CN110760527A - 与干旱胁迫相关的菏豆12号GmYLD1基因及其等位突变基因与应用 - Google Patents

与干旱胁迫相关的菏豆12号GmYLD1基因及其等位突变基因与应用 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种与干旱胁迫相关的菏豆12号GmYLD1基因及其等位突变基因与所述基因，其中所述GmYLD1基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，其等位突变基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示。本发明还公开了所述基因在培育耐旱转基因植物或在植物干旱胁迫研究中的应用。实验证明，本发明所提供的菏豆12号GmYLD1基因对于干旱具有一定的抗性，而其等位突变体gmyld1，具有明显的干旱敏感性，可以用于改良大豆或植物的遗传育种，其发现为培育抗旱作物品种提供了技术手段。

Description

与干旱胁迫相关的菏豆12号GmYLD1基因及其等位突变基因与 应用
技术领域
本发明属于植物基因工程技术领域，具体涉及一种与干旱胁迫相关的菏豆12号GmYLD1基因及其等位突变基因与所述基因的应用。
背景技术
大豆是我国重要粮食和油料作物，含有多种生理活性物质，具有广泛工业用途，在国民经济中占有不可替代的重要地位。大豆还是人类食物结构中主要植物蛋白来源，是当今市场上重要保健食品和优蛋白饲料。近年来，世界对大豆需求量逐年上升，而我国大豆消费量的三分之二依赖进口。因此，提高大豆产量成为我国乃至世界大豆育种的重要任务和研究方向。
基因功能研究中，最为便捷的方法就是突变体。大豆突变体库的构建，可应用现代分子操作技术，集中诸多优良性状，从而开掘多个富有应用价值的等位基因，为各种基因功能分析，开发近等基因系等提供材料，更有利于大豆育种研究。植物遗传诱变中化学诱变是比较重要的诱变手段之一，是构建突变体库的重要方法之一。EMS作为一种常用的诱变剂，突出特点是高效稳定。EMS主要诱发点突变，从而发生错义突变(missensemutation)、沉默突变(silentmutation)、无义突变(nonsencemutation)。在模式植物拟南芥中的研究显示，EMS能够使C-T的碱基发生转换突变。从拟南芥的基因编码习惯来分析，错义突变占大约百分之六十五，其余是沉默突变和极少量的无义突变。EMS化学诱变剂的处理对象是种子，这省去了繁琐的组织培养步骤，使实验过程更简洁。另一个使EMS被广泛用于构建突变体库的重要原因，是其诱变的频率高、种类丰富、范围广，且获得的突变体以点突变为主。目前已成功构建了EMS突变体库，并已开展了基因功能研究。
从表型到基因的研究是正向遗传学的范畴。目前通过正向遗传学发现的新基因多数来自于基于遗传作图的基因发掘的方法。这种方法依赖于分子标记作图。大豆中，许多重要的农艺性状，例如大豆的籽粒产量和成分以及抗病性等，受QTL(数量性状位点)的控制。这些复杂的数量性状的表型遗传率低且受环境影响很大，所以传统的育种方法的选择效果甚微。使用分子标记作图的方法对目的基因进行定位实验并且与已知的基因位点比较，可以有效的加快新基因发掘的速度。尽管这种方法存在着作图速度慢、分离群体构建周期长、效率低等问题，但随着大批量永久作图群体的构建以及高通量分子标记技术的快速发展，一些高密度的遗传图谱已构建。
基于遗传作图所发现的新基因还需要图位克隆(mapbased cloning)或其它方法来实现。图位克隆又称为定位克隆(Positional cloning)，首次由剑桥大学Alon等于1986年提出，其根本原理是根据目的基因在染色体上的位置对基因进行克隆，再用遗传转化实验验证目的基因的功能。获得高质量的精细图谱是图位克隆法成功的关键，QTL近等基因系(QTL-NIL)的构建和大规模分离群体的培育，对于数量性状基因的克隆是重要的前提和基础。利用分子标记作图对目的基因定位，再与已知的基因位点进行比较，从而可以加快新基因的发掘。此方法在数量性状位点QTL作图方面取得了突破。至今，利用图位克隆法，中国已标记和定位了一批大豆重要性状基因，例如抗SMV(大豆花叶病毒病)、SCN(抗大豆胞囊线虫病)、耐旱、耐盐等相关基因，产量相关性状、根重、窄叶、育性等相关基因。国外有关大豆重要性状基因的分子标记研究及获得的标记数目相对国内较多。
目前，利用EMS诱变已创造出一大批具有高产、早熟、矮杆、高油、高蛋白、低亚麻酸、高亚油酸、抗病和抗旱/耐盐等的大豆优良突变系，一些突变相关基因用图位克隆方法已被发掘，但是与拟南芥和水稻等模式植物相比，大豆高产及耐逆功能基因研究仍相对滞后，这与大豆基因组信息公布晚；分子标记覆盖度较低，缺乏高精度的遗传图谱；能够用于发掘基因的突变体材料少；获得的与农业性状相关的重要基因数目少及大豆基因功能研究技术平台不健全(缺乏高效率的大豆基因转化体系)有重要关系。基于此，利用大豆EMS诱变筛选抗逆相关突变体，并利用BSA-seq及图位克隆技术发掘干旱胁迫基因具有重要的理论及实践意义。检索发现有关与干旱胁迫相关的菏豆12号GmYLD1基因及其等位突变基因与所述基因在干旱胁迫中的应用还未见报道。
发明内容
针对现有技术的不足，本发明要解决的问题是提供一种通过图位克隆技术在菏豆12号中得到的与干旱胁迫相关的菏豆12号GmYLD1基因及其等位突变基因与所述基因的应用。
本发明所述的与干旱胁迫相关的菏豆12号GmYLD1基因，其特征在于：所述基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。
上述与干旱胁迫相关的菏豆12号GmYLD1基因编码的氨基酸序列，其特征在于：所述氨基酸序列如SEQ ID No.2所示。
本发明还公开了一种与干旱胁迫相关的菏豆12号GmYLD1基因的等位突变基因，其特征在于：所述基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示；其突变表现为SEQ ID NO.1所示的GmYLD1基因核苷酸序列的第一外显子的第1630位碱基由野生型的C变成T。
上述与干旱胁迫相关的菏豆12号GmYLD1基因的等位突变基因编码的氨基酸序列，其特征在于：所述氨基酸序列如SEQ ID No.4所示，是SEQ ID No.2所示的氨基酸序列第543位氨基酸由脯氨酸变成了丝氨酸；植株性状表现为使野生型菏豆12号的抗旱性下降，且叶片颜色变成浅绿色，该突变体命名为gmyld1。
本发明所述与干旱胁迫相关的菏豆12号GmYLD1基因在培育耐旱转基因植物中的应用。
本发明所述与干旱胁迫相关的菏豆12号GmYLD1基因在植物干旱胁迫研究中的应用。
本发明所述与干旱胁迫相关的菏豆12号GmYLD1基因的等位突变基因在植物干旱胁迫研究中的应用。
其中：上述的应用中，所述植物优选拟南芥或大豆。
申请人使用gmyld1与williams82杂交产生的F2代进行图位克隆并结合BSA测序，得到了GmYLD1基因，并通过转基因验证确定了该基因的准确性。实验证实：相比于野生型菏豆12号，GmYLD1基因的等位突变体gmyld1出现了抗旱性下降，叶片黄化等缺陷，该现象对抗旱转基因植物的研究以及等位基因在干旱胁迫中的应用研究有重要意义。
与现有技术相比，本发明的有益效果为：通过EMS诱变得到可稳定遗传突变体gmyld1，发现该GmYLD1基因的一个碱基突变降低了野生型菏豆12号抗旱能力。本发明为大豆菏豆12号抗旱性鉴定、挖掘与作物抗旱相关的基因提供更多的理论依据，对利用基因工程技术改良大豆抗旱性等具有重要意义，解决现在干旱等胁迫环境导致大豆减产等问题。
附图说明
图1为野生型菏豆12植株及其等位突变植株gmyld1的表型对比。
其中：左为野生型菏豆12号，右为突变植株gmyld1。
图2为本发明所述EMS诱变的菏豆12号图位克隆的实际应用流程示意图。
图3为PCR克隆菏豆12号的GmYLD1基因CDS序列电泳图。
其中：M为Marker，1、2、3为GmYLD1基因CDS序列，片段长度3777bp。
图4为野生型菏豆12植株及其等位突变植株gmyld1干旱胁迫存活率，叶片失水率以及叶片相对含水量比对
其中：WT代表野生型菏豆12植株，MT代表其等位突变植株gmyld1。
具体实施方式
下面结合具体附图和实施例对本发明内容进行详细说明。如下所述例子仅是本发明的较佳实施方式而已，应该说明的是，下述说明仅仅是为了解释本发明，并非对本发明作任何形式上的限制，凡是依据本发明的技术实质对实施方式所做的任何简单修改，等同变化与修饰，均属于本发明技术方案的范围内。
下述实施例中，所使用的实验方法，未做具体说明的，均为常规方法，例如可以参考《分子克隆实验指南》(Sambrook和Russell,2001)。
下述实施例中，所使用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。
实施例1EMS诱变的菏豆12号图位克隆的实际应用流程
DNA样品制备(CTAB提取大豆叶片DNA法)
(1)取约0.8g大豆叶片材料加入1.5mL离心管中，加入磁珠，扣盖，迅速置于液氮中预冷，用磨样机将样品打成粉末；
(2)样品打成粉末后，迅速加入1mL 65℃预热的2％CTAB提取液，按照“∞”字形轻柔颠倒混匀，65℃水浴0.5-2h，期间每5min颠倒混匀一次；
(3)12000rpm离心10min，取600μL上清于新的1.5mL离心管中。加入等体积酚/氯仿/异戊醇，按照“∞”字形轻柔颠倒混匀，12000rpm离心10min；
(4)将上清转移至新的1.5mL离心管中，加入等体积氯仿/异戊醇，按照“∞”字形轻柔颠倒混匀，12000rpm离心10min；
(5)取400μL上清至新的干净离心管中，加入-20°预冷的异丙醇400μL，按照“∞”字形轻柔颠倒混匀，-20℃静置30min以上；
(6)4℃，12000rpm，离心10min，弃上清，75％乙醇洗一次，于超净工作台中吹干；
(7)600μL含RNase A双蒸水溶解沉淀，37℃消化15min,依次用等体积的酚/氯仿/异戊醇和氯仿/异戊醇抽提一次；
(8)取400μL上清至新的1.5mL离心管中，加1/10倍体积3M NaAc(pH 5.2)和2倍体积预冷的无水乙醇，-20℃放置30min；
(9)4℃，12000rpm，离心10min，弃上清，75％乙醇洗两次，于超净工作台中吹干；
(10)40μL双蒸水溶解沉淀，保存于-20℃冰箱中备用。
按照以上步骤提取田间生长的野生型菏豆12号10棵,BC1F2代中分离出的野生型植株55棵，叶色黄化型55棵大豆叶片DNA。
分别将上述DNA等量混成3个池，并依次将样品命名为R01(野生型亲本混池)，R02(BC1F2群体中野生型混池)，R03(BC1F2群体中突变型混池)。经电泳及紫外分光光度计法对3个混池的DNA进行检测质量，送贝瑞和康公司进行重测序。
1.1PCR扩增
普通EasyTaq酶进行PCR扩增反应(20μL体系)：
Figure BDA0002305108510000041
Figure BDA0002305108510000051
扩增条件如下：
Figure BDA0002305108510000052
Phusion高保真聚合酶进行巢氏PCR的反应体系(50μL体系)：
Figure BDA0002305108510000053
扩增条件如下：
Figure BDA0002305108510000054
1.2电泳缓冲液配制
30％聚丙烯酰胺母液配方：
Figure BDA0002305108510000061
1.5M Tris-Hcl配方：
Figure BDA0002305108510000062
0.5M Tris-Hcl配方：
Figure BDA0002305108510000063
TEMED(N,N,N,’N’-四甲基乙二胺)：购买于沃恩生物科技公司，4买保存。
10％APS(10％过硫酸铵溶液)配方：
Figure BDA0002305108510000064
Tris-Glycine电泳缓冲液配方：
Figure BDA0002305108510000065
菏豆12号基因型为a带型，Williams82基因型为b带型，F1代杂合体的基因型为h带型，提取gmyld1和Williams 82杂交F1代和F2代群体中分离出的突变植株(即F2代中突变表型植株)DNA作为模板，使用均匀分布在菏豆12号20条染色体上的128个具有多态性的Indel分子标记作为PCR扩增引物，对其进行扩增，然后使用丙烯酰胺凝胶进行电泳分离PCR产物，确定其属于a带型b带型或者h带型。根据公式重组率＝(h+2b)/(a+b+h)*2寻找重组率最低的染色体条带，确定突变位点位于20号染色体上，进一步使用了dCAPS和SSR分子标记作为引物，并继续对F1代和F2代植株进行培育扩大图位克隆群体，利用分离的1564个突变单株作为模板，将突变位点确定为20号染色体8606837位点，其发生了C-T的突变，见图1、图2。
实施例2菏豆12号的GmYLD1基因CDS序列
根据NCBI网站上查到的GmYLD1基因CDS序列设计引物(F：5’-ATGGCTTTTGCTATGGTGG-3’R：5’-TCATATTATCACTTTACCATTTATCTT-3’)。利用CTAB法提取菏豆12号基因组RNA，将提取的基因组总RNA反转成cDNA，用作扩增CDS序列的模板。利用高保真酶Phusion(Takara)，扩增GmYLD1基因CDS序列。
菏豆12号总RNA的提取
(1)适量液氮预冷研钵，将菏豆12号叶片材料放入研钵中，在液氮环境下将样品研磨至呈粉末状；
(2)待液氮挥发完，迅速用预冷过的钥匙取菏豆12号叶片粉末100-200mg转入到1.5mL离心管中(防止样品中RNA降解)，然后快速加入Trizol提取液1mL，涡旋震荡充分混匀，室温静置10min；
(3)4℃，12,000rpm，离心10min，取900μL上清液转移至新的1.5mL离心管中，加入0.2mL氯仿剧烈振荡，混匀后室温静置5min；
(4)4℃，12,000rpm，离心10min，取400μL上清液转移到新的1.5mL离心管中，再加入等体积的异丙醇，上下颠倒次混匀，室温放置15mim；
(5)4℃，12,000rpm，离心10min，弃上清，加入1mL 75％的乙醇洗涤沉淀两次，4℃，8,000rpm，离心5min；
(6)弃上清，将离心管于超净工作台中上干燥5min至RNA呈透明状，加入40μLRNase-Free H2O，60℃，10min，使RNA充分溶解；
(7)用紫外分光光度计测RNA样品的OD值和浓度，A260/A280应该在1.7-2.0的范围内；然后用琼脂糖凝胶电泳对RNA的质量进行检测。
RNA的反转录
RNA的反转录根据Quant qRT-PCR kit(SYBR Green)的说明书进行，混合体系如下：
RNA 2μg
5×gDNA Buffer 2μL
Rnase free ddH2O Add up to 10μL
充分混匀后42℃金属浴放置5min，立即放冰上。
Figure BDA0002305108510000081
将反转录的cDNA置于-20℃冰箱保存。
Phusion高保真聚合酶进行PCR的反应体系(50μL体系)：
Figure BDA0002305108510000082
扩增条件如下：
Figure BDA0002305108510000083
Figure BDA0002305108510000091
Max DNA Polymerase进行Gateway系统基因克隆的一次反应，体系如下：
Figure BDA0002305108510000092
PCR扩增条件如下：
Figure BDA0002305108510000093
在PCR产物两端添加完整的attb接头，反应体系如下：
Figure BDA0002305108510000094
基于Gateway系统的pDONR221载体的构建
Figure BDA0002305108510000095
参见
Figure BDA0002305108510000101
Technology产品说明书(Catalog nos.12535-019和12535-027)。
大肠杆菌的质粒转化(无菌操作)
(1)将上一步中1-5μl pDONR221连接产物加入50μl的大肠杆菌感受态细胞中，轻轻混匀，在冰上放置30min；
(2)42℃水浴热激90sec，立即放置冰上2-3min；
(3)在超净台中加入1ml LB培养基，37℃摇床上培养40-50min；
(4)室温，5000rpm，离心3min；
(5)倒掉LB培养基，将菌涂布于含有相应抗生素的培养平皿上，37℃倒置培养过夜。
大肠杆菌PCR验证
反应体系如下(20μl体系)：
Figure BDA0002305108510000102
扩增条件如下：
Figure BDA0002305108510000103
PCR结束后，反应液于0.8％TAE琼脂糖凝胶电泳检测，Gmyld1基因序列为6494bp，其CDS序列为3777bp，经测序后，保存含有Gmyld1基因CDS序列的pDONR221质粒及相关菌种，可经LR反应连接其他载体用于其他实验。
实施例3等位突变体gmyld1的获得
本实验采用EMS(甲基磺酸乙酯，ethyl methansulfonate，美国Sigma公司生产)诱变的方法，诱变剂的浓度为0.6％，对野生型菏豆12号进行诱变处理。
具体方法：挑选大小一致，饱满，种皮完好的野生型菏豆12号种子5000粒，室温条件下，纯水浸种约4小时，倒掉水分后用0.6％的EMS诱变剂浸种约8小时，加入5％硫代硫酸钠作为终止剂和解毒剂，再用流水冲洗一小时，风干后于田间播种。同期种下野生型菏豆12号的种子作为对照。
经过诱变处理的大豆种子播种后长出的植株即为M1代植株，对M1代植株通常不进行选择。将M1代单株收种，播种后获得M2代群体，从出苗期到成熟期的整个生长周期中，定期对M2代植株进行田间表型调查，得到gmyld1突变体。
实施例4野生型菏豆12植株及其等位突变植株gmyld1干旱胁迫存活率，叶片失水率以及叶片相对含水量比对
大豆叶片失水率测定
取待检测野生型菏豆12号和突变体gmyld1的第一对三出复叶中间的叶子，每种样品取十片叶子，记为一组。将各组样品每隔10min称重一次，称取2～4h内叶片的重量，计算其在一定时间内的失水率变化。
植株失水率计算：植株失水率＝(称重-首重)/首重。
大豆叶片相对含水量检测(RWC％)
将称重后的叶子完全浸没于ddH2O中(为避免叶子浮于水表面可用纱网遮挡一下叶片，使得叶片完全浸润)，置于4℃冰箱放置24h，使叶片充分吸水而处于一种饱和状态。取出叶片称重，记为其饱和鲜重(Tw)。称重后，将叶片迅速置于60℃的恒温培养箱中，烘干48h，取出叶片称重，记为其干重(Dw)。
计算公式为：RWC％＝(Fw-Dw)/(Tw-Dw)x 100％。
在对野生型菏豆12号和突变体gmyld1进行干旱胁迫试验后，经过数据统计分析，发现野生型菏豆12号的存活率为55％，而突变体gmyld1的存活率为33％，同时对野生型菏豆12号和突变体gmyld1进行叶片失水率和相对含水量的测定，发现突变体gmyld1的叶片失水率高于野生型菏豆12号，而相对含水量低于野生型菏豆12号，这表明野生型菏豆12号抗干旱胁迫能力更强。见图4。
序列表
<110>山东大学
<120>与干旱胁迫相关的菏豆12号GmYLD1基因及其等位突变基因与应用
<141> 2019-11-23
<160> 4
<210> 1
<211> 6494
<212> DNA
<213>大豆属大豆（Glycine max.）
<221>与干旱胁迫相关的菏豆12号GmYLD1基因核苷酸序列
<222>（1）…（6494）
<400> 1
gcatttctaa cacattaatt attctcatta ccagaagact gtatcacatt cagcattttg 60
ctaaagtttc agagtattca tacagtttgc taaacaagag aagagatggc ttttgctatg 120
gtgggagagg cacttatctc tgcttctgtg gagatcttgt tggataggat aacttctgcg 180
gagtttcgag atttctttgc caatagaaag ctgaatgttt ctctcttgga cgagctgaag 240
ataaagctgt tggaactcaa tgctgtgctc aatgatgctg aggagaaaca gatcactaat 300
gaagcagtga aggcatggct tgatgagttg aaagatgctg ttctagacgc tgaggatttg 360
ttggacgaaa tcaacacaga ttctctgagg tgcaaggtgg agggacaatg taaaaccttt 420
actagccagg tgtggtcatc actttcttct ccctttaatc aattctataa gagcatgaat 480
tccaagcttg aagcaatatc tagaaggctt gaaaattttc ttaaacggat agatagtctc 540
ggtttgaaaa ttgttgctgg cagagtctct tacagaaaag atacagatcg atcggtggaa 600
tatgtcgttg caagagacga tgacaaaaag aagctgttga gcatgcttct ctctgatgaa 660
gatgagaata ataatcacat acaagtgctg acaatatggg gcatgggagg tcttggaaaa 720
acaacccttg ctcagagcct tttaaatgat gatgcagtgc agaaccattt tgatctcaaa 780
gcttgggcat gggtatctga tccttttgat gtgtttaagg caacaaaggc aattgttgaa 840
tctgccactt ctaaaacttg tgatattact aattttgatg ctcttcgtgt tgaattgaag 900
accaccttta aagataaatt ttttttgctt gtgctcgatg acctttggaa tatgcagtat 960
catgattggg atcaactaat aacccctttt agctgtggga aaaagggaag taaaatcatt 1020
gtgacaaccc gacaacacag aattgcagaa atcactcgta catttcccat tcatgagctg 1080
aagattctta cggatgacaa ctgttggtgt atacttgcta aacatgcatt tggaaatcaa 1140
ggatatgaca aatatccaat cctagcagaa attggtagac aaattgcaac aaaatgcaag 1200
ggtctaccat tagcagccaa aacattggga ggtcttttgc gatcaaatgt tgatgcagag 1260
tattggaaag gaattctgaa cagcaacatg tgggcaaata atgaagtttt accggcttta 1320
tgcataagtt atcttcatct tccaccacat ctgaaaagat gttttgccta ttgctcaatt 1380
tttcctagac aacatttgtt ggataggaag gaattgattc tgttatggat ggctgaaggc 1440
tttcttacac aaatccacgg agagaaagca atggaatcag taggtgaaga ctacttcaat 1500
gaattgttat ctagatcttt aattgaaaaa gacaaaaatg agggaaagga acaacttcga 1560
atgcatgacc ttatttacga tttagccagg ctagtttctg ggaagagatc ttgttacttt 1620
gaaggaggag aagtcccatt aaatgttcgc catttgacat atcgtcaaag agactatgat 1680
gtctctaaaa gatttgaggg cttgtatgag ctgaaggttt tgcgcagctt tttaccactg 1740
tgtggatata aattttttgg ttattgtgta tccaaaaagg tgacccatga ttggctgcca 1800
aaagtaacat atctgcgaac attgtccttg tttggctaca gaaatatcac tgagctgcct 1860
gattcaataa gcaatttggt actattgcgg tatcttgacc tttcccatac ttccatcaaa 1920
agtttgcctg atgcagcctt taggctttac aatttgcaga ctttgaaatt atcaagttgt 1980
tattatctta cggagttgcc tgaacagata ggagatttgt tactcttacg atatcttgac 2040
ctttctcata ctcccatcaa tcggctgcct gaacagatag gaaatttggt caatctatgc 2100
caccttgata ttagaggcac aaatttgtcg gagatgccat cacaaataag caagctacaa 2160
gatctccgtg tgttgacttc ttttgttgta ggcagagaag gtggagtaac tataagagaa 2220
ttaagaaagt ttccttactt gcaaggtacg ctttccattt tgaggctaca aaatgttgtt 2280
gatcccaagg atgctgttca agctgactta aagaagaaag agcacattga ggagcttatg 2340
ctggagtggg gcagtgaacc acaagattca caaattgaga aagatgtact tcagaacctg 2400
caatcgtcga caaatttaaa gaaactcagc ataagctact acagtggcac aagctttcct 2460
aaatggttgg gtgactctac atattctaat gttatagacc ttcgcatcac tgattgcaac 2520
tattgctttt cacttccacc attaggacaa ctaccttctc tcaaggagct tgtgatagga 2580
aggatgaaaa tggtgaagac agttggtgaa gaattctact gcaacaatgg gggttccctt 2640
tcatttcaac catttccatt gttggagagt atccggttca aagagatgtc agagtgggaa 2700
gagtggctac catttgaagg tggaggcaga aaatttcctt ttccttgcct taagcgtttg 2760
agtttatcag aatgccccaa gttgagagga aacttgccca accatctacc ttcattgaca 2820
gaggttagta tatcagagtg caaccagcta gaggcaaaat cacatgatct acattggaac 2880
acatcaattg aagacataaa tattaaagaa gcaggagaag acttgttgtc tttgcttgac 2940
aacttttctt ataggaatct acggattgaa aaatgtgaga gcttgtcatc ttttccaaga 3000
ataatactag ctgccaattg tctccaaagg ttgactcttg tggatatccc caatttgatt 3060
tccttctcag ctgatggctt gccaacgtca ttgcaatcac ttcaaattta caactgtgag 3120
aacttagaat ttctgtctcc cgaatcatgc ctcaaataca tatcacttga atctctggca 3180
atttgcggaa gctgtcattc cctggcgtcc ttaccattag atggtttctc ttccctgcaa 3240
tttcttcgta tcgaggaatg tcccaacatg gaagcaatta ctactcatgg tggaacgaat 3300
gctctccaat taactacact tactgtttgg aattgtaaga aacttaggtc acttccagag 3360
cagattgatc ttcctgccct ttgtcggtta taccttaatg ggcttccaga gctaacatca 3420
ttgcccccaa ggtgtttgcc ttccagttta caaacacttg aagttgatgt tggaatgcta 3480
tcatcgatgt ctaaacacga gttaggtttc ttattccaac gcctcacttc tctgtttcgt 3540
ctttccattg ctggttttgg ggaggaagat gttgttaaca ccctgttgaa ggagtgctta 3600
ctgcccactt ccctgcaata tctgtcccta cgatttttag atgatttaaa gttgttggaa 3660
ggaaaagggc ttcaacatct cacttccctc acagagcttg ccatctggca ttgtaaaagc 3720
ctagagtcct tgcccgaaga tcagcttcca tcctctcttg aattactgga gataggtagt 3780
tgtcctttac tagaagcaag gtatcaaagt cggaaaggga aacactggtc taagattgct 3840
cacattcctg ctatcaagat aaatggtaaa gtgataatat gaccctgtgg catgagtagg 3900
aaccatccag aaggtaaaat aaggcttcaa ttattttgag aatgtatagt gttaatgctt 3960
tttttttttt tagcagtggt aatttgcatc atggggttta attttatttg acatttaaat 4020
aagctaaaat gggtttaatt gaatgaatag tactgagaag ccatttatta aattttgtga 4080
attgttaaga gttgtccaag agttttgttt tttggaagga ttgtccaaga gttggactat 4140
aaagtcacat tttaatcttt tacttatgac aatgtgtcgt gtggttccta tttctataag 4200
ttagagatta aaaggagacg atttttctga aaaataggaa ctacaattta catttttcaa 4260
aaaacagagg gaataaaatt agatgagtca ttttttaaat actaaacatg aacatttcta 4320
tatttatata tttaaccctt ttataatttt tgaaagcttc agggatttat tttccaactt 4380
ggcacatgtt taaataatta aaccttctat ttatataaag gttgatactt tatattgtct 4440
taaagttatg tggtttctta atttatattg ttgttggtat agtggagtat aaaaacgttt 4500
ttatattttg tttaaatttg ctttcatttg ttaaaaggat acattttaat atgtttgatt 4560
agagattgcc tttacacagg atattagttc tttggtgttt actagtagat gctgagtggt 4620
gtaattggtg tgatggatta ttgaggcaaa ttaatgttaa ggaagtaaaa tgatggaatt 4680
catctttcta atctattttt cttttttgaa aaaaaaaata gaaattccat caaatgttct 4740
gtttacaaac tcaaatggta gataatattg attgttgtct atgctagaat ctggaacttg 4800
ttttggatta ttacagtgtt gcacaattct tattgataat attgatttgg aaatgttgat 4860
acagatggtt gctgaggtcc cgggtgtgca atatttgctg accatttcag tcaagttgtc 4920
acttttgttt cttcaccagt ggatggtttc tattgaatca tctgaaccca acactagaaa 4980
tttcctctat aacatttgta cttggtacaa attaacctgt tgtctattga tgtttttttt 5040
ttaatgtttt tgataagcaa aagatatttt attgttgtgg tttgttgatg ttgatgttct 5100
attagctgga tgatgattga tatttgatac ctattttttc tttgtattaa attttaagtt 5160
aaccctgttc atttgtcctt attttctcca agttgaataa ttatttcaaa atgttttgat 5220
tacagtgcaa gcttgcaagt gaatgaagtg ataggttgat gttttttact gctgcatttg 5280
gctttttggt ctaaccttgc taattccata gtcttggagc ttacatggtt aaatatttca 5340
gattaagtta ttgtttaaaa ctttcaaaaa ataaaaagaa tatagttaga gggaaacaat 5400
gtcaatgagt tagattataa aatctagttt ttgacttaat aaaaaacaat gaataaaaga 5460
gtaacaaatt aagcatatat ttatgataca agaaaaaaat atgcaaaaag gtagtttgta 5520
gctcctttca aaattaatat catctcgctt tttggcatta gaatcttcac ttaattgtgg 5580
tatcaaattc ttttgatatt ggccatctaa ttctttgatt ttttttttgg tgctataatc 5640
tacttgatta cacaaggagt attctcaagt agtctttgca cttcctcttc cacattaata 5700
ctcactcctt aatttcgtac aacataactt ttacaaggac aaaccatatt aaacaatgtt 5760
gaataaccca actaatttag cacagaatat tgtatgaaca aattgttcat agtttcatac 5820
tagcaagttg ttaacagaac ctcaattaat agtatttttt gtggattttt cttggattca 5880
attgtaatct tagttgtatt tttcattcta tcagttgatt tttcttggat tcaatatggt 5940
aacaaaccat tgcttataga agaaacgttc ctctagctgg ctaccaaatc acacttctcc 6000
atcaggacaa tcttctttgg gtaccaatcc ctaacaataa aaacaagtta agcacgactg 6060
atagagtatg cttatgtttc ctaaattaga ggccaggaac tacctccaaa attaaggtaa 6120
gaagctagaa tttctgaaat ttctcattgt cttcctctta ttcattacat gtatatgtat 6180
ttatagctag tgaaatagaa aggatagcta ctaatcctaa cggcctcacc agcactaagg 6240
ggaacaagcc ataaccgaat ggatagtcga gggggacaag cactacaatc actacagagg 6300
ataattccta taccaccctt ttgctaacag actgggtagt tgcagaagga acttagtgga 6360
tgaactcctc ccgtcctgag ggcttcttca tgattcttct cggccttgag gtgctatcaa 6420
cgacagttaa ttttgctctt ataatttcaa atgttaatta tggtgtttta ctagataaca 6480
aaatttgaat tgga 6494
<210> 2
<211> 1258
<212> PRT
<213> 人工序列
<221> 与干旱胁迫相关的菏豆12号GmYLD1基因编码的氨基酸序列
<222>（1）…（1258）
<400> 2
MAFAMVGEAL ISASVEILLD RITSAEFRDF FANRKLNVSL LDELKIKLLE LNAVLNDAEE 60
KQITNEAVKA WLDELKDAVL DAEDLLDEIN TDSLRCKVEG QCKTFTSQVW SSLSSPFNQF 120
YKSMNSKLEA ISRRLENFLK RIDSLGLKIV AGRVSYRKDT DRSVEYVVAR DDDKKKLLSM 180
LLSDEDENNN HIQVLTIWGM GGLGKTTLAQ SLLNDDAVQN HFDLKAWAWV SDPFDVFKAT 240
KAIVESATSK TCDITNFDAL RVELKTTFKD KFFLLVLDDL WNMQYHDWDQ LITPFSCGKK 300
GSKIIVTTRQ HRIAEITRTF PIHELKILTD DNCWCILAKH AFGNQGYDKY PILAEIGRQI 360
ATKCKGLPLA AKTLGGLLRS NVDAEYWKGI LNSNMWANNE VLPALCISYL HLPPHLKRCF 420
AYCSIFPRQH LLDRKELILL WMAEGFLTQI HGEKAMESVG EDYFNELLSR SLIEKDKNEG 480
KEQLRMHDLI YDLARLVSGK RSCYFEGGEV PLNVRHLTYR QRDYDVSKRF EGLYELKVLR 540
SFLPLCGYKF FGYCVSKKVT HDWLPKVTYL RTLSLFGYRN ITELPDSISN LVLLRYLDLS 600
HTSIKSLPDA AFRLYNLQTL KLSSCYYLTE LPEQIGDLLL LRYLDLSHTP INRLPEQIGN 660
LVNLCHLDIR GTNLSEMPSQ ISKLQDLRVL TSFVVGREGG VTIRELRKFP YLQGTLSILR 720
LQNVVDPKDA VQADLKKKEH IEELMLEWGS EPQDSQIEKD VLQNLQSSTN LKKLSISYYS 780
GTSFPKWLGD STYSNVIDLR ITDCNYCFSL PPLGQLPSLK ELVIGRMKMV KTVGEEFYCN 840
NGGSLSFQPF PLLESIRFKE MSEWEEWLPF EGGGRKFPFP CLKRLSLSEC PKLRGNLPNH 900
LPSLTEVSIS ECNQLEAKSH DLHWNTSIED INIKEAGEDL LSLLDNFSYR NLRIEKCESL 960
SSFPRIILAA NCLQRLTLVD IPNLISFSAD GLPTSLQSLQ IYNCENLEFL SPESCLKYIS 1020
LESLAICGSC HSLASLPLDG FSSLQFLRIE ECPNMEAITT HGGTNALQLT TLTVWNCKKL 1080
RSLPEQIDLP ALCRLYLNGL PELTSLPPRC LPSSLQTLEV DVGMLSSMSK HELGFLFQRL 1140
TSLFRLSIAG FGEEDVVNTL LKECLLPTSL QYLSLRFLDD LKLLEGKGLQ HLTSLTELAI 1200
WHCKSLESLP EDQLPSSLEL LEIGSCPLLE ARYQSRKGKH WSKIAHIPAI KINGKVII 1258
<210> 3
<211> 6494
<212> DNA
<213>大豆属大豆（Glycine max.）
<221>与干旱胁迫相关的菏豆12号GmYLD1基因的等位突变基因核苷酸序列
<222>（1）…（6494）
<400> 3
gcatttctaa cacattaatt attctcatta ccagaagact gtatcacatt cagcattttg 60
ctaaagtttc agagtattca tacagtttgc taaacaagag aagagatggc ttttgctatg 120
gtgggagagg cacttatctc tgcttctgtg gagatcttgt tggataggat aacttctgcg 180
gagtttcgag atttctttgc caatagaaag ctgaatgttt ctctcttgga cgagctgaag 240
ataaagctgt tggaactcaa tgctgtgctc aatgatgctg aggagaaaca gatcactaat 300
gaagcagtga aggcatggct tgatgagttg aaagatgctg ttctagacgc tgaggatttg 360
ttggacgaaa tcaacacaga ttctctgagg tgcaaggtgg agggacaatg taaaaccttt 420
actagccagg tgtggtcatc actttcttct ccctttaatc aattctataa gagcatgaat 480
tccaagcttg aagcaatatc tagaaggctt gaaaattttc ttaaacggat agatagtctc 540
ggtttgaaaa ttgttgctgg cagagtctct tacagaaaag atacagatcg atcggtggaa 600
tatgtcgttg caagagacga tgacaaaaag aagctgttga gcatgcttct ctctgatgaa 660
gatgagaata ataatcacat acaagtgctg acaatatggg gcatgggagg tcttggaaaa 720
acaacccttg ctcagagcct tttaaatgat gatgcagtgc agaaccattt tgatctcaaa 780
gcttgggcat gggtatctga tccttttgat gtgtttaagg caacaaaggc aattgttgaa 840
tctgccactt ctaaaacttg tgatattact aattttgatg ctcttcgtgt tgaattgaag 900
accaccttta aagataaatt ttttttgctt gtgctcgatg acctttggaa tatgcagtat 960
catgattggg atcaactaat aacccctttt agctgtggga aaaagggaag taaaatcatt 1020
gtgacaaccc gacaacacag aattgcagaa atcactcgta catttcccat tcatgagctg 1080
aagattctta cggatgacaa ctgttggtgt atacttgcta aacatgcatt tggaaatcaa 1140
ggatatgaca aatatccaat cctagcagaa attggtagac aaattgcaac aaaatgcaag 1200
ggtctaccat tagcagccaa aacattggga ggtcttttgc gatcaaatgt tgatgcagag 1260
tattggaaag gaattctgaa cagcaacatg tgggcaaata atgaagtttt accggcttta 1320
tgcataagtt atcttcatct tccaccacat ctgaaaagat gttttgccta ttgctcaatt 1380
tttcctagac aacatttgtt ggataggaag gaattgattc tgttatggat ggctgaaggc 1440
tttcttacac aaatccacgg agagaaagca atggaatcag taggtgaaga ctacttcaat 1500
gaattgttat ctagatcttt aattgaaaaa gacaaaaatg agggaaagga acaacttcga 1560
atgcatgacc ttatttacga tttagccagg ctagtttctg ggaagagatc ttgttacttt 1620
gaaggaggag aagtcccatt aaatgttcgc catttgacat atcgtcaaag agactatgat 1680
gtctctaaaa gatttgaggg cttgtatgag ctgaaggttt tgcgcagctt tttatcactg 1740
tgtggatata aattttttgg ttattgtgta tccaaaaagg tgacccatga ttggctgcca 1800
aaagtaacat atctgcgaac attgtccttg tttggctaca gaaatatcac tgagctgcct 1860
gattcaataa gcaatttggt actattgcgg tatcttgacc tttcccatac ttccatcaaa 1920
agtttgcctg atgcagcctt taggctttac aatttgcaga ctttgaaatt atcaagttgt 1980
tattatctta cggagttgcc tgaacagata ggagatttgt tactcttacg atatcttgac 2040
ctttctcata ctcccatcaa tcggctgcct gaacagatag gaaatttggt caatctatgc 2100
caccttgata ttagaggcac aaatttgtcg gagatgccat cacaaataag caagctacaa 2160
gatctccgtg tgttgacttc ttttgttgta ggcagagaag gtggagtaac tataagagaa 2220
ttaagaaagt ttccttactt gcaaggtacg ctttccattt tgaggctaca aaatgttgtt 2280
gatcccaagg atgctgttca agctgactta aagaagaaag agcacattga ggagcttatg 2340
ctggagtggg gcagtgaacc acaagattca caaattgaga aagatgtact tcagaacctg 2400
caatcgtcga caaatttaaa gaaactcagc ataagctact acagtggcac aagctttcct 2460
aaatggttgg gtgactctac atattctaat gttatagacc ttcgcatcac tgattgcaac 2520
tattgctttt cacttccacc attaggacaa ctaccttctc tcaaggagct tgtgatagga 2580
aggatgaaaa tggtgaagac agttggtgaa gaattctact gcaacaatgg gggttccctt 2640
tcatttcaac catttccatt gttggagagt atccggttca aagagatgtc agagtgggaa 2700
gagtggctac catttgaagg tggaggcaga aaatttcctt ttccttgcct taagcgtttg 2760
agtttatcag aatgccccaa gttgagagga aacttgccca accatctacc ttcattgaca 2820
gaggttagta tatcagagtg caaccagcta gaggcaaaat cacatgatct acattggaac 2880
acatcaattg aagacataaa tattaaagaa gcaggagaag acttgttgtc tttgcttgac 2940
aacttttctt ataggaatct acggattgaa aaatgtgaga gcttgtcatc ttttccaaga 3000
ataatactag ctgccaattg tctccaaagg ttgactcttg tggatatccc caatttgatt 3060
tccttctcag ctgatggctt gccaacgtca ttgcaatcac ttcaaattta caactgtgag 3120
aacttagaat ttctgtctcc cgaatcatgc ctcaaataca tatcacttga atctctggca 3180
atttgcggaa gctgtcattc cctggcgtcc ttaccattag atggtttctc ttccctgcaa 3240
tttcttcgta tcgaggaatg tcccaacatg gaagcaatta ctactcatgg tggaacgaat 3300
gctctccaat taactacact tactgtttgg aattgtaaga aacttaggtc acttccagag 3360
cagattgatc ttcctgccct ttgtcggtta taccttaatg ggcttccaga gctaacatca 3420
ttgcccccaa ggtgtttgcc ttccagttta caaacacttg aagttgatgt tggaatgcta 3480
tcatcgatgt ctaaacacga gttaggtttc ttattccaac gcctcacttc tctgtttcgt 3540
ctttccattg ctggttttgg ggaggaagat gttgttaaca ccctgttgaa ggagtgctta 3600
ctgcccactt ccctgcaata tctgtcccta cgatttttag atgatttaaa gttgttggaa 3660
ggaaaagggc ttcaacatct cacttccctc acagagcttg ccatctggca ttgtaaaagc 3720
ctagagtcct tgcccgaaga tcagcttcca tcctctcttg aattactgga gataggtagt 3780
tgtcctttac tagaagcaag gtatcaaagt cggaaaggga aacactggtc taagattgct 3840
cacattcctg ctatcaagat aaatggtaaa gtgataatat gaccctgtgg catgagtagg 3900
aaccatccag aaggtaaaat aaggcttcaa ttattttgag aatgtatagt gttaatgctt 3960
tttttttttt tagcagtggt aatttgcatc atggggttta attttatttg acatttaaat 4020
aagctaaaat gggtttaatt gaatgaatag tactgagaag ccatttatta aattttgtga 4080
attgttaaga gttgtccaag agttttgttt tttggaagga ttgtccaaga gttggactat 4140
aaagtcacat tttaatcttt tacttatgac aatgtgtcgt gtggttccta tttctataag 4200
ttagagatta aaaggagacg atttttctga aaaataggaa ctacaattta catttttcaa 4260
aaaacagagg gaataaaatt agatgagtca ttttttaaat actaaacatg aacatttcta 4320
tatttatata tttaaccctt ttataatttt tgaaagcttc agggatttat tttccaactt 4380
ggcacatgtt taaataatta aaccttctat ttatataaag gttgatactt tatattgtct 4440
taaagttatg tggtttctta atttatattg ttgttggtat agtggagtat aaaaacgttt 4500
ttatattttg tttaaatttg ctttcatttg ttaaaaggat acattttaat atgtttgatt 4560
agagattgcc tttacacagg atattagttc tttggtgttt actagtagat gctgagtggt 4620
gtaattggtg tgatggatta ttgaggcaaa ttaatgttaa ggaagtaaaa tgatggaatt 4680
catctttcta atctattttt cttttttgaa aaaaaaaata gaaattccat caaatgttct 4740
gtttacaaac tcaaatggta gataatattg attgttgtct atgctagaat ctggaacttg 4800
ttttggatta ttacagtgtt gcacaattct tattgataat attgatttgg aaatgttgat 4860
acagatggtt gctgaggtcc cgggtgtgca atatttgctg accatttcag tcaagttgtc 4920
acttttgttt cttcaccagt ggatggtttc tattgaatca tctgaaccca acactagaaa 4980
tttcctctat aacatttgta cttggtacaa attaacctgt tgtctattga tgtttttttt 5040
ttaatgtttt tgataagcaa aagatatttt attgttgtgg tttgttgatg ttgatgttct 5100
attagctgga tgatgattga tatttgatac ctattttttc tttgtattaa attttaagtt 5160
aaccctgttc atttgtcctt attttctcca agttgaataa ttatttcaaa atgttttgat 5220
tacagtgcaa gcttgcaagt gaatgaagtg ataggttgat gttttttact gctgcatttg 5280
gctttttggt ctaaccttgc taattccata gtcttggagc ttacatggtt aaatatttca 5340
gattaagtta ttgtttaaaa ctttcaaaaa ataaaaagaa tatagttaga gggaaacaat 5400
gtcaatgagt tagattataa aatctagttt ttgacttaat aaaaaacaat gaataaaaga 5460
gtaacaaatt aagcatatat ttatgataca agaaaaaaat atgcaaaaag gtagtttgta 5520
gctcctttca aaattaatat catctcgctt tttggcatta gaatcttcac ttaattgtgg 5580
tatcaaattc ttttgatatt ggccatctaa ttctttgatt ttttttttgg tgctataatc 5640
tacttgatta cacaaggagt attctcaagt agtctttgca cttcctcttc cacattaata 5700
ctcactcctt aatttcgtac aacataactt ttacaaggac aaaccatatt aaacaatgtt 5760
gaataaccca actaatttag cacagaatat tgtatgaaca aattgttcat agtttcatac 5820
tagcaagttg ttaacagaac ctcaattaat agtatttttt gtggattttt cttggattca 5880
attgtaatct tagttgtatt tttcattcta tcagttgatt tttcttggat tcaatatggt 5940
aacaaaccat tgcttataga agaaacgttc ctctagctgg ctaccaaatc acacttctcc 6000
atcaggacaa tcttctttgg gtaccaatcc ctaacaataa aaacaagtta agcacgactg 6060
atagagtatg cttatgtttc ctaaattaga ggccaggaac tacctccaaa attaaggtaa 6120
gaagctagaa tttctgaaat ttctcattgt cttcctctta ttcattacat gtatatgtat 6180
ttatagctag tgaaatagaa aggatagcta ctaatcctaa cggcctcacc agcactaagg 6240
ggaacaagcc ataaccgaat ggatagtcga gggggacaag cactacaatc actacagagg 6300
ataattccta taccaccctt ttgctaacag actgggtagt tgcagaagga acttagtgga 6360
tgaactcctc ccgtcctgag ggcttcttca tgattcttct cggccttgag gtgctatcaa 6420
cgacagttaa ttttgctctt ataatttcaa atgttaatta tggtgtttta ctagataaca 6480
aaatttgaat tgga 6494
<210> 4
<211> 1258
<212> PRT
<213> 人工序列
<221> 与干旱胁迫相关的菏豆12号GmYLD1基因的等位突变基因编码的氨基酸序列
<222>（1）…（1258）
<400> 4
MAFAMVGEAL ISASVEILLD RITSAEFRDF FANRKLNVSL LDELKIKLLE LNAVLNDAEE 60
KQITNEAVKA WLDELKDAVL DAEDLLDEIN TDSLRCKVEG QCKTFTSQVW SSLSSPFNQF 120
YKSMNSKLEA ISRRLENFLK RIDSLGLKIV AGRVSYRKDT DRSVEYVVAR DDDKKKLLSM 180
LLSDEDENNN HIQVLTIWGM GGLGKTTLAQ SLLNDDAVQN HFDLKAWAWV SDPFDVFKAT 240
KAIVESATSK TCDITNFDAL RVELKTTFKD KFFLLVLDDL WNMQYHDWDQ LITPFSCGKK 300
GSKIIVTTRQ HRIAEITRTF PIHELKILTD DNCWCILAKH AFGNQGYDKY PILAEIGRQI 360
ATKCKGLPLA AKTLGGLLRS NVDAEYWKGI LNSNMWANNE VLPALCISYL HLPPHLKRCF 420
AYCSIFPRQH LLDRKELILL WMAEGFLTQI HGEKAMESVG EDYFNELLSR SLIEKDKNEG 480
KEQLRMHDLI YDLARLVSGK RSCYFEGGEV PLNVRHLTYR QRDYDVSKRF EGLYELKVLR 540
SFLSLCGYKF FGYCVSKKVT HDWLPKVTYL RTLSLFGYRN ITELPDSISN LVLLRYLDLS 600
HTSIKSLPDA AFRLYNLQTL KLSSCYYLTE LPEQIGDLLL LRYLDLSHTP INRLPEQIGN 660
LVNLCHLDIR GTNLSEMPSQ ISKLQDLRVL TSFVVGREGG VTIRELRKFP YLQGTLSILR 720
LQNVVDPKDA VQADLKKKEH IEELMLEWGS EPQDSQIEKD VLQNLQSSTN LKKLSISYYS 780
GTSFPKWLGD STYSNVIDLR ITDCNYCFSL PPLGQLPSLK ELVIGRMKMV KTVGEEFYCN 840
NGGSLSFQPF PLLESIRFKE MSEWEEWLPF EGGGRKFPFP CLKRLSLSEC PKLRGNLPNH 900
LPSLTEVSIS ECNQLEAKSH DLHWNTSIED INIKEAGEDL LSLLDNFSYR NLRIEKCESL 960
SSFPRIILAA NCLQRLTLVD IPNLISFSAD GLPTSLQSLQ IYNCENLEFL SPESCLKYIS 1020
LESLAICGSC HSLASLPLDG FSSLQFLRIE ECPNMEAITT HGGTNALQLT TLTVWNCKKL 1080
RSLPEQIDLP ALCRLYLNGL PELTSLPPRC LPSSLQTLEV DVGMLSSMSK HELGFLFQRL 1140
TSLFRLSIAG FGEEDVVNTL LKECLLPTSL QYLSLRFLDD LKLLEGKGLQ HLTSLTELAI 1200
WHCKSLESLP EDQLPSSLEL LEIGSCPLLE ARYQSRKGKH WSKIAHIPAI KINGKVII 1258

Claims (8)

1.一种与干旱胁迫相关的菏豆12号GmYLD1基因，其特征在于：所述基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。
2.权利要求1所述与干旱胁迫相关的菏豆12号GmYLD1基因编码的氨基酸序列，其特征在于：所述氨基酸序列如SEQ ID No.2所示。
3.一种与干旱胁迫相关的菏豆12号GmYLD1基因的等位突变基因，其特征在于：所述基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示；其突变表现为SEQ ID NO.1所示的GmYLD1基因核苷酸序列的第一外显子的第1630位碱基由野生型的C变成T。
4.权利要求3所述与干旱胁迫相关的菏豆12号GmYLD1基因的等位突变基因编码的氨基酸序列，其特征在于：所述氨基酸序列如SEQ ID No.4所示，是SEQ ID No.2所示的氨基酸序列第543位氨基酸由脯氨酸变成了丝氨酸；植株性状表现为使野生型菏豆12号的抗旱性下降，且叶片颜色变成浅绿色，该突变体命名为gmyld1。
5.权利要求1所述与干旱胁迫相关的菏豆12号GmYLD1基因在培育耐旱转基因植物中的应用。
6.权利要求1所述与干旱胁迫相关的菏豆12号GmYLD1基因在植物干旱胁迫研究中的应用。
7.权利要求3所述与干旱胁迫相关的菏豆12号GmYLD1基因的等位突变基因在植物干旱胁迫研究中的应用。
8.根据权利要求5、6或7所述的应用，其特征在于：所述植物是拟南芥或大豆。
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