CN110702833A - 一种锦灵肠安胶囊中六种药材的快速薄层鉴别方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种锦灵肠安胶囊中六种药材的快速薄层鉴别方法。其特征在于：用简便、快捷的前处理方法得到同一供试品溶液和六种对照药材溶液，在三块薄层板上同时鉴别了仙鹤草、地榆、三七、地锦草、苦参和白及；斑点分离良好，互不干扰。六味药材的薄层鉴别完成只需样品2g、对照药材共1.4g、提取溶剂和展开剂37ml、薄层板3块、时间1小时，方法无萃取、无浓缩、无蒸发、简便、快捷、环保、斑点清晰。上述鉴别中仙鹤草、地榆、地锦草和白及的新鉴别特征点；仙鹤草、地榆和三七；地锦草和苦参的同时鉴别；均为首次报道。

Description

一种锦灵肠安胶囊中六种药材的快速薄层鉴别方法

技术领域

本发明属于中药薄层鉴别领域，即，采用薄层鉴别技术，同一供试品溶液，在三块薄层板上，同时鉴别了处方中的六味药材，即，仙鹤草、地榆、三七、地锦草、苦参和白及。方法无萃取、无浓缩、无蒸发、简便、快捷、环保、斑点清晰。

背景技术

仙鹤草为蔷薇植物龙芽草的干燥地上部分，早期文献报道主含仙鹤草素、仙鹤草内酯、鞣质、甾醇、有机酸、酚性成分、皂苷、仙鹤草酚A、B、C、D、E等。具收敛止血，截疟，止痢，解毒，补虚之功效。用于咯血，吐血，崩漏下血，疟疾，血痢，痈肿疮毒，阴痒带下，脱力劳伤。其薄层鉴别中国药典2015年版一部是以仙鹤草酚B为指标，以石油醚(60～90℃) -乙酸乙酯-醋酸(100∶9∶5)为展开剂，10％硫酸乙醇溶液显色后，日光下检视颜色斑点。不过供试品溶液的制备方法，比较麻烦，需要石油醚提取，提取液蒸干，三氯甲烷溶解残渣，碱水溶液萃取后，用盐酸调成酸性，再用三氯甲烷萃取2次，三氯甲烷液水洗后，浓缩到1ml，作为供试品溶液。取仙鹤草对照药材2g，同法制备对照药材溶液。····仅样品制备就要花费有机溶剂140ml、时间2小时，而且鉴别的是脂溶性较大的成分。文献报道^【1】的仙鹤草的薄层鉴别也都与药典的方法大同小异，检测的都是脂溶性成分。目前还未查阅到与地榆和三七同时鉴别的报道。

地榆为蔷薇植物地榆或长叶地榆的干燥根茎，主要为皂苷、鞣质和黄酮类。具凉血止血，解毒敛疮之功效。用于便血，痔血，血痢，崩漏，水火烫伤，痈肿疮毒。其薄层鉴别中国药典2015年版一部是以没食子酸为指标，将样品用含10％盐酸的50％甲醇回流水解2小时后，用盐酸饱和的乙醚，萃取2次，每次25ml，乙醚液挥干，残渣用甲醇溶解，即为供试品溶液。方法稍繁琐、污染环境。仅供试品溶液的制备也要花费3小时、100ml有机溶剂。用甲苯(水饱和)-乙酸乙酯-甲酸(6∶3∶1)展开后，喷雾1％三氯化铁乙醇溶液，显色，检测颜色斑点。文献报道^【2】的地榆的薄层鉴别也都与药典的方法大同小异，都是以没食子酸为薄层鉴别指标的。目前还未查阅到与仙鹤草和三七同时鉴别的报道。

三七为五加科植物三七的干燥根和根茎，主含皂苷类，如人参皂苷(ginsenoside)Rb1， Rb2，Rb1，Rc，F2，Rg1，Rg2等，其中，尤以人参皂苷Rg1，和Rb1。含量最高。除此以外，也有一些是三七所独有的皂苷类成分，如三七皂苷R1，R2，R4，R5，Fa，Fc，Fe等。三七的地下部分既有20(S)-原人参二醇型皂苷，也含20(S)原人参三醇型皂苷等。具散瘀止血，消肿定痛之功效。用于咯血，吐血，衄血，便血，崩漏，外伤出血，胸腹刺痛，跌扑肿痛。其薄层鉴别中国药典2015年版一部是以人参皂苷Rb1、Re、Rg1和三七皂苷R1为指标，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-水(15∶40∶22∶10)10℃以下放置的下层溶液为展开剂，展开后，喷以10％硫酸乙醇溶液显色，日光下检视颜色斑点。文献报道^【3】的复方制剂中的三七薄层鉴别基本都是在药典的供试品溶液制备的基础上，对展开剂稍有变动，进行的。目前还未查阅到与仙鹤草和地榆同时鉴别的报道。

地锦草为大戟科植物地锦或斑地锦的干燥全草，含有黄酮、甾体、三萜、鞣质及酚酸类等多种生物活性物质。具清热解毒，凉血止血，利湿退黄之功效。用于痢疾，泄泻，咯血，尿血，便血，崩漏，疮疖痈肿，湿热黄疸。其薄层鉴别中国药典2015年版一部是以槲皮素为指标，但供试品溶液的制备非常繁琐、费时，需用80％的甲醇回流提取1小时，提取液蒸干，残渣加水-乙醚(1∶1)混合溶液溶解、分层，弃去乙醚液，再用乙醚洗涤两次，水液加盐酸，水解1小时，用乙醚提取2次，合并乙醚液，水洗涤，将乙醚液挥干，残渣加乙醇溶解，即为供试品溶液。以槲皮素对照品为对照，以甲苯-乙酸乙酯-甲酸(5∶4.5∶0.5)为展开剂，展开后，喷以3％三氯化铝乙醇溶液显色，置紫外光灯(365nm)下检测槲皮素的荧光斑点。仅供试品溶液的制备就要花费4小时、190ml有机溶剂。萃取，挥干，严重污染环境。查阅的文献^【4】地锦草药材基本都是采用药典的方法，在复方制剂中地锦草报道^【5】的也是以药典为蓝本，稍有改动，但样品都要提纯处理。仅查阅到一篇文献^【6】报道的地锦草是以对照药材为对照，进行薄层鉴别的，但样品的制备也是非常繁琐的，展开剂是正己烷-乙酸乙醇(5∶1)，显色剂是5％磷钼酸乙醇液。目前查阅到的文献都是单味药材的鉴别，还未查阅到与苦参的同时鉴别报道。

苦参为豆科植物苦参的干燥根，主含生物碱类，如苦参碱、氧化苦参碱、槐果碱、槐胺碱、金雀花碱等，还含黄酮类，多数为二氢黄酮和二氢黄酮醇类，少数为黄酮类、黄酮醇类、异黄酮类等等。具有清热燥湿，杀虫，利尿之功效。用于热痢，便血，黄疸尿闭，赤白带下，阴肿阴痒，湿疹，湿疮，皮肤瘙痒，疥廯麻风；外治滴虫性阴道炎。其薄层鉴别中国药典2015版一部，采用同一供试品溶液，通过二块薄层板鉴别三种生物碱，第一块薄层板是将样品和对照品点在碱性硅胶G薄层板，进行二次展开，即，先以甲苯-丙酮-甲醇(8∶3∶ 0.5)为展开剂，展开8cm，取出，晾干，再以甲苯-乙酸乙酯-甲醇-水(2∶4∶2∶1)10℃以下放置的上层溶液展开后，依次喷雾碘化铋钾试液和亚硝酸钠乙醇试液，日光下检视呈色的苦参碱和槐定碱斑点；另一块是将样品和对照品点于碱性硅胶G薄层板，以三氯甲烷-甲醇 -浓氨试液(5∶0.6∶0.3)10℃以下放置的下层溶液展开后，依次喷雾碘化铋钾试液和亚硝酸钠乙醇试液，日光下检视氧化苦参碱的颜色斑点。虽然供试品溶液制备不复杂，只需三氯甲烷提取后，提取液蒸干，三氯甲烷溶解残渣，即为到供试品溶液，但需要特制的碱性硅胶G薄层板，其中第一块板要二次展开，还要依次喷雾两种显色剂。其操作规程也是比较麻烦的。查阅的文献得知苦参药材基本都是采用药典的方法^【7】，在复方制剂中其供试品溶液的制备方法基本与药材大同小异，仅以苦参碱对照品为指标，将展开剂修订为苯-丙酮-乙酸乙酯- 氨水(2∶3∶4∶0.2)，喷以改良的碘化铋钾试液显色。还未查阅到与地锦草的同时鉴别报道。

白及为兰科植物白及的干燥块茎，其主要化学成分是联苄类、二氢菲类、联菲类及其菲类的衍生物，此外还有挥发油，粘液质，白及甘露聚糖，葡萄糖等。具有收敛止血，消肿生肌之功效。用于咯血、吐血、外伤出血，疮疡肿毒，皮肤皲裂。其薄层鉴别中国药典2015 版一部收载的方法是：取白及粉末2g，加70％甲醇20ml，超声处理30分钟，滤液蒸干，残渣加水10ml使溶解，用乙醚振摇提取2次，每次20ml，乙醚液挥至1ml，作为供试品溶液。另取白及对照药材1g，同法制成对照药材溶液。取两种溶液分别点于同一硅胶G薄层板上，以环己烷-乙酸乙酯-甲醇(6∶2.5∶1)为展开剂，展开后，喷以10％硫酸乙醇溶液，105℃加热数分钟，放置30～60分钟，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色斑点；置紫外光灯(365nm)下检视，显相同的棕红色荧光斑点。按相似相容的提取原则，本鉴别检测的是乙醚溶解的脂溶性成分。文献报道的方法^【8】与药典不同，需进行水解后，乙醚提取。方法如下：取白及粉末4g，加甲醇20ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水20ml使溶解，再加盐酸2ml，加热回流30分钟，立即冷却，用乙醚振摇提取2次，每次40ml。合并乙醚液，蒸干，加三氯甲烷1ml溶解残渣，作为供试品溶液。另取白及对照药材2g，同法制成对照药材溶液。吸取对照药材溶液与供试品溶液各5μl，以条带状点于同一硅胶预制薄层板上，以石油醚(30-60℃)-甲酸乙酯-甲酸(15∶5∶1)的上层溶液为展开剂，展开8 cm，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同的荧光斑点。文献报道^【9】在制剂中也是采用药典的方法进行薄层鉴别的。

综上，仙鹤草、地榆、三七、地锦草、苦参和白及的薄层鉴别，不论是药材，还是制剂都是鉴别的白及一味药材，其供试品溶液的制备方法都较繁琐，有的还要进行二次展开，费时、费力，污染环境。甚至展开剂中还应用了已经禁用的剧毒试剂苯。还未查阅到复方制剂中仙鹤草、地榆和三七；地锦草和苦参的同时薄层鉴别报道。

锦灵肠安胶囊由8味药材组成，其处方配比如下：

地锦草45-50份 灵芝13-18份 茯苓11-16份 仙鹤草20-25份

地榆27-32份 苦参17-22份 白及9-13份 三七3-6份

制备方法以上八味，三七、白及，粉碎成细粉，备用；地锦草与仙鹤草加70％乙醇，提取2次，每次2.5小时，滤过，回收乙醇至无醇味，备用；取苦参，加pH3的盐酸水溶液，浸泡过夜，提取2小时，滤过，药渣再加水，提取两小时，滤过，合并滤液，在真空度为0.06Mpa， 70℃减压浓缩至密度约为1.15(50℃)清膏，70℃减压干燥或喷雾干燥，得苦参干膏；其余灵芝、茯苓、地榆，加水，提取2次，每次2.5小时，滤过，滤液在真空度为0.06Mpa，温度70℃减压浓缩至相对密度1.10-1.15清膏，与醇提清膏合并，继续在真空度为0.06Mpa，温度70℃减压减压浓缩成稠膏，加入药材细粉，搅拌均匀，在真空度为0.06Mpa，70℃减压干燥成干膏，将干膏粉、苦参干膏与适量淀粉，粉碎混合均匀，用80％乙醇制粒，整粒，装胶囊1000粒，即得。

发明内容

本发明就是在上述研究背景的基础上，针对其薄层鉴别繁琐、费时、方法污染环境和高成本的弊端，发明了锦灵肠安胶囊中六种药材的快速薄层鉴别方法。即，用简便、快捷的前处理方法得到同一供试品溶液和六种对照药材溶液，在三块薄层板上同时鉴别了仙鹤草、地榆、三七、地锦草、苦参和白及；斑点分离良好，互不干扰。六味药材的薄层鉴别完成只需样品2g、对照药材共1.4g、提取溶剂和展开剂37ml、薄层板3块、时间1小时，方法无萃取、无浓缩、无蒸发、简便、快捷、环保、斑点清晰。上述鉴别中仙鹤草、地榆、地锦草和白及的新鉴别特征点；仙鹤草、地榆和三七；地锦草和苦参的同时鉴别，均为首次报道。

本发明解决其技术问题所采用的方案为：

(1)取本品2g，加甲醇5ml，超声处理15分钟，离心，上清液作为供试品溶液；另取仙鹤草、地榆和三七对照药材粉末0.3、0.3和0.1g，分别加甲醇2ml，超声处理15分钟，离心，上清液作为各自对照药材溶液；吸取对照药材溶液各5μl、供试品溶液8～10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比8∶2∶4∶1的三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-浓氨试液为展开剂，展开2cm，取出，热风吹干，再置同一展开剂中，展至10cm，取出，热风吹干，喷以 10％硫酸乙醇溶液，105℃加热至斑点显色清晰，日光检视检视，供试品色谱中，在与各对照药材色谱相应的位置上，分别显相同颜色的主斑点；

(2)取地锦草、苦参对照药材粉末0.3、0.2g，分别加甲醇2ml，超声处理15分钟，离心，上清液作为对照药材溶液；吸取对照药材溶液5μl，(1)项下的供试品溶液5～8μl，分别点于同一硅胶GF₂₅₄薄层板上，以体积比为9∶1∶2.5∶1的三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-浓氨试液的下层溶液为展开剂，展开，取出，热风吹干，置紫外光灯365nm下检视，供试品色谱中，在与地锦草对照药材色谱相应的位置上，显相同的红色荧光主斑点；再喷以碘化铋钾试液，日光下检视，供试品色谱中，在与苦参对照药材色谱相应的位置上，显相同的橙红色主斑点；在与地锦草对照药材色谱相应的位置上，显相同的浅棕绿色主斑点；

(3)取白及对照药材0.2g，加甲醇2ml，超声处理15分钟，离心，上清液作为对照药材溶液；吸取对照药材溶液5μl，(1)项下的供试品溶液3～5μl，分别点于同一硅胶GF₂₅₄薄层板上，以体积比为2.5∶1∶4∶1的三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-浓氨试液为展开剂，展开，取出，热风吹干，喷以新鲜配置的体积比1∶6的5％的香草醛硫酸溶液-乙醇的混合溶液，105 加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色主斑点。

本发明的原理如下：

依据中药各有效成分的化学结构与性质，遵循相似相容的提取原则，采用适宜的提取溶剂，简便、快捷地制成同一供试品溶液与对照药材溶液。再通过多组分展开剂中每种展开剂极性不同，展开速度而异，携带的成分不一样，在薄层板上的吸附、解吸附能力的差别，使各成分斑点得以分离，在各自不同的检视条件下，呈现不同的颜色斑点，实现同一块薄层板上，不同的检视条件下，检视多种药材的特征性成分。

本发明的创新点及有益效果如下：

1.取供试品溶液、仙鹤草、地榆和三七对照药材溶液，分别点在同一块薄层板上，以体积比8∶2∶4∶1的三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-浓氨试液为展开剂，展开2cm，取出，热风吹干，既可防止斑点扩散，又能做到了要分离的成分已经不在同一起点，确保第二次展开后，各斑点分离良好，用10％硫酸乙醇溶液显色，供试品在与仙鹤草对照药材色谱相应的位置上，呈现的2个颜色斑点，属于偏水溶性化合物，为新的鉴别特征点；供试品在与地榆对照药材色谱相应的位置上，呈现的紫红色斑点，不是没食子酸的斑点，也为新的鉴别特征点；在同一块薄层板上同时鉴别仙鹤草、地榆和三七(图1)，目前还未见相同报道。

2.以体积比为9∶1∶2.5∶1的三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-浓氨试液的下层溶液为展开剂，同时鉴别地锦草和苦参，是借助于展开剂的碱性，将处方中地榆、灵芝和仙鹤草的酸性成分拖在了原点，仅推动了一些碱性和中性的成分，随展开剂上行展开，使展开的薄层板上，在符合规定的Rf值范围内，地锦草仅呈现了紫外光灯365nm下的1个红色荧光斑点(图2)，显色后，日光下变为浅棕绿色；苦参呈现了显色后日光下的2个橙红色斑点(图3)；其他6味药材的成分基本上都被隐蔽或排除。

3.以体积比为2.5∶1∶4∶1的三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-浓氨试液为展开剂，展开后，喷以新鲜配置的体积比1∶6的5％的香草醛硫酸溶液-乙醇的混合溶液，105加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显2个清晰的棕褐色主斑点(图4)，从展开剂的组成配比分析，属于水溶性成分。与中国药典鉴别的乙醚溶解的成分，极性不同，不是同一化合物，为新发现的鉴别特征点。

4.上述六种药材的鉴别，供试品和对照药材均是甲醇超声的上清液，直接点样，展开，即可获得清晰的薄层鉴别斑点。与报道的采用提取溶剂反复萃取除杂质方法相比，具有简便、快捷、高效、环保的实用效果。并使薄层鉴别增订率达到了75％，高于组方味数相同的其他制剂。

5.本鉴别方法的创新性还在于突破了传统的以提取溶剂，反复纯化供试品溶液的繁琐性和严重的环境污染性，以一种新的举措，即展开剂的极性、酸碱性、显色剂的选择性和检视条件的局限性，来排除众多不被检测成分的干扰，获得清晰的薄层鉴别斑点。该举措为薄层鉴别排干扰，减少污染，提高效率，提升薄层鉴别的清晰度，提供了新思路，具创造性与广泛的实用性。

附图说明

图1为仙鹤草、地榆和三七喷雾10％硫酸乙醇溶液显色后，日光下的薄层色谱图。

图2为地锦草在紫外光灯365nm下的薄层色谱图。

图3为苦参和地锦草喷雾碘化铋钾试液显色后，日光下的薄层色谱图。

图4为白及喷雾体积比1∶6的5％的香草醛硫酸溶液-乙醇的混合溶液显色后，日光下的薄层色谱图。

图1中，1.仙鹤草空白；2.仙鹤草对照药材；3.4.5样品；6.地榆对照药材；7.地榆空白；8.三七对照药材；9.三七空白。

图2.3为同一块薄层板，不同检视条件下的薄层色谱图，图中，1.地锦草空白；2.地锦草对照药材；3.4.5.样品；6.苦参对照药材；7.苦参空白。

图4中，1.2.3样品；4.白及对照药材；5.空白。

本发明具体实施方式如下：

(1)取本品2g，加甲醇5ml，超声处理15分钟，离心，上清液作为供试品溶液；另取仙鹤草、地榆和三七对照药材粉末0.3、0.3和0.1g，分别加甲醇2ml，超声处理15分钟，离心，上清液作为各自对照药材溶液；吸取对照药材溶液各5μl、供试品溶液8～10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比8∶2∶4∶1的三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-浓氨试液为展开剂，展开2cm，取出，热风吹干，再置同一展开剂中，展至10cm，取出，热风吹干，喷以 10％硫酸乙醇溶液，105℃加热至斑点显色清晰，日光检视检视，供试品色谱中，在与各对照药材色谱相应的位置上，分别显相同颜色的主斑点；

(2)取地锦草、苦参对照药材粉末0.3、0.2g，分别加甲醇2ml，超声处理15分钟，离心，上清液作为对照药材溶液；吸取对照药材溶液5μl，(2)项下的供试品溶液5～8μl，分别点于同一硅胶GF₂₅₄薄层板上，以体积比为9∶1∶2.5∶1的三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-浓氨试液的下层溶液为展开剂，展开，取出，热风吹干，紫外光灯365nm下检视，供试品色谱中，在与地锦草对照药材色谱相应的位置上，显相同的红色荧光主斑点；再喷以碘化铋钾试液，日光下检视，供试品色谱中，在与苦参对照药材色谱相应的位置上，显相同的橙红色主斑点；在与地锦草对照药材色谱相应的位置上，显相同的浅棕绿色主斑点；

(3)取白及对照药材0.2g，加甲醇2ml，超声处理15分钟，离心，上清液作为对照药材溶液；吸取对照药材溶液5μl，(1)项下的供试品溶液3～5μl，分别点于同一硅胶GF₂₅₄薄层板上，以体积比为2.5∶1∶4∶1的三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-浓氨试液为展开剂，展开，取出，热风吹干，喷以新鲜配置的体积比1∶6的5％的香草醛硫酸溶液-乙醇的混合溶液，105 加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色主斑点。

参考文献

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Claims (3)

1.一种锦灵肠安胶囊中六种药材的快速薄层鉴别方法，其特征在于：

(1)取本品2g，加甲醇5ml，超声处理15分钟，离心，上清液作为供试品溶液；另取仙鹤草、地榆和三七对照药材粉末0.3、0.3和0.1g，分别加甲醇2ml，超声处理15分钟，离心，上清液作为各自对照药材溶液；吸取对照药材溶液各5μl、供试品溶液8～10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比8∶2∶4∶1的三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-浓氨试液为展开剂，展开2cm，取出，热风吹干，再置同一展开剂中，展至10cm，取出，热风吹干，喷以10％硫酸乙醇溶液，105℃加热至斑点显色清晰，日光检视检视，供试品色谱中，在与各对照药材色谱相应的位置上，分别显相同颜色的主斑点；

(2)取地锦草、苦参对照药材粉末0.3、0.2g，分别加甲醇2ml，超声处理15分钟，离心，上清液作为对照药材溶液；吸取对照药材溶液5μl，(1)项下的供试品溶液5～8μl，分别点于同一硅胶GF₂₅₄薄层板上，以体积比为9∶1∶2.5∶1的三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-浓氨试液的下层溶液为展开剂，展开，取出，热风吹干，置紫外光灯365nm下检视，供试品色谱中，在与地锦草对照药材色谱相应的位置上，显相同的红色荧光主斑点；再喷以碘化铋钾试液，日光下检视，供试品色谱中，在与苦参对照药材色谱相应的位置上，显相同的橙红色主斑点；在与地锦草对照药材色谱相应的位置上，显相同的浅棕绿色主斑点；

(3)取白及对照药材0.2g，加甲醇2ml，超声处理15分钟，离心，上清液作为对照药材溶液；吸取对照药材溶液5μl，(1)项下的供试品溶液3～5μl，分别点于同一硅胶GF₂₅₄薄层板上，以体积比为2.5∶1∶4∶1的三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-浓氨试液为展开剂，展开，取出，热风吹干，喷以新鲜配置的体积比1∶6的5％的香草醛硫酸溶液-乙醇的混合溶液，105加热至斑点显色清晰，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色主斑点。

2.根据权利要求1所述的一种锦灵肠安胶囊中六种药材的快速薄层鉴别方法，其特征在于所述的六种药材系指仙鹤草、地榆、三七、地锦草、苦参和白及。

3.根据权利要求1所述的一种锦灵肠安胶囊中六种药材的快速薄层鉴别方法，其特征在于供试品溶液和六种对照药材溶液的制备，只需甲醇17ml、时间20分钟，简便、快捷、环保、高效。

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