JPH0322934A - 植物苗の製造方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 ［産業上の利用分野］ 本発明は、茎頂培養を利用して植物、例えばリンゴ、ツ
バキ、タバコ等の苗を製造する方法に関するものである
。

［従来の技術・発明が解決しようとする課題１茎頂培養
は葉芽を解剖し、茎頂分裂組織を摘出して培養し、苗条
と根をもった完全植物を育てる技術である。

植物の茎頂培養技術は石原ら（竹内，中島，古谷編，植
物組織培養の技術，ｐ．ｌ５１．朝倉書店．昭和５８午
）．　Ｒ．　Ｈ．　Ｚｉｍｍｅｒｍａｎら（１．　Ｋ．
Ｖａｓ　ｉ　ｌ編，　Ｃｅｌｌ　　Ｃｕｌｔｕｒｅ　　
ａｎｄ　　Ｓｏｍａｔｉｃ　　ＣｅｌｌＧｅｎｅｔｉｃ
ｓ　　ｏｒ　　Ｐｌａｎｔｓ，　　Ｖｏｌ．　　１　．
　　ｐ．　１　　１　　１−１　２　２　．　Ａｃａｄ
ｅｍｉｃ　　Ｐｒｅｓｓ，　　ｌ　９　８　４　）によ
り確立されているが、この方法で植物苗を生産する方法
は、従来、植物の種類、品種によって発根率の低い場合
があり（Ｌ　Ｒ．　Ｓｈａｒｐ．　Ｄ．　Ａ．　Ｅｖａ
ｎｓ，　Ｐ．　Ｖ．Ａｍｍｉｒａｔｏ，　Ｙ．　Ｙａｍ
ａｄａ編，　Ｈａｎｄｂｏｏｋ　　ｏｆ　　Ｐｌａｎｔ
Ｃｅｌｌ　　Ｃｕｌｔｕｒｅ，　Ｖｏｗ．　２　＋　ｐ
３　８　４　，　ＭａｃｍｉｌｌａｎＰｕｂｌｉｓｈｉ
ｎｇ　　Ｃｏｍｐａｎｙ．　　ｌ　９　８　４）必ずし
も満足できるものではなかった。従って、効率の良い発
根法の開発が望まれる。又、実生から植物苗を作出する
方法が知られているが、この方法で製造される植物苗は
遺伝的均一性に欠けるという欠点を有する。

［課題を解決するための手段１ 本発明は上記の課題を解決するもので、植物の茎頂を培
養し苗条とし、これを発根させる際に培地固型化剤とし
てゲランガム（Ｇｅｌｌａｎ　　ｇｕｍ）を用いること
を特徴とする植物苗の製造方法に関する。

以下本発明による植物苗条の製造方法を説明する。

本発明方法は ■）芽を解剖，茎頂を摘出．培養し多数の苗条を得る工
程（苗条確立工程），および ２）苗条を切り取って発根させる工程（発根工程）より
戊る。

ｌ）苗条確立工程 植物の新梢頂芽または腋芽を採取し、消毒用アルコール
，次亜塩素酸ソーダ，さらし粉などで殺曹し、滅菌水で
洗浄したのち、実体顕微鏡下で葉原基２〜３１’ｉを含
む茎頂部分を摘出する。

摘出した茎頂は固型培地上に置床し培養する。

培地としては、植物の組織培養に用いられる基本培地、
たとえばムラシゲ・スクーグ（以下ＭＳと略す）の培地
、ガンボーグのＢ５培地，リンスマイヤー・スクーグの
培地およびこれらの改変培地などが用いられる。

このような培地には炭素源、窒素源、無機塩類、有機物
等が適宜公知の技術に従って配合されてもよい。

炭素源としてたとえばシヨ糖、グルコース、７ルクトー
ス、マルトースなどの糖類、可溶性デンブンなどが用い
られる。窒素源としては、たとえば硝酸塩、アンモニウ
ム塩などが用いられる。無機塩類としては、たとえばリ
ン、カリウム、カルシウム、マグネシウム、マンガン、
銅、亜鉛、モリブデン、硼素、鉄、コバルト、ニッケル
などの元素を含有するものなどが用いられる。有機物と
しては、たとえばイノシトール、ニコチン、ビリドキシ
ン塩酸、チアミン塩酸、パントテン酸カルシウム、葉酸
、ｐ−アミノ安息香酸、ビオチン、コリンクロライド、
リボフラビン、アスコルビン酸、ビタミンＡ１　ビタミ
ンＤ！、ビタミンＢＩ！などのビタミン類、たとえばピ
ルビン酸ナトリウム、クエン酸、リンゴ酸、フマル酸な
どの有機酸、たとえばココナッツミルク、カゼイン加水
分解物、酵母エキスなどの天然物質などが用いられる。

培地には、さらにたとえばオーキシン類、サイトカイニ
ン類などの植物生長調節物質、寒天などが適宜添加され
てもよい。このようなオーキシン類としては、たとえば
２．４−ジクロロフゴ．ノキシ酢酸，２，４−ジクロロ
フェニル酢酸，インドール−３酢酸、インドール−３一
酪酸（以下、ｒＢＡと略記）、ｌ−ナフタレン酢酸、２
−ナフトキシ酢酸、バラクロロフェノキシ酢Ｍ、２．４
．５−１リクロロ７エノキシ酢酸、ｌ−ナフタレンアセ
トアミドなどが用いられる。また、サイトカイニン類と
し−Ｃは、たとえば６−ペンジルアデニン（以下ＢＡＰ
と略記）、２−インペンチルアデニン、２−インベンテ
ニノレアデニン、カイネチン、ゼアチン、ジヒドロゼア
チン、ゼアチンリボシド、ジ７エニル尿素などが用いら
れる。なかでもオーキシン類としてはたとえばＩＢＡな
どが、サイトカイニン類としてはたとえばＢＡＰなどが
繁用される。

通常オーキシン類は通常約Ｏ〜２０ｐｐｍ．サイトカイ
ニン類は通常約０．０　１　＝　１　５ｐｐｍの割合で
培地中に添加される。

上記培地上、通常約４〜４０℃、好ましくは２０〜３０
℃で照明下（通常０〜１００．０００ルクス，好ましく
はｉ．ｏｏｏ〜ｉｏ．ｏｏｏルクス．１２〜２４時間日
長），約ｌケ月毎に継代しながら約２〜４ケ月培養する
と茎頂が或長し苗条（リンゴの場合、ロゼット状）とな
る。この苗条をさらに同様の条件で２〜４ケ月培養する
と苗条塊が形或される。苗条の伸長を促すためジベレリ
ン酸（Ｇ　Ａ　３）を通常約ｏ．ｔ−ｌｏｐｐｍ培地に
添加してもよい。

２）発根工程 前工程で得た苗条塊の個々の苗条を切り取り発根用固型
培地に移植する。この場合の基本培地としては前工程で
用い！二基本培地またはこれらを通常約１／２〜ｌ／２
０程度に希釈したものが用いられる。培地にはオーキシ
ン類を通常約０．０１〜１ｏｐｐａ＋．糖類を通常約０
〜５％添加する。固型化剤としてはゲランガムを通常約
０．１−１．０％添加すると寒天、アガロースよりも発
根率が高い。

上記培地に移植した苗条は、通常約４〜４０’０、好ま
しくは２０〜３０℃で照明下（通常Ｏ〜１００．０００
ルクス，好ましくは１．０００〜５０，０００ルクス，
８〜２４時間）培養すると２〜３週間で発根し、発根し
た葉条を得る。

自体公知の手段に従って発根した葉条を植物苗に導く。

具体的には例えば、発根した葉条を洗浄してゲランガム
を除去し、例えばバーミキュライト等の土壌の入った鉢
に移植し、好ましくは遮光、多湿化によって再発根を促
進して順化させ、しかるのち、育苗鉢に移植して育苗す
る。

このようにして、目的とする植物苗が生産できる。

以下、本発明の実施例を詳細に説明する。なお、本明細
書を通して％は全て重量％である。

実施例１ （苗条確立工程） リンゴ（品種：スターキング）の頂芽および腋芽を７０
％エタノールに５分間、ついで１％次亜塩素酸ナトリウ
ム溶液に１０分間潰して滅菌後、滅菌水で５回洗浄した
。続いて実体顕微鏡下で葉原基２〜３個を含む茎頂を摘
出した。

摘出した茎頂は表一ｌのＭＳ培地にＢＡＰ２ｆｆｉｇ／
Ｑ，シ３糖３０ｇ／Ｑ．寒天８ｇ／Ｑを加えてｐＨ　５
　．８に調整し、その培地上に置床し照明下（白色螢光
灯，２，０００ルクス．１６時間日長）２５℃でｌケ月
毎に新しい培地に植えつぎ７ケ月培養した。

置床３ケ月後にはロゼット状の葉条が形戊され、ついで
主枝が伸長した苗条となり、７ケ月後には苗条塊が形或
された。

（以下余白） 表一ｌ　　ムラシゲ・スクーグ（ＭＳ）培地戊　　　分
　　　　　　　　　濃度（ｍｇ／ａ）ＭｇＳＯ．・７Ｈ
，０　　　　　　　　　３７０ＣａＣ（２ｚ　・２　Ｈ
！０　　　　　　　　　４　４　０ＫＮ０，　　　　　
　　　　　　　　１，９００ＮＨ４ＮＯ３　　　　　　
　　　　　１　，６　５　０ＫＨ，ＰＯ．　　　　　　
　　　　　　　ｌ　７０Ｆ　ｅ　Ｓ　Ｏ　１７　Ｈ　２
　０　　　　　　　　　　２　７　−　８Ｎａ，−ＥＤ
ＴＡ　　　　　　　　　　　　３７．３ＭｎＳ　０４　
・４　ＨｚＯ　　　　　　　　　　２　２　．３ＺｎＳ
Ｏ＋”　７Ｈ＊０　　　　　　　　　　　８．６ＣｕＳ
Ｏ＊・５ＨｔＯ　　　　　　　　　　　Ｏ．０２５Ｃｏ
ＣＱｚ　・６　ＨｚＯ　　　　　　　　　　　　Ｏ−０
　２　５Ｋ　Ｉ　　　　　　　　　　　　　　　　　　
Ｏ．８　３Ｈ３Ｂ０，　　　　　　　　　　　　　　　
　６．２Ｎａ２Ｍｏ０４”　２Ｈ２０　　　　　　　　
　　０−２５シヨ糖　　　　　　　　　　３０，０００
ミオイノシトール　　　　　　　　ｌＯＯニコチン酸　
　　　　　　　　　　　　０．５塩酸ビリドキシン　　
　　　　　　　　０．５塩酸チアミン　　　　　　　　
　　　　０．１−１グリシン　　　　　　　　　　　　
　　　２（発根工程） 前工程で得た苗条塊から、長さ約２０ｍｍ以上の伸長苗
条を切り取り、ｌ／１０濃度のＭＳ培地にＩＢＡ　　０
．１＋ｇ／ｆｆ．シヨ糖３０ｇ／（２，ゲランガム８ｇ
／Ｑを加えてｐＨ５．８に調整した固型培地に挿し、照
明下（白色螢光灯．２．ＯＯＯルクス，１６時間日長）
２５゜Ｃで２週間培養した。同様にして固型化剤のみを
寒天、アガロースに変えて比較した。各発根率を２週間
後に調査した（表−２）。

ゲウ？ｆｆｌ，注１） ２　２／２　５ アガ・−ス注２） １２／２５ 注ｌ）ゲルライト（ＧｅｌｒｉｔｅＸケルコ　デイビイ
ジョン　オブ　メルク社（　Ｋａｌｃｏ　　Ｄｉｖｉｓ
ｉｏｎｏｆ　　Ｍｅｒｃｋ　　＆　　Ｃｏ．，　Ｉｎｃ
．）製）注２）アガロース７型（Ａｇａｒｏｓｅ　　Ｔ
ｙｐｅ■）（シグマ（Ｓｉｇｍａ）社製） 注３）バタトアガー（Ｂａｃｔｏ　−　ａｇａｒ）（デ
ィ７コ（Ｄｉｒｃｏ）社製） 以上の結果から、本発明の方法が発根率においてアガロ
ース又は寒天を用いる通常の方法に比して２〜３倍優れ
ていることがわかる。

発根した葉条は根の長さが３０ｍｍ程度に伸長したとこ
ろで容器外に取り出し、付着したゲランガムを除去した
。ポリエチレン鉢につめたバーミキュライトに移植し、
十分潅水し、乾燥防止のための覆いをした。穂が新葉を
展開し始めたところで、徐々に覆いを外して外気に馴ら
した。随時給水し液肥を与えて育てた。

このようにして、目的とするリンゴ苗を生産した。

実施例２ （苗条確立工程） リンゴ（品種：スターキング）の頂芽および腋芽を７０
％エタノールに１分間、ついでｌ％次亜塩素酸ナトリウ
ム溶液に３分間浸漬して滅菌後、滅菌水で２回洗浄した
。続いて実体顕微鏡下で葉原基２〜３個を含む茎頂を摘
出した。

摘出した茎頂はＭＳ寒天培地にＢＡＰ２ｍｇ／Ｑ．シａ
糖３０ｇ／（２，寒天８ｇ／ｌを加え”（ｐＨ５．８に
調整した培地上に置床し、照明下（白色螢光灯２，００
０ルクス．１６時間日長）２５℃でｌケ月毎に新しい培
地に植えつぎ７ケ月培養した。置床３ケ月後にはロゼッ
ト状の葉条が形戊され、ついで主技が伸長した苗条とな
り、ＢＡＰ　　１０−ＳＭ，ＩＢＡ　　ＩＱ−６Ｍ１お
よびジベレリン酸（ＧＡＰ）１０−”Ｍを含むＭＳ寒天
培地に植えつぎ７ケ月後には苗条塊が形成された。

（発根工程） 前工程で得た苗条塊から、長さ約２０ｍｍ以上の伸長苗
条を切り取り、１／Ｉ　Ｏ濃度のＭＳ固型培地にＩＢＡ
　　Ｏ．ｌｍｇ／Ｌシヨ糖３０ｇ／Ｑ．ゲランガム８ｇ
／Ｑを加えてｐＨ５．８に調整した培地に挿し、照明下
（白色螢光灯２．０　０　０ルクス，１６時間日長）２
５℃で２週間培養した。同様にして固型化剤のみを寒天
、アガロースに変えて比較した。各発根率を２週間後に
調査した（表−３）。

発根率が極めて高く、工業的有利に生産できる。

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. 植物の茎頂培養における発根培地に、培地固型化剤とし
   てゲランガムを用いることを特徴とする植物苗の製造方
   法