CN109275519A - 一种草莓茎尖脱毒的原种苗网室培育的方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种草莓茎尖脱毒的原种苗网室培育的方法，本发明采用热处理结合茎尖组织培养，获得草莓试管苗，在试管内不增殖的情况下，直接进行炼苗移栽，然后对移栽成活的试管苗，通过指示植物法进行病毒检测，然后对获得的脱毒原种苗在网室内进行繁育，经过脱毒检测的草莓苗通过网室，以匍匐茎的方式进行扩繁，避免了在原试管中扩繁造成的后代变异，有利于草莓苗的繁育；本发明的草莓培育方法，比通过单纯用试管苗进行多代增殖繁殖的变异小，生产风险降低，提高了经济效益。

Description

一种草莓茎尖脱毒的原种苗网室培育的方法
技术领域
本发明涉及蔬果种植技术领域，尤其涉及一种草莓茎尖脱毒的原种苗网室培育的方法。
背景技术
草莓是蔷薇科草莓属多年生草本植物，果实酸甜适口，素有“水果皇后”的美称。果实成熟早，温室栽培可以供应整个冬季市场，填补果品淡季，同时草莓也是重要的食品加工原料。草莓是靠匍匐茎进行无性繁殖的作物，经过几代后，容易感染多种病毒。感染病毒病的草莓生长缓慢、叶片皱缩、果实小而畸形、品质变差。我国已鉴定明确的草莓病毒病主要有四种，即草莓斑驳病毒、草莓轻型黄边病毒、草莓镶脉病毒、草莓皱缩病毒等。一旦感染病毒，常规药剂很难进行防治，极大地制约了草莓产业的发展。通常草莓脱毒苗在培养瓶中增殖扩繁，容易导致植物激素的累积，造成后代变异，如不易成花、产量低、畸形果多等，给草莓生产带来极大风险。
发明内容
本发明目的就是为了弥补已有技术的缺陷，提供一种草莓茎尖脱毒的原种苗网室培育的方法。
本发明是通过以下技术方案实现的：
一种草莓茎尖脱毒的原种苗网室培育的方法，包括以下具体步骤：
（1）选择草莓6月份萌发的茎生长充实，小叶尚未展开，4-5厘米长的匍匐茎顶部进行消毒处理，将消毒后的草莓匍匐茎置于解剖镜下，剥取茎尖，切取0.2-0.3mm，将切取的生长点立即置于启动培养基上，经121℃压力灭菌15-20分钟后，置于温度25-27℃，光照1500-2000Lx、日照时数15-16h的培养条件下启动培养；
（2）将试管苗在移栽前将组培苗放入温室中，在自然光下进行炼苗3-4天，然后拧松瓶口2-3天，当组培苗无异常反应时，将其移栽到种苗穴盘中，移栽后灌透水，前期放在小拱棚内保湿，同时适当用遮阴网遮阴，温度保持15-25℃，空气湿度85%-90%，14-15天后，可慢慢撤去小拱棚，增加光照和通风；将移栽成功的试管苗嫁接到到指示植物上，嫁接15天左右开始观察症状表现，没有病毒表现症状即可进行脱毒苗的繁育；
（3）选择土质疏松、肥沃的沙壤土地块，要求排灌方便，呈中性反应、有机质含量在1.5%以上的地块作为苗圃，搭建40目尼龙网制成的网室，将脱毒苗移栽至苗圃中，每畦栽一行，控制株距70-80厘米，缓苗后合理进行追肥，采用自动喷水或者滴灌装置进行保湿，合理去除田间杂草以及老叶；
（4）当秧苗发生匍匐茎后，要及时引蔓、压土，使匍匐茎在地面均匀分布，早发不定根。当产生的匍匐茎苗数量已达到繁殖系数时，对匍匐茎摘心，草莓匍匐茎开始伸长、田间摘老叶结束及降雨前后采用适量药物进行病虫害防治即可。
一种草莓茎尖脱毒的原种苗网室培育的方法，步骤（1）所述的消毒处理，具体操作为：先用洗洁精洗刷草莓匍匐茎表面，用流水冲洗2h，在超净工作台上，将洗后匍匐茎顶端留2-3cm长，先后用75%酒精消毒30秒、0.1%的升汞溶液消毒6-7min，再用无菌水冲洗3-5次。
一种草莓茎尖脱毒的原种苗网室培育的方法，步骤（1）所述的启动培养基，成分为MS+6-BA1.0mg/L+IBA0.2mg/L+GA0.5mg/L，蔗糖30g/L，pH值5.8，琼脂6-6.5g/L。
一种草莓茎尖脱毒的原种苗网室培育的方法，步骤（2）所述的移栽，具体的为移栽基质为草炭土和珍珠岩按照2:1比例的混合物，在栽植过程中，一定要将组培苗根系的琼脂清洗干净，用600倍的多菌灵浸泡草莓根系，若根系过长，可以剪去部分老根后移栽。
一种草莓茎尖脱毒的原种苗网室培育的方法，步骤（2）所述的指示植物，是指EMC、UC5、UC10、UC11，其中EMC和UC5对草莓斑驳病毒、草莓轻型黄边病毒、草莓皱缩病毒表现敏感，UC10和UC11只对草莓皱缩病毒和草莓轻型黄边病毒敏感。
一种草莓茎尖脱毒的原种苗网室培育的方法，步骤（3）所述的合理进行追肥，具体采用根外追肥，尿素和磷酸二氢钾的浓度应控制在0.2%，追肥间隔10-15d。
一种草莓茎尖脱毒的原种苗网室培育的方法，步骤（4）所述的病虫害的防治，具体7-8月的虫害主要是斜纹夜蛾，可选用的农药有农地乐1000倍或杀虫素2000倍或万灵1000倍液等，可交替进行防治，间隔期10d左右；叶斑病可用多菌灵600倍液和百菌清600-800倍液等交替防治。
本发明的优点是：本发明采用热处理结合茎尖组织培养，获得草莓试管苗，在试管内不增殖的情况下，直接进行炼苗移栽，然后对移栽成活的试管苗，通过指示植物法进行病毒检测，然后对获得的脱毒原种苗在网室内进行繁育，经过脱毒检测的草莓苗通过网室，以匍匐茎的方式进行扩繁，避免了在原试管中扩繁造成的后代变异，有利于草莓苗的繁育；本发明的草莓培育方法，比通过单纯用试管苗进行多代增殖繁殖的变异小，生产风险降低，提高了经济效益。
具体实施方式
一种草莓茎尖脱毒的原种苗网室培育的方法，包括以下具体步骤：
（1）选择草莓6月份萌发的茎生长充实，小叶尚未展开，4厘米长的匍匐茎顶部进行消毒处理，将消毒后的草莓匍匐茎置于解剖镜下，剥取茎尖，切取0.2mm，将切取的生长点立即置于启动培养基上，经121℃压力灭菌15分钟后，置于温度25℃，光照1500Lx、日照时数15h的培养条件下启动培养；
（2）将试管苗在移栽前将组培苗放入温室中，在自然光下进行炼苗3天，然后拧松瓶口2天，当组培苗无异常反应时，将其移栽到种苗穴盘中，移栽后灌透水，前期放在小拱棚内保湿，同时适当用遮阴网遮阴，温度保持15℃，空气湿度85%%，14天后，可慢慢撤去小拱棚，增加光照和通风；将移栽成功的试管苗嫁接到到指示植物上，嫁接15天左右开始观察症状表现，没有病毒表现症状即可进行脱毒苗的繁育；
（3）选择土质疏松、肥沃的沙壤土地块，要求排灌方便，呈中性反应、有机质含量在1.5%以上的地块作为苗圃，搭建40目尼龙网制成的网室，将脱毒苗移栽至苗圃中，每畦栽一行，控制株距70厘米，缓苗后合理进行追肥，采用根外追肥，尿素和磷酸二氢钾的浓度应控制在0.2%，追肥间隔10d，采用自动喷水或者滴灌装置进行保湿，合理去除田间杂草以及老叶；
（4）当秧苗发生匍匐茎后，要及时引蔓、压土，使匍匐茎在地面均匀分布，早发不定根。当产生的匍匐茎苗数量已达到繁殖系数时，对匍匐茎摘心，草莓匍匐茎开始伸长、田间摘老叶结束及降雨前后采用适量药物进行病虫害防治，7月的虫害主要是斜纹夜蛾，可选用的农药有农地乐1000倍或杀虫素2000倍或万灵1000倍液等，可交替进行防治，间隔期10d左右；叶斑病可用多菌灵600倍液和百菌清600倍液等交替防治。
一种草莓茎尖脱毒的原种苗网室培育的方法，步骤（1）所述的消毒处理，具体操作为：先用洗洁精洗刷草莓匍匐茎表面，用流水冲洗2h，在超净工作台上，将洗后匍匐茎顶端留2cm长，先后用75%酒精消毒30秒、0.1%的升汞溶液消毒6min，再用无菌水冲洗3次。
一种草莓茎尖脱毒的原种苗网室培育的方法，步骤（1）所述的启动培养基，成分为MS+6BA1.0mg/L+IBA0.2mg/L+GA0.5mg/L，蔗糖30g/L，pH值5.8，琼脂6g/L。
一种草莓茎尖脱毒的原种苗网室培育的方法，步骤（2）所述的移栽，具体的为移栽基质为草炭土和珍珠岩按照2:1比例的混合物，在栽植过程中，一定要将组培苗根系的琼脂清洗干净，用600倍的多菌灵浸泡草莓根系，若根系过长，可以剪去部分老根后移栽。
一种草莓茎尖脱毒的原种苗网室培育的方法，步骤（2）所述的指示植物，是指EMC、UC5、UC10、UC11，其中EMC和UC5对草莓斑驳病毒、草莓轻型黄边病毒、草莓皱缩病毒表现敏感，UC10和UC11只对草莓皱缩病毒和草莓轻型黄边病毒敏感。

Claims (8)

1.一种草莓茎尖脱毒的原种苗网室培育的方法，其特征在于，包括以下具体步骤：
（1）选择草莓6月份萌发的茎生长充实，小叶尚未展开，4-5厘米长的匍匐茎顶部进行消毒处理，将消毒后的草莓匍匐茎置于解剖镜下，剥取茎尖，切取0.2-0.3mm，将切取的生长点立即置于启动培养基上，经121℃压力灭菌15-20分钟后，置于温度25-27℃，光照1500-2000Lx、日照时数15-16h的培养条件下启动培养；
（2）将试管苗在移栽前将组培苗放入温室中，在自然光下进行炼苗3-4天，然后拧松瓶口2-3天，当组培苗无异常反应时，将其移栽到种苗穴盘中，移栽后灌透水，前期放在小拱棚内保湿，同时适当用遮阴网遮阴，温度保持15-25℃，空气湿度85%-90%，14-15天后，可慢慢撤去小拱棚，增加光照和通风；将移栽成功的试管苗嫁接到到指示植物上，嫁接15天左右开始观察症状表现，没有病毒表现症状即可进行脱毒苗的繁育；
（3）选择土质疏松、肥沃的沙壤土地块，要求排灌方便，呈中性反应、有机质含量在1.5%以上的地块作为苗圃，搭建40目尼龙网制成的网室，将脱毒苗移栽至苗圃中，每畦栽一行，控制株距70-80厘米，缓苗后合理进行追肥，采用自动喷水或者滴灌装置进行保湿，合理去除田间杂草以及老叶；
（4）当秧苗发生匍匐茎后，要及时引蔓、压土，使匍匐茎在地面均匀分布，早发不定根。
2.当产生的匍匐茎苗数量已达到繁殖系数时，对匍匐茎摘心，草莓匍匐茎开始伸长、田间摘老叶结束及降雨前后采用适量药物进行病虫害防治即可。
3.根据权利要求1所述的一种草莓茎尖脱毒的原种苗网室培育的方法，其特征在于，步骤（1）所述的消毒处理，具体操作为：先用洗洁精洗刷草莓匍匐茎表面，用流水冲洗2h，在超净工作台上，将洗后匍匐茎顶端留2-3cm长，先后用75%酒精消毒30秒、0.1%的升汞溶液消毒6-7min，再用无菌水冲洗3-5次。
4.根据权利要求1所述的一种草莓茎尖脱毒的原种苗网室培育的方法，其特征在于，步骤（1）所述的启动培养基，成分为MS+6-BA1.0mg/L+IBA0.2mg/L+GA0.5mg/L，蔗糖30g/L，pH值5.8，琼脂6-6.5g/L。
5.根据权利要求1所述的一种草莓茎尖脱毒的原种苗网室培育的方法，其特征在于，步骤（2）所述的移栽，具体的为移栽基质为草炭土和珍珠岩按照2:1比例的混合物，在栽植过程中，一定要将组培苗根系的琼脂清洗干净，用600倍的多菌灵浸泡草莓根系，若根系过长，可以剪去部分老根后移栽。
6.根据权利要求1所述的一种草莓茎尖脱毒的原种苗网室培育的方法，其特征在于，步骤（2）所述的指示植物，是指EMC、UC5、UC10、UC11，其中EMC和UC5对草莓斑驳病毒、草莓轻型黄边病毒、草莓皱缩病毒表现敏感，UC10和UC11只对草莓皱缩病毒和草莓轻型黄边病毒敏感。
7.根据权利要求1所述的一种草莓茎尖脱毒的原种苗网室培育的方法，其特征在于，步骤（3）所述的合理进行追肥，具体采用根外追肥，尿素和磷酸二氢钾的浓度应控制在0.2%，追肥间隔10-15d。
8.根据权利要求1所述的一种草莓茎尖脱毒的原种苗网室培育的方法，其特征在于，步骤（4）所述的病虫害的防治，具体7-8月的虫害主要是斜纹夜蛾，可选用的农药有农地乐1000倍或杀虫素2000倍或万灵1000倍液等，可交替进行防治，间隔期10d左右；叶斑病可用多菌灵600倍液和百菌清600-800倍液等交替防治。
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