CN110741938A - 一种促进构树组织苗营养物质积累的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种促进构树组织苗营养物质积累的方法,以构树嫩茎为外植体,利用其专用LED光源及增殖光配方,成功建立了一个构树组织培养高效再生体系,为构树工厂化育苗提供了一种可参照的技术和方法,同时为开展工厂化育苗奠定了基础。采用本发明组织培养方法,构树杂种无性系30天增殖倍数达到6~8倍,与传统光源培养方法相比,增殖倍数提高了2~3倍,叶片中粗蛋白含量增加了85%~90%,全磷含量增加了100%~130%,全钾含量增加了100%~128%,纤维素降低了8%~15%,提高了叶片的营养物质含量和饲用品质。
Description
技术领域
本发明涉及生物技术和农业工程领域,具体涉及一种促进构树组织苗营养物质积累的方法。
背景技术
构树(Broussonetia papyrifera(L.)vent)为桑科(Moraceae)构树属(Broussonetia)落叶乔木。构树适应性强,分布广泛,耐干旱贫瘠,耐盐碱,是困难立地造林的先锋树种;作为新型的木本饲料,其蛋白质含量高,钙、铁、硒等元素丰富且均衡,适口性好,畜禽喜食。构树常规播种和扦插繁殖效率低,随着市场对种苗需求量的激增,组培快繁已成为获取构树优质种苗的主要途径。目前对构树组培快繁的研究多集中在取材部位、培养基种类、激素水平等培养条件的选择上,但通常以白色荧光灯作为光源,因其光谱能量分布不符合植株需求,生物能效极低且存在增殖系数低、难生根等问题。
植物组织培养过程中幼苗形态建成与生理生化变化受到诸多环境因子(光照、温度、湿度等)的影响,其中,光对植物细胞、组织、器官的生长和分化有着极其重要的作用,影响着植物生长发育的整个过程。传统组培光源主要是多峰值谱线的白色荧光灯,由于缺乏单色光光源,光调控组培植物生长发育的研究大多集中在光强和光周期。发光二极管(light-emitting diodes,LED)诞生于20世纪60年代,波谱宽度小于±30nm,可根据需要获取特定峰值的纯正单色光或复合光谱,为光质生物学研究提供了极大的便利性和精确性。近年来国内外学者围绕LED在植物组织培养领域的应用开展了广泛研究,对蝴蝶兰、棉花(Gossypium hirsutum)、红掌(Anthurium andreanum)、兰花、地被菊(Chrysanthemummorifolium)、葡萄(Vitis vinifera)、草莓等植物研究的结果表明,LED光质对组培植物的生长发育具有显著影响,且不同植物在组织培养各阶段对光质的反应也不同。因此,了解构树组织培养对光质的需求并获得精细的LED光质配方,对提高构树组培效率和品质具有重要意义。
发明内容
本发明的目的是为构树的繁育提供一种能够促进构树组织苗营养物质积累的方法,提供了构树组培苗增殖和营养物质积累的光配方。
为实现上述目的,本发明提供的技术方案是:
一种促进构树组织苗营养物质积累的方法,其培养步骤如下:
(1)选材及消毒处理:选取生长健壮、无病虫害的1~2年生构树枝条,摘除老叶,置于室温下水培7天,每天换水1次;以新长出的嫩茎作为外植体,然后将所选取的外植体剪切成2~4cm长的带芽茎段;经酒精、升汞消毒,最后用无菌水冲洗;
(2)组培苗培养:在超净工作台上,在无菌条件下,将步骤(1)中消毒处理后的外植体剪去接触消毒液的伤口部位,留1~2cm带芽茎段接种在含有诱导培养基的培养瓶中,将其置于白色荧光灯为光源的环境下,控制光量40μmol·m-2·s-1,设定光照时间12h·d-1,温度25±1℃,培养15天,长成6~8cm的无菌组培苗;
(3)增殖培养:将步骤(2)中长成的组培苗,剪切成长度为1.5~2.0cm带有1~2个腋芽的茎段,转接到增殖培养基中进行增殖培养,置于LED光源下培养,控制光量40μmol·m-2·s-1,设定光照时间12h·d-1,温度25±1℃,在该培养基中获得健壮的增殖苗,一个周期30天的繁殖倍数为6~8倍;
所述的诱导培养基为:MS+0.1mg·L-1 6-苄基腺嘌呤(6-BA)+0.1mg·L-1赤霉素(GA3)+蔗糖40g·L-1+琼脂6g·L-1,pH值为5.8;
所述的增殖培养基为:MS+0.1mg·L-1萘乙酸(NAA)+0.2mg·L-1吲哚丁酸(IBA)+蔗糖40g·L-1+琼脂6g·L-1,pH值为5.8。
步骤(1)中的带芽茎段为带有顶芽或腋芽的长度2~4cm的茎段。
步骤(1)中,经70%的酒精消毒30~40s,再用0.1%的升汞消毒5分钟,最后用无菌水冲洗5次。
MS基本培养基由常量元素、微量元素、铁盐和有机成分组成。
步骤(3)中,LED光质条件为:峰值波长390/nm,波长半宽20/nm的紫光。
所述MS基本培养基中:
所述的常量元素为:KNO3 1900mg/L、NH4NO3 1650mg/L、KH2PO4 170mg/L、MgSO4·7H2O 370mg/L、CaCl2·2H2O 440mg/L;
所述的微量元素为:KI 0.83mg/L、H3BO3 6.2mg/L、MnSO4·H2O 22.3mg/L、ZnSO4·7H2O 8.6mg/L、Na2MoO4·2H2O 0.25mg/L、CuSO4·5H2O 0.025mg/L、CoCl2.6 H2O0.025mg/L;
所述的铁盐为:Na2·EDTA 37.3mg/L、FeSO4·7H2O 27.8mg/L;
所述的有机成分为:肌醇100mg/L、甘氨酸2mg/L、盐酸硫胺素VB1 0.1mg/L、盐酸吡哆醇VB6 0.5mg/L、烟酸VB5 0.5mg/L。
与现有技术相比,本发明的有益效果是:
本发明以构树嫩茎为外植体,利用LED光源及增殖光配方,建立一个构树组织培养高效再生体系,为构树工厂化育苗提供了一种可参照的技术和方法,同时为开展工厂化育苗奠定了基础。
本发明具有以下优点:
1、繁殖效率高:采用本发明组织培养方法,构树杂种无性系30天增殖倍数达到6~8倍,与常规的组织培养方法相比,增殖倍数提高了2~3倍。
2、营养物质含量高:相比传统荧光灯光源,采用此方法中LED光源培养显著提高了叶片的营养含量和饲用品质,粗蛋白含量增加了85%~90%,全磷含量增加了100%~130%,全钾含量增加了100%~128%,纤维素降低了8%~15%。
3、节能:LED是新型的高效节能光源,在植物组织培养中用LED作为光源,能形成与植物光合作用与形态建成基本吻合的光谱,光能利用效率达80%~90%,节能效果极为显著。
综上所述:本发明的构树组织培养方法具有繁殖系数高、节能、营养物质含量高等优点,在构树苗木生产及科研中均具有重要的应用价值。
附图说明
图1为实施例1获得的增殖苗。
图2为实施例2获得的增殖苗。
图3为实施例3获得的增殖苗。
图4为实施例4获得的增殖苗。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明作进一步说明。
实施例1
基本培养基的配置:
基本培养基为MS培养基,其中,常量元素的组分和其对应的使用浓度如下;KNO31900mg/L、NH4NO3 1650mg/L、KH2PO4 170mg/L、MgSO4·7H2O 370mg/L、CaCl2·2H2O 440mg/L;
微量元素的组分和其对应的使用浓度如下:KI 0.83mg/L、H3BO3 6.2mg/L、MnSO4·H2O22.3mg/L、ZnSO4·7H2O 8.6mg/L、Na2MoO4·2H2O 0.25mg/L、CuSO4·5H2O 0.025mg/L、CoCl2.6 H2O 0.025mg/L;
铁盐的组分和其对应的使用浓度如下:Na2·EDTA 37.3mg/L、FeSO4·7H2O27.8mg/L;
有机成分的组分和其对应的浓度如下:肌醇100mg/L、甘氨酸2mg/L、盐酸硫胺素VB1 0.1mg/L、盐酸吡哆醇VB6 0.5mg/L、烟酸VB5 0.5mg/L。
利用上述的基本培养基配置诱导培养基、增殖(生根)培养基。
其中,诱导培养基:每升基本培养基+0.1mg 6-苄基腺嘌呤(6-BA)+0.1mg赤霉素(GA3)+40g蔗糖+6g琼脂,pH值为5.8;
增殖培养基:每升基本培养基+0.1mg·L-1萘乙酸(NAA)+0.2mg·L-1吲哚丁酸(IBA)+40g蔗糖+6g琼脂,pH值为5.8;
将上述配置好的培养基注入玻璃瓶中,经高温高压消毒20分钟,待用,其中,温度为120-125℃,压力为1.1KG/CM2。
构树组织培养快繁方法,按以下步骤进行:
(1)选材及消毒处理:选取生长健壮、无病虫害的1~2年生构树枝条,摘除老叶,置于室温下水培7天,每天换水1次,以新长出的嫩茎作为外植体,然后将所选取的外植体剪切成2~4cm长的小段,经70%的酒精消毒35s,再用0.1%的升汞消毒5分钟,最后用无菌水冲洗5次。
(2)组培苗培养:在超净工作台上和无菌条件下,将步骤(1)中消毒处理后的外植体剪去接触消毒液的伤口部位,留1~2cm带芽茎段接种在含有诱导培养基的培养瓶中,然后将其置于白色荧光灯灯为光源的环境下,控制光量40μmol·m-2·s-1,设定光照时间12h·d-1,温度(25±1)℃,培养15天,长成6~8cm的无菌组培苗;
(3)增殖培养:将步骤(2)中长成的组培苗,剪切成长度为1.5~2.0cm带有1~2个腋芽的茎段,转接到增殖培养基中进行增殖培养,置于LED光源下培养,控制光量40μmol·m-2·s-1,光质条件为峰值波长390/nm,波长半宽20/nm的紫光,设定光照时间12h·d-1,温度(25±1)℃,培养30天。
(4)营养物质含量检测:将步骤(3)中长成的组培苗取出,清水洗净擦干,测定植株鲜重、干重、叶片中粗蛋白(凯氏定氮法/流动分析仪测定)、全磷(钼锑抗比色法测定)、全钾(火焰光度计法测定)、纤维素(硫酸提取蒽酮比色法测定)、灰分(干灰法)的含量。
此方法可获得健壮的增殖苗(附图1),一个周期30天的繁殖倍数为7.4倍;组培苗干物率为15.39%,叶片中粗蛋白含量为301.90±0.87mg/g,全磷含量为3.50±0.06g/kg,全钾含量为120.27±2.17g/kg,粗纤维含量为7.78±0.30mg/g。
实施例2
基本培养基的配置:
基本培养基为MS培养基,其中,常量元素的组分和其对应的使用浓度如下;KNO31900mg/L、NH4NO3 1650mg/L、KH2PO4 170mg/L、MgSO4·7H2O 370mg/L、CaCl2·2H2O 440mg/L;
微量元素的组分和其对应的使用浓度如下:KI 0.83mg/L、H3BO3 6.2mg/L、MnSO4·H2O22.3mg/L、ZnSO4·7H2O 8.6mg/L、Na2MoO4·2H2O 0.25mg/L、CuSO4·5H2O 0.025mg/L、CoCl2.6 H2O 0.025mg/L;
铁盐的组分和其对应的使用浓度如下:Na2·EDTA 37.3mg/L、FeSO4·7H2O27.8mg/L;
有机成分的组分和其对应的浓度如下:肌醇100mg/L、甘氨酸2mg/L、盐酸硫胺素VB1 0.1mg/L、盐酸吡哆醇VB6 0.5mg/L、烟酸VB5 0.5mg/L。
利用上述的基本培养基配置诱导培养基、增殖(生根)培养基。
其中,诱导培养基:每升基本培养基+0.1mg 6-苄基腺嘌呤(6-BA)+40g蔗糖+6g琼脂,pH值为5.8;
增殖培养基:每升基本培养基+0.1mg·L-1萘乙酸(NAA)+0.2mg·L-1吲哚丁酸(IBA)+40g蔗糖+6g琼脂,pH值为5.8;
将上述配置好的培养基注入玻璃瓶中,经高温高压消毒20分钟,待用,其中,温度为120-125℃,压力为1.1KG/CM2。
构树组织培养快繁方法,按以下步骤进行:
(1)选材及消毒处理:选取生长健壮、无病虫害的1~2年生构树枝条,摘除老叶,置于室温下水培7天,每天换水1次,以新长出的嫩茎作为外植体,然后将所选取的外植体剪切成2~4cm长的小段,经70%的酒精消毒40s,再用0.1%的升汞消毒5分钟,最后用无菌水冲洗5次。
(2)组培苗培养:在超净工作台上和无菌条件下,将步骤(1)中消毒处理后的外植体剪去接触消毒液的伤口部位,留1~2cm带芽茎段接种在含有诱导培养基的培养瓶中,然后将其置于白色荧光灯灯为光源的环境下,控制光量40μmol·m-2·s-1,设定光照时间12h·d-1,温度(25±1)℃,培养15天,长成6~8cm的无菌组培苗;
(3)增殖培养:将步骤(2)中长成的组培苗,剪切成长度为1.5~2.0cm带有1~2个腋芽的茎段,转接到增殖培养基中进行增殖培养,置于白色荧光灯光源下培养,控制光量40μmol·m-2·s-1,设定光照时间12h·d-1,温度(25±1)℃,培养30天。
(4)营养物质含量检测:将步骤(3)中长成的组培苗取出,清水洗净擦干,测定植株鲜重、干重、叶片中粗蛋白(凯氏定氮法/流动分析仪测定)、全磷(钼锑抗比色法测定)、全钾(火焰光度计法测定)、纤维素(硫酸提取蒽酮比色法测定)、灰分(干灰法)的含量。
此方法可获得健壮的增殖苗(附图2),一个周期30天的繁殖倍数为6.8倍;组培苗干物率为13.88%,叶片中粗蛋白含量为157.63±3.45mg/g,全磷含量为1.52±0.08g/kg,全钾含量为52.62±0.94g/kg,粗纤维含量为9.15±0.52mg/g。
实施例3
基本培养基的配置:
基本培养基为MS培养基,其中,常量元素的组分和其对应的使用浓度如下;KNO31900mg/L、NH4NO3 1650mg/L、KH2PO4 170mg/L、MgSO4·7H2O 370mg/L、CaCl2·2H2O 440mg/L;
微量元素的组分和其对应的使用浓度如下:KI 0.83mg/L、H3BO3 6.2mg/L、MnSO4·H2O22.3mg/L、ZnSO4·7H2O 8.6mg/L、Na2MoO4·2H2O 0.25mg/L、CuSO4·5H2O 0.025mg/L、CoCl2.6 H2O 0.025mg/L;
铁盐的组分和其对应的使用浓度如下:Na2·EDTA 37.3mg/L、FeSO4·7H2O27.8mg/L;
有机成分的组分和其对应的浓度如下:肌醇100mg/L、甘氨酸2mg/L、盐酸硫胺素VB1 0.1mg/L、盐酸吡哆醇VB6 0.5mg/L、烟酸VB5 0.5mg/L。
利用上述的基本培养基配置诱导培养基、增殖(生根)培养基。
其中,诱导培养基:每升基本培养基+0.1mg 6-苄基腺嘌呤(6-BA)+0.1mg赤霉素(GA3)+40g蔗糖+6g琼脂,pH值为5.8;
增殖培养基:每升基本培养基+0.1mg·L-1萘乙酸(NAA)+0.1mg·L-1吲哚丁酸(IBA)+40g蔗糖+6g琼脂,pH值为5.8;
将上述配置好的培养基注入玻璃瓶中,经高温高压消毒20分钟,待用,其中,温度为120-125℃,压力为1.1KG/CM2。
构树组织培养快繁方法,按以下步骤进行:
(1)选材及消毒处理:选取生长健壮、无病虫害的1~2年生构树枝条,摘除老叶,置于室温下水培7天,每天换水1次,以新长出的嫩茎作为外植体,然后将所选取的外植体剪切成2~4cm长的小段,经70%的酒精消毒40s,再用0.1%的升汞消毒5分钟,最后用无菌水冲洗5次。
(2)组培苗培养:在超净工作台上和无菌条件下,将步骤(1)中消毒处理后的外植体剪去接触消毒液的伤口部位,留1~2cm带芽茎段接种在含有诱导培养基的培养瓶中,然后将其置于白色荧光灯灯为光源的环境下,控制光量40μmol·m-2·s-1,设定光照时间12h·d-1,温度(25±1)℃,培养15天,长成6~8cm的无菌组培苗;
(3)增殖培养:将步骤(2)中长成的组培苗,剪切成长度为1.5~2.0cm带有1~2个腋芽的茎段,转接到增殖培养基中进行增殖培养,置于LED光源下培养,控制光量40μmol·m-2·s-1,光质条件为峰值波长660/nm,波长半宽20/nm的红光,设定光照时间12h·d-1,温度(25±1)℃,培养30天。
(4)营养物质含量检测:将步骤(3)中长成的组培苗取出,清水洗净擦干,测定植株鲜重、干重、叶片中粗蛋白(凯氏定氮法/流动分析仪测定)、全磷(钼锑抗比色法测定)、全钾(火焰光度计法测定)、纤维素(硫酸提取蒽酮比色法测定)、灰分(干灰法)的含量。
此方法可获得健壮的增殖苗(附图3),一个周期30天的繁殖倍数为6.5倍;组培苗干物率为15.87%,叶片中粗蛋白含量为183.54±1.49mg/g,全磷含量为2.08±0.05g/kg,全钾含量为58.22±1.56g/kg,粗纤维含量为7.03±0.23mg/g。
实施例4
基本培养基的配置:
基本培养基为MS培养基,其中,常量元素的组分和其对应的使用浓度如下;KNO31900mg/L、NH4NO3 1650mg/L、KH2PO4 170mg/L、MgSO4·7H2O 370mg/L、CaCl2·2H2O 440mg/L;
微量元素的组分和其对应的使用浓度如下:KI 0.83mg/L、H3BO3 6.2mg/L、MnSO4·H2O22.3mg/L、ZnSO4·7H2O 8.6mg/L、Na2MoO4·2H2O 0.25mg/L、CuSO4·5H2O 0.025mg/L、CoCl2.6 H2O 0.025mg/L;
铁盐的组分和其对应的使用浓度如下:Na2·EDTA 37.3mg/L、FeSO4·7H2O27.8mg/L;
有机成分的组分和其对应的浓度如下:肌醇100mg/L、甘氨酸2mg/L、盐酸硫胺素VB1 0.1mg/L、盐酸吡哆醇VB6 0.5mg/L、烟酸VB5 0.5mg/L。
利用上述的基本培养基配置诱导培养基、增殖(生根)培养基。
其中,诱导培养基:每升基本培养基+0.1mg 6-苄基腺嘌呤(6-BA)+0.1mg赤霉素(GA3)+40g蔗糖+6g琼脂,pH值为5.8;
增殖培养基:每升基本培养基+0.2mg·L-1吲哚丁酸(IBA)+40g蔗糖+6g琼脂,pH值为5.8;
将上述配置好的培养基注入玻璃瓶中,经高温高压消毒20分钟,待用,其中,温度为120-125℃,压力为1.1KG/CM2。
构树组织培养快繁方法,按以下步骤进行:
(1)选材及消毒处理:选取生长健壮、无病虫害的1~2年生构树枝条,摘除老叶,置于室温下水培7天,每天换水1次,以新长出的嫩茎作为外植体,然后将所选取的外植体剪切成2~4cm长的小段,经70%的酒精消毒30s,再用0.1%的升汞消毒5分钟,最后用无菌水冲洗5次。
(2)组培苗培养:在超净工作台上和无菌条件下,将步骤(1)中消毒处理后的外植体剪去接触消毒液的伤口部位,留1~2cm带芽茎段接种在含有诱导培养基的培养瓶中,然后将其置于白色荧光灯灯为光源的环境下,控制光量40μmol·m-2·s-1,设定光照时间12h·d-1,温度(25±1)℃,培养15天,长成6~8cm的无菌组培苗;
(3)增殖培养:将步骤(2)中长成的组培苗,剪切成长度为1.5~2.0cm带有1~2个腋芽的茎段,转接到增殖培养基中进行增殖培养,置于LED光源下培养,控制光量40μmol·m-2·s-1,光质条件为峰值波长470/nm,波长半宽20/nm的蓝光,设定光照时间12h·d-1,温度(25±1)℃,培养30天。
(4)营养物质含量检测:将步骤(3)中长成的组培苗取出,清水洗净擦干,测定植株鲜重、干重、叶片中粗蛋白(凯氏定氮法/流动分析仪测定)、全磷(钼锑抗比色法测定)、全钾(火焰光度计法测定)、纤维素(硫酸提取蒽酮比色法测定)、灰分(干灰法)的含量。
此方法可获得健壮的增殖苗(附图4),一个周期30天的繁殖倍数为5.7倍;组培苗干物率为35.67%,叶片中粗蛋白含量为235.56±4.67mg/g,全磷含量为2.34±0.04g/kg,全钾含量为64.28±3.70g/kg,粗纤维含量为6.79±0.20mg/g。
以上所述,仅是本发明的较佳实施例,并非对本发明作任何形式上的限制,任何熟悉本专业的技术人员,在不脱离本发明技术方案范围内,依据本发明的技术实质,对以上实施例所作的任何简单的修改、等同替换与改进等,均仍属于本发明技术方案的保护范围之内。
Claims (6)
1.一种促进构树组织苗营养物质积累的方法,其特征在于:其培养步骤如下:
(1)选材及消毒处理:选取生长健壮、无病虫害的1~2年生构树枝条,摘除老叶,置于室温下水培7天,每天换水1次;以新长出的嫩茎作为外植体,然后将所选取的外植体剪切成2~4cm长的带芽茎段;经酒精、升汞消毒,最后用无菌水冲洗;
(2)组培苗培养:在超净工作台上,在无菌条件下,将步骤(1)中消毒处理后的外植体剪去接触消毒液的伤口部位,留1~2cm带芽茎段接种在含有诱导培养基的培养瓶中,将其置于白色荧光灯为光源的环境下,控制光量40μmol·m-2·s-1,设定光照时间12h·d-1,温度25±1℃,培养15天,长成6~8cm的无菌组培苗;
(3)增殖培养:将步骤(2)中长成的组培苗,剪切成长度为1.5~2.0cm带有1~2个腋芽的茎段,转接到增殖培养基中进行增殖培养,置于LED光源下培养,控制光量40μmol·m-2·s-1,设定光照时间12h·d-1,温度25±1℃,在该培养基中获得健壮的增殖苗,一个周期30天的繁殖倍数为6~8倍;
所述的诱导培养基为:MS+0.1mg·L-1 6-苄基腺嘌呤(6-BA)+0.1mg·L-1赤霉素(GA3)+蔗糖40g·L-1+琼脂6g·L-1,pH值为5.8;
所述的增殖培养基为:MS+0.1mg·L-1萘乙酸(NAA)+0.2mg·L-1吲哚丁酸(IBA)+蔗糖40g·L-1+琼脂6g·L-1,pH值为5.8。
2.根据权利要求1所述的促进构树组织苗营养物质积累的方法,其特征在于:步骤(1)中的带芽茎段为带有顶芽或腋芽的长度2~4cm的茎段。
3.根据权利要求1所述的促进构树组织苗营养物质积累的方法,其特征在于:步骤(1)中,经70%的酒精消毒30~40s,再用0.1%的升汞消毒5分钟,最后用无菌水冲洗5次。
4.根据权利要求1所述的促进构树组织苗营养物质积累的方法,其特征在于:MS基本培养基由常量元素、微量元素、铁盐和有机成分组成。
5.根据权利要求1所述的促进构树组织苗营养物质积累的方法,其特征在于:步骤(3)中,LED光质条件为:峰值波长390/nm,波长半宽20/nm的紫光。
6.根据权利要求4所述的促进构树组织苗营养物质积累的方法,其特征在于:所述MS基本培养基中:
所述的常量元素为:KNO3 1900mg/L、NH4NO3 1650mg/L、KH2PO4 170mg/L、MgSO4·7H2O370mg/L、CaCl2·2H2O 440mg/L;
所述的微量元素为:KI 0.83mg/L、H3BO3 6.2mg/L、MnSO4·H2O 22.3mg/L、ZnSO4·7H2O8.6mg/L、Na2MoO4·2H2O 0.25mg/L、CuSO4·5H2O 0.025mg/L、CoCl2.6H2O 0.025mg/L;
所述的铁盐为:Na2·EDTA 37.3mg/L、FeSO4·7H2O 27.8mg/L;
所述的有机成分为:肌醇100mg/L、甘氨酸2mg/L、盐酸硫胺素VB1 0.1mg/L、盐酸吡哆醇VB6 0.5mg/L、烟酸VB5 0.5mg/L。
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Cited By (1)
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---|---|---|---|---|
CN113598047A (zh) * | 2021-08-04 | 2021-11-05 | 广西壮族自治区林业科学研究院 | 一种高蛋白杂交构树高效组培育苗的方法 |
Citations (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN101200704A (zh) * | 2007-12-25 | 2008-06-18 | 大连中植环境生物科技有限公司 | 构树的一种组织培养方法 |
US20150359188A1 (en) * | 2013-03-15 | 2015-12-17 | Biotech Institute LLC | Breeding, production, processing and use of specialty cannabis |
CN107125132A (zh) * | 2017-03-27 | 2017-09-05 | 河池乐康生态农业科技有限公司 | 一种杂交构树组织培养快速繁殖方法 |
CN108157187A (zh) * | 2018-04-02 | 2018-06-15 | 昆明厚成农林科技有限公司 | 一种构树简便组培方法 |
CN108338071A (zh) * | 2017-12-29 | 2018-07-31 | 天长市金农农业发展有限公司 | 一种杂交构树的无性繁殖育苗方法 |
WO2019217843A1 (en) * | 2018-05-11 | 2019-11-14 | Front Range Biosciences, Inc. | Systems, methods and kits for micropropagation of cannabis |
-
2019
- 2019-12-05 CN CN201911234245.XA patent/CN110741938B/zh active Active
Patent Citations (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN101200704A (zh) * | 2007-12-25 | 2008-06-18 | 大连中植环境生物科技有限公司 | 构树的一种组织培养方法 |
US20150359188A1 (en) * | 2013-03-15 | 2015-12-17 | Biotech Institute LLC | Breeding, production, processing and use of specialty cannabis |
CN107125132A (zh) * | 2017-03-27 | 2017-09-05 | 河池乐康生态农业科技有限公司 | 一种杂交构树组织培养快速繁殖方法 |
CN108338071A (zh) * | 2017-12-29 | 2018-07-31 | 天长市金农农业发展有限公司 | 一种杂交构树的无性繁殖育苗方法 |
CN108157187A (zh) * | 2018-04-02 | 2018-06-15 | 昆明厚成农林科技有限公司 | 一种构树简便组培方法 |
WO2019217843A1 (en) * | 2018-05-11 | 2019-11-14 | Front Range Biosciences, Inc. | Systems, methods and kits for micropropagation of cannabis |
Non-Patent Citations (7)
Title |
---|
S. DUTTA GUPTA等: "Fundamentals and applications of light-emitting diodes (LEDs) in in vitro plant growth and morphogenesis", 《PLANT BIOTECHNOLOGY REPORTS》 * |
ZHANG CHAOHUI等: "Induction of Broussonetia papyrifera somatic embryo.", 《JOURNAL OF HENAN AGRICULTURAL SCIENCES》 * |
尤伟忠主编: "《园林苗木生产技术》", 31 July 2015, 苏州大学出版社 * |
朱宏: "桑树立体培养与多倍体诱导研究", 《中国优秀硕士学位论文全文数据库(电子期刊)农业科学辑》 * |
李义: "《植物快繁技术》", 31 October 2016, 四川大学出版社 * |
蒋泽平等: "光叶楮组织培养快速繁殖技术的研究", 《江苏林业科技》 * |
黄婧等: "不同LED光质对构树组织培养苗生物量和营养物质含量的影响", 《江苏林业科技》 * |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN113598047A (zh) * | 2021-08-04 | 2021-11-05 | 广西壮族自治区林业科学研究院 | 一种高蛋白杂交构树高效组培育苗的方法 |
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