CN112480243A - 一种规模化水蛭素分离纯化生产工艺方法及设备 - Google Patents
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Abstract
一种规模化水蛭素分离纯化生产工艺方法及设备,经过诱导催吐、粗品收集、酸沉、水浴加热、冷却、平板离心过滤、中和、管式离心去沉淀、微滤、纳滤浓缩,最终成品收集后冷冻干燥。本发明可实现水蛭素连续生产纯化,可任意转换产品纯度等级的技术效果,具有连续性生产的特点,产量高,水蛭素原料回收率高,损耗少,生产高效快捷、操作方便等优点。
Description
技术领域
本发明涉及生物医药制品技术领域,具体为一种规模化水蛭素分离纯化生产工艺方法及设备。
背景技术
天然水蛭素是一种从吸血类水蛭唾液腺及其分泌液中提取的天然活性物质,水蛭素是一类很有前途的抗凝化瘀药物,它可用于治疗各种血栓疾病,尤其是静脉血栓和弥漫性血管凝血的治疗;也可用于外科手术后预防动脉血栓的形成,预防溶解血栓后或血管再造后血栓的形成;改善体外血液循环和血液透析过程。水蛭素还可配合化学治疗和放射治疗,由于促进肿瘤中的血流而增强疗效。在生物医学领域具有广泛用途。
水蛭素是由65个或66个氨基酸残基组成的单链多肽,分子量为7000d,能在极端的pH条件下稳定存在。水蛭素根据医疗、食品、化妆品等用途的不同,也分为若干纯度等级进行生产和加工。近年来,采用活体水蛭催吐经收集水蛭素粗品,是得到产品质量稳定,可重复性好,成本较低的方式,如发明专利:一种天然水蛭素的规模化生产方法,专利号:CN201410402315.9中所述。得到水蛭素粗品后,还需要经过分离纯化的一系列工序才能得到水蛭素产品。水蛭素粗品中含有水蛭素以外其他很多盐分和杂质蛋白,包括水蛭体内分泌的其它消化酶等等,杂质蛋白没有水蛭素的抗凝活性,视为杂质,这种杂质如果长期存在于产品中,会氧化分解水蛭素的有效成分,使水蛭素保质期缩短甚至预热失效,因此水蛭素粗品需要进行分离纯化,将多余的盐分和杂质蛋白质去除,最终得到较为纯净的水蛭素产品。
纯化水蛭素的方法一般通过沉淀、过滤、反渗透、层析等一系列步骤,对目标蛋白质及盐分进行去除,最终得到较纯的水蛭素产品,例如以下公开文献:
1、一种天然水蛭素的生产方法;申请号:CN201110237495.6;申请人:周维官;摘要:一种天然水蛭素的生产方法,该生产方法的特征在于包括含天然水蛭素液体的提取、酸沉、加热、脱水和干燥等步骤,所得到的天然水蛭素粉末,可采用Markwardt凝血酶直接滴定法检测其活性成分的含量,使质量稳定,产品疗效有保证。该方法具有工艺简单、提取率高、生产成本低、产品纯度高、保存期长等特点,可为食品、保健食品、药品或化妆品提供安全、优质的原料。
其中,天然水蛭素粗提物通过酸沉去除沉淀物,水浴加热去除沉淀物得清液,然后采用透析或超滤的方式对清液进行脱水得浓缩液,浓缩液加入水溶性填充液后冷冻干燥,最终得到水蛭素冻干粉。
2、一种基于亲和层析的水蛭素分离纯化方法;申请号:CN201810268931.8;申请人:苏州至汇生物科技有限公司;摘要:一种基于亲和层析的水蛭素分离纯化方法,用生理盐水喂饱水蛭活体后,物理挤压使其分泌唾液并收集,将获得的水蛭唾液样本,加入预冷三氯乙酸提取液混匀,浸提,离心取上清,调节pH3.0-5.0后加入预冷的丙酮混匀静置过夜,回收上清中丙酮,离心,取沉淀,备用;将所述沉淀加入蒸馏水,充分溶解,调节pH 6.0-8.0,用凝血酶Sepharose 4FF亲合柱进行分离纯化,高效液相色谱检测水蛭素含量,取水蛭素含量峰值处纯化液,将上述纯化液进行透析,并且过程中重复加水2-4次,持续10-15h,将超滤后的上清液进行旋转蒸发,去除水分70-80%后,取浓缩液冻干机冻干,得水蛭素产品。本发明方法纯化所得的天然水蛭素纯度高,活性高,成本低,操作简单,易重复。
3、基于阴离子交换柱高效分离出高活性水蛭素的生产工艺;申请号:CN201210220494.5;申请人:郑州英诺生物科技有限公司;摘要:一种新型阴离子交换柱(DEAE-硅胶分离柱),实现高效分离纯化水蛭素。以广西菲牛蛭制成的蚂蝗粉为原材料,属于中药制药领域,涉及动物有效成分的提取,目的是解决水蛭素提取复杂、成本高、难以工业化生产的问题。本发明的特征在于围绕这种新的价格低廉的DEAE-硅胶分离柱的分离纯化系统,设计了水蛭素分离纯化的新工艺。本工艺简单快速,成本低;并且所得到的水蛭素冻干粉活性高,回收率高,纯度高,保存期长,可为食品、保健食品、药品或化妆品等行业提供安全、优质的原料。
4、一种水蛭素的提取方法;申请号:CN201710924107.9;申请人:广西博白县琼达农业科技有限公司;摘要:一种水蛭素的提取方法,包括以下步骤:A)取经过预处理的水蛭,加水匀浆,调节pH值,反复冻融;B)经1-3次离心、过滤、调节pH值,得清液;C)冷冻融化后再过滤,得水蛭素。本发明所述的水蛭素的提取方法,不采用任何有机溶剂,采用离心、超滤等方法纯化,得到纯度较高的水蛭素。
以上公开文献可以看出,水蛭素的收集、提取、纯化需经过多道工序,将水蛭素粗品当中的杂质蛋白过滤,才能得到水蛭素产品。缺点比较突出:1、在繁复的制备过程中,传统采用人工或半人工化的操作方式,自动化程度低,工人劳动强度大,不能做到连续生产,滤芯等耗材消耗大,且产品质量得不到保证,有的批次甚至全部报废丢弃,浪费很大。2、在纯化过程中产品溶液经过长时间流动或与外界接触,生产过程时间过长,水蛭素会造成自然氧化消耗,温度变化大,产品品质和质量稳定性也会受到很大影响。3、如需要生产不同纯度的水蛭素,要对生产流程和设备进行临时更改,生产参数控制不准确。4、水蛭素粗品在经过多个工序和设备后,有效成分损失很大,有效成分回收率仅达到50%左右。
发明内容
本发明的目的是提供一种规模化水蛭素分离纯化生产工艺方法及设备,实现水蛭素连续生产,还可实现不同纯度水蛭素生产的快速转化,具有水蛭素产量高,回收率高,损耗少,生产高效快捷、操作方便等优点。
为达到上述目的,本发明的技术方案如下:
一种规模化水蛭素分离纯化生产工艺方法,包括以下步骤:
A、 水蛭放在专用催吐桶中进行水蛭素粗品的制备和收集,制备方法是,先用诱导液喂饱饥饿的水蛭,排液;再用催吐液灌入桶内,催吐水蛭,得到水蛭素粗品,排液收集;将清水灌入桶内清洗水蛭,对水蛭进行养护;
B、所得原料通过管道收集进入酸沉桶,在上述滤液中加入三氯乙酸,用三氯乙酸调节溶液的pH至0.5~3.5进行沉淀,静置10~30分钟;在酸性条件下,蛋白质形成不溶性盐,并且和溶液中的无机盐聚集沉淀,而水蛭素是一种小分子多肽,在酸性条件下稳定存在于溶液中。
C、酸沉后所得原料通过管道进入水浴锅,于50~65℃的恒温水浴中隔水加热15~20分钟;在水浴温度下,有助于蛋白质的酸沉的反应,形成的不溶性盐和原有的无机盐杂质聚集沉淀更完全;
D、水浴加热后,原料通过管道进入冷却桶内冷却至室温;有利于使已经形成的不溶性盐进入平板离心机进行固液分离。
E、冷却后原料通过管道进入平板离心机进行固液分离,保留下来的清液就是水蛭素料液,可以进入下一工序,所得固体作为生产废物处理。
F、过滤后所得液体通过管道进入中和桶内,用氢氧化钠调节溶液的pH至6.0~7.0,抽入管式离心机,管式离心机型号选用GQ150,再次进行更精细的固液分离,让板式离心无法分离的细小不溶性蛋白质沉淀分离出来,为下一步的微滤和纳滤准备;
G、管式离心后所得原料液通过管道进入微滤桶;为进入微滤机过滤进行收集和准备;
H、微滤桶内原料通过管道进入微滤机进行微滤;微滤机可以截留分子直径≧0.2μm的管式离心无法分离的微小颗粒和细菌。由于水蛭素的分子量是6-7KD,所以得以保留再透过液中。
I、微滤后的滤液通过管道进入纳滤桶;为下一步做纳滤和反渗透浓缩进行收集和准备。
J、纳滤桶内滤液通过管道进入纳滤机,纳滤机型号选用CLMB-6-2S错流纳滤机;先通过10KD滤芯,保留透过液,弃非透过液。再通过3KD滤芯,保留非透过液,弃透过液,此透过液就含有未能去除的无机盐和水分,使水蛭素原液得以进一步净化和浓缩。
K、纳滤所得原料通过管道进入成品桶储存,成品通过管道输送到冷冻干燥机进行干燥,得到成品水蛭素冻干粉。
所述平板离心机设置管道将过滤液回到冷却桶,冷却桶设置回液管道至酸沉桶;平板离心机过滤所得液体通过冷却桶回到酸沉桶,重新添加三氯乙酸调节溶液的pH至0.5~3.5进行沉淀,静置10~30分钟,再次经过水浴、冷却后进入平板离心机二次离心,所得过滤液再进入后续工艺流程。二次酸沉工艺和系统的设置,可以使得水蛭素粗品的酸沉反应更为彻底,在第一次酸沉过程中,酸液被消耗逐渐减少,导致酸沉不彻底,当经过第一次平板离心后,滤液进入冷却桶进行储存,然后再返回酸沉桶进行二次酸沉,使残留的蛋白质和无机盐进一步聚集沉淀,溶液中的水蛭素更纯净,为生产纯度更高的水蛭素产品做准备。
所述催吐桶、酸沉桶、水浴锅、冷却桶、中和桶、微滤桶、微滤机、纳滤桶和成品桶设置注水入水管道,并分别设置开关阀。
所述中和桶设置管道与成品桶连接,管道设置开关阀。以实现多种纯化过程的转换,适应不同品质产品的生产需要。
所述微滤机设置管道与成品桶连接,管道设置开关阀。以实现多种纯化过程的转换,适应不同品质产品的生产需要。
所述酸沉桶处设置酸液注入管道,并设置开关阀。管道上设置液泵并连接酸液桶,以实现自动加注三氯乙酸。
所述中和桶处设置碱液注入管道,并设置开关阀。管道上设置液泵并连接碱液桶,以实现自动加注氢氧化钠调节溶液。
所述专用催吐桶,支撑在支架的上方,催吐桶的底部中心设置向下的排液管,排液管上设置排液阀;催吐桶内还设置隔离网;支架固定安放在台秤上方;
桶内固定支撑环,支撑环的放射状辐条焊接在催吐桶底部,隔离网放置在支撑环上。
本发明的优点:
(1)本发明改变传统水蛭素生产人工或半人工的生产现状,实现水蛭素全自动化生产,大幅提高生产效率,减轻工人劳动强度,在进行不同类型天然水蛭素的纯化转化时,只需更换设备部件即可,方便快捷。
(2)本发明实现水蛭素生产过程全封闭,避免水蛭素与外界环境接触,造成自然氧化消耗;设备整体布置紧凑合理,占地面积小,利于生产监控和操作。
(3)传统水蛭素纯化方法中层析、过滤等大部分都是在常压下进行的,设备小效率低,并且有相当部分粗提液由于粘液较多没办法透过,只能作废弃处理,造成浪费。本发明采用高压高转速设备处理,水蛭素残留很少,残留在设备中的水蛭素可以与下一批料液继续接触混合,原料在设备系统中循环,最终留到成品箱收集,可做到水蛭素零残留零废弃。
(4)本发明中改变了现有技术文件1:一种天然水蛭素的生产方法;申请号:CN201110237495.6中,酸沉—离心过滤—水浴—冷却—离心过滤—中和—脱水—干燥的工艺步骤,采用酸沉—水浴—冷却—离心过滤—中和—管式过滤—微滤—纳滤的工艺步骤,与旧方法比较,旧方法是每个步骤都是独立操作的,并且没有管式离心、微滤和纳滤工序,产品质量粗糙且不稳定,回收率低下,工人劳动强度大。新方法采用管线加泵输液连续生产,生产中可以按要求随时调节,避免生产中的不稳定因素,通过微滤纳滤后,可以使产品纯度跟高(可达到85%),回收率更高(从50%提高到90%以上),生产效率更高,实现正真意义上的规模化水蛭素分离纯化生产。
(5)申请人发现:在水蛭催吐过程中,含水蛭素的唾液随着诱导液吃进水蛭体内的消化系统中,水蛭会在短时间内通过皮肤排出多余的水份,减少肠胃内容物,传统如果人工催吐不及时,会造成催吐后吐出量少。另一方面,水蛭素在水蛭消化系统中会缓慢分解,单位含量随着时间的推移也会迅速降低。本发明专用催吐桶的应用,实现精确控制水蛭吸食诱导液和浸泡催吐液的时间,可大幅提高水蛭素粗品的产量。
(6)水蛭素专用催吐桶可以替代传统水蛭催吐桶,能够实现做到在保证提取液产量的前提下,快速操作水蛭素的提取,最大限度地减轻了对受提取水蛭活体的刺激,使水蛭体能得到很快恢复,避免水蛭因浸泡催吐液时间过长而死亡造成经济损失。还可大幅提高工作效率,省时省力,操作方便,维护方便;台秤的设计可免除称量等繁琐的工序,定量加液准确规范,便于数据的集中统一管理,实现生产的流程化,提高劳动效率。
附图说明:
图1为本发明工艺流程图;
图2为本发明设备管道流向示意图;
图3为本发明设备平面布置图;
图4为专用催吐桶结构示意图;
图5为支撑环与隔离网分解结构示意图;
图中部件名称为:1、催吐桶;13、排液管;14、支架;16、排液阀;17、隔离网;18、支撑环;2、酸沉桶;3、水浴锅;4、冷却桶;5、平板离心机;6、中和桶;7、管式离心机;8、微滤桶;81、微滤机;9、纳滤桶;91、纳滤机;10、成品桶。
具体实施方式
实施例1
食品级天然水蛭素的生产方法,包括以下步骤:
A、水蛭放在专用催吐桶1中进行水蛭素粗品的制备和收集,制备方法是,先用诱导液喂饱饥饿的水蛭,排液;再用催吐液灌入桶内,催吐水蛭,得到水蛭素粗品,排液收集;将清水灌入桶内清洗水蛭,对水蛭进行养护;
B、所得原料通过管道进入酸沉桶2,在上述滤液中加入三氯乙酸,用三氯乙酸调节溶液的pH至2.5进行沉淀,静置30分钟;
C、酸沉后所得原料通过管道进入水浴锅3,于65℃的恒温水浴中隔水加热15分钟;
D、水浴加热后,原料通过管道抽入冷却桶4内冷却至室温;
E、冷却后原料通过管道进入平板离心机5进行固液分离,离心机转股直径D600,转速1200r/min,离心时间10min,去清液排除离心沉淀的固体。
F、过滤后所得液体通过管道进入中和桶6内,用氢氧化钠调节溶液的pH至6.8;
G、所得原料通过管道进入成品桶10储存,成品通过管道输送到冷冻干燥机进行干燥,得到成品食品级天然水蛭素冻干粉。
实施例2
口服药品级天然水蛭素的生产方法,包括以下步骤:
A、水蛭放在专用催吐桶1中进行水蛭素粗品的制备和收集,制备方法是,先用诱导液喂饱饥饿的水蛭,排液;再用催吐液灌入桶内,催吐水蛭,得到水蛭素粗品,排液收集;将清水灌入桶内清洗水蛭,对水蛭进行养护;
B、所得原料通过管道进入酸沉桶2,在上述滤液中加入三氯乙酸,用三氯乙酸调节溶液的pH至2进行沉淀,静置30分钟;
C、酸沉后所得原料通过管道进入水浴锅3,于65℃的恒温水浴中隔水加热20分钟;
D、水浴加热后,原料通过管道抽入冷却桶4内冷却至室温;
E、冷却后原料通过管道进入平板离心机5进行固液分离,离心机转股直径D600,转速1200r/min,离心时间10min,去清液排除离心沉淀的固体;
F、过滤后所得液体回到冷却桶4进行收集,再回到酸沉桶2中加入三氯乙酸,调节溶液的pH至0.5进行沉淀,静置30分钟;
G、二次酸沉后所得原料通过管道进入水浴锅3,于65℃的恒温水浴中隔水加热20分钟;
H、二次水浴加热后,原料通过管道抽入冷却桶4内二次冷却至室温;
I、二次冷却后原料通过管道进入平板离心机5进行二次固液分离,离心机转股直径D450,转速2500r/min,离心时间10min,去清液排除离心沉淀的固体;
J、滤液通过管道进入成品桶10储存,成品通过管道输送到冷冻干燥机进行干燥,得到口服药品级天然水蛭素成品。
实施例3
化妆品添加级水蛭素生产方法,其特征在于:包括以下步骤:
A、水蛭放在专用催吐桶1中进行水蛭素粗品的制备和收集,制备方法是,先用诱导液喂饱饥饿的水蛭,排液;再用催吐液灌入桶内,催吐水蛭,得到水蛭素粗品,排液收集;将清水灌入桶内清洗水蛭,对水蛭进行养护;
B、所得原料通过管道进入酸沉桶2,在上述滤液中加入三氯乙酸,用三氯乙酸调节溶液的pH至0.5进行沉淀,静置20分钟;
C、酸沉后所得原料通过管道进入水浴锅3,于60℃的恒温水浴中隔水加热15分钟;
D、水浴加热后,原料通过管道抽入冷却桶4内冷却至室温;
E、冷却后原料通过管道进入平板离心机5进行固液分离,离心机转股直径D450,转速2500r/min,离心时间10min,去清液排除离心沉淀的固体;
F、离心去除沉淀后所得液体通过管道进入中和桶6内,用氢氧化钠调节溶液的pH至7.0,抽入管式离心机7中离心去沉淀;转速19000r/min,离心时间5min;
G、管式过滤后所得原料通过管道进入微滤桶8;
H、纳滤桶8内原料通过管道进入微滤机81进行微滤;采取滤芯孔径0.2μm,操作压力0.2Mpa;
I、微滤后的滤液通过管道进入成品桶10储存,成品通过管道输送到冷冻干燥机进行干燥,得到化妆品添加级水蛭素冻干粉。
实施例4
科研纯化级水蛭素生产方法,包括以下步骤:
A、水蛭放在专用催吐桶1中进行水蛭素粗品的制备和收集,制备方法是,先用诱导液喂饱饥饿的水蛭,排液;再用催吐液灌入桶内,催吐水蛭,得到水蛭素粗品,排液收集;将清水灌入桶内清洗水蛭,对水蛭进行养护;
B、所得原料通过管道进入酸沉桶2,在上述滤液中加入三氯乙酸,用三氯乙酸调节溶液的pH至1.5进行沉淀,静置30分钟;
C、酸沉后所得原料通过管道进入水浴锅3,于65℃的恒温水浴中隔水加热15分钟;
D、水浴加热后,原料通过管道抽入冷却桶4内冷却至室温;
E、冷却后原料通过管道进入平板离心机5进行固液分离,排出过滤所得固体;离心机转股直径D600,转速1200r/min,离心时间10min;
F、过滤后所得液体通过管道进入中和桶6内,用氢氧化钠调节溶液的pH至7.0,抽入管式离心机7中过滤;管式离心机转股直径150,转速19000r/min,离心时间5min;
G、管式过滤后所得原料通过管道进入微滤桶8;
H、纳滤桶8内原料通过管道进入微滤机81进行微滤;采取滤芯孔径0.2μm,操作压力0.2Mpa;
I、微滤后的滤液通过管道进入纳滤桶9;
J、纳滤桶9内滤液通过管道进入纳滤机91;错流滤芯孔径分别为3KD和10KD,保留3KD至10KD的水蛭素浓缩液体;
K、纳滤所得原料通过管道进入成品桶10储存,成品通过管道输送到冷冻干燥机进行干燥,得到科研纯化级水蛭素冻干粉。
由上表可见,本发明设备可满足多种纯度的天然水蛭素纯化加工生产,回收率得到大幅度提升。
以上检测方法遵循:
GB 7916―1987《化妆品卫生标准》
《中国人民共和国药典》2015年版
《广西壮族自治区壮药质量标准(第三卷)》2017年版
天然水蛭素的测定方法采用凝血酶滴定法:
1、方法提要
天然水蛭素能与凝血酶结合,使凝血酶失活,其结合比例为1:1,抗凝血酶单位以ATU 表示,即每消耗一个凝血酶单位(U)相当于一个抗凝血酶单位(ATU) 。
2、仪器设备
0.75cm×10cm小试管;微量移液器(1~500μl、1~5ml);
45 度角试管架;秒表;恒温水浴箱;分析天平,感量0.0001克;
pH测试仪;普通玻璃仪器。
3、试剂
(人)纤维蛋白原;凝血酶; 0.2 mol/L的 Tris-Hcl缓冲液(pH7.4); 0.2mol/L三羟甲基氨基甲烷溶液;0.1mol/L盐酸溶液;氯化钠;0.9%生理盐水。
4、溶液的配制
(1)Tris-HCl缓冲液(pH7.4)的配制
将0.2mol/L三羟甲基氨基甲烷溶液约25ml、0.1mol/L盐酸溶液约40ml和氯化钠0.8766g混合、溶解,调节pH值至7.4,然后加蒸馏水定容100ml(含0.15 mol氯化钠)即成Tris-HCl缓冲溶液,备用。
(2)0.5%(人)纤维蛋白原的配制
用上述已配制好的Tris-HCl缓冲溶液溶解(人)纤维蛋白原,配成0.5%纤维蛋白原溶液(以凝固物计,现用现配),备用。
(3)凝血酶溶液的配制
用0.9%生理盐水配制成凝血酶浓度为40 U/ml的溶液(现用现配),备用。
5、分析步骤
取1g样品粉末(过三号筛),精密称定,精密加入0.9%氯化钠溶液5ml,充分搅拌,浸提30分钟,并时时振摇,离心,精密量取上清夜100μl置试管中,加入0.5%(人)纤维蛋白原溶液200μl、摇匀,用移液器在试管内的溶液中吹一小气泡作为观察标记(注意避免产生其它气泡),接着加入已配制好的凝血酶溶液,轻轻摇匀(3~5s,下同)、计时,然后将试管插入位于37℃恒温水浴箱的45 度角试管架中,轻轻旋转并观察气泡随液面转动情况,如气泡随液面转动即为反应终点,否则按每分钟滴加5μl凝血酶溶液至凝固(如滴加凝血酶溶液次数超过5次不凝固者应稀释样品,直至在3~5次为止)。记录消耗凝血酶溶液的体积。
6、结果表述
天然水蛭素含量按下列公式计算:
样品中水蛭素含量=(C1×V1)/(C2×V2)
式中天然水蛭素含量单位为 ATU/g;
C1----凝血酶溶液的浓度,U/ml;
C2----供试品溶液的浓度,g/ml;
V1----消耗凝血酶溶液的体积,μl;
V2----供试验品溶液的加入量,μl。
Claims (8)
1.一种规模化水蛭素分离纯化生产工艺方法,其特征在于:包括以下步骤:
A、水蛭放在专用催吐桶(1)中进行水蛭素粗品的制备和收集,制备方法是,先用诱导液喂饱饥饿的水蛭,排液;再用催吐液灌入桶内,催吐水蛭,得到水蛭素粗品,排液收集;将清水灌入桶内清洗水蛭,对水蛭进行养护;
B、所得原料通过管道进入酸沉桶(2),在上述滤液中加入三氯乙酸,用三氯乙酸调节溶液的pH至0.5~3.5进行沉淀,静置10~30分钟;
C、酸沉后所得原料通过管道泵进入水浴锅(3),于50~65℃的恒温水浴中隔水加热15-20分钟;
D、水浴加热后,原料通过管道进入冷却桶(4)内冷却至室温;
E、冷却后原料通过管道泵进入平板离心机(5)进行固液分离,排出过滤所得固体;
F、过滤后所得液体通过管道进入中和桶(6)内,用氢氧化钠调节溶液的pH至6.0~7.0,抽入管式离心机(7)中再进行固液分离;
G、管式过滤后所得原料清液通过管道进入微滤桶(8);
H、微滤桶(8)内原料清液通过管道进入微滤机(81)进行微滤;
I、微滤后的滤液通过管道进入纳滤桶(9);
J、纳滤桶(9)内滤液通过管道进入纳滤机(91);利用纳滤机纳滤和反渗透功能,达到进一步去除大分子颗粒和无用盐分离子,保留水蛭素成分,并浓缩去除部分水分;
K、纳滤浓缩所得原料液通过管道进入成品桶(10)储存,成品通过管道输送到冷冻干燥机进行干燥,得到成品粉碎过筛后即为水蛭素冻干粉。
2.根据权利要求1所述规模化水蛭素分离纯化生产工艺方法,其特征在于:所述平板离心机(5)设置管道将过滤液回到冷却桶(4),冷却桶(4)设置回液管道至酸沉桶(2),重新添加三氯乙酸调节溶液的pH至0.5~3.5进行再次沉淀,静置10~30分钟,再次经过水浴、冷却后进入平板离心机(5)二次离心,所得过滤液再进入后续工艺流程。
3.根据权利要求1所述规模化水蛭素分离纯化生产工艺方法,其特征在于:所述催吐桶(1)、酸沉桶(2)、水浴锅(4)、冷却桶(5)、中和桶(6)、微滤桶(8)、微滤机(81)、纳滤桶(9)和成品桶(10)设置注水入水管道,并分别设置开关阀。
4.根据权利要求1所述规模化水蛭素分离纯化生产工艺方法,其特征在于:所述中和桶(6)设置管道与成品桶(10)连接,管道设置开关阀。
5.根据权利要求1所述规模化水蛭素分离纯化生产工艺方法,其特征在于:所述微滤机(81)设置管道与成品桶(10)连接,管道设置开关阀。
6.根据权利要求1所述规模化水蛭素分离纯化生产工艺方法,其特征在于:所述酸沉桶(2)处设置酸液注入管道,并设置开关阀。
7.根据权利要求1所述规模化水蛭素分离纯化生产工艺方法,其特征在于:所述中和桶(6)处设置碱液注入管道,并设置开关阀。
8.根据权利要求1所述规模化水蛭素分离纯化生产工艺方法,其特征在于:所述专用催吐桶(1),支撑在支架(14)的上方,催吐桶(1)的底部中心设置向下的排液管(13),排液管(13)上设置排液阀(16);催吐桶(1)内还设置隔离网(17);支架(14)固定安放在台秤上方;
桶内固定支撑环(18),支撑环(18)的放射状辐条焊接在催吐桶(1)底部,隔离网(17)放置在支撑环(18)上。
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