CN112048024A - 一种灵芝提取物及其制备方法和应用 - Google Patents

一种灵芝提取物及其制备方法和应用 Download PDF

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CN112048024A CN202010828673.1A CN202010828673A CN112048024A CN 112048024 A CN112048024 A CN 112048024A CN 202010828673 A CN202010828673 A CN 202010828673A CN 112048024 A CN112048024 A CN 112048024A
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Abstract

本发明提供了一种灵芝提取物及其制备方法和应用,所述制备方法是将灵芝孢子粉经提取、离心分离、微滤后,将微滤截留液经真空浓缩、乙醇沉淀、沉淀收集干燥得第一灵芝提取物;将微滤清液经膜浓缩、乙醇沉淀、沉淀收集干燥得第二灵芝提取物;然后合并第一灵芝提取物与第二灵芝提取物。本发明采用分级膜截留方式,对不同分子量的多糖进行分离。微滤一次截留液中多糖纯度达88~90%,微滤、反渗透两部分截留液合并多糖纯度达73~75%。相比现有单一超滤处理需要循环浓缩的过程,本发明既能缩短生产时间提高效率,又能对多糖进行分级分离。

Description

一种灵芝提取物及其制备方法和应用
技术领域
本发明涉及灵芝多糖提取技术领域,尤其涉及一种灵芝提取物及其制备方法和应用。
背景技术
灵芝孢子具有灵芝全部遗传活性物质,是灵芝的精华,大量文献报道其具有抗肿瘤,免疫调节,调节血脂以及调节改善神经、心血管和呼吸系统等的药理作用。灵芝孢子多糖是灵芝孢子中主要的化学成分之一,是灵芝孢子重要药理活性的体现者。
然而,由于灵芝多糖传统提取工艺落后,得到的产品多糖含量、纯度不高,杂质含量过高的灵芝多糖抗癌活性也较差。灵芝多糖是由三股单糖链构成的、具有螺旋状立体构形(三级结构)的葡聚糖,是一种大分子化合物,其分子量从数千到数十万,它是一种从灵芝孢子粉或灵芝中提取的物质。不溶于高浓度的酒精,微溶于低浓度酒精及冷水,在热水中能全部溶解。温度过高,会引起灵芝多糖的降解,多糖体中糖苷键易断裂而形成多个糖单体,从而失去生物活性。
现有专利及文献无法分离出针对不同分子量段的灵芝多糖,只简单分离出粗多糖,以粗多糖为主,且工序相对复杂,纯度较低,影响产品功效。近年来有资料采用超滤、透析等方法对灵芝多糖分离,但提取液不经处理直接超滤处理,导致处理时间长,能耗增加,生产效率低等问题。透析纯化方法虽然纯化效果好,但只适用于实验室规模,难以放大生产。如何建立一种适用于大规模生产,可以在尽量少的破坏多糖结构的基础上,有效的制备高纯度灵芝多糖且收率相对较高的方法,是值得探索和进一步完善的。
发明内容
有鉴于此,本发明的目的在于提出一种灵芝提取物及其制备方法和应用,目的是在尽量少的破坏灵芝多糖结构的基础上,有效的制备高纯度灵芝多糖。
基于上述目的,本发明提供了一种灵芝提取物的制备方法,所述制备方法是将灵芝孢子粉经提取、离心分离、微滤后,将微滤截留液经真空浓缩、乙醇沉淀、沉淀收集干燥得第一灵芝提取物;将微滤清液经膜浓缩、乙醇沉淀、沉淀收集干燥得第二灵芝提取物;然后合并第一灵芝提取物与第二灵芝提取物。
优选的,所述制备方法包括如下步骤:
步骤一、以灵芝孢子粉为原料,采用高压差/热回流提取;
步骤二、离心分离,离心分离后取上清液;
步骤三、微滤处理,处理过程的压力控制为0.1-0.3Mpa,收集微滤清液与微滤截留液;
步骤四、将微滤截留液在55~85℃下真空浓缩成相对密度1.1~1.3的浸膏后,浸膏经乙醇沉淀、静置、收集沉淀、水溶解及干燥处理后得第一灵芝提取物;
步骤五、将微滤清液采用膜浓缩,反渗透压力0.5~1Mpa,反渗透浓缩液55~85℃下真空浓缩成相对密度1.1~1.3的浸膏后,浸膏经乙醇沉淀、静置、收集沉淀、水溶解及干燥处理后得第二灵芝提取物;
步骤六、合并第一灵芝提取物及第二灵芝提取物。
所述步骤一中采用热回流提取的温度为90-100℃。
所述步骤四和步骤五中乙醇沉淀的方法均是在相应的浸膏中加入乙醇至浸膏乙醇含量为80-85%,4℃下静置12小时。
所述乙醇的体积分数为80-95%。
所述步骤四和步骤五中的干燥处理方式均为喷雾干燥、真空干燥或一步制粒干燥。
所述制备方法还包括灵芝多糖提纯的步骤,灵芝多糖提纯的方法为将合并后的灵芝提取物溶解形成混合溶液,之后加入树脂振摇,再抽滤将树脂和溶液分离,收集脱蛋白后的溶液,然后上阳离子交换柱,先用灭菌水洗涤至洗脱液无色,再用灭菌生理盐水洗涤,收集洗脱液A,取洗脱液A上阴离子交换柱,先用灭菌水洗涤至洗脱液无色,再用灭菌生理盐水洗涤,收集洗脱液B,最后将洗脱液B经超滤膜超滤分离并浓缩,超滤膜的截留分子量为30000以上,浓缩液经喷雾干燥、真空干燥或一步制粒干燥后即得灵芝多糖。
本发明还提供了一种灵芝提取物,所述灵芝提取物采用上述制备方法制得。
相应的,本发明还提供了所述灵芝提取物在药品中的应用。
相应的,本发明还提供了所述灵芝提取物在保健品、食品、化妆品中的应用。
本发明的有益效果:
1、本发明采用分级膜截留方式,对不同分子量的多糖进行分离。微滤一次截留液中多糖纯度达88~90%,微滤、反渗透两部分截留液合并多糖纯度达73~75%。相比现有单一超滤处理需要循环浓缩的过程,本发明既能缩短生产时间提高效率,又能对多糖进行分级分离。
2、本发明制备的灵芝第一提取物收率(MFN部分):0.8~1.2%,第二提取物收率(RO部分):2.6~3.5%,提取物率高,适合大规模生产。
3、本发明过程连续化,全部过程可在动态的连续过程中完成,综合利用率高,在同一工艺过程,可产出两种以上提取物。
4、本发明通过合理的提纯工艺,进一步提高灵芝多糖的纯度,使得产品纯度极高。高纯度的灵芝多糖可拥有药品、保健品的原料,如胶囊剂、片剂、口服液等,具有良好的开发应用前景。
具体实施方式
为使本公开的目的、技术方案和优点更加清楚明白,以下结合具体实施例,对本公开进一步详细说明。
需要说明的是,除非另外定义,本说明书的实施例使用的技术术语或者科学术语应当为本公开所属领域内具有一般技能的人士所理解的通常意义。包括”或者“包含”等类似的词语意指出现该词前面的元件或者物件涵盖出现在该词后面列举的元件或者物件及其等同,而不排除其他元件或者物件。本说明书的实施例中使用的“第一”、“第二”以及类似的词语并不表示任何顺序、数量或者重要性,而只是用来区分不同的组成部分。
实施例1
本实施例灵芝提取物的制备方法如下:
将灵芝孢子粉25Kg与20倍纯化水加入热回流提取罐,95℃热回流提取2h。提取液经10000r/min的转速离心分离,分离出的离心液进行微滤处理,微滤精度500nm,处理过程中压力控制为0.2Mpa,控制温度在25℃,收集微滤清液与微滤截留液。微滤截留液60℃下真空浓缩成相对密度1.2的浸膏后,往浸膏中加入体积分数95%的乙醇至浸膏中乙醇含量为85%,4℃下静置12小时。收集沉淀用3倍纯水溶解后喷雾干燥即得第一灵芝提取物(产品1);将微滤清液采用膜浓缩,反渗透压力1Mpa,浓缩过程控制温度30℃,反渗透浓缩液60℃下真空浓缩成相对密度1.2的浸膏后,往浸膏中加入体积分数90%的乙醇至浸膏中的乙醇的占比含量为85%,4℃下静置12小时。收集沉淀用3倍纯水溶解后喷雾干燥即得第二灵芝提取物(产品2);合并产品1和产品2,得到产品3,总收率为3.3%。所得产品多糖含量60%。
实施例2
本实施例灵芝提取物的制备方法如下:
将灵芝孢子粉25Kg与20倍纯化水混合,料液进行连续式高效高压差提取。提取液经10000r/min的转速离心分离,分离出的离心液进行微滤处理,微滤精度500nm,处理过程中压力控制为0.12Mpa,控制温度20℃,收集微滤清液与微滤截留液。微滤截留液60℃下真空浓缩成相对密度1.3的浸膏后,往浸膏中加入体积分数90%的乙醇至浸膏中乙醇含量为85%,4℃下静置12小时。收集沉淀用3倍纯水溶解后喷雾干燥即得第一灵芝提取物(产品1);将微滤清液采用膜浓缩,反渗透压力1Mpa,浓缩过程控制温度34℃,反渗透浓缩液60℃下真空浓缩成相对密度1.3的浸膏后,往浸膏中加入体积分数95%的乙醇至浸膏中的乙醇含量为85%,4℃下静置12小时。收集沉淀用3倍纯水溶解后喷雾干燥即得第二灵芝提取物(产品2);合并产品1和产品2,得到产品3,总收率为3%。所得产品多糖含量60%。
实施例3
本实施例灵芝提取物的制备方法如下:
将灵芝孢子粉25Kg与20倍纯化水加入热回流提取罐,95℃热回流提取2h。提取液经11000r/min的转速离心分离,分离出的离心液进行微滤处理,微滤精度500nm,处理过程中压力控制为0.3Mpa,控制温度在20℃,收集微滤清液与微滤截留液。微滤截留液60℃下真空浓缩成相对密度1.2的浸膏后,往浸膏中加入体积分数95%的乙醇至浸膏中的乙醇含量为80%,4℃下静置12小时。收集沉淀用3倍纯水溶解后喷雾干燥即得第一灵芝提取物(产品1);将微滤清液采用膜浓缩,反渗透压力0.8Mpa,浓缩过程控制温度25℃,反渗透浓缩液60℃下真空浓缩成相对密度1.2的浸膏后,往浸膏中加入体积分数90%的乙醇至浸膏中乙醇的含量为85%,4℃下静置12小时。收集沉淀用3倍纯水溶解后喷雾干燥即得第二灵芝提取物(产品2);合并产品1和产品2,得到产品3,总收率为3.5%。所得产品多糖含量62%。
实施例4
本实施例灵芝提取物的制备方法如下:
将灵芝孢子粉25Kg与20倍纯化水混合,料液进行连续式高效高压差提取。提取液经10000r/min的转速离心分离,分离出的离心液进行微滤处理,微滤精度500nm,处理过程中压力控制为0.Mpa,控制温度20℃,收集微滤清液与微滤截留液。微滤截留液60℃下真空浓缩成相对密度1.3的浸膏后,往浸膏中加入体积分数95%的乙醇至浸膏中的乙醇含量为82%,4℃下静置12小时。收集沉淀用3倍纯水溶解后喷雾干燥即得第一灵芝提取物(产品1);将微滤清液采用膜浓缩,反渗透压力0.7Mpa,浓缩过程控制温度28℃,反渗透浓缩液60℃下真空浓缩成相对密度1.3的浸膏后,往浸膏中加入体积分数90%的乙醇至浸膏中的乙醇含量为80%,4℃下静置12小时。收集沉淀用3倍纯水溶解后喷雾干燥即得第二灵芝提取物(产品2);合并产品1和产品2,得到产品3,总收率为3.1%。所得产品多糖含量61%。
实施例5
本实施例灵芝提取物的制备方法如下:
将灵芝孢子粉25Kg与20倍纯化水加入热回流提取罐,95℃热回流提取2h。提取液经11000r/min的转速离心分离,分离出的离心液进行微滤处理,微滤精度500nm,处理过程中压力控制为0.2Mpa,控制温度在30℃,收集微滤清液与微滤截留液。微滤截留液60℃下真空浓缩成相对密度1.1的浸膏后,往浸膏中加入体积分数90%的乙醇至浸膏中的乙醇的占比含量为83%,4℃下静置12小时。收集沉淀用3倍纯水溶解后喷雾干燥即得第一灵芝提取物(产品1);将微滤清液采用膜浓缩,反渗透压力1Mpa,浓缩过程控制温度30℃,反渗透浓缩液60℃下真空浓缩成相对密度1.2的浸膏后,往浸膏中加入体积分数95%的乙醇浸膏乙醇的占比含量为80%,4℃下静置12小时。收集沉淀用3倍纯水溶解后喷雾干燥即得第二灵芝提取物(产品2);合并产品1和产品2,得到产品3,总收率为3.4%。所得产品多糖含量61%。
将合并后的产品3在60℃纯水中溶解形成混合溶液,加入80目-100目的聚酰胺,使产品3与聚酰胺的质量比为20:3mg/g,在室温下摇床振摇3h,转速为150r/min,使树脂吸附溶液成分。振荡结束后,抽滤将树脂和溶液分离,收集脱蛋白后的溶液。
阳离子交换剂预处理:取适量阳离子交换树脂,以无菌水洗涤除杂质,洗至pH中性后,用0.5mol./L盐酸浸泡0.5h,水洗至中性,抽干除去水分,用0.5mol./L氢氧化钠浸泡0.5h,洗至中性,抽干除去水分,再用0.5mol./L盐酸浸泡0.5h,水洗至中性,抽干除去水分,加无菌水保存备用。阴离子交换剂预处理:取适量阴离子交换树脂,以无菌水洗涤除杂质,用0.5mol./L氢氧化钠浸泡0.5h,洗至中性,抽干除去水分,用0.5mol./L盐酸浸泡0.5h,水洗至中性,抽干除去水分,在用0.5mol./L氢氧化钠浸泡0.5h,洗至中性,抽干除去水分,加无菌水保存备用。
取备用阳离子交换剂,装柱(10×100cm)。取脱蛋白后的溶液10L上阳离子交换柱,先用灭菌水洗涤至洗脱液无色,再用灭菌生理盐水洗涤,流速控制在5ml/min,收集洗脱液A。取备用阴离子交换剂,取洗脱液A上阴离子交换柱,先用灭菌水洗涤至洗脱液无色,再用灭菌生理盐水洗涤,流速控制在5ml/min,收集洗脱液B,最后将洗脱液B经超滤膜超滤分离并浓缩,超滤膜的截留分子量为30000以上,浓缩液经喷雾干燥后即得灵芝多糖。按硫酸-苯酚法测定,灵芝多糖中活性多糖含量约为95%。
实施例6
本实施例灵芝提取物的制备方法如下:
将灵芝孢子粉25Kg与20倍纯化水加入热回流提取罐,料液进行连续式高效高压差提取。提取液经12000r/min的转速离心分离,分离出的离心液进行微滤处理,微滤精度500nm,处理过程中压力控制为0.2Mpa,控制温度在15℃,收集微滤清液与微滤截留液。微滤截留液60℃下真空浓缩成相对密度1.1的浸膏后,往浸膏中加入体积分数90%的乙醇至浸膏中乙醇的占比含量为85%,4℃下静置12小时。收集沉淀用3倍纯水溶解后喷雾干燥即得第一灵芝提取物(产品1);将微滤清液采用膜浓缩,反渗透压力0.8Mpa,浓缩过程控制温度25℃,反渗透浓缩液60℃下真空浓缩成相对密度1.2的浸膏后,往浸膏中加入体积分数90%的乙醇至浸膏中乙醇的占比含量为80%,4℃下静置12小时。收集沉淀用3倍纯水溶解后喷雾干燥即得第二灵芝提取物(产品2);合并产品1和产品2,得到产品3,总收率为3.2%。所得产品多糖含量59%。
将合并后的产品3在60℃纯水中溶解形成混合溶液,加入80目-100目的聚酰胺,使产品3与聚酰胺的质量比为22:2mg/g,在室温下摇床振摇3h,转速为150r/min,使树脂吸附溶液成分。振荡结束后,抽滤将树脂和溶液分离,收集脱蛋白后的溶液。
阳离子交换剂预处理:取适量阳离子交换树脂,以无菌水洗涤除杂质,洗至pH中性后,用0.5mol./L盐酸浸泡0.5h,水洗至中性,抽干除去水分,用0.5mol./L氢氧化钠浸泡0.5h,洗至中性,抽干除去水分,再用0.5mol./L盐酸浸泡0.5h,水洗至中性,抽干除去水分,加无菌水保存备用。阴离子交换剂预处理:取适量阴离子交换树脂,以无菌水洗涤除杂质,用0.5mol./L氢氧化钠浸泡0.5h,洗至中性,抽干除去水分,用0.5mol./L盐酸浸泡0.5h,水洗至中性,抽干除去水分,在用0.5mol./L氢氧化钠浸泡0.5h,洗至中性,抽干除去水分,加无菌水保存备用。
取备用阳离子交换剂,装柱(10×100cm)。取脱蛋白后的溶液10L上阳离子交换柱,先用灭菌水洗涤至洗脱液无色,再用灭菌生理盐水洗涤,流速控制在5ml/min,收集洗脱液A。取备用阴离子交换剂,取洗脱液A上阴离子交换柱,先用灭菌水洗涤至洗脱液无色,再用灭菌生理盐水洗涤,流速控制在5ml/min,收集洗脱液B,最后将洗脱液B经超滤膜超滤分离并浓缩,超滤膜的截留分子量为30000以上,浓缩液经喷雾干燥后即得灵芝多糖。按硫酸-苯酚法测定,灵芝多糖中活性多糖含量约为94%。
对比例1
本对比例采用与实施例1相同量的灵芝孢子粉先进行预处理,之后通过超滤除去大部分小分子杂质,之后经分离、冷冻干燥后,在真空干燥得到灵芝多糖。
对比例2
本对比例采用与实施例1相同量的灵芝孢子粉与纯化水经常规的热水浸提法制得灵芝提取物。
采用紫外分光光度法对上述各实施例所得灵芝提取物进行测定,测定方法如下:
对照品溶液制备:取60℃真空干燥过夜的葡萄糖对照品约10mg(±0.2mg),精密称定(十万分之一天平),入100mL洁净干燥容量瓶,加纯化水50mL以下,轻微晃动至完全溶解后继续定容至刻度,具塞,摇匀,备用。标准曲线制备见下表:
Figure BDA0002637136060000091
供试品溶液制备:(1)备洁净干燥100mL容量瓶2支,各取多糖提取物样品约500mg(±10mg),精密称定(万分之一天平),称量法加入纯化水约50.0g(天平精度不低于0.01g),具塞,适当摇匀,超声5min,每隔1min手工振摇,使样品溶解完全,摇匀,5mL移液管(首吸首排弃用,靠壁自然滴落,有“吹”字标最后再吹)精密取样于50mL一次性塑料离心管,各取3支,用25ml移液管一次性靠壁高悬冲入无水乙醇,具塞(所有液体不得接触离心管口及盖子),离心管架上直立放置,置4-12℃冰箱静置过夜。(2)次日,直接冰箱取出醇沉样品于自适倾角式离心机4000r/min离心15min,小心倾去上清液,离心管倒置于滤纸上片刻,吸掉明显的上清液残留(如有操作失败直接丢弃),重新直立于离心管架上,备用。(按22%多糖纯度进行估算)每支离心管总计需加200g纯化水复溶,提前准备洁净干燥的500mL烧杯或250mL的具塞三角瓶,称定空容器重量。离心管加入适量纯化水,适度超声或漩涡助溶后(至无肉眼可见)移入干燥洁净容器中,重复3~5次直到离心管内样品沉淀转移完全后,离心管盖适当清洗,再用纯化水补液到200g(扣除空容器重量),玻璃棒搅拌适当超声助溶,混匀后,取适量溶液用0.45μm微孔滤膜滤过,取第5滴以后的续滤液1.5mL以上,备用。
测定:取供试品溶液1ml,加入1.5ml 5%苯酚溶液,7ml 98%浓硫酸,室温静置显色30min,于490nm处测定吸光度,同时作空白。
测试结果:实施例1中第一灵芝提取物(产品1)的多糖纯度为88.23%,第二灵芝提取物(产品2)的多糖纯度为27.38%。实施例2中第一灵芝提取物(产品1)的多糖纯度为88.35%,第二灵芝提取物(产品2)的多糖纯度为28.12%。实施例3中第一灵芝提取物(产品1)的多糖纯度为88.83%,第二灵芝提取物(产品2)的多糖纯度为29.16%。实施例4中第一灵芝提取物(产品1)的多糖纯度为88.45%,第二灵芝提取物(产品2)的多糖纯度为28.26%。实施例5中第一灵芝提取物(产品1)的多糖纯度为88.50%,第二灵芝提取物(产品2)的多糖纯度为27.86%。实施例6中第一灵芝提取物(产品1)的多糖纯度为88.12%,第二灵芝提取物(产品2)的多糖纯度为27.18%。
经过测试对比,本发明实施例1-6制备的灵芝提取物中的活性多糖含量明显高于对比例1及对比例2的含量。经实施例5和实施例6处理后的灵芝多糖纯度明显有所提高。实施例1-6制备的灵芝提取物及灵芝多糖可直接用于保健品和药品的原料。
相较而言,实施例1至实施例6制备的灵芝提取物和灵芝多糖含量比普通方法得到灵芝多糖活性相对更高,其抗肿瘤,抗血栓,抗氧化,抗衰老,抗辐射,保肝,降血糖,降血脂,调节免疫,调节核酸,增强体液免疫功能的作用明显提升。
所属领域的普通技术人员应当理解:以上任何实施例的讨论仅为示例性的,并非旨在暗示本公开的范围(包括权利要求)被限于这些例子;在本公开的思路下,以上实施例或者不同实施例中的技术特征之间也可以进行组合,步骤可以以任意顺序实现,并存在如上所述的本说明书实施例的不同方面的许多其它变化,为了简明它们没有在细节中提供。
本说明书的实施例旨在涵盖落入所附权利要求的宽泛范围之内的所有这样的替换、修改和变型。因此,凡在本说明书实施例的精神和原则之内,所做的任何省略、修改、等同替换、改进等,均应包含在本公开的保护范围之内。

Claims (10)

1.一种灵芝提取物的制备方法,其特征在于,所述制备方法是将灵芝孢子粉经提取、离心分离、微滤后,将微滤截留液经真空浓缩、乙醇沉淀、沉淀收集干燥得第一灵芝提取物;将微滤清液经膜浓缩、乙醇沉淀、沉淀收集干燥得第二灵芝提取物;然后合并第一灵芝提取物与第二灵芝提取物。
2.根据权利要求1所述灵芝提取物的制备方法,其特征在于,所述制备方法包括如下步骤:
步骤一、以灵芝孢子粉为原料,采用高压差/热回流提取;
步骤二、离心分离,离心分离后取上清液;
步骤三、微滤处理,处理过程的压力控制为0.1-0.3Mpa,收集微滤清液与微滤截留液;
步骤四、将微滤截留液在55~85℃下真空浓缩成相对密度1.1~1.3的浸膏后,浸膏经乙醇沉淀、静置、收集沉淀、水溶解及干燥处理后得第一灵芝提取物;
步骤五、将微滤清液采用膜浓缩,反渗透压力0.5~1Mpa,反渗透浓缩液55~85℃下真空浓缩成相对密度1.1~1.3的浸膏后,浸膏经乙醇沉淀、静置、收集沉淀、水溶解及干燥处理后得第二灵芝提取物;
步骤六、合并第一灵芝提取物及第二灵芝提取物。
3.根据权利要求2所述灵芝提取物的制备方法,其特征在于,所述步骤一中采用热回流提取的温度为90-100℃。
4.根据权利要求2所述灵芝提取物的制备方法,其特征在于,所述步骤四和步骤五中乙醇沉淀的方法均是在相应的浸膏中加入乙醇至浸膏乙醇含量为80-85%,4℃下静置12小时。
5.根据权利要求4所述灵芝提取物的制备方法,其特征在于,所述乙醇的体积分数为80-95%。
6.根据权利要求2所述灵芝提取物的制备方法,其特征在于,所述步骤四和步骤五中的干燥处理方式均为喷雾干燥、真空干燥或一步制粒干燥。
7.根据权利要求1所述灵芝提取物的制备方法,其特征在于,所述制备方法还包括灵芝多糖提纯的步骤,灵芝多糖提纯的方法为将合并后的灵芝提取物溶解形成混合溶液,之后加入树脂振摇,再抽滤将树脂和溶液分离,收集脱蛋白后的溶液,然后上阳离子交换柱,先用灭菌水洗涤至洗脱液无色,再用灭菌生理盐水洗涤,收集洗脱液A,取洗脱液A上阴离子交换柱,先用灭菌水洗涤至洗脱液无色,再用灭菌生理盐水洗涤,收集洗脱液B,最后将洗脱液B经超滤膜超滤分离并浓缩,超滤膜的截留分子量为30000以上,浓缩液经喷雾干燥、真空干燥或一步制粒干燥后即得灵芝多糖。
8.一种灵芝提取物,其特征在于,所述灵芝提取物采用权利要求1-7任一项所述制备方法制得。
9.权利要求8所述灵芝提取物在药品中的应用。
10.权利要求8所述灵芝提取物在保健品、食品、化妆品中的应用。
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