CN103548691B - 茶树组培苗生根培养的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明建立了两种茶树组培苗生根培养的方法。一种方法是将茶树组培苗经过继代增殖的芽苗接种于生根培养基中进行生根培养；所述生根培养基是以1/2MS培养基为基本培养基，并添加有吲哚-3-丁酸5mg/L、蔗糖20g/L和琼脂3g/L。另一种方法是将茶树组培苗经过继代增殖的芽苗在浓度为1g/L的吲哚-3-丁酸中浸泡1min后，接种于生根培养基中进行生根培养；所述生根培养基是以1/2MS培养基为基本培养基，并添加有蔗糖2g/L和琼脂1.5g/L。本发明建立了一套经济、高效的茶树诱导生根快繁技术体系，提高了茶树生根率，为实现商品化生产等研究提供了基础。
Description
技术领域
本发明属于植物组织培养技术领域，涉及一种茶树组培苗生根培养的方法。背景技术
茶树（Camelliasinensis（L.）O.Kuntze）通常为常绿灌木或小乔木，云贵高原是茶树的原产地。茶树的种植在我国有着悠久的传统，其叶加工后成为当今世纪三大无酒精饮品之一。茶叶中的糖类物质即茶多糖具有降血糖、抗炎、抗凝、抗血栓、抗辐射等药理作用。
然而，茶树常规育种不仅费时费力，且生长周期长，结实率低，仅为3%-15%。主要是由于茶树是多年生植物、多酚类物质含量高等本身特性引起，造成培养的愈伤组织易褐化、难以分化、基因不能按序表达。其有性繁殖品质不稳定，种子育苗易造成品种混杂、退化，使生产名优高档茶受到限制,并且影响茶叶产量、质量及效益。因故生产上常用无性的扦插繁殖方式。然而无性的扦插繁殖生根费时费事，效率不高，在常规的扦插繁殖过程中，其繁殖速度慢、受季节限制、占地面积大等原因，使茶树的推广速度大为受限了，再加上我国很多茶树品种都渐渐被无性系良种所取代或者逐渐走入珍稀濒危植物的行列，所以可望通过组织培养进行茶树种质资源保存，特别是不育或败育率很高的品种。而且，许多野生茶树数量稀少，利用组培技术进行茶树的快速、大量地繁殖是很有必要。
组织培养已成为当前农林种苗生产中的一种重要的繁殖手段，与常规的无性繁殖方法相比，它具有繁殖速度快、周年生产、产品一致性好等优点，尤其在繁殖一些种源稀缺的品种时，更能体现它的优势。相对于扦插苗，茶树组培苗不受季节限制，更适宜于工厂化育苗。成浩、刘德华等先后利用茶树的不同器官进行了快速繁殖研究，但是在茶树组织培养中其生根率仍然很低。
发明内容
有鉴于此，本发明的目的在于提供一种茶树组培苗生根培养的方法，提高茶树生根率，为其建立一套经济、高效的茶树诱导生根快繁技术体系，为实现商品化生产等研究提供基础。
为达到上述目的，本发明提供如下技术方案：
本发明公开了一种茶树组培苗生根培养的方法，将茶树组培苗经过继代增殖的芽苗接种于生根培养基中进行生根培养；所述生根培养基是以1/2MS培养基为基本培养基，并添加有吲哚-3-丁酸5mg/L、蔗糖20g/L和琼脂3g/L。
进一步，生根培养时的培养条件为：培养温度为25±2℃，光照强度为1500lx，光照时间为12h/d。
本发明还公开了另一种茶树组培苗生根培养的方法，将茶树组培苗经过继代增殖的芽苗在浓度为1g/L的吲哚-3-丁酸中浸泡1min后，接种于生根培养基中进行生根培养；所述生根培养基是以1/2MS培养基为基本培养基，并添加有蔗糖2g/L和琼脂1.5g/L。
本发明中所述的1/2MS培养基为植物组织培养中常用的基本培养基，其具体配方如下表所示：
本发明的有益效果在于：本发明研究了不同培养基、不同处理方法以及不同浓度激素不同处理时间等因素对茶树生根的影响，建立了两种茶树组培苗生根培养的方法，一种采用在半固体培养基中添加较高浓度生长素的处理方式，适合的培养基组合为1/2MS+IBA5.0mg/L，生根率最高达55.6%，根白色健壮，长1-2cm；另一种采用将茎段在高浓度生长素中浸蘸一定时间后移入1/2MS+1.5g/L琼脂+2.0g/L蔗糖的培养基中，适合的生长素及其浓度和时间为在浓度为1g/L的吲哚-3-丁酸（IBA）中浸泡1min，生根率较高，侧根较多，平均根长为1-2cm。本发明建立了一套经济、高效的茶树诱导生根快繁技术体系，提高了茶树生根率，为实现商品化生产等研究提供了基础。
附图说明
为了使本发明的目的、技术方案和有益效果更加清楚，本发明提供如下附图进行说明：
图1为茶树组培苗经过继代增殖的芽苗；
图2为1/2MS+IBA5.0mg/L培养基培养的茶树生根苗；
图3为1g/L的IBA溶液处理1min后的茶树生根苗。
具体实施方式
下面将结合附图，对本发明的优选实施例进行详细的描述。
本发明实施例的实验材料选择重庆文理学院重庆高校园林花卉工程研究中心健康无菌的茶树组培苗为研究对象，取其带1～2个腋芽的茎段作为供试材料。
1.第一种茶树组培苗生根培养的方法：
将茶树组培苗经过继代增殖的芽苗（如图1所示，高>2.0cm，生长健壮，叶形正常）接种于生根培养基中进行生根培养；生根培养基是以1/2MS为基本培养基，添加蔗糖20g/L、琼脂3g/L，并添加不同浓度的生长激素吲哚-3-丁酸（IBA）；培养温度为25±2℃，光照强度为1500lx，光照时间为12h/d；每个处理3瓶，每瓶10根，试验重复3次，培养20d后统计生根率和平均根数。
试验结果见表1，试验结果表明，1/2MS+IBA5.0mg/L处理生根率最高，平均达55.6%，根白色健壮，长1-2cm（如图2所示），且与供试的另外两个处理在1%和5%水平上差异显著。因此，适合的生根培养基组合为1/2MS+IBA5.0mg/L，即以1/2MS培养基为基本培养基，并添加有吲哚-3-丁酸5mg/L、蔗糖20g/L和琼脂3g/L。
表1不同激素浓度对茶树生根的影响
2.第二种茶树组培苗生根培养的方法：
将茶树组培苗经过继代增殖的芽苗（高>2.0cm，生长健壮，叶形正常）在高浓度生长素中浸泡一定时间后移入1/2MS+1.5g/L琼脂+2.0g/L蔗糖的培养基中，置于散光下培养20天后统计生根数与根长度。采用IBA、NAA两种生长素，设0.2g/L、0.5g/L、1.0g/L三种浓度，处理时间分别为10s、1min、5min、10min、30min（H1、H2、H3、H4、H5）。
试验结果见表2，试验结果表明，经过1g/L的IBA浸蘸处理1min的茶树生根率较高，侧根较多，平均根长为1-2cm（如图3所示），而其他处理虽然均有侧根生长，但长度很短，平均在0.1-0.5cm左右。并且可以看到激素处理时间过长反而抑制根的生长，各激素处理30min左右时茶树生根率均为零。因此，适合的生长素及其浓度和时间为在浓度为1g/L的吲哚-3-丁酸（IBA）中浸泡1min。
表2不同激素浓度不同处理时间对茶树生根的影响
最后说明的是，以上优选实施例仅用以说明本发明的技术方案而非限制，尽管通过上述优选实施例已经对本发明进行了详细的描述，但本领域技术人员应当理解，可以在形式上和细节上对其作出各种各样的改变，而不偏离本发明权利要求书所限定的范围。
Claims (2)
1.茶树组培苗生根培养的方法，其特征在于：将茶树组培苗经过继代增殖的芽苗接种于生根培养基中进行生根培养；所述生根培养基是以1/2MS培养基为基本培养基，并添加有吲哚-3-丁酸5mg/L、蔗糖20g/L和琼脂3g/L。
2.根据权利要求1所述的茶树组培苗生根培养的方法，其特征在于：生根培养时的培养条件为：培养温度为25±2℃，光照强度为1500lx，光照时间为12h/d。
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