CN111632190A - 一种医用生物凝胶止血敷料的制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开一种医用生物凝胶止血敷料的制备方法，涉及生物医学领域。本发明先利用蚕茧和聚乙烯醇溶液，制得蚕丝蛋白混合液，然后将细菌纤维素与蚕丝蛋白混合液混合，并加入聚丙烯酰胺，经冻融循环后，制得凝胶坯料；再将凝胶坯料用壳聚糖季铵盐处理液处理后，依次与含有海藻酸钠的银氨溶液以及钙离子溶液混合，过滤，冷冻干燥，制得医用生物凝胶止血敷料。本发明制备的医用生物凝胶止血敷料具有优异的抗菌性能，且对血液具有较好的吸附能力，并可使血液快速凝固，同事本发明制备的医用生物凝胶止血敷料具有优异的力学性能。

Description

一种医用生物凝胶止血敷料的制备方法
技术领域
本发明涉及生物医学领域，具体是一种医用生物凝胶止血敷料的制备方法。
背景技术
医学临床上指出，人体因急性出血而不采取有效的急救措施，则患者在6~20分钟内就会死亡。人体失血若超过全身血量的20%即发生休克；失血若超过全身 血量的40%即濒临死亡。据统计，创伤死亡人数占总死亡人数的10%，而其中大量出血造成死亡占其中的30%~40%，因此，早期控制出血是降低死亡率的主要方法。
目前，在医院中对各种动脉、静脉进行穿刺拔管手术后，需要对伤口进行压迫止血。在医院中应用最广泛的压迫止血方式还是医务人员采用纱布加压止血。医务人员把纱布叠合在伤口上，然后采用绷带或缚带进行固定。此类的操作方式存在缺陷：一是，由于绷带或缚带不具有延展性和粘性，不能自动给于压迫力，所以固定好后，绷带或缚带绑得不紧会失去压迫力，如果病人移动有可能会使纱布发生位移；二是，纱布的吸血性能差，容易对伤口照成感染，而且其只是依靠绷带或缚带给于的压迫力来实现对伤口的压迫。
最新发展的止血敷料多使用几丁聚糖这种新型生物材料为止血主体。几丁聚糖，不仅具有生物相容性及生物可降解性，且资源丰富、易于取得，应用于止血敷料中，具有抗菌、消炎、止血、镇痛、促进伤口愈合等功能。为进一步增强几丁聚糖作为止血敷料的性能，现有技术中有采用几丁聚糖和其他物质混合，进而制成止血敷料的。
几丁聚糖是由几丁质经去乙酰化后所得的高分子，几丁质则是从生物中所萃取的天然高分子，主要存在于甲壳类动物（虾、蟹）、昆虫外壳或是真菌类的细胞壁中。几丁质是由葡萄糖胺及N-乙酰葡萄糖胺以β-1,4键结而成的直链状高分子多糖聚合物。几丁聚糖因与细胞间具有良好的生物相容性、生物活性、无细胞毒性及生物可分解性，故可应用于生物材料与医学材料。几丁聚糖在酸性溶液中带有正电，因此能吸引血小板聚集，进而达到快速止血的效果。
目前，以几丁聚糖不织布组成的敷料已广泛于临床中应用，然而几丁聚糖敷料具有应力不佳的缺点，在接触血液后，会快速形成凝胶而断裂。可以对一般性出血起到较好的止血效果，具有良好的生物相容性，伤口愈合期间使用时对人体产生的副作用较小。但是，在面临急性出血或者手术出血的情况时，其止血速度及止血量依然无法满足大量快速出血时紧急处理的要求。
因此，发明一种可以解决现有的止血敷料所存在的止血效果差等缺点的新型止血敷料，以此来适应于有关行业的需求，是一件很重要的事情。
发明内容
本发明的目的在于提供一种医用生物凝胶止血敷料及其制备方法，以解决现有技术中的问题。
为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：
一种医用生物凝胶止血敷料，其特征在于，所述医用生物凝胶止血敷料主要包括以下重量份数的原料组分：20~30份蚕丝，6~12份壳聚糖季铵盐，8~15份细菌纤维素，2~4份聚丙烯酰胺和5~8份海藻酸钠。
一种医用生物凝胶止血敷料，其特征在于，所述医用生物凝胶止血敷料还包括以下重量份数的原料组分：12~18份聚乙烯醇和2~4份纳米银。
作为优化，所述壳聚糖季铵盐是由壳聚糖经缩水甘油三甲基氯化铵处理后制得。
作为优化，所述医用生物凝胶止血敷料主要包括以重量份数的原料组分：25份蚕丝，10份壳聚糖季铵盐，8份细菌纤维素，3份聚丙烯酰胺，8份海藻酸钠，12份聚乙烯醇和4份纳米银。
作为优化，一种医用生物凝胶止血敷料的制备方法，主要包括以下制备步骤：
（1）将蚕茧进行脱胶、粉碎后，制得细化蚕丝，将细化蚕丝与蛋白酶溶液混合后，高温灭酶，并加入聚乙烯醇溶液，搅拌混合，得蚕丝蛋白混合液；
（2）将细菌纤维素与步骤（1）所得蚕丝蛋白混合液混合，并加入聚丙烯酰胺，搅拌混合后，经冻融循环，制得凝胶坯料；
（3）将步骤（2）所得凝胶坯料与壳聚糖季铵盐处理液混合，过滤，得预处理凝胶坯料，将预处理凝胶坯料与银氨溶液混合，并加入海藻酸钠，搅拌混合后，过滤，过滤，冷冻干燥，得凝胶；
（4）将步骤（3）所得凝胶与钙离子溶液混合，过滤，冷冻干燥，得医用生物凝胶止血敷料；
（5）将步骤（4）所得医用生物凝胶止血敷料进行指标分析。
作为优化，一种医用生物凝胶止血敷料的制备方法，主要包括以下制备步骤：
（1）将蚕茧与质量分数为10%的碳酸钠溶液按质量比1:8混合，搅拌反应后，过滤，得脱胶蚕茧，将脱胶蚕茧于粉碎机中粉碎20~40min后，得细化蚕丝，将细化蚕丝与质量分数为3%的胰蛋白酶溶液按质量比1:12混合，搅拌反应后，高温灭酶，得蚕丝蛋白分散液，将蚕丝蛋白分散液与质量分数为10%的聚乙烯醇溶液按质量比3:1混合；
（2）将细菌纤维素与步骤（1）所得物质按质量比1:20~1:25混合，并加入细菌纤维素质量0.2~0.5倍的聚丙烯酰胺，搅拌混合后，得混合分散液，将混合分散液与-40~-20℃的条件下冷冻6h后，再于室温条件下解冻，如此冻融循环3次后，得凝胶坯料；
（3）将步骤（2）所得物质与壳聚糖季铵盐处理液按质量比1:6~1:8混合，静置反应3~4h后，过滤，得预处理凝胶坯料，将预处理凝胶坯料与质量分数为10%银氨溶液按质量比1:10混合，并加入预处理凝胶坯料质量0.1~0.5倍的海藻酸钠，搅拌反应后，过滤，冷冻干燥；
（4）将步骤（3）所得物质与钙离子溶液按质量比1:10混合，静置反应后，过滤，冷冻干燥；
（5）将步骤（4）所得物质进行指标分析。
作为优化，步骤（3）所述壳聚糖季铵盐处理液为将壳聚糖与质量分数为2%的醋酸溶液按质量比1:10混合，调节壳聚糖与醋酸溶液混合液的pH至10，收集沉淀，得预处理壳聚糖，将预处理壳聚糖与异丙醇按质量比1:8混合，并加入预处理壳聚糖质量3~6倍的质量分数为20%的缩水甘油三甲基氯化铵溶液，搅拌反应后，加入乙醇沉淀，过滤，干燥，得壳聚糖季铵盐，将壳聚糖季铵盐与水按质量比1:20混合，并加入将壳聚糖季铵盐质量0.1~0.3倍的柠檬酸和壳聚糖季铵盐质量0.2~0.3倍的三乙醇胺，搅拌混合，得壳聚糖季铵盐处理液。
作为优化，步骤（4）所述钙离子溶液为质量分数为5%的氯化钙溶液或质量分数为3%的硝酸钙溶液中任意一种。
与现有技术相比，本发明的有益效果是：
本发明在制备医用生物凝胶止血敷料时加入蚕丝和壳聚糖季铵盐；首先，在医用生物凝胶止血敷料中加入蚕丝，一方面，蚕丝可配合加入的细菌纤维素作为医用生物凝胶止血敷料的骨架，从而提高医用生物凝胶止血敷料的力学性能，防止医用生物凝胶止血敷料在使用时因吸血促凝发生断裂，并提高产品的可剥离性，另一方面，加入的蚕丝经过蛋白酶处理后，蚕丝表面发生降解，从而提高蚕丝表面的活性基团数量，在与钙离子溶液混合后，可吸附足量的钙离子，而钙离子可促进血液凝结，从而在医用生物凝胶止血敷料使用时提高产品对血液的促凝性能，同时，由于蚕丝为蛋白质纤维，在产品使用过程中可被血浆中的蛋白酶所分解，并未伤口愈合提高氨基酸，从而提高产品的使用效果；其次，在医用生物凝胶止血敷料中加入壳聚糖季铵盐，壳聚糖季铵盐可在静电力的作用下吸附与蚕丝表面，从而提高产品的抗菌性能，在后续与含有海藻酸钠的银氨溶液混合后，海藻酸钠可在静电力的作用下，在蚕丝表面进行自组装，同时，由于海藻酸钠和蚕丝表面的基团具有还原性，可将银氨溶液进行还原，形成纳米银，因此海藻酸钠在自组装过程中可将纳米银牢固的包覆于蚕丝表面，进而进一步提高产品的抗菌性，再者，由于海藻酸钠可在钙离子溶液下进行交联，从而进一步提高产品中钙离子含量，并提高产品的牢度，进而提高产品对血液的促凝效果。
具体实施方式
下面将结合本发明实施例，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
为了更清楚的说明本发明提供的方法通过以下实施例进行详细说明，在以下实施例中制作的医用生物凝胶止血敷料的各指标测试方法如下：
杀菌性：将各实施例所得医用生物凝胶止血敷料与对比例产品分别置于相同浓度的金黄色葡萄球菌培养液和大肠杆菌培养液中，测量放置2h后的杀菌率。
凝血性：将各实施例所得医用生物凝胶止血敷料与对比例产品裁剪至1cm×1cm×0.5cm的块状，并分别置于含有10mL血液的烧杯中，测量吸附全部血液的时间和血液凝结的时间。
实施例1
一种医用生物凝胶止血敷料，按重量份数计，主要包括以下重量份数的原料组分：25份蚕丝，10份壳聚糖季铵盐，8份细菌纤维素，3份聚丙烯酰胺，8份海藻酸钠，12份聚乙烯醇和4份纳米银。
一种医用生物凝胶止血敷料的制备方法，所述医用生物凝胶止血敷料的制备方法主要包括以下制备步骤：
（1）将蚕茧与质量分数为10%的碳酸钠溶液按质量比1:8混合，于温度为60℃，转速为300r/min的条件下搅拌反应80min后，过滤，得脱胶蚕茧，将脱胶蚕茧于粉碎机中粉碎40min后，得细化蚕丝，将细化蚕丝与质量分数为3%的胰蛋白酶溶液按质量比1:12混合于烧杯中，于温度为36℃，转速为300r/min的条件下搅拌反应50min后，将烧杯内物料升温至90℃，并恒温30min灭酶，得蚕丝蛋白分散液，将蚕丝蛋白分散液与质量分数为10%的聚乙烯醇溶液按质量比3:1混合；
（2）将细菌纤维素与步骤（1）所得物质按质量比1:20混合，并加入细菌纤维素质量0.4倍的聚丙烯酰胺，于温度为35℃，转速为280r/min的条件下搅拌混合40min后，得混合分散液，将混合分散液与-30℃的条件下冷冻6h后，再于室温条件下解冻6h，如此冻融循环3次后，得凝胶坯料；
（3）将步骤（2）所得凝胶坯料与壳聚糖季铵盐处理液按质量比1:8混合，于温度为40℃的条件下静置反应4h后，过滤，得预处理凝胶坯料，将预处理凝胶坯料与质量分数为10%银氨溶液按质量比1:10混合于锥形瓶中，并向锥形瓶中加入预处理凝胶坯料质量0.2倍的海藻酸钠，于温度为45℃，转速为180r/min的条件下搅拌反应3h后，过滤，冷冻干燥；
（4）将步骤（3）所得物质与钙离子溶液按质量比1:10混合，于温度为35℃的条件下静置反应3h后，过滤，冷冻干燥；
（5）将步骤（4）所得物质进行指标分析。
作为优化，步骤（3）所述壳聚糖季铵盐处理液为将壳聚糖与质量分数为2%的醋酸溶液按质量比1:10混合，调节壳聚糖与醋酸溶液混合液的pH至10，收集沉淀，得预处理壳聚糖，将预处理壳聚糖与异丙醇按质量比1:8混合，并加入预处理壳聚糖质量4倍的质量分数为20%的缩水甘油三甲基氯化铵溶液，搅拌反应后，再加入乙醇沉淀，过滤，得滤渣，将滤渣于温度为75℃的条件下干燥3h后，得壳聚糖季铵盐，将壳聚糖季铵盐与水按质量比1:20混合，并加入将壳聚糖季铵盐质量0.2倍的柠檬酸和壳聚糖季铵盐质量0.3倍的三乙醇胺，搅拌混合，得壳聚糖季铵盐处理液。
作为优化，步骤（4）所述钙离子溶液为质量分数为5%的氯化钙溶液。
实施例2
一种医用生物凝胶止血敷料，按重量份数计，主要包括以下重量份数的原料组分：25份蚕丝，10份壳聚糖季铵盐，8份细菌纤维素，3份聚丙烯酰胺，12份聚乙烯醇和4份纳米银。
一种医用生物凝胶止血敷料的制备方法，所述医用生物凝胶止血敷料的制备方法主要包括以下制备步骤：
（1）将蚕茧与质量分数为10%的碳酸钠溶液按质量比1:8混合，于温度为60℃，转速为300r/min的条件下搅拌反应80min后，过滤，得脱胶蚕茧，将脱胶蚕茧于粉碎机中粉碎40min后，得细化蚕丝，将细化蚕丝与质量分数为3%的胰蛋白酶溶液按质量比1:12混合于烧杯中，于温度为36℃，转速为300r/min的条件下搅拌反应50min后，将烧杯内物料升温至90℃，并恒温30min灭酶，得蚕丝蛋白分散液，将蚕丝蛋白分散液与质量分数为10%的聚乙烯醇溶液按质量比3:1混合；
（2）将细菌纤维素与步骤（1）所得物质按质量比1:20混合，并加入细菌纤维素质量0.4倍的聚丙烯酰胺，于温度为35℃，转速为280r/min的条件下搅拌混合40min后，得混合分散液，将混合分散液与-30℃的条件下冷冻6h后，再于室温条件下解冻6h，如此冻融循环3次后，得凝胶坯料；
（3）将步骤（2）所得凝胶坯料与壳聚糖季铵盐处理液按质量比1:8混合，于温度为40℃的条件下静置反应4h后，过滤，得预处理凝胶坯料，将预处理凝胶坯料与质量分数为10%银氨溶液按质量比1:10混合于锥形瓶中，于温度为45℃，转速为180r/min的条件下搅拌反应3h后，过滤，冷冻干燥；
（4）将步骤（3）所得物质与钙离子溶液按质量比1:10混合，于温度为35℃的条件下静置反应3h后，过滤，冷冻干燥；
（5）将步骤（4）所得物质进行指标分析。
作为优化，步骤（3）所述壳聚糖季铵盐处理液为将壳聚糖与质量分数为2%的醋酸溶液按质量比1:10混合，调节壳聚糖与醋酸溶液混合液的pH至10，收集沉淀，得预处理壳聚糖，将预处理壳聚糖与异丙醇按质量比1:8混合，并加入预处理壳聚糖质量4倍的质量分数为20%的缩水甘油三甲基氯化铵溶液，搅拌反应后，再加入乙醇沉淀，过滤，得滤渣，将滤渣于温度为75℃的条件下干燥3h后，得壳聚糖季铵盐，将壳聚糖季铵盐与水按质量比1:20混合，并加入将壳聚糖季铵盐质量0.2倍的柠檬酸和壳聚糖季铵盐质量0.3倍的三乙醇胺，搅拌混合，得壳聚糖季铵盐处理液。
作为优化，步骤（4）所述钙离子溶液为质量分数为5%的氯化钙溶液。
实施例3
一种医用生物凝胶止血敷料，按重量份数计，主要包括以下重量份数的原料组分：25份蚕丝，8份细菌纤维素，3份聚丙烯酰胺，8份海藻酸钠，12份聚乙烯醇和4份纳米银。
一种医用生物凝胶止血敷料的制备方法，所述医用生物凝胶止血敷料的制备方法主要包括以下制备步骤：
（1）将蚕茧与质量分数为10%的碳酸钠溶液按质量比1:8混合，于温度为60℃，转速为300r/min的条件下搅拌反应80min后，过滤，得脱胶蚕茧，将脱胶蚕茧于粉碎机中粉碎40min后，得细化蚕丝，将细化蚕丝与质量分数为3%的胰蛋白酶溶液按质量比1:12混合于烧杯中，于温度为36℃，转速为300r/min的条件下搅拌反应50min后，将烧杯内物料升温至90℃，并恒温30min灭酶，得蚕丝蛋白分散液，将蚕丝蛋白分散液与质量分数为10%的聚乙烯醇溶液按质量比3:1混合；
（2）将细菌纤维素与步骤（1）所得物质按质量比1:20混合，并加入细菌纤维素质量0.4倍的聚丙烯酰胺，于温度为35℃，转速为280r/min的条件下搅拌混合40min后，得混合分散液，将混合分散液与-30℃的条件下冷冻6h后，再于室温条件下解冻6h，如此冻融循环3次后，得凝胶坯料；
（3）将步骤（2）所得凝胶坯料与质量分数为10%银氨溶液按质量比1:10混合于锥形瓶中，并向锥形瓶中加入预处理凝胶坯料质量0.2倍的海藻酸钠，于温度为45℃，转速为180r/min的条件下搅拌反应3h后，过滤，冷冻干燥；
（4）将步骤（3）所得物质与钙离子溶液按质量比1:10混合，于温度为35℃的条件下静置反应3h后，过滤，冷冻干燥；
（5）将步骤（4）所得物质进行指标分析。
作为优化，步骤（3）所述壳聚糖季铵盐处理液为将壳聚糖与质量分数为2%的醋酸溶液按质量比1:10混合，调节壳聚糖与醋酸溶液混合液的pH至10，收集沉淀，得预处理壳聚糖，将预处理壳聚糖与异丙醇按质量比1:8混合，并加入预处理壳聚糖质量4倍的质量分数为20%的缩水甘油三甲基氯化铵溶液，搅拌反应后，再加入乙醇沉淀，过滤，得滤渣，将滤渣于温度为75℃的条件下干燥3h后，得壳聚糖季铵盐，将壳聚糖季铵盐与水按质量比1:20混合，并加入将壳聚糖季铵盐质量0.2倍的柠檬酸和壳聚糖季铵盐质量0.3倍的三乙醇胺，搅拌混合，得壳聚糖季铵盐处理液。
作为优化，步骤（4）所述钙离子溶液为质量分数为5%的氯化钙溶液。
实施例4
一种医用生物凝胶止血敷料，按重量份数计，主要包括以下重量份数的原料组分：10份壳聚糖季铵盐，8份细菌纤维素，3份聚丙烯酰胺，8份海藻酸钠，12份聚乙烯醇和4份纳米银。
一种医用生物凝胶止血敷料的制备方法，所述医用生物凝胶止血敷料的制备方法主要包括以下制备步骤：
（1）将细菌纤维素与质量分数为10%的聚乙烯醇溶液按质量比1:20混合，并加入细菌纤维素质量0.4倍的聚丙烯酰胺，于温度为35℃，转速为280r/min的条件下搅拌混合40min后，得混合分散液，将混合分散液与-30℃的条件下冷冻6h后，再于室温条件下解冻6h，如此冻融循环3次后，得凝胶坯料；
（2）将步骤（1）所得凝胶坯料与壳聚糖季铵盐处理液按质量比1:8混合，于温度为40℃的条件下静置反应4h后，过滤，得预处理凝胶坯料，将预处理凝胶坯料与质量分数为10%银氨溶液按质量比1:10混合于锥形瓶中，并向锥形瓶中加入预处理凝胶坯料质量0.2倍的海藻酸钠，于温度为45℃，转速为180r/min的条件下搅拌反应3h后，过滤，冷冻干燥；
（3）将步骤（2）所得物质与钙离子溶液按质量比1:10混合，于温度为35℃的条件下静置反应3h后，过滤，冷冻干燥；
（4）将步骤（3）所得物质进行指标分析。
作为优化，步骤（2）所述壳聚糖季铵盐处理液为将壳聚糖与质量分数为2%的醋酸溶液按质量比1:10混合，调节壳聚糖与醋酸溶液混合液的pH至10，收集沉淀，得预处理壳聚糖，将预处理壳聚糖与异丙醇按质量比1:8混合，并加入预处理壳聚糖质量4倍的质量分数为20%的缩水甘油三甲基氯化铵溶液，搅拌反应后，再加入乙醇沉淀，过滤，得滤渣，将滤渣于温度为75℃的条件下干燥3h后，得壳聚糖季铵盐，将壳聚糖季铵盐与水按质量比1:20混合，并加入将壳聚糖季铵盐质量0.2倍的柠檬酸和壳聚糖季铵盐质量0.3倍的三乙醇胺，搅拌混合，得壳聚糖季铵盐处理液。
作为优化，步骤（3）所述钙离子溶液为质量分数为5%的氯化钙溶液。
对比例
一种医用生物凝胶止血敷料，按重量份数计，主要包括以下重量份数的原料组分：8份细菌纤维素，3份聚丙烯酰胺，12份聚乙烯醇。
一种医用生物凝胶止血敷料的制备方法，所述医用生物凝胶止血敷料的制备方法主要包括以下制备步骤：
（1）将细菌纤维素与质量分数为10%的聚乙烯醇溶液按质量比1:20混合，并加入细菌纤维素质量0.4倍的聚丙烯酰胺，于温度为35℃，转速为280r/min的条件下搅拌混合40min后，得混合分散液，将混合分散液与-30℃的条件下冷冻6h后，再于室温条件下解冻6h，如此冻融循环3次后，得凝胶坯料；
（2）将步骤（1）所得物质与钙离子溶液按质量比1:10混合，于温度为35℃的条件下静置反应3h后，过滤，冷冻干燥；
（3）将步骤（2）所得物质进行指标分析。
作为优化，步骤（2）所述钙离子溶液为质量分数为5%的氯化钙溶液。
效果例
下表1给出了采用本发明实施例1至4与对比例的医用生物凝胶止血敷料的杀菌性能和凝血性能的分析结果。
表1
Figure 890988DEST_PATH_IMAGE001
从表1中实施例1与对比例的实验数据比较可发现，在制备医用生物凝胶止血敷料时加入壳聚糖季铵盐、海藻酸钠和蚕丝可有效提高产品的血液吸附性，同时促进血液凝结，并且可使产品具有优异的抗菌性能；从实施例1与实施例2的实验数据比较可发现，当在医用生物凝胶止血敷料中不加入海藻酸钠时，无法将银氨溶液中产生的纳米银固定于产品中，从而降低产品的抗菌性能，并且，由于缺少海藻酸钠，从而导致产品在与钙离子溶液混合 时无法吸附足量钙离子，进而在使用过程中无法使血液快速凝固；从实施例1与实施例3的实验数据比较可发现，当产品中不加入壳聚糖季铵盐时，由于壳聚糖季铵盐的缺失，从而导致产品的抗菌性下降，同时当不加入壳聚糖季铵盐时，海藻酸钠无法将纳米银固定于产品之中，并且海藻酸钠与凝胶坯料间的结合力较低，进而进一步降低产品的凝血性能；从实施例1与实施例4的实验数据比较可发现，当产品中不加入蚕丝时，纳米银缺少载体，因此降低产品的抗菌性，同时由于蚕丝的缺失，从而导致产品中钙离子吸附基团减少，进而进一步降低产品的凝血性能。
对于本领域技术人员而言，显然本发明不限于上述示范性实施例的细节，而且在不背离本发明的精神或基本特征的情况下，能够以其他的具体形式实现本发明。因此，无论从哪一点来看，均应将实施例看作是示范性的，而且是非限制性的，本发明的范围由所附权利要求而不是上述说明限定，因此旨在将落在权利要求的等同要件的含义和范围内的所有变化囊括在本发明内。

Claims (1)

1.一种医用生物凝胶止血敷料的制备方法，主要包括以下制备步骤：
（1）将蚕茧与质量分数为10%的碳酸钠溶液按质量比1:8混合，于温度为60℃，转速为300r/min的条件下搅拌反应80min后，过滤，得脱胶蚕茧，将脱胶蚕茧于粉碎机中粉碎40min后，得细化蚕丝，将细化蚕丝与质量分数为3%的胰蛋白酶溶液按质量比1:12混合于烧杯中，于温度为36℃，转速为300r/min的条件下搅拌反应50min后，将烧杯内物料升温至90℃，并恒温30min灭酶，得蚕丝蛋白分散液，将蚕丝蛋白分散液与质量分数为10%的聚乙烯醇溶液按质量比3:1混合；
（2）将细菌纤维素与步骤（1）所得物质按质量比1:20混合，并加入细菌纤维素质量0.4倍的聚丙烯酰胺，于温度为35℃，转速为280r/min的条件下搅拌混合40min后，得混合分散液，将混合分散液与-30℃的条件下冷冻6h后，再于室温条件下解冻6h，如此冻融循环3次后，得凝胶坯料；
（3）将步骤（2）所得凝胶坯料与壳聚糖季铵盐处理液按质量比1:8混合，于温度为40℃的条件下静置反应4h后，过滤，得预处理凝胶坯料，将预处理凝胶坯料与质量分数为10%银氨溶液按质量比1:10混合于锥形瓶中，并向锥形瓶中加入预处理凝胶坯料质量0.2倍的海藻酸钠，于温度为45℃，转速为180r/min的条件下搅拌反应3h后，过滤，冷冻干燥；
（4）将步骤（3）所得物质与钙离子溶液按质量比1:10混合，于温度为35℃的条件下静置反应3h后，过滤，冷冻干燥；
（5）将步骤（4）所得物质进行指标分析；
步骤（3）所述壳聚糖季铵盐处理液为将壳聚糖与质量分数为2%的醋酸溶液按质量比1:10混合，调节壳聚糖与醋酸溶液混合液的pH至10，收集沉淀，得预处理壳聚糖，将预处理壳聚糖与异丙醇按质量比1:8混合，并加入预处理壳聚糖质量4倍的质量分数为20%的缩水甘油三甲基氯化铵溶液，搅拌反应后，再加入乙醇沉淀，过滤，得滤渣，将滤渣于温度为75℃的条件下干燥3h后，得壳聚糖季铵盐，将壳聚糖季铵盐与水按质量比1:20混合，并加入将壳聚糖季铵盐质量0.2倍的柠檬酸和壳聚糖季铵盐质量0.3倍的三乙醇胺，搅拌混合，得壳聚糖季铵盐处理液；步骤（4）所述钙离子溶液为质量分数为5%的氯化钙溶液。
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