CN111304134A - 一株能有效缓解糖尿病的植物乳杆菌 - Google Patents
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Abstract
本发明提供一株能有效缓解糖尿病的植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)AR113菌株，该植物乳杆菌AR113菌株已在2017年3月22日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.13909。本发明的植物乳杆菌AR113菌株能够有效缓解甚至治疗糖尿病，能够起到降低血糖和改善胰岛素抵抗的作用。
Description
技术领域
本发明属于微生物领域，具体涉及一株能有效缓解糖尿病的植物乳杆菌。
背景技术
糖尿病是一类严重的慢性疾病，其致病原理是由于在人体内无法产生足够的胰岛素或者细胞无法有效的使用其产生的胰岛素。典型的症状是血糖浓度过高，主要分为3大类包括：Ⅰ型，Ⅱ型，妊娠型。其中II型糖尿病是最常见的类型，占糖尿病患者的90％以上，甚至会引发冠心病、动脉粥样硬化、肾脏病变、神经病变、视网膜病变以及足部病变等并发症。目前针对糖尿病治疗有两种方法：一种是注射胰岛素治疗，但有可能会造成胰岛素抵抗；第二种是口服降血糖药物，但是长期服用药物会引起一些副作用，如腹泻、头晕、恶心、食欲不振、低血糖和肝功能损伤等，严重影响患者的身体健康。急需一种安全、无毒副作用的缓解甚至治疗糖尿病的方法，近年来，益生菌的益生功能引起了人们的广泛关注。益生菌，指主要定植于人体肠道和生殖系统内，能产生确切健康功效从而改善宿主微生态平衡、发挥有益作用的具有活性的微生物的总称。益生菌具有低成本、高安全性和高可靠性的特点。
发明内容
本发明是为了解决上述问题而进行的，目的在于提供一株能有效缓解糖尿病的植物乳杆菌。
本发明提供了一种能有效缓解糖尿病的植物乳杆菌(Lactobacillusplantarum)AR113菌株，具有这样的特征，所述植物乳杆菌AR113菌株已在2017年3月22日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.13909。
本发明还提供了利用植物乳杆菌AR113菌株制备用于缓解糖尿病的制品中的应用。
发明的作用与效果
根据本发明所涉及的能有效缓解糖尿病的植物乳杆菌，该植物乳杆菌是安全、无毒副作用的益生菌，能够有效缓解甚至治疗糖尿病，即降低血糖的同时还能改善胰岛素抵抗，另外，还具有可以长期实用的安全性，且成本低、安全性高、可靠性高，能够用来制备用于缓解甚至治疗糖尿病的药品、保健品或食品饮品。
附图说明
图1是本发明的实施例中各处理组小鼠体重变化图；
图2是本发明的实施例中正常小鼠喂食益生菌后血糖变化图；
图3是本发明的实施例中模型小鼠喂食益生菌后血糖变化图；
图4是本发明的实施例中模型小鼠喂食益生菌后葡萄糖耐受实验后的血糖变化图；
图5是本发明的实施例中正常小鼠喂食益生菌后葡萄糖耐受实验后的血糖变化图；
图6是本发明的实施例中正常小鼠喂食益生菌后胰岛素敏感实验后的血糖变化图；
图7是本发明的实施例中模型小鼠喂食益生菌后胰岛素敏感实验后的血糖变化图。
具体实施方式
为了使本发明实现的技术手段与功效易于明白了解，以下结合实施例及附图对本发明作具体阐述。
本发明的一株能有效缓解糖尿病的植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)AR113菌株，已在2017年3月22日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.13909。
利用植物乳杆菌AR113菌株制备用于缓解糖尿病的制品中的应用。
本发明中的制品可以是药品、保健品或食品饮品。较佳的食品饮品可为在乳酸菌饮品、酸奶、发酵豆制品、菌粉或奶粉中加入有效量的植物乳杆菌AR113而制成的产品。
实施例：
(1)培养基的制备
MRS液体培养基：蛋白胨10g、酵母膏5g、柠檬酸二胺2g、牛肉膏10g、葡萄糖20g、Tween-801mL、乙酸钠5g、磷酸氢二钾2g、硫酸镁0.58g、硫酸锰0.25g、琼脂粉15g、蒸溜水1000mL。
MRS固体培养基：在MRS液体培养基中加入15g琼脂，加1000mL蒸馏水后灭菌备用。
(2)益生菌的培养
在MRS液体培养基中培养益生菌菌株至第二代，离心并用灭菌的蒸馏水洗涤两次并重悬，调节菌液浓度为2×109备用。
(3)大鼠的喂养及样本采集
喂养：购买7周龄的SD大鼠，适应1周，随机分成模型组和正常组，模型组喂养高脂饲料，正常组喂养普通饲料。在第7周结束时进行造模，注射STZ(25mg/kg)，72h后血糖>＝11.1mmol L–1造模成功，各组随机分为7组，(正常组，模型组，药组，正常113组，正常495组，模型113组，模型495组)。灌胃8周。饲养室内12h/12h昼夜明暗交替，室内温度保持在18-22℃，相对湿度保持在50-60％。定时补给饲料，饮用水，更换垫料，保证实验大鼠的正常饮食以及干燥卫生的生活环境。
体内动物实验，利用动物模型评价体外α葡萄糖苷酶抑制率强的菌株AR113和能力弱的菌株AR495分别在体内缓解糖尿病的效果。
选用7周龄的SD大鼠，适应性喂养1周后，分为正常组和模型组，模型组高脂喂养6周，正常组普通饲料。第7周末注射STZ造模，72h后空腹血糖高于11.1mmol/L即3造模成功。随后将其分成7大组(模型组、正常组、药物组、模型AR113组、模型495组、正常AR113组、正常AR495组)，每组10只。灌胃8周，剂量为109CFU/ml，正常组和模型组灌胃无菌水10ml/kg。每周同一时间测定体重，空腹血糖。第16周结束断颈处死大鼠，收集血清、肝脏、肾、胰腺、结肠、脂肪等组织，分别放于4％多聚甲醛和-80℃的冰箱中保存。
(4)基本指标的测定：包括血脂水平(TC、TG、HDL-C、LDL-C)、肝糖原、胰岛素、胰高血糖素、糖化血红蛋白(HbA1c)。
(5)结果分析
如图1所示，注射STZ后，模型组各组体重都明显的下降，之后除了模型组之外，益生菌组和药物组体重有所回升，到实验结束，各组体重都趋于稳定，益生菌及二甲双胍对于大鼠体重没有明显的改善作用。
如图2和图3所示，各个正常组血糖值都在6mmol/L上下浮动，没有差异。各个模型组经过8周到灌胃后，模型组AR113和二甲双胍组血糖明显下降，相对于模型组具有显著性。模型组血糖基本没有变化，AR495血糖值没有得到改善，基本保持稳定，表明AR113和二甲双胍起到了降低血糖的作用，需进一步探究降糖的机制。
如图4和图5所示，葡萄糖耐受实验(OGTT)是测定的主要是全身胰岛素的分泌，实验结果植物乳杆菌AR113对于全身胰岛素分泌的改善作用有一定的作用，但是不明显。需要进行ITT实验进一步确定是否植物乳杆菌AR113起到改善胰岛素抵抗的作用。
ITT是胰岛素敏感实验，从图6和图7中可以看出大鼠空腹注射胰岛素后，正常组，正常AR113，正常495组，血糖下降很明显，最后达到2.6mmol/L左右。相对于模型组和模型AR495，模型组AR113和药组血糖下降很明显，也就表明了植物乳杆菌AR113对于缓解胰岛素抵抗有一定的作用。
实施例的作用与效果
上述实施例中通过体内实验即对对大鼠体重的观察、血糖的测定以及改善胰岛素抵抗的实验，得知本发明的植物乳杆菌AR113能够降低血糖，并对缓解胰岛素抵抗具有一定的作用。
此外，本发明的植物乳杆菌AR113是安全、无毒副作用的益生菌，能够有效缓解甚至治疗糖尿病，即降低血糖的同时还能改善胰岛素抵抗，另外，还具有可以长期实用的安全性，且成本低、安全性高、可靠性高，能够用来制备用于缓解甚至治疗糖尿病的药品、保健品或食品饮品。
上述实施方式为本发明的优选案例，并不用来限制本发明的保护范围。
Claims (2)
1.一株能有效缓解糖尿病的植物乳杆菌(Lactobacillusplantarum)AR113菌株，其特征在于：所述植物乳杆菌AR113菌株已在2017年3月22日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCCNo.13909。
2.利用权利要求1所述的植物乳杆菌AR113菌株制备用于缓解糖尿病的制品中的应用。
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