CN112029674A - 改善肠道微生态缓解便秘的凝结芽孢杆菌bc01及应用 - Google Patents

改善肠道微生态缓解便秘的凝结芽孢杆菌bc01及应用 Download PDF

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Abstract

本发明筛选出了的一株具备优良益生特性的凝结芽孢杆菌BC01，本发明筛选出的凝结芽孢杆菌BC01有着在改善肠道菌群丰度以及缓解便秘症状方面的优良特性，本发明利用凝结芽孢杆菌BC01增加肠道菌群丰度以及缓解便秘症状。本发明还提供了从含凝结芽孢杆菌的样本中筛选出凝结芽孢杆菌BC01以及进行培养的方法。本发明提供的凝结芽孢杆菌BC01在每日晚上睡觉前摄入量为20亿CFU‑50亿CFU时，连续摄入7‑10天，就可以很有效的缓解便秘症状且可以显著提高肠道菌群的丰度，效果强于现有乳酸菌类益生菌。

Description

改善肠道微生态缓解便秘的凝结芽孢杆菌BC01及应用
技术领域
本发明属于微生物领域，特别涉及凝结芽孢杆菌。
背景技术
随着科学家对人体共生微生物的研究日益加深，现在科学家们已经普遍确定人是由自身细胞与共生微生物组成的超级生命体。人体的健康是由自身细胞及其共生微生物共同决定的。肠道菌群是人体最大的共生微生态菌群，众多科学研究已经证实，肠道菌群的失衡与多种疾病(比如，肠炎、便秘、腹泻、炎症、精神疾病等)有着关联。因此，维护肠道微生态平衡对维持人体健康有着重要的意义。
饮食结构可以直接影响肠道菌群的组成和丰度，现在已经普遍采用饮食、益生菌、益生元、粪便移植等方式来对肠道菌群进行干预。这些干预手段各有其优点和缺陷。当采用益生菌对肠道菌群进行干预的时候，与益生菌菌株的自有特性紧密相关。因此，即便是同一菌种，但不同菌株对人体的健康功效可能都有着截然不同甚至相反的效果。比如，FatihOzogul[1]等就列举除了嗜酸乳杆菌的8株不同菌株，它们产生不同的细菌素，有着不同的抑菌谱,对人体有着不同的健康功能。
因此，筛选和纯化各类具有各自特性的益生菌菌株并且将之运用于人体健康领域也是益生菌产业的核心技术和竞争力。
肠道菌群紊乱或者功能异常会导致便秘、腹泻或者肠易激综合征等疾病。对于肠道便秘的资料，医学上普遍采用改善肠神经药物、泻药或者生物疗法作为治疗的主要方法。以乳酸菌为代表的的益生菌产品虽然也用于治疗便秘，但大部分此类益生菌单独使用的时候效果都不如预期，因此常常作为辅助治疗手段。
发明内容
本发明筛选出了的一株具备优良益生特性的凝结芽孢杆菌BC01，本发明筛选出的凝结芽孢杆菌BC01有着在改善肠道菌群丰度以及缓解便秘症状方面的优良特性，本发明利用凝结芽孢杆菌BC01增加肠道菌群丰度以及缓解便秘症状。本发明提供的凝结芽孢杆菌BC01在每日晚上睡觉前摄入量为20亿CFU-50亿CFU时，连续摄入7-10天，就可以很有效的缓解便秘症状且可以显著提高肠道菌群的丰度，效果强于现有乳酸菌类益生菌。
根据本发明的一方面，提供了一种凝结芽孢杆菌BC01，该凝结芽孢杆菌BC01为保藏编号：CCTCC NO:M2017813的菌株。
根据本发明的一方面，上述凝结芽孢杆菌BC01的16SrDNA测序结果如SEQ IDNo.1。
16s rDNA是菌株的保守序列，同一个种的菌保守序列大多大部分相同。
基因组测序显示本发明筛选出的这株菌与市售其他的凝结芽孢杆菌菌株不同。因此，发明的这株菌在缓解便秘和增加肠道菌群丰度方面的优良特性。本发明的菌株已经进行了专利保藏。
根据本发明的一方面，还提供了一种凝结芽孢杆菌BC01，该凝结芽孢杆菌BC01具备如下形态特征：呈细长杆状、革兰氏染色阳性、形态特征芽孢端生，有的芽孢会脱落。
根据本发明的一方面，还提供了一种凝结芽孢杆菌BC01，该凝结芽孢杆菌BC01还具有如下形态特征：平板形态为乳白色菌落、边缘整齐，大小约2-4mm。
根据本发明的一方面，还提供了一种凝结芽孢杆菌BC01，该芽孢杆菌BC01具有如下生理生化特征：
接触酶实验阳性；
氧化酶实验阴性；
VP实验阳性；
产酸实验：D-甘露醇阴性；
产酸实验：葡萄糖阳性；
淀粉水解阳性；
利用盐类：柠檬酸盐阴性；
利用盐类：丙酸盐阴性；
7％NaCl生长阴性；
最高生长温度为60℃；
明胶液化阴性。
根据本发明的一方面，还提供了一种凝结芽孢杆菌BC01的制备方法，该凝结芽孢杆菌BC01制备方法为如下两种制备方法中任意一种：
方法1步骤如下：在无菌瓶中加入含菌样品无菌生理盐水制备成含菌原液，然后将原液梯度稀释101倍、102倍、103倍、104倍、105倍、106倍、107倍、108倍、109倍；将上诉原液和各稀释倍数的稀释液涂布于凝结芽孢杆菌富集固体培养基上，在恒温箱中40℃培养48小时，挑选分离充分、长势良好的单菌落再次接种于凝结芽孢杆菌富集液体培养基上，在摇床中以220rpm的转速40℃培养24小时；将液体培养基以10000rpm的转速离心，收集菌泥进行16SrDNA分析，通过NCBI比对后鉴定出凝结芽孢杆菌，再对纯种进行保藏进行进一步的生理生化、耐抗生素、耐胃酸小肠液等试验分析；
或方法2：在无菌瓶中加入含菌样品无菌生理盐水制备成含菌原液，直接将含菌原液接种于凝结芽孢杆菌富集液体培养基中，在摇床上以220rpm的转速40℃培养48小时。然后将液体培养液80℃处理20分钟，再将液体培养液涂布于凝结芽孢杆菌富集固体培养基中，挑选充分分离，长势良好的菌落接种进凝结芽孢杆菌富集固体培养斜面在恒温箱中40℃培养48小时。将获得的菌泥先进行16S rDNA分析，通过NCBI比对后鉴定出凝结芽孢杆菌，再对纯种进行保藏进行进一步的生理生化、耐抗生素、耐胃酸小肠液等试验分析。
根据本发明的一方面，还提供了凝结芽孢杆菌BC01的应用，本发明的凝结芽孢杆菌BC01作为改善肠道微生态或缓解功能性便秘的药物、食品或者保健品。
根据本发明的一方面，还提供了凝结芽孢杆菌BC01的非治疗用途的应用，本发明的凝结芽孢杆菌BC01用于改善肠道微生态、缓解便秘症状。
根据本发明的一方面，还提供了一种凝结芽孢杆菌BC01制剂，该凝结芽孢杆菌BC01的制剂含有本发明的凝结芽孢杆菌BC01。
根据本发明的一方面，还提供了一种凝结芽孢杆菌BC01制剂，上述凝结芽孢杆菌BC01制剂含有20亿CFU～50亿CFU的所述凝结芽孢杆菌BC01。
本发明还提供一种凝结芽孢杆菌BC01的纯种制剂，每日睡前单独摄入20亿CFU-50亿CFU该菌株的纯种制剂，连续摄入7-10天，就可以有效缓解功能性便秘，提高肠道菌群丰度指数。制剂类型为药学上可接受的任意制剂类型。
附图说明
图1、为本发明其一个实施例中营养体形态的凝结芽孢杆菌BC01的显微照片；
图2、为本发明其中一个实施例中芽孢体形态的凝结芽孢杆菌BCO1的显微照片；
图3、为本发明其中一个实施例中测序比对结果图；
图4、为本发明其中一个实施例中凝结芽孢杆菌BC01对各种主要抗生素的敏感性试验结果图；
图5、为本发明其中一个实施例中凝结芽孢杆菌BC01的抗逆性能测试结果图；
图6、为本发明其中一个实施例中部分试食凝结芽孢杆菌BC01规格利用二代测序技术进行肠道菌群分析后，无人工干预的算法自动归类结果图；
图7、为本发明其中一个实施例中每天摄入20亿CFU的凝结芽孢杆菌BC01可以有效提高食用人群的肠道菌群丰度(n＝15)结果图。
具体实施方式
下述的实施例是为了进一步说明本发明的一些优选实施例，并非全部实施例。本领域专业人员在没有进行创造性劳动的前提下做出的基于本发明的其他实施例，都属于本发明的权利保护范围。下面将结合附图对本发明作进一步的说明。
实施例1凝结芽孢杆菌BC01
本发明提供的凝结芽孢杆菌BC01保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号：CCTCCNO:M2017813。
实施例2上述凝结芽孢杆菌BC01的活菌制剂制备
2.1采集可能含有凝结芽孢杆菌的样本，样本来源于土壤、发酵食品、植物、人体肠道等，然后将样本置于灭菌后的无菌瓶中，然后采取如下两种方法获得纯种菌株：
2.1.1获得纯种菌株方法1：在无菌瓶中加入含菌样品和100mL无菌生理盐水制备成含菌原液，然后将原液梯度稀释101倍、102倍、103倍、104倍、105倍、106倍、107倍、108倍、109倍。将上诉原液和各稀释倍数的稀释液涂布于凝结芽孢杆菌富集固体培养基上，在恒温箱中40℃培养48小时，挑选分离充分、长势良好的单菌落再次接种于凝结芽孢杆菌富集液体培养基上，在摇床中以220rpm的转速40℃培养24小时。将液体培养基以10000rpm的转速离心，收集菌泥进行16S rDNA分析，通过NCBI比对后鉴定出凝结芽孢杆菌，再对纯种进行保藏进行进一步的生理生化、耐抗生素、耐胃酸小肠液等试验分析。
2.1.2获得纯种菌株方法2：在无菌瓶中加入含菌样品和100mL无菌生理盐水制备成含菌原液，直接将含菌原液接种于凝结芽孢杆菌富集液体培养基中，在摇床上以220rpm的转速40℃培养48小时。然后将液体培养液80℃处理20分钟，再将液体培养液涂布于凝结芽孢杆菌富集固体培养基中，挑选充分分离，长势良好的菌落接种进凝结芽孢杆菌富集固体培养斜面在恒温箱中40℃培养48小时。将获得的菌泥先进行16S rDNA分析，通过NCBI比对后鉴定出凝结芽孢杆菌，再对纯种进行保藏进行进一步的生理生化、耐抗生素、耐胃酸小肠液等试验分析。
2.2凝结芽孢杆菌富集液体培养基的组成为(g/L)：玉米淀粉10，牛肉膏10，酵母粉OXIDE 5，氯化钠5。用0.1mol/L氢氧化钠或0.1mol/L盐酸调PH值6.0-6.2(固体培养基在此基础上添加2％的琼脂)
2.3获得凝结芽孢杆菌的纯种以后，再利用发酵罐扩增培养，通过发酵过程调控手段待发酵液中凝结芽孢杆菌的OD600大于45，芽孢率大于80％以后，10000rpm离心，收集菌泥，将收集到的菌泥以生理盐水适当稀释后利用喷雾干燥、沸腾床干燥以及真空干燥等方法获得凝结芽孢杆菌的活菌粉，检测活菌粉的芽孢率以及活菌含量，添加适量的麦芽糊精、低聚异麦芽糖等辅料将凝结芽孢杆菌活菌粉制备成不同活菌浓度的制剂。
2.4凝结芽孢杆菌的扩增培养基(g/L)为：葡萄糖5，玉米淀粉10，牛肉膏10，酵母粉OXIDE 5，硫酸镁·7H2O 0.4，硫酸锰·1H2O 0.1，硫酸亚铁·7H2O 0.1，氯化钠5。
2.5凝结芽孢杆菌的扩增培养条件为：发酵温度40℃，转速300rpm，DO＞80％，pH5.6-6.0。
含菌样品来源于发酵食品、土壤或植物。
实施例3形态、生理生化鉴定
本发明所述的凝结芽孢杆菌BC01具备如下形态特征如图1和2所示(图1：营养体、图2：芽孢体)：
细菌呈细长杆状、革兰氏染色阳性、芽孢端生，芽孢态犹如小“羽毛球拍”，有的芽孢会脱落
平板形态：乳白色菌落、边缘整齐，大小约2-4mm。
1、凝结芽孢杆菌BC01的生理生化鉴定结果如下(表1)：
Figure BDA0002383145980000051
Figure BDA0002383145980000061
表1：凝结芽孢杆菌的生理生化鉴定结果。“+”：阳性，“-”：阴性
实施例4
本发明的凝结芽孢杆菌BC01菌株的16SrDNA鉴定Sanger测序如下(SEQ ID No.1)
5’-ATTGTCTCTTCGGCGGCTGGCTCCGTAAAGGTTACCTCACCGACTTCGGGTGTTACAAACTCTCGTGGTGTGACGGGCGGTGTGTACAAGGCCCGGGAACGTATTCACCGCGGCATGCTGATCCGCGATTACTAGCGATTCCGGCTTCATGCAGGCGGGTTGCAGCCTGCAATCCGAACTGGGAATGGTTTTCTGGGATTGGCTTAACCTCGCGGTCTCGCAGCCCTTTGTACCATCCATTGTAGCACGTGTGTAGCCCAGGTCATAAGGGGCATGATGATTTGACGTCATCCCCACCTTCCTCCGGTTTGTCACCGGCAGTCACCTTAGAGTGCCCAACTGAATGCTGGCAACTAAGGTCAAGGGTTGCGCTCGTTGCGGGACTTAACCCAACATCTCACGACACGAGCTGACGACAACCATGCACCACCTGTCACTCTGTCCCCCGAAGGGGAAGGCCCTGTCTCCAGGGAGGTCAGAGGATGTCAAGACCTGGTAAGGTTCTTCGCGTTGCTTCGAATTAAACCACATGCTCCACCGCTTGTGCGGGCCCCCGTCAATTCCTTTGAGTTTCAGCCTTGCGGCCGTACTCCCCAGGCGGAGTGCTTAATGCGTTAGCTGCAGCACTAAAGGGCGGAAACCCTCTAACACTTAGCACTCATCGTTTACGGCGTGGACTACCAGGGTATCTAATCCTGTTTGCTCCCCACGCTTTCGCGCCTCAGCGTCAGTTACAGACCAGAGAGCCGCCTTCGCCACTGGTGTTCCTCCACATCTCTACGCATTTCACCGCTACACGTGGAATTCCACTCTCCTCTTCTGCACTCAAGCCTCCCAGTTTCCAATGACCGCTTGCGGTTGAGCCGCAAGATTTCACATCAGACTTAAGAAGCCGCCTGCGCGCGCTTTACGCCCAATAATTCCGGACAACGCTTGCCACCTACGTATTACCGCGGCTGCTGGCACGTAGTTAGCCGTGGCTTTCTGGCCGGGTACCGTCAAGGCGCCGCCCTGTTCGAACGGCACTTGTTCTTCCCCGGCAACAGAGTTTTACGACCCGAAGGCCTTCTTCACTCACGCGGCGTTGCTCCGTCAGACTTTCGTCCATTGCGGAAGATTCCCTACTGCTGCCTCCCGTAGGAGTTTGGGCCGTGTCTCAGTCCCAATGTGGCCGATCACCCTCTCAGGTCGGCTACGCATCGTTGCCTTGGTGAGCCGTTACCCCACCAACTAGCTAATGCGCCGCGGGCCCATCTGTAAGTGACAGCAGAAGCCGTCTTTCCTTTTTCCTCCATGCGGAGGAAAAAACTATCCGGTATTAGCCCCGGTTTCCCGGCGTTATCCCGATCTTACAGGCAGGTTGCCCACGTGTTACTCACCCGTCCGCCGCTAACCTTTTAAAAGCAAGCTTTAAAAGGTCCGCACGACTGCATGTATAGG-3’。
序列比对结果如图3，显示从测序比对结果看出BC01菌株为凝结芽孢杆菌。
实施例5生物安全性测试
对凝结芽孢杆菌BC01进行的抗生素敏感性试验表明，凝结芽孢杆菌BC01对受试的22种抗生素中的18种高度以上敏感，表明凝结芽孢杆菌BC01具备极高的生物安全性(如图4)。
实施例6抗逆性能测试
如图5所示，凝结芽孢杆菌BC01还拥有极强的抗逆性能，其活菌制剂在37摄氏度处理10天存活率大于93％。在体外模拟连续通过胃酸与小肠液的测试中，其存活率达到了惊人的100％(胃酸环境pH 2.0,按照中国药典的方法加入胃蛋白酶；小肠液pH6.8,按照中国药典的方法加入了胰蛋白酶以及胆盐)。
实施例7凝结芽孢杆菌BC01用于缓解便秘
申请人对每日睡前食用凝结芽孢杆菌BC01 20亿CFU的人群发出了256份调查，通过收回的有效调查问卷表明，根据罗马III便秘诊断标准，每日食用20亿CFU的凝结芽孢杆菌BC01，其便秘症状缓解率达到了83％，胃肠道生活质量指数提高了72.2％(见表2)
Figure BDA0002383145980000071
表2：每日食用20亿CFU凝结芽孢杆菌活菌粉BC01对便秘及相关胃肠道症状的改善备注：
a：指符合功能性罗马III便秘诊断标准的食用者；
b:根据《Bristol粪便性状评分》统计，分别统计食用本品前一周每次排便的粪便性状评分以及食用本品开始到食用20天的每次排便性状评分。表格里为统计平均值。
c:指按照《wexner便秘评分系统》进行的调查统计。这里的有效指按照我们的调查要求同时填写了食用前和食用后《wexner便秘评分系统》的顾客。这里填写的评分分别为食用本品前的分值和食用本品1周、2周和3周的平均值。
d:指按《胃肠道生活质量指数(GIQLI)》表统计的有效调查数据。有效指按照我们的调查要求同时填写了食用前和食用后《胃肠道生活质量指数(GIQLI)》的顾客。食用后是指食用本品连续10天后的胃肠道感受。
实施例8凝结芽孢杆菌BC01提高肠道菌群丰度
利用第二代基因测序技术，对部分每日食用20亿CFU凝结芽孢杆菌BC01的顾客进行的肠道菌群丰度分析表明，每日食用20亿CFU的凝结芽孢杆菌可以显著提高食用者的肠道菌群丰度(如图6：由二代测序归类算法对食用者的肠道菌群数据进行了无人工干预的算法自动归类结果图，证明了本发明采用的二代测序技术的有效性)(如图7：利用二代测序技术对15位每日食用20亿CFU凝结芽孢杆菌BC01的顾客进行了肠道菌群丰度指数分析，结果表明，食用凝结芽孢杆菌BC01可以有效提高肠道菌群丰度)。
基于以上所展现的凝结芽孢杆菌BC01的优良特性及益生功效，证明本发明提供的分离方法、菌株可以有效改善便秘和提高肠道菌群丰度。本发明提供了制备凝结芽孢杆菌的活菌粉的方法，可以通过添加辅料的方法，辅料可以是淀粉、菊粉、低聚异麦芽糖等，灵活的将制备的活菌粉稀释成不同的活菌浓度(单位：CFU/克)，可以提供不同规格的产品，根据不同的产品规格可以制定不同的摄入方法，只要保证每日的摄入量大于20亿CFU，即可起到改善便秘以及提高肠道菌群丰度，改善肠道菌群平衡的作用。
上述的实施例是为了进一步说明本发明的一些优选实施例，并非全部实施例。本领域专业人员在没有进行创造性劳动的前提下做出的基于本发明的其他实施例，都属于本发明的权利保护范围。
序列表
<110> 善恩康生物科技（苏州）有限公司
<120> 改善肠道微生态缓解便秘的凝结芽孢杆菌BC01及应用
<141> 2019-12-20
<160> 1
<170> SIPOSequenceListing 1.0
<210> 1
<211> 1440
<212> DNA
<213> Bacillus coagulans
<400> 1
attgtctctt cggcggctgg ctccgtaaag gttacctcac cgacttcggg tgttacaaac 60
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gcgcgcttta cgcccaataa ttccggacaa cgcttgccac ctacgtatta ccgcggctgc 960
tggcacgtag ttagccgtgg ctttctggcc gggtaccgtc aaggcgccgc cctgttcgaa 1020
cggcacttgt tcttccccgg caacagagtt ttacgacccg aaggccttct tcactcacgc 1080
ggcgttgctc cgtcagactt tcgtccattg cggaagattc cctactgctg cctcccgtag 1140
gagtttgggc cgtgtctcag tcccaatgtg gccgatcacc ctctcaggtc ggctacgcat 1200
cgttgccttg gtgagccgtt accccaccaa ctagctaatg cgccgcgggc ccatctgtaa 1260
gtgacagcag aagccgtctt tcctttttcc tccatgcgga ggaaaaaact atccggtatt 1320
agccccggtt tcccggcgtt atcccgatct tacaggcagg ttgcccacgt gttactcacc 1380
cgtccgccgc taacctttta aaagcaagct ttaaaaggtc cgcacgactg catgtatagg 1440

Claims (10)

1.凝结芽孢杆菌BC01，其特征在于，所述凝结芽孢杆菌BC01为保藏编号：CCTCC NO:M2017813的菌株。
2.根据权利要求1所述的凝结芽孢杆菌BC01，其特征在于，所述凝结芽孢杆菌BC01的16SrDNA测序结果如SEQ ID No.1。
3.根据权利要求1所述的凝结芽孢杆菌BC01，其特征在于，所述凝结芽孢杆菌BC01具备如下形态特征：呈细长杆状、革兰氏染色阳性、形态特征芽孢端生，有的芽孢会脱落。
4.根据权利要求3所述的凝结芽孢杆菌BC01，其特征在于，所述凝结芽孢杆菌BC01还具有如下形态特征：平板形态为乳白色菌落、边缘整齐，大小约2-4mm。
5.根据权利要求1所述的凝结芽孢杆菌BC01，其特征在于，所述结芽孢杆菌BC01具有如下生理生化特征：
接触酶实验阳性；
氧化酶实验阴性；
VP实验阳性；
产酸实验：D-甘露醇阴性；
产酸实验：葡萄糖阳性；
淀粉水解阳性；
利用盐类：柠檬酸盐阴性；
利用盐类：丙酸盐阴性；
7％NaCl生长阴性；
最高生长温度为60℃；
明胶液化阴性。
6.根据权利要求1所述的凝结芽孢杆菌BC01的制备方法，所述凝结芽孢杆菌BC01制备方法为如下两种制备方法中任意一种：
方法1步骤如下：在无菌瓶中加入含菌样品和无菌生理盐水制备成含菌原液，然后将原液梯度稀释101倍、102倍、103倍、104倍、105倍、106倍、107倍、108倍、109倍；将上诉原液和各稀释倍数的稀释液涂布于凝结芽孢杆菌富集固体培养基上，在恒温箱中40℃培养48小时，挑选分离充分、长势良好的单菌落再次接种于凝结芽孢杆菌富集液体培养基上，在摇床中以220rpm的转速40℃培养24小时；将液体培养基以10000rpm的转速离心，收集菌泥进行16SrDNA分析，通过NCBI比对后鉴定出凝结芽孢杆菌，再对纯种进行保藏进行进一步的生理生化、耐抗生素、耐胃酸小肠液试验分析；
或方法2：在无菌瓶中加入含菌样品和无菌生理盐水制备成含菌原液，直接将含菌原液接种于凝结芽孢杆菌富集液体培养基中，在摇床上以220rpm的转速40℃培养48小时；然后将液体培养液80℃处理20分钟，再将液体培养液涂布于凝结芽孢杆菌富集固体培养基中，挑选充分分离，长势良好的菌落接种进凝结芽孢杆菌富集固体培养斜面在恒温箱中40℃培养48小时；将获得的菌泥先进行16S rDNA分析，通过NCBI比对后鉴定出凝结芽孢杆菌，再对纯种进行保藏进行进一步的生理生化、耐抗生素、耐胃酸小肠液试验分析。
7.权利要求1所述的凝结芽孢杆菌BC01的应用，其特征在于，所述凝结芽孢杆菌BC01作为改善肠道微生态或缓解功能性便秘的药物、食品或者保健品。
8.权利要求1所述的凝结芽孢杆菌BC01的非治疗用途的应用，其特征在于，所述凝结芽孢杆菌BC01用于改善肠道微生态、缓解便秘症状。
9.一种凝结芽孢杆菌BC01制剂，其特征在于，所述凝结芽孢杆菌BC01的制剂含有权利要1～5任意所述的凝结芽孢杆菌BC01。
10.根据权利要求1所述的凝结芽孢杆菌BC01制剂，其特征在于所述，凝结芽孢杆菌BC01制剂含有20亿CFU～50亿CFU的所述凝结芽孢杆菌BC01。
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