CN107466850B - 蓝莓种植及其幼苗快速培育方法 - Google Patents
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Abstract
一种蓝莓种植及其幼苗快速培育方法，属于种植业领域。幼苗快速培育方法包括从制作经过消毒处理的外植体。将外植体接种至WPM培养基中，并在室温，以1000～2000LX光照强度、6～12小时/天条件下培养30～60天得到丛生芽。将丛生芽通过继代增殖培养至生根幼苗。本发明可以有效地提高蓝莓幼苗的成活率，缩短蓝莓的培育周期，有利于短时间了进行大面积栽种。
Description
技术领域
本发明涉及种植业领域，具体而言，涉及一种蓝莓种植及其幼苗快速培育方法。
背景技术
蓝莓为多年生落叶或常绿灌木，果实呈蓝色，种子极小。蓝莓果肉细腻，甜酸适度，可鲜食，亦可加工成果酱、果汁、果酒等。蓝莓果实中除了常规的糖、酸和维生素C外，富含维生素E、维生素A、维生素B、超氧化物歧化酶(SOD)、熊果苷、蛋白质、花青苷、食用纤维以及丰富的钾、铁、锌、钙等矿物质元素。正是由于蓝莓果实中含有丰富的营养成分，高锌、高钙、高铁、高铜、高维生素的营养保健果品。它不仅具有良好的营养保健作用，还具有防止脑神经老化、强心、抗癌软化血管、增强人机体免疫等功能。随着人们对蓝莓的需求量的不断增加，市场上迫切需要一种能否实现蓝莓快速、批量种植的方案。
发明内容
本发明的第一方面，提供了一种蓝莓幼苗快速培育方法，可提高蓝莓植株幼苗的成活率，降低其培育难度。
本发明的第二方面，提供了一种蓝莓种植方法，其利用前述的方法培育的蓝莓幼苗进行种植，可有效蓝莓生活率，提高生产效率。
本发明是这样实现的：
一种蓝莓幼苗快速培育方法，包括：
从蓝莓健壮、成熟的植株上收集具有腋芽的枝条，用清水洗净并浸泡60～120分钟，然后用乙醇含量为60～80VL％酒精浸泡10～20秒，再用0.01％的HgCl2浸泡6～10分钟，经过无菌水冲洗得到外植体；
以腋芽朝上的方式将外植体接种至pH值为5.6～6.4的WPM培养基中，且WPM培养基中添加有15～30g/L的蔗糖、8～20g/L的琼脂，在室温条件下，以1000～2000LX光照强度、6～12小时/天照射外植体，培养30～60天得到丛生芽；
将丛生芽切割为2～5cm新梢，并接种至MS培养基中继代增殖培养至生根幼苗，MS培养基中添加有0.5～1mg/L的玉米素和0.05～0.2mg/L的吲哚丁酸。
在较佳的一个示例中，外植体为健壮、成熟的植株春季萌动枝条的顶端的部分。
在较佳的一个示例中，WPM培养基的pH值通过磷酸盐溶液进行缓冲调节。
在较佳的一个示例中，在继代增殖培养过程中，培养环境的温度为23～30℃，光照强度为2000～3000LX，光照时间为6-9小时/天。
在较佳的一个示例中，在继代增殖培养过程中，培养环境的温度为25～27℃，光照强度为2000～2600LX，光照时间为8小时/天。
在较佳的一个示例中，在继代增殖培养之后，将幼苗转移至遮光率为30～60％的遮阳房内进行驯化。
在较佳的一个示例中，经过驯化后，将幼苗蘸取生根液之后再扦插入移栽培养基中，移栽培养基由泥炭和河沙按照2:1的体积比混合而成。
在较佳的一个示例中，生根液含有吲哚乙酸0.4～0.6g/L和萘乙酸0.2～0.5g/L。
一种蓝莓种植方法，包括：
根据前述的蓝莓幼苗快速培育方法培育蓝莓幼苗；
将蓝莓幼苗栽植于经过改良的土壤中，并进行田间管理，改良的土壤pH值为4.0～5.6，且有机质含量不低于6wt％。
在较佳的一个示例中，在将蓝莓幼苗栽植于经过改良的土壤中之前，蓝莓幼苗根部蘸有蓝莓菌根真菌。
本发明实施例所述的WPM培养基(WPM Medium)，是用于植物组织培养的物质，其主体成分如下组分：硝酸铵；硫酸钾；硫酸镁；磷酸二氢钾；氯化钙；硫酸锰；硫酸锌；硼酸；硫酸铜；钼酸钠；硫酸亚铁；乙二胺四乙酸；盐酸硫胺素(VB1)1.0；盐酸吡哆辛(VB6)；烟酸(VB5)；甘氨酸；肌醇等等。此外，还可以向WPM培养基中添加pH值调整剂或其他成分。
本发明实施例所述的MS培养基(MS Medium)，是用于植物组织培养的物质，其主体成分如下组分(mg/L)：硝酸铵；硝酸钾；二水合氯化钙；硫酸镁；磷酸二氢钾；碘化钾；硫酸锰；硫酸锌；硼酸；硫酸铜等等。此外，还可以向MS培养基中添加pH值调整剂或其他成分。
本发明实施例的有益效果：本发明实施例提供的蓝莓幼苗快速培育方法，利用蓝莓植株上的枝条为原料进行培养，从而得到植株幼苗。利用这种方法可以使蓝莓幼苗的获取更加的简单和高效，从而可以快速地获得大量的蓝莓幼苗。此方法获得蓝莓幼苗纯度高、母系优良特征保持好，其定植后长势更好。此外，蓝莓幼苗的生命力更强，成活率高，有利于提高蓝莓种植的大面积展开，提高蓝莓产量。本发明通过对蓝莓带芽枝条(茎段)进行离体培养，在适度筛选、增殖，经过植株再生、生根获得幼苗。通过人工干预的方式使得获得幼苗具有成活率、株高、茎粗等由于自然生产的蓝莓，从而有利于规模化生产。
具体实施方式
下面将结合实施例对本发明的实施方案进行详细描述，但是本领域技术人员将会理解，下列实施例仅用于说明本发明，而不应视为限制本发明的范围。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。
以下针对本发明实施例的蓝莓种植及其幼苗快速培育方法进行具体说明：
蓝莓幼苗快速培育方法，其主要包括外植体的获取、外植体培养得到丛生芽，以及由丛生芽培养至得到幼苗的步骤。
步骤S101、获取外植体
从蓝莓健壮、成熟的植株上收集具有腋芽的枝条，用清水洗净并浸泡60～120分钟，然后用乙醇含量为60～80VL％酒精浸泡10～20秒，再用0.01％的HgCl2浸泡6～10分钟，经过无菌水冲洗得到外植体。
进一步地，清水浸泡的时间还可以是80～100分钟，或者95分钟等等。酒精的浓度优选为73％，且利用酒精的浸泡时间为13s。HgCl2的消毒时间可以是8分钟或9分钟。
其中，所述的无菌水通常是通过高温蒸汽法、化学法、臭氧方法和物理过滤法将水中微生物杀死或过滤掉而得到的水。水中的无机盐保持其原有浓度。本发明实施例中，无菌水采用高温蒸汽杀菌而得。
在一些示例中，外植体为健壮、成熟的植株春季萌动枝条的顶端的部分。较佳地，获取外植体时，优选在无菌房中进行，以避免其受到污染。
步骤S102、获取丛生芽
以腋芽朝上的方式将外植体接种至pH值为5.6～6.4的WPM培养基中，且WPM培养基中添加有15～30g/L的蔗糖、8～20g/L的琼脂，在室温条件下，以1000～2000LX光照强度、6～12小时/天照射外植体，培养30～60天得到丛生芽。
WPM培养基的pH值可以选用硫酸(如硫酸浓度可以是2.4g/L)，或者，通过磷酸盐溶液进行缓冲调节，优选采用磷酸盐溶液(如磷酸二氢钾)进行调节，其可以补充植物生长所述的钾元素。
培养外植体时，优选通过观察其长势，控制光照强度和光照时间。
S103、获取幼苗
将丛生芽切割为2～5cm新梢，并接种至MS培养基中继代增殖培养至生根幼苗，MS培养基中添加有0.5～1mg/L的玉米素和0.05～0.2mg/L的吲哚丁酸。
进一步地，在继代增殖培养过程中，培养环境的温度为23～30℃，光照强度为2000～3000LX，光照时间为6-9小时/天。更进一步地，在继代增殖培养过程中，培养环境的温度为25～27℃，光照强度为2000～2600LX，光照时间为8小时/天。
为了提高蓝莓幼苗在自然条件环境中的生长成活率，在继代增殖培养之后，将幼苗转移至遮光率为30～60％的遮阳房内进行驯化，以提高植株的抗性，提高其环境耐受程度。更佳地，在驯化过程中，保持驯化环境湿度为80％，并且逐步进行通风。
此外，经过驯化后，还可以将幼苗蘸取生根液之后再扦插入移栽培养基中，移栽培养基由泥炭和河沙按照2:1的体积比混合而成，其进一步地提高蓝莓幼苗的成活率。更优地是，移栽培养基以水苔藓为基质，并且添加前述的泥炭和河沙。所述的泥炭(泥炭土，peatsoil)是指在某些河湖沉积低平原及山间谷地中，由于长期积水，水生植被茂密，在缺氧情况下，大量分解不充分的植物残体积累并形成泥炭层的土壤。
生根液可以是各种植物生长激素，本发明实施例中，生根液优选为吲哚乙酸0.4～0.6g/L和萘乙酸0.2～0.5g/L的混合液，用85％酒精溶解而得。
基于前述的蓝莓幼苗培育方法，本发明还提供了一种蓝莓种植方法。其包括：根据前述的蓝莓幼苗快速培育方法培育蓝莓幼苗。然后将蓝莓幼苗栽植于经过改良的土壤中，并进行田间管理。田间管理例如可以是施肥、除草、浇水等等。
其中，改良的土壤pH值为4.0～5.6，且有机质含量不低于6wt％。其主要还包括粘土、植物纤维。进一步地，为了提高蓝莓的成活率以及更快地生根，在将蓝莓幼苗栽植于经过改良的土壤中之前，蓝莓幼苗根部蘸有蓝莓菌根真菌。菌根真菌是自然界中一种能与植物形成共生体的特殊真菌。菌根真菌生活在活的植物根部，从中获取必需的碳水化合物和其他的一些物质，但同时又向植物的根系提供植物生长所需的营养物质、酶类和水分。
作为一种示例，蓝莓菌根真菌可以是晶粒鬼伞菌(Coprinus micaceus)
以下结合实施例对本发明的蓝莓种植及其幼苗快速培育方法作进一步的详细描述。
实施例1
一种芭尔德温蓝莓幼苗快速培育方法。
从蓝莓健壮、成熟的植株上收集具有腋芽的枝条，用蒸馏水洗净并浸泡60分钟，然后用乙醇含量为60VL％酒精浸泡10秒，再用0.01％的HgCl2浸泡10分钟，经过无菌水冲洗得到外植体。
以腋芽朝上的方式将外植体接种至pH值为5.6的WPM培养基中，且WPM培养基中添加有15g/L的蔗糖、8g/L的琼脂，在室温条件下，以1000LX光照强度、6小时/天照射外植体，培养30天得到丛生芽。
将丛生芽切割为2cm新梢，并接种至MS培养基中继代增殖培养至生根幼苗，MS培养基中添加有0.5mg/L的玉米素和0.05mg/L的吲哚丁酸。其中，培养环境的温度为22℃，光照强度为1800LX，光照时间为5小时/天。培养过程中，10天后可见明显生根现象。
实施例2
一种埃利奥特蓝莓幼苗快速培育方法。
从蓝莓健壮、成熟的植株上收集具有腋芽的枝条，用清水洗净并浸泡120分钟，然后用乙醇含量为80VL％酒精浸泡20秒，再用0.01％的HgCl2浸泡10分钟，经过无菌水冲洗得到外植体。其中，外植体为健壮、成熟的植株春季萌动枝条的顶端的部分。
以腋芽朝上的方式将外植体接种至通过磷酸二氢钾是溶液调节pH值为6.4的WPM培养基中，且WPM培养基中添加有30g/L的蔗糖、20g/L的琼脂，在室温条件下，以2000LX光照强度、12小时/天照射外植体，培养60天得到丛生芽；
将丛生芽切割为2cm新梢，并接种至MS培养基中继代增殖培养至生根幼苗，MS培养基中添加有1mg/L的玉米素和0.2mg/L的吲哚丁酸。其中，培养环境的温度为23℃，光照强度为2000LX，光照时间为6小时/天。培养过程中，10天后可见明显生根现象。
实施例3
一种迪克西蓝莓幼苗快速培育方法。
从蓝莓健壮、成熟的植株上收集具有腋芽的枝条，用清水洗净并浸泡80分钟，然后用乙醇含量为75VL％酒精浸泡18秒，再用0.01％的HgCl2浸泡8分钟，经过无菌水冲洗得到外植体；
以腋芽朝上的方式将外植体接种至pH值为6.1的WPM培养基中，且WPM培养基中添加有22g/L的蔗糖、13g/L的琼脂，在室温条件下，以1600LX光照强度、11小时/天照射外植体，培养38天得到丛生芽；
将丛生芽切割为2cm新梢，并接种至MS培养基中继代增殖培养至生根幼苗，MS培养基中添加有0.6mg/L的玉米素和0.1mg/L的吲哚丁酸。其中，培养环境的温度为30℃，光照强度为3000LX，光照时间为9小时/天。培养过程中，10天后可见明显生根现象。
实施例4
一种红利蓝莓幼苗快速培育方法。
从蓝莓健壮、成熟的植株上收集具有腋芽的枝条，用清水洗净并浸泡90分钟，然后用乙醇含量为75VL％酒精浸泡10秒，再用0.01％的HgCl2浸泡6分钟，经过无菌水冲洗得到外植体。
以腋芽朝上的方式将外植体接种至pH值为5.5的WPM培养基中，且WPM培养基中添加有19g/L的蔗糖、18g/L的琼脂，在室温条件下，以1700LX光照强度、10小时/天照射外植体，培养46天得到丛生芽。
将丛生芽切割为4cm新梢，并接种至MS培养基中继代增殖培养至生根幼苗，MS培养基中添加有0.7mg/L的玉米素和0.013mg/L的吲哚丁酸。在继代增殖培养过程中，培养环境的温度为27℃，光照强度为2600LX，光照时间为8小时/天。培养过程中，13天后可见明显生根现象。
实施例5
一种美登蓝莓幼苗快速培育方法。
从蓝莓健壮、成熟的植株上收集具有腋芽的枝条，用清水洗净并浸泡100分钟，然后用乙醇含量为60VL％酒精浸泡20秒，再用0.01％的HgCl2浸泡10分钟，经过无菌水冲洗得到外植体；
以腋芽朝上的方式将外植体接种至pH值为6.0的WPM培养基中，且WPM培养基中添加有30g/L的蔗糖、11g/L的琼脂，在室温条件下，以1700LX光照强度、8小时/天照射外植体，培养40天得到丛生芽；
将丛生芽切割为2～5cm新梢，并接种至MS培养基中继代增殖培养至生根幼苗，MS培养基中添加有0.7mg/L的玉米素和0.08mg/L的吲哚丁酸。在继代增殖培养过程中，培养环境的温度为25℃，光照强度为2000LX，光照时间为8小时/天。培养过程中，9天后可见明显生根现象。
在继代增殖培养之后，将得到的蓝莓幼苗将幼苗转移至遮光率为45％的遮阳房内进行驯化。
实施例6
一种美登蓝莓幼苗快速培育方法。
从蓝莓健壮、成熟的植株上收集具有腋芽的枝条，用清水洗净并浸泡100分钟，然后用乙醇含量为64VL％酒精浸泡10秒，再用0.01％的HgCl2浸泡8分钟，经过无菌水冲洗得到外植体；
以腋芽朝上的方式将外植体接种至pH值为6.0的WPM培养基中，且WPM培养基中添加有30g/L的蔗糖、11g/L的琼脂，在室温条件下，以1700LX光照强度、8小时/天照射外植体，培养40天得到丛生芽；
将丛生芽切割为2～5cm新梢，并接种至MS培养基中继代增殖培养至生根幼苗，MS培养基中添加有0.5mg/L的玉米素和0.2mg/L的吲哚丁酸。在继代增殖培养过程中，培养环境的温度为26℃，光照强度为1700LX，光照时间为8小时/天。
在继代增殖培养之后，将得到的蓝莓幼苗将幼苗转移至遮光率为45％的遮阳房内进行驯化。然后，将幼苗蘸取生根液之后再扦插入移栽培养基中，移栽培养基由泥炭和河沙按照2:1的体积比混合而成。生根液含有吲哚乙酸0.4～0.6g/L和萘乙酸0.2～0.5g/L。培养过程中，8天后可见明显生根现象。
实施例7
本实施例分别采用实施例1至6中培育的蓝莓幼苗进行移栽。
实施例1至6获得蓝莓幼苗分别取30株，将蓝莓幼苗根部浸泡在蓝莓菌根真菌溶液中，然后直接栽植于经过改良的土壤中，并进行田间管理。
改良的土壤pH值为4.0～5.6，且有机质含量30wt％。
田间管理包括如下。施肥：施肥料氨基酸肥、中微量元素肥以及水溶肥料、腐熟的蚯蚓粪、植物肥和菌肥。除草：在蓝莓生长中，在行间和垄间培植果园草或养殖家禽进行除草，并在行间或垄间设置约10cm厚的覆盖物。覆盖物包括作物秸秆以及锯末。
结果显示，在蓝莓幼苗移植后，分别对应于实施例1至6提供的幼苗的生活率为90％(成活27株，平均株高12cm)，93.3％(成活28株，平均株高9cm)，93.3％(成活28株，平均株高10cm)，93.3％(成活28株，平均株高13cm)，100％(成活30株，平均株高20cm)，100％(成活30株，平均株高20cm)，且幼苗生长旺盛。
尽管已用具体实施例来说明和描述了本发明，然而应意识到，在不背离本发明的精神和范围的情况下可以作出许多其它的更改和修改。因此，这意味着在所附权利要求中包括属于本发明范围内的所有这些变化和修改。
Claims (6)
1.一种蓝莓幼苗快速培育方法，其特征在于，包括：
从蓝莓健壮、成熟的植株上收集具有腋芽的枝条，用清水洗净并浸泡60～120分钟，然后用乙醇的体积分数为60～80％的酒精浸泡10～20秒，再用0.01％的HgCl2浸泡6～10分钟，经过无菌水冲洗得到外植体；
以所述腋芽朝上的方式将所述外植体接种至pH值为5.6～6.4的WPM培养基中，且所述WPM培养基中添加有15～30g/L的蔗糖、8～20g/L的琼脂，在室温条件下，以1000～2000LX光照强度、6～12小时/天照射所述外植体，培养30～60天得到丛生芽；
将所述丛生芽切割为2～5cm新梢，并接种至MS培养基中继代增殖培养至生根幼苗，所述MS培养基中添加有0.5～1mg/L的玉米素和0.05～0.2mg/L的吲哚丁酸，在所述继代增殖培养过程中，培养环境的温度为23～30℃，光照强度为2000～3000LX，光照时间为6-9小时/天；
在继代增殖培养之后，将幼苗转移至遮光率为30～60％的遮阳房内进行驯化；
经过驯化后，将幼苗蘸取生根液之后再扦插入移栽培养基中，移栽培养基由泥炭和河沙按照2:1的体积比混合而成，其中，所述生根液含有吲哚乙酸0.4～0.6g/L和萘乙酸0.2～0.5g/L。
2.根据权利要求1所述的蓝莓幼苗快速培育方法，其特征在于，所述外植体为所述健壮、成熟的植株春季萌动枝条的顶端的部分。
3.根据权利要求1所述的蓝莓幼苗快速培育方法，其特征在于，所述WPM培养基的pH值通过磷酸盐溶液进行缓冲调节。
4.根据权利要求1所述的蓝莓幼苗快速培育方法，其特征在于，在所述继代增殖培养过程中，培养环境的温度为25～27℃，光照强度为2000～2600LX，光照时间为8小时/天。
5.一种蓝莓种植方法，其特征在于，包括：
根据权利要求1至4中任一项所述的蓝莓幼苗快速培育方法培育蓝莓幼苗；
将所述蓝莓幼苗栽植于经过改良的土壤中，并进行田间管理，所述改良的土壤pH值为4.0～5.6，且有机质含量不低于6wt％。
6.根据权利要求5所述的蓝莓种植方法，其特征在于，在将所述蓝莓幼苗栽植于经过改良的土壤中之前，所述蓝莓幼苗根部蘸有蓝莓菌根真菌。
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| CN106258993B (zh) * | 2016-10-19 | 2018-12-25 | 云南省农业科学院园艺作物研究所 | 一种蓝莓组培方法 |
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2017
- 2017-08-15 CN CN201710699573.1A patent/CN107466850B/zh active Active
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Application publication date: 20171215 Assignee: Shanwei Lushun Ecological Agriculture Co.,Ltd. Assignor: ZHONGKAI University OF AGRICULTURE AND ENGINEER Contract record no.: X2023980046286 Denomination of invention: Blueberry Planting and Rapid Seedling Cultivation Method Granted publication date: 20191018 License type: Common License Record date: 20231108 Application publication date: 20171215 Assignee: Lufeng Huizhi Agricultural Technology Co.,Ltd. Assignor: ZHONGKAI University OF AGRICULTURE AND ENGINEER Contract record no.: X2023980045883 Denomination of invention: Blueberry Planting and Rapid Seedling Cultivation Method Granted publication date: 20191018 License type: Common License Record date: 20231107 Application publication date: 20171215 Assignee: Huaiji County Xingshuai Agricultural Technology Co.,Ltd. Assignor: ZHONGKAI University OF AGRICULTURE AND ENGINEER Contract record no.: X2023980045801 Denomination of invention: Blueberry Planting and Rapid Seedling Cultivation Method Granted publication date: 20191018 License type: Common License Record date: 20231106 Application publication date: 20171215 Assignee: Zhaoqing Geling Agricultural Technology Co.,Ltd. Assignor: ZHONGKAI University OF AGRICULTURE AND ENGINEER Contract record no.: X2023980045772 Denomination of invention: Blueberry Planting and Rapid Seedling Cultivation Method Granted publication date: 20191018 License type: Common License Record date: 20231106 |
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