CN111363774A - 发酵乳杆菌发酵人参的方法及人参发酵产物和用途 - Google Patents

发酵乳杆菌发酵人参的方法及人参发酵产物和用途 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种发酵乳杆菌发酵人参的方法及人参发酵产物和用途。该发酵乳杆菌发酵人参的方法包括如下步骤：(1)将人参粉末加水制备人参匀浆，灭菌，得到人参灭菌液；其中，人参匀浆中人参添加量为5～12wt％；(2)所述人参灭菌液冷却后接种发酵乳杆菌种子液，在24～36℃的发酵温度下进行摇床发酵，摇床转速为100～300rmp，发酵时间为20～50h，得到人参发酵产物。本发明的方法可以提高人参中人参皂苷Rg1、Re、Rb1、Rc以及Rd的产量。

Description

发酵乳杆菌发酵人参的方法及人参发酵产物和用途
技术领域
本发明涉及一种发酵乳杆菌发酵人参的方法及人参发酵产物和用途。
背景技术
人参为五加科多年生草本植物，2012年卫生部批准人参(5年及5年以下人工种植的人参)作为新资源食品。现代医学证明人参具有诸多生物活性功能，人参不仅抗癌、抗衰老、抗氧化，还有效改善机体的免疫调节系统。
人参的化学成分很复杂，有皂苷、挥发油、糖类及维生素等。经现代医学和药理研究证明，人参皂苷为人参的主要有效成分。人参的根、茎、叶、花及果实中均含有多种人参皂苷(ginsenosides)。到目前为止，文献报道从人参根及其它部位已分离确定化学结构的人参皂苷有人参皂苷-R0、-Ra1、-Ra2、-Rb1、-Rb2、-Rb3、-Rc、-Rd、-Re、-Rf、-Rg1、-Rg2、-Rg3、-Rh1、-Rh2及-Rh3等。其中，由于人参皂苷Rg1、Re、Rb1、Rc以及Rd具有确切的多种药理活性，市场需求量较大。
乳酸菌是有较高认可度的益生菌,广泛应用于农业、食品加工等行业中，例如常用于酸奶、泡菜等发酵食品中。大量研究表明，乳酸菌能调节肠道菌群，改善胃肠道功能，降低血液中的胆固醇含量。此外，乳酸菌能产多种酶类，如超氧化物歧化酶、β-葡萄糖苷酶、α-淀粉酶、纤维素酶等，各种产酶乳酸菌已经用于生产之中。其中，发酵乳杆菌被CFDA认定为可用于食品生产的乳酸菌，有较高的安全性。
CN109182441A公开了人参皂苷Rb1发酵液的制备方法，它包括：1)每1L MRS培养基加入人参皂苷Rb1 1～5g，溶解，调节pH值至5.0～5.5；2)在无菌条件下，将含有人参皂苷Rb1的MRS液体培养基过滤除菌；3)将发酵乳杆菌按照1～5％接种量接种于含有人参皂苷Rb1的MRS液体培养基中，发酵条件为：33～40℃下摇床培养，摇床转速为70～130r/min，发酵5～7天；动物实验结果表明，该发酵乳杆菌发酵人参Rb1对修复高脂饮食诱导的脂肪性肝损伤具有潜在作用；该发酵乳杆菌发酵人参皂苷Rb1转化生成Rg3和F2后对高脂饮食引起的肝损伤及炎症反应具有一定的缓解和改善作用，而Rb1没有作用。该方法是对人参皂苷单体进行发酵，发酵的原料须从人参中进行提取纯化或者单独购买，成本较高。
CN109536560A公开了一种提高人参水提取物中稀有皂苷含量的方法，其包括以下步骤：(1)将人参破碎粉磨后过筛得到人参粉末，将人参粉末溶于水中后进行超声微波处理过滤掉人参粉渣，得到人参水提取物；(2)取步骤(1)制得的人参水提取物，加入复配菌和糖源在28～40℃发酵4～8天，所述复配菌为乳酸菌和醋酸杆菌；(3)升高发酵温度至42～55℃，继续发酵10～20天，发酵结束后，过滤留下发酵液即可。该方法采用微波超声协同萃取来制备人参水提取液，将人参水提取液作为发酵基质，发酵转化生成4种稀有人参皂苷(Rg3、CK、F2和Rh2)，但是发酵菌为乳酸菌和醋酸杆菌，生成的人参皂苷种类仍较少，且上述发酵条件并没有涉及人参皂苷Rg1、Re、Rb1、Rc、Rd的产量的提高。
CN106244487A公开了一株乳杆菌及提高稀有皂苷的人参发酵方法，它包括：将保藏编号为CCTCC M 2016372乳杆菌的种子发酵液，按1-6％接种量接种于人参液，发酵条件为：33-40℃摇床培养，转速为70-160r/min，发酵18-72h；所述的人参液为人参加水打浆。该方法使得人参发酵液Rh1+Rg2、F1、Rh2、20(S)-Rg3、R0的产量都有很大的提高，但是上述发酵条件并没有涉及人参皂苷Rg1、Re、Rb1、Rc、Rd的产量的提高。
因此，本发明提供一种发酵乳杆菌发酵人参的方法及人参发酵产物和用途，旨在提高人参皂苷Rg1、Re、Rb1、Rc以及Rd的产量。
发明内容
有鉴于此，本发明的一个目的在于提供一种发酵乳杆菌发酵人参的方法，其可以提高人参皂苷Rg1、Re、Rb1、Rc以及Rd的产量。
本发明的另一个目的在于提供上述方法得到的人参发酵产物，其中人参皂苷Rg1、Re、Rb1、Rc以及Rd的产量均明显提高。
本发明的再一个目的在于提供上述人参发酵产物用于制备抗氧化产品的用途。
本发明的再一个目的在于提供上述人参发酵产物用于制备人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1、人参皂苷Rc、人参皂苷Rd单体的用途，或用于制备由人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1、人参皂苷Rc或人参皂苷Rd组成的组合物的用途。
本发明采用如下技术方案实现上述目的。
一方面，本发明提供一种发酵乳杆菌发酵人参的方法，其包括如下步骤：
(1)将人参粉末加水制备人参匀浆，灭菌，得到人参灭菌液；其中，人参匀浆中人参添加量为5～12wt％；
(2)所述人参灭菌液冷却后接种发酵乳杆菌(Lactobacillus fermentium)种子液，在24～36℃的发酵温度下进行摇床发酵，摇床转速为100～300rmp，发酵时间为20～50h，得到人参发酵产物；其中，所述发酵乳杆菌种子液为采用MRS液体培养基制备的发酵乳杆菌种子液；所述发酵乳杆菌种子液的活菌数为106～108CFU·mL-1；发酵乳杆菌种子液的接种量为人参灭菌液的重量的2～6wt％。
根据本发明的方法，优选地，所述人参匀浆中人参添加量为6～10wt％。
根据本发明的方法，优选地，所述发酵温度为24～32℃。
根据本发明的方法，优选地，所述发酵时间为24～48h。
根据本发明的方法，优选地，发酵乳杆菌种子液的接种量为人参灭菌液的重量的2～4wt％。
根据本发明的方法，优选地，所述人参匀浆中人参添加量为6～10wt％，所述发酵温度为24～32℃，所述发酵时间为24～48h，发酵乳杆菌种子液的接种量为人参灭菌液的重量的2～4wt％。
根据本发明的方法，优选地，所述人参匀浆中人参添加量为8.03wt％，所述发酵温度为28.24℃，所述发酵时间为42h，发酵乳杆菌种子液的接种量为人参灭菌液的重量的2wt％。
另一方面，本发明提供一种人参发酵产物，其采用如上所述的发酵乳杆菌发酵人参的方法制备得到。
再一方面，本发明提供上述人参发酵产物用于制备抗氧化产品的用途。
再一方面，本发明提供上述人参发酵产物用于制备人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1、人参皂苷Rc、人参皂苷Rd单体的用途，或用于制备由人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1、人参皂苷Rc或人参皂苷Rd组成的组合物的用途。
本发明的发酵乳杆菌发酵人参的方法能够有效提高人参皂苷Rg1、Re、Rb1、Rc以及Rd的产量。本发明的人参发酵产物用于制备抗氧化产品的用途。本发明的人参发酵产物用于制备人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1、人参皂苷Rc、人参皂苷Rd单体的用途，或用于制备由人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1、人参皂苷Rc或人参皂苷Rd组成的组合物的用途。
附图说明
图1为人参皂苷的混合对照品溶液的HPLC分析结果。其中，1：人参皂苷Rg1(ginsenoside Rg1)；2：人参皂苷Re(ginsenoside Re)；3：人参皂苷Rb1(ginsenosideRb1)；4：人参皂苷Rc(ginsenoside Rc)；5：人参皂苷Rd(ginsenoside Rd)。
图2为未发酵人参清液的HPLC分析结果。其中，1：人参皂苷Rg1(ginsenosideRg1)；2：人参皂苷Re(ginsenoside Re)；3：人参皂苷Rb1(ginsenoside Rb1)；4：人参皂苷Rc(ginsenoside Rc)；5：人参皂苷Rd(ginsenoside Rd)。
图3为人参发酵清液的HPLC分析结果。其中，1：人参皂苷Rg1(ginsenoside Rg1)；2：人参皂苷Re(ginsenoside Re)；3：人参皂苷Rb1(ginsenoside Rb1)；4：人参皂苷Rc(ginsenoside Rc)；5：人参皂苷Rd(ginsenoside Rd)。
图4为MRS益生菌发酵液、未发酵人参清液、人参发酵清液的SOD活性分析结果。其中，a:人参发酵清液；b:MRS益生菌发酵液；c:未发酵人参清液。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明作进一步的说明，但本发明的保护范围并不限于此。
在本发明中，发酵乳杆菌的拉丁学名为Lactobacillus fermentium。
目前，由于人参皂苷单体Rg1、Re、Rb1、Rc以及Rd具有确切的多种药理活性，市场需求量较大。但是目前人参皂苷单体Rg1、Re、Rb1、Rc以及Rd的制备仍主要从人参根及其它部位分离，制备步骤非常繁琐且产量较低。本发明提出一种发酵乳杆菌发酵人参的方法，可以提高人参皂苷Rg1、Re、Rb1、Rc以及Rd的产量。
<发酵乳杆菌发酵人参的方法>
本发明的发酵乳杆菌发酵人参的方法，包括如下步骤：(1)人参灭菌液的制备步骤；(2)发酵步骤。
在步骤(1)中，将人参粉末加水制备人参匀浆，灭菌，得到人参灭菌液；其中，人参匀浆中人参添加量为5～12wt％。人参优选为3～5年干人参。人参粉末优选通过如下方法得到：将人参粉碎，过药典筛四号筛，得到所述人参粉末。人参匀浆中人参添加量优选为6～10wt％，更优选为8～10wt％。制备人参匀浆的水优选为去离子水。灭菌优选用高压蒸汽法进行灭菌。灭菌条件优选为：温度为110～130℃，时间为10～30min；更优选为：温度为115～125℃，时间为15～25min。
在步骤(2)中，所述人参灭菌液冷却后接种发酵乳杆菌(Lactobacillusfermentium)种子液，在24～36℃的发酵温度下进行摇床发酵，摇床转速为100～300rmp，发酵时间为20～50h，得到人参发酵产物。优选地，发酵乳杆菌(Lactobacillus fermentium)购自北京豫维科技有限公司，保藏编号为：CICC 22808。发酵乳杆菌种子液优选为采用MRS液体培养基制备得到。MRS液体培养基可以为市售的MRS液体培养基；也可以为自制的MRS液体培养基，MRS液体培养基配方为：蛋白胨10g，牛肉浸粉8g，酵母浸粉4g，葡萄糖20g，磷酸氢二钾2g，柠檬酸氢二胺2g，乙酸钠5g，硫酸镁0.2g，硫酸锰0.04g，吐温-80 1g，蒸馏水1L；调节pH为6.0～6.2，121℃灭菌15min。发酵时间优选为24～48h，更优选为30～45h。发酵温度优选为24℃～32℃，更优选为26～32℃。摇床转速优选为130～250rmp，更优选为150～200rmp。发酵乳杆菌种子液的活菌数可以为106～108CFU·mL-1；优选为107～108CFU·mL-1。发酵乳杆菌种子液的接种量可以为人参灭菌液的重量的2～6wt％；优选为人参灭菌液的重量的2～4wt％；更优选为人参灭菌液的重量的2.5～3.5wt％。
根据本发明的发酵乳杆菌发酵人参的方法，优选地，发酵乳杆菌发酵人参的方法包括如下步骤：(1)将人参粉末加水制备人参匀浆，灭菌，得到人参灭菌液；其中，人参匀浆中人参添加量为5～12wt％；(2)所述人参灭菌液冷却后接种发酵乳杆菌(Lactobacillusfermentium)种子液，在24～36℃的发酵温度下进行摇床发酵，摇床转速为100～300rmp，发酵时间为20～50h，得到人参发酵产物；其中，所述发酵乳杆菌种子液为采用MRS液体培养基制备的发酵乳杆菌种子液；所述发酵乳杆菌种子液的活菌数为106～108CFU·mL-1；发酵乳杆菌种子液的接种量为人参灭菌液的重量的2～6wt％。上述发酵乳杆菌发酵人参的方法可以更有效地提高人参皂苷Rg1、Re、Rb1、Rc以及Rd的产量。
根据本发明的发酵乳杆菌发酵人参的方法，更优选地，发酵乳杆菌发酵人参的方法包括如下步骤：(1)将人参粉末加水制备人参匀浆，灭菌，得到人参灭菌液；其中，人参匀浆中人参添加量为6～10wt％；(2)所述人参灭菌液冷却后接种发酵乳杆菌(Lactobacillusfermentium)种子液，在24～32℃的发酵温度下进行摇床发酵，摇床转速为150～200rmp，发酵时间为24～48h，得到人参发酵产物；其中，所述发酵乳杆菌种子液为采用MRS液体培养基制备的发酵乳杆菌种子液；所述发酵乳杆菌种子液的活菌数为107～108CFU·mL-1；发酵乳杆菌种子液的接种量为人参灭菌液的重量的2～4wt％。上述方法可以保证发酵液中发酵乳杆菌的活菌数达到较佳值，并获得较高的人参皂苷Rg1、Re、Rb1、Rc以及Rd的产量。
根据本发明优选的实施方式，发酵乳杆菌发酵人参的方法包括如下步骤：(1)将人参粉末加水制备人参匀浆，灭菌，得到人参灭菌液；其中，人参匀浆中人参添加量为8～10wt％；(2)所述人参灭菌液冷却后接种发酵乳杆菌(Lactobacillus fermentium)种子液，在26～32℃的发酵温度下进行摇床发酵，摇床转速为150～200rmp，发酵时间为40～45h，得到人参发酵产物；其中，所述发酵乳杆菌种子液为采用MRS液体培养基制备的发酵乳杆菌种子液；所述发酵乳杆菌种子液的活菌数为107～108CFU·mL-1；发酵乳杆菌种子液的接种量为人参灭菌液的重量的2.5～3.5wt％。上述方法可以保证发酵液中发酵乳杆菌的活菌数达到较佳值，并获得较高的人参皂苷Rg1、Re、Rb1、Rc以及Rd的产量。
根据本发明的一个具体实施方式，发酵乳杆菌发酵人参的方法包括如下步骤：(1)将人参粉末加水制备人参匀浆，灭菌，得到人参灭菌液；其中，人参匀浆中人参添加量为8.03wt％；(2)所述人参灭菌液冷却后接种发酵乳杆菌(Lactobacillus fermentium)种子液，在28.24℃的发酵温度下进行摇床发酵，摇床转速为160rmp，发酵时间为42h，得到人参发酵产物；其中，所述发酵乳杆菌种子液为采用MRS液体培养基制备的发酵乳杆菌种子液；所述发酵乳杆菌种子液的活菌数为5×107CFU·mL-1；发酵乳杆菌种子液的接种量为人参灭菌液的重量的2wt％。上述方法可以保证发酵液中发酵乳杆菌的活菌数达到最佳值，并获得更高的人参皂苷Rg1、Re、Rb1、Rc以及Rd的产量。
<人参发酵产物>
本发明的人参发酵产物是以人参作为底物，以发酵乳杆菌(Lactobacillusfermentium)作为菌种发酵得到的。优选地，发酵乳杆菌(Lactobacillus fermentium)购自北京豫维科技有限公司，保藏编号为：CICC 22808。所述人参发酵产物中发酵乳杆菌活菌的浓度可以为1011～1015CFU·mL-1，优选为1012～1014CFU·mL-1，更优选为5×1012～6×1013CFU·mL-1。具体地，本发明的人参发酵产物是通过上述发酵乳杆菌发酵人参的方法制备得到的。相比于人参，本发明的人参发酵产物中人参皂苷Rg1、Re、Rb1、Rc以及Rd的产量均明显提高。此外，相比于人参，本发明的人参发酵产物中SOD酶活性显著提高，抗氧化能力显著提高。
<人参发酵产物的用途>
本发明还提供上述人参发酵产物的用途。
一方面，本发明提供所述人参发酵产物用于制备人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1、人参皂苷Rc、人参皂苷Rd单体的用途，或用于制备由人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1、人参皂苷Rc或人参皂苷Rd组成的组合物的用途。
另一方面，本发明的人参发酵产物具有较高的SOD酶活性，因此，本发明还提供所述人参发酵产物用于制备抗氧化产品的用途；所述抗氧化产品为保健品或化妆品。
以下实施例与实验例采用的实验试剂、仪器以及检测指标如下：
人参为5年生干人参；发酵乳杆菌(Lactobacillus fermentium)购自北京豫维科技有限公司，保藏编号为CICC 22808。
人参皂苷类对照品均购自上海源叶生物科技有限公司，包括人参皂苷Rg1(货号：X13O8L45573)、人参皂苷Re(货号：B10M8S35243)、人参皂苷Rb1(货号：Z16J9X52719)、人参皂苷Rc(货号：M18J9S53098)、人参皂苷Rd(货号：Z13N8X48155)。
SOD(总超氧化物歧化酶)采用T-SOD试剂盒，购自南京建成生物工程研究所。
MRS液体培养基购自青岛海博生物科技有限公司。
MRS固体培养基：在MRS液体培养基内添加20g琼脂/L，灭菌、冷却得到。
发酵乳杆菌种子液为采用MRS液体培养基制备的发酵乳杆菌种子液。
高压蒸汽法灭菌设备为立式压力蒸汽灭菌器BXM-30R，购自上海博讯实业有限公司。
高效液相色谱仪购自Waters公司。
DL-820E智能超声波清洗器购自上海之信仪器有限公司。
实施例1
发酵乳杆菌发酵人参的方法包括如下步骤：
(1)将人参粉碎过药典筛四号筛，得到人参粉末；将人参粉末与去离子水混悬后制备为人参匀浆，用高压蒸汽法进行灭菌，灭菌温度为121℃，灭菌时间为20min，得到人参灭菌液；其中，人参匀浆中人参添加量为8wt％。
(2)上述人参灭菌液冷却后接种发酵乳杆菌(Lactobacillus fermentium)种子液，发酵乳杆菌种子液的活菌数为5×107CFU·mL-1，发酵乳杆菌种子液的接种量为人参灭菌液的重量的3wt％，在28℃下进行摇床发酵，摇床转速为160rmp，发酵时间为36h，得到人参发酵产物。冷藏保存。
实施例2
发酵乳杆菌发酵人参的方法包括如下步骤：
(1)将人参粉碎过药典筛四号筛，得到人参粉末；将人参粉末与去离子水混悬后制备为人参匀浆，用高压蒸汽法进行灭菌，灭菌温度为121℃，灭菌时间为20min，得到人参灭菌液；其中，人参匀浆中人参添加量为8.03wt％。
(2)上述人参灭菌液冷却后接种发酵乳杆菌(Lactobacillus fermentium)种子液，发酵乳杆菌种子液的活菌数为5×107CFU·mL-1，发酵乳杆菌种子液的接种量为人参灭菌液的重量的2wt％，在28.24℃下进行摇床发酵，摇床转速为160rmp，发酵时间为42h，得到人参发酵产物。冷藏保存。
实施例3
发酵乳杆菌发酵人参的方法包括如下步骤：
(1)将人参粉碎过药典筛四号筛，得到人参粉末；将人参粉末与去离子水混悬后制备为人参匀浆，用高压蒸汽法进行灭菌，灭菌温度为121℃，灭菌时间为20min，得到人参灭菌液；其中，人参匀浆中人参添加量为10wt％。
(2)上述人参灭菌液冷却后接种发酵乳杆菌(Lactobacillus fermentium)种子液，发酵乳杆菌种子液的活菌数为5×107CFU·mL-1，发酵乳杆菌种子液的接种量为人参灭菌液的重量的4wt％，在32℃下进行摇床发酵，摇床转速为160rmp，发酵时间为48h，得到人参发酵产物。冷藏保存。
实施例4
发酵乳杆菌发酵人参的方法包括如下步骤：
(1)将人参粉碎过药典筛四号筛，得到人参粉末；将人参粉末与去离子水混悬后制备为人参匀浆，用高压蒸汽法进行灭菌，灭菌温度为121℃，灭菌时间为20min，得到人参灭菌液；其中，人参匀浆中人参添加量为6wt％。
(2)上述人参灭菌液冷却后接种发酵乳杆菌(Lactobacillus fermentium)种子液，发酵乳杆菌种子液的活菌数为5×107CFU·mL-1，发酵乳杆菌种子液的接种量为人参灭菌液的重量的2wt％，在24℃下进行摇床发酵，摇床转速为160rmp，发酵时间为24h，得到人参发酵产物。冷藏保存。
实施例5-8
实施例5-8除以下实验条件之外，其余条件与实施例1完全相同。
实施例5-8的实验条件参见表1。
表1实施例5-8的实验条件
实施例编号 发酵时间/h 温度/℃
5 24 24
6 48 32
7 48 24
8 24 32
实施例9-12
实施例9-12除以下实验条件之外，其余条件与实施例1完全相同。
实施例9-12的实验条件参见表2。
表2实施例9-12的实验条件
实施例编号 人参添加量/％ 接种量/％
9 6 4
10 10 4
11 10 2
12 6 2
实施例13-16
实施例13-16除以下实验条件之外，其余条件与实施例1完全相同。实施例13-16的实验条件参见表3。
表3实施例13-16的实验条件
实施例编号 温度/℃ 接种量/％
13 32 4
14 24 2
15 24 4
16 32 2
实施例17-20
实施例17-20除以下实验条件之外，其余条件与实施例1完全相同。实施例17-20的实验条件参见表4。
表4实施例17-20的实验条件
实施例编号 人参添加量/％ 温度/℃
17 10 32
18 10 24
19 6 32
20 6 24
实验例1人参发酵产物的活菌数测定
分别测定实施例1～20的人参发酵产物的发酵乳杆菌活菌数。以实施例1为例，人参发酵产物的发酵乳杆菌活菌数的测定方法为：无菌条件下将实施例1的人参发酵产物梯度稀释至不同浓度，涂布于MRS固体培养基中，28℃培养36h，选择菌落数在30～300个的平板进行计数，每个梯度重复三次。实施例1～20的人参发酵产物的发酵乳杆菌活菌数参见表5。
表5人参发酵产物的发酵乳杆菌活菌数
实施例编号 人参发酵产物的发酵乳杆菌活菌数/×10<sup>11</sup>CFU
1 425
2 450
3 412
4 71.8
5 165
6 100
7 123
8 129
9 131
10 149
11 231
12 160
13 207
14 220
15 151
16 242
17 32
18 29
19 50
20 29
实验例2人参皂苷的HPLC分析
(1)对照品溶液的制备
分别精密称取人参皂苷3.75mg Rg1对照品、3.00mg Re对照品、3.50mg Rb1对照品、2.50mg Rc对照品、5.95mg Rd对照品，溶解于甲醇中，定容至5mL，制得混合对照品储备液。
(2)线性关系考察
精密吸取混合对照品储备液分别稀释100、50、20、10、5、2倍，得到不同浓度的混合对照品溶液，分别进样10μL进行测定，记录各色谱峰峰面积，以峰面积为纵坐标，进样量为横坐标进行线性回归。
(3)样品处理
取实施例1的人参发酵产物的匀浆与相同浓度的人参匀浆，分别冷冻干燥处理，取冷冻干燥后粉末0.30g，分别置于具塞三角瓶中，加80％甲醇25mL，密塞后称定重量，摇匀，超声(250W，50kHz)提取1h，离心收集上清，沉淀以相同条件提取两次，分别收集上清；上清挥干后，分别用100％甲醇溶解并定容至10ml，溶液过0.45μm微孔滤膜，分别得到人参发酵清液与未发酵人参清液。
(4)色谱条件
安捷伦Eclipse XDB-C18(4.6mm×250mm，5μm)色谱柱柱；流动相：乙腈(A)-0.05mol·L-1磷酸二氢钾水溶液(B)，洗脱梯度(0-10min，20％A；10-22min，20％A-22％A；22-30min，22％A-29％A；30-50min，29％A-29％A；50-60min，29％A-35％A；60-65min，35％A-40％A；65-75min，40％A-30％A；75-85min，30％A-20％A；85-90min，20％A-80％A)；流速：1mL·min-1；柱温：30℃；检测波长：203nm；进样量：10μL；分析时间：90min。
(5)人参皂苷的HPLC分析结果
对人参皂苷的混合对照品溶液的HPLC分析结果参见图1。对未发酵人参清液的HPLC分析结果参见图2。对人参发酵清液的HPLC分析结果参见图3。发酵前后人参皂苷的变化参见表6。人参皂苷的线性关系参见表7。
由图1、2、3、表6、表7可知，经发酵乳杆菌发酵后，发酵体系中各人参皂苷浓度均有一定的提高(参见表6)，其中人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1、人参皂苷Rc、人参皂苷Rd分别提高了69％、62％、73％、34％、64％，且经发酵后产生了新的物质(参见图3中峰7)，这表明发酵乳杆菌中可能存在某些酶类对人参皂苷进行转化。
表6发酵前后人参皂苷的变化
Figure BDA0002416321910000161
表7人参皂苷的线性关系
化合物 回归方程 r 线性范围/(mg·mL<sup>-1</sup>)
人参皂苷Rg1 Y＝141221X+696.89 0.9995 0.18～5.46
人参皂苷Re Y＝164168X+1253.82 0.9997 0.45～7.59
人参皂苷Rb<sub>1</sub> Y＝121954X+1000.98 0.9999 0.22～8.66
人参皂苷Rc Y＝112155X-158.89 0.9998 0.35～4.88
人参皂苷Rd Y＝137894X+801.73 0.9998 0.32～9.36
实验例3 SOD活性分析
取实施例1的人参发酵产物，经12000rpm离心30min后取上清，过0.22nm滤膜，得到澄清的人参发酵清液；未发酵人参匀浆(实施例1)以相同操作制得未发酵人参清液；MRS益生菌发酵液为相同发酵条件下以MRS液体培养基发酵后离心取上清制得。取上述母液，用去离子水制备成不同质量浓度的样品溶液(1％、5％、10％、20％、50％、100％)，利用T-SOD试剂盒测定不同浓度溶液的SOD(总超氧化物歧化酶)活性。MRS益生菌发酵液、未发酵人参清液、人参发酵清液的SOD活性分析结果参见图4。
由图4可知，随样品浓度增加，发酵后的人参发酵清液的SOD酶活性从29.9U·mL-1上升到51.0U·mL-1，具有较好SOD酶活性。且人参经过发酵后其SOD酶活性有明显的提升，从40.5U·mL-1提升至51.0U·mL-1，升高约26％。此外，MRS益生菌发酵液也存在一定的SOD酶活性，但与人参发酵清液相比较低。
SOD可对抗与阻断氧自由基对细胞造成的损害，并及时修复受损细胞。由上述图4中SOD酶活性分析发现，经发酵后人参发酵清液的SOD活性有一定的提升，这说明在发酵的过程中，发酵乳杆菌中的多种酶类发挥功能，并可能释放一些如SOD酶等对人体有益的酶类。
对比例1发酵时间对发酵乳杆菌活菌数的影响
除了发酵时间之外，其余条件与实施例1完全相同；发酵时间分别为4h、8h、12h、16h、60h、72h时，分别测定人参发酵产物(发酵结束时的发酵液)的发酵乳杆菌活菌数，参见表8。发酵乳杆菌活菌数的测定方法为：无菌条件下将人参发酵产物(发酵结束时的发酵液)梯度稀释至不同浓度，涂布于MRS固体培养基中，28℃培养36h，选择菌落数在30～300个的平板进行计数，每个梯度重复三次。
表8人参发酵产物的发酵乳杆菌活菌数
发酵时间 人参发酵产物的发酵乳杆菌活菌数(CFU·mL<sup>-1</sup>)
4h 1.18×10<sup>8</sup>
8h 1.75×10<sup>8</sup>
12h 9.86×10<sup>8</sup>
16h 1.13×10<sup>9</sup>
60h 2.62×10<sup>8</sup>
72h 1.87×10<sup>8</sup>
对比例2人参添加量对发酵乳杆菌活菌数的影响
除了人参匀浆中人参添加量之外，其余条件与实施例1完全相同；人参匀浆中人参添加量分别为1wt％、2wt％、4wt％、12.5wt％、20wt％时，分别测定人参发酵产物(发酵结束时的发酵液)的发酵乳杆菌活菌数，参见表9。发酵乳杆菌活菌数的测定方法为：无菌条件下将人参发酵产物(发酵结束时的发酵液)梯度稀释至不同浓度，涂布于MRS固体培养基中，28℃培养36h，选择菌落数在30～300个的平板进行计数，每个梯度重复三次。
表9人参发酵产物的发酵乳杆菌活菌数
人参匀浆中人参添加量 人参发酵产物的发酵乳杆菌活菌数(CFU·mL<sup>-1</sup>)
1wt％ 1.02×10<sup>8</sup>
2wt％ 8.35×10<sup>8</sup>
4wt％ 1.79×10<sup>9</sup>
12.5wt％ 2.31×10<sup>9</sup>
20wt％ 7.53×10<sup>8</sup>
对比例3发酵温度对发酵乳杆菌活菌数的影响
除了发酵温度之外，其余条件与实施例1完全相同；发酵温度分别为20℃、40℃时，分别测定人参发酵产物(发酵结束时的发酵液)的发酵乳杆菌活菌数，参见表10。发酵乳杆菌活菌数的测定方法为：无菌条件下将人参发酵产物(发酵结束时的发酵液)梯度稀释至不同浓度，涂布于MRS固体培养基中，28℃培养36h，选择菌落数在30～300个的平板进行计数，每个梯度重复三次。
表10人参发酵产物的发酵乳杆菌活菌数
发酵温度 人参发酵产物的发酵乳杆菌活菌数(CFU·mL<sup>-1</sup>)
20℃ 3.18×10<sup>9</sup>
40℃ 4.92×10<sup>8</sup>
对比例4接种量对发酵乳杆菌活菌数的影响
除了发酵乳杆菌种子液的接种量之外，其余条件与实施例1完全相同；发酵乳杆菌种子液的接种量分别为人参灭菌液的重量的1wt％、7wt％时，分别测定人参发酵产物(发酵结束时的发酵液)的发酵乳杆菌活菌数，参见表11。发酵乳杆菌活菌数的测定方法为：无菌条件下将人参发酵产物(发酵结束时的发酵液)梯度稀释至不同浓度，涂布于MRS固体培养基中，28℃培养36h，选择菌落数在30～300个的平板进行计数，每个梯度重复三次。
表11人参发酵产物的发酵乳杆菌活菌数
接种量 人参发酵产物的发酵乳杆菌活菌数(CFU·mL<sup>-1</sup>)
1wt％ 1.7×10<sup>11</sup>
7wt％ 5.6×10<sup>11</sup>
对比例5发酵时间、发酵温度对发酵乳杆菌活菌数的影响
除了发酵时间、发酵温度之外，其余条件与实施例1完全相同；发酵时间为16h、发酵温度为20℃，测定人参发酵产物(发酵结束时的发酵液)的发酵乳杆菌活菌数为1.84×109CFU·mL-1。发酵乳杆菌活菌数的测定方法为：无菌条件下将人参发酵产物(发酵结束时的发酵液)梯度稀释至不同浓度，涂布于MRS固体培养基中，28℃培养36h，选择菌落数在30～300个的平板进行计数，每个梯度重复三次。
对比例6人参添加量、接种量对发酵乳杆菌活菌数的影响
除了人参匀浆中人参添加量、发酵乳杆菌种子液的接种量之外，其余条件与实施例1完全相同；人参匀浆中人参添加量为12.5wt％、发酵乳杆菌种子液的接种量为人参灭菌液的重量的7wt％，测定人参发酵产物(发酵结束时的发酵液)的发酵乳杆菌活菌数为2.73×1011CFU·mL-1。发酵乳杆菌活菌数的测定方法为：无菌条件下将人参发酵产物(发酵结束时的发酵液)梯度稀释至不同浓度，涂布于MRS固体培养基中，28℃培养36h，选择菌落数在30～300个的平板进行计数，每个梯度重复三次。
对比例7接种量、发酵温度对发酵乳杆菌活菌数的影响
除了接种量、发酵温度之外，其余条件与实施例1完全相同；发酵乳杆菌种子液的接种量为人参灭菌液的重量的7wt％、发酵温度为40℃，测定人参发酵产物(发酵结束时的发酵液)的发酵乳杆菌活菌数为2.81×1010CFU·mL-1。发酵乳杆菌活菌数的测定方法为：无菌条件下将人参发酵产物(发酵结束时的发酵液)梯度稀释至不同浓度，涂布于MRS固体培养基中，28℃培养36h，选择菌落数在30～300个的平板进行计数，每个梯度重复三次。
对比例8人参添加量、发酵温度对发酵乳杆菌活菌数的影响
除了人参匀浆中人参添加量、发酵温度之外，其余条件与实施例1完全相同；人参匀浆中人参添加量为12.5wt％、发酵温度为20℃，测定人参发酵产物(发酵结束时的发酵液)的发酵乳杆菌活菌数为1.06×109CFU·mL-1。发酵乳杆菌活菌数的测定方法为：无菌条件下将人参发酵产物(发酵结束时的发酵液)梯度稀释至不同浓度，涂布于MRS固体培养基中，28℃培养36h，选择菌落数在30～300个的平板进行计数，每个梯度重复三次。
本发明并不限于上述实施方式，在不背离本发明的实质内容的情况下，本领域技术人员可以想到的任何变形、改进、替换均落入本发明的范围。

Claims (10)

1.一种发酵乳杆菌发酵人参的方法，其特征在于，包括如下步骤：
(1)将人参粉末加水制备人参匀浆，灭菌，得到人参灭菌液；其中，人参匀浆中人参添加量为5～12wt％；
(2)所述人参灭菌液冷却后接种发酵乳杆菌(Lactobacillus fermentium)种子液，在24～36℃的发酵温度下进行摇床发酵，摇床转速为100～300rmp，发酵时间为20～50h，得到人参发酵产物；其中，所述发酵乳杆菌种子液为采用MRS液体培养基制备的发酵乳杆菌种子液；所述发酵乳杆菌种子液的活菌数为106～108CFU·mL-1；发酵乳杆菌种子液的接种量为人参灭菌液的重量的2～6wt％。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述人参匀浆中人参添加量为6～10wt％。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述发酵温度为24～32℃。
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述发酵时间为24～48h。
5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，发酵乳杆菌种子液的接种量为人参灭菌液的重量的2～4wt％。
6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述人参匀浆中人参添加量为6～10wt％，所述发酵温度为24～32℃，所述发酵时间为24～48h，发酵乳杆菌种子液的接种量为人参灭菌液的重量的2～4wt％。
7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述人参匀浆中人参添加量为8.03wt％，所述发酵温度为28.24℃，所述发酵时间为42h，发酵乳杆菌种子液的接种量为人参灭菌液的重量的2wt％。
8.一种人参发酵产物，其特征在于，采用如权利要求2～6任一项所述的发酵乳杆菌发酵人参的方法制备得到。
9.根据权利要求8所述的人参发酵产物用于制备抗氧化产品的用途。
10.根据权利要求8所述的人参发酵产物用于制备人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1、人参皂苷Rc、人参皂苷Rd单体的用途，或用于制备由人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1、人参皂苷Rc或人参皂苷Rd组成的组合物的用途。
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Cited By (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN113244158A (zh) * 2021-05-12 2021-08-13 江苏巴帝恩生物科技有限公司 一种四重珍萃复合物的制备方法及应用
CN113308419A (zh) * 2021-07-22 2021-08-27 中国农业科学院农产品加工研究所 一株发酵用的谷糠乳杆菌及其应用
CN113621673A (zh) * 2021-09-03 2021-11-09 北京思维晶格科技有限公司 复合菌株发酵人参的方法及发酵产物和用途
CN115227615A (zh) * 2022-08-03 2022-10-25 北京工商大学 人参根发酵物，含其皮肤外用剂及其制备方法和应用

Citations (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20090083505A (ko) * 2008-01-30 2009-08-04 주식회사 바이오랜드 락토바실러스 퍼멘텀 ｂｌｊｈ１０１을 이용한인삼추출물의 발효물을 제조하는 방법 및 이를 함유하는조성물
CN102154428A (zh) * 2011-01-13 2011-08-17 佟心 一种人参皂苷Rh2的制备方法
US20120045428A1 (en) * 2010-08-17 2012-02-23 Il Hwa Co., Ltd. Methods for preparing a fermented ginseng concentrate or powder
KR20130003944A (ko) * 2011-07-01 2013-01-09 주식회사 바이오랜드 발효 인삼추출물의 제조방법
CN102888437A (zh) * 2011-07-22 2013-01-23 复旦大学 一种利用微生物转化制备人参皂苷Rd的方法
CN104489843A (zh) * 2015-01-19 2015-04-08 中国食品发酵工业研究院 一种山楂发酵制品及其制备方法
CN106244487A (zh) * 2016-08-24 2016-12-21 吉林农业大学 一株乳杆菌及提高稀有皂苷的人参发酵方法
CN106282039A (zh) * 2016-08-24 2017-01-04 吉林农业大学 一株酿酒酵母及提高稀有皂苷的人参发酵方法
CN108378362A (zh) * 2018-04-24 2018-08-10 吉林大学 一种发酵糖参片的制备方法
CN109182441A (zh) * 2018-08-31 2019-01-11 吉林农业大学 人参皂苷Rb1发酵液的制备方法及其应用

Patent Citations (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20090083505A (ko) * 2008-01-30 2009-08-04 주식회사 바이오랜드 락토바실러스 퍼멘텀 ｂｌｊｈ１０１을 이용한인삼추출물의 발효물을 제조하는 방법 및 이를 함유하는조성물
US20120045428A1 (en) * 2010-08-17 2012-02-23 Il Hwa Co., Ltd. Methods for preparing a fermented ginseng concentrate or powder
CN102154428A (zh) * 2011-01-13 2011-08-17 佟心 一种人参皂苷Rh2的制备方法
KR20130003944A (ko) * 2011-07-01 2013-01-09 주식회사 바이오랜드 발효 인삼추출물의 제조방법
CN102888437A (zh) * 2011-07-22 2013-01-23 复旦大学 一种利用微生物转化制备人参皂苷Rd的方法
CN104489843A (zh) * 2015-01-19 2015-04-08 中国食品发酵工业研究院 一种山楂发酵制品及其制备方法
CN106244487A (zh) * 2016-08-24 2016-12-21 吉林农业大学 一株乳杆菌及提高稀有皂苷的人参发酵方法
CN106282039A (zh) * 2016-08-24 2017-01-04 吉林农业大学 一株酿酒酵母及提高稀有皂苷的人参发酵方法
CN108378362A (zh) * 2018-04-24 2018-08-10 吉林大学 一种发酵糖参片的制备方法
CN109182441A (zh) * 2018-08-31 2019-01-11 吉林农业大学 人参皂苷Rb1发酵液的制备方法及其应用

Non-Patent Citations (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
SEONG-EUN PARK ET.AL: "Biotransformation of major ginsenosides in ginsenoside model culture by lactic acid bacteria", 《JOURNAL OF GINSENG RESEARCH》 *
WEI ZHOU ET AL: "A simple and rapid gradient RP-HPLC method for simultaneous separation and determination of related ginsenosides during the process of biotransformation of ginsenoside Rb1 has been developed. As many as four process ginsenosides have been separated and ide", 《JOURNAL OF SEPARATION SCIENCE》 *
刘倩倩等: "耐酸乳酸杆菌物种特异性引物设计及其在古井贡酒窖泥酒醅质量评价中的初步应用", 《食品与发酵工业》 *
卲淇等: "乳酸菌对人参皂苷 Rb1的生物转化研究", 《 延边大学学报（自然科学版） 》 *
周中流等: "天然产物皂苷类化合物生物转化的研究进展", 《中国实验方剂学杂志》 *
夏晚霞等: "乳酸菌发酵转化人参皂苷", 《现代食品科技》 *
孙诗清: "《生物分离实验技术》", 28 February 2017, 北京理工大学出版社 *
薛兢兢灯: "人参提取和人参发酵工艺的主要有效成分对比评价", 《改革与开放》 *
贾天柱等: "《中药炮制化学》", 31 October 2015 *
黎阳等: "人参化学成分和药理研究进展", 《中草药》 *

Cited By (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN113244158A (zh) * 2021-05-12 2021-08-13 江苏巴帝恩生物科技有限公司 一种四重珍萃复合物的制备方法及应用
CN113308419A (zh) * 2021-07-22 2021-08-27 中国农业科学院农产品加工研究所 一株发酵用的谷糠乳杆菌及其应用
CN113621673A (zh) * 2021-09-03 2021-11-09 北京思维晶格科技有限公司 复合菌株发酵人参的方法及发酵产物和用途
CN113621673B (zh) * 2021-09-03 2023-07-25 北京思维晶格科技有限公司 复合菌株发酵人参的方法及发酵产物和用途
CN115227615A (zh) * 2022-08-03 2022-10-25 北京工商大学 人参根发酵物，含其皮肤外用剂及其制备方法和应用
CN115227615B (zh) * 2022-08-03 2024-04-09 北京工商大学 人参根发酵物，含其皮肤外用剂及其制备方法和应用

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