CN105145358B - 一种黄藤组织培养快繁方法 - Google Patents
一种黄藤组织培养快繁方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN105145358B CN105145358B CN201510584902.9A CN201510584902A CN105145358B CN 105145358 B CN105145358 B CN 105145358B CN 201510584902 A CN201510584902 A CN 201510584902A CN 105145358 B CN105145358 B CN 105145358B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- culture
- explant
- seedling
- strong
- herba fibraureae
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Fee Related
Links
Landscapes
- Breeding Of Plants And Reproduction By Means Of Culturing (AREA)
Abstract
一种黄藤组织培养快繁方法，包括如下步骤：(1)取黄藤健壮植株新萌发的嫩芽作为外植体进行消毒；(2)将消毒后的外植体置于MS基本培养基中诱导得到无菌试管苗；(3)将无菌试管苗置于MS繁殖培养基中进行试管苗快速繁殖培养获得丛生芽；(4)将丛生芽置于MS壮苗培养基中进行壮苗获得健壮植株；(5)将健壮植株置于1/2MS生根培养基中进行生根培养获得完整带根苗。(6)将完整带根苗在室温下炼苗4‑7天，待表面角质形成后将苗取出，洗净根部培养基立即移栽到基质中，生长一个月后移栽到大田。采用本发明得到的黄藤丛生芽增殖系数达到30‑40倍，生根率在95％以上，移栽成活率在95％以上，有效解决黄藤的规模化育苗问题。
Description
技术领域
本发明涉及一种植物繁殖方法，特别是一种黄藤组织培养快繁方法。
背景技术
黄藤(Fibaurea recisa Pierre)别名土黄莲、黄莲藤，为防已科多年生藤本植物。以藤茎或根为主要药用部位，具有清热解毒、利尿通便、治疗饮食中毒、咽喉肿痛、霉菌性阴道炎等重要作用。随着相关制剂，如：黄藤分散片、复方黄藤洗剂、黄藤素片、黄藤素栓等的深入开发利用，对黄藤资源的需求也日益增加，但因少有黄藤人工栽培，药用黄藤主要靠采挖野生资源，以致其野生资源遭到毁灭性的破坏。
黄藤雌雄异株，为天然异花授粉植物，结实率易受环境影响，兼之种子成熟期长，不易长期保存，否则容易丧失活力，因此，自然状态下黄藤种子的数量和质量缺乏保证；且种子苗遗传背景杂合，不能完全代表母株的遗传特性，后代植株差异不齐。无性繁殖具有保持亲本遗传性状的优点，但黄藤无性繁殖只有扦插相关的研究报道，且尚无明确的成苗情况和繁殖效率比较研究(闫志刚等.吲哚丁酸和萘乙酸对黄藤插穗生根的影响.时珍国医国药,2008(19):2)。
发明内容
本发明的目的是提供一种黄藤组织培养快繁方法，它能够快速繁殖出大量适合移栽的优良黄藤种苗、满足生产需要。
本发明通过以下技术方案达到上述目的：一种黄藤组织培养快繁方法，包括以下步骤：
(1)外植体的选择与消毒：取黄藤健壮植株新萌发的嫩芽作为外植体，去除叶片，依次用2％洗洁精水溶液浸泡5min、线状自来水冲洗15-30min、添加了2-3滴吐温-20的100毫升0.1％升汞消毒8-10min、无菌水冲洗3-5次，然后用消毒滤纸除去表面水分，得到外植体，其中无菌水为经高温高温高压灭菌的蒸馏水；
(2)外植体初代诱导获得无菌试管苗：将步骤(1)得到的外植体置于超净工作台内，切成带有一个腋芽的茎段，接种到MS诱导培养基中，在培养温度为23-27℃，光照强度1500lux，光照时间为8-10小时/天的条件下培养30天得到无菌试管苗，其中MS培养基中添加了0.5-1.5mg/L的6-苄基腺嘌呤6-BA、0.1-0.5mg/L的萘乙酸NAA、2mg/L聚乙烯吡咯烷酮PVP、30g/L蔗糖和5g/L的琼脂，培养基的pH值为5.8，
(3)试管苗丛生芽快速繁殖培养：将步骤(2)中得到的无菌试管苗置于MS繁殖培养基中，在培养温度为23-27℃，光照强度1500lux，光照时间为8-10小时/天的条件下培养30天得到试管苗丛生芽，其中MS繁殖培养基中添加了0.5-1.5mg/L的6-苄基腺嘌呤6-BA、0.1-0.5mg/L的吲哚乙酸IAA、0.1-0.5mg/L的激动素KT、2mg/L聚乙烯吡咯烷酮PVP、30g/L蔗糖和5g/L的琼脂，培养基的pH值为5.8，
(4)丛生芽壮苗培养：将步骤(3)中得到的试管苗丛生芽置于MS壮苗培养基中，在培养温度为23-27℃，光照强度1500lux，光照时间为8-10小时/天的条件下培养30天得到健壮植株，其中MS壮苗培养基中添加了0.1-0.5mg/L吲哚乙酸IAA、0.5-0.1.0mg/L的6-苄基腺嘌呤6-BA、2mg/L聚乙烯吡咯烷酮PVP、30g/L蔗糖和5g/L的琼脂，培养基的pH值为5.8，
(5)生根培养：将步骤(4)中得到的健壮植株置于1/2MS生根培养基中，在培养温度为23-27℃，光照强度1500lux，光照时间为8-10小时/天的条件下培养30天得到完整带根苗，其中1/2MS生根培养基中添加0.5-1.0mg/L的萘乙酸NAA、30g/L的香蕉泥、10g/L蔗糖和5g/L的琼脂，培养基的pH值为5.8，
(6)炼苗移栽：将所述完整带根苗在室温下炼苗4-7天，待表面角质形成后将苗取出，洗净根部培养基立即移栽到按质量比为蛭石：泥炭土＝1：1的基质中，生长一个月后移栽到大田。
本发明的突出优点在于：
(1)采用本发明所述的培养方法得到的黄藤丛生芽增殖系数达到30-40倍，丛生芽健壮，接种到生根培养基后容易生根，生根率可达95％以上。
(2)采用组织培养的方法能够在短时间内培育出大量适合栽培种植的黄藤幼苗，保障黄藤种苗的增殖系数和种苗质量，实现规模化生产，满足生产上的需要。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明的技术方案进一步说明。
实施例1
本发明所述的黄藤的组织培养快繁方法的一个实例，包括以下步骤：
(1)外植体的选择与消毒：取黄藤健康植株新萌发的嫩芽置于封口袋中在4℃的冰箱中冷藏一周后作为外植体，去外除叶后，依次用2％洗洁精水溶液浸泡5min、线状自来水冲洗15-30min、添加了2-3滴吐温-20的100毫升0.1％升汞消毒8-10min、无菌水冲洗3-5次，最后用消毒滤纸除去表面水分，得到外植体，其中无菌水为经高温高压灭菌的蒸馏水；
(2)外植体初代诱导获得无菌试管苗：将步骤(1)得到的外植体置于超净工作台内，用解剖刀切成1.0-1.5cm长的带有一个腋芽的茎段接种到MS诱导培养基中，在培养温度为23-27℃，光照强度1500lux，光照时间为8-10小时/天的条件下培养30天得到无菌试管苗，其中MS诱导培养基中添加0.5mg/L的6-苄基腺嘌呤6-BA、0.2mg/L的萘乙酸NAA、2mg/L聚乙烯吡咯烷酮PVP、30g/L蔗糖和5g/L的琼脂，培养基的pH值为5.8；
(3)试管苗丛生芽快速繁殖培养：将步骤(2)中得到的无菌试管苗置于MS繁殖培养基中，在培养温度23-27℃，光照强度1500lux，光照时间为8-10小时/天的条件下培养30天得到试管苗丛生芽，其中MS繁殖培养基中添加0.5mg/L的6-苄基腺嘌呤6-BA、0.2mg/L的吲哚丁酸IBA、0.2mg/L的激动素KT、2mg/L聚乙烯吡咯烷酮PVP、30g/L蔗糖和5g/L的琼脂，培养基的pH值为5.8，丛生芽增殖系数为13.5。
(4)丛生芽壮苗培养：将步骤(3)中得到的丛生芽置于MS壮苗培养基中，在培养温度23-27℃，光照强度1500lux，光照时间为8-10小时/天的条件下培养30天得到健壮植株，其中MS壮苗培养基中添加0.2mg/L 2.4二氯苯氧乙酸2.4-D、0.5-0.1.0mg/L的6-苄基腺嘌呤6-BA、2mg/L聚乙烯吡咯烷酮PVP、30g/L蔗糖和5g/L的琼脂，培养基的pH值为5.8。
(5)生根培养：将步骤(4)中得到的健壮植株置于1/2MS生根培养基中在培养温度23-27℃，光照强度1500lux，光照时间为8-10小时/天的条件下培养30天得到完整带根苗，其中1/2MS生根培养基中添加0.1mg/L萘乙酸NAA、10g/L蔗糖和5g/L的琼脂，培养基的pH值为5.8。生根率95％。
(6)炼苗与移栽：打开组培瓶盖，加入30-50ml的自来水，炼苗一周；待培养基表面形成角质后，将幼苗取出，洗净根部培养基，移栽到基质中；在基质中生长一个月左右后，移栽到大田。移栽成活率96％。
实施例2
本发明所述的黄藤的组织培养快速繁殖方法的另一个实例，包括以下步骤：
(1)外植体的选择与消毒：取黄藤健康植株新萌发的嫩芽置于封口袋中在4℃的冰箱中冷藏一周后作为外植体，去外去叶后，依次用2％洗洁精水溶液浸泡5min、线状自来水冲洗15-30min、添加了2-3滴吐温-20的100毫升0.1％升汞消毒8-10min、无菌水冲洗3-5次，最后用消毒滤纸除去表面水分，得到外植体，其中无菌水为经高温高压灭菌的蒸馏水；
(2)外植体初代诱导获得无菌试管苗：将步骤(1)得到的外植体置于超净工作台内，用解剖刀切成1.0-1.5cm长的带有一个腋芽的茎段接种到MS诱导培养基中，在培养温度为23-27℃，光照强度1500lux，光照时间为8-10小时/天的条件下培养30天得到无菌试管苗，其中MS诱导培养基中添加0.5mg/L的6-苄基腺嘌呤6-BA、0.2mg/L的萘乙酸NNA、2mg/L聚乙烯吡咯烷酮PVP、0g/L蔗糖和5g/L的琼脂，培养基的pH值为5.8；
(3)试管苗丛生芽快速繁殖培养：将步骤(2)中得到的无菌试管苗置于MS繁殖培养基中，在培养温度23-27℃，光照强度1500lux，光照时间为8-10小时/天的条件下培养30天得到试管苗丛生芽，其中MS繁殖培养基中添加1.0mg/L的6-苄基腺嘌呤6-BA、0.2mg/L的吲哚丁酸IBA、0.2mg/L的激动素KT、2mg/L聚乙烯吡咯烷酮PVP、30g/L蔗糖和3.4g/L的琼脂，培养基的pH值为5.8，丛生芽增殖系数为23.7。
(4)丛生芽壮苗培养：将步骤(3)中得到的丛生芽置于MS壮苗培养基中，在培养温度23-27℃，光照强度1500lux，光照时间为8-10小时/天的条件下培养30天得到健壮植株，其中MS壮苗培养基中添加0.5mg/L 2.4二氯苯氧乙酸2.4-D、0.5mg/L的6-苄基腺嘌呤6-BA、2mg/L聚乙烯吡咯烷酮PVP、30g/L蔗糖和5g/L的琼脂，培养基的pH值为5.8。
(5)生根培养：将步骤(4)中得到的健壮植株置于1/2MS生根培养基中在培养温度23-27℃，光照强度1500lux，光照时间为8-10小时/天的条件下培养30天得到完整带根苗，其中1/2MS生根培养基中添加0.1mg/L萘乙酸NAA、10g/L蔗糖和5g/L的琼脂，培养基的pH值为5.8。生根率98％。
(6)炼苗与移栽：打开组培瓶盖，加入30-50ml的自来水，炼苗一周；待培养基表面形成角质后，将幼苗取出，洗净根部培养基，移栽到基质中；在基质中生长一个月左右后，移栽到大田。移栽成活率100％。
实施例3
本发明所述的黄藤的组织培养快速繁殖方法的再一个实例，包括以下步骤：
(1)外植体的选择与消毒：取黄藤健康植株新萌发置于封口袋中在4℃的冰箱中冷藏一周后的嫩芽作为外植体，去除叶后，依次用2％洗洁精水溶液浸泡5min、线状自来水冲洗15-30min、添加了2-3滴吐温-20的100毫升0.1％升汞消毒8-10min、无菌水冲洗3-5次，最后用消毒滤纸除去表面水分，得到外植体，其中无菌水为经高温高压灭菌的蒸馏水；
(2)外植体初代诱导获得无菌试管苗将步骤：(1)得到的外植体置于超净工作台内，用解剖刀切成1.0-1.5cm长的带有一个腋芽的茎段接种到MS诱导培养基中，在培养温度为23-27℃，光照强度1500lux，光照时间为8-10小时/天的条件下培养30天得到无菌试管苗，其中MS诱导培养基中添加0.5mg/L的6-苄基腺嘌呤6-BA、0.2mg/L的萘乙酸NAA、2mg/L聚乙烯吡咯烷酮PVP、30g/L蔗糖和5g/L的琼脂，培养基的pH值为5.8；
(3)试管苗丛生芽快速繁殖培养：将步骤(2)中得到的无菌试管苗置于MS繁殖培养基中，在培养温度23-27℃，光照强度1500lux，光照时间为8-10小时/天的条件下培养30天得到试管苗丛生芽，其中MS繁殖培养基中添加1.5mg/L的6-苄基腺嘌呤6-BA、0.2mg/L的吲哚丁酸IBA、0.2mg/L的激动素KT、2mg/L聚乙烯吡咯烷酮PVP、30g/L蔗糖和3.4g/L的琼脂，培养基的pH值为5.8，丛生芽增殖系数为28.5。
(4)丛生芽壮苗培养：将步骤(3)中得到的丛生芽置于MS壮苗培养基中，在培养温度23-27℃，光照强度1500lux，光照时间为8-10小时/天的条件下培养30天得到健壮植株，其中MS壮苗培养基中添加0.5mg/L 2.4二氯苯氧乙酸2.4-D、1.0mg/L的6-苄基腺嘌呤6-BA、2mg/L聚乙烯吡咯烷酮PVP、30g/L蔗糖和5g/L的琼脂，培养基的pH值为5.8。
(5)生根培养：将步骤(4)中得到的健壮植株置于1/2MS生根培养基中在培养温度23-27℃，光照强度1500lux，光照时间为8-10小时/天的条件下培养30天得到完整带根苗，其中1/2MS生根培养基中添加0.5mg/L萘乙酸NAA、10g/L蔗糖和5g/L的琼脂，培养基的pH值为5.8。生根率100％。
(6)炼苗与移栽：打开组培瓶盖，加入30-50ml的自来水，炼苗一周；待培养基表面形成角质后，将幼苗取出，洗净根部培养基，移栽到基质中；在基质中生长一个月左右后，移栽到大田。移栽成活率98％。
实施例4
本发明所述的黄藤的组织培养快速繁殖方法的又一个实例，包括以下步骤：
(1)外植体的选择与消毒：取黄藤健康植株新萌发的嫩芽置于封口袋中在4℃的冰箱中冷藏一周后作为外植体，去除叶后，依次用2％洗洁精水溶液浸泡5min、线状自来水冲洗15-30min、添加了2-3滴吐温-20的100毫升0.1％升汞消毒8-10min、无菌水冲洗3-5次，最后用消毒滤纸除去表面水分，得到外植体，其中无菌水为经高温高压灭菌的蒸馏水；
(2)外植体初代诱导获得无菌试管苗：(1)得到的外植体置于超净工作台内，用解剖刀切成1.0-1.5cm长的带有一个腋芽的茎段接种到MS诱导培养基中，在培养温度为23-27℃，光照强度1500lux，光照时间为8-10小时/天的条件下培养60天得到无菌试管苗，其中MS诱导培养基中添加0.5mg/L的6-苄基腺嘌呤6-BA、0.2mg/L的萘乙酸NAA、2mg/L聚乙烯吡咯烷酮PVP、30g/L蔗糖和5g/L的琼脂，培养基的pH值为5.8；
(3)试管苗丛生芽快速繁殖培养：将步骤(2)中得到的无菌试管苗置于MS繁殖培养基中，在培养温度23-27℃，光照强度1500lux，光照时间为8-10小时/天的条件下培养30天得到试管苗丛生芽，其中MS繁殖培养基中添加1.5mg/L的6-苄基腺嘌呤6-BA、0.5mg/L的吲哚丁酸IBA、0.3mg/L的激动素KT、2mg/L聚乙烯吡咯烷酮PVP、30g/L蔗糖和5g/L的琼脂，培养基的pH值为5.8,丛芽增殖系数.40.2。
(4)丛生芽壮苗培养：将步骤(3)中得到的丛生芽置于MS壮苗培养基中，在培养温度23-27℃，光照强度1500lux，光照时间为8-10小时/天的条件下培养30天得到健壮植株，其中MS壮苗培养基中添加0.5mg/L 2.4二氯苯氧乙酸2.4-D、1.0mg/L的6-苄基腺嘌呤6-BA、2mg/L聚乙烯吡咯烷酮PVP、30g/L蔗糖和5g/L的琼脂，培养基的pH值为5.8。
(5)生根培养：将步骤(4)中得到的健壮植株置于1/2MS生根培养基中在培养温度23-27℃，光照强度1500lux，光照时间为8-10小时/天的条件下培养30天得到完整带根苗，其中1/2MS生根培养基中添加0.5mg/L萘乙酸NAA、50g/L香蕉泥、10g/L蔗糖和5g/L的琼脂，培养基的pH值为5.8。生根率96％。
(6)炼苗与移栽：打开组培瓶盖，加入30-50ml的自来水，炼苗一周；待培养基表面形成角质后，将幼苗取出，洗净根部培养基，移栽到基质中；在基质中生长一个月左右后，移栽到大田。移栽成活率100％。
Claims (1)
1.一种黄藤Fibaurea recisa Pierre组织培养快繁方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：
（1）外植体的选择与消毒：取黄藤健壮植株新萌发的嫩芽作为外植体，去除叶片，依次用2%洗洁精水溶液浸泡5min、线状自来水冲洗15-30min、添加了2-3滴吐温-20的100毫升0.1%升汞消毒8-10min、无菌水冲洗3-5次，然后用消毒滤纸除去表面水分，得到外植体，其中，无菌水为经高温高压灭菌的蒸馏水；
（2）外植体初代诱导获得无菌试管苗：将步骤（1）得到的外植体置于超净工作台内，切成带有一个腋芽的茎段，接种到MS诱导培养基中，在培养温度为23-27℃，光照强度1500lux，光照时间为8-10小时/天的条件下培养30天得到无菌试管苗，其中，MS诱导培养基中添加了0.5-1.5mg/L的6-苄基腺嘌呤6-BA、0.1-0.5mg/L的萘乙酸NAA、2mg/L聚乙烯吡咯烷酮PVP、30g/L蔗糖和5g/L的琼脂，培养基的pH值为5.8；
（3）试管苗丛生芽快速繁殖培养：将步骤（2）中得到的无菌试管苗置于MS丛生芽培养基中，在培养温度为23-27℃，光照强度1500lux，光照时间为8-10小时/天的条件下培养30天，得到试管苗丛生芽，其中，MS丛生芽培养基中添加了0.5-1.5mg/L的6-苄基腺嘌呤6-BA、0.1-0.5mg/L的吲哚乙酸IAA、0.1-0.5mg/L的激动素KT、2mg/L聚乙烯吡咯烷酮PVP、30g/L蔗糖和5g/L的琼脂，培养基的pH值为5.8；
(4)丛生芽壮苗培养：将步骤（3）中得到的试管苗丛生芽置于MS壮苗培养基中，在培养温度为23-27℃，光照强度1500lux，光照时间为8-10小时/天的条件下培养30天得到健壮植株，其中MS壮苗培养基中添加了0.1-0.5mg/L吲哚乙酸IAA、0.5-0.1.0mg/L的6-苄基腺嘌呤6-BA、2mg/L聚乙烯吡咯烷酮PVP、30g/L蔗糖和5g/L的琼脂，培养基的pH值为5.8；
（5）生根培养：将步骤（4）中得到的健壮植株置于1/2MS生根培养基中，在培养温度为23-27℃，光照强度1500lux，光照时间为8-10小时/天的条件下培养30天得到完整带根苗，其中，1/2MS生根培养基中添加了0.5-1.0mg/L的萘乙酸NAA、30g/L的香蕉泥、10g/L蔗糖和5g/L的琼脂，培养基的pH值为5.8；
（6）炼苗移栽：将所述完整带根苗在室温下炼苗4-7天，待表面角质形成后将苗取出，洗净根部培养基立即移栽到按质量比为蛭石：泥炭土=1：1的基质中，生长一个月后移栽到大田。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201510584902.9A CN105145358B (zh) | 2015-09-15 | 2015-09-15 | 一种黄藤组织培养快繁方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201510584902.9A CN105145358B (zh) | 2015-09-15 | 2015-09-15 | 一种黄藤组织培养快繁方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN105145358A CN105145358A (zh) | 2015-12-16 |
| CN105145358B true CN105145358B (zh) | 2017-08-04 |
Family
ID=54786760
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201510584902.9A Expired - Fee Related CN105145358B (zh) | 2015-09-15 | 2015-09-15 | 一种黄藤组织培养快繁方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN105145358B (zh) |
Families Citing this family (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN107593451A (zh) * | 2017-10-31 | 2018-01-19 | 广西壮族自治区药用植物园 | 红鱼眼组织培养快繁方法 |
| CN111149705A (zh) * | 2020-03-13 | 2020-05-15 | 云南珍逸德农业科技有限公司 | 一种大黄藤茎段组培快繁方法 |
| CN111837960A (zh) * | 2020-08-05 | 2020-10-30 | 贵州茗香茶业发展有限公司 | 一种适用于喀斯特地貌金丝黄菊的育种方法 |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1526278A (zh) * | 2003-09-23 | 2004-09-08 | �й���ҵ��ѧ�о�Ժ�ȴ���ҵ�о��� | 黄藤无性系组培繁殖方法 |
| CN102805032A (zh) * | 2012-08-20 | 2012-12-05 | 广西壮族自治区药用植物园 | 防止黄藤愈伤组织褐化现象产生的方法 |
-
2015
- 2015-09-15 CN CN201510584902.9A patent/CN105145358B/zh not_active Expired - Fee Related
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1526278A (zh) * | 2003-09-23 | 2004-09-08 | �й���ҵ��ѧ�о�Ժ�ȴ���ҵ�о��� | 黄藤无性系组培繁殖方法 |
| CN102805032A (zh) * | 2012-08-20 | 2012-12-05 | 广西壮族自治区药用植物园 | 防止黄藤愈伤组织褐化现象产生的方法 |
Non-Patent Citations (3)
| Title |
|---|
| "长嘴黄藤离体快繁研究";曾炳山等;《福建林学院学报》;20021231;第22卷(第2期);第169-171页 * |
| "黄藤以芽繁芽组培快繁研究";李湘阳等;《浙江林业科技》;20070531;第27卷(第3期);第15-18页 * |
| "黄藤继代增殖培养和成苗的繁殖体选择";刘英等;《林业科学研究》;19981231;第11卷(第2期);第152-155页 * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN105145358A (zh) | 2015-12-16 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN105145359B (zh) | 一种羊齿天冬组织培养快速繁殖方法 | |
| CN103704130B (zh) | 一种春兰与大花蕙兰杂交种育苗的方法 | |
| CN102144566A (zh) | 兴仁金线莲试管苗的培育方法 | |
| CN102845313A (zh) | 狗枣猕猴桃的离体快速繁殖方法 | |
| CN105340739A (zh) | 一种白花蛇舌草组培苗的快速繁殖方法 | |
| CN105145358B (zh) | 一种黄藤组织培养快繁方法 | |
| KR100868523B1 (ko) | 새우난속 식물의 기내 무균발아를 통한 증식방법 | |
| CN108719058B (zh) | 沙棘组培快繁培养基及组培快繁方法 | |
| CN102239801A (zh) | 一种兰科植物试管内授粉及结实的方法 | |
| Hoque et al. | In vitro plant regeneration of Rauvolfia tetraphylla L.: a threatened medicinal plant | |
| CN103843664B (zh) | Lycium exsertum组织培养及快速繁殖方法 | |
| CN105028206A (zh) | 一种海南石斛组织培养繁育方法 | |
| CN103563747A (zh) | 惠楼山药的脱毒快繁方法 | |
| CN110972956A (zh) | 一种独蒜兰种子组织培育方法 | |
| CN109156338B (zh) | 一种通过胚挽救获得甜菊自交后代的方法 | |
| CN106818481A (zh) | 一种苤蓝组织培养快速繁殖方法 | |
| CN105010123B (zh) | 通过离体挽救培养获得草莓远缘杂种的方法及培养基 | |
| CN106613933A (zh) | 一种诱导苹果矮化砧木组培苗生根的方法 | |
| CN109275519A (zh) | 一种草莓茎尖脱毒的原种苗网室培育的方法 | |
| CN105230493B (zh) | 一种白术种苗的繁殖方法及其应用 | |
| CN108849500A (zh) | 一种莲胚拯救及后代快速生长发育的培养基和方法 | |
| CN104094841A (zh) | 茄科枸杞属短柄枸杞组织培养及快速繁殖方法 | |
| CN113287518A (zh) | 一种在华南地区朱顶红商品化种球生产方法 | |
| CN103125384A (zh) | 南海杜鹃的组织培养与快速繁殖方法 | |
| CN113100069A (zh) | 一种大花美人蕉去病毒优质种苗组织培养快速繁殖方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| CB03 | Change of inventor or designer information |
Inventor after: Wang Xiaofeng Inventor after: Li Gang Inventor after: Wei Kunhua Inventor after: Wei Ying Inventor after: Wang Yinuo Inventor after: Liang Ying Inventor after: Jiu Jianhua Inventor before: Wang Xiaofeng Inventor before: Li Gang Inventor before: Wei Kunhua Inventor before: Wei Ying Inventor before: Wang Yinuo Inventor before: Liang Ying |
|
| COR | Change of bibliographic data | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee | ||
| CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |
Granted publication date: 20170804 Termination date: 20200915 |