CN1121375C - 低聚糖的合成 - Google Patents

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Abstract

基于具有通式(I)的2-取代-1，3-二氧代环烷基连接体能用来将O-糖苷和N-糖苷型偶合到聚合物载体上的发现，本发明提供了一种固相合成低聚糖的系统。本发明提供了固相合成低聚糖的试剂、试剂盒和方法。

Description

低聚糖的合成
发明领域
本发明涉及合成低聚糖的方法，尤其是涉及低聚糖的固相或联合合成(combinatorial synthesis)的方法。本发明提供了一种新型的连接体-树脂，连接体-糖，或树脂-连接体-糖络合物，在一个实施方案中该络合物使得糖的残基能被连接到一可溶或不溶聚合物载体上以用作固相合成低聚糖的基础。在第二个实施方案中，本发明的络合物使得低聚糖能被连接到一固体聚合物载体上以用作分析试剂。
发明背景
低聚糖构成了生物活性聚合物的一个主要类别，涉及到如细胞的分化(cellular differentiation)，荷尔蒙细胞识别以及细胞-细胞粘着等各种生化过程(Lasky，1992；Varki，1993)，尤其是病毒-寄主细胞(Gambaryan等，1995)和细菌-寄主细胞的吸附(Boren等，1993)。因此强烈地暗示着如癌症，心血管失调，微生物感染，移植排斥以及自免疫失调等疾病与低聚糖有关。碳水化合物与生物活性肽的共轭也被证明能稳定肽使其不降解，并在更特定环境下有助于肽越过生物障碍(Lee，1989；Fisher，1991；Rodriguez，1989)。因此，以容易而有效的方法合成低聚糖的能力目前正在成为有机化学中一个极其重要的领域。
迄今为止合成低聚糖所用的高劳动强度的溶液相法要求极其专业化的知识和高度的化学技巧。这一状况在肽的合成方面有反映，直到Merrifield等于30年前(Merrifield，1963)提出并发展了肽的固相合成法(Solid Phase Peptide Synthesis，SPPS)。在SPPS中，将所需序列的第一氨基酸固定在不溶树脂上使得能够使用大量过量的试剂以达到第二个氨基酸的偶合。偶合步骤末，残余下来的任何未用完的材料可以简单地通过洗涤树脂珠而除去。这一技术意味着化学家可以使得每一偶合反应达到量化的产率，而且由于所形成的肽中间产物仍然附着在树脂上，不再需要每个酰化步骤后的净化操作。SPPS使得肽和多肽的合成可以象常规研究和合成工具那样操作，且允许肽的大规模的联合合成以筛选潜在的药物。
多年来，化学家们试图将这一固相方法转移到低聚糖的合成上来，取得了不同程度的成功。第一次尝试大约是在25年前(Frechet和Schuerch，1971；Frechet和Schuerch，1972；Guthrie等，1971；Guthrie等，1973)。然而，臭氧调节的(mediated)脱保护产物是醛-取代的糖苷。Danishefsky及其同事们描述了Lewis b抗原(Randolph等，1995)和N-连接的糖肽(Roberge等，1995)的通过起先借助甲硅烷基醚连接将低聚糖的第一个糖元连接到1％的二乙烯基苯-苯乙烯共聚物载体上的固相合成。在此情况下附着在树脂上的那部分糖是烯糖，通过环氧化双键得到树脂上的活化，所得到的烯糖残基通过环氧化物的亲核开环起作糖供体的作用。由于那时糖化学家们还没有比色法以监视树脂上的糖基化作用，评价反应过程的唯一的方法是通过低聚糖-树脂键的溶解(lysisi)和随后对分裂产物的分析，通常是通过薄层色谱法。分裂Danishefsky的甲硅烷基醚连接体所需的四-n-丁基铵氟化物调节的脱保护条件既危险又缓慢。结合系留(tethered)烯糖的树脂上活化的要求，使得整个策略和方法远不够理想。
在另一个方法中，Douglas及其同事们描述了采用聚乙二醇-ω-单甲基醚共聚物和琥珀酰基或α，α′-二氧二醚(dioxyxylyldiether)连接体合成D-甘露戊糖的方法(Douglas等，1995)。反应在溶液相中进行，未用完的反应物的去除是通过低聚糖-聚合物络合物的沉淀以及随后的洗涤来完成的。在后一例子中，低聚糖-聚合物键的分裂是通过催化氢化来完成的，该方法需要将共轭体暴露在1atm的H2中48小时以达到可观的产率。同样这太慢而无法有效地监视各个糖基化反应。Yan等人报告了在Merrifield树脂上的亚砜调节的糖基化反应，使用苯硫酚连接体来附着第一个糖的残基(Yan等，1994)。这一方法得到了(1-6)-连接的低聚糖的结构，适于用来合成α-和β-糖苷连接。然而，硫代糖苷的连接在树脂上使得在这一方法中无法使用相似的糖供体。
近来Rademann和Schmidt报道了使用三氯亚氨逐乙酸酯(trichloroacetimidate)糖供体得到通过烷基硫代系留的附着在树脂上的糖(Rademann和Schmidt，1996)。然而，同样，这一方法无法使用优越得多的硫代糖苷糖供体。同时，Adinolfi等描述了二糖的合成，使用聚乙烯醇-聚苯乙烯树脂，通过琥珀酸间隔基将第一个糖连接到聚合物载体上(Adinolfi等，1996)。然而，这一连接体所显示出来的酸不稳定性意味着第一个糖不能通过糖苷位置连接到树脂上。
上面用例子说明了固相合成中的关键因素是固相载体和起始合成子之间的连接体的本性。该连接体必须对偶合和脱保护条件具有优良的稳定性，而在固相低聚糖的合成中，该连接体应能快速而有效地分裂以允许对各个偶合反应过程的监视。分裂最好是通过使用相对无毒的化学试剂来达成。
这样，很明显，在这一领域仍然需要简单有效而经济的固相合成低聚糖的方法。
已有报道在SPPS法中使用联氨-不稳定伯氨基-保护基团，N-1-(4，4-二甲基-2，6-二氧代环亚己基)乙基(Dde)来保护赖氨酸侧链(Bycroft等，1993)。当2-乙酰基-双甲酮的2-(3-甲基丁酰)双甲酮类似物用4-氨基苄醇来缩合以得到4-[N-[1-(4，4-二甲基-2，6-二氧代环亚己基)-3-甲基-丁基]-氨基]苄酯(ODmab)时，这一基团被改性以在SPPS法中用作羧基保护基团(Chan等，1995)。
有报道说这两个基团对SPPS过程中广泛使用的脱保护条件，即三氟乙酸(TFA)或二甲基甲酰胺(DMF)中20％的哌啶，是稳定的。乙酯，4-[N-(1-(4，4-二甲基-2，6-二氧代环亚己基)乙基)氨基]苄酯(ODab)对20％的哌啶-DMF显示出微小但显著的不稳定性。Dde和ODmab均连接在氨基酸上的基团上，而不是直接连接在固相载体上。尚未有人建议其在固相低聚糖合成中的使用。
现在我们已经惊讶地发现类似于Dde和ODmab的保护基团可以偶合到聚合物载体上，从而产生一个固定糖的系统。为此，我们采用不同的糖供体已经将N-和O-糖苷固定在固体载体和合成的低聚糖上。连接体显示出对在现代合成化学中所遇到的大多数酸和仲/叔碱优异的稳定性，而且是快速而有效地与胺，肼或伯氨分裂。
Bannwarth等人独立地开发了与Dde保护基团不同的固相连接体，他们用它来固定用于联合的文库合成(combinatorial librarysynthesis)的氨基酸和伯氨(Bannwarth等，1996)。然而，这一连接体的合成既费时又低效，而且该连接体对仲碱，如哌啶只是显示出有限的稳定性。尚未有人认为该连接体可以用于低聚糖的合成。我们开发的连接体显示出比Bannwarth等人的连接体高得多的稳定性。
发明概述
一方面，本发明提供了一种固相合成低聚糖的载体，该载体包括：
a)树脂，
b)共价连接在树脂上的连接体，和
c)一个或多个通过连接体共价连接在树脂上的糖基团，
其中该连接体是2-取代-1，3-二氧代环烷烃化合物，并且
所述的载体具有如下化学式I：
其中，R1和R2可以相同或不同，且各自是氢或C1-4烷基；
R′是氨基糖，葡基胺，或是低聚糖的葡基胺；通过烷基-，取代烷基-，芳基-，取代芳基-，环烷基-，或取代环烷-氨基基团偶合的单或低聚糖；或通过羧烷基-，取代羧烷基-，羧芳基-，取代羧芳基-，羧环烷基-，或取代羧环烷基-氨基基团偶合的单或低聚糖。
R″是直接偶合在树脂载体上、或者也可以是通过合适的共价连接偶合在树脂载体上的烷基，取代烷基，芳基，取代芳基，环烷基，或取代环烷基间隔基团，它在低聚糖合成和分裂条件下是稳定的。
与树脂的共价连接可以合适地由-CONH-，-O-，-S-，-COO-，-CH＝N-，-NHCONH-，-NHCSNH，或-NHNH-基团提供，如间隔基团-CONH-树脂，间隔基团-O-树脂，间隔基团-S-树脂，间隔基团-CO2-树脂，间隔基团-CH＝N-树脂，间隔基团-NHCONH-树脂，间隔基团-NHCSNH-树脂，间隔基团-NHNH-树脂。其他可能的共价连接基团对本领域熟练技术人员来说是公知的。
优选R1和R2均是甲基。
优选R′是低聚糖-O-CH2-(C6H4)-NH，单糖-O-CH2-(C6H4)-NH，氨基-低聚糖-CO2CH2-(C6H4)NH，或氨基-单糖-CO2CH2-(C6H4)-NH基团。
在一特别优选的实施方案中，2-取代-1，3-二氧代环烷烃连接体是官能化Dde，Ddh或ODmab。在一个非常特别优选的实施方案中，载体包括树脂，连接体，和单糖，低聚糖，氨基糖或氨基-低聚糖。
另一方面，本发明提供了一个用来固相合成的载体，包括树脂和连接基团，其中连接体是具有如下通式II的2-取代-1，3-二氧代环烷烃：
其中，X是OH或NH2；
R1和R2可以相同或不同，且各自是氢或C1-4烷基；优选R1和R2均是甲基；且
R″是直接偶合在树脂载体上、或是通过合适的共价连接选择性地偶合在树脂载体上的烷基-，取代烷基-，芳基-，取代芳基-，环烷基-，或取代环烷氨基间隔基团，在低聚糖合成和分裂条件下它是稳定的。共价连接可以合适地由-CONH-，-O-，-S-，-COO-，-CH＝N-，-NHCONH-，-NHCSNH-，或-NHNH-基团提供，如间隔基团-CONH-树脂，间隔基团-O-树脂，间隔基团-S-树脂，间隔基团-CO2-树脂，间隔基团-CH＝N-树脂，间隔基团-NHCONH-树脂，间隔基团-NHCSNH-树脂，间隔基团-NHNH-树脂。其他可能的共价连接基团对本领域熟练技术人员来说是公知的。
在第三方面，本发明提供了一种连接体-糖复合物，包含具有如上所述的通式II的连接体基团和一个如上所述的R′的糖基团。
在第四方面，本发明提供了一种连接体化合物，该化合物带有适于通过共价键将伯氨附着到树脂上的官能团，该共价键在低聚糖的合成和分裂条件下是稳定的，所述的化合物具有如下通式III：
Figure C9719916700111
其中，X是OH或NH2；
R1和R2可以相同或不同，且各自是氢或C1-4烷基；且
R″是烷基-，取代烷基-，芳基-，取代芳基-，环烷基-，或取代环烷基间隔基团，该基团带有能与官能化的树脂反应的官能团。
优选连接体化合物是6-羟基-6-(4，4-二甲基-2，6-二氧代环亚己基)-己酸或其酯。优选该酯是苄酯，甲酯，叔丁酯。
就本说明书的目的而言，本说明书中关于取代基定义中的术语“取代的”是指被取代基本身被一个基团取代，而这个基团不改变该取代基总的化学特性。优选这样的取代基是卤素，硝基，氨基，羟基，和硫羟；优选卤素是氯和碘。本领域的熟练技术人员对具有相似大小和电荷特征并能在给定条件下用作替代物的其他合适的取代基是知道的。
就本说明书的目的而言，如果在室温下暴露在氨，肼或伯氨化合物的水溶液或DMF溶液中之后该化合物的失重少于10％，那么就认为该化合物“对低聚糖的合成和分裂条件是稳定的”。本领域的熟练技术人员能够决定某特定化合物在使用适于其特定目的的条件下是否足够稳定以用于本发明的目的。
本发明的连接体化合物可以在树脂上合成，也可以在溶液中合成。
本发明还提供了一组用于固相合成或联合合成低聚糖的试剂盒，根据本发明，包括如上所述的或是
a)树脂-连接体-糖载体，
b)连接体-糖络合物，或是
c)树脂-连接体载体。
该试剂盒也可以选择性地包括一种或多种其他试剂，如保护剂，脱保护剂，和/或适于固相或联合合成的溶剂。本领域的熟练技术人员能知道这些合适的其他试剂。根据所需的用途可以选用不同类型的试剂盒。
树脂可以是任何能在水和/或有机溶剂中溶胀的树脂，且含有如下取代基的一种：卤素，羟基，羧基，SH，NH2，甲酰基，SO2NH2，或NHNH2，例如甲基二苯甲基胺(methylbenzhydrylamine)(MBHA)树脂，氨或羧基tentagel树脂，4-硫代戊基苄基AM树脂(4-sulphamyl-benzyl AM resin)。其他合适的树脂对本领域的熟练技术人员来说是已知的。
本发明还提供了一种固相合成低聚糖的方法，包括依次将单或低聚糖基团连接到上述载体上的步骤。类似地，单或低聚糖结构单元可以是如上所述的。
该方法对联合合成应用尤其有用。
连接体化合物可以在溶液中合成或在起始糖基团偶合前直接在树脂上逐步合成，或先在溶液相合成连接体-起始糖共轭体，然后偶合到固体载体上，然后依次将随后的糖附着上去。优选该第二和所有随后的糖基团在低聚糖链中的最后那个糖被部分脱保护之后偶合到低聚糖链-树脂共轭体上去。
本发明相应地提供了一种合成具有如上所述化学式I的连接体基团的方法，包括将2-取代-1，3-二氧代环己烷化合物用二羧酸进行C-酰化的步骤。优选该二羧酸是通过形成酯被单保护的。更优选该反应被碳二亚胺活化并被N，N′-二甲基氨基哌啶催化。
反应产物可以选择性地与4-氨基苄醇反应以形成4-氨基苄基衍生物。
本发明还提供了一种合成树脂-连接体载体的方法，包括在合适的溶剂中溶胀树脂，用二羧酸处理该溶胀树脂，和使如此制得的树脂与2-取代-1，3-二氧代环烷烃化合物反应的步骤。优选在连接体的合成和树脂-连接体载体的合成中，2-取代-1，3-二氧代环烷烃化合物均是5，5-二甲基-1，3-环己二酮。也优选二羧酸是己二酸。
连接在树脂-连接体单元上的第一个糖可以是未保护的，部分保护的或完全保护的糖苷，氨基糖苷，或醚-或氨基-连接的糖，其中偶合通过一非糖苷位置发生。
单或低聚糖供体结构单元可以是任何活化糖，包括但不限于原酸酯，硫代原酸酯，氰亚烷基衍生物，1-O-酰基糖，氨基糖，亚氨逐乙酸酯(acetimidates)，三氯亚氨逐乙酸酯，硫代糖苷，氨基糖苷，氨基-低聚糖，低聚糖的糖基胺，糖基硫氰酸酯，戊烯基糖苷，戊烯酰糖苷(pentenoylglycosides)，异戊二烯基糖苷(isoprenyl glycosides)，烯糖，二氨基四甲基磷酸酯(tetramethyl-phosphoro diamidates)，糖二氮杂环丙烯(sugar diazirines)，硒基糖苷，二硫代磷酸酯，糖基二烷基亚磷酸酯，糖基亚砜和糖基氟化物。
优选偶合到树脂上的第一个糖是氨基糖，氨基糖苷，或氨基低聚糖或低聚糖的糖基胺。
优选部分糖脱保护是通过使用酰基型，三苯甲游基，苄基型，乙缩醛型，或各种甲硅烷基和/或光不稳定的保护性基团以及永久性保护基团得到的。这使得能通过在单个糖供体上使用两个正交(orthogonal)羟基保护基团而合成分支的低聚糖。
合成的低聚糖可以用氨，肼或伯胺如丁基胺或环己胺与树脂分裂。就制备氨基糖苷而言，优选使用有机溶剂中的氨或合适的伯胺。就制备酰肼而言，优选使用水或有机溶剂中的肼。就制备低聚糖而言，优选使用水或有机溶剂中的氨，然后酸化。如果连接体含有4-氨苄基部分，在如上所述的分裂以后释放出的第一个糖仍然被氨苄基团保护；如果需要，可以通过氢化来除去。
本领域的熟练技术人员能理解低聚糖可以保留在树脂上以用作分析或制备试剂，例如在亲和色谱法或大规模的亲和分离中。
附图的详细描述
图1所示为固相低聚糖合成所需方法的一般的表示。
图2说明了使用固相方法的低聚糖的文库的合成的“分离-偶合-重组”方法的一般的表达。
图3所示为本发明的Dde基连接体的合成，第一个糖的残基的附着和糖-连接体共轭体偶合到树脂载体上。还显示了另一种直接在树脂上合成连接体的方法。
图4所示为本发明的Ddmab基连接体的合成，第一个糖的残基的附着和糖-连接体共轭体偶合到树脂载体上。
图5所示为结合在树脂上的肼调节的脱保护产物中低聚糖-连接体键的分裂。
图6所示为一个糖羟基的选择性脱保护和与下一个糖供体的偶合的一般表示。
图7所示为将氨基-低聚糖固定的Dde-衍生的载体上。
图8所示为固相合成的活化糖供体的列表。
图9所示为不同保护的硫代糖苷和部分保护的氨基糖苷的合成。
图10所示为4-氨苄基改性的连接体的三氯亚氨逐乙酸酯活化。
图11所示为氨调节的氨基糖苷的分裂与分裂后的酸化以产生游离的碳氢化合物。
图12所示为使用硫代糖苷作为糖供体的低聚糖合成的一般方法的一个特定实施例。
图13所示为使用硫代糖苷作为糖供体的低聚糖合成的大概方法的另一个特定实施例。
图14所示为与4-氨苄基调节的连接体结合的单糖的分裂。
图15所示为与树脂结合的完全保护的三糖的一个实施例。
图16所示为未保护的氨基糖的固定。
发明的详细描述
此处使用了如下缩写：
Bn      苄基
Bu      丁基
DCM     氯甲烷
Dde     N-1-(4，4-二甲基-2，6-二氧代环亚己基)乙基
Ddh-OH  6-羟基-6-(4，4-二甲基-2，6-二氧代环亚己基)-己酸
DMAP    N，N’-二甲基氨基吡啶
DMF     N，N’-二甲基甲酰胺
DMTST   二甲基(甲基硫代)锍三氟甲烷磺酸酯
EEDQ    1-异丁基氧羰基-2-异丁基氧-1，2-二氢喹啉
EtOAc   酸乙酯
EtOH    乙醇
FAB-MS  快速原子轰击质谱仪
HRMS    高分辨率质谱仪
MBHA    甲基二苯甲基胺树脂(methyl benzyhydrylamineresine)
Me      甲基
MeOH    甲醇
NMR     核磁共振
ODmab   4-{N-[1-(4，4-二甲基-2，6-二氧代环亚己基)-3-甲基丁基]-氨基}苄醇
PEG     聚乙二醇
tBu     叔丁基
TFA     三氟乙酸
THF     四氢呋喃
TLC     薄层色谱
TNBS    2，4，6-三硝基苯磺酸
本发明是基于将Dde-，Ddh或ODmab-基连接体固定到聚合物载体上以系留任何糖或低聚糖基团的。这一点已经通过N-和O-糖苷偶合到连接体上得以说明，该连接体己被用作在偶合到树脂上之后的低聚糖的合成。这些连接体的性质以及其固定任何类型的糖的潜能，使得任何糖供体均可以随后用于低聚糖的合成，从而允许快速而有效的偶合程序。合适的糖供体包括但不限于原酸酯，硫代原酸酯，氰亚烷基衍生物，1-O-酰基糖，亚氨逐乙酸酯，三氯亚氨逐乙酸酯，硫代糖苷，氨基糖苷，氨基-低聚糖，低聚糖的糖基胺，糖基硫氰酸酯，戊烯基糖苷，戊烯酰糖苷，异戊二烯基糖苷，烯糖，二氨基四甲基磷酸酯，糖二氮杂环丙烯，硒基糖苷，二硫代磷酸酯，糖基二烷基亚磷酸酯，糖基亚砜和糖基氟化物。
连接体的稳定性是指在糖保护中能使用正交羟基保护基团。这些基团包括但不限于，酰基型，三苯甲游型，苄基型，乙缩醛型，或各种甲硅烷基和光不稳定的保护性基团。
连接体合成的容易性是指连接体上的第二官能团可以是卤素，醇，硫醇或仲胺，例如，
Figure C9719916700171
或
X＝卤素，OH，COOH，SH，NHR
相似地，连接体合成的容易性还意味着任何官能化的树脂均可以用来固定连接体，例如MBHA树脂，氨基或羧基tentagel树脂，4-硫代戊基苄基AM树脂等。
双甲酮与，例如单保护的二羧酸的C-酰化作用通过碳二亚胺活化、在干的DCM中用DMAP催化缩合可以很容易的达到。除去酯保护和第一氨基糖残基的偶合产生糖-连接体共轭体，该共轭体通过碳二亚胺调节的缩合作用可以很容易地偶合到氨基官能化的树脂载体上。这一反应可以使用常规的胺试验如TNBS或水合茚三酮来监视，以确保定量酰化。或者，连接体可以直接在树脂上合成，然后向连接体-树脂共轭体上引入第一糖残基。两种方法均示于图3。
如果第一个糖的残基和树脂之间需要醚型连接，那么用4-氨基苄醇改性连接体以产生ODmab型本体使得这一化学络合物形成作用可行，如图4所示。
在羟基的选择性脱保护之后，用任何上述的糖供体偶合第二个糖的残基，如图8所示。一部分树脂可以或是用醚，肼或是用伯胺分裂，如图5所示，分裂混合物用TLC分析以监视反应进程。反应的结束是通过单糖的消失来指示的。继续进行随后的脱保护和偶合随后的糖的残基直到完成所需的低聚糖，如图1所示。然后除脱保护性基团，并或是用氨，肼，或是用伯氨在合适的溶剂中将低聚糖从树脂载体上分裂开来。
本发明的树脂-连接体系统对联合低聚糖文库的合成(如图2所示)以及单或低聚糖的固定(如图7所示)是理想的。
下面通过结合下列非限制性的实施例详细叙述本发明。实施例1-5   特别保护的硫代糖苷型糖供体的合成(图9)1  乙基2，3，4，6-四-O-乙酰基-1-硫代-β-D-吡喃半乳糖苷
在CH2Cl2(150ml)中于室温下将半乳糖五乙酸酯(38.00g，97.43mmol)，(乙基硫代)三甲基硅烷(19.60g，146.15mmol)和三甲基甲硅烷基三氟甲烷磺酸酯(23.60g，106.20mmol)的混合物搅拌过夜。将反应混合物用CH2Cl2(150ml)稀释并用1M的Na2CO3溶液(300ml)，水(300ml)洗涤，用MgSO4干燥，浓缩。残余物用1∶1(v/v)的己烷/二异丙醚结晶得到乙基2，3，4，6-四-O-乙酰基-1-硫代-β-D-吡喃半乳糖苷(34.00g，89％)。Rf0.43(己烷/EtOAc 1∶1)；FAB MS C16H24O9S(392.3)m/z(％)415[M+Na]+(100)，393[M+H]+(20)，331(56)。2  乙基4，6-O-苯亚甲基-1-硫代-β-D-吡喃半乳糖苷
在无水MeOH(150ml)中于室温下将乙基2，3，4，6-四-O-乙酰基-1-硫代-β-D-吡喃半乳糖苷(10g，25.51mmol)，和甲醇钠(200g，3.7mmol)的混合物搅拌2hr。将反应混合物用Amberlite IRA 120(H+)离子交换树脂中和并蒸发。残余物收集在1∶？的苯甲醛/甲酸(21.2ml)混合物中并在室温下搅拌90分钟。反应混合物用醚(200ml)稀释并在-15℃保持2小时。收集所形成的沉淀并以CHCl3/乙醇10∶3(v∶v)用色谱纯化得到乙基4，6-O-苯亚甲基-1-硫代-β-D-吡喃半乳糖苷(8.1g，64.5％)Rf0.64(CHCl3/乙醇10∶3)。3  乙基2，3-二-O-苄基4，6-O-苯亚甲基-β-D-吡喃半乳糖苷
在0℃下往60％的氢化钠(2.65g，66.34mmol)的60mlDMF悬浮液中滴加60ml DMF中的乙基4，6-O-苯亚甲基-1-硫代-β-D-吡喃半乳糖苷(6.90g，22.11mmol)。将混合物在室温下搅拌1hr，然后在0℃下滴加苄基溴(11.34g，66.34mmol)。将混合物在室温下搅拌过夜。将反应混合物蒸发，并从残余物中蒸馏出二甲苯(2×50ml)。将残余物收集在醚(300ml)中并用2×200ml水洗涤。有机层用MgSO4干燥，蒸发并从MeOH中结晶得到乙基2，3-二-O-苄基4，6-O-苯亚甲基-1-硫代-β-D-吡喃半乳糖苷(8.90g，82％)。Rf0.51(己烷/EtOAc 1∶1v/v)；1H NMR(CDCl3)δ7.55-7.25(m，15H，15Ar-H)，5.47(s，1H，CHAr)，4.88-4.75(4d，4H，2 CH2Ar)，4.44(d，1H，H-1，J1，2＝10.89Hz)，4.30(dd，1H，H-6′)，4.16(d，1H，H-4)，3.97(dd，1H，H-3)，3.88(t，1H，H-2)，3.60(dd，1H，H-6)，3.35(d，1H，H-5)，2.90-2.40(m，2H，CH2S)，1.33(t，3H，Me)；FAB MS C29H32O5S(492.40)m/z(％)515[M+Na]+(100)，493[M+H]+(41)，431(53)。4  乙基2，3，6-三-O-苄基-1-硫代-β-D-吡喃半乳糖苷
在0℃下于THF(60ml)中搅拌粗乙基2，3-二-O-苄基4，6-O-苯亚甲基-1-硫代-β-D-吡喃半乳糖苷(5.4g，10.97mmol)，氰基氢硼化钠(6.89g，109.7mmol)和几滴甲基橙指示剂的混合物。慢慢地加入用HCl饱和的THF直到得到永久的粉红色。将反应混合物在室温下搅拌20分钟，然后用干NH3中和并蒸发。将残余物收集在CHCl3(100ml)中并用饱和NaHCO3溶液(50ml)洗涤，用MgSO4干燥，蒸发。将残余物溶解于MeOH(50ml)中，回流10分钟并蒸发。将粗产物用1，2-二氯乙烷/乙酸乙酯10∶0.5作为流动相的色谱纯化得到乙基2，3，6-三-O-苄基-1-硫代-β-D-吡喃半乳糖苷(4.1 4g，75％)。Rf0.43(1，2-二氯乙烷/EtOAc 10∶0.5v/v)；1H NMR(CDCl3)δ7.40-7.26(m，15H，15 Ar-H)，4.88，4.76，4.73，4.71(4d，4H，2 CH2Ar)，4.57(s，2H，CH2Ar)，4.42(d，1H，H-1，J1，2＝9.64Hz)，4.10(m，1H，H-4)，3.76(dd，1H，H-3)，3.67(t，1H，H-2)，3.55(m，2H，H-6)，2.75(m，2H，CH2S)，2.50(bs，1H，OH)，1.31(t，3H，CH3)；FAB MS C29H34O5S(494.61)m/z(％)627[M+Cs]+(70)，517[M+Na]+(30)，495[M+H]+(12)。5  乙基2，3，6-三-O-苄基-4-溴乙酰基-1-硫代-β-D-吡喃半乳糖苷
在0℃下于干燥CH2Cl2(60ml)中搅拌乙基2，3，6-三-O-苄基-1-硫代-β-D-吡喃半乳糖苷(4.14g，8.38mmol)，对称可力丁(sym.Collidine)(3.65g，30.16mmol)，和4-二甲基氨基哌啶的混合物，并在15分钟内滴加溴乙酰溴(2.53，2.57mmol)的CH2Cl2溶液。将反应混合物用CH2Cl2(1 00ml)稀释并用5％的盐酸溶液(3×30ml)和饱和NaHCO3溶液(30ml)洗涤。溶液用MgSO4干燥，蒸发。将残余物用己烷/EtOAc 2∶1作为流动相的色谱纯化得到乙基2，3，6-三-O-苄基-4-溴乙酰基-1-硫代-β-D-吡喃半乳糖苷(4.84g，94％)。
1H NMR(CDCl3)δ7.40-7.25(m，15H，15 Ar-H)，4.80-4.50(m，6H，3 CH2Ar)，4.45(d，1H，H-1，J1，2＝9.53Hz)，2.73(m，2H，CH2S)，1.30(t，3H，CH3)；FAB MS C31H35BrO6S(615.56)m/z(％)638[M+Na]+(15)，616[M+H]+(32)，509(80)，463(21)，419(18)。实施例6-10   部分保护的糖基胺的合成(图9)6   2，3，4，6-四-O-乙酰基-β-D-吡喃半乳糖基叠氮化物
将1，2，3，4，6-五-O-乙酰基吡喃半乳糖(1.17g，3mmol)溶解在干燥的CH2Cl2(15ml)中，然后在氮气下滴加三甲基甲硅烷基叠氮化物(416mg，3.6mmol)和SnCl4(0.18ml)。在室温下搅拌混合物24小时。然后将反应混合物用CH2Cl2(40ml)稀释，用MgSO4干燥，蒸发。残余物用己烷/EtOAc 8∶7(v∶v)作为流动相的色谱纯化得到2，3，4，6-四-O-乙酰基-β-D-吡喃半乳糖基叠氮化物(2，3，4，6-tetra-O-acetyl-β-D-galactopyranosly azide)(1.05g，94％)。Rf0.74(己烷/EtOAc 8∶7v/v)；1H NMR(CDCl3)δ5.41(d，1H，H-4)，5.17(t，1H，H-2)，5.04(dd，1H，H-3)，4.60(d，1H，H-1，J1，2＝10.09Hz)，4.19(m，2H，H-6)，4.00(m，1H，H-5)，2.15-1.98(4s，12H，4OAc)；FAB MSC14H19N3O9(373.32)m/z(％)396[M+Na]+(100)，374[M+H]+(35)，331(23)。7  4，6-O-苯亚甲基-β-D-吡喃半乳糖基叠氮化物
在无水MeOH(100ml)中于室温下将2，3，4，6-四-O-乙酰基-β-D-吡喃半乳糖基叠氮化物(19.35g，51.79mmol)，和甲醇钠(200mg，3.7mmol)的混合物搅拌2hr。将反应混合物用Amberlite IRA 120(H+)离子交换树脂中和并蒸发。残余物收集在1∶1的苯甲醛/甲酸(52ml)的混合物中并在室温下搅拌90分钟。将反应混合物蒸发并将残余物收集在醚(60ml)中并在-15℃保持2小时。通过过滤收集所形成的沉淀并在室温下干燥得到4，6-O-苯亚甲基-β-D-吡喃半乳糖基叠氮化物(11.8g，78％)。Rf0.64(CHCl3/乙醇10∶1.5)。8   2，3-二-O-苄基-4，6-O-苯亚甲基-β-D-吡喃半乳糖基叠氮化物
在0℃下往60％的氢化钠(6.2g，155.38mmol)的60mlDMF悬浮液中滴加60ml DMF中的4，6-O-苯亚甲基-β-D-吡喃半乳糖基叠氮化物(11.8g，40.27mmol)。将混合物在室温下搅拌1hr，然后在0℃下滴加苄基溴(26.57g，155.38mmol)。将混合物在室温下搅拌过夜。将混合物蒸发，并从残余物中蒸馏出二甲苯(2×50ml)。将残余物收集在醚(500ml)中并用2×100ml水洗涤。有机层用MgSO4干燥并蒸发，得到粗产物甲基2，3-二-O-苄基-4，6-O-苯亚甲基-β-D-吡喃半乳糖基叠氮化物(19.4g)。9  2，3，6-三-O-苄基-β-D-吡喃半乳糖基叠氮化物
在0℃下于THF(80ml)中搅拌粗2，3-二-O-苄基-4，6-O-苯亚甲基-β-D-吡喃半乳糖基叠氮化物(9.00g，19.02mmol)，氰基氢硼化钠(12.00g，190.2mmol)和几滴甲基橙指示剂的混合物。慢慢地加入用HCl饱和的THF直到得到永久的粉红色。将反应混合物在室温下搅拌20分钟，然后用干NH3中和并蒸发。将残余物收集在CHCl3(100ml)中并用饱和NaHCO3溶液(50ml)洗涤，用MgSO4干燥并蒸发。将残余物溶解于MeOH(50ml)中，保持回流10分钟并蒸发。将粗产物用1，2-二氯乙烷/EtOAc 10∶0.4作为流动相的色谱纯化得到2，3，6-三-O-苄基-β-D-吡喃半乳糖基叠氮化物(6.50g，72％)。Rf0.42(1，2-二氯乙烷/EtOAc 10∶0.4v/v)；1H NMR(CDCl3)δ7.40(m，15H，15 Ar-H)，4.90-4.55(m，6H，3 CH2Ar)，4.06(m，1H，H-4)，3.82-3.70(m，3H，H-3，H-2，H-5)，3.65(dd，1H，H-6′)，3.60(d，1H，H-1，J1，2＝8.64Hz)，3.51(dd，1H，H-6)；FAB MS C27H29N3O5(475.40)m/z(％)608[M+Cs]+(10)，498[M+Na]+(65)，476[M+H]+(25)，433(75)，341(20)。10  2，3，6-三-O-苄基-β-D-吡喃半乳糖基胺
在室温、氮气下于MeOH(31ml)中将2，3，6-三-O-苄基-β-D-吡喃半乳糖基叠氮化物(3.00g，6.31mmol)，丙烷-1，3-二硫醇(3.40g，31.50mmol)，和三乙基氨(3.50g，31.5mmol)的混合物搅拌10小时。将反应混合物蒸发并用CHCl3/EtOH 10∶0.3v/v的色谱纯化得到2，3，6-三-O-苄基-β-D-吡喃半乳糖基胺(2.66g，94％)。Rf0.38(CHCl3/EtOH 10∶0.3v/v)；FAB MS C27H31NO5(449.33)m/z(％)472[M+Na]+(75)，450[M+H]+(100)。实施例11   在溶液中合成糖基胺-Ddh-苄基酯共轭体(图3)11  N-(苄基6-(4，4-二甲基-2，6-二氧代环亚己基)-己酸酯-6-基)2，3，4，6-四-O-乙酰基-β-D-吡喃葡糖基胺
在室温下于CH2Cl2(2.0ml)中将苄基6-羟基-6-(4，4-二甲基-2，6-二氧代环亚己基)-己酸酯(932mg，2.60mmol)，2，3，4，6-四-O-乙酰基-β-D-吡喃葡基胺的混合物搅拌2天。将反应混合物蒸发并用己烷/EtOAc1∶1作为流动相的色谱纯化得到N-(苄基6-(4，4-二甲基-2，6-二氧代环亚己基)-己酸酯-6-基)2，3，4，6-四-O-乙酰基-β-D-吡喃葡糖基胺(N-(benzyl 6-(4，4-dimethyl-2，6-dioxocyclohexylidene)-hexanoate-6-yl)2，3，4，6-tetra-O-acetyl-β-D-glucopyranosyl amine)(1.70g，95％)。Rf0.32(己烷/EtOAc 1∶1v/v)；1H NMR(CDCl3)δ7.37-7.26(m，5H，5Ar-H)，5.40-5.00(m，7H，7糖质子)，3.10，2.85(2t，4H，2 CH2)，2.38(2 s，4H，Dde 2 CH2)，2.06-1.98(4s，12H，4OAc)，1.80(m，4H，2 CH2)，1.02，1.00(2s，6H，Dde 2 CH3)；FAB MS C35H45NO13(687.23)m/z(％)710[M+Na]+(35)，688[M+H]+(100)，356(60)。实施例12   在溶液中合成完全保护的糖基胺-Ddh共轭体，脱保护一 个“完全保护的氨-Ddh酯共轭体”(图3)12    N-(6-(4，4-二甲基-2，6-二氧代环亚己基)-己酸-6-基)2，3，4，6-四-O-乙酰基-β-D-吡喃葡糖基胺
在室温下在Pd/C(10％)(200mg)上于MeOH(20ml)中氢化N-(苄基6-(4，4-二甲基-2，6-二氧代环亚己基)-己酸酯-6-基)2，3，4，6-四-O-乙酰基-β-D-吡喃葡糖基胺(1.27g，1.84mmol)10小时。滤掉催化剂，将滤液蒸发并用CHCl3/MeOH 10∶0.5v/v作为流动相的色谱纯化得到N-(6-(4，4-二甲基-2，6-二氧代环亚己基)-己酸-6-基)2，3，4，6-四-O-乙酰基-β-D-吡喃葡糖基胺(1.10g，98％)。Rf0.38(CHCl3/MeOH 10∶0.5v/v)；1H NMR(CDCl3)δ5.40-5.00(m，7H，7糖质子)，3.15，2.86(2t，4H，2 CH2)，2.45(2s，4H，Dde 2 CH2)，2.10-1.98(4s，12H，4 OAc)，1.80-1.65(m，4H，2 CH2)，1.02，1.00(2s，6H，Dde 2CH3)；FAB MS C28H39NO13(597.33)m/z(％)620[M+Na]+(55)，598[M+H]+(100)。实施例13   在溶液中合成糖基胺-Ddh-甲基酯共轭体(图3)13  N-(甲基6-(4，4-二甲基-2，6-二氧代环亚己基)-己酸酯-6-基)2，3，4，6-四-O-乙酰基-β-D-吡喃葡糖基胺
重复反应11，不同之处在于使用的是甲基6-羟基6-(4，4-二甲基-2，6-二氧代环亚己基)-己酸酯而不是苄基6-羟基6-(4，4-二甲基-2，6-二氧代环亚己基)-己酸酯。产率：92％。Rf0.28(己烷/EtOAc 1∶1v/v)；FAB MS C29H41NO13(611.45)m/z(％)624[M+Na]+(100)，612[M+H]+(34)。实施例14   在溶液中合成糖基胺-Ddh-叔丁酯共轭体(图3)14  N-(叔丁基6-(4，4-二甲基-2，6-二氧代环亚己基)-己酸酯-6-基)2，3，4，6-四-O-乙酰基-β-D-吡喃葡糖基胺
重复反应11，不同之处在于使用的是叔丁基6-羟基6-(4，4-二甲基-2，6-二氧代环亚己基)-己酸酯而不是苄基6-羟基6-(4，4-二甲基-2，6-二氧代环亚己基)-己酸酯。产率：96％。Rf0.35(己烷/EtOAc 1∶1v/v)；FAB MS C32H47NO13(653.37)m/z(％)676[M+Na]+(80)，677[M+H]+(100)。实施例15   在溶液中合成Ddh-羟基苄基酯(图3)15  苄基6-羟基-6-(4，4-二甲基-2，6-二氧代环亚己基)-己酸酯
向搅拌的单-苄基己二酸酯(2.36g，10mmol)的干CH2Cl2溶液中加入5，5-二甲基-1，3-环己二酮(1.4g，10mmol)、N，N′-二环己基碳二亚胺(2.1g，10.1mmol)和4-二甲基氨基吡啶(1.22g，10mmol)。将所得到的溶液在室温下搅拌18小时。冷却溶液并过滤除去沉淀的N，N′-二环己基脲。将滤液蒸发并将残余物重新溶解在EtOAc(50ml)中并用1M的KHSO4洗涤。用盐水(92×10ml)洗涤有机萃取物，干燥(MgSO4)并蒸发生成白色/黄色非晶形的粉末。急骤硅胶色谱(Flash silicachromatography)(EtOAc/己烷1∶2v/v)得到白色结晶固体苄基6-羟基-6-(4，4-二甲基-2，6-二氧代环亚己基)-己酸酯(3.00g，84％)。1H NMR(CDCl3)δ18.10(s，1H，OH)，7.30(s，5H，5 Ar-H)，5.06(s，2H，CH2Ar)，3.00(t，2H，CH2)，2.47(s，2H，Dde CH2)，2.35(t，2H，CH2CO2)，2.29(s，2H，Dde CH2)，1.65(m，4H，2 CH2)，1.01(s，6H，2 CH3)；FAB MSC21H26O5(358.18)m/z(％)359[M+H]+(100)，267(40)；对HRMS(FAB)的测定值：m/z 359.1858，对C21H27O5的计算值：(M+H)，359.1850。实施例16   通过脱保护Ddh-DH酯合成Ddh-OH(图3)16  6-羟基-6-(4，4-二甲基-2，6-二氧代环亚己基)-己酸
室温下在Pd/C(10％)(150mg)上于MeOH(20ml)中氢化苄基6-羟基6-(4，4-二甲基-2，6-二氧代环亚己基)-己酸酯(1.50g，4.19mmol)10小时。滤掉催化剂，将滤液蒸发，得到6-羟基-6-(4，4-二甲基-2，6-二氧代环亚己基)-己酸(1.10g，98％)。Rf0.35(己烷/EtOAc 2∶1v/v)；FAB MS C14H20O5(268.12)m/z(％)313[M+2Na]+(34)，291[M+Na]+(100)，269[M+H]+(16)。实施例17   在溶液中合成Ddh-OH甲基酯(图3)17  甲基6-羟基-6-(4，4-二甲基-2，6-二氧代环亚己基)-己酸酯
重复反应15，不同之处在于使用的是单-甲基己二酸酯而不是单苄基己二酸酯，得到甲基6-羟基-6-(4，4-二甲基-2，6-二氧代环亚己基)-己酸酯(2.39g，85％)。Rf0.32(EtOAc/己烷1∶2v/v)；FAB MS C15H22O5(282.22)m/z(％)305[M+H]+(100)，283[M+H]+(66)。实施例18   在溶液中合成Ddh-OH叔丁酯(图3)18  叔丁基6-羟基-6-(4，4-二甲基-2，6-二氧代环亚己基)-己酸酯
重复反应15，不同之处在于使用的是单-叔丁基己二酸酯而不是单苄基己二酸酯，得到叔丁基6-羟基-6-(4，4-二甲基-2，6-二氧代环亚己基)-己酸酯(2.62g，81％)。Rf0.36(EtOAc/己烷1∶2v/v)；FAB MS C18H28O5(324.41)m/z(％)347[M+H]+(100)，325[M+H]+(43)，267(80)。实施例19   通过脱保护Ddh-OH叔丁酯合成Ddh-OH(见16，图3)19  6-羟基-6-(4，4-二甲基-2，6-二氧代环亚己基)-己酸
将叔丁基6-羟基-6-(4，4-二甲基-2，6-二氧代环亚己基)-己酸酯(100mg，0.30mmol)溶解在CH2Cl2/TFA的1∶1混合物(2ml)中并在室温下搅拌1小时。将反应混合物蒸发得到6-羟基-6-(4，4-二甲基-2，6-二氧代环亚己基)-己酸(0.81g，98％)。实施例20   由环酐合成Ddh-OH(见16，图3)20  6-羟基-6-(4，4-二甲基-2，6-二氧代环亚己基)-己酸
在室温下于无水吡啶(50ml)中将戊二酐(2.28g，20mmol)，双甲酮(2.8g，20mmol)，4-二甲基氨基吡啶(3.99g，30mmol)的混合物搅拌24小时。蒸发反应混合物并将残余物收集在CHCl3(100ml)中，用5％HCl溶液(3×25ml)、饱和NaHCO3溶液洗涤，在MgSO4上干燥并蒸发。以醚/乙酸(10ml∶1滴)作为流动相的色谱纯化残余物得到6-羟基-6-(4，4-二甲基-2，6-二氧代环亚己基)-己酸(2.28g，45％)。实施例21   在溶液中用Ddh-OH合成完全保护的糖基胺-Ddh共轭体(见12，图3)21  N-(6-(4，4-二甲基-2，6-二氧代环亚己基)-己酸-6-基)2，3，4，6-四-O-乙酰基-β-D-吡喃葡糖基胺
在回流下于无水乙醇中将6-羟基-6-(4，4-二甲基-2，6-二氧代环亚己基)-己酸(400mg，1.49mmol)、2，3，4，6-四-O-乙酰基-β-D-吡喃葡糖基胺(259mg，0.74mmol)的混合物搅拌2小时。将反应混合物蒸发并用CHCl3/MeOH 10∶0.5v/v的色谱纯化得到N-(6-(4，4-二甲基-2，6-二氧代环亚己基)-己酸-6-基)2，3，4，6-四-O-乙酰基-β-D-吡喃葡糖基胺(410mg，92％)。实施例22   在溶液中用Ddh-OH合成部分保护的糖基胺-Ddh共轭体(图3)22  N-(6-(4，4-二甲基-2，6-二氧代环亚己基)-己酸-6-基)2，3，6-三-O-苄基-β-D-吡喃半乳糖基胺
重复反应21，区别是使用的是2，3，6-三-O-苄基-β-D-吡喃半乳糖基胺而不是2，3，4，6-四-O-乙酰基-β-D-吡喃葡糖基胺，得到N-(6-(4，4-二甲基-2，6-二氧代环亚己基)-己酸-6-基)2，3，6-三-O-苄基-β-D-吡喃半乳糖基胺(299mg，90％)。Rf0.34(CHCl3/MeOH 10∶0.1v/v)FAB MS C37H43NO7(613.41)m/z(％)649[M+2Na]+(34)，626[M+Na]+(100)，614[M+H]+(65)。实施例23   在溶液中合成Ddh-氨苄基连接体(图4)23  N-(6-(4，4-二甲基-2，6-二氧代环亚己基)-己酸-6-基)4-氨基-苄醇
重复反应21，区别是使用4-氨基苄醇而不是2，3，4，6-四-O-乙酰基-β-D-吡喃葡糖基胺，得到N-(6-(4，4-二甲基-2，6-二氧代环亚己基)-己酸-6-基)4-氨基苄醇(259mg，94％)。Rf0.40(EtOAc/己烷/乙酸2∶1∶0.1v/v/v)；FAB MS C21H27NO5(373.43)m/z(％)418[M+2Na]+(24)，396[M+Na]+(100)，374[M+H]+(35)。实施例24   在溶液中合成Ddh-氨苄基叔丁酯连接体(图4)24  N-(叔丁基6-(4，4-二甲基-2，6-二氧代环亚己基)-己酸酯-6-基)4-氨基苄醇
在回流下于无水乙醇中将叔丁基6-羟基-6-(4，4-二甲基-2，6-二氧代环亚己基)-己酸酯(400mg，1.23mmol)和4-氨基苄醇(605mg，4.92mmol)的混合物搅拌2小时。将反应混合物蒸发并用CHCl3/MeOH9∶1作为流动相的色谱纯化得到N-(叔丁基6-(4，4-二甲基-2，6-二氧代环亚己基)-己酯-6-基)4-氨基苄醇(395mg，75％)。Rf0.52(CHCl3/MeOH 9∶1v/v)FAB MS C25H35NO5(429.53)m/z(％)452[M+Na]+(100)，430[M+H]+(32)，372(64)。实施例25   在溶液中合成Ddh-氨苄基叔丁酯三氯亚氨逐乙酸酯活化 的连接体(图4)25  N-(叔丁基6-(4，4-二甲基-2，6-二氧代环亚己基)-己酸醇-6-基)4-氨苄基三氯亚氨逐乙酸酯
在0℃下于CH2Cl2(5ml)中搅拌N-(叔丁基6-(4，4-二甲基-2，6-二氧代环亚己基)-己酸酯-6-基)4-氨基苄醇(500mg，1.16mmol)和三氯乙腈(503mg，3.49mmol)的混合物，并加入1，8-二氮杂二环(5.4.0)十一-7-烯(1，8-diazabicyclo(5.4.0)undec-7-ene)(5mg，0.03mmol)。将反应混合物在0℃下搅拌90分钟，在室温下搅拌2小时，然后蒸发。残余物用EtOAc/己烷1∶1作为流动相的色谱纯化得到N-(叔丁基6-(4，4-二甲基-2，6-二氧代环亚己基)-己酸酯-6-基)4-氨苄基三氯亚氨逐乙酸酯(580mg，87％)。Rf0.4 1(EtOAc/己烷1∶1v/v)；FAB MS C27H35Cl3N2O5(573.94)m/z(％)595[M+Na]+(100)，753[M+H]+(40)，515(39)，430(54)。实施例26   通过三氯亚氨逐乙酸酯活化合成完全保护的糖(糖-连接体 键不在糖苷的位置)-Ddh-氨苄基叔丁酯共轭体(图4)26  苄基2-乙酰氨基-3-O-乙酰基-6-O-苄基-2-脱氧-4-O-[N-(叔丁基6-(4，4-二甲基-2，6-二氧代环亚己基)-己酸酯-6-基)4-氨苄基]-α-D-吡喃葡糖苷
在20℃、氮气下向苄基2-乙酰氨基-3-O-乙酰基-6-O-苄基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖苷(155mg，0.35mmol)的CH2Cl2(6ml)溶液中加入N-(叔丁基6-(4，4-二甲基-2，6-二氧代环亚己基)-己酸酯-6-基)4-氨苄基三氯亚氨逐乙酸酯(400mg，0.70mmol)。加入三氟甲烷磺酸的醚溶液(0.1M，0.06ml)，将混合物在20℃下搅拌30分钟。反应用5％的NaHCO3溶液(0.25ml)中止。将混合物过滤并将滤液蒸发后，粗产物用EtOAc/己烷2∶1v/v作为流动相的色谱纯化得到苄基2-乙酰氨基-3-O-乙酰基-6-O-苄基-2-脱氧-4-O-[N-(叔丁基6-(4，4-二甲基-2，6-二氧代环亚己基)-己酸酯-6-基)4-氨苄基]-α-D-吡喃葡糖苷(210mg，71％)。Rf0.37(EtOAc/己烷2∶1v/v)；FAB MS C49H62N2O11(855.01)m/z(％)877[M+Na]+(100)，855[M+H]+(35)，797(73)。实施例27   通过三氯亚氨逐乙酸酯活化合成完全保护的糖苷(糖-连接 体键在糖苷的位置)-Ddh-氨苄基连接体-树脂(图4)27  [N6-(4，4-二甲基-2，6-二氧代环亚己基)-己酸-6-基)4-氨苄基]2，3 4，6-四-O-乙酰基-β-D-吡喃葡糖苷MBHA树脂共轭体
在20℃、氮气下向2，3，4，6-四-O-乙酰基-β-D-吡喃葡糖(121mg，0.35mmol)的CH2Cl2(6ml)溶液中加入N-(叔丁基6-(4，4-二甲基-2，6-二氧代环亚己基)-己酸酯-6-基)4-氨苄基三氯亚氨逐乙酸酯(400mg，0.70mmol)。加入三氟甲烷磺酸的醚溶液(0.1M，0.06ml)，将混合物在20℃下搅拌30分钟。反应用5％的NaHCO3溶液(0.25ml)中止。将混合物过滤后将蒸发滤液。将未纯化残余物收集在5ml的CH2Cl2/TFA混合液(1∶1)中，在室温下搅拌1小时并蒸发。将所得的酸溶解在CH2Cl2(5ml)中，加入N，N’-二异丙基碳二亚胺(128mg，1mmol)，将混合物与MBHA树脂(100mg)(在DMF中溶胀20分钟)一起缓慢搅拌30分钟。实施例28   通过DMTST促进的糖基化合成完全保护的糖苷(糖-连接 体键在糖苷的位置)-Ddh-氨苄基苄基酯共轭体(见26，图4)28  [N-[苄基(6-(4，4-二甲基-2，6-二氧代环亚己基)-己酸酯]-6-基4-氨苄基]-2，3，4，6-四-O-乙酰基-β-D-吡喃葡糖苷
在室温下搅拌于CH2Cl2(10ml)中的N-[苄基(6-(4，4-二甲基-2，6-二氧代环亚己基)-己酸酯]-6-基4-氨基苄醇(500mg，1.08mmol)，甲基2，3，4，6-四-O-乙酰基-1-硫代-β-D-吡喃葡糖苷(400mg，1.08mmol)的混合物并加入DMTST(835mg，3.24mmol)。将溶液在室温下搅拌1小时并用饱和NaHCO3溶液(3ml)洗涤，在MgSO4上干燥并蒸发。将残余物用己烷/EtOAc 1∶1v/v作为流动相的色谱纯化得到[N-[苄基(6-(4，4-二甲基-2，6-二氧代环亚己基)-己酸酯]-6-基)4-氨苄基]2，3，4，6-四-O-乙酰基-β-D-吡喃葡糖苷(610mg，75％)。Rf0.47(己烷/EtOAc 1∶1v/v)；FAB MS C42H51NO14(793.83)m/z(％)816[M+Na]+(100)，794[M+H]+(25)，702(66)。实施例29   通过DIPCDI活化合成完全保护的糖苷(糖-连接体键在糖 苷的位置)-Ddh-氨苄基连接体-树脂共轭体(见27，图4)29  [N-(6-(4，4-二甲基-2，6-二氧代环亚己基)-己酸-6-基)4-氨苄基]-2，3，4，6-四-O-乙酰基-β-D-吡喃葡糖苷MBHA树脂共轭体
在室温下在Pd/C(10％)(200mg)上于MeOH(20ml)中氢化[N-[苄基(6-(4，4-二甲基-2，6-二氧代环亚己基)-己酸酯-6-基4-氨苄基]-2，3，4，6-四-O-乙酰基-β-D-吡喃葡糖苷(500mg，0.63mmol)10小时。滤掉催化剂，将滤液蒸发。将残余物溶解在CH2Cl2(5ml)中，加入N，N’-二异丙基碳二亚胺(128mg，1mmol)，将混合物与MBHA树脂(200mg)(在DMF中预溶胀20分钟)一起缓慢搅拌30分钟。实施例30   在溶液中用Ddh-OH叔丁酯合成部分保护的糖基胺-Ddh 共轭体(见22，图3)30  N-(6-(4，4-二甲基-2，6-二氧代环亚己基)-己酸-6-基)2，3，6-三-O-苄基-β-D-吡喃半乳糖胺
在回流下于无水乙醇(10ml)中搅拌叔丁基6-羟基-6-(4，4-二甲基-2，6-二氧代环亚己基)-己酸酯(400mg，1.23mmol)和2，3，6-三-O-苄基-β-D-吡喃半乳糖基胺(276mg，0.61mmol)的混合物2小时。将反应混合物蒸发。残余物收集在CH2Cl2/TFA的混合物(1∶1)(10ml)中并在室温下搅拌1小时。将反应混合物蒸发并用CHCl3/MeOH 10∶0.1v/v作为流动相的色谱纯化得到N-(6-(4，4-二甲基-2，6-二氧代环亚己基)-己酸-6-基)2，3，6-三-O-苄基-β-D-吡喃半乳糖基胺(280mg，73％)。Rf0.34(CHCl3/MeOH 10∶0.1v/v)FAB MS C37H43NO7(613.41)m/z(％)649[M+2Na]+(34)，626[M+Na]+(100)，614[M+H]+(65)。实施例31   完全保护的糖基胺-Ddh-树脂共轭体的合成，其中树脂的 偶合是最后步骤(图3)31  N-(6-(4，4-二基-2，6-二氧代环亚己基)-己酸-6-基)2，3，4，6-四-O-乙酰基-β-D-吡喃葡糖基胺-MBHA共轭体
将总胺官能度为0.084mmol的MBHA树脂(取代率：0.42mmol/g)(200mg)在DMF中溶胀20分钟。然后将树脂用新鲜DMF洗涤，将N-(6-(4，4-二甲基-2，6-二氧代环亚己基)-己酸-6-基)2，3，4，6-四-O-乙酰基-β-D-吡喃葡糖基胺(200mg，4当量)和N，N′-二异丙基碳二亚胺(53μl，4当量)加入DMF(5ml)并将树脂缓慢搅拌30分钟。TNBS试验略显正值，所以使用上述条件，进行双偶合(double coupling)，这次产生负的TNBS试验结果。将树脂用DMF、甲醇，最后用醚洗涤。然后将树脂放在KOH上于真空下干燥过夜。实施例32   完全保护的糖(糖-连接体键不在糖苷的位置)-Ddh-树脂共 轭体的合成，其中树脂的偶合是最后步骤(见27，图4)32  苄基2-乙酰氨基-3-O-乙酰基-6-O-苄基-2-脱氧-4-O-[N-6-(4，4-二甲基-2，6-二氧代环亚己基)-己酸-6-基)4-氨苄基]-α-D-吡喃葡糖-MBHA树脂共轭体
将苄基2-乙酰氨基-3-O-乙酰基-6-O-苄基-2-脱氧-4-O-[N-(叔丁基6-(4，4-二甲基-2，6-二氧代环亚己基)-己酸酯-6-基)4-氨苄基]-α-D-吡喃葡糖(290mg，0.33mmol)溶解在CH2Cl2/TFA的混合物(1∶1)中并在室温下搅拌1小时。将反应混合物蒸发，并采用步骤31的方法将化合物结合到MBHA树脂上去。实施例33   带有选择性树脂偶合的Ddh-氨苄基连接体-树脂共轭体 的合成(连接体上有未保护的羟基基团)(图10)33   N-(6-(4，4-二甲基-2，6-二氧代环亚己基)-己酸-6-基)4-氨基苄醇MBHA树脂共轭体
将总胺官能度为0.042mmol的MBHA树脂(100mg)在DMF中溶胀20分钟。然后将树脂用新鲜DMF洗涤，将N-(6-(4，4-二甲基-2，6-二氧代环亚己基)-己酸-6-基)4-氨基苄醇(63mg，4当量)和1-异丁基氧-羰基-2-异丁基氧-1，2-二氢喹啉(EEDQ)(51mg，4当量)加入DMF(5ml)溶液，并将树脂缓慢搅拌24小时。TNBS试验略显正值，所以使用上述条件，进行双偶合，这次产生负的TNBS试验结果。将树脂用DMF(5×10ml)洗涤。实施例34   在活化发生在树脂上时合成Ddh-氨苄基三氯亚氨逐乙酸 酯活化的连接体-树脂共轭体(图10)34  N-(6-(4，4-二甲基-2，6-二氧代环亚己基)-己酸酯-6-基)4-氨苄基三氯亚氨逐乙酸酯-MBHA树脂共轭体
在0℃下搅拌于CH2Cl2(1ml)中用三氯乙腈(50mg，0.33mmol)处理的实施例33的树脂，并加入1，8-二氮杂二环(5.4.0)十一-7-烯(1mg，0.003mmol)。将反应混合物在0℃下搅拌90分钟，在室温下搅拌2小时，然后滤掉树脂并用DMF(5×10ml)洗涤。实施例35   当糖的偶合是最后步骤时，完全保护的糖(糖-连接体键 不在糖苷的位置)-Ddh-树脂共轭体的合成(见32，图4)35  苄基2-乙酰氨基-3-O-乙酰基-6-O-苄基-2-脱氧-4-O-[N-6-(4，4-二甲基-2，6-二氧代环亚己基)-己酸-6-基)4-氨苄基]-α-D-吡喃葡糖苷-MBHA树脂共轭体
在室温下将实施例34的树脂添加到苄基2-乙酰氨基-3-O-乙酰基-6-O-苄基-2-脱氧-α-D-吡喃葡糖苷(75mg，0.16mmol)的CH2Cl2(1ml)溶液中。加入三氟甲烷磺酸的醚溶液(0.1M，60μl)并将混合物搅拌30分钟。反应用三乙胺(120μl)中止并用DMF(5×10ml)洗涤。实施例36   固相合成树脂-Ddh-或Ddh-氨苄基连接体的第一步(图3)36  己二酸MBHA树脂共轭体
将总胺官能度为0.42mmol的MBHA树脂(1.0g)在DMF中溶胀20分钟。然后将树脂用己二酸(1.41g，10mmol)和N，N′-二异丙基碳二亚胺在CH2Cl2(10ml)中的混合物处理60分钟。在DMF中进行第二次偶合得到负的水合茚三酮试验结果。树脂用DMF(5×10ml)洗涤。实施例37   固相合成树脂-Ddh-或Ddh-氨苄基连接体的第二步(图3)37  6-羟基-6-(4，4-二甲基-2，6-二氧代环亚己基)-己酸-MBHA树脂共轭体
向实施例36的树脂中加入5，5-二甲基-1，3-环己二酮(280mg，2.0mmol)、N，N′-二异丙基碳二亚胺(283mg，2.00mmol)和4-二甲基氨基吡啶(244mg，2.00mmol在CH2Cl2(10ml)中的混合物并在室温下搅拌18小时。树脂用DMF(5×10ml)洗涤。实施例38   固相合成完全保护的糖基胺-Ddh-树脂共轭体(见31，图3)38  N-(6-(4，4-二甲基-2，6-二氧代环亚己基)-己酸-6-基)2，3，4，6-四-O-乙酰基-β-D-吡喃葡糖基胺-MBHA树脂共轭体
使实施例37的树脂与2，3，4，6-四-O-乙酰基-β-D-吡喃葡糖基胺(712mg，2.00mmol)在DMF(5ml)中于室温下反应两天。树脂用DMF(5×10ml)洗涤。实施例39   固相合成部分保护的糖基胺-Ddh-树脂共轭体(图3)39    N-(6-(4，4-二甲基-2，6-二氧代环亚己基)-己酸-6-基)2，3，6-三-O-苄基-β-D-吡喃葡糖基胺-MBHA树脂共轭体
使实施例37的树脂与2，3，6-三-O-苄基-β-D-吡喃葡糖基胺(900mg，2.00mmol)在无水乙醇中在回流下反应2小时。树脂用DMF(5×10ml)洗涤。实施例40   固相合成Ddh-氨苄基连接体-树脂共轭体(见33，图10)40  N-(6-(4，4-二甲基-2，6-二氧代环亚己基)-己酸-6-基)4-氨基苄醇-MBHA树脂共轭体
使实施例37的树脂和4-氨基苄醇(246mg，2.00mmol)的混合物在无水乙醇中在回流下搅拌2小时，然后用DMF(5×10ml)洗涤。实施例41   分裂完全保护的糖基胺-Ddh-树脂共轭体提供完全保护的 糖基胺(图11)41  通过NH3处理，分裂N-(6-(4，4-二甲基-2，6-二氧代环亚己基)-己酸-6-基)2，3，4，6-四-O-乙酰基-β-D-吡喃葡糖基胺-MBHA树脂共轭体。
将实施例38的树脂(10mg)用饱和NH3/MeOH溶液(0.2ml)在室温下处理5分钟。滤掉树脂，蒸发滤液，以量化产率得到2，3，4，6-四-O-乙酰基-β-D-吡喃葡糖基胺。实施例42   分裂完全保护的糖基胺-Ddh-树脂共轭体提供完全保护的 还原糖42  通过NH3处理，分裂N-(6-(4，4-二甲基-2，6-二氧代环亚己基)-己酸-6-基)2，3 4，6-四-O-乙酰基-β-D-吡喃葡糖基胺-MBHA树脂共轭体，提供还原碳氢化合物的衍生物(图11)。
将实施例38的树脂(10mg)用饱和NH3/MeOH溶液(0.2ml)在室温下处理5分钟。滤掉树脂，蒸发滤液。将树脂溶解在丙酮/水的10∶1v/v的混合物(0.2ml)中，用乙酸(20μl)酸化并在室温下搅拌1小时。蒸发溶液以量化产率得到2，3，4，6-四-O-乙酰基-β-D-吡喃葡糖。实施例43   完全保护的糖-Ddh连接体-树脂共轭体的碳氢化合物脱 保护(图12)43  N-(6-(4，4-二甲基-2，6-二氧代环亚己基)-己酸-6-基)β-D-吡喃葡糖基胺-MBHA树脂共轭体
将实施例38的树脂与甲醇钠(200mg，3.70mmol)一起在无水甲醇(5ml)中于室温下缓慢搅拌1小时。将树脂用无水甲醇(5×10ml)、DMF(5×10ml)、醚(5×10ml)洗涤并在高真空下干燥1小时，得到附着在树脂上的未保护的β-D-吡喃葡糖基胺。将树脂样品(5mg)用NH3/MeOH(实施例41)分裂，所得产物用TLC和质谱分析，证实了量化的脱保护。实施例44   在固体载体上合成二、三和四糖的文库(library)(图12)44  单、二和三-O-(2，3，4-三-O-苄基α，β-L-吡喃岩藻糖基)(1→2)，(1→3)，(1→4)，(1→6)-[N-(6-(4，4-二甲基-2，6-二氧代环亚己基)-己酸-6-基)]β-D-吡喃葡糖基胺-MBHA树脂共轭体的混合物
将无水的CH2Cl2(10ml)中的实施例43的树脂和乙基2，3，4-三-O-苄基-1-硫代-β-L-吡喃岩藻糖苷(fucopyranoside)(950mg，2mmol)的混合物用二甲基-(甲基硫代)-锍三氟甲烷磺酸盐(DMTST)(1.50mg，5.81mmol)在室温下处理1小时。树脂用无水的CH2Cl2(5×10ml)洗涤。实施例45  从树脂上分裂二、三和四糖的文库提供低聚糖的糖基胺(图12)45  单、二和三-O-(2，3，4-三-O-苄基α，β-L-吡喃岩藻糖基)(1→2)，(1→3)，(1→4)，(1→6)-β-D-吡喃葡糖基胺的混合物
将实施例44的树脂用NH3/MeOH(10ml)处理5分钟。滤掉树脂，蒸发滤液，得到二糖、三糖和四糖的混合物。FAB MS二糖C33H41NO9(595.66)，三糖C60H69NO13(1012.16)，四糖C87H97NO17(1429.66)m/z(％)61 8[Mdi+Na]+(41)，596[Mdi+H]+(57)，1034[Mtri+Na]+(56)，1012[Mtri+H]+(100)，1450[Mtetra+Na]+(8)，1428[Mtetra+H]+(10)。实施例46   第二糖-糖基胺-Ddh连接体-树脂共轭体的合成(图13)46  O-(2，3，6-三-O-苄基-4-O-溴乙酰基-α，β-D-吡喃半乳糖基)(1→4)-[N-(6-(4，4-二甲基-2，6-二氧代环亚己基)-己酸-6-基)]2，3，6-三-O-苄基-β-D-吡喃半乳糖基胺-MBHA树脂共轭体
将实施例39的树脂和乙基2，3，6-三-O-苄基-4-O-溴乙酰基-1-硫代-β-D-吡喃半乳糖苷(1.25g，2mmol)的混合物在无水的CH2Cl2(10ml)中用二甲基-(甲基硫代)-锍三氟甲烷磺酸盐(DMTST)(1.50g，5.81mmol)在室温下处理1小时。树脂用干燥的CH2Cl2(5×10ml)洗涤。实施例47   第二糖-糖基胺-Ddh连接体-树脂共轭体的选择性脱保护(图13)47  O-(2，3，6-三-O-苄基-α，β-D-吡喃半乳糖基)(1→4)-[N-(6-(4，4-二甲基-2，6-二氧代环亚己基)-己酸-6-基)]2，3，6-三-O-苄基-β-D-吡喃半乳糖基胺-MBHA树脂共轭体
将实施例46的树脂与甲醇钠(200mg，3.70mmol)一起在无水甲醇(5ml)中于室温下缓慢搅拌1小时。将树脂用无水甲醇(5×10ml)、DMF(5×10ml)、醚(5×10ml)洗涤并在高真空下干燥1小时，得到附着在树脂上的部分未保护的二糖。将树脂样品(5mg)用NH3/MeOH分裂(实施例41)，所得产物用TLC和质谱分析，证实了量化的脱保护。实施例48   第二糖-糖基胺-Ddh连接体-树脂共轭体的分裂提供二糖 的糖基胺(图13)48  O-(2，3，6-三-O-苄基-α，β-D-吡喃半乳糖基)(1→4)-2，3，6-三-O-苄基-β-D-吡喃半乳糖基胺
将实施例47的树脂用NH3/MeOH(10ml)处理5分钟。滤掉树脂，蒸发滤液，得到二糖的端基异构的混合物。FAB MS C54H59NO10(882.01)m/z(％)904[M+Na]+(100)，880[M+H]+(41)。实施例49   碳氢化合物-Ddh-氨苄基连接体-树脂共轭体的分裂提供 氨苄基保护的碳氢化合物(图14)49  4-氨苄基β-D-吡喃葡糖苷
将实施例29的树脂用NH3/MeOH(5ml)处理过夜。滤掉树脂，蒸发滤液，得到4-氨苄基β-D-吡喃葡糖苷。Rf0.55(CHCl3/MeOH/H2O 10∶4∶0.5v/v/v)；FAB MS C13H19NO5(269.28)m/z(％)402[M+Cs]+(25)，292[M+Na]+(50)，270[M+H]+(18)。实施例50   4-氨苄基保护的碳氢化合物的脱保护(图14)50  β-D-吡喃葡糖
在室温下在Pd/C(10％)(50mg)上于MeOH(5ml)中氢化4-氨苄基β-D-吡喃葡糖苷(110mg，0.40mmol)4小时。滤掉催化剂并蒸发滤液以定量产率得到D-葡萄糖。实施例51   低聚糖的固定(图15)51  用6-羟基-6-(4，4-二甲基-2，6-二氧代环亚己基)-己酸-MBHA树脂共轭体制取O-[O-(2，3，4，6-四-O-乙酰基-β-D-吡喃葡糖基(1→4))-2，3，6-三-O-乙酰基-β-D-吡喃葡糖基(1→4)]-2，3，6-三-O-乙酰基-β-D-吡喃葡糖基胺
使实施例37的树脂与O-[O-(2，3，4，6-四-O-乙酰基-β-D-吡喃葡糖基(1→4))-2，3，6-三-O-乙酰基-β-D-吡喃葡糖基(1→4)]-2，3，6-三-O-乙酰基-β-D-吡喃葡糖基胺(1.80g，2.00mmol)在DMF(5ml)中于室温下反应2天。树脂用DMF(5×10ml)洗涤。实施例52   氨基糖-Ddh-树脂共轭体的合成(图16)52  N-(6-(4，4-二甲基-2，6-二氧代环亚己基)-己酸-6-基)D-葡糖胺-MBHA树脂共轭体
使实施例37的树脂与葡糖胺(350mg，2mmol)在DMF(20ml)中于室温下搅拌2天。滤掉树脂，用DMF/水4∶1(5×10ml)、DMF(5×10ml)、甲醇(5×10ml)、醚(5×10ml)洗涤，并在高真空下干燥过夜。
对本领域的熟练技术人员来说，很明显，虽然为了清楚和理解，对本发明进行了一定程度的详细描述，但是可以对此处所描述的实施方案和方法作出许多种调整和改变而不脱离此发明所公开的发明概念的范围。
下面列出的是所引用的文献，这些文献通过此引用文献而被并入本文。
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Claims (17)

1、一种具有如通式I的化合物：
Figure C9719916700021
其中，R1是氢或C1-4烷基；
R2是氢或C1-4烷基；
R′是OH，NHC6H4CH2OH，NHC6H4CH2ONHCCl3，氨基糖，葡基胺，或是低聚糖的葡基胺；通过烷基-，取代烷基-，芳基-，取代芳基-，环烷基-，或取代环烷氨基-偶合的单或低聚糖；或通过羧基烷基-，取代羧基烷基-，羧基芳基-，取代羧基芳基-，羧基环烷基-，取代羧基环烷基-氨基基团，NHC6H4CH2O-或NHC6H4CH2COO-偶合的单或低聚糖；
R″是选择性地直接偶合在树脂上、或选择性地通过一官能团偶合在树脂上的烷基-，取代烷基-，芳基-，取代芳基-，环烷基-，或取代环烷基间隔基团，所述官能团提供了选自于-CONH-，-O-，-S-，-COO-，-CH＝N-，-NHCONH-，-NHCSNH-和-NHNH-的共价连接。
2、如权利要求1所述的化合物，其中R1和R2均是甲基。
3、如权利要求1所述的化合物，其中R′是低聚糖-O-CH2-(C6H4)-NH，单糖-O-CH2-(C6H4)-NH，氨基-低聚糖-CO2CH2-(C6H4)NH，或氨基-单糖-CO2CH2-(C6H4)-NH基团。
4、如权利要求1所述的化合物，其中通式I是取代的Dde，取代的DdeOH或取代的ODMab。
5、如权利要求1所述的化合物，其中R′是单糖或通过NHC6H4CH2O-偶合的低聚糖，氨基糖或葡基胺。
6、如权利要求1所述的化合物，其中R″上的官能团是羧基。
7、如权利要求1所述的化合物，该化合物是6-羟基-6-(4，4-二甲基-2，6-二氧代环亚己基)-己酸或其酯。
8、如权利要求7所述的化合物，其中的酯是苄酯，甲酯或叔丁酯。
9、一种用于固相合成或联合合成低聚糖的试剂盒，其包括：如权利要求1所述的通式I的化合物和一种或多种保护剂，脱保护剂，或适于固相或联合合成的溶剂。
10、一种固相合成低聚糖的方法，其包括依次将单-或低聚糖基团连接至如权利要求1所述的通式I的化合物上，其中R″是直接偶合在树脂上、或通过一官能团偶合在所述树脂上的烷基-，取代烷基-，芳基-，取代芳基-，环烷基-，或取代环烷基间隔基团，所述官能团提供了选自于-CONH-，-O-，-S-，-COO-，-CH＝N-，-NHCONH-，-NHCSNH-和-NHNH-的共价连接。
11、一种合成如权利要求1所述的通式I的化合物的方法，其中R″是选择性地通过羧基偶合在树脂上的烷基，该方法包括步骤：用二羧酸或其单酯C-酰化1，3-二氧代环己烷或5，5-二烷基-1，3-二氧代环己烷，和选择性地将C-酰化反应的产物与4-氨基苄醇反应以形成4-氨基苄衍生物。
12、如权利要求11所述的方法，其中的C-酰化反应是被碳二亚胺活化的且是被N，N′-二甲基氨基吡啶所催化的。
13、如权利要求11所述的方法，其中5，5-二烷基-1，3-二氧代环己烷是5，5-二甲基-1，3-环己二酮。
14、如权利要求11所述的方法，其中二羧酸是己二酸。
15、一种合成如权利要求1所述的通式I的化合物的方法，其中R″是选择性地通过羧基偶合在树脂上的烷基，该方法包括步骤：在合适的溶剂中溶胀树脂，用二羧酸处理溶胀的树脂以制得一产物，并将所得的产物与1，3-二氧代环己烷或5，5-二烷基-1，3-二氧代环己烷反应。
16、如权利要求15所述的方法，其中5，5-二烷基-1，3-二氧代环己烷是5，5-二甲基-1，3-二氧代环己烷。
17、如权利要求15所述的方法，其中二羧酸是己二酸。
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