CN116530618B - 一种山羊饲料及其制备方法和应用 - Google Patents
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Abstract
本发明提出了一种山羊饲料及其制备方法和应用，属于饲料技术领域。将玉米和大豆煮熟后酶解，过滤，得到滤渣和滤液，滤液干燥，得到玉米‑大豆酶解产物；将黄芪、厚朴、山楂、青蒿加水沸腾提取，过滤，得到中药滤渣和滤液，得到中药水提取物，将两次滤渣混合均匀，加水润湿，灭菌，制得固体发酵培养基，加入复合酶后，接种活化的植物乳杆菌和黑曲霉菌，发酵培养，再接种活化的富硒酵母菌，发酵培养，得到的产物与玉米‑大豆酶解产物、中药水提取物混合加入金属盐溶液反应，得到螯合产物，与牛磺酸、茶氨酸、玉米秸秆、小麦秸秆混合均匀，制得山羊饲料。增强抗氧化能力和机体免疫力，提高动物的生产性能并且提高奶量奶质，具有广阔的应用前景。
Description
技术领域
本发明涉及饲料技术领域，具体涉及一种山羊饲料及其制备方法和应用。
背景技术
近年来，随着养殖业的大力发展，饲料工业及饲养业也发展迅速，饲料品种日趋增多。传统饲料中大都添加了一些化学合成的促生长剂、抗生素、激素等物质，由于抗生素、激素等物质在动物体内的残留及耐药性等问题，无法满足人们对健康安全畜禽产品食品的要求，也影响到我国农副产品的出口。而我国创立的中草药物性理论及其丰富的实践，为天然物中草药饲料添加剂的开发提供了坚实基础和可靠依据，中草药作为天然物质，避免了其他类型添加剂所具有的缺陷。
山羊养殖是我国农业中的重要产业，对保障肉食品安全供应有重要作用，目前我国山羊养殖正由传统养羊向现代化养羊转变，无论是养殖模式、区域布局还是生产方式、生产能力都在发生显著变化。高度集约化的山羊养殖，给羊病防控、食品安全、环境保护等方面带来诸多挑战。特别是疫病防控和食品安全，面临的问题越来越严峻。羊场为了追求经济效益，在饲料中添加多种防治羊病的药物，其中有的药物在一定时间内会残留于山羊体内，给羊肉食用者的健康带来问题。
硒是人和动物的必需微量元素，具有清除自由基、抗氧化、降低血脂、提高免疫力等多种生物学功能。食品中硒量长期偏低，容易导致克山病、大骨节病、肌肉萎缩等病症的发生。此外，常见的癌症、心血管疾病、肝病、白内障、生育能力下降、前列腺癌等17种疾病也和缺硒有关。因此，富硒食品越来越受到消费者的热爱。
中国专利CN1225188C的专利公开了一种育肥生猪的中药饲料，其利用复方丹参制剂生产过程中的废料，即丹参药渣和三七药渣，经验证，加入中药药渣后的猪饲料具有消化率较高，育肥效果好，提高生猪出栏率，降低生猪的病死率的效果。可见，中药药渣在饲料中的应用适合广泛推广。
中国专利CN106343180B公开了一种用于提高黑山羊体重的饲料及其制备方法，属于饲料加工领域，包括如下组分：玉米40份-60份、麦麸8.55份-18.55份、豆粕12份-20份、菜籽粕5份-15份、菊花粉1份-10份、磷酸氢钙0.5份-1.5份、碳酸氢钠0.1份-0.3份、硫酸钠0.1份-0.2份、食盐0.5份-1.5份、微量元素预混料0.05份-0.15份，该饲料还包括多维Ⅱ号10g/50kg、赖氨酸25g/50kg、复合酶50g/50kg。该饲料提高了羊的日增重，缩短了羊出栏时间，提高养羊经济效益，降低羊的发病率和死亡率。但该发明存在成分种类较多，成本较高的缺陷。
发明内容
本发明的目的在于提出一种山羊饲料及其制备方法和应用，制备方法简单，原料来源广，成本低，经济实惠，且制得的山羊饲料能够调节动物肠道的微生态平衡，促进有益菌增殖，抑制有害菌生长，从而提高免疫抗病能力，为动物提供生长所需的基础营养，增强抗氧化能力和机体免疫力，提高动物的生产性能并且提高产奶量、奶质等，具有广阔的应用前景。
本发明的技术方案是这样实现的：
本发明提供一种山羊饲料的制备方法，将玉米和大豆煮熟后酶解，过滤，得到滤渣和滤液，滤液干燥，得到玉米-大豆酶解产物；将黄芪、厚朴、山楂、青蒿加水沸腾提取，过滤，得到中药滤渣和滤液，得到中药水提取物，将两次滤渣混合均匀，加水润湿，灭菌，制得固体发酵培养基，加入复合酶后，接种活化的植物乳杆菌和黑曲霉菌，发酵培养，再接种活化的富硒酵母菌，发酵培养，得到的产物与玉米-大豆酶解产物、中药水提取物混合加入金属盐溶液反应，得到螯合产物，与牛磺酸、茶氨酸、玉米秸秆、小麦秸秆混合均匀，制得山羊饲料。
作为本发明的进一步改进，包括以下步骤：
S1.基料的酶解：将玉米和大豆混合，加热煮熟，粉碎，干燥，得到基料粉，加入水中，加入复合蛋白酶酶解，过滤，得到滤渣和滤液，滤液冷冻干燥，得到玉米-大豆酶解产物；
S2.中药的水提取：将黄芪、厚朴、山楂、青蒿分别洗净，干燥，粉碎，得到中药粉，加水沸腾提取，过滤，得到中药滤渣和滤液，滤液干燥，得到中药水提取物；
S3.固体发酵培养基的制备：将步骤S1制得的滤渣、步骤S2制得的中药滤渣混合均匀，加水润湿，灭菌，制得固体发酵培养基；
S4.菌酶协同发酵：向步骤S3制得的固体发酵培养基中加入复合酶，搅拌混合均匀，接种活化的植物乳杆菌和黑曲霉菌，发酵培养，得到发酵产物；
S5.富硒发酵：向步骤S4中的发酵产物中接种活化的富硒酵母菌，发酵培养，得到第二次发酵产物；
S6.微量元素的螯合：将步骤S1制得的玉米-大豆酶解产物、步骤S2制得的中药水提取物和步骤S5制得的第二次发酵产物混合均匀，加入金属盐溶液，搅拌反应，冷冻干燥，得到螯合产物；
S7.山羊饲料的制备：将步骤S6制得的螯合产物、牛磺酸、茶氨酸、玉米秸秆、小麦秸秆混合均匀，制得山羊饲料。
作为本发明的进一步改进，步骤S1中所述玉米和大豆的质量比为5-7:3-5，所述复合蛋白酶选自木瓜蛋白酶、无花果蛋白酶、菠萝蛋白酶、中性蛋白酶、碱性蛋白酶、酸性蛋白酶、胰蛋白酶、胃蛋白酶中的至少一种，优选地，为木瓜蛋白酶、无花果蛋白酶的混合物，质量比为3-5:1-2。
作为本发明的进一步改进，步骤S2中所述黄芪、厚朴、山楂、青蒿的质量比为3-5:1-2:2-3:5-7，所述中药粉和水的固液比为1:5-7g/mL，所述沸腾提取的时间为2-3h。
作为本发明的进一步改进，步骤S3中所述滤渣和中药滤渣的质量比为5-7:3-5，所述加水润湿至含水量为40-60wt%，所述灭菌为紫外线灭菌。
作为本发明的进一步改进，步骤S4中所述固体发酵培养基、复合酶的质量比为35-40:3-5，所述复合酶选自纤维素酶、果胶酶、植酸酶、淀粉酶、蛋白酶中的至少一种，优选地，为纤维素酶和果胶酶的混合物，质量比为3-5:1，所述植物乳杆菌和黑曲霉菌的活化方法为将植物乳杆菌和黑曲霉菌分别接种至高氏培养基中，37-39℃，50-70r/min，活化培养12-16h，得到含菌量为108-109cfu/mL的菌种种子液，所述活化的植物乳杆菌和黑曲霉菌的接种量分别为2-3%和1-2%，所述发酵培养的条件为37-39℃，50-70r/min，发酵培养36-48h。
作为本发明的进一步改进，步骤S5中所述富硒酵母菌的活化方法为富硒酵母菌接种至高氏培养基中，36-38℃，50-70r/min，活化培养12-16h，得到含菌量为108-109cfu/mL的菌种种子液，所述活化的富硒酵母菌的接种量为0.5-1%，所述发酵培养的条件为36-38℃，50-70r/min，发酵培养24-36h。
作为本发明的进一步改进，步骤S6中所述玉米-大豆酶解产物、中药水提取物、第二次发酵产物、金属盐的质量比为7-10:3-5:25-30:3-5，所述金属盐选自氯化镁、氯化锌、氯化铁、氯化亚铁、氯化铜、氯化锰、硫酸镁、硫酸锌、硫酸锰、硫酸铁、硫酸亚铁中至少一种，优选地，为氯化锌和氯化铁的混合物，质量比为3-5:7；步骤S7中所述螯合产物、牛磺酸、茶氨酸、玉米秸秆、小麦秸秆的质量比为40-50:2-3:1-3:20-30:12-15。
本发明进一步保护一种上述的制备方法制得的山羊饲料。
本发明进一步保护一种上述的山羊饲料在提高山羊产奶量、提高奶汁质量以及提高山羊免疫力中的应用。
本发明具有如下有益效果：本发明玉米、大豆这种粮食饲料混合经过蛋白酶酶解，并在后续经过益生菌发酵，可明显改善原饲料的适口性。同时，酶解后的产物玉米-大豆酶解产物中含有大量的氨基酸，在后续金属盐螯合的过程中，能够产生氨基酸-金属螯合物，从而明显提高微量元素的吸收率，大大提高了山羊机体的免疫力以及产奶量和产奶的质量。
本发明将黄芪、厚朴、山楂、青蒿这4味中药混合发酵，可以显著增加山羊的肠道中双歧杆菌和乳酸杆菌的数量，并显著降低大肠杆菌的数量，使血清免疫球蛋白含量和溶菌酶活性呈剂量依赖型显著增加。还可以减少幼山羊的腹泻率，并显著提高生长性能。其中，将青蒿叶渣进行固体发酵，可使青蒿叶渣中粗蛋白以及双氢青蒿素、青蒿乙素的含量大幅提升，用作饲料添加剂饲喂山羊，使羊奶奶质得到改善，蛋白质含量更高，粪便成型且细腻，残渣明显减少。发酵能够增加部分中药中酯类成分的含量，掩盖中药原有的不良气味，进一步提高饲料的适口性。发酵可以使黄芪的脂溶性成分发生较大改变，新增苯乙醇等物质，这些变化可能为发酵黄芪香气增加的原因，从而使得发酵黄芪具有独特的香甜味，提高山羊的采食量。
本发明中，首先将中药组合物经过水提取，将溶于水的部分成分提取出来，药渣含有粗蛋白、粗纤维和淀粉等营养物质，若直接作为饲料添加剂使用，纤维素含量较多，动物的适口性差，且不益于营养成分的吸收。
发酵中药药渣可以降低纤维素的含量，提高蛋白质等营养物质的含量，从而易于山羊对中药药渣的食用和有效物质的吸收。因此，本发明将中药药渣进行发酵，发酵益生菌株可以增加中药中有效成分的含量，增强对患病动物的疗效，破坏植物类中药的细胞壁，更快、更好地发挥作用。发酵时，中药药渣中的部分有机物会被分解产生酸、醇、酮和醛等，也包括蛋白质和脂肪的复杂分解过程。发酵过程中可以降低中药药渣的毒性，提高药效，且不易产生耐药性，使用安全，得到快速吸收的产物。因此，发酵过程，可以使中药中的大分子转变为小分子物质，所含微生物促使饲料被更快速、充分地吸收。另外，饲料中添加发酵中药可以提高饲料利用率，节约饲喂成本。此外，发酵可以增加中药中有效成分的提取率，从而可以在保证效果的前提下使用更少量的药材，使得饲料的成本更低，价格更经济。
中药发酵中，微生物可以与中药产生的次级代谢产物，对中药的成分进行结构修饰和转化，在这个过程中会产生新的有效活性物质，同时可以对一些有毒物质进行转化，有效清除中草药中所含的霉菌毒素，成为低毒或无毒的新成分。发酵中药可以调节动物肠道的微生态平衡，促进有益菌增殖，抑制有害菌生长，从而提高免疫抗病能力。
采用植物乳杆菌和黑曲霉菌等复合益生菌，发酵中草药时，该发酵制剂可显著提高山羊泌乳量和乳蛋白率，显著降低患乳腺炎的体细胞数。
菌酶协同发酵技术在微生物发酵过程中，加入高活性酶制剂，对提高原料营养价值、提高益生菌菌群活力、促进机体生长和消化、增强免疫力具有显著功效。菌酶协同发酵是在微生物发酵基础上添加外来酶，包括纤维素酶和果胶酶，能够将中药药渣和基料药渣中大部分植物细胞的细胞壁破碎，促进内容物溶出，酶水解后的底物能够更好地被菌体利用，形成正向促进作用，将菌种潜力和底物利用率提升到最大。
本发明采用富硒酵母菌进行发酵，使得产物中含有丰富的硒元素，提高了山羊的免疫能力，也提高了山羊奶中硒的含量，使得奶质明显提高。
本发明将发酵产物与玉米-大豆酶解产物、中药水提取物一同与金属盐反应，形成氨基酸螯合微量元素、活性物质螯合微量元素，特别是铁和锌，不仅大大提高了微量元素的吸收率，而且可以增强杀灭有害菌的作用，同时，增强免疫应答，提高奶汁中微量元素的含量，大大提高了奶汁的营养价值。
茶氨酸有利于抗应激，同时，茶氨酸还可以是营养素和抗氧化剂，具有增强机体免疫力等功能；牛磺酸可以提高免疫球蛋白和白蛋白介素含量，增强机体免疫功能。小麦秸秆可以有效改善山羊奶的香甜口感，同时增强山羊对热应激的耐受性，并显著提高山羊中乳脂率和乳蛋白率，改善热应激状态下山羊产奶量下降的状况。
本发明制得的山羊饲料制备方法简单，原料来源广，成本低，经济实惠，且制得的山羊饲料能够调节动物肠道的微生态平衡，促进有益菌增殖，抑制有害菌生长，可以作为精补料，从而提高免疫抗病能力，为动物提供生长所需的基础营养，增强抗氧化能力和机体免疫力，提高动物的生产性能并且提高产奶量、奶质等，具有广阔的应用前景。
具体实施方式
下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
木瓜蛋白酶，FDG-2203，10万U/g，无花果蛋白酶；纤维素酶；果胶酶；
植物乳杆菌，为JYLP-326，100亿cfu/g，购于山东中科嘉亿生物工程有限公司；富硒酵母菌，100亿cfu/g，购于安琪酵母有限公司；黑曲霉菌，购于山东和众康源生物科技有限公司。
实施例1：本实施例提供一种山羊饲料的制备方法，包括以下步骤：
S1.基料的酶解：将5重量份玉米和3重量份大豆混合，加热煮熟，粉碎，干燥，得到基料粉，加入100重量份水中，加入0.5重量份复合蛋白酶酶解3h，过滤，得到滤渣和滤液，滤液冷冻干燥，得到玉米-大豆酶解产物；
所述复合蛋白酶为木瓜蛋白酶、无花果蛋白酶的混合物，质量比为3:1；
S2.中药的水提取：将3重量份黄芪、1重量份厚朴、2重量份山楂、5重量份青蒿分别洗净，干燥，粉碎，得到中药粉，加水沸腾提取2h，所述中药粉和水的固液比为1:5g/mL，过滤，得到中药滤渣和滤液，滤液干燥，得到中药水提取物；
S3.固体发酵培养基的制备：将5重量份步骤S1制得的滤渣、3重量份步骤S2制得的中药滤渣混合，搅拌20min，加水润湿至含水量为40wt%，紫外线灭菌，制得固体发酵培养基；
S4.菌酶协同发酵：向35重量份步骤S3制得的固体发酵培养基中加入3重量份复合酶，搅拌混合均匀，接种活化的植物乳杆菌和黑曲霉菌，接种量分别为2%和1%，37℃，50r/min，发酵培养36h，得到发酵产物；
所述复合酶为纤维素酶和果胶酶的混合物，质量比为3:1；
植物乳杆菌和黑曲霉菌的活化方法为将植物乳杆菌和黑曲霉菌分别接种至高氏培养基中，37℃，50r/min，活化培养12h，得到含菌量为108cfu/mL的菌种种子液；
S5.富硒发酵：向步骤S4中的发酵产物中接种活化的富硒酵母菌，接种量为0.5%，36℃，50r/min，发酵培养24h，得到第二次发酵产物；
所述富硒酵母菌的活化方法为富硒酵母菌接种至高氏培养基中，36℃，50r/min，活化培养12h，得到含菌量为108cfu/mL的菌种种子液；
S6.微量元素的螯合：将7重量份步骤S1制得的玉米-大豆酶解产物、3重量份步骤S2制得的中药水提取物和25重量份步骤S5制得的第二次发酵产物混合，搅拌20min，加入100重量份含3重量份金属盐的水溶液，搅拌反应30min，冷冻干燥，得到螯合产物；
所述金属盐为氯化锌和氯化铁的混合物，质量比为3:7；
S7.山羊饲料的制备：将40重量份步骤S6制得的螯合产物、2重量份牛磺酸、1重量份茶氨酸、20重量份玉米秸秆、12重量份小麦秸秆混合，搅拌20min，制得山羊饲料。
实施例2：本实施例提供一种山羊饲料的制备方法，包括以下步骤：
S1.基料的酶解：将7重量份玉米和5重量份大豆混合，加热煮熟，粉碎，干燥，得到基料粉，加入100重量份水中，加入1重量份复合蛋白酶酶解3h，过滤，得到滤渣和滤液，滤液冷冻干燥，得到玉米-大豆酶解产物；
所述复合蛋白酶为木瓜蛋白酶、无花果蛋白酶的混合物，质量比为5:2；
S2.中药的水提取：将5重量份黄芪、2重量份厚朴、3重量份山楂、7重量份青蒿分别洗净，干燥，粉碎，得到中药粉，加水沸腾提取3h，所述中药粉和水的固液比为1:7g/mL，过滤，得到中药滤渣和滤液，滤液干燥，得到中药水提取物；
S3.固体发酵培养基的制备：将7重量份步骤S1制得的滤渣、5重量份步骤S2制得的中药滤渣混合，搅拌20min，加水润湿至含水量为60wt%，紫外线灭菌，制得固体发酵培养基；
S4.菌酶协同发酵：向40重量份步骤S3制得的固体发酵培养基中加入5重量份复合酶，搅拌混合均匀，接种活化的植物乳杆菌和黑曲霉菌，接种量分别为3%和2%，39℃，70r/min，发酵培养48h，得到发酵产物；
所述复合酶为纤维素酶和果胶酶的混合物，质量比为5:1；
植物乳杆菌和黑曲霉菌的活化方法为将植物乳杆菌和黑曲霉菌分别接种至高氏培养基中，39℃，70r/min，活化培养16h，得到含菌量为109cfu/mL的菌种种子液；
S5.富硒发酵：向步骤S4中的发酵产物中接种活化的富硒酵母菌，接种量为1%，38℃，70r/min，发酵培养36h，得到第二次发酵产物；
所述富硒酵母菌的活化方法为富硒酵母菌接种至高氏培养基中，38℃，70r/min，活化培养16h，得到含菌量为109cfu/mL的菌种种子液；
S6.微量元素的螯合：将10重量份步骤S1制得的玉米-大豆酶解产物、5重量份步骤S2制得的中药水提取物和30重量份步骤S5制得的第二次发酵产物混合，搅拌20min，加入100重量份含5重量份金属盐的水溶液，搅拌反应40min，冷冻干燥，得到螯合产物；
所述金属盐为氯化锌和氯化铁的混合物，质量比为5:7；
S7.山羊饲料的制备：将50重量份步骤S6制得的螯合产物、3重量份牛磺酸、3重量份茶氨酸、30重量份玉米秸秆、15重量份小麦秸秆混合，搅拌20min，制得山羊饲料。
实施例3：本实施例提供一种山羊饲料的制备方法，包括以下步骤：
S1.基料的酶解：将6重量份玉米和4重量份大豆混合，加热煮熟，粉碎，干燥，得到基料粉，加入100重量份水中，加入0.7重量份复合蛋白酶酶解3h，过滤，得到滤渣和滤液，滤液冷冻干燥，得到玉米-大豆酶解产物；
所述复合蛋白酶为木瓜蛋白酶、无花果蛋白酶的混合物，质量比为4:1.5；
S2.中药的水提取：将4重量份黄芪、1.5重量份厚朴、2.5重量份山楂、6重量份青蒿分别洗净，干燥，粉碎，得到中药粉，加水沸腾提取2.5h，所述中药粉和水的固液比为1:6g/mL，过滤，得到中药滤渣和滤液，滤液干燥，得到中药水提取物；
S3.固体发酵培养基的制备：将6重量份步骤S1制得的滤渣、4重量份步骤S2制得的中药滤渣混合，搅拌20min，加水润湿至含水量为50wt%，紫外线灭菌，制得固体发酵培养基；
S4.菌酶协同发酵：向37重量份步骤S3制得的固体发酵培养基中加入4重量份复合酶，搅拌混合均匀，接种活化的植物乳杆菌和黑曲霉菌，接种量分别为2.5%和1.5%，38℃，60r/min，发酵培养42h，得到发酵产物；
所述复合酶为纤维素酶和果胶酶的混合物，质量比为4:1；
植物乳杆菌和黑曲霉菌的活化方法为将植物乳杆菌和黑曲霉菌分别接种至高氏培养基中，38℃，60r/min，活化培养14h，得到含菌量为109cfu/mL的菌种种子液；
S5.富硒发酵：向步骤S4中的发酵产物中接种活化的富硒酵母菌，接种量为0.7%，37℃，60r/min，发酵培养30h，得到第二次发酵产物；
所述富硒酵母菌的活化方法为富硒酵母菌接种至高氏培养基中，37℃，60r/min，活化培养14h，得到含菌量为109cfu/mL的菌种种子液；
S6.微量元素的螯合：将8.5重量份步骤S1制得的玉米-大豆酶解产物、4重量份步骤S2制得的中药水提取物和27重量份步骤S5制得的第二次发酵产物混合，搅拌20min，加入100重量份含4重量份金属盐的水溶液，搅拌反应35min，冷冻干燥，得到螯合产物；
所述金属盐为氯化锌和氯化铁的混合物，质量比为4:7；
S7.山羊饲料的制备：将45重量份步骤S6制得的螯合产物、2.5重量份牛磺酸、2重量份茶氨酸、25重量份玉米秸秆、13.5重量份小麦秸秆混合，搅拌20min，制得山羊饲料。
实施例4：与实施例3相比，不同之处在于，复合蛋白酶为单一的木瓜蛋白酶。
实施例5：与实施例3相比，不同之处在于，复合蛋白酶为单一的无花果蛋白酶。
实施例6：与实施例3相比，不同之处在于，复合酶为单一的纤维素酶。
实施例7：与实施例3相比，不同之处在于，复合酶为单一的果胶酶。
实施例8：与实施例3相比，不同之处在于，金属盐为单一的氯化锌。
实施例9：与实施例3相比，不同之处在于，金属盐为单一的氯化铁。
对比例1
与实施例3相比，不同之处在于，步骤S1中未进行酶解。
具体如下：
S1.基料的酶解：将6重量份玉米和4重量份大豆混合，加热煮熟，粉碎，干燥，得到基料粉。
对比例2
与实施例3相比，不同之处在于，步骤S2中未添加黄芪。
具体如下：
S2.中药的水提取：将1.5重量份厚朴、2.5重量份山楂、10重量份青蒿分别洗净，干燥，粉碎，得到中药粉，加水沸腾提取2.5h，所述中药粉和水的固液比为1:6g/mL，过滤，得到中药滤渣和滤液，滤液干燥，得到中药水提取物。
对比例3
与实施例3相比，不同之处在于，步骤S2中未添加青蒿。
具体如下：
S2.中药的水提取：将10重量份黄芪、1.5重量份厚朴、2.5重量份山楂分别洗净，干燥，粉碎，得到中药粉，加水沸腾提取2.5h，所述中药粉和水的固液比为1:6g/mL，过滤，得到中药滤渣和滤液，滤液干燥，得到中药水提取物。
对比例4
与实施例3相比，不同之处在于，步骤S2中未进行水提取。
具体如下：
S2.中药的水提取：将4重量份黄芪、1.5重量份厚朴、2.5重量份山楂、6重量份青蒿分别洗净，干燥，粉碎，得到中药粉。
对比例5
与实施例3相比，不同之处在于，步骤S3中未添加步骤S1制得的滤渣。
具体如下：
S3.固体发酵培养基的制备：将10重量份步骤S2制得的中药滤渣搅拌20min，加水润湿至含水量为50wt%，紫外线灭菌，制得固体发酵培养基。
对比例6
与实施例3相比，不同之处在于，步骤S3中未添加步骤S2制得的中药滤渣。
具体如下：
S3.固体发酵培养基的制备：将10重量份步骤S1制得的滤渣搅拌20min，加水润湿至含水量为50wt%，紫外线灭菌，制得固体发酵培养基。
对比例7
与实施例3相比，不同之处在于，步骤S4中未添加复合酶。
具体如下：
S4.菌酶协同发酵：向41重量份步骤S3制得的固体发酵培养基中接种活化的植物乳杆菌和黑曲霉菌，接种量分别为2.5%和1.5%，38℃，60r/min，发酵培养42h，得到发酵产物；
植物乳杆菌和黑曲霉菌的活化方法为将植物乳杆菌和黑曲霉菌分别接种至高氏培养基中，38℃，60r/min，活化培养14h，得到含菌量为109cfu/mL的菌种种子液。
对比例8
与实施例3相比，不同之处在于，步骤S4中未接种植物乳杆菌。
具体如下：
S4.菌酶协同发酵：向37重量份步骤S3制得的固体发酵培养基中加入4重量份复合酶，搅拌混合均匀，接种活化的黑曲霉菌，接种量为4%，38℃，60r/min，发酵培养42h，得到发酵产物；
所述复合酶为纤维素酶和果胶酶的混合物，质量比为4:1；
黑曲霉菌的活化方法为将黑曲霉菌接种至高氏培养基中，38℃，60r/min，活化培养14h，得到含菌量为109cfu/mL的菌种种子液。
对比例9
与实施例3相比，不同之处在于，步骤S4中未接种黑曲霉菌。
具体如下：
S4.菌酶协同发酵：向37重量份步骤S3制得的固体发酵培养基中加入4重量份复合酶，搅拌混合均匀，接种活化的植物乳杆菌，接种量为4%，38℃，60r/min，发酵培养42h，得到发酵产物；
所述复合酶为纤维素酶和果胶酶的混合物，质量比为4:1；
植物乳杆菌的活化方法为将植物乳杆菌接种至高氏培养基中，38℃，60r/min，活化培养14h，得到含菌量为109cfu/mL的菌种种子液。
对比例10
与实施例3相比，不同之处在于，步骤S4中未接种植物乳杆菌和黑曲霉菌。
具体如下：
S4.菌酶协同发酵：向37重量份步骤S3制得的固体发酵培养基中加入4重量份复合酶，搅拌混合均匀，38℃，60r/min，搅拌反应42h，得到产物；
所述复合酶为纤维素酶和果胶酶的混合物，质量比为4:1。
对比例11
与实施例3相比，不同之处在于，未进行步骤S5。
具体如下：
S1.基料的酶解：将6重量份玉米和4重量份大豆混合，加热煮熟，粉碎，干燥，得到基料粉，加入100重量份水中，加入0.7重量份复合蛋白酶酶解3h，过滤，得到滤渣和滤液，滤液冷冻干燥，得到玉米-大豆酶解产物；
所述复合蛋白酶为木瓜蛋白酶、无花果蛋白酶的混合物，质量比为4:1.5；
S2.中药的水提取：将4重量份黄芪、1.5重量份厚朴、2.5重量份山楂、6重量份青蒿分别洗净，干燥，粉碎，得到中药粉，加水沸腾提取2.5h，所述中药粉和水的固液比为1:6g/mL，过滤，得到中药滤渣和滤液，滤液干燥，得到中药水提取物；
S3.固体发酵培养基的制备：将6重量份步骤S1制得的滤渣、4重量份步骤S2制得的中药滤渣混合，搅拌20min，加水润湿至含水量为50wt%，紫外线灭菌，制得固体发酵培养基；
S4.菌酶协同发酵：向37重量份步骤S3制得的固体发酵培养基中加入4重量份复合酶，搅拌混合均匀，接种活化的植物乳杆菌和黑曲霉菌，接种量分别为2.5%和1.5%，38℃，60r/min，发酵培养42h，得到发酵产物；
所述复合酶为纤维素酶和果胶酶的混合物，质量比为4:1；
植物乳杆菌和黑曲霉菌的活化方法为将植物乳杆菌和黑曲霉菌分别接种至高氏培养基中，38℃，60r/min，活化培养14h，得到含菌量为109cfu/mL的菌种种子液；
S5.微量元素的螯合：将8.5重量份步骤S1制得的玉米-大豆酶解产物、4重量份步骤S2制得的中药水提取物和27重量份步骤S4制得的发酵产物混合，搅拌20min，加入100重量份含4重量份金属盐的水溶液，搅拌反应35min，冷冻干燥，得到螯合产物；
所述金属盐为氯化锌和氯化铁的混合物，质量比为4:7；
S6.山羊饲料的制备：将45重量份步骤S5制得的螯合产物、2.5重量份牛磺酸、2重量份茶氨酸、25重量份玉米秸秆、13.5重量份小麦秸秆混合，搅拌20min，制得山羊饲料。
对比例12
与实施例3相比，不同之处在于，未进行步骤S6。
具体如下：
S1.基料的酶解：将6重量份玉米和4重量份大豆混合，加热煮熟，粉碎，干燥，得到基料粉，加入100重量份水中，加入0.7重量份复合蛋白酶酶解3h，过滤，得到滤渣和滤液，滤液冷冻干燥，得到玉米-大豆酶解产物；
所述复合蛋白酶为木瓜蛋白酶、无花果蛋白酶的混合物，质量比为4:1.5；
S2.中药的水提取：将4重量份黄芪、1.5重量份厚朴、2.5重量份山楂、6重量份青蒿分别洗净，干燥，粉碎，得到中药粉，加水沸腾提取2.5h，所述中药粉和水的固液比为1:6g/mL，过滤，得到中药滤渣和滤液，滤液干燥，得到中药水提取物；
S3.固体发酵培养基的制备：将6重量份步骤S1制得的滤渣、4重量份步骤S2制得的中药滤渣混合，搅拌20min，加水润湿至含水量为50wt%，紫外线灭菌，制得固体发酵培养基；
S4.菌酶协同发酵：向37重量份步骤S3制得的固体发酵培养基中加入4重量份复合酶，搅拌混合均匀，接种活化的植物乳杆菌和黑曲霉菌，接种量分别为2.5%和1.5%，38℃，60r/min，发酵培养42h，得到发酵产物；
所述复合酶为纤维素酶和果胶酶的混合物，质量比为4:1；
植物乳杆菌和黑曲霉菌的活化方法为将植物乳杆菌和黑曲霉菌分别接种至高氏培养基中，38℃，60r/min，活化培养14h，得到含菌量为109cfu/mL的菌种种子液；
S5.富硒发酵：向步骤S4中的发酵产物中接种活化的富硒酵母菌，接种量为0.7%，37℃，60r/min，发酵培养30h，得到第二次发酵产物；
所述富硒酵母菌的活化方法为富硒酵母菌接种至高氏培养基中，37℃，60r/min，活化培养14h，得到含菌量为109cfu/mL的菌种种子液；
S6.山羊饲料的制备：将45重量份混合物（包括步骤S1制得的玉米-大豆酶解产物、步骤S2制得的中药水提取物和步骤S5制得的第二次发酵产物，质量比为8.5:4:27）、2.5重量份牛磺酸、2重量份茶氨酸、25重量份玉米秸秆、13.5重量份小麦秸秆混合，搅拌20min，制得山羊饲料。
对比例13
与实施例3相比，不同之处在于，步骤S7中未添加牛磺酸。
具体如下：
S7.山羊饲料的制备：将45重量份步骤S6制得的螯合产物、4.5重量份茶氨酸、25重量份玉米秸秆、13.5重量份小麦秸秆混合，搅拌20min，制得山羊饲料。
对比例14
与实施例3相比，不同之处在于，步骤S7中未添加茶氨酸。
具体如下：
S7.山羊饲料的制备：将45重量份步骤S6制得的螯合产物、4.5重量份牛磺酸、25重量份玉米秸秆、13.5重量份小麦秸秆混合，搅拌20min，制得山羊饲料。
对比例15
与实施例3相比，不同之处在于，步骤S7中未添加小麦秸秆。
具体如下：
S7.山羊饲料的制备：将45重量份步骤S6制得的螯合产物、2.5重量份牛磺酸、2重量份茶氨酸、38.5重量份玉米秸秆混合，搅拌20min，制得山羊饲料。
测试例1
选择60只胎次（2胎）和泌乳期（150 d）相同的关中奶山羊作为试验对象，随机分成20组，每个组3只奶山羊。分别为实施例1-9组、对比例1-15组、空白对照组。空白对照组饲喂基础日粮；实施例1-9组、对比例1-15组饲喂本发明实施例1-9或对比例1-15制得的山羊饲料。基础日粮包括：狗尾草甘草42wt%、玉米30wt%、麸皮9wt%、豆粕12wt%、胡麻粕6wt%、苏打0.5wt%、食盐0.5wt%。试验开始前先对羊舍、食槽、水槽、运动场进行全面清洁、消毒，经7d预试期后开始正式试验，试验期42d，每天早上6:00、中午2:00和下午5:00投喂饲料，每天共饲喂3次，羊饮水自由，采食后可在运动场内自由活动。
1、采食量及日增重
试验期内每天定时记录试验羊投喂饲料量和料槽剩料量，计算平均采食量。并于试验开始期和试验结束后的早上7:00空腹称量试验羊体重，计算试验期内羊平均日增。结果见表1。
表1
注释：为与正常对照组相比，P<0.05。
由上表可知，奶山羊对本发明实施例1-3制得的山羊饲料的采食量大，日增重提高。
2、产奶量
试验期间每天早上6:30和下午5:00挤奶，记录每只羊的产奶量，计算平均日产奶量。结果见表2。
表2
注释：为与正常对照组相比，P<0.05。
由上表可知，奶山羊食用本发明实施例1-3制得的山羊饲料后产奶量明显提高。
3、奶质分析
将最末次收集的奶样进行氨基酸及脂肪酸检测，采用GB 5009.124-2016《食品安全国家标准食品中氨基酸的测定》检测羊奶样品中氨基酸的总含量；采用GB 5009.168-2016《食品安全国家标准食品中脂肪酸的测定》检测羊奶样品中脂肪酸的总含量。使用乳成分分析仪乳蛋白率的检测。结果见表3。
表3
注释：为与正常对照组相比，P<0.05。
由上表可知，食用本发明实施例1-3制得的山羊饲料后的奶山羊的奶质明显提高，氨基酸、脂肪酸含量明显提高，乳蛋白率提高。
4、血清生化指标的检测
试验第一天和最后一天清晨空腹称重，并逐一通过颈静脉采血，离心，制备血清，进行血清生化指标测定。指标包括白蛋白（ALB）、超氧化物歧化酶（SOD）、白细胞介素2（IL-2）等，测定方法参照试剂盒说明书。结果见表4。
表4
注释：为与正常对照组相比，P<0.05。
由上表可知，食用本发明实施例1-3制得的山羊饲料后的奶山羊中白蛋白、超氧化物歧化酶、白细胞介素2明显提高，免疫力明显增强。
实施例4、5与实施例3相比，复合蛋白酶为单一的木瓜蛋白酶或无花果蛋白酶。对比例1与实施例3相比，步骤S1中未进行酶解。对比例5与实施例3相比，步骤S3中未添加步骤S1制得的滤渣。产奶量下降，奶质下降，且山羊血清的白蛋白、超氧化物歧化酶、白细胞介素2指标下降。本发明玉米、大豆这种粮食饲料混合经过蛋白酶酶解，并在后续经过益生菌发酵，可明显改善原饲料的适口性。同时，酶解后的产物玉米-大豆酶解产物中含有大量的氨基酸，在后续金属盐螯合的过程中，能够产生氨基酸-金属螯合物，从而明显提高微量元素的吸收率，大大提高了山羊机体的免疫力以及产奶量和产奶的质量。
实施例6、7与实施例3相比，复合酶为单一的纤维素酶或果胶酶。对比例7与实施例3相比，步骤S4中未添加复合酶。日增重下降，采食量下降，且山羊血清的白蛋白、超氧化物歧化酶、白细胞介素2指标下降。菌酶协同发酵技术在微生物发酵过程中，加入高活性酶制剂，对提高原料营养价值、提高益生菌菌群活力、促进机体生长和消化、增强免疫力具有显著功效。菌酶协同发酵是在微生物发酵基础上添加外来酶，包括纤维素酶和果胶酶，能够将中药药渣和基料药渣中大部分植物细胞的细胞壁破碎，促进内容物溶出，酶水解后的底物能够更好地被菌体利用，形成正向促进作用，将菌种潜力和底物利用率提升到最大。
实施例8、9与实施例3相比，金属盐为单一的氯化锌或氯化铁。对比例12与实施例3相比，未进行步骤S6。奶质下降，且山羊血清的白蛋白、超氧化物歧化酶、白细胞介素2指标下降。本发明将发酵产物与玉米-大豆酶解产物、中药水提取物一同与金属盐反应，形成氨基酸螯合微量元素、活性物质螯合微量元素，特别是铁和锌，不仅大大提高了微量元素的吸收率，而且可以增强杀灭有害菌的作用，同时，增强免疫应答，提高奶汁中微量元素的含量，大大提高了奶汁的营养价值。
对比例2、3与实施例3相比，步骤S2中未添加黄芪或青蒿。对比例4与实施例3相比，步骤S2中未进行水提取。对比例6与实施例3相比，步骤S3中未添加步骤S2制得的中药滤渣。日增重下降，采食量下降，产奶量下降，奶质下降，且山羊血清的白蛋白、超氧化物歧化酶、白细胞介素2指标下降。本发明将黄芪、厚朴、山楂、青蒿这4味中药混合发酵，可以显著增加山羊的肠道中双歧杆菌和乳酸杆菌的数量，并显著降低大肠杆菌的数量，使血清免疫球蛋白含量和溶菌酶活性呈剂量依赖型显著增加。还可以减少幼山羊的腹泻率，并显著提高生长性能。其中，将青蒿叶渣进行固体发酵，可使青蒿叶渣中粗蛋白以及双氢青蒿素、青蒿乙素的含量大幅提升，用作饲料添加剂饲喂山羊，使羊奶奶质得到改善，蛋白质含量更高，粪便成型且细腻，残渣明显减少。发酵能够增加部分中药中酯类成分的含量，掩盖中药原有的不良气味，进一步提高饲料的适口性。发酵可以使黄芪的脂溶性成分发生较大改变，新增苯乙醇等物质，这些变化可能为发酵黄芪香气增加的原因，从而使得发酵黄芪具有独特的香甜味，提高山羊的采食量。
对比例8、9与实施例3相比，步骤S4中未接种植物乳杆菌或黑曲霉菌。对比例10与实施例3相比，步骤S4中未接种植物乳杆菌和黑曲霉菌。日增重下降，采食量下降，产奶量下降，奶质下降，且山羊血清的白蛋白、超氧化物歧化酶、白细胞介素2指标下降。本发明采用植物乳杆菌和黑曲霉菌等复合益生菌，发酵中草药时，该发酵制剂可显著提高山羊泌乳量和乳蛋白率，显著降低患乳腺炎的体细胞数。
对比例11与实施例3相比，未进行步骤S5。日增重下降，且山羊血清的白蛋白、超氧化物歧化酶、白细胞介素2指标下降。本发明采用富硒酵母菌进行发酵，使得产物中含有丰富的硒元素，提高了山羊的免疫能力，也提高了山羊奶中硒的含量，使得奶质明显提高。
对比例13与实施例3相比，步骤S7中未添加牛磺酸。日增重下降，山羊血清的白蛋白、超氧化物歧化酶、白细胞介素2指标下降。本发明添加牛磺酸可以提高免疫球蛋白和白蛋白介素含量，增强机体免疫功能。
对比例14与实施例3相比，步骤S7中未添加茶氨酸。日增重下降，山羊血清的白蛋白、超氧化物歧化酶、白细胞介素2指标下降。本发明添加的茶氨酸有利于抗应激，同时，茶氨酸还可以是营养素和抗氧化剂，具有增强机体免疫力等功能。
对比例15与实施例3相比，步骤S7中未添加小麦秸秆。日增重下降，产奶量下降，奶质下降。本发明添加的小麦秸秆可以有效改善山羊奶的香甜口感，同时增强山羊对热应激的耐受性，并显著提高山羊中乳脂率和乳蛋白率，改善热应激状态下山羊产奶量下降的状况。
以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (3)
1.一种山羊饲料的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
S1.基料的酶解：将玉米和大豆混合，加热煮熟，粉碎，干燥，得到基料粉，加入水中，加入复合蛋白酶酶解，过滤，得到滤渣和滤液，滤液冷冻干燥，得到玉米-大豆酶解产物；所述玉米和大豆的质量比为5-7:3-5，所述复合蛋白酶为木瓜蛋白酶、无花果蛋白酶的混合物，质量比为3-5:1-2；
S2.中药的水提取：将黄芪、厚朴、山楂、青蒿分别洗净，干燥，粉碎，得到中药粉，加水沸腾提取，过滤，得到中药滤渣和滤液，滤液干燥，得到中药水提取物；所述黄芪、厚朴、山楂、青蒿的质量比为3-5:1-2:2-3:5-7，所述中药粉和水的固液比为1:5-7g/mL，所述沸腾提取的时间为2-3h；
S3.固体发酵培养基的制备：将步骤S1制得的滤渣、步骤S2制得的中药滤渣混合均匀，加水润湿，灭菌，制得固体发酵培养基；所述滤渣和中药滤渣的质量比为5-7:3-5，所述加水润湿至含水量为40-60wt%，所述灭菌为紫外线灭菌；
S4.菌酶协同发酵：向步骤S3制得的固体发酵培养基中加入复合酶，搅拌混合均匀，接种活化的植物乳杆菌和黑曲霉菌，发酵培养，得到发酵产物；所述固体发酵培养基、复合酶的质量比为35-40:3-5，所述复合酶为纤维素酶和果胶酶的混合物，质量比为3-5:1，所述植物乳杆菌和黑曲霉菌的活化方法为将植物乳杆菌和黑曲霉菌分别接种至高氏培养基中，37-39℃，50-70r/min，活化培养12-16h，得到含菌量为108-109cfu/mL的菌种种子液，所述活化的植物乳杆菌和黑曲霉菌的接种量分别为2-3%和1-2%，所述发酵培养的条件为37-39℃，50-70r/min，发酵培养36-48h；
S5.富硒发酵：向步骤S4中的发酵产物中接种活化的富硒酵母菌，发酵培养，得到第二次发酵产物；所述富硒酵母菌的活化方法为富硒酵母菌接种至高氏培养基中，36-38℃，50-70r/min，活化培养12-16h，得到含菌量为108-109cfu/mL的菌种种子液，所述活化的富硒酵母菌的接种量为0.5-1%，所述发酵培养的条件为36-38℃，50-70r/min，发酵培养24-36h；
S6.微量元素的螯合：将步骤S1制得的玉米-大豆酶解产物、步骤S2制得的中药水提取物和步骤S5制得的第二次发酵产物混合均匀，加入金属盐溶液，搅拌反应，冷冻干燥，得到螯合产物；所述玉米-大豆酶解产物、中药水提取物、第二次发酵产物、金属盐的质量比为7-10:3-5:25-30:3-5，所述金属盐为氯化锌和氯化铁的混合物，质量比为3-5:7；
S7.山羊饲料的制备：将步骤S6制得的螯合产物、牛磺酸、茶氨酸、玉米秸秆、小麦秸秆混合均匀，制得山羊饲料；所述螯合产物、牛磺酸、茶氨酸、玉米秸秆、小麦秸秆的质量比为40-50:2-3:1-3:20-30:12-15。
2.一种如权利要求1所述的制备方法制得的山羊饲料。
3.一种如权利要求2所述的山羊饲料在提高山羊产奶量、提高奶汁质量中的应用。
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