CN111056935A - 去芳化异戊烯基酰基间苯三酚类衍生物及其药物组合物和应用 - Google Patents

去芳化异戊烯基酰基间苯三酚类衍生物及其药物组合物和应用 Download PDF

Info

Publication number
CN111056935A
CN111056935A CN202010000560.2A CN202010000560A CN111056935A CN 111056935 A CN111056935 A CN 111056935A CN 202010000560 A CN202010000560 A CN 202010000560A CN 111056935 A CN111056935 A CN 111056935A
Authority
CN
China
Prior art keywords
hyphenane
acid
components
hypatone
compound
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN202010000560.2A
Other languages
English (en)
Other versions
CN111056935B (zh
Inventor
许刚
年寅
叶岩松
杜叔宗
杨建�
阎慧
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Kunming Institute of Botany of CAS
Original Assignee
Kunming Institute of Botany of CAS
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Kunming Institute of Botany of CAS filed Critical Kunming Institute of Botany of CAS
Priority to CN202010000560.2A priority Critical patent/CN111056935B/zh
Publication of CN111056935A publication Critical patent/CN111056935A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN111056935B publication Critical patent/CN111056935B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Images

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C49/00—Ketones; Ketenes; Dimeric ketenes; Ketonic chelates
    • C07C49/76—Ketones containing a keto group bound to a six-membered aromatic ring
    • C07C49/82—Ketones containing a keto group bound to a six-membered aromatic ring containing hydroxy groups
    • C07C49/835—Ketones containing a keto group bound to a six-membered aromatic ring containing hydroxy groups having unsaturation outside an aromatic ring
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/12—Ketones
    • A61K31/122—Ketones having the oxygen directly attached to a ring, e.g. quinones, vitamin K1, anthralin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/04—Centrally acting analgesics, e.g. opioids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/08—Antiepileptics; Anticonvulsants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/14—Drugs for disorders of the nervous system for treating abnormal movements, e.g. chorea, dyskinesia
    • A61P25/16—Anti-Parkinson drugs
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/20—Hypnotics; Sedatives
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/12—Antihypertensives
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C45/00—Preparation of compounds having >C = O groups bound only to carbon or hydrogen atoms; Preparation of chelates of such compounds
    • C07C45/78—Separation; Purification; Stabilisation; Use of additives
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C45/00—Preparation of compounds having >C = O groups bound only to carbon or hydrogen atoms; Preparation of chelates of such compounds
    • C07C45/78—Separation; Purification; Stabilisation; Use of additives
    • C07C45/79—Separation; Purification; Stabilisation; Use of additives by solid-liquid treatment; by chemisorption
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C49/00—Ketones; Ketenes; Dimeric ketenes; Ketonic chelates
    • C07C49/587—Unsaturated compounds containing a keto groups being part of a ring
    • C07C49/703—Unsaturated compounds containing a keto groups being part of a ring containing hydroxy groups
    • C07C49/743—Unsaturated compounds containing a keto groups being part of a ring containing hydroxy groups having unsaturation outside the rings, e.g. humulones, lupulones
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C2601/00—Systems containing only non-condensed rings
    • C07C2601/12—Systems containing only non-condensed rings with a six-membered ring
    • C07C2601/14—The ring being saturated
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C2601/00—Systems containing only non-condensed rings
    • C07C2601/12—Systems containing only non-condensed rings with a six-membered ring
    • C07C2601/16—Systems containing only non-condensed rings with a six-membered ring the ring being unsaturated

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Psychology (AREA)
  • Anesthesiology (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Abstract

本发明提供了去芳化异戊烯基酰基间苯三酚类衍生物及其制备方法，具有治疗癫痫、高血压、帕金森病，疼痛、肿瘤、睡眠障碍等疾病的药物组合物及其应用，属于药物技术领域。本发明提供的化合物hypatone B，hyphenrone J和hyphenrone K具有显著抑制Cav3.1低电压门控钙离子通道的活性，其中化合物hyphenrone K是目前活性最强的天然抑制剂，IC50比阳性对照咪拉地尔低一个数量级，具有潜在的药用价值。

Description

去芳化异戊烯基酰基间苯三酚类衍生物及其药物组合物和 应用
技术领域
本发明涉及药物技术领域，尤其涉及具有Cav3.1低电压门控的钙离子通道抑制活性的化合物hypatone B，hyphenrone J和hyphenrone K及其制备方法，及其在治疗癫痫、高血压、帕金森病，疼痛、肿瘤、睡眠障碍等疾病的药物中的应用。
背景技术
金丝桃属(Hypericum)是藤黄科(Guttiferae)的一个大属，全世界约400种，除南北两极地或荒漠地及大部分热带低地外世界广布。其中我国约有55种8亚种，几产于全国各地，主要集中在西南地区。该属植物在国内外民间被广泛作为药用，具有悠久的历史，国产金丝桃属植物有25种被民间作药用，具有抗抑郁、抗肿瘤、抗病毒和抗菌等多种药理活性。从金丝桃属植物中已经发现了多种类型的活性成分，其中异戊烯基化的酰基间苯三酚是其特征性的化学成分，因具有复杂的结构和多样的生物活性而受到广泛的关注。
金丝梅(Hypericum patulum)别名土连翘、芒种花。生于海拔2700m的山坡、草地、林下、灌丛中或空旷处，具有清热利湿解毒、疏肝通络、祛瘀止痛等功效。文献报道该植物的化学成分主要有黄酮，口山酮类化学成分。然而迄今为止现有的技术中未见有去芳化异戊烯基间苯三酚类化合物hypatone B及其活性的报道以及未见有hyphenrone J和hyphenrone K在钙离子通道方面的活性的报道。
Cav3.1属于低压门控Ca2+通道的一个亚家族，在大脑中广泛表达。在生理上，Cav3.1在调节神经元的回返式放电(burst firing)中起着至关重要的作用。Cav3.1功能的缺失或获得与神经系统疾病相关，例如特发性全身性癫痫，脊髓小脑性共济失调42型(SCA42)和儿童期小脑萎缩。Cav3.1的激动剂和拮抗剂均可用于基础研究，以了解Cav3.1的生理学和病理生理学，或为制药业提供先导合物。目前有许多Cav3.1抑制剂，例如唑尼沙胺(Zonisamide)和乙琥胺(Ethosuximide)，已在临床上用于治疗癫痫、CX-8998在临床上用于治疗静息性震颤。因此，Cav3.1成为了研发治疗中枢神经系统相关疾病的热门靶点。
发明内容
本发明的目的在于提供从金丝梅(H.patulum)中分离得到的去芳化异戊烯基间苯三酚类衍生物hypatone B，hyphenrone J和hyphenrone K，其制备方法，在药物中特别是在治疗癫痫、高血压、帕金森病，疼痛、肿瘤、睡眠障碍等疾病药物中的应用。本发明提供的化合物hypatone B，hyphenrone J和hyphenrone K具有显著Cav3.1低电压门控的钙离子通道抑制活性，可以用于制备预防和/或治疗癫痫、高血压、帕金森病，疼痛、肿瘤、睡眠障碍等疾病中的药物。
为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：
本发明提供了下述结构所示的去芳化异戊烯基间苯三酚类化合物hypatone B，hyphenrone J和hyphenrone K或其药用盐：
Figure BDA0002353138120000021
本发明提供了上述技术方案所述化合物hypatone B，hyphenrone J和hyphenroneK的制备方法，包括以下步骤：用甲醇对干燥金丝梅全草进行提取3次，每次2天，所得提取液经减压蒸馏得到浸膏，将所述浸膏用100–200目硅胶拌样，进行硅胶柱层析，所用洗脱剂为氯仿，得到氯仿段，之后将所得氯仿部分在用聚酰胺拌样，以70％–100％的甲醇–水作为流动相过MCI柱，依次收集得到5个组分A～E。将B组分在梯度洗脱条件下进行硅胶柱层析，以石油醚/乙酸乙酯为洗脱剂依次收集得到10个组分，记为B1～B10组分；B4和B6组分经过HPLC分离纯化分别得到化合物hyphenrone J和hyphenrone K。将C组分在梯度条件下进行硅胶柱层析，以石油醚/丙酮为洗脱剂依次收集得到7个组分，记为C1～C7组分；C2组分经进一步HPLC分离纯化得到化合物hypatone B。
以权利要求1所述的化合物hypatone B、hyphenrone J、hyphenrone K为活性成分的药物组合物，其还含有药学上可接受的辅料。
本发明同时提供了一种具有Cav3.1低电压门控的钙离子通道抑制活性的药物组合物，由活性成分和药学上可接受的辅料组成，所述活性成分为上述技术方案所述化合物hypatone B，hyphenrone J和hyphenrone K或上述技术方案所述制备方法制备得到的化合物hypatone B，hyphenrone J和hyphenrone K。
钙离子通道抑制剂，其以化合物hypatone B、hyphenrone J、hyphenrone K任一或任意组合为活性成分。
优选地，所述药学上可接受的辅料包括药物载体、表面活性剂、缓冲物质、崩解剂、粘合剂、填充剂、润滑剂、赋形剂、增溶剂、香味剂和着色剂中的一种或几种。
本发明提供了上述技术方案所述药物组合物在制备抑制Cav3.1低电压门控的钙离子通道活性疾病的药物中的应用。
优选地，所述抑制Cav3.1低电压门控的钙离子通道活性疾病包括治疗癫痫、高血压、帕金森病，疼痛、肿瘤、睡眠障碍等疾病中的一种或几种。
优选地，所述预防和/或治疗神经退行性疾病的药物的剂型包括片剂、胶囊剂、颗粒剂、冲剂、丸剂、口服液制剂、注射剂或冻干粉针剂。
本发明提供的化合物hypatone B，hyphenrone J和hyphenrone K对Cav3.1低电压门控的钙离子通道激活活性，以所化合物为有效成分的药物组合物可用于制备预防和/或治疗癫痫等疾病药物，具有潜在临床应用价值。
本发明提供的化合物hypatone B，hyphenrone J和hyphenrone K的制备方法，金丝梅经甲醇提取后利用MCI柱分离、反相和正相柱层析以及高效液相色谱分离技术，能够得到具有显著而强效Cav3.1低电压门控的钙离子通道抑制活性的目标化合物，操作方便。
如所述的去芳化异戊烯基间苯三酚与柠檬烯的杂合物hypatone B，hyphenrone J和hyphenrone K或其药用盐，其中所述的药用盐是指药学上可接受的盐，包括与有机酸和无机酸形成的盐，所述的有机酸为酒石酸、柠檬酸、甲酸、乙酸、乙二酸、丁酸、草酸、马来酸、琥珀酸、乙二酸、藻酸、天冬氨酸、苯磺酸、樟脑酸、樟脑磺酸、二葡糖酸、环戊烷丙酸、十二烷基磺酸、乙磺酸、葡庚糖酸、甘油磷酸、半硫酸、庚酸、己酸、延胡索酸、2-羟基乙磺酸、乳酸、马来酸、甲磺酸、烟酸、2-萘磺酸、扑酸、果胶酯酸、3-苯基丙酸、苦味酸、新戊酸、丙酸、琥珀酸、酒石酸、硫代氰酸、对-甲苯磺酸盐和十一烷酸盐，所述的无机酸为盐酸、氢溴酸、氢碘酸、硫酸或磷酸。
附图说明
图1为化合物hypatone B的氢谱(600MHz,CDCl3)；
图2为化合物hypatone B的碳谱(150MHz,CDCl3)；
图3为化合物hypatone B的高分辨质谱图；
图4为化合物2c的氢谱(600MHz,CDCl3)；
图5为化合物2c的碳谱(150MHz,CDCl3)；
图6为化合物2c的高分辨质谱图；
图7为化合物hypatone B(2)的酮式-烯醇互变和甲基化反应；
图8为化合物hyphenrone J的X-射线的衍射图；
图9为化合物hyphenrone J(3)和hyphenrone K(4)的实验的ECD图。
图10为化合物hypatone B，hyphenrone J和hyphenrone K的结构示意图。
具体实施方式
本发明提供了去芳化异戊烯基间苯三酚类化合物hypatone B，hyphenrone J和hyphenrone K结构如图10所示。
本发明提供了上述技术方案所述化合物hypatone B，hyphenrone J和hyphenroneK的制备方法，包括以下步骤：用甲醇对干燥金丝梅全草(12kg)进行提取3次，每次2天，所得提取液经减压蒸馏得到浸膏，将所述浸膏用100–200目硅胶拌样，进行硅胶柱层析，所用洗脱剂为氯仿，得到氯仿段，之后将所得氯仿部分在用聚酰胺拌样，以70％–100％的甲醇–水作为流动相过MCI柱，依次收集得到5个组分A～E。将B组分在梯度洗脱条件下进行硅胶柱层析，以石油醚/乙酸乙酯为洗脱剂依次收集得到10个组分，记为B1～B10组分；B4和B6组分经过HPLC分离纯化分别得到化合物hyphenrone J和hyphenrone K。将C组分在梯度条件下进行硅胶柱层析，以石油醚/丙酮为洗脱剂依次收集得到7个组分，记为C1～C7组分；C2组分经进一步HPLC分离纯化得到化合物hypatone B。
在本发明中，上述硅胶柱层析以及MCI柱分离的过程中，所用洗脱剂的体积没有特殊限定，根据实际需要进行选择即可。
在本发明中，上述进行硅胶柱层析和过MCI柱分离的过程中，优选采用薄层色谱法检视分段收集得到多个相应组分(即A～E组分、A1～A5组分)。
本发明提供了一种具有Cav3.1低电压门控的钙离子通道抑制活性的药物组合物，由活性成分和药学上可接受的辅料组成，所述活性成分为上述技术方案所述化合物hypatone B，hyphenrone J和hyphenrone K或上述技术方案所述制备方法得到的化合物中的至少一种。
本发明对于所述药学上可接受的辅料没有特殊的限定，具体的，所述药学上可接受的辅料优选包括药物载体、表面活性剂、缓冲物质、崩解剂、粘合剂、填充剂、润滑剂、赋形剂、增溶剂、香味剂和着色剂中的一种或几种。本发明对于上述辅料中的具体种类没有特殊的限定，根据实际需要选择即可。
本发明提供了上述技术方案所述药物组合物在制备预防和/或治疗Cav3.1低电压门控的钙离子通道抑制活性的药物中的应用。
本发明对于所述预防和/或治疗Cav3.1低电压门控的钙离子通道抑制活性疾病的药物的剂型没有特殊的限定，根据实际需要选择即可，具体可以为片剂、胶囊剂、颗粒剂、冲剂、丸剂、口服液制剂、注射剂或冻干粉针剂。本发明对于不同剂型药物的制备方法没有特殊的限定，采用本领域技术人员熟知的方法即可。
在本发明中，所述预防和/或治疗Cav3.1低电压门控的钙离子通道抑制活性疾病的药物所给予的剂量将随着所使用的化合物、给予方式、所希望的治疗和所指示的障碍而变化。例如，口服给药，所述化合物hypatone B，hyphenrone J和hyphenrone K或其药学上可接受的盐的每日剂量可以在0.01微克/千克体重(μg/kg)至100毫克/千克体重(mg/kg)的范围内。
下面将结合本发明中的实施例，对本发明中的技术方案进行清楚、完整地描述。显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
实施例1
化合物hypatone B，hyphenrone J和hyphenrone K的制备方法，包括以下步骤：
本发明提供了上述技术方案所述化合物hypatone B，hyphenrone J和hyphenroneK的制备方法，包括以下步骤：用甲醇对干燥金丝梅全草(12kg)进行提取3次，每次2天，所得提取液经减压蒸馏得到浸膏，将所述浸膏用100–200目硅胶拌样，进行硅胶柱层析，所用洗脱剂为氯仿，得到氯仿段，之后将所得氯仿部分在用聚酰胺拌样，以70％–100％的甲醇–水作为流动相过MCI柱，依次收集得到5个组分A～E。将B(8.4g)组分在梯度洗脱条件下进行硅胶柱层析，以石油醚/乙酸乙酯为洗脱剂依次收集得到10个组分，记为B1～B10组分；B4(755.9mg)和B6(1.2g)组分经过HPLC分离纯化分别得到化合物hyphenrone J和hyphenroneK。将C(17.5g)组分在梯度条件下进行硅胶柱层析，以石油醚/丙酮为洗脱剂依次收集得到7个组分，记为C1～C7组分；C2(2.3g)组分经进一步HPLC分离纯化得到化合物hypatone B。
化合物hypatone B的结构解析(各化合物的表征图如图1～6所示)具体如下：
化合物hypatone B无色晶体。HRESIMS表明其分子式为C33H42O5。其1H NMR和13C NMR谱都显示出一对1：1.6的两队信号，这个现象可能是在去芳化异戊烯基酰基间苯三酚类化合物中常见的酮式烯醇式的互变引起的。由于两对信号的过于重叠，为了确保结构的正确性，化合物hypatone B的甲基化的衍生物(2c)在TMS-CHN2的条件下被制备得到。仔细分析化合物2c的HSQC、HMBC、1H-1H COSY和ROESY谱，最终确定了化合物2c的结构，从而也确定了化合物hypatone B的结构，其1H和13C NMR数据如表1和2所示。
化合物hyphenrone J和hyphenrone K的绝对构型的确定具体如下：
尽管化合物hyphenrone J和hyphenrone K已经被获得过，但是其绝对构型还从未被确定过。化合物hyphenrone J的绝对构型通过X-射线的衍射分析得到，化合物hyphenrone K的绝对构型通过与化合物hyphenrone J的实验的ECD谱对比得到确认。
表1化合物hypatone B(2)的1H-NMR和13C-NMR数据(CDCl3)
Figure BDA0002353138120000081
Figure BDA0002353138120000091
化合物hypatone B(2)的理化性质及结构数据：
化合物(2)：黄色胶状物；
Figure BDA0002353138120000092
(c 0.12,MeOH)；UV(MeOH)λmax(logε)279(0.62),300(0.61),197(1.51),286(0.62),364(1.11)nm；IR(KBr)νmax3414,2966,2927,2858,1636,1592,1448,1377,1313,1260cm-1。
化合物(2c)：绿色胶状物；
Figure BDA0002353138120000093
(c 0.10MeOH)；UV(MeOH)λmax 202(4.56),247(4.26)nm；IR(KBr)νmax 3420,2963,2925,2853,1677,1649,1598,1568,1450,1383,1248cm-1。
实施例2：
本发明去芳化异戊烯基间苯三酚与柠檬烯杂合化合物hypatone B，hyphenrone J和hyphenrone K对Cav3.1钙离子通道抑制活性实验方法和结果如下：
1、细胞制备与表达
以添加10％小牛血清(Gibco)和青霉素(100单位/毫升)、链霉素(0.1毫克/毫升)(Biological Industries)双抗的DMEM(HyClone)培养基培养人胚胎肾(HEK)293细胞。将处于对数生长期的293细胞用LipoD293TM(SignaGen Laboratories)转染试剂将鼠源pCDNA3.1-Cav3.1、pCDNA3.1-Cav3.1(Arg1723His)和pCDNA3.1-EGFP质粒转染入细胞。转染的人胚胎肾(HEK)293细胞需在48小时内使用。
2、电生理学实验
所有实验均在室温(22-25℃)下进行。利用微电极拉制仪(P-1000,SutterInstrument)和加热抛光将硼硅酸盐玻璃制备移液管(World Precision Instruments)制备为阻抗在2～4MΩ的玻璃电极并用于全细胞电流记录。电流通过Axopatch 200B进行放大，然后Digidata 1440A(Molecular Devices)进行数据转化。电流以2kHz通过低能滤波器，然后在10kHz进行采样。pCLAMP 10(Molecular Devices)被用来进行数据采集和分析。细胞外溶液中包含(in mM)142 CsCl,1 MgCl2,2 CaCl2,10 Glucose和10 HEPES(pH＝7.4，用CsOH来调节)。细胞内溶液中包含(in mM)127 Cs-methanesulphonate,2 MgCl2,2Na2ATP,10 HEPES和11 EGTA(pH＝7.4，用CsOH来调节)。电流记录程序为：将细胞膜钳制在-100mV电位，用150ms的-30mV去极化电压刺激细胞，每次刺激间隔为4s。
3、数据分析与统计
数据的收集和统计分析均采用GraphPad 8.0.1(GraphPad Software,San Diego,CA USA)。IC50值和希尔系数通过希尔方程Y＝IMin+(IMax-ICMin)/[1+10(LogEC50-C)×Hillslope]用收集得到的数据计算得出。这里IC50是在通道电流被抑制一半时的浓度，C是化合物的浓度，IMin是最小抑制率，IMax是最大抑制率，Hillslope是希尔系数。所有数据均为平均值±标准差。
4、化合物hypatone B，hyphenrone J和hyphenrone K对Cav3.1钙通道的抑制活性实验，如表2所示。
表2.hypatone B，hyphenrone J，hyphenrone K和咪拉地尔作用于Cav3.1峰电流的剂量效应关系
Figure BDA0002353138120000111
实验结果表明，在上述实验条件下，咪拉地尔(一种经典的TTCC抑制剂，曾经临床上用来治疗高血压)对Cav3.1钙离子通道具有抑制活性，IC50＝1.1μM，希尔系数为1.6。而化合物hypatone B，hyphenrone J和hyphenrone K同样表现出了显著的Cav3.1钙离子通抑制活性，IC50分别为2.3，3.5和0.19μM。生物活性研究表明，hypatone B，hyphenrone J的活性与阳性对照相当，而hyphenrone K的活性比阳性对照强一个数量级，是目前发现的活性最强的Cav3.1钙离子通道天然抑制剂。上述3个分子可能称为治疗与Cav3.1钙离子相关疾病的先导化合物，如癫痫、高血压、帕金森病，疼痛、肿瘤、睡眠障碍等疾病。
实施例3
片剂的制备：
按实施例1的方法先制得化合物，以及利用有机酸(酒石酸，柠橡酸，甲酸，乙二酸等)或无机酸(盐酸，硫酸，磷酸等)制成的盐，按其与赋形剂重量比为1:5-1:10的比例加入赋形剂，制粒压片。
实施例4
口服液制剂的制备：
按实施例1的方法先制得化合物，以及利用有机酸(酒石酸，柠橡酸，甲酸，乙二酸等)或无机酸(盐酸，硫酸，磷酸等)制成的盐，按常规口服液制法制成口服液。
实施例5
胶囊剂、颗粒剂或冲剂的制备：
按实施例1的方法先制得化合物，以及利用有机酸(酒石酸，柠橡酸，甲酸，乙二酸等)或无机酸(盐酸，硫酸，磷酸等)制成的盐，按其与赋形剂重量比为5:1的比例加入赋形剂，制成胶囊或颗粒剂或冲剂。
以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。
以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。

Claims (9)

1.如下结构式所示的去芳化的异戊烯基取代酰基间苯三酚类衍生物hypatone B，hyphenrone J和hyphenrone K，
Figure FDA0002353138110000011
2.权利要求1所述去芳化的异戊烯基的酰基间苯三酚类衍生物物的制备方法，采用甲醇对干燥金丝梅全草进行提取3次，每次2天，所得提取液经减压蒸馏得到浸膏，将所述浸膏用100–200目硅胶拌样，进行硅胶柱层析，所用洗脱剂为氯仿，得到氯仿段，之后将所得氯仿部分在用聚酰胺拌样，以70％–100％的甲醇–水作为流动相过MCI柱，依次收集得到5个组分A～E，将B组分在梯度洗脱条件下进行硅胶柱层析，以石油醚/乙酸乙酯为洗脱剂依次收集得到10个组分，记为B1～B10组分；B4和B6组分经过HPLC分离纯化分别得到化合物hyphenrone J和hyphenrone K，将C组分在梯度条件下进行硅胶柱层析，以石油醚/丙酮为洗脱剂依次收集得到7个组分，记为C1～C7组分；C2组分经进一步HPLC分离纯化得到化合物hypatone B。
3.以权利要求1所述的化合物hypatone B、hyphenrone J、hyphenrone K为活性成分的药物组合物，其还含有药学上可接受的辅料。
4.一种用于预防和治疗癫痫、高血压、帕金森病、疼痛、肿瘤、睡眠障碍疾病的药物组合物，其特征在于，由活性成分和药学上可接受的辅料组成，所述活性成分为权利要求1所述化合物去芳华异戊烯基酰基间苯三酚类衍生物中的至少一种或权利要求2所述制备方法制备得到的去芳化异戊烯基酰基间苯三酚衍生物中的至少一种。
5.根据权利要求3或4所述的药物组合物，其特征在于，所述药学上可接受的辅料为药物载体、表面活性剂、缓冲物质、崩解剂、粘合剂、填充剂、润滑剂、赋形剂、增溶剂、香味剂和着色剂中的一种或几种。
6.权利要求1所述的化合物hypatone B、hyphenrone J、hyphenrone K或权利要求3或4任一项所述的药物组合物在制备抑制Cav3.1低电压门控钙离子通道活性疾病的药物中的应用。
7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述抑制Cav3.1低电压门控的钙离子通道活性疾病为癫痫、高血压、帕金森病，疼痛、肿瘤、睡眠障碍疾病的一种或几种。
8.根据权利要求6或7任一项所述的应用，其特征在于，所述预防和/或治疗抑制Cav3.1低电压门控的钙离子通道活性疾病的药物的剂型为片剂、胶囊剂、颗粒剂、冲剂、丸剂、口服液制剂、注射剂或冻干粉针剂。
9.钙离子通道抑制剂，其以权利要求1所述的化合物hypatone B、hyphenrone J、hyphenrone K任一或任意组合为活性成分。
CN202010000560.2A 2020-01-02 2020-01-02 去芳化异戊烯基酰基间苯三酚类衍生物及其药物组合物和应用 Active CN111056935B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202010000560.2A CN111056935B (zh) 2020-01-02 2020-01-02 去芳化异戊烯基酰基间苯三酚类衍生物及其药物组合物和应用

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202010000560.2A CN111056935B (zh) 2020-01-02 2020-01-02 去芳化异戊烯基酰基间苯三酚类衍生物及其药物组合物和应用

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN111056935A true CN111056935A (zh) 2020-04-24
CN111056935B CN111056935B (zh) 2022-05-20

Family

ID=70304815

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202010000560.2A Active CN111056935B (zh) 2020-01-02 2020-01-02 去芳化异戊烯基酰基间苯三酚类衍生物及其药物组合物和应用

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN111056935B (zh)

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN111233886A (zh) * 2020-03-26 2020-06-05 中国科学院昆明植物研究所 去芳化异戊烯基酰化间苯三酚杂萜类化合物及其药物组合物和应用
CN115433152A (zh) * 2022-09-16 2022-12-06 贵州医科大学 从金丝梅果实内分离出的化合物、制备方法和用途

Citations (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0046270A1 (en) * 1980-08-13 1982-02-24 INTERx RESEARCH CORPORATION Novel derivatives of bio-affecting phenolic compounds and pharmaceutical composition containing them
CN103288615A (zh) * 2013-06-27 2013-09-11 中国科学院昆明植物研究所 单环间苯三酚类化合物及其药物组合物和其应用
CN103288614A (zh) * 2013-06-27 2013-09-11 中国科学院昆明植物研究所 具有抗肿瘤活性的单环间苯三酚类化合物及其药物组合物
US20140194499A1 (en) * 2013-01-10 2014-07-10 Hong Kong Baptist University Polyprenylated Benzoylphloroglucinols With Anticancer Activity
CN104513224A (zh) * 2015-01-09 2015-04-15 中国科学院昆明植物研究所 具有抗肿瘤活性的金刚烷型间苯三酚类化合物及其药用组合物
CN106496171A (zh) * 2016-10-20 2017-03-15 贵州省中国科学院天然产物化学重点实验室 具有抗肿瘤活性的多环多异戊烯基间苯三酚类化合物、其制备方法及应用
CN107986951A (zh) * 2017-12-15 2018-05-04 中国科学院昆明植物研究所 新型拓扑异构酶i抑制剂及其药物组合物与其制备方法及应用
CN109020945A (zh) * 2018-09-20 2018-12-18 贵州省中国科学院天然产物化学重点实验室 一种异藤黄酚衍生物、其制备方法及应用
CN110511202A (zh) * 2019-08-13 2019-11-29 厦门大学 多环多异戊烯基酰基间苯三酚类化合物及其制备方法与应用

Patent Citations (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0046270A1 (en) * 1980-08-13 1982-02-24 INTERx RESEARCH CORPORATION Novel derivatives of bio-affecting phenolic compounds and pharmaceutical composition containing them
US20140194499A1 (en) * 2013-01-10 2014-07-10 Hong Kong Baptist University Polyprenylated Benzoylphloroglucinols With Anticancer Activity
CN103288615A (zh) * 2013-06-27 2013-09-11 中国科学院昆明植物研究所 单环间苯三酚类化合物及其药物组合物和其应用
CN103288614A (zh) * 2013-06-27 2013-09-11 中国科学院昆明植物研究所 具有抗肿瘤活性的单环间苯三酚类化合物及其药物组合物
CN104513224A (zh) * 2015-01-09 2015-04-15 中国科学院昆明植物研究所 具有抗肿瘤活性的金刚烷型间苯三酚类化合物及其药用组合物
CN106496171A (zh) * 2016-10-20 2017-03-15 贵州省中国科学院天然产物化学重点实验室 具有抗肿瘤活性的多环多异戊烯基间苯三酚类化合物、其制备方法及应用
CN107986951A (zh) * 2017-12-15 2018-05-04 中国科学院昆明植物研究所 新型拓扑异构酶i抑制剂及其药物组合物与其制备方法及应用
CN109020945A (zh) * 2018-09-20 2018-12-18 贵州省中国科学院天然产物化学重点实验室 一种异藤黄酚衍生物、其制备方法及应用
CN110511202A (zh) * 2019-08-13 2019-11-29 厦门大学 多环多异戊烯基酰基间苯三酚类化合物及其制备方法与应用

Non-Patent Citations (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
JING-JING ZHANG 等: "Cytotoxic polyprenylated acylphloroglucinol derivatives from Hypericum henryi", 《TETRAHEDRON》 *
KANJI NIWA 等: "Hypascyrins A–E, Prenylated Acylphloroglucinols from Hypericum ascyron", 《J. NAT. PROD》 *
NA-NA JIANG 等: "Hyphenone A, the first 3,3-diisoprenylated bicyclic polyprenylated acylphloroglucinols as Ca(v)3.1 T-type calcium channel inhibitor from Hypericum henryi", 《TETRAHEDRON LETTERS》 *
XING-WEI YANG 等: "Polycyclic Polyprenylated Acylphloroglucinol Congeners Possessing Diverse Structures from Hypericum henryi", 《J. NAT. PROD.》 *
YAN-SONG YE 等: "Congenetic Hybrids Derived from Dearomatized Isoprenylated Acylphloroglucinol with Opposite Effects on Cav3.1 Low Voltage-Gated Ca2+ Channel", 《J. MED. CHEM.》 *
张小飞 等: "短柱金丝桃中多酚类化学成分的研究", 《中药与临床》 *
荆林乾: "连柱金丝桃中间苯三酚类成分及其细胞毒性研究", 《中国优秀博硕士学位论文全文数据库(硕士) 医药卫生科技辑》 *

Cited By (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN111233886A (zh) * 2020-03-26 2020-06-05 中国科学院昆明植物研究所 去芳化异戊烯基酰化间苯三酚杂萜类化合物及其药物组合物和应用
CN111233886B (zh) * 2020-03-26 2022-06-17 中国科学院昆明植物研究所 去芳化异戊烯基酰化间苯三酚杂萜类化合物及其药物组合物和应用
CN115433152A (zh) * 2022-09-16 2022-12-06 贵州医科大学 从金丝梅果实内分离出的化合物、制备方法和用途
CN115433152B (zh) * 2022-09-16 2023-10-13 贵州医科大学 从金丝梅果实内分离出的化合物、制备方法和用途

Also Published As

Publication number Publication date
CN111056935B (zh) 2022-05-20

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EP1800685B1 (en) Steroidal saponin pharmaceutical composition, its preparation method and use
CN111056935B (zh) 去芳化异戊烯基酰基间苯三酚类衍生物及其药物组合物和应用
CN113105388B (zh) 一种千金二萜烷化合物及其提取方法和应用
CN112979598B (zh) 愈创木烷倍半萜内酯类化合物及提取方法及其用途
JP2004518751A (ja) Ｌｉａｎｇｔｏｕｊｉａｎ抽出物の製造方法、その抽出物を含有する医薬組成物及びその用途
JPH0477730B2 (zh)
US6911222B2 (en) Anti-depression pharmaceutical composition containing polygala extract
CN108117557B (zh) 一种马钱子碱的提取分离纯化方法
CN113527324A (zh) 暗绿蒿烯内酯a-l及其药物组合物和其应用
CN101612183B (zh) 一种乌骨藤皂苷提取物、药物组合物、制备方法及其应用
CN111170967B (zh) 酰基间苯三酚类衍生物及其药物组合物和应用
CN111233886B (zh) 去芳化异戊烯基酰化间苯三酚杂萜类化合物及其药物组合物和应用
CN115894418B (zh) 蒙古蒿内酯a-f及其药物组合物和其制备方法与应用
JP3128823B2 (ja) 制癌化合物およびその製造法
CN113717190B (zh) 一类吲哚生物碱及其药物组合物与其制备方法和应用
CN110467522B (zh) 一种青黛中具有抗肠炎活性的二苯乙烯类化合物及其制备方法、应用
CN100577176C (zh) 短瓣金莲花提取物、其抗炎有效成分和它们的用途
CN117209462B (zh) 白莲蒿内酯a-u及其药物组合物和其制备方法与应用
EP2848251B1 (en) Extracts and isolated compounds from Cakile arabica for treatment of ulcer
CN113999245B (zh) 具有抗胰腺癌活性的天然化合物及其分离方法及应用
CN114805382B (zh) 一种倍半萜色酮类化合物及其分离和在制备抗胰腺癌药物中的应用
CN112778255B (zh) 鹅不食草内酯l及提取方法及其用途
KR100516647B1 (ko) 당뇨병 치료제 조성물
CN113173905A (zh) 茵陈蒿中香豆酸及其药物组合物与其制备方法和应用
CN117164588A (zh) 一类喹啉生物碱及其药物组合物与其制备方法和应用

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant