CN112972647A - 一种组合物在防治酒精性脑损伤中的应用 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种组合物在防治酒精性脑损伤中的应用，属于生物医药技术领域，本发明提供一种组合物在制备防治酒精性脑损伤的药物制剂中的应用，该组合物以重量份计，包括以下组分：海藻多酚10～30份、海藻酸钠2～6份、鲍鱼肽30～55份和亚精胺0.5～3份；本发明将具有抗氧化、抗菌功能的海藻多酚和富含多种营养、多重生物功效的鲍鱼肽组合，经动物试验证明，该组合物在酒精性脑损伤的防治中发挥多途径、多靶点、协同增效作用，同时本发明具有良好的产品稳定性，生物利用度高，而且安全无毒、服用方便，无不良气味，依从性好。

Description

一种组合物在防治酒精性脑损伤中的应用

技术领域

本发明涉及生物医药技术领域，特别是涉及一种组合物在防治酒精性脑损伤中的应用。

背景技术

随着社会的进步和经济水平的快速发展，我国人民的生活水平得到了显著改善，对于酒精消费的需求越来越多，慢性酒精病成为全球公共卫生问题之一。酒精对身体器官及其各系统的影响主要通过肝脏代谢蔓延到肝脏以外，包括中枢神经系统、心血管系统、免疫系统、肾脏、肺、胃肠道、胰腺等器官。

长期喝酒的人大脑皮质会处于麻醉状态，对神经系统的损伤，表现为一系列思维及行为释放状态，如患者理智障碍、易冲动、共济失调、语无伦次、呕吐、嗜睡等，重者可引起癫痫、抽搐甚至死亡。酒精干扰组织氧化应激防御系统，引起细胞膜中类脂和蛋白质的结构变化，改变神经细胞膜的流动性和三磷酸腺苷的活性，阻碍钙的运输，引起神经细胞功能障碍，导致神经细胞死亡。作为一种亲脂性小分子毒性物质，酒精对中枢神经和周围神经均可造成损伤，尤其容易透过血脑屏障作用于脑部，造成大脑神经细胞的损伤。目前，由于酒精引起的脑疾病发生率持续增高，但酒精对脑的损伤机制和对脑的保护作用的产品却研究较少，因此，找到一种高效防治酒精性脑损伤的解酒制品具有市场价值。

现有技术中公开了多种防治酒精性脑损伤的物质，如中国专利CN201510956371.1公开了一种缓解酒精性肝、脑和心损伤的袋泡茶组合物，主要由葛根、山楂、枳椇子、菊花、芦根和木瓜组成，具有保护酒精性肝、心损伤的作用。中国专利CN201310692332.6公开了白藜芦醇苷在制备治疗慢性酒精中毒脑损药物中的应用，主要由白藜芦醇苷组成，具有对慢性酒精中毒的神经保护作用。中国专利CN201510915401.4公开了黑线银胶提取物在酒精性脑损伤保护药物中的应用，主要由黑线银胶提取物组成，具有对酒精中毒大鼠脑损伤的保护作用。这些物质多数疗效广泛，能增加体内抗氧化物酶活性，降低脑的氧化损伤，但难以说明酒精性脑损伤的保护机制，且抗氧化活性物质生物利用度低。

发明内容

本发明的目的是提供一种组合物在防治酒精性脑损伤中的应用，以解决上述现有技术存在的问题，该组合物配方简单，稳定性好，抗氧化性强，防治酒精性脑损伤效果好，而且服用方便。

为实现上述目的，本发明提供了如下方案：

本发明提供一种组合物在制备防治酒精性脑损伤的药物制剂中的应用，所述组合物以重量份计，包括以下组分：海藻多酚10～30份、海藻酸钠2～6份、鲍鱼肽30～55份和亚精胺0.5～3份。

其中，海藻多酚是从海藻中提取出来的多酚类化合物，主要成分是间苯三酚及其衍生物，其羟基是具有抗氧化活性的重要基团。由于海藻多酚具有直接或间接清除自由基和活性氧的能力，被认为是预防或减少慢性疾病的天然抗氧化剂。但多酚类物质稳定性差，体内生物利用度低。

海藻酸钠是一类从海洋中提取的生物高分子材料，具有生物相容性、亲水性、无毒等优点，可在温和条件下通过电离作用形成水凝胶，通常采用物理交联、化学交联、酶交联等方式制备海藻酸水凝胶，广泛应用于药物活性肽和蛋白质的控制释放系统。

鲍鱼肽是鲍鱼肉经过酶解制成，其氨基酸种类齐全、配比合理，被誉为海洋“软黄金”。鲍鱼中EPA、DHA、微量元素、牛磺酸及超氧化物歧化酶等营养成分丰富，具有抗氧化、增强免疫力、抗疲劳等作用。

亚精胺是一种天然存在的多胺，是一种安全、高效的细胞自噬诱导剂，几乎存在于所有细胞中，具有抗衰老、抗癌、保护心血管和神经等作用。亚精胺有利于辅助药物输送，提高药物分子的水溶解度、稳定性和膜渗透能力从而进一步提高药物在生物体内的吸收。

本发明是将海藻酸盐和亚精胺与具有抗氧化、抗菌功能的海藻多酚通过共混，制成海藻多酚颗粒。亚精胺分子含有三个氨基，两端和中间的氨基可以分别与海藻酸钠、海藻多酚相连接，对海藻多酚形成“伞”式保护结构，提高产品的稳定性。海藻多酚颗粒和富含多种营养与多重功效的鲍鱼肽通过氢键、静电、π-π堆叠等多重非共价键作用，形成复配组合物，通过多种途径、多个靶点，对酒精性脑损伤的防治产生对协同增效作用。当组合物进入胃中，海藻酸钠在胃酸的作用下形成海藻酸胶体，包裹海藻多酚和鲍鱼肽，避免在体内复杂环境下活性的丧失；在肠道中海藻酸转换为离子盐状态，持续释放海藻多酚和鲍鱼肽，发挥持久活性，提高其生物利用度。

所述海藻多酚来源于可食用大型海藻，包括海带、昆布、马尾藻、龙须菜、羊栖菜、裙带菜或江蓠。所述海藻多酚的提取方法可按本领域海藻多酚的常规提取方法进行。优选的，本发明所采用的海藻多酚中总酚重量含量不少于30％。

所述鲍鱼肽是采用鲍鱼肉经生物酶解制备得到的复合肽。所述鲍鱼肽的酶解方法可按本领域的常规方法酶解进行。优选的，本发明所采用的鲍鱼肽的分子量分布范围为：分子量>3.0kDa多肽含量为2.15％，分子量1.0～3.0kDa多肽含量为16.59％，分子量<1.0kDa多肽含量为81.26％。

进一步地，所述组合物以重量份计，包括以下组分：海藻多酚20份、海藻酸钠4份、鲍鱼肽40份和亚精胺1.5份。

进一步地，所述组合物的制备方法，包括以下步骤：

S1.取海藻酸钠加入水中配制成海藻酸钠溶液，调节溶液pH6.0-7.5，加入亚精胺，室温搅拌5-8小时，冰水浴处理，待溶液体系降温至5-10℃，加入海藻多酚，继续搅拌1-3小时，冷冻干燥，液氮碎化，得到海藻多酚复合粉粒；

S2.用水溶解鲍鱼肽，制成鲍鱼肽溶液，在搅拌状态下加入所述海藻多酚复合粉粒，混悬均匀，冷冻干燥，即得所述组合物。

在所述组合物的制备过程中，海藻酸钠溶液和鲍鱼肽溶液的浓度对组合物的稳定性和协同增效作用有重要影响。

进一步地，所述海藻酸钠溶液的质量浓度为1％-3.5％，优选为1.5％；若海藻酸钠溶液的质量浓度过大(＞3.5％)，容易粘团，难以形成均匀的海藻多酚颗粒，功效差；若海藻酸钠溶液的质量浓度过小(＜1％)，与亚精胺作用弱，达不到对海藻多酚的保护效果。

进一步地，所述鲍鱼肽溶液的质量浓度为18％-26％，优选为22％；若鲍鱼肽溶液的质量浓度过大(＞26％)，易受微生物感染，丧失活性；若鲍鱼肽溶液的质量浓度过小(＜18％)，与海藻多酚的协同作用减弱，达不到防治酒精性脑损伤的效果。

进一步地，在步骤S1中，需要严格控制溶液的pH范围。本发明调节pH的方法为常规方法，由于海藻酸钠溶液呈弱碱性，因此，本发明调节pH采用的为0.1mol/L的HCl溶液。若溶液的pH过小(＜6.0)，则酸性过强，海藻酸钠生成海藻酸胶体析出；若溶液的pH过大(＞7.5)，亚精胺难以通过静电作用与海藻酸钠和海藻多酚形成复合“伞”式结构。因此，本发明中，所述海藻酸钠溶液pH优选为6.0-7.5，更优选为6.5。

作为说明，本发明中所涉及的室温，也成为常温或者一般温度，一般定义为25℃，本领域技术人员可对其进行合理调整，其也在本发明的保护范围内。

进一步地，所述药物制剂还包括药学上可接受的辅料。

进一步地，所述药物制剂为片剂，所述辅料包括玉米淀粉、滑石粉和硬脂酸镁；

所述片剂中各组分的质量分数为：

所述组合物10-20wt％、玉米淀粉65-75wt％、滑石粉11-17wt％和硬脂酸镁0.5-2wt％。

进一步地，所述药物制剂为胶囊剂，所述辅料包括乳糖、玉米淀粉和滑石粉；

所述胶囊剂中各组分的质量分数为：

所述组合物10-30wt％、乳糖10-20wt％、玉米淀粉50-60wt％和滑石粉5-15wt％。

进一步地，所述药物制剂为颗粒剂，所述辅料包括玉米淀粉、羟甲基纤维素钠和硬脂酸镁；

所述颗粒剂中各组分的质量分数为：

所述组合物5-15wt％、玉米淀粉74-84wt％、羟甲基纤维素钠5-15wt％和硬脂酸镁0.5-2wt％。

本发明公开了以下技术效果：

(1)本发明将具有抗氧化、抗菌功能的海藻多酚和富含多种营养、多重生物功效的鲍鱼肽组合，通过氢键、静电、π-π堆叠等多重作用，二者形成复合物；经动物模型试验证明，该复合物在酒精性脑伤的防治中发挥多途径、多靶点、协同增效作用。

(2)本发明利用海藻酸盐的水凝胶特性，在胃中低pH环境下形成海藻酸胶质，包裹海藻多酚和鲍鱼肽复合物，避免其在体内复杂环境中活性的丧失；在肠道中海藻酸转换为离子盐状态，缓控释放海藻多酚和鲍鱼肽，发挥持久活性效应。

(3)本发明中添加的亚精胺，利用其“三胺”特性，分别与海藻酸盐和海藻多酚相连接，对海藻多酚形成“伞”式保护结构，使得海藻多酚的稳定性、物理性状及口感均得到改善，有利于其发挥在酒精性脑损伤中的防治效果。

(4)本发明原料均来自天然食材，绿色安全；制备工艺简单，易于工业化生产；而且安全无毒、服用方便，无不良气味，依从性好。

附图说明

为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。

图1是本发明制备的防治酒精性脑损伤的组合物对DPPH自由基清除能力。

图2是本发明制备的防治酒精性脑损伤的组合物对OH自由基清除能力。

图3是本发明制备的防治酒精性脑损伤的组合物的抗氧化稳定性。

图4是本发明制备的防治酒精性脑损伤的组合物对小鼠脑指数的影响。

图5是本发明制备的防治酒精性脑损伤的组合物对小鼠撤除平台后游泳路线的影响。

具体实施方式

现详细说明本发明的多种示例性实施方式，该详细说明不应认为是对本发明的限制，而应理解为是对本发明的某些方面、特性和实施方案的更详细的描述。

应理解本发明中所述的术语仅仅是为描述特别的实施方式，并非用于限制本发明。另外，对于本发明中的数值范围，应理解为还具体公开了该范围的上限和下限之间的每个中间值。在任何陈述值或陈述范围内的中间值以及任何其他陈述值或在所述范围内的中间值之间的每个较小的范围也包括在本发明内。这些较小范围的上限和下限可独立地包括或排除在范围内。

除非另有说明，否则本文使用的所有技术和科学术语具有本发明所述领域的常规技术人员通常理解的相同含义。虽然本发明仅描述了优选的方法和材料，但是在本发明的实施或测试中也可以使用与本文所述相似或等同的任何方法和材料。本说明书中提到的所有文献通过引用并入，用以公开和描述与所述文献相关的方法和/或材料。在与任何并入的文献冲突时，以本说明书的内容为准。

在不背离本发明的范围或精神的情况下，可对本发明说明书的具体实施方式做多种改进和变化，这对本领域技术人员而言是显而易见的。由本发明的说明书得到的其他实施方式对技术人员而言是显而易见得的。本申请说明书和实施例仅是示例性的。

关于本文中所使用的“包含”、“包括”、“具有”、“含有”等等，均为开放性的用语，即意指包含但不限于。

除非特别说明，本发明采用的试剂、方法和设备为本技术领域常规试剂、方法和设备。

除非特别说明，以下实施例所用试剂和材料均为市购。作为一个说明，本发明所采用海藻多酚和鲍鱼肽除采用常规方法制备，所述海藻多酚也可购自山东洁晶集团股份有限公司，所述鲍鱼肽也可购自山东海龙元生物科技有限公司。

实施例1

一种防治酒精性脑损伤的组合物，以重量份计，包括以下组分：海藻多酚20份、海藻酸钠4份、鲍鱼肽40份和亚精胺1.5份。

所述组合物的制备方法，包括以下步骤：

S1.按所述重量份数，取海藻酸钠加入蒸馏水中配制成1.5wt％海藻酸钠溶液，调节溶液pH6.5，加入亚精胺，室温搅拌6.5小时，冰水浴处理，待溶液体系降温至8℃，加入海藻多酚，继续搅拌2小时，冷冻干燥，液氮碎化，得到海藻多酚复合粉粒；

S2.按所述重量份数，用蒸馏水溶解鲍鱼肽，制成22wt％鲍鱼肽溶液，在搅拌状态下，加入S1所述海藻多酚复合粉粒，混悬均匀，冷冻干燥，即可得到所述组合物。

实施例2

一种防治酒精性脑损伤的组合物，以重量份计，包括以下组分：海藻多酚15份、海藻酸钠3份、鲍鱼肽35份和亚精胺1份。

所述组合物的制备方法，包括以下步骤：

S1.按所述重量份数，取海藻酸钠加入蒸馏水中配制成2.0wt％海藻酸钠溶液，调节溶液pH7.0，加入亚精胺，室温搅拌7小时，冰水浴处理，待溶液体系降温至6℃，加入海藻多酚，继续搅拌1.5小时，冷冻干燥，液氮碎化，得到海藻多酚复合粉粒；

S2.按所述重量份数，用蒸馏水溶解鲍鱼肽，制成24wt％鲍鱼肽溶液，在搅拌状态下，加入S1所述海藻多酚复合粉粒，混悬均匀，冷冻干燥，即可得到所述组合物。

实施例3

一种防治酒精性脑损伤的组合物，以重量份计，包括以下组分：海藻多酚10份、海藻酸钠2份、鲍鱼肽30份和亚精胺0.5份。

所述组合物的制备方法，包括以下步骤：

S1.按所述重量份数，取海藻酸钠加入蒸馏水中配制成1wt％海藻酸钠溶液，调节溶液pH6.0，加入亚精胺，室温搅拌5小时，冰水浴处理，待溶液体系降温至5℃，加入海藻多酚，继续搅拌1小时，冷冻干燥，液氮碎化，得到海藻多酚复合粉粒；

S2.按所述重量份数，用蒸馏水溶解鲍鱼肽，制成18wt％鲍鱼肽溶液，在搅拌状态下，加入S1所述海藻多酚复合粉粒，混悬均匀，冷冻干燥，即可得到所述组合物。

实施例4

一种防治酒精性脑损伤的组合物，以重量份计，包括以下组分：海藻多酚30份、海藻酸钠6份、鲍鱼肽55份、亚精胺3份。

所述组合物的制备方法，包括以下步骤：

S1.按所述重量份数，取海藻酸钠加入蒸馏水中配制成3.5wt％海藻酸钠溶液，调节溶液pH7.5，加入亚精胺，室温搅拌8小时，冰水浴处理，待溶液体系降温至10℃，加入海藻多酚，继续搅拌3小时，冷冻干燥，液氮碎化，得到海藻多酚复合粉粒；

S2.按所述重量份数，用蒸馏水溶解鲍鱼肽，制成26wt％鲍鱼肽溶液，在搅拌状态下，加入S1所述海藻多酚复合粉粒，混悬均匀，冷冻干燥，即可得到所述组合物。

对比例1

与实施例1的不同之处仅在于，用维生素C代替海藻多酚。

对比例2

与实施例1的不同之处仅在于，用精胺代替亚精胺。

对比例3

与实施例1的不同之处仅在于，直接原料共混，具体如下：

一种防治酒精性脑损伤的组合物，以重量份计，包括以下组分：海藻多酚20份、海藻酸钠4份、鲍鱼肽40份和亚精胺1.5份。

所述组合物的制备方法，包括以下步骤：

按所述重量份数，取海藻酸钠、亚精胺、海藻多酚和鲍鱼肽原料，加入蒸馏水，混悬均匀，冷冻干燥，即可得到所述组合物。

对比例4

与实施例1的不同之处仅在于，用牡蛎肽代替鲍鱼肽。

应用例1防治酒精性脑损伤的组合物的抗氧化实验

1、实验方法

(1)1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基清除能力的测定

将2.0mL不同质量浓度的样品溶液(实施例1～4组和对比例1～4组制备得到的组合物)与2mL DPPH无水乙醇溶液混合，室温下避光放置60min后，在517nm处测定溶液的吸光度。以蒸馏水代替样品溶液作空白对照，按下式(1)计算DPPH自由基的清除率，用IC₅₀表示清除效果。

其中，A_X为样品的吸光度，

为空白对照的吸光度。

(2)羟自由基清除能力的测定

在同一比色管中分别加入浓度为1mL H₂O₂溶液(8.8mmol/L)、1mL FeSO₄溶液(9mmol/L)和12mL不同质量浓度的样品溶液(实施例1～4组和对比例1～4组制备得到的组合物)，再加入1mL水杨酸的乙醇溶液(9mmol/L)，摇匀，置37℃水浴30min，在波长510nm处测定吸光度；以蒸馏水替代样品溶液作空白对照。羟自由基清除率按公式(1)计算，用IC₅₀表示清除效果。

2、实验结果

(1)DPPH自由基清除效果

IC₅₀值越小，清除自由基能力越强。维生素C(Vc)是一种强抗氧化剂，作为阳性对照。防治酒精性脑损伤组合物的DPPH自由基清除效果如图1所示，实施例1～4组的IC₅₀都接近Vc组，表现出强的DPPH自由基清除效果，尤以实施例1的DPPH自由基清除能力最强。虽然对比例1组也表现出与实施例1～4组接近的DPPH自由基清除效果，但对比例2-4组的DPPH自由基清除能力远远不如实施例1～4组。

(2)羟自由基清除效果

维生素C(Vc)是一种强抗氧化剂，作为阳性对照。防治酒精性脑损伤组合物的羟自由基清除效果如图2所示，实施例1～4组的IC₅₀差不多接近Vc组，表现出强的羟自由基清除效果，尤以实施例1的羟自由基清除能力最强。虽然对比例1组也表现出与实施例1～4组接近的羟自由基清除效果，但对比例2-4组的羟自由基清除能力远远不如实施例1～4组。

综合以上两个实验结果，实施例1-4组都表现出强的自由基清除效果，说明本发明制备的防治酒精性脑损伤的组合物具有强的抗氧化活性，尤以实施例1组抗氧化活性最强。本发明组合物的配方或者制备方法改变，都达不到预期的抗氧化效果。

应用例2防治酒精性脑损伤组合物的抗氧化稳定性实验

采用铁离子还原/抗氧化能力法(FRAP法)检测组合物存储期间的总抗氧化能力。

样品储存：样品存储于棕色瓶中，室温条件下放置。样品每隔一定时间取样，进行总抗氧化能力测试。

测试方法：取0.02mL FeSO₄溶液，加入0.18mL FRAP液(现配现用)，混匀，37℃水浴10min，采用紫外-可见分光光度计在593nm测吸光值。以FeSO₄溶液浓度为横坐标，吸光值为纵坐标，建立FeSO₄当量标准曲线。以V_C溶液为阳性对照，根据标准曲线计算出FeSO₄当量。根据FeSO₄当量计算出各样品的V_C相对百分比。

防治酒精性脑损伤的组合物的抗氧化稳定性结果如图3所示，由于多酚性质的不稳定性，多酚易被氧化，长期储存中极易变质，对比例3组合物的总抗氧化能力在储存过程中几乎呈直线下降，而实施例1的组合物在相同的环境中，在5天内随着储存时间的延长，其总抗氧化能力几乎保持稳定状态。由此可见，本发明组合物的配方和制备方法，可有效提高组合物的抗氧化稳定性。

应用例3防治酒精性脑损伤组合物的护脑功效测定

1、造模方法

实验动物：昆明雄性小鼠，6-8周龄，体重18-22克，SPF级，动物饲养条件：(25±1)℃，相对湿度：(55±5)％。

实验分组：取140只小鼠随机分为10组，每组14只，分为生理盐水组、模型组、实施例1～4组和对比例1～4组。

各组小鼠每日分别按照梯度浓度灌胃小鼠相对应体积56度红星二锅头白酒(生理盐水组灌胃对应体积的生理盐水)，灌酒1小时后按10g/kg·BW(体重)剂量给各组灌胃相应受试物，生理盐水组和模型组灌胃生理盐水。连续灌胃8周。每周给小鼠称重以调节酒及受试物剂量。第一周灌酒量为2mL/kg·BW，为了造成持续性酒精伤害，之后根据每周小鼠的死亡情况等适当增加灌酒量。

2、Morris水迷宫实验

酒精性脑损伤会造成小鼠明显的学习记忆能力下降现象。通过小鼠在水迷宫中寻找隐藏在水下的平台，来测试小鼠学习和记忆空间位置和方向的能力。小鼠在酒精损伤8周后进行Morris水迷宫测试，小鼠在直径为120厘米，高度为40厘米的黑色圆形水池中游泳，水池中充满水，内含直径8厘米的可移动平台。实验5天，每天4次，分别从四个不同的起始点放入水中。录像记录小鼠找到平台的时间(逃避潜伏期)。在第6天撤除原平台，将小鼠任选1个入水点放入水中，记录小鼠在原平台的停留时间、跨越原平台的次数和路径。实验结束第二天禁食不禁水24h后进行样本采集：

(1)小鼠解剖后，取出脑组织，用预冷的生理盐水洗去表面的血水，用滤纸吸干后快速称重，用公式计算脑指数：

脑指数(％)＝脑重量(g)/体重(g)×100％

(2)快速解剖脑组织，-80℃保存，制备成10％脑组织匀浆，按照相应试剂盒要求，严格操作，测定脑组织匀浆中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)和丙二醛(MDA)的含量。

2、实验结果

(1)脑指数

若脑指数增大，则代表脏器充血，水肿增生肥大等情况；若脑指数减少，则表示脏器发生萎缩及其他退行性改变。防治酒精性脑损伤组合物的脑指数实验结果如图4所示。小鼠造模后，与生理盐水组相比，模型组脑指数显著升高，具有显著差异(p＜0.01)，表明持续过量灌酒会造成小鼠脑水肿。与模型组对比，实施例1～4组的小鼠脑指数均显著降低，具有统计学差异(p＜0.01)，其中实施例1组的效果最佳，脑指数几乎接近生理盐水组水平，说明本发明制备的防治酒精性脑损伤的组合物可有效地改善脑指数，降低脑组织出现水肿、增生、肥大等病变，对酒精性脑损伤具有显著的防治作用。与模型组对比，虽然对比例1～4组的小鼠脑指数都有降低，但无统计学差异，由此说明，本专利组合物的配方或者制备方法改变，都不能有效地降低酒精诱导的脑指数，对酒精诱导的脑损伤也无防治作用。

(2)SOD、GSH-Px和MDA结果分析

酒精对机体细胞的损害主要通过诱导细胞氧化应激，过量长期饮酒会导致机体脑细胞中SOD、GSH活性的改变并进一步导致细胞氧化应激损害中枢神经，因此可通过调节体内抗氧化物酶的活性来防治酒精性脑损伤。防治酒精性脑损伤的组合物对氧化物酶活性影响结果如表1所示。与生理盐水组相比，模型组小鼠脑组织中SOD和GSH-Px含量显著降低，具有统计学差异(p＜0.01)，表明持续过量灌酒导致的小鼠脑氧化应激异常是造成小鼠脑损伤的重要因素之一。与模型组对比，实施例1～4组小鼠脑组织中SOD和GSH-Px含量显著提高(p＜0.01)，其中实施例1组尤以为甚，说明本发明制备的防治酒精性脑损伤的组合物能显著降低酒精引起小鼠脑中过氧化物水平，增强脑组织抗氧化能力。MDA是自由基作用于脂质过氧化的产物，通过测定MDA含量可以反映体内脂质过氧化的程度。实施例1～4组小鼠脑组织中MDA含量显著低于模型组(p＜0.01)，其中实施例1组MDA含量最低。结果表明，本发明制备的防治酒精性脑损伤的组合物可通过增加SOD和GSH-Px活性，增强小鼠脑组织抗氧化能力，纠正氧化和抗氧化平衡紊乱，减轻自由基对脑细胞损伤，从而对慢性酒精中毒造成的脑损伤起到保护作用。

表1各组小鼠脑组织中SOD、GSH-Px和MDA含量

注：与生理盐水组比较，^##p<0.01；与模型组比较，*p<0.05，**p<0.01。

(3)小鼠Morris水迷宫的实验结果

Morris水迷宫实验包括定位航行和空间搜索两部分，定位航行试验逃避潜伏期结果代表脑记忆获得能力，空间搜索试验目标象限停留时间和穿越平台次数结果则代表脑记忆保持能力。表2～3实验结果分别对应定位航行结果和空间搜索结果，经过5d的Morris实验，各实验组小鼠的逃避潜伏期均逐渐缩短，与生理盐水组相比，模型组小鼠逃避潜伏期明显延长，差异具有统计学意义(p＜0.05)；与模型组相比，实施例1～4组和对比例1～4组小鼠从第2d开始，逃避潜伏期逐天减少，其中实施例1～4组显著减少(p＜0.01)；与模型组相比，实施例1～4组小鼠的撤除原平台后目标象限停留时间和穿越平台次数都有极显著性差异(p＜0.01)，其中实施例1组小鼠目标象限停留时间最长和穿越平台次数最多；此外，由撤除平台后小鼠游泳路线图5可以看出，模型组小鼠寻找原平台目的性不强，实施例1组与生理盐水组小鼠目的性较强。结果表明，持续过量灌酒到实验第8周时小鼠脑记忆获得功能和脑记忆保持功能受损，本发明制备的防治酒精性脑损伤的组合物对酒精导致的小鼠脑损伤具有显著的改善作用。

表2小鼠Morris定位航行试验结果

注：与生理盐水组比较，^##p<0.01；与模型组比较，*p<0.05，**p<0.01。

表3小鼠Morris空间搜索试验结果

注：与生理盐水组比较，^##p<0.01；与模型组比较，*p<0.05，**p<0.01。

应用例4急性毒性实验

动物：取健康小鼠，体重18-22g，雌雄各半，共20只，随机分为实验组和空白对照两组。

受试物：以实施例1的组合物作为受试物。

实验方法：在预实验中，未能测出半数致死量，故选用上述实验给药量进行试验。以小鼠的体重为准，按10g/kg的剂量，每24h灌胃一次，连续灌胃实验组小鼠2周,空白对照组灌胃蒸馏水，在饲喂期间均自由饮水和觅食，实验期间观察小鼠的活动状态、饮食、粪便、呼吸、体重及死亡情况。

实验结果：实验组小鼠灌胃受试物2周内无一例死亡，与对照组相比，体重变化无显著差异，进食和饮水均无异常，且小鼠精神状态良好，活泼好动。将动物

处死后，肉眼观察各主要脏器无异常现象。结果表明，本发明的防治酒精性脑损伤组合物口服应用，对动物无明显损害，未发现对机体产生的毒性反应，安全无毒。

实施例5一种防治酒精性脑损伤的片剂

该防治酒精性脑损伤的片剂，以质量分数计，包括以下组分：

实施例6一种防治酒精性脑损伤的片剂

该防治酒精性脑损伤的片剂，以质量分数计，包括以下组分：

实施例7一种防治酒精性脑损伤的片剂

该防治酒精性脑损伤的片剂，以质量分数计，包括以下组分：

实施例8一种防治酒精性脑损伤的胶囊剂

该防治酒精性脑损伤的胶囊剂，以质量分数计，包括以下组分：

实施例9一种防治酒精性脑损伤的胶囊剂

该防治酒精性脑损伤的胶囊剂，以质量分数计，包括以下组分：

实施例10一种防治酒精性脑损伤的胶囊剂

该防治酒精性脑损伤的胶囊剂，以质量分数计，包括以下组分：

实施例11一种防治酒精性脑损伤的颗粒剂

该防治酒精性脑损伤的胶囊剂，以质量分数计，包括以下组分：

实施例12一种防治酒精性脑损伤的颗粒剂

该防治酒精性脑损伤的胶囊剂，以质量分数计，包括以下组分：

实施例13一种防治酒精性脑损伤的颗粒剂

该防治酒精性脑损伤的胶囊剂，以质量分数计，包括以下组分：

以上所述的实施例仅是对本发明的优选方式进行描述，并非对本发明的范围进行限定，在不脱离本发明设计精神的前提下，本领域普通技术人员对本发明的技术方案做出的各种变形和改进，均应落入本发明权利要求书确定的保护范围内。

Claims (9)

1.一种组合物在制备防治酒精性脑损伤的药物制剂中的应用，所述组合物以重量份计，包括以下组分：海藻多酚10～30份、海藻酸钠2～6份、鲍鱼肽30～55份和亚精胺0.5～3份。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述组合物以重量份计，包括以下组分：海藻多酚20份、海藻酸钠4份、鲍鱼肽40份和亚精胺1.5份。

3.根据权利要求1或2所述的应用，其特征在于，所述组合物的制备方法，包括以下步骤：

S1.取海藻酸钠加入水中配制成海藻酸钠溶液，调节溶液pH 6.0-7.5，加入亚精胺，室温搅拌5-8小时，冰水浴处理，待溶液体系降温至5-10℃，加入海藻多酚，继续搅拌1-3小时，冷冻干燥，液氮碎化，得到海藻多酚复合粉粒；

S2.用水溶解鲍鱼肽，制成鲍鱼肽溶液，在搅拌状态下加入所述海藻多酚复合粉粒，混悬均匀，冷冻干燥，即得所述组合物。

4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述海藻酸钠溶液的质量浓度为1％-3.5％；所述鲍鱼肽溶液的质量浓度为18％-26％。

5.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述海藻酸钠溶液pH调节至6.5。

6.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述药物制剂还包括药学上可接受的辅料。

7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述药物制剂为片剂，所述辅料包括玉米淀粉、滑石粉和硬脂酸镁；

所述片剂中各组分的质量分数为：

所述组合物10-20wt％、玉米淀粉65-75wt％、滑石粉11-17wt％和硬脂酸镁0.5-2wt％。

8.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述药物制剂为胶囊剂，所述辅料包括乳糖、玉米淀粉和滑石粉；

所述胶囊剂中各组分的质量分数为：

所述组合物10-30wt％、乳糖10-20wt％、玉米淀粉50-60wt％和滑石粉5-15wt％。

9.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述药物制剂为颗粒剂，所述辅料包括玉米淀粉、羟甲基纤维素钠和硬脂酸镁；

所述颗粒剂中各组分的质量分数为：

所述组合物5-15wt％、玉米淀粉74-84wt％、羟甲基纤维素钠5-15wt％和硬脂酸镁0.5-2wt％。

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