CN111035572B - 一种具有美白功效纳米结构脂质体及其制备方法和化妆品 - Google Patents

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Abstract

本发明属于化妆品技术领域，具体涉及一种具有美白功效纳米结构脂质体及其制备方法和化妆品。所述制备方法包括分别制备油相和水相脂质，然后通向220V反向电流和220V正向电流交替处理得到初乳，再通过高压均质机在压力500～1200bar作用下均质5～9次，冷却至室温得到具有美白功效纳米结构脂质体。本发明能够在大规模的状态下制备粒径小、分散性好的纳米粒子，制得的纳米结构脂质体具有美白功效，稳定性好。

Description

一种具有美白功效纳米结构脂质体及其制备方法和化妆品
技术领域
本发明属于化妆品技术领域，具体涉及一种具有美白功效纳米结构脂质体及其制备方法和化妆品。
背景技术
白藜芦醇一种非黄酮类多酚化合物，是许多植物受到刺激时产生的一种抗毒素，具有抗癌、抗菌、抗炎、抗氧化、免疫调节、抗喘等多种生物活性。但由于白藜芦醇化学性质不稳定，见光易分解，水溶性差，因此存在生物利用率低、功效难以持久等问题。
纳米结构脂质载体(NLC)是最新的纳米脂质载体，以固液混合脂质作为生物活性成分的基质，通过表面活性剂将生物活性物质包埋于液相中，形成纳米级乳液，在温室或低温下重结晶形成的非完美晶型结构，具有稳定性好、靶向性强和延缓释放等特点成为近代医学、食品化学和化妆品行业的关注的焦点。
目前国内外白藜芦醇的纳米脂质体的制备方法大多采用薄膜分散法、逆向蒸发法、乙醇注入法、超声法、高压均质法，但是薄膜分散法、逆向蒸发法或多或少都会存在有机溶剂残留，致使白藜芦醇纳米脂质体安全性降低，成膜难以控制，不易洗膜，放大工业化生产存在难度，乙醇注入法的注入速度不易控制，生产周期长；超声法制备的白藜芦醇脂质体粒径分布范围小，超声时间过长易致。高压均质法制备脂质体由于高压均质压力过大，均质次数过多，乳化剂的用量和种类均会引起药物渗透和包封率降低，产品稳定性有待提高。另外工业采用高压均质法由于生产量大，常需要加入大量的表面活性剂的乳化剂，而引入过多会不仅会引起皮肤过敏，还会导致生产成本提高，引入量过低制得的脂质体在储存过程中容易受到温度、pH等外界环境的影响容易发生泄露。此外，高压均质过程中制得的白藜芦醇纳米结构脂质由于纳米粒径减小，粒子碰撞容易发生团聚，致使产品稳定性不能保证。因此寻找一种高效，可规模化，不容易发生团聚的方法对纳米结构脂质在化妆品中的应用具有重要意义。
发明内容
为了解决现有技术中，由于纳米粒径减小，粒子碰撞容易发生团聚，致使产品稳定性不好以及引入表面活性剂的乳化剂会对皮肤产生一定的毒性等问题，本发明提供了一种具有美白功效纳米结构脂质体及其制备方法和化妆品，该方法制得的脂质体不仅具有美白功效，还具有稳定性好，经皮吸收好的特点。
为了达到上述目的，本发明采用以下技术方案：
一种具有美白功效的纳米结构脂质体的制备方法，所述制备方法包括以下步骤：
S1、按配方称取白藜芦醇、稳定剂、乳化剂投入至高剪切机，搅拌混合均匀后，保持温度为55℃，得到油相；
S2、按配方称取辅助乳化剂、去离子水投入至高剪切机，搅拌混合均匀后，保持温度为55℃，得到水相；
S3、将由步骤S2得到的水相在剪切力为8000～12000r/min作用下缓慢加入由步骤S1得到的油相均质2～5min，先通向220V反向电流处理10～15s，再通向220V正向电流处理6～8s，持续反向电流和正向电流交替处理30～45min，断电后得到初乳；
S4、将步骤S3得到的初乳，通过高压均质机在压力500～1200bar作用下均质5～9次，冷却至室温得到具有美白功效纳米结构脂质体。
优选的，所述步骤S1中白藜芦醇的重量份数为1～15份，稳定剂的重量份数为3～10份，乳化剂的重量份数为1～10份，辅助乳化剂的重量份数为5～15份。
优选的，所述步骤S1中的稳定剂选自辛酸癸酸甘油三酯或棕榈酸甘油三酯。
优选的，所述步骤S1中的乳化剂选自鲸蜡硬脂醇聚醚-25、硬脂醇、单硬脂酸甘油酯、辛基葡萄糖苷和癸基葡萄糖苷中一种或几种。
优选的，所述步骤S2中的辅助乳化剂选自花生蛋白、大豆蛋白及燕麦蛋白中一种或几种。
本发明提供了上述方法制得的具有美白功效纳米结构脂质体。
本发明还提供了上述具有美白功效纳米结构脂质体在化妆品中的应用。
在高压均质过程中，伴随着粒径降低，颗粒的表面积会出现急剧的上升，分散性不好的初乳会导致纳米颗粒聚集现象发生，本发明分别将油相和水相的脂质剪切，使纳米粒子的粒径变小，再通过反向电流和正向电流使初乳分散，使得纳米粒子保持较好的分散性，并保持纳米粒子带负电荷，有利于脂质体滞留于皮肤中，本发明通过试验1证实，当进行高压均质时，省略反向电流和正向电流处理，所制备得到的白藜芦醇结构脂质载体粒径大，不均匀，电位位阻低。
进一步的，在经皮吸收实验中证实花生蛋白、大豆蛋白及燕麦蛋白的加入可以促使纳米脂质结构体更容易被吸收，在美白功效实验中，表明大豆蛋白、花生蛋白、燕麦蛋白可以与其他组分协同促进白藜芦醇纳米结构脂质载体抑制酪氨酸酶，进而发挥美白效果。
与现有技术相比，本发明具有以下优点：1)本发明制备的白藜芦醇纳米结构脂质载体可提高白藜芦醇的稳定性，利于在皮肤上缓释，发挥良好的美白功效；2)本发明加入花生蛋白、大豆蛋白及燕麦蛋白，可以协助稳定纳米结构脂质载体，增加其稳定性；3)本发明利用大豆粕、花生粕、燕麦麸皮来源的蛋白作为载体辅助乳化剂进行负载白藜芦醇，减少了引入过敏原的乳化剂的使用，降低过敏风险，有利于农副产物的高效利用。
附图说明
图1为累计透皮吸收率结果。
具体实施方式
以下通过实施例形式的具体实施方式，对本发明的上述内容作进一步的详细说明。但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下实施例。
实施例1：一种具有美白功效纳米结构脂质载体的制备方法，所述制备方法包括以下步骤：
S1、按配方称取白藜芦醇、稳定剂、乳化剂投入至高剪切机，搅拌混合均匀后，保持温度为55℃，得到油相；
S2、按配方称取辅助乳化剂、去离子水投入至高剪切机，搅拌混合均匀后，保持温度为55℃，得到水相；
S3、将由步骤S2得到的水相在剪切力为8000r/min作用下缓慢加入由步骤S1得到的油相均质2min后，进行先通向220V反向电流处理10s，再通向220V正向电流处理6s，持续反向电流和正向电流交替处理30min，断电后得到初乳；
S4、将步骤S3得到的初乳，通过高压均质机在压力500bar作用下均质5次，冷却至室温得到具有美白功效纳米结构脂质体。
所述配方按以下重量份数组成：白藜芦醇1份，辛酸癸酸甘油三酯10份，鲸蜡硬脂醇聚醚-25 1份，单硬脂酸甘油酯1份，辛基癸基葡萄糖苷2份，花生蛋白2份，大豆蛋白1份，燕麦蛋白2份和余量去离子水。
实施例2：一种具有美白功效纳米结构脂质载体的制备方法，所述制备方法包括以下步骤：
S1、按配方称取白藜芦醇、稳定剂、乳化剂至高剪切机，搅拌混合均匀，保持温度为55℃，得到油相；
S2、按配方称取辅助乳化剂、去离子水至高剪切机，搅拌混合均匀，保持温度为55℃，得到水相；
S3、将由步骤S2得到的水相在剪切力为10000r/min作用下缓慢加入由步骤S1得到的油相均质3min后，进行先通向220V反向电流处理15s，再通向220V正向电流处理8s，持续反向电流和正向电流交替处理38min，断电后得到初乳；
S4、将步骤S3得到的初乳，通过高压均质机在压力1000bar作用下均质7次，冷却至室温得到具有美白功效纳米结构脂质体。
所述配方按以下重量份数组成：白藜芦醇10份，棕榈酸甘油三酯5份，鲸蜡硬脂醇聚醚-25 4份，单硬脂酸甘油酯3份，辛基癸基葡萄糖苷1份，花生蛋白2份，大豆蛋白3份，燕麦蛋白5份和余量去离子水。
实施例3：一种具有美白功效纳米结构脂质载体的制备方法，所述制备方法包括以下步骤：
S1、按配方称取白藜芦醇、稳定剂、乳化剂，搅拌混合均匀，保持温度为45～60℃，得到油相；
S2、按配方称取辅助乳化剂、去离子水，搅拌混合均匀，保持温度为45～60℃，得到水相；
S3、将由步骤S2得到的水相在剪切力为9000r/min作用下缓慢加入由步骤S1得到的油相均质5min，先通向220V反向电流处理12s，再通向220V正向电流处理7s，持续反向电流和正向电流交替处理45min，断电后得到初乳；
S4、将步骤S3得到的初乳，通过高压均质机在压力1200bar作用下均质9次，冷却至室温得到具有美白功效纳米结构脂质体。
所述配方按以下重量份数组成：白藜芦醇15份，辛酸癸酸甘油三酯10份，鲸蜡硬脂醇聚醚-25 1份，单硬脂酸甘油酯3份，辛基癸基葡萄糖苷7份，花生蛋白5份，大豆蛋白5份，燕麦蛋白6份和余量去离子水。
实施例4：一种具有美白功效纳米结构脂质载体的制备方法，所述制备方法包括以下步骤：
S1、按配方称取白藜芦醇、稳定剂、乳化剂，搅拌混合均匀，保持温度为45～60℃，得到油相；
S2、按配方称取辅助乳化剂、去离子水，搅拌混合均匀，保持温度为45～60℃，得到水相；
S3、将由步骤S2得到的水相在剪切力为12000r/min作用下缓慢加入由步骤S1得到的油相均质4min，先通向220V反向电流处理15s，再通向220V正向电流处理8s，持续反向电流和正向电流交替处理40min，断电后得到初乳；
S4、将步骤S3得到的初乳，通过高压均质机在压力1200bar作用下均质8次，冷却至室温得到具有美白功效纳米结构脂质体。
所述配方按以下重量份数组成：白藜芦醇2份，辛酸癸酸甘油三酯6份，鲸蜡硬脂醇聚醚-25 1份，单硬脂酸甘油酯1份，辛基癸基葡萄糖苷3份，花生蛋白1份，大豆蛋白2份，燕麦蛋白1份和余量去离子水。
实施例5：一种具有美白功效纳米结构脂质载体的制备方法，所述制备方法包括以下步骤：
S1、按配方称取白藜芦醇、稳定剂、乳化剂至高剪切机，搅拌混合均匀后，保持温度为45～60℃，得到油相；
S2、按配方称取辅助乳化剂、去离子水至高剪切机，搅拌混合均匀后，保持温度为45～60℃，得到水相；
S3、将由步骤S2得到的水相在剪切力为1000r/min作用下缓慢加入由步骤S1得到的油相均质3min，先通向220V反向电流处理13s，再通向220V正向电流处理7s，持续反向电流和正向电流交替处理30min，断电后得到初乳；
S4、将步骤S3得到的初乳，通过高压均质机在压力600bar作用下均质3次，冷却至室温得到具有美白功效纳米结构脂质体。
所述配方按以下重量份数组成：白藜芦醇0.5份，辛酸癸酸甘油三酯5份，鲸蜡硬脂醇聚醚-25 2份，单硬脂酸甘油酯3份，辛基癸基葡萄糖苷2份，花生蛋白1份，大豆蛋白2份，燕麦蛋白2份和余量去离子水。
对比例1
与实施例5的区别在于：所述配方按以下重量份数组成：白藜芦醇0.5份，辛酸癸酸甘油三酯5份，鲸蜡硬脂醇聚醚～25 2份，单硬脂酸甘油酯3份，辛基癸基葡萄糖苷2份，大豆蛋白2.5份，燕麦蛋白2.5份和余量去离子水。
对比例2
与实施例5的区别在于：所述配方按以下重量份数组成：白藜芦醇0.5份，辛酸癸酸甘油三酯5份，鲸蜡硬脂醇聚醚～25 2份，单硬脂酸甘油酯3份，辛基癸基葡萄糖苷2份，花生蛋白1.7份，燕麦蛋白3.3份和余量去离子水。
对比例3
与实施例5的区别在于：所述配方按以下重量份数组成：白藜芦醇0.5份，辛酸癸酸甘油三酯5份，鲸蜡硬脂醇聚醚～25 2份，单硬脂酸甘油酯3份，辛基癸基葡萄糖苷2份，花生蛋白1.7份，大豆蛋白3.3份和余量去离子水。
对比例4
与实施例5的区别在于：步骤S3中未进行220V反向电流和正向电流处理。
对比例5
与实施例5的区别在于：所述配方按以下重量份数组成：白藜芦醇0.5份，辛酸癸酸甘油三酯5份，鲸蜡硬脂醇聚醚～25 2份，单硬脂酸甘油酯3份，辛基癸基葡萄糖苷2份，鲸蜡硬脂醇聚醚-6 5份和余量去离子水。
试验例1包埋率和相关参数测定
试验材料：实施例1～5和对比例1～5制得的纳米结构脂质载体
称取一定量脂质体，取适量蒸馏水进行水溶，充分溶解后置于离心管中，3000r/min进行离心3分钟，注射器移取上层清液，加入适量乙醇或者甲醇进行定容，之后在305nm的波长下测定其吸光度，经换算得到未包封的游离的白藜芦醇量，并在室温利用MalvenZetasizer Nano ZS90进行PCS测试进行粒径、多分散指数(PDI)及Zeta电位的测定。
表1脂质体包埋率和相关参数测定结果
包埋率 粒径nm 多分散指数PDI Zeta电位mV
实施例1 85.56％ 146.3 0.149 -12.1
实施例2 90.16％ 169.7 0.161 -11.3
实施例3 81.24％ 125.8 0.135 -13.3
实施例4 89.86％ 123.4 0.163 -12.5
实施例5 96.15％ 110.1 0.118 -17.6
对比例1 64.98％ 261.3 0.316 -8.3
对比例2 61.23％ 300.5 0.289 -6.1
对比例3 72.31％ 310.3 0.223 -6.8
对比例4 45.62％ 215.25 0.256 -4.9
对比例5 50.13％ 262.12 0.308 -9.9
纳米结构脂质载体包埋率和相关参数测定结果如表1，结果显示，同时通向常压正电流和常压正电流制备脂质体具有较高的包封率，制得的纳米结构脂质载体分散性更好且电位电阻较高。其中实施例5测得包埋率为96.15％，粒径仅为110.1nm。
试验例2稳定性测试
取实施例1～5和对比例1～5制备的纳米结脂质体，分别置于4℃和50℃下保存，1个月后取样，进行粒径和含量的测试，同时分别对样品进行10000r/min的转速进行离心30min，观察样品是否分层或者有沉淀析出。
表2稳定性测试结果
Figure BDA0002350468190000071
从表2可以看出，实施例5制得的纳米结构脂质载体经过4℃和50℃下保存1个月后，实施例1～5的含量变化和粒径变化效果明显优于对比例1～5，其中实施例5经过4℃和50℃保存一个月后，含量和粒径均未发生显著性变化，并且离心后未发现分层现象和沉淀析出。
试验例3经皮吸收测试
采用Franz扩散池法，扩散池供给鼠皮面积上均匀涂上0.1g实施例5和对比例1-5，每组平行3次，分别在1.0、2.0、4.0、6.0、8.0、10.0、12.0h时吸取接收液1mL，每次取样后均补入相同体积的接收液，再进行色谱进样分析，测定白藜芦醇的含量。
经皮吸收测试结果如图1，结果显示，与缺少大豆蛋白、花生蛋白、燕麦蛋白任一组分制得的纳米结构脂质载体相比，实施例5累计透过量效果较好，表明大豆蛋白、花生蛋白和燕麦蛋白可以与其他组分协同促进纳米结构脂质载体的经皮吸收。
试验例4美白功效评价
以小鼠黑色素瘤细胞B16为细胞模型，研究对酪氨酸酶抑制作用，分别取实施例5和对比例1～3的溶液1ml置于37℃恒温10min，在加入1ml的0.15％酪氨酸酶溶液混匀，于37℃恒温10min后测得475nm处吸光度，计算酪氨酸酶抑制率。
表3酪氨酸酶抑制率
组别 抑制率％
实施例5 97.87
对比例1 75.62
对比例2 81.21
对比例3 70.33
对比例5 86.13
从表3可以看出，与缺少大豆蛋白、花生蛋白、燕麦蛋白任一组分制得的纳米结构脂质载体相比，实施例5的酪氨酸酶抑制率显著高于对比例1～3和对比例5，表明大豆蛋白、花生蛋白和燕麦蛋白可以协同促进白藜芦醇结构脂质载体抑制酪氨酸酶发挥美白效果。
上述实施例仅例示性说明本发明的原理及其功效，而非用于限制本发明。任何熟悉此技术的人士皆可在不违背本发明的精神及范畴下，对上述实施例进行修饰或改变。因此，举凡所属技术领域中具有通常知识者在未脱离本发明所揭示的精神与技术思想下所完成的一切等效修饰或改变，仍应由本发明的权利要求所涵盖。

Claims (3)

1.一种具有美白功效纳米结构脂质载体的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括以下步骤：
S1、按配方称取白藜芦醇、稳定剂、乳化剂投入至高剪切机，搅拌混合均匀后，保持温度为55℃，得到油相；
S2、按配方称取辅助乳化剂、去离子水投入至高剪切机，搅拌混合均匀后，保持温度为55℃，得到水相；
S3、将由步骤S2得到的水相在剪切力为8000～12000r/min作用下缓慢加入由步骤S1得到的油相均质2～5min，进行先通向220V反向电流处理10～15s，再通向220V正向电流处理6～8s，持续反向电流和正向电流交替处理30～45min，断电后得到初乳；
S4、将步骤S3得到的初乳，通过高压均质机在压力500～1200bar作用下均质5～9次，冷却至室温得到具有美白功效纳米结构脂质载体；
所述步骤S1中白藜芦醇的重量份数为1～15份，稳定剂的重量份数为3～10份，乳化剂的重量份数为1～10份，辅助乳化剂的重量份数为5～15份；
所述步骤S1中的稳定剂选自辛酸癸酸甘油三酯；
所述步骤S1中的乳化剂选自鲸蜡硬脂醇聚醚-25、硬脂醇、单硬脂酸甘油酯、辛基葡萄糖苷和癸基葡萄糖苷中一种或几种；
所述步骤S2中的辅助乳化剂选自花生蛋白、大豆蛋白及燕麦蛋白中一种或几种。
2.根据权利要求1所述方法制得的具有美白功效纳米结构脂质载体。
3.根据权利要求2所述具有美白功效纳米结构脂质载体在化妆品中的应用。
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