CN113307785A - 一种具有抗肿瘤作用的松香烷型二萜化合物、制备方法及药物组合物和应用 - Google Patents

一种具有抗肿瘤作用的松香烷型二萜化合物、制备方法及药物组合物和应用 Download PDF

Info

Publication number
CN113307785A
CN113307785A CN202110455130.4A CN202110455130A CN113307785A CN 113307785 A CN113307785 A CN 113307785A CN 202110455130 A CN202110455130 A CN 202110455130A CN 113307785 A CN113307785 A CN 113307785A
Authority
CN
China
Prior art keywords
abietane
ethyl acetate
compound
cells
volume ratio
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN202110455130.4A
Other languages
English (en)
Other versions
CN113307785B (zh
Inventor
许明峰
田霖丹
戴杨帆
朱芹
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Hangzhou Normal University
Original Assignee
Hangzhou Normal University
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Hangzhou Normal University filed Critical Hangzhou Normal University
Priority to CN202110455130.4A priority Critical patent/CN113307785B/zh
Publication of CN113307785A publication Critical patent/CN113307785A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN113307785B publication Critical patent/CN113307785B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Images

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D307/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom
    • C07D307/77—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with carbocyclic rings or ring systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
    • A61K36/85—Verbenaceae (Verbena family)
    • A61K36/855—Clerodendrum, e.g. glorybower
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Natural Medicines & Medicinal Plants (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Alternative & Traditional Medicine (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Medical Informatics (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicines Containing Plant Substances (AREA)

Abstract

本发明涉及抗肿瘤化合物技术领域，具体涉及一种具有抗肿瘤作用的松香烷型二萜化合物、制备方法及药物组合物和应用,所述松香烷型二萜化合物的化学名称为12,16‑环氧‑17(15→16)‑移‑3,5,8,12‑松香烷四烯‑7,11,14‑三酮，从苞花大青的风干枝条中提取得到，对于多种肿瘤细胞均有抑制作用，尤其是对人肺癌细胞A549细胞抑制作用明显，在制备抗肿瘤药物上具有非常大的应用前景，对提升苞花大青的医学和经济价值，推动对苞花大青的营养价值、潜在毒性、生药学特征、化学成分等展开研究具有重要作用。

Description

一种具有抗肿瘤作用的松香烷型二萜化合物、制备方法及药 物组合物和应用
技术领域
本发明涉及抗肿瘤化合物技术领域，具体涉及一种具有抗肿瘤作用的松香烷型二萜化合物、制备方法及药物组合物和应用。
背景技术
苞花大青为灌木或小乔木，高3～4米，少数可达10米，为马鞭草科大青属植物，该属我国有40种，大部分分布于华南、西南地区，其中可供药用的有23种。从历代本草记载及民间治病的经验看，该属多种植物具清热解毒、祛风除湿、活血散瘀、消炎镇痛等功效，常用于治疗痈疽、疔疮、感冒高热、风湿性关节炎、跌打损伤等疾病。目前对苞花大青的化学成分的研究还未见报道，将苞花大青及其提取成分应用于抗肿瘤的研究也未见报道。
发明内容
本发明的目的在于提供一种从苞花大青中提取得到的具有抗肿瘤作用的松香烷型二萜化合物，对人肺癌细胞和人原髓细胞白血病细胞具有抑制作用。
本发明另一目的为提供上述松香烷型二萜化合物的制备方法。
本发明另一目的为提供含有上述松香烷型二萜化合物、及其药学上可接受的盐、立体异构体、水合物、溶剂化物或前药的药物组合物。
本发明另一目的为提供松香烷型二萜化合物或其药物组合物在制备抗肿瘤药物上的应用。
本发明提供如下的技术方案：
一种具有抗肿瘤作用的松香烷型二萜化合物，所述松香烷型二萜化合物的化学名称为12,16-环氧-17(15→16)-移-3,5,8,12-松香烷四烯-7,11,14-三酮，结构如下式I所示：
Figure BDA0003040256790000011
本发明的松香烷型二萜化合物即12,16-环氧-17(15→16)-移-3,5,8,12-松香烷四烯-7,11,14-三酮，从苞花大青中提取得到，记为松香烷型二萜化合物Bracteatum A，对多种肿瘤细胞具有抑制作用，如人肺癌细胞A549细胞和人原髓细胞白血病细胞HL-60，其中对人肺癌细胞A549细胞的抑制作用更为显著。
上述松香烷型二萜化合物的制备方法，包括以下步骤：
(1)以苞花大青的风干枝条为原料，粉碎后有机溶剂浸提，低温减压浓缩得到浸膏；
(2)将浸膏和水混合得悬浊液，加入乙酸乙酯萃取，低温减压浓缩得到乙酸乙酯萃取相；
(3)采用硅胶柱层析分离乙酸乙酯萃取相，以石油醚-乙酸乙酯作为洗脱剂洗脱，收集石油醚和乙酸乙酯的体积比为2.9～3.1:1时对应的洗脱液，然后经薄层层析分析，合并相似组分得到初组分A1；
(4)将初组分A1经反相色谱柱分离，以甲醇水溶液洗脱，收集甲醇水体积比为1±0.1:2时对应的洗脱液，经薄层层析分析并合并相似组份得到初组分A2；
(5)将初组分A2经凝胶色谱柱分离，得到结构式I所示的松香烷型二萜化合物。
作为本发明方法的优选，步骤(1)中有机溶剂为体积分数≥80％的乙醇，加入量以苞花大青枝条质量计为10～20mL/g；浸提温度为65～75℃浸提，浸提2～3次，每次4～6小时；低温减压浓缩的温度为40～50℃，真空度为0.07～0.09MPa。
作为本发明方法的优选，步骤(2)中浸膏和水的质量比为1:1～3，乙酸乙酯与悬浊液体积比0.6～1:1，萃取2～4次。
作为本发明方法的优选，步骤(3)中石油醚-乙酸乙酯为梯度洗脱，石油醚和乙酸乙酯体积比依次为9.9～10.1:1、4.9～5.1:1、2.9～3.1:1、0.9～1.1:1、0.9～1.1:3、0.9～1.1:5和0.9～1.1:10。
作为本发明方法的优选，步骤(5)中所用反相色谱柱为反相C18色谱柱；甲醇水溶液为梯度洗脱，甲醇和水的体积比为1±0.1:2、1±0.1:1、1:3±0.1和1:5±0.1。
作为本发明方法的优选，步骤(6)中所用凝胶分离柱为Sephadex LH-20柱，洗脱液为氯仿:甲醇体积比为1:0.9～1.1的溶液。
本发明的松香烷型二萜化合物以苞花大青的枝条为原料，经破碎、浸提、减压浓缩、萃取和多次分离纯化得到。制备时，选用干燥的苞花大青枝条或者将苞花大青枝条干燥后使用，这样方便枝条破碎。由于苞花大青枝条中含有大量的杂质成分，采用单一浓度洗脱无法得到松香烷型二萜化合物Bracteatum A；而浓度梯度设置不合理，过大或者过小都可能会导致松香烷型二萜化合物Bracteatum A无法充分洗脱出来。在缺少可借鉴材料提供提取松香烷型二萜化合物Bracteatum A或者其存在的指示的情况下，处理苞花大青枝条并从中得到Bracteatum A具有很大的不确定性。
一种药物组合物，所述药物组合物含有包括药学上可接受的载体和如权利要求1所述的松香烷型二萜化合物，或松香烷型二萜化合物的药学上可接受的盐、立体异构体、水合物、溶剂化物或前药。
上述药物组合物在制备抗肿瘤药物上的应用。
作为本发明的优选，所述肿瘤对应的肿瘤细胞至少为人肺癌细胞A549细胞和人原髓细胞白血病细胞HL-60细胞中的一种。
上述松香烷型二萜化合物Bracteatum A及其药物组合物可以应用在制备抗肿瘤药物上，其中对于人肺癌细胞A549细胞的抑制作用明显，半数抑制浓度IC50值比市场上的广谱抗肿瘤药物顺铂小，显示其具有很强的抗肿瘤活性。
本发明的有益效果如下：
本发明的松香烷型二萜化合物Bracteatum A为从苞花大青枝条中提取得到的天然抗肿瘤化合物，对于多种肿瘤细胞均有抑制作用，尤其是对人肺癌细胞A549细胞抑制作用明显，在制备抗肿瘤药物上具有非常大的应用前景，对提升苞花大青的医学和经济价值，推动对苞花大青的营养价值、潜在毒性、生药学特征、化学成分等展开研究具有重要作用。
附图说明
图1是化合物Bracteatum A的1H核磁谱图。
图2是化合物Bracteatum A的13C核磁谱图。
图3是化合物Bracteatum A的1H-1H COSY核磁谱图。
图4是化合物Bracteatum A的HSQC核磁谱图。
图5是化合物Bracteatum A的HMBC核磁谱图。
具体实施方式
下面就本发明的具体实施方式作进一步说明。
如无特别说明，本发明中所采用的原料均可从市场上购得或是本领域常用的，如无特别说明，下述实施例中的方法均为本领域的常规方法。
实施例1
一种具有抗肿瘤作用的松香烷型二萜化合物，化学名称为12,16-环氧-17(15→16)-移-3,5,8,12-松香烷四烯-7,11,14-三酮，松香烷型二萜化合物Bracteatum A，结构如下式I所示：
Figure BDA0003040256790000041
1、上述化合物Bracteatum A的理化性能测试。
1.1分子结构式确定
所用核磁共振仪为Bruker公司制造的Bruker AVANCE III 500型核磁共振仪，核磁共振使用氘代CDCl3(氘代氯仿)试剂，所得松香烷型二萜化合物Bracteatum A的氢谱和碳谱数据见下表1所示，结果如图1、2所示。
表1 Bracteatum A的氢谱1H-NMR(500MHz)和碳谱13C-NMR(125MHz)数据
Figure BDA0003040256790000042
注：化学位移用δ表示；s表示单峰；m表示多重峰；dd表示双二重峰。
进一步的，上述Bracteatum A的其他NMR测试结果分别如图3(1H-1H COSY核磁谱图)、图4(HSQC核磁谱图)和图5(HMBC核磁谱图)所示。
根据图1～5及表1中的核磁NMR数据确定，松香烷型二萜化合物Bracteatum A的分子式为C20H20O4，分子量为324，不饱和度为11，化学名称为12,16-环氧-17(15→16)-移-3,5,8,12-松香烷四烯-7,11,14-三酮，结构如式I所示。
1.2熔点测试
所用熔点仪为上海物光制作的WRS-1C型熔点仪；经测试，松香烷型二萜化合物Bracteatum A的熔点为m.p.226-229℃。
实施例2
实施例1中的松香烷型二萜化合物Bracteatum A的制备方法，包括以下步骤：
(1)将9kg的苞花大青的风干枝条粉碎，然后在体积分数为90％的乙醇中70℃浸提3次，每次浸提5小时，乙醇的加入量以苞花大青的枝条碎片质量计为10mL/g，过滤不溶物并合并滤液，然后在真空度为0.08MPa、温度为45℃下低温减压蒸干得到浸膏630g；
(2)将所得浸膏与水按质量比为1:2混合均匀制成悬浊液，等体积乙酸乙酯萃取3次，合并萃取液，在真空度为0.08MPa、温度为45℃下低温减压蒸干得到乙酸乙酯萃取相81g；
(3)将得到的乙酸乙酯萃取相与等质量的硅胶拌匀，然后置于硅胶柱中层析，采用石油醚-乙酸乙酯作为洗脱剂进行梯度洗脱，石油醚与乙酸乙酯的各梯度洗脱体积比为10:1、5:1、3:1、1:1、1:3、1:5和1:10，收集石油醚和乙酸乙酯的体积比为3:1时的洗脱液，经薄层层析分析并合并相似组份，得到0.190g的初组分A1；
(4)将初组分A1置于反相C18柱色谱中，采用甲醇与水作为洗脱剂进行梯度洗脱，甲醇与水的各梯度洗脱体积比为1:2、1:1、1:3和1:5，收集甲醇与水的体积比为1:2时的洗脱液，经薄层层析分析并合并相似组份，得到0.080g的初组分A2；
(5)将初组分A2置于Sephadex LH-20柱色谱中，以氯仿:甲醇＝1:1作为流动相纯化得到结构式I所示的松香烷型二萜化合物Bracteatum A共16mg。
实施例3
实施例1中的松香烷型二萜化合物Bracteatum A的制备方法，包括以下步骤：
(1)将9kg的苞花大青的风干枝条粉碎，然后在体积分数为80％的乙醇中75℃浸提3次，每次浸提6小时，乙醇的加入量以苞花大青的枝条碎片质量计为12mL/g，过滤不溶物并合并滤液，然后在真空度为0.07MPa、温度为50℃下低温减压蒸干得到浸膏；
(2)将所得浸膏与水按质量比为1:1混合均匀制成悬浊液，等体积乙酸乙酯萃取3次，合并萃取液，在真空度为0.07MPa、温度为50℃下低温减压蒸干得到乙酸乙酯萃取相；
(3)将得到的乙酸乙酯萃取相与等质量的硅胶拌匀，然后置于硅胶柱中层析，采用石油醚-乙酸乙酯作为洗脱剂进行梯度洗脱，石油醚与乙酸乙酯的各梯度洗脱体积比为9.9.:1、4.9:1、2.9:1、0.9:1、1:0.9、1:4.9和1:9.9，收集石油醚和乙酸乙酯的体积比为2.9:1时的洗脱液，经薄层层析分析并合并相似组份，得到初组分A1；
(4)将初组分A1置于反相C18柱色谱中，采用甲醇与水作为洗脱剂进行梯度洗脱，甲醇与水的各梯度洗脱体积比为0.9:2、0.9:1、0.9:3和1:4.9，收集甲醇与水的体积比为0.9:2时的洗脱液，经薄层层析分析并合并相似组份，得到初组分A2；
(5)将初组分A2置于Sephadex LH-20柱色谱中，以氯仿:甲醇＝0.9:1作为流动相纯化得到结构式I所示的松香烷型二萜化合物Bracteatum A共10mg。
实施例4
实施例1中的松香烷型二萜化合物Bracteatum A的制备方法，包括以下步骤：
(1)将9kg的苞花大青的风干枝条粉碎，然后在体积分数为90％的乙醇中75℃浸提3次，每次浸提4小时，乙醇的加入量以苞花大青的枝条碎片质量计为20mL/g，过滤不溶物并合并滤液，然后在真空度为0.09MPa、温度为40℃下低温减压蒸干得到浸膏；
(2)将所得浸膏与水按质量比为1:1混合均匀制成悬浊液，等体积乙酸乙酯萃取3次，合并萃取液，在真空度为0.09MPa、温度为40℃下低温减压蒸干得到乙酸乙酯萃取相；
(3)将得到的乙酸乙酯萃取相与等质量的硅胶拌匀，然后置于硅胶柱中层析，采用石油醚-乙酸乙酯作为洗脱剂进行梯度洗脱，石油醚与乙酸乙酯的各梯度洗脱体积比为10.1:1、5.1:1、3.1:1、1.1:1、1:3.1、1:5.1和1:10.1，收集石油醚和乙酸乙酯的体积比为3.1:1时的洗脱液，经薄层层析分析并合并相似组份，得到初组分A1；
(4)将初组分A1置于反相C18柱色谱中，采用甲醇与水作为洗脱剂进行梯度洗脱，甲醇与水的各梯度洗脱体积比为1.1:2、1.1:1、1.1:3和1:5.1，收集甲醇与水的体积比为1.1:2时的洗脱液，经薄层层析分析并合并相似组份，得到初组分A2；
(5)将初组分A2置于Sephadex LH-20柱色谱中，以氯仿:甲醇＝1.1:1作为流动相纯化得到结构式I所示的松香烷型二萜化合物Bracteatum A共8mg。
实施例5
一种药物组合物，该药物组合物含有包括药学上可接受的载体和如结构式I所示的松香烷型二萜化合物Bracteatum A，即12,16-环氧-17(15→16)-移-3,5,8,12-松香烷四烯-7,11,14-三酮。
当然，也可以选择松香烷型二萜化合物的药学上可接受的盐、立体异构体、水合物、溶剂化物或前药与药学上可接受的载体制备成药物组合物。
可以将上述不同形式的药物组合物以及松香烷型二萜化合物Bracteatum A应用在制备抗肿瘤细胞的药物上。
2、抗肿瘤性能测试
取实施例2制备的松香烷型二萜化合物Bracteatum A，即结构式I所示的12,16-环氧-17(15→16)-移-3,5,8,12-松香烷四烯-7,11,14-三酮作抗肿瘤能力测试，过程如下：
体外肿瘤细胞增殖抑制试验：取对数生长期肿瘤细胞，调整细胞悬液浓度(50000～100000个/毫升)，每孔100μl细胞悬液接种于96孔细胞培养板中，接种24h后给药(100μl/孔)，分别设空白对照组、细胞对照组以及6个浓度(3.12，6.25，12.5，25，50，100μmol/L)受试药物组，细胞对照组中的药物为顺铂，继续培养72h后每孔加入100μl MTT(1mg/ml，以DMEM培养液溶解)，37℃孵育4h，弃去各孔内液体后加入150μl酸化异丙醇(含0.04mol/LHCl)，避光放置30min，酶标仪测定570nm处吸光度，计算受试药物对肿瘤细胞的增殖抑制率，计算受试物对肿瘤细胞增殖(72h)的半数抑制浓度(IC50)，为减小实验误差带来的影响，进行三次试验测定，每次实验做三个平行。
2.1人原髓细胞白血病细胞HL-60
(1)顺铂对HL-60细胞的抑制作用，见表2.11、2.12和2.13。
表2.11顺铂对HL-60细胞的抑制作用平行测试一结果
Figure BDA0003040256790000071
由Graphpad Prism 6.0求得IC50＝11.87。
表2.12顺铂对HL-60细胞的抑制作用平行测试二结果
Figure BDA0003040256790000072
由Graphpad Prism 6.0求得IC50＝10.68。
表2.13顺铂对HL-60细胞的抑制作用平行测试三结果
Figure BDA0003040256790000073
Figure BDA0003040256790000081
由Graphpad Prism 6.0求得IC50＝12.57。
由以上数据可求得：顺铂的IC50＝11.70±0.95。
(2)化合物Bracteatum A对HL-60细胞的抑制作用，见表2.14、2.15和2.16。
表2.14化合物Bracteatum A对HL-60细胞的抑制作用平行测试一结果
Figure BDA0003040256790000082
由Graphpad Prism 6.0求得IC50＝19.23。
表2.15化合物Bracteatum A对HL-60细胞的抑制作用平行测试二结果
Figure BDA0003040256790000083
由Graphpad Prism 6.0求得IC50＝23.91。
表2.16化合物Bracteatum A对HL-60细胞的抑制作用平行测试二结果
Figure BDA0003040256790000084
由Graphpad Prism 6.0求得IC50＝20.52。
由以上数据可求得：Bracteatum A的IC50＝21.22±2.41。
2.2人肺癌细胞A549细胞
(1)顺铂对人肺癌细胞A549细胞的抑制作用，见表2.21、2.22和2.23。
表2.21顺铂对A549细胞的抑制作用平行测试一结果
Figure BDA0003040256790000091
由Graphpad Prism 6.0求得IC50＝16.42。
表2.22顺铂对A549细胞的抑制作用平行测试二结果
Figure BDA0003040256790000092
由Graphpad Prism 6.0求得IC50＝14.60。
表2.23顺铂对A549细胞的抑制作用平行测试三结果
Figure BDA0003040256790000093
由Graphpad Prism 6.0求得IC50＝14.79。
由以上数据可求得：顺铂的IC50＝15.27±1.00。
(2)化合物Bracteatum A对A549细胞的抑制作用，见表2.24、2.25和2.26。
表2.24化合物Bracteatum A对A549细胞的抑制作用平行测试一结果
Figure BDA0003040256790000094
由Graphpad Prism 6.0求得IC50＝12.18。
表2.25化合物Bracteatum A对A549细胞的抑制作用平行测试二结果
Figure BDA0003040256790000095
Figure BDA0003040256790000101
由Graphpad Prism 6.0求得IC50＝15.20。
表2.26化合物Bracteatum A对A549细胞的抑制作用平行测试二结果
Figure BDA0003040256790000102
由Graphpad Prism 6.0求得IC50＝13.77。
由以上数据可求得：Bracteatum A的IC50＝13.71±1.51。
2.3Bracteatum A和顺铂对两种癌细胞72小时半数抑制浓度IC50(μmol/L)见表3所示。
表3Bracteatum A和顺铂对两种癌细胞的72小时半数抑制浓度IC50(μmol/L)
肿瘤细胞 HL-60细胞 A-549细胞
Bracteatum A 21.22±2.41 13.71±1.51
顺铂 11.70±0.95 15.27±1.00
从上述表2.14～2.16和表2.24～2.26中可以看出，不同浓度的化合物BracteatumA对人肺癌细胞A549细胞和人原髓细胞白血病细胞HL-60均匀抑制作用，Bracteatum A在72h后的IC50值分别达到13.71±1.51和21.22±2.41μmol/L，表明对上述两种肿瘤细胞的生长具有较强的抑制作用，特别是对人肺癌细胞A549细胞的IC50值低于顺铂对照组，说明Bracteatum A对人肺癌细胞A549细胞有着极为显著的抑制作用。

Claims (10)

1.一种具有抗肿瘤作用的松香烷型二萜化合物，其特征在于，所述松香烷型二萜化合物的化学名称为12,16-环氧-17(15→16)-移-3,5,8,12-松香烷四烯-7,11,14-三酮，结构如下式I所示：
Figure FDA0003040256780000011
2.一种如权利要求1所述的松香烷型二萜化合物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)以苞花大青的风干枝条为原料，粉碎后有机溶剂浸提，低温减压浓缩得到浸膏；
(2)将浸膏和水混合得悬浊液，加入乙酸乙酯萃取，低温减压浓缩得到乙酸乙酯萃取相；
(3)采用硅胶柱层析分离乙酸乙酯萃取相，以石油醚-乙酸乙酯作为洗脱剂洗脱，收集石油醚和乙酸乙酯的体积比为2.9～3.1:1时对应的洗脱液，然后经薄层层析分析，合并相似组分得到初组分A1；
(4)将初组分A1经反相色谱柱分离，以甲醇水溶液洗脱，收集甲醇水体积比为1±0.1:2时对应的洗脱液，经薄层层析并合并相似组份得到初组分A2；
(5)将初组分A2经凝胶色谱柱分离，得到结构式I所示的松香烷型二萜化合物。
3.根据权利要求2所述的松香烷型二萜化合物的制备方法，其特征在于，步骤(1)中有机溶剂为体积分数≥80％的乙醇，加入量以苞花大青枝条质量计为10～20mL/g；浸提温度为65～75℃浸提，浸提2～3次，每次4～6小时；低温减压浓缩的温度为40～50℃，真空度为0.07～0.09MPa。
4.根据权利要求2所述的松香烷型二萜化合物的制备方法，其特征在于，步骤(2)中浸膏和水的质量比为1:1～3，乙酸乙酯与悬浊液体积比0.6～1:1，萃取2～4次。
5.根据权利要求2所述的松香烷型二萜化合物的制备方法，其特征在于，步骤(3)中石油醚-乙酸乙酯为梯度洗脱，石油醚和乙酸乙酯体积比依次为9.9～10.1:1、4.9～5.1:1、2.9～3.1:1、0.9～1.1:1、0.9～1.1:3、0.9～1.1:5和0.9～1.1:10。
6.根据权利要求2所述的松香烷型二萜化合物的制备方法，其特征在于，步骤(5)中所用反相色谱柱为反相C18色谱柱；甲醇水溶液为梯度洗脱，甲醇和水的体积比为1±0.1:2、1±0.1:1、1:3±0.1和1:5±0.1。
7.根据权利要求2所述的松香烷型二萜化合物的制备方法，其特征在于，步骤(6)中所用凝胶分离柱为Sephadex LH-20柱，洗脱液为氯仿:甲醇体积比为1:0.9～1.1的溶液。
8.一种药物组合物，其特征在于，所述药物组合物含有包括药学上可接受的载体和如权利要求1所述的松香烷型二萜化合物，或松香烷型二萜化合物的药学上可接受的盐、立体异构体、水合物、溶剂化物或前药。
9.如权利要求1所述的松香烷型二萜化合物或如权利要求8所述的药物组合物在制备抗肿瘤药物上的应用。
10.根据权利要求9所示的应用，其特征在于，所述肿瘤对应的肿瘤细胞至少为人肺癌细胞A549细胞和人原髓细胞白血病细胞HL-60细胞中的一种。
CN202110455130.4A 2021-04-26 2021-04-26 一种具有抗肿瘤作用的松香烷型二萜化合物、制备方法及药物组合物和应用 Active CN113307785B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202110455130.4A CN113307785B (zh) 2021-04-26 2021-04-26 一种具有抗肿瘤作用的松香烷型二萜化合物、制备方法及药物组合物和应用

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202110455130.4A CN113307785B (zh) 2021-04-26 2021-04-26 一种具有抗肿瘤作用的松香烷型二萜化合物、制备方法及药物组合物和应用

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN113307785A true CN113307785A (zh) 2021-08-27
CN113307785B CN113307785B (zh) 2022-09-23

Family

ID=77371176

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202110455130.4A Active CN113307785B (zh) 2021-04-26 2021-04-26 一种具有抗肿瘤作用的松香烷型二萜化合物、制备方法及药物组合物和应用

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN113307785B (zh)

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN114031579A (zh) * 2021-11-11 2022-02-11 沈阳药科大学 芫花花蕾中瑞香烷型二萜类化合物的制备和应用
CN115417837A (zh) * 2022-06-07 2022-12-02 新疆维吾尔自治区中药民族药研究所 神香草提取物中去甲戊烷型二萜成分及其制备方法和应用
CN117771237A (zh) * 2024-02-27 2024-03-29 南昌医学院 一种松香烷型二萜化合物的用途和制备方法

Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101880269A (zh) * 2010-06-30 2010-11-10 浙江工商大学 二萜单体及从大青中分离制备二萜单体的方法
CN102286065A (zh) * 2010-06-18 2011-12-21 中国科学院上海药物研究所 新型松香烷型二萜衍生物、其制备方法和应用
CN104557823A (zh) * 2013-10-15 2015-04-29 上海中医药大学 松香型二萜衍生物及其制备方法和应用
CN107344945A (zh) * 2016-11-15 2017-11-14 杭州师范大学 一种松香烷型二萜化合物及其制备方法和应用
US20180369165A1 (en) * 2017-06-12 2018-12-27 University Of South Carolina Deacetylnemorone Abietane Diterpenoids for Use in Cancer Treatment
CN109331001A (zh) * 2018-12-21 2019-02-15 徐小波 一种异海松酸在制备抗肿瘤药物中的应用

Patent Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102286065A (zh) * 2010-06-18 2011-12-21 中国科学院上海药物研究所 新型松香烷型二萜衍生物、其制备方法和应用
CN101880269A (zh) * 2010-06-30 2010-11-10 浙江工商大学 二萜单体及从大青中分离制备二萜单体的方法
CN104557823A (zh) * 2013-10-15 2015-04-29 上海中医药大学 松香型二萜衍生物及其制备方法和应用
CN107344945A (zh) * 2016-11-15 2017-11-14 杭州师范大学 一种松香烷型二萜化合物及其制备方法和应用
US20180369165A1 (en) * 2017-06-12 2018-12-27 University Of South Carolina Deacetylnemorone Abietane Diterpenoids for Use in Cancer Treatment
CN109331001A (zh) * 2018-12-21 2019-02-15 徐小波 一种异海松酸在制备抗肿瘤药物中的应用

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
WEN-XUAN WANG，ET AL.: ""Rearranged abietane diterpenoids from the roots of Clerodendrum trichotomum and their cytotoxicities against human tumor cells"", 《PHYTOCHEMISTRY》 *

Cited By (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN114031579A (zh) * 2021-11-11 2022-02-11 沈阳药科大学 芫花花蕾中瑞香烷型二萜类化合物的制备和应用
CN114031579B (zh) * 2021-11-11 2023-03-07 沈阳药科大学 芫花花蕾中瑞香烷型二萜类化合物的制备和应用
CN115417837A (zh) * 2022-06-07 2022-12-02 新疆维吾尔自治区中药民族药研究所 神香草提取物中去甲戊烷型二萜成分及其制备方法和应用
CN117771237A (zh) * 2024-02-27 2024-03-29 南昌医学院 一种松香烷型二萜化合物的用途和制备方法
CN117771237B (zh) * 2024-02-27 2024-05-03 南昌医学院 一种松香烷型二萜化合物的用途和制备方法

Also Published As

Publication number Publication date
CN113307785B (zh) 2022-09-23

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN113307785B (zh) 一种具有抗肿瘤作用的松香烷型二萜化合物、制备方法及药物组合物和应用
CN113336634B (zh) 一种17(15→16)-移-松香烷型二萜化合物、制备方法及药物组合物和应用
CN103191143B (zh) 一种强心苷化合物的用途
CN115838328A (zh) 一种松香烷型二萜化合物、制备方法、应用及抗肿瘤药物
CN101537027A (zh) 暗消藤抗肺癌活性提取物及其化合物的制备工艺
CN112898357B (zh) 金莲花中一种二萜苷类新化合物及其分离纯化方法和应用
CN115448827B (zh) 一种含末端双键的松香烷型二萜化合物及其制备方法和应用
CN109369399B (zh) 1,3-o-二阿魏酸酯-2-甲氧基丙二醇及其制备方法和应用
CN107082780B (zh) 一种具有吡咯骈异喹啉结构的生物碱及其制备方法与应用
CN115819213A (zh) 一种抗肿瘤活性化合物、提取分离方法、药物及用途
CN110903269B (zh) 一类杜松烷型倍半萜化合物及其制备方法
CN109456163B (zh) 一种具有对称结构的环烯酮类化合物及其制备方法和应用
CN106377523B (zh) 一种天然活性药物及其制备与应用
CN113149840B (zh) 一种山胡椒提取物及其制备方法和应用
CN106349021B (zh) 一种吉祥草中的化合物及其制备与应用
CN109180632A (zh) 一种从雷公藤中分离出的新化合物及其制备方法和医药用途
CN104398532B (zh) 一种强心苷化合物的用途
CN115716830B (zh) 一种苦参碱型生物碱及其制备方法与在制备具有抗肺癌作用的药物中的应用
CN111303185B (zh) 一种具有抑制肿瘤活性的化合物及其提取方法
CN104324043B (zh) 一种强心苷化合物的用途
CN114133422B (zh) 一种葫芦烷三萜类化合物及其制备方法和应用
CN110368407B (zh) 一种钩枝藤枝叶有效部位及其制备方法和应用
CN111470955B (zh) 一种具有抗肿瘤作用的菲类化合物、制备方法及应用
CN111393450B (zh) 一种具有抗肿瘤作用的二环氧型二萜化合物、制备方法及应用
CN109575089B (zh) 酰化葡萄糖类化合物及其药物组合物和制备方法与应用

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant