CN111944753A - 一种用于间充质干细胞的培养基及培养方法 - Google Patents

一种用于间充质干细胞的培养基及培养方法 Download PDF

Info

Publication number
CN111944753A
CN111944753A CN202010894856.3A CN202010894856A CN111944753A CN 111944753 A CN111944753 A CN 111944753A CN 202010894856 A CN202010894856 A CN 202010894856A CN 111944753 A CN111944753 A CN 111944753A
Authority
CN
China
Prior art keywords
culture medium
mesenchymal stem
stem cells
culture
fisetin
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN202010894856.3A
Other languages
English (en)
Other versions
CN111944753B (zh
Inventor
王忠伟
李巍
符春娱
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Hainan Jimin Boao International Hospital Co ltd
Original Assignee
Hainan Jimin Boao International Hospital Co ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Hainan Jimin Boao International Hospital Co ltd filed Critical Hainan Jimin Boao International Hospital Co ltd
Priority to CN202010894856.3A priority Critical patent/CN111944753B/zh
Publication of CN111944753A publication Critical patent/CN111944753A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN111944753B publication Critical patent/CN111944753B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Images

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
    • C12N5/06—Animal cells or tissues; Human cells or tissues
    • C12N5/0602—Vertebrate cells
    • C12N5/0652—Cells of skeletal and connective tissues; Mesenchyme
    • C12N5/0662—Stem cells
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N5/00—Undifferentiated human, animal or plant cells, e.g. cell lines; Tissues; Cultivation or maintenance thereof; Culture media therefor
    • C12N5/06—Animal cells or tissues; Human cells or tissues
    • C12N5/0602—Vertebrate cells
    • C12N5/0652—Cells of skeletal and connective tissues; Mesenchyme
    • C12N5/0662—Stem cells
    • C12N5/0667—Adipose-derived stem cells [ADSC]; Adipose stromal stem cells
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2500/00—Specific components of cell culture medium
    • C12N2500/30—Organic components
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2500/00—Specific components of cell culture medium
    • C12N2500/30—Organic components
    • C12N2500/32—Amino acids
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2500/00—Specific components of cell culture medium
    • C12N2500/30—Organic components
    • C12N2500/38—Vitamins
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2501/00—Active agents used in cell culture processes, e.g. differentation
    • C12N2501/06—Anti-neoplasic drugs, anti-retroviral drugs, e.g. azacytidine, cyclophosphamide
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2501/00—Active agents used in cell culture processes, e.g. differentation
    • C12N2501/10—Growth factors
    • C12N2501/11—Epidermal growth factor [EGF]
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2501/00—Active agents used in cell culture processes, e.g. differentation
    • C12N2501/999—Small molecules not provided for elsewhere
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
    • Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Developmental Biology & Embryology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)

Abstract

本发明公开了一种用于间充质干细胞的培养基及培养方法，本发明培养基中包括木犀草素、漆黄素、大黄素、1,2,3,6‑四‑O‑没食子酰‑β‑D‑葡萄糖、青霉素、链霉素、L‑抗坏血酸、L‑谷氨酰胺、表皮生长因子等成分。使用本发明培养基，出现明显钙结节时间被有效缩短至少5d，同一培养时间骨桥蛋白mRNA表达显著增高，脂肪间充质干细胞成骨分化效率提高。

Description

一种用于间充质干细胞的培养基及培养方法
技术领域
本发明涉及细胞生物学技术领域，具体涉及一种用于间充质干细胞的培养基及其制备方法。
背景技术
间充质干细胞是一类存在于多种组织(如骨髓、脐带血和脐带组织、胎盘组织、脂肪组织等)，具有多向分化潜力，非造血干细胞的成体干细胞，在一定条件下可分化为脂肪细胞、成骨细胞、软骨细胞、神经细胞、心肌细胞、内皮细胞等。间充质干细胞作为多种疾病细胞治疗的细胞来源，已经成为干细胞领域研究的热点。目前对于间充质干细胞的成骨分化培养尚且缺少简单、高效的培养基和培养方法。
发明内容
鉴于现有技术的不足，本发明提供一种用于间充质干细胞的培养基及其制备方法。
本发明方案包括以下方面：
一种用于间充质干细胞的培养基，包括以下组份：
木犀草素15～30μg/mL、漆黄素10～22μg/mL、大黄素15～30μg/mL、1,2,3,6-四-O-没食子酰-β-D-葡萄糖5～10μg/mL、青霉素20～30U/mL、链霉素50～60mg/mL、L-抗坏血酸0.02～0.04mM、L-谷氨酰胺3～6mM、表皮生长因子10～16ng/mL、丙酮酸钠1～2mM，余量是DMEM低糖培养基。
优选的，所述的用于间充质干细胞的培养基中，木犀草素为16～23μg/mL，漆黄素为18～20μg/mL，大黄素为22～25μg/mL，1,2,3,6-四-O-没食子酰-β-D-葡萄糖为7～8μg/mL。
优选的，所述培养基包括以下组份：
木犀草素16μg/mL、漆黄素20μg/mL、大黄素22μg/mL、1,2,3,6-四-O-没食子酰-β-D-葡萄糖7μg/mL、青霉素30U/mL，链霉素60mg/mL、L-抗坏血酸0.04mM、L-谷氨酰胺6mM、表皮生长因子16ng/mL、丙酮酸钠2mM，余量是DMEM低糖培养基。
优选的，所述间充质干细胞为脂肪间充质干细胞。
另一方面，本发明还提供了所述培养基进行间充质干细胞培养的方法，包括以下步骤：
(1)取间充质干细胞，用培养基培养，所述培养基为：木犀草素15～30μg/mL、1,2,3,6-四-O-没食子酰-β-D-葡萄糖5～10μg/mL、青霉素20～30U/mL、链霉素50～60mg/mL、L-抗坏血酸0.02～0.04mM、L-谷氨酰胺3～6mM、表皮生长因子10～16ng/mL、丙酮酸钠1～2mM，余量是DMEM低糖培养基；
(2)更换培养基培养，所述培养基为在步骤(1)培养基中添加漆黄素10～22μg/mL、大黄素15～30μg/mL；
(3)之后每2～3d更换一次培养基，培养基成分与步骤(2)相同。
优选的，步骤(1)培养基pH7.0～7.2，步骤(2)培养基pH7.6～7.8，步骤(3)培养基pH7.0～7.3。
优选的，步骤(2)培养基中，木犀草素为16～23μg/mL，漆黄素为18～20μg/mL，大黄素为22～25μg/mL，1,2,3,6-四-O-没食子酰-β-D-葡萄糖为7～8μg/mL。
优选的，步骤(1)培养2～3d。
优选的，培养条件是37℃、体积分数5％CO2、相对湿度95％。
本发明中，所述的间充质干细胞可通过现有常规方法分离得到：收集腹部脂肪抽吸术的女性脂肪组织(供试者排除恶性肿瘤、自身免疫性疾病、先天性疾病及遗传病)。参照现有技术采用胶原酶消化法获得人脂肪间充质干细胞。具体方法可以为：无菌条件下取新鲜脂肪组织，用0.1％的Ⅰ型胶原酶，37℃恒温水浴锅内振荡消化60min，1 200r/min离心10min，弃上清，加含体积分数10％胎牛血清的DMEM培养液(含青霉素100U/ml，链霉素100mg/ml、0.05g/L L-抗坏血酸)，200目筛过滤，在37℃、体积分数5％CO2、95％相对湿度的培养箱中进行原代培养。2天后第一次换液，以后视情况每2～3天换一次液，每天观察细胞生长形态特征，细胞长满至80～90％时，用0.25％胰蛋白酶消化贴壁细胞，按1:3比例传代培养。倒置显微镜观察干细胞形态与生长情况，并通过流式细胞术等确定获得脂肪间充质干细胞。分离培养的hADSCs表达干细胞表面标志CD44、CD90、CD105，不表达CD34、CD45。
本发明中，漆黄素溶解于DMSO后使用，浓度10mg/ml。
与现有技术相比，本发明的有益效果是：
本发明培养基中包括木犀草素、漆黄素、大黄素、1,2,3,6-四-O-没食子酰-β-D-葡萄糖、青霉素、链霉素、L-抗坏血酸、L-谷氨酰胺、表皮生长因子等成分。使用本发明培养基，出现明显钙结节时间被有效缩短至少5d，同一培养时间骨桥蛋白mRNA表达显著增高，脂肪间充质干细胞成骨分化效率提高。
本发明还发现，培养基成分的阶段性添加、培养基成分含量和pH的精密控制对培养过程中细胞的成骨分化有促进作用。
附图说明
图1为实施例1培养14d后行茜素红染色鉴定钙结节结果图；
图2为成骨分化过程中骨桥蛋白mRNA的相对表达结果图；纵坐标代表相对表达量，横坐标代表培养时间。
具体实施方式
为了更好理解本发明技术内容，下面提供具体实施例，对本发明做进一步的说明。
实施例1
一种用于脂肪间充质干细胞的培养基，包括以下组份：木犀草素30μg/mL、漆黄素10μg/mL、大黄素15μg/mL、1,2,3,6-四-O-没食子酰-β-D-葡萄糖10μg/mL、青霉素20U/mL、链霉素50mg/mL、L-抗坏血酸0.04mM、L-谷氨酰胺3mM、表皮生长因子16ng/mL、丙酮酸钠1mM，余量是DMEM低糖培养基。
实施例2
一种用于脂肪间充质干细胞的培养基，包括以下组份：木犀草素15μg/mL、漆黄素22μg/mL、大黄素30μg/mL、1,2,3,6-四-O-没食子酰-β-D-葡萄糖5μg/mL、青霉素30U/mL、链霉素60mg/mL、L-抗坏血酸0.02mM、L-谷氨酰胺6mM、表皮生长因子10ng/mL、丙酮酸钠2mM，余量是DMEM低糖培养基。
使用实施例1和实施例2的培养基进行脂肪间充质干细胞培养的方法：取间充质干细胞，用培养基培养，pH7.0～7.3；每2d换液一次。
实施例3
利用本发明培养基进行脂肪间充质干细胞培养的方法：
(1)取间充质干细胞，用培养基培养2d，所述培养基为：木犀草素为23μg/mL、1,2,3,6-四-O-没食子酰-β-D-葡萄糖8μg/mL、青霉素30U/mL、链霉素60mg/mL、L-抗坏血酸0.04mM、L-谷氨酰胺6mM、表皮生长因子16ng/mL、丙酮酸钠2mM，余量是DMEM低糖培养基，pH7.0～7.3；
(2)更换培养基培养，所述培养基为在步骤(1)培养基中添加漆黄素为20μg/mL、大黄素为25μg/mL，pH7.0～7.3；
(3)之后每2d更换一次培养基，培养基成分与步骤(2)相同。
实施例4
利用本发明培养基进行脂肪间充质干细胞培养的方法：
(1)取间充质干细胞，用培养基培养3d，所述培养基为：木犀草素为16μg/mL、1,2,3,6-四-O-没食子酰-β-D-葡萄糖7μg/mL、青霉素30U/mL，链霉素60mg/mL、L-抗坏血酸0.04mM、L-谷氨酰胺6mM、表皮生长因子16ng/mL、丙酮酸钠2mM，余量是DMEM低糖培养基，pH7.0～7.3；
(2)更换培养基培养，所述培养基为在步骤(1)培养基中添加漆黄素为18μg/mL、大黄素为22μg/mL；
(3)之后每3d更换一次培养基，培养基成分与步骤(2)相同。
实施例5
实施例5与实施例4的主要区别是：
漆黄素20μg/mL。
步骤(1)培养基pH7.0～7.2，步骤(2)培养基pH7.6～7.8，步骤(3)培养基pH7.0～7.3。
对比例1
本例与实施例1的主要区别是：
一种用于脂肪间充质干细胞的培养基，包括以下组份：木犀草素40μg/mL、漆黄素10μg/mL、大黄素10μg/mL、1,2,3,6-四-O-没食子酰-β-D-葡萄糖15μg/mL、青霉素20U/mL、链霉素50mg/mL、L-抗坏血酸0.04mM、L-谷氨酰胺3mM、表皮生长因子16ng/mL、丙酮酸钠1mM，余量是DMEM低糖培养基。
对比例2
本例与实施例1的主要区别是：
漆黄素替换为地塞米松。
对比例3
本例与实施例1的主要区别是：未添加木犀草素、漆黄素、大黄素、1,2,3,6-四-O-没食子酰-β-D-葡萄糖，改为添加β-磷酸甘油8mmol/L、地塞米松100μmol/L、L-抗坏血酸0.1mM。
对比例4
本例与实施例1的主要区别是：
未添加木犀草素、漆黄素、大黄素和1,2,3,6-四-O-没食子酰-β-D-葡萄糖。
试验例1
取实施例和对比例培养后的细胞，镜下观察细胞形态变化，行茜素红染色鉴定钙结节。参照郭艳萍等的方法，通过RT-PCR检测骨桥蛋白mRNA的表达。
表1
组别 钙结节提前天数
1组(实施例1) -5d
2组(实施例2) -5d
3组(实施例3) -7d
4组(实施例4) -7d
5组(实施例5) -10d
6组(对比例1) -2d
7组(对比例2) -0d
8组(对比例3) -
9组(对比例4) -
表2
组别 7d 14d 21d 28d
1组(实施例1) 2.0±0.11 5.2±0.13 6.5±0.13 7.3±0.24
2组(实施例2) 2.1±0.12 5.0±0.22 6.3±0.10 7.5±0.16
3组(实施例3) 2.0±0.20 6.3±0.16 7.2±0.22 8.3±0.13
4组(实施例4) 1.9±0.19 6.2±0.23 7.5±0.15 8.3±0.20
5组(实施例5) 3.3±0.13 7.7±0.16 8.6±0.14 9.8±0.26
6组(对比例1) 0.8±0.07 2.0±0.09 3.2±0.11 4.0±0.15
7组(对比例2) 1.0±0.11 1.5±0.23 2.8±0.14 3.3±0.13
8组(对比例3) 0.5±0.07 1.1±0.04 2.0±0.13 2.5±0.12
9组(对比例4) 0.1±0.05 0.1±0.04 0.1±0.06 0.1±0.04
表1结果为相比对比例3，其他各组出现明显钙结节的提前天数。结果显示，相比对比例3，实施例组出现明显钙结节时间提前5～10d，对比例1提前2d，对比例2钙结节时间无明显改变，对比例4未出现明显钙结节。结果说明，本发明方法，脂肪间充质干细胞成骨分化效率提高。
表2和图2为RT-PCR检测骨桥蛋白mRNA结果。结果显示，与对比例组相比，实施例组骨桥蛋白mRNA表达显著增高。其中，培养7d，实施例5的骨桥蛋白mRNA相对表达量显著高于其他实施例组；实施例3～5培养14d、21d、28d的骨桥蛋白mRNA相对表达量均显著高于实施例1～2，实施例5又显著高于实施例3～4，说明培养基成分的阶段性添加、培养基成分含量和pH的精密控制对培养过程中细胞的成骨分化有促进作用。
以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (9)

1.一种用于间充质干细胞的培养基，其特征在于，包括以下组份：
木犀草素15～30μg/mL、漆黄素10～22μg/mL、大黄素15～30μg/mL、1,2,3,6-四-O-没食子酰-β-D-葡萄糖5～10μg/mL、青霉素20～30U/mL、链霉素50～60mg/mL、L-抗坏血酸0.02～0.04mM、L-谷氨酰胺3～6mM、表皮生长因子10～16ng/mL、丙酮酸钠1～2mM，余量是DMEM低糖培养基。
2.根据权利要求1所述的用于间充质干细胞的培养基，其特征在于，木犀草素为16～23μg/mL，漆黄素为18～20μg/mL，大黄素为22～25μg/mL，1,2,3,6-四-O-没食子酰-β-D-葡萄糖为7～8μg/mL。
3.根据权利要求1所述的用于间充质干细胞的培养基，其特征在于，包括以下组份：
木犀草素16μg/mL、漆黄素20μg/mL、大黄素22μg/mL、1,2,3,6-四-O-没食子酰-β-D-葡萄糖7μg/mL、青霉素30U/mL，链霉素60mg/mL、L-抗坏血酸0.04mM、L-谷氨酰胺6mM、表皮生长因子16ng/mL、丙酮酸钠2mM，余量是DMEM低糖培养基。
4.根据权利要求1所述的用于间充质干细胞的培养基，其特征在于，所述间充质干细胞为脂肪间充质干细胞。
5.使用权利要求1～4任一项所述培养基进行间充质干细胞培养的方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)取间充质干细胞，用培养基培养，所述培养基为：木犀草素15～30μg/mL、1,2,3,6-四-O-没食子酰-β-D-葡萄糖5～10μg/mL、青霉素20～30U/mL、链霉素50～60mg/mL、L-抗坏血酸0.02～0.04mM、L-谷氨酰胺3～6mM、表皮生长因子10～16ng/mL、丙酮酸钠1～2mM，余量是DMEM低糖培养基；
(2)更换培养基培养，所述培养基为在步骤(1)培养基中添加漆黄素10～22μg/mL、大黄素15～30μg/mL；
(3)之后每2～3d更换一次培养基，培养基成分与步骤(2)相同。
6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，步骤(1)培养基pH7.0～7.2，步骤(2)培养基pH7.6～7.8，步骤(3)培养基pH7.0～7.3。
7.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，步骤(2)培养基中，木犀草素为16～23μg/mL，漆黄素为18～20μg/mL，大黄素为22～25μg/mL，1,2,3,6-四-O-没食子酰-β-D-葡萄糖为7～8μg/mL。
8.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，步骤(1)培养2～3d。
9.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，培养条件是37℃、体积分数5％CO2、相对湿度95％。
CN202010894856.3A 2020-08-31 2020-08-31 一种用于间充质干细胞的培养基及培养方法 Active CN111944753B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202010894856.3A CN111944753B (zh) 2020-08-31 2020-08-31 一种用于间充质干细胞的培养基及培养方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202010894856.3A CN111944753B (zh) 2020-08-31 2020-08-31 一种用于间充质干细胞的培养基及培养方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN111944753A true CN111944753A (zh) 2020-11-17
CN111944753B CN111944753B (zh) 2023-09-22

Family

ID=73368206

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202010894856.3A Active CN111944753B (zh) 2020-08-31 2020-08-31 一种用于间充质干细胞的培养基及培养方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN111944753B (zh)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN113846056A (zh) * 2021-10-26 2021-12-28 上海泽充生物技术有限公司 一种用于培养间充质干细胞的培养基及培养方法

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103826632A (zh) * 2011-08-26 2014-05-28 国立大学法人名古屋大学 骨形成促进剂及其用途
CN105112364A (zh) * 2015-08-18 2015-12-02 广州暨南生物医药研究开发基地有限公司 人脂肪间充质干细胞的无血清培养基及其制备方法
CN105112366A (zh) * 2015-08-18 2015-12-02 广州暨南生物医药研究开发基地有限公司 一种含小檗碱的间充质干细胞无血清培养基

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103826632A (zh) * 2011-08-26 2014-05-28 国立大学法人名古屋大学 骨形成促进剂及其用途
CN105112364A (zh) * 2015-08-18 2015-12-02 广州暨南生物医药研究开发基地有限公司 人脂肪间充质干细胞的无血清培养基及其制备方法
CN105112366A (zh) * 2015-08-18 2015-12-02 广州暨南生物医药研究开发基地有限公司 一种含小檗碱的间充质干细胞无血清培养基

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
ELAHE VADAYE KHEIRY ET AL.: "The Osteogenic Differentiation of Mice Bone Marrow Mesenchymal Stem Cells with Fisetin Phytoestrogen" *
FENG YANG ET AL.: "Emodin enhances osteogenesis and inhibits adipogenesis" *

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN113846056A (zh) * 2021-10-26 2021-12-28 上海泽充生物技术有限公司 一种用于培养间充质干细胞的培养基及培养方法

Also Published As

Publication number Publication date
CN111944753B (zh) 2023-09-22

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN104164403B (zh) 一种提取及培养脂肪干细胞的方法
US20050013804A1 (en) Method of culturing mesenchymal stem cells
CN107557331B (zh) 一种分离和培养人脂肪干细胞的方法
EP2210937A1 (en) Culture method for mesenchymal stem cell and process for production of supporting material for biological tissue
CN111235101B (zh) 一种人脐带间充质干细胞培养基及人脐带间充质干细胞的培养方法
CN105039248B (zh) 树鼩骨髓间充质干细胞培养系统
EP3578641A1 (en) Method for preparing dental pulp stem cells from cells derived from dental pulp tissue
CN109628388B (zh) 用消化酶组合物从胎盘血管分离间充质干细胞
CN111944753B (zh) 一种用于间充质干细胞的培养基及培养方法
CN113249314B (zh) 促进间充质干细胞增殖与分化的培养方法及无血清培养基
CN110846273A (zh) 一种脂肪组织来源的间充质干细胞培养及三系分化诱导方法
CN111454896B (zh) 一种提高间充质干细胞促进急性髓系白血病分化能力的诱导方法
CN111849878A (zh) 一种提高间充质干细胞成骨能力的方法
CN114790443B (zh) 一种间充质干细胞体外培养方法及其培养基
CN112779211A (zh) 一种优化的人脂肪间充质干细胞培养体系
CN112522193B (zh) 无血清培养基在分离和传代脂肪间充质干细胞中的用途
CN110592009B (zh) 一种积雪草酸衍生物用于促进人脂肪间充质干细胞体外增殖并维持干性的用途
CN112608892B (zh) 血小板裂解物用于无血清分离和传代培养脐带间充质干细胞的方法
CN110592010B (zh) 积雪草酸用于促进人脂肪间充质干细胞体外增殖并诱导其成软骨分化的用途
CN109652367B (zh) 一种制备临床级脂肪干细胞的方法
Mahboudi et al. Comparison between high cell-density culture systems for chondrogenic differentiation and articular cartilage reconstruction of human mesenchymal stem cells: a literature review
CN113201491A (zh) 一种促进干细胞体外增殖和分化的培养方法
CN106957814B (zh) 一种羊膜间充质干细胞培养基和培养羊膜间充质干细胞的方法
JP4646600B2 (ja) 間葉系幹細胞の培養方法
CN114752560B (zh) 一种脐带间充质干细胞培养基

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant