CN112708606A - 一种高效海参脱皮复配专用酶、制备方法及其应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种高效海参脱皮复配专用酶、制备方法及其应用，其原料包括，木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶、β‑葡聚糖酶、半纤维素酶、植酸酶、端肽酶、酸度调节抗结剂、海藻糖，余量为葡萄糖；将所述原料进行配比放入三维立体搅拌装置搅拌均匀、混合，获得高效海参脱皮复配专用酶；将海参浸泡在清水中，按重量比例加入高效海参复配专用酶，搅拌，可高效、快速的脱去海参皮，应用在不同种类的海参，如茄参、刺参等，都能达到等同效果。本发明各组分之间协同作用，利用复配酶水解把海参结缔组织蛋白质通过水解度的控制，使海参快速去皮、脱色，安全、营养、健康、高效；本发明无需低温冷冻，人工去皮，机械去皮等操作，操作简单，脱皮效果显著。
Description
【技术领域】
本发明属于生物加工激素和领域，具体设计一种高效海参脱皮复配专用酶、制备方法及其应用。
【背景技术】
海参其营养价值高，需求量不断增加，利用其功能开发的食品已经成为海参深加工的重要方向，但海参外皮存在大量色素、泥沙、影响其产品品质，不利于海参产品的深加工，在追求营养、色、香、味俱全的现代社会，海参如何又快又好的脱皮成为一个棘手的问题。
人工脱皮、酸法脱皮、碱法脱皮、单体酶脱皮时，因可控性差、效率低、营养成分流失、出品率低等问题存在而不能完全达到市场需求。酶法对海参脱皮相对于其他方法具有很多优点，即生产应用条件温和、安全、操作简单，经过酶法脱皮的相比高效，目前酶法在海参脱皮、海参加工中得到广泛应用。
目前也有单体酶进行对海参脱皮的，但是由于水解度没有定向特异性水解，容易出现水解过度导致海参蛋白分解成肽类溶解在水中流失掉，同时海参经过酶解，参体会溶烂，影响成品率和海参的完整，或者水解结蒂组织蛋白的位点单一，导致海参皮脱落不完全。
在海参脱皮专用复配酶产品的开发上，酶的协同作用和定向水解能为传统海参加工行业开创出新的机会；其生物学功能和市场经济价值正在被人们关注，这方面的研究也逐渐成为人们研究的热点。
中国申请专利(CN201110302730.3)公开了一种东海海参的快速脱皮方法，使用食品级胃蛋白酶、木瓜蛋白酶和碱性蛋白酶加水复配而成的酶解液进行海参脱皮，海参需要先在-40℃下速冻定型，再置于磨皮机中脱皮，去除内脏和表面泥沙后，使用酶解液进行脱皮，过程繁琐复杂，并且还出现需要进行第二次脱皮的海参。
【发明内容】
本发明的目的在于提供一种高效海参脱皮复配专用酶、制备方法及其应用，以解决现有技术脱除海参皮可控性差、效率低、营养成分流失、出品率底等问题，利用专用酶高效海参脱皮，并不破坏海参体胶原蛋白结构，达到安全、营养、健康、高效的目的，满足人们对海参的需求。
为解决上述问题，本发明采用以下技术方案：
一种高效海参脱皮复配专用酶，原料按重量百分比包括木瓜蛋白酶10％- 15％、菠萝蛋白酶10％-12.5％、β-葡聚糖酶8％-10.5％、半纤维素酶5％-8％、植酸酶3％-5％、端肽酶2％-3％、酸度调节抗结剂0.3％-0.5％，、海藻糖8％-11％，余量为葡萄糖。
进一步的，所述酸度抗结剂为乳酸。
一种高效海参脱皮复配专用酶制备方法，包括以下步骤：
S1：提取木瓜蛋白酶：采集番木瓜浆，将木瓜浆和水按照1:5的重量比混匀，待木瓜浆充分溶解浸提30-60分钟，过滤，过滤液30分钟内通过微滤生物有机膜除杂质除菌至食品级菌落总数，再通过超滤生物膜浓缩至60-70％浓度，干燥 A得到纯度≧98％的木瓜蛋白酶，粉碎到90％能通过80目标准筛粉状备用；
S2：提取菠萝蛋白酶：将菠萝汁和水按照1:5的重量比混合，混合液30分钟内通过微滤生物有机膜除杂质除菌至食品级菌落总数，再通过超滤生物膜浓缩至60-70％浓度，干燥A得到纯度≧98％的菠萝蛋白酶，粉碎到90％能通过80目标准筛粉状备用；
S3：制取β-葡聚糖酶：培养分离、筛选能产β-葡聚糖酶的优良黑曲霉、烟曲霉、枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌中的一种或多种，并通过诱变育种；将经过诱变的高产菌株发酵得到粗制酶；将粗制酶按1:5的重量加水搅拌溶解浸提30- 60分钟，过滤，滤液15分钟内通过微滤生物有机膜除杂质除菌至食品级菌落总数，再通过超滤生物膜浓缩至60-70％浓度，干燥B得到纯度≧98％的β-葡聚糖酶粉碎到90％能通过80目标准筛粉状备用；
S4：制取纤维素酶：培养分离、筛选能产半纤维素酶的优良黑曲霉，并通过诱变育种；将经过诱变的高产菌株进行固态谷物原料发酵得到粗制酶；将粗制酶按1:10的重量加水搅拌溶解浸提30-60分钟，过滤，滤液15分钟内通过微滤生物有机膜除杂质除菌至食品级菌落总数，再通过超滤生物膜浓缩至60-70％浓度，干燥B得到纯度≧98％的纤维素酶，粉碎到90％能通过80目标准筛粉状备用；
S5：制取植酸酶的：培养分离、筛选能产植酸酶的优良米曲霉、绿色木霉、产朊假丝酵母，并通过诱变育种；将经过诱变的高产菌株进行固态谷物原料发酵得到粗制酶；将粗制酶按1:3的重量加水搅拌溶解浸提20-40分钟，过滤，滤液 15分钟内通过微滤生物有机膜除杂质除菌至食品级菌落总数，再通过超滤生物膜浓缩至60-70％浓度，干燥B得到纯度≧98％的植酸酶备用；
S6：端肽酶的制备：对米曲霉菌株进行PDA平板初筛及复筛，得到高酶活菌株进行保藏和备用；将高酶活菌株接种到高温蒸煮过的固态谷物原料培养基中进行固态发酵得到端肽酶粗制酶；将粗制酶按1:10的重量加水搅拌溶解浸提30- 60分钟，过滤，滤液15分钟内通过微滤生物有机膜除杂质除菌至食品级菌落总数，再通过超滤生物膜浓缩至60-70％浓度，干燥B得到纯度≧98％的植酸酶备用；
S7：将食品级乳酸粉、海藻糖分别粉碎至90％能通过80目标准筛备用；
S8：将步骤S1-S7中备好的原料按照重量百分比木瓜蛋白酶10％-15％、菠萝蛋白酶10％-12.5％、β-葡聚糖酶8％-10.5％、半纤维素酶5％-8％、植酸酶3％- 5％、端肽酶2％-3％、酸度调节抗结剂0.3％-0.5％、海藻糖8％-11％、余量为葡萄糖的配比放入三维立体搅拌机中进行搅拌均匀混合。
进一步的，所述步骤S1-S6中食品级菌落总数为≤1×104cfu/g。
进一步的，所述步骤S1-S2中干燥A为冷冻干燥，所述步骤S3-S6中干燥B 为喷雾干燥。所述步骤S3-S5中诱变为物理、化学诱变剂相结合来动摇菌种的遗传性从而进行复合变异。
一种高效海参脱皮复配专用酶的应用，应用于未脱皮干海参和鲜海参；
其中应用于未脱皮干海参：干海参加水泡发，泡发后捞出置于清水中，控制物料温度，加入海参脱皮复配专用酶，翻动式搅拌5-15分钟，第二次捞出并清洗干净后，脱皮完成，可进行煮制或者加工；
其中应用于鲜海参：将鲜海参放置于水中加热5-10分钟，待冷却至室温后捞出，放置于清水中，控制物料温度，加入海参脱皮复配专用酶，翻动式搅拌5- 15分钟，第二次捞出并清洗干净后，脱皮完成，可进行煮制或者加工。
进一步的，所述干海参加水泡发以1小时内不增重、体积不增大视为泡发完成。
进一步的，所述应用于未脱皮干海参和鲜海参中清水重量不得超过海参的 0.5-1.0倍。
进一步的，所述应用于未脱皮干海参和鲜海参中加入海参脱皮复配专用酶为海参重量的0.1-0.3％。
进一步的，所述应用于未脱皮干海参和鲜海参中物料温度控制在20-50℃。
本发明具有以下有益效果：
(1)利用物理、化学等诱变剂相结合来动摇菌种的遗传性进行复合诱变，使诱变育种后的群体中筛选优良高活力酶目标菌株，目标菌株产酶相比行业高出 30-40％酶活力；
(2)将微生物酶发酵产物或含酶植物原料加纯化水浸提30-60分钟，经过滤，除菌，浓缩，现代干燥技术提纯化后酶制剂纯度≥98％，酶活力均相比行业高出20-30％；
(3)将利用内、外切酶协同作用于海参结缔组织蛋白结合位点，能特异定向水解使结蒂组织分子之间的连接键发生断裂，从而破坏它们的分子结构，使表皮溶出脱落，脱皮率达98％以上；
(4)通过水解度的控制，，使海参表面结缔组织蛋白水解，达到海参外层皮质和参肉快速分离，而附着在表面的钙质或者石灰等物也随之脱落，达到去皮、脱色的目的，同时海参体胶原蛋白结构不会破坏，保留海参的营养成分和口感，综合解决了传统脱皮加工效率低、安全性低、可操作性差的问题。
【附图说明】
图1是干茄参原料图；
图2是茄参经海参脱皮复配专用酶处理后效果图；
图3是刺参湿原料图；
图4是刺参经海参脱皮复配专用酶处理后效果图。
【具体实施方式】
下面结合附图进一步解释说明本发明，应该强调的是，以下仅仅是示例性的，而不是为了限制本发明的范围及其应用，任何在此基础上做出的等同变换或者替代都均落入本发明的保护范围。
实施例1
一种高效海参脱皮复配专用酶制备方法，包括以下步骤：
S1：提取木瓜蛋白酶：采集番木瓜浆，将木瓜浆和水按照1:5的重量比混匀，待木瓜浆充分溶解浸提30分钟，过滤，过滤液30分钟内通过微滤生物有机膜除杂质除菌至食品级菌落总数≤1×104cfu/g，再通过超滤生物膜浓缩至70％浓度，冷冻干燥得到纯度≧98％的木瓜蛋白酶，粉碎到90％能通过80目标准筛粉状备用；
S2：提取菠萝蛋白酶：将菠萝汁和水按照1:5的重量比混合，混合液30分钟内通过微滤生物有机膜除杂质除菌至食品级菌落总数≤1×104cfu/g，再通过超滤生物膜浓缩至70％浓度，冷冻干燥得到纯度≧98％的菠萝蛋白酶，粉碎到90％能通过80目标准筛粉状备用；
S3：制取β-葡聚糖酶：培养分离、筛选能产β-葡聚糖酶的优良黑曲霉、烟曲霉、枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌中的一种或多种，并通过物理、化学诱变剂相结合来动摇菌种的遗传性从而进行复合变异；将经过诱变的高产菌株发酵得到粗制酶；将粗制酶按1:5的重量加水搅拌溶解浸提60分钟，过滤，滤液15分钟内通过微滤生物有机膜除杂质除菌至食品级菌落总数≤1×104cfu/g，再通过超滤生物膜浓缩至70％浓度，喷雾干燥得到纯度≧98％的β-葡聚糖酶粉碎到90％能通过80目标准筛粉状备用；
S4：制取纤维素酶：培养分离、筛选能产半纤维素酶的优良黑曲霉，并通过物理、化学诱变剂相结合来动摇菌种的遗传性从而进行复合变异；将经过诱变的高产菌株进行固态谷物原料发酵得到粗制酶；将粗制酶按1:10的重量加水搅拌溶解浸提45分钟，过滤，滤液15分钟内通过微滤生物有机膜除杂质除菌至菌落总数≤1×104cfu/g，再通过超滤生物膜浓缩至70％浓度，喷雾干燥得到纯度≧98％的纤维素酶.粉碎到90％能通过80目标准筛粉状备用；
S5：制取植酸酶的：培养分离、筛选能产植酸酶的优良米曲霉、绿色木霉、产朊假丝酵母，并通过物理、化学诱变剂相结合来动摇菌种的遗传性从而进行复合变异；将经过诱变的高产菌株进行固态谷物原料发酵得到粗制酶；将粗制酶按 1:3的重量加水搅拌溶解浸提25分钟，过滤，滤液15分钟内通过微滤生物有机膜除杂质除菌至食品级菌落总数≤1×104cfu/g，再通过超滤生物膜浓缩至70％浓度，喷雾干燥得到纯度≧98％的植酸酶备用；
S6：端肽酶的制备：对米曲霉菌株进行PDA平板初筛及复筛，得到高酶活菌株进行保藏和备用；将高酶活菌株接种到高温蒸煮过的固态谷物原料培养基中进行固态发酵得到端肽酶粗制酶；将粗制酶按1:10的重量加水搅拌溶解浸提40 分钟，过滤，滤液15分钟内通过微滤生物有机膜除杂质除菌至食品级菌落总数≤1×104cfu/g，再通过超滤生物膜浓缩至70％浓度，喷雾干燥得到纯度≧98％的植酸酶备用；
S7：将食品级乳酸粉、海藻糖分别粉碎至90％能通过80目标准筛备用；
S8：将步骤S1-S7中备好的原料按照重量百分比木瓜蛋白酶10％，菠萝蛋白酶12.5％，β-葡聚糖酶8％，半纤维素酶5％、植酸酶3％，端肽酶2％、酸度调节抗结剂0.5％，海藻糖11％，葡萄糖48％的配比放入三维立体搅拌机中进行搅拌均匀混合。
将高效海参脱皮复配专用酶应用于干茄参
干茄参5kg加水泡发，达到1个小时不增重、体积不增大视为泡发完成，泡发后捞出置于2.5kg清水中，控制物料温度为50℃，加入海参脱皮复配专用酶 0.005kg，翻动式搅拌5分钟，第二次捞出并清洗干净后，脱皮完成，可进行煮制或者加工。
实施例2
一种高效海参脱皮复配专用酶制备方法，包括以下步骤：
S1：提取木瓜蛋白酶：采集番木瓜浆，将木瓜浆和水按照1:5的重量比混匀，待木瓜浆充分溶解浸提30分钟，过滤，过滤液30分钟内通过微滤生物有机膜除杂质除菌至食品级菌落总数≤1×104cfu/g，再通过超滤生物膜浓缩至70％浓度，冷冻干燥得到纯度≧98％的木瓜蛋白酶，粉碎到90％能通过80目标准筛粉状备用；
S2：提取菠萝蛋白酶：将菠萝汁和水按照1:5的重量比混合，混合液30分钟内通过微滤生物有机膜除杂质除菌至食品级菌落总数≤1×104cfu/g，再通过超滤生物膜浓缩至70％浓度，冷冻干燥得到纯度≧98％的菠萝蛋白酶，粉碎到90％能通过80目标准筛粉状备用；
S3：制取β-葡聚糖酶：培养分离、筛选能产β-葡聚糖酶的优良黑曲霉、烟曲霉、枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌中的一种或多种，并通过物理、化学诱变剂相结合来动摇菌种的遗传性从而进行复合变异；将经过诱变的高产菌株发酵得到粗制酶；将粗制酶按1:5的重量加水搅拌溶解浸提60分钟，过滤，滤液15分钟内通过微滤生物有机膜除杂质除菌至食品级菌落总数≤1×104cfu/g，再通过超滤生物膜浓缩至70％浓度，喷雾干燥得到纯度≧98％的β-葡聚糖酶粉碎到90％能通过80目标准筛粉状备用；
S4：制取纤维素酶：培养分离、筛选能产半纤维素酶的优良黑曲霉，并通过物理、化学诱变剂相结合来动摇菌种的遗传性从而进行复合变异；将经过诱变的高产菌株进行固态谷物原料发酵得到粗制酶；将粗制酶按1:10的重量加水搅拌溶解浸提45分钟，过滤，滤液15分钟内通过微滤生物有机膜除杂质除菌至菌落总数≤1×104cfu/g，再通过超滤生物膜浓缩至70％浓度，喷雾干燥得到纯度≧98％的纤维素酶.粉碎到90％能通过80目标准筛粉状备用；
S5：制取植酸酶的：培养分离、筛选能产植酸酶的优良米曲霉、绿色木霉、产朊假丝酵母，并通过物理、化学诱变剂相结合来动摇菌种的遗传性从而进行复合变异；将经过诱变的高产菌株进行固态谷物原料发酵得到粗制酶；将粗制酶按 1:3的重量加水搅拌溶解浸提25分钟，过滤，滤液15分钟内通过微滤生物有机膜除杂质除菌至食品级菌落总数≤1×104cfu/g，再通过超滤生物膜浓缩至70％浓度，喷雾干燥得到纯度≧98％的植酸酶备用；
S6：端肽酶的制备：对米曲霉菌株进行PDA平板初筛及复筛，得到高酶活菌株进行保藏和备用；将高酶活菌株接种到高温蒸煮过的固态谷物原料培养基中进行固态发酵得到端肽酶粗制酶；将粗制酶按1:10的重量加水搅拌溶解浸提40 分钟，过滤，滤液15分钟内通过微滤生物有机膜除杂质除菌至食品级菌落总数≤1×104cfu/g，再通过超滤生物膜浓缩至70％浓度，喷雾干燥得到纯度≧98％的植酸酶备用；
S7：将食品级乳酸粉、海藻糖分别粉碎至90％能通过80目标准筛备用；
S8：将步骤S1-S7中备好的原料按照重量百分比木瓜蛋白酶15％，菠萝蛋白酶10％，β-葡聚糖酶10.5％，半纤维素酶8％、植酸酶5％，端肽酶3％、酸度调节抗结剂0.3％，海藻糖8％，葡萄糖40.2的配比放入三维立体搅拌机中进行搅拌均匀混合。
将高效海参脱皮复配专用酶应用于干茄参
干茄参5kg加水泡发，达到1个小时不增重、体积不增大视为泡发完成，泡发后捞出置于5kg清水中，控制物料温度为20℃，加入海参脱皮复配专用酶0.015kg，翻动式搅拌15分钟，第二次捞出并清洗干净后，脱皮完成，可进行煮制或者加工。
实施例3
一种高效海参脱皮复配专用酶制备方法，包括以下步骤：
S1：提取木瓜蛋白酶：采集番木瓜浆，将木瓜浆和水按照1:5的重量比混匀，待木瓜浆充分溶解浸提30分钟，过滤，过滤液30分钟内通过微滤生物有机膜除杂质除菌至食品级菌落总数≤1×104cfu/g，再通过超滤生物膜浓缩至70％浓度，冷冻干燥得到纯度≧98％的木瓜蛋白酶，粉碎到90％能通过80目标准筛粉状备用；
S2：提取菠萝蛋白酶：将菠萝汁和水按照1:5的重量比混合，混合液30分钟内通过微滤生物有机膜除杂质除菌至食品级菌落总数≤1×104cfu/g，再通过超滤生物膜浓缩至70％浓度，冷冻干燥得到纯度≧98％的菠萝蛋白酶，粉碎到90％能通过80目标准筛粉状备用；
S3：制取β-葡聚糖酶：培养分离、筛选能产β-葡聚糖酶的优良黑曲霉、烟曲霉、枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌中的一种或多种，并通过物理、化学诱变剂相结合来动摇菌种的遗传性从而进行复合变异；将经过诱变的高产菌株发酵得到粗制酶；将粗制酶按1:5的重量加水搅拌溶解浸提60分钟，过滤，滤液15分钟内通过微滤生物有机膜除杂质除菌至食品级菌落总数≤1×104cfu/g，再通过超滤生物膜浓缩至70％浓度，喷雾干燥得到纯度≧98％的β-葡聚糖酶粉碎到90％能通过80目标准筛粉状备用；
S4：制取纤维素酶：培养分离、筛选能产半纤维素酶的优良黑曲霉，并通过物理、化学诱变剂相结合来动摇菌种的遗传性从而进行复合变异；将经过诱变的高产菌株进行固态谷物原料发酵得到粗制酶；将粗制酶按1:10的重量加水搅拌溶解浸提45分钟，过滤，滤液15分钟内通过微滤生物有机膜除杂质除菌至菌落总数≤1×104cfu/g，再通过超滤生物膜浓缩至70％浓度，喷雾干燥得到纯度≧98％的纤维素酶.粉碎到90％能通过80目标准筛粉状备用；
S5：制取植酸酶的：培养分离、筛选能产植酸酶的优良米曲霉、绿色木霉、产朊假丝酵母，并通过物理、化学诱变剂相结合来动摇菌种的遗传性从而进行复合变异；将经过诱变的高产菌株进行固态谷物原料发酵得到粗制酶；将粗制酶按 1:3的重量加水搅拌溶解浸提25分钟，过滤，滤液15分钟内通过微滤生物有机膜除杂质除菌至食品级菌落总数≤1×104cfu/g，再通过超滤生物膜浓缩至70％浓度，喷雾干燥得到纯度≧98％的植酸酶备用；
S6：端肽酶的制备：对米曲霉菌株进行PDA平板初筛及复筛，得到高酶活菌株进行保藏和备用；将高酶活菌株接种到高温蒸煮过的固态谷物原料培养基中进行固态发酵得到端肽酶粗制酶；将粗制酶按1:10的重量加水搅拌溶解浸提40 分钟，过滤，滤液15分钟内通过微滤生物有机膜除杂质除菌至食品级菌落总数≤1×104cfu/g，再通过超滤生物膜浓缩至70％浓度，喷雾干燥得到纯度≧98％的植酸酶备用；
S7：将食品级乳酸粉、海藻糖分别粉碎至90％能通过80目标准筛备用；
S8：将步骤S1-S7中备好的原料按照重量百分比木瓜蛋白酶10％，菠萝蛋白酶12.5％，β-葡聚糖酶10.5％，半纤维素酶5％、植酸酶3％，端肽酶2％、酸度调节抗结剂0.5％，海藻糖8％，葡萄糖48.5％的配比放入三维立体搅拌机中进行搅拌均匀混合。
将高效海参脱皮复配专用酶应用于鲜海参
将5kg鲜刺海参放置于80℃水中加热10分钟，待冷却至室温后捞出，放置于2.5kg清水中，控制物料温度为20℃，加入海参脱皮复配专用酶0.015kg，翻动式搅拌15分钟，第二次捞出并清洗干净后，脱皮完成，可进行煮制或者加工。
实施例4
一种高效海参脱皮复配专用酶制备方法，包括以下步骤：
S1：提取木瓜蛋白酶：采集番木瓜浆，将木瓜浆和水按照1:5的重量比混匀，待木瓜浆充分溶解浸提30分钟，过滤，过滤液30分钟内通过微滤生物有机膜除杂质除菌至食品级菌落总数≤1×104cfu/g，再通过超滤生物膜浓缩至70％浓度，冷冻干燥得到纯度≧98％的木瓜蛋白酶，粉碎到90％能通过80目标准筛粉状备用；
S2：提取菠萝蛋白酶：将菠萝汁和水按照1:5的重量比混合，混合液30分钟内通过微滤生物有机膜除杂质除菌至食品级菌落总数≤1×104cfu/g，再通过超滤生物膜浓缩至70％浓度，冷冻干燥得到纯度≧98％的菠萝蛋白酶，粉碎到90％能通过80目标准筛粉状备用；
S3：制取β-葡聚糖酶：培养分离、筛选能产β-葡聚糖酶的优良黑曲霉、烟曲霉、枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌中的一种或多种，并通过物理、化学诱变剂相结合来动摇菌种的遗传性从而进行复合变异；将经过诱变的高产菌株发酵得到粗制酶；将粗制酶按1:5的重量加水搅拌溶解浸提60分钟，过滤，滤液15分钟内通过微滤生物有机膜除杂质除菌至食品级菌落总数≤1×104cfu/g，再通过超滤生物膜浓缩至70％浓度，喷雾干燥得到纯度≧98％的β-葡聚糖酶粉碎到90％能通过80目标准筛粉状备用；
S4：制取纤维素酶：培养分离、筛选能产半纤维素酶的优良黑曲霉，并通过物理、化学诱变剂相结合来动摇菌种的遗传性从而进行复合变异；将经过诱变的高产菌株进行固态谷物原料发酵得到粗制酶；将粗制酶按1:10的重量加水搅拌溶解浸提45分钟，过滤，滤液15分钟内通过微滤生物有机膜除杂质除菌至菌落总数≤1×104cfu/g，再通过超滤生物膜浓缩至70％浓度，喷雾干燥得到纯度≧98％的纤维素酶.粉碎到90％能通过80目标准筛粉状备用；
S5：制取植酸酶的：培养分离、筛选能产植酸酶的优良米曲霉、绿色木霉、产朊假丝酵母，并通过物理、化学诱变剂相结合来动摇菌种的遗传性从而进行复合变异；将经过诱变的高产菌株进行固态谷物原料发酵得到粗制酶；将粗制酶按 1:3的重量加水搅拌溶解浸提25分钟，过滤，滤液15分钟内通过微滤生物有机膜除杂质除菌至食品级菌落总数≤1×104cfu/g，再通过超滤生物膜浓缩至70％浓度，喷雾干燥得到纯度≧98％的植酸酶备用；
S6：端肽酶的制备：对米曲霉菌株进行PDA平板初筛及复筛，得到高酶活菌株进行保藏和备用；将高酶活菌株接种到高温蒸煮过的固态谷物原料培养基中进行固态发酵得到端肽酶粗制酶；将粗制酶按1:10的重量加水搅拌溶解浸提40 分钟，过滤，滤液15分钟内通过微滤生物有机膜除杂质除菌至食品级菌落总数≤1×104cfu/g，再通过超滤生物膜浓缩至70％浓度，喷雾干燥得到纯度≧98％的植酸酶备用；
S7：将食品级乳酸粉、海藻糖分别粉碎至90％能通过80目标准筛备用；
S8：将步骤S1-S7中备好的原料按照重量百分比木瓜蛋白酶15％，菠萝蛋白酶10％，β-葡聚糖酶8％，半纤维素酶8％、植酸酶5％，端肽酶3％、酸度调节抗结剂0.3％，海藻糖11％，葡萄糖39.7％的配比放入三维立体搅拌机中进行搅拌均匀混合。
将高效海参脱皮复配专用酶应用于鲜海参
将5kg鲜刺海参放置于100℃水中加热5分钟，待冷却至室温后捞出，放置于5kg清水中，控制物料温度为50℃，加入海参脱皮复配专用酶0.005kg，翻动式搅拌5分钟，第二次捞出并清洗干净后，脱皮完成，可进行煮制或者加工。
对比例1
操作步骤和实施例2完全相同，唯有不同的是，不加入海参脱皮复配专用酶，使用人工软刷进行脱皮。
对比例2
操作步骤和实施例2完全相同，唯有不同的是，不加入海参脱皮复配专用酶，加入0.1kg醋酸。
对比例3
操作步骤和实施例2完全相同，唯有不同的是，不加入海参脱皮复配专用酶，加入0.05kg烧碱。
对比例4
操作步骤和实施例2完全相同，唯有不同的是，不加入海参脱皮复配专用酶，加入0.015kg木瓜蛋白酶。
对比例5
操作步骤和实施例3完全相同，唯有不同的是，不加入海参脱皮复配专用酶，使用人工软刷进行脱皮。
对比例6
操作步骤和实施例3完全相同，唯有不同的是，不加入海参脱皮复配专用酶，加入0.1kg醋酸。
对比例7
操作步骤和实施例3完全相同，唯有不同的是，不加入海参脱皮复配专用酶，加入0.05kg烧碱。
对比例8
操作步骤和实施例3完全相同，唯有不同的是，不加入海参脱皮复配专用酶，加入0.015kg木瓜蛋白酶。
将实施例1-2和对比例1-4实验得到的结果对比，得到结果如表1，表2。
表1不同脱皮方法对茄参脱皮效率对比
表2不同脱皮方法对茄参脱皮后质量对比表
将实施例3-4和对比例5-8实验得到的结果对比，得到结果如表3，表4。
表3不同脱皮方法对刺身脱皮效率对比表
表4不同脱皮方法对刺参脱皮后质量对比表
根据表1所记载数据，使用本发明海参脱皮复配专用酶应用于干茄参在5分钟就能达到85％的脱皮率，在15分钟后脱皮率达到了99％，使用人工软刷进行处理65分钟时才达到96％，时间快了50分钟，提升了76.9％以上；并且在长时间使用醋酸、烧碱会使海参融化，不能达到85％以上的脱皮率；使用重量比为0.3％的木瓜蛋白酶在65分钟时脱皮率仅84％，远不及人工软刷。同理可以计算得到海参脱皮复配专用酶应用在湿刺参上的脱皮率也远超其他对比例。综上，可见使用本发明对海参进行脱皮处理，通过水解度的控制，使海参表面结缔组织蛋白水解，达到海参外层皮质和参肉快速分离，并且附着在表皮的钙质或者石灰等物质也会随之脱落，真正达到高效的海参去皮脱色目的，同时不会破坏海参体胶原蛋白结构，保留海参的营养成分和口感。
以上内容不能认定本发明的具体实施仅局限于这些说明，对本发明所述技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干简单推演或替换，都应当视为属于本发明所提交的权利要求书确定的专利保护范围。
Claims (10)
1.一种高效海参脱皮复配专用酶，其特征在于，原料按重量百分比包括木瓜蛋白酶10％-15％、菠萝蛋白酶10％-12.5％、β-葡聚糖酶8％-10.5％、半纤维素酶5％-8％、植酸酶3％-5％、端肽酶2％-3％、酸度调节抗结剂0.3％-0.5％，、海藻糖8％-11％，余量为葡萄糖。
2.根据权利要求1所述的一种高效海参脱皮复配专用酶，其特征在于，所述酸度拮抗剂为乳酸。
3.一种根据权利要求1或2所述的一种高效海参脱皮复配专用酶制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
S1：提取木瓜蛋白酶：采集番木瓜浆，将木瓜浆和水按照1:5的重量比混匀，待木瓜浆充分溶解浸提30-60分钟，过滤，过滤液30分钟内通过微滤生物有机膜除杂质除菌至食品级菌落总数，再通过超滤生物膜浓缩至60-70％浓度，干燥A得到纯度≧98％的木瓜蛋白酶，粉碎到90％能通过80目标准筛粉状备用；
S2：提取菠萝蛋白酶：将菠萝汁和水按照1:5的重量比混合，混合液30分钟内通过微滤生物有机膜除杂质除菌至食品级菌落总数，再通过超滤生物膜浓缩至60-70％浓度，干燥A得到纯度≧98％的菠萝蛋白酶，粉碎到90％能通过80目标准筛粉状备用；
S3：制取β-葡聚糖酶：培养分离、筛选能产β-葡聚糖酶的优良黑曲霉、烟曲霉、枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌中的一种或多种，并通过诱变育种；将经过诱变的高产菌株发酵得到粗制酶；将粗制酶按1:5的重量加水搅拌溶解浸提30-60分钟，过滤，滤液15分钟内通过微滤生物有机膜除杂质除菌至食品级菌落总数，再通过超滤生物膜浓缩至60-70％浓度，干燥B得到纯度≧98％的β-葡聚糖酶粉碎到90％能通过80目标准筛粉状备用；
S4：制取纤维素酶：培养分离、筛选能产半纤维素酶的优良黑曲霉，并通过诱变育种；将经过诱变的高产菌株进行固态谷物原料发酵得到粗制酶；将粗制酶按1:10的重量加水搅拌溶解浸提30-60分钟，过滤，滤液15分钟内通过微滤生物有机膜除杂质除菌至食品级菌落总数，再通过超滤生物膜浓缩至60-70％浓度，干燥B得到纯度≧98％的纤维素酶，粉碎到90％能通过80目标准筛粉状备用；
S5：制取植酸酶的：培养分离、筛选能产植酸酶的优良米曲霉、绿色木霉、产朊假丝酵母，并通过诱变育种；将经过诱变的高产菌株进行固态谷物原料发酵得到粗制酶；将粗制酶按1:3的重量加水搅拌溶解浸提20-40分钟，过滤，滤液15分钟内通过微滤生物有机膜除杂质除菌至食品级菌落总数，再通过超滤生物膜浓缩至60-70％浓度，干燥B得到纯度≧98％的植酸酶备用；
S6：端肽酶的制备：对米曲霉菌株进行PDA平板初筛及复筛，得到高酶活菌株进行保藏和备用；将高酶活菌株接种到高温蒸煮过的固态谷物原料培养基中进行固态发酵得到端肽酶粗制酶；将粗制酶按1:10的重量加水搅拌溶解浸提30-60分钟，过滤，滤液15分钟内通过微滤生物有机膜除杂质除菌至食品级菌落总数，再通过超滤生物膜浓缩至60-70％浓度，干燥B得到纯度≧98％的植酸酶备用；
S7：将食品级乳酸粉、海藻糖分别粉碎至90％能通过80目标准筛备用；
S8：将步骤S1-S7中备好的原料按照重量百分比木瓜蛋白酶10％-15％，菠萝蛋白酶10％-12.5％，β-葡聚糖酶8％-10.5％，半纤维素酶5％-8％、植酸酶3％-5％，端肽酶2％-3％、酸度调节抗结剂0.3％-0.5％，海藻糖8％-11％，余量为葡萄糖的配比放入三维立体搅拌机中进行搅拌均匀混合。
4.根据权利要求3所述的一种高效海参脱皮复配专用酶制备方法，其特征在于，所述步骤S1-S6中食品级菌落总数为≤1×104cfu/g。
5.根据权利要求3所述的一种高效海参脱皮复配专用酶制备方法，其特征在于，所述步骤S1-S2中干燥A为冷冻干燥，所述步骤S3-S6中干燥B为喷雾干燥；所述步骤S3-S5中诱变为物理、化学诱变剂相结合来动摇菌种的遗传性从而进行复合变异。
6.一种根据权利要求3-5任一项所述方法制备的高效海参脱皮复配专用酶的应用，其特征在于，应用于未脱皮干海参和鲜海参；
其中应用于未脱皮干海参：干海参加水泡发，泡发后捞出置于清水中，控制物料温度，加入海参脱皮复配专用酶，翻动式搅拌5-15分钟，第二次捞出并清洗干净后，脱皮完成，可进行煮制或者加工；
其中应用于鲜海参：将鲜海参放置于水中加热5-10分钟，待冷却至室温后捞出，放置于清水中，控制物料温度，加入高效海参脱皮复配专用酶，翻动式搅拌5-15分钟，第二次捞出并清洗干净后，脱皮完成，可进行煮制或者加工。
7.根据权利要求6所述的一种高效海参脱皮复配专用酶的应用，其特征在于，所述干海参加水泡发以1小时内不增重、体积不增大视为泡发完成。
8.根据权利要求6所述的一种高效海参脱皮复配专用酶的应用，其特征在于，所述应用于未脱皮干海参和应用于鲜海参中清水重量不得超过海参的0.5-1.0倍。
9.根据权利要求6所述的一种高效海参脱皮复配专用酶的应用，其特征在于，所述应用于未脱皮干海参和应用于鲜海参中加入海参脱皮复配专用酶为海参重量的0.1-0.3％。
10.根据权利要求6所述的一种高效海参脱皮复配专用酶的应用，其特征在于，所述应用于未脱皮干海参和应用于鲜海参中物料温度控制在20-50℃。
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