CN112425508B - 一种草莓茎尖诱导分化、增殖、生根通用的培养基 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及草莓茎尖组织培养技术领域，具体涉及一种草莓茎尖诱导分化、增殖、生根通用的培养基，该培养基为MS+0.3 mg/L6‑BA+0.7 mg/LTDZ+0.1 mg/LNAA+0.1 mg/LIAA+0.3 mg/LIBA+7g/L琼脂+25g/L白糖，PH 5.4‑5.8。本发明的培养基即可用于草莓茎尖诱导分化，也可用于增殖、生根培养，可延长外植体在瓶内生长时间，减少培养基的配制及接种次数，降低因切割损伤、培养基污染及周转等带来的损失。既简化了操作工序，也降低了生产成本，有利于该技术的推广及应用，促进组培苗的规模化生产。
Description
技术领域
本发明涉及草莓茎尖组织培养技术领域，具体涉及一种草莓茎尖诱导分化、增殖、生根通用的培养基。
背景技术
草莓茎尖组织培养技术已成形，但通常采用茎尖诱导分化、增殖、生根三种培养基进行培养，生产中需频繁配制及接种更换培养基，工序较为繁琐, 影响其生产效益的因素较多。如果在同种培养基上完成组培苗的培养，则可延长瓶内生长时间，减少培养基的配制及接种次数，降低因切割损伤、培养基污染及周转等带来的损失。
发明内容
为解决上述问题，本发明提供了一种草莓茎尖诱导分化、增殖、生根通用的培养基。
为实现上述目的，本发明采取的技术方案为：
一种草莓茎尖诱导分化、增殖、生根通用的培养基，该培养基为MS + 0.3 mg/L6-BA + 0.7 mg/LTDZ + 0.1 mg/LNAA + 0.1 mg/LIAA + 0.3 mg/LIBA + 7g/L琼脂 + 25g/L白糖，PH 5.4 - 5.8。
上述培养基即可用于草莓茎尖诱导分化，也可用于增殖、生根培养，简化了操作工序，且降低了生产成本，有利于该技术的推广及应用，促进组培苗的规模化生产。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明进行详细说明。以下实施例将有助于本领域的技术人员进一步理解本发明，但不以任何形式限制本发明。应当指出的是，对本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进。这些都属于本发明的保护范围。
实验例
试验材料选择
试验材料为单季品种“久久”和四季资源“龙引”，剪取2 cm长，无病虫害且生长健壮的匍匐茎茎尖。采集时间为匍匐茎生长旺盛期，此时茎尖生长旺盛，接种后易产生增殖芽。
培养基的制备及工具准备
所有培养基均采用MS + 植物激素 + 7g/L琼脂 + 25g/L白糖，PH 5.4 - 5.8，0.103 MPa，121 ℃，湿热灭菌20 min。无菌水、滤纸及工具，0.103 MPa，121 ℃，湿热灭菌30min。解剖镜放入超净工作台酒精擦拭表面，紫外灭菌30 min。
制备所需化学试剂
①制备1LMS培养基，取50ml贮备液Ⅰ，5ml贮备液Ⅱ，5ml贮备液Ⅲ和5ml贮备液Ⅳ。
②制备1L1/2MS培养基，取25ml贮备液Ⅰ，5ml贮备液Ⅱ，5ml贮备液Ⅲ和5ml贮备液Ⅳ。
③把配置好的贮备液放入4℃冰箱中贮藏。
试验材料处理
将采集的茎尖在流水状态下冲洗2 h，置于超净工作台中无菌水冲洗3次。酒精消毒1 min，无菌水冲洗3次，每次1 min以上。Hgcl2消毒7 min，无菌水冲洗3次，每次1 min以上，立即接种。剥取茎尖0.3mm内，此形态生长较快，且脱毒效果好。
实验方法
草莓组织培养基中生长激素的正交实验
生长激素采用6-BA、TDZ、NAA、IAA、IBA，6-BA设置0.1mg/L、0.3mg/L、0.5 mg/L、0.7mg/L、0.9 mg/L，TDZ设置0.1mg/L、0.3mg/L、0.5 mg/L、0.7 mg/L、0.9 mg/L，NAA设置0 mg/L、 0.1 mg/L、0.3 mg/L、0.5mg/L、0.7mg/L，IAA设置0 mg/L、 0.1 mg/L、0.3 mg/L、0.5mg/L、0.7mg/L，IBA设置0 mg/L、 0.1 mg/L、0.3 mg/L、0.5mg/L、0.7mg/L，进行五因素五水平的L25（56）的正交实验。每处理组合接种10瓶、每接种3个试验材料，重复3次，30 d调查一次生长结果。
茎尖诱导率(%) = 萌发茎尖数 / 接种茎尖数 × 100%；芽生长状态包括叶色、长势。
丛生芽增殖系数 = 增殖芽数 / 接种芽数；芽生长状态包括叶色、长势。
组培苗生根率(%) = 生根组培苗数 / 接种组培苗数 × 100%；组培苗生长状态包括叶色、长势。
培养条件
培养温度23 ℃ ± 2 ℃，夜晚不低于18 ℃，光照强度为2500 lux - 3000 lux，光照时长14 h/d，相对空气湿度40% - 50%。
数据分析
试验数据采用SPSS23和Excel 2019进行分析。
试验结果与分析
适宜草莓茎尖诱导分化、增殖、生根培养基筛选。
表3的结果显示“久久”和“龙引”的诱导分化率、增殖系数、生根率处理的总效应均未达到5%的显著水平，各因素只有6-BA、IBA对生根率的影响达到5%显著水平。“久久”和“龙引”的茎尖组织培养优异培养基MS + 0.5 mg/L6-BA + 0.3 mg/LTDZ + 0.3 mg/LNAA +0.5 mg/LIAA + 0.1 mg/LIBA；MS + 0.5 mg/L6-BA + 0.7 mg/LTDZ + 0 mg/LNAA + 0.1mg/LIAA + 0.1 mg/LIBA；MS + 0.3 mg/L6-BA + 0.7 mg/LTDZ + 0.1 mg/LNAA + 0.1 mg/LIAA + 0.3 mg/LIBA。优异培养基为MS + 0.1 mg/L6-BA + 0.3 mg/LTDZ + 0.1 mg/LNAA+ 0.1 mg/LIAA + 0.1 mg/LIBA；MS + 0.5mg/L6-BA + 0.3 mg/LTDZ + 0.5 mg/LNAA + 0mg/LIAA + 0.3 mg/LIBA。将5种培养基进行对比验证，每处理组合接种10瓶、每瓶接种3个试验材料，重复3次。30 d调查一次生长情况。
表4的结果显示，MS + 0.5 mg/L6-BA + 0.7 mg/LTDZ + 0 mg/LNAA + 0.1 mg/LIAA + 0.1 mg/LIBA培养基上“久久”和“龙引”增殖系数达到了8.9和8.8，但植株叶片发黄，且生根率和茎尖诱导分化率低。“久久”在MS + 0.5 mg/L6-BA + 0.3 mg/LTDZ + 0.3mg/LNAA + 0.5 mg/LIAA + 0.1 mg/LIBA上茎尖诱导分化率达到了67.2%，且植株长势健壮，但生根率和增殖系数低于MS + 0.3 mg/L6-BA + 0.7 mg/LTDZ +0.1 mg/LNAA + 0.1mg/LIAA + 0.3 mg/LIBA培养基。因此，以MS + 0.3 mg/L6-BA + 0.7 mg/LTDZ + 0.1 mg/LNAA + 0.1 mg/LIAA + 0.3 mg/LIBA培养效果最好，“久久”茎尖诱导分化率为68.2%、增殖系数达到8.5，生根率为95.1%。“龙引”茎尖诱导分化率为67.6%、增殖系数达到8.6，生根率为96%。
本发明的培养基还应用于过的草莓品种“章姬”、“安娜”，引进资源“cmw”、“yy”等种苗繁育，茎尖诱导分化率达到65%以上、增殖系数达到8.5以上，生根率达到95%以上，且植株长势良好。
以上对本发明的具体实施例进行了描述。需要理解的是，本发明并不局限于上述特定实施方式，本领域技术人员可以在权利要求的范围内做出各种变化或修改，这并不影响本发明的实质内容。在不冲突的情况下，本申请的实施例和实施例中的特征可以任意相互组合。
Claims (1)
1.一种草莓茎尖诱导分化、增殖、生根通用的培养基，其特征在于：该培养基为MS +0.3 mg/L6-BA + 0.7 mg/LTDZ + 0.1 mg/LNAA + 0.1 mg/LIAA + 0.3 mg/LIBA + 7g/L琼脂 + 25g/L白糖，pH 5.4 - 5.8。
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Families Citing this family (1)
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|---|---|---|---|---|
| CN113755521B (zh) * | 2021-07-29 | 2024-02-06 | 上海市农业科学院 | 一种由农杆菌介导的草莓‘甜查理’遗传转化体系的构建方法 |
Citations (10)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO1997022700A2 (en) * | 1995-12-21 | 1997-06-26 | Cornell Research Foundation, Inc. | Grapevine leafroll virus proteins and their uses |
| CN102106261A (zh) * | 2010-12-02 | 2011-06-29 | 浙江省农业科学院 | 一种led条件下草莓脱毒组培方法 |
| CN102257961A (zh) * | 2011-05-27 | 2011-11-30 | 东海县黄川春风草莓生产合作社 | 一种草莓种苗的组织培养方法 |
| CN102668984A (zh) * | 2012-05-24 | 2012-09-19 | 南京农业大学 | 一种梨叶片诱导不定芽再生植株的方法 |
| CN103688855A (zh) * | 2013-12-11 | 2014-04-02 | 福建农林大学 | 一种小叶红豆离体胚培养及植株再生方法 |
| CN103975854A (zh) * | 2014-04-29 | 2014-08-13 | 卞佳林 | 一种草莓茎尖培养诱导植株分化的培养基及其培养方法 |
| CN108464240A (zh) * | 2018-04-13 | 2018-08-31 | 河北富硕农业科技发展有限公司 | 白雪公主草莓脱毒快繁的方法 |
| CN108739385A (zh) * | 2018-06-04 | 2018-11-06 | 华中农业大学 | 一种砂梨叶片高效再生体系的建立方法及其应用 |
| CN208063887U (zh) * | 2018-03-22 | 2018-11-09 | 黑龙江省农业科学院园艺分院 | 一种多功能压枝叉 |
| CN108834908A (zh) * | 2018-09-10 | 2018-11-20 | 河北农业大学 | 一种桃花药愈伤组织的诱导和继代保存方法 |
Family Cites Families (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| USPP7269P (en) * | 1988-11-21 | 1990-07-10 | Regents Of The University Of Minnesota | Chrysanthemum plant named Maroon Pride |
| CN102422816A (zh) * | 2011-10-25 | 2012-04-25 | 上海航育种子基地场 | 草莓的茎尖离体快速培养方法 |
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Patent Citations (10)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO1997022700A2 (en) * | 1995-12-21 | 1997-06-26 | Cornell Research Foundation, Inc. | Grapevine leafroll virus proteins and their uses |
| CN102106261A (zh) * | 2010-12-02 | 2011-06-29 | 浙江省农业科学院 | 一种led条件下草莓脱毒组培方法 |
| CN102257961A (zh) * | 2011-05-27 | 2011-11-30 | 东海县黄川春风草莓生产合作社 | 一种草莓种苗的组织培养方法 |
| CN102668984A (zh) * | 2012-05-24 | 2012-09-19 | 南京农业大学 | 一种梨叶片诱导不定芽再生植株的方法 |
| CN103688855A (zh) * | 2013-12-11 | 2014-04-02 | 福建农林大学 | 一种小叶红豆离体胚培养及植株再生方法 |
| CN103975854A (zh) * | 2014-04-29 | 2014-08-13 | 卞佳林 | 一种草莓茎尖培养诱导植株分化的培养基及其培养方法 |
| CN208063887U (zh) * | 2018-03-22 | 2018-11-09 | 黑龙江省农业科学院园艺分院 | 一种多功能压枝叉 |
| CN108464240A (zh) * | 2018-04-13 | 2018-08-31 | 河北富硕农业科技发展有限公司 | 白雪公主草莓脱毒快繁的方法 |
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| CN108834908A (zh) * | 2018-09-10 | 2018-11-20 | 河北农业大学 | 一种桃花药愈伤组织的诱导和继代保存方法 |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| 草莓茎尖分生组织一步成苗试验;沈磊等;《现代农业科技》;20081010(第19期);第36、38页 * |
| 赛娃草莓脱毒快繁关键技术研究;马宗新等;《中国果菜》;20130815(第08期);第16-18页 * |
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