CN111358833A - 夏枯草提取物及其在制备治疗甲状腺疾病药物中的应用 - Google Patents

夏枯草提取物及其在制备治疗甲状腺疾病药物中的应用 Download PDF

Info

Publication number
CN111358833A
CN111358833A CN202010321456.3A CN202010321456A CN111358833A CN 111358833 A CN111358833 A CN 111358833A CN 202010321456 A CN202010321456 A CN 202010321456A CN 111358833 A CN111358833 A CN 111358833A
Authority
CN
China
Prior art keywords
extract
selfheal
thyroid
prunella vulgaris
group
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN202010321456.3A
Other languages
English (en)
Inventor
李定祥
郭碧泽
张�杰
邱子梁
李慧民
陆家强
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Guiyang Xin Tian Pharmaceutical Co ltd
Original Assignee
Guiyang Xin Tian Pharmaceutical Co ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Guiyang Xin Tian Pharmaceutical Co ltd filed Critical Guiyang Xin Tian Pharmaceutical Co ltd
Priority to CN202010321456.3A priority Critical patent/CN111358833A/zh
Publication of CN111358833A publication Critical patent/CN111358833A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
    • A61K36/53—Lamiaceae or Labiatae (Mint family), e.g. thyme, rosemary or lavender
    • A61K36/536—Prunella or Brunella (selfheal)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/21—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates
    • A61K31/215—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates of carboxylic acids
    • A61K31/216—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates of carboxylic acids of acids having aromatic rings, e.g. benactizyne, clofibrate
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
    • A61P5/14—Drugs for disorders of the endocrine system of the thyroid hormones, e.g. T3, T4
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2236/00—Isolation or extraction methods of medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicine
    • A61K2236/30—Extraction of the material
    • A61K2236/33—Extraction of the material involving extraction with hydrophilic solvents, e.g. lower alcohols, esters or ketones
    • A61K2236/333—Extraction of the material involving extraction with hydrophilic solvents, e.g. lower alcohols, esters or ketones using mixed solvents, e.g. 70% EtOH
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2236/00—Isolation or extraction methods of medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicine
    • A61K2236/30—Extraction of the material
    • A61K2236/39—Complex extraction schemes, e.g. fractionation or repeated extraction steps
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2236/00—Isolation or extraction methods of medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicine
    • A61K2236/50—Methods involving additional extraction steps
    • A61K2236/51—Concentration or drying of the extract, e.g. Lyophilisation, freeze-drying or spray-drying
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2236/00—Isolation or extraction methods of medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicine
    • A61K2236/50—Methods involving additional extraction steps
    • A61K2236/53—Liquid-solid separation, e.g. centrifugation, sedimentation or crystallization
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2236/00—Isolation or extraction methods of medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicine
    • A61K2236/50—Methods involving additional extraction steps
    • A61K2236/55—Liquid-liquid separation; Phase separation

Abstract

本发明公开了夏枯草提取物及其在制备治疗甲状腺疾病药物中的应用，属于中医药领域。夏枯草提取物由夏枯草果穗经超声浸提、大孔树脂柱梯度洗脱和加热浓缩得到、或由超声浸提液直接减压浓缩后萃取得到，其总有机酸类成分的重量百分含量不低于20％，总黄酮类成分的重量百分含量不低于10％。夏枯草提取物通过降低患者体内甲状腺球蛋白抗体(TgAb)和甲状腺过氧化物酶抗体(TPOAb)，可用于制备预防或治疗甲状腺疾病药物特别是自身免疫性甲状腺疾病，有望为目前甲状腺疾病患者提供新的成本低且疗效显著的治疗途径。

Description

夏枯草提取物及其在制备治疗甲状腺疾病药物中的应用
技术领域
本发明属于中医药领域，具体涉及一种夏枯草提取物及其在制备治疗甲状腺疾病药物中的应用。
背景技术
甲状腺球蛋白(Tg)与甲状腺过氧化物酶(TPO)是甲状腺细胞内的正常成分，正常情况下不溢出到外周血液内。病理状态下，甲状腺滤泡细胞结构受到破坏，Tg和TPO向外周血溢漏，出现在血液内的Tg与TPO作为自身免疫性甲状腺疾病中一种重要的自身抗原刺激机体免疫系统产生甲状腺组织成分抗体，即甲状腺球蛋白抗体(TgAb)和甲状腺过氧化物酶抗体(TPOAb)。体内TPOAb的出现是一种病理状态，是促甲状腺激素(TSH)升高和发生甲状腺功能减退的早期标志物，TPOAb升高以后发生甲状腺功能减退的风险增加。TgAb也是自身免疫性甲状腺疾病的一个标志性抗体，一般与TPOAb同时出现。TPOAb和TgAb参与辅助T淋巴细胞的活化，激活补体和抗体依赖性细胞介导的细胞毒性作用，破坏甲状腺上皮细胞，维持和加重甲状腺的损伤。
TPOAb和TgAb升高，损伤甲状腺产生的主要危害：①使甲状腺激素产生减少，由于甲状腺激素具有维持垂体-卵巢轴的稳定性，所以导致流产和不孕风险明显增加。有研究者发现自身免疫型复发性流产(RSA)患者TPOAb阳性率较正常妊娠妇女高，TPOAb阳性妇女RSA发生率增加3倍，且线性回归分析认为流产率与TPOAb水平亦有关；②发展为甲减，需要甲状腺激素终身治疗；③发展为产后甲状腺炎(PPT)。TPOAb阳性的妊娠妇女60％～70％发生PPT，甚至发展至永久性甲减。因此，降低TPOAb和TgAb水平，减少其对甲状腺的损伤是有必要的。
有研究报道维生素D、硒酵母等可以调节甲状腺自身抗体水平。对甲状腺自身抗体阳性而甲状腺功能正常的妇女，国外应用静脉注射免疫球蛋白，泼尼松与阿司匹林联合，以及应用左旋甲状腺素(L-T4)等治疗单纯的甲状腺自身免疫异常，可提高妊娠率，降低流产、早产和死胎风险。在L-T4基础上加硒治疗，TPOAb抗体滴度比单用L-T4显著降低，但硒治疗尚需进一步验证，而且目前尚没有确切、有效的临床治疗方案，维生素D和硒酵母等方案仍存有争议。
迷迭香酸(Rosmarinicacid，RosA)是从唇形科植物迷迭香中分离得到的一种水溶性的天然酚酸类化合物，分布较为广泛，主要存在于唇形科、紫草科、葫芦科、椴树科、伞形科的多种植物中，尤以唇型科和紫草科植物中含量最高。迷迭香酸是一种天然抗氧化剂，具有较强的抗氧化活性，有助于防止自由基造成的细胞受损，降低癌症和动脉硬化的风险，还具有较强的抗炎活性以及抗菌、抗病毒、抗肿瘤的活性。目前，迷迭香酸有免疫调节作用，但在降低抗体含量和治疗甲状腺疾病方面未见相关报道。
夏枯草(Prunella vulgaris L.)为唇形科植物，夏季果穗呈棕红色时采收，除去杂质，晒干，其多用于肝火上炎、目赤肿痛、目珠疼痛、头痛、晕眩等症，为清肝火、散郁结的要药，它所主治的大多是肝经的病症如治瘰历结核，近年来临床上有用于肿瘤，但未见其用于自身免疫性甲状腺疾病治疗的相关报道。
发明内容
本发明提供了一种夏枯草提取物，其总有机酸类成分的重量百分含量不低于20％，总黄酮类成分的重量百分含量不低于10％。
根据本发明所述夏枯草提取物的一些实施方式，其总迷迭香酸的重量百分含量不低于30％。
根据本发明所述夏枯草提取物的一些实施方式，其可以通过包含以下步骤的制备方法得到：
(1)按照料液比为1：5～10向夏枯草果穗中加入水或者80vol％的乙醇水溶液进行超声浸提2h，重复上述超声浸提1～5次，过滤后合并提取液，得到夏枯草粗提物；
(2)将所述夏枯草粗提物用大孔树脂柱依次经过水、10～30vol％的乙醇水溶液和50～95vol％的乙醇水溶液进行梯度洗脱，收集经50～95vol％的乙醇水溶液洗脱后的洗脱液；
(3)将所得洗脱液于60～70℃的条件下浓缩至相对密度为1.05～1.15，得到夏枯草提取物浸膏。
根据本发明所述夏枯草提取物的一些实施方式，上述步骤(1)中料液比为1：7，重复超声浸提三次。
根据本发明所述夏枯草提取物的一些实施方式，还包括将所述夏枯草提取物浸膏处理为夏枯草提取物口服液剂型的步骤，具体为：将所述夏枯草提取物浸膏静置12～36h，过滤，滤液加辅料，加热煮沸使其溶解，加水至处方量，混匀，冷却至2～10℃冷藏12～36h，经孔径为1μm的微孔过滤器过滤，灌装每支装量为10.0～10.5mL，115℃灭菌15min。
根据本发明所述夏枯草提取物的一些实施方式，其还可以通过包含以下步骤的制备方法得到：
(1)按照料液比为1：5～10向夏枯草果穗中加入70vol％的乙醇水溶液进行超声浸提1h，重复上述超声浸提1～5次，过滤后合并提取液，得到夏枯草粗提物；
(2)将所述夏枯草粗提物经减压浓缩至无醇味，向浓缩液内加入0.1N的稀盐酸调节pH至3，并按照单次体积比1：1加入乙酸乙酯进行萃取1～5次，取出乙酸乙酯层后用饱和氯化钠溶液进行洗涤，回收乙酸乙酯，得夏枯草提取物。
根据本发明所述夏枯草提取物的一些实施方式，根据本发明所述夏枯草提取物的一些实施方式，上述步骤(1)中料液比为1：7，重复超声浸提三次，且所得夏枯草提取物的迷迭香酸的总含量不低于30％。
本发明还提供上述夏枯草提取物在制备预防或治疗甲状腺疾病药物中的应用。
根据本发明所述应用的一些实施方式，所述的甲状腺疾病为自身免疫性甲状腺疾病，包括但不限于Graves病、慢性淋巴细胞性甲状腺炎、产后甲状腺炎和甲状腺癌。
根据本发明所述应用的一些实施方式，所述慢性淋巴细胞性甲状腺炎包括但不限于桥本氏甲状腺炎和萎缩性甲状腺炎。
根据本发明所述应用的一些实施方式，通过所述夏枯草提取物降低患者体内甲状腺抗体水平实现；其中，所述甲状腺抗体包括但不限于甲状腺球蛋白抗体和甲状腺过氧化物酶抗体。
本发明还提供了用于预防或治疗甲状腺疾病的药物组合物，以所述夏枯草提取物为活性成分，所述药物组合物的剂型包括浸膏或口服液，给药方式为口服。
根据本发明所述药物组合物的一些实施方式，所述药物组合物还包括药学上可接受的辅料或辅助性成分。
根据本发明所述药物组合物的一些实施方式，所述药物组合物的剂型为夏枯草提取物口服液，其中所述夏枯草提取物的浓度为125～500mg/mL，给药剂量为10mL/次，2次/天，连续服用3个月。
本发明还提供了迷迭香酸在制备预防或治疗甲状腺疾病药物中的应用。
根据本发明所述迷迭香酸应用的一些实施方式，所述的迷迭香酸来源于上述任一所述的夏枯草提取物。
根据本发明所述迷迭香酸应用的一些实施方式，其通过降低患者体内甲状腺抗体水平实现；其中，所述甲状腺抗体包括但不限于甲状腺球蛋白抗体和甲状腺过氧化物酶抗体。
与现有技术相比，本发明的有益效果在于：
本发明传统中草药夏枯草的提取物用于制备预防或治疗甲状腺疾病的药物，通过自身免疫性甲状腺炎的小鼠模型动物实验表明，夏枯草提取物可减轻小鼠甲状腺炎症细胞浸润，降低甲状腺抗体水平特别是显著降低甲状腺过氧化物酶抗体和甲状腺球蛋白抗体水平，有望为目前甲状腺疾病患者提供新的成本低且疗效显著的治疗途径。
附图说明
图1为实施例中构建小鼠模型的流程示意图。
图2为实施例中小鼠模型中正常对照组(A)和模型组(B)灌胃给药前的甲状腺球蛋白抗体水平；其中，正常对照组(A)的TgAb水平为52.13±10.40，模型组(B)的TgAb水平为140.26±21.37**，ns为P＞0.05，*为P<0.05，**为P<0.01，***为P<0.001。
图3为实施例中各组在治疗前和治疗8周时的甲状腺球蛋白抗体水平，依次包括正常对照组(A)、模型组(B)、低剂量夏枯草Ⅰ组(C)、高剂量夏枯草Ⅰ组(D)、低剂量夏枯草Ⅱ组(E)和迷迭香酸组(F)。
图4为实施例中各组的甲状腺组织HE染色结果，依次包括正常对照组(A)、模型组(B)、低剂量夏枯草Ⅰ组(C)、高剂量夏枯草Ⅰ组(D)、低剂量夏枯草Ⅱ组(E)和迷迭香酸组(F)，均为放大200倍。
图5为实施例中各组治疗前后的甲状腺球蛋白抗体和甲状腺过氧化物酶抗体水平；其中，正常对照组(A)采用西医常规治疗，治疗组(G)在正常对照组(A)基础上服用夏枯草提取物口服液，与治疗前相比，ns为P＞0.05，*为P<0.05，**为P<0.01，***为P<0.001。
图6为实施例中各组治疗后的甲状腺球蛋白抗体和甲状腺过氧化物酶抗体水平；其中，正常对照组(A)为采用西医常规治疗，治疗组(G)为在正常对照组(A)基础上服用夏枯草提取物口服液，与对照组相比，ns为P＞0.05，#为P<0.05，##为P<0.01，###为P<0.001。
图7为实施例中各组的甲状腺组织内Fas、FasL、Bcl-2、Bax和β-Actin蛋白水平的表达。
具体实施方式
下面结合附图和实施例对本发明的实施方案进行详细描述，但是本领域技术人员将会理解，下列实施例仅用于说明本发明，而不应视为限定本发明的范围。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市购获得的常规产品。
实施例1制备夏枯草提取物Ⅰ
向100g夏枯草果穗中加入700mL 80vol％的乙醇水溶液进行超声浸提2h，重复上述超声浸提三次，合并提取液，得到夏枯草粗提物。再将夏枯草粗提物通过大孔树脂柱，依次经水、10～30vol％的乙醇水溶液和50～95vol％的乙醇水溶液进行梯度洗脱，收集50～95vol％的乙醇水溶液洗脱后的洗脱液，于60～70℃的条件下浓缩至相对密度为1.05～1.15，得到夏枯草提取物Ⅰ的浸膏。
将上述夏枯草提取物Ⅰ的浸膏静置24h，过滤，滤液加辅料，加热煮沸使其溶解，加水至处方量，混匀，冷却至2～10℃冷藏24h，经孔径为1μm的微孔过滤器过滤，灌装每支装量为10.0～10.5mL，115℃灭菌15min，得到夏枯草提取物口服液剂型。
实施例2制备夏枯草提取物Ⅱ
向100g夏枯草果穗中加入700mL 70vol％的乙醇水溶液进行超声浸提1h，重复上述超声浸提三次，合并提取液，得到夏枯草粗提物。再将上述夏枯草粗提物减压浓缩至无醇味，进一步浓缩至约50mL，向浓缩液内加入0.1N的稀盐酸调节pH至3，每次加入50mL乙酸乙酯进行萃取三次，取出乙酸乙酯层并用20mL饱和氯化钠溶液洗涤，回收乙酸乙酯，得到夏枯草提取物Ⅱ，经测试其中迷迭香酸的重量含量大于30％。
实施例3动物实验
(1)主要材料及试剂
雄性Wistar大鼠、碘化钾、夏枯草浸膏、猪甲状腺球蛋白(PTg)、完全弗氏佐剂(CFA)、不完全弗氏佐剂(IFA)、大鼠TgAb ELISA试剂盒、Fas抗体(Western blot，抗大鼠)、FasL抗体(Western blot，抗大鼠)、Bcl-2抗体(Western blot，抗大鼠)和Bax抗体(Westernblot，抗大鼠)，夏枯草提取物口服液(批号：JG180502，贵阳新天药业股份有限公司提供)。
(2)油包水制剂的制备
猪甲状腺球蛋白(PTg)溶于磷酸盐缓冲液(0.2mol/L，pH＝7.0)中，制成浓度为2mg/mL的溶液，充分溶解后与完全弗氏佐剂(CFA)等体积于冰浴中混合，注射器反复抽吸使之充分乳化，形成稳定的CFA乳化的PTg油包水制剂。IFA乳化的PTg油包水制剂的制备方法同上，均于4℃冰箱保存备用。
(3)建立小鼠模型
选择5～6周龄的雄性Wistar大鼠104只，随机分成6组，分别为正常对照组(A)20只、模型组(B)20只、低剂量夏枯草Ⅰ组(C)16只、高剂量夏枯草Ⅰ组(D)16只、低剂量夏枯草Ⅱ组(E)16只和迷迭香酸组(F)16只。除正常对照组(A)外，其余各组大鼠于实验开始第1天接受初次免疫，在大鼠尾根部皮下注射经CFA乳化的PTg油包水制剂0.1mL；第14天、21天、28天进行加强免疫，在大鼠皮下注射经IFA乳化的PTg油包水制剂0.1mL，避免与初次注射位置重复，期间给予碘水(含0.05％碘化钾，现配现用，避光保存)及饲料喂养；正常对照组于相同时间点注射等量生理盐水，给予正常饮用水及饲料喂养。造模8周后处死正常对照组和模型组各4只大鼠，取血清进行检测，构建动物模型流程如图1所示。
该动物模型建立成功的判定标准：1)出现甲状腺抗体和2)甲状腺组织有淋巴细胞浸润。如图2所示，该动物模型中正常对照组(A)和模型组(B)灌胃给药前甲状腺球蛋白抗体(TgAb)水平变化提示该模型造模成功。另外，以下检测中各模型组甲状腺抗体均较正常对照组(A)明显升高，病理学检查也发现各模型组甲状腺组织滤泡结构都有不同程度的破坏和淋巴细胞浸润，也进一步证实造模成功。
(4)实验设置与检测
造模完成8周后，低剂量夏枯草Ⅰ组(C)按照0.21mL/200g灌胃予以夏枯草提取物Ⅰ的浸膏，每日2次；高剂量夏枯草Ⅰ组(D)按照0.42mL/200g灌胃予以夏枯草提取物Ⅰ的浸膏，每日2次；低剂量夏枯草Ⅱ组(E)按照0.21mL/200g灌胃予以夏枯草提取物Ⅱ的水溶液，每日2次；迷迭香酸组(F)按照0.21mL/200g灌胃予以迷迭香酸的水溶液，每日2次；正常对照组(A)和模型组(B)按照1mL/100g予以灌胃服用生理盐水，共给药4周，期间正常喂养，定期补充灭菌水和饲料。于第5周开始处死各组大鼠，每2周处死一次，每组每次处死4只，取血清和甲状腺进行后续检测，且每次处死后剩余大鼠继续按照上述药物剂量进行给药处理，如图1所示。具体各组为：
正常对照组(A)：灌服生理盐水1mL/100g；
模型组(B)：灌服生理盐水1mL/100g；
低剂量夏枯草Ⅰ组(C)：灌服夏枯草提取物Ⅰ的浸膏0.21mL/200g；
高剂量夏枯草Ⅰ组(D)：灌服夏枯草提取物Ⅰ的浸膏0.42mL/200g。
低剂量夏枯草Ⅱ组(E)：灌服夏枯草提取物Ⅱ的水溶液0.21mL/200g；
迷迭香酸组(F)：灌服迷迭香酸的水溶液0.21mL/200g。
(5)抗体水平
通过ELISA检测正常对照组(A)和模型组(B)灌胃给药前的甲状腺球蛋白抗体水平(每组4只大鼠)和上述A至F组在治疗前和治疗8周时的甲状腺球蛋白抗体水平，结果分别如图2、3和表1所示。可以看出，正常对照组(A)和模型组(B)的TgAb抗体水平均无明显变化，低剂量夏枯草Ⅰ组(C)、高剂量夏枯草Ⅰ组(D)、低剂量夏枯草Ⅱ组(E)和迷迭香酸组(F)经治疗8周后，TgAb抗体水平较治疗前显著降低(p<0.05)，与模型组(B)比较，TgAb抗体水平也显著降低(p<0.05)，与治疗前比，差异具有统计学意义(p<0.05)。
表1：各组治疗前后的TgAb水平
组别 治疗前 治疗后
正常对照组(A) 52.13±10.40 52.68±10.78
模型组(B) 140.36±22.30 136.41±21.37
低剂量夏枯草Ⅰ组(C) 140.36±22.30 90.41±6.60<sup>**</sup>
高剂量夏枯草Ⅰ组(D) 140.36±22.30 78.63±6.80<sup>**</sup>
低剂量夏枯草Ⅱ组(E) 140.36±22.30 75.14±9.15<sup>**#</sup>
迷迭香酸组(F) 140.36±22.30 93.68±14.60<sup>*</sup>
注：治疗8周后，与模型组比较，*为P<0.05，**为P<0.01，***为P<0.001；治疗8周后，与低剂量夏枯草Ⅰ组比较，#为P<0.05，##为P<0.01，###为P<0.001。
(6)甲状腺组织、肝脏组织和肾脏组织HE染色
通过各组大鼠甲状腺组织HE染色观察甲状腺组织病理变化，结果如图4所示，正常对照组(A)的甲状腺滤泡结构完整，滤泡腔充满胶质，分布均匀，滤泡呈小叶状排列，小叶周围有少量纤维组织和血管；模型组(B)的甲状腺滤泡结构不同程度破坏，滤泡胶质潴留上皮细胞增生，间质水肿，伴灶性淋巴细胞浸润，低剂量夏枯草Ⅰ组(C)、高剂量夏枯草Ⅰ组(D)、低剂量夏枯草Ⅱ组(E)和迷迭香酸组(F)的甲状腺滤泡较模型组完整，间质水肿减轻，少量炎症细胞浸润。迷迭香酸组(F)与低剂量夏枯草Ⅰ组(C)的效果相近。
(7)夏枯草提取物的药效
设置对照组(A1)采用西医常规治疗，治疗组(G)在对照组(A1)的基础上服用夏枯草提取物口服液，测试该两组治疗前和治疗8周后甲状腺过氧化物酶抗体和甲状腺球蛋白抗体水平，结果如图5、表2和图6、表3所示。可以看出，相较于单纯的西医常规治疗，配合服用夏枯草提取物口服液治疗后其体内TPOAb和TgAb水平均显著降低，证明夏枯草提取物可减轻小鼠甲状腺炎症细胞浸润，显著降低TPOAb和TgAb水平，对甲状腺疾病治疗具有一定疗效。
表2
Figure BDA0002461586360000081
注：与治疗前相比，ns为P＞0.05，*为P<0.05，**为P<0.01，***为P<0.001。
表3
组别 TPOAb TgAb
正常对照组(A1) 50.00％ 55.00％
治疗组(G) 87.50％<sup>##</sup> 75.00％<sup>ns</sup>
注：与对照组(A1)相比，ns为P＞0.05，#为P<0.05，##为P<0.01，###为P<0.001。
(8)甲状腺组织内Fas、FasL、Bcl-2、Bax和β-Actin蛋白水平的表达
通过Western blot检测甲状腺组织中Fas、FasL、Bcl-2、Bax和β-Actin蛋白的表达，结果如图7所示，可以看出夏枯草提取物能减少Fas、FasL和Bax的表达，增加Bcl-2的表达，从而减少甲状腺细胞的凋亡。
上述对实施例的描述是为了便于该技术领域的普通技术人员能理解和使用本发明。熟悉本领域技术人员显然可以容易的对这些实施例做出各种修改，并把在此说明的一般原理应用到其他实施例中，而不必经过创造性的劳动。因此，本发明不限于上述实施例。本领域技术人员根据本发明的原理，不脱离本发明的范畴所做出的改进和修改都应该在本发明的保护范围之内。

Claims (14)

1.一种夏枯草提取物，其特征在于，其总有机酸类成分的重量百分含量不低于20％，总黄酮类成分的重量百分含量不低于10％。
2.根据权利要求1所述的夏枯草提取物，其特征在于，其迷迭香酸的重量百分含量不低于30％。
3.根据权利要求1所述的夏枯草提取物，其特征在于，其可以通过包含以下步骤的制备方法得到：
(1)按照料液比为1：5～10向夏枯草果穗中加入水或者80vol％的乙醇水溶液进行超声浸提2h，重复上述超声浸提1～5次，过滤后合并提取液，得到夏枯草粗提物；
(2)将所述夏枯草粗提物用大孔树脂柱依次经过水、10～30vol％的乙醇水溶液和50～95vol％的乙醇水溶液进行梯度洗脱，收集经50～95vol％的乙醇水溶液洗脱后的洗脱液；
(3)将所得洗脱液于60～70℃的条件下浓缩至相对密度为1.05～1.15，得到夏枯草提取物浸膏。
4.根据权利要求3所述的夏枯草提取物，其特征在于，还包括将所述夏枯草提取物浸膏处理为夏枯草提取物口服液剂型的步骤，具体为：将所述夏枯草提取物浸膏静置12～36h，过滤，滤液加辅料，加热煮沸使其溶解，加水至处方量，混匀，冷却至2～10℃冷藏12～36h，经孔径为1μm的微孔过滤器过滤，灌装每支装量为10.0～10.5mL，115℃灭菌15min。
5.根据权利要求1或2所述的夏枯草提取物，其特征在于，其还可以通过包含以下步骤的制备方法得到：
(1)按照料液比为1：5～10向夏枯草果穗中加入70vol％的乙醇水溶液进行超声浸提1h，重复上述超声浸提1～5次，过滤后合并提取液，得到夏枯草粗提物；
(2)将所述夏枯草粗提物经减压浓缩至无醇味，向浓缩液内加入0.1N的稀盐酸调节pH至3，并按照单次体积比1：1加入乙酸乙酯进行萃取1～5次，取出乙酸乙酯层后用饱和氯化钠溶液进行洗涤，回收乙酸乙酯，得夏枯草提取物。
6.权利要求1至5任一项所述的夏枯草提取物在制备预防或治疗甲状腺疾病药物中的应用。
7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述的甲状腺疾病为自身免疫性甲状腺疾病，包括但不限于Graves病、慢性淋巴细胞性甲状腺炎、产后甲状腺炎和甲状腺癌。
8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，所述慢性淋巴细胞性甲状腺炎包括但不限于桥本氏甲状腺炎和萎缩性甲状腺炎。
9.根据权利要求6至8任一项所述的应用，其特征在于，通过所述夏枯草提取物降低患者体内甲状腺抗体水平实现，所述甲状腺抗体包括但不限于甲状腺球蛋白抗体(TgAb)和甲状腺过氧化物酶抗体(TPOAb)。
10.用于预防或治疗甲状腺疾病的药物组合物，其特征在于，
以权利要求1至5任一项所述的夏枯草提取物为活性成分，还包括药学上可接受的辅料或辅助性成分；
所述药物组合物的剂型包括浸膏或口服液，给药方式为口服。
11.根据权利要求10所述的药物组合物，其特征在于，所述药物组合物的剂型为夏枯草提取物口服液，其中所述夏枯草提取物的浓度为125～500mg/mL，给药剂量为10mL/次，2次/天，连续服用3个月。
12.迷迭香酸在制备预防或治疗甲状腺疾病药物中的应用。
13.根据权利要求12所述的应用，其特征在于，所述迷迭香酸来源于权利要求1至5任一项所述的夏枯草提取物。
14.根据权利要求12或13所述的应用，其特征在于，所述迷迭香酸通过降低患者体内甲状腺抗体水平实现；其中：
所述甲状腺抗体包括但不限于甲状腺球蛋白抗体和甲状腺过氧化物酶抗体。
CN202010321456.3A 2020-04-22 2020-04-22 夏枯草提取物及其在制备治疗甲状腺疾病药物中的应用 Pending CN111358833A (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202010321456.3A CN111358833A (zh) 2020-04-22 2020-04-22 夏枯草提取物及其在制备治疗甲状腺疾病药物中的应用

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202010321456.3A CN111358833A (zh) 2020-04-22 2020-04-22 夏枯草提取物及其在制备治疗甲状腺疾病药物中的应用

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN111358833A true CN111358833A (zh) 2020-07-03

Family

ID=71199672

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202010321456.3A Pending CN111358833A (zh) 2020-04-22 2020-04-22 夏枯草提取物及其在制备治疗甲状腺疾病药物中的应用

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN111358833A (zh)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN114272282A (zh) * 2022-01-26 2022-04-05 贵阳新天药业股份有限公司 夏枯草提取物在制备改善妊娠结局的药物中的应用

Citations (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1853508A (zh) * 2005-04-19 2006-11-01 韩国养药多股份有限公司 有效改善肝功能、降低血液酒精浓度及加强抗氧化能力的组合物
CN1331488C (zh) * 2004-02-18 2007-08-15 江苏康缘药业股份有限公司 一种夏枯草提取物与用途
CN101332229A (zh) * 2008-01-23 2008-12-31 上海海天医药科技开发有限公司 夏枯草属植物提取物、其制备方法和药物用途
CN101658550A (zh) * 2009-09-24 2010-03-03 贵阳新天药业股份有限公司 夏枯草口服液含量测定方法
CN104873570A (zh) * 2015-06-05 2015-09-02 辽宁中医药大学 一种夏枯草总黄酮的提取纯化方法及其应用
CN105017345A (zh) * 2015-04-13 2015-11-04 湖南中医药大学 从夏枯草中同时提取四种化合物的方法及应用
CN107812038A (zh) * 2017-11-21 2018-03-20 广州王老吉药业股份有限公司 一种夏枯草治疗和预防甲状腺癌的新用途
CN107913305A (zh) * 2016-10-10 2018-04-17 北京中医药大学 夏枯草提取物及其制备方法和用途
CN107913304A (zh) * 2016-10-10 2018-04-17 北京中医药大学 含夏枯草提取物的滴丸及其制备方法

Patent Citations (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1331488C (zh) * 2004-02-18 2007-08-15 江苏康缘药业股份有限公司 一种夏枯草提取物与用途
CN1853508A (zh) * 2005-04-19 2006-11-01 韩国养药多股份有限公司 有效改善肝功能、降低血液酒精浓度及加强抗氧化能力的组合物
CN101332229A (zh) * 2008-01-23 2008-12-31 上海海天医药科技开发有限公司 夏枯草属植物提取物、其制备方法和药物用途
CN101658550A (zh) * 2009-09-24 2010-03-03 贵阳新天药业股份有限公司 夏枯草口服液含量测定方法
CN105017345A (zh) * 2015-04-13 2015-11-04 湖南中医药大学 从夏枯草中同时提取四种化合物的方法及应用
CN104873570A (zh) * 2015-06-05 2015-09-02 辽宁中医药大学 一种夏枯草总黄酮的提取纯化方法及其应用
CN107913305A (zh) * 2016-10-10 2018-04-17 北京中医药大学 夏枯草提取物及其制备方法和用途
CN107913304A (zh) * 2016-10-10 2018-04-17 北京中医药大学 含夏枯草提取物的滴丸及其制备方法
CN107812038A (zh) * 2017-11-21 2018-03-20 广州王老吉药业股份有限公司 一种夏枯草治疗和预防甲状腺癌的新用途

Non-Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
EWA HABZA-KOWALSKA，等: "Thyroid Peroxidase Activity is Inhibited by Phenolic Compounds-Impact of Interaction", 《MOLECULES》 *
余欣然等: "夏枯草对AIT大鼠TSH、TGAb、TPOAb及Th相关细胞因子表达的调节作用研究", 《国际检验医学杂志》 *
范敏等: "夏枯草口服液联合~(131)I治疗Graves病的疗效观察 ", 《中草药》 *

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN114272282A (zh) * 2022-01-26 2022-04-05 贵阳新天药业股份有限公司 夏枯草提取物在制备改善妊娠结局的药物中的应用

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN101292969B (zh) 丁酸(酪酸)在制备治疗肛肠疾病药物中的应用
CN1289137C (zh) 一种治疗乳腺增生疾病的药物和制备方法及其应用
EA029649B1 (ru) Гель на основе полифенолов гранатовой кожуры для лечения воспалительных заболеваний в гинекологии и способ его приготовления
CN111568948A (zh) 桑提取物在制备改善胰岛功能药物中的应用
CN115089695A (zh) 一种具有治疗子宫内膜癌功效的组合物及其制备方法
CN1382478A (zh) 桑枝提取物及其提取方法和新用途
CN111358833A (zh) 夏枯草提取物及其在制备治疗甲状腺疾病药物中的应用
CN107375334B (zh) 胎盘提取物及其制备方法和应用
CN103705632B (zh) 乳癖消片在制备治疗阴茎硬结症药物中的应用
CN107281386B (zh) 以铁皮石斛与莱菔子制备治疗高血压药物的方法及应用
CN112641889B (zh) 理肠汤在制备治疗克罗恩病药物中的应用
CN107375333B (zh) 治疗卵巢早衰的胎盘提取物生物凝胶制剂及其制备方法
CN110368445B (zh) 一种治疗银屑病的中药组合物及其制备方法和应用
CN101773545B (zh) 含鲨肝醇的升白药物
CN107260750A (zh) 人参皂苷Rb1在制备治疗免疫性复发性流产药物中的用途及其药物组合物
CN1241571C (zh) 积雪草总甙在制药中的用途
CN1382439A (zh) 氧化苦参碱在制备治疗溃疡性结肠炎药物中的应用
JP2506307B2 (ja) 生理機能活性剤
CN114588118B (zh) 一种注射用七叶皂苷钠复方制剂
CN115624543B (zh) 治疗偏头痛的药物、药物组合物、其制备方法和制药用途
CN115957260B (zh) 一种祛风湿抗炎的中药组合物及其制备方法和应用
CN106880654B (zh) 竹节参提取物在制备治疗鼻炎药物中的应用及组合物
CN117180331B (zh) 外用退热中药组合物及其制备方法、应用和退热凝胶贴膏
JPH01268640A (ja) 生理機能活性剤
CN107648482A (zh) 一种用于治疗神经退行性疾病的中药组合物

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination