CN111011106A - 一种茅窝菌仿野生栽培的方法 - Google Patents

Abstract

本发明提供一种茅窝菌仿野生栽培的方法，包括以下步骤：(1)选择野生茅窝菌菌株，分离获取茅窝菌子实体，作为茅窝菌原种；(2)制备茅草‑PDA复合培养基，置于无菌培养容器，接种原种，培养母种；(3)取干茅草加水浸湿，加棉籽皮、麦麸、石灰配料并混匀，装袋灭菌、降温，接种茅窝菌母种，培养制得茅窝菌栽培种；(4)在茅草地开浅沟，将茅窝菌栽培种播种在浅沟内，覆细土，用微喷带进行微喷将浅沟及茅草地浇透；(5)播种一个月后，在茅草地上架设遮阴网，地面用微喷带进行微喷，使空气湿度达到85‑95％，刺激茅窝菌出菇；当茅窝菌子实体平展时，采收子实体，得茅窝菌产品。

Description

一种茅窝菌仿野生栽培的方法

背景技术

渤海湾大面积的盐碱荒地地被植物主要以白茅为主，伴生植物有芦苇、二色补血草、苘麻、萝藦、结缕草、中华补血草、罗布麻、狗尾草、小蓟，柽柳等，总盖度70％左右；所述白茅群落，是盐生草甸植被演替到木本植物最后一个草本植被。在盐碱地茅草地生长着一种独特的食用菌-茅窝菌，当地人在茅窝菌出菇时节冒雨争抢采摘，或直接鲜食，或晾晒成干品储藏。

茅窝菌由菌丝体和子实体两部分组成，其中菌丝体是营养器官，呈白色丝状；茅窝菌子实体是繁殖器官，灰白色，由菌盖、菌柄、菌褶等部分组成，菌盖直径0.5-2cm左右。茅窝菌一般寄生于茅草植株基部，单生或丛生，夏季连绵小雨后易生长，但受环境温度、湿度、气候、茅草地况等自然资源条件的限制，产量少而不稳定，很难满足人们的需求，尤其是茅窝菌干品已经成为馈赠亲友的珍品。

目前，茅窝菌都是野生生长，通过常规的食用菌人工繁育方法进行茅窝菌的育种栽培，其效果往往不够理想；迄今为止，还没有茅窝菌人工栽培或仿野生栽培成功的报道。

发明内容

为解决上述技术问题，本发明提供一种茅窝菌仿野生栽培的方法，包括以下步骤：

(1)选择具有典型性状和长势良好的野生茅窝菌菌株，采用组织分离法获取茅窝菌子实体，作为茅窝菌原种保存或直接用于步骤(2)的接种操作；

(2)取剪切或打碎的干茅草，加5-10倍质量的水浸泡20-60min，煮至水沸并保持微沸20-60min，过滤，所得滤液为茅草提取液；所述茅草提取液加所需量的马铃薯切片、糖、琼脂，煮至水沸并保持沸腾20-40min，过滤，所得滤液冷却后为茅草-PDA复合培养基；所述茅草-PDA复合培养基置于无菌培养容器，接种步骤(1)采集或保存的茅窝菌原种，在22-24℃培养5-8天至菌丝长满培养容器，得茅窝菌母种；

(3)以质量份数计，取剪切或打碎的干茅草30份，加3-5倍质量的水浸20-30min，加棉籽皮60-65份、麦麸3-10份、石灰0.5-2份，按该比例配料并混匀，补加水至含水占总质量的65-70％并处理均匀后装袋，装袋料用高压灭菌法灭菌，灭菌后降温至自然温度后得袋装培养料，在无菌条件下接种步骤(2)所得茅窝菌母种，在23-26℃培养20-30天至袋内长满菌丝，得茅窝菌栽培种；

(4)在茅草地开出深2-3cm，宽5-8cm的浅沟，浅沟与浅沟间距30-50cm；将茅窝菌栽培种处理至0.5-1.5cm尺寸或厚度，播种在浅沟内，覆盖0.4-0.7cm厚的细土，然后用微喷带进行微喷将浅沟及茅草地浇透，促使茅窝菌菌丝在茅草地里生长；

(5)播种一个月后，在茅草地上距离地面1.5-2.0m处架设悬挂遮阴网，地面用微喷带进行微喷，使空气相对湿度达到85-95％，刺激茅窝菌子实体原基形成，促使茅窝菌子实体生长出菇；当茅窝菌子实体平展时，采收子实体，得茅窝菌产品。

以上步骤(2)-(4)中，所述剪切或打碎的干茅草，其长度优选为0.5-2.0cm；其中步骤(3)、(4)中，棉籽皮为棉籽脱皮的原尺寸，不经粉碎，干茅草过短或磨成粉，或者棉籽皮粉碎都不好，缺点之一是降低配料的空隙率，不利于菌丝生长，缺点之二是步骤(4)中的发酵过程过快或较难控制并造成步骤(5)中茅窝菌产量降低。

步骤(2)中，所述茅草-PDA复合培养基的原料配比，优选为每1000ml茅草提取液加厚度1-3mm马铃薯切片200g、糖20g、琼脂15-20g。

步骤(4)中，所述茅草地包括盐碱茅草地，茅草地的选择以茅草长势以中等偏弱为好，茅草密度以中等偏低为好，茅草长势过旺或茅草密度过高时茅窝菌的出菇数量、长势和产量反而降低；浅沟内播种时将茅窝菌栽培种播种在土层表面以下1-2cm深度；用微喷带进行微喷将地浇透后优选用不含灭草剂的薄膜覆盖，四周压严进行保湿，达到使茅窝菌菌丝在浅沟内生长所需的湿度，可用透光薄膜，采用黑色薄膜效果更好一些，有保湿和遮光的双重作用，覆膜时步骤(5)中应先移除薄膜。茅窝菌菌丝的生长除了在浅沟土壤内，主要是向浅沟周边的茅草根部土壤生长。华北地区如渤海湾的盐碱茅草地，在5月中旬进行栽培播种为好，该段时间和在之后的一两个月中，土壤的墒情和气温、降雨条件，适于茅窝菌的野生种植栽培和熟菇采收，该段种植采收期内一般不发生暴雨和温度骤降、过度干旱等不利情况。

步骤(5)中，微喷的控制方法可以是每微喷半小时，间隔一小时，再微喷半小时，循环微喷约24小时左右，也可根据实际情况进行调整；喷水范围包括浅沟和茅草地。茅窝菌子实体主要从浅沟外土壤的茅草基部即茅草入土的位置生长出来，在浅沟内的覆土带基本没有茅窝菌子实体生长出来。所述子实体即茅窝菌产品采收第一茬后，继续控制遮阴网下空气的相对湿度85％以上，保持适当通风和遮阴，还会有茅窝菌子实体从浅沟外土壤的茅草基部继续生长出来，并发育到可采收的成熟状态；一般可以连续采收4-6茬茅窝菌菇，每平方米茅草地的茅窝菌产量可达到0.8-1.5kg。这种在野外茅草地栽培、采收的茅窝菌，其保质期为3-5天，一般比温室栽培产品长2天左右，除了可直接烹饪食用，还可以晾晒成干品保存，烹饪前再水发软化。

以上步骤(2)中，若干茅草不经水浸泡、水煮、过滤制备茅草提取液，再在茅草提取液中加所需量的马铃薯切片、糖、琼脂，而是将干茅草、马铃薯切片、糖、琼脂直接加水浸泡、水煮、过滤制备茅草-PDA复合培养基，则接种步骤(1)采集或保存的茅窝菌原种，在22-24℃培养5-8天过程中菌丝生长较慢，长势明显较弱，培养10-15天时只长出少量菌丝，无法作为茅窝菌母种，即便用于步骤(3)的高压灭菌装袋料接种，在23-26℃培养过程中菌丝生长也较慢，长势明显弱，即便接种量较大，培养25天时袋内也远不能长满菌丝。这说明干茅草提取液的单独制备很重要，干茅草、马铃薯切片、糖、琼脂直接加水浸泡、水煮、过滤制备的培养基效果不好。

步骤(2)中，若不用干茅草而仅用马铃薯切片、糖、琼脂加水浸泡、水煮、过滤制备PDA培养基，则PDA培养基接种步骤(1)采集或保存的茅窝菌原种，在22-24℃培养10天过程中菌丝生长很慢，长势很弱，培养20天也于远不能长满培养容器，若作为茅窝菌母种用于步骤(3)的高压灭菌装袋料接种，在23-26℃培养过程中菌丝生长也较慢，长势明显弱，即便接种量增加多倍，培养30天时袋内也无法长满菌丝。这说明干茅草或其提取液对茅窝菌原种在培养基中的生长及茅窝菌母种制备，起到了关键作用；单用PDA培养基的培养效果不好。若将所述茅草提取液直接用作培养基，在22-24℃接种步骤(1)采集或保存的茅窝菌原种并培养10天过程中，则菌丝生长很慢，长势极弱，培养10天仅长出少量菌丝，若作为茅窝菌母种用于步骤(3)的高压灭菌装袋料接种，在23-26℃培养过程中菌丝生长也很慢，长势很弱，即便接种量加倍，培养25天时袋内也远不能长满菌丝。步骤(2)中制备茅草-PDA复合培养基的茅窝菌母种培养效果，显著高于单用PDA培养基的培养效果与将所述茅草提取液作为培养基的培养效果的加和，发挥出了1+1>2的效果。

步骤(3)中，若不用干茅草而仅用棉籽皮、麦麸、石灰，将干茅草替换为相应比例的棉籽皮、麦麸，石灰的量或比例不变，配料并混匀，加水至含水量65-70m％并处理均匀后装袋，用高压灭菌法灭菌、降温至自然温度，则这种不含茅草的装袋培养料接种步骤(2)所得茅窝菌母种，在23-26℃培养过程中菌丝生长也较慢，长势明显弱，即便接种量增加多倍，培养30天时袋内也远不能长满菌丝。这说明干茅草对茅窝菌原种在袋装培养料中的生长，起到了关键作用；即单用棉籽皮、麦麸、石灰培养料的茅窝菌栽培种的培养效果不好。若仅用干茅草而不用棉籽皮、麦麸，将棉籽皮、麦麸替换为相应比例的干茅草，石灰的量或比例不变，配料并混匀，加水至含水量65-70m％并处理均匀后装袋，则不含茅草装袋料用高压灭菌法灭菌、降温至自然温度、接种步骤(2)所得茅窝菌母种，在23-26℃培养过程中菌丝生长也较慢，长势明显弱，即便接种量增加多倍，培养30天时袋内也远不能长满菌丝。这说明棉籽皮、麦麸对茅窝菌原种在袋装培养料中的生长，所起作用也很大，能提供菌丝生长所需的营养成分；干茅草、石灰培养料的茅窝菌栽培种的培养效果不好。用近似方法，单用干茅草加水而不加石灰制备袋装培养料，接种步骤(2)所得茅窝菌母种，茅窝菌栽培种的培养效果还劣于或低于干茅草、石灰培养料。步骤(3)中制备茅草+棉籽皮+麦麸+石灰+水高压灭菌装袋培养料接种步骤(2)所得茅窝菌母种的培养效果，显著高于棉籽皮+麦麸+石灰+水高压灭菌装袋培养料的培养效果与茅草+石灰+水或茅草+水高压灭菌装袋培养料的培养效果的加和，也发挥出了1+1>2的效果。

若将所述干茅草替换为芦苇、二色补血草、苘麻、萝藦、结缕草、中华补血草、罗布麻、狗尾草、小蓟，柽柳的收割干草或干茎叶中的一种或多种，分别制备所述步骤(2)的复合培养基、步骤(3)的袋装培养料，则所制备各复合培养基接种步骤(1)采集或保存的茅窝菌原种后存在原种无法存活、不生长菌丝，或菌丝生长极慢等问题，所制备各袋装培养料接种步骤(2)制备的茅窝菌母种后也存在菌丝不生长、菌丝生长极慢等问题；步骤(4)-(5)的野外茅草地栽培过程中，茅草地中若伴生少量芦苇、二色补血草、苘麻、萝藦、结缕草、中华补血草、罗布麻、狗尾草、小蓟，柽柳等杂类植物，则所述杂类植物的土壤内根系所及之处，一般没有茅窝菌菌丝生长过去，其根部之上也不出菇，说明茅草的伴生植物芦苇、二色补血草、苘麻、萝藦、结缕草、中华补血草、罗布麻、狗尾草、小蓟，柽柳等不利于茅窝菌的野生栽培，说明茅草才是茅窝菌菌丝的合适寄主。

以上说明茅草提供了可促进茅窝菌菌丝体和子实体的繁育、生长所必需的物质因子，PDA培养基、棉籽皮/麦麸/石灰分别与茅草结合制备的培养料才能提供可促进茅窝菌菌丝体正常繁育、生长所需的物质条件，而PDA培养基、棉籽皮/麦麸/石灰培养料不能提供茅窝菌菌丝体正常繁育、生长所需的物质条件。这一特性可能是茅窝菌不易通过常规的食用菌人工繁育方法进行育种和栽培，或者效果不够理想的原因所在。

步骤(5)中，若不对茅草地进行所述喷水保湿操作，则基本没有茅窝菌子实体生长出来，直接进行茅草地水漫灌的效果也不好，说明喷水对促进子实体的形成作用很大，该作用应源自其对地表菌丝的物理性刺激，这种物理性刺激有利于茅窝菌菌丝的扭结和分化，但刺激过大也不行。

本发明实现了野生茅窝菌的人工育种和野外栽培生产，提供了一种新型的食用菌食材，也增加了一种新的能够人工栽培的珍稀食用菌种类。将所栽培仿野生茅窝菌与自然野生茅窝菌进行对比，发现在颜色、质地、口感、香味方面几乎相当，菌盖尺寸和单重略大，普遍较为强壮，一致性更好，产量有保证。

具体实施方式

以下实施例、对比例所用原料中，干茅草为先去除杂草再剪切为长度0.5-1.0cm的碎茅草，棉籽皮为为棉籽脱皮的原尺寸，不经粉碎，石灰为60目新鲜石灰粉(氧化钙含量高于99m％)。各实施例、对比例的各步骤操作，并不是机械实施，而是根据需要适当安排，使各步操作能合理衔接；各相应步骤，在进行对比时尽量采取有对比意义的操作时间和条件。

以下具有步骤(4)-(5)的实施例、对比例中，步骤(4)-(5)即茅窝菌的野外草地栽培部分，分别在河北省东南部渤海湾某平整的盐碱草地和某平整的无盐碱草地进行，每块地的长宽皆为20x30m，都已生长茅草多年，在以下实施例1步骤(4)茅窝菌栽培的前一年，各已整理成相邻的20x10m纯茅草区、20x10m伴生杂草的茅草区、20x10m杂草区，土壤中无石子等颗粒物，草的长势和密度皆为中等水平，各草区内不同位置草的生长情况基本相同，即同一草区内各实施例或对比例的草地具有生物学意义上的可比性。步骤(4)栽培种播种时间都是5月中旬，在该段时间，和之后的一个多月中即步骤(5)的出菇期结束前，土壤的墒情和气温、降雨条件，适于茅窝菌的野生种植栽培和熟菇采收，末发生大量降雨如暴雨和温度骤降、过度干旱等不利情况。每个实施例或对比例都沿20m方向开浅沟并栽培至少二条沟，该地块内各实施例或对比例的开沟和播种在同一天2小时内完成，之后立即设置微喷带进行微喷将整个20x30m草地及该地块内所有浅沟浇透，一个月后在整个20x30m草地块上距离地面1.7m处架设水平遮阴网，各周边悬挂垂直遮阴网至地面。

实施例1

按如下步骤，进行茅窝菌的栽培：

(1)选择具有典型性状和长势良好的野生茅窝菌菌株，采用组织分离法获取子实体菌柄菌褶连接处附近的菌丝块多粒，每粒尺寸为绿豆粒大小，作为茅窝菌原种立即用于步骤(2)的接种操作；

(2)取干茅草200g，加水2000g浸泡30min，煮至水沸并保持微沸30min，过滤，所得滤液为茅草提取液；所述茅草提取液加马铃薯切片200g、葡萄糖20g、琼脂20g，大火煮至水沸并中火保持沸腾20min，四层纱布过滤，得滤液1000ml冷却后为茅草-PDA复合培养基；取适量茅草-PDA复合培养基置于5个无菌培养试管，分别接种步骤(1)采集的茅窝菌原种各一粒，在23-24℃培养5天至菌丝长满各试管，得茅窝菌母种，其菌丝为白色，长势强；

(3)取干茅草600g，加水3000g浸泡20min使茅草吸足水分，配入棉籽皮1300g、麦麸120g、石灰20g并混匀，补加水至总质量6000g(含水66％)并处理均匀后分装入多个聚丙烯塑料袋，每袋装料1kg左右，装袋料在高压灭菌锅126℃灭菌2h，灭菌后降至室温后，取3袋料在无菌条件下分别接种步骤(2)所得茅窝菌母种，在23-25℃培养23天至各袋内长满白色的菌丝，菌丝强壮，得茅窝菌栽培种；

(4)在所述盐碱草地纯茅草区开出深2-3cm，宽5-6cm的浅沟，浅沟与浅沟间距40cm；将茅窝菌栽培种处理至1.0-1.5cm尺寸，点种在浅沟内土壤中，覆盖0.4-0.7cm厚的细土，然后用微喷带进行微喷将浅沟及茅草地浇透，促使茅窝菌菌丝在浅沟内及向茅草下土壤里的生长；

(5)播种一个月后，在草地上架设遮阴网，地面设置微喷带进行微喷，微喷的基本控制方式是每微喷半小时，停喷一小时，再微喷半小时，循环微喷约24小时左右，期间根据实际情况进行适当调整微喷及间隔时间，喷水范围包括浅沟和茅草地，使遮阴网内空气相对湿度达到85-95％，刺激茅窝菌子实体原基形成，促使茅窝菌子实体生长；茅窝菌子实体主要从浅沟外土壤的茅草基部即茅草入土的位置生长出来，在浅沟内的覆土带基本没有茅窝菌子实体生长出来，当茅窝菌子实体平展时，采收子实体，得第一茬茅窝菌产品，每平方米纯茅草区草地的第一茬茅窝菌平均产量为0.18kg；所述子实体即茅窝菌产品采收第一茬后，继续控制遮阴网下空气的相对湿度85％以上，保持适当通风和遮阴，还会有茅窝菌子实体从浅沟外土壤的茅草基部继续生长出来，并发育到可采收的成熟状态；共连续采收5茬茅窝菌菇，每平方米纯茅草区草地的茅窝菌产量达到0.71kg。

实施例2

在所述盐碱草地纯茅草区，与实施例1步骤(4)-(5)同时进行本实施例的操作，基本重复该二步骤的操作，区别在于步骤(4)中茅窝菌栽培种播种、覆土后在浅沟表面覆盖宽7cm、不含灭草剂的带状透明塑料薄膜，每隔20cm左右覆土一把压住塑料薄膜带，然后用微喷带进行微喷将茅草地浇透。

和实施例1的情况相比，发现该实施例中浅沟土壤中菌丝的生长较多较壮，浅沟周边茅草下土壤中菌丝的生长较多较快较壮；茅窝菌子实体也主要从浅沟外土壤的茅草基部即茅草入土的位置生长出来，在浅沟外缘有少量茅窝菌子实体生长出来。每平方米茅草地的第一茬茅窝菌平均产量为0.26kg，连续采收5茬茅窝菌菇，每平方米茅草地的茅窝菌总产量达到0.80kg。

实施例3

在所述盐碱草地伴生杂草的茅草区，与实施例1步骤(4)-(5)同时进行该二步骤的操作。

发现该实施例中浅沟土壤中、浅沟周边茅草下土壤中菌丝的生长情况，与实施例1的情况相近，茅窝菌子实体也主要从浅沟外土壤的茅草基部即茅草入土的位置生长出来，在浅沟外缘有少量茅窝菌子实体生长出来；伴生的少量芦苇、二色补血草、苘麻、萝藦、结缕草、中华补血草、罗布麻、狗尾草、小蓟，柽柳等杂类植物根系所及之土壤内，一般没有茅窝菌菌丝生长过去，这些杂草的根部之上也不出菇。

本实施例每平方米茅草地的第一茬茅窝菌平均产量为0.15kg，连续采收5茬茅窝菌菇，每平方米茅草地的茅窝菌总产量为0.53kg。

实施例4

在所述无盐碱草地的纯茅草区，与实施例1步骤(4)-(5)同时进行该二步骤的操作。

发现该实施例中浅沟土壤中、浅沟周边茅草下土壤中菌丝的生长情况，略优于实施例1的情况，茅窝菌子实体也主要从浅沟外土壤的茅草基部即茅草入土的位置生长出来，在浅沟外缘有少量茅窝菌子实体生长出来。

本实施例每平方米茅草地的第一茬茅窝菌平均产量为0.33kg，连续采收5茬茅窝菌菇，每平方米茅草地的茅窝菌总产量达到0.92kg。

实施例5

在所述无盐碱草地伴生杂草的茅草区，与实施例1步骤(4)-(5)同时进行该二步骤的操作。

发现该实施例中浅沟土壤中、浅沟周边茅草下土壤中菌丝的生长情况，与实施例1的情况相近，茅窝菌子实体也主要从浅沟外土壤的茅草基部即茅草入土的位置生长出来，在浅沟外缘有少量茅窝菌子实体生长出来；伴生的少量芦苇、二色补血草、苘麻、萝藦、结缕草、中华补血草、罗布麻、狗尾草、小蓟，柽柳等杂类植物根系所及之土壤内，一般没有茅窝菌菌丝生长过去，这些杂草的根部之上也不出菇。

本实施例每平方米茅草地的第一茬茅窝菌平均产量为0.26kg，连续采收5茬茅窝菌菇，每平方米茅草地的茅窝菌总产量达到0.79kg。

将实施例1-5所收获茅窝菌，与野生茅窝菌进行对比，发现在颜色、质地、口感、香味方面几乎相当，菌盖尺寸和单重略大，普遍较为强壮，一致性更好。

对比例1

在进行实施例1步骤(2)操作的同时，基本重复进行该步骤的操作，区别在于将干茅草替换为相同长度的结缕草，结果所制备的复合培养基接种步骤(1)新采集的茅窝菌原种后存在原种无法存活、不生长菌丝的问题。

对比例2

在进行实施例1步骤(3)操作的同时，基本重复进行该步骤的操作，区别在于将干茅草替换为相同长度的结缕草，结果所制备的灭菌袋装培养料在接种[0004]段步骤(2)制备的茅窝菌母种后存在菌丝不生长的问题。

对比例3

在进行实施例1步骤(2)-(3)操作的同时，基本重复该二步骤的操作，区别在于步骤(2)中，将干茅草200g不经水浸泡、不经水煮，直接与马铃薯切片200g、糖20g、琼脂20g加水2000g浸泡30min，大火煮至水沸并中火保持沸腾26min，四层纱布过滤，得滤液1000ml，冷却至室温，制备茅草-PDA培养基；取适量茅草-PDA培养基置于无菌培养试管，接种实施例1步骤(1)新采集的茅窝菌原种一粒，在23-24℃培养，发现菌丝生长较慢，长势明显较弱，培养10天时只长出少量菌丝，尝试作为茅窝菌母种用于实施例1步骤(3)的两个灭菌袋料中接种，一个袋料接种菌量与实施例1步骤(3)基本相同，在23-26℃培养过程中菌丝生长也较慢，长势明显弱，另一个袋料中接种菌量加倍，培养25天时袋内远不能长满菌丝。

对比例4

在进行实施例1步骤(2)-(3)操作的同时，基本重复该二步骤的操作，区别在于步骤(2)中，不制备茅草提取液，而仅用马铃薯切片200g、糖20g、琼脂20g加水1400g，大火煮至水沸并中火保持沸腾23min，四层纱布过滤，得滤液1000ml，冷却至室温，制备PDA培养基；取适量PDA培养基置于无菌培养试管，接种实施例1步骤(1)新采集的茅窝菌原种一粒，在23-24℃培养10天，发现菌丝生长很慢，长势很弱，培养20天也于远不能长满培养容器，将试管内长出全部菌丝作为茅窝菌母种用于实施例1步骤(3)的一个灭菌袋料中接种，在23-26℃培养过程中菌丝生长也较慢，长势明显弱，培养30天时袋内远不能长满菌丝。

对比例5

在进行实施例1步骤(2)-(3)操作的同时，基本重复该二步骤的操作，区别在于将实施例1步骤(2)中所制备茅草提取液直接用作培养基，置于无菌培养试管，接种实施例1步骤(1)新采集的茅窝菌原种一粒，在23-24℃培养，发现菌丝生长很慢，长势很弱，培养10天时只长出少量菌丝，将试管内长出全部菌丝作为茅窝菌母种用于实施例1步骤(3)的一个灭菌袋料中接种，在23-26℃培养过程中菌丝生长也很慢，长势很弱，培养25天时袋内也只长出少量菌丝。

对比例6

在进行实施例1步骤(3)操作的同时，基本重复该步骤的操作，区别在于末用干茅草而仅用棉籽皮、麦麸、石灰，制备高压灭菌袋料，将干茅草替换为相应比例的棉籽皮、麦麸，石灰的量不变，具体为：取棉籽皮1850g、麦麸170g、石灰20g混匀，加水至总质量6000g(含水66％)并处理均匀后分装入多个聚丙烯塑料袋，每袋装料1kg左右，装袋料在高压灭菌锅126℃X2h灭菌，灭菌后降至室温后，取两个灭菌袋料在无菌条件下分别接种实施例1步骤(2)所得茅窝菌母种，一个袋料接种菌量与实施例1步骤(3)基本相同，在23-26℃培养过程中菌丝生长也很慢，长势很弱，另一个袋料中接种菌量加倍，培养25天时袋内也只长出少量菌丝，袋内都远不能长满菌丝。

对比例7

在进行实施例1步骤(3)操作的同时，基本重复该步骤的操作，区别在于直接用干茅草、石灰而不用棉籽皮、麦麸，制备高压灭菌袋料，将棉籽皮、麦麸替换为基本相同量的干茅草，石灰的量不变，具体为：取干茅草2000g，加水至总质量6000g浸泡30min，茅草可吸尽水分，加石灰20g处理均匀(含水66.4％)后分装入多个聚丙烯塑料袋，每袋装料1kg左右，装袋料在高压灭菌锅126℃X2h灭菌，灭菌后降至室温后，取两个灭菌袋料在无菌条件下分别接种实施例1步骤(2)所得茅窝菌母种，一个袋料接种菌量与实施例1步骤(3)基本相同，在23-26℃培养过程中菌丝生长很慢，长势很弱，另一个袋料中接种菌量加倍，培养25天时袋内也都只长出少量菌丝，袋内都远不能长满菌丝。

对比例8

在进行实施例1步骤(2)操作的同时，基本重复进行该步骤的操作，区别在于将干茅草替换为相同长度的结缕草，结果所制备的复合培养基接种步骤(1)新采集的茅窝菌原种后存在原种无法存活、不生长菌丝的问题。

对比例9

在进行实施例1步骤(3)操作的同时，基本重复进行该步骤的操作，区别在于将干茅草替换为相同长度的结缕草，结果所制备的灭菌袋装培养料在接种[0004]段步骤(2)制备的茅窝菌母种后存在菌丝不生长的问题。

对比例10

在所述盐碱草地的杂草区，与实施例1步骤(4)-(5)同时进行该二步骤的操作。

发现该对比例的浅沟土壤中无杂草根系处菌丝能生长，有杂草根系处基本无菌丝生长，浅沟周边杂草下土壤中杂草根系处基本无菌丝生长，这些杂草的根部之上也不出菇。

对比例11

在所述无盐碱草地的杂草区，与实施例1步骤(4)-(5)同时进行该二步骤的操作。

发现该对比例的浅沟土壤中无杂草根系处菌丝能生长，有杂草根系处基本无菌丝生长，浅沟周边杂草下土壤中杂草根系处基本无菌丝生长，这些杂草的根部之上也不出菇。

Claims (7)

1.一种茅窝菌仿野生栽培的方法，包括以下步骤：

(1)选择具有典型性状和长势良好的野生茅窝菌菌株，采用组织分离法获取茅窝菌子实体，作为茅窝菌原种保存或直接用于步骤(2)的接种操作；

(2)取剪切或打碎的干茅草，加5-10倍质量的水浸泡20-60min，煮至水沸并保持微沸20-60min，过滤，所得滤液为茅草提取液；所述茅草提取液加所需量的马铃薯切片、糖、琼脂，煮至水沸并保持沸腾20-40min，过滤，所得滤液冷却后为茅草-PDA复合培养基；所述茅草-PDA复合培养基置于无菌培养容器，接种步骤(1)采集或保存的茅窝菌原种，在22-24℃培养5-8天至菌丝长满培养容器，得茅窝菌母种；

(3)以质量份数计，取剪切或打碎的干茅草30份，加3-5倍质量的水浸泡20-30min，加棉籽皮60-65份、麦麸3-10份、石灰0.5-2份，按该比例配料并混匀，补加水至含水占总质量的65-70％并处理均匀后装袋，装袋料用高压灭菌法灭菌，灭菌后降温至自然温度后，在无菌条件下接种步骤(2)所得茅窝菌母种，在23-26℃培养20-30天至袋内长满菌丝，得茅窝菌栽培种；

(4)在茅草地开出深2-3cm，宽5-8cm的浅沟，浅沟与浅沟间距30-50cm；将茅窝菌栽培种处理至0.5-1.5cm尺寸或厚度，播种在浅沟内，覆盖0.4-0.7cm厚的细土，然后用微喷带进行微喷将浅沟及茅草地浇透，促使茅窝菌菌丝在茅草地里生长；

(5)播种一个月后，在茅草地上距离地面1.5-2.0m处架设悬挂遮阴网，地面用微喷带进行微喷，使空气相对湿度达到85-95％，刺激茅窝菌子实体原基形成，促使茅窝菌子实体生长出菇；当茅窝菌子实体平展时，采收子实体，得茅窝菌产品。

2.如权利要求1所述茅窝菌仿野生栽培的方法，其特征在于，步骤(2)-(4)中，所述剪切或打碎的干茅草，其长度为0.5-2.0cm。

3.如权利要求1所述茅窝菌仿野生栽培的方法，其特征在于，步骤(2)中所述茅草-PDA复合培养基的原料配比，为每1000ml茅草提取液加厚度1-3mm马铃薯切片200g、糖20g、琼脂15-20g。

4.如权利要求1所述茅窝菌仿野生栽培的方法，其特征在于，步骤(4)中所用薄膜不含除草剂。

5.如权利要求1所述茅窝菌仿野生栽培的方法，其特征在于，步骤(4)中所述栽培种的野外播种时间是5月中旬。

6.如权利要求1所述茅窝菌仿野生栽培的方法，其特征在于，步骤(4)中所述茅草地包括盐碱茅草地和无盐碱茅草地。

7.如权利要求1所述茅窝菌仿野生栽培的方法，其特征在于，步骤(5)中，茅窝菌产品采收第一茬后，继续控制遮阴网内相对湿度85％以上，继续生长茅窝菌并采收多茬。