CN113855609B - 糯米发酵提取物及其抗湿疹应用 - Google Patents

Abstract

本发明提供了糯米发酵提取物，包含糯米发酵提取物的组合物，以及糯米发酵提取物在抗炎、抗敏、抗刺激和/或止痒方面的应用。所述包含糯米发酵提取物的组合物可以是药品、保健食品或皮肤外用剂。所述糯米发酵提取物通过包括以下步骤的方法制备：(a)将糯米粉碎，蒸煮，经糖化后加入酵母菌和麦曲进行酒醪发酵，得到酒醪；(b)加入麦麸和稻壳，搅拌均匀，接入固态种子醅和复合微生物菌种进行醋醅固态分层发酵，得到醋醅；(c)取醋醅底部自然渗出的醋卤，得到醋卤；(d)醋卤经树脂分离洗脱，得到醋卤提取物。

Description

糯米发酵提取物及其抗湿疹应用

技术领域

本发明涉及糯米发酵提取物、其制备方法以及该提取物在药品、保健食品或皮肤外用剂中的应用。

背景技术

据中华医学会皮肤性病学分会免疫学组《湿疹诊疗指南(2011年)》中华皮肤科杂志,2011,44(1):5-6提出，湿疹是由多种内外因素引起的一种具有明显渗出倾向的炎症性皮肤病，伴有明显疹痒，易复发，严重影响患者的生活质量。湿疹是皮肤科常见病，我国一般人群患病率约为7.5％，美国为10.7％。其发病机制被认为是机体内部因素如免疫功能异常、皮肤屏障功能障碍等基础上，由多种内外因素综合作用的结果。免疫性机制如变态反应和非免疫性机制如皮肤刺激均参与发病过程。外用治疗以糖皮质激素制剂抗敏抗炎为主，但存在药物不良反应风险。因此，从皮肤护肤领域提供更安全的能够缓解湿疹症状的长效护理产品，不失为是一种好的选择。

胸腺基质淋巴细胞生成素(thymic stromal lymphopoietin，TSLP)是一种具有四个a-螺旋束结构的白介素(interleukin，IL-7样)炎症细胞因子。研究表明，TSLP可以通过活化树突状细胞、2型先天淋巴细胞等募集辅助T细胞(T helper，Th)，增强Th2介导的超敏反应，并有助于产生表达TSLP受体(TSLP receptor，TSLPR)为特征的记忆Th2细胞亚群。在哮喘、特应性皮炎、变态反应性结膜炎等变态反应性疾病中发挥重要作用。近年来研究逐渐发现，TSLP还可作用于各种类型的免疫细胞及肿瘤细胞，参与多种炎症性疾病、自身免疫性疾病及肿瘤性疾病的发生发展。玫瑰痤疮患者皮脂腺丰富的皮肤中TSLP高表达；寻常型银屑病患者皮损和血清中TSLP水平明显增高；多种嗜酸性皮病皮损组织标本中TSLP高表达。

特应性皮炎(atopic dermatitis，AD)是一种与遗传过敏素质有关的慢性复发性、炎症性、瘙痒性皮肤病，以湿疹样皮炎和剧烈瘙痒为主要特征。目前认为遗传易感性、免疫炎症反应、环境因素、皮肤屏障功能障碍及皮肤表面微生态失调等因素均与特应性皮炎的发病密切相关。有研究表明，TSLP在AD患者皮损中的表达高于非皮损区及健康皮肤，且与病情严重程度和表皮屏障受损程度有关。

周昕等(《胸腺基质淋巴细胞生成素在炎症性皮肤病中的作用及相关机制研究进展》，皮肤性病诊疗学杂志，2021，28(01):73-77)研究了湿疹是由多种内外因素引起的一种具有明显渗出倾向的炎症性、瘙痒性皮肤病。研究发现湿疹患者血清中TSLP表达水平与EASI(湿疹面积及严重程度评分)、瘙痒强度、皮损面积呈正相关关系。TSLP被认为可能是一种新的致痒因子，可能在瘙痒的发生机制中具有重要作用。

由此可见，TSLP在包括特异性皮炎、湿疹多种炎症性皮肤病中均扮演着重要的角色，有望成为潜在的治疗靶点。

杨超等(《丝聚蛋白与皮肤病相关性的研究进展》实用皮肤病学杂志，2014，7(02):115-118)研究了丝聚蛋白(filaggrin，FLG)基因是一群与表皮分化相关联的基因簇，其与皮肤病的相关性受到广泛关注。FLG基因位于1q21的表皮分化复合物之内，由3个外显子组成，第1个外显子为非编码序列，第2个外显子编码S-100钙结合区域，第3个外显子长约12.7kbp，由10～12个不等的重复序列组成，是编码FLG的主要结构。同时FLG基因还有两个内含子，一个在5'非编码区，长约9.6kbp，另一个位于两个“EF手(钙离子结合区)”之间，长约570bp，与其他类S-100家族一致，这种钙离子结合区域表明FLG需结合钙离子，才能发挥其某些功能，而且钙离子结合区在透明角质颗粒的形成和(或)随后丝聚蛋白原水解为单个FLG单体中具有重要作用。丝聚蛋白原丝聚蛋白原是由FLG基因编码的一种高度不溶于水、富含组氨酸的蛋白质，其相对分子质量略>400000。FLG丝聚蛋白原经过去磷酸化和蛋白水解形成FLG单体(37000)，FLG单体则通过连接角蛋白1、角蛋白10以及其他角蛋白，使得KC骨架收缩，促使其坍塌，变得扁平，最后在角质层的最外层形成鳞屑。FLG单体促进了KC角质包膜的形成，在表皮的分化过程中，它将替代KC的细胞质，形成一个屏障，防止表皮水分的丢失和外界过敏原及微生物的入侵。丝聚蛋白在表皮层降解形成氨基酸、反式尿刊酸以及吡咯烷酮-5-羧基酸等，起到表皮保水和维持酸性环境的作用。研究表明特应性皮炎、湿疹、接触性皮炎、鱼鳞病等，与FLG基因的功能下降或缺失具有很强关联性。

食醋酿造工艺不同，风味各有特点，以四大名醋为代表，分别是镇江香醋、山西老陈醋、四川保宁醋、福建永春老醋。

镇江香醋以糯米(Oryza sativa L.var.glutinosa Mats.)为发酵底物，以固态分层发酵工艺为特色，采用复式糖化、酒精发酵、固态分层醋酸发酵、套淋、陈酿等大小40道工序，历史60多天酿制而成，酸鲜、微甜。酸而不涩、香而微甜、色浓味鲜、愈存愈醇、营养丰富。

山西老陈醋以高梁(Sorghum vulgare Pers.)为发酵原料，以熏醅工艺和夏伏晒冬抽冰陈酿为特色，经蒸、酵、熏、淋、晒等过程酿就而成，色泽呈酱红色，食之绵、酸、香、甜、鲜，色泽黑紫、酸味醇厚。

四川保宁醋以“药醋”著称，发酵原料为小麦(Triticum aestivum L.)、玉米、大米，以加入60余味中药制曲为特点，采用糖化、酒化、醋化同池发酵，9次耖糟的独特工艺酿制而成。色黑褐(红褐色)、味幽香、酸柔和、体澄清，含有中草药香味。

福建永春老醋以糯米(Oryza sativa L.var.glutinosa Mats.)、红曲(Monascuspurpureus Went.)、芝麻(Sesamum indicum)为发酵原料，以液态酿造工艺为特点，采用原料多次添加，液态发酵，多年陈酿而成。气味香浓，香甜味鲜。色泽棕黑、酸而不涩、香中有甜、风味独特、久藏不腐。

镇江恒顺香醋从1850年开始生产，它以优质糯米为主要原料，经酿酒、醋酸发酵、淋醋3大过程，40多道工序，历时60多天酿制而成，具有“色、香、酸、醇、浓”5大特色，素有“酸而不涩，香而微甜，色浓味鲜，愈存愈香”之特点。2006年镇江恒顺香醋酿制技艺入选国家级非物质文化遗产。

徐清萍等(《镇江香醋抗氧化活性成分来源分析》食品与发酵工业，2005(03)：33-36)研究发现，镇江香醋在酿造的3阶段中，醋卤的总酚、总黄酮和清除DPPH自由基的作用最强，其次为成品醋阶段，酒样过程含量最低，作用最弱。该文献虽发现在整个镇江香醋酿造过程中，中间体醋卤的总多酚和总黄酮含量最高，清除DPPH自由基的作用最强。但该文献并未进一步对醋卤做深入的工艺研究和美容功效研究，且由于醋卤含有大量有机酸类成分，所以难以在日化护肤等产品中应用。

徐清萍等(《镇江香醋不同极性组分抗氧化性比较》中国酿造,2007(06):18-20》)研究还发现，镇江香醋经过不同极性溶剂萃取得到的提取物具有清除DPPH自由基的作用，其中经乙酸乙酯萃取后的乙醇沉淀上清液浓缩物经无水丙酮、无水乙醇处理后分离得到的镇江香醋提取物V4和乙醇沉淀物中的水溶性组分V5，具有较高的自由基清除活性和总酚含量。V4和V5在终浓度为150ug/mL时的清除率分别达到了56.31％、59.42％，在250ug/mL时的清除率均达到71.44％。V4和V5的总酚含量分别为53.70ug/mg、42.89ug/mg。该文献采用有机溶剂提取法，从镇江香醋中提取并验证了V4、V5两个部位具有较好的清除DPPH自由基作用，而且总酚含量较高。但由于有机溶剂毒性较大，不适合工业化和在药品、保健食品或日用化学品(皮肤外用剂)中应用。

现有技术中关于食醋和镇江香醋的文献都明确提到食醋和镇江香醋含有总酚、总黄酮等成分，并且发现这些成分具有清除DPPH自由基等抗氧化作用。但以上文献均未提到食醋和镇江香醋是否具有除抗氧化以外的其他功效机理，并缺乏食醋和镇江香醋在其他功效维度的研究和探索。

本发明意外地发现，糯米发酵提取物具有抑制TSLP的作用，动物止痒实验也证实了其具有良好的止痒作用，并同时发现其具有提高丝聚蛋白(FLG，皮肤保湿和屏障相关)基因mRNA表达的作用。本发明的糯米发酵提取物可作为功效添加剂用于药品，保健品和皮肤护理的皮肤外用剂中，能够显著改善特异性皮炎/湿疹皮肤问题。

发明内容

一方面，本发明提供了糯米发酵提取物，以重量计，所述糯米发酵提取物中总多酚含量至少≥6.34％，总黄酮含量至少≥2.28％。

另一方面，本发明提供了糯米发酵提取物在抗炎、抗敏、抗刺激和/或止痒方面的应用。在优选的实施方式中，所述抗炎、抗敏、抗刺激和/或止痒作用通过抑制胸腺基质淋巴生成素TSLP实现。

另一方面，本发明提供了糯米发酵提取物在缓解湿疹和/或改善皮肤屏障方面的应用。在优选的实施方式中，所述缓解湿疹和/或改善皮肤屏障是通过抑制胸腺基质淋巴生成素TSLP和/或促进丝聚蛋白FLG基因表达实现。

又一方面，本发明提供了包含糯米发酵提取物的组合物，其中所述组合物可以是药品、保健食品或皮肤外用剂。在优选的实施方式中，所述组合物用于抗炎、抗敏、抗刺激和/或止痒。在优选的实施方式中，所述组合物用于缓解湿疹和/或改善皮肤屏障。在优选的实施方式中，所述组合物用作皮肤外用剂时，糯米发酵提取物的用量为0.001-100重量％。在优选的实施方式中，所述组合物用作药品时，糯米发酵提取物的用量至少≥0.01重量％。在优选的实施方式中，所述组合物用作保健食品时，糯米发酵提取物的用量至少≥1重量％。

在优选的实施方式中，本发明的糯米发酵提取物通过包括以下步骤的方法制备：

(a)将糯米粉碎，蒸煮，经糖化后加入酵母菌和麦曲进行酒醪发酵，得到酒醪；

(b)加入麦麸和稻壳，搅拌均匀，接入固态种子醅和复合微生物菌种进行醋醅固态分层发酵，得到醋醅；

(c)取醋醅底部自然渗出的醋卤，得到醋卤；

(d)醋卤经树脂分离洗脱，得到醋卤提取物。

在优选的实施方式中，所述步骤(d)采用的树脂选自以下：非极性大孔树脂、弱极性大孔树脂、极性大孔树脂中的任一种。在优选的实施方式中，所述非极性大孔树脂是D101树脂，所述弱极性大孔树脂是AB-8树脂、所述极性大孔树脂是DM301树脂。在优选的实施方式中，所述步骤(d)采用水或乙醇洗脱。在优选的实施方式中，所述步骤(d)采用50-70体积％的乙醇洗脱。

附图简要说明

图1显示了具体的醋醪工艺过程。

图2显示了具体的醋醅工艺过程。

图3显示了具体的醋卤工艺过程。

图4显示了具体的醋卤提取物的工艺过程。

图5显示了炎症因子TSLP检测的结果。

图6显示了FLG检测结果。

图7显示了醋卤提取物对磷酸组织胺致痒反应的影响。

图8显示了含醋卤提取物的基质配方对磷酸组织胺致痒反应的影响。

具体实施方式

本发明是以镇江香醋等食醋的制造工艺为基础，从中获得醋卤，并进一步通过大孔吸附树脂技术对醋卤进行精制获得了一种醋卤提取物(即酵母菌/糯米发酵产物滤液)。

本发明涉及糯米发酵提取物及其制备与应用，在研究中发现了其具有TSLP分泌抑制和促进丝聚蛋白FLG基因表达的作用，同时在动物模型上表现出了显著的止痒作用。因此，糯米发酵提取物可用于缓解过敏性相关疾病和/或用于皮肤护理。糯米发酵提取物可以作为功效添加剂，用于制备药品、保健食品或皮肤外用剂，以起到抗皮肤衰老、缓解湿疹、改善皮肤屏障等作用。而且，本发明的糯米发酵提取物可作为功效添加剂用于药品，保健品和皮肤护理的皮肤外用剂中，能够显著改善皮肤屏障和/或缓解湿疹的皮肤问题。

为了提供更简明的描述，本文给出的一些数量表述没有用术语“约”修饰。应当理解，无论是否明确地使用了术语“约”，本文所给出的每个量都意在指代实际的给定值，并且还意在指代由本领域的普通技术人员可合理推测出的这些给定值的近似值，包括这些给定值的由实验和/或测量条件所引起的近似值。

为了提供更简洁的描述，本文中一些数量表述被叙述为约X量至约Y量的范围。应当理解，当叙述范围时，该范围并不限制于所叙述的上下界限，而应包括约X量至约Y量的整个范围或它们之间的任何量。

糯米发酵提取物

本发明意外地发现，糯米发酵提取物具有抑制TSLP的作用，动物止痒实验也证实了其具有良好的止痒作用，并同时发现其具有提高丝聚蛋白(FLG，皮肤保湿和屏障相关)基因mRNA表达的作用。本发明的糯米发酵提取物可作为功效添加剂用于药品，保健品和皮肤护理的皮肤外用剂中，能够显著改善特异性皮炎/湿疹皮肤问题。

酒醪：

选用优质糯米粉碎、蒸煮，经液化、糖化后加入酵母菌和麦曲进行酒醪发酵(例如，发酵7-10天)。取酒醪即得。本发明中酒醪，又名酵母菌/大米发酵产物初级滤液，又名含有糯米的初级发酵物。图1显示了具体的醋醪工艺过程。

醋醅又名醋醅醅卤：

选用优质糯米粉碎、蒸煮，经液化、糖化后加入酵母菌和麦曲进行酒醪发酵(例如，发酵7-10天)。随后加入麦麸和稻壳，搅拌均匀。接入传统的固态种子醅和复合微生物菌种进行醋醅固态分层发酵(例如，发酵21天)。醋醅发酵结束后，取醋醅即得。本发明醋醅，又名酵母菌/大米发酵产物中级滤液，又名含有糯米的中级发酵物。图2显示了具体的醋醅工艺过程。

醋卤：

选用优质糯米粉碎、蒸煮，经液化、糖化后加入酵母菌和麦曲进行酒醪发酵(例如，发酵7-10天)。随后加入麦麸和稻壳，搅拌均匀。接入传统的固态种子醅和复合微生物菌种进行醋醅固态分层发酵(例如，发酵21天)。醋醅发酵结束后，取醋醅底部自然渗出的醋卤，澄清过滤即得。本发明醋卤，又名酵母菌/大米发酵产物滤液，又名含有糯米的发酵物。图3显示了具体的醋卤工艺过程。

醋卤提取物：

选用优质糯米粉碎、蒸煮，经液化、糖化后加入酵母菌和麦曲进行酒醪发酵(例如，发酵7-10天)。随后加入麦麸和稻壳，搅拌均匀。接入传统的固态种子醅和复合微生物菌种进行醋醅固态分层发酵(例如，发酵21天)。醋醅发酵结束后，取醋醅底部自然渗出的醋卤，澄清过滤即得醋卤。任选地，可以离心去除大颗粒杂质。例如，可以6000rpm/分钟离心10分钟以去除大颗粒杂质。

然后，将醋卤通过树脂洗脱分离，洗脱液经浓缩、干燥后得到醋卤提取物。在本发明的一些实施方式中，树脂洗脱步骤采用的树脂选自以下：非极性大孔树脂、弱极性大孔树脂、极性大孔树脂中的任一种。本申请中可以采用的树脂包括但不限于：非极性树脂，D-101(南开合成科技)，XAD2(罗门哈斯)、HP-20(三菱化学)，HZ-802(华昌聚合物公司)；弱极性树脂，AB-8(南开合成科技)，DM-130(天津海光)、XAD7(罗门哈斯)；极性树脂，DM-301(天津海光)、NKA-9(南开合成科技)，HZ-806(华昌聚合物公司)。

在本发明的一些实施方式中，采用D101树脂洗脱分离。在本发明的一些实施方式中，采用AB-8树脂洗脱分离。在本发明的一些实施方式中，采用DM301树脂洗脱分离。在本发明的一些实施方式中，采用水进行洗脱。在本发明的一些实施方式中，采用乙醇进行洗脱。在本发明的一些实施方式中，可使用体积浓度10％～100％的乙醇，优选使用30％～95％的乙醇，更优选使用30％～70％，最优选使用50％的乙醇。

本发明醋卤提取物，可以为酒醪提取物，醋醅提取物，醋醅醅卤提取物，又名稻(ORYZA SATIVA)糟提取物或稻米发酵提取物，又名酵母菌/大米发酵产物滤液或酵母菌/大米发酵产物提取物，又名糯米发酵物提取物。其中糯米(Oryza sativa L.var.glutinosaMatsum.)别名稻米(《别录》)，江米(《本草原始》)，元米(《随息居饮食谱》)，来源为禾本科植物稻(糯稻)(Oryza sativa L.var.glutinosa Mats.)的种仁或种子。图4显示了具体的醋卤提取物的工艺过程。

本发明酒醪、醋醅、醋卤除了实验室自制外，还可以从恒顺醋业购买获得。

本发明糯米发酵提取物对皮肤的有益作用有，抗敏、脱敏、舒敏、抗炎、消炎等皮肤安全舒缓作用，能有效抗敏抗炎抗湿疹止痒。

任选地，本发明醋卤提取物可以用粮食和/或粮食来源的壳体为发酵底物获得，包括但限于如糯米(Oryza sativa L.var.glutinosa Matsum.)、高粱(Sorghom vulgarePers.)、藜麦(Chenopodium quinoa Willd.)、大麦(Hordeum vulgare L.)、小麦(Triticumaestivum L.)、大米(粳米)(Oryza sativa L.)、小米(粟米)(Setaria italica(L.)Beauv.)或(Setaria italica(L.)Beauv.var.germanica(Mill.)Schred)、玉米(Zea maysL.)、芝麻(Sesamum indicum L.)、豌豆(Pisum sativum L.)、麦麸、稻壳或它们的组合。在本发明的其他实施方式中，还可以辅以中药，包括但不限于人参(Panax ginsengC.A.Mey.)、玫瑰花(Rosa rugose Thunb.)、丹参(Salvia miltiorrhiza Bge.)、铁皮石斛(Dendrobium officinale Kimura et Migo)、肉苁蓉(Cistanche deserticola Y.C.Ma)或管花肉苁蓉(Cistanche tubulosa(Schenk)Wight)、牡丹花(Paeonia suffruticosaAndr.)、丁香花(Eugenia caryophyllata Thunb.)等。通过液态发酵和/或固态发酵而制得。

含糯米发酵提取物的药品、保健食品或皮肤外用剂

本发明的糯米发酵提取物可以作为功效添加剂应用于药品、保健食品或皮肤外用剂中。

在一些实施方式中，所述药品选自：片剂、胶囊、乳剂、混悬剂、粉末剂、颗粒剂、溶液剂、以及本领域已知的各种药品剂型。根据剂型的不同类型添加不同的用量。

保健食品亦称功能性食品。它具有调节人体功能的作用，但不以治疗疾病为目的，适于特定人群食用。在一些实施方式中，所述保健食品可以是粉末剂型。

在一些实施方式中，所述皮肤外用剂选自：洁面乳、化妆水、乳液、膏霜、啫喱、面膜。根据制剂的不同类型添加不同的用量。

所述皮肤外用剂是通常用于皮肤外部的所有成分的统称概念，例如可以是化妆品组合物。所述化妆品组合物中可以是基础化妆品、面部妆容化妆品、身体用化妆品、头发护理用化妆品等，对其剂型无特殊限制，根据不同目的可合理选择。所述化妆品组合物中根据剂型和目的的不同还含有不同的化妆品学层面允许的介质或基质赋形剂。

皮肤外用剂含有皮肤学上可接受的载体或媒介物(例如，洗液、面霜、软膏、清洁剂等等)。本领域普通技术人员能够根据本领域公知常识，选择能够以上文所述的浓度溶解或分散这些组分的载体。当使用一种载体时，该载体应当不会导致糯米发酵提取物的灭活，而且在使用时不会在皮肤上带来任何相反的作用。

本领域普通技术人员能够根据公知常识和它们以最适用于处理时活性组分的浓度而溶解或分散在活性组分中的能力来选择适宜的载体，所述载体例如包括水、醇类、油等。

本发明的皮肤外用剂可以是局部施用产品的形式，其能够从外部施用在皮肤上，并能够以本领域公知的那些普通技术制备。载体可以具有各种实际的形式，例如面霜，敷料，凝胶，洗液，软膏或者液体，其包括敷用和清洗掉的组合物，以及用本领域公知的方法将它们加入到例如干的或湿的涂抹物，水凝胶基质，或粘性(或非粘性)贴片的材料载体中。优选地，载体是一种凝胶或增加水分的洗剂，或者以干或湿的形式的涂抹物。

典型的载体包括包含水和/或醇和润肤剂的乳剂，其中润肤剂是例如烃的油和蜡，硅油，透明质酸，植物、动物或海洋生物的脂肪或油，甘油酯衍生物，脂肪酸、或脂肪酸酯或醇或醇醚，羊毛脂及其衍生物，多元醇或酯，蜡酯，甾醇，磷脂等等，一般还有乳化剂(非离子的，阳离子的或阴离子的)，尽管一些润肤剂本身具有乳化特性。另外，可以利用其组分的不同比例和/或通过掺入例如树胶或其他形式的亲水胶体的增稠剂将这些相同组分配制成面霜、凝胶、或固体棒。

本发明的皮肤外用剂可以包含在皮肤护理组合物中通常能找到的附加组分，例如润肤剂、皮肤调节剂、乳化剂、防腐剂、抗氧化剂、香料、螯合剂等，只要它们与皮肤外用剂中其他的组分在物理上和化学上相容、且不影响本发明的糯米发酵提取物的效果即可。

在本发明的皮肤外用剂的一些实施方式中，可使用一种或多种防腐剂。适宜的防腐剂包括对羟基苯乙酮、C1-C4对羟基苯甲酸烷基酯和苯氧基乙醇。基于组合物总重量，防腐剂的用量为大约0.5至大约2重量％，优选大约0.5至1重量％。

在本发明的皮肤外用剂的一个实例中，可使用一种或多种抗氧化剂。适宜的抗氧化剂包括丁化羟基甲苯(BHT)、抗坏血酸棕榈酸酯(BHA)、丁羟茴醚、苯基-α-萘基胺、氢醌、没食子丙酯、去甲二氢愈创木酸、维生素E或维生素E的衍生物、维生素C及其衍生物、泛酸钙、绿茶提取物和混合的多酚，以及上面所述的物质的混合物。所使用的抗氧化剂是组合物总重量的大约0.02至0.5重量％，更最优选的是从大约0.002至0.1重量％的用量范围。

在本发明的皮肤外用剂的一个实例中，可使用一种或多种润肤剂，通过其保持在皮肤表面上或在角质层中的能力，起到润滑剂的作用，以减少剥落，改善皮肤的外观。典型的润肤剂包括脂肪酯、脂肪醇、矿物油、聚醚硅氧烷共聚物等等。适宜的润肤剂的例子非限定地包括，聚丙二醇(“PPG”)-15十八烷基醚，PPG-10十六烷基醚，Steareth-10，Oleth-8，PPG－4十二烷基醚，维生素E醋酸酯，羊毛脂，鲸蜡醇，鲸蜡硬脂醇乙基己酸酯，十六十八醇，甘油硬脂酸酯，羟基硬脂酸辛脂，二甲基聚硅氧烷，以及它们的组合。鲸蜡醇，鲸蜡硬脂醇乙基己酸酯，十六十八醇，甘油硬脂酸酯以及它们的组合是优选的。使用时，润肤剂是基于组合物总重量的大约0.1至大约30重量％，优选大约1至大约30重量％的用量范围。

在本发明的皮肤外用剂的一个实例中，可使用本发明的糯米发酵提取物以外的一种或多种保湿剂。保湿剂也称为湿润剂，其有助于提高润肤剂的效果，减少剥落，刺激组成的鳞皮的去除和提高皮肤触感。可使用多元醇作为保湿剂，包括但并不限于，甘油，聚亚烷基二醇，亚烷基多元醇及其衍生物，包含丁二醇、丙二醇、双丙二醇，聚丙三醇，聚乙二醇及其衍生物，山梨醇，羟丙基山梨醇，己二醇，1,3－二丁二醇，1,2,6-己三醇，乙氧基化甘油，丙氧基化甘油，以及它们的组合。使用时，基于组合物的总重量，保湿剂的用量为大约0.1至大约20重量％，优选是大约1至大约15重量％。

在本发明的皮肤外用剂的一个实例中，可使用一种或多种乳化剂。乳化剂可在有效稳定量的范围内使用。优选地，在组合物总重量的基础上，以大约1.0至大约10.0重量％，更优选的是大约3.0至大约6.0重量％的用量来使用乳化剂。可以使用任何与组合物中的组分相容的乳化剂。适宜的乳化剂包括硬脂酸，鲸蜡醇，甘油硬脂酸酯，卵磷脂，十八烷醇，Steareth-2，Steareth-20，丙烯酸(酯)类/C10-30烷醇丙烯酸酯交联聚合物，以及它们的组合。

在本发明的皮肤外用剂的一个实例中，可使用一种或多种pH调节剂。本发明的皮肤外用剂中有益的pH调节剂包括氨丁三醇。使用时，基于组合物的总重量pH调节剂的用量为大约0.1至大约2重量％，优选是大约0.1至大约1重量％。

在本发明的一个具体实施方式中，皮肤外用剂包含丙烯酸(酯)类/C10-30烷醇丙烯酸酯交联聚合物、甘油、对羟基苯乙酮、甘油硬脂酸酯和卵磷脂、十六/十八醇、鲸蜡硬脂醇乙基己酸酯、氨丁三醇或它们的组合。

在本发明的一些实施方式中，皮肤外用剂中糯米发酵提取物的用量为0.001％-20％(w/w)，优选的重量百分比为0.01％-20％(w/w)，更优选的重量百分比为0.01％-10％(w/w)，最优选的重量百分比为0.1％-5％(w/w)。

在本发明的一个具体实施方式中，皮肤外用剂中糯米发酵提取物的用量为0.3-10重量％。在本发明的一个具体实施方式中，皮肤外用剂中糯米发酵提取物的用量为0.3-5重量％。

实施例

下面结合具体实施例，以进一步阐述本发明。有必要在此指出的是，实施例只用于对本发明进行进一步的说明，不能理解为对本发明保护范围的限制，该领域的技术熟练人员可以根据上述本发明的内容做出一些非本质的改进和调整。下列实施例中未注明具体条件的试验方法，通常按照常规条件，或按照制造厂商所建议的条件。除非另有说明，所有的百分比和份数按重量计。

实施例中的干燥可以是常规冷冻干燥或者喷雾干燥。冷冻干燥仪(北京松源LGJ-12)，工艺条件：-60度预冻3h，-15度真空度60Pa干燥8h，-5度真空度60Pa干燥6h，25度真空度60Pa干燥3h。喷雾干燥仪(buchi B290)，工艺条件：进口温度140度，出口温度85度，进气量700L/h，进料速度10％。

本发明中所用原料来源如下：

糯米，江苏恒顺醋业有限公司友情提供；

糯稻，江苏恒顺醋业有限公司友情提供；

淀粉酶，江苏恒顺醋业有限公司友情提供；

糖化酶，江苏恒顺醋业有限公司友情提供；

酵母菌，江苏恒顺醋业有限公司友情提供；

麦曲，江苏恒顺醋业有限公司友情提供；

麦麸，江苏恒顺醋业有限公司友情提供；

稻壳，江苏恒顺醋业有限公司友情提供；

固态种子醅，江苏恒顺醋业有限公司友情提供；

复合微生物菌种，江苏恒顺醋业有限公司友情提供；

实施例1醋卤，实验室自制；

实施例2-6醋卤，江苏恒顺醋业股份有限公司友情提供。

实施例1：醋卤提取物的制备

选用优质糯米或糯稻粉碎成粗颗粒(摇摆式高速磨粉机DFY-1000D(大德)，过8目筛)、加淀粉酶水蒸汽蒸煮60-120分钟，加入糖化酶进行糖化反应60℃40-60分钟糖化后，降温至30℃，加入活化酵母菌(2％-15％)和麦曲进行发酵7-10天得到酒醪。随后加入麦麸(30-65wt％)和稻壳，搅拌均匀。接入传统的固态种子醅(发酵到7-15天的醋醅，参见李信,余永建,朱胜虎等，镇江香醋酿造过程中种子醅的优化[J]，食品与发酵工业，2017，43(3):111-115.DOI:10.13995/j.cnki.11-1802/ts.201703020)(发酵到9-11天的醋醅)7-15天和5-10wt％复合微生物菌种(醋酸菌和乳酸菌等核心功能微生物)进行醋醅固态分层发酵21天，得到醋醅。醋醅发酵结束后，取醋醅底部自然渗出的醋卤，澄清过滤即得醋卤。6000rpm/min离心10分钟去除大颗粒杂质。

取醋卤100g，上样于200g经预处理(用乙醇浸泡24h，用乙醇洗至(流出液与水比例为1：5)不浑浊，用水洗至无醇味)的D101树脂的层析柱，进行动态吸附。上样结束后，分别以去离子水洗脱、10％乙醇洗脱、80％乙醇洗脱，收集80％乙醇洗脱液，浓缩、干燥，得到醋卤提取物1.35g，备用。

实施例2：醋卤提取物的制备

取醋卤100g，上样于200g经预处理(用乙醇浸泡24h，用乙醇洗至(流出液与水比例为1：5)不浑浊，用水洗至无醇味)的D101树脂的层析柱，进行动态吸附。上样结束后，分别以去离子水洗脱、10％乙醇洗脱、80％乙醇洗脱，收集80％乙醇洗脱液，浓缩、干燥，得到醋卤提取物1.37g，备用。

实施例3：醋卤提取物的制备

取醋卤100g，上样于经预处理(用乙醇浸泡24h，用乙醇洗至(流出液与水比例为1：5)不浑浊，用水洗至无醇味)的150g D101树脂的层析柱，进行动态吸附。上样结束后，分别以去离子水洗脱、30％乙醇洗脱，收集30％乙醇洗脱液，浓缩、干燥，得到30％乙醇洗脱物1.07g，备用。

实施例4：醋卤提取物的制备

取醋卤100g，上样于经预处理(用乙醇浸泡24h，用乙醇洗至(流出液与水比例为1：5)不浑浊，用水洗至无醇味)的150g AB-8树脂的层析柱，进行动态吸附。上样结束后，分别以去离子水洗脱、10％乙醇洗脱、60％乙醇洗脱，收集60％乙醇洗脱液，浓缩、干燥，得到60％乙醇洗脱物1.32g，备用。

实施例5：醋卤提取物的制备

取醋卤100g，加2-10倍去离子水稀释后，加入100g AB-8树脂，室温静态吸附，过滤分离出树脂，分别以去离子水洗脱、以50％乙醇洗脱，收集50％乙醇洗脱液，浓缩、干燥，得到醋卤提取物2.05g，备用。

实施例6：醋卤提取物的制备

取醋卤100g，加2-10倍去离子水稀释后，加入100g DM301树脂，室温静态吸附，过滤分离出树脂，分别以去离子水洗脱、以70％乙醇洗脱，收集70％洗脱液，浓缩、干燥，得到醋卤提取物2.2g，备用。

实施例7：皮肤外用剂组合物

称取56.16质量份的去离子水放入烧杯中，开启搅拌，边搅拌边加入0.2质量份的丙烯酸(酯)类/C10-30烷醇丙烯酸酯交联聚合物及12质量份的甘油，开启均质至分散均匀。当温度升至40℃时，加入0.5质量份的对羟基苯乙酮继续搅拌溶解，升温至75-80℃，得到A相。

称取3质量份的甘油硬脂酸酯&卵磷脂、3质量份的十六/十八醇及20质量份的鲸蜡硬脂醇乙基己酸酯，搅拌加热至75-80℃后，得到B相。

在均质条件下，将B相液体缓慢加入A相中，均质均匀。

另称取0.14质量份的氨丁三醇加入5质量份的去离子水中，完全溶解后，加入A/B相中，搅拌均匀。边搅拌边开始降温。温度降低至常温后，备用。

实施例8：含醋卤提取物的皮肤外用剂组合物

称取56.06质量份的去离子水放入烧杯中，开启搅拌，边搅拌边加入0.2质量份的丙烯酸(酯)类/C10-30烷醇丙烯酸酯交联聚合物及12质量份的甘油，开启均质至分散均匀。当温度升至40℃时，加入0.5质量份的对羟基苯乙酮继续搅拌溶解，升温至75-80℃，得到A相。

称取3质量份的甘油硬脂酸酯&卵磷脂、3质量份的十六/十八醇及20质量份的鲸蜡硬脂醇乙基己酸酯，搅拌加热至75-80℃后，得到B相。

在均质条件下，将B相液体缓慢加入A相中，均质均匀。

另称取0.14质量份的氨丁三醇加入5质量份的去离子水中，完全溶解后，加入A/B相中，搅拌均匀。边搅拌边开始降温。当温度降至50℃时，加入0.25质量份的实施例5醋卤提取物溶液(预先将醋卤提取物以去离子水配制成1％质量浓度溶液)，搅拌均匀，温度降低至常温后，备用。

实施例9：含醋卤提取物的皮肤外用剂组合物

称取56.06质量份的去离子水放入烧杯中，开启搅拌，边搅拌边加入0.2质量份的丙烯酸(酯)类/C10-30烷醇丙烯酸酯交联聚合物及12质量份的甘油，开启均质至分散均匀。当温度升至40℃时，加入0.5质量份的对羟基苯乙酮继续搅拌溶解，升温至75-80℃，得到A相。

称取3质量份的甘油硬脂酸酯&卵磷脂、3质量份的十六/十八醇及20质量份的鲸蜡硬脂醇乙基己酸酯，搅拌加热至75-80℃后，得到B相。

在均质条件下，将B相液体缓慢加入A相中，均质均匀。

另称取0.14质量份的氨丁三醇加入5质量份的去离子水中，完全溶解后，加入A/B相中，搅拌均匀。边搅拌边开始降温。当温度降至50℃时，加入0.5质量份的实施例5醋卤提取物溶液(预先将醋卤提取物以去离子水配制成1％质量浓度溶液)，搅拌均匀，温度降低至常温后，备用。

测试例1：总多酚检测

试剂与仪器：无水乙醇(分析纯)、福林酚试剂(分析纯)、碳酸钠(分析纯)、没食子酸(C₇H₆O₅，CAS号：149-91-7)，纯度≥99.0％。紫外可见分光光度计、分析天平。

没食子酸标准储备液配制：准确称取20mg(精确至0.1mg)没食子酸标准品，用蒸馏水溶解定容至100mL，此溶液中没食子酸含量为200mg/L。于4℃冰箱中避光保存。

标准曲线的制作：准确吸取没食子酸标准储备液0.0，0.2，0.4，0.6，1.0，1.5mL分别置于10mL容量瓶中，用60％乙醇溶液定容，得到没食子酸工作液。然后分别移取没食子酸工作液1.0mL于10mL比色管中，加入2.5mL福林酚试剂，摇匀，加入2.5mL15％Na₂CO₃溶液，加水定容至刻度，摇匀。在40℃水浴60min，静置冷却20min。配制成浓度为0mg/L、4mg/L、8mg/L、12mg/L、20mg/L、30mg/L的标准系列，测定其吸光度值。以浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。

样品的测定：样品为实施例1-6的醋卤提取物，同标准曲线制作步骤。

结果计算：根据标准曲线计算样品中多酚含量。

结果显示，实施例1醋卤提取物的总多酚含量6.88％，实施例2醋卤提取物的总多酚含量6.90％，实施例3醋卤提取物的总多酚含量7.13％，实施例4醋卤提取物的总多酚含量7.05％，实施例5醋卤提取物的总多酚含量6.34％，实施例6醋卤提取物的总多酚含量6.68％。

测试例2：总黄酮检测

试剂与仪器：亚硝酸钠、硝酸铝、氢氧化钠、甲醇，均为分析纯。芦丁对照品(纯度≥99％)。紫外可见分光光度计、分析天平。

芦丁标准储备液配制：

准确称取20mg(精确至0.1mg)芦丁标准品，用甲醇溶解定容至100mL，此溶液中芦丁含量为0.2mg/L。于4℃冰箱中避光保存。

标准曲线的制作：

准确吸取芦丁标准溶液0.0，0.5，0.8，1.0，1.3，1.5，1.8，2.0mL分别置于10mL比色管中，加甲醇至总体积为5mL，加亚硝酸钠溶液0.3mL，混匀，静置8min；再加入氯化铝溶液0.3mL，摇匀，静置10min；加氢氧化钠溶液4.0mL，用甲醇定容至刻度，摇匀，静置10min。以甲醇作为空白对照，于510nm处测定吸光度值A。以芦丁浓度为横坐标，以吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。

样品测定：样品为实施例1-6的醋卤提取物，样品以甲醇稀释后，按标准曲线操作步骤同法测定吸光度。

结果计算：根据标准曲线计算样品中总黄酮含量。

结果表明，实施例1醋卤提取物的总黄酮含量2.95％，实施例2醋卤提取物的总黄酮含量2.94％，实施例3醋卤提取物的总黄酮含量2.97％，实施例4醋卤提取物的总黄酮含量2.97％，实施例5醋卤提取物的总黄酮含量2.60％，实施例6醋卤提取物的总黄酮含量2.28％。

测试例3：抗敏抗炎--降低TSLP表达

1.试验材料

1.1细胞：皮肤模型为3D表皮皮肤模型

(批号：ES210402)

1.2试剂：

PBS、MTT(Sigma)、DMSO(Sigma)、MEM培养液(Gibco)、Human TSLP ELISA试剂盒(博士德)、异丙醇(国药)、PolyI:C(Sigma)、脂多糖(E.Coli.Sigma)、AlamarBlue(索莱宝)、RNAiso Plus(TaKaRa)、无水乙醇(国药集团)、DEPC水(Beyotime)、反转录试剂盒(TaKaRa)、荧光染料(TaKaRa)。

1.3主要设备

CO2培养箱(Thermo)、超净工作台(苏净安泰)、倒置显微镜(Olympus)、酶标仪(BioTek)、高速冷冻离心机(长沙湘仪)、普通PCR仪(BIO-RAD)、实时荧光定量PCR仪(BIO-RAD)、数显恒温水浴锅(常州国华)。

2.实验方法：

2.1测试用液配制

PolyI:C+LPS诱导工作液：取1.44mL 5mg/mL PolyI:C母液和3mL2mg/mL LPS母液，溶于MEM培养液中，总体积为300mL，使得PolyI:C的终浓度为24μg/mL，LPS的终浓度为20μg/mL。

2.2给药与诱导

准备6孔板，空白BC组加入新鲜正常培养液，模型NC组，阳性组和样品组，均加入诱导工作液；给药孵育完成后，从培养箱中取出6孔板，用无菌PBS清洗皮肤模型底部，并用无菌棉签擦拭PBS残留液，然后将皮肤模型转移至提前准备好的新的6孔板中。结束后，将6孔板置于CO2培养箱(37℃、5％CO2)中孵育24h。

2.3炎症因子TSLP检测

(1)收样：诱导孵育24h结束后，收集模型培养液于EP管中，置于-80℃冰箱保存。

(2)ELISA检测：根据TSLP ELISA检测试剂盒的操作说明书进行检测分析。

2.4检测结果统计分析

各组间采用t-test统计分析，p<0.05表示差异显著，p<0.01表示差异极显著。

表1显示了样品对TSLP炎症因子表达的影响。

表1

炎症因子TSLP检测的结果如图6所示。从TSLP检测结果可以看出，模型诱导后TSLP明显提升，而经给药后TSLP浓度显著下降，醋卤提取物0.003重量％浓度下，能显著降低炎症因子TSLP的表达，其效果优于阳性对照0.01％地塞米松，说明醋卤提取物能通过降低炎症因子TLSP以达到抗炎作用。

测试例4：屏障修复—促进FLG表达

1.试验材料

1.1细胞：皮肤模型为3D表皮皮肤模型

(批号：ES210402)

1.2试剂：

PBS、MTT(Sigma)、DMSO(Sigma)、MEM培养液(Gibco)、Human TSLP ELISA试剂盒、异丙醇(国药)、PolyI:C(Sigma)、脂多糖(E.Coli.Sigma)、AlamarBlue(索莱宝)、RNAiso Plus(TaKaRa)、无水乙醇(国药集团)、DEPC水(Beyotime)、反转录试剂盒(TaKaRa)、荧光染料(TaKaRa)。

1.3主要设备

CO2培养箱(Thermo)、超净工作台(苏净安泰)、倒置显微镜(Olympus)、酶标仪(BioTek)、高速冷冻离心机(长沙湘仪)、普通PCR仪(BIO-RAD)、实时荧光定量PCR仪(BIO-RAD)、数显恒温水浴锅(常州国华)。

2.实验方法：

2.1测试用液配制

PolyI:C+LPS诱导工作液：取1.44mL 5mg/mL PolyI:C母液和3mL2mg/mL LPS母液，溶于MEM培养液中，总体积为300mL，使得PolyI:C的终浓度为24μg/mL，LPS的终浓度为20μg/mL。

2.2给药与诱导

准备6孔板，空白BC组加入新鲜正常培养液，模型NC组，阳性组WY-14643(匹立尼酸Pirinixic Acid)和样品组，均加入诱导工作液；给药孵育完成后，从培养箱中取出6孔板，用无菌PBS清洗皮肤模型底部，并用无菌棉签擦拭PBS残留液，然后将皮肤模型转移至提前准备好的新的6孔板中。结束后，将6孔板置于CO2培养箱(37℃、5％CO2)中孵育24h。

2.3基因检测

收样后依据试剂盒说明书，开展RNA提取、反转录及荧光定量PCR检测，采用2-△△CT方法进行结果计算。

2.4检测结果统计分析

各组间采用t-test统计分析，p<0.05表示差异显著，p<0.01表示差异极显著。

表2显示了样品对屏障因子FLG表达的影响。

表2

基于类湿疹3D皮肤模型的检测FLG结果如图7所示。结果表明，经模型诱导后，FLG表达量比正常组下降，而给药后FLG表达量明显提高。由结果可知，醋卤提取物0.003重量％浓度下，能显著提升屏障因子FLG基因的表达，其效果优于阳性对照，说明醋卤提取物能改善皮肤屏障。

测试例5：抗敏止痒动物实验

动物：豚鼠30只(上海杰思捷实验动物有限公司，每组10只)体重：300g左右，雌/雄各半。

试剂：磷酸组胺、阳性对照丙酸氯倍他索乳膏。

试验条件：温度20—25℃，相对湿度60—70％

试验方法：将豚鼠随机分为3组，每组10只。分空白对照组，阳性对照组，样品组。实验前一天，给各组豚鼠右后足背，涂样品一次。实验当天，用粗砂纸擦伤动物右后足背剃毛处，约1平方厘米范围左右，再在该处涂抹样品一次，空白对照组给予等量蒸馏水。待10分钟后，开始在创伤面处滴0.01％磷酸组织胺0.05ml/只，此后每隔3分钟按0.01％，0.02％，0.03％，0.04％……递增浓度，每次均为0.05ml/只。直至出现豚鼠回头舔右后足，以最后出现豚鼠回头舔右后足时所给予的磷酸组胺总量为致痒阈。记录并比较各组的致痒阈。

表3显示了醋卤提取物对磷酸组织胺致痒反应的影响。

表3

注：P值为均与空白对照比较

由上表可以看出，10mg/ml醋卤提取物与空白对照样品比较，有一定提高豚鼠致痒阈作用(P<0.01)。

测试例6：含醋卤提取物的基质配方的抗敏止痒动物实验

动物：豚鼠50只(每组10只)体重：300g左右，雌/雄各半。

试剂：磷酸组胺、阳性对照丙酸氯倍他索乳膏。

试验条件：温度20—25℃，相对湿度60—70％

试验方法：将豚鼠随机分为5组，每组50只。分空白对照组，阳性对照组，样品组。实验前一天，给各组豚鼠右后足背，涂样品一次。实验当天，用粗砂纸擦伤动物右后足背剃毛处，约1平方厘米范围左右，再在该处涂抹样品一次，空白对照组给予等量蒸馏水。待10分钟后，开始在创伤面处滴0.01％磷酸组织胺0.05ml/只，此后每隔3分钟按0.01％，0.02％，0.03％，0.04％……递增浓度，每次均为0.05ml/只。直至出现豚鼠回头舔右后足，以最后出现豚鼠回头舔右后足时所给予的磷酸组胺总量为致痒阈。记录并比较各组的致痒阈。

表4显示了含醋卤提取物的基质配方对磷酸组织胺致痒反应的影响。

表4

注：P值为均与空白对照比较

由上表可以看出，实施例7不含醋卤提取物的皮肤外用剂(即，基质配方)没有止痒作用(p>0.05)，而实施例8含醋卤提取物0.25mg/g的皮肤外用剂和实施例9含醋卤提取物0.5mg/g的皮肤外用剂与空白对照样品比较，能显著提高豚鼠致痒阈作用。进一步说明了醋卤提取物具有抗敏止痒作用。

应用例

本发明所述的醋卤提取物可以作为中间体原料或功效添加剂用于药品、保健食品或皮肤外用剂的制备，所述皮肤外用剂优选为化妆品组合物，包括但不限于面霜、乳液、啫喱、化妆水、精华液、面膜、眼霜、气雾(清洁泡)、喷雾、沐浴露和洗面奶等剂型的产品的制备。本发明所述的醋卤提取物可以作为冻干粉直接使用或用去离子水复溶后使用。

实施例1-6醋卤提取物，在皮肤外用剂中的重量百分比为0.0001％-20％(w/w)。优选的重量百分比为0.001％-10％(w/w)。更优选的重量百分比为0.001％-5％(w/w)。最优选的重量百分比为0.01％-5％(w/w)。

以下是实施例1-6获得醋卤提取物在皮肤外用剂中的具体应用例，以及这些剂型的配方和制备方法。具体应用例如下：

应用例1：胶囊的制备

取实施例1醋卤，浓缩至稠膏，加入麦芽糊精，混匀，制粒，装入胶囊，每粒装0.2g，制成1000粒，即得。

应用例2：中药制剂的制备

将实施例2醋卤，在室温下用超滤膜(超滤膜1000D，博纳)超滤，截留分子量大于30000道尔顿,将经过超滤膜的超滤液(分子量小于30000道尔顿)保存备用。在室温下用纳滤膜(纳滤膜100D，博纳)过滤分子量小于30000的超滤液，截留分子量大于150的浓缩液备用。将分子量大于150的浓缩液无菌冷冻干燥，制成冻干粉。将冻干粉制成胶囊和粉针剂，获得中药制剂。

应用例3：面霜的制备

应用例4：乳液的制备

应用例5：啫喱的制备

应用例6：化妆水的制备

应用例7：精华液的制备

应该例8：面膜的制备

应用例9：眼霜的制备

应用例10：气雾(清洁泡)的制备

应用例11：喷雾的制备

应用例12：沐浴露的制备

应用例13：洗面奶的制备

Claims (15)

1.糯米发酵提取物在制备用于抗炎、抗敏、抗刺激和/或止痒的药物中的应用，所述糯米发酵提取物通过包括以下步骤的方法制备：

(a)将糯米粉碎，蒸煮，经糖化后加入酵母菌和麦曲进行酒醪发酵，得到酒醪；

(b)加入麦麸和稻壳，搅拌均匀，接入固态种子醅和复合微生物菌种进行醋醅固态分层发酵，得到醋醅；

(c)取醋醅底部自然渗出的醋卤，得到醋卤；

(d)醋卤经树脂分离洗脱，得到醋卤提取物；

其中，以重量计，所述糯米发酵提取物中总多酚含量至少≥6.34％，总黄酮含量至少≥2.28％。

2.如权利要求1所述的应用，其中，所述步骤(d)采用的树脂选自以下：非极性大孔树脂、弱极性大孔树脂、极性大孔树脂中的任一种。

3.如权利要求2所述的应用，所述非极性大孔树脂是D101树脂，所述弱极性大孔树脂是AB-8树脂、所述极性大孔树脂是DM301树脂。

4.如权利要求1所述的应用，其中，所述步骤(d)采用水或乙醇洗脱。

5.如权利要求4所述的应用，其中，所述步骤(d)采用50-70体积％的乙醇洗脱。

6.如权利要求1所述的应用，其中，所述抗炎、抗敏、抗刺激和/或止痒作用通过抑制胸腺基质淋巴生成素实现。

7.糯米发酵提取物在制备用于缓解湿疹和/或改善皮肤屏障的药物中的应用，所述糯米发酵提取物通过包括以下步骤的方法制备：

(a)将糯米粉碎，蒸煮，经糖化后加入酵母菌和麦曲进行酒醪发酵，得到酒醪；

(b)加入麦麸和稻壳，搅拌均匀，接入固态种子醅和复合微生物菌种进行醋醅固态分层发酵，得到醋醅；

(c)取醋醅底部自然渗出的醋卤，得到醋卤；

(d)醋卤经树脂分离洗脱，得到醋卤提取物；

其中，以重量计，所述糯米发酵提取物中总多酚含量至少≥6.34％，总黄酮含量至少≥2.28％。

8.如权利要求7所述的应用，其中，所述步骤(d)采用的树脂选自以下：非极性大孔树脂、弱极性大孔树脂、极性大孔树脂中的任一种。

9.如权利要求8所述的应用，所述非极性大孔树脂是D101树脂，所述弱极性大孔树脂是AB-8树脂、所述极性大孔树脂是DM301树脂。

10.如权利要求7所述的应用，其中，所述步骤(d)采用水或乙醇洗脱。

11.如权利要求10所述的应用，其中，所述步骤(d)采用50-70体积％的乙醇洗脱。

12.如权利要求7所述的应用，其中所述缓解湿疹和/或改善皮肤屏障是通过抑制胸腺基质淋巴生成素和/或促进丝聚蛋白基因表达实现。

13.糯米发酵提取物在制备具有皮肤抗炎、抗敏、抗刺激和/或止痒的皮肤外用剂中的应用，所述糯米发酵提取物通过包括以下步骤的方法制备：

(a)将糯米粉碎，蒸煮，经糖化后加入酵母菌和麦曲进行酒醪发酵，得到酒醪；

(b)加入麦麸和稻壳，搅拌均匀，接入固态种子醅和复合微生物菌种进行醋醅固态分层发酵，得到醋醅；

(c)取醋醅底部自然渗出的醋卤，得到醋卤；

(d)醋卤经树脂分离洗脱，得到醋卤提取物；

其中，以重量计，所述糯米发酵提取物中总多酚含量至少≥6.34％，总黄酮含量至少≥2.28％。

14.糯米发酵提取物在制备具有缓解湿疹和/或改善皮肤屏障的皮肤外用剂中的应用，所述糯米发酵提取物通过包括以下步骤的方法制备：

(a)将糯米粉碎，蒸煮，经糖化后加入酵母菌和麦曲进行酒醪发酵，得到酒醪；

(b)加入麦麸和稻壳，搅拌均匀，接入固态种子醅和复合微生物菌种进行醋醅固态分层发酵，得到醋醅；

(c)取醋醅底部自然渗出的醋卤，得到醋卤；

(d)醋卤经树脂分离洗脱，得到醋卤提取物；

其中，以重量计，所述糯米发酵提取物中总多酚含量至少≥6.34％，总黄酮含量至少≥2.28％。

15.如权利要求13或14所述的应用，所述皮肤外用剂中糯米发酵提取物的用量为0.001-100重量％。

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