CN112898447B - 一种白首乌多糖的提取方法 - Google Patents

一种白首乌多糖的提取方法 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种白首乌多糖的提取方法，属于植物提纯技术领域。包括以下步骤：将白首乌粉末均匀分散于烷基糖苷溶液后，于40～70℃，循环超声提取20～50min，提取结束后，进行沉淀处理，收集上清液；将上清液通过蒸发使上清液体积浓缩至1/4～1/3后，除去蛋白，再均匀分散于乙醇溶液中，于4℃条件下进行醇沉，收集醇沉液；随后将醇沉液进行沉淀处理，并对沉积物经处理后，即得白首乌多糖。本发明基于循环超声波提取技术上，加入了烷基糖苷作为提取溶剂，能够使白首乌多糖提取率从传统工艺的1.45％提升至2.15％，提升近1.5倍，并且成本大幅度降低，提取时间与原先相比也缩短了三分之二的时间，且提取温度适宜，能够保持多糖活性。

Description

一种白首乌多糖的提取方法
技术领域
本发明属于植物提纯技术领域，具体涉及一种白首乌多糖的提取方法。
背景技术
白首乌(Cynanchum auriculatum)为萝藦科(Asclepiadaceae)鹅绒藤属(Cynanchum)植物，其味甘、苦，性微温，具有滋补肝肾、益精血、抗衰老、乌须发等功效。因其具有抗氧化、抗衰老、清除自由基等功效，白首乌被历代名家视为摄生防老珍品。中国95％的白首乌出产于盐城市滨海县，研究表明，滨海白首乌富含蛋白质、淀粉、维生素、氨基酸、无机盐等营养成分，以及C21甾体、苯酮类、磷脂和多糖等活性成分。但是目前对其研究主要集中在C21甾体提取和成分分析上，而对于白首乌多糖提取工艺及其理化性质的研究相对较少。
随着白首乌的普及，人们对其接受度大大增加，市场上也逐渐出现了比较多的白首乌加工产品，例如白首乌粉发酵乳、白首乌精粉等，但是深加工产品仍十分稀少，白首乌产业仍存在着研发能力不足、品牌效应不强、产品滞销、产品等级低等问题亟需解决。根据调查显示，人们对于白首乌产品的毒性仍心存疑虑，也没有研究阐明白首乌产品中的营养物质是否相互干扰，导致白首乌真正的市场价值无法体现。
目前市常见的植物多糖提取方法有水提法、酶解辅助法、微波辅助提取法等，但这些提取方法要求苛刻，提取方法复杂，提取周期长，提取量少且提取过程中容易破坏多糖活性。传统工艺的高成本、低产率等劣势，导致白首乌多糖在市场销售上尚属空白。
发明内容
为了解决现有技术中的存在的不足，本发明提供了一种白首乌多糖的提取方法，该方法结合循环超声波提取技术，在加入了烷基糖苷作为提取溶剂，能够使白首乌多糖提取率从传统工艺的1.45％提升至2.15％，提升近1.5倍。并且成本大幅度降低，提取时间与原先相比也缩短了三分之二的时间，且提取温度适宜，能够保持多糖活性。
本发明的目的是提供一种白首乌多糖的提取方法，包括以下步骤：
将白首乌粉末均匀分散于烷基糖苷溶液后，于40～70℃，循环超声提取20～50min，提取结束后，进行沉淀处理，收集上清液；
将上清液通过蒸发使上清液体积浓缩至1/4～1/3后，除去蛋白，再均匀分散于乙醇溶液中，于1～5℃条件下进行醇沉，收集醇沉液；随后将醇沉液进行沉淀处理，并对沉积物经处理后，即得白首乌多糖。
优选的，所述烷基糖苷溶液浓度为0.0625～0.25mmol/L。
优选的，循环超声提取过程中，超声功率为300～450w。
优选的，所述除去蛋白采用Sevag法。
优选的，所述沉淀处理均采用离心处理方法；其中，离心转速为4000r/min，离心时长10min。
优选的，所述乙醇溶液为含体积比为80％的无水乙醇溶液。
优选的，所述白首乌粉末是将新鲜的白首乌粉碎至≥80目的粉体而制得。
优选的，沉积物经处理是按照以下步骤进行：
将沉积物用体积比为80％的无水乙醇溶液洗涤三次，再用去离子水将沉淀物复溶，并透析24～48h后，冷冻干燥。
与现有技术相比，本发明的有益效果在于：
本发明提供了一种白首乌多糖的提取方法，以烷基糖苷溶液替代水剂，无毒无刺激，可生物降解，能显著提高多糖得率。以循环超声波技术替代热回流法，可以有效缩短工艺周期，彻底除去白首乌精粉中的毒性物质，并保证白首乌多糖的活性。
本发明基于循环超声波提取技术上，加入了烷基糖苷作为提取溶剂，能够使白首乌多糖提取率从传统工艺的1.45％提升至2.15％，提升近1.5倍，并且成本大幅度降低，提取时间与原先相比也缩短了三分之二的时间，且提取温度适宜，能够保持多糖活性。
本发明提供的白首乌多糖的提取方法，与传统工艺相比，具有周期短、成本低、无毒副作用、得率高、效益高、活性强等优势，通过本技术生产的产品基于抗氧化、抗自由基损伤、抑制褐化等功效，可以应用于美容、生物医药、食品等产业，产业前景一片开阔。
本发明利用前沿技术高效提取白首乌多糖，提升白首乌产业结构，延长白首乌产业链。
附图说明
图1为实施例1～3及对比例1提供的白首乌多糖的提取方法中烷基糖苷溶液浓度对白首乌多糖得率的影响柱状图。
图2为实施例1、4～6提供的白首乌多糖的提取方法中提取时间对白首乌多糖得率的影响柱状图。
图3为实施例1、7～9提供的白首乌多糖的提取方法中超声功率对白首乌多糖得率的影响柱状图。
图4为实施例1、10～12提供的白首乌多糖的提取方法中提取温度对白首乌多糖得率的影响柱状图。
具体实施方式
为了使本领域技术人员更好地理解本发明的技术方案能予以实施，下面结合具体实施例来对本发明作进一步说明，但所举实施例不作为对本发明的限定。
下述各实施例中所述实验方法，如无特殊说明，均为常规方法；所用材料如无特殊说明，均可在市场上购买得到。
实施例1
一种白首乌多糖的提取方法，具体按照以下步骤实施：
(1)白首乌的前处理：取洗净后的白首乌块根100g，切块后放入粉碎机，研磨成粉后过80目筛；
(2)白首乌多糖的提取：将100g白首乌粉末溶于0.125mmol/L烷基糖苷溶液中，置于循环超声提取机，按照提取时间30min、超声功率400W、提取温度为50℃的条件进行提取，提取结束后，将提取液倒入离心杯中，以4000r/min的转速离心10min。
(3)白首乌多糖的沉淀分离：将上清液转入旋蒸瓶，旋转蒸发至1/4体积，随后采用Sevag法除蛋白，加入4倍体积的无水乙醇置于4℃条件下过夜醇沉。将醇沉液于4000r/min离心10min，弃去上清液，将沉淀用80％的乙醇洗涤三次，最后用去离子水将沉淀复溶，离心除去不溶物，将上清液上样于层析柱(Φ26.0mm×300.0nm)，装柱体系1BV(133mL)；分别用蒸馏水和多种浓度NaCl溶液(0.1、0.3、0.5、0.7mol/L)进行梯度洗脱(流速1mL/min，10min/管)，采用苯酚-硫酸法检测多糖含量，绘制洗脱曲线，并收集不同组分的洗脱液；在50℃条件下将收集的洗脱液浓缩至30mL后，用去离子水透析48h后，于-80℃冷冻干燥，得白首乌多糖。
实施例2
一种白首乌多糖的提取方法，具体按照以下步骤实施：
(1)白首乌的前处理：取洗净后的白首乌块根100g，切块后放入粉碎机，研磨成粉后过80目筛；
(2)白首乌多糖的提取：将100g白首乌粉末溶于0.0625mmol/L烷基糖苷溶液中，置于循环超声提取机，按照提取时间30min、超声功率400W、提取温度为50℃的条件进行提取，提取结束后，将提取液倒入离心杯中，以4000r/min的转速离心10min。
(3)白首乌多糖的沉淀分离：将上清液转入旋蒸瓶，旋转蒸发至1/4体积，随后采用Sevag法除蛋白，加入4倍体积的无水乙醇置于4℃条件下过夜醇沉。将醇沉液于4000r/min离心10min，弃去上清液，将沉淀用80％的乙醇洗涤三次，最后用去离子水将沉淀复溶，离心除去不溶物，将上清液上样于层析柱(Φ26.0mm×300.0nm)，装柱体系1BV(133mL)；分别用蒸馏水和多种浓度NaCl溶液(0.1、0.3、0.5、0.7mol/L)进行梯度洗脱(流速1mL/min，10min/管)，采用苯酚-硫酸法检测多糖含量，绘制洗脱曲线，并收集不同组分的洗脱液；在50℃条件下将收集的洗脱液浓缩至30mL后，用去离子水透析48h后冷冻干燥，得白首乌多糖。
实施例3
一种白首乌多糖的提取方法，具体按照以下步骤实施：
(1)白首乌的前处理：取洗净后的白首乌块根100g，切块后放入粉碎机，研磨成粉后过80目筛；
(2)白首乌多糖的提取：将100g白首乌粉末溶于0.25mmol/L烷基糖苷溶液中，置于循环超声提取机，按照提取时间30min、超声功率400W、提取温度为50℃的条件进行提取，提取结束后，将提取液倒入离心杯中，以4000r/min的转速离心10min。
(3)白首乌多糖的沉淀分离：将上清液转入旋蒸瓶，旋转蒸发至1/4体积，随后采用Sevag法除蛋白，加入4倍体积的无水乙醇置于4℃条件下过夜醇沉。将醇沉液于4000r/min离心10min，弃去上清液，将沉淀用80％的乙醇洗涤三次。最后用去离子水将沉淀复溶，离心除去不溶物，将上清液上样于层析柱(Φ26.0mm×300.0nm)，装柱体系1BV(133mL)；分别用蒸馏水和多种浓度NaCl溶液(0.1、0.3、0.5、0.7mol/L)进行梯度洗脱(流速1mL/min，10min/管)，采用苯酚-硫酸法检测多糖含量，绘制洗脱曲线，并收集不同组分的洗脱液；在50℃条件下将收集的洗脱液浓缩至30mL后，用去离子水透析48h后冷冻干燥，得白首乌多糖。
实施例4
一种白首乌多糖的提取方法，具体按照以下步骤实施：
(1)白首乌的前处理：取洗净后的白首乌块根100g，切块后放入粉碎机，研磨成粉后过80目筛；
(2)白首乌多糖的提取：将100g白首乌粉末溶于0.125mmol/L烷基糖苷溶液中，置于循环超声提取机，按照提取时间20min、超声功率400W、提取温度为50℃的条件进行提取，提取结束后，将提取液倒入离心杯中，以4000r/min的转速离心10min。
(3)白首乌多糖的沉淀分离：将上清液转入旋蒸瓶，旋转蒸发至1/4体积，随后采用Sevag法除蛋白，加入4倍体积的无水乙醇置于4℃条件下过夜醇沉。将醇沉液于4000r/min离心10min，弃去上清液，将沉淀用80％的乙醇洗涤三次，最后用去离子水将沉淀复溶，离心除去不溶物，将上清液上样于层析柱(Φ26.0mm×300.0nm)，装柱体系1BV(133mL)；分别用蒸馏水和多种浓度NaCl溶液(0.1、0.3、0.5、0.7mol/L)进行梯度洗脱(流速1mL/min，10min/管)，采用苯酚-硫酸法检测多糖含量，绘制洗脱曲线，并收集不同组分的洗脱液；在50℃条件下将收集的洗脱液浓缩至30mL后，用去离子水透析48h后冷冻干燥，得白首乌多糖。
实施例5
一种白首乌多糖的提取方法，具体按照以下步骤实施：
(1)白首乌的前处理：取洗净后的白首乌块根100g，切块后放入粉碎机，研磨成粉后过80目筛；
(2)白首乌多糖的提取：将100g白首乌粉末溶于0.125mmol/L烷基糖苷溶液中，置于循环超声提取机，按照提取时间40min、超声功率400W、提取温度为50℃的条件进行提取，提取结束后，将提取液倒入离心杯中，以4000r/min的转速离心10min。
(3)白首乌多糖的沉淀分离：将上清液转入旋蒸瓶，旋转蒸发至1/4体积，随后采用Sevag法除蛋白，加入4倍体积的无水乙醇置于4℃条件下过夜醇沉。将醇沉液于4000r/min离心10min，弃去上清液，将沉淀用80％的乙醇洗涤三次，最后用去离子水将沉淀复溶，离心除去不溶物，将上清液上样于层析柱(Φ26.0mm×300.0nm)，装柱体系1BV(133mL)；分别用蒸馏水和多种浓度NaCl溶液(0.1、0.3、0.5、0.7mol/L)进行梯度洗脱(流速1mL/min，10min/管)，采用苯酚-硫酸法检测多糖含量，绘制洗脱曲线，并收集不同组分的洗脱液；在50℃条件下将收集的洗脱液浓缩至30mL后，用去离子水透析48h后冷冻干燥，得白首乌多糖。
实施例6
一种白首乌多糖的提取方法，具体按照以下步骤实施：
(1)白首乌的前处理：取洗净后的白首乌块根100g，切块后放入粉碎机，研磨成粉后过80目筛；
(2)白首乌多糖的提取：将100g白首乌粉末溶于0.125mmol/L烷基糖苷溶液中，置于循环超声提取机，按照提取时间50min、超声功率400W、提取温度为50℃的条件进行提取，提取结束后，将提取液倒入离心杯中，以4000r/min的转速离心10min。
(3)白首乌多糖的沉淀分离：将上清液转入旋蒸瓶，旋转蒸发至1/4体积，随后采用Sevag法除蛋白，加入4倍体积的无水乙醇置于4℃条件下过夜醇沉。将醇沉液于4000r/min离心10min，弃去上清液，将沉淀用80％的乙醇洗涤三次，最后用去离子水将沉淀复溶，离心除去不溶物，将上清液上样于层析柱(Φ26.0mm×300.0nm)，装柱体系1BV(133mL)；分别用蒸馏水和多种浓度NaCl溶液(0.1、0.3、0.5、0.7mol/L)进行梯度洗脱(流速1mL/min，10min/管)，采用苯酚-硫酸法检测多糖含量，绘制洗脱曲线，并收集不同组分的洗脱液；在50℃条件下将收集的洗脱液浓缩至30mL后，用去离子水透析48h后冷冻干燥，得白首乌多糖。
实施例7
一种白首乌多糖的提取方法，具体按照以下步骤实施：
(1)白首乌的前处理：取洗净后的白首乌块根100g，切块后放入粉碎机，研磨成粉后过80目筛；
(2)白首乌多糖的提取：将100g白首乌粉末溶于0.125mmol/L烷基糖苷溶液中，置于循环超声提取机，按照提取时间30min、超声功率300W、提取温度为50℃的条件进行提取，提取结束后，将提取液倒入离心杯中，以4000r/min的转速离心10min。
(3)白首乌多糖的沉淀分离：将上清液转入旋蒸瓶，旋转蒸发至1/4体积，随后采用Sevag法除蛋白，加入4倍体积的无水乙醇置于4℃条件下过夜醇沉。将醇沉液于4000r/min离心10min，弃去上清液，将沉淀用80％的乙醇洗涤三次，最后用去离子水将沉淀复溶，离心除去不溶物，将上清液上样于层析柱(Φ26.0mm×300.0nm)，装柱体系1BV(133mL)；分别用蒸馏水和多种浓度NaCl溶液(0.1、0.3、0.5、0.7mol/L)进行梯度洗脱(流速1mL/min，10min/管)，采用苯酚-硫酸法检测多糖含量，绘制洗脱曲线，并收集不同组分的洗脱液；在50℃条件下将收集的洗脱液浓缩至30mL后，用去离子水透析48h后冷冻干燥，得白首乌多糖。
实施例8
一种白首乌多糖的提取方法，具体按照以下步骤实施：
(1)白首乌的前处理：取洗净后的白首乌块根100g，切块后放入粉碎机，研磨成粉后过80目筛；
(2)白首乌多糖的提取：将100g白首乌粉末溶于0.125mmol/L烷基糖苷溶液中，置于循环超声提取机，按照提取时间30min、超声功率350W、提取温度为50℃的条件进行提取，提取结束后，将提取液倒入离心杯中，以4000r/min的转速离心10min。
(3)白首乌多糖的沉淀分离：将上清液转入旋蒸瓶，旋转蒸发至1/4体积，随后采用Sevag法除蛋白，加入4倍体积的无水乙醇置于4℃条件下过夜醇沉。将醇沉液于4000r/min离心10min，弃去上清液，将沉淀用80％的乙醇洗涤三次，最后用去离子水将沉淀复溶，离心除去不溶物，将上清液上样于层析柱(Φ26.0mm×300.0nm)，装柱体系1BV(133mL)；分别用蒸馏水和多种浓度NaCl溶液(0.1、0.3、0.5、0.7mol/L)进行梯度洗脱(流速1mL/min，10min/管)，采用苯酚-硫酸法检测多糖含量，绘制洗脱曲线，并收集不同组分的洗脱液；在50℃条件下将收集的洗脱液浓缩至30mL后，用去离子水透析48h后冷冻干燥，得白首乌多糖。
实施例9
一种白首乌多糖的提取方法，具体按照以下步骤实施：
(1)白首乌的前处理：取洗净后的白首乌块根100g，切块后放入粉碎机，研磨成粉后过80目筛；
(2)白首乌多糖的提取：将100g白首乌粉末溶于0.125mmol/L烷基糖苷溶液中，置于循环超声提取机，按照提取时间30min、超声功率450W、提取温度为50℃的条件进行提取，提取结束后，将提取液倒入离心杯中，以4000r/min的转速离心10min；
(3)白首乌多糖的沉淀分离：将上清液转入旋蒸瓶，旋转蒸发至1/4体积，随后采用Sevag法除蛋白，加入4倍体积的无水乙醇置于4℃条件下过夜醇沉。将醇沉液于4000r/min离心10min，弃去上清液，将沉淀用80％的乙醇洗涤三次，最后用去离子水将沉淀复溶，离心除去不溶物，将上清液上样于层析柱(Φ26.0mm×300.0nm)，装柱体系1BV(133mL)；分别用蒸馏水和多种浓度NaCl溶液(0.1、0.3、0.5、0.7mol/L)进行梯度洗脱(流速1mL/min，10min/管)，采用苯酚-硫酸法检测多糖含量，绘制洗脱曲线，并收集不同组分的洗脱液；在50℃条件下将收集的洗脱液浓缩至30mL后，用去离子水透析48h后冷冻干燥，得白首乌多糖。
实施例10
一种白首乌多糖的提取方法，具体按照以下步骤实施：
(1)白首乌的前处理：取洗净后的白首乌块根100g，切块后放入粉碎机，研磨成粉后过80目筛；
(2)白首乌多糖的提取：将100g白首乌粉末溶于0.125mmol/L烷基糖苷溶液中，置于循环超声提取机，按照提取时间30min、超声功率400W、提取温度为40℃的条件进行提取，提取结束后，将提取液倒入离心杯中，以4000r/min的转速离心10min；
(3)白首乌多糖的沉淀分离：将上清液转入旋蒸瓶，旋转蒸发至1/4体积，随后采用Sevag法除蛋白，加入4倍体积的无水乙醇置于4℃条件下过夜醇沉。将醇沉液于4000r/min离心10min，弃去上清液，将沉淀用80％的乙醇洗涤三次，最后用去离子水将沉淀复溶，离心除去不溶物，将上清液上样于层析柱(Φ26.0mm×300.0nm)，装柱体系1BV(133mL)；分别用蒸馏水和多种浓度NaCl溶液(0.1、0.3、0.5、0.7mol/L)进行梯度洗脱(流速1mL/min，10min/管)，采用苯酚-硫酸法检测多糖含量，绘制洗脱曲线，并收集不同组分的洗脱液；在50℃条件下将收集的洗脱液浓缩至30mL后，用去离子水透析48h后冷冻干燥，得白首乌多糖。
实施例11
一种白首乌多糖的提取方法，具体按照以下步骤实施：
(1)白首乌的前处理：取洗净后的白首乌块根100g，切块后放入粉碎机，研磨成粉后过80目筛；
(2)白首乌多糖的提取：将100g白首乌粉末溶于0.125mmol/L烷基糖苷溶液中，置于循环超声提取机，按照提取时间30min、超声功率400W、提取温度为60℃的条件进行提取，提取结束后，将提取液倒入离心杯中，以4000r/min的转速离心10min；
(3)白首乌多糖的沉淀分离：将上清液转入旋蒸瓶，旋转蒸发至1/4体积，随后采用Sevag法除蛋白，加入4倍体积的无水乙醇置于4℃条件下过夜醇沉。将醇沉液于4000r/min离心10min，弃去上清液，将沉淀用80％的乙醇洗涤三次，最后用去离子水将沉淀复溶，离心除去不溶物，将上清液上样于层析柱(Φ26.0mm×300.0nm)，装柱体系1BV(133mL)；分别用蒸馏水和多种浓度NaCl溶液(0.1、0.3、0.5、0.7mol/L)进行梯度洗脱(流速1mL/min，10min/管)，采用苯酚-硫酸法检测多糖含量，绘制洗脱曲线，并收集不同组分的洗脱液；在50℃条件下将收集的洗脱液浓缩至30mL后，用去离子水透析48h后冷冻干燥，得白首乌多糖。
实施例12
一种白首乌多糖的提取方法，具体按照以下步骤实施：
(1)白首乌的前处理：取洗净后的白首乌块根100g，切块后放入粉碎机，研磨成粉后过80目筛；
(2)白首乌多糖的提取：将100g白首乌粉末溶于0.125mmol/L烷基糖苷溶液中，置于循环超声提取机，按照提取时间30min、超声功率400W、提取温度为70℃的条件进行提取，提取结束后，将提取液倒入离心杯中，以4000r/min的转速离心10min；
(3)白首乌多糖的沉淀分离：将上清液转入旋蒸瓶，旋转蒸发至1/4体积，随后采用Sevag法除蛋白，加入4倍体积的无水乙醇置于4℃条件下过夜醇沉。将醇沉液于4000r/min离心10min，弃去上清液，将沉淀用80％的乙醇洗涤三次，最后用去离子水将沉淀复溶，离心除去不溶物，将上清液上样于层析柱(Φ26.0mm×300.0nm)，装柱体系1BV(133mL)；分别用蒸馏水和多种浓度NaCl溶液(0.1、0.3、0.5、0.7mol/L)进行梯度洗脱(流速1mL/min，10min/管)，采用苯酚-硫酸法检测多糖含量，绘制洗脱曲线，并收集不同组分的洗脱液；在50℃条件下将收集的洗脱液浓缩至30mL后，用去离子水透析48h后冷冻干燥，得白首乌多糖。
对比例1
与实施例1相同，不同之处在于，未加入烷基糖苷溶液。
为了说明本发明提供的方法对提取白首乌多糖得率的影响，则对实施例1～12及对比例1的提供的方法进行白首乌多糖得率进行测试，见图1～4所示。
图1为实施例1～3及对比例1提供的白首乌多糖的提取方法中烷基糖苷溶液浓度对白首乌多糖得率的影响曲线图。从图1中可知，随着烷基糖苷溶液浓度的提高，白首乌多糖得率逐渐升高，当烷基糖苷溶液浓度达到0.125mmol/L时，白首乌多糖得率最高(1.990％)。这是因为，当烷基糖苷溶液浓度较低时，溶剂与白首乌样品接触不充分，导致提取效率未达峰值。当烷基糖苷溶液浓度超过0.125mmol/L，白首乌多糖得率呈下降趋势，推测该情况的出现是由于烷基糖苷溶液浓度过高会导致溶液和样品混合过度，后续的分离浓缩操作难度增加，溶液和样品间的吸附能力减弱，白首乌细胞壁无法被完全破碎，因此导致了白首乌多糖得率的降低。由此可见，最佳烷基糖苷溶液浓度是0.125mmol/L。
图2为实施例1、4～6提供的白首乌多糖的提取方法中提取时间对白首乌多糖得率的影响曲线图。从图2中可知，随着循环超声波提取时间的延长，白首乌多糖得率逐渐升高，当提取时间为40min时，白首乌多糖得率最高(2.15％)，表明在适宜的时长内，随着循环超声提取时长的增加，白首乌多糖得率逐渐提高。当提取时间超过40min，白首乌多糖得率出现下降，这是由于循环超声时间过长会破坏白首乌多糖结构，促成部分小分子多糖的降解，最终导致了白首乌多糖得率的下降。
图3为实施例1、7～9提供的白首乌多糖的提取方法中超声功率对白首乌多糖得率的影响曲线图。从图3中可知，随着超声功率的增加，白首乌多糖得率逐渐升高，当超声功率达400W时，白首乌多糖得率最高(1.76％)，表明随着超声功率的增加，白首乌多糖得率逐渐提高。当超声功率达450W时，白首乌多糖得率为1.31％，较超声功率400W时显著降低了25.57％，这是因为当超声功率过高时会对多糖分子结构造成破坏，促进了部分多糖的降解，导致白首乌多糖得率的下降。
图4为实施例1、10～12提供的白首乌多糖的提取方法中提取温度对白首乌多糖得率的影响曲线图。从图4中可知，随着提取温度的升高，白首乌多糖得率逐渐升高，当提取温度为50℃时，白首乌多糖得率最高(1.64％)，表明在适宜的提取温度区间内，提取温度的提高有利于白首乌多糖在烷基糖苷溶液中的溶解效率。当提取温度超过50℃，白首乌多糖得率呈下降趋势，推测提取温度过高造成淀粉溶解，淀粉溶解后与部分多糖结合，导致后续去淀粉的工艺流程中造成了部分多糖的损失。
综上，本发明针对当前白首乌多糖提取技术的毒性成分清除不彻底、多糖得率低、周期长、多糖活性受损等缺点，本发明对传统工艺流程进行精简，采用烷基糖苷辅以循环超声波技术，通过设置单因素变量，结合响应面法优化工艺设计，获得最优提取工艺参数。经盐城市白首乌生物工程技术研发中心鉴定，白首乌多糖提取率从传统工艺的1.45％提升至2.15％，提升近1.5倍。并且成本大幅度降低，提取时间与原先相比也缩短了三分之二的时间，且提取温度适宜，能够保持多糖活性。本发明利用前沿技术高效提取白首乌多糖，提升白首乌产业结构，延长白首乌产业链。
本发明提供了一种白首乌多糖的提取方法，以烷基糖苷溶液替代水剂，无毒无刺激，可生物降解，能显著提高多糖得率。以循环超声波技术替代热回流法，可以有效缩短工艺周期，彻底除去白首乌精粉中的毒性物质，并保证白首乌多糖的活性。
本发明提供的白首乌多糖的提取方法，与传统工艺相比，具有周期短、成本低、无毒副作用、得率高、效益高、活性强等优势，通过本技术生产的产品基于抗氧化、抗自由基损伤、抑制褐化等功效，可以应用于美容、生物医药、食品等产业，产业前景一片开阔。
显然，本领域的技术人员可以对本发明进行各种改动和变型而不脱离本发明的精神和范围。这样，倘若本发明的这些修改和变型属于本发明权利要求及其等同技术的范围之内，则本发明也意图包含这些改动和变型在内。

Claims (4)

1.一种白首乌多糖的提取方法，其特征在于，包括以下步骤：
将白首乌粉末均匀分散于烷基糖苷溶液后，于50℃，循环超声提取40min，提取结束后，进行沉淀处理，收集上清液；
将上清液通过蒸发使上清液体积浓缩至1/4~1/3后，除去蛋白，再均匀分散于乙醇溶液中，于1~5℃条件下进行醇沉，收集醇沉液；随后将醇沉液进行沉淀处理，并对沉积物经处理后，即得白首乌多糖；
所述烷基糖苷溶液浓度为0.125mmol/L；
循环超声提取过程中，超声功率为400w；
所述除去蛋白采用Sevag法；
沉积物经处理是按照以下步骤进行：
将沉积物用体积比为80%的无水乙醇溶液洗涤三次，再用去离子水将沉淀物复溶，并透析24~48h后，冷冻干燥。
2.根据权利要求1所述的白首乌多糖的提取方法，其特征在于，所述沉淀处理均采用离心处理方法；其中，离心转速为4000 r/min，离心时长10 min。
3.根据权利要求1所述的白首乌多糖的提取方法，其特征在于，所述乙醇溶液为含体积比为80%的无水乙醇溶液。
4.根据权利要求1所述的白首乌多糖的提取方法，其特征在于，所述白首乌粉末是将新鲜的白首乌粉碎至≥80目的粉体而制得。
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