CN112940114A - 一种抗真菌1,3-β-D-葡聚糖单克隆抗体及其应用 - Google Patents

一种抗真菌1,3-β-D-葡聚糖单克隆抗体及其应用 Download PDF

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Abstract

本发明提供了一种抗真菌1,3‑β‑D‑葡聚糖单克隆抗体及其应用，所述抗真菌1,3‑β‑D‑葡聚糖单克隆抗体包括SEQ ID NO:1所示的重链CDR1、SEQ ID NO:2所示的重链CDR2和SEQ ID NO:3所示的重链CDR3；所述轻链可变区包括SEQ ID NO:4所示的轻链CDR1、SEQ ID NO:5所示的轻链CDR2和SEQ ID NO:6所示的轻链CDR3。本发明的抗真菌1,3‑β‑D‑葡聚糖单克隆抗体对真菌1,3‑β‑D‑葡聚糖具有显著的特异性结合能力，构建的试剂盒特异性好、灵敏度高、准确性佳，在真菌1,3‑β‑D‑葡聚糖检测领域具有重要意义。

Description

一种抗真菌1,3-β-D-葡聚糖单克隆抗体及其应用
技术领域
本发明属于真菌检测技术领域，涉及一种抗真菌1,3-β-D-葡聚糖单克隆抗体及其应用。
背景技术
目前，真菌1,3-β-D-葡聚糖检测主要采用鲎试剂法，检测原理为1,3-β-D-葡聚糖特异性激活鲎试剂中的G因子，进而激活凝固酶原形成凝固酶，凝固酶催化显色反应或浊度反应，产生游离的对硝基苯胺(pNA)并引起吸光度变化，通过动态检测溶液吸光度变化率实现对1,3-β-D-葡聚糖浓度的定量检测。该方法总检测时间约50min，线性下限为37.5pg/mL。
然而，鲎试剂的关键原料来自国家二级野生保护动物鲎，鲎的生长周期较长、人工养殖率低，通常需要捕捞野生鲎、从鲎血中提取鲎试剂原料。鲎是濒危物种，采用鲎试剂法检测真菌1,3-β-D-葡聚糖已不能满足临床需求，且天然鲎血制备的鲎试剂批间差异大，导致产品生产成本高、再现性较差。此外，鲎试剂在细菌内毒素的作用下同样会激活凝固酶原形成凝固酶，而细菌内毒素广泛存在于自然界中，因此鲎试剂法极易受细菌内毒素的干扰。
化学发光检测法因其特异性好、灵敏度高、检测时间短、易于自动化等特点，已广泛应用于生物大分子检测领域。以罗氏公司的PCT检测试剂盒为例，该检测试剂盒采用夹心法，样品、生物素标记抗体和钌复合物标记抗体形成抗体抗原夹心免疫复合物，再添加链霉亲和素磁珠，利用生物素和链霉亲和素的相互作用结合在免疫复合物上；向孵育混合液施加电磁作用，磁珠及免疫复合物吸附在电极表面，未与磁珠结合的物质通过ProCell被去除；向电极施加电压使免疫复合物化学发光，根据化学发光强度分析样品中抗原的浓度。该检测试剂盒检测时间短，仅18min，但是样品中的生物素会干扰生物素标记抗体与链霉亲和素磁珠的结合，影响结果的准确性。
发明内容
针对现有技术的不足和实际需求，本发明提供了一种抗真菌1,3-β-D-葡聚糖单克隆抗体及其应用，所述抗真菌1,3-β-D-葡聚糖单克隆抗体对真菌1,3-β-D-葡聚糖具有特异性结合力，稳定性好、批间差异小，构建的基于化学发光的真菌1,3-β-D-葡聚糖检测试剂盒实现了灵敏、特异、准确的定量或半定量检测真菌1,3-β-D-葡聚糖的效果，在判断患者真菌感染程度方面具有重要的应用前景。
为达此目的，本发明采用以下技术方案：
第一方面，本发明提供了一种抗真菌1,3-β-D-葡聚糖单克隆抗体，所述抗真菌1,3-β-D-葡聚糖单克隆抗体包括重链可变区和轻链可变区；
所述重链可变区包括SEQ ID NO:1所示的重链CDR1、SEQ ID NO:2所示的重链CDR2和SEQ ID NO:3所示的重链CDR3；
所述轻链可变区包括SEQ ID NO:4所示的轻链CDR1、SEQ ID NO:5所示的轻链CDR2和SEQ ID NO:6所示的轻链CDR3；
SEQ ID NO:1：SGGNTNQQK；
SEQ ID NO:2：DSSDPPPMSLLTEV；
SEQ ID NO:3：NNMDRAVKL；
SEQ ID NO:4：GLCDETRFEC；
SEQ ID NO:5：VPSPLAPISKQL；
SEQ ID NO:6：QANIYSYCSE。
本发明中，包括SEQ ID NO:1～6的CDR的抗真菌1,3-β-D-葡聚糖单克隆抗体对真菌1,3-β-D-葡聚糖具有显著的特异性结合能力，有利于构建特异、灵敏、准确、低廉的真菌1,3-β-D-葡聚糖检测试剂盒，在真菌1,3-β-D-葡聚糖检测领域具有重要意义。
优选地，所述重链可变区包括SEQ ID NO:7所示的氨基酸序列；
SEQ ID NO:7：
QSLEESGGRLVTPGTPLTLTCTASGFSLSSGGNTNQQKWVRQAPGKGLEWIGDSSDPPPMSLLTEVRFTISKTPTTVDLKMTSPTTEDTATHFCARNNMDRAVKLWGPGTLVTVSS。
优选地，所述轻链可变区包括SEQ ID NO:8所示的氨基酸序列；
SEQ ID NO:8：
ADIVMTQTPSSASEPVGGTVTIKCGLCDETRFECWYQQKAGQPPKRLIYVPSPLAPISKQLGVPSRFKGSGSGTEFTLTISDLECADAATYYCQANIYSYCSEFGGGTEVVVKG。
本发明中，含有SEQ ID NO:7～8的可变区的抗真菌1,3-β-D-葡聚糖单克隆抗体特异性好、稳定性好，与真菌1,3-β-D-葡聚糖的亲和力强，可以快速与真菌1,3-β-D-葡聚糖结合，有利于缩短检测时间。
优选地，所述抗真菌1,3-β-D-葡聚糖单克隆抗体还包括恒定区。
优选地，所述恒定区包括IgG1、IgG2、IgG3或IgG4恒定区中的任意一种或至少两种的组合。
优选地，所述抗真菌1,3-β-D-葡聚糖单克隆抗体修饰有缀合物。
优选地，所述缀合物包括化学发光基团、辣根过氧化物酶或荧光基团中的任意一种。
第二方面，本发明提供了一种第一方面所述的抗真菌1,3-β-D-葡聚糖单克隆抗体的制备方法，所述制备方法包括以下步骤：
(1)取经真菌1,3-β-D-葡聚糖免疫的实验动物的脾细胞，与骨髓瘤细胞进行融合，制备杂交瘤细胞；
(2)从制备的杂交瘤细胞中克隆抗真菌1,3-β-D-葡聚糖单克隆抗体基因，构建含有抗真菌1,3-β-D-葡聚糖单克隆抗体基因的重组表达载体；
(3)将所述重组表达载体导入感受态细胞，从感受态细胞培养上清中分离纯化得到所述抗真菌1,3-β-D-葡聚糖单克隆抗体。
本发明中，采用基因工程技术构建稳定表达抗真菌1,3-β-D-葡聚糖单克隆抗体的细胞株，由此制备的抗真菌1,3-β-D-葡聚糖单克隆抗体稳定性好、批间差异小，对真菌1,3-β-D-葡聚糖具有强特异性结合力。
第三方面，本发明提供了一种真菌1,3-β-D-葡聚糖化学发光检测试剂盒，所述真菌1,3-β-D-葡聚糖化学发光检测试剂盒包括检测抗体和信号抗体，所述检测抗体和/或所述信号抗体为第一方面所述的抗真菌1,3-β-D-葡聚糖单克隆抗体。
本发明中，采用对真菌1,3-β-D-葡聚糖具有强特异性结合力的抗真菌1,3-β-D-葡聚糖单克隆抗体作为检测抗体和/或信号抗体构建免疫化学发光检测试剂盒，原料来源广泛、可控、稳定性好，检测方法灵敏度高、准确性好、时间短，样本处理方法简单，解决了传统的鲎试剂法易受内毒素干扰的问题。
优选地，本发明既可以采用乙二胺四乙酸(EDTA)溶液预处理血清样本、又可以采用酸碱样本释放液预处理血清样本，例如，向血清样本加入EDTA溶液，120℃加热6min，10000g离心10min，获得上清作为检测样本，或向血清样本加入酸性样本释放液室温静置5min、再加入碱性样本释放液进行中和反应，得到检测样本，相较于鲎试剂法的样本处理方法更简单。
优选地，所述检测抗体偶联在固相载体上，优选为羧基化固相载体上。
本发明中，采用羧基化偶联方法将检测抗体修饰在固相载体上，避免依赖生物素-链霉亲和素相互作用，消除了样品生物素对实验结果的干扰，结果准确性显著提高。
优选地，所述固相载体包括羧基化的磁微粒、酶标板、微球、亲和膜或液相芯片中的任意一种或至少两种的组合。
优选地，所述信号抗体上修饰有化学发光基团。
优选地，所述化学发光基团包括吖啶磺酰胺、吖啶酯、钌复合物、鲁米诺、(金钢烷)-1,2-二氧乙烷或碱性磷酸酶中的任意一种或至少两种的组合。
本发明中，采用化学发光一步夹心法检测样本中的真菌1,3-β-D-葡聚糖，羧基化磁珠偶联检测抗体、真菌1,3-β-D-葡聚糖和化学发光基团修饰信号抗体形成抗体抗原夹心免疫复合物，磁分离洗涤去除未与磁珠结合的物质后，加入激发液发光，通过检测化学发光强度从而分析样本中真菌1,3-β-D-葡聚糖的含量，实现了快速、灵敏检测真菌1,3-β-D-葡聚糖的效果。
优选地，所述真菌1,3-β-D-葡聚糖化学发光检测试剂盒还包括阳性对照品、阴性对照品、激发液、封闭液或洗涤液中的任意一种或至少两种的组合。
第四方面，本发明提供了一种真菌1,3-β-D-葡聚糖酶联免疫吸附检测试剂盒，所述真菌1,3-β-D-葡聚糖酶联免疫吸附检测试剂盒包括第一方面所述的抗真菌1,3-β-D-葡聚糖单克隆抗体。
优选地，所述抗真菌1,3-β-D-葡聚糖单克隆抗体修饰有辣根过氧化物酶。
优选地，所述真菌1,3-β-D-葡聚糖酶联免疫吸附检测试剂盒还包括固相载体，优选为酶标板、磁微粒、微球、亲和膜或液相芯片中的任意一种或至少两种的组合。
优选地，所述真菌1,3-β-D-葡聚糖酶联免疫吸附检测试剂盒还包括封闭液、显色液或终止液中的任意一种或至少两种的组合。
第五方面，本发明提供了一种真菌1,3-β-D-葡聚糖免疫荧光检测试剂盒，所述真菌1,3-β-D-葡聚糖免疫荧光检测试剂盒包括第一方面所述的抗真菌1,3-β-D-葡聚糖单克隆抗体。
优选地，所述抗真菌1,3-β-D-葡聚糖单克隆抗体修饰有荧光基团。
优选地，所述真菌1,3-β-D-葡聚糖免疫荧光检测试剂盒还包括封闭液和/或洗涤液。
第六方面，本发明提供了第一方面所述的抗真菌1,3-β-D-葡聚糖单克隆抗体、第三方面所述的真菌1,3-β-D-葡聚糖化学发光检测试剂盒、第四方面所述的真菌1,3-β-D-葡聚糖酶联免疫吸附检测试剂盒或第五方面所述的真菌1,3-β-D-葡聚糖免疫荧光检测试剂盒在制备真菌1,3-β-D-葡聚糖检测产品中的应用。
与现有技术相比，本发明具有如下有益效果：
(1)本发明的抗真菌1,3-β-D-葡聚糖单克隆抗体对真菌1,3-β-D-葡聚糖具有特异性强亲和力，采用基因工程方法表达制备，稳定性好、批间差异小、价格低廉、适用于大规模生产；
(2)本发明基于抗真菌1,3-β-D-葡聚糖单克隆抗体的真菌1,3-β-D-葡聚糖检测试剂盒性能稳定、灵敏度高、检测时间仅10min，检测结果与鲎试剂法检测结果相关性好；
(3)本发明的真菌1,3-β-D-葡聚糖检测方法对样本预处理条件宽松，用碱液在37℃处理、EDTA在100℃处理或酸性样本释放液在2～40℃处理样本后，均不影响结果的准确性，且抗生物素干扰能力强，生物素浓度达到640ng/mL也不影响样本的阴阳性检测结果，在真菌检测技术领域具有重要的应用前景。
附图说明
图1为化学发光检测法和鲎试剂法的检测结果的相关性。
具体实施方式
为进一步阐述本发明所采取的技术手段及其效果，以下结合实施例和附图对本发明作进一步地说明。可以理解的是，此处所描述的具体实施方式仅仅用于解释本发明，而非对本发明的限定。
实施例中未注明具体技术或条件者，按照本领域内的文献所描述的技术或条件，或者按照产品说明书进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可通过正规渠道商购获得的常规产品。
实施例1抗真菌1,3-β-D-葡聚糖单克隆抗体的制备
采用真菌1,3-β-D-葡聚糖腹部皮下免疫雌性BALB/c小鼠(50μg/只)，每隔一周后采用不完全弗氏佐剂乳化的真菌1,3-β-D-葡聚糖进行第二、第三、第四次免疫；四次免疫后取小鼠尾血，ELISA测定梯度稀释的血清效价，筛选血清中特异性抗体滴度超过200000的小鼠，取脾脏与骨髓瘤细胞进行细胞融合，并用筛选培养基培养；
筛选培养液中含有特异性抗体活性的细胞株，从这些细胞株中克隆特异性抗体的基因，再构建含有特异性抗体基因的重组表达载体pCMVp-NEO-BAN-Ab，将所述重组表达载体转化入CHO细胞进行表达，纯化表达抗体，筛选敏感性和特异性良好的抗体作为最终选择的单克隆抗体。
实施例2基于抗真菌1,3-β-D-葡聚糖单克隆抗体的化学发光检测
本实施例采用可变区如SEQ ID NO:7～8所示的抗真菌1,3-β-D-葡聚糖单克隆抗体作为检测抗体和信号抗体，构建化学发光体系，进行样本中真菌1,3-β-D-葡聚糖的检测，步骤如下：
(1)向血清样本加入EDTA溶液，120℃加热6min，10000g离心10min，获得上清作为检测样本；
(2)向反应杯中加入EDTA预处理的样本、羧基磁珠偶联检测抗体和吖啶磺酰胺标记信号抗体，混合后孵育6min形成抗体抗原夹心免疫复合物；
(3)将混合溶液置于磁分离器上，吸去上清液，并加入洗涤液洗涤，去除未与磁珠结合的物质；
(4)将反应杯置于测量点后，加入激发液混合均匀进行化学发光，利用光电倍增器检测发光强度，根据化学发光数值和提前建立的标准曲线(样本为梯度稀释的阳性标准品)分析样本中真菌1,3-β-D-葡聚糖的浓度。
本实施例同时采用鲎试剂法检测相同样本的真菌1,3-β-D-葡聚糖浓度。
结果如表1和图1所示，检测浓度≥90pg/mL的样本为真菌1,3-β-D-葡聚糖阳性样本，可以看出，基于抗真菌1,3-β-D-葡聚糖单克隆抗体的化学发光检测法和鲎试剂法的检测结果相关性良好(R2>0.98)。
表1
Figure BDA0002940746900000081
Figure BDA0002940746900000091
实施例3样本处理方法对检测结果的影响
本实施例采用不同的样本处理方法预处理样本，并分别采用鲎试剂法和化学发光法检测真菌1,3-β-D-葡聚糖浓度。
结果如表2所示，样本用碱液(1M KOH，0.3M KCl)在37℃处理、0.12M EDTA-2Na在100℃处理或酸性样本释放液(10％HCl，2％Gly)在2～40℃处理，均可以采用化学发光法检测真菌1,3-β-D-葡聚糖浓度(pg/mL)，其检测结果与鲎试剂法相关性好(R2>0.98)。
表2
Figure BDA0002940746900000101
Figure BDA0002940746900000111
实施例4生物素抗干扰效果
本实施例向样本中加入不同浓度的生物素，利用羧基化磁珠偶联抗体作为检测抗体，检测样本中生物素对实施例2的化学发光体系准确性的影响。
结果如表3所示，化学发光法的检测时间较鲎试剂法(50min)显著缩短，仅需10min；在临界值附近样本中添加生物素浓度至640ng/mL，未改变样本的阴阳性检测结果，可见采用羧基化磁珠偶联抗体消除了样本中生物素对结果的干扰。
表3
Figure BDA0002940746900000112
Figure BDA0002940746900000121
实施例5基于抗真菌1,3-β-D-葡聚糖单克隆抗体的酶联免疫吸附检测
本实施例采用可变区如SEQ ID NO:7～8所示的抗真菌1,3-β-D-葡聚糖单克隆抗体作为包被抗体和酶标抗体，构建ELISA检测体系，进行样本中真菌1,3-β-D-葡聚糖的检测，步骤如下：
(1)将抗真菌1,3-β-D-葡聚糖单克隆抗体用0.01M碳酸盐缓冲液(CBS)配制成浓度为1000ng/mL的包被液，按100μL/孔加入到微孔板内，4℃过夜包被，第二天去除包被液后封闭处理1h，烘干30min，制得酶标板；
(2)将HRP标记的抗真菌1,3-β-D-葡聚糖单克隆抗体用偶联物稳定剂配制成浓度为1000ng/mL的酶标抗体；
(3)用EDTA-2Na热处理样本，按100μL/孔加入到酶标板中，37℃孵育20min，洗涤后，按100μL/孔将酶标抗体加入到酶标板中，37℃孵育20min，洗涤；
(4)按100μL/孔将显色底物加入到酶标板中，37℃孵育10min，终止读数。
实施例6基于抗真菌1,3-β-D-葡聚糖单克隆抗体的免疫荧光检测
本实施例采用可变区如SEQ ID NO:7～8所示的抗真菌1,3-β-D-葡聚糖单克隆抗体作为结合抗体和检测抗体，构建免疫荧光检测试剂卡，进行样本中真菌1,3-β-D-葡聚糖的检测，步骤如下：
(1)将1mg/mL荧光微球标记抗真菌1,3-β-D-葡聚糖单克隆抗体划在结合物释放垫上，将1mg/mL抗真菌1,3-β-D-葡聚糖单克隆抗体划在硝酸纤维素膜上，烘干后组装试剂卡；
(2)用EDTA-2Na热处理样本后，将100μL样品加入到试剂卡样本槽内，静置10～15min，用荧光分析仪检测。
综上所述，本发明的抗真菌1,3-β-D-葡聚糖单克隆抗体特异性好、稳定性好，可以快速与真菌1,3-β-D-葡聚糖进行结合，基于所述抗真菌1,3-β-D-葡聚糖单克隆抗体的真菌1,3-β-D-葡聚糖检测方法检测时间短、灵敏度高、准确性好，具有潜在应用价值。
申请人声明，本发明通过上述实施例来说明本发明的详细方法，但本发明并不局限于上述详细方法，即不意味着本发明必须依赖上述详细方法才能实施。所属技术领域的技术人员应该明了，对本发明的任何改进，对本发明产品各原料的等效替换及辅助成分的添加、具体方式的选择等，均落在本发明的保护范围和公开范围之内。
SEQUENCE LISTING
<110> 丹娜（天津）生物科技股份有限公司
<120> 一种抗真菌1,3-β-D-葡聚糖单克隆抗体及其应用
<130> 20210207
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<170> PatentIn version 3.3
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<213> 人工序列
<400> 5
Val Pro Ser Pro Leu Ala Pro Ile Ser Lys Gln Leu
1 5 10
<210> 6
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列
<400> 6
Gln Ala Asn Ile Tyr Ser Tyr Cys Ser Glu
1 5 10
<210> 7
<211> 116
<212> PRT
<213> 人工序列
<400> 7
Gln Ser Leu Glu Glu Ser Gly Gly Arg Leu Val Thr Pro Gly Thr Pro
1 5 10 15
Leu Thr Leu Thr Cys Thr Ala Ser Gly Phe Ser Leu Ser Ser Gly Gly
20 25 30
Asn Thr Asn Gln Gln Lys Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu
35 40 45
Glu Trp Ile Gly Asp Ser Ser Asp Pro Pro Pro Met Ser Leu Leu Thr
50 55 60
Glu Val Arg Phe Thr Ile Ser Lys Thr Pro Thr Thr Val Asp Leu Lys
65 70 75 80
Met Thr Ser Pro Thr Thr Glu Asp Thr Ala Thr His Phe Cys Ala Arg
85 90 95
Asn Asn Met Asp Arg Ala Val Lys Leu Trp Gly Pro Gly Thr Leu Val
100 105 110
Thr Val Ser Ser
115
<210> 8
<211> 114
<212> PRT
<213> 人工序列
<400> 8
Ala Asp Ile Val Met Thr Gln Thr Pro Ser Ser Ala Ser Glu Pro Val
1 5 10 15
Gly Gly Thr Val Thr Ile Lys Cys Gly Leu Cys Asp Glu Thr Arg Phe
20 25 30
Glu Cys Trp Tyr Gln Gln Lys Ala Gly Gln Pro Pro Lys Arg Leu Ile
35 40 45
Tyr Val Pro Ser Pro Leu Ala Pro Ile Ser Lys Gln Leu Gly Val Pro
50 55 60
Ser Arg Phe Lys Gly Ser Gly Ser Gly Thr Glu Phe Thr Leu Thr Ile
65 70 75 80
Ser Asp Leu Glu Cys Ala Asp Ala Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Ala Asn
85 90 95
Ile Tyr Ser Tyr Cys Ser Glu Phe Gly Gly Gly Thr Glu Val Val Val
100 105 110
Lys Gly

Claims (10)

1.一种抗真菌1,3-β-D-葡聚糖单克隆抗体，其特征在于，所述抗真菌1,3-β-D-葡聚糖单克隆抗体包括重链可变区和轻链可变区；
所述重链可变区包括SEQ ID NO:1所示的重链CDR1、SEQ ID NO:2所示的重链CDR2和SEQ ID NO:3所示的重链CDR3；
所述轻链可变区包括SEQ ID NO:4所示的轻链CDR1、SEQ ID NO:5所示的轻链CDR2和SEQ ID NO:6所示的轻链CDR3。
2.根据权利要求1所述的抗真菌1,3-β-D-葡聚糖单克隆抗体，其特征在于，所述重链可变区包括SEQ ID NO:7所示的氨基酸序列；
优选地，所述轻链可变区包括SEQ ID NO:8所示的氨基酸序列。
3.根据权利要求1或2所述的抗真菌1,3-β-D-葡聚糖单克隆抗体，其特征在于，所述抗真菌1,3-β-D-葡聚糖单克隆抗体还包括恒定区；
优选地，所述恒定区包括IgG1、IgG2、IgG3或IgG4恒定区中的任意一种或至少两种的组合。
4.根据权利要求1-3任一项所述的抗真菌1,3-β-D-葡聚糖单克隆抗体，其特征在于，所述抗真菌1,3-β-D-葡聚糖单克隆抗体修饰有缀合物；
优选地，所述缀合物包括化学发光基团、辣根过氧化物酶或荧光基团中的任意一种。
5.一种权利要求1-4任一项所述的抗真菌1,3-β-D-葡聚糖单克隆抗体的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括以下步骤：
(1)取经真菌1,3-β-D-葡聚糖免疫的实验动物的脾细胞，与骨髓瘤细胞进行融合，制备杂交瘤细胞；
(2)从制备的杂交瘤细胞中克隆抗真菌1,3-β-D-葡聚糖单克隆抗体基因，构建含有抗真菌1,3-β-D-葡聚糖单克隆抗体基因的重组表达载体；
(3)将所述重组表达载体导入感受态细胞，从感受态细胞培养上清中分离纯化得到所述抗真菌1,3-β-D-葡聚糖单克隆抗体。
6.一种真菌1,3-β-D-葡聚糖化学发光检测试剂盒，其特征在于，所述真菌1,3-β-D-葡聚糖化学发光检测试剂盒包括检测抗体和信号抗体，所述检测抗体和/或所述信号抗体为权利要求1-4任一项所述的抗真菌1,3-β-D-葡聚糖单克隆抗体；
优选地，所述检测抗体偶联在固相载体上，优选为羧基化固相载体上；
优选地，所述固相载体包括羧基化的磁微粒、酶标板、微球、亲和膜或液相芯片中的任意一种或至少两种的组合；
优选地，所述信号抗体上修饰有化学发光基团；
优选地，所述化学发光基团包括吖啶磺酰胺、吖啶酯、钌复合物、鲁米诺、(金钢烷)-1,2-二氧乙烷或碱性磷酸酶中的任意一种或至少两种的组合。
7.根据权利要求6所述的真菌1,3-β-D-葡聚糖化学发光检测试剂盒，其特征在于，所述真菌1,3-β-D-葡聚糖化学发光检测试剂盒还包括阳性对照品、阴性对照品、激发液、封闭液或洗涤液中的任意一种或至少两种的组合。
8.一种真菌1,3-β-D-葡聚糖酶联免疫吸附检测试剂盒，其特征在于，所述真菌1,3-β-D-葡聚糖酶联免疫吸附检测试剂盒包括权利要求1-4任一项所述的抗真菌1,3-β-D-葡聚糖单克隆抗体；
优选地，所述抗真菌1,3-β-D-葡聚糖单克隆抗体修饰有辣根过氧化物酶；
优选地，所述真菌1,3-β-D-葡聚糖酶联免疫吸附检测试剂盒还包括固相载体，优选为酶标板、磁微粒、微球、亲和膜或液相芯片中的任意一种或至少两种的组合；
优选地，所述真菌1,3-β-D-葡聚糖酶联免疫吸附检测试剂盒还包括封闭液、显色液或终止液中的任意一种或至少两种的组合。
9.一种真菌1,3-β-D-葡聚糖免疫荧光检测试剂盒，其特征在于，所述真菌1,3-β-D-葡聚糖免疫荧光检测试剂盒包括权利要求1-4任一项所述的抗真菌1,3-β-D-葡聚糖单克隆抗体；
优选地，所述抗真菌1,3-β-D-葡聚糖单克隆抗体修饰有荧光基团；
优选地，所述真菌1,3-β-D-葡聚糖免疫荧光检测试剂盒还包括封闭液和/或洗涤液。
10.权利要求1-4任一项所述的抗真菌1,3-β-D-葡聚糖单克隆抗体、权利要求6或7所述的真菌1,3-β-D-葡聚糖化学发光检测试剂盒、权利要求8所述的真菌1,3-β-D-葡聚糖酶联免疫吸附检测试剂盒或权利要求9所述的真菌1,3-β-D-葡聚糖免疫荧光检测试剂盒在制备真菌1,3-β-D-葡聚糖检测产品中的应用。
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