CN113115860A - 一种黑果腺肋花楸果渣的用途及其使用方法 - Google Patents

一种黑果腺肋花楸果渣的用途及其使用方法 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种黑果腺肋花楸果渣的用途及其使用方法，本发在仔猪的饲料中加入0.2％的黑果腺肋花楸果渣，从而有效降低了仔猪腹泻率，提高了其生长性能、血清和肝脏中GSH‑Px的活性。本发明公开了一种黑果腺肋花楸果渣的新用途，并为其在禽畜防病、促生长方面的应用提供了依据。

Description

一种黑果腺肋花楸果渣的用途及其使用方法
技术领域：
本发明属于养殖领域，具体涉及一种黑果腺肋花楸果渣的用途及其使用方法。
背景技术：
黑果腺肋花楸(Aroniamelanocarpa)原产于北美洲，属于蔷薇科的一个种。因口感较涩而较少直接食用，大多数都用来加工成果汁和果酱。我国于上世纪90年代引入该品种，随后由波兰和日本引进的优良菌株在我国北方地区大面积栽种。黑果腺肋花楸果渣是果汁加工过程中产生的副产品，仍含有丰富的生物活性物质，如花青素、原花青素等。果渣都是作为废料处理，其仍有很高的抗炎和抗氧化活性，具有良好的饲用开发价值。
黑果腺肋花楸具有多种生物活性，如抗糖尿病、抗肿瘤及保肝等。黑果腺肋花楸提取物还可以提高机体的抗氧化酶活性，并降低胆固醇、甘油三酯及血压。根据研究，在众多浆果中黑果腺肋花楸具有最高的抗氧化活性，而这很大程度上是由于其含有很高含量的多酚类化合物，如花青素、原花青素等。
黑果腺肋花楸果渣在猪养殖中应用还鲜有报道。
名词解释：
GSH-Px：谷胱甘肽过氧化物酶。
发明内容：
本发明的目的在于提供一种黑果腺肋花楸果渣的用途及其使用方法，本发明降低了仔猪腹泻率，提高了其生长性能、血清和肝脏中GSH-Px的活性。
为解决上述问题，本发明的技术方案是：
一种黑果腺肋花楸果渣的用途，所述黑果腺肋花楸果渣用作仔猪的饲料添加物或药物。
进一步的改进，所述黑果腺肋花楸果渣用作提高仔猪食量和日增重的饲料添加物。
进一步的改进，所述黑果腺肋花楸果渣用于制作提高仔猪血清中GSH-Px含量的药物或饲料添加物。
进一步的改进，所述黑果腺肋花楸果渣用于制作提高仔猪肝脏中GSH-Px含量的药物或饲料添加物。
进一步的改进，所述黑果腺肋花楸果渣用作提高仔猪GPx基因mRNA表达量的药物或饲料添加物。
进一步的改进，所述GPx基因包括GPx1基因和GPx4基因。
进一步的改进，所述黑果腺肋花楸果渣用于制作预防仔猪腹泻的药物或饲料添加物。
进一步的改进，所述仔猪为28-56日龄的仔猪。
进一步的改进，所述黑果腺肋花楸果渣由黑果腺肋花楸的果实经粉碎、过滤得到残渣，残渣干燥后得到黑果腺肋花楸果渣。
一种黑果腺肋花楸果渣的使用方法，在仔猪的饲料中加入黑果腺肋花楸果渣；所述黑果腺肋花楸果渣占仔猪的饲料质量的0.2％。
本发明的优点：
本发明降低了仔猪腹泻率，提高了其生长性能、血清和肝脏中GSH-Px的活性，为黑果腺肋花楸果渣在禽畜防病、促生长方面的应用提供了依据。
附图说明：
图1为黑果腺肋花楸果渣对肝脏中GPx1的mRNA相对表达量的影响(CON对照组，PC阳性对照组，AMP黑果腺肋花楸果渣组)。
图2为黑果腺肋花楸果渣对肝脏中GPx4的mRNA相对表达量的影响(CON对照组，PC阳性对照组，AMP黑果腺肋花楸果渣组)。
具体实施方式：
为使本发明的上述目的、特征和优点能够更加明显易懂，下面将结合附图对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。下面详细描述本申请的实施例，所述实施例的示例在附图中示出，其中自始至终相同或类似的标号表示相同或类似的元件或具有相同或类似功能的元件。下面通过参考附图描述的实施例是示例性的，旨在用于解释本申请，而不能理解为对本申请的限制。
实施例1
1材料与方法
1.1试验材料
本试验中的黑果花楸原料由吉林省楸之源生态科技有限公司提供，黑果花楸果渣由梨树黑土地健康食品有限公司生产。黑果花楸果渣营养成分见表1。
表1黑果腺肋花楸果渣营养成分
Figure BDA0003004052900000031
Figure BDA0003004052900000041
1.2试验设计
试验选用72头28日龄、初始体重为8.50±1.26kg的健康三元杂交(杜×长×大)断奶仔猪。随机分为3个处理，每处理6个重复，每个重复4头猪。试验期分为两个阶段，共28天，1-14天为第一阶段，15-28天为第二阶段。
试验饲粮组成见表2，各组饲粮营养水平都满足NRC(2012)推荐的标准。对照组饲粮饲喂玉米-豆粕基础饲粮；阳性对照组饲粮在基础饲粮基础上添加75mg/kg的金霉素；试验组饲粮添加了0.2％黑果腺肋花楸果渣。在第二阶段，每组饲粮添加三氧化二铬(0.3％)作为指示剂，用以测定营养物质消化率。
猪舍每栏配备自动饮水器及不锈钢食槽，圈舍环境温度控制在25±2℃，湿度控制在60±5％。所有仔猪自由采食和饮水，平日消毒、免疫及驱虫等工作按照饲养场常规进行，并按照测定指标记录日常数据。
表2.试验饲粮组成及营养水平(饲喂基础，％)
Figure BDA0003004052900000042
Figure BDA0003004052900000051
1)AMP，黑果腺肋花楸果渣。
2)预混料为每千克饲粮提供:维生素A,12,000IU；维生素B12,20.0μg；维生素E,30IU；维生素D3,3000IU；维生素K3,2.5mg；烟酸,40mg；核黄素,4.0mg；泛酸,12.5mg；叶酸,0.7mg；氯化胆碱,400mg；吡哆醇,3.0mg；硫胺素,2.5mg；生物素,70μg；锌,80mg；铁,100mg；碘,0.25mg；锰,30mg；铜,90mg；硒,0.15mg。
1.3样品收集
试验第13-14天及27-28天，收集每栏猪粪便样品100g置于-20℃保存，用于营养物质消化率测定，同时收集鲜粪样品于5mL冻存管中液氮保存，用于短链脂肪酸测定。第14天及28天，每栏中选择一头与平均体重相近的仔猪，使用真空采血管取10mL左右血液样品。收集完毕后静置2小时，4℃条件下，4000rpm离心15分钟即得血清样品。
试验结束后，每栏选取和平均体重相近的仔猪，每个处理从中选择4头进行屠宰试验。使用载玻片刮取空肠粘膜样品，及取得肝脏样品，立即置于液氮中用于消化酶和抗氧化酶活性和GPx基因的mRNA表达量测定。
1.4测定指标及方法
1.4.1生长性能及腹泻率
在试验第1天、14天和28天，08：00对仔猪进行空腹称重，同时，记录饲料消耗量。用以计算平均日采食量(ADFI)、平均日增重(ADG)、增重耗料比(G/F)。每日09:00和16:00，仔细检查每一头仔猪是否有腹泻情况并记录，试验结束后统计腹泻仔猪头数，腹泻率计算公式如下：
腹泻率(％)＝仔猪腹泻头次总和/(仔猪头数×试验天数)×1001.4.2化学成分测定
样品测定方法：干物质参照GB/T 6435-2006，粗蛋白质参照GB/T6432-1994、能量参照ISO 9831:1998、灰分参照GB/T 6438-2007、脂肪参照GB/T 6433-2006、中性洗涤纤维参照GB/T 20806-2006、酸性洗涤纤维参照NY/T 1459-2007。
1.4.3短链脂肪酸的测定
将鲜粪样品置于4℃条件下解冻，称取0.5g左右于10mL离心管中，加入8mL超纯水溶解，置于超声仪中超声30分钟后4℃，5000rpm条件下离心10分钟。吸取上清液稀释50倍后过滤，使用ICS3000型离子色谱仪(美国赛默飞)进行测定。
1.4.4血清生化指标
免疫球蛋白A(Immunoglobulin A,IgA)、免疫球蛋白M(ImmunoglobulinM,IgM)和免疫球蛋白G(Immunoglobulin G,IgG)使用A6型半自动生化仪进行测定(北京松上)。超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)、总抗氧化能力(Total antioxidantcapacity,T-AOC)、谷胱甘肽过氧化物酶(Glutathione peroxidase,GSH-Px)、过氧化氢酶(Catalase,CAT)及丙二醛(Malondialdehyde,MDA)测定方法按照试剂盒(南京建成)所列出的步骤进行操作。肠粘膜酶活性通过比色法，使用试剂盒(南京建成)进行测定。
1.4.5肝脏中GPx基因mRNA表达量检测
首先，使用RNA提取试剂盒(美国Invitrogen)提取RNA。其次，经过琼脂糖凝胶(1％)电泳检验RNA质量。再次，使用反转录试剂盒(日本Takara)将RNA反转录成cDNA。最后，使用7500荧光定量PCR仪(美国ABI)检测mRNA表达水平。PCR引物设计见表3。
表3荧光定量PCR基因引物序列
Figure BDA0003004052900000071
1.5统计分析
采用SAS数据分析软件(9.2版本)中的ANOVA进行方差分析，并以Tukey法进行多重比较，试验结果以“平均值±标准差”表示。P＜0.05表示差异显著，P<0.01表示差异极显著。
2结果与分析
2.1黑果腺肋花楸果渣对断奶仔猪生长性能的影响
如表4所示，试验仔猪初始体重差异不显著。各试验组仔猪末重差异极显著(P<0.05)。在试验前期，与对照组和阳性对照组相比，试验组显著增加了ADG(P<0.05)。与对照组相比，阳性对照组和试验组显著提高了ADFI(P<0.01)和腹泻率(P<0.01)。
在试验后期，与对照组相比，阳性对照组和试验组显著增加了ADFI(P<0.01)。从全期来看，与对照组相比，其余二组显著提高ADG(P<0.05)和ADFI(P<0.01)，且显著降低腹泻率(P<0.01)。平均日采食量(ADFI)、平均日增重(ADG)、增重耗料比(G/F)。
表4.黑果腺肋花楸果渣对断奶仔猪生长性能的影响
Figure BDA0003004052900000081
2.2黑果腺肋花楸果渣对断奶仔猪营养物质全肠道表观消化率的影响
如表5所示，在第28天，各组干物质、能量、粗蛋白质及有机物的营养物质消化率差异不显著。
表5.黑果腺肋花楸果渣对断奶仔猪营养物质消化率影响(％)
Figure BDA0003004052900000091
2.3黑果腺肋花楸果渣对断奶仔猪血清生化指标的影响
如表6所示，在试验第28天，添加了黑果腺肋花楸果渣的试验组与两个对照组相比，显著提高了血清中GSH-Px的含量。
表6.黑果腺肋花楸果渣对断奶仔猪血清免疫球蛋白和抗氧化指标的影响
Figure BDA0003004052900000092
2.4黑果腺肋花楸果渣对断奶仔猪粪便中短链脂肪酸的影响
如表7所示，在第14天及28天，各个处理组之间短链脂肪酸含量差异不显著。
表7.黑果腺肋花楸果渣对断奶仔猪粪便中短链脂肪酸的影响(mg/g)
Figure BDA0003004052900000093
Figure BDA0003004052900000101
2.5黑果腺肋花楸果渣对仔猪空肠和肝脏抗氧化酶活性的影响
如表8所示，与对照组相比，阳性对照组和试验组显著提高了仔猪肝脏中GSH-Px的含量(P<0.01)。
表8.黑果腺肋花楸果渣对断奶仔猪空肠和肝脏中抗氧化酶活性的影响
Figure BDA0003004052900000102
2.6黑果腺肋花楸果渣对仔猪空肠粘膜酶活性的影响
如表9所示，各个处理之间蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶活性差异不显著。
表9.黑果腺肋花楸果渣对断奶仔猪空肠粘膜酶活性的影响(U/mg)
Figure BDA0003004052900000103
2.7黑果腺肋花楸果渣对肝脏中GPx基因mRNA表达量的影响
如图1和图2所示，与对照组相比，黑果腺肋花楸果渣和阳性对照都显著提高了肝脏中GPx(P<0.01)的mRNA的表达。
3结论
与对照组相比，试验组能够显著提高仔猪的ADFI，可能是因为黑果腺肋花楸果渣所带有的特殊香味提高了饲粮适口性。同时，果渣显著降低了前期和全期的腹泻率，很大程度上因为黑果腺肋花楸果渣中含有的强抗氧化物质，如原花青素(9.53g/kg)和花青素(18.20g/kg)。
3结论
本发明中黑果腺肋花楸果渣可以降低仔猪腹泻率，提高生长性能、血清和肝脏中GSH-Px的活性。
上述实施例仅仅是本发明的一个具体实施方式，并不作为本发明的限定，任何对其进行的简单改进和替换均在本发明的保护范围内。

Claims (10)

1.一种黑果腺肋花楸果渣的用途，其特征在于，所述黑果腺肋花楸果渣用作仔猪的饲料添加物或药物。
2.根据权利要求1所述的一种黑果腺肋花楸果渣的用途，其特征在于，所述黑果腺肋花楸果渣用作提高仔猪食量和日增重的饲料添加物。
3.根据权利要求1所述的一种黑果腺肋花楸果渣的用途，其特征在于，所述黑果腺肋花楸果渣用于制作提高仔猪血清中GSH-Px含量的药物或饲料添加物。
4.根据权利要求1所述的一种黑果腺肋花楸果渣的用途，其特征在于，所述黑果腺肋花楸果渣用于制作提高仔猪肝脏中GSH-Px含量的药物或饲料添加物。
5.根据权利要求1所述的一种黑果腺肋花楸果渣的用途，其特征在于，所述黑果腺肋花楸果渣用于制作提高仔猪GPx基因mRNA表达量的药物或饲料添加物。
6.根据权利要求5所述的一种黑果腺肋花楸果渣的用途，其特征在于，所述GPx基因包括GPx1基因和GPx4基因。
7.根据权利要求1所述的一种黑果腺肋花楸果渣的用途，其特征在于，所述黑果腺肋花楸果渣用于制作预防仔猪腹泻的药物或饲料添加物。
8.根据权利要求1-7任一所述的一种黑果腺肋花楸果渣的用途，其特征在于，所述仔猪为28-56日龄的仔猪。
9.根据权利要求1所述的一种黑果腺肋花楸果渣的用途，其特征在于，所述黑果腺肋花楸果渣由黑果腺肋花楸的果实经粉碎、过滤得到残渣，残渣干燥后得到黑果腺肋花楸果渣。
10.一种黑果腺肋花楸果渣的使用方法，其特征在于，在仔猪的饲料中加入黑果腺肋花楸果渣；所述黑果腺肋花楸果渣占仔猪的饲料质量的0.2％。
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