KR20130003944A - 발효 인삼추출물의 제조방법 - Google Patents
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Abstract
본 발명은 발효 인삼추출물의 제조방법에 관한 것으로, 더욱 구체적으로 인삼추출액을 유산균으로 발효시키고 고압유화 처리한 후 트리코더마 리세이(Trichoderma reesei) 균주를 접종 및 배양하여 발효 인삼추출물을 수득하는 단계를 포함하는 발효 인삼추출물의 제조방법에 관한 것이다.
본 발명에 따르면, 상기 제조방법으로 진세노사이드 Rd, Rg3-R, Rk1를 고함량으로 함유하는 발효 인삼추출물을 제조할 수 있으며, 본 발명의 제조방법을 통하여, 특정 진세노사이드 Rd, Rg3-R, Rk1의 사포닌이 증가된 발효 인삼농축액 및 인삼 제품을 생산할 수 있다.
본 발명에 따르면, 상기 제조방법으로 진세노사이드 Rd, Rg3-R, Rk1를 고함량으로 함유하는 발효 인삼추출물을 제조할 수 있으며, 본 발명의 제조방법을 통하여, 특정 진세노사이드 Rd, Rg3-R, Rk1의 사포닌이 증가된 발효 인삼농축액 및 인삼 제품을 생산할 수 있다.
Description
본 발명은 발효 인삼추출물의 제조방법에 관한 것으로, 더욱 구체적으로 인삼추출액을 유산균으로 발효시키고 고압유화 처리한 후 트리코더마 리세이(Trichoderma reesei) 균주를 접종 및 배양하여 발효 인삼추출물을 수득하는 단계를 포함하는 발효 인삼추출물의 제조방법에 관한 것이다.
인삼은 식물 분류학상 오가피나무 과(Aralaiaceae)의 인삼 속에 속하는 다년생 숙근초로서 지구상에 약 11종이 알려져 있으며, 과거 수천 년 전부터 우리나라를 비롯하여 중국, 일본 등에서 주로 건강증진을 위한 목적으로 널리 사용되어 왔다. 최근에는 수삼을 증기로 수차례 쪄서 가공하여 인체에 유용한 미량의 진세노사이드를 함유한 홍삼의 효능이 뛰어나다고 알려져 있다. 인삼의 대표적인 유효성분인 사포닌(saponine)은 배당체(ginsennoside)라 불리는 화합물의 일종이다. 인삼을 물과 에탄올로 추출한 인삼추출물의 주요 효능을 나타내는 사포닌은 30 종류 이상의 진세노사이드로 구성된다. 진세노사이드는 인삼추출물의 주요성분으로 면역력강화, 항염증작용, 항알러지작용, 항암효과, 혈압강하작용, 항콜레스테롤작용, 항혈전작용, 성인병 및 노화에 대한 예방 및 치료 효과가 있음이 보고되어 있다.
체내에 섭취된 사포닌은 장내에 있는 미생물에 의해 분해되어 체내로 흡수된다 [Panta Med. 62, pp453-457, 1996]. 진세노사이드 Rh1의 경우, 장내 미생물에 의해 진세노사이드 Rh, 컴파운드 K, 프로토파낙사디올(protopanaxadiol)로 순차적으로 전환된다. 인삼의 사포닌을 분해하는 장내 미생물은 사람의 체질, 식습관 등에 따라 그 존재의 유무와 보유하고 있는 정도가 다르며, 대사산물로 전환하는데 차이가 있으므로 인삼을 복용 후 효능이 나타나는 데에 차이가 나타날 수 있다. 또한 장내 미생물 균총이 사람마다 다르기 때문에 진세노사이드의 전환율과 생체이용율은 다를 수밖에 없다 [J. Pharm. Pharmacol., 50, pp1155-1160, 1998]. 따라서 장내 미생물의 차이로 인한 효능과 흡수율의 차이를 없애기 위해, 미생물을 이용한 인삼추출물의 유산균 발효물을 이용하는 것은 개인차를 극복하고 체내 흡수율을 증대시키는 효과가 있다.
이에, 본 발명자들은 상기 종래기술들의 문제점들을 극복하기 위하여 예의 연구 노력한 결과, 유산균를 이용하여 발효시킨 인삼추출물을 고압유화기로 처리하고 다시 트리코더마 리세이(Trichoderma reesei) 균주로 재배양한 후, 열처리하는 경우, 특정 성분의 진세노사이드 함량이 증가된 발효 인삼추출물을 제조할 수 있음을 확인하고, 본 발명을 완성하게 되었다.
따라서, 본 발명의 주된 목적은 진세노사이드 Rd, Rg3-r 및 Rk1의 함량이 증가된 발효 인삼추출물의 제조방법을 제공하는 데 있다.
본 발명의 다른 목적은 상기 방법으로 제조된 진세노사이드 Rd, Rg3-r 및 Rk1의 함량이 증가된 발효 인삼추출물을 제공하는데 있다.
본 발명의 한 양태에 따르면, 본 발명은 하기 단계들을 포함하는 발효 인삼추출물의 제조방법을 제공한다:
a) 인삼으로부터 인삼추출액을 제조하는 단계;
b) 상기 인삼추출액을 유산균으로 발효시키는 단계;
c) 상기 유산균 발효물을 고압유화 처리하여 유산균 세포를 파괴하는 단계; 및
d) 상기 고압유화 처리된 유산균 발효물에 트리코더마 리세이(Trichoderma reesei)를 접종 및 배양하여 발효 인삼추출물을 수득하는 단계.
본 발명자들은, 인삼에 포함되어 있는 사포닌, 즉 진세노사이드를 인체에 보다 유용한 형태로 전환시킬 수 있는 방법을 개발하고자 노력하였다. 그 결과, 인삼추출물에 유산균을 접종하여 발효시키고 고압유화 처리 후 트리코더마 리세이 균주로 재배양함으로써 인삼 고유의 진세노사이드가 인체에 유용한 특정 형태의 진세노사이드로 전화됨을 확인하였다.
본 발명은 인삼 고유의 진세노사이드를 특정 성분, 즉 진세노사이드 Rd, Rg3-r 및 Rk1의 함량을 증가시킬 수 있는 방법에 관한 것이다.
본 발명에서, 용어 ‘사포닌’은 특별하게 다른 언급이 없는 한, 진세노사이드, 즉 인삼사포닌과 동일한 의미로 사용되고 있다.
본 발명에서, ‘인삼’은 다양한 형태로 가공된 모든 인삼, 예컨대 수삼, 미삼, 백삼 및 홍삼을 포함하는 의미로 사용되며, 본 발명의 방법은 이들 다양한 형태의 인삼에 적용될 수 있다. 이들 다양한 형태의 인삼들은 진세노사이드의 성분 함량에서 차이가 있을 수 있으나 본 발명의 제조 단계들을 거침으로써 특정 성분이 증가되는 효과는 동일하다는 것은 당업자에게 명확하다.
본 발명에 이용되는 인삼의 원산지로는 특별히 한정되지 않으며 예를 들면, 국내산, 미국산, 일본, 히말라야, 베트남 및 중국산을 모두 사용할 수 있다.
본 발명에 이용되는 인삼추출물은 공지의 식물 추출방법을 이용하여 인삼으로부터 용이하게 제조될 수 있다. 예들 들어, 열수추출, 유기용매 추출 등의 방법을 사용할 수 있으며, 구체적으로 인삼 건조물 또는 그 분쇄물을 추출 용매에 투입하고 필요에 따라 교반하면서 5-40℃에서 1-15일간 침적시키거나 40-100℃에서 4-20시간 동안 가열하여 추출할 수 있다. 추출에 사용되는 용매로는 물, 유기용매 또는 이들의 혼합용매일 수 있으며 상기 유기용매로는 에탄올, 메탄올, 프로필렌글리콜, 부틸렌글리콜, 글리세린, 함수에탄올, 함수부틸렌글리콜, 함수프로필렌글리콜, 헥산, 에틸아세테이트로 등을 사용할 수 있다. 추출에 사용되는 용매의 양은 추출 원료의 통상 3 내지 20 배량(중량비)이다. 또한 본 발명에 이용되는 인삼추출물은 추가적으로 통상적인 냉각, 여과, 농축, 및 살균 과정을 거친 인삼추출물일 수 있다.
본 발명의 발효 인삼추출물의 제조방법에서, 상기 유산균은 당업계에 공지된 다양한 유산균을 포함한다. 예들 들어, 상기 유산균은 락토바실러스(Lactobacillus), 락토코커스(Lactococcus), 류코노스톡(Leuconostoc), 프로리오니박테리움(Propionibacterium), 엔테로코커스(Enterococcus), 비피도박테리움(Bifidobacterium), 스트렙토코커스(Streptococcus) 및 페디오코커스(Pediococcus)로 구성된 군으로부터 선택되는 유산균이다. 바람직하게는 본 발명에서 이용되는 유산균은 락토바실러스 퍼멘텀(Lactobacillus fermentum)이다.
본 발명의 발효 인삼추출물의 제조방법에서, 상기 c)단계에서 고압유화 처리는 1300~1600 bar에서 2~4회 수행되는 것을 특징으로 한다. 본 발명에서는 상기 고압유화 처리에 의해 유산균 세포가 파쇄되면서 유산균 발효물 내 조지방, 조단배질, 탄수화물 및 수용성 식이섬유의 함량이 증가하게 된다 (표 1 참조). 이러한 인삼추출물의 영양성분의 변화에 따라, 고압유화 처리된 유산균 발효물에 트리코더마 리세이(Trichoderma reesei)를 접종하고 배양하면 특정 성분의 진세노사이드가 증가하는 효과를 나타낸다.
본 발명의 발효 인삼추출물의 제조방법에서, 상기 d)단계에서 트리코더마 리세이의 배양은 적합한 조건 하에서 수행될 수 있다. 하기 실시예에서와 같이, 트리코더마 리세이 균주를 고압유화 처리된 유산균 발효물에 접종하고 25~30℃에서 3~5일간 배양할 수 있다.
본 발명의 방법으로 제조된 발효 인삼추출물은, 기존 인삼추출물의 진세노사이드의 조성과 비교하여 상대적으로 진세노사이드 Rb1의 함량이 현저히 감소한 반면 진세노사이드 Rd, Rg3-r 및 Rk1의 함량이 현저히 증가하는 효과를 나타내었다. 뿐만 아니라, 본 발명의 방법으로 제조된 발효 인삼추출물은 상기 d)단계 후 110~125℃에서 20~40분간 열처리하는 단계를 더 포함하는 경우, 진세노사이드 Rb1의 함량 감소와, Rd, Rg3-r 및 Rk1의 함량 증가에서 더욱 두드러진 효과를 나타내었다 (표 4 참조).
본 발명의 발효 인삼추출물의 제조방법에서, 상기 d)단계의 발효 인삼추출물은 a)단계의 인삼추출물과 비교하여 진세노사이드 Rd, Rg3-r 및 Rk1의 함량이 2배 이상 증가된 것을 특징으로 한다. 본 발명의 방법으로 제조된 발효 인삼추출물은, 최초 인삼추출물의 진세노사이드 성분 함량과 비교하여, Rb1의 함량은 10.51 mg/g에서 2.23 mg/g로 약 4.7배 감소한 반면, Rd의 함량은 2.53 mg/g에서 8.12 mg/g로 약 3.2배 증가, Rg3-r의 함량은 0.92 mg/g에서 2.13 mg/g로 약 2.3배 증가, Rk1의 함량은 1.14 mg/g에서 3.02 mg/g로 약 2.6배 증가하였다 (표 4 참조).
특히 본 발명의 발효 인삼추출물의 제조방법에서 d)단계 후 열처리 단계를 추가적으로 수행하는 경우, 최초 인삼추출물의 진세노사이드 성분 함량과 비교하여, Rb1의 함량은 10.51 mg/g에서 1.53 mg/g로 약 6.8배 감소한 반면, Rd의 함량은 2.53 mg/g에서 8.23 mg/g로 약 3.2배 증가, Rg3-r의 함량은 0.92 mg/g에서 3.42 mg/g로 약 3.7배 증가, Rk1의 함량은 1.14 mg/g에서 4.19 mg/g로 약 3.6배 증가하는 효과를 나타냄으로써 진세노사이드 Rd, Rg3-r 및 Rk1 함량이 더욱 증가된 발효 인삼추출물을 얻을 수 있었다 (표 4 참조).
본 발명의 다른 양태에 따르면, 본 발명은 상기 방법으로 제조된 진세노사이드 Rd, Rg3-r 및 Rk1의 함량이 증가된 발효 인삼추출물을 제공한다.
본 발명의 발효 인삼추출물은 진세노사이드 Rd, Rg3-r 및 Rk1의 함량이 크게 증가된 것이다. 본 발명의 경우, 진세노사이드 Rd, Rg3-r 및 Rk1의 함량이 최대 3배 이상 증가하게 된다. 이러한 진세노사이드 Rd, Rg3-r 및 Rk1의 함량 증가는 최초 인삼추출물이 유산균 발효 및 고압유화 처리에 의해 영양성분의 변화를 가져오고 이후 트리코더마 리세이(Trichoderma reesei)의 접종 및 배양에 의한 것이다. 이러한 일련의 과정을 통해 이루어지는 진세노사이드 성분의 미생물 전환은 본 발명에서 처음으로 발견한 것이다.
이상 설명한 바와 같이, 본 발명에 따르면 인삼추출물을 유산균으로 배양하고 고압유화기로 처리한 후 트리코더마 리세이로 배양하면, 진세노사이드 Rd, Rg3-R, 및 Rk1의 함량이 증가된 발효 인삼추출물을 제조할 수 있다. 본 발명의 제조방법을 통하여, 인삼추출물에서 트리코더마 리세이의 배양성을 현저히 향상시킬 수 있었으며, 진세노사이드 Rd, Rg3-R, Rk1의 함량을 증대시킨 발효 인삼농축액 및 인삼 제품을 생산할 수 있다.
도 1은 본 발명에 따른 발효 인삼추출물의 제조방법을 모식화한 것이다.
도 2는 본 발명에 따른 제조방법에서 인삼추출물의 유산균 배양 후 고압유화 처리에 의한 배양물 파쇄 전후를 현미경 사진으로 나타낸 것이다.
도 3은 본 발명에 따른 발효 인삼추출물의 단계별 진세노사이드의 함량을 비교한 그래프이다.
도 2는 본 발명에 따른 제조방법에서 인삼추출물의 유산균 배양 후 고압유화 처리에 의한 배양물 파쇄 전후를 현미경 사진으로 나타낸 것이다.
도 3은 본 발명에 따른 발효 인삼추출물의 단계별 진세노사이드의 함량을 비교한 그래프이다.
이하, 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하기로 한다. 이들 실시예는 단지 본 발명을 예시하기 위한 것이므로, 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되는 것으로 해석되지는 않는다.
비교예
: 인삼추출물 제조
6년근 인삼 30 kg을 90 ~ 100 ℃에서 3 ~ 5시간 동안 열처리 한 후, 상기 열처리한 인삼 8.5 kg을 열풍 건조기에서 50 ~ 60 ℃에서 3 일간 건조하였다. 회수한 인삼 건조물에 4 ~ 5배 분량의 이온수를 넣고, 80 ~ 90 ℃에서 8시간 씩 3회 추출하였다. 추출한 액을 농축하여 고형분 60%의 인삼추출물 5.0 kg을 얻었다.
제조예: 발효 인삼추출물의 제조
6년근 인삼 30 kg을 90 ~ 100 ℃에서 3 ~ 5시간 동안 열처리 한 후, 상기 열처리한 인삼 8.5 kg을 열풍 건조기에서 50 ~ 60 ℃에서 3 일간 건조하였다. 회수한 인삼 건조물에 4 ~ 5배 분량의 이온수를 넣고, 80 ~ 90 ℃에서 8시간 씩 3회 추출하였다. 추출한 액을 농축하여 고형분 60%의 인삼추출물을 얻었다. 고형분 60%의 인삼추출물 5.0 kg을 발효조에 넣고 3배 분량의 이온수 15 L를 첨가하였다. 상기 액을 100 ℃에서 30분간 살균처리한 후, 37 ℃까지 온도를 낮추었다.
이후, MRS(deMan Rogosa Sharpe; Becton, Dickinson and Company) 배지에서 37 ℃, 2일 정치 배양한 락토바실러스 퍼멘텀(Lactobacillus fermentum KCCM109129) 200 mL (1.5× 108 cfu/ml)을 상기 발효조에 접종한 후, 0.5 bar, 37 ℃, 100 rpm의 발효조 조건으로 2일간 발효하였다. 상기 발효액을 100 ℃에서 30분간 살균하고, 냉각하여 유산균발효 인삼추출액을 제조하였다.
상기 유산균발효 인삼추출액을 1,500 bar, 3회 조건으로 고압유화기(Microfludizer(110Y), Microfluidics Corperation)를 통과시킨 후, PDB(potato dextrose broth; Becton, Dickinson and Company)에서 28 ℃, 160 rpm의 조건으로 2일 배양한 트리코더마 리세이(Trichoderma reesei BLJH304) 전배양액 400 ml(5.4× 108 cfu/ml)을 상기 10 L의 유산균발효 인삼추출액에 접종하여 200 rpm, 0.5 vvm 조건으로 28 ℃에서 3일간 배양하였다. 상기 배양액을 110 ~ 125 ℃에서 30분간 열처리한 후, 400 g의 여과보조제를 첨가한 후 필터프레스로 여과하였다. 상기 여과액을 고형분 60 ~ 65 %로 농축하여 발효 인삼추출물을 제조하였다. 이상의 과정을 모식화하여 도 1에 나타내었다.
실험예
1:
고압유화
처리에 의한 영양성분 변화 확인
상기 비교예와 제조예에서 제조한 인삼추출물 및 발효 인삼추출물의 제조과정 중 고압유화 처리에 의한 영양성분 변화를 분석하기 위해, 각 제조단계의 샘플들을 동결건조 한 후, 분쇄한 샘플의 조지방, 조단백질, 탄수화물, 나트륨. 당류, 수용성식이섬유 함량을 분석하였다. 상기 샘플의 영양성분을 측정하기 위해, 조지방은 Soxhloet 추출법, 조단백질은 Macro-Kjeldalhl법, 탄수화물은 환원당 정량법인 Schoorl법, 나트륨은 Mohr법, 당류는 Molish 반응법, 수용성 식이섬유는 AOAC의 방법에 의해 정량하였다.
| 제조단계 |
조지방 (g/100g) |
조단백질 (g/100g) |
탄수화물 (g/100g) |
나트륨 (g/100g) |
당류 (g/100g) |
수용성 식이섬유 (%) |
| 1. 인삼추출물 | 0.2 | 9.5 | 53.2 | 0.12 | 27.7 | 7.1 |
| 2. 인삼추출물을 유산균으로 배양한 배양액 | 0.0 | 7.9 | 81.3 | 0.14 | 16.4 | 11.0 |
| 3. 2의 배양액을 고압유 화 처리 |
2.8 | 13.0 | 66.9 | 0.12 | 21.7 | 16.4 |
상기 표 1과 같이, 인삼추출물은 유산균 발효 후 고압유화 처리에 의해 조지방, 조단백질, 탄수화물, 수용성 식이섬유의 함량이 증가하였다. 이러한 영양성분의 증가가 본 발명에서 고압유화 처리 이후 접종되는 트리코더마 리세이의 성장력 및 활성도에 영향을 미칠 것으로 예상하였다.
또한, 상기 고압유화 처리에 의한 유산균 배양물의 변화를 현미경으로 확인하였다. 도 2는 본 발명에 따른 제조방법에서 인삼추출물의 유산균 배양 후 고압유화 처리에 의한 배양물 파쇄 전후를 현미경 사진으로 나타낸 것이다. 도 2에서, 유산균 균체가 고압유화 처리에 의해 파쇄된 모습을 확인할 수 있었다.
실험예
2:
고성능액체크로마토그래피를
이용한 추출물의
진세노사이드
분석
상기 비교예와 제조예에서 제조한 인삼추출물 및 발효 인삼추출물에 함유된 진세노사이드 성분의 함량을 측정하기 위해, 고성능액체크로마토그래피(Ultra Performance Liquid Chromatography, UPLC, Waters)를 이용하였다. 진세노사이드의 함량 측정을 위한 실험과정은 하기에 자세히 나타내었다.
먼저, 비교예의 인삼추출물 및 제조예의 발효 인삼추출물 각각 1 g을 50 mL의 매스플라스크에 정량하여 넣은 후, 이온수로 용해하였다. 상기 용해액을 활성화시킨 C18 카트리지(Sep-Pak Plus, WAT020515, Waters, USA)에 통과시켜 물과 30%(v/v) 메탄올로 세척한 후, 메탄올 20 mL로 용리한 다음 60 ℃ 이하에서 감압농축한 후 메탄올 2 mL로 용해하여 분석 시 사용하였다. 표준으로는 진세노사이드 Rb1, Rd, Rg3-R, Rk1를 각각 1 mg/ml의 농도로 메탄올에 녹여 스톡(stock) 용액으로 하여 1.0, 0.1, 0.01 mg/ml의 검액을 제조하여 검량선용 표준용액으로 사용하여 검량선을 작성하였다. 이때 분석조건은 하기 표 2에 나타내었으며, 이동상(mobile phase)의 gradient table은 하기 표 3에 나타내었다.
| UPLC 분석조건 | |
| 유량 (Flow rate) | 0.6 mL/min |
| 주입량 (Injection Volume) | 2 μl |
| 분석온도 (Analyzing Temperature) | 10 min |
| 컬럼온도 (Column Temperature) | 30 ℃ |
| 컬럼 (Column) | ACQUITY UPLC BEH C18 (1.7μm, 2.1×50mm) |
| 이동상 (Mobile Phase) | A: water, B: Acetonitrile |
| Gradient Table | |||||
| Time (min) | Flow rate | A (%) | B (%) | Curve | |
| 1 | 0 | 0.6 | 80 | 20 | |
| 2 | 0.97 | 0.6 | 80 | 20 | 7 |
| 3 | 4.31 | 0.6 | 68 | 32 | 7 |
| 4 | 5.97 | 0.6 | 50 | 50 | 6 |
| 5 | 7.64 | 0.6 | 35 | 65 | 6 |
| 6 | 7.86 | 0.6 | 10 | 90 | 6 |
| 7 | 8.98 | 0.6 | 10 | 90 | 6 |
| 8 | 9.20 | 0.6 | 80 | 20 | 6 |
| 9 | 10.0 | 0.6 | 80 | 20 | 6 |
상술한 진세노사이드의 함량 측정 방법을 통해, 본 발명에 따른 발효 인삼추출물의 제조과정 중 각 제조 단계별로 수득된 시료에 함유된 진세노사이드 성분 함량을 측정한 결과를 하기 표 4에 나타내었다.
| 제조단계 |
진세노사이드 (mg/g) | |||
| Ginsenoside Rb1 | Ginsenoside Rd |
Ginsenoside Rg3-R |
Ginsenoside Rk1 |
|
| 1. 인삼추출물 | 10.51 | 2.53 | 0.92 | 1.14 |
| 2. 인삼추출물을 유산균으로 배양한 배양액 |
8.50 | 2.78 | 1.32 | 1.31 |
| 3. 2의 배양액을 고압유화 처리하지 않고 트리코더마 리세이로 배양한 배양액 |
3.15 | 5.19 | 1.31 | 1.54 |
| 4. 2의 배양액을 고압유화 처리 후 트리코더라 리세이 로 배양한 배양액 |
2.23 | 8.12 | 2.13 | 3.02 |
| 5. 4의 배양액을 열처리한 인삼발효물 |
1.53 | 8.23 | 3.42 | 4.19 |
상기 표 4에 나타낸 바와 같이, 인삼추출물을 락토바실러스 퍼멘텀으로 배양한 배양액(2)의 진세노사이드의 성분 함량은 유산균으로 배양하지 않은 인삼추출물(1)에 비해 진세노사이드 Rd, Rg3-R, Rk1 함량이 미량 증가하였다. 또한 인삼추출물을 락토바실러스 퍼멘텀으로 배양한 배양액을 고압유화 처리하지 않고 트리코더마 리세이로 배양한 배양액(3)은 진세노사이드 Rd 함량만 증가하는데 그쳤다.
그러나 인삼추출물을 락토바실러스 퍼멘텀으로 배양한 배양액을 고압유화 처리 후 트리코더마 리세이로 배양한 배양액(4)은 진세노사이드 Rd, Rg3-R, Rk1의 함량이 모두 현저히 증가하였다. 뿐만 아니라, 여기에 추가적으로 열처리를 수행한 인삼발효물(5)은 진세노사이드 Rb1은 현저히 감소하면서 진세노사이드 Rd, Rg3-R, Rk1의 함량은 더욱 증가하는 결과를 나타내었다. 이러한 단계별 진세노사이드의 함량 변화를 도 3에 그래프로 나타내었다.
결론적으로, 인삼추출물을 유산균으로만 배양하거나 고압유화 처리하지 않고 트리코더마 리세이로 배양하는 경우는 진세노사이드 Rd, Rg3-R, Rk1의 함량을 모두 증가시키기 어려웠으나, 인삼추출물을 유산균으로 배양하고 고압유화 처리 후 트리코더마 리세이로 배양하는 경우는 진세노사이드 Rd, Rg3-R, Rk1의 함량을 모두 증가시킬 수 있었다. 또한 추가적인 열처리 과정을 통해 진세노사이드 Rd, Rg3-R, Rk1의 함량을 더욱 증가시킬 수 있었다.
Claims (7)
- 하기 단계들을 포함하는 발효 인삼추출물의 제조방법:
a) 인삼으로부터 인삼추출액을 제조하는 단계;
b) 상기 인삼추출액을 유산균으로 발효시키는 단계;
c) 상기 유산균 발효물을 고압유화 처리하여 유산균 세포를 파괴하는 단계; 및
d) 상기 고압유화 처리된 유산균 발효물에 트리코더마 리세이(Trichoderma reesei)를 접종 및 배양하여 발효 인삼추출물을 수득하는 단계.
- 제 1항에 있어서, 상기 유산균은 락토바실러스 퍼멘텀(Lactobacillus fermentum)인 것을 특징으로 하는 방법.
- 제 1항에 있어서, 상기 c)단계에서 고압유화 처리는 1300~1600 bar에서 2~4회 수행되는 것을 특징으로 하는 방법.
- 제 1항에 있어서, 상기 d)단계에서 트리코더마 리세이의 배양은 25~30℃에서 3~5일간 수행하는 것을 특징으로 하는 방법.
- 제 1항에 있어서, 상기 d)단계 후 110~125℃에서 20~40분간 열처리하는 단계를 더 포함하는 것을 특징으로 하는 방법.
- 제 1항에 있어서, 상기 d)단계의 발효 인삼추출물은 a)단계의 인삼추출물과 비교하여 진세노사이드 Rd, Rg3-r 및 Rk1의 함량이 2배 이상 증가된 것을 특징으로 하는 방법.
- 제 1항 내지 제 6항 중 어느 한 항에 따른 방법으로 제조된 진세노사이드 Rd, Rg3-r 및 Rk1의 함량이 증가된 발효 인삼추출물.
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