CN106069755A - 一种茶树组培苗的壮苗生根培养方法 - Google Patents

一种茶树组培苗的壮苗生根培养方法 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种茶树组培苗的壮苗生根培养方法，包括以下步骤：（1）选种消毒；（2）壮苗生根培养：生根培养时保持温度为25‑28℃，光照时间为每日12‑15h，光强1000‑1500lx，培养4‑5周，生根后的植株的根长度达到1‑2cm时，进行移栽；（3）移栽。本发明所述的茶树组培苗的壮苗生根培养基通过改良基本培养基及成分、调整培养条件等配套措施，使得移栽成活率可达到95%以上，种苗生长健壮，可有效提高茶叶的产量和质量，增强了其经济价值。

Description

一种茶树组培苗的壮苗生根培养方法
技术领域
本发明涉及一种茶树组培苗的壮苗生根培养方法，属于植物组织培养技术领域。
背景技术
茶叶从中国走向世界，早已成为世界饮料市场三分天下有其一的重要品种。世界茶叶市场竞争也日益尖锐，20世纪90年代以来各主要茶叶生产消费国都不断出现新的经营方式。中国是茶叶的故乡，有绿茶、红茶等六大茶类，二十个产茶省，八千万茶农，是名副其实的产茶大国。
茶叶中含有儿茶素、胆甾烯酮、咖啡碱、肌醇、叶酸、泛酸等成分，可以增进人体健康，茶叶饮品-茶被誉为"“世界三大饮料之一”，因此，茶树种植具有非常大的经济价值。
然而，茶树常规育种不仅费时费力，且生长周期长，结实率低，仅为3%-15%。主要是由于茶树是多年生植物、多酚类物质含量高等本身特性引起，造成培养的愈伤组织易褐化、难以分化、基因不能按序表达。其有性繁殖品质不稳定，种子育苗易造成品种混杂、退化，使生产名优高档茶受到限制, 并且影响茶叶产量、质量及效益。因故生产上常用无性的扦插繁殖方式。然而无性的扦插繁殖生根费时费事，效率不高，在常规的扦插繁殖过程中，其繁殖速度慢、受季节限制、占地面积大等原因，使茶树的推广速度大为受限了，再加上我国很多茶树品种都渐渐被无性系良种所取代或者逐渐走入珍稀濒危植物的行列，所以可望通过组织培养进行茶树种质资源保存，特别是不育或败育率很高的品种。而且，许多野生茶树数量稀少，利用组培技术进行茶树的快速、大量地繁殖是很有必要。
发明内容
为了解决上述问题，本发明的目的在于提供一种生根快，成活率高的茶树组培苗的壮苗生根培养方法。
为解决上述技术问题，本发明的技术方案为：
一种茶树组培苗的壮苗生根培养方法，包括以下步骤：
（1）选种消毒：选取经过继代增殖培养后3-5cm的牙苗，先用流水冲洗，然后用浓度为70%乙醇溶液浸泡30s，然后在消毒水中浸泡2-3min后，用无菌水冲洗3-5次后接种于壮苗生根培养基中；
（2）壮苗生根培养：
生根培养时保持温度为25-28℃，光照时间为每日12-15h，光强1000-1500lx，培养4-5周，生根后的植株的根长度达到1-2cm时，进行移栽；
（3）移栽：
将步骤（2）所述的植株移栽到培养室内，在3-5d后逐渐打开生根培养的瓶口，然后用清水洗去基部残留的培养基，然后扦插于穴盘内，并保持室内温度为25-28℃，20-25d后，移栽到穴盘内的营养土中，隔天浇水,并保持土壤含水量为85-90%以上，35-40d后，在新根新芽萌出后，逐渐减少浇水次数并定植于田间进行常规管理。
进一步，所述的消毒水为氯化汞，且所述的氯化汞的质量浓度为0.05%。
而所述的壮苗生根培养基包括1/2改良MS + 0.1～0.3mgL-1 IBA + 0.5～1.0mgL-1NAA +3～5mg L-1吲哚丁酸+0.5～1.0 gL-1活性炭 + 4.0～5.0gL-1琼脂+ 20gL-1蔗糖, 且pH值为5.5-6.5。
且所述的改良MS包括常量营养元素、微量营养元素和有机试剂。
其中，所述的常量营养元素的组分和其对应的浓度为：
硝酸钾1800 mg/L；
硫酸铵1650 mg/L；
二水氯化钙380 mg/L；
无水磷酸二氢钾120mg/L；
乙二胺四乙酸二钠28.6 mg/L；
七水硫酸亚铁20.5 mg/L。
所述的微量营养元素的组分和其对应的浓度为：
四水硫酸锰19.5 mg/L；
硫酸锌9.0mg/L；
硼酸7.5 mg/L；
碘化钾1.0mg/L；
钼酸钠0.5mg/L；
氯化钴0.05 mg/L。
而所述的有机试剂的组分和其对应的浓度为：
盐酸硫胺素8.0 mg/L；
甘氨酸：1.5 mg/L；
烟酸1.5 mg/L；
盐酸吡哆醇1.0mg/L；
肌醇100.0 mg/L。
本发明的有益效果为：本发明所述的茶树组培苗的壮苗生根培养基通过改良基本培养基及成分、调整培养条件等配套措施，使得移栽成活率可达到95%以上，种苗生长健壮，可有效提高茶叶的产量和质量，增强了其经济价值。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明进行详细的说明。
在以下实施例中，采用的改良MS包括常量营养元素、微量营养元素和有机试剂，其中常量营养元素的组分和其对应的浓度为：硝酸钾1800 mg/L；硫酸铵1650 mg/L；二水氯化钙380 mg/L；无水磷酸二氢钾120mg/L；乙二胺四乙酸二钠28.6 mg/L；七水硫酸亚铁20.5mg/L。
微量营养元素的组分和其对应的浓度为：四水硫酸锰19.5 mg/L；硫酸锌9.0mg/L；硼酸7.5 mg/L；碘化钾1.0mg/L；钼酸钠0.5mg/L；氯化钴0.05 mg/L。
而有机试剂的组分和其对应的浓度为：盐酸硫胺素8.0 mg/L；甘氨酸：1.5 mg/L；烟酸1.5 mg/L；盐酸吡哆醇1.0mg/L；肌醇100.0 mg/L。
实施例1：
（1）选种消毒：选取经过继代增殖培养后3-5cm的牙苗，先用流水冲洗，然后用浓度为70%乙醇溶液浸泡30s，然后在质量浓度为0.05%的氯化汞消毒水中浸泡2min后，用无菌水冲洗3次后接种于壮苗生根培养基中，所述的壮苗生根培养基包括1/2改良MS + 0.1mgL-1 IBA+ 0.5mgL-1NAA +3mg L-1吲哚丁酸+0.5gL-1活性炭 + 4.0gL-1琼脂+ 20gL-1蔗糖, 且pH值为5.5；
（2）壮苗生根培养：生根培养时保持温度为25-28℃，光照时间为每日12-15h，光强1000-1500lx，培养4周后，生根后的植株的根长度达到平均1.2cm时，进行移栽；
（3）移栽：将步骤（2）所述的植株移栽到培养室内，在3d后逐渐打开生根培养的瓶口，然后用清水洗去基部残留的培养基，然后扦插于穴盘内，并保持室内温度为25-28℃，20d后，移栽到穴盘内的营养土中，隔天浇水,并保持土壤含水量为85以上，35d后，在新根新芽萌出后，逐渐减少浇水次数并定植于田间进行常规管理。
实施例2：
（1）选种消毒：选取经过继代增殖培养后3-5cm的牙苗，先用流水冲洗，然后用浓度为70%乙醇溶液浸泡30s，然后在质量浓度为0.05%的氯化汞消毒水中浸泡3min后，用无菌水冲洗5次后接种于壮苗生根培养基中，所述的壮苗生根培养基包括1/2改良MS + 0.3mgL-1 IBA+ 1.0mgL-1NAA +5mg L-1吲哚丁酸+1.0gL-1活性炭 + 5.0gL-1琼脂+ 20gL-1蔗糖, 且pH值为6.5。
（2）壮苗生根培养：生根培养时保持温度为25-28℃，光照时间为每日12-15h，光强1000-1500lx，培养4周后，生根后的植株的根长度达到平均1.1cm时，进行移栽；
（3）移栽：将步骤（2）所述的植株移栽到培养室内，在5d后逐渐打开生根培养的瓶口，然后用清水洗去基部残留的培养基，然后扦插于穴盘内，并保持室内温度为25-28℃，25d后，移栽到穴盘内的营养土中，隔天浇水,并保持土壤含水量为86%以上，40d后，在新根新芽萌出后，逐渐减少浇水次数并定植于田间进行常规管理。
实施例3：
（1）选种消毒：选取经过继代增殖培养后3-5cm的牙苗，先用流水冲洗，然后用浓度为70%乙醇溶液浸泡30s，然后在质量浓度为0.05%的氯化汞消毒水中浸泡3min后，用无菌水冲洗4次后接种于壮苗生根培养基中，所述的壮苗生根培养基包括1/2改良MS + 0.2mgL-1 IBA+ 0.8mgL-1NAA +4mg L-1吲哚丁酸+0.8gL-1活性炭 + 5.0gL-1琼脂+ 20gL-1蔗糖, 且pH值为6；
（2）壮苗生根培养：生根培养时保持温度为25-28℃，光照时间为每日12-15h，光强1000-1500lx，培养4周后，生根后的植株的根长度达到平均1.6cm时，进行移栽；
（3）移栽：将步骤（2）所述的植株移栽到培养室内，在4d后逐渐打开生根培养的瓶口，然后用清水洗去基部残留的培养基，然后扦插于穴盘内，并保持室内温度为25-28℃，22d后，移栽到穴盘内的营养土中，隔天浇水,并保持土壤含水量为85-90%以上，36d后，在新根新芽萌出后，逐渐减少浇水次数并定植于田间进行常规管理。
上述实施例1-3的实验结果如表1所示：
表1：茶树组培苗的壮苗生根培养的结果
。
由表1可知：本发明所述的茶树组培苗的壮苗生根培养基通过改良基本培养基及成分、调整培养条件等配套措施，使得移栽成活率可达到95%以上，种苗生长健壮，可有效提高茶叶的产量和质量，增强了其经济价值。
以上具体实施方式不以任何形式限制本发明，凡是以等同替换或等效变换的方式所获得的技术方案，均落在本发明的保护范围内。

Claims (7)

1.一种茶树组培苗的壮苗生根培养方法，其特征在于，包括以下步骤：
（1）选种消毒：选取经过继代增殖培养后3-5cm的牙苗，先用流水冲洗，然后用浓度为70%乙醇溶液浸泡30s，然后在消毒水中浸泡2-3min后，用无菌水冲洗3-5次后接种于壮苗生根培养基中；
（2）壮苗生根培养：
生根培养时保持温度为25-28℃，光照时间为每日12-15h，光强1000-1500lx，培养4-5周，生根后的植株的根长度达到1-2cm时，进行移栽；
（3）移栽：
将步骤（2）所述的植株移栽到培养室内，在3-5d后逐渐打开生根培养的瓶口，然后用清水洗去基部残留的培养基，然后扦插于穴盘内，并保持室内温度为25-28℃，20-25d后，移栽到穴盘内的营养土中，隔天浇水,并保持土壤含水量为85-90%以上，35-40d后，在新根新芽萌出后，逐渐减少浇水次数并定植于田间进行常规管理。
2.根据权利要求1所述的一种茶树组培苗的壮苗生根培养方法，其特征在于，所述的消毒水为氯化汞，且所述的氯化汞的质量浓度为0.05%。
3.根据权利要求1所述的一种茶树组培苗的壮苗生根培养方法，其特征在于，所述的壮苗生根培养基包括1/2改良MS + 0.1～0.3mgL-1 IBA + 0.5～1.0mgL-1NAA +3～5mg L-1吲哚丁酸+0.5～1.0 gL-1活性炭 + 4.0～5.0gL-1琼脂+ 20gL-1蔗糖, 且pH值为5.5-6.5。
4.根据权利要求3所述的一种茶树组培苗的壮苗生根培养方法，其特征在于，所述的改良MS包括常量营养元素、微量营养元素和有机试剂。
5.根据权利要求4所述的一种茶树组培苗的壮苗生根培养方法，其特征在于，所述的常量营养元素的组分和其对应的浓度为：
硝酸钾1800 mg/L；
硫酸铵1650 mg/L；
二水氯化钙380 mg/L；
无水磷酸二氢钾120mg/L；
乙二胺四乙酸二钠28.6 mg/L；
七水硫酸亚铁20.5 mg/L。
6.根据权利要求4所述的一种茶树组培苗的壮苗生根培养方法，其特征在于，所述的微量营养元素的组分和其对应的浓度为：
四水硫酸锰19.5 mg/L；
硫酸锌9.0mg/L；
硼酸7.5 mg/L；
碘化钾1.0mg/L；
钼酸钠0.5mg/L；
氯化钴0.05 mg/L。
7.根据权利要求4所述的一种茶树组培苗的壮苗生根培养方法，其特征在于，而所述的有机试剂的组分和其对应的浓度为：
盐酸硫胺素8.0 mg/L；
甘氨酸：1.5 mg/L；
烟酸1.5 mg/L；
盐酸吡哆醇1.0mg/L；
肌醇100.0 mg/L。
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