CN103975854A - 一种草莓茎尖培养诱导植株分化的培养基及其培养方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种草莓茎尖培养诱导植株分化的培养基，包括MS+1-1.5mg/L6-BA+0.05-0.1mg/LIBA+0.05-0.1mg/LGA3+30-40g/L蔗糖+3-5g/Lphytagel，pH值为5.8-6.0。同时公开了草莓茎尖培养诱导植株分化的培养方法。本发明通过改进基本培养基及有效成分，调整培养条件，有效克服了传统的培养基有机物含量非常低，不利于植物的助长发育，致使成活率低的缺陷，且本发明具有繁殖速度快、成活率高、育苗成本低、占地面积小、使用灵活、不受季节限制的优势。
Description
技术领域
本发明涉及一种培养基及其培养方法，尤其是涉及一种草莓的培养基及其培养方法，属于苗木的组织培养技术领域。
背景技术
草莓的组织培养是指将草莓的组织、器官和细胞，在人工培养基和无菌条件下离体培养成完整植株的方法。组织培养有很多优点，如：繁殖速度快，可短期内获得大量苗木，满足生产要求；能快速地推广新品种，降低育苗成本；可以培养无病毒苗，对不含病毒的分生组织进行离体培养，即可获得无病毒植株，且占地少，节省土地，使用灵活，不受季节限制，随时可以获得苗木。
而目前草莓的组织培养基多采用MSM培养基为基本培养基，MSM培养基有机物含量非常低，不利于植物的助长发育，致使成活率降低。
发明内容
为了解决上述技术问题，本发明的发明目的在于提供一种繁殖速度快、成活率高的草莓茎尖培养诱导植株分化的培养基及其培养方法。
本发明是通过以下技术方案实现的：
一种草莓茎尖培养诱导植株分化的培养基，其特征在于，包括MS+1-1.5mg/L 6-BA+0.05-0.1 mg/L IBA+0.05-0.1 mg/L GA3+30-40g/L蔗糖+3-5g/Lphytagel，pH值为5.8-6.0。
进一步，所述的MS包括：
硝酸钾：1900mg/L；
硝酸铵：1700mg/L；
磷酸二氢钾：150 mg/L；
氯化钙：450 mg/L；
硫酸镁：350 mg/L；
铁盐：45 mg/L；
七水硫酸锌：8.5 mg/L；
四水硫酸锰：22.3 mg/L；
碘化钾：0.85 mg/L；
钼酸钠：0.25 mg/L；
硫酸铜：0.025 mg/L；
氯化钴：0.025 mg/L；
硼酸：6.5 mg/L；
甘氨酸：1.5 mg/L；
盐酸硫胺素：0.4 mg/L；
盐酸吡哚素：0.4 mg/L；
烟酸：0.5 mg/L；
肌醇：100 mg/L。
且所述的铁盐为乙二胺四乙酸二钠和硫酸亚铁组合形成的混合溶液，且所述的乙二胺四乙酸二钠和硫酸亚铁的质量比为7:5。
一种草莓茎尖培养诱导植株分化的培养方法，其特征在于，包括以下步骤：
（1）材料准备：选取每年生4-6cm的匍匐茎先端作为植株，首先将植株用水冲洗2-4h，然后在无菌环境下，截取植株2-3cm的先端进行消毒处理；
（2）接种：用无菌水对步骤（1）消毒后的植株冲洗2-3次，然后剥去幼叶，切下0.3-0.5mm的生产点先端，然后放入培养基中进行培养；
（3）培养：接种后在培养室内培养，室温20-25℃，湿度50-60%，日光灯照射，光照强度10-20μm-2·s-1，每日光照10-12h，培养25-30天。
更进一步，步骤（1）所述的消毒处理方法为：先用浓度为70%的酒精漂洗，然后用浓度为6-8%的次氯酸钠浸泡5-10min。
本发明的有益效果为：本发明通过改进基本培养基及有效成分，调整培养条件，有效克服了传统的培养基有机物含量非常低，不利于植物的助长发育，致使成活率低的缺陷，且本发明具有繁殖速度快、成活率高、育苗成本低、占地面积小、使用灵活、不受季节限制的优势。
具体实施方式
现在参考具体实施例对本发明进行具体的说明。
实施例1：
一种草莓茎尖培养诱导植株分化的培养基，包括MS+1mg/L 6-BA+0.05mg/L IBA+0.05mg/L GA3+40g/L蔗糖+5g/Lphytagel，pH值为5.8左右。
实施例2：
一种草莓茎尖培养诱导植株分化的培养基，包括MS+1.5mg/L 6-BA+0.1 mg/L IBA+0.1 mg/L GA3+30g/L蔗糖+5g/Lphytagel，pH值为6.0左右。
实施例3：
一种草莓茎尖培养诱导植株分化的培养基，包括MS+1.2mg/L 6-BA+0.08 mg/L IBA+0.06 mg/L GA3+35g/L蔗糖+4g/Lphytagel，pH值为5.9左右。
实施例4：
一种草莓茎尖培养诱导植株分化的培养基，包括MS+1.3mg/L 6-BA+0.06 mg/L IBA+0.07 mg/L GA3+32g/L蔗糖+3.5g/Lphytagel，pH值为5.8左右。
实施例5：
一种草莓茎尖培养诱导植株分化的培养基，包括MS+1.4mg/L 6-BA+0.08mg/L IBA+0.08 mg/L GA3+38g/L蔗糖+4g/Lphytagel，pH值为6.0左右。
实施例6：
在上述实施例1-5中，所述的MS包括：硝酸钾：1900mg/L；硝酸铵：1700mg/L；磷酸二氢钾：150 mg/L；氯化钙：450 mg/L；硫酸镁：350 mg/L；铁盐：45 mg/L；七水硫酸锌：8.5 mg/L；四水硫酸锰：22.3 mg/L；碘化钾：0.85 mg/L；钼酸钠：0.25 mg/L；硫酸铜：0.025 mg/L；氯化钴：0.025 mg/L；硼酸：6.5 mg/L；甘氨酸：1.5 mg/L；盐酸硫胺素：0.4 mg/L；盐酸吡哚素：0.4 mg/L；烟酸：0.5 mg/L；肌醇：100 mg/L。
实施例7：
选择100个培养瓶，分成5组，每组20个，然后，5组培养瓶对应上述实施例1-5的培养基，即每个实施例所述的培养基对应20个培养瓶，具体培养方法为：
（1）选取每年生4-6cm的匍匐茎先端作为植株，共选取500株，首先将植株用水冲洗2-4h，然后在无菌环境下，截取植株2-3cm的先端进行消毒处理具体处理方法为：先用浓度为70%的酒精漂洗，然后用浓度为6-8%的次氯酸钠浸泡5-10min；
（2）接种：用无菌水对步骤（1）消毒后的植株冲洗2-3次，然后剥去幼叶，切下0.3-0.5mm的生产点先端，然后将500个草莓茎尖置于培养瓶中培养，每个培养瓶中放5个草莓茎尖，；
（3）培养：接种后在培养室内培养，室温20-25℃，湿度50-60%，日光灯照射，光照强度10-20μm-2·s-1，每日光照10-12h，培养25-30天。
结论：培养30天后，5组实施例均出现分化新芽，培养50-60天，每个培养瓶中均分化出1.5-2cm无根苗25-30株，然后，以每月1:8-10的增值倍数繁殖，而在后续的移栽过程中，成活率达到了92%以上。
以上显示和描述了本发明的基本原理、主要特征及优点。本行业的技术人员应该了解，上述说明书中描述的只是说明本发明的原理，在不脱离本发明精神和范围的前提下，本发明还会有各种变化和改进，这些变化和改进都落入要求保护的本发明范围内。本发明要求保护范围由所附的权利要求书及其等效物界定。
Claims (5)
1.一种草莓茎尖培养诱导植株分化的培养基，其特征在于，包括MS+1-1.5mg/L 6-BA+0.05-0.1 mg/L IBA+0.05-0.1 mg/L GA3+30-40g/L蔗糖+3-5g/Lphytagel，pH值为5.8-6.0。
2.根据权利要求1所述的一种草莓茎尖培养诱导植株分化的培养基，其特征在于，所述的MS包括：
硝酸钾：1900mg/L；
硝酸铵：1700mg/L；
磷酸二氢钾：150 mg/L；
氯化钙：450 mg/L；
硫酸镁：350 mg/L；
铁盐：45 mg/L；
七水硫酸锌：8.5 mg/L；
四水硫酸锰：22.3 mg/L；
碘化钾：0.85 mg/L；
钼酸钠：0.25 mg/L；
硫酸铜：0.025 mg/L；
氯化钴：0.025 mg/L；
硼酸：6.5 mg/L；
甘氨酸：1.5 mg/L；
盐酸硫胺素：0.4 mg/L；
盐酸吡哚素：0.4 mg/L；
烟酸：0.5 mg/L；
肌醇：100 mg/L。
3.根据权利要求2所述的一种草莓茎尖培养诱导植株分化的培养基，其特征在于，所述的铁盐为乙二胺四乙酸二钠和硫酸亚铁组合形成的混合溶液，且所述的乙二胺四乙酸二钠和硫酸亚铁的质量比为7:5。
4.一种草莓茎尖培养诱导植株分化的培养方法，其特征在于，包括以下步骤：
（1）材料准备：选取每年生4-6cm的匍匐茎先端作为植株，首先将植株用水冲洗2-4h，然后在无菌环境下，截取植株2-3cm的先端进行消毒处理；
（2）接种：用无菌水对步骤（1）消毒后的植株冲洗2-3次，然后剥去幼叶，切下0.3-0.5mm的生产点先端，然后放入培养基中进行培养；
（3）培养：接种后在培养室内培养，室温20-25℃，湿度50-60%，日光灯照射，光照强度10-20μm-2·s-1，每日光照10-12h，培养25-30天。
5.根据权利要求4所述的一种草莓茎尖培养诱导植株分化的培养方法，其特征在于，步骤（1）所述的消毒处理方法为：先用浓度为70%的酒精漂洗，然后用浓度为6-8%的次氯酸钠浸泡5-10min。
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