CN111758486B - 一种规模化高产早熟柞蚕蛹虫草生产栽培方法 - Google Patents

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Abstract

本发明提供了一种规模化高产早熟柞蚕蛹虫草生产栽培方法。该技术方案包括蚕蛹消毒、接种、养菌、刻伤、出草管理、采收、干燥等步骤，其突出特征是在出草管理前增加刻伤步骤，用锋利刀片削除僵化蚕蛹的头顶板，破除蚕蛹表皮障碍，使内部菌丝与空气接触快速生长。在蚕蛹接种僵化后，及时处理，使伤口处菌丝快速生长形成原基，继而长成子实体。与常规方法相比，本发明可缩短生产周期5～10天；由于该处理手段破除了蛹体表皮的束缚，因此子实体形成率可达100％，成品率可达98％，且子实体着生位置一致、生长进程一致，不仅产品品相好，而且便于管理与采收。

Description

一种规模化高产早熟柞蚕蛹虫草生产栽培方法
技术领域
本发明涉及蛹虫草栽培技术领域，具体涉及一种规模化高产早熟柞蚕蛹虫草生产栽培方法。
背景技术
蛹虫草，又名北虫草，北冬虫夏草。学名Cordyceps militaris(L.)link。属子囊菌亚门，核菌纲，球壳目，麦角菌科，虫草属。是一种名贵的食药用菌。现代药学研究表明，蛹虫草中含有核苷类、多糖类、虫草素、甾醇类等成分与冬虫夏草相同。对免疫系统、神经系统及心血管系统等疾病具有治疗效果，并有抗肿瘤和抗癌作用，应用前景广阔。目前，蛹虫草栽培多采用小麦、大米等谷物为栽培基质。虽生产成本较低，但其产品功用不能与蛹体栽培的蛹虫草相提并论。而蚕蛹虫草才具有真正的药用价值。
目前柞蚕蛹虫草多采用注射接种的方式栽培。在目前的常规方法中，首先将菌种接种到消毒后的蛹体中，而后仅对环境条件加以控制，而子实体的出草及生长完全任由其自然发展。这种方法存在生产周期较长、子实体生长不齐、成品率低等问题，甚至出现蚕蛹接种僵化后不能正常生成子实体的情况。
发明内容
本发明旨在针对现有技术的技术缺陷，提供一种规模化高产早熟柞蚕蛹虫草生产栽培方法，以解决常规栽培方法在蛹体僵化后，原基形成时间长、质量差、子实体生长速率不一致等技术问题。
本发明要解决的另一技术问题是，如何通过栽培工艺的改进，缩短生产周期、提升出草率及成品率。
为实现以上技术目的，本发明采用以下技术方案：
一种规模化高产早熟柞蚕蛹虫草生产栽培方法，包括以下步骤：
1)取活蚕蛹，置于30～40mg/m3的臭氧环境中，保持10min；
2)取步骤1)处理后的蚕蛹，在无菌条件下，向每只蚕蛹注射接种液体菌种0.2～0.3mL；
3)将步骤2)接种后的蚕蛹置于盘状容器中，在容器上端无覆盖的状态下，以环境温度15～17℃，空气相对湿度50％～70％RH，避光，培养5d；
4)用刀片削除僵化蚕蛹的头顶板，破除蚕蛹表皮障碍；
5)调节培养温度至20～22℃、空气相对湿度80％RH以上，继续培养，每日通风，每日光照时长10～12h；
6)当子实体长度达5～7cm时，采收；
7)55～60℃热风干燥。
作为优选，步骤1)中所述的活蚕蛹，不包括死蛹、病蛹、虫蛹、畸形蛹、软蛹；所述活蚕蛹现用现剥。
作为优选，步骤2)中所述的接种，是利用连续注射器实施的。
作为优选，步骤3)中所述的盘状容器有若干个，若干盘状容器纵向叠放，所述叠放的层数不超过4层。
作为优选，在步骤5)中，刻伤后的僵化蛹伤口朝上摆放。
作为优选，步骤2)中所述液体菌种，是通过以下方法制备的：在无菌条件下，将蛹虫草菌种接种至固体斜面培养基上，在18～22℃下避光培养7～10d；而后，转接至液体培养基中，在18～20℃下避光、震荡培养5～7d；震荡培养的频率为130～150转/min。
作为优选，所述固体斜面培养基包括以下成分：200g马铃薯的去皮、煮汁产物，葡萄糖15～20g，蛋白胨5～7g，磷酸二氢钾0.5～1g，硫酸镁0.2～0.5g，琼脂粉18～20g，水1000mL。
作为优选，所述液体培养基包括以下成分：200g马铃薯的去皮、煮汁产物，葡萄糖15～20g，蛋白胨5～7g，磷酸二氢钾0.5～1g，硫酸镁0.2～0.5g，水1000mL。
本发明提供了一种规模化高产早熟柞蚕蛹虫草生产栽培方法。该技术方案包括蚕蛹消毒、接种、养菌、刻伤、出草管理、采收、干燥等步骤，其突出特征是在出草管理前增加刻伤步骤，用锋利刀片削除僵化蚕蛹的头顶板，破除蚕蛹表皮障碍，使内部菌丝与空气接触快速生长。在蚕蛹接种僵化后，及时处理，使伤口处菌丝快速生长形成原基，继而长成子实体。与常规方法相比，本发明可缩短生产周期5～10天；由于该处理手段破除了蛹体表皮的束缚，因此子实体形成率可达100％，成品率可达98％，且子实体着生位置一致、生长进程一致，不仅产品品相好，而且便于管理与采收。
具体实施方式
以下将对本发明的具体实施方式进行详细描述。为了避免过多不必要的细节，在以下实施例中对属于公知的结构或功能将不进行详细描述。以下实施例中所使用的近似性语言可用于定量表述，表明在不改变基本功能的情况下可允许数量有一定的变动。除有定义外，以下实施例中所用的技术和科学术语具有与本发明所属领域技术人员普遍理解的相同含义。
实施例1
一种规模化高产早熟柞蚕蛹虫草生产栽培方法，包括：
(一)菌种准备：
低温保藏蛹虫草菌种：常规蛹虫草菌种。
蛹虫草液体菌种：培养步骤如下：
(1)试管斜面菌种活化
培养基配制：马铃薯200g(去皮煮汁)、葡萄糖20g、蛋白胨5g、磷酸二氢钾1g、硫酸镁0.5g、琼脂粉20g、水1000ml。分装于试管中，121℃高温灭菌20min，摆放斜面。然后将保藏的蛹虫草菌种在无菌条件下接入试管斜面，18-20℃，避光培养7-10d。
(2)三角品液体种子培养：
培养基配制：马铃薯200g(去皮煮汁)、葡萄糖20g、蛋白胨5g、磷酸二氢钾1g、硫酸镁0.5g水1000ml。将配制好的培养基分装入三角瓶中，用棉塞或双层聚丙烯薄膜封口。放入高压灭菌锅中，121℃灭菌20min。培养基制备完成后，在无菌条件下接入斜面试管菌种，培养温度18-20℃，避光震荡培养5-7d，震荡频率为130-150转/min。
(二)蚕蛹消毒：
选择新鲜活蚕蛹，臭氧浓度30-40mg/m3，处理时间10min。
(三)接种：
在无菌条件下，使用连续注射器，每只蚕蛹注射接种液体菌种0.2-0.3ml。
(四)养菌：
接种后的蚕蛹摆放在养菌盘内，单组叠码不超过四层。养菌盘不需覆盖，直接摆放在养菌室内培养即可。环境温度15-17℃，空气相对湿度50％-70％RH，避光，培养时间为5d。
(五)刻伤：
用锋利刀片削除僵化蚕蛹的头顶板，破除蚕蛹表皮障碍，使内部菌丝与空气接触快速生长。在操作时应避免交叉污染。
(六)出草管理：
将刻伤后的僵化蛹伤口向上，摆放在栽培盒内，培养温度20-22℃，空气相对湿度80％RH以上，每日通风，保持空气新鲜，光照时间10-12h。
(七)采收：
子实体长至5-7cm时采收。
(八)烘干：
55-60℃热风干燥。
实施例2
一种规模化高产早熟柞蚕蛹虫草生产栽培方法，包括蚕蛹消毒、接种、养菌、刻伤、出草管理、采收、干燥，具体工艺步骤为：
1、蚕蛹消毒：蚕蛹应按接种量现用现剥，以保证蚕蛹的质量，蛹体大小适中，鲜活。凡死蛹、病蛹、虫蛹、畸形蛹、软蛹应一律给予剔除不得使用。蚕蛹消毒是，臭氧浓度30-40mg/m3，处理时间10min。
2、接种：在无菌条件下，使用连续注射器，每只蚕蛹注射接种液体菌种0.2-0.3ml。
3、养菌：接种后的蚕蛹摆放在养菌盘内，养菌盘可叠码，单组叠码不超过四层。养菌盘不需覆盖，直接摆放在养菌室内培养即可。环境温度15-17℃，空气相对湿度50％-70％RH，避光，培养时间为5d。
4、刻伤：用锋利刀片削除僵化蚕蛹的头顶板，破除蚕蛹表皮障碍，使内部菌丝与空气接触快速生长。在操作时应避免交叉污染。
5、出草管理：培养温度20-22℃，空气相对湿度80％RH以上，每日通风，保持空气新鲜，光照时间10-12h。
6、采收：子实体长至5-7cm时采收。
7、烘干：55-60℃热风干燥。
以上步骤2中接入的蛹虫草菌种为蛹虫草液体菌种，该菌种通过试管斜面菌种培养和三角瓶液体菌种培养而成，具体工艺步骤为：
试管斜面菌种培养：
配制培养基：其各组分比例为：马铃薯200g(去皮煮汁)、葡萄糖15-20g、蛋白胨5-7g、磷酸二氢钾0.5-1g、硫酸镁0.2-0.5g、琼脂粉18-20g、水1000ml。斜面培养基制备完成后，在无菌条件下接入蛹虫草菌种，在18-22℃，条件下避光培养7-10d。
三角瓶液体菌种培养：配制培养基：其各组分比例为：马铃薯200g(去皮煮汁)、葡萄糖15-20g、蛋白胨5-7g、磷酸二氢钾0.5-1g、硫酸镁0.2-0.5g、水1000ml。将配制好的培养基分装入三角瓶中，用棉塞或双层聚丙烯薄膜封口。放入高压灭菌锅中，121℃灭菌20min。培养基制备完成后，在无菌条件下接入斜面试管菌种，培养温度18-20℃，避光震荡培养5-7d，震荡频率为130-150转/min。
实施例3
一种规模化高产早熟柞蚕蛹虫草生产栽培方法，包括以下步骤：
1)取活蚕蛹，置于30～40mg/m3的臭氧环境中，保持10min；
2)取步骤1)处理后的蚕蛹，在无菌条件下，向每只蚕蛹注射接种液体菌种0.2～0.3mL；
3)将步骤2)接种后的蚕蛹置于盘状容器中，在容器上端无覆盖的状态下，以环境温度15～17℃，空气相对湿度50％～70％RH，避光，培养5d；
4)用刀片削除僵化蚕蛹的头顶板，破除蚕蛹表皮障碍；
5)调节培养温度至20～22℃、空气相对湿度80％RH以上，继续培养，每日通风，每日光照时长10～12h；
6)当子实体长度达5～7cm时，采收；
7)55～60℃热风干燥。
以上对本发明的实施例进行了详细说明，但所述内容仅为本发明的较佳实施例，并不用以限制本发明。凡在本发明的申请范围内所做的任何修改、等同替换和改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (8)

1.一种规模化高产早熟柞蚕蛹虫草生产栽培方法，其特征在于包括以下步骤：
1)取活蚕蛹，置于30～40mg/m3的臭氧环境中，保持10min；
2)取步骤1)处理后的蚕蛹，在无菌条件下，向每只蚕蛹注射接种液体菌种0.2～0.3mL；
3)将步骤2)接种后的蚕蛹置于盘状容器中，在容器上端无覆盖的状态下，以环境温度15～17℃，空气相对湿度50％～70％RH，避光，培养5d；
4)用刀片削除僵化蚕蛹的头顶板，破除蚕蛹表皮障碍；
5)调节培养温度至20～22℃、空气相对湿度80％RH以上，继续培养，每日通风，每日光照时长10～12h；
6)当子实体长度达5～7cm时，采收；
7)55～60℃热风干燥。
2.根据权利要求1所述的一种规模化高产早熟柞蚕蛹虫草生产栽培方法，其特征在于，步骤1)中所述的活蚕蛹，不包括死蛹、病蛹、虫蛹、畸形蛹、软蛹；所述活蚕蛹现用现剥。
3.根据权利要求1所述的一种规模化高产早熟柞蚕蛹虫草生产栽培方法，其特征在于，步骤2)中所述的接种，是利用连续注射器实施的。
4.根据权利要求1所述的一种规模化高产早熟柞蚕蛹虫草生产栽培方法，其特征在于，步骤3)中所述的盘状容器有若干个，若干盘状容器纵向叠放，所述叠放的层数不超过4层。
5.根据权利要求1所述的一种规模化高产早熟柞蚕蛹虫草生产栽培方法，其特征在于，在步骤5)中，刻伤后的僵化蛹伤口朝上摆放。
6.根据权利要求1所述的一种规模化高产早熟柞蚕蛹虫草生产栽培方法，其特征在于，步骤2)中所述液体菌种，是通过以下方法制备的：在无菌条件下，将蛹虫草菌种接种至固体斜面培养基上，在18～22℃下避光培养7～10d；而后，转接至液体培养基中，在18～20℃下避光、震荡培养5～7d；震荡培养的频率为130～150转/min。
7.根据权利要求6所述的一种规模化高产早熟柞蚕蛹虫草生产栽培方法，其特征在于，所述固体斜面培养基包括以下成分：200g马铃薯的去皮、煮汁产物，葡萄糖15～20g，蛋白胨5～7g，磷酸二氢钾0.5～1g，硫酸镁0.2～0.5g，琼脂粉18～20g，水1000mL。
8.根据权利要求6所述的一种规模化高产早熟柞蚕蛹虫草生产栽培方法，其特征在于，所述液体培养基包括以下成分：200g马铃薯的去皮、煮汁产物，葡萄糖15～20g，蛋白胨5～7g，磷酸二氢钾0.5～1g，硫酸镁0.2～0.5g，水1000mL。
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