CN107455262A - 一种脱毒红心甘薯的工厂化繁育方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种脱毒红心甘薯的工厂化繁育方法，包括脱毒试管苗、原原种、原种及良种。方法其具体步骤为：首先将薯块洗净，用50%多菌灵800倍液消毒处理20min，然后进行26℃恒温催芽，待芽长至0.1～0.5cm时，采取每天在26℃时处理16小时，35～40℃时处理8小时的高低温交替处理模式，持续处理30天左右；再结合茎尖脱毒、组培快繁、生根炼苗、水培快繁、薯藤移栽繁育原原种、次年用原原种在带有防虫网的大棚内排薯育苗，移栽大田、田间管理、病虫害防治、霜降前及时收获原种进行贮藏，良种繁育同原种。本发明能短时间内工厂化扩繁脱毒种苗，降低脱毒种苗的生产成本，最后获得脱毒良种方便农民种植和运输保存。

Description

一种脱毒红心甘薯的工厂化繁育方法

技术领域

本发明属于农产品种植领域，特别涉及一种脱毒红心甘薯的工厂化繁育方法。

背景技术

红心甘薯是一种地方特色甘薯品种，其营养丰富、口感佳、品种优、表皮光滑、体型细长均匀，市场前景好，是农业产业结构调整的主要作物之一。在生产中由于农户长期采用自留薯块自繁扦插的方式，多年的无性繁殖种植使得种薯感染并积累病毒而引起严重的种性退化，产量和品质下降，病虫害严重。

发明内容

本发明的目的是提供一种生产红心甘薯脱毒种薯试管苗、原原种及原种的方法，该方法通过茎尖结合热处理进行脱毒，获得试管苗，经过试管苗水培、剪尖扦插繁育脱毒原原种，经过三级扩繁，最终获得脱毒良种用于生产。

一种脱毒红心甘薯的工厂化繁育方法，其具体步骤为：

第一步：脱毒试管苗培育

①将薯块进行催芽及热处理

将薯块洗净，用50%多菌灵800倍液消毒处理20min，然后选取无病、无腐烂的薯块置于高温灭菌后的珍珠岩中，再放入培养箱中26℃进行催芽，待芽长至0.1～0.5cm时，采取每天在35～40℃下热处理8小时，其余时间恢复至26℃的下交替处理30天；

②外植体表面灭菌剂的选择

将热处理后茎尖取1～3cm在自来水下冲洗干净并晾干，在超净工作台上用75%酒精浸泡20～30s，再10%的次氯酸钠消毒20min，无菌水冲洗3次后置于无菌滤纸上，吸干水分备用；

③组培快繁

诱导培养：在超净工作台上，将吸干水分的外植体置于体视镜下剥取长0.2～0.5mm的茎尖分生组织，接种于启动培养基MS+6BA3.0mg/l，诱导再生植株；

病毒检测：对再生植株进行编号、培养，经病毒检测，淘汰有病毒的试管苗；

增殖生根培养：将确认无病毒的苗剪段接种于MS+IBA0.5mg/l进行增殖和生根同步培养；

培养条件：培养温度为26℃，光照2000lx，12-16h/d；

第二步：原原种繁育

①试管苗炼苗

将长至4～5片叶,高5cm左右的生根试管苗连同瓶子一起移出培养室，在大棚里炼苗3～7天；

②苗床准备

将网棚内的表土除去、整平，用砖砌成宽1.5 m的厢床，腐熟过的农家肥2000kg/亩铺设在厢床底部；网棚内外喷施杀虫杀菌剂；

③基质的配置与消毒

可用蛭石、珍珠岩、椰糠、泥炭土等1:1:1:1配置基质，也可用松针土+硫酸钾20kg/亩+磷肥25kg/亩混合均匀后填入栽培试管苗的厢面内，铺设厚度为15cm～20cm；再用1%的甲醛浇透基质后，密闭大棚8 d ～10 d，打开棚膜10d～12 d待甲醛气味消散后使用；

④试管苗移栽

移栽前1d～2d提前浇透厢面水分，翻松、刮平划行距线；于3月～4月气温回升后，将经练苗后的脱毒试管苗用清水将根部培养基洗净，按10*15的株行距移栽到已消毒的大棚的基质里，在生长期内用浓度0.1%尿素+0.2%KH₂PO₄ 或营养液对苗根部进行浇灌，每15天1次。或把试管苗放入漂浮育苗盘中用营养液培养。加盖小拱棚，保温保湿，温度超过30℃时，及时揭开网室大棚的侧膜和小拱棚两头通风透气；

⑤剪尖扦插

当苗长到15～20cm时，剪尖扦插到已垄好的大棚网室基质上，交足定根水，繁育原原种；

⑥原原种收获贮藏

霜降前后，原原种长至75～150g时即可收获；收获前15d停止浇水，前一周进行割蔓；在通风干燥的库房内预贮15d～20d后再入库贮藏；贮藏前严格淘汰病、烂 、伤、杂及畸形薯；贮藏前用甲醛熏蒸、撒生石灰、喷杀菌剂等方式对地窖进行消毒；贮藏种薯的数量不超过地窖容量的2/3，温度控制在10℃～15℃,相对湿度70%～90%，定期通风；

第三步：原种繁育

①大棚育苗

3月中下旬，将原原种从贮藏窖中取出，剔除烂薯和病薯，用51～54℃温水浸种10分钟，或用70％甲基托布津或用50％多菌灵500液浸种10分钟；整理好厢面后，进行排薯，采用平排，排种时要注意分清头尾，切忌倒排；排种时大小分开，保持上齐下不齐；排种后，撒上细土5～10cm，再用水浇透床土；随即盖上小拱棚封闭升温；

②土壤选择

选择5年未栽过甘薯，土质肥沃、富含有机质、通透性好、土壤疏松、耕层深厚的黄砂壤地块；

③整地施肥

深耕细耙，起垄做成深沟高垄；垄距90～110cm，高30～40cm，垄面宽30～40cm，实行大垄双行种植；施肥以基肥为主，每亩施腐熟圈肥1500 kg、硫酸钾肥10～15kg、15:15:15复合肥50kg，硫酸钾肥、复合肥的基追比例为7∶3；

④薯藤移栽

在4月下旬～5月，当大棚内的薯藤长到40cm以上时，按4～ 5个节间剪藤平插，密度为3500～4500 株/亩；

第四步：田间管理

移栽后须及时实施查苗补苗；扦插后30～40d 结合追肥进行第1 次中耕，松土保墒;分枝封垄期结合中耕培土，适当追施肥料，促茎叶稳继生长； 在8 月上旬对肥力较大的田块用15％多效唑全田喷洒，抑制地上部茎叶生长；

第五步：病虫害防治

黑斑病的防治是在种植时采用50％多菌灵可湿性粉剂800～1000 倍液浸种苗基部3～5min，或1000～1500 倍液蘸苗基部10min； 600 倍敌百虫加功夫的混合液喷施防治地下害虫；用吡虫啉1000 倍液喷雾防治蚜虫；

第六步：原种收获贮藏

霜降前后，温度低于15℃度以下时，选择晴天及时收获，在地里分级装框，轻拿轻放，不弄伤薯块及表皮。

本发明是一种甘薯3级扩繁脱毒的栽培方法，该方法能降低脱毒试管苗的繁育成本，获得脱毒良种后方便农民种植和保存，提高农民的产量及经济效益。

附图说明

图1为本发明繁育方法的流程框图。

具体实施方式

甘薯为异花授粉作物，自交不孕，用种子繁殖的后代性状很不一致，产量低。因此在生产上都很少采用有性繁殖。由于甘薯块根、茎蔓等营养器官的再生能力较强，并能保持良种性状，故在生产上多采用块根、茎蔓、薯尖等无性繁殖。

下面结合附图对本发明进行详述。

发明人根据甘薯的繁殖特性，试制出一种工厂化栽培脱毒红心甘薯的方法，其具体步骤为：

1.1脱毒试管苗培育

1.1.1将薯块进行催芽及热处理

将薯块洗净，用50%多菌灵800倍液消毒处理20min，然后选取无病、无腐烂的薯块置于高温灭菌后的珍珠岩中，再放入培养箱中26℃进行催芽，待芽长至0.1～0.5cm时，采取每天在35～40℃下热处理8小时，其余时间恢复至26℃的交替处理30天左右；

1.1.2外植体表面灭菌剂的选择

将热处理后茎尖取1～3cm在自来水下冲洗干净并晾干，在超净工作台上用75%酒精浸泡20～30s，再10%的次氯酸钠消毒20min，无菌水冲洗3次后置于无菌滤纸上，吸干水分备用；

1.1.3组培快繁

诱导培养：在超净工作台上，将吸干水分的外植体置于体视镜下剥取长0.2～0.5mm的茎尖分生组织，接种于启动培养基MS+6BA3.0mg/l，诱导再生植株，诱导率达95%；

病毒检测：对再生植株进行编号、培养，经有资质的检测单位进行甘薯主要病毒检测，淘汰有病毒的试管苗。

增殖生根培养：将确认无病毒的苗剪段接种于MS+IBA0.5mg/l进行增殖和生根同步培养。试管苗增殖倍数达8倍，生根率达96%，且苗健壮，有效缩短试管苗培养周期，简化培养程序，降低培养成本。

培养条件：培养温度为26℃，光照2000lx，12-16h/d。

1.2原原种繁育

1.2.1试管苗炼苗

将长至4～5片叶,高5cm左右的生根试管苗连同瓶子一起移出培养室，在大棚里炼苗3～7天。

1.2.2苗床准备

将网棚内的表土除去、整平，用砖砌成宽1.5 m的厢床，腐熟过的农家肥2000kg/亩铺设在厢床底部。网棚内外喷施杀虫杀菌剂（辛硫磷、百菌清等）。

1.2.3基质的配置与消毒

可用蛭石、珍珠岩、椰糠、泥炭土等1:1:1:1配置基质，也可用松针土+硫酸钾20kg/亩+磷肥25kg/亩混合均匀后填入栽培试管苗的厢面内，铺设厚度为15cm～20cm。再用1%的甲醛浇透基质后，密闭大棚8 d ～10 d，打开棚膜10d～12 d待甲醛气味消散后使用。

1.2.3试管苗移栽

移栽前1d～2d提前浇透厢面水分，翻松、刮平划行距线。于3月～4月气温回升后，将经练苗后的脱毒试管苗用清水将根部培养基洗净，按10*15的株行距移栽到已消毒的大棚的基质里在生长期内用浓度0.1%尿素+0.2%KH₂PO₄ 或营养液对苗根部进行浇灌，每15天1次。或把试管苗放入漂浮育苗盘中用营养液培养。加盖小拱棚，保温保湿，温度超过30℃时，及时揭开网室大棚的侧膜和小拱棚两头通风透气。

水培营养液配方 :

1.2.3剪尖扦插

当苗长到15～20cm时，剪尖扦插到已垄好的大棚网室基质上（基质制备及消毒同上），交足定根水，繁育原原种。

1.2.4原原种收获贮藏

霜降前后，原原种长至75～150g时即可收获。收获前15d停止浇水，前一周进行割蔓，以减少薯块感病，加速幼嫩薯皮木栓化。在通风干燥的库房内预贮15d～20d后再入库贮藏。贮藏前严格淘汰病、烂 、伤、杂及畸形薯。贮藏前用甲醛熏蒸、撒生石灰、喷杀菌剂等方式对地窖进行消毒。贮藏种薯的数量最多为地窖容量的2/3，温度控制在10℃～15℃,相对湿度70%～90%，定期通风。

1.3原种繁育

1.3.1 大棚育苗

3月中下旬，将原原种从贮藏窖中取出，剔除烂薯和病薯，用51～54℃温水浸种10分钟，或用70％甲基托布津（50％多菌灵）500液浸种10分钟。 整理好厢面后，进行排薯，采用平排，排种时要注意分清头尾，切忌倒排。排种时大小分开，保持上齐下不齐，以便出苗整齐。排种后，撒上细土5～10cm，再用水浇透床土。随即盖上小拱棚封闭升温。

1.3.2土壤选择

选择5年未栽过甘薯，土质肥沃、富含有机质、通透性好、土壤疏松、耕层深厚的黄砂壤地块；

1.3.3整地施肥

深耕细耙，起垄做成深沟高垄；垄距90～110cm，高30～40cm，垄面宽30～40cm，实行大垄双行种植；施肥以基肥为主，每亩施腐熟圈肥1500 kg、硫酸钾肥10～15kg、15:15:15复合肥50kg，硫酸钾肥、复合肥的基追比例为7∶3；

1.3.4薯藤移栽

在4月下旬～5月开始栽植，当大棚内的薯藤长到40cm以上时，按4～ 5个节间剪藤平插，密度为 3500～4500 株/亩；

4、田间管理

移栽后须及时实施查苗补苗；扦插后30～40d 结合追肥进行第1 次中耕，松土保墒;分枝封垄期结合中耕培土，适当追施肥料，促茎叶稳继生长； 在8 月上旬对肥力较大的田块用15％多效唑全田喷洒，抑制地上部茎叶生长；

5、病虫害防治

黑斑病的防治是在种植时采用50％多菌灵可湿性粉剂800～1000 倍液浸种苗基部3～5min，或1000～1500 倍液蘸苗基部10min； 600 倍敌百虫加功夫的混合液喷施防治地下害虫；用吡虫啉1000 倍液喷雾防治蚜虫；

6、原种收获贮藏

霜降前后，温度低于15℃度以下时，选择晴天及时收获，在地里分级装框，轻拿轻放，不弄伤薯块及表皮。贮藏方法同原原种，原种可直接用于大田繁育商品薯，也可繁育良种（良种繁育方法同原种）。

采用本发明所获得的甘薯原种进行繁育，选择近5年来未种植过甘薯且隔离条件较好的地块，方法同常规种植方法基本相同，加强病虫害防控，可提高甘薯的产量，为农民带来很好的经济效益。

Claims (1)

1.一种脱毒红心甘薯的工厂化繁育方法，其特征在于：所述方法的具体步骤为：

第一步：脱毒试管苗培育

①将薯块进行催芽及热处理

将薯块洗净，用50%多菌灵800倍液消毒处理20min，然后选取无病、无腐烂的薯块置于高温灭菌后的珍珠岩中，再放入培养箱中26℃进行催芽，待芽长至0.1～0.5cm时，采取每天在35～40℃下热处理8小时，其余时间恢复至26℃的下交替处理30天；

②外植体表面灭菌剂的选择

将热处理后茎尖取1～3cm在自来水下冲洗干净并晾干，在超净工作台上用75%酒精浸泡20～30s，再10%的次氯酸钠消毒20min，无菌水冲洗3次后置于无菌滤纸上，吸干水分备用；

③组培快繁

诱导培养：在超净工作台上，将吸干水分的外植体置于体视镜下剥取长0.2～0.5mm的茎尖分生组织，接种于启动培养基MS+6BA3.0mg/l，诱导再生植株；

病毒检测：对再生植株进行编号、培养，经病毒检测，淘汰有病毒的试管苗；

增殖生根培养：将确认无病毒的苗剪段接种于MS+IBA0.5mg/l进行增殖和生根同步培养；

培养条件：培养温度为26℃，光照2000lx，12-16h/d；

第二步：原原种繁育

①试管苗炼苗

将长至4～5片叶,高5cm左右的生根试管苗连同瓶子一起移出培养室，在大棚里炼苗3～7天；

②苗床准备

将网棚内的表土除去、整平，用砖砌成宽1.5 m的厢床，腐熟过的农家肥2000kg/亩铺设在厢床底部；网棚内外喷施杀虫杀菌剂；

③基质的配置与消毒

可用蛭石、珍珠岩、椰糠、泥炭土等1:1:1:1配置基质，也可用松针土+硫酸钾20kg/亩+磷肥25kg/亩混合均匀后填入栽培试管苗的厢面内，铺设厚度为15cm～20cm；再用1%的甲醛浇透基质后，密闭大棚8 d ～10 d，打开棚膜10d～12 d待甲醛气味消散后使用；

④试管苗移栽

移栽前1d～2d提前浇透厢面水分，翻松、刮平划行距线；于3月～4月气温回升后，将经练苗后的脱毒试管苗用清水将根部培养基洗净，按10*15的株行距移栽到已消毒的大棚的基质里，在生长期内用浓度0.1%尿素+0.2%KH₂PO₄ 或营养液对苗根部进行浇灌，每15天1次，或把试管苗放入漂浮育苗盘中用营养液培养；加盖小拱棚，保温保湿，温度超过30℃时，及时揭开网室大棚的侧膜和小拱棚两头通风透气；

⑤剪尖扦插

当苗长到15～20cm时，剪尖扦插到已垄好的大棚网室基质上，交足定根水，繁育原原种；

⑥原原种收获贮藏

霜降前后，原原种长至75～150g时即可收获；收获前15d停止浇水，前一周进行割蔓；在通风干燥的库房内预贮15d～20d后再入库贮藏；贮藏前严格淘汰病、烂 、伤、杂及畸形薯；贮藏前用甲醛熏蒸、撒生石灰、喷杀菌剂等方式对地窖进行消毒；贮藏种薯的数量不超过地窖容量的2/3，温度控制在10℃～15℃,相对湿度70%～90%，定期通风；

第三步：原种繁育

①大棚育苗

3月中下旬，将原原种从贮藏窖中取出，剔除烂薯和病薯，用51～54℃温水浸种10分钟，或用70％甲基托布津或用50％多菌灵500液浸种10分钟；整理好厢面后，进行排薯，采用平排，排种时要注意分清头尾，切忌倒排；排种时大小分开，保持上齐下不齐；排种后，撒上细土5～10cm，再用水浇透床土；随即盖上小拱棚封闭升温；

②土壤选择

选择5年未栽过甘薯，土质肥沃、富含有机质、通透性好、土壤疏松、耕层深厚的黄砂壤地块；

③整地施肥

深耕细耙，起垄做成深沟高垄；垄距90～110cm，高30～40cm，垄面宽30～40cm，实行大垄双行种植；施肥以基肥为主，每亩施腐熟圈肥1500 kg、硫酸钾肥10～15kg、15:15:15复合肥50kg，硫酸钾肥、复合肥的基追比例为7∶3；

④薯藤移栽

在4月下旬～5月，当大棚内的薯藤长到40cm以上时，按4～ 5个节间剪藤平插，密度为3500～4500 株/亩；

第四步：田间管理

移栽后须及时实施查苗补苗；扦插后30～40d 结合追肥进行第1 次中耕，松土保墒;分枝封垄期结合中耕培土，适当追施肥料，促茎叶稳继生长； 在8 月上旬对肥力较大的田块用15％多效唑全田喷洒，抑制地上部茎叶生长；

第五步：病虫害防治

黑斑病的防治是在种植时采用50％多菌灵可湿性粉剂800～1000 倍液浸种苗基部3～5min，或1000～1500 倍液蘸苗基部10min； 600 倍敌百虫加功夫的混合液喷施防治地下害虫；用吡虫啉1000 倍液喷雾防治蚜虫；

第六步：原种收获贮藏

霜降前后，温度低于15℃度以下时，选择晴天及时收获，在地里分级装框，轻拿轻放，不弄伤薯块及表皮。