CN111187327A - 一种从小驳骨中提取新三萜类化合物驳骨萜a的方法及其应用 - Google Patents

一种从小驳骨中提取新三萜类化合物驳骨萜a的方法及其应用 Download PDF

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Abstract

本发明涉及从小驳骨中提取新三萜类化合物驳骨萜A的方法及其应用,有效解决从小驳骨中提取新三萜类化合物驳骨萜A,用于制备抗肝恶性肿瘤的药物问题,小驳骨用乙醇加热回流提取,减压回收乙醇,得到的浸膏状乙醇提取物混悬于蒸馏水中,依次以石油醚、乙酸乙酯萃取3次,将乙酸乙酯萃取部位经硅胶吸附柱色谱分离,用石油醚‑丙酮混合溶剂系统进行梯度洗脱,收集流份,减压回收溶剂,得浓缩物,经反相ODS柱色谱,用甲醇‑水混合溶剂系统进行梯度洗脱,收集流份,减压浓缩,经硅胶柱色谱,用石油醚‑丙酮混合溶剂系统梯度洗脱,收集含有目标化合物的流份即为驳骨萜A。本发明原料丰富,制备方法易操作,开拓了小驳骨的药物价值和商业价值。

Description

一种从小驳骨中提取新三萜类化合物驳骨萜A的方法及其 应用
技术领域
本发明涉及医药,特别是一种从小驳骨中提取新三萜类化合物驳骨萜A的方法及其应用。
背景技术
小驳骨为爵床科植物小驳骨(Gendarussa vulgaris Nees)的干燥地上部分。广泛分布于我国广西、广东、海南等省。具有祛瘀镇痛、续筋接骨之功效,主要用于跌打损伤、筋伤骨折、风湿骨痛、血瘀经闭及产后腹痛。在我国已有较长的应用历史,在《本草纲目拾遗》、《生草药性备要》、《岭南采药录》、《陆川本草》等医药古籍中均有记载。2010年作为新增药材,收载于《中华人民共和国药典》。近年来关于小驳骨化学成分及生物活性的研究受到国内外学者的广泛关注,化学成分主要包括生物碱、黄酮、香豆素、三萜等类型。生物活性研究表明,具有抗炎、止痛、保肝、抗氧化、免疫抑制、抗血管生成、抗人获得性免疫缺陷病毒、驱虫、抗焦虑等作用。
恶性肿瘤已经成为当前严重影响人类健康、威胁人类生命的主要疾病之一。肝癌是指发生于肝脏的恶性肿瘤,全世界每年新发肝癌患者约60万,发病率居恶性肿瘤的第五位,其死亡率仅次于胃癌和食道癌居第三位。我国每年死于肝癌的患者约11万,占全世界肝癌死亡人数的45%。目前临床上广泛使用的合成的抗肝癌药物普遍存在着毒副作用,如脱发、贫血和胃肠不适等现象。因此加强肝癌治疗的研究,延长患者的生存期,改善患者的生活质量是药学工作者的当务之急。中草药在抗肿瘤方面的应用历史悠久,从中草药中寻找高效低毒的抗肿瘤活性物质,研制选择性强、毒副作用低的新型抗肿瘤药物是药学科研工作者迫切解决的首要问题,但迄今为止未见有如何从小驳骨中提取新三萜类化合物驳骨萜A,并用于治疗恶性肿瘤的公开报导。
发明内容
针对上述情况,为克服现有技术之缺陷,本发明之目的就是提供一种从小驳骨中提取新三萜类化合物驳骨萜A的方法及其应用,可有效解决从小驳骨中提取新三萜类化合物驳骨萜A,并用于制备抗肝恶性肿瘤的药物问题。
本发明解决的技术方案是,一种从小驳骨中提取新三萜类化合物驳骨萜A的方法,该化合物为驳骨萜A,分子结构式为:
Figure BDA0002365932890000021
其制备方法是,以小驳骨15–20kg为原料,以2–5倍原料重量的、体积浓度为75%–95%的乙醇加热回流提取3次,提取温度为90–95℃,每次提取时间为1小时,减压回收乙醇,得浸膏状乙醇提取物;将浸膏状乙醇提取物混悬于3.6–4.8L的蒸馏水中,依次以石油醚、乙酸乙酯萃取3次,每次3.6–4.8L,时间为1.5小时;将乙酸乙酯萃取部位经硅胶吸附柱色谱分离,依次用体积比为100︰5、100︰20、100︰30石油醚-丙酮混合溶剂系统进行梯度洗脱,每一梯度用3.7–5.0L洗脱液,流速为10–15mLmin-1,收集100︰20的石油醚-丙酮洗脱流份,减压回收溶剂,得浓缩物;将该浓缩物经反相ODS柱色谱,依次用体积比为70︰30、80︰20甲醇-水混合溶剂系统进行梯度洗脱,每一梯度用500–1000mL洗脱液,流速为7–10mLmin-1,收集体积比为80︰20甲醇-水的洗脱流份,减压浓缩后,得到浓缩物;将该浓缩物经硅胶柱色谱,依次用体积比100︰5、100︰7、100︰10、100︰20的石油醚-丙酮混合溶剂系统梯度洗脱,每一梯度用150–200mL洗脱液,流速为8–12mLmin-1,收集含有目标化合物的流份即为驳骨萜A。
该驳骨萜A具有抗肝恶性肿瘤活性,有效用于抗肝癌的药物,实现驳骨萜A(Gvterpennoid A)在制备抗肝癌药物中的应用。
本发明原料丰富,制备方法易操作,可有效解决从小驳骨中提取新三萜类化合物驳骨萜A,并用于制备抗肝癌药物,开拓了小驳骨的药物价值和商业价值,有巨大的经济和社会效益。
附图说明
图1为本发明化合物驳骨萜A的DEPT135谱图。
图2为本发明化合物驳骨萜A的HMBC谱图。
图3为本发明化合物驳骨萜A的HSQC谱图。
图4为本发明化合物驳骨萜A的NOE谱图。
图5为本发明化合物驳骨萜A的H-HCOSY谱图。
图6为本发明化合物驳骨萜A的核磁共振氢谱图。
图7为本发明化合物驳骨萜A的核磁共振碳谱图。
具体实施方式
以下结合实施例对本发明的具体实施方式作详细说明。
本发明在具体实施中可由以下实施例给出。
实施例1
本发明在具体实施中,一种从小驳骨中提取新三萜类化合物驳骨萜A的方法,以小驳骨20kg为原料,以5倍原料重量的、体积浓度为95%的乙醇加热回流提取3次,提取温度为90℃,每次提取时间为1小时,减压回收乙醇,得浸膏状乙醇提取物;将浸膏状乙醇提取物混悬于4.8L的蒸馏水中,依次以石油醚、乙酸乙酯萃取3次,每次4.8L,时间为1.5小时;将乙酸乙酯萃取部位经硅胶吸附柱色谱分离,依次用体积比为100︰5、100︰20、100︰30石油醚-丙酮混合溶剂系统进行梯度洗脱,每一梯度用5.0L洗脱液,流速为15mLmin-1,收集100︰20的石油醚-丙酮洗脱流份,减压回收溶剂后,得到浓缩物;将该浓缩物经反相ODS柱色谱,依次用体积比为70︰30、80︰20甲醇-水混合溶剂系统进行梯度洗脱,每一梯度用1000mL洗脱液,流速为10mLmin-1,收集体积比为80︰20甲醇-水的洗脱流份,减压浓缩后,得到浓缩物;将该浓缩物经硅胶柱色谱,依次用体积比100︰5、100︰7、100︰10、100︰20的石油醚-丙酮混合溶剂系统梯度洗脱,每一梯度用200mL洗脱液,流速为12mLmin-1,收集含有目标化合物的流份即为驳骨萜A。
实施例2
本发明一种从小驳骨中提取新三萜类化合物驳骨萜A的方法,以小驳骨15kg为原料,以3倍原料重量的、体积浓度为90%的乙醇加热回流提取3次,提取温度为95℃,每次提取时间为1小时,减压回收乙醇,得浸膏状乙醇提取物;将浸膏状乙醇提取物混悬于3.6L的蒸馏水中,依次以石油醚、乙酸乙酯萃取3次,每次3.6L,时间为1.5小时;将乙酸乙酯萃取部位经硅胶吸附柱色谱分离,依次用体积比为100︰5、100︰20、100︰30石油醚-丙酮混合溶剂系统进行梯度洗脱,每一梯度用3.7L洗脱液,流速为10mLmin-1,收集100︰20的石油醚-丙酮洗脱流份,减压回收溶剂,得浓缩物;将该浓缩物经反相ODS柱色谱,依次用体积比为70︰30、80︰20甲醇-水混合溶剂系统进行梯度洗脱,每一梯度用500mL洗脱液,流速为7mLmin-1,收集体积比为80︰20甲醇-水的洗脱流份,减压浓缩后,得到浓缩物;将该浓缩物经硅胶柱色谱,依次用体积比100︰5、100︰7、100︰10、100︰20的石油醚-丙酮混合溶剂系统梯度洗脱,每一梯度用150mL洗脱液,流速为8mLmin-1,收集含有目标化合物的流份即为驳骨萜A。
实施例3
本发明一种从小驳骨中提取新三萜类化合物驳骨萜A的方法,以小驳骨18kg为原料,以4倍原料重量的、体积浓度为85%的乙醇加热回流提取3次,提取温度为92℃,每次提取时间为1小时,减压回收乙醇,得浸膏状乙醇提取物;将浸膏状乙醇提取物混悬于4.5L的蒸馏水中,依次以石油醚、乙酸乙酯萃取3次,每次4.5L,时间为1.5小时;将乙酸乙酯萃取部位经硅胶吸附柱色谱分离,依次用体积比为100︰5、100︰20、100︰30石油醚-丙酮混合溶剂系统进行梯度洗脱,每一梯度用4.4L洗脱液,流速为12mLmin-1,收集100︰20的石油醚-丙酮洗脱流份,减压回收溶剂,得浓缩物;将该浓缩物经反相ODS柱色谱,依次用体积比为70︰30、80︰20甲醇-水混合溶剂系统进行梯度洗脱,每一梯度用850mL洗脱液,流速为9mLmin-1,收集体积比为80︰20甲醇-水的洗脱流份,减压浓缩后,得到浓缩物;将该浓缩物经硅胶柱色谱,依次用体积比100︰5、100︰7、100︰10、100︰20的石油醚-丙酮混合溶剂系统梯度洗脱,每一梯度用190mL洗脱液,流速为11mLmin-1,收集含有目标化合物的流份即为驳骨萜A。
实施例4
本发明一种从小驳骨中提取新三萜类化合物驳骨萜A的方法,以小驳骨16kg为原料,以3倍原料重量的、体积浓度为93%的乙醇加热回流提取3次,提取温度为93℃,每次提取时间为1小时,减压回收乙醇,得浸膏状乙醇提取物;将浸膏状乙醇提取物混悬于3.8L的蒸馏水中,依次以石油醚、乙酸乙酯萃取3次,每次3.8L,时间为1.5小时;将乙酸乙酯萃取部位经硅胶吸附柱色谱分离,依次用体积比为100︰5、100︰20、100︰30石油醚-丙酮混合溶剂系统进行梯度洗脱,每一梯度用3.8L洗脱液,流速为11mLmin-1,收集100︰20的石油醚-丙酮洗脱流份,减压回收溶剂,得浓缩物;将该浓缩物经反相ODS柱色谱,依次用体积比为70︰30、80︰20甲醇-水混合溶剂系统进行梯度洗脱,每一梯度用700mL洗脱液,流速为8mLmin-1,收集体积比为80︰20甲醇-水的洗脱流份,减压浓缩后,得到浓缩物;将该浓缩物经硅胶柱色谱,依次用体积比100︰5、100︰7、100︰10、100︰20的石油醚-丙酮混合溶剂系统梯度洗脱,每一梯度用160mL洗脱液,流速为10mLmin-1,收集含有目标化合物的流份即为驳骨萜A。
上述实施例1-4制备的驳骨萜A具有抗肝恶性肿瘤活性,有效用于抗肝癌的药物,实现驳骨萜A(Gvterpennoid A)在制备抗肝癌药物中的应用,特别是在制备抗人肝癌细胞株HepG2药物中的应用。
本发明方法稳定可靠,易操作,所得产物经鉴定为具有抗肝癌活性的三萜类化合物驳骨萜A,有关资料如下:
一、化合物的鉴定
经过核磁共振光谱(1H-NMR、13C-NMR、HSQC、HMBC、DEPT、1H-1H COSY、NOESY)及高分辨质谱(HR-ESI-MS)等光谱技术鉴定了其化学结构(以实施例3为例)。
白色粉末,Liebermann-Burchard反应呈阳性,提示可能为三萜类化合物。HR-ESI-MS给出准分子离子峰m/z 381.2772[M﹢Na]+(calcd for C24H38O2Na,381.2770),确定分子式为C24H38O213C NMR和DEPT谱共给出24个碳信号,其中包括8个季碳、4个次甲基碳、6个亚甲基碳、6个甲基碳。1H NMR和13C NMR谱给出3个甲基和1个孕甾母核。根据高分辩质谱给出的分子式C24H38O2,推测该化合物的不饱和度为6,其中四个烯碳δC 120.5,145.8,115.4,141.9占去2个不饱和度,剩余4个不饱和度,提示结构中存在四个环。三个甲基[δH 0.89(3H,s)、0.47(3H,s)、1.06(3H,d,J=6.1Hz),δC 22.6、15.9、23.8],四个次甲基[两个连氧次甲基δH3.00(1H,m)、δC 76.8,3.41(1H,m)、δC 68.8;两个烯氢质子δH 5.32(1H,t,J=6.0Hz)、5.48(1H,t,J=6.2Hz)],和四个烯碳δC 120.5,145.8,115.4,141.9,提示结构中存在一个3,20-dihydroxy-7,9(11)-pregnadien母核。部分结构片段通过1H–1H COSY谱进行连。根据H-22(δ0.89)、H-23(δ0.76)分别与C-3(δ76.8)、C-4(δ38.3)、C-5(δ48.9)的HMBC相关,H-24(δ0.82)与C-8(δ145.8)、C-14(δ49.9)、C-15(δ26.1)的HMBC相关,提示在母核的4位存在两个甲基取代,在14位存在1个甲基取代。通过NOESY谱确定该化合物母核上取代基的相对构型。由H-3与Me-22的NOE相关,提示H-3为α取向。由H-5与Me-22、Me-24的NOE相关,提示Me-24为α取向。由3β-OH与Me-19的NOE相关,Me-19与Me-18的NOE相关,提示Me-19和Me-18均为β取向。Me-18与H-20的NOE相关,提示17位上的取代基为β取向。因此该化合物确定为3β,20-dihydroxy-4,4,14-trimethyl-7,9(11)-pregnadien,命名为驳骨萜A(Gvterpennoid A)。
Figure BDA0002365932890000051
Figure BDA0002365932890000052
Figure BDA0002365932890000061
二、细胞毒活性
本发明方法稳定可靠,其提取分离的驳骨萜A经试验,对人肝癌细胞株HepG2具有细胞毒活性,有关实验资料如下:
1.实验材料
人肝癌细胞株(HepG2)由中国医学科学院药物研究所提供,胎牛血清购自Gibco公司。
2.细胞培养
HepG2细胞培养于含有10%经加热灭活的胎牛血清、100U/mL青霉素、100μg/mL链霉素的RPMI1640培养基中,将培养瓶置于37℃,5%CO2饱和湿度培养箱培养,每1~2天换培养液一次。当细胞生长到足以覆盖瓶底壁的大部分表面时,用0.25%胰蛋白酶消化,传代。
3.MTT法
对数生长期细胞培养于96孔培养板内,每孔100μL(含4000个肿瘤细胞),置37℃、5%CO2温箱中培养。次日,给药组加入含有不同浓度的测试化合物的稀释液,设4–5个剂量组,每组至少设五个平行孔。对照组加入与给药组等体积的溶剂。置37℃、5%CO2温箱中培养。2天后弃培养液,每孔加50μL(1mg/ml)MTT溶液(培养基配置)。37℃孵育4小时,弃去上清液,每孔加入DMSO 200μL溶解甲簪颗粒,轻度振荡溶解。用酶标仪,在检测波长490nm条件下测定光密度值(OD),以溶剂对照处理的细胞为对照组,用下面公式计算药物对细胞的抑制率,根据计算得到的各浓度的抑制率通过SPSS13.0软件处理得到半数抑制浓度(IC50),重复测试3次,取平均值为最终结果。
Figure BDA0002365932890000071
4.实验结果
通过MTT法采用人肝癌细胞株(HepG2)对驳骨萜A进行细胞毒活性测试,结果表明IC50为83.6μM。
在对实施例3做上述试验的同时,对实施例1、2、4也做了同样的试验,均取得了相同和相近似的结果,这里不再一一列举。
通过大量的实验证实,萜类化合物由于母核及其所连基团的位置、数目、种类的不同,其细胞毒活性会存在很大的差异。
由以上表明,本发明方法易操作,可有效从小驳骨中提取新三萜类化合物驳骨萜A,驳骨萜A对人肝癌细胞株HepG2具有细胞毒活性,具有开发成抗肝癌药物的前景,且其制备方法简单、重现性良好,所得化合物纯度高,有利于对其进行进一步的药理和临床研究,开拓了小驳骨的药物价值和商业价值,特别为治疗肝恶性肿瘤提供了技术支持,经济和社会效益巨大。

Claims (7)

1.一种从小驳骨中提取新三萜类化合物驳骨萜A的方法,其特征在于,该化合物为驳骨萜A,分子结构式为:
Figure FDA0002365932880000011
其制备方法是,以小驳骨15–20kg为原料,以2–5倍原料重量的、体积浓度为75%–95%的乙醇加热回流提取3次,提取温度为90–95℃,每次提取时间为1小时,减压回收乙醇,得浸膏状乙醇提取物;将浸膏状乙醇提取物混悬于3.6–4.8L的蒸馏水中,依次以石油醚、乙酸乙酯萃取3次,每次3.6–4.8L,时间为1.5小时;将乙酸乙酯萃取部位经硅胶吸附柱色谱分离,依次用体积比为100︰5、100︰20、100︰30石油醚-丙酮混合溶剂系统进行梯度洗脱,每一梯度用3.7–5.0L洗脱液,流速为10–15mLmin-1,收集100︰20的石油醚-丙酮洗脱流份,减压回收溶剂,得浓缩物;将该浓缩物经反相ODS柱色谱,依次用体积比为70︰30、80︰20甲醇-水混合溶剂系统进行梯度洗脱,每一梯度用500–1000mL洗脱液,流速为7–10mLmin-1,收集体积比为80︰20甲醇-水的洗脱流份,减压浓缩后,得到浓缩物;将该浓缩物经硅胶柱色谱,依次用体积比100︰5、100︰7、100︰10、100︰20的石油醚-丙酮混合溶剂系统梯度洗脱,每一梯度用150–200mL洗脱液,流速为8–12mLmin-1,收集含有目标化合物的流份即为驳骨萜A。
2.根据权利要求1所述的从小驳骨中提取新三萜类化合物驳骨萜A的方法,其特征在于,以小驳骨20kg为原料,以5倍原料重量的、体积浓度为95%的乙醇加热回流提取3次,提取温度为90℃,每次提取时间为1小时,减压回收乙醇,得浸膏状乙醇提取物;将浸膏状乙醇提取物混悬于4.8L的蒸馏水中,依次以石油醚、乙酸乙酯萃取3次,每次4.8L,时间为1.5小时;将乙酸乙酯萃取部位经硅胶吸附柱色谱分离,依次用体积比为100︰5、100︰20、100︰30石油醚-丙酮混合溶剂系统进行梯度洗脱,每一梯度用5.0L洗脱液,流速为15mLmin-1,收集100︰20的石油醚-丙酮洗脱流份,减压回收溶剂,得浓缩物;将该浓缩物经反相ODS柱色谱,依次用体积比为70︰30、80︰20甲醇-水混合溶剂系统进行梯度洗脱,每一梯度用1000mL洗脱液,流速为10mLmin-1,收集体积比为80︰20甲醇-水的洗脱流份,减压浓缩后,得到浓缩物;将该浓缩物经硅胶柱色谱,依次用体积比100︰5、100︰7、100︰10、100︰20的石油醚-丙酮混合溶剂系统梯度洗脱,每一梯度用200mL洗脱液,流速为12mLmin-1,收集含有目标化合物的流份即为驳骨萜A。
3.根据权利要求1所述的从小驳骨中提取新三萜类化合物驳骨萜A的方法,其特征在于,以小驳骨15kg为原料,以3倍原料重量的、体积浓度为90%的乙醇加热回流提取3次,提取温度为95℃,每次提取时间为1小时,减压回收乙醇,得浸膏状乙醇提取物;将浸膏状乙醇提取物混悬于3.6L的蒸馏水中,依次以石油醚、乙酸乙酯萃取3次,每次3.6L,时间为1.5小时;将乙酸乙酯萃取部位经硅胶吸附柱色谱分离,依次用体积比为100︰5、100︰20、100︰30石油醚-丙酮混合溶剂系统进行梯度洗脱,每一梯度用3.7L洗脱液,流速为10mLmin-1,收集100︰20的石油醚-丙酮洗脱流份,减压回收溶剂,得浓缩物;将该浓缩物经反相ODS柱色谱,依次用体积比为70︰30、80︰20甲醇-水混合溶剂系统进行梯度洗脱,每一梯度用500mL洗脱液,流速为7mLmin-1,收集体积比为80︰20甲醇-水的洗脱流份,减压浓缩后,得到浓缩物;将该浓缩物经硅胶柱色谱,依次用体积比100︰5、100︰7、100︰10、100︰20的石油醚-丙酮混合溶剂系统梯度洗脱,每一梯度用150mL洗脱液,流速为8mLmin-1,收集含有目标化合物的流份即为驳骨萜A。
4.根据权利要求1所述的从小驳骨中提取新三萜类化合物驳骨萜A的方法,其特征在于,以小驳骨18kg为原料,以4倍原料重量的、体积浓度为85%的乙醇加热回流提取3次,提取温度为92℃,每次提取时间为1小时,减压回收乙醇,得浸膏状乙醇提取物;将浸膏状乙醇提取物混悬于4.5L的蒸馏水中,依次以石油醚、乙酸乙酯萃取3次,每次4.5L,时间为1.5小时;将乙酸乙酯萃取部位经硅胶吸附柱色谱分离,依次用体积比为100︰5、100︰20、100︰30石油醚-丙酮混合溶剂系统进行梯度洗脱,每一梯度用4.4L洗脱液,流速为12mLmin-1,收集100︰20的石油醚-丙酮洗脱流份,减压回收溶剂,得浓缩物;将该浓缩物经反相ODS柱色谱,依次用体积比为70︰30、80︰20甲醇-水混合溶剂系统进行梯度洗脱,每一梯度用850mL洗脱液,流速为9mLmin-1,收集体积比为80︰20甲醇-水的洗脱流份,减压浓缩后,得到浓缩物;将该浓缩物经硅胶柱色谱,依次用体积比100︰5、100︰7、100︰10、100︰20的石油醚-丙酮混合溶剂系统梯度洗脱,每一梯度用190mL洗脱液,流速为11mLmin-1,收集含有目标化合物的流份即为驳骨萜A。
5.根据权利要求1所述的从小驳骨中提取新三萜类化合物驳骨萜A的方法,其特征在于,以小驳骨16kg为原料,以3倍原料重量的、体积浓度为93%的乙醇加热回流提取3次,提取温度为93℃,每次提取时间为1小时,减压回收乙醇,得浸膏状乙醇提取物;将浸膏状乙醇提取物混悬于3.8L的蒸馏水中,依次以石油醚、乙酸乙酯萃取3次,每次3.8L,时间为1.5小时;将乙酸乙酯萃取部位经硅胶吸附柱色谱分离,依次用体积比为100︰5、100︰20、100︰30石油醚-丙酮混合溶剂系统进行梯度洗脱,每一梯度用3.8L洗脱液,流速为11mLmin-1,收集100︰20的石油醚-丙酮洗脱流份,减压回收溶剂,得浓缩物;将该浓缩物经反相ODS柱色谱,依次用体积比为70︰30、80︰20甲醇-水混合溶剂系统进行梯度洗脱,每一梯度用700mL洗脱液,流速为8mLmin-1,收集体积比为80︰20甲醇-水的洗脱流份,减压浓缩后,得到浓缩物;将该浓缩物经硅胶柱色谱,依次用体积比100︰5、100︰7、100︰10、100︰20的石油醚-丙酮混合溶剂系统梯度洗脱,每一梯度用160mL洗脱液,流速为10mLmin-1,收集含有目标化合物的流份即为驳骨萜A。
6.权利要求1-5所述方法制备的该驳骨萜A在制备抗肝癌药物中的应用。
7.权利要求6所述的驳骨萜A在制备抗肝癌药物中的应用,其特征在于,驳骨萜A在制备抗人肝癌细胞株HepG2药物中的应用。
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