CN114051927A - 一种甘薯脱毒种苗轻简化繁育方法 - Google Patents
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Abstract
本发明属于甘薯快繁技术领域，具体涉及一种甘薯脱毒种苗轻简化繁育方法。包括试管苗繁育、原原种繁育、原种生产、良种生产和农用种苗繁育，本发明的繁育方法加快了脱毒种苗繁殖速度，提高了生产效率，提升了甘薯产量和品质，可操作性强，周期短、经济适用。
Description
技术领域
本发明属于甘薯快繁技术领域，具体涉及一种甘薯脱毒种苗轻简化繁育方法。
背景技术
甘薯长期进行无性繁殖，病毒病为害逐渐加重，种性退化、产量降低、品质变劣。利用植物细胞的全能性，对茎尖分生组织进行组织培养，获得不带病毒的试管苗进行快繁推广，是解决当前甘薯生产中病毒病发生严重，产量急剧下降，品质不断变劣的主要途径。
传统的脱毒甘薯繁育技术只包括脱毒试管苗、原原种、原种和生产种四级繁育体系，存在周期长，从脱毒苗到生产种苗需要3-4年；在脱毒苗的生长繁育过程中，甘薯易感病毒病并随繁殖代数的增加而逐代加重，种薯质量下降；且繁育需要的人力、物力多，经济成本。
发明内容
为解决现有技术的不足，本发明提供了一种甘薯脱毒种苗轻简化繁育方法。
为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：
一种甘薯脱毒种苗轻简化繁育方法，包括试管苗繁育、原原种繁育、原种生产、良种生产和农用种苗繁育；
所述试管苗繁育包括以下步骤：
11)将高产优质品种种薯放置在28℃-32℃环境中进行催芽；
12)待芽萌发至2-3cm时，将粗壮的芽切下，剥去外叶，消毒；
13)将消毒的芽剥离带1-2个叶原基的茎尖分生组织；
14)将剥离的茎尖分生组织接种到添加0.5mg/L-1.5mg/L 6-BA的MS培养基上，于温度26±2℃，光照时间14h，光照强度为1500lx-2000lx条件下培养 45-60d，使茎尖长成试管苗；
15)对试管苗进行病毒检测，剔除长势弱，叶片黄化及带毒病株，获得脱毒苗；
16)获得的脱毒苗根据其具有品种特征特性进行优良株系评选，淘汰变异株系，保留优良株系；
17)将保留优良株系的脱毒试管苗切成一叶一节的茎段，扦插在1/2MS培养基上，培养条件同步骤14)，40-45d进入下一轮扩繁，循环数代获得生长健壮、无污染的脱毒苗，然后移栽。
进一步的，所述高产优质品种种薯为秦薯5号、秦薯6号、胜利百号或延薯1号。
进一步的，步骤12)的消毒具体为：用水冲洗60-120s，用体积分数为75％的乙醇溶液中浸泡10s，用0.1％升汞溶液消毒5-10min，用无菌水对其冲洗5 次，再用无菌滤纸吸干水分备用。
进一步的，原原种繁育包括以下步骤：
21)将生长健壮、无污染，且具有8-10片叶的脱毒苗移栽到炼苗床上，盖上农膜，于温度24±2℃、湿度80％条件下培养6-7d，进行炼苗；
22)将炼苗后的脱毒苗顶端4-6cm长、且带4-6片叶的茎段剪下，基部用 0.1mg/LIBA+0.3mg/L NAA+50mg/L GGR混合溶液浸泡12-20min后栽插，采用畦栽方式，畦宽1.2m，每畦6行，株距15cm，每亩栽插密度控制在2万株；
23)田间管理：缓苗期：1-3d做到遮阳、保温、保湿，防止叶面蒸腾失水过多，相对湿度保持在95％以上，温度控制在26±2℃；4-5d后逐渐降温至 22℃，直至缓苗期结束后去掉覆盖物为止；肥水管理：4-6d进行雾化喷水1 次，生长期相对湿度保持在75％以上；追肥全部采用营养液随水喷施，除缓苗期外，其余生长期间每15-20d喷施一次营养液，全生育期喷施5-8次；病虫害防治：缓苗期采用喷施农用链霉素预防细菌污染；防治蚜虫和白粉虱等害虫采用喷施“抗蚜威”和“永安”交替使用2-3次；
24)按各品种典型特征特性进行逐株鉴定，连根拔除杂株和非典型株，其余作为原原种收获。
进一步的，所述营养液组成为：950mg/L KNO3+800mg/L NH4NO3+180mg/L MgSO4·7H2O。
更进一步的，所述营养液的喷施量为0.6-0.8L/m2。
更进一步的，原种生产包括以下步骤：
31)将原原种于5月中、下旬至6月上旬栽插，密度为每亩3500-4000株；
32)田间管理：定植后5-7d进行查苗补苗，达到全苗，中耕除草；
33)鉴定去杂：采用目测方式检查生长过程中地上部特征及收获时的薯块，对感染甘薯瘟病、病毒病、根腐病、线虫病、黑斑病、软腐病和蚁象的病虫害的植株全部淘汰，其余作为原种收获。
更进一步的，良种生产包括以下步骤：41)择土壤PH值6.5-7.5，前茬是禾本科和豆类作物，甘薯轮作年限在3年以上的地块，深翻至30cm以上，结合整地起垄，每亩施农家肥2000kg，尿素15kg，过磷酸钙50kg，硫酸钾30kg；
42)栽植：水浇地采取单垄单行、台地和塬地采用宽垄双行种植方式；
43)甘薯生长前期茎叶生长过快，茎叶浅绿色，叶大而薄，叶面积系数大于3.5；或生长后期叶大、叶色浓绿，叶面积系数大于5，则为旺长，采取打顶、喷多效唑和提蔓等措施抑制茎叶旺长；
44)整个生长期内定期检查，将发病植株全部淘汰，其余作为良种收获。
更进一步的，农用种苗繁育包括以下步骤：
51)挑选薯块重150-250g的良种，将薯块上的泥洗净，用50％的可湿性甲基托布津600倍液浸5min，再用52-54℃温水在恒温下浸泡10min，作为种薯；
52)栽插春薯前44-46d，苗床温度升至20℃以上时，将种薯按照大小分开，头尾相连，上平下不平的方式排种在苗床上，盖灌缝土再浇透水，浇水后种薯上复2-3cm细沙土，做平苗床；
53)种薯排种前苗床温度控制在30±1℃，排种后3-4d内温度控制在 35-37℃，5-6d降至到32±1℃；中期平稳长苗，齐苗后，床温逐渐降至25-28℃，苗间温度不超过40℃；采苗前5-7d低温练苗，温度22-24℃；苗床薯苗长至20cm 高时，此期以炼为主，采取降温蹲苗，保持床温20-22℃；整个过程通风透光；
54)排种后一次浇足薯重的1.5倍水，第一茬苗剪完后立即浇促苗水，做到高温时育苗床不旱，低温炼苗期水不涝；
追肥：剪苗结合浇水追1次尿素、磷酸二氢钾混合叶面肥，每10m2追施 0.2-0.24kg；
55)当薯苗长20-25cm时，采苗，扦插到大田或苗圃。
与现有技术相比，本发明具有如下有益效果：
传统的脱毒甘薯繁育技术的四级体系不完善，只包括脱毒试管苗、原原种、原种和生产用种，但是生产原原种的过程包括“初代培养-继代培养-生根培养- 炼苗移栽”四个环节，而本发明的体系只包括“初代培养-继代培养-炼苗移栽”三个环节，减少了“生根培养”环节，缩短了脱毒种苗生产时间。
本发明解决了当前脱毒种苗生产慢、品质低、技术不系统、繁育成本高的问题，可操作性强。
本发明集成、创新出适宜当地的甘薯脱毒种苗繁育技术体系，对加快脱毒种苗繁殖速度，提高生产效率,提高甘薯产量和品质，增加薯农经济收入具有重要意义。
附图说明
图1为本发明繁育得到的秦薯5号原原种。
具体实施方式
下面结合附图和具体实施例对本发明进行详细说明，但不应理解为本发明的限制。如未特殊说明，下述实施例中所用的技术手段为本领域技术人员所熟知的常规手段，下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。
实施例1
如图1所示，本实施例的一种甘薯脱毒种苗轻简化繁育方法，包括试管苗繁育、原原种繁育、原种生产、良种生产和农用种苗繁育；所述试管苗繁育由以下步骤组成：
11)培养箱育芽：将高产优质品种种薯放置在28℃-32℃环境中进行催芽；本实施例中品种为秦薯5号；
12)待芽萌发至2-3cm时，将粗壮的芽切下，剥去外叶，消毒；具体采用自来水下冲洗100s，用体积分数为75％的乙醇溶液中浸泡10s，用0.1％升汞溶液消毒8min，用无菌水对其冲洗5次，再用无菌滤纸吸干水分备用；
13)将消毒的芽剥离带1-2个叶原基的茎尖分生组织；
14)将剥离的茎尖分生组织接种到添加1mg/L 6-BA的MS培养基上，于温度26±2℃，光照时间14h，光照强度为1500lx-2000lx条件下培养45-60d，使茎尖长成试管苗；
15)对试管苗进行病毒检测，剔除长势弱，叶片黄化及带毒病株，获得脱毒苗；
16)获得的脱毒苗根据其具有品种特征特性进行优良株系评选，淘汰变异株系，保留优良株系；
17)将保留优良株系的脱毒试管苗切成一叶一节的茎段，扦插在1/2MS培养基上，培养条件同步骤14)，40-45d进入下一轮扩繁，循环3-4代获得生长健壮、无污染的脱毒苗，然后移栽。
原原种繁育包括以下步骤：
21)将生长健壮、无污染，且具有8-10片叶的脱毒苗移栽到炼苗床上，盖上农膜，于温度24±2℃、湿度80％条件下培养6-7d，进行炼苗；炼苗床选在地势较高平坦，地力均匀、肥力较好，排灌方便，无病虫害，3年以上未种过甘薯的轮作地建繁育网棚内；
22)将炼苗后的脱毒苗顶端4-6cm长、且带4-6片叶的茎段剪下，基部用 I0.1mg/LIBA+0.3mg/L NAA+50mg/L GGR混合溶液浸泡12-20min后栽插，采用畦栽方式，畦宽1.2m，每畦6行，株距15cm，每亩栽插密度控制在2万株；
23)田间管理：缓苗期：1-3d做到遮阳、保温、保湿，防止叶面蒸腾失水过多，相对湿度保持在95％以上，用95％的遮阳网覆盖，将温度控制在26±2℃； 4-5d后将95％的遮阳网换成75％的遮阳网，并通过农膜边缘通风，逐渐降温至 22℃，直至缓苗期结束后去掉覆盖物为止；肥水管理：4-6d进行雾化喷洒1 次，生长期相对湿度保持在75％以上；追肥全部采用营养液随水喷施，除缓苗期外，其余生长期间每15-20d喷施一次营养液(950mg/L KNO3+800mg/L NH4NO3+180mg/L MgSO4·7H2O)，全生育期喷施6次，每次的喷施量为 0.6-0.8L/m2；病虫害防治：缓苗期采用喷施农用链霉素预防细菌污染；防治蚜虫和白粉虱等害虫采用喷施“抗蚜威”和“永安”交替使用2次；
24)按各品种典型特征特性进行逐株鉴定，连根拔除杂株和非典型株，其余作为原原种收获；在成熟前和收获后，按原原种分级标准进行检验、检测，当地下10cm温度稳定在15℃左右时，适时收获，剔除病、烂和无种用价值的块根。
经统计发现，脱毒苗栽插成活率达99.8％。
原种生产包括以下步骤：
31)将原原种于5月中、下旬至6月上旬栽插，密度为每亩3500-4000株；选择地势平坦、土层深厚、通气性好，排灌方便，无病虫害，3年以上未种过甘薯的地块，选500m内无甘薯种植的空间或有自然屏障的隔离区。灌水渠道不得通过可能带有甘薯病害的田块；
32)田间管理：定植后5-7d进行查苗补苗，达到全苗；中耕除草；适时提蔓：夏秋季连阴雨较多的情况下，可采用提蔓方式断掉不定根，抑制茎叶徒长，雨后做到排湿、防涝；
33)鉴定去杂：采用目测方式检查生长过程中地上部特征及收获时的薯块，对感染甘薯瘟病、病毒病、根腐病、线虫病、黑斑病、软腐病和蚁象的病虫害的植株全部淘汰，其余作为原种收获，按原种标准进行检验。当地下10cm温度稳定在15℃左右时，适时收获，剔除病、烂和无种用价值的块根。
经统计发现，原原种的发芽率达到98.8，繁殖系数达到730。
良种生产包括以下步骤：
41)择土壤PH值6.5-7.5，前茬是禾本科和豆类作物，甘薯轮作年限在3 年以上的地块，深翻至30cm以上，结合整地起垄，每亩施农家肥2000kg，尿素15kg，过磷酸钙50kg，硫酸钾30kg；
42)栽植：水浇地采取单垄单行、台地和塬地采用宽垄双行种植方式；
43)甘薯生长前期茎叶生长过快，茎叶浅绿色，叶大而薄，叶面积系数大于3.5；或生长后期叶大、叶色浓绿，叶面积系数大于5，则为旺长，采取打顶、喷多效唑和提蔓等措施抑制茎叶旺长；
44)整个生长期内定期检查发病植株，将其全部淘汰，其余作为良种收获。
经统计发现，原种的发芽率达到97.5％，繁殖系数达到860。
农用种苗繁育包括以下步骤：
51)挑选薯块重150-250g的良种，将薯块上的泥洗净，用50％的可湿性甲基托布津600倍液浸5min，再用52-54℃温水在恒温下浸泡10min(可有效防止黑斑病，提早萌芽)，作为种薯；
52)栽插春薯前44-46d，苗床温度升至20℃以上时，将种薯按照大小分开，头尾相连，上平下不平的方式排种在苗床上，盖灌缝土再浇透水，浇水后种薯上复2-3cm细沙土，做平苗床；
53)种薯排种前苗床温度控制在30±1℃，排种后3-4d内温度控制在 35-37℃，5-6d后降至到32±1℃；中期平稳长苗，齐苗后，床温逐渐降至25-28℃，苗间温度不超过40℃；采苗前5-7d低温练苗；苗床薯苗长至20cm高时，此期以炼为主，采取降温蹲苗，保持床温20-25℃；整个过程通风透光；
54)排种后一次浇足薯重的1.5倍水，第一茬苗剪完后立即浇促苗水，做到高温时育苗床不旱，低温炼苗期水不涝；
追肥：剪苗结合浇水追1次尿素、磷酸二氢钾混合叶面肥(二者质量比为 0.8:1)，每10m2追施0.2-0.24kg；
55)当薯苗长20-25cm时，采苗，扦插到大田或苗圃。
经统计发现，良种的发芽率达到97.5％，栽插后的农用种苗的成活率达到95.2％，良种当年的繁殖系数达到860。
综上：本发明是立足延安甘薯产业现状，通过试验研究总结归纳出的发明专利，更符合延安甘薯生产实际。
在用脱毒试管苗生产原原种的过程中，我们通过对脱毒试管苗采取带根幼苗移栽法和茎段扦插法两种栽植方法试验研究结果比较，创新改“带根幼苗移栽法”为“茎尖扦插法”。一是减少了脱毒试管苗获得的生产环节。改“初代培养-继代培养-生根培养-炼苗移栽”四个环节为“初代培养-继代培养-炼苗移栽”三个环节，减少了“生根培养”环节，缩短了生产时间，节约了生产成本。二是扦插法减少了试管苗生根培养和流水清洗的过程，降低了脱毒苗污染环节，缩短了缓苗期，提高了成活率，降低了生产成本。
在甘薯剪苗过程中，我们创新改“传统拔苗法”为“高剪苗法”。降低了病菌入侵机会，增加了母薯扩繁系数，提高了成活率。
尽管已描述了本发明的优选实施例，但本领域内的技术人员一旦得知了基本创造性概念，则可对这些实施例作出另外的变更和修改。所以，所附权利要求意欲解释为包括优选实施例以及落入本发明范围的所有变更和修改。
显然，本领域的技术人员可以对本发明进行各种改动和变型而不脱离本发明的精神和范围。这样，倘若本发明的这些修改和变型属于本发明权利要求及其等同技术的范围之内，则本发明也意图包含这些改动和变型在内。
Claims (9)
1.一种甘薯脱毒种苗轻简化繁育方法，其特征在于，包括试管苗繁育、原原种繁育、原种生产、良种生产和农用种苗繁育；
所述试管苗繁育包括以下步骤：
11)将高产优质品种种薯放置在28℃-32℃环境中进行催芽；
12)待芽萌发至2-3cm时，将粗壮的芽切下，剥去外叶，消毒；
13)将消毒的芽剥离带1-2个叶原基的茎尖分生组织；
14)将剥离的茎尖分生组织接种到添加0.5mg/L-1.5mg/L 6-BA的MS培养基上，于温度26±2℃，光照时间14h，光照强度为1500lx-2000lx条件下培养45-60d，使茎尖长成试管苗；
15)对试管苗进行病毒检测，剔除长势弱，叶片黄化及带毒病株，获得脱毒苗；
16)获得的脱毒苗根据其具有品种特征特性进行优良株系评选，淘汰变异株系，保留优良株系；
17)将保留优良株系的脱毒试管苗切成一叶一节的茎段，扦插在1/2MS培养基上，培养条件同步骤14)，40-45d进入下一轮扩繁，循环数代获得生长健壮、无污染的脱毒苗，然后移栽。
2.根据权利要求1所述的一种甘薯脱毒种苗轻简化繁育方法，其特征在于，所述高产优质品种种薯为秦薯5号、秦薯6号、胜利百号或延薯1号。
3.根据权利要求2所述的一种甘薯脱毒种苗轻简化繁育方法，其特征在于，步骤12)的消毒具体为：依次用水冲洗60-120s，用体积浓度为75％的酒精溶液中浸泡10s，用0.1％升汞溶液消毒5-10min，用无菌水对其冲洗5次，再用无菌滤纸吸干水分备用。
4.根据权利要求3所述的一种甘薯脱毒种苗轻简化繁育方法，其特征在于，原原种繁育包括以下步骤：
21)将生长健壮、无污染，且具有8-10片叶的脱毒苗移栽到炼苗床上，盖上农膜，于温度24±2℃、湿度80％条件下培养6-7d，进行炼苗；
22)将炼苗后的脱毒苗顶端4-6cm长、且带4-6片叶的茎段剪下，基部用0.1mg/L IBA+0.3mg/L NAA+50mg/L GGR混合溶液浸泡12-20min后栽插，采用畦栽方式，畦宽1.2m，每畦6行，株距15cm，每亩栽插密度控制在2万株；
23)田间管理：缓苗期：1-3d做到遮阳、保温、保湿，防止叶面蒸腾失水过多，相对湿度保持在95％以上，温度控制在26±2℃；4-5d后逐渐降温至22℃，直至缓苗期结束后去掉覆盖物为止；肥水管理：4-6d进行雾化喷水1次，生长期相对湿度保持在75％以上；追肥全部采用营养液随水喷施，除缓苗期外，其余生长期间每15-20d喷施一次营养液，全生育期喷施5-8次；病虫害防治：缓苗期采用喷施农用链霉素预防细菌污染；防治蚜虫和白粉虱等害虫采用喷施“抗蚜威”和“永安”交替使用2-3次；
24)按各品种典型特征特性进行逐株鉴定，连根拔除杂株和非典型株，其余作为原原种收获。
5.根据权利要求4所述的一种甘薯脱毒种苗轻简化繁育方法，其特征在于，所述营养液组成为：950mg/L KNO3+800mg/L NH4NO3+180mg/L MgSO4·7H2O。
6.根据权利要求5所述的一种甘薯脱毒种苗轻简化繁育方法，其特征在于，所述营养液的喷施量为0.6-0.8L/m2。
7.根据权利要求6所述的一种甘薯脱毒种苗轻简化繁育方法，其特征在于，原种生产包括以下步骤：
31)将原原种于5月中、下旬至6月上旬栽插，密度为每亩3500-4000株；
32)田间管理：定植后5-7d进行查苗补苗，达到全苗，中耕除草；
33)鉴定去杂：采用目测方式检查生长过程中地上部特征及收获时的薯块，对感染甘薯瘟病、病毒病、根腐病、线虫病、黑斑病、软腐病和蚁象的病虫害的植株全部淘汰，其余作为原种收获。
8.根据权利要求7所述的一种甘薯脱毒种苗轻简化繁育方法，其特征在于，良种生产包括以下步骤：
41)择土壤PH值6.5-7.5，前茬是禾本科和豆类作物，甘薯轮作年限在3年以上的地块，深翻至30cm以上，结合整地起垄，每亩施农家肥2000kg，尿素15kg，过磷酸钙50kg，硫酸钾30kg；
42)栽植：水浇地采取单垄单行、台地和塬地采用宽垄双行种植方式；
43)甘薯生长前期茎叶生长过快，茎叶浅绿色，叶大而薄，叶面积系数大于3.5；或生长后期叶大、叶色浓绿，叶面积系数大于5，则为旺长，采取打顶、喷多效唑和提蔓等措施抑制茎叶旺长；
44)整个生长期内定期检查，将发病植株全部淘汰，其余作为良种收获。
9.根据权利要求8所述的一种甘薯脱毒种苗轻简化繁育方法，其特征在于，农用种苗繁育包括以下步骤：
51)挑选薯块重150-250g的良种，将薯块上的泥洗净，用50％的可湿性甲基托布津600倍液浸5min，再用52-54℃温水在恒温下浸泡10min，作为种薯；
52)栽插春薯前44-46d，苗床温度升至20℃以上时，将种薯按照大小分开，头尾相连，上平下不平的方式排种在苗床上，盖灌缝土再浇透水，浇水后种薯上复2-3cm细沙土，做平苗床；
53)种薯排种前苗床温度控制在30±1℃，排种后3-4d内温度控制在35-37℃，5-6d后降至32±1℃；中期平稳长苗，齐苗后，床温逐渐降至25-28℃，苗间温度不超过40℃；采苗前5-7d低温练苗，温度22-24℃；苗床薯苗长至20cm高时，此期以炼为主，采取降温蹲苗，保持床温20-22℃；整个过程通风透光；
54)排种后一次浇足薯重的1.5倍水，第一茬苗剪完后立即浇促苗水，做到高温时育苗床不旱，低温炼苗期水不涝；
追肥：剪苗结合浇水追1次尿素、磷酸二氢钾混合叶面肥，每10m2追施0.2-0.24kg；
55)当薯苗长20-25cm时，采苗，扦插到大田或苗圃。
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