CN112336649B - 一种神经酰胺与脂溶性活性物皮肤共渗透载体的制备方法和产品 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种神经酰胺与脂溶性活性物皮肤共渗透载体的制备方法和产品，包括，神经酰胺、脂溶性活性物、磷脂、胆固醇、脂肪酸、植物鞘氨醇、液态脂质、固态脂质、多元醇和水。该载体带正电，三元促渗体系能显著提高神经酰胺在皮肤角质层中的渗透量，发挥其增强皮肤水合和提高角质层脂质流动性的功效，进而促进载体中脂溶性活性物的皮肤渗透，达到共渗透的目的。
Description
技术领域
本发明属于化妆品技术领域，具体涉及到一种神经酰胺与脂溶性活性物皮肤共渗透载体的制备方法和产品。
背景技术
神经酰胺是由饱和度不同或羟基个数不同的鞘氨醇与不同碳链长度或饱和度的脂肪酸共价结合而成的一类物质。神经酰胺约占皮肤角质层脂质的40％～50％，是维持皮肤正常生理功能的一类重要脂质，可以修复受损皮肤，促进皮肤天然保护层的更新。作为一类天然的保湿因子，神经酰胺拥有很强的缔合水分子的能力，将其应用于皮肤后可以促进皮肤水合作用，具有优异的保湿功效。
但是，神经酰胺是一类高结晶性的油脂，如将其直接应用于化妆品配方中，它极易结晶析出，且皮肤吸收性差，影响其自身作用的发挥。因此，针对以上神经酰胺在应用中的问题，并提高其透皮性和生物利用率，多种运输载体技术已被大量研究并公开。如：中国发明专利CN 101214198A公开了一种神经酰胺脂质体制剂及其制备方法和用途，该专利制得的脂质体粒径在20-40nm，具有较好的水溶性和透明度；中国发明专利CN106102708B公开了一种神经酰胺分散组合物的制备方法和用途，该专利制得的分散组合物平均粒径在60nm左右，上述专利中的技术虽然可以在一定程度上提高神经酰胺的稳定性，抑制其结晶，但并未对运载后神经酰胺的透皮情况进行考察。中国专利CN106691889A公开了一种高皮肤滞留神经酰胺纳米组合物的制备方法和用途，该专利虽考察了神经酰胺经运载后的透皮情况，但并未进一步将神经酰胺与其它脂溶性活性物组合起来，构建一种皮肤亲和性更好的共输送体系，发挥神经酰胺在其它脂溶性活性物经皮输送方面的有益作用。
此外，目前有关神经酰胺的载体技术中，并未见将其与胆固醇、脂肪酸组合后包载的技术。
发明内容
本部分的目的在于概述本发明的实施例的一些方面以及简要介绍一些较佳实施例。在本部分以及本申请的说明书摘要和发明名称中可能会做些简化或省略以避免使本部分、说明书摘要和发明名称的目的模糊，而这种简化或省略不能用于限制本发明的范围。
鉴于上述和/或现有技术中存在的问题，提出了本发明。
因此，本发明的目的是，克服现有技术中的不足，提供一种神经酰胺与脂溶性活性物皮肤共渗透载体。
为解决上述技术问题，本发明提供了如下技术方案：一种神经酰胺与脂溶性活性物皮肤共渗透载体，包括，神经酰胺、脂溶性活性物、磷脂、胆固醇、脂肪酸、植物鞘氨醇、液态脂质、固态脂质、多元醇和水；按原料质量百分比计，所述神经酰胺为0.1～10％，所述脂溶性活性成分为0.1～15％，所述磷脂为0.1～10％，所述胆固醇为0.1～10％，所述脂肪酸为0.1～10％，所述植物鞘氨醇为0.1～10％，所述液态脂质为0～10％，所述固态脂质为0～10％，所述多元醇为0～90％，余量为水补足至100％。
作为本发明所述神经酰胺与脂溶性活性物皮肤共渗透载体的一种优选方案，其中：所述神经酰胺包括神经酰胺1、神经酰胺2、神经酰胺3、神经酰胺4和神经酰胺6II中的一种或几种。
作为本发明所述神经酰胺与脂溶性活性物皮肤共渗透载体的一种优选方案，其中：所述脂溶性活性成分包括维生素E、辅酶Q10、视黄醇、姜黄素、四氢姜黄素、槲皮素、白藜芦醇、虾青素中的一种或几种。
作为本发明所述神经酰胺与脂溶性活性物皮肤共渗透载体的一种优选方案，其中：所述磷脂为天然大豆或蛋黄卵磷脂、氢化卵磷脂中的一种或几种；所述脂肪酸为月桂酸、肉豆蔻酸、油酸、棕榈酸、硬脂酸、异硬脂酸中的一种或几种。
作为本发明所述神经酰胺与脂溶性活性物皮肤共渗透载体的一种优选方案，其中：所述液态脂质为辛酸癸酸甘油三酯、橄榄油、杏仁油、角鲨烷、辛基十二醇中的一种或几种；所述固态脂质为十六醇、十六十八醇、二十醇、二十二醇中的一种或几种。
作为本发明所述神经酰胺与脂溶性活性物皮肤共渗透载体的一种优选方案，其中：所述多元醇为甘油、丁二醇、山梨醇、季戊四醇、木糖醇中的一种或几种。
本发明的目的是，克服现有技术中的不足，提供一种神经酰胺与脂溶性活性物皮肤共渗透载体的制备方法。
为解决上述技术问题，本发明提供了如下技术方案：一种神经酰胺与脂溶性活性物皮肤共渗透载体的制备方法，包括，将神经酰胺、胆固醇、脂肪酸共混，形成三元促渗油性体系1后，将脂溶性活性物、磷脂、植物鞘氨醇、液态脂质和固态脂质加入混合溶解，得到油相体系2；
将多元醇和水混合溶解，得到水相；
将所述水相加入所述油相体系2中，分散、均质，得到神经酰胺与脂溶性活性物皮肤共渗透载体。
作为本发明所述神经酰胺与脂溶性活性物皮肤共渗透载体制备方法的一种优选方案，其中：所述神经酰胺与脂溶性活性物皮肤共渗透载体，其中，按原料质量百分比计，所述神经酰胺为0.1～10％，所述脂溶性活性成分为0.1～15％，所述磷脂为0.1～10％，所述胆固醇为0.1～10％，所述脂肪酸为0.1～10％，所述植物鞘氨醇为0.1～10％，所述液态脂质为0～10％，所述固态脂质为0～10％，所述多元醇为0～90％，余量为水补足至100％。
作为本发明所述神经酰胺与脂溶性活性物皮肤共渗透载体制备方法的一种优选方案，其中：所述分散，分散转速为10000～20000rpm，分散时间为1～5min；所述高压均质，高压均质压力为100～150MPa，均质次数为3～7次。
作为本发明所述神经酰胺与脂溶性活性物皮肤共渗透载体制备方法的一种优选方案，其中：所述神经酰胺与脂溶性活性物皮肤共渗透载体为半透明均匀液体，带正电，粒径为40～100nm，室温放置一年粒径无明显变化。
本发明有益效果：
(1)本发明创新性的将神经酰胺和脂溶性活性物进行共包载，一方面，通过模拟人体角质层脂质组成，将神经酰胺、胆固醇和脂肪酸按照一定比例形成三元促渗油相体系，增强载体的皮肤表面水合作用，提高角质层脂质的流动性。另一方面，利用植物鞘氨醇带正电的特质，赋予载体正电，利于载体和皮肤角蛋白之间的相互作用，提高皮肤滞留时间。在此基础上，载体中的脂溶性活性物被释放，达到共渗透的目的。
(2)本发明将三种油脂成分共混，可通过模拟人体角质层脂质组成，形成三元促渗体系，在皮肤表面形成自然致密的脂质薄膜，促进皮肤水合作用，提高角质层脂质流动性，疏松角蛋白堆积结构，进而促进脂溶性活性物的透皮输送；且结合神经鞘氨醇带正电的特性，促进载体体系与皮肤之间的相互作用，起到进一步促渗的功效。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施例的技术方案，下面将对实施例描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动性的前提下，还可以根据这些附图获得其它的附图。其中：
图1为本发明实施例1、6的载体外观图，其中，左：实施例1；右：实施例6。
图2为本发明实施例1的粒径分布图。
图3为本发明实施例1应用于透皮吸收的结果图。
图4为本发明实施例2、3、4、5、6、7应用于透皮吸收的结果图。
图5为本发明实施例2、3、4、5、6应用于透皮吸收后皮肤截面的激光共聚焦显微镜图，其中，A-E对应的Cer3含量分别为0％、0.5％、1％、1.5％、2％。
图6为本发明实施例中不同植物鞘氨醇含量Zeta电位分布图。
图7为本发明实施例10、11、12、13应用于透皮吸收的结果图。
具体实施方式
为使本发明的上述目的、特征和优点能够更加明显易懂，下面结合说明书实施例对本发明的具体实施方式做详细的说明。
在下面的描述中阐述了很多具体细节以便于充分理解本发明，但是本发明还可以采用其他不同于在此描述的其它方式来实施，本领域技术人员可以在不违背本发明内涵的情况下做类似推广，因此本发明不受下面公开的具体实施例的限制。
其次，此处所称的“一个实施例”或“实施例”是指可包含于本发明至少一个实现方式中的特定特征、结构或特性。在本说明书中不同地方出现的“在一个实施例中”并非均指同一个实施例，也不是单独的或选择性的与其他实施例互相排斥的实施例。
实施例1
辛酸癸酸甘油三酯：5g
辛基十二醇：1.5g
鲸蜡硬脂醇：0.5g
神经酰胺3：2g
胆固醇：0.7g
棕榈酸：0.7g
氢化卵磷脂：5g
甘油：60g
水：余量，加水补足至100g
将甘油与水混合，于85℃水浴锅中磁力搅拌至水相澄清透明；
将神经酰胺2、胆固醇、棕榈酸于85℃水浴锅中加热溶解，并与辛酸癸酸甘油三酯、辛基十二醇、鲸蜡硬脂醇和氢化卵磷脂的溶解物混合，至油相澄清透明；
将水相加入油相，采用高速分散与15000rpm，分散3min，然后高压均质于90Mpa，循环5次，室温冷却得到神经酰胺载体。
所得载体为半透明液体，神经酰胺负载量为2％，神经酰胺包封率为99.1％左右；采用Zeta电位及纳米粒度分析仪测定粒径为78.7nm，室温放置一年后粒径无显著变化，体系稳定。
图2为神经酰胺载体的粒径分布图，可以看出，载体具有一个较为集中的粒径分布，分散度较好。
图3为神经酰胺载体与神经酰胺油溶液的透皮含量对比图，说明与神经酰胺油溶液相比，神经酰胺载体可以有效促进神经酰胺的经皮输送。
实施例2
硬酯醇：1.5g
辛基十二醇：0.5g
辛酸癸酸甘油三酯：5g
辅酶Q10：7g
氢化卵磷脂：4g
甘油：75g
水：余量，加水补足至100g
将甘油与水混合，于85℃水浴锅中磁力搅拌至水相澄清透明；将辅酶Q10、辛酸癸酸甘油三酯、辛基十二醇、鲸蜡硬脂醇和氢化卵磷脂的溶解物混合，至油相透明；将水相加入油相，采用高速分散与15000rpm，分散3min，然后高压均质于90Mpa，循环5次，室温冷却得到运载辅酶Q10的载体。
所得载体为半透明液体，辅酶Q10负载量为7％，包封率为98.5％左右；采用Zeta电位及纳米粒度分析仪测定粒径为77nm，室温放置60d后，其外观无明显变化，粒径略微增加至81nm，辅酶Q10保留率在95％以上，载体具有良好的常温储藏稳定性。
实施例3
硬酯醇：1.5g
辛基十二醇：0.5g
辛酸癸酸甘油三酯：5g
辅酶Q10：7g
神经酰胺3：0.5g
胆固醇：0.2g
棕榈酸：0.2g
氢化卵磷脂：4g
甘油：75g
水：余量，加水补足至100g
将甘油与水混合，于85℃水浴锅中磁力搅拌至水相澄清透明；将神经酰胺3、胆固醇、棕榈酸于85℃水浴锅中加热溶解，并与辅酶Q10、辛酸癸酸甘油三酯、辛基十二醇、硬脂醇和氢化卵磷脂的溶解物混合，至油相澄清透明；将水相加入油相，采用高速分散与15000rpm，分散3min，然后高压均质于90Mpa，循环5次，室温冷却得到运载神经酰胺与辅酶Q10的载体。
所得载体为半透明液体，辅酶Q10负载量为7％，神经酰胺负载量为0.5％，辅酶Q10包封率为98.7％左右，神经酰胺包封率为99.2％左右；采用Zeta电位及纳米粒度分析仪测定粒径为78.3nm，室温放置60d后，其外观无明显变化，粒径略微增加至81.7nm，辅酶Q10保留率在95％以上，载体具有良好的常温储藏稳定性。
实施例4
硬酯醇：1.5g
辛基十二醇：0.5g
辛酸癸酸甘油三酯：5g
辅酶Q10：7g
神经酰胺3：1g
胆固醇：0.3g
硬脂酸：0.3g
氢化卵磷脂：4g
甘油：75g
水：余量，加水补足至100g
将甘油与水混合，于85℃水浴锅中磁力搅拌至水相澄清透明；将神经酰胺3、胆固醇、棕榈酸于85℃水浴锅中加热溶解，并与辅酶Q10、辛酸癸酸甘油三酯、辛基十二醇、硬脂醇和氢化卵磷脂的溶解物混合，至油相澄清透明；将水相加入油相，采用高速分散与15000rpm，分散3min，然后高压均质于90Mpa，循环5次，室温冷却得到运载神经酰胺与辅酶Q10的载体。
所得载体为半透明液体，辅酶Q10负载量为7％，神经酰胺负载量为1％，辅酶Q10包封率为98.3％左右，神经酰胺包封率为99.4％左右；采用Zeta电位及纳米粒度分析仪测定粒径为79nm，室温放置60d后，其外观无明显变化，粒径略微增加至82.4nm，辅酶Q10保留率在95％以上，载体具有良好的常温储藏稳定性。
实施例5
硬酯醇：1.5g
辛基十二醇：0.5g
辛酸癸酸甘油三酯：5g
辅酶Q10：7g
神经酰胺3：1.5g
胆固醇：0.5g
硬脂酸：0.5g
氢化卵磷脂：4g
甘油：75g
水：余量，加水补足至100g
将甘油与水混合，于85℃水浴锅中磁力搅拌至水相澄清透明；将神经酰胺3、胆固醇、棕榈酸于85℃水浴锅中加热溶解，并与辅酶Q10、辛酸癸酸甘油三酯、辛基十二醇、硬脂醇和氢化卵磷脂的溶解物混合，至油相澄清透明；将水相加入油相，采用高速分散与15000rpm，分散3min，然后高压均质于90Mpa，循环5次，室温冷却得到运载神经酰胺与辅酶Q10的载体。
所得载体为半透明液体，辅酶Q10负载量为7％，神经酰胺负载量为1.5％，辅酶Q10包封率为99.1％左右，神经酰胺包封率为98.9％左右；采用Zeta电位及纳米粒度分析仪测定粒径为79.5nm，室温放置60d后，其外观无明显变化，粒径略微增加至83.3nm，辅酶Q10保留率在95％以上，载体具有良好的常温储藏稳定性。
实施例6
硬酯醇：1.5g
辛基十二醇：0.5g
辛酸癸酸甘油三酯：5g
辅酶Q10：7g
神经酰胺3：2g
胆固醇：0.7g
硬脂酸：0.7g
氢化卵磷脂：4g
甘油：75g
水：余量，加水补足至100g
将甘油与水混合，于85℃水浴锅中磁力搅拌至水相澄清透明；将神经酰胺3、胆固醇、棕榈酸于85℃水浴锅中加热溶解，并与辅酶Q10、辛酸癸酸甘油三酯、辛基十二醇、硬脂醇和氢化卵磷脂的溶解物混合，至油相澄清透明；将水相加入油相，采用高速分散与15000rpm，分散3min，然后高压均质于90Mpa，循环5次，室温冷却得到运载神经酰胺与辅酶Q10的载体。
所得载体为半透明液体，辅酶Q10负载量为7％，神经酰胺负载量为2％，辅酶Q10包封率为98.8％左右，神经酰胺包封率为99.3％左右；采用Zeta电位及纳米粒度分析仪测定粒径为81.5nm，室温放置60d后，其外观无明显变化，粒径略微增加至84.6nm，辅酶Q10保留率在95％以上，载体具有良好的常温储藏稳定性。
实施例7
硬酯醇：1.5g
辛基十二醇：0.5g
辛酸癸酸甘油三酯：5g
辅酶Q10：7g
神经酰胺3：3g
胆固醇：1g
硬脂酸：1g
氢化卵磷脂：4g
甘油：75g
水：余量，加水补足至100g
将甘油与水混合，于85℃水浴锅中磁力搅拌至水相澄清透明；将神经酰胺3、胆固醇、棕榈酸于85℃水浴锅中加热溶解，并与辅酶Q10、辛酸癸酸甘油三酯、辛基十二醇、硬脂醇和氢化卵磷脂的溶解物混合，至油相澄清透明；将水相加入油相，采用高速分散与15000rpm，分散3min，然后高压均质于90Mpa，循环5次，室温冷却得到运载神经酰胺与辅酶Q10的载体。
所得载体为半透明液体，辅酶Q10负载量为7％，神经酰胺负载量为3％，辅酶Q10包封率为96.8％左右，神经酰胺包封率为99％左右；采用Zeta电位及纳米粒度分析仪测定粒径为107.7nm，室温放置30d后，粒径增加至124.3nm，辅酶Q10保留率在95％以上，载体的常温储藏稳定性较好。
图1为本发明实施例1、6的载体外观图，其中，左：实施例1；右：实施例6，可以看出，两种载体均呈现半透明状态。
实施例8
将实施例2、例3、例4、例5、例6、例7应用于透皮吸收：
将猪皮置于Franzs扩散池的供给池与接收池之间，在供给池加入1ml样品并放入透皮扩散试验仪中，反应12h。反应结束后，采用tape stripping法测定角质层中CoQ10的含量：用3M胶带粘贴猪皮的角质层，舍弃第一层，继续粘贴20层；收集于离心管中，加入萃取剂萃取，采用HPLC测定CoQ10的含量，即为角质层中CoQ10的含量。
将用3M胶带粘贴21层除去角质层后剩余的皮肤表面于60℃水浴加热10s，而后用手术刀小心剥离最上层皮肤层，剪碎后收集于离心管中，加入萃取剂萃取，采用HPLC测定CoQ10的含量，即为有活力的表皮中CoQ10的含量。
将剥离有活力的表皮层后剩余的皮肤剪碎，并收集于离心管中，加入萃取剂萃取，采用HPLC测定CoQ10的含量，即为真皮中CoQ10的含量。
图4为本发明实施例2、3、4、5、6、7应用于透皮吸收的结果图，可以看出，神经酰胺可以有效促进辅酶Q10的经皮输送，且神经酰胺含量越高，促渗效果越明显，当神经酰胺含量大于1.5％时，辅酶Q10的透皮增加量减小，当神经酰胺含量高于2％时，透皮量减小。结果显示，当神经酰胺含量低于2％时，随着神经酰胺含量的增加，辅酶Q10的透皮含量显著增加，表明神经酰胺的添加可以促进油溶性生物活性成分的透皮吸收，当神经酰胺含量高于2％时，由于载体粒径增加，辅酶Q10的透皮量相应减少。可能由于神经酰胺的添加量越高，较高的神经酰胺含量会影响载体的粒径和稳定性，反而不利于油溶性生物活性成分的透皮吸收。
图5为本发明实施例2、3、4、5、6应用于透皮吸收后皮肤截面的激光共聚焦显微镜图，其中，A-E对应的Cer3含量分别为0％、0.5％、1％、1.5％、2％，直观说明了图4的透皮效果。
实施例9
辛基十二醇：2g
辛酸癸酸甘油三酯：5g
神经酰胺2：2g
神经酰胺3：2g
胆固醇：0.7g
硬脂酸：0.7g
辅酶Q10：7g
氢化卵磷脂：4g
甘油：15g
水：余量，加水补足至100g
将甘油与水混合，于85℃水浴锅中磁力搅拌至水相澄清透明；将神经酰胺3、胆固醇、棕榈酸于85℃水浴锅中加热溶解，并与辅酶Q10、辛酸癸酸甘油三酯、辛基十二醇、硬脂醇和氢化卵磷脂的溶解物混合，至油相澄清透明；将水相加入油相，采用高速分散与15000rpm，分散3min，然后高压均质于90Mpa，循环5次，室温冷却得到运载神经酰胺与辅酶Q10的载体。
所得载体为半透明液体，辅酶Q10负载量为7％，神经酰胺负载量为2％，辅酶Q10包封率为98.9％左右，神经酰胺包封率为99.5％左右；采用Zeta电位及纳米粒度分析仪测定粒径为76.7nm，室温放置60d后，其外观透明度降低，粒径增加显著至153nm左右，载体常温储藏性较差。该示例构建了一个甘油含量较低的载体配方，经过储存发现，由于甘油含量较低，载体黏度低，载体稳定性差；说明甘油对于维持体系的稳定有一定作用。
实施例10
硬酯醇：1.5g
辛基十二醇：0.5g
辛酸癸酸甘油三酯：5g
辅酶Q10：7g
神经酰胺3：2g
胆固醇：0.7g
硬脂酸：0.7g
植物鞘氨醇：0.5g
氢化卵磷脂：4g
甘油：75g
水：余量，加水补足至100g
将甘油与水混合，于85℃水浴锅中磁力搅拌至水相澄清透明；将神经酰胺3、胆固醇、棕榈酸、植物鞘氨醇于85℃水浴锅中加热溶解，并与辅酶Q10、辛酸癸酸甘油三酯、辛基十二醇、硬脂醇和氢化卵磷脂的溶解物混合，至油相澄清透明；将水相加入油相，采用高速分散与15000rpm，分散3min，然后高压均质于90Mpa，循环5次，室温冷却得到运载神经酰胺与辅酶Q10的载体。
所得载体为半透明液体，辅酶Q10负载量为7％，神经酰胺负载量为2％，辅酶Q10包封率为98.8％左右，神经酰胺包封率为98.3％左右；采用Zeta电位及纳米粒度分析仪测定粒径为95.5nm，Zeta电位为-15.95mV，室温放置60d后，其外观无明显变化，粒径略微增加至100.2nm，辅酶Q10保留率在95％以上，载体具有良好的常温储藏稳定性。
实施例11
硬酯醇：1.5g
辛基十二醇：0.5g
辛酸癸酸甘油三酯：5g
辅酶Q10：7g
神经酰胺3：2g
胆固醇：0.7g
硬脂酸：0.7g
植物鞘氨醇：1g
氢化卵磷脂：4g
甘油：75g
水：余量，加水补足至100g
将甘油与水混合，于85℃水浴锅中磁力搅拌至水相澄清透明；将神经酰胺3、胆固醇、棕榈酸、植物鞘氨醇于85℃水浴锅中加热溶解，并与辅酶Q10、辛酸癸酸甘油三酯、辛基十二醇、硬脂醇和氢化卵磷脂的溶解物混合，至油相澄清透明；将水相加入油相，采用高速分散与15000rpm，分散3min，然后高压均质于90Mpa，循环5次，室温冷却得到运载神经酰胺与辅酶Q10的载体。
所得载体为半透明液体，辅酶Q10负载量为7％，神经酰胺负载量为2％，辅酶Q10包封率为97.8％左右，神经酰胺包封率为99.1％左右；采用Zeta电位及纳米粒度分析仪测定粒径为96.7nm，Zeta电位为21.86mV，室温放置60d后，其外观无明显变化，粒径略微增加至104.9nm，辅酶Q10保留率在95％以上，载体具有良好的常温储藏稳定性。
实施例12
硬酯醇：1.5g
辛基十二醇：0.5g
辛酸癸酸甘油三酯：5g
辅酶Q10：7g
神经酰胺3：2g
胆固醇：0.7g
硬脂酸：0.7g
植物鞘氨醇：1.5g
氢化卵磷脂：4g
甘油：75g
水：余量，加水补足至100g
将甘油与水混合，于85℃水浴锅中磁力搅拌至水相澄清透明；将神经酰胺3、胆固醇、棕榈酸、植物鞘氨醇于85℃水浴锅中加热溶解，并与辅酶Q10、辛酸癸酸甘油三酯、辛基十二醇、硬脂醇和氢化卵磷脂的溶解物混合，至油相澄清透明；将水相加入油相，采用高速分散与15000rpm，分散3min，然后高压均质于90Mpa，循环5次，室温冷却得到运载神经酰胺与辅酶Q10的载体。
所得载体为半透明液体，辅酶Q10负载量为7％，神经酰胺负载量为2％，辅酶Q10包封率为98.1％左右，神经酰胺包封率为97.3％左右；采用Zeta电位及纳米粒度分析仪测定粒径为104.5nm，Zeta电位为34.67mV，室温放置60d后，其外观无明显变化，粒径略微增加至111.3nm，辅酶Q10保留率在95％以上，载体具有良好的常温储藏稳定性。
实施例13
硬酯醇：1.5g
辛基十二醇：0.5g
辛酸癸酸甘油三酯：5g
辅酶Q10：7g
神经酰胺3：2g
胆固醇：0.7g
硬脂酸：0.7g
植物鞘氨醇：2g
氢化卵磷脂：4g
甘油：75g
水：余量，加水补足至100g
将甘油与水混合，于85℃水浴锅中磁力搅拌至水相澄清透明；将神经酰胺3、胆固醇、棕榈酸、植物鞘氨醇于85℃水浴锅中加热溶解，并与辅酶Q10、辛酸癸酸甘油三酯、辛基十二醇、硬脂醇和氢化卵磷脂的溶解物混合，至油相澄清透明；将水相加入油相，采用高速分散与15000rpm，分散3min，然后高压均质于90Mpa，循环5次，室温冷却得到运载神经酰胺与辅酶Q10的载体。
所得载体为半透明液体，辅酶Q10负载量为7％，神经酰胺负载量为2％，辅酶Q10包封率为98.1％左右，神经酰胺包封率为97.3％左右；采用Zeta电位及纳米粒度分析仪测定粒径为136.5nm，Zeta电位为45.14mV，室温放置60d后，其外观无明显变化，粒径略微增加至147.3nm，辅酶Q10保留率在95％以上，载体具有良好的常温储藏稳定性。
图6为不同植物鞘氨醇含量Zeta电位分布图，由图可知，随着植物鞘氨醇添加量的增加，载体携带的正电荷量随之增加。
实施例14
将实施例10、实施例11、实施例12、实施例13应用于透皮吸收。
将猪皮置于Franzs扩散池的供给池与接收池之间，在供给池加入1ml样品并放入透皮扩散试验仪中，反应12h。反应结束后，采用tape stripping法测定角质层中CoQ10的含量：用3M胶带粘贴猪皮的角质层，舍弃第一层，继续粘贴20层；收集于离心管中，加入萃取剂萃取，采用HPLC测定CoQ10的含量，即为角质层中CoQ10的含量。
将用3M胶带粘贴21层除去角质层后剩余的皮肤表面于60℃水浴加热10s，而后用手术刀小心剥离最上层皮肤层，剪碎后收集于离心管中，加入萃取剂萃取，采用HPLC测定CoQ10的含量，即为有活力的表皮中CoQ10的含量。
将剥离有活力的表皮层后剩余的皮肤剪碎，并收集于离心管中，加入萃取剂萃取，采用HPLC测定CoQ10的含量，即为真皮中CoQ10的含量。
图7为本发明实施例10、11、12、13应用于透皮吸收的结果图，可以看出，当植物鞘氨醇含量低于1.5％时，辅酶Q10的透皮量随着植物鞘氨醇添加量的增加而增加，当植物鞘氨醇含量高于1.5％时，辅酶Q10的透皮量未再进一步增加。
相比于带负电的载体，带正电的载体作用于皮肤表面后可以与带负电的角质层细胞相互作用和吸附，促进活性成分的经皮渗透。结果显示，辅酶Q10的透皮量与载体粒径及载体带电情况有关，随着植物鞘氨醇添加量的增加，载体带的正电荷量逐渐增加，辅酶Q10透皮量逐渐增加，但是由于载体粒径也同样随着植物鞘氨醇添加量的增加而增大，因此当植物鞘氨醇添加量大于1.5％时，受粒径影响，辅酶Q10透皮量并未再进一步提高。
本发明将神经酰胺作为促渗剂进行共同包载，同时在神经酰胺的渗透方面，加入了胆固醇和脂质体促进神经酰胺的渗透，最终达到提高脂溶性活性物渗透的效果。本发明创新性的将神经酰胺和脂溶性活性物进行共包载，一方面，通过模拟人体角质层脂质组成，将神经酰胺、胆固醇和脂肪酸按照一定比例形成三元促渗油相体系，增强载体的皮肤表面水合作用，提高角质层脂质的流动性。另一方面，利用植物鞘氨醇带正电的特质，赋予载体正电，利于载体和皮肤角蛋白之间的相互作用，提高皮肤滞留时间，在此基础上，载体中的脂溶性活性物被释放，达到共渗透的目的。
应说明的是，以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非限制，尽管参照较佳实施例对本发明进行了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的精神和范围，其均应涵盖在本发明的权利要求范围当中。
Claims (5)
1.一种神经酰胺与脂溶性活性物皮肤共渗透载体的制备方法，其特征在于：包括，
将神经酰胺、胆固醇、脂肪酸共混，形成三元促渗油性体系1后，将脂溶性活性物、磷脂、植物鞘氨醇、液态脂质和固态脂质加入混合溶解，得到油相体系2；
将多元醇和水混合溶解，得到水相；
将所述水相加入所述油相体系2中，分散、均质，得到神经酰胺与脂溶性活性物皮肤共渗透载体；
所述神经酰胺与脂溶性活性物皮肤共渗透载体，按原料质量百分比计，所述神经酰胺为0.5~2%，所述脂溶性活性成分为0.1~15%，所述磷脂为0.1~10%，所述胆固醇为0.1~10%，所述脂肪酸为0.1~10%，所述植物鞘氨醇为1~2%，所述液态脂质为0~10%，所述固态脂质为0~10%，所述多元醇为0~90%，余量为水补足至100%；
所述磷脂为天然大豆或蛋黄卵磷脂、氢化卵磷脂中的一种或几种；
所述脂肪酸为月桂酸、肉豆蔻酸、油酸、棕榈酸、硬脂酸、异硬脂酸中的一种或几种；
所述神经酰胺包括神经酰胺1、神经酰胺2、神经酰胺3、神经酰胺4和神经酰胺6II中的一种或几种；
所述神经酰胺与脂溶性活性物皮肤共渗透载体为半透明均匀液体，带正电，粒径为40~100 nm，室温放置一年粒径无明显变化。
2.如权利要求1所述神经酰胺与脂溶性活性物皮肤共渗透载体的制备方法，其特征在于：所述脂溶性活性成分包括维生素E、辅酶Q10、视黄醇、姜黄素、四氢姜黄素、槲皮素、白藜芦醇、虾青素中的一种或几种。
3.如权利要求1所述神经酰胺与脂溶性活性物皮肤共渗透载体的制备方法，其特征在于：所述液态脂质为辛酸癸酸甘油三酯、橄榄油、杏仁油、角鲨烷、辛基十二醇中的一种或几种；所述固态脂质为十六醇、十六十八醇、二十醇、二十二醇中的一种或几种。
4.如权利要求1所述神经酰胺与脂溶性活性物皮肤共渗透载体的制备方法，其特征在于：所述多元醇为甘油、丁二醇、山梨醇、季戊四醇、木糖醇中的一种或几种。
5.如权利要求1所述神经酰胺与脂溶性活性物皮肤共渗透载体的制备方法，其特征在于：所述分散，分散转速为10000~20000 rpm，分散时间为1~5 min；所述均质，均质压力为100~150 MPa，均质次数为3~7次。
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