CN106613933A - 一种诱导苹果矮化砧木组培苗生根的方法 - Google Patents

Abstract

本发明提供一种诱导苹果矮化砧木组培苗生根的方法，具体步骤如下：选择生长健壮的无根苹果矮化砧木组培苗，切下带顶芽的2～3厘米茎段，放入诱导生根培养基进行诱导生根培养，5-10天后得到有根的苹果矮化砧木组培苗。本发明诱导苹果矮化砧木组培苗生根的方法可以实现苹果矮化砧木的组培苗快速生根，诱导生根培养6～10天时，不定根长度不低于0.2厘米，生根率达到90％以上。结合本发明配合本发明的炼苗和移栽方法，苹果矮化砧木组培苗的大田移栽成活率大于85％，为苹果矮化砧木组培苗诱导生根和炼苗提供简单快捷高效的技术方法。

Description

一种诱导苹果矮化砧木组培苗生根的方法

技术领域

本发明属于植物的组织培养领域，具体涉及一种诱导苹果矮化砧木组培苗生根的方法。

背景技术

目前，矮砧栽培成为国际主流的苹果栽培方式，欧美等大多数国家90％以上苹果栽培采用此方式，也是今后我国苹果生产的发展方向。苹果矮化砧木，常用的有SH6、T337、美国G系等品种，具有抗逆性强、结果早、产量高和品质优等特点，由于其自生根难等问题，在含北京在内的我国主要苹果产区仍以矮化中间砧方式种植。植物组织培养技术具有不受时间和外界环境条件控制、节约土地、快捷高效的优点，已成为工厂化生产中广泛应用的一种育苗手段。现有组培苗生根技术中，苹果矮化砧木品种组培生根经暗培养和光培养两个步骤，耗时长、操作复杂成本高，炼苗时根长较长使得组培苗取出较困难、附着培养基不易洗净，增加细菌真菌病害发病率，组培移栽苗的生长环境不易控制降低了组培苗移栽成活率，限制了其在组培工厂化育苗中的应用。

发明内容

针对苹果矮化砧木生根经暗培养和光培养两个步骤，耗时长、操作复杂成本高等现状，本发明提供一种诱导苹果矮化砧木组培苗生根的方法，具体步骤如下：

选择生长健壮的无根苹果矮化砧木组培苗，切下带顶芽的2～3厘米茎段，放入诱导生根培养基进行诱导生根培养，5-10天后得到有根的苹果矮化砧木组培苗；

所述诱导生根培养基是以大量元素减半的1/2MS固体培养基为基本培养基，含有活性炭的浓度为0.2～6g/L、蔗糖的浓度为15～30g/L、吲哚丁酸的浓度为0.1～1.2mg/L，pH值为5.6～6.2的培养基。

其中，所述诱导生根培养基，吲哚丁酸的浓度优选为0.5～1.0mg/L，进一步优选为0.6～0.9mg/L，更优选为0.7～0.8mg/L，最优选为0.8mg/L。

其中，所述无根苹果矮化砧木组培苗，为按常规苹果组培方法继代培养20-35天后得到的株高大于2cm的组培苗。

其中，所述诱导生根培养，培养条件为：温度18-26℃，湿度55-75％，光照16～20小时/天，光照强度1800-2200Lx。

其中，所述苹果，品种优选为SH6。

本发明还提供与上述诱导苹果矮化砧木组培苗生根的方法配合使用的炼苗和移栽方法，包括如下步骤：

1)将有根的苹果矮化砧木组培苗在温度24～30℃，湿度≥90％，光照≥14小时/天的环境内炼苗1天；

2)洗去炼苗后的苹果矮化砧木组培苗的基质，采用质量百分浓度0.2％的多菌灵进行根部消毒，栽入基质中，每天喷施质量百分浓度5％的硫酸镁溶液1次，每周喷施质量百分浓度0.1％的多菌灵一次，培养25～30天后即可移栽到大田。

其中，所述基质为泥炭：珍珠岩：蛭石体积比为1：1：1的基质。

本发明还提供所述的诱导苹果矮化砧木组培苗生根的方法，在苹果繁育中的应用。

本发明还提供所述炼苗和移栽方法，在苹果繁育中的应用。

本发明的有益效果在于：

本发明可以实现苹果矮化砧木的组培苗快速生根，诱导生根培养6～10天时，不定根长度不低于0.2厘米，生根率达到90％以上。配合本发明的炼苗和移栽方法，大田移栽成活率大于85％，为苹果矮化砧木组培苗诱导生根和炼苗提供简单快捷高效的技术方法。

附图说明

图1是实施例1中苹果矮化砧木SH6诱导生根5d后的照片；

图2是实施例1中苹果矮化砧木SH6诱导生根12d后的照片；

图3是实施例1中苹果矮化砧木SH6组培生根苗穴盘生长10d后的照片。

具体实施方式

以下实施例用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。在不背离本发明精神和实质的情况下，对本发明方法、步骤或条件所作的修改或替换，均属于本发明的范围。

若未特别指明，实施例中所用的技术手段为本领域技术人员所熟知的常规手段。

预备例1无根苹果矮化砧木组培苗的培育

在北京市顺义区杨镇苹果组织培养实验室试验了本发明的方法，所用苹果矮化砧木SH6组培苗以任意适合该品种的组培方式得到即可，本实施例采用如下方法组培：

选择苹果矮化砧木SH6的单株营养枝，捡取带顶芽或侧芽的茎段，外植体消毒用自来水冲洗30分钟，70％酒精消毒10～60s，无菌水冲洗2～4次，0.1％升汞消毒3～10分钟，无菌水冲洗2～4次，然后采用初代培养基和继代培养基先后进行初代和继代培养。

所述初代培养基是以MS固体培养基为基本培养基，含有6-苄氨基嘌呤的浓度为0.1～0.8mg/L、吲哚丁酸的浓度为0.1～0.6mg/L、聚乙烯吡咯烷酮浓度为200～400mg/L、蔗糖的浓度为25～30g/L、琼脂糖的浓度为5～7g/L的培养基。

所述继代培养基是以MS固体培养基为基本培养基，含有6-苄氨基嘌呤的浓度为0.1～0.8mg/L、吲哚丁酸的浓度为0.1～0.6mg/L、蔗糖的浓度为25～30g/L、琼脂糖的浓度为5～7g/L的培养基。

继代培养20～35天后，选择生长健壮，高度大于2cm的无根苹果矮化砧木组培苗待用。

预备例1SH6诱导生根培养基中吲哚丁酸浓度的筛选：

采用大量元素减半的1/2MS培养基，添加2g/L的活性炭，22g/L的蔗糖，设置分别添加0mg/L、0.1mg/L、0.2mg/L……1.2mg/L的吲哚丁酸进行预实验，结果如表1所示：

表1吲哚丁酸添加浓度筛选结果

IBA(mg/L)	生根率(％)
		0	2.18±0.89
0.1	8.36±1.01
		0.2	16.65±0.96
0.3	28.12±1.33
		0.4	37.53±1.64
0.5	57.76±1.62
		0.6	74.94±2.46
0.7	86.47±2.49
		0.8	90.64±3.05
0.9	73.17±1.97
		1	55.58±2.63
1.1	36.94±1.78
		1.2	11.76±1.31

结果表明，在诱导生根培养基上添加0.1～1.2mg/L的吲哚丁酸能提高生根率，尤其是吲哚丁酸的浓度为0.5～1.0mg/L时生根率能达到50％以上，吲哚丁酸的浓度为0.6～0.9mg/L时生根率达到70％以上，吲哚丁酸的浓度为0.7～0.8mg/L时生根率高达85％以上，当吲哚丁酸的浓度为0.8mg/L时生根率最高，90％以上。

实施例1苹果矮化砧木苗的生根

苹果矮化砧木SH6诱导生根培养基配制：采用大量元素减半的1/2MS培养基，添加0.2～6g/L的活性炭，15～30g/L的蔗糖，吲哚丁酸0.1～1.2mg/L，调整pH值为5.6～6.2，灭菌后待用。

切取无根苹果矮化砧木组培苗2～3厘米带顶芽茎段，放入诱导生根培养基进行生根培养，温度18-26℃，湿度55-75％，光照16～20小时/天，光照强度1800-2200Lx；

苹果矮化砧木SH6组培苗炼苗和移栽：继代培养试验材料诱导生根5～10天后(图1为诱导生根5天后的照片，图2为诱导生根12天后的照片)，砧木组培苗根长达到0.2～0.5厘米后，移至智能温室大棚闭瓶炼苗1天，智能温室大棚配备有高压弥雾设备、湿帘控温设备和全光照补光照明系统，维持棚内温度24～30℃，湿度≥90％，光照≥14小时/天，从瓶中取出生根组培苗，洗去培养基，采用0.2％多菌灵进行根部消毒处理，移栽入穴盘中(见图3)，穴盘填充基质为泥炭：珍珠岩：蛭石体积比1：1：1的混合物，移栽组培苗每天喷施5％的硫酸镁溶液1次，每周喷施0.1％多菌灵一次，培养25～30天至组培苗根系发育完全后即可移栽到大田。

以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明技术原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。

Claims (10)

1.一种诱导苹果矮化砧木组培苗生根的方法，其特征在于，具体步骤如下：

选择生长健壮的无根苹果矮化砧木组培苗，切下带顶芽的2～3厘米茎段，放入诱导生根培养基进行诱导生根培养，5-10天后得到有根的苹果矮化砧木组培苗；

所述诱导生根培养基是以大量元素减半的1/2MS固体培养基为基本培养基，含有活性炭的浓度为0.2～6g/L、蔗糖的浓度为15～30g/L、吲哚丁酸的浓度为0.1～1.2mg/L，pH值为5.6～6.2的培养基。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述诱导生根培养基，吲哚丁酸的浓度为0.5～1.0mg/L。

3.如权利要求2所述的方法，其特征在于，所述诱导生根培养基，吲哚丁酸的浓度为0.6～0.9mg/L。

4.如权利要求3所述的方法，其特征在于，所述诱导生根培养基，吲哚丁酸的浓度为0.7～0.8mg/L。

5.如权利要求4所述的方法，其特征在于，所述诱导生根培养基，吲哚丁酸的浓度为0.8mg/L。

6.如权利要求1-5任一项所述的方法，其特征在于，所述苹果，品种为SH6。

7.与权利要求1-6任一项所述的诱导苹果矮化砧木组培苗生根的方法配合使用的炼苗和移栽方法，其特征在于，包括如下步骤：

1)将有根的苹果矮化砧木组培苗在温度24～30℃，湿度≥90％，光照≥14小时/天的环境内炼苗1天；

2)洗去炼苗后的苹果矮化砧木组培苗的基质，采用质量百分浓度0.2％的多菌灵进行根部消毒，栽入基质中，每天喷施质量百分浓度5％的硫酸镁溶液1次，每周喷施质量百分浓度0.1％的多菌灵一次，培养25～30天至组培苗根系发育完全后即可移栽到大田。

8.如权利要求7所述的炼苗和移栽方法，其特征在于，所述基质为泥炭：珍珠岩：蛭石体积比为1：1：1的基质。

9.权利要求1-6任一项所述的诱导苹果矮化砧木组培苗生根的方法，在苹果繁育中的应用。

10.权利要求7-8任一项所述的炼苗和移栽方法，在苹果繁育中的应用。