CN114010762A - 一种改善贫血症状的制剂及其制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种改善贫血症状的制剂及其制备方法，属于血蛋白多肽技术领域，一种改善贫血症状的制剂，包括重量份数计的以下各组分：血蛋白多肽粉3‑10份、胶原蛋白肽粉3‑10份、红枣提取物3‑10份、牛磺酸0.1‑0.3份、三氯蔗糖0.01‑0.04份、甜菊糖苷0.015‑0.025份、赤藓糖醇0.1‑0.3份、柠檬酸0.6‑0.8份、果胶0.05‑0.15份、食品用香精0.15‑0.18份、人参粉0.1‑0.2份及阿胶肽粉0.1‑0.2份。该制剂吸收率高；不蓄积；安全性高无胃肠道刺激，在大鼠实验下证实其有效性与安全性。对于贫血，尤其是肿瘤相关性贫血，能有效改善贫血指标，在试验服用期间患者并未施打促红针的情况下，对于红细胞生成效果也相当显著。

Description

一种改善贫血症状的制剂及其制备方法
技术领域
本发明涉及血蛋白多肽技术领域，更具体地说，涉及一种改善贫血症状的制剂及其制备方法。
背景技术
肿瘤相关性贫血(cancer relatedanemia，CRA)是肿瘤患者本身或者治疗过程中发生的贫血，是常见的并发症之一，主要是指肿瘤患者在其疾病的发展及治疗过程中发生的贫血。CRA的患病率为30％一90％。能显著影响肿瘤的临床治疗效果和患者的生存期，也是影响疾病进展、预后和生存率的消极因素。在不同类型肿瘤中，肺癌、妇科、泌尿生殖系及胃肠道消化系统肿瘤患者贫血的发生率高。CRA患者(Hb范围，8～10g/dl)会表现出疲乏、嗜睡、呼吸困难、厌食、注意力集中困难等；贫血可以损害他们的整体功能状态，显著降低抗癌方案的有效性。CRA相关的疲劳会影响患者的生活质量以及接受治疗的效果。
随着化疗的开展，贫血患者比例逐渐增加。高达9284％的CRA患者未得到任何纠正贫血的治疗！研究表明临终前一年恶性肿瘤患者中贫血比例随着病情接近终末期而显著增加，需要输血的重度贫血患者比例亦显著增加，对终末期肿瘤患者进行肿瘤相关性贫血的检测及加强支持治疗十分重要。肿瘤相关性贫血发生率高，但治疗率低，应引起足够的重视。
目前关于CRA患者的治疗指南治疗方式有输血治疗、红细胞生成刺激剂(ESA)治疗与口服铁剂和注射铁剂进行治疗。输注全血或红细胞是治疗CRA的主要方式，主要优点是可以迅速升高Hb浓度、可用于EPO治疗无效的患者。尽管输血后Hb浓度迅速升高，但恶性肿瘤的持续存在或具有细胞毒性的化疗药物引起患者的红细胞生成反应依然钝化，Hb很快降至输血前水平，因此治疗过程中Hb的波动较大，维持时间短但是临床上还是会出现治疗效果不佳和副反应多的问题。红细胞生成刺激剂(erythropolesls一stimulating agents,ESA)治疗是治疗CRA的最重要方法EPO是临床上最常用也是研究最多的ESA。EPO治疗的主要优点是符合正常生理、生活质量明显改善、可用于门诊患者以及耐受性好。治疗的主要缺点是大约2/3患者有效，用药2一4周起效。目前认为，EPO和输血均为治疗肿瘤患者贫血的主要手段，但是，EPO治疗的主要目标是减少输血。循证医学资料提示，EPO治疗贫血能改善生活质量，使输血需求下降“。口服铁剂，优点是使用方便；缺点是服用后仅有10％左右被人体吸收，同时胃肠道刺激症状比较严重。有部分患者对口服铁剂过敏。肠道外铁剂，优点是能够被人体完全吸收，起效快，无胃肠道刺激症状；缺点是相对口服铁剂来说需要注射使用。用于对口服铁不耐受或无反应的患者缺铁治疗。
临床上口服铁剂如硫酸亚铁、富马酸亚铁、琥珀酸亚铁等吸收率差,为了达到治疗效果往往用量大，铁离子蓄积肠道，造成胃肠刺激，吸收率持续下降，胃肠菌群失调等问题。注射铁剂如蔗糖铁剂量难以把控，铁过量造成氧化应激发生血管内皮损伤、促进动脉粥样硬化等并发症。以上问题都是造成贫血难治疗，副反应多的原因之一。
北京协和医院临床营养科主任于康教授提到“铁是和蛋白质一起合成血红蛋白的。如果蛋白质缺乏,即使铁足够,也会引起贫血”。蛋白营养不良和缺铁性贫血在临床上也是密切相关的，恶性蛋白营养不良不及时纠正，一定会导致贫血，严重贫血常常伴有蛋白营养不良。所以在临床上，营养素铁和蛋白两者应该同时受到重视，才能提高营养性贫血患者的治愈率。根据我国相关疾病临床路径流行病学调查数据显示，恶性肿瘤约15％～55％发生轻～中度贫血。约有40％-80％蛋白营养不良。中国临床肿瘤学会肿瘤相关性贫血临床实践指南2021内容发现，传统铁剂补充有吸收率差(约10％)，安全性差的缺点。如何选择优化使用更好的铁剂改善CRA疾病人群的贫血症状是一个非常迫切的问题。
发明内容
针对现有技术中存在的问题，本发明的目的在于提供一种改善贫血症状的制剂及该制剂的制备方法。
为解决上述问题，本发明采用如下的技术方案。
本发明的第一目的在于提供一种改善贫血症状的制剂，包括以下重量百分含量的组分：血蛋白多肽粉3-10份、胶原蛋白肽粉3-10份、红枣提取物3-10份、牛磺酸0.1-0.3份、三氯蔗糖0.01-0.04份、甜菊糖苷0.015-0.025份、赤藓糖醇0.1-0.3份、柠檬酸0.6-0.8份、果胶0.05-0.15份、食品用香精0.15-0.18份、人参粉0.1-0.2份及阿胶肽粉0.1-0.2份。
优选的，采用的所述血蛋白多肽粉富含血红素铁。主要是通过在动物新鲜血液中先加入抗凝剂，再离心弃血浆，收集血红细胞破壁加热、酶解、超滤、浓缩及干燥获得。且血蛋白多肽粉的获得最好在氮气保护环境下完成。
优选的，上述血蛋白多肽粉的制备方法，包括以下步骤：
S1：原料处理：新鲜动物血液从屠宰场收集后，迅速抗凝，离心弃血浆，收集血红细胞；
S2：采用高压均质机对S1收集的血红细胞进行高剪切细胞膜破碎；避光条件下45～55℃加热25～35min，得到血红蛋白；
S3：酶解：在特定的温度和pH下按一定量的料液比向S2的血红蛋白内加入蛋白酶进行酶解；
S4：超滤：在S3血红蛋白酶解后，利用超滤膜截留酶解液；
S5：浓缩：将S4截留后的酶解液进行单效浓缩；
S6：干燥：在S5浓缩后干燥得到所述血蛋白多肽粉。
其中，步骤S1的血液优选为牛血，也可以是其他动物血液，比如猪血，最好是牛血，猪血气味差，成品口感差，猪是杂食动物，牛是素食动物，牛来源更好。步骤S2中避光条件下，加热温度优选为50℃，加热时间优选为30min。
优选的，步骤S3中酶解的具体过程为，以料液比1:10～20加入适量的纯化水，通过筛选按固含量3％先后加入胰蛋白酶和风味蛋白酶，酶解时间为75～85h，煮沸04～06h灭酶，优选为酶解8h，煮沸05h灭酶。所述酶解还可以分两步进行，先维持前6h在温度45℃pH＝75的条件下酶解，再维持后2h在温度55℃pH＝7的条件下酶解。
优选的，步骤S4超滤膜截留分子量为6000-30000；酶解液浓度浓缩至30～50％最好。步骤S6优选采用喷雾干燥法，喷雾干燥条件为进风温度160～180℃，出风温度80～100℃。
优选的，所述血蛋白多肽粉的制备包括以下步骤：
(1)在氮气保护环境下，新鲜动物血液从屠宰场收集后，迅速加入柠檬酸钠抗凝，离心弃血浆，收集血红细胞；采用高压均质机进行高剪切细胞膜破碎；避光条件下50℃加热30min，得到血红蛋白。
(2)酶解：以料液比1:10～20加入步骤(1)的血红蛋白和纯化水，通过筛选按固含量3％先加入胰蛋白酶维持前6h在温度45℃pH＝75的条件下酶解，再加入风味蛋白酶维持后2h在温度55℃pH＝7的条件下酶解，煮沸05h灭酶；
(3)超滤：步骤(2)后，利用超滤膜截留分子量为6000-30000；
(4)浓缩：步骤(3)后，将酶解液进行单效浓缩；
(5)干燥：步骤(4)后，采用喷雾干燥法，制得所述血蛋白多肽粉。
优选的，具体所述制剂包括血蛋白多肽粉10份、胶原蛋白肽粉10份、红枣提取液10份、牛磺酸0.2份、三氯蔗糖0.02份、甜菊糖苷0.015份、赤藓糖醇0.1份、柠檬酸0.6份、果胶0.05份、食品用香精0.15份、人参粉0.1份及阿胶肽粉0.1份，其余为水。
本发明的第二目的在于提供一种改善贫血症状的制剂的制备方法，它能以片剂形状存在，具体是将血蛋白多肽粉、胶原蛋白肽粉、红枣提取物、牛磺酸、三氯蔗糖、甜菊糖苷、赤藓糖醇、柠檬酸、果胶、食品用香精、人参粉及阿胶肽粉混合搅拌过筛，制粒后压片，加入复配被膜剂进行包衣，包装即成片状的所述血蛋白多肽制剂。
另外，它还能以液态饮品形式存在，主要是将血蛋白多肽粉、胶原蛋白肽粉、红枣提取物、牛磺酸、三氯蔗糖、甜菊糖苷、赤藓糖醇、柠檬酸、果胶、食品用香精、人参粉及阿胶肽粉混合搅拌，加水溶解定容，过滤后再灭菌灌装即得液体状可饮用的所述血蛋白多肽制剂。优选的饮品制剂成分是包括血蛋白多肽粉10份、胶原蛋白肽粉10份、红枣提取物10份、牛磺酸0.2份、三氯蔗糖0.02份、甜菊糖苷0.015份、赤藓糖醇0.1份、柠檬酸0.6份、果胶0.05份、食品用香精0.15份、人参粉0.1份、阿胶肽粉0.1份以及水68.7份。
相应的，还能以膏剂或粒状等形式存在，具体形态可根据实际需要进行选择。主要是用于改善肿瘤相关性贫血。
相比于现有技术，本发明的优点在于：
一、本方案的制剂提取动物血液尤其是提取草食性动物比如牛血中的血红蛋白，然后利用体外酶切技术，酶切成小分子肽的血红蛋白，吸收率高，安全性高无胃肠道刺激，吸收率高；同时也未发现有肠道蓄积现象出现；在大鼠实验下证实其有效性与安全性。对于贫血，尤其是肿瘤性疾病方面的贫血，相对生物利用度均比对照补铁药物高、血红蛋白再生效率、红细胞的恢复、体重的增加等皆取得很好效果，同时安全性比补铁药物高，不产生胃肠炎症和肠道刺激反应，可以提升NK细胞活性，长期增加巨噬细胞吞噬细菌能力，帮助肿瘤患者增强免疫力。
二、本方案的制剂红枣提取物中环磷酸腺苷(cAMP)含量丰富，据相关研究报道，健康人体内cAMP的含量与肿瘤患者的含量存在较大的差异，当癌细胞不断增值时，cAMP逐渐下降，而经药物治疗或放化疗治疗后，患者体内的cAMP含量又呈现出上升趋势，可见cAMP含量与肿瘤癌细胞的增长与减少之间具有一定的相关机制。当通过药物不断提高体内cAMP的含量，使其达到一定的水平，则可提高细胞对外部信息的反应敏锐度，达到扰乱细胞生长周期的目的，从而抑制肿瘤细胞生长和促进分化。肿瘤癌症患者多因缺乏营养而出现贫血症状，通过该制剂治疗，提高了患者体内的cAMP含量，可有效促进红细胞等造血细胞的分化。
三、本方案的血蛋白多肽粉在制备工艺上，采用特殊的原料处理方式：采用高压均质机进行高剪切细胞膜破碎，不仅有利于提高效率，还提高了蛋白含量；进一步结合物理变性方法，避光条件下50℃加热30min，去除了变性的杂蛋白，得到较纯的血红蛋白，使血红蛋白含量高达90％以上。它通过精密控制酶剪切程度，在产生肽的同时，又让血红素铁没有完全脱离肽的保护，继续保持2价水溶状态。具有更高的吸收效率，而且不会产生胃肠刺激，避免了现有铁剂产品服用后出现恶心、呕吐等胃肠道不适现象，解决了贫血人群的困扰。
四、本方案的制剂以血蛋白肽粉为核心配料，快速补充人体合成血红蛋白所需要的两大必须成分：蛋白和铁。铁的存在形式为2价血红素铁，与现有铁补充剂相比，具有吸收率高、无胃肠道刺激的特点，解决了贫血人群服用铁剂后产生胃肠道不适症状的问题。蛋白以肽的形式存在，解决了血红蛋白因本身球形结构导致难于消化利用的问题。本发明通过解决血红蛋白合成所需要的营养吸收问题，来提高人体血红蛋白合成的速度，改善贫血症状症状，效果已经经过动物实验和临床验证。
五、本方案的制剂在制备时在氮气保护环境中进行，获得的制剂不易有杂质，而且制剂采用复配被膜剂包衣可以支撑片剂方便携带，也能支撑液剂方便服用。
六、本方案的制剂应用后可以有效改善贫血症状，尤其是针对肿瘤患者相关性的贫血。
具体实施方式
实施例1：
100g血蛋白多肽粉、100g胶原蛋白肽粉、100g红枣提取液、2g牛磺酸、0.2g三氯蔗糖、0.15g甜菊糖苷、1g赤藓糖醇、6g柠檬酸、0.5g果胶、1.5g食品用香精、1g人参粉及1g阿胶肽粉混合搅拌，过筛，制粒后压片，加入复配被膜剂进行包衣，得片状的所述血蛋白多肽制剂。
实施例2：
100g血蛋白多肽粉、100g胶原蛋白肽粉、100g红枣提取液、2g牛磺酸、0.2g三氯蔗糖、0.15g甜菊糖苷、1g赤藓糖醇、6g柠檬酸、0.5g果胶、1.5g食品用香精、1g人参粉及1g阿胶肽粉混合搅拌，再加680.6g的水溶解定容5小时，过滤再进行UHT灭菌，灭菌2小时，后灌装封盖，灯检进行液位、异物监测，然后对瓶盖喷码，再进行二次灭菌，贴标后再次灯检自动装盒称重装箱入库。
实施例3：血蛋白多肽对缺铁性贫血动物实验
利用本发明制剂中的成分血蛋白多肽粉对IDA大鼠进行干预，将从血液指标、体态体重和蛋白营养三个方面进行研究，以研究血蛋白多肽对大鼠IDA的预防效果。
1实验材料与仪器
11实验材料
111实验动物
Wistar品系大鼠，4周龄，体重60±6g，雌雄各半，健康状况良好。
饲料配制过程中严格控制铁污染，盛放饲料的器具均经硝酸浸泡过夜，并使用去离子水反复冲洗干净。
12实验仪器
微量进样器(MC，上海安亭微量进样器厂)；不锈钢电热板(DB-Ⅲ，山东鄂城嘉德仪器厂)；马弗炉(天津市科学仪器设备厂)；自动血球计数仪(sysmxeF-820，日本希森美康公司)；原子吸收分光光度计(AA-6200型，日本岛津公司)；分析天平(A5003N型，上海分析电子天平厂)；离心机(LD4-2型，北京医用离心机厂)。
实验方法
21饲养条件：采用不锈钢鼠笼，饮用蒸馏水，白然采光，自由进食，室温22±2℃，湿度50-60％，不锈钢鼠笼，搪瓷食盆、玻璃给水器，为保证动物处于严格的无铁环境，所用器皿均经10％的硝酸溶液浸泡处理，实验中严防外来铁的污染。实验大鼠均自由采食和饮用蒸馏水，其它按试验动物饲养操作规程进行
22实验分组
将实验动物随机分为5组，每组10只。分别为正常对照组、硫酸亚铁组、血蛋白多肽高剂量组、血蛋白多肽低剂量组和缺铁模型对照组。
23动物模型制备及给药方法
正常对照组：喂饲基础饲料+灌胃10mL/kg去离子水；
缺铁模型对照组：喂饲低铁饲料+灌胃10mL/kg去离子水；
高剂量血蛋白多肽组：喂饲低铁饲料+灌胃200mg/kg·d血蛋白多肽，含铁20mg/kg·d；
低剂量血蛋白多肽组：喂饲低铁饲料+灌胃100mg/kg·d血蛋白多肽溶液，含铁10mg/kg·d；
硫酸亚铁组：喂饲低铁饲料+灌胃55mg/kg·d硫酸亚铁溶液，含铁20mg/kg·d；
各组大鼠均自由进食和饮用去离子水。
3检测目标
分别于造模前和5周后，尾静脉采血，每只大鼠血液备用两管，其中一管采0lmL左右血用抗凝处理后，备测血红蛋白、红细胞数；其余血液收集到50mL离心管中，于37℃水浴箱中保温30min，离心制备血清，冻存，备测血清铁(SI)。用血细胞自动分析仪测定Hb含量。同时取股动、静脉血测定血常规并使用全自动血生化分析仪测定血清总蛋白、白蛋白、球蛋白水平、血清铁(SI)铁采用原子吸收法进行测定。
4统计分析
采用SPSS190进行统计分析。所有指标均做单因素方差分析，并用LSD法进行组间比较；对非正态或方差不齐的数据采用秩和检验。
5实验结果
51血蛋白多肽对大鼠血红蛋白的影响
实验前，各组大鼠血红蛋白差异无统计学意义(P>005)；实验结束时，与对照组比较，缺铁模型组的血红蛋白含量均显著下降(P<005)；与缺铁模型组比较，高剂量血蛋白多肽组、低剂量血蛋白多肽组和硫酸亚铁组的血红蛋白浓度均显著增加(P<005)；与造模前血红蛋白浓度无显著性差异(P>005)，高剂量血蛋白多肽组与低剂量血蛋白多肽组和硫酸亚铁三组间无显著性差异(P>005)，详细结果见表1。
表1血蛋白多肽对大鼠血红蛋白的影响(n＝10，
Figure BDA0003332595860000091
)
组别 造模前血红蛋白/g/L 5周后血红蛋白/g/L
正常组 14021±625 14021±835
模型组 1424±428 724±522**<sup>□□</sup>
高剂量组 1392±569 1385±518<sup>▲▲</sup>
低剂量组 1383±725 1376±826<sup>▲▲</sup>
硫酸亚铁组 1405±125 1395±322<sup>▲▲</sup>
注：*与正常组比较P<005；**与正常组比较P<001
▲与模型组比较P<005；▲▲与模型组比较P<001
☆与硫酸亚铁组比较P<005；☆☆与高剂量组比较P<001
□与实验前相比比较P<005；□□与高剂量组比较P<001
52血蛋白多肽对大鼠红细胞数的影响
实验前，各组大鼠红细胞数差异无统计学意义(P>005)；实验结束时，与对照组比较，缺铁模型组的红细胞数含量均显著下降(P<005)；与缺铁模型组比较，高剂量血蛋白多肽组、低剂量血蛋白多肽组和硫酸亚铁组的红细胞数均显著增加(P<005)；与造模前红细胞数无显著性差异(P>005)，高剂量血蛋白多肽组、低剂量血蛋白多肽组和硫酸亚铁三组间无显著性差异(P>005)，结果见表2。
表2血蛋白多肽对大鼠红细胞数目的影响(×1012/L，n＝10，
Figure BDA0003332595860000101
)
组别 造模前红细胞数 5周后红细胞数
正常组 600±026 610±035
模型组 595±035 322±071**<sup>□□</sup>
高剂量组 605±016 612±018<sup>▲▲</sup>
低剂量组 599±053 598±026<sup>▲▲</sup>
硫酸亚铁组 610±085 623±022<sup>▲▲</sup>
注：*与正常组比较P<005；**与正常组比较P<001
▲与模型组比较P<005；▲▲与模型组比较P<001
☆与硫酸亚铁组比较P<005；☆☆与高剂量组比较P<001
□与实验前相比比较P<005；□□与高剂量组比较P<001
53血蛋白多肽对大鼠红细胞压积的影响
实验前，各组大鼠红细胞压积差异无统计学意义(P>005)；实验结束时，与对照组比较，缺铁模型组的红细胞压积含量均显著下降(P<005)；与缺铁模型组比较，高剂量血蛋白多肽组、低剂量血蛋白多肽组和硫酸亚铁组的红细胞压积均显著增加(P<005)；与造模前红细胞压积无显著性差异(P>005)，高剂量血蛋白多肽组、低剂量血蛋白多肽组和硫酸亚铁三组间无显著性差异(P>005)，结果见表3。
表3血蛋白多肽对大鼠红细胞压积的影响(n＝10，
Figure BDA0003332595860000111
)
组别 造模前红细胞压积/I/L 5周后红细胞压积/I/L
正常组 4291±325 4389±235
模型组 4240±328 3835±122**<sup>□□</sup>
高剂量组 4122±169 4250±218<sup>▲▲</sup>
低剂量组 4133±125 4160±126<sup>▲▲</sup>
硫酸亚铁组 4233±125 4259±222<sup>▲▲</sup>
注：*与正常组比较P<005；**与正常组比较P<001
▲与模型组比较P<005；▲▲与模型组比较P<001
☆与硫酸亚铁组比较P<005；☆☆与高剂量组比较P<001
□与实验前相比比较P<005；□□与高剂量组比较P<001
54血蛋白多肽对大鼠血清铁浓度的影响
实验前，各组大鼠血清铁浓度差异无统计学意义(P>005)；实验结束时，与对照组比较，缺铁模型组的血清铁浓度含量均显著下降(P<005)；与缺铁模型组比较，高剂量血蛋白多肽组、低剂量血蛋白多肽组和硫酸亚铁组的血清铁浓度均显著增加(P<005)；与造模前血清铁浓度比较(P>005)，高剂量血蛋白多肽组、低剂量血蛋白多肽组和硫酸亚铁三组间无显著性差异(P>005)，结果见表4。
表4血蛋白多肽对大鼠血清铁浓度的影响(n＝10，x±s
Figure BDA0003332595860000121
)
组别 造模前血清铁浓度μmol/L 5周后血清铁浓度μmol/L
正常组 3391±325 3389±235
模型组 3440±328 835±122**<sup>□□</sup>
高剂量组 3522±169 3250±218<sup>▲▲</sup>
低剂量组 3333±125 3160±126<sup>▲▲</sup>
硫酸亚铁组 3433±125 3259±222<sup>▲▲</sup>
注：*与正常组比较P<005；**与正常组比较P<001
▲与模型组比较P<005；▲▲与模型组比较P<001
☆与硫酸亚铁组比较P<005；☆☆与高剂量组比较P<001
□与实验前相比比较P<005；□□与高剂量组比较P<001
本研究通过贫血大鼠模型观察了血蛋白多肽对血清铁含量、血红蛋白、红细胞数和红细胞压积影响情况，并与硫酸亚铁对照。结果显示高剂量组血蛋白多肽和低剂量组血蛋白多肽均能显著提高血清铁含量、血红蛋白、红细胞数和红细胞压积(P<005)；与造模前无显著性差异(P>005)。且给药5周后高剂量血蛋白多肽组、低剂量血蛋白多肽组和硫酸亚铁三组间无显著性差异(P>005)。说明本发明所得血蛋白多肽对改善缺铁性贫血具有较好的疗效。
实施例4：
采用实施例1和2所制成的产品对小鼠进行饲养，连续30天。
观察大鼠状态，每周称体重1次。灌胃30天后，取血，分别用生物化学方法或ELISA方法检测铁代谢指标(采用南京建成公司试剂盒)；肝肾功能和血脂、血糖(使用医院检验科的全自动生化分析仪检测)。取胃、十二指肠、盲肠，组织切片，HE染色，观察是否有炎性反应等改变。取肝、肾，测量各脏器重量，计算各脏器的脏器体重比值(脏体比)。
结论：1、补充本发明实施例1-2的产品30天对普通日粮喂养的健康大鼠体重以及肝肾功能、肝肾大小、糖脂代谢均无明显影响。
2、补充本发明实施例1-2的产品30天对普通日粮喂养的健康大鼠铁代谢无明显影响。
3、补充本发明实施例1-2的产品30天，大鼠胃肠道黏膜无明显炎症变化。
实施例5：
在通过实施例4大鼠实验下验证该制剂的安全性后，给予肿瘤性贫血患者实施例2的制剂饮品，2次/天；50ml/次，连续服用15天。总共收案30例，男性20位女性10位。
表(1)常规治疗+液态制剂饮品服用后数据统计一
Figure BDA0003332595860000131
Figure BDA0003332595860000141
表(2)常规治疗后数据统计二
Figure BDA0003332595860000142
Figure BDA0003332595860000151
实验结果：表(1)常规治疗+服用本制剂液态饮品，平均约年龄53.9岁；服用15天有改善10例；服用15天无改善1例；服用不足15天有改善1例；没有第2份检验报告单，检测数据不符合条件不能纳入3例。
有效人群服用前红细胞计数(RBC)平均值约为2.83×1012/L；血红蛋白(HGB)平均数值为82.3g/L；血红细胞压积(HCT)平均值为24.17％；服用后红细胞计数(RBC)平均值约为3.28×1012/L；血红蛋白(HGB)平均数值为88.8g/L；血红细胞压积(HCT)平均值约为27.69％；红细胞计数(RBC)平均提升0.45×1012/L；血红蛋白(HGB)平均提升6.5g/L；血红细胞压积(HCT)平均提升3.52％。
表(2)常规治疗，平均年龄59岁；服用15天有改善11例；服用15天无改善2例；没有第2份检验报告单，检测数据不符合条件不能纳入2例；
有效人群服用前红细胞计数(RBC)平均值约为2.68×1012/L；血红蛋白(HGB)平均数值约为81.38g/L；血红细胞压积(HCT)平均值约为24.58％；服用后红细胞计数(RBC)平均值约为2.94×1012/L；血红蛋白(HGB)平均数值为85.69g/L；血红细胞压积(HCT)平均值约为25.54％；红细胞计数(RBC)平均提升0.26×1012/L；血红蛋白(HGB)平均提升4.31g/L；血红细胞压积(HCT)平均提升0.96％。表(2)相比于表(1)，红细胞计数(RBC)、血红蛋白(HGB)和血红细胞压积(HCT)提升缓慢，吸收率低。
结论：本发明的补血剂，提取牛血中的血红蛋白利用专利体外酶切技术，酶切成小分子肽的血红蛋白，具有吸收率高；不蓄积；安全性高无胃肠道刺激，在大鼠实验下证实其有效性与安全性。在本次的试验结果也证实其有效性，所以对于肿瘤性患者人群是能有效改善贫血指标，对于红细胞生成效果也相当显著。

Claims (10)

1.一种改善贫血症状的制剂，其特征在于：包括重量份数计的以下各组分：血蛋白多肽粉3-10份、胶原蛋白肽粉3-10份、红枣提取物3-10份、牛磺酸0.1-0.3份、三氯蔗糖0.01-0.04份、甜菊糖苷0.015-0.025份、赤藓糖醇0.1-0.3份、柠檬酸0.6-0.8份、果胶0.05-0.15份、食品用香精0.15-0.18份、人参粉0.1-0.2份及阿胶肽粉0.1-0.2份。
2.根据权利要求1所述的一种改善贫血症状的制剂，其特征在于：所述血蛋白多肽粉富含血红素铁。
3.根据权利要求1所述的一种改善贫血症状的制剂，其特征在于：所述血蛋白多肽粉是在氮气保护环境下，通过在动物新鲜血液中先加入抗凝剂，再离心弃血浆，收集血红细胞破壁加热、酶解、超滤、浓缩及干燥获得。
4.根据权利要求3所述的一种改善贫血症状的制剂，其特征在于：所述酶解的方法为以料液比1:10~20加入纯化水，通过筛选按固含量3%先后加入胰蛋白酶和风味蛋白酶，酶解75～85 h, 煮沸04～06 h灭酶；进一步的，所述酶解时间为8 h，先加入胰蛋白酶维持前6 h在温度45℃ pH=75的条件下酶解，再加入风味蛋白酶维持后2h在温度55℃ pH=7的条件下酶解。
5.根据权利要求3所述的一种改善贫血症状的制剂，其特征在于：所述浓缩时将酶解后的酶解液浓度浓缩至30～50%；进一步的，所述干燥条件为进风温度160～180℃，出风温度80～100℃。
6.根据权利要求1所述的一种改善贫血症状的制剂，其特征在于：所述血蛋白多肽粉的制备包括以下步骤：
（1）在氮气保护环境下，新鲜动物血液从屠宰场收集后，迅速加入柠檬酸钠抗凝，离心弃血浆，收集血红细胞；采用高压均质机进行高剪切细胞膜破碎；避光条件下50℃ 加热30min，得到血红蛋白；
（2）酶解：以料液比1:10～20加入步骤（1）的血红蛋白和纯化水，通过筛选按固含量3%先加入胰蛋白酶维持前6 h在温度45℃ pH=75的条件下酶解，再加入风味蛋白酶维持后2h在温度55℃ pH=7的条件下酶解，煮沸05 h灭酶；
（3）超滤：步骤（2）后，利用超滤膜截留分子量为6000-30000；
（4）浓缩：步骤（3）后，将酶解液进行单效浓缩；
（5）干燥：步骤（4）后，采用喷雾干燥法，制得所述血蛋白多肽粉；。
7.根据权利要求6所述的一种改善贫血症状的制剂，其特征在于：所述动物血液为牛血。
8.根据权利要求1-7任一所述的一种改善贫血症状的制剂的制备方法，其特征在于：将血蛋白多肽粉、胶原蛋白肽粉、红枣提取物、牛磺酸、三氯蔗糖、甜菊糖苷、赤藓糖醇、柠檬酸、果胶、食品用香精、人参粉及阿胶肽粉混合搅拌过筛，制粒后压片，加入复配被膜剂进行包衣，包装即成片状的所述血蛋白多肽制剂。
9.根据权利要求1-7任一所述的一种改善贫血症状的制剂，其特征在于：以重量份数计，所述制剂包括血蛋白多肽粉10份、胶原蛋白肽粉10份、红枣提取物10份、牛磺酸0.2份、三氯蔗糖0.02份、甜菊糖苷0.015份、赤藓糖醇0.1份、柠檬酸0.6份、果胶0.05份、食品用香精0.15份、人参粉0.1份、阿胶肽粉0.1份以及水68.7份。
10.根据权利要求9所述的一种改善贫血症状的制剂的制备方法，其特征在于：将血蛋白多肽粉、胶原蛋白肽粉、红枣提取物、牛磺酸、三氯蔗糖、甜菊糖苷、赤藓糖醇、柠檬酸、果胶、食品用香精、人参粉及阿胶肽粉混合搅拌，加水溶解定容，过滤后再灭菌灌装即得液体状可饮用的所述血蛋白多肽制剂。
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