CN113520936A - 一种金银花提取物的制备及其在牙膏中的应用 - Google Patents

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Abstract

本发明属于日用化工品技术领域，具体涉及一种金银花提取物的制备及其在牙膏中的应用，本发明利用水提醇沉的方法对金银花多糖进行提取，结合高温杀青、热风干燥、研磨、高压处理以及十二烷基硫酸钠等手段，降低了提取温度和减少了醇沉步骤，将获得的金银花提取物与羧甲基纤维钠按1：(3‑4.5)的质量比组成复配体系，该复配体系能够作为牙膏增稠剂，不仅能够改善牙膏流变性，降低牙膏制作成本，还能够降低对口腔的刺激性，提高稳定性和安全性。

Description

一种金银花提取物的制备及其在牙膏中的应用
技术领域
本发明属于日用化工品技术领域，具体涉及一种金银花提取物的制备及其在牙膏中的应用。
背景技术
金银花自古被誉为清热解毒的良药，性甘寒气芳香，甘寒清热而不伤胃，芳香透达又可祛邪。金银花所含有的有机酸、黄酮和多糖类成分，很多都具有抗氧化、抗衰老、抑菌消炎的作用。目前，以中草药金银花的提取液为主要成分配制牙膏，具有清热去火、消炎止痛和除口臭作用，并且在牙膏中添加金银花，其特有香味，还能改善使用感。
目前，金银花在牙膏中的应用关键在于保健作用，并且为了保证金银花多糖的生物活性，通常需要对金银花提取的多糖进行脱蛋白步骤，而脱蛋白不仅会对多糖的结构破坏较大，但是金银花多糖对牙膏的质感、流变性能等影响的研究是鲜少的，另外，有研究发现牙膏中最为常见的表面活性剂十二烷基硫酸钠(简称SDS)与蛋白质之间亲和作用强，可以使蛋白变性失活，而且其抑制获得性膜的生成，长期使用可能对牙周组织及口腔粘膜带来伤害，这极大限制了SDS在牙膏中的应用，因此，本发明人通过对金银花提取工艺的研究，以期提取一种能够与SDS相配合来改善牙膏体系流变性。
发明内容
本发明针对现有技术的不足，提出了一种金银花提取物的制备及其在牙膏中的应用。
具体是通过以下技术方案来实现的：
本发明的第一目的在于提供：一种金银花提取物的制备方法，包括如下步骤：
1)取鲜金银花放入到杀青干燥机中，用高温杀青3-5min，再热风控温50-55℃干燥10-15min，研磨至过40-50目筛，得金银花粉；
2)按固:液＝1:(10-20)的质量比将金银花粉末置于水中，高压处理3-5min，然后加入十二烷基硫酸钠混合均匀，加热提取10-15min，经离心分离、过滤，取滤液A；
3)向滤液A中加入无水乙醇至含醇量10％，置于0-4℃条件下静置1-2h，过滤，去除沉淀，得滤液B，向滤液B中加入无水乙醇至含醇量50％，重复静置操作后，离心分离，弃去上清液，收集残余物进行干燥。
所述高温杀青的温度为120-130℃。
所述高压处理的压力为20-25MPa。
所述十二烷基硫酸钠的用量为金银花粉末质量的0.01-0.05％。
所述加热提取的温度为45-55℃。
所述离心分离的转速为4000-5000转/min，时间为8-10min。
本发明利用高温杀青，对鲜金银花进行灭活处理，进而避免了多糖的降解，采用热风控温干燥，能够降低金银花中有效成分随水分散失而大量损失。
本发明采用研磨，对鲜金银花中纤维素等大分子物质进行了机械损害，再结合高压处理，进一步破坏了细胞壁、细胞膜结构，这有利于多糖成分的提取。
本发明添加十二烷基硫酸钠，其起到了增溶作用，能够确保多糖成分高效溶出，利用无水乙醇，有效分离了多糖成分。
本发明采用水提醇沉的方法对金银花多糖进行提取，通过以上技术手段的结合，降低了提取温度和减少了醇沉步骤，同时集成了低成本、工业化提取技术。
本发明的第二目的在于提供：金银花提取物在牙膏中的应用，所述金银花提取物用于制作牙膏增稠剂。
所述牙膏增稠剂由金银花提取物与羧甲基纤维素钠(CMC-Na)按照质量比1：(3-4.5)组成。
所述牙膏由以下重量百分比计的原料制成：石粉30-40％、增稠剂1.2-1.6％、保湿剂20-25％、十二烷基硫酸钠1-2％、磨擦剂20-30％、香料1-1.2％，余量为水。
本发明牙膏增稠剂由金银花提取物与羧甲基纤维素钠组成，由于CMC-Na黏性较大，但容易产生大量气泡，造成牙膏分散、易拉丝，稳定性差等问题，添加本发明的金银花提取物，能够改善膏体的黏度和稳定性，使得膏体均匀，无拉丝现象，在实验中还发现本发明提取的金银花多糖与CMC-Na在20℃条件、4％盐水溶液下的盐粘比CMC-Na的盐粘比显著提高，这说明本发明提取的金银花多糖能够改善增稠剂的抗盐性，这助于实现CMC-Na在含盐牙膏中的应用。
本发明的金银花提取物未脱蛋白，能够与十二烷基硫酸钠相结合，避免十二烷基硫酸钠对口腔的损害。
有益效果：
本发明的金银花提取工艺具有成本低、操作简单、多糖提取率高的特点。
利用本提取工艺提取的金银花提取物能够用于制作牙膏增稠剂，改善膏体流变性，同时保留金银花多糖的保健效果，同时与CMC-Na按1：(3-4.5)的质量比组成复配体系，该复配体系能够作为牙膏增稠剂，不仅能够改善牙膏流变性，降低牙膏制作成本，还能够降低对口腔的刺激性，提高稳定性和安全性。
按照GB8372相关规定，按照传统牙膏制备方法对本发明配方的牙膏进行稳定性检查：取试样牙膏2支，1支样品室温保存，另一支样品放入-8℃的冰箱内，8h后取出，随即放入45℃恒温培养箱内，8h后取出，恢复室温，开盖，膏体不溢出管口。将牙膏管体倒置，10s内无液体从管口滴出，香味色泽正常。
具体实施方式
下面对本发明的具体实施方式作进一步详细的说明，但本发明并不局限于这些实施方式，任何在本实施例基本精神上的改进或代替，仍属于本发明权利要求所要求保护的范围。
实施例1
一种金银花提取物的制备方法，包括如下步骤：
1)取鲜金银花放入到杀青干燥机中，在120℃条件下杀青3min，再热风控温50℃干燥10min，研磨至过40目筛，得金银花粉；
2)按固:液＝1:10的质量比将金银花粉末置于水中，在20MPa条件下高压处理3min，然后加入金银花粉末质量0.01％的十二烷基硫酸钠混合均匀，在45℃条件下加热提取10min，经4000转/min离心分离8min、过滤，取滤液A；
3)向滤液A中加入无水乙醇至含醇量10％，0℃静置1h，过滤，去除沉淀，得滤液B，向滤液B中加入无水乙醇至含醇量50％，0℃静置1h后，4000转/min离心分离8min，弃去上清液，收集残余物进行干燥。
实施例2
一种金银花提取物的制备方法，包括如下步骤：
1)取鲜金银花放入到杀青干燥机中，在130℃条件下杀青5min，再热风控温55℃干燥15min，研磨至过50目筛，得金银花粉；
2)按固:液＝1:20的质量比将金银花粉末置于水中，在25MPa条件下高压处理5min，然后加入金银花粉末质量0.05％的十二烷基硫酸钠混合均匀，在55℃条件下加热提取15min，经5000转/min离心分离10min、过滤，取滤液A；
3)向滤液A中加入无水乙醇至含醇量10％，4℃静置2h，过滤，去除沉淀，得滤液B，向滤液B中加入无水乙醇至含醇量50％，4℃静置2h后，5000转/min离心分离10min，弃去上清液，收集残余物进行干燥。
实施例3
一种金银花提取物的制备方法，包括如下步骤：
1)取鲜金银花放入到杀青干燥机中，在125℃条件下杀青4min，再热风控温52℃干燥12min，研磨至过45目筛，得金银花粉；
2)按固:液＝1:15的质量比将金银花粉末置于水中，在22MPa条件下高压处理4min，然后加入金银花粉末质量0.03％的十二烷基硫酸钠混合均匀，在50℃条件下加热提取12min，经4500转/min离心分离9min、过滤，取滤液A；
3)向滤液A中加入无水乙醇至含醇量10％，2℃静置1.5h，过滤，去除沉淀，得滤液B，向滤液B中加入无水乙醇至含醇量50％，2℃静置1.5h后，4500转/min离心分离9min，弃去上清液，收集残余物进行干燥。
实施例4
一种金银花提取物的制备方法，包括如下步骤：
1)取鲜金银花放入到杀青干燥机中，在127℃条件下杀青3-5min，再热风控温52℃干燥13min，研磨至过40目筛，得金银花粉；
2)按固:液＝1:18的质量比将金银花粉末置于水中，在21MPa条件下高压处理4min，然后加入金银花粉末质量0.04％的十二烷基硫酸钠混合均匀，在52℃条件下加热提取12min，经4000转/min离心分离10min、过滤，取滤液A；
3)向滤液A中加入无水乙醇至含醇量10％，3℃静置1h，过滤，去除沉淀，得滤液B，向滤液B中加入无水乙醇至含醇量50％，3℃静置1h后，4000转/min离心分离10min，弃去上清液，收集残余物进行干燥。
实施例5
一种金银花提取物的制备方法，包括如下步骤：
1)取鲜金银花放入到杀青干燥机中，在121℃条件下杀青5min，再热风控温54℃干燥10min，研磨至过40目筛，得金银花粉；
2)按固:液＝1:14的质量比将金银花粉末置于水中，在24MPa条件下高压处理3.5min，然后加入金银花粉末质量0.02％的十二烷基硫酸钠混合均匀，在47℃条件下加热提取12min，经5000转/min离心分离8min、过滤，取滤液A；
3)向滤液A中加入无水乙醇至含醇量10％，0℃静置2h，过滤，去除沉淀，得滤液B，向滤液B中加入无水乙醇至含醇量50％，4℃静置1h后，5000转/min离心分离8min，弃去上清液，收集残余物进行干燥。
实验例1
按照《内部沸腾法提取金银花多糖》(李建凤，李陈，廖立敏于2016年发表)的方法测定多糖含量，计算出金银花多糖的提取率，同时作对比实验和空白实验，各组提取率结果如表1所示：
空白组：按固:液＝1:10的质量比将金银花粉末置于水中，在45℃条件下加热提取10min，经4000转/min离心分离8min、过滤，取滤液A，步骤3)同实施例1；
对比组1：在实施例2的基础上，不进行高压处理。
对比组2：在实施例3的基础上，将高温杀青替换为78℃杀青。
对比组3：在实施例4的基础上，不采用十二烷基硫酸钠。
对比组4：在实施例5的基础上，将十二烷基硫酸钠替换为聚山梨酯-80；
各组提取率结果如表1所示；
表1
项目 实施例1 实施例2 实施例3 实施例4 实施例5
提取率(％) 12.49 12.53 12.77 12.68 12.61
项目 空白组 对比组1 对比组2 对比组3 对比组4
提取率(％) 3.17 8.24 10.87 9.56 11.29
实施例6-10
金银花提取物在牙膏中的应用，所述牙膏由以下重量百分比计的原料制成如表2所示：
表2
Figure BDA0003131054210000081
各实施例中具体原料选择见表3所示；
表3
Figure BDA0003131054210000082
第一部分 流变性能分析
Kinexuslab+型旋转流变仪测定陈化后的溶胶体系的假塑性、触变性、蠕变性，将样品均匀放置在椎板间，设置不同参数进行测试。
1.1假塑性研究
检测条件：椎板cp2/40，温度25℃，剪切速率0.01-100s-1。
1.2触变性研究
检测条件：椎板cp2/40，温度25℃，剪切速率从0.01-100s-1，中间维持120s，剪切速率从100-0.01s-1，测定升速和降速所形成的触变环。
1.3蠕变性
检测条件：椎板cp2/40，温度25℃，剪切应力1Pa，扫描频率0.01-10Hz，扫描时间60s。
同时在各组实施例的基础上，进行流变性能分析，同时以增稠剂仅为CMC-Na为阳性对照组，以增稠剂仅为金银花提取物为阴性对照组，经过试验可知：“金银花提取物+CMC-Na”的黏度介于CMC-Na和金银花之间；但复配体系的触变环最大，形变量最小，这说明以“金银花提取物+CMC-Na”为增稠剂具有较好的流变性，能够使牙膏更水润、细腻。实施例6及其相应阳性、阴性对照组的触变环面积如表4所示：
表4
项目 实施例6 阳性对照组 阴性对照组
触变环面积(Pa/s) 128.6 99.7 103.5
实施例7-10的触变环面积与实施例6组的差异不大，在128-135Pa/s之间，但是均大于相应的阳性、阴性对照组的触变环面积。
1.4屈服应力检测
检测条件：椎板cp2/40，温度25℃，剪切力0～100Pa，时间2min。
同时以不添加金银花提取物为空白对照组，各组的屈服应力如表5所示,：
表5
Figure BDA0003131054210000101
由表5可知，添加金银花提取物能够提高屈服应力，说明金银花提取物能够提高物理结构稳定性。
第二部分 体外细胞毒性研究
按照传统制备方法将实施例6-10配方制成牙膏，参照CN108743502B公开的方法进行实验：1)牙膏浸提液的制备：分别取实施例6-10的牙膏3.0g，每种牙膏样品于10mL磷酸缓冲液(PBS，pH＝7.4)中，摇晃混匀，常温下静置过夜，吸取上清液，用微孔滤器过滤除菌，得到牙膏浸提液；
2)使用MTT法测定牙膏浸提液的细胞毒性：将人口腔黏膜成纤维细胞(homf)制备成1×105个/mL的细胞悬液，按每孔200μL接种于96孔细胞培养板中，置于5％CO2，37℃细胞培养箱内培养24h，弃去原培养液，每孔加180μLMEM/F12细胞培养液(加入10％胎牛血清、100U/mL青霉素、100U/mL链霉素)和20μL牙膏浸提液，设3个平行孔，以加等量PBS作阴性对照，继续培养20h。然后每孔加5g/L的MTT溶液20μL，继续在37℃下培养4h后，吸弃原培养液。每孔加入200μLDMSO，室温下振荡10min后，用酶标仪在490nm波长下检测每孔的OD值，计算细胞相对增殖率(RGR)，分级标准如表6所示，注：RGR＝实验组OD值/阴性对照组OD值×100％；
表6
Figure BDA0003131054210000111
实验结果显示：实施例6-10的牙膏浸提液的细胞毒性分级均为1，RGR值均≥94，这说明本发明的牙膏对口腔黏膜的刺激性较低。

Claims (9)

1.一种金银花提取物的制备方法，包括如下步骤：
1)取鲜金银花放入到杀青干燥机中，用高温杀青3-5min，再热风控温50-55℃干燥10-15min，研磨至过40-50目筛，得金银花粉；
2)按固:液＝1:(10-20)的质量比将金银花粉末置于水中，高压处理3-5min，然后加入十二烷基硫酸钠混合均匀，加热提取10-15min，经离心分离、过滤，取滤液A；
3)向滤液A中加入无水乙醇至含醇量10％，置于0-4℃条件下静置1-2h，过滤，去除沉淀，得滤液B，向滤液B中加入无水乙醇至含醇量50％，重复静置操作后，离心分离，弃去上清液，收集残余物进行干燥。
2.如权利要求1所述一种金银花提取物的制备方法，其特征在于，所述高温杀青的温度为120-130℃。
3.如权利要求1所述一种金银花提取物的制备方法，其特征在于，所述高压处理的压力为20-25MPa。
4.如权利要求1所述一种金银花提取物的制备方法，其特征在于，所述十二烷基硫酸钠的用量为金银花粉末质量的0.01-0.05％。
5.如权利要求1所述一种金银花提取物的制备方法，其特征在于，所述加热提取的温度为45-55℃。
6.如权利要求1所述一种金银花提取物的制备方法，其特征在于，所述离心分离的转速为4000-5000转/min，时间为8-10min。
7.如权利要求1所述制备方法制备的金银花提取物在牙膏中的应用，其特征在于，所述金银花提取物用于制备牙膏增稠剂。
8.如权利要求7所述的应用，其特征在于，所述牙膏增稠剂由金银花提取物与羧甲基纤维素钠按照质量比1：(3-4.5)组成。
9.如权利要求7所述的应用，其特征在于，所述牙膏由以下重量百分比计的原料制成：石粉30-40％、增稠剂1.2-1.6％、保湿剂20-25％、十二烷基硫酸钠1-2％、磨擦剂20-30％、香料1-1.2％，余量为水。
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