CN111727809B

CN111727809B - 一种香菇菌株及其培育方法和应用

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Publication number: CN111727809B
Application number: CN202010733297.8A
Authority: CN
Inventors: 梁晓生; 梁宏丽; 柳凤玉; 刘桂娟
Original assignee: Pingquan Xicai Application Mycology Technology Development Co ltd
Current assignee: Pingquan Xisheng Agricultural Development Co ltd
Priority date: 2020-07-27
Filing date: 2020-07-27
Publication date: 2021-12-24
Anticipated expiration: 2040-07-27
Also published as: CN111727809A

Abstract

本发明涉及食用菌培育技术领域，具体公开一种香菇菌株及其培育方法和应用。所述香菇菌株的菌种保藏号为CGMCC No.19652，其培育方法为将所述香菇菌株接种到母种培养基上培养得到母种菌丝，将所述菌丝接种到原种培养基中扩大培养得到原种菌丝，再将所述原种菌丝接种到菌袋培养基中进行菌袋培养和出菇管理。本发明香菇菌株与传统的香菇品种相比，兼具产量高、优质菇比例高、染菌率低、生物转化率高以及单株生长的特点，适合全国大范围推广种植。

Description

一种香菇菌株及其培育方法和应用

技术领域

本发明涉及食用菌培育技术领域，尤其涉及一种香菇菌株及其培育方法和应用。

背景技术

香菇(学名：Lentinusedodes)，是一种食用真菌，含有丰富的食物纤维、蛋白质、多糖和氨基酸等营养物质，具有提高机体免疫功能、延缓衰老、防癌抗癌、降血压、降血脂、降胆固醇、降血糖等多种功能。

目前全国各地香菇品种繁多，但优良菌株的选育和定向培育方面工作还较少，后备品种匮乏。我国香菇主栽品种中808和168属于中大型、硬质优质香菇品种，早在上世纪80年代就开始使用，但是808和168的生长发育周期长，且在长期的传代过程中，已经出现产量下降，抗逆性差，病虫害加重，畸形菇增多等劣化问题。早熟香菇品种中0912和868的生长发育周期较短、出菇量较大，但是由于出菇过多、过密，严重影响香菇品质。同时，808、168、0912和868四种香菇栽培品种都存在丛生率高的问题，进而易出现畸形菇，影响香菇的整体品质。

发明内容

针对现有香菇品种的产量低、抗病菌能力差以及丛生率高的问题，本发明提供一种香菇菌株及其培育方法和应用。

为达到上述发明目的，本发明实施例采用了如下的技术方案：

一种香菇菌株，其保藏号为CGMCC No.19652。该菌株从亲本为香菇168和香菇0912的杂交后代中选育得到，其属香菇(Lentinula edodes)，命名为平香3号，于2020年06月04日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址位于北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所。

相对于现有技术，本发明提供的香菇菌株与传统的香菇品种相比，兼具产量高、优质菇比例高、染菌率低、生物转化率高以及单株生长(丛生率低)的特点，是一种新型的优质香菇品种，适合全国大范围推广种植。

本发明还提供所述香菇菌株产生的原生质体。

本发明还提供所述香菇菌株产生的孢子。

本发明还提供所述香菇菌株产生的菌丝体。

本发明还提供所述香菇菌株产生的子实体。

本发明还提供包含所述香菇菌株的香菇菌棒。

本发明还提供所述的香菇菌株在香菇育种中的应用。

本发明还提供所述的香菇菌株在制备香菇子实体、香菇菌丝体和/或香菇孢子中的应用。

本发明还提供所述香菇菌株的培育方法。该培育方法至少包括以下步骤：

将所述香菇菌株的保藏菌种或子实体接种到母种培养基上培养得到母种菌丝，将所述母种菌丝接种到原种培养基中扩大培养得到原种菌丝，再将所述原种菌丝接种到菌袋培养基中进行菌袋培养和出菇管理。其中所述的菌袋培养和出菇管理方法均为现有香菇栽培的常规方法。

优选的，所述母种菌丝和所述原种菌丝的培养温度以及所述菌袋培养的温度均为20-30℃。

优选的，所述原种菌丝的培养和所述菌袋培养的环境湿度均为60-70％。

优选的，所述母种培养基的配方为：马铃薯180-220g/L，葡萄糖15-25g/L，KH₂PO₄2-4g/L，MgSO₄·7H₂O 0.4-0.6g/L，琼脂18-22g/L，pH自然。

优选的，所述原种培养基中各组分按质量配比为：木屑75-80份，麦麸15-25份，石膏0.5-1.5份，红糖0.5-1.5份，水120-150份，pH自然。

优选的，所述菌袋培养基中各组分按质量配比为：木屑78-80份，麦麸15-25份，石膏0.5-1.5份，水120-150份，pH自然。

附图说明

图1是本发明实施例2的拮抗试验中ZJ3与168菌株的拮抗线照片；

图2是本发明实施例2的拮抗试验中ZJ3与0912菌株的拮抗线照片；

图3是本发明实施例2中菌株ZJ3的第一潮菇的生长状态图；

图4是本发明实施例2中杂交新菌株中ZJ3以与亲本菌株168和0912的第一潮菇的形态如图4所示。

具体实施方式

为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合实施例，对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。

实施例1

香菇菌株的选育

1.1材料

亲本香菇菌株：北方地区香菇常用品种168和0912；

母种培养基：马铃薯200g/L，葡萄糖20g/L，KH₂PO₄3g/L，MgSO₄·7H₂O0.5 g/L，琼脂20g/L，pH自然。

栽培种培养基按质量配比：碎木屑78份，麦麸20份，石膏1份，红糖1份，水130份，pH自然。

出菇菌袋培养基按质量配比：碎木屑79份，麦麸20份，石膏1份，水130份，pH自然。

1.2工具

超净工作台、手术刀、研钵、高压灭菌锅、镊子、接种勺、无菌水、生化培养箱、平板培养皿。

1.3方法

从平泉市希才应用菌科技发展有限公司2019年8月中旬的出菇试验菌棒所出的香菇168和香菇0912的第一潮菇中选择单株生、柄短、盖厚、不易开伞且品相较好的香菇菌株作为亲本材料。

将选好的香菇168和香菇0912菌株的子实体置于超净工作台内，在酒精灯火焰上进行表面消毒，用手术刀片切掉菌幕及卷边，取菌褶部位及纵深0.5cm的肉质部位，置于经过酒精灯火焰杀菌和冷冻的研钵中，两个子实体组织块的总量控制在10g(香菇168的子实体为5g，香菇0912的子实体为5g)，然后加入经过灭菌的石英砂5g，开始研磨，将组织块研磨成粉末状后加入10g的0.4wt％的NaCl溶液，搅拌均匀形成糊状，然后用接种勺将糊状物转接在平板(母种培养基)的中央，置于25℃的生化培养箱中进行培养，待菌丝萌发生长后，进行3次转管培养。观察菌丝生长发育阶段的变化并进行记录，通过统计后保留经3次转管培养菌丝生长发育一致(主要包括菌丝生长速度、色泽、形态和浓密度方面)的菌株作为继续试验的材料。通过上述方法最后保留26个新菌株进入下一步的试验。

1.4筛选

将初步筛选得到的26株不同的菌株分别与原始的亲本菌株香菇168和香菇0912菌株做拮抗试验，将杂交筛选到的26株分别与亲本同时接种到母种培养基的平板中，在生化培养箱25℃恒温培养，通过观察平板中新菌株与亲本菌株之间是否存在拮抗线来判断杂交后代是否区别于两个亲本，进而判断新菌株是否杂交成功。

经过拮抗试验发现26株新菌株中有12株菌株(ZJ1-12)与亲本之间都出现明显的拮抗线，用亲本香菇168和香菇0912分别作为对照试验，对照组香菇168的拮抗试验结果和对照组香菇0912的拮抗试验结果均未出现拮抗线，证明ZJ1-12菌株均为杂交成功的杂交新菌株。

1.5选育

将筛选得到的12株菌株(ZJ1-12)接种到母种培养基平板中，观察菌丝的长势和形态，挑选出发菌快、颜色洁白、粗壮、生长速度快和转色深的菌株5株(ZJ1、ZJ3、ZJ4、ZJ11、ZJ12)。

将挑选出的5株菌株接种到PDF培养基上，在25℃常规培养得到母种菌丝，将所述母种菌丝接种到原种培养基中，温度为25℃、湿度为65％下进行常规扩大培养，当菌丝布满原种培养基后得到原种菌丝，再将所述原种菌丝按常规方法接种到菌袋培养基中进行菌袋培养和常规出菇管理。其中，菌袋为规格为17cm×60cm×0.005cm的聚乙烯折角袋，菌袋中的培养基湿重为1150g，菌袋培养的温度为25℃、湿度为65％，菌袋长满菌丝后刺大孔。

对上述5株菌株栽培过程中的发育时间、出菇率、染菌率和产量进行监测，监测结果如表1所示：

表1 6株杂交新菌株的发育时间、出菇率、染菌率和产量

注：出菇率＝出菇袋数/栽培袋数，染菌率＝染菌袋数/栽培袋数。

由表1可以看出，上述6株杂交新菌株中ZJ3(命名为平香3号)的发育时间、染菌率、出菇率和单袋平均产量等综合品质较高，表现出明显的杂交优势。

实施例2

对实施例1中选育出的杂交新菌株ZJ3的性状进行进一步观察。将杂交新菌株ZJ3分别与亲本菌株168和0912接种到同一平板中(母种培养基)进行拮抗试验。25℃培养5天后，平板中杂交新菌株ZJ3与亲本菌株168和0912之间出现明显的拮抗线，杂交新菌株ZJ3和亲本菌株168之间的拮抗线如图1所示，杂交新菌株ZJ3和亲本菌株0912之间的拮抗线如图2所示，说明菌株ZJ3确实为区别于168和0912的新菌株，且可以看出杂交新菌株ZJ3的菌丝生长状态也明显优于两个亲本菌株。

将实施例1中得到的ZJ3的原种菌丝按常规方法接种到菌袋培养基中进行菌袋培养和常规出菇管理。其中，接种的菌袋数为5000袋，菌袋为规格为17cm×60cm×0.005cm的聚乙烯折角袋，菌袋中的培养基湿重为1150g，菌袋培养的温度为25℃、湿度为65％，菌袋长满菌丝后刺大孔。

对ZJ3菌株栽培过程中的子实体性状、单菇重量、丛生率和生物转化率进行监测，监测结果如表2所示：

表2ZJ3株菌的子实体性状、单菇重量、丛生率和生物转化率

注：丛生率为第一潮菇采收时出现丛生菌株的菌袋数/栽培袋数。

由表2可以看出，杂交新菌株ZJ3的菌株性状、单菇重量和生物转化率均优于其两个亲本菌株，且杂交新菌株ZJ3的菌袋培养的第一潮菇中丛生率极低，为单株发育的优质新品种，表现出明显的杂交优势。杂交新菌株中ZJ3菌袋培养的第一潮菇的生长状态如图3所示，均为单株生长；杂交新菌株中ZJ3以及亲本菌株168和0912的第一潮菇的形态如图4所示。

对ZJ3菌株栽培得到的优质菇的比例进行检测，检测结果如表3所示：

表3ZJ3菌株栽培得到的优质菇的比例

品种	优质菇比例(％)	菜菇比例(％)
			ZJ3	99.9	0.1
168	75.3	24.7
			0912	47.9	52.1

注：优质菇标准为：菌盖直径在35mm以上，朵型圆整，菌盖卷边度不低于2mm，菌柄长度低于35mm；除优质菇以外的为菜菇。

对ZJ3菌株、168菌株和0912菌株的索状联合进行镜检：将待测菌株接种到母种培养基平板中，待菌丝布满平板后，随机选择50个视野，显微镜下观察索状联合的有无，通过索状联合的多寡来判断待测菌株的结实程度(索状联合越多，结实程度越高)。锁状联合的定义为：在蕈菌(香菇)的发育过程中，其菌丝的分化可明显的分成五个阶段，其中在第二阶段中有一个特殊的菌丝结合方式，即不同性别的一级菌丝发生接合后，通过质配形成了由双核构成二级菌丝，它通过独特的锁状连合，即形成喙状突起而连和两个细胞的方式不断使双核细胞分裂，从而使菌丝尖端不断向前延伸，常发生在菌丝顶端，形如锁状。

镜检结果显示，ZJ3菌株的50个视野中索状联合出现的概率为100％，168菌株的50个视野中索状联合出现的概率为76.2％，0912菌株的50个视野中索状联合出现的概率为43.6％。

综上，本发明提供的杂交新菌株ZJ3的发菌周期为110天，第一潮菇的采收时间为118天，出菇率达到99.5％，染菌率仅为0.1％，菌盖厚度为14-16mm，菌盖直径为45-63mm，菌柄长度为15-20mm，单菇重量达到50-65g，生物转化率达到97.7％，优质菇的比例达到99.9％，丛生率极低，几乎全部为单株生长。相比于传统的168和0912菌株，本发明的杂交新菌株ZJ3兼具生长周期短、染菌率低、产量高、优质菇比例和生物转化率大幅提高、结实程度高、单株生长等优良的品质，有极好的发展推广的潜力。

以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换或改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims

1.一种香菇菌株，其特征在于：其菌种保藏号为CGMCC No.19652。

2.权利要求1所述的香菇菌株产生的原生质体。

3.权利要求1所述的香菇菌株产生的孢子。

4.权利要求1所述的香菇菌株产生的菌丝体。

5.权利要求1所述的香菇菌株产生的子实体。

6.包含权利要求1所述的香菇菌株的香菇菌棒。

7.权利要求1所述的香菇菌株在香菇育种中的应用。

8.权利要求1所述的香菇菌株在制备香菇子实体、香菇菌丝体和/或香菇孢子中的应用。

9.权利要求1所述的香菇菌株的培育方法，其特征在于：将所述香菇菌株的保藏菌种或子实体接种到母种培养基上培养得到母种菌丝，将所述菌丝接种到原种培养基中扩大培养得到原种菌丝，再将所述原种菌丝接种到菌袋培养基中进行菌袋培养和出菇管理。

10.如权利要求9所述的培育方法，其特征在于：所述母种菌丝和所述原种菌丝的培养温度以及所述菌袋培养的温度均为20-30℃；和/或

所述原种菌丝的培养和所述菌袋培养的环境湿度均为60-70％；和/或

所述母种培养基的配方为：马铃薯180-220g/L，葡萄糖15-25g/L，KH₂PO₄ 2-4g/L，MgSO₄·7H₂O 0.4-0.6g/L，琼脂18-22g/L，pH自然；和/或

所述原种培养基中各组分按质量配比为：木屑75-80份，麦麸15-25份，石膏0.5-1.5份，红糖0.5-1.5份，水120-150份，pH自然；和/或

所述菌袋培养基中各组分按质量配比为：木屑78-80份，麦麸15-25份，石膏0.5-1.5份，水120-150份，pH自然。