CN106880654B - 竹节参提取物在制备治疗鼻炎药物中的应用及组合物 - Google Patents
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Abstract
一种竹节参提取物在制备治疗鼻炎药物中的应用及组合物，属于药物技术领域。竹节参提取物中的竹节参多糖、竹节参总皂苷和竹节参皂苷V均对鼻炎具有较好的治疗效果，能够应用于制备治疗鼻炎的药物。本发明还提供了一种具有上述竹节参提取物的组合物，该组合物能够用于治疗鼻炎，特别是对于过敏性鼻炎具有较好的缓解和治疗效果。
Description
技术领域
本发明涉及药物技术领域，且特别涉及一种竹节参提取物在制备治疗鼻炎药物中的应用及组合物。
背景技术
鼻炎是指鼻腔内部区域受到刺激而产生的炎症，其是由病毒、细菌、变应原、各种理化因子及某些全身性疾病引起的鼻腔黏膜炎症的总称。鼻炎会使鼻腔粘膜出现充血、肿胀、增生、萎缩等症状，其典型病征表现为鼻塞、流涕、头疼、食欲不振、易疲倦、记忆力减退及失眠等症状。鼻炎分为急性鼻炎和慢性鼻炎，急性鼻炎多为伤风或感冒等急性感染导致，其主要症状表现为鼻塞和分泌物增多；慢性鼻炎是目前常见的多发病，其是由鼻腔粘膜和粘膜下层的慢性炎症发展形成，慢性鼻炎的发病与细菌继发感染有关，且其难以彻底治疗，容易反复发作，严重的影响着人们的工作和生活。
目前鼻炎的治疗方法分为西医治疗和中医治疗两类，前者主要使用化学药物治疗，如使用麻黄素、抗组胺类药物、西替利嗪等能够收缩鼻血管的药物，以及使用类固醇激素喷鼻制剂，这些药物均具有较大的副作用，且需反复用药控制症状，难以从根本上解决慢性鼻炎反复发作、久治不愈的难题。在鼻炎的治疗方面，我国传统的中医药疗法往往被证明具有特殊的疗效。
竹节参为五加科植物竹节参(Panax japonicus C.A.Mey.)的干燥根茎，其具有滋补强身、活血化瘀、散瘀止痛、止血祛痰的功效，在土家族苗族聚居区被誉为“草药之王”，属珍稀濒危的名贵“七类”中草药。研究表明，竹节参提取物具有抗炎、抗肿瘤、降血脂的功效，对多种疾病具有有效的治疗效果，如竹节参提取物能够用于预防和治疗慢性阻塞性肺疾病、护肝、降血脂、治疗肠粘膜损伤、制备抗血栓药物、制备抗尿酸性关节炎药物、制备抗骨质疏松药物等等，但是目前尚无竹节参提取物在制备治疗鼻炎的药物方面的应用。
发明内容
本发明的目的在于提供一种竹节参提取物在制备治疗鼻炎药物中的应用。
本发明的另一目的在于提供一种包含上述竹节参提取物的组合物，该组合物能够用于改善和治疗鼻炎。
本发明解决其技术问题是采用以下技术方案来实现的。
本发明提供了一种竹节参提取物在制备治疗鼻炎药物中的应用，竹节参提取物包含竹节参多糖提取物或竹节参总皂苷提取物中的至少一种。
进一步地，在本发明较佳实施例中，竹节参提取物包括质量比为0.8～1.5：1的竹节参多糖提取物和竹节参总皂苷提取物。
进一步地，在本发明较佳实施例中，竹节参提取物包括质量比为1.1～1.3：1的竹节参多糖提取物和竹节参总皂苷提取物。
进一步地，在本发明较佳实施例中，竹节参提取物为竹节参多糖提取物，其单位体重用量为每天16～420mg/kg。
进一步地，在本发明较佳实施例中，竹节参提取物为竹节参总皂苷提取物，其单位体重用量为每天12～380mg/kg。
进一步地，在本发明较佳实施例中，竹节参总皂苷提取物中含有质量百分比为50％以上的竹节参皂苷V。
进一步地，在本发明较佳实施例中，竹节参多糖提取物是按照以下制备方法制得：向竹节参粉末中加入其质量8～10倍的水，浸泡1～3小时后煎煮1.5～2小时，过滤；对过滤后的滤渣进行2～3次二次提取，并过滤，合并所有过滤后的滤液，减压浓缩得到浓缩液；对浓缩液进行2～3次醇提，合并所有醇提得到的沉淀物，冷冻干燥。
进一步地，在本发明较佳实施例中，竹节参总皂苷提取物是按照以下制备方法制得：向竹节参粉末中加入其质量10～12倍的乙醇，浸泡2～3小时后水浴并回流提取1.5～2小时，过滤；对过滤后的残渣进行2～3次再提取，并过滤，合并所有过滤后的提取液，减圧回收乙醇后配制成固体：液体为1g：2.5～5mL的溶液，使用HP-400大孔树脂柱依次用水、质量浓度60％的乙醇洗脱溶液得到乙醇洗脱液，将乙醇洗脱液冷冻干燥。
本发明还提供了一种组合物，其包括上述的竹节参提取物及医用辅料。
进一步地，在本发明较佳实施例中，组合物制备成口服药或鼻腔喷剂使用。
本发明的有益效果是：本发明公开了竹节参提取物在制备治疗鼻炎药物中的应用，表明竹节参提取物中的竹节参多糖、竹节参总皂苷和竹节参皂苷V对于鼻炎具有显著的疗效，其具有开发和制备治疗鼻炎药物的前景，竹节参提取物还具有对人体副作用小，使用安全的优点。本发明还提供了一种包含上述竹节参提取物的组合物，该组合物能够用于缓解和治疗鼻炎。
具体实施方式
为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。
下面对本发明实施例提供的竹节参提取物在制备治疗鼻炎药物中的应用及组合物进行具体说明。
本发明实施例提供了一种竹节参提取物在制备治疗鼻炎药物中的应用，特别是竹节参提取物在制备治疗过敏性鼻炎的药物中的应用，该竹节参提取物中包含有竹节参多糖提取物、竹节参总皂苷提取物或竹节参皂苷V提取物中的至少一种；且当竹节参提取物为竹节参多糖提取物时，其单位体重用量为每天16～420mg/kg；当竹节参提取物为竹节参总皂苷提取物时，其单位体重用量为每天12～380mg/kg；当竹节参提取物为竹节参多糖提取物和竹节参总皂苷提取物的混合物时，竹节参多糖提取物和竹节参总皂苷提取物的质量比为0.8～1.5：1；且当竹节参多糖提取物和竹节参总皂苷提取物的质量比为1.1～1.3：1时，竹节参提取物对于鼻炎症状具有最佳的治疗效果；竹节参多糖提取物的优选单位体重用量为每天24～96mg/kg，竹节参总皂苷提取物的优选单位体重用量为每天12～72mg/kg；此外，竹节参总皂苷提取物中竹节参皂苷V的含量优选为50％以上,；竹节参皂苷V的纯度为92～95％。
其中，竹节参多糖提取物是按照以下制备方法制得：向竹节参粉末中加入其质量8～10倍的水，浸泡1～3小时后煎煮1.5～2小时，过滤；对过滤后的滤渣进行2～3次二次提取并过滤；二次提取的方法是：向滤渣中加入其质量5～8倍的水并煎煮1～1.5小时后过滤；合并所有过滤后的滤液，减压浓缩得到浓缩液，对浓缩液进行2～3次醇提；醇提是向浓缩液中加入乙醇至乙醇质量浓度为60～65％，并放置12小时以上后过滤获取沉淀物；合并所有醇提得到的沉淀物，冷冻干燥得到竹节参多糖提取物。
竹节参总皂苷提取物是按照以下制备方法制得：向竹节参粉末中加入其质量10～12倍的乙醇，浸泡2～3小时后水浴并回流提取1.5～2小时，过滤；对过滤后的残渣进行2～3次再提取并过滤，再提取是向残渣中加入其质量6～8倍的乙醇并回流提取2～3次，每次提取1～1.5小时得到提取液；合并所有过滤后的提取液，减圧回收乙醇后配制成固体：液体为1g：2.5～5mL的溶液，使用HP-400大孔树脂柱依次用水、质量浓度60％的乙醇洗脱溶液得到乙醇洗脱液，将乙醇洗脱液冷冻干燥得到竹节参总皂苷提取物。
本发明实施例公开了竹节参提取物即竹节参多糖、竹节参总皂苷和竹节参皂苷V在制备治疗鼻炎药物中的应用，研究表明，竹节参多糖、竹节参总皂苷和竹节参皂苷V均能很好的改善和缓解鼻炎症状，特别是竹节参提取物中竹节参多糖和竹节参总皂苷的质量比为1.1～1.3：1时，竹节参多糖和竹节参总皂苷配合作用，能够起到最佳的治疗效果，从而有效的治疗过敏性鼻炎。本发明还提供了竹节参多糖和竹节参总皂苷的制备方法，该方法能够将竹节参中的竹节参多糖活性成分和竹节参总皂苷活性成分充分的提取出来。
本发明还提供了一种组合物，其包括上述竹节参提取物及医用辅料，该组合物可以制备成为片剂、颗粒剂、胶囊剂、膏剂等常用口服剂使用，也可制备成鼻腔喷剂使用。
以下结合实施例中的实验方法和结果对本发明作进一步的详细描述。
1.实验材料。
1.1 竹节参多糖的提取、纯化和制备。
将竹节参磨成100μm以下的粉末，向竹节参粉末中加入其质量8倍的水，浸泡3小时后煎煮1.5小时，过滤；对过滤得到的滤渣进行2次二次提取得到滤液；二次提取的方法是：向滤渣中加入其质量6倍的水并煎煮1.5小时后过滤；合并所有过滤的滤液后减压浓缩得到浓缩液，对浓缩液进行3次醇提得到沉淀物；醇提是向浓缩液中加入乙醇至乙醇质量浓度为65％，并放置18小时后过滤获取沉淀物，合并所有过滤得到的沉淀物后冷冻干燥得到竹节参多糖。
1.2 竹节参总皂苷的提取、纯化和制备。
将竹节参磨成200μm以下的粉末，向竹节参粉末中加入其质量12倍的乙醇，浸泡3小时后水浴回流提取2小时，过滤；对过滤后的残渣进行3次再提取并过滤；再提取是向残渣中加入其质量8倍的乙醇回流提取2次并过滤得到提取液，每次提取1.5小时；合并所有过滤得到的提取液，减圧回收乙醇后配制成固体：液体为1g：3mL的溶液，使用HP-400大孔树脂柱依次用水、质量浓度60％的乙醇洗脱溶液得到乙醇洗脱液，将乙醇洗脱液冷冻干燥得到竹节参总皂苷。
1.3 竹节参皂苷V的提取、纯化和制备。
取上述竹节参总皂苷使用HP-20树脂柱纯化，收集55～85％的乙醇洗脱液，减压回收乙醇冷冻干燥，得到竹节参皂苷V，其纯度为95％。
2.竹节参多糖、竹节参总皂苷与竹节参皂苷V预防与治疗鼻炎的实验研究。
2.1 实验设备和内容。
2.1.1 实验试剂：竹节参多糖(DT)、竹节参总皂苷(ZG)、竹节参皂苷V(ZV)为自制。
2.1.2 实验仪器：TE-CAr全波长多功能酶标仪(型号SAFIRE2)；LXJ-II离心机(上海医用分析仪器厂)；Satrious电子天平(德国)；恒温水浴锅(上海亚荣生化仪器厂)；低温高速离心机(天美Z323K)；RSFJ800心肺功能测定仪(成都日升科技有限公司)；移液枪(大龙医疗设备(上海)公司)。
2.1.3 实验动物：SPF级雄性Wistar大鼠72只，体重200±20g，由华中科技大学提供。
2.2 实验样品溶液的配制。
2.2.1 CMC-Na溶液的配制：精密称取4gCMC-Na溶解于1000mL蒸馏水，配制成浓度为0.4％的CMC-Na溶液。
2.2.2 阳性对照液制备：称取辛芩颗粒适量，置于研钵中碾成细粉，溶解于适量CMC-Na溶液中，配制成0.5g/mL的辛芩颗粒悬液，为阳性对照药液。
2.2.3 DT药液的配制：精密称取DT适量，溶解于适量CMC-Na溶液中，配制成2.0mg/mL的DT混悬液。
2.2.4 ZG药液的配制：精密称取ZG适量，溶解于适量CMC-Na溶液中，配制成2.0mg/mL的ZG混悬液。
2.2.5 ZV药液的配制：精密称取ZV适量，溶解于适量CMC-Na溶液中，配制成1.0mg/mL的ZV混悬液。
2.2.6 DT+ZG(1)药液的配制：精密称取ZG与DT适量，溶解于适量CMC-Na溶液中，配制成含DT为1.0mg/mL与含ZG为1.0mg/mL的混悬液(即DT：ZG＝1：1)。
2.2.7 DT+ZG(2)药液的配制：精密称取ZG与DT适量，溶解于适量CMC-Na溶液中，配制成含DT为1.5mg/mL与含ZG为0.5mg/mL的混悬液(即DT：ZG＝3：1)。
2.2.8 DT+ZG(3)药液的配制：精密称取ZG与DT适量，溶解于适量CMC-Na溶液中，配制成含DT为0.5mg/mL与含ZG为1.5mg/mL的混悬液(即DT：ZG＝1：3)。
2.3 动物实验。
2.3.1 造模：鼻炎模型大鼠的造模方法为：于第一天腹腔注射卵清蛋白100μg与氢氧化铝凝胶混合液0.3mL使之致敏，第8天和第15天用同样的方法加强致敏2次，第22-28天每天给予4％卵清蛋白生理盐水溶液20μL滴鼻激发；空白对照组以等量生理盐水代替。
2.3.2 分组及给药。
将动物称重，编号，选择健康大鼠72只，按体重大小排序，用随机分组法分成9组，每组8只，正常组、模型组、阳性组、DT组、ZG组、ZV组、DT+ZG(1)组、DT+ZG(2)组与DT+ZG(3)组，各组动物均自由饮食，适应性饲养一周后用于实验。
将64只成模的大鼠于局部激发第3次当日开始给药，DT组、ZG组、ZV组、DT+ZG(1)组、DT+ZG(2)组与DT+ZG(3)组分别按相应的剂量灌服给药，辛芩颗粒对照组灌服辛芩颗粒5g/kg，空白对照组与模型组灌服同等容积的CMC-Na溶液，每日1次，连续7天。
2.3.3 观察指标。
2.3.3.1 行为学观察。
末次给药后30min内，记录大鼠鼻分泌量、喷嚏及搔鼻次数，采用叠加量化计分法进行计分。计分方法是，鼻痒：无挠鼻为0分，轻度挠鼻1分，频繁挠鼻2分，挠鼻不止为3分；喷嚏：30min内无喷嚏为0分，打喷嚏1～3个为1分，4～10个为2分，11个以上为3分；鼻涕：无鼻涕为0分，流至前鼻孔为1分，超出前鼻孔为2分，涕流满面为3分。
2.3.3.2 血清生化指标。
末次给药1h，戊巴比妥钠麻醉，肝门静脉采血用于HA和IgE的测定。
2.3.3.3 组织学观察。
末次给药1h，戊巴比妥钠麻醉采血后，立即处死，剥离鼻部皮肤后，将连同鼻腔的上颌骨取下，从中切齿间分离双侧鼻腔，小心取出双侧鼻黏膜组织，4％甲醛固定，用于HE染色。
2.4 统计学处理。
各组实验数据用均数±标准差(X±SD)表示，并用spss13.0进行统计学处理，显著性检验采用方差分析。
3 结果。
3.1 对行为学的影响。
如表1所示，模型组大鼠出现大量清涕、频繁喷嚏、剧烈挠鼻等典型AR症状，说明造模成功。对表1中数据进行对比，DT组、ZG组、ZV组、DT+ZG(1)组、DT+ZG(2)组与DT+ZG(3)组症状积分均低于模型组(P<0.05)，说明竹节参提取物均对鼻炎有一定的缓解和治疗作用。
表1对AR大鼠行为学的影响(x±s)
| 组别 | n | 剂量g/kg/d | 症状积分 |
| 正常组 | 8 | - | 0.36±0.29 |
| 模型组 | 8 | - | 5.89±0.78<sup>##</sup> |
| 阳性组 | 8 | 5 | 4.69±0.48* |
| DT组 | 8 | 0.02 | 4.93±0.68* |
| ZG组 | 8 | 0.02 | 4.22±0.51** |
| ZV组 | 8 | 0.01 | 4.38±0.74** |
| DT+ZG组(1) | 8 | 0.02 | 3.44±0.33*** |
| DT+ZG组(2) | 8 | 0.02 | 4.15±0.55** |
| DT+ZG组(3) | 8 | 0.02 | 4.25±0.37** |
注：与模型对照组比较，*P<0.05，**P<0.01，与正常组比较#P<0.05，##P<0.01。
3.2 对血清HA和IgE的影响。
如表2所示，模型组AR大鼠血清组胺和IgE水平明显高于空白对照组(P<0.01)，DT组、ZG组、ZV组、DT+ZG(1)组、DT+ZG(2)组与DT+ZG(3)给药组血清组胺和IgE水平均低于模型组，结果有显著意义(P<0.05)。
表2对血清HA和IgE水平的影响
注：与模型对照组比较，*P<0.05，**P<0.01，与正常组比较#P<0.05，##P<0.01。
3.3 组织学观察结果。
鼻炎模型组大鼠病理改变明显，大鼠的纤毛柱状上皮基本脱落，黏膜层增厚且结构紊乱，内有大量炎性细胞浸润，血管充血明显，腺体增加，组织水肿。竹节参提取物给药组大鼠可见由于纤维修复所致的组织结构重建，黏膜增厚，炎性细胞浸润减少，间质无水肿，血管未见充血、扩张，表明竹节参提取物能减少AR豚鼠鼻分泌物、保护鼻粘膜组织，亦能抑制HA和IgE的释放，具有治疗过敏性鼻炎的作用。
4 结论。
竹节参提取物给药组大鼠的行为学症状积分明显低于模型组大鼠；组织学观察可见，竹节参提取物给药组大鼠的纤维修复所致组织结构重建，黏膜增厚，炎性细胞浸润减少，间质无水肿，血管未见充血、扩张；同时竹节参提取物给药组大鼠的血清组胺和IgE水平亦明显低于模型组，这表明竹节参提取物能够有效缓解鼻炎模型大鼠的炎症反应，其具有潜在的对鼻炎病征的治疗作用。
综上所述，竹节参提取物中的竹节参多糖、竹节参总皂苷和竹节参皂苷V均对鼻炎具有较好的治疗效果，能够应用于制备治疗鼻炎的药物，能够很好的缓解、改善和治疗过敏性鼻炎。
本发明提供的以上所描述的实施例是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。本发明的实施例的详细描述并非旨在限制要求保护的本发明的范围，而是仅仅表示本发明的选定实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
Claims (2)
1.一种竹节参提取物在制备治疗鼻炎药物中的应用，其特征在于，所述竹节参提取物为竹节参皂苷V；
所述鼻炎为过敏性鼻炎。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述治疗鼻炎药物为口服药或鼻腔喷剂。
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