CN112680369B - 一种高产长链二元酸的菌株及其发酵方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种热带假丝酵母菌株，及利用该菌株发酵生产长链二元酸的方法。所述菌株为热带假丝酵母(Candida tropicalis Am2020)Am2020，保藏编号为CCTCC NO:M 2019418。该长链二元酸的生产方法包括通过所述的热带假丝酵母菌株(Candida tropicalis Am2020)Am2020制备种子液，和/或；发酵生产长链二元酸。本发明所公开的热带假丝酵母菌株(Candida tropicalis Am2020)Am2020，较亲本对底物转化效率增强，提高了长链二元酸的产能，降低了生产成本，发酵过程中产杂酸少，后续分离提纯简单，发酵生产过程易于大规模化，应用前景良好。
Description
技术领域
本发明属于生物技术领域，具体涉及一种菌株，特别涉及一种生产长链二元酸的菌株，及利用该菌株发酵生产长链二元酸的方法。
背景技术
长链二元酸是合成香料、尼龙工程塑料、热熔胶、树脂、耐寒性增塑剂、医药和农药等的重要原料，其结构式为HOOC(CH2)nCOOH，其中n为大于7的整数。其中，十碳二元酸或称为十碳长链二元酸、癸二酸，其化学式为HOOC(CH2)8COOH。十碳二元酸作为一种重要的单体原料，广泛用于生产聚酰胺工程塑料，如尼龙510、尼龙1010、尼龙610。十碳二元酸也可用于制造耐高温润滑油、环氧树脂固化剂、合成润滑脂及人造香料、耐寒增塑剂等，是应用广泛的化工原料之一。
目前工业生产和应用的十碳二元酸是用蓖麻油为原料，通过化学法制备得到的。主要工艺流程是蓖麻油水解生成蓖麻油酸钠皂，然后进一步制备得到蓖麻油酸，蓖麻油酸在苯酚的存在下，加碱、加热进行高温裂解，生成十碳二元酸双钠盐，然后进一步加热、加酸、脱色、结晶得到十碳二元酸。采用蓖麻油催化裂解法制备十碳二元酸，生产过程复杂、在250～270℃的高温下进行反应，使用苯酚或邻甲酚有毒试剂，污染环境，严重制约着化学法生产十碳二元酸产业的发展。
生物法制备十碳二元酸具有生产工艺简单、绿色环保的特点。中国科学院微生物所的余志华(见《微生物学报》1989年06期：0253-2654)通过诱变筛选获得一株高产菌株，在16升发酵罐上获得十碳二元酸的产量达到71g/L以上，通过水相结晶得到了十碳二元酸产品，产品纯度99.6％以上；中科院林业土壤研究所(见《微生物学报》1979年01期)筛选得到的解脂假丝酵母发酵生产十碳二元酸的产量为30～40g/L。
在生物法制备十碳二元酸的过程中，癸烷或其类似物常作为发酵底物，这类发酵底物在发酵过程中可能存在的转化途径包括：被菌体多步氧化成为目的产物十碳二元酸、被菌体生长维持所消耗或者挥发后进入外部环境等。癸烷等发酵底物的易挥发性质大大制约了十碳二元酸的转化率，同时烷烃成本也是发酵过程中成本占比最高的部分。因此，通过改良菌株产酸性能，提高菌株转化率降低生产成本是一个重要的研究方向。
发明内容
本发明的第一方面目的在于提供一种热带假丝酵母菌株，以解决目前热带假丝酵母菌株产十碳二元酸产酸浓度低，转化效率低的问题，进而解决生产成本高的技术问题。
本发明通过以下技术方案解决上述技术问题，达到本发明的第一方面目的。
一种热带假丝酵母菌株，该菌株为热带假丝酵母(Candida topicalis Am2020)Am2020，保藏编号为CCTCC NO:M 2019418。
本发明所提供的菌种为热带假丝酵母(Candida topicalis Am2020)Am2020，是以一株氧化正烷烃生产混合二羧酸的热带假丝酵母(Candida tropicalis)CAT N145(已于2011年6月9日提交位于武汉大学的中国典型培养物保藏中心(CCTCC)，保藏号为CCTCC M2011192)为出发菌株，通过紫外线照射诱变、筛选培育出来的。
热带假丝酵母(Candida topicalis Am2020)Am2020形态特征：奶油白色，皱褶型，菌落为表面光滑湿润呈乳白色有光泽、圆形、边缘整齐。
本发明的第二方面目的在于提出上述热带假丝酵母菌株(Candida topicalisAm2020)Am2020在十碳二元酸生产中的应用。
本发明的第三方面目的在于提出一种长链二元酸的生产方法，尤其是生产十碳二元酸的方法，以解决目前热带假丝酵母菌株产十碳二元酸产酸浓度低，转化效率低的技术问题，进而解决生产成本高的问题。
本发明通过以下技术方案解决上述技术问题，达到本发明的第三方面目的。
一种十碳二元酸的生产方法，通过所述的热带假丝酵母菌株(Candida topicalisAm2020)Am2020制备种子液，和/或；发酵生产十碳二元酸。进一步优选地，所述长链二元酸为C10的直链饱和二元酸。
在一优选实施方式中，所述发酵的底物包括C10的正烷烃、C10的直链饱和脂肪酸、C10的直链饱和脂肪酸酯、C10的直链饱和脂肪酸盐中的一种或多种；优选地，所述发酵的底物的添加量为100～400mL/L，所述体积比为底物与发酵培养基的体积比。
在一优选实施方式中，所述制备种子液的温度为在27～31℃；所述发酵生产十碳二元酸的发酵温度为在27～31℃。
培养基的选择对于菌株发酵是非常重要的，在上述任一技术方案的基础上进一步，所述的长链二元酸的生产方法，其中，所述发酵的发酵培养基包括：
碳源 10g/L～40g/L
氮源 每种所述氮源浓度为0.5～10g/L
无机盐 每种所述无机盐浓度为0.5～12g/L。
又进一步，所述碳源包括蔗糖、葡萄糖、麦芽糖、糖蜜、果糖、鼠李糖、阿拉伯糖和山梨醇中的一种或多种；
所述氮源包括酵母膏、玉米浆、尿素、氨水、硫酸铵、硝酸钾和硝酸铵中的一种或多种；
所述无机盐包括钾盐和钠盐中的一种或多种；优选地，所述钾盐包括氯化钾、硝酸钾、磷酸二氢钾、磷酸氢二钾中的一种或多种，所述钠盐包括氯化钠、硝酸钠、磷酸二氢钠、磷酸氢二钠中的一种或多种。
优选地，所述发酵培养基包括：
在上述任一技术方案的基础上进一步，所述长链二元酸的生产方法包括以下步骤：
a)菌种活化；
b)利用种子培养基制备种子液；
c)将所述种子液接种到发酵培养基中发酵。
又进一步，步骤a)中，所述菌种活化的培养基包括YPD培养基。所述YPD培养基包括葡萄糖2.0％(w/v)、酵母膏1.0％(w/v)、蛋白胨2.0％(w/v)，余量为水。
又进一步，步骤b)中，所述种子培养基包括：蔗糖10～20g/L，玉米浆2～4g/L，酵母膏3～8g/L，磷酸二氢钾4～12g/L，尿素0.5～4g/L、正十碳烷烃、直链饱和十碳脂肪酸、直链饱和十碳脂肪酸酯和直链饱和十碳脂肪酸盐中的一种或多种0～80mL/L；
优选地，步骤b)中，制备所述种子液的培养时间12～48h，种子成熟指标为水稀释30倍后OD620为0.5～1.0。
优选地，步骤c)中，所述种子液接种到发酵培养基发酵时，将计料体积培养液为10％～30％的接种量接种于培养液中。
所述菌种在发酵系统中对底物的转化效率为45％以上，进一步优选为50％以上。
本发明与已有技术相比具有以下显著特点和积极效果：
本发明的热带假丝酵母菌株，具有快速高效转化底物生产十碳二元酸，产十碳二元酸浓度高，大幅度降低生产成本的特性。
保藏信息
菌株：热带假丝酵母(Candida topicalis Am2020)Am2020
保藏日期：2019年6月18日
保藏单位：中国典型培养物保藏中心(地址：中国.武汉.武汉大学)
保藏编号：CCTCC NO:M 2019418
附图说明
图1是本发明的热带假丝酵母(Candida topicalis)Am2020的第一代的菌落照片；
图2是本发明的热带假丝酵母(Candida topicalis)Am2020的第六代的菌落照片。
具体实施方式
下面结合附图，详细说明本发明。
本申请的发明人通过以现有长链二元酸生产菌株热带假丝酵母(Candidatropicalis)CAT N145(该菌株在公开号为CN 102839133A，公开日为2012-12-26的中国发明专利中已经公开，在该专利程序中已于2011年6月9日提交位于武汉大学的中国典型培养物保藏中心(CCTCC)，保藏号为CCTCC M 2011192)为出发菌株，通过驯化、常规诱变方法进行诱变育种后，例如，参照中国专利CN201110138270.5中公开的方法，筛选得到了一株新的热带假丝酵母，命名为热带假丝酵母(Candida topicalis Am2020)Am2020，其能够将十碳的正烷烃、十碳的直链饱和脂肪酸、十碳的直链饱和脂肪酸衍生物(如直链饱和脂肪酸酯、直链饱和脂肪酸盐)或它们中的两种以上的混合物高效转化为十碳二元酸。
一种十碳二元酸的生产方法，其包括以下步骤：
a)菌种活化；在一个优选的具体实施方式中，所述菌种活化是摇床培养1～2天；所述菌种活化的培养基包括YPD培养基，优选地，所述YPD培养基包括葡萄糖2.0％(w/v)、酵母膏1.0％(w/v)、蛋白胨2.0％(w/v)，余量为水。
b)利用种子培养基制备种子液；在一个优选的具体实施方式中，所述利用种子培养基制备种子液，是在27～31℃培养，优选在29℃培养，培养时间36～48h，测得种子液的OD620在0.5～1.0(水稀释30倍)时，接种到装有发酵培养基的摇瓶中。所述种子培养基包括：蔗糖10～20g/L，玉米浆2～4g/L，酵母膏3～8g/L，磷酸二氢钾4～12g/L，尿素0.5～4g/L，正十碳烷烃、直链饱和十碳脂肪酸和直链饱和十碳脂肪酸衍生物(如直链饱和脂肪酸酯、直链饱和脂肪酸盐)中的一种或多种0～80mL/L。
c)将所述种子液接种到发酵培养基中，通过如上文所述的热带假丝酵母菌株(Candida topicalis Am2020)Am2020发酵生产十碳二元酸。
优选地，步骤c)中，所述发酵的温度为在27～31℃，进一步优选为29℃。
所述发酵的底物包括C10正烷烃、C10直链饱和脂肪酸、C10直链饱和脂肪酸酯和C10直链饱和脂肪酸盐中的一种或多种；优选地，所述发酵的底物的添加量为100～400mL/L，所述体积比为底物与发酵培养基的体积比。
所述发酵的培养基包括：
碳源 10g/L～40g/L
氮源 每种所述氮源浓度为0.5～10g/L
无机盐 每种所述无机盐浓度为0.5～12g/L。
所述碳源包括蔗糖、葡萄糖、麦芽糖、糖蜜、果糖、鼠李糖、阿拉伯糖和山梨醇中的一种或多种；
所述氮源包括酵母膏、玉米浆、尿素、氨水、硫酸铵、硝酸钾和硝酸铵中的一种或多种；
所述无机盐包括钾盐和钠盐中的一种或多种；优选地，所述钾盐包括氯化钾、硝酸钾、磷酸二氢钾和磷酸氢二钾中的一种或多种，所述钠盐包括氯化钠、硝酸钠、磷酸二氢钠和磷酸氢二钠中的一种或多种。
在一个优选的实施例中，所述发酵的培养基包括：
发酵初始时，发酵液中的底物浓度100～400mL/L，用NaOH溶液调节培养基pH至7.5。
本发明中，培养基中加入的底物，即正烷烃、直链饱和脂肪酸、直链饱和脂肪酸衍生物中的一种或多种，优选地，所述底物包括C10的正烷烃、C10的直链饱和脂肪酸、C10的直链饱和脂肪酸酯和C10的直链饱和脂肪酸盐中的一种或多种。
以下实施例中所使用的二元酸、脂肪酸、羟基酸含量的测定方法：
发酵液中二元酸含量检测：发酵液经前处理后气相色谱检测(内标法)，色谱条件：色谱柱：Supelco SPB-50 30m*0.53mm*0.5μm(货号54983)。气相色谱仪(Shimadzu，GC-2014)。
方法：初温100℃，15℃/min升温至230℃，保持2min。载气为氢气，进样口温度280℃，FID温度280℃，进样量4μL。
根据产物峰面积和已知浓度的内标峰面积比进行产物浓度计算。
YPD培养基包括葡萄糖2.0％(w/v)、酵母膏1.0％(w/v)、蛋白胨2.0％(w/v)，余量为水。
以下实施例中所残余的烷烃含量采用离心法测定：
(1)取6mL的二元酸发酵液(发酵液的体积为V总)，并向发酵液中加入3mL的0.1mol/L的氢氧化钠溶液，并放在80度的水浴锅中加热10min。
(2)冷却，3000转/min离心10min，离心结束后读数，油层体积V油，乳化层体积V乳；
注意：离心管必须是带刻度的。
(例如，V油/V乳/V总＝0.1：0.2：6，V油0.1指油层在带刻度的试管中的刻度高度；V乳0.2指乳化层在带刻度的试管中的刻度高度；V总6指取6mL的二元酸发酵液体积)。
实施例1
本发明的热带假丝酵母(Candida tropicalis)Am2020，经传代实验验证，经五次传代后菌落形态及生产十碳二元酸的能力均未出现明显变化(见图1、图2)。在29℃条件下，第一代和第六代菌株经摇瓶发酵产DC10分别为102g/L和103g/L(添加3.0mL癸烷作为底物)；菌落形态：菌落表面光滑湿润呈乳白色有光泽、圆形、边缘整齐。可见本发明的热带假丝酵母(Candida tropicalis)Am2020的传代稳定性良好。
实施例2
取1支甘油管种子接入YPD活化培养基中，培养24h后接培养液进种子培养基(培养基于121℃灭菌20分钟)。种子培养基包括：蔗糖20g/L，玉米浆2g/L，酵母膏6g/L，磷酸二氢钾8g/L，尿素2g/L，nC10 1mL；在29℃条件下培养48h，测得种子液的OD620达到了0.55(水稀释30倍)，将3.0mL种子液接种到装有发酵培养基的摇瓶中(发酵培养基的用量为15mL)，发酵培养基包括：蔗糖30g/L，玉米浆5g/L，酵母膏5g/L，磷酸二氢钾8g/L，硝酸钾4g/L，氯化钠1.5g/L，尿素0.5g/L。发酵培养基中所加的正烷烃nC10为3.0mL，发酵培养基在121℃灭菌20分钟。在29℃条件下发酵，发酵液内的发酵底物检测为0时结束发酵，发酵周期154h。
发酵结束后，测定发酵液中的DC10二元酸的含量为103g/L，平均产酸速率为0.67g/h·L，底物质量转化率为70.57％。发酵液中，十碳脂肪酸与十碳二元酸的含量比为0.43％，十碳羟基脂肪酸与十碳二元酸的含量比为0.38％。
实施例3
取1支甘油管种子接入YPD活化培养基中，培养24h后接培养液进种子培养基(培养基于121℃灭菌20分钟)。种子培养基包括：蔗糖20g/L，玉米浆2g/L，酵母膏6g/L，磷酸二氢钾8g/L，尿素2g/L；在29℃条件下培养48h，测得种子液的OD620达到了0.7(水稀释30倍)，将3.0mL种子液接种到装有发酵培养基的摇瓶中(发酵培养基的用量为15mL)，发酵培养基包括：蔗糖30g/L，玉米浆5g/L，酵母膏5g/L，磷酸二氢钾8g/L，硝酸钾4g/L，氯化钠1.5g/L，尿素0.5g/L。发酵培养基中所加的正烷烃nC10为3.0mL，发酵培养基在121℃灭菌20分钟。在29℃条件下发酵，发酵液内的发酵底物检测为0时结束发酵，发酵周期172h。
发酵结束后，测定发酵液中的DC10二元酸的含量为93g/L，平均产酸速率为0.54g/h·L，底物质量转化率为63.72％。发酵液中，十碳脂肪酸与十碳二元酸的含量比为0.39％，十碳羟基脂肪酸与十碳二元酸的含量比为0.36％。
实施例4
取1支甘油管种子接入YPD活化培养基中，培养24h后接培养液进种子培养基(培养基于121℃灭菌20分钟)。种子培养基包括：蔗糖20g/L，玉米浆2g/L，酵母膏6g/L，磷酸二氢钾8g/L，尿素2g/L，nC10 1mL；在29℃条件下培养48h，测得种子液的OD620达到了0.55(水稀释30倍)，将3.0mL种子液接种到装有发酵培养基的摇瓶中(发酵培养基的用量为15mL)，发酵培养基包括：蔗糖30g/L，玉米浆5g/L，酵母膏5g/L，磷酸二氢钾8g/L，硝酸钾4g/L，氯化钠1.5g/L，尿素0.5g/L。发酵培养基中所加的正烷烃nC10为1.5mL，发酵培养基在121℃灭菌20分钟。在29℃条件下发酵，发酵液内的发酵底物检测为0时结束发酵，发酵周期135h。
发酵结束后，测定发酵液中的DC10二元酸的含量为51g/L，平均产酸速率为0.37g/h·L，底物质量转化率为69.88％。发酵液中，十碳脂肪酸与十碳二元酸的含量比为0.5％，十碳羟基脂肪酸与十碳二元酸的含量比为0.46％。
实施例5
取1支甘油管种子接入YPD活化培养基中，培养24h后接培养液进种子培养基(培养基于121℃灭菌20分钟)。种子培养基包括：蔗糖20g/L，玉米浆2g/L，酵母膏6g/L，磷酸二氢钾8g/L，尿素2g/L，十碳脂肪酸甲酯1mL；在29℃条件下培养48h，测得种子液的OD620达到了0.7(水稀释30倍)，将3.0mL种子液接种到装有发酵培养基的摇瓶中(发酵培养基的用量为15mL)，发酵培养基包括：蔗糖30g/L，玉米浆5g/L，酵母膏5g/L，磷酸二氢钾8g/L，硝酸钾4g/L，氯化钠1.5g/L，尿素0.5g/L。发酵培养基中所加的十碳脂肪酸甲酯为4.5mL，发酵培养基在121℃灭菌20分钟。在29℃条件下发酵，发酵液内的发酵底物检测为0时结束发酵，发酵周期174h。
发酵结束后，测定发酵液中的DC10二元酸的含量为130g/L，平均产酸速率为0.75g/h·L，底物质量转化率为51.64％。发酵液中，十碳脂肪酸与十碳二元酸的含量比为0.41％，十碳羟基脂肪酸与十碳二元酸的含量比为0.48％。
实施例6
将热带假丝酵母Am2020菌体接种于种子培养基，培养温度30℃，当种子液菌体光密度(OD620)达到0.5(稀释30倍)时，将种子液接入发酵培养基中进行发酵转化，接种量为10％(v/v)。控制发酵温度30℃，控制发酵过程中pH值为7.2，控制空气流量为0.3vvm，控制发酵罐压为0.08MPa，保持一定的搅拌速度，发酵过程中溶氧维持在20％以上。种子液接入发酵罐后，菌体开始生长繁殖，当发酵液中菌体光密度(OD620)达到0.5(稀释30倍)时，加入发酵底物正癸烷。采用流加方式控制癸烷的补加速率以使发酵过程中发酵液内的癸烷浓度范围为0.5％～1％(v/v)，发酵底物癸烷总添加量为1300g。发酵液内的发酵底物检测为0时，停止发酵，发酵时间150h。
发酵结束后发酵液中十碳二元酸的产量为199g/L，底物质量转化率为92％，平均产酸速率为1.33g/h·L，发酵液中，十碳脂肪酸与十碳二元酸的含量比为0.35％，十碳羟基脂肪酸与十碳二元酸的含量比为0.27％。
对比例1
取1支热带假丝酵母(Candida tropicalis)CAT N145甘油管种子接入YPD活化培养基中，培养24h后接培养液进种子培养基(培养基于121℃灭菌20分钟)。种子培养基包括：蔗糖20g/L，玉米浆2g/L，酵母膏6g/L，磷酸二氢钾8g/L，尿素2g/L，nC10 1mL；在29℃条件下培养48h，测得种子液的OD620达到了0.55(水稀释30倍)，将3.0mL种子液接种到装有发酵培养基的摇瓶中(发酵培养基的用量为15mL)，发酵培养基包括：蔗糖30g/L，玉米浆5g/L，酵母膏5g/L，磷酸二氢钾8g/L，硝酸钾4g/L，氯化钠1.5g/L，尿素0.5g/L。发酵培养基中所加的正烷烃nC10为1.5mL，发酵培养基在121℃灭菌20分钟。在29℃条件下发酵，发酵液内的发酵底物检测为0时结束发酵，发酵周期140h。
发酵结束后，测定发酵液中的DC10二元酸的含量为30g/L，平均产酸速率为0.21g/h·L，底物质量转化率为41.11％。发酵液中，十碳脂肪酸与十碳二元酸的含量比为0.91％，十碳羟基脂肪酸与十碳二元酸的含量比为0.71％。
对比例2
将热带假丝酵母CATN145菌体接种于种子培养基，培养温度30℃，当种子液菌体光密度(OD620)达到0.5(稀释30倍)时，将种子液接入发酵培养基中进行发酵转化，接种量为10％(v/v)。控制发酵温度30℃，控制发酵过程中pH值为7.2，控制空气流量为0.3vvm，控制发酵罐压为0.08MPa，保持一定的搅拌速度，发酵过程中溶氧维持在20％以上。种子液接入发酵罐后，菌体开始生长繁殖，当发酵液中菌体光密度(OD620)达到0.5(稀释30倍)时，加入发酵底物正癸烷。采用流加方式控制癸烷的补加速率以使发酵过程中发酵液内的癸烷浓度范围为0.5％～1％(v/v)，发酵底物癸烷总添加量为1300g。发酵液内的发酵底物检测为0时，停止发酵，发酵时间170h。
发酵结束后发酵液中十碳二元酸的产量为184g/L，底物的质量转化率为85.2％，平均产酸速率为1.08g/h·L。发酵液中，十碳脂肪酸含量为0.85％，十碳羟基脂肪酸含量为0.67％。
由上述实施例可知，本发明所采用的热带假丝酵母菌株(Candida tropicalis)Am2020，较亲本热带假丝酵母CATN145菌体具有更好的产十碳二元酸能力，在实施例6中产十碳二元酸的含量达199g/L，其产酸速率达到1.33g/h·L，并且，当采用正十烷作为底物时，热带假丝酵母菌株(Candida tropicalis)Am2020对底物的质量转化率均能够保持在63.7％以上。因此，本发明的热带假丝酵母菌株(Candida tropicalis)Am2020可用于酶法工业化生产十碳二元酸。
最后应说明的是：以上各实施例仅用以说明本发明的技术方案，而非对其限制；尽管参照前述各实施例对本发明进行了详细的说明，本领域的普通技术人员应当理解：其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分或者全部技术特征进行等同替换；而这些修改或者替换，并不使相应技术方案的本质脱离本发明各实施例技术方案的范围。
Claims (10)
1.一种热带假丝酵母菌株，其特征在于，所述菌株为热带假丝酵母(Candida topicalis)Am2020，保藏编号为CCTCC NO:M 2019418。
2.一种如权利要求1所述的热带假丝酵母菌株在十碳二元酸生产中的应用。
3.如权利要求2所述的应用，其特征在于，用于发酵转化的底物包括C10的正烷烃、C10的直链饱和脂肪酸、C10的直链饱和脂肪酸酯和C10的直链饱和脂肪酸盐中的一种或多种。
4.一种长链二元酸的生产方法，其特征在于，通过如权利要求1所述的热带假丝酵母菌株(Candida topicalis)Am2020制备种子液，发酵生产长链二元酸，所述长链二元酸为C10的直链饱和二元酸。
5.如权利要求4所述的生产方法，其特征在于，所述发酵的底物包括C10的正烷烃、C10的直链饱和脂肪酸、C10的直链饱和脂肪酸酯和C10的直链饱和脂肪酸盐中的一种或多种；所述发酵的底物的添加量为100～400mL/L。
6.如权利要求4或5所述的生产方法，其特征在于，所述生产方法包括以下步骤：
a)菌种活化；
b)利用种子培养基制备种子液；
c)将所述种子液接种到发酵培养基中发酵。
7.如权利要求6所述的生产方法，其特征在于，步骤a)中，所述菌种活化的培养基包括YPD培养基；所述YPD培养基包括葡萄糖2.0％(w/v)、酵母膏1.0％(w/v)、蛋白胨2.0％(w/v)，余量为水。
8.如权利要求6所述的生产方法，其特征在于，步骤b)中，所述种子培养基包括：蔗糖10～20g/L，玉米浆2～4g/L，酵母膏3～8g/L，磷酸二氢钾4～12g/L，尿素0.5～4g/L、发酵的底物0～80mL/L；
其中所述发酵的底物包括C10的正烷烃、C10的直链饱和脂肪酸、C10的直链饱和脂肪酸酯和C10的直链饱和脂肪酸盐中的一种或多种。
9.如权利要求6所述的生产方法，其特征在于，步骤b)中，所述制备所述种子液的培养时间12～48h，种子成熟指标为水稀释30倍后OD620为0.5～1.0。
10.如权利要求6所述的生产方法，其特征在于，步骤c)中，所述种子液接种到发酵培养基发酵时，将计料体积培养液为10％～30％的接种量接种于培养液中。
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Citations (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5204252A (en) * | 1989-02-08 | 1993-04-20 | Henkel Research Corporation | Candida tropicalis transformation system |
| CN102839133A (zh) * | 2011-06-21 | 2012-12-26 | 上海凯赛生物技术研发中心有限公司 | 一种长链二元酸生产菌株及其应用 |
| CN102994402A (zh) * | 2012-03-09 | 2013-03-27 | 上海凯赛生物技术研发中心有限公司 | 一种生产二元酸的菌株及其发酵方法 |
| KR20170048763A (ko) * | 2015-10-27 | 2017-05-10 | 한국생명공학연구원 | 세바식산 생산용 미생물 및 이를 이용한 세바식산의 생산 방법 |
| CN109706192A (zh) * | 2019-02-01 | 2019-05-03 | 上海凯赛生物技术研发中心有限公司 | 一种c19~c21长链二元酸的发酵生产方法 |
| CN109913512A (zh) * | 2017-12-13 | 2019-06-21 | 上海凯赛生物技术研发中心有限公司 | 生物发酵生产长链二元酸的方法 |
| CN109943598A (zh) * | 2017-12-20 | 2019-06-28 | 上海凯赛生物技术研发中心有限公司 | 一种发酵生产长链二元酸的方法 |
| CN110218661A (zh) * | 2018-03-01 | 2019-09-10 | 上海凯赛生物技术研发中心有限公司 | 一种热带假丝酵母菌及其应用、以及一种长链二元酸的生产方法 |
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|---|---|---|---|---|
| US9388378B2 (en) * | 2012-03-09 | 2016-07-12 | Cathay R&D Center Co., Ltd. | Candida sake strain for producing long chain dicarboxylic acids |
| CN107326051B (zh) * | 2017-08-02 | 2021-06-08 | 上海凯赛生物技术股份有限公司 | 一种微生物发酵法生产的癸二酸及其制备方法 |
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Patent Citations (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5204252A (en) * | 1989-02-08 | 1993-04-20 | Henkel Research Corporation | Candida tropicalis transformation system |
| CN102839133A (zh) * | 2011-06-21 | 2012-12-26 | 上海凯赛生物技术研发中心有限公司 | 一种长链二元酸生产菌株及其应用 |
| CN102994402A (zh) * | 2012-03-09 | 2013-03-27 | 上海凯赛生物技术研发中心有限公司 | 一种生产二元酸的菌株及其发酵方法 |
| KR20170048763A (ko) * | 2015-10-27 | 2017-05-10 | 한국생명공학연구원 | 세바식산 생산용 미생물 및 이를 이용한 세바식산의 생산 방법 |
| CN109913512A (zh) * | 2017-12-13 | 2019-06-21 | 上海凯赛生物技术研发中心有限公司 | 生物发酵生产长链二元酸的方法 |
| CN109943598A (zh) * | 2017-12-20 | 2019-06-28 | 上海凯赛生物技术研发中心有限公司 | 一种发酵生产长链二元酸的方法 |
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| CN109706192A (zh) * | 2019-02-01 | 2019-05-03 | 上海凯赛生物技术研发中心有限公司 | 一种c19~c21长链二元酸的发酵生产方法 |
Non-Patent Citations (5)
| Title |
|---|
| Characterization of the newly isolated ω-oxidizing yeast Candida sorbophila DS02 and its potential applications in long-chain dicarboxylic acid production;Heeseok Lee等;Appl Microbiol Biotechnol;20170606;1-10 * |
| 热带假丝酵母对癸烯-1及十二烯-1的两端氧化;刘祖同等;微生物学报;19921015;第32卷(第5期);340-345 * |
| 热带假丝酵母突变株SD_1利用癸烷产生癸二酸的研究;刘祖同;H.G.Sato;;石油学报;19871231(02);32-40 * |
| 用热带假丝酵母多倍体变种发酵生产长链二元酸;沈永强, 楼纯菊;化学世界;19800725(07);201-203 * |
| 石油发酵长链二元酸的研究――(Ⅰ)二元酸产生菌的筛选方法、菌种鉴定及产物分析;沈永强, 楼纯菊, 徐可仁, 姚佩华, 夏洁, 夏国兴, 焦瑞身;植物生理与分子生物学学报;19790520(02);161-170 * |
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