CN111678755B - 一种尿液有形成分分析仪用管型质控物及其制备方法 - Google Patents
一种尿液有形成分分析仪用管型质控物及其制备方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN111678755B CN111678755B CN202010435855.2A CN202010435855A CN111678755B CN 111678755 B CN111678755 B CN 111678755B CN 202010435855 A CN202010435855 A CN 202010435855A CN 111678755 B CN111678755 B CN 111678755B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- tubular
- quality control
- analog
- initial
- cells
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- 238000003908 quality control method Methods 0.000 title claims abstract description 78
- 210000002700 urine Anatomy 0.000 title claims abstract description 51
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims abstract description 18
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims abstract description 75
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims abstract description 59
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims abstract description 43
- 238000012423 maintenance Methods 0.000 claims abstract description 34
- 239000006185 dispersion Substances 0.000 claims abstract description 30
- 239000000835 fiber Substances 0.000 claims abstract description 21
- 241000195493 Cryptophyta Species 0.000 claims abstract description 18
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 claims abstract description 13
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 claims abstract description 12
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 claims abstract description 11
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 claims abstract description 11
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 claims abstract description 10
- 241000206581 Gracilaria Species 0.000 claims abstract description 9
- 239000000463 material Substances 0.000 claims description 28
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 22
- 238000004088 simulation Methods 0.000 claims description 21
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 18
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims description 13
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 claims description 12
- 210000000601 blood cell Anatomy 0.000 claims description 12
- 230000000877 morphologic effect Effects 0.000 claims description 12
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 claims description 12
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 11
- 239000003219 hemolytic agent Substances 0.000 claims description 10
- 239000002245 particle Substances 0.000 claims description 10
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims description 8
- 239000012528 membrane Substances 0.000 claims description 8
- 239000011148 porous material Substances 0.000 claims description 8
- SXRSQZLOMIGNAQ-UHFFFAOYSA-N Glutaraldehyde Chemical compound O=CCCCC=O SXRSQZLOMIGNAQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 6
- 238000003756 stirring Methods 0.000 claims description 6
- 239000008098 formaldehyde solution Substances 0.000 claims description 5
- 239000003513 alkali Substances 0.000 claims description 4
- 238000002156 mixing Methods 0.000 claims description 4
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 claims description 3
- 229920000742 Cotton Polymers 0.000 claims description 3
- 241000195474 Sargassum Species 0.000 claims description 3
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 claims description 3
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 claims description 3
- 229940098773 bovine serum albumin Drugs 0.000 claims description 3
- 239000000428 dust Substances 0.000 claims description 3
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 claims description 3
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-M hydroxide Chemical compound [OH-] XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 3
- 230000003204 osmotic effect Effects 0.000 claims description 3
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 claims description 3
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 claims description 3
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 claims description 3
- 239000001509 sodium citrate Substances 0.000 claims description 3
- NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K sodium citrate Chemical compound O.O.[Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K 0.000 claims description 3
- 239000010902 straw Substances 0.000 claims description 3
- 238000009210 therapy by ultrasound Methods 0.000 claims description 3
- 239000002023 wood Substances 0.000 claims description 3
- 241000195649 Chlorella <Chlorellales> Species 0.000 claims description 2
- 210000001772 blood platelet Anatomy 0.000 claims description 2
- 230000003301 hydrolyzing effect Effects 0.000 claims description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims 1
- 230000021164 cell adhesion Effects 0.000 abstract description 3
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 16
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 11
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 10
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 7
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 5
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 4
- 239000013049 sediment Substances 0.000 description 4
- 244000037364 Cinnamomum aromaticum Species 0.000 description 3
- 235000014489 Cinnamomum aromaticum Nutrition 0.000 description 3
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 3
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 3
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 description 3
- 210000001635 urinary tract Anatomy 0.000 description 3
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 2
- 241000264279 Sargassum fusiforme Species 0.000 description 2
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 2
- 208000017169 kidney disease Diseases 0.000 description 2
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 2
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 2
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 2
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 2
- 241000497429 Obus Species 0.000 description 1
- 239000000470 constituent Substances 0.000 description 1
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 230000003203 everyday effect Effects 0.000 description 1
- 239000003527 fibrinolytic agent Substances 0.000 description 1
- 230000003480 fibrinolytic effect Effects 0.000 description 1
- 239000002657 fibrous material Substances 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 238000007689 inspection Methods 0.000 description 1
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 1
- 231100000956 nontoxicity Toxicity 0.000 description 1
- 231100000915 pathological change Toxicity 0.000 description 1
- 230000036285 pathological change Effects 0.000 description 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 1
- 238000001303 quality assessment method Methods 0.000 description 1
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 1
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 1
- 238000005353 urine analysis Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N1/00—Sampling; Preparing specimens for investigation
- G01N1/28—Preparing specimens for investigation including physical details of (bio-)chemical methods covered elsewhere, e.g. G01N33/50, C12Q
- G01N1/30—Staining; Impregnating ; Fixation; Dehydration; Multistep processes for preparing samples of tissue, cell or nucleic acid material and the like for analysis
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N1/00—Sampling; Preparing specimens for investigation
- G01N1/28—Preparing specimens for investigation including physical details of (bio-)chemical methods covered elsewhere, e.g. G01N33/50, C12Q
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N1/00—Sampling; Preparing specimens for investigation
- G01N1/28—Preparing specimens for investigation including physical details of (bio-)chemical methods covered elsewhere, e.g. G01N33/50, C12Q
- G01N1/34—Purifying; Cleaning
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N1/00—Sampling; Preparing specimens for investigation
- G01N1/28—Preparing specimens for investigation including physical details of (bio-)chemical methods covered elsewhere, e.g. G01N33/50, C12Q
- G01N2001/2893—Preparing calibration standards
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Immunology (AREA)
- Pathology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Abstract
本发明公开了一种尿液有形成分分析仪用管型质控物及其制备方法，尿液有形成分分析仪用管型质控物包括初始管型模拟物、固化剂、细胞保养液、红细胞和白细胞的一种或两种，利用离心或者水解制备初始管型模拟物，所述初始管型模拟物包括有尾藻细胞、纤细藻细胞或纤维中的任意一种，对所述有尾藻细胞进行去尾，对纤细藻细胞或纤维进行细胞粘附，改变所述初始管型模拟物的形态；然后对形态改进后的所述初始管型模拟物进行分离提纯，得到管型模拟物，其次，向所述管型模拟物中加入固化剂并保存，得到管型模拟物分散液；最后向所述管型模拟物分散液中加入制备剂，得到单项或多项管型质控物，适合广泛推广使用。
Description
技术领域
本发明涉及临床体液学检验质量控制技术领域，尤其涉及一种尿液有形成分分析仪用管型质控物及其制备方法。
背景技术
在一定条件下，肾脏滤出的蛋白质以及细胞或碎片在肾小管(远曲)、集合管中凝固后，可形成圆柱形蛋白聚体而随尿液排出，称为管型。尿中出现多量管型表示肾实质有病理性变化，因而在体外诊断尿常规检查中，能精确识别管型对肾脏类疾病诊断具有重要的意义。
目前，在尿液分析领域，自动化尿有形成分分析仪广泛应用于临床，在一定程度上取代了人工镜检，但是由于对尿有形成分分析系统的全面质量控制还很困难，有时得出的结果并不能确认，因此还经常需要进行人工复检，耗时耗力。
每天利用质控物对尿有形分析成分分析系统的质量控制是非常重要的一环，现市场上针对尿有形成分分析仪的商品化质控物常只含有WBC、RBC中的一种或者两种，或者如日本Sysmex公司使用不同直径大小的微粒子作为质控物，并不能对尿有形成分分析仪检测的项目全面控制，特别是对管型成分的控制，一般尿管型的出现意味肾脏出现重大毛病，因而对尿管型的质控具有重大意义，而市场上并没有商品化尿管型质控物。现有人收集人类肾脏疾病患者的阳性尿液，从中提取相关的有形成分，经过固定等处理，配制成多项质控物，但由于阳性样本收集的困难，并且是利用人体尿液可能会对操作者产生污染，因而只适于部分基层医院及个别仪器监控，并不能广泛推广使用。
发明内容
本发明的目的在于提供一种尿液有形成分分析仪用管型质控物及其制备方法，适合广泛推广使用。
为实现上述目的，第一方面，本发明提供了一种尿液有形成分分析仪用管型质控物的制备方法，包括：
利用离心或者水解制备初始管型模拟物，所述初始管型模拟物包括有尾藻细胞、纤细藻细胞或纤维中的任意一种；
对所述初始管型模拟物进行形态改进；
对形态改进后的所述初始管型模拟物进行分离提纯，得到管型模拟物；
向所述管型模拟物中加入固化剂并保存，得到管型模拟物分散液；
向所述管型模拟物分散液中加入制备剂，得到单项或多项管型质控物。
其中，所述利用离心或者水解制备初始管型模拟物，包括：
将各100mL的布氏双尾藻、新月藻、绿草履虫和纤细水绵中的一种或多种均分成两管，分别在500-1500rpm的速度下离心5-15min，得到有尾藻细胞或纤细藻细胞。
其中，所述利用离心或者水解制备初始管型模拟物，还包括：
量取质量分数为30％-70％的硫酸溶液，并在25-55℃下水解棉花、纸、木屑和秸秆中的一种或多种5min-5h后，在500-1500rpm的速度下离心5-15min，得到离心沉淀后，将所述离心沉淀分散于细胞保养液中，再次在500-1500rpm的速度下离心5-15min，得到纤维。
其中，对所述初始管型模拟物进行形态改进，包括：
将所述有尾藻细胞加入氢氧根浓度为0.05-2mol/L的碱溶液中5-60min后，在超声频率为50-50000Hz下超声0.05s-30min，且在搅拌速度为200-1000r/min下搅拌0.5h-5h，其中，所述有尾藻细胞和所述碱溶液的体积比为1:10-1:100。
其中，对所述初始管型模拟物进行形态改进，还包括：
向所述纤细藻细胞或所述纤维加入动物血细胞，再加入固化剂静置12-72h后，并在静置时间内每隔6-18h搅匀一次，再加入溶血剂混匀后静置5-20min，其中，所述纤细藻细胞与动物血细胞的体积比为1:1-1:10，与固化剂的体积比为1:2-1:20，与溶血剂的体积为1:1-1:30；所述纤维与动物血细胞的体积比为1:2-1:20,与固化剂的体积比为1:3-1:30，与溶血剂的体积为1:1-1:30；所述固化剂为质量分数是0.1-2％的甲醛溶液、戊二醛溶液或醋酸溶液中的一种，所述动物血细胞为红细胞、白细胞或血小板中的一种或多种。
其中，对形态改进后的所述初始管型模拟物进行分离提纯，得到管型模拟物，包括：
依次使用孔径为30-50μm和10-20μm的滤膜过滤去除所述形态改进后的所述初始管型模拟物中颗粒，并在500-1500rpm的速度下离心5-10min，得到管型模拟物。
其中，向所述管型模拟物中加入固化剂并保存，得到管型模拟物分散液，包括：
向所述管型模拟物中加入细胞保养液后，加入固化剂固化1-60min，并在500-1500rpm的速度下离心5-10min，将得到的沉淀分散于细胞保养液中，得到管型模拟物分散液，其中，所述管型模拟物与所述细胞保养液的体积比为1:5-1:50；所述管型模拟物与固化剂的体积比为1:5-1:50；所述固化剂为质量分数是0.1-2％的甲醛溶液、戊二醛溶液或醋酸溶液中的一种。
其中，向所述管型模拟物分散液中加入制备剂，得到单项或多项管型质控物，包括：
向所述管型模拟物分散液中加入细胞保养液或红细胞和白细胞的一种或两种，制得单项或多项管型质控物，其中，所述细胞保养液的渗透压为300±40mOsm/kg，pH值为7.3±0.5，包括抗生素0.4-2g/L、多糖0.1-20g/L、牛血清蛋白20-50g/L、氯化钠0.1-10g/L、柠檬酸钠0.1-20g/L和柠檬酸0.001-5g/L。
第二方面，本发明提供一种尿液有形成分分析仪用管型质控物，所述尿液有形成分分析仪用管型质控物包括初始管型模拟物、固化剂、细胞保养液、红细胞和白细胞的一种或两种。
其中，所述初始管型模拟物包括有尾藻细胞、纤细藻细胞或纤维中的任意一种。
本发明的一种尿液有形成分分析仪用管型质控物及其制备方法，包括初始管型模拟物、固化剂、细胞保养液、红细胞和白细胞的一种或两种，利用离心或者水解制备初始管型模拟物，所述初始管型模拟物包括有尾藻细胞、纤细藻细胞或纤维中的任意一种，对所述有尾藻细胞进行去尾，对纤细藻细胞或纤维进行细胞粘附，改变所述初始管型模拟物的形态；然后对形态改进后的所述初始管型模拟物进行分离提纯，得到管型模拟物，其次，向所述管型模拟物中加入固化剂并保存，得到管型模拟物分散液；最后向所述管型模拟物分散液中加入制备剂，得到单项或多项管型质控物，适合广泛推广使用。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
图1是本发明第一实施例提供的一种尿液有形成分分析仪用管型质控物的制备方法的步骤示意图。
图2是本发明第二实施例提供的一种尿液有形成分分析仪用管型质控物的制备方法的步骤示意图。
图3是本发明第三实施例提供的一种尿液有形成分分析仪用管型质控物的制备方法的步骤示意图。
图4为第一实施例制备的管型质控物的显微镜图。
图5为全自动尿液有形成分仪器URIT-1280、UD-1320分别测试第一实施例制备的管型质控物的测试图。
图6为第二实施例制备的管型质控物的显微镜图。
图7为全自动尿液有形成分仪器URIT-1280测试第二实施例制备的管型质控物的测试图。
图8为第三实施例中制备的管型质控物的显微镜图。
图9为全自动尿液有形成分仪器UD-1320测试第三实施例制备的管型质控物的测试图。
具体实施方式
下面详细描述本发明的实施例，所述实施例的示例在附图中示出，其中自始至终相同或类似的标号表示相同或类似的元件或具有相同或类似功能的元件。下面通过参考附图描述的实施例是示例性的，旨在用于解释本发明，而不能理解为对本发明的限制。
请参阅图1，本发明第一实施例提供的一种尿液有形成分分析仪用管型质控物的制备方法，包括：
S101、利用离心将布氏双尾藻原液制备成初始管型模拟物。
具体的，取100mL布氏双尾藻原液分成两管，每管各50mL，以1000rpm转速离心10min，去除上清，提取纯布氏双尾藻沉淀，每管约有1mL，获得初始管型模拟物。
S102、对所述初始管型模拟物进行形态改进。
具体的，向获得的两管布氏双尾藻沉淀中分别加入50mL氢氧根浓度为1mol/L的氢氧化钠溶液，30min后进行超声处理，超声的频率为10000Hz，超声的时间为1s，获得形态改进后的初始管型模拟物。
S103、对形态改进后的所述初始管型模拟物进行分离提纯，得到管型模拟物。
具体的，使用孔径为50μm的滤膜过滤除去所述形态改进后的初始管型模拟物中的大片段以及大颗粒，再使用孔径为15μm的滤膜过滤余下的小碎片及颗粒，获得符合要求的管型模拟物；再以1000rpm的速度离心10min，去除上清液，得到1.1mL浓缩后的符合要求的管型质控物。
S104、向所述管型模拟物中加入固化剂并保存，得到管型模拟物分散液。
具体的，将获得的1.1mL符合要求的管型模拟物分散于25mL细胞保养液中，然后加入25mL质量分数为2％的甲醛固化剂固化10min，最后以1000rpm的转速离心10min，去上清取沉淀，并将获得的沉淀分散于20mL细胞保养液后保存，获得管型模拟物分散液。
S105、向所述管型模拟物分散液中加入细胞保养液，得到单项管型质控物。
具体的，取所述管型模拟物分散液1mL，加入200mL细胞保养液以调节管型模拟物的浓度，获得单项管型质控物。
在10×40倍光学显微镜下观察上述制备的单项管型质控物，结果如图4所示。利用桂林优利特全自动尿液有形成分仪器URIT-1280、UD-1320分别对上述制备的单项管型质控物进行测试，测试结果如图5所示。可见制备得到的单项管型质控物形态与临床样本相近，且能够被尿液有形成分分析仪识别为管型。
利用桂林优利特全自动尿液有形成分仪器URIT-1280的测试上述制备的单项管型质控物的开瓶稳定性，测试结果见表1。
表1
由表1可知，第一实施例中的方法可以有效去取有尾藻细胞的尾部，模拟管型，通过该方法制得的单项管型质控物在6个月内形态完整，被仪器识别为管型的浓度无显著差异，说明其性能稳定。
请参阅图2，本发明第二实施例提供的一种尿液有形成分分析仪用管型质控物的制备方法，包括：
S201、利用离心将新月藻原液制备成初始管型模拟物。
具体的，取100mL新月藻原液分成两管，每管各50mL，以1500rpm转速离心8min，去除上清，提取纯新月藻沉淀，每管约有1.5mL，获得初始管型模拟物。
S202、对所述初始管型模拟物进行形态改进。
具体的，向获得的两管纯新月藻沉淀中分别加入5mL羊血红细胞，然后再加入6.5mL质量分数是0.25％的戊二醛固化剂，静置72h，期间每隔12h搅匀一次，最后再加入13mL溶血剂，混匀后静置10min，获得形态改进后的初始管型模拟物。
S203、对形态改进后的所述初始管型模拟物进行分离提纯，得到管型模拟物。
具体的，使用孔径为30μm的滤膜过滤除去所述形态改进后的初始管型模拟物中的大片段以及大颗粒，再使用孔径为10μm的滤膜过滤余下的小碎片及颗粒，获得符合要求的管型模拟物；再以1000rpm的速度离心10min，去除上清液，得到1.2mL浓缩后的符合要求的管型质控物。
S204、向所述管型模拟物中加入固化剂并保存，得到管型模拟物分散液。
具体的，将获得的1.2mL符合要求的管型模拟物分散于40mL细胞保养液中，然后加入40mL质量分数是0.5％的戊二醛固化剂固化1min，再以1500rpm的转速离心8min，去上清取沉淀，并将获得的沉淀分散于30mL细胞保养液后保存，获得管型模拟物分散液。
S205、向所述管型模拟物分散液中加入细胞保养液，得到单项管型质控物。
具体的，取所述管型模拟物分散液1mL，加入150mL细胞保养液以调节管型模拟物的浓度，获得单项管型质控物。
在10×40倍光学显微镜下观察上述制备的单项管型质控物，结果如图6所示，利用桂林优利特全自动尿液有形成分仪器URIT-1280对上述制备的单项管型质控物进行测试，测试结果如图7所示，可见制备得到的单项管型质控物形态与临床样本相似，且能够被尿液有形成分分析仪识别为管型。
利用桂林优利特全自动尿液有形成分仪器URIT-1280的测试上述制备的单项管型质控物的开瓶稳定性，检测结果见表2。
表2
| 测试时间 | 总颗粒数 | 识别为管型数目 | 形态 |
| 2018.04.05 | 7 | 6 | 完整 |
| 2018.05.09 | 6 | 6 | 完整 |
| 2018.06.12 | 8 | 6 | 完整 |
| 2018.07.15 | 7 | 5 | 完整 |
| 2018.08.20 | 8 | 7 | 完整 |
| 2018.09.25 | 8 | 7 | 完整 |
| 2018.10.30 | 7 | 5 | 完整 |
由表2可知，第二实施例中的方法可以有效增加纤细类藻细胞的直径，使得该法制得的管型模拟物能够被仪器识别为管型，同时在初始管型模拟物的形态改进过程中，通过加入溶血剂溶去管型模拟物上不稳定的动物血细胞以提升该模拟物的稳定性，并去除多余的游离动物血细胞。通过该方法制得的单项管型质控物在6个月内形态完整，被仪器识别为管型的浓度无显著差异，说明其性能稳定。
请参阅图3，本发明第三实施例提供的一种尿液有形成分分析仪用管型质控物的制备方法，包括：
S301、利用水解将纸制备成初始管型模拟物。
具体的，配制80mL质量分数为50％的硫酸溶液，分为两份，每份各40mL，待硫酸溶液冷却至室温后，分别加入1g纸，搅拌至肉眼看不见纸屑后，放入37℃的烘箱内水解反应2h，然后以1200rpm的转速离心6min，去上清取沉淀，将该沉淀分散于50mL细胞保养液中，再以1200rpm的转速离心6min，去除上清，再次收集沉淀约1mL，获得初始管型模拟物。
S302、对所述初始管型模拟物进行形态改进。
具体的，向获得的两初始管型模拟物中分别加入6mL羊血红细胞，然后再加入6mL质量分数是1.8％的醋酸固化剂，静置48h，期间每隔12h搅匀一次，最后再加入12mL溶血剂，混匀后静置10min，获得形态改进后的初始管型模拟物。
S303、对形态改进后的所述初始管型模拟物进行分离提纯，得到管型模拟物。
具体的，对获得的形态改进后的初始管型模拟物使用孔径为50μm的滤膜过滤除去所述形态改进后的初始管型模拟物中的大片段以及大颗粒，再使用孔径为10μm的滤膜过滤余下的小碎片及颗粒，获得符合要求的管型模拟物；再以1000rpm的速度离心10min，去除上清，得到1.5mL浓缩后的符合要求的管型质控物。
S304、向所述管型模拟物中加入固化剂并保存，得到管型模拟物分散液。
具体的，将获得的符合要求的管型模拟物分散于20mL细胞保养液中，然后加入40mL质量分数是1％的甲醛固化剂固化5min，最后以1200rpm的转速离心6min，去上清取沉淀，然后将获得的沉淀分散于10mL细胞保养液后保存，获得管型模拟物分散液。
S305、向所述管型模拟物分散液中加入细胞保养液，得到单项管型质控物。
具体的，取所述管型模拟物分散液1mL，加入100mL细胞保养液以调节管型模拟物的浓度，获得单项管型质控物。
在10×40倍光学显微镜下观察上述制备的单项管型质控物，结果如图8所示；利用桂林优利特全自动尿液有形成分仪器UD-1320分别对上述制备的单项管型质控物进行测试，结果如图9所示，可见制备得到的单项管型质控物形态与临床样本相近，且能够被尿液有形成分分析仪识别为管型。
利用桂林优利特全自动尿液有形成分仪器UD-1320的测试上述制备的单项管型质控物的开瓶稳定性，测试结果见表3。
表3
由表3可知，第三实施例中的方法可以有效增加纤维的的直径，使得该法制得的管型模拟物能够被仪器识别为管型，同时在初始管型模拟物的形态改进过程中，通过加入溶血剂溶去管型模拟物上不稳定的动物血细胞以提升该模拟物的稳定性，并去除多余的游离动物血细胞。通过该方法制得的单项管型质控物在6个月内形态完整，被仪器识别为管型的浓度无显著差异，说明其性能稳定。
本发明提供一种尿液有形成分分析仪用管型质控物，所述尿液有形成分分析仪用管型质控物包括初始管型模拟物、固化剂、细胞保养液、红细胞和白细胞的一种或两种。
在本实施方式中，所述尿液有形成分分析仪用管型质控物包括初始管型模拟物、固化剂、细胞保养液、红细胞和白细胞的一种或两种，所述固化剂为质量分数是0.1-2％的甲醛溶液、戊二醛溶液或醋酸溶液中的一种，所述所述细胞保养液的渗透压为300±40mOsm/kg，pH值为7.3±0.5，包括抗生素0.4-2g/L、多糖0.1-20g/L、牛血清蛋白20-50g/L、氯化钠0.1-10g/L、柠檬酸钠0.1-20g/L和柠檬酸0.001-5g/L，原料易得，成本低且无毒害，制备的管型质控物稳定性好、灵敏度高、安全性高，可适于全自动尿有形成分分析仪的质控，弥补了市场尿管型质控物的空缺，能够广泛应用于室间质评。
进一步的，所述初始管型模拟物包括有尾藻细胞、纤细藻细胞或纤维中的任意一种。
在本实施方式中，所述有尾藻细胞和所述纤细藻细胞来源于布氏双尾藻、新月藻、绿草履虫或纤细水绵中的至少一种，所述纤维材料为棉花、纸、木屑、秸秆中的至少一种，原料易得，成本低且无毒害，制备的管型质控物稳定性好、灵敏度高、安全性高，可适于全自动尿有形成分分析仪的质控，弥补了市场尿管型质控物的空缺，能够广泛应用于室间质评。
本发明的一种尿液有形成分分析仪用管型质控物及其制备方法，包括初始管型模拟物、固化剂、细胞保养液、红细胞和白细胞的一种或两种，利用离心或者水解制备初始管型模拟物，所述初始管型模拟物包括有尾藻细胞、纤细藻细胞或纤维中的任意一种，对所述有尾藻细胞进行去尾，对纤细藻细胞或纤维进行细胞粘附，改变所述初始管型模拟物的形态；然后对形态改进后的所述初始管型模拟物进行分离提纯，得到管型模拟物，其次，向所述管型模拟物中加入固化剂并保存，得到管型模拟物分散液；最后向所述管型模拟物分散液中加入制备剂，得到单项或多项管型质控物，适合广泛推广使用。
以上所揭露的仅为本发明一种较佳实施例而已，当然不能以此来限定本发明之权利范围，本领域普通技术人员可以理解实现上述实施例的全部或部分流程，并依本发明权利要求所作的等同变化，仍属于发明所涵盖的范围。
Claims (4)
1.一种尿液有形成分分析仪用管型质控物的制备方法，其特征在于，包括：
利用离心或者水解制备初始管型模拟物，所述初始管型模拟物包括有尾藻细胞、纤细藻细胞或纤维中的任意一种；
对所述初始管型模拟物进行形态改进；
对形态改进后的所述初始管型模拟物进行分离提纯，得到管型模拟物；
向所述管型模拟物中加入固化剂并保存，得到管型模拟物分散液；
向所述管型模拟物分散液中加入制备剂，得到单项或多项管型质控物；
所述利用离心或者水解制备初始管型模拟物，包括：
将各100mL的布氏双尾藻、新月藻、绿草履虫和纤细水绵中的一种或多种均分成两管，分别在500-1500rpm的速度下离心5-15min，得到有尾藻细胞或纤细藻细胞；
所述利用离心或者水解制备初始管型模拟物，还包括：
量取质量分数为30%-70%的硫酸溶液，并在25-55℃下水解棉花、纸、木屑和秸秆中的一种或多种5min-5h后，在500-1500rpm的速度下离心5-15min，得到离心沉淀后，将所述离心沉淀分散于细胞保养液中，再次在500-1500rpm的速度下离心5-15min，得到纤维；
对所述初始管型模拟物进行形态改进，包括：
将所述有尾藻细胞加入氢氧根浓度为0.05-2mol/L的碱溶液中5-60min后，在超声频率为50-50000Hz下超声0.05s-30min，且在搅拌速度为200-1000r/min下搅拌0.5h-5h，其中，所述有尾藻细胞和所述碱溶液的体积比为1:10-1:100；
对所述初始管型模拟物进行形态改进，还包括：
向所述纤细藻细胞或所述纤维加入动物血细胞，再加入固化剂静置12-72h后，并在静置时间内每隔6-18h搅匀一次，再加入溶血剂混匀后静置5-20min，其中，所述纤细藻细胞与动物血细胞的体积比为1:1-1:10，与固化剂的体积比为1:2-1:20，与溶血剂的体积为1:1-1:30；所述纤维与动物血细胞的体积比为1:2-1:20,与固化剂的体积比为1:3-1:30，与溶血剂的体积为1:1-1:30；所述固化剂为质量分数是0.1-2%的甲醛溶液、戊二醛溶液或醋酸溶液中的一种，所述动物血细胞为红细胞、白细胞或血小板中的一种或多种。
2.如权利要求1所述的一种尿液有形成分分析仪用管型质控物的制备方法，其特征在于，对形态改进后的所述初始管型模拟物进行分离提纯，得到管型模拟物，包括：
依次使用孔径为30-50µm和10-20µm的滤膜过滤去除所述形态改进后的所述初始管型模拟物中颗粒，并在500-1500rpm的速度下离心5-10min，得到管型模拟物。
3.如权利要求2所述的一种尿液有形成分分析仪用管型质控物的制备方法，其特征在于，向所述管型模拟物中加入固化剂并保存，得到管型模拟物分散液，包括：
向所述管型模拟物中加入细胞保养液后，加入固化剂固化1-60min，并在500-1500rpm的速度下离心5-10min，将得到的沉淀分散于细胞保养液中，得到管型模拟物分散液，其中，所述管型模拟物与所述细胞保养液的体积比为1:5-1:50；所述管型模拟物与固化剂的体积比为1:5-1:50；所述固化剂为质量分数是0.1-2%的甲醛溶液、戊二醛溶液或醋酸溶液中的一种。
4.如权利要求3所述的一种尿液有形成分分析仪用管型质控物的制备方法，其特征在于，向所述管型模拟物分散液中加入制备剂，得到单项或多项管型质控物，包括：
向所述管型模拟物分散液中加入细胞保养液、红细胞和白细胞的一种或两种，制得单项或多项管型质控物，其中，所述细胞保养液的渗透压为300±40mOsm/kg，pH值为7.3±0.5，包括抗生素0.4-2g/L、多糖0.1-20g/L、牛血清蛋白20-50g/L、氯化钠0.1-10g/L、柠檬酸钠0.1-20g/L和柠檬酸0.001-5g/L。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202010435855.2A CN111678755B (zh) | 2020-05-21 | 2020-05-21 | 一种尿液有形成分分析仪用管型质控物及其制备方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202010435855.2A CN111678755B (zh) | 2020-05-21 | 2020-05-21 | 一种尿液有形成分分析仪用管型质控物及其制备方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN111678755A CN111678755A (zh) | 2020-09-18 |
| CN111678755B true CN111678755B (zh) | 2023-09-19 |
Family
ID=72452112
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202010435855.2A Active CN111678755B (zh) | 2020-05-21 | 2020-05-21 | 一种尿液有形成分分析仪用管型质控物及其制备方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN111678755B (zh) |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN112881114A (zh) * | 2021-01-12 | 2021-06-01 | 桂林优利特医疗电子有限公司 | 阴道分泌物有形成分分析用质量控制组合物及制备方法 |
Citations (12)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5059394A (en) * | 1986-08-13 | 1991-10-22 | Lifescan, Inc. | Analytical device for the automated determination of analytes in fluids |
| US5780239A (en) * | 1994-11-23 | 1998-07-14 | Carter; Jesse M. | Method for the determination of cast in urine |
| EP1082614A1 (en) * | 1999-03-26 | 2001-03-14 | Idexx Laboratories, Inc. | Method and device for detecting analytes in fluids |
| CN101285841A (zh) * | 2008-04-25 | 2008-10-15 | 四川省迈克科技有限责任公司 | 三分类全血质控物模拟物及其制备方法 |
| JP2012078334A (ja) * | 2010-10-05 | 2012-04-19 | Aska Special Laboratory Co Ltd | 微量の血液から血漿または血清を分離する方法とその器具 |
| CN103196815A (zh) * | 2013-04-08 | 2013-07-10 | 桂林优利特医疗电子有限公司 | 尿沉渣计数池 |
| EP2996789A1 (en) * | 2013-05-17 | 2016-03-23 | Siemens Healthcare Diagnostics Inc. | Particle release and collection |
| CN105606424A (zh) * | 2016-03-21 | 2016-05-25 | 任亮 | 棉布耐汗渍色牢度分级标准样品及其制备方法 |
| CN106932598A (zh) * | 2017-03-24 | 2017-07-07 | 南通伊仕生物技术股份有限公司 | Hcg周期检测试剂盒及其制备方法 |
| CN107271234A (zh) * | 2017-06-19 | 2017-10-20 | 桂林市贝丛医疗科技有限公司 | 尿液有形成分分析仪用质控物/控制物质及其制备方法 |
| CN110864945A (zh) * | 2019-11-11 | 2020-03-06 | 珠海高瑞特医疗科技有限公司 | 一种精浆生化质控品及其制备方法 |
| CN110959116A (zh) * | 2017-08-28 | 2020-04-03 | 美国西门子医学诊断股份有限公司 | 供基于显微术的尿沉渣分析仪使用的质量控制物质及其使用方法 |
Family Cites Families (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US7236623B2 (en) * | 2000-04-24 | 2007-06-26 | International Remote Imaging Systems, Inc. | Analyte recognition for urinalysis diagnostic system |
| AR034413A1 (es) * | 2000-08-25 | 2004-02-25 | Nestor Abel Chamoles | Metodo para determinar la actividad de las enzimas lisosomales |
| US20030203366A1 (en) * | 2002-04-26 | 2003-10-30 | Large Scale Proteomics Corporation | Microarray channel devices produced by a block mold process |
| US20050254995A1 (en) * | 2004-05-12 | 2005-11-17 | Harvard Apparatus, Inc. | Devices and methods to immobilize analytes of interest |
| CN104360052B (zh) * | 2014-11-05 | 2016-08-17 | 中国农业科学院农业质量标准与检测技术研究所 | 一种克伦特罗检测质控用动物尿液干粉及其制备方法与应用 |
-
2020
- 2020-05-21 CN CN202010435855.2A patent/CN111678755B/zh active Active
Patent Citations (12)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5059394A (en) * | 1986-08-13 | 1991-10-22 | Lifescan, Inc. | Analytical device for the automated determination of analytes in fluids |
| US5780239A (en) * | 1994-11-23 | 1998-07-14 | Carter; Jesse M. | Method for the determination of cast in urine |
| EP1082614A1 (en) * | 1999-03-26 | 2001-03-14 | Idexx Laboratories, Inc. | Method and device for detecting analytes in fluids |
| CN101285841A (zh) * | 2008-04-25 | 2008-10-15 | 四川省迈克科技有限责任公司 | 三分类全血质控物模拟物及其制备方法 |
| JP2012078334A (ja) * | 2010-10-05 | 2012-04-19 | Aska Special Laboratory Co Ltd | 微量の血液から血漿または血清を分離する方法とその器具 |
| CN103196815A (zh) * | 2013-04-08 | 2013-07-10 | 桂林优利特医疗电子有限公司 | 尿沉渣计数池 |
| EP2996789A1 (en) * | 2013-05-17 | 2016-03-23 | Siemens Healthcare Diagnostics Inc. | Particle release and collection |
| CN105606424A (zh) * | 2016-03-21 | 2016-05-25 | 任亮 | 棉布耐汗渍色牢度分级标准样品及其制备方法 |
| CN106932598A (zh) * | 2017-03-24 | 2017-07-07 | 南通伊仕生物技术股份有限公司 | Hcg周期检测试剂盒及其制备方法 |
| CN107271234A (zh) * | 2017-06-19 | 2017-10-20 | 桂林市贝丛医疗科技有限公司 | 尿液有形成分分析仪用质控物/控制物质及其制备方法 |
| CN110959116A (zh) * | 2017-08-28 | 2020-04-03 | 美国西门子医学诊断股份有限公司 | 供基于显微术的尿沉渣分析仪使用的质量控制物质及其使用方法 |
| CN110864945A (zh) * | 2019-11-11 | 2020-03-06 | 珠海高瑞特医疗科技有限公司 | 一种精浆生化质控品及其制备方法 |
Non-Patent Citations (7)
| Title |
|---|
| Miroslava Benovska 等.Evaluation of FUS-2000 urine analyzer: analytical properties and particle recognition.《Scandinavian Journal of Clinical and Laboratory Investigation》.2018,第78卷第143-148页. * |
| Urine sediment examination：A comparison of automated urinalysis systems;Tzu-I Chien 等;《Clinica Chimica Acta》;第28-34页 * |
| 刘春都.尿液有形成分测定影响因素分析.《中国煤炭工业医学杂志》.2012,第15卷(第11期),第1708-1709页. * |
| 李文庆 等.UF-1000i检测尿管型准确性及影响因素分析.《医学信息》.2013,(第undefined期),第120页. * |
| 王青 等.尿液有形成份质控品的研制和观察.《中华医学会第九次全国检验医学学术会议暨中国医院协会临床检验管理专业委员会第六届全国临床检验实验室管理学术会议论文汇编》.2011,第393页. * |
| 许凯声 等.人工尿液质控物的配制与应用.《检验医学》.2004,第19卷(第4期),第361-363页. * |
| 郑文芝 等.《临床检验基础》.人民军医出版社,2012,第256页. * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN111678755A (zh) | 2020-09-18 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| McLeod et al. | Improved plasma culture system for production of erythrocytic colonies in vitro: quantitative assay method for CFU-E | |
| CN106399250A (zh) | 一种分离外泌体的方法及其试剂盒 | |
| CN109251886B (zh) | 一种提取脂肪组织来源外泌体的试剂盒及其提取方法和应用 | |
| CN111678755B (zh) | 一种尿液有形成分分析仪用管型质控物及其制备方法 | |
| RU2608509C1 (ru) | Способ получения экзосом из крови | |
| CN102154201A (zh) | 一种人类骨髓、脐带血或外周血干细胞处理试剂盒及干细胞分离方法 | |
| CN101182506A (zh) | 脱落细胞保存固定液及细胞薄层涂片的制作方法 | |
| CN112538475A (zh) | 植物基因组dna的提取方法、测序方法及试剂盒 | |
| CN113101737A (zh) | 一种亲和切向流过滤系统及其构建方法和外泌体提取方法及应用 | |
| CN110218700A (zh) | 一种制备动物成熟神经元单细胞的方法 | |
| CN111257361A (zh) | 一种以纳米颗粒作为参照物质的病毒颗粒的电镜定量检测方法 | |
| CN116004516A (zh) | 一种从猪皮肤组织中分离制备单细胞悬液的方法 | |
| CN111413176B (zh) | 一种尿液有形成分分析用红细胞和白细胞质控物质及其制备方法 | |
| CN102965339A (zh) | 一种人类骨髓、脐带血、外周血细胞处理试剂盒及细胞处理方法 | |
| CN116286605A (zh) | 一种制备纤维化肝脏单细胞悬液的试剂、试剂盒及方法 | |
| CN102749238B (zh) | 一种血站阴性滤除白细胞的洗脱和固定方法及专用过滤器 | |
| CN115161282A (zh) | 一种小鼠脑微血管内皮细胞与周细胞联合提取培养方法 | |
| CN103361299B (zh) | 分离干细胞的方法和试剂盒 | |
| CN111518745A (zh) | 一种人甲状旁腺单细胞悬液的制备方法及检测方法 | |
| CN106769278B (zh) | 一种细胞蜡块制备试剂盒及其制备方法 | |
| CN111537531A (zh) | 一种快速的细胞超薄切片电镜检测逆转录病毒的方法 | |
| CN113308436A (zh) | 一种人类骨髓、脐带血干细胞处理试剂盒及干细胞分离方法 | |
| CN111257072B (zh) | 一种通过牛血清原料预混合降低补体水平和蛋白析出的方法 | |
| CN107486027A (zh) | 一种用于分离液体中肿瘤细胞的复合膜及其制备方法 | |
| CN108865976B (zh) | 一种离散汲取收集外泌体(exosome)的方法及试剂 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant |