CN110678466A - 作为hpk1抑制剂的二氮杂萘类 - Google Patents

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Abstract

本申请描述了二氮杂萘化合物以及它们作为HPK1抑制剂的用途。所述化合物可用于治疗HPK1依赖性病症和增强免疫应答。本申请也描述了抑制HPK1的方法、治疗HPK1依赖性病症的方法、增强免疫应答的方法和制备所述二氮杂萘化合物的方法。

Description

作为HPK1抑制剂的二氮杂萘类
相关申请的交叉引用
本申请要求2017年3月30日提交的国际专利申请号PCT/CN2017/078792和2018年2月15日提交的国际专利申请号PCT/CN2018/076909的优先权，该申请的内容通过引用其整体并入本文。
序列表
本申请包含序列表，其已经以ASCII格式电子提交，并且通过引用其整体并入本文。在2018年3月26日创建的所述ASCII副本命名为P34139_WO_2_SL.TXT，其大小为21KB。
技术领域
本发明涉及调节HPK1功能的化合物，其可用于治疗由HPK1介导的疾病和病况例如癌症。
背景技术
肿瘤学家们用于治疗癌症的主要治疗方式是手术切除、放射疗法和经典化疗药物。不幸的是，对于许多肿瘤或癌症形式来说，手术切除不是可行的选择。此外，放射疗法和化疗药物不仅仅靶向患病的细胞，因而最终损害健康的细胞。通过利用肿瘤特异性抗原表达或肿瘤细胞内特定蛋白质的不当过度表达或不当活化，开发更特异性靶向肿瘤细胞的疗法，但肿瘤细胞倾向于发生突变而且可对特异性靶向肿瘤细胞的药物产生抵抗。
已出现一种新的癌症治疗范例，其利用患者自身的免疫系统，来克服被许多癌症所用的免疫侵袭策略，并增强抗肿瘤免疫力。这样一种策略抑制免疫应答的负调节因子(其通常起到维持外周耐受的功能)，从而允许肿瘤抗原被识别为非自身实体。
造血祖细胞激酶1(HPK1)为树突细胞活化及T和B细胞应答的负调节因子的实例(其可靶向增强抗肿瘤免疫力)。HPK1主要由造血细胞(包括早期祖细胞)表达。在T细胞中，据信，HPK1通过磷酸化Ser376处的SLP76(Di Bartolo et al.(2007)JEM 204:681-691)和Thr254处的Gads减少信号传导微团簇的持久性来负调节T细胞活化，这导致与经磷酸化的SLP76和Gads结合的14-3-3蛋白质的募集，而从含LAT的微团簇中释放出SLP76-Gads-14-3-3配合物(Lasserre et al.(2011)J Cell Biol 195(5):839-853)。HPK1也可响应于通常由肿瘤分泌的前列腺素E2而被激活，这有助于肿瘤细胞从免疫系统中逃逸。
发明内容
本文提供酶HPK1的拮抗剂。所述化合物具有式I或Ia所示的结构，或者为其药学上可接受的盐、代谢物、前药或衍生物。还提供制备式I或Ia化合物的方法。
所述化合物可用于抑制HPK1激酶活性、增强免疫应答和治疗HPK1依赖性病症。因此，还提供药物组合物，其包含式I或Ia化合物或其药学上可接受的盐、前药、代谢物或衍生物和药学上可接受的载体。提供抑制HPK1的方法，其包括使HPK1与有效量的式I或Ia化合物或其药学上可接受的盐、前药、代谢物或衍生物接触。提供治疗HPK1依赖性病症的方法，其包括向有此需要的受试者给药式I或Ia化合物或其药物制剂。还提供用于治疗HPK1依赖性病症的试剂盒，该试剂盒包含含有式I或Ia化合物的药物组合物；以及使用说明。
具体实施方式
本文公开式I或Ia化合物及其药物组合物，它们为HPK1(造血祖细胞激酶1)的抑制剂或调节剂。因此，所述化合物和组合物可用于治疗由HPK1介导的疾病和病症。治疗方法的一个例子为受试者患有癌症的情况。该化合物不仅可用于对抗癌症，还可有利地用于增强有此需要的受试者的免疫应答。
现在，将在下文中更全面地描述本公开的主题。然而，受益于前述说明书呈现的教导，本领域技术人员将想到本文所阐述的本公开的主题的许多变型和其它实施方案。因此，应该理解的是，本公开的主题不限于所公开的具体实施方案，且那些变型和其它实施方案旨在包括在所附权利要求的范围内。换句话说，本文所描述的主题涵盖所有替代、变型和等同物。若所并入的文献、专利和类似材料中的一个或多个与本申请不同或相矛盾，包括但不限于定义的术语、术语用法、所描述的技术等，则以本申请为准。除非另有限定，否则本文使用的所有技术和科学术语具有的含义与本领域普通技术人员通常理解的相同。本文提及的所有出版物、专利申请、专利和其它参考文献都通过引用其整体并入本文。
定义
术语“取代基”是指替代分子上氢原子的原子或基团。术语“取代的”表示特定的分子带有一个或多个取代基。术语“式…的化合物”或“式…化合物”是指选自式I或Ia所定义的化合物的属的任何化合物。
如本文所用，术语“烷基”是指含有1至12个碳原子的直链的或支链的烃基基团。术语“低级烷基”是指C1-C6烷基链。烷基基团的实例包括甲基、乙基、正丙基、异丙基、叔丁基和正戊基。烷基基团可任选取代有一个或多个取代基。
术语“烯基”是指具有2-8个碳原子的直链或支链一价烃基(C2-C8)、优选(C2-6)，其具有至少一个不饱和位点，即碳-碳sp2双键，其中所述烯基基团可独立地任选取代有一个或多个本文所述的取代基，并包括具有“顺式”和“反式”取向的基团，或者“E”和“Z”取向的基团。实例包括但不限于乙烯基(ethylenyl)或乙烯基(vinyl)(-CH═CH2)、烯丙基(-CH2CH═CH2)，等等。
术语“亚烯基”(alkenylene)是指具有2-8个碳原子的直链或支链二价烃基(C2-C8)、优选(C2-6)，其具有至少一个不饱和位点，即碳-碳sp2双键，其中所述亚烯基基团可独立地任选取代有一个或多个本文所述的取代基，并且包括具有“顺式”和“反式”取向的基团，或者“E”和“Z”取向的基团。实例包括但不限于亚乙烯基(ethylenylene)或亚乙烯基(vinylene)(-CH═CH-)、烯丙基(-CH2CH═CH-)，等等。
术语“烷氧基”是指-O-烷基基团。烷氧基基团可任选取代有一个或多个取代基。
术语“卤代烷氧基”是指被一个或多个卤素取代基取代的-O-烷基基团。卤代烷氧基基团的实例包括三氟甲氧基和2,2,2-三氟乙氧基。
术语“卤代烷基”是指被一个或多个卤素取代基取代的烷基基团。卤代烷基基团的实例包括二氟甲基(CHF2)、三氟甲基(-CF3)和2,2,2-三氟乙基。
如本文所用，术语“卤素”或“卤代”意指-F、-Cl、-Br或-I。
如本文所用，所述名称“(CO)”和“C(O)”用于表示羰基部分。适合的羰基部分的实例包括但不限于酮和醛部分。
术语“环烷基”是指3-8元3-7元或3-6元或3-5元或3-4元的烃且可为单环或双环的。该环可为饱和或可具有一定不饱和度。环烷基基团可任选取代有一个或多个取代基。在一个实施方案中，环烷基基团各个环的0个、1个、2个、3个或4个原子可以被取代基取代。环烷基基团的代表性实例包括环丙基、环戊基、环己基、环丁基、环庚基、环戊烯基、环戊二烯基、环己烯基、环己二烯基等。
术语“芳基”是指烃族单环、双环或三环芳族环系。芳基基团可任选取代有一个或多个取代基。在一个实施方案中，芳基基团各个环的0个、1个、2个、3个、4个、5个或6个原子可被取代基取代。芳基基团的实例包括苯基、萘基、蒽基、芴基、茚基、薁基，等等。
术语“杂芳基”是指芳族5-8元环体系，其中所述杂原子选自O、N或S，其余的环原子为碳(除非另有说明，否则具有适当的氢原子)。杂芳基基团可任选取代有一个或多个取代基。在一个实施方案中，杂芳基基团各个环的0个、1个、2个、3个或4个原子可被取代基取代。杂芳基基团的实例包括吡啶基、呋喃基、噻吩基、吡咯基、噁唑基、噁二唑基、咪唑基、噻唑基、异噁唑基、喹啉基、吡唑基、异噻唑基、哒嗪基、嘧啶基、吡嗪基、三嗪基、异喹啉基、吲唑基，等等。
术语“杂环基”或“杂环烷基”是指非芳族3-8元单环、7-12元双环或10-14元三环环系，其包含1-3个杂原子(若为单环的)、1-6个杂原子(若为双环的)或1-9个杂原子(若为三环的)，所述杂原子选自O、N、S、B、P或Si，其中该非芳族环系为完全饱和的。杂环烷基基团可任选取代有一个或多个取代基。在一个实施方案中，杂环烷基基团各个环的0个、1个、2个、3个或4个原子可被取代基取代。代表性的杂环烷基基团包括哌啶基、哌嗪基、四氢吡喃基、吗啉基、硫代吗啉基、1,3-二氧杂环戊基、THF基、四氢噻吩基、噻吩基，等等。
术语“烷基氨基”是指进一步取代有一个或两个烷基基团的氨基取代基。术语“氨基烷基”是指进一步取代有一个或多个氨基基团的烷基取代基。术语“羟基烷基”是指进一步取代有一个或多个羟基基团的烷基取代基。烷基氨基、氨基烷基、巯基烷基、羟基烷基、巯基烷氧基、磺酰基烷基、磺酰基芳基、烷基羰基和烷基羰基烷基的烷基或芳基部分可任选取代有一个或多个取代基。
术语“羟基烷基”是指进一步取代有一个或多个羟基基团的烷基取代基。该烷基部分可进一步任选取代有一个或多个取代基。
取代基和/或变量的组合，只有在这种组合产生正确的化合价时，才是允许的。除非上下文另有说明，否则连字符(-)表示所述侧基或基团的连接点。
术语“互变异构体”或“互变异构形式”是指具有不同能量的结构异构体，其可通过低能垒相互转化。例如，质子互变异构体(也称为质子互变的异构体)包括通过质子迁移的相互转化，例如酮-烯醇和亚胺-烯胺异构化。化合价互变异构体包括通过重组一些成键电子的相互转化。
术语“手性”是指具有镜像配偶体的不可重叠性的分子，而术语“非手性”是指可与其镜像配偶体重叠的分子。
术语“非对映异构体”是指具有两个或更多个不对称中心并且其分子不为彼此的镜像的立体异构体。
术语“对映异构体”是指彼此不可重叠的镜像的化合物的两种立体异构体。两种对映异构体的等摩尔混合物称为“外消旋混合物”或“外消旋体”。
术语“异构体”或“立体异构体”是指具有相同化学组成但空间中原子或基团的排列不同的化合物。
关于手性中心的命名，术语“d”和“1”(或+和-)构型如IUPAC建议书所定义。
此外，本文所述的化合物可包括具有以下任一种几何结构的烯烃：“Z”是指所谓的“顺式”(同侧)构型，而“E”是指所谓的“反式”(对侧)构型。
“溶剂合物”是指一个或多个溶剂分子与本发明化合物的缔合物(association)或配合物(complex)。形成溶剂合物的溶剂的实例包括但不限于水、异丙醇、乙醇、甲醇、DMSO、乙酸乙酯、乙酸和乙醇胺。术语“水合物”是指溶剂分子为水的配合物。
“代谢物”是通过在体内代谢特定化合物或其盐而产生的产物。可使用本领域已知的常规技术鉴定化合物的代谢物，并使用如本文所述的测试确定它们的活性。此类产物可由例如所述给药的化合物的氧化、羟基化、还原、水解、酰胺化、脱酰胺化、酯化、脱酯化、酶促裂解等产生。因此，本发明包括本发明化合物的代谢物，包括通过以下方法产生的化合物，该方法包括使本发明化合物与哺乳动物接触足以产生其代谢产物的一段时间。
短语“药学上可接受的”表示该物质或组合物必须在化学和/或毒理学上与包含制剂的其它成分和/或用其治疗的受试者相容。
本文使用的短语“药学上可接受的盐”是指本发明化合物的药学上可接受的有机盐或无机盐。示例性盐包括但不限于硫酸盐、柠檬酸盐、乙酸盐、草酸盐、氯化物、溴化物、碘化物、硝酸盐、硫酸氢盐、磷酸盐、酸式磷酸盐、异烟酸盐、乳酸盐、水杨酸盐、酸式柠檬酸盐、酒石酸盐、油酸盐、丹宁酸盐、泛酸盐、酒石酸氢盐、抗坏血酸盐、琥珀酸盐、马来酸盐、龙胆酸盐、富马酸盐、葡萄糖酸盐、葡萄糖醛酸盐、糖酸盐、甲酸盐、苯甲酸盐、谷氨酸盐、甲磺酸盐(methanesulfonate“mesylate”)、乙磺酸盐、苯磺酸盐、对甲苯磺酸盐、双羟萘酸盐(即1,1'-亚甲基-双-(2-羟基-3-萘甲酸)盐)、碱金属(例如钠和钾)盐、碱土金属(例如镁)盐和铵盐。药学上可接受的盐可涉及包含另一种分子，该分子例如乙酸根离子、琥珀酸根离子或其它抗衡离子。该抗衡离子可为任何有机或无机部分，其稳定所述母体化合物上的电荷。此外，药学上可接受的盐在其结构中可具有多于一个带电的原子。在多个带电原子为药学上可接受的盐的一部分的实例中，该盐可以具有多个抗衡离子。因此，药学上可接受的盐可具有一个或多个带电原子和/或一个或多个抗衡离子。
如本文所用的“载体”包括药学上可接受的载体、赋形剂或稳定剂，它们对所用剂量和浓度的细胞或哺乳动物是无毒的。所述生理学上可接受的载体通常为pH缓冲水溶液。生理学上可接受的载体的非限制性实例包括缓冲剂，例如磷酸盐、柠檬酸盐和其它有机酸；抗氧化剂，包括抗坏血酸；低分子量(小于约10个残基)多肽；蛋白质，例如血清白蛋白、明胶或免疫球蛋白；亲水性聚合物，例如聚乙烯基吡咯烷酮；氨基酸，例如甘氨酸、谷氨酰胺、天冬酰胺、精氨酸或赖氨酸；单糖、二糖和其它碳水化合物，包括葡萄糖、甘露糖或糊精；螯合剂，例如EDTA；糖醇如甘露醇或山梨糖醇；成盐的抗衡离子，例如钠；以及/或非离子表面活性剂，例如TWEENTM、聚乙二醇(PEG)和PLURONICSTM。在某些实施方案中，所述药学上可接受的载体为非天然存在的药学上可接受的载体。
本文中“抑制剂”一词的使用意指抑制HPK1活性的分子。本文中的“抑制”意指，与不存在该抑制剂时所述酶的活性相比，降低该目标酶的活性。在一些实施方案中，术语“抑制”意指HPK1活性降低至少约5％、至少约10％、至少约20％、至少约25％、至少约50％、至少约60％、至少约70％、至少约80％、至少约90％或至少约95％。在其它实施方案中，抑制意指HPK1活性降低约5％至约25％、约25％至约50％、约50％至约75％或约75％至100％。在一些实施方案中，抑制意指HPK1活性降低约95％至100％，例如活性降低95％、96％、97％、98％、99％或100％。可使用各种技术测量这种降低，这些技术为本领域技术人员可掌握的，其包括体外激酶测定。
如本文所用，“HPK1拮抗剂”或“HPK1抑制剂”为一种分子，该分子降低、抑制或以其它方式减少HPK1的一种或多种生物活性(例如，丝氨酸/苏氨酸激酶活性、在TCR激活后募集到TCR配合物、与蛋白质结合配偶体(例如SLP76)相互作用)。使用所述HPK1拮抗剂的拮抗作用不一定表明完全消除HPK1活性。相反，该活性可减少统计上显著的量，包括例如，与适当的对照相比，减少HPK1活性的至少约5％、10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、95％或100％。在一些实施方案中，所述HPK1拮抗剂降低、抑制或以其它方式减少HPK1的丝氨酸/苏氨酸激酶活性。在这些实施方案的一些实施方案中，所述HPK1拮抗剂降低、抑制或以其它方式降低由HPK1介导的SLP76和/或Gads的磷酸化作用。本发明化合物直接与HPK1结合并抑制其激酶活性。
“特异性拮抗剂”是指降低、抑制或以其它方式降低限定靶标的活性的试剂，该降低量大于不相关靶标的活性。例如，HPK1特异性拮抗剂将HPK1的至少一种生物活性降低一定量，该一定量在统计学上大于所述拮抗剂对任何其它蛋白质(例如，其它丝氨酸/苏氨酸激酶)的抑制作用。在一些实施方案中，所述拮抗剂对所述靶标的IC50为对非靶标拮抗剂IC50的约90％、80％、70％、60％、50％、40％、30％、20％、10％、5％、1％、0.1％、0.01％、0.001％或更低。本发明化合物可为或不为特异性HPK1拮抗剂。特异性HPK1拮抗剂降低HPK1的生物活性的量，该量在统计学上大于该拮抗剂对任何其它蛋白质(例如，其它丝氨酸/苏氨酸激酶)的抑制作用。在某些实施方案中，所述HPK1拮抗剂特异性地抑制HPK1的丝氨酸/苏氨酸激酶活性。在这些实施方案的一些实施方案中，该HPK1拮抗剂对HPK1的IC50为该HPK1拮抗剂对另一种丝氨酸/苏氨酸激酶或其它类型激酶(例如酪氨酸激酶)的IC50的约90％、80％、70％、60％、50％、40％、30％、20％、10％、0.1％、0.01％、0.001％或更低。
术语“治疗”是指治疗性治疗和防病或预防性措施，其中所述目的为预防或减缓(减轻)不期望的生理变化或病症，例如癌症的发展或扩散。出于本发明的目的，有益的或期望的临床结果包括但不限于减轻症状、减轻疾病程度、稳定(即，不恶化)疾病状态、延迟或减缓疾病进展、改善或缓解所述疾病状态以及缓解(无论是部分亦或全部)，无论是可检测的还是不可检测的。与预期生存期(若不接受治疗)相比，“治疗”还意味着延长生存期。需要治疗的患者包括，已患有该病况或病症的那些患者，以及倾向于患有该病况或病症的那些患者或者要预防该病况或病症的那些患者。
术语“给药”或“给予”包括将所述化合物引入受试者以实现其预期功能的途径。可使用的给药途径的实例包括注射(皮下、静脉内、肠胃外、腹膜内、鞘内)、局部、口服、吸入、直肠和经皮。
术语“有效量”包括在必要的剂量和时间段内有效实现所需结果的量。有效量的化合物可根据例如受试者的疾病状态、年龄和体重等因素以及该化合物在该受试者中引发所需响应的能力而变化。可调整剂量方案以提供最佳治疗响应。
本文所用的短语“全身给药”、“全身地给药”、“外周给药”和“外周地给药”意指给药化合物、药物或其它物质，使其进入所述患者的系统以及因此受到新陈代谢和其它类似过程的影响。
短语“治疗有效量”意指本发明化合物的量，该量(i)治疗或预防特定疾病、病况或病症，(ii)减弱、改善或消除特定疾病、病况或病症的一种或多种症状，或(iii)预防或延迟本文所述特定疾病、病况或病症的一种或多种症状的发作。在癌症的情况下，所述治疗有效量的药物可减少癌细胞的数量；减小肿瘤大小；抑制(即，在某种程度上减缓并且优选地停止)癌细胞浸润到外周器官中；抑制(即，在某种程度上减缓并且优选地停止)肿瘤转移；在一定程度上抑制肿瘤生长；和/或在一定程度上缓解与该癌症相关的一种或多种症状。到该药物可阻止和/或杀死现有癌细胞生长的程度时，它可为细胞抑制性和/或细胞毒性的。对于癌症治疗，可通过例如评估该疾病进展时间(TTP)和/或确定响应率(RR)来测量功效。
术语“受试者”是指动物例如哺乳动物，包括但不限于灵长类动物(例如人)、牛、绵羊、山羊、马、狗、猫、兔、大鼠、小鼠等。在某些实施方案中，所述受试者为人。
术语“异常细胞生长”、“不受调节的细胞生长”和“过度增殖性病症”在本申请中可互换使用。除非另有说明，否则本文所用的“异常细胞生长”是指不受正常调节机制支配的细胞生长(例如，丧失接触抑制)。
术语“癌症”是指受试者中以不受调节的细胞生长为特征的所述症况，其中所述癌细胞能够局部侵入和/或转移至不连续的部位。如本文所用，“癌症细胞”、“癌细胞”或“肿瘤细胞”是指以这种不受调节的细胞生长和侵入性质为特征的所述细胞。术语“癌症”涵盖所有类型的癌症，包括但不限于所有形式的癌瘤、黑色素瘤、胚细胞瘤(blastoma)、肉瘤(sarcoma)、淋巴瘤(lymphoma)和白血病(leukemia)，包括但不限于膀胱癌、膀胱癌瘤(bladder carcinoma)、脑肿瘤(brain tumor)、乳腺癌、宫颈癌(cervical cancer)、结肠直肠癌、食道癌(esophageal cancer)、子宫内膜癌(endometrial cancer)、肝细胞癌瘤(hepatocellular carcinoma)、喉癌(laryngeal cancer)、肺癌、骨肉瘤(osteosarcoma)、卵巢癌、胰腺癌、前列腺癌(prostate cancer)、肾癌瘤(renal carcinoma)和甲状腺癌(thyroid cancer)、急性淋巴细胞白血病(acute lymphocytic leukemia)、急性髓性白血病(acute myeloid leukemia)、室管膜瘤(ependymoma)、尤文氏肉瘤(Ewing’s sarcoma)、胶质母细胞瘤(glioblastoma)、成神经管细胞瘤(medulloblastoma)、神经母细胞瘤(neuroblastoma)、骨肉瘤、横纹肌肉瘤(rhabdomyosarcoma)、横纹肌样癌(rhabdoidcancer)和肾母细胞瘤(nephroblastoma，维尔姆斯肿瘤)。
“化疗剂”为可用于治疗癌症的化学化合物或生物剂。化疗剂的实例包括烷基化剂类，例如塞替派和环磷酰胺
Figure BDA0002289356600000091
烷基磺酸酯类，例如白消安、英丙舒凡和哌泊舒凡；氮杂环丙烷类，例如苯佐替派(benzodopa)、卡波醌(carboquone)、美妥替派(meturedopa)和乌瑞替派(uredopa)；乙撑亚胺和甲基蜜胺类，包括六甲蜜胺(altretamine)、三乙撑蜜胺(triethylenemelamine)、三乙撑磷酰胺(triethylenephosphoramide)、三乙撑硫代磷酰胺(triethylenethiophosphoramide)和三羟甲蜜胺(trimethylomelamine)；番荔枝内酯类(acetogenins)(尤其是布拉他辛(bullatacin)和布拉他辛酮(bullatacinone))；δ-9-四氢大麻酚(屈大麻酚，
Figure BDA0002289356600000101
)；β-拉帕醌(beta-lapachone)；拉帕醇(lapachol)；秋水仙碱；桦木酸；喜树碱(包括合成类似物拓扑替康(topotecan)
Figure BDA0002289356600000102
CPT-11(伊立替康，
Figure BDA0002289356600000103
)、乙酰喜树碱(acetylcamptothecin)、东莨菪素(scopolectin)和9-氨基喜树碱)；苔藓抑素；培美曲塞；凯利他汀(callystatin)；CC-1065(包括其阿多来新(adozelesin)、卡折来新(carzelesin)和比折来新(bizelesin)合成类似物)；足叶草素(podophyllotoxin)；足叶草酸(podophyllinic acid)；替尼泊苷(teniposide)；念珠藻素类(cryptophycins)(具体为念珠藻素1和念珠藻素8)；多拉司他汀(dolastatin)；倍癌霉素(duocarmycin)(包括合成类似物KW-2189和CB1-TM1)；软珊瑚醇(eleutherobin)；潘卡他汀(pancratistatin)；TLK-286；CDP323，口服α-4整合素抑制剂；匍枝珊瑚醇(sarcodictyin)；海绵抑制素(spongistatin)；氮芥，例如苯丁酸氮芥(chlorambucil)、萘氮芥(chlomaphazine)、氯磷酰胺(cholophosphamide)、雌氮芥(estramustine)、异环磷酰胺(ifosfamide)、二氯甲基二乙胺(mechlorethamine)、二氯甲基二乙胺氧化物盐酸盐、美法仑、新恩比兴(novembichin)、苯芥胆甾醇(phenesterine)、泼尼莫司汀(prednimustine)、氯乙环磷酰胺(trofosfamide)、尿嘧啶氮芥(uracil mustard)；亚硝基脲，例如卡莫司汀(carmustine)、吡葡亚硝脲(chlorozotocin)、福莫司汀(fotemustine)、洛莫司汀(lomustine)、尼莫司汀(nimustine)和雷莫司汀(ranimnustine)；抗生素，例如烯二炔抗生素(例如卡里奇霉素，尤其卡里奇霉素γ1I和卡里奇霉素ω1I(参见，例如Nicolaou etal.,Angew.Chem Intl.Ed.Engl.,33：183-186(1994))；达内霉素(dynemicin)，包括达内霉素A；埃斯培拉霉素(esperamicin)；以及新制癌菌素(neocarzinostatin)发色团和相关色蛋白烯二炔抗生素发色团、阿克拉霉素(aclacinomysins)、放线菌素(actinomycin)、安曲霉素(authramycin)、重氮丝氨酸(azaserine)、博莱霉素(bleomycin)、放线菌素C(cactinomycin)、卡拉比星(carabicin)、洋红霉素(carminomycin)、嗜癌菌素(carzinophilin)、色霉素(chromomycin)、放线菌素D(dactinomycin)、道诺霉素(daunorubicin)、地托比星(detorubicin)、6-重氮基-5-氧代-L-正亮氨酸、阿霉素(doxorubicin，包括
Figure BDA0002289356600000104
吗啉代-阿霉素、氰基吗啉代-阿霉素、2-吡咯啉基-阿霉素、阿霉素HCl脂质体注射液
Figure BDA0002289356600000105
和脱氧阿霉素)、表柔比星(epirubicin)、依索比星(esorubicin)、伊达比星(idarubicin)、麻西罗霉素(marcellomycin)、丝裂霉素(mitomycin)(例如丝裂霉素C)、霉酚酸(mycophenolic acid)、诺加霉素(nogalamycin)、橄榄霉素(olivomycin)、培洛霉素(peplomycin)、泊非霉素(porfiromycin)、嘌呤霉素(puromycin)、三铁阿霉素(quelamycin)、罗多比星(rodorubicin)、链黑菌素(streptonigrin)、链脲霉素(streptozocin)、杀结核菌素(tubercidin)、乌苯美司(ubenimex)、净司他汀(zinostatin)、佐柔比星(zorubicin)；抗代谢物，例如甲氨蝶呤、吉西他滨(gemcitabine)
Figure BDA0002289356600000111
替加氟(tegafur)
Figure BDA0002289356600000112
卡培他滨(capecitabine)
Figure BDA0002289356600000113
埃博霉素(epothilon)和5-氟尿嘧啶(5-FU)；叶酸类似物，例如二甲叶酸(denopterin)、甲氨蝶呤、蝶罗呤(pteropterin)、三甲曲沙(trimetrexate)；嘌呤类似物，例如氟达拉滨(fludarabine)、6-巯基嘌呤(6-mercaptopurine)、硫咪嘌呤(thiamiprine)、硫鸟嘌呤(thioguanine)；嘧啶类似物，例如环胞苷(ancitabine)、阿扎胞苷(azacitidine)、6-氮尿苷(6-azauridine)、卡莫氟(carmofur)、阿糖胞苷(cytarabine)、二脱氧尿苷(dideoxyuridine)、脱氧氟尿苷(doxifluridine)、依诺他滨(enocitabine)、氟尿苷(floxuridine)；抗肾上腺剂，例如氨鲁米特(aminoglutethimide)、米托坦(mitotane)、曲洛司坦(trilostane)；叶酸(folic acid)补充剂，例如弗罗林酸(frolinicacid)；乙酰葡醛酯(aceglatone)；醛磷酰胺糖苷(aldophosphamide glycoside)；氨基乙酰丙酸(aminolevulinic acid)；恩尿嘧啶(eniluracil)；安吖啶(amsacrine)；倍曲布西(bestrabucil)；比生群(bisantrene)；依达曲沙(edatraxate)；地佛法明(defofamine)；地美可辛(demecolcine)；地吖醌(diaziquone)；依洛尼塞(elfomithine)；依利醋铵(elliptinium acetate)；依托格鲁(etoglucid)；硝酸镓(gallium nitrate)；羟基脲(hydroxyurea)；香菇多糖(lentinan)；洛尼代宁(lonidainine)；美登木素(maytansinoids)，例如美登素(maytansine)和安丝菌素(ansamitocin)；米托胍腙(mitoguazone)；米托蒽醌(mitoxantrone)；莫匹丹莫(mopidanmol)；二胺硝吖啶(nitraerine)；喷司他汀(pentostatin)；苯来美特(phenamet)；吡柔比星(pirarubicin)；洛索蒽醌(losoxantrone)；2-乙基酰肼；丙卡巴肼(procarbazine)；
Figure BDA0002289356600000114
多糖配合物(JHS Natural Products，Eugene，OR)；雷佐生(razoxane)；根霉素(rhizoxin)；西索菲兰(sizofiran)；螺旋锗(spirogermanium)；细交链孢菌酮酸(tenuazonic acid)；三亚胺醌(triaziquone)；2,2',2"-三氯三乙胺；单端孢霉烯(trichothecene)(尤其T-2毒素、维拉库林A(verracurin A)、杆孢菌素A(roridin A)和蛇形菌素(anguidine))；乌拉坦(urethan)；长春地辛(vindesine)
Figure BDA0002289356600000121
达卡巴嗪(dacarbazine)；甘露醇氮芥(mannomustine)；二溴甘露醇(mitobronitol)；二溴卫矛醇(mitolactol)；哌泊溴烷(pipobroman)；格塞图辛(gacytosine)；阿拉伯糖苷(arabinoside)(“Ara-C”)；噻替派(thiotepa)；紫杉烷(taxoid)，包括紫杉醇(paclitaxel)
Figure BDA0002289356600000122
白蛋白工程化的紫杉醇纳米颗粒制剂(ABRAXANETM)和多西他赛(doxetaxel，)；苯丁酸氮芥(chloranbucil)；6-硫代鸟嘌呤(6-thioguanine)；巯基嘌呤(mercaptopurine)；甲氨蝶呤；铂类似物，例如顺铂(cisplatin)和卡铂(carboplain)；长春花碱(vinblastine)
Figure BDA0002289356600000124
铂；依托泊苷(etoposide)(VP-16)；异环磷酰胺；米托蒽醌；长春新碱(vincristine)
Figure BDA0002289356600000125
奥沙利铂(oxaliplatin)；亚叶酸(leucovovin)；长春瑞滨(vinorelbine)
Figure BDA0002289356600000126
诺消灵(novantrone)；依达曲沙(edatrexate)；道诺霉素(daunomycin)；氨基蝶呤(aminopterin)；伊班膦酸盐(ibandronate)；拓扑异构酶抑制剂RFS 2000；二氟甲基鸟氨酸(DMFO)；类视色素(retinoid)，例如视黄酸(retinoic acid)；任何以上化疗剂的药学上可接受的盐、酸或衍生物；以及上述两种或多种化疗剂的组合，例如CHOP(环磷酰胺、阿霉素、长春新碱和泼尼松龙(prednisolone)联合治疗的缩写)和FOLFOX(奥沙利铂(ELOXATINTM)与5-FU和亚叶酸组合的治疗方案的缩写)。
化疗剂的其它实例包括抗激素剂，其用于调节、减少、阻断或抑制可促进癌生长的激素作用，且其通常为全身的或全身治疗的形式。它们本身可为激素。实例包括抗雌激素和选择性雌激素受体调节剂(SERM)，包括例如他莫昔芬(包括
Figure BDA0002289356600000127
他莫昔芬)、雷洛昔芬
Figure BDA0002289356600000128
屈洛昔芬、4-羟基他莫昔芬、曲沃昔芬、雷洛西芬、LY117018、奥那司酮和托瑞米芬
Figure BDA0002289356600000129
抗孕酮；雌激素受体下调剂(ERDs)；雌激素受体拮抗剂如氟维司群(fulvestrant)
Figure BDA00022893566000001210
用来抑制或停止卵巢的药剂，例如，促黄体激素释放激素(leutinizing hormone-releasing hormone)(LHRH)激动剂例如醋酸亮丙瑞林(leuprolide acetate)(
Figure BDA00022893566000001211
和
Figure BDA00022893566000001212
)、醋酸戈舍瑞林(goserelinacetate)、醋酸布舍瑞林(buserelin acetate)和曲普瑞林(tripterelin)；抗雄激素如氟他胺，尼鲁米特和比卡鲁胺；和抑制调节肾上腺中雌激素产生的酶芳香酶的芳香酶抑制剂，例如4(5)-咪唑、氨鲁米特、醋酸甲地孕酮(megestrol acetate)
Figure BDA0002289356600000131
依西美坦(exemestane)
Figure BDA0002289356600000132
福美司坦(formestanie)、法倔唑(fadrozole)、伏氯唑(vorozole)
Figure BDA0002289356600000133
来曲唑(letrozole)
Figure BDA0002289356600000134
和阿那曲唑(anastrozole)
Figure BDA0002289356600000135
此外，化疗剂的此类定义包括二膦酸盐，例如氯膦酸盐(例如
Figure BDA0002289356600000136
或
Figure BDA0002289356600000137
)、依替膦酸盐
Figure BDA0002289356600000138
NE-58095、唑来膦酸/唑来膦酸盐
Figure BDA0002289356600000139
阿仑膦酸盐
Figure BDA00022893566000001310
帕米膦酸盐
Figure BDA00022893566000001311
替鲁膦酸盐
Figure BDA00022893566000001312
或利塞膦酸盐
Figure BDA00022893566000001313
以及曲沙他滨(1,3-二氧戊环核苷胞嘧啶类似物)；反义寡核苷酸，特别是抑制涉及异常细胞增殖的信号通路方面的基因表达的那些反义寡核苷酸，例如PKC-α、Raf、H-Ras和表皮生长因子受体(EGFR)；疫苗，例如疫苗和基因疗法疫苗，例如
Figure BDA00022893566000001315
疫苗、
Figure BDA00022893566000001316
疫苗和
Figure BDA00022893566000001317
疫苗；拓扑异构酶1抑制剂(例如，
Figure BDA00022893566000001318
)；抗雌激素，例如氟维司群；EGFR抑制剂如厄洛替尼(erlotinib)或西妥昔单抗(cetuximab)；抗VEGF抑制剂如贝伐单抗(bevacizumab)；arinotecan；rmRH(例如，
Figure BDA00022893566000001319
)；17AAG(格尔德霉素衍生物，即热休克蛋白(Hsp)90毒物)，以及任何以上化疗剂的药学上可接受的盐、酸或衍生物。
还包括在“化疗剂”的定义中的有：(i)抗激素剂，其用于调节或抑制激素对肿瘤的作用，例如抗雌激素和选择性雌激素受体调节剂(SERM)，包括，例如他莫昔芬(包括
Figure BDA00022893566000001320
枸橼酸他莫昔芬)、雷洛昔芬、屈洛昔芬、4-羟基他莫昔芬、曲沃昔芬、雷洛西芬、LY117018、奥那司酮和
Figure BDA00022893566000001321
(托瑞米芬柠檬酸盐)；(ii)抑制调节肾上腺中雌激素产生的酶芳香酶的芳香酶抑制剂，例如4(5)-咪唑、氨鲁米特、
Figure BDA00022893566000001322
(醋酸甲地孕酮)、
Figure BDA00022893566000001323
(依西美坦；Pfizer)、福美司坦、法倔唑、(伏氯唑)、
Figure BDA00022893566000001325
(来曲唑；Novartis)和
Figure BDA00022893566000001326
(阿那曲唑；AstraZeneca)；(iii)抗雄激素，例如氟他胺、尼鲁米特、比卡鲁胺、亮丙瑞林和戈舍瑞林；以及曲沙他滨(1,3-二氧戊环核苷胞嘧啶类似物)；(iv)蛋白激酶抑制剂；(v)脂质激酶抑制剂；(vi)反义寡核苷酸，特别是那些抑制涉及异常细胞增殖的信号通路方面的基因表达的那些反义寡核苷酸，例如PKC-α、Ralf和H-Ras；(vii)核酶如VEGF表达抑制剂(例如，
Figure BDA00022893566000001327
)和HER2表达抑制剂；(viii)疫苗，例如基因治疗疫苗，例如
Figure BDA0002289356600000141
和
Figure BDA0002289356600000142
Figure BDA0002289356600000143
rIL-2；拓扑异构酶1抑制剂例如
Figure BDA0002289356600000144
Figure BDA0002289356600000145
rmRH；(ix)抗血管生成剂如贝伐单抗(
Figure BDA0002289356600000146
Genentech)；和(x)任何上述化疗剂的药学上可接受的盐、酸和衍生物。
在一些实施方案中，所述化疗剂为免疫治疗剂。如本文所用，“免疫治疗剂”为增强免疫系统帮助对抗癌症(特异性或非特异性地)的化合物。免疫疗法包括单克隆抗体和增强免疫系统的非特异性免疫疗法，例如细胞因子、白细胞介素(例如，IL-2、IL-7、IL-12、IL-15、IL-21)、干扰素(例如，IFN-α、IFN-β、IFN-γ)、GM-CSF、沙利度胺(thalidomide)、(Celgene)、来那度胺(lenalidomide)(
Figure BDA0002289356600000148
Celgene)、泊马度胺(pomalidomide)(Celgene)、咪喹莫特(imiquimod)(
Figure BDA00022893566000001410
Valeant)。可用作化疗剂的单克隆抗体的非限制性实例包括曲妥珠单抗(trastuzumab)(
Figure BDA00022893566000001411
Genentech)、贝伐单抗(
Figure BDA00022893566000001412
Genentech)、西妥昔单抗(cetuximab)(
Figure BDA00022893566000001413
Bristol-Myers Squibb)、帕尼单抗(panitumumab)(
Figure BDA00022893566000001414
Amgen)、易普利姆玛(ipilimumab)(
Figure BDA00022893566000001415
Bristol-MyersSquibb)、利妥昔单抗(rituximab)(
Figure BDA00022893566000001416
Genentech)、阿仑单抗(alemtuzumab)(
Figure BDA00022893566000001417
Genzyme)、奥法木单抗(ofatumumab)(
Figure BDA00022893566000001418
Genmab)、吉妥单抗(gemtuzumab ozogamicin)(
Figure BDA00022893566000001419
Wyeth)、本妥昔单抗(brentuximabvedotin)(
Figure BDA00022893566000001420
Seattle Genetics)、90Y-标记的替伊莫单抗(ibritumomabtiuxetan)(Biogen Idec)、131I-标记的托西莫单抗(tositumomab)(
Figure BDA00022893566000001422
GlaxoSmithKline)、曲妥珠单抗-美坦新偶联物(ado-trastuzumabemtansine)(Genentech)、博纳吐单抗(blinatumomab)(
Figure BDA00022893566000001424
Amgen)、帕妥珠单抗(pertuzumab，
Figure BDA00022893566000001425
Genentech)、奥滨尤妥珠单抗(obinutuzumab，
Figure BDA00022893566000001426
Genentech)、纳武单抗(nivolumab)(
Figure BDA00022893566000001427
Bristol-Myers Squibb)、派姆单抗(pembrolizumab)(
Figure BDA00022893566000001428
Merck)、皮地利珠单抗(pidilizumab)(CureTech)、MPDL3280A(在WO2010/077634中描述，通过引用其整体并入本文)、MDX-1105(在WO2007/005874中描述，通过引用其整体并入本文)和MEDI4736(在WO2011/066389和US2013/034559中描述，通过引用各个的整体并入本文)。另一种有用的免疫治疗剂为AMP-224(在WO2010/027827和WO2011/066342中描述，通过引用各个的整体并入本文)。
本文其它地方也提供其它定义。
化合物
本发明的化合物为式I或Ia化合物或其盐(例如，药学上可接受的盐)、前药、代谢物或衍生物。这些化合物是有用的HPK1抑制剂。
在一个方面，提供式I化合物：
Figure BDA0002289356600000151
或其盐(例如，药学上可接受的盐)、溶剂合物(例如，水合物)、前药、代谢物或衍生物，其中：
R1为C2-9杂芳基、C2-9杂环基、C6-10芳基、C3-9环烷基、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、-C≡C-(C2-9杂芳基)、-C≡C-(C6-10芳基)、-CH(Rj’)-O-(C2-9杂芳基)、-CH(Rj’)-O-(C2-9杂环基)、-CH(Rj’)-O-(C6-10芳基)、-CH(Rj’)-O-(C3-9环烷基)、-CH(Rj’)-O-(C1-6烷基)、-C(O)N(Rj’)(C2-9杂芳基)、-C(O)N(Rj’)(C2-9杂环基)、-C(O)NR24R25、-C(O)OR26、-C(＝NR29)R27、-C(＝NR29)NR24R25、-C(＝NOR29)R27、氰基、氢、卤素、-R24R25、-NR28C(O)R27、-NR28C(O)NR24R25、-NR28C(O)OR26、-NR28S(O)R29；-NR28SO2R29、-NR28SO2NR24R25、-OR26、-OC(O)R27、-OC(O)NR24R25、-S(O)R29；-SO2R29或-SO2NR24R25；
其中所述R1的C2-9杂芳基和C2-9杂环基独立地具有1-4个选自O、S和N的杂原子；且其中所述R1的C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-9环烷基、C6-10芳基、C2-9杂芳基和C2-9杂环基独立地任选取代有一个、两个、三个、四个或五个取代基；
其中所述R1的C3-9环烷基、C6-10芳基、C2-9杂芳基或C2-9杂环基与所述取代基中的两个一同可形成任选取代的双环；
其中嵌入所述环烷基、芳基、杂芳基或杂环基的碳与和它所连结的氧一同可形成羰基；
各个Rj’独立地为氢或任选取代的C1-6烷基；
各个R24和R25独立地为氢或任选取代的C1-6烷基；或R24和R25与和它们所连结的氮原子一同形成任选取代有一至四个取代基的C3-7杂环基[例如，任选取代的吡咯烷或吡咯烷酮]；
各个R26、R27和R28独立地为氢或任选取代的C1-6烷基；
各个R29独立地为任选取代的C1-6烷基；
R1’为氢、C1-6烷基、C2-6烯基、C3-6环烷基、C6-10芳基、C2-9杂芳基或卤素，其中所述烷基、烯基、环烷基、芳基和杂芳基可任选取代有一个、两个、三个、四个或五个取代基；其条件为R1和R1’的至少一个不为氢；
R2为A-C(O)-或D；
A为C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-7环烷基、C6-10芳基、C2-9杂芳基、C2-9杂环基、(C3-7环烷基)-(C1-6亚烷基)-、(C6-10芳基)-(C1-6亚烷基)-、(C2-9杂芳基)-(C1-6亚烷基)-、(C2-9杂环基)-(C1-6亚烷基)-、-NRgRh或-ORh；
其中所述A的C1-6烷基、C3-9环烷基、C6-10芳基、C2-9杂芳基和C2-9杂环基独立地任选取代有一个、两个、三个、四个或五个取代基；
Rg为H或任选取代有一至四个独立选自羟基、卤素、氰基、氨基、二(C1-6烷基)氨基、单(C1-6烷基)氨基的取代基的C1-6烷基；-CHF2和-CF3；
Rh为C1-6烷基、C3-7环烷基、C6-10芳基、C2-9杂芳基、C2-9杂环基、(C3-7环烷基)-(C1-6亚烷基)-、(C6-10芳基)-(C1-6亚烷基)-、(C2-9杂芳基)-(C1-6亚烷基)-或(C2-9杂环基)-(C1-6亚烷基)-；
其中所述Rh的C1-6烷基、C3-7环烷基、C6-10芳基、C2-9杂芳基和C2-9杂环基独立地任选取代有一个、两个、三个、四个或五个取代基；
D为H、C1-6烷基、C3-7环烷基、C6-10芳基、C2-9杂芳基、C2-9杂环基、(C3-7环烷基)-(C1-6亚烷基)-、(C6-10芳基)-(C1-6亚烷基)-、(C2-9杂芳基)-(C1-6亚烷基)-、(C2-9杂环基)-(C1-6亚烷基)-或(C3-7环烷基)-S(O)2-；
其中所述D的C2-9杂芳基和C2-9杂环基独立地具有一至四个选自选自O、S和N的杂原子；且其中所述D的C1-6烷基、C3-7环烷基、C6-10芳基、C2-9杂芳基和C2-9杂环基独立地任选取代有一个、两个、三个、四个或五个取代基；
其中，两个所述连至不同原子的取代基与它们所连结的原子一同形成双环或三环，其中所述双环或三环任选取代；且，其中嵌入所述杂芳基或杂环基的碳与它所连结的氧一同可形成一个羰基；
且R2’为H或任选取代的C1-6烷基。
在式(I)所述的通用结构的一些实施方案中：
R1为C2-9杂芳基、C2-9杂环基、C6-10芳基、-C≡C-C2-9杂芳基、-C(O)N(Rj’)(C2-9杂芳基)、-C(O)N(Rj’)(C2-9杂环基)、-CH(Rj’)-O-(C2-9杂芳基)、C3-9环烷基、C1-6烷基或氢；其中各个Rj’独立地为氢或C1-6烷基；
其中所述R1的C2-9杂芳基和C2-9杂环基独立地具有1-4个选自O、S和N的杂原子；且其中所述R1的C1-6烷基、C3-9环烷基、C6-10芳基、C2-9杂芳基和C2-9杂环基独立地任选取代有一个、两个、三个、四个或五个取代基；
其中所述R1的C6-10芳基、C2-9杂芳基或C2-9杂环基与所述取代基中的两个一同可形成任选取代的双环；且
其中嵌入所述芳基、杂芳基或杂环基的碳与和它所连结的氧一同可形成羰基；
R1’为氢、C1-6烷基、C2-6烯基、C3-6环烷基、C2-9杂芳基或卤素，其中所述烷基、烯基、环烷基和杂芳基为任选取代的(例如，取代有羟基、卤素和/或氨基)；其条件为R1和R1’的至少一个不为氢；
且R2和R2’如上所详述。
在所述式(I)的通用结构的一个方面：
R1为：
C2-9杂芳基、C2-9杂环基或C6-10芳基，其中所述杂芳基或杂环基具有1-4个选自O、S和N的杂原子；且其中所述芳基、杂芳基和杂环基可任选取代有一个、两个、三个或四个取代基R6、R7、R8和R8’，它们各自独立选自：
i.支链的或直链的C1-6烷基、C1-6烯基、C1-6亚烯基和C3-9环烷基，其中所述烷基、烯基、亚烯基和环烷基可任选取代有羟基、卤素、-CF2、-CF3、氨基、二(C1-6)烷基氨基、单(C1-6)烷基氨基、氰基、C3-7环烷基、C1-6烷氧基、-SO2R’、-SO2NR’R”、-(CO)NR’R”或-NR’(CO)R”，其中R’和R”独立地为H或C1-6烷基；
ii.NRaRb-C(O)-，
其中，Ra和Rb各自独立地为氢或C1-6烷基，其中所述烷基可任选取代有羟基、卤素、-CF2或-CF3；
iii.C1-6烷氧基；
iv.卤素；
v.氰基；
vi.羟基；
vii.氨基；
viii.二(C1-6)烷基氨基；
ix.单(C1-6)烷基氨基；
x.-NRc(CO)Rd，其中Rc和Rd独立地为H或C1-6烷基；
xi.-CF3；
xii.-CF2；
xiii.-SO2R’，其中R’如上所述；
xiv.-SO2NR’R”，其中R’和R”如上所述；
xv.-(CO)NRcRd；其中Rc和Rd如上所述；
xvi.-(CO)ORe；其中Re为H、C1-6烷基或CH2-芳基；
xvii.经取代或未经取代的C3-5杂环基；且
其中嵌入所述芳基、杂芳基或杂环基的碳与和它所连结的氧一同可形成羰基；
R1’为：
H、C1-6烷基、C2-6烯基、C3-6环烷基、C2-9杂芳基或卤素，其中所述烷基、烯基、环烷基和杂芳基可任选取代有羟基、卤素或氨基；
R2为A-C(O)-，其中，A为：
i.C3-7环烷基(C1-6)j烷基-或C2-9杂环基(C1-6)j烷基-，其中，j为1或0；且其中所述环烷基或杂环基可任选取代有一个、两个、三个或四个R5，其中，在各种情况下，R5独立选自支链的或直链的C1-6烷基、卤素、氰基、氰基(C1-6)烷基-、-CF3、-CF2、羟基(C1-6)烷基、卤代(C1-6)烷基、羟基、(C1-6烷基)-O-(C1-6烷基)-、氨基、二(C1-6)烷基氨基、单(C1-6)烷基氨基、氨基(C1-6)烷基、C1-6烷氧基、CH3CO2-(C1-6烷基)-、-SO2R’、-SO2NR’R”、-(CO)NR’R”、-NR’(CO)R”，其中，在各种情况下，R’和R”如上所述为任选取代的C2-9杂芳基、任选取代的C2-9杂环基、任选取代的C6-10芳基和NReRf-C(O)-(C1-6烷基)k-，
其中Re和Rf各自独立地为选自氢和支链的或直链的C1-6烷基，或Re和Rf与和各自所连结的氮一同可形成C3-7环烷基，其可任选取代有支链的或直链的C1-6烷基、C3-4环烷基、卤素、氰基、-CF3、-CF2或羟基；
且，k为1或0；
或者，所述环烷基或杂环基与两个R5一同形成双环或螺环，其中两个连至不同碳上的R5与和各自所连结的碳一同形成双环，或两个连至相同碳上的R5与和各自所连结的碳一同形成螺环；
ii.-NRgRh，其中
Rg为H或支链的或直链的C1-6烷基，其中所述烷基可任选取代有羟基、卤素、氰基、氨基、二(C1-6)烷基氨基、单(C1-6)烷基氨基；-CF2或-CF3；
Rh选自：
a.支链的或直链的C1-6烷基，其中所述烷基可任选取代有羟基、卤素、氰基、氨基、二(C1-6)烷基氨基、单(C1-6)烷基氨基、-CF2、-CF3或NRe’Rf’-C(O)-，其中Re’和Rf’各自独立地为氢或支链的或直链的C1-6烷基；
且，
b.C3-7环烷基(C1-6烷基)m-、C2-9杂芳基(C1-6烷基)m-、C6-10芳基(C1-6烷基)m-或C2-9杂环基(C1-6烷基)m-，其中，m为1或0；且其中所述环烷基、杂芳基、芳基或杂环基可任选取代有一个或两个R5’，
其中，在各种情况下，R5’独立选自支链的或直链的C1-6烷基、卤素、氰基、-CF3、-CF2、羟基(C1-6)烷基、卤代(C1-6)烷基、羟基、C1-6烷氧基、氨基、氨基(C1-6)烷基和NRiRj-C(O)-(C1-6烷基)k’-，
其中Ri和Rj独立选自氢和支链的或直链的C1-6烷基，且k’为1或0；
iii.R9-(C1-6烷基)-，其中R9选自羟基、卤素、-CF2、-CF3、氰基、C1-6烷氧基、-NRoRp，其中，Ro和Rp各自独立地为氢或支链的或直链的C1-6烷基、NRo’Rp’-CO-，其中Ro’和Rp’各自独立地为氢或支链的或直链的C1-6烷基；
iv.B-(C1-6烷基)t-，其中，B为C3-9杂芳基或C3-7杂环基，其中，所述杂芳基或杂环基具有一至三个选自O、S和N的杂原子；且其中所述杂芳基或杂环基可任选取代有一个、两个或三个R10、R10’和R10”，它们各自独立选自：
a.支链的或直链的C1-6烷基或C3-4环烷基，其中所述烷基或环烷基可任选取代有羟基、卤素、-CF2、-CF3、氨基、二(C1-6)烷基氨基、单(C1-6)烷基氨基、氰基、-(CO)NRqRr或-NRq(CO)Rr，其中Rq和Rr独立地为H或C1-6烷基；
b.C3-7环烷基；和
c.C3-7杂环基；
d.羟基；
e.卤素；
f.-CF2；
g.-CF3；
h.氨基；
i.二(C1-6)烷基氨基；
j.单(C1-6)烷基氨基；
k.氰基；
l.-(CO)NRsRt，其中Rs和Rt独立地为H或C1-6烷基；和
m.-NRs(CO)Rt，其中Rs和Rt独立地为H或C1-6烷基；
且，t为1或0；
v.(C6-10芳基)q’-(C1-6烷基)n-O-或吡咯烷基-O-，其中，所述芳基可任选取代有一个、两个或三个R11、R12和R13，它们各自选自支链的或直链的C1-6烷基、羟基、卤素、-CF2、-CF3、氰基、C1-6烷氧基和NRuRv-，其中Ru和Rv各自独立地为H或支链的或直链的C1-6烷基，
且，n为1或0，q’为1或0，其条件为n和q’中的一个为1；
vi.支链的或直链的C1-6烷基、C1-6烯基、C1-6亚烯基，其中所述烷基、烯基和亚烯基可任选取代有羟基、卤素、-CF2、-CF3、氨基、二(C1-6)烷基氨基、单(C1-6)烷基氨基、氰基、C3-7环烷基、C1-6烷氧基、-SO2R’、-SO2NR’R”、-(CO)NR’R”或-NR’(CO)R”，其中R’和R”独立地为H或C1-6烷基；
或，R2为D，其中D为：
i.C6-10芳基-(C1-6烷基)z-或C3-9杂芳基-(C1-6烷基)z-，其中，所述杂芳基具有1-4个选自O、S和N的杂原子；且其中所述芳基或杂芳基可任选取代有一个、两个、三个或四个R14、R15、R16’和R16，它们各自独立选自：
a.支链的或直链的C1-6烷基，其中所述烷基可任选取代有羟基、卤素、-CF2、-CF3、氨基、二(C1-6)烷基氨基、单(C1-6)烷基氨基、氰基C1-6烷氧基、-SO2R’、-SO2NR’R”、-(CO)NRwRx或-NRw(CO)Rx，其中Rw和Rx独立地为H或C1-6烷基，其中连至不同原子的R14、R15、R16’和R16中的两个与和各自所连结的原子一同形成双环；
b.C3-7环烷基；
c.C3-7杂环基；
d.羟基；
e.卤素；
f.-CF2；
g.-CF3；
h.氨基；
i.二(C1-6)烷基氨基；
j.单(C1-6)烷基氨基；
k.氰基；
l.-NRy(CO)Rz，其中Ry和Rz独立地为H或C1-6烷基；
m.-(CO)NRyRz，其中Ry和Rz独立地为H或C1-6烷基；
n.-SO2NRyRz，其中Ry和Rz独立地为H或C1-6烷基；和
o.-(CO)ORy，其中Ry为H或C1-6烷基；
且，z为1或0；
ii.C3-7环烷基-(SO2)-，其中所述环烷基可任选取代有一个或两个R6’，其中，在各种情况下，R6’独立选自支链的或直链的C1-6烷基、卤素、氰基、-CF3、-CF2、羟基(C1-6)烷基、卤代(C1-6)烷基、羟基、(C1-6烷基)-O-(C1-6烷基)-、C1-6烷氧基、氨基、二(C1-6)烷基氨基、单(C1-6)烷基氨基、氨基(C1-6)烷基和NRe’Rf’-C(O)-(C1-6烷基)n-，其中Re’和Rf’独立选自氢和支链的或直链的C1-6烷基，且n为1或0；和
iii.C1-6烷基或吡咯烷基团，其中所述烷基任选取代有卤素；
且，R2’为H或支链的或直链的C1-6烷基。
在一个方面，提供式Ia化合物：
Figure BDA0002289356600000221
或其盐(例如，药学上可接受的盐)、溶剂合物(例如，水合物)、前药、代谢物或衍生物，其中：
R1为：
C2-9杂芳基、C2-9杂环基、C6-10芳基、-C≡C-C2-9杂芳基、-C(O)N(Rj’)(C2-9杂芳基)、-C(O)N(Rj’)(C2-9杂环基)、-CH(Rj”)-O-(C2-9杂芳基)或C1-6烷基；其中各个Rj’独立地为氢或C1-6烷基；
其中所述R1的C2-9杂芳基和C2-9杂环基独立地具有1-4个选自O、S和N的杂原子；且其中所述R1的C1-6烷基、C6-10芳基、C2-9杂芳基和C2-9杂环基任选取代有一个、两个、三个或四个R6、R7、R8和R8’取代基，它们各自独立选自：
i.支链的或直链的C1-6烷基、C1-6烯基、C1-6亚烯基和C3-9环烷基，其中所述烷基、烯基、亚烯基和环烷基任选取代有一至四个选自羟基、卤素、-CHF2、-CF3、氨基、二(C1-6烷基)氨基、单(C1-6烷基)氨基、氰基、C3-7环烷基、C1-6烷氧基、-S(O)R’、-SO2R’、-SO2NR’R”、-C(O)NR’R”和-NR’C(O)R”的取代基，其中R’和R”独立地为H或C1-6烷基；
ii.NRaRb-C(O)-，其中，Ra和Rb各自独立地为氢或C1-6烷基，其中所述烷基可任选取代有羟基、卤素、-CHF2或-CF3；
iii.C1-6烷基氧基；
iv.卤素；
v.氰基；
vi.羟基；
vii.氨基；
viii.二(C1-6烷基)氨基；
ix.单(C1-6烷基)氨基；
x.-NRcC(O)Rd，其中Rc和Rd独立地为H或C1-6烷基；
xi.-CF3；
xii.-CHF2；
xiii.-SO2R’，其中R’为H或C1-6烷基；
xiv.-SO2NR’R”，其中R’和R”独立地为H或C1-6烷基；
xv.-C(O)NRcRd；其中Rc和Rd独立地为H或C1-6烷基；
xvi.-C(O)ORe；其中Re为H、C1-6烷基或CH2-芳基；
xvii.C3-5杂环基、C6-10芳基、-(C1-6烷基)(C6-10芳基)或C2-9杂芳基，其中所述杂环基、芳基或杂芳基可任选取代有C1-6烷基、C6-10芳基或-C(O)ORe；其中Re为H、C1-6烷基或CH2-芳基；
xviii.-O-(C2-9杂芳基)；
xix.-NR’S(O)k’R”，其中k’为1或2且R’和R”独立地为H或C1-6烷基；
其中所述R1的C6-10芳基、C2-9杂芳基或C2-9杂环基与R6、R7、R8和R8’中的两个一同可形成双环；和
其中嵌入所述芳基、杂芳基或杂环基的碳与和它所连结的氧一同可形成羰基；
R1’为：
氢、C1-6烷基、C2-6烯基、C3-6环烷基、C2-9杂芳基或卤素，其中所述烷基、烯基、环烷基和杂芳基可任选取代有羟基、卤素或氨基；
R2为A-C(O)-或D，其中，A为：
i.(C3-7环烷基)(C1-6烷基)j-或(C2-9杂环基)(C1-6烷基)j-，其中，j为1或0；且其中所述环烷基或杂环基可任选取代有一个、两个、三个或四个R5，其中，在各种情况下，R5独立选自支链的或直链的C1-6烷基、卤素、氰基、氰基(C1-6烷基)-、-CF3、-CHF2、羟基(C1-6烷基)、卤代(C1-6烷基)、羟基、(C1-6烷基)-O-(C1-6烷基)-、-(C1-6烷基)-NHC(O)-(C1-6烷基)、氨基、-NR’C(O)R”、乙酰基、二(C1-6烷基)氨基、单(C1-6烷基)氨基、氨基(C1-6烷基)、C1-6烷氧基、CH3CO2-(C1-6烷基)-、-NR’SO2R”、-SO2R’、-SO2NR’R”、-C(O)NR’R”、-NR’C(O)R”、任选取代的C2-9杂芳基、任选取代的C2-9杂环基、任选取代的C6-10芳基、任选取代的C3-9环烷基-C(O)-和NReRf-C(O)-(C1-6烷基)k-，
其中所述C2-9杂芳基、C2-9杂环基和C6-10芳基可任选取代有C1-6烷基或(C1-6烷基)-O-(C1-6烷基)-，其中所述(C1-6烷基)-O-(C1-6烷基)-可任选取代有氨基，
其中，在各种情况下，R’和R”独立地为H或C1-6烷基，
其中Re和Rf各自独立选自氢和支链的或直链的C1-6烷基，或Re和Rf与和各自所连结的氮一同可形成C3-7环烷基，其可任选取代有支链的或直链的C1-6烷基、C3-4环烷基、卤素、氰基、-CF3、-CHF2或羟基；
且k为1或0；
或者，所述环烷基或杂环基与两个R5一同形成双环或螺环，其中两个连至不同碳的R5与和各自所连结的碳一同形成双环，或两个连至相同碳上的R5与和各自所连结的碳一同形成螺环，其中所述双环或螺环可取代有一个、两个、三个或四个如上所述的R5；
ii.-NRgRh，其中
Rg为H或支链的或直链的C1-6烷基，其中所述烷基可任选取代有一至四个独立选自羟基、卤素、氰基、氨基、二(C1-6烷基)氨基、单(C1-6烷基)氨基的取代基；-CHF2和-CF3；
Rh选自：
a.支链的或直链的C1-6烷基，其中所述烷基可任选取代有羟基、卤素、氰基、氨基、二(C1-6烷基)氨基、单(C1-6烷基)氨基、-CHF2、-CF3或NRe’Rf’-C(O)-，其中Re’和Rf’各自独立地为氢或支链的或直链的C1-6烷基；
且，
b.(C3-7环烷基)(C1-6烷基)m-、(C2-9杂芳基)(C1-6烷基)m-、(C6-10芳基)(C1-6烷基)m-或(C2-9杂环基)(C1-6烷基)m-，其中，m为1或0；且其中所述环烷基、杂芳基、芳基或杂环基可任选取代有一个或两个R5’，
其中，在各种情况下，R5’独立选自支链的或直链的C1-6烷基、卤素、氰基、氰基(C1-6烷基)-、-CF3、-CHF2、羟基(C1-6烷基)、卤代(C1-6烷基)、羟基、C1-6烷氧基、氨基、氨基(C1-6烷基)和NRiRj-C(O)-(C1-6烷基)k’-，
其中Ri和Rj独立选自氢和支链的或直链的C1-6烷基，且k’为1或0；
iii.R9-(C1-6烷基)-，其中R9选自羟基、卤素、-CHF2、-CF3、氰基、C1-6烷氧基、-NRoRp、NRo’Rp’-C(O)-；其中Ro、Rp、Ro’和Rp’各自独立地为氢或支链的或直链的C1-6烷基；
iv.B-(C1-6烷基)t-，其中，B为C3-9杂芳基或C3-7杂环基，其中，所述杂芳基或杂环基具有1-3个选自O、S和N的杂原子；且其中所述杂芳基或杂环基可任选取代有一个、两个或三个R10、R10’和R10”，它们各自独立选自：
a.支链的或直链的C1-6烷基或C3-4环烷基，其中所述烷基或环烷基可任选取代有羟基、卤素、-CHF2、-CF3、氨基、二(C1-6烷基)氨基、单(C1-6烷基)氨基、氰基、-C(O)NRqRr或-NRqC(O)Rr，其中Rq和Rr独立地为H或C1-6烷基；
b.C3-7环烷基；
c.C3-7杂环基；
d.羟基；
e.卤素；
f.-CHF2；
g.-CF3；
h.氨基；
i.二(C1-6烷基)氨基；
j.单(C1-6烷基)氨基；
k.氰基；
l.-C(O)NRsRt，其中Rs和Rt独立地为H或C1-6烷基；和
m.-NRsC(O)Rt，其中Rs和Rt独立地为H或C1-6烷基；
且，t为1或0；
v.(C6-10芳基)q’-(C1-6烷基)n-O-或(C2-7杂环基)-O-，其中，所述芳基或杂环基可任选取代有一个、两个或三个R11、R12和R13，它们各自选自支链的或直链的C1-6烷基、羟基、卤素、-CHF2、-CF3、氰基、C1-6烷氧基、乙酰基和NRuRv-；其中Ru和Rv各自独立地为氢或支链的或直链的C1-6烷基；其中，存在，则嵌入所述杂环基的硫若与一个氧一同可形成亚砜，或与两个氧一同可形成砜；
且，n为1或0，q’为1或0，其条件为n和q’中的一个为1；
vi.支链的或直链的C1-6烷基、C1-6烯基、C1-6亚烯基，其中所述烷基、烯基和亚烯基可任选取代有羟基、卤素、-CHF2、-CF3、氨基、二(C1-6烷基)氨基、单(C1-6烷基)氨基、氰基、C3-7环烷基、C1-6烷氧基、-SO2R’、-SO2NR’R”、-C(O)NR’R”或-NR’C(O)R”，其中R’和R”独立地为H或C1-6烷基；
D为：
i.(C6-10芳基)(C1-6烷基)z-、(C3-7环烷基)(C1-6烷基)z-或(C3-9杂芳基)(C1-6烷基)z-，其中，所述杂芳基具有1-4个选自O、S和N的杂原子；且其中所述芳基、环烷基或杂芳基可任选取代有一个、两个、三个或四个R14、R15、R16’和R16，它们各自独立选自：
a.支链的或直链的C1-6烷基或C2-6烯基，其中所述烷基或烯基可任选取代有一至四个独立选自羟基、卤素、-CHF2、-CF3、氨基、二(C1-6烷基)氨基、单(C1-6烷基)氨基、氰基C1-6烷氧基、-SO2R’、-SO2NR’R”、-C(O)NRwRx和-NRwC(O)Rx的取代基，其中Rw和Rx独立地为H或C1-6烷基；其中连至不同原子的R14、R15、R16’和R16中的两个与和各自所连结的原子一同形成双环或三环，其中所述双环或三环可取代有一个、两个、三个或四个如上所述的R14、R15、R16’和R16；
b.C3-7环烷基；
c.C3-7杂环基，其中所述杂环基可被羟基、乙酰基或氧杂环丁烷基团任选取代；
d.羟基；
e.卤素；
f.-CHF2；
g.-CF3；
h.氨基；
i.二(C1-6烷基)氨基；
j.单(C1-6烷基)氨基；
k.氰基；
l.-NRyC(O)Rz，其中Ry和Rz独立地为H或C1-6烷基；
m.-C(O)NRyRz，其中Ry和Rz独立地为H或C1-6烷基；
n.-SO2NRyRz，其中Ry和Rz独立地为H或C1-6烷基；和
o.-C(O)ORy，其中Ry为H或C1-6烷基；
且，z为1或0；
ii.C3-7环烷基-SO2-，其中所述环烷基可任选取代有一个或两个R6’，其中，在各种情况下，R6’独立选自支链的或直链的C1-6烷基、卤素、氰基、-CF3、-CHF2、羟基(C1-6烷基)、卤代(C1-6烷基)、羟基、(C1-6烷基)-O-(C1-6烷基)-、C1-6烷氧基、氨基、二(C1-6烷基)氨基、单(C1-6烷基)氨基、氨基(C1-6烷基)和NRe’Rf’-C(O)-(C1-6烷基)n-，其中Re’和Rf’独立选自氢和支链的或直链的C1-6烷基，且n为1或0；
或
iii.H、C1-6烷基或吡咯烷，其中所述烷基任选取代有卤素；
且，R2’为H或支链的或直链的C1-6烷基。
在所述式I或Ia化合物的各种实施方案中，所述烷基、烯基、炔基、环烷基、芳基、杂芳基和杂环基任选取代有一至五个取代基。在一些实施方案中，C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-9环烷基、C6-10芳基、C2-9杂芳基或C2-9杂环基可独立地任选取代有一至五个R30。
在一些实施方案中，在各种情况下，R30独立地为C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-9环烷基、C6-10芳基、C2-9杂芳基、C2-9杂环基、卤素、氰基、氧代、-C(O)NR31R32、-C(O)OR33、-C(＝NR36)R34、-C(＝NR36)NR31R32、-C(＝NOR36)R34、氰基、氢、卤素、-R31R32、-NR35C(O)R34、-NR35C(O)NR31R32、-NR35C(O)OR33、-NR35S(O)R36；-NR35SO2R36、-NR35SO2NR31R32、-OR33、-OC(O)R34、-OC(O)NR31R32、-S(O)R36；-SO2R36或-SO2NR31R32；其中所述R30的C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-9环烷基、C6-10芳基、C2-9杂芳基、C2-9杂环基任选取代有一至四个R40；或两个R30基团与和它们所连结的母体部分一同形成环，该环任选取代有一至四个R40；
R31和R32各自独立地为氢、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-9环烷基、C6-10芳基、C2-9杂芳基或C2-9杂环基，它们各自独立地任选取代有一至四个R40；或R31和R32与和它们所连结的氮原子一同形成任选取代有一至四个R40的C3-7杂环基；
R33、R34和R35各自独立地为氢、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-9环烷基、C6-10芳基、C2-9杂芳基或C2-9杂环基，它们各自独立地任选取代有一至四个R40；
R36为任选取代有一至四个R40的C1-6烷基。
在各种情况下，R40独立选自卤素、氰基、氧代、-NR41R42、-SO2NR41R42、-C(O)NR41R42、-C(O)OR43、-OR43、-NR43C(O)R44、-NR43C(O)OR43、-NR43C(O)NR41R42、-NR43SO2R45、-SO2R45、C1-6烷基、C3-7环烷基、C6-10芳基、C2-9杂芳基或C2-9杂环基；或两个R40基团与和它们所连结的母体部分一同形成环，该环任选取代有一至三个选自C1-6烷基、C1-6卤代烷基、羟基和氧代的取代基；所述R40的C1-6烷基、C3-7环烷基、C6-10芳基、C2-9杂芳基或C2-9杂环基独立地任选取代有一至三个选自C1-6烷基、C1-6卤代烷基、羟基和氧代的取代基。
R41和R42各自独立地为氢或C1-6烷基；或R41和R42与和它们所连结的氮原子一同形成一个C3-7杂环基，该杂环基任选取代有一至三个选自C1-6烷基、C1-6卤代烷基、羟基和氧代的取代基；
R43和R44各自独立地为氢或C1-6烷基；且
R45为C1-6烷基。
在所有其它变量如上文所定义的实施方案中，R1的有用值为任选取代的C2-9杂芳基或任选取代的C3-7杂环基。在一些实施方案中，R1为任选取代的C2-9杂芳基或任选取代的C2-9杂环基。在所有其它变量如任何上述实施方案中所定义的实施方案中，R1选自：
Figure BDA0002289356600000291
Figure BDA0002289356600000292
它们各自可任选取代有一个、两个、三个或四个取代基。在一些实施方案中，各个上述部分可任选取代有一个、两个或三个取代基R6、R7和R8。
在所有其它变量如任何上述实施方案中所定义的实施方案中，R1的有用值选自：
Figure BDA0002289356600000293
Figure BDA0002289356600000301
Figure BDA0002289356600000302
它们各自可任选取代有一个、两个、三个或四个取代基。在一些实施方案中，各个上述部分可任选取代有一个、两个或三个取代基R6、R7和R8。
在所有其它变量如任何上述实施方案中所定义的实施方案中，R1的有用值选自：
Figure BDA0002289356600000303
Figure BDA0002289356600000304
它们各自可任选取代有一个、两个、三个或四个取代基。在一些实施方案中，各个上述部分可任选取代有一个、两个或三个取代基R6、R7和R8。
在所有其它变量如任何上述实施方案中所定义的实施方案中，R1的有用值为：
Figure BDA0002289356600000305
在所有其它变量如任何上述实施方案中所定义的实施方案中，R1为：
Figure BDA0002289356600000311
在所有其它变量如任何上述实施方案中所定义的实施方案中，其中R1为：
在所有其它变量如任何上述实施方案中所定义的实施方案中，其中R1为：
Figure BDA0002289356600000313
在一些实施方案中，R6、R7和R8各自独立选自：
i.支链的或直链的C1-6烷基、C1-6烯基、C1-6亚烯基和C3-9环烷基，其中所述烷基、烯基、亚烯基和环烷基任选取代有一至四个选自羟基、卤素、-CHF2、-CF3、氨基、二(C1-6烷基)氨基、单(C1-6烷基)氨基、氰基、C3-7环烷基、C1-6烷氧基、-S(O)R’、-SO2R’、-SO2NR’R”、-C(O)NR’R”和-NR’C(O)R”的取代基，其中R’和R”独立地为H或C1-6烷基；
ii.NRaRb-C(O)-，其中，Ra和Rb各自独立地为氢或C1-6烷基，其中所述烷基可任选取代有羟基、卤素、-CHF2或-CF3；
iii.C1-6烷氧基；
iv.卤素；
v.氰基；
vi.羟基；
vii.氨基；
viii.二(C1-6烷基)氨基；
ix.单(C1-6烷基)氨基；
x.-NRcC(O)Rd，其中Rc和Rd独立地为H或C1-6烷基；
xi.-CF3；
xii.-CHF2；
xiii.-SO2R’，其中R’为H或C1-6烷基；
xiv.-SO2NR’R”，其中R’和R”独立地为H或C1-6烷基；
xv.-C(O)NRcRd；其中Rc和Rd独立地为H或C1-6烷基；
xvi.-C(O)ORe；其中Re为H、C1-6烷基或CH2-芳基；
xvii.C3-5杂环基、C6-10芳基、-(C1-6烷基)(C6-10芳基)或C2-9杂芳基，其中所述杂环基、芳基或杂芳基任选取代有C1-6烷基、C6-10芳基或-C(O)ORe；其中Re为H、C1-6烷基或CH2-芳基；
xviii.-O-(C2-9杂芳基)；
xix.-NR’S(O)k’R”，其中k’为1或2且R’和R”独立地为H或C1-6烷基；
其中所述R1的C6-10芳基、C2-9杂芳基或C2-9杂环基与R6、R7和R8中的两个可一同形成双环；且
其中嵌入所述芳基、杂芳基或杂环基的碳与和它所连结的氧一同可形成羰基。
在一些实施方案中，一个或多个R6、R7和R8独立选自支链的或直链的C1-6烷基、C1-6烯基、C1-6亚烯基和C3-9环烷基，其中所述烷基、烯基、亚烯基和环烷基任选取代有一至四个选自羟基、卤素、-CHF2、-CF3、氨基、二(C1-6烷基)氨基、单(C1-6烷基)氨基、氰基、C3-7环烷基、任选取代的C6-10芳基、任选取代的C2-9杂芳基、任选取代的C2-9杂环基、C1-6烷氧基、-S(O)R’、-SO2R’、-SO2NR’”R”、-C(O)NR”’R”和-NR’C(O)R”、-NR’C(O)OR”、-NR’C(O)NR”R’”、-NR’SO2NR”R’”或-NR’S(O)R”的取代基，其中R’和R”’独立地为H或C1-6烷基且R”独立地为C1-6烷基、卤代(C1-6烷基)或任选取代有C1-6烷基的C6-10芳基；或R”和R’”与和它们所连结的氮一同形成经取代或未经取代的杂环基。在一些实施方案中，一个或多个R6、R7和R8独立地为C1-6卤代烷基(例如，CHF2或CF3)。
在一些实施方案中，一个或多个R6、R7和R8独立地为-C(O)NRaRb、-NRcC(O)Rd、-C(O)ORe；-NRcC(O)ORe；-NRcC(O)RaRb；其中，Ra和Rb各自独立地为氢、任选取代的C1-6烷基、任选取代的C6-10芳基、任选取代的C2-9杂环基或任选取代的C2-9杂芳基；或Ra和Rb与和它们所连结的氮一同形成任选取代的杂环基；其中Rc和Rd独立地为H、任选取代的C1-6烷基、任选取代的C6-10芳基、任选取代的C2-9杂环基或任选取代的C2-9杂芳基；其中Re为H、C1-6烷基或CH2-芳基。所述任选的取代基的实例包括但不限于羟基、卤素、-CHF2和-CF3。
在一些实施方案中，一个或多个R6、R7和R8独立选自iii.卤素、氰基、羟基、C1-6烷氧基、氨基、单(C1-6烷基)氨基或二(C1-6烷基)氨基。
在一些实施方案中，一个或多个R6、R7和R8独立地为-SO2R’、-SO2NR”R’”、-NR’SO2NR”R’”、-NR’S(O)R”或-NR’SO2R”；其中R’和R’”独立地为H或任选取代的C1-6烷基；且R”独立地为C1-6烷基、卤代(C1-6烷基)或任选取代有C1-6烷基的C6-10芳基；或R”和R’”与和它们所连结的氮一同形成任选取代的C2-9杂环基。
在一些实施方案中，R1为
Figure BDA0002289356600000331
其中R6、R7和R8各自独立选自氢、羟基、氨基、C1-6烷基、C1-6烷氧基和单(C1-6烷基)氨基；或R6、R7和R8中的两个可形成双环。
在这些实施方案的一些实施方案中，R6为C1-6烷基；R7为氢、氨基或单(C1-6烷基)氨基；且R8为氢、羟基或C1-6烷氧基；或R6和R7一同形成双环；或R7和R8一同形成双环。在一些实施方案中，R6为甲基。在一些实施方案中，R7为氨基。在一些实施方案中，R6为甲基且R7为氨基。
在一些实施方案中，R1为
Figure BDA0002289356600000332
其中R6和R7选自氢、氨基和C1-6烷基。在一些实施方案中，R6为C1-6烷基(例如，甲基)。在一些实施方案中，R7为氢或氨基。在一些实施方案中，R7为氢。在一些实施方案中，R7为氨基。在一些实施方案中，R6为C1-6烷基(例如，甲基)且R7为氢或氨基。
在所有其它变量如任何上述实施方案中所定义的实施方案中，R1为
Figure BDA0002289356600000341
其中，R6为C1-6烷基，其任选取代有羟基、-CF2、-CF3或卤素。
在所有其它变量如任何上述实施方案中所定义的实施方案中，R6为甲基。
在一些实施方案中，R1为
Figure BDA0002289356600000342
Figure BDA0002289356600000343
在一些实施方案中，R1为
Figure BDA0002289356600000344
Figure BDA0002289356600000345
在一些实施方案中，R1为
Figure BDA0002289356600000346
在一些实施方案中，R1为
Figure BDA0002289356600000347
在一些实施方案中，R1为
在所有其它变量如任何上述实施方案中所定义的实施方案中，R2为-A-C(O)-。在一些实施方案中，A为任选取代的C1-6烷基、任选取代的C3-9环烷基、任选取代的C6-10芳基、任选取代的C2-9杂芳基、任选取代的C2-9杂环基、-NRgRh或-ORh。
在一些实施方案中，A为：
i.(C3-7环烷基)(C1-6烷基)j-或(C2-9杂环基)(C1-6烷基)j-，其中，j为1或0；且其中所述环烷基或杂环基可任选取代有一个、两个、三个或四个R5，其中，在各种情况下，R5独立选自支链的或直链的C1-6烷基、卤素、氰基、氰基(C1-6烷基)-、-CF3、-CHF2、羟基(C1-6烷基)、卤代(C1-6烷基)、羟基、(C1-6烷基)-O-(C1-6烷基)-、-(C1-6烷基)-NHC(O)-(C1-6烷基)、氨基、-NR’C(O)R”、乙酰基、二(C1-6烷基)氨基、单(C1-6烷基)氨基、氨基(C1-6烷基)、C1-6烷氧基、CH3CO2-(C1-6烷基)-、-NR’SO2R”、-SO2R’、-SO2NR’R”、-C(O)NR’R”、-NR’C(O)R”、任选取代的C2-9杂芳基、任选取代的C2-9杂环基、任选取代的C6-10芳基、任选取代的C3-9环烷基-C(O)-和NReRf-C(O)-(C1-6烷基)k-，
其中所述C2-9杂芳基、C2-9杂环基和C6-10芳基可任选取代有C1-6烷基或(C1-6烷基)-O-(C1-6烷基)-，其中所述(C1-6烷基)-O-(C1-6烷基)-可任选取代有氨基，
其中，在各种情况下，R’和R”独立地为H或C1-6烷基，
其中Re和Rf各自独立选自氢和支链的或直链的C1-6烷基，或Re和Rf与和各自所连结的氮一同可形成C3-7环烷基，该环烷基可任选取代有支链的或直链的C1-6烷基、C3-4环烷基、卤素、氰基、-CF3、-CHF2或羟基；
且k为1或0；
或者，所述环烷基或杂环基与两个R5一同形成双环或螺环，其中两个连至不同碳的R5与和各自所连结的碳一同形成双环，或两个连至相同碳上的R5与和各自所连结的碳一同形成螺环，其中所述双环或螺环可取代有一个、两个、三个或四个如上所述的R5；
ii.-NRgRh，其中
Rg为H或支链的或直链的C1-6烷基，其中所述烷基可任选取代有一至四个独立选自羟基、卤素、氰基、氨基、二(C1-6烷基)氨基、单(C1-6烷基)氨基的取代基；-CHF2和-CF3；
Rh选自：
a.支链的或直链的C1-6烷基，其中所述烷基可任选取代有羟基、卤素、氰基、氨基、二(C1-6烷基)氨基、单(C1-6烷基)氨基、-CHF2、-CF3或NRe’Rf’-C(O)-，其中Re’和Rf’各自独立地为氢或支链的或直链的C1-6烷基；
且，
b.(C3-7环烷基)(C1-6烷基)m-、(C2-9杂芳基)(C1-6烷基)m-、(C6-10芳基)(C1-6烷基)m-或(C2-9杂环基)(C1-6烷基)m-，其中，m为1或0；且其中所述环烷基、杂芳基、芳基或杂环基可任选取代有一个或两个R5’，
其中，在各种情况下，R5’独立选自支链的或直链的C1-6烷基、卤素、氰基、氰基(C1-6烷基)-、-CF3、-CHF2、羟基(C1-6烷基)、卤代(C1-6烷基)、羟基、C1-6烷氧基、氨基、氨基(C1-6烷基)和NRiRj-C(O)-(C1-6烷基)k’-，
其中Ri和Rj独立选自氢和支链的或直链的C1-6烷基，且k’为1或0；
iii.R9-(C1-6烷基)-，其中R9选自羟基、卤素、-CHF2、-CF3、氰基、C1-6烷氧基、-NRoRp、NRo’Rp’-C(O)-；其中Ro、Rp、Ro’和Rp’各自独立地为氢或支链的或直链的C1-6烷基；
iv.B-(C1-6烷基)t-，其中，B为C3-9杂芳基或C3-7杂环基，其中，所述杂芳基或杂环基具有1-3个选自O、S和N的杂原子；且其中所述杂芳基或杂环基可任选取代有一个、两个或三个R10、R10’和R10”，它们各自独立选自：
a.支链的或直链的C1-6烷基或C3-4环烷基，其中所述烷基或环烷基可任选取代有羟基、卤素、-CHF2、-CF3、氨基、二(C1-6烷基)氨基、单(C1-6烷基)氨基、氰基、-C(O)NRqRr或-NRqC(O)Rr，其中Rq和Rr独立地为H或C1-6烷基；
b.C3-7环烷基；
c.C3-7杂环基；
d.羟基；
e.卤素；
f.-CHF2；
g.-CF3；
h.氨基；
i.二(C1-6烷基)氨基；
j.单(C1-6烷基)氨基；
k.氰基；
l.-C(O)NRsRt，其中Rs和Rt独立地为H或C1-6烷基；和
m.-NRsC(O)Rt，其中Rs和Rt独立地为H或C1-6烷基；
且，t为1或0；
v.(C6-10芳基)q’-(C1-6烷基)n-O-或(C2-7杂环基)-O-，其中，所述芳基或杂环基可任选取代有一个、两个或三个R11、R12和R13，它们各自选自支链的或直链的C1-6烷基、羟基、卤素、-CHF2、-CF3、氰基、C1-6烷氧基、乙酰基和NRuRv-；其中Ru和Rv各自独立地为氢或支链的或直链的C1-6烷基；其中，若存在，则嵌入所述杂环基的硫与一个氧一同可形成亚砜，或与两个氧一同可形成砜；
且，n为1或0，q’为1或0，其条件为n和q’中的一个为1；
或
vi.支链的或直链的C1-6烷基、C1-6烯基、C1-6亚烯基，其中所述烷基、烯基、和亚烯基，可任选取代有羟基、卤素、-CHF2、-CF3、氨基、二(C1-6烷基)氨基、单(C1-6烷基)氨基、氰基、C3-7环烷基、C1-6烷氧基、-SO2R’、-SO2NR’R”、-C(O)NR’R”或-NR’C(O)R”，其中R’和R”独立地为H或C1-6烷基。
在一些实施方案中，A为(C3-7环烷基)(C1-6烷基)j-或(C2-9杂环基)(C1-6烷基)j-，其中，j为1或0；且其中所述环烷基或杂环基可任选取代有一个、两个、三个或四个R5，
其中，在各种情况下，R5独立选自支链的或直链的C1-6烷基、卤素、氰基、氰基(C1-6烷基)-、-CF3、-CHF2、羟基(C1-6烷基)、卤代(C1-6烷基)、羟基、(C1-6烷基)-O-(C1-6烷基)-、-(C1-6烷基)-NHC(O)-(C1-6烷基)、氨基、-NR’C(O)R”、乙酰基、二(C1-6烷基)氨基、单(C1-6烷基)氨基、氨基(C1-6烷基)、C1-6烷氧基、CH3CO2-(C1-6烷基)-、-NR’SO2R”、-SO2R’、-SO2NR’R”、-C(O)NR’R”、-NR’C(O)OR”、-NR’C(O)NR’R”、任选取代的C2-9杂芳基、任选取代的C2-9杂环基、任选取代的C6-10芳基、任选取代的C3-9环烷基、任选取代的C3-9环烷基-C(O)-和NReRf-C(O)-(C1-6烷基)k-；
其中所述C2-9杂芳基、C2-9杂环基和C6-10芳基可任选取代有C1-6烷基或(C1-6烷基)-O-(C1-6烷基)-，其中所述(C1-6烷基)-O-(C1-6烷基)-可任选取代有氨基，
其中，在各种情况下，R’和R”独立地为H或C1-6烷基，
其中Re和Rf各自独立选自氢和支链的或直链的C1-6烷基，或Re和Rf与和各自所连结的氮一同可形成C3-7环烷基，该环烷基可为任选取代的(例如取代有支链的或直链的C1-6烷基、C3-4环烷基、卤素、氰基、-CF3、-CHF2或羟基)；
且k为1或0；
或者，所述环烷基或杂环基与两个R5一同形成双环或螺环，其中两个连至不同碳的R5与和各自所连结的碳一同形成双环，或两个连至相同碳上的R5与和各自所连结的碳一同形成螺环，其中所述双环或螺环可取代有一个、两个、三个或四个取代基(例如，如上所述的R5，当它不在一起时)。
在一些实施方案中，A为-NRgRh或-ORh，其中Rg为H或任选取代的C1-6烷基；且Rh为任选取代的C1-6烷基、任选取代的C3-9环烷基、任选取代的C6-10芳基、任选取代的C2-9杂芳基或任选取代的C2-9杂环基。
在一些实施方案中，所述Rg的C1-6烷基任选取代有一至四个独立选自羟基、卤素、氰基、氨基、二(C1-6烷基)氨基、单(C1-6烷基)氨基；-CHF2和-CF3的取代基。
Rh的实例包括但不限于，
a.支链的或直链的C1-6烷基，其中所述烷基可任选取代有羟基、卤素、氰基、氨基、二(C1-6烷基)氨基、单(C1-6烷基)氨基、-CHF2、-CF3、-S(O)R’、-SO2R’、-SO2NR’”R”、-C(O)NR”’R”、-NR’C(O)R”、-NR’C(O)OR”、-NR’C(O)NR”R’”、-NR’SO2NR”R’”或-NR’S(O)R”，其中R’和R”’独立地为H或C1-6烷基且R”独立地为C1-6烷基、卤代(C1-6烷基)或任选取代有C1-6烷基的C6-10芳基；或R”和R’”与和它们所连结的氮一同形成经取代或未经取代的杂环基；和
b.(C3-7环烷基)(C1-6烷基)m-、(C2-9杂芳基)(C1-6烷基)m-、(C6-10芳基)(C1-6烷基)m-或(C2-9杂环基)(C1-6烷基)m-，其中，m为1或0；且其中所述环烷基、杂芳基、芳基或杂环基可任选取代有一个或两个R5’；其中，在各种情况下，R5’独立选自支链的或直链的C1-6烷基、卤素、氰基、氰基(C1-6烷基)-、-CF3、-CHF2、羟基(C1-6烷基)、卤代(C1-6烷基)、羟基、C1-6烷氧基、氨基、氨基(C1-6烷基)和NRiRj-C(O)-(C1-6烷基)k’-；其中Ri和Rj独立选自氢和支链的或直链的C1-6烷基，且k’为1或0。
在一些实施方案中，A为(C3-7环烷基)(C1-6烷基)j-、(C2-9杂环基)(C1-6烷基)j-、(C6-10芳基)q’-(C1-6烷基)n-O-或(C2-7杂环基)-O-，其中所述环烷基、烷基、芳基或杂环基可为任选取代的；j为1或0；且n为1或0且q’为1或0，其条件为n和q’中的一个为1。在一些实施方案中，A为任选取代的C3-7环烷基(例如，环丙基)。
在所有其它变量如任何上述实施方案中所定义的实施方案中，A为I(例如上所列)。在该实施方案中，A的有用值包括任选取代的C3-7环烷基(C1-6)j烷基-。在实施方案中，j为0。
在一些实施方案中，R2为：
Figure BDA0002289356600000391
其中，v为0、1、2、3或4；X、Y和Z各自独立地不存在或为-CH2-，且其中，若存在，则在各个X、Y和Z上的0个、1个或2个H可为R5。
在所有其它变量如任何上述实施方案中所定义的实施方案中，R2为：
其中，v为0、1、2、3或4；X、Y和Z各自独立地不存在或为-CH2-，且其中，若存在，则在各个X、Y和Z上的0个、1个或2个H可为R5。
在所有其它变量如任何上述实施方案中所定义的实施方案中，R2为
Figure BDA0002289356600000393
其中，v为0、1、2或3；且
在各种情况下，R5独立选自C1-6烷基、卤素、氰基、氰基(C1-6烷基)-、-CF3、-CHF2、羟基(C1-6烷基)、卤代(C1-6烷基)、羟基、(C1-6烷基)-O-(C1-6烷基)-、-(C1-6烷基)-NHC(O)-(C1-6烷基)、氨基、-NR’C(O)R”、乙酰基、二(C1-6烷基)氨基、单(C1-6烷基)氨基、氨基(C1-6烷基)、C1-6烷氧基、CH3CO2-(C1-6烷基)-、-NR’SO2R”、-SO2R’、-SO2NR’R”、-C(O)NR’R”、-NR’C(O)OR”、-NR’C(O)NR’R”、任选取代的C2-9杂芳基、任选取代的C2-9杂环基、任选取代的C6-10芳基、任选取代的C3-9环烷基、任选取代的C3-9环烷基-C(O)-和NReRf-C(O)-(C1-6烷基)k-，
其中所述C2-9杂芳基、C2-9杂环基和C6-10芳基可任选取代有C1-6烷基或(C1-6烷基)-O-(C1-6烷基)-，其中所述(C1-6烷基)-O-(C1-6烷基)-可任选取代有氨基，
其中，在各种情况下，R’和R”独立地为H或C1-6烷基，
其中Re和Rf各自独立地选自氢和支链的或直链的C1-6烷基，或Re和Rf与和各自所连结的氮一同可形成C3-7环烷基，其可为任选取代的(例如，取代有支链的或直链的C1-6烷基、C3-4环烷基、卤素、氰基、-CF3、-CHF2或羟基)；
且k为1或0。
在所有其它变量如任何上述实施方案中所定义的实施方案中，R2为：
Figure BDA0002289356600000401
且v为0、1或2。
在所有其它变量如任何上述实施方案中所定义的实施方案中，R2为：
Figure BDA0002289356600000402
在所有其它变量如任何上述实施方案中所定义的实施方案中，R5不为氢且R2为：
在所有其它变量如任何上述实施方案中所定义的实施方案中，R2为：
Figure BDA0002289356600000404
在所有其它变量如任何上述实施方案中所定义的实施方案中，R5不为氢且R2为：
Figure BDA0002289356600000411
在所有其它变量如任何上述实施方案中所定义的实施方案中，当A为环烷基时，该环烷基可为双环、螺或不饱和的。
在所有其它变量如任何上述实施方案中所定义的实施方案中，R5选自氢、氟、氰基、NH2-C(O)-、烷基-(C1-6)烷氧基-、任选取代的C2-9杂芳基和氰基(C1-6)烷基。在这些实施方案中，R5为氟或氰基。在这些实施方案中，R5为氢。在这些实施方案中，R5为任选取代的C2-9杂芳基或氰基(C1-6)烷基。在这些实施方案中，R5为氰基-CH2-。在一些实施方案中，至少一个R5为C1-6烷基(例如，甲基)。
在所有其它变量如任何上述实施方案中所定义的实施方案中，所述化合物中至少一个R5为任选取代的C2-9杂芳基。
在所有其它变量如任何上述实施方案中所定义的实施方案中，所述化合物中该至少一个R5为任选取代的C2-9杂芳基，所述C2-9杂芳基为任选取代的含有1或2个氮原子的5元杂芳基。
在所有其它变量如任何上述实施方案中所定义的实施方案中，所述化合物中该任选取代的5元杂芳基为任选取代的吡唑。
在所有其它变量如任何上述实施方案中所定义的实施方案中，所述化合物中该任选取代的吡唑为
Figure BDA0002289356600000412
其中该波浪线表示与所述环丙基环连接的点；且其中RB1为支链的或直链的C1-6烷基，其中该烷基可任选取代有一至四个羟基、卤素、腈、氨基、-O-(C1-6)烷基、-O-(C1-6)烷基氨基-、二(C1-6)烷基氨基-或-NRy(CO)Rz，其中，在各种情况下，Ry和Rz独立地为氢或C1-6烷基；或-SO2R’，其中R’为C1-6烷基。
在所有其它变量如任何上述实施方案中所定义的实施方案中，所述化合物中RB1为任选取代的直链C1-6烷基。
在所有其它变量如任何上述实施方案中所定义的实施方案中，所述化合物中该任选取代的直链C1-6烷基为甲基。
在一些实施方案中，R2为
Figure BDA0002289356600000421
其中v为2，一个R5为甲基且第二个R5为1-甲基吡唑-4-基。
在一些实施方案中，R2为
Figure BDA0002289356600000422
Figure BDA0002289356600000423
Figure BDA0002289356600000424
在一些实施方案中，R2为
Figure BDA0002289356600000425
在一些实施方案中，R2为
Figure BDA0002289356600000426
在一些实施方案中，R2为
Figure BDA0002289356600000427
在一些实施方案中，R2为
Figure BDA0002289356600000428
Figure BDA0002289356600000429
在所有其它变量如任何上述实施方案中所定义的实施方案中，A为-NRgRh。在这些实施方案中，Rg为H或甲基。在具体的实施方案中，Rg为H。在具体的实施方案中，m为0。
在所有其它变量如任何上述实施方案中所定义的实施方案中，A为R9-(C1-6烷基)-。在这些实施方案中，R9-(C1-6烷基)-的具体值为R9-(C1-4烷基)-，其中该烷基为直链的或直链的，且可为任选取代的。
在所有其它变量如任何上述实施方案中所定义的实施方案中，A为B-(C1-6烷基)t-。在这些实施方案中，t的具体值为0。在这些实施方案中，B的具体值为C3-9杂芳基。在这些实施方案中，B选自：
Figure BDA0002289356600000431
Figure BDA0002289356600000441
它们各自可任选取代有一个、两个、三个或四个取代基。在一些实施方案中，各个上述部分可任选取代有1个、2个或3个取代基R10、R10’和R10”。
在所有其它变量如任何上述实施方案中所定义的实施方案中，B的有用值选自：
Figure BDA0002289356600000442
它们各自可任选取代有一个、两个、三个或四个取代基。在一些实施方案中，各个上述部分可任选取代有1个、2个或3个取代基R10、R10’和R10”。
在所有其它变量如任何上述实施方案中所定义的实施方案中，B选自：
Figure BDA0002289356600000443
在所有其它变量如任何上述实施方案中所定义的实施方案中，B为：
Figure BDA0002289356600000451
其中，R10为C1-6烷基。
在所有其它变量如任何上述实施方案中所定义的实施方案中，R2为D。
在一些实施方案中，D为：
i.(C6-10芳基)(C1-6烷基)z-、(C3-7环烷基)(C1-6烷基)z-或(C3-9杂芳基)(C1-6烷基)z-，其中，所述杂芳基具有一至四个选自O、S和N的杂原子；且其中所述芳基、环烷基或杂芳基可任选取代有一个、两个、三个或四个R14、R15、R16’和R16，它们各自独立选自：
a.支链的或直链的C1-6烷基或C2-6烯基，其中所述烷基或烯基可任选取代有一至四个取代基，该取代基独立选自羟基、卤素、-CHF2、-CF3、氨基、二(C1-6烷基)氨基、单(C1-6烷基)氨基、氰基C1-6烷氧基、-SO2R’、-SO2NR’R”、-NR”SO2R’、卤代烷基、杂芳基、芳基、氧代、螺烷基、稠合烷基、-C(O)NRwRx和-NRwC(O)Rx，其中Rw和Rx独立地为H或C1-6烷基，或一同形成环；其中连至不同原子的R14、R15、R16’和R16中的两个与和各自所连结的原子一同形成双环或三环，其中所述双环或三环可如上文所述取代有一个、两个、三个或四个R14、R15、R16’和R16；
b.C3-7环烷基；
c.任选取代的C3-7杂环基，[例如，杂环基可被羟基、乙酰基或氧杂环丁烷基团任选取代]；
d.羟基；
e.卤素；
f.-CHF2；
g.-CF3；
h.氨基；
i.二(C1-6烷基)氨基；
j.单(C1-6烷基)氨基；
k.氰基；
l.-NRyC(O)Rz或-NRySO2Rz，其中Ry和Rz独立地为H或C1-6烷基，或一同形成环；
m.-C(O)NRyRz，其中Ry和Rz独立地为H或C1-6烷基，或一同形成环；
n.-SO2NRyRz，其中Ry和Rz独立地为H或C1-6烷基；和
o.-C(O)ORy，其中Ry为H或C1-6烷基，或一同形成环；
且z为1或0；
ii.C3-7环烷基-SO2-，其中所述环烷基可任选取代有一个或两个R6’，其中，在各种情况下，R6’独立选自支链的或直链的C1-6烷基、卤素、氰基、-CF3、-CHF2、羟基(C1-6烷基)、卤代(C1-6烷基)、羟基、(C1-6烷基)-O-(C1-6烷基)-、C1-6烷氧基、氨基、二(C1-6烷基)氨基、单(C1-6烷基)氨基、氨基(C1-6烷基)和NRe’Rf’-C(O)-(C1-6烷基)n-，其中Re’和Rf’独立选自氢和支链的或直链的C1-6烷基，且n为1或0；和
iii.H、任选取代的C1-6烷基(例如，卤代烷基)或任选取代的C3-9环烷基、任选取代的C6-10芳基、任选取代的C2-9杂芳基或任选取代的C2-9杂环基(例如吡咯烷基团)。
在一些实施方案中，D为C3-9杂芳基-(C1-6烷基)z-。在这些实施方案中，z的具体值为0。在这些实施方案中，所述杂芳基的具体值为：
Figure BDA0002289356600000461
Figure BDA0002289356600000471
它们各自可任选取代有一个、两个、三个或四个取代基。在一些实施方案中，各个上述部分可任选取代有1个、2个或3个取代基R14、R15和R16。
在所有其它变量如任何上述实施方案中所定义的实施方案中，D的有用值选自：
它们各自可任选取代有一个、两个、三个或四个取代基。在一些实施方案中，各个上述部分可任选取代有1个、2个或3个取代基R14、R15和R16。
在所有其它变量如任何上述实施方案中所定义的实施方案中，D的有用值选自
Figure BDA0002289356600000481
它们各自可任选取代有1个、2个或3个取代基。在一些实施方案中，所述三个取代基为R14、R15和R16。
在所有其它变量如任何上述实施方案中所定义的实施方案中，所述D的杂芳基为
Figure BDA0002289356600000482
在一些实施方案中，D为
在这些实施方案的一些实施方案中，R14、R15和R16各自独立选自：
a.支链的或直链的C1-6烷基，其中所述烷基可任选取代有羟基、卤素、-CF2、-CF3、氨基、二(C1-6)烷基氨基、单(C1-6)烷基氨基、氰基C1-6烷氧基、-SO2R’、-SO2NR’R”、-(CO)NRwRx或-NRw(CO)Rx，其中Rw和Rx独立地为H或C1-6烷基，或其中如本文所述的R14、R15和R16中的两个，当连至不同原子时，与和各自所连结的原子一同形成双环；
b.C3-7环烷基；
c.C3-7杂环基；
d.羟基；
e.卤素；
f.-CF2；
g.-CF3；
h.氨基；
i.二(C1-6)烷基氨基；
j.单(C1-6)烷基氨基；
k.氰基；
l.-NRy(CO)Rz，其中Ry和Rz独立地为H或C1-6烷基；
m.-(CO)NRyRz，其中Ry和Rz独立地为H或C1-6烷基；
n.-SO2NRyRz，其中Ry和Rz独立地为H或C1-6烷基；和
o.-(CO)ORy，其中Ry为H或C1-6烷基；
其中所述连至不同原子的R14、R15和R16中的两个与和各自所连结的原子一同形成双环或三环；其中所述双环或三环为任选取代的。
在这些实施方案的一些实施方案中，连至不同原子的R14、R15和R16中的两个与和各自所连结的原子一同形成双环或三环。在一些实施方案中，D为双环(或三环，当进一步的环稠合存在时)，其为
Figure BDA0002289356600000491
其中X’和Y’各自独立地为C、N、S或O；且其中所述双环任选取代有R17、R18、R19和R20，其中R17、R18、R19和R20各自独立选自氢、羟基、氨基和C1-6烷基，且其中R17、R18、R19和R20中的两个与和它们所连结的碳可形成C3-C5螺环或C2-9杂芳基环。在这些实施方案的一些实施方案中，X’或Y’中的至少一个为N。
在一些实施方案中，D为双环，其为
Figure BDA0002289356600000492
在所有其它变量如任何上述实施方案中所定义的实施方案中，D的杂芳基为：
Figure BDA0002289356600000493
在所有其它变量如任何上述实施方案中所定义的实施方案中，所述化合物中D为任选取代的C6-10芳基。
在所有其它变量如任何上述实施方案中所定义的实施方案中，所述化合物中该任选取代的C6-10芳基为任选取代的苯基。
在所有其它变量如任何上述实施方案中所定义的实施方案中，所述化合物中该任选取代的苯基取代有任选取代的支链的或直链的C1-6烷基或C3-7杂环基。
在所有其它变量如任何上述实施方案中所定义的实施方案中，所述化合物中D为具有式
Figure BDA0002289356600000501
的5元杂芳基，或具有式
Figure BDA0002289356600000502
的6元杂芳基，其中：
Q为NR20、CR20、O或S；
各个T独立地为N或CR21；
各个Z独立地为N或C，其条件为只有一个Z为N；
R20和R21各自独立地为氢、烷基、卤代烷基、烷氧基、卤素、羟基或氰基；且
R22和R23与和它们所连结的原子一同形成双环；其中所述双环可含有一个或多个选自N、S和O的杂原子；且其中所述双环任选取代有一个、两个、三个、四个或五个R30；
其中各个R30独立地为C1-6烷基、C2-6烯基、C3-7环烷基、C3-7杂环基、卤素、氰基、氧代、-NR31R32、-SO2NR31R32、-C(O)NR31R32、-C(O)OR33、-OR33、-NR33C(O)R34、-NR33SO2R35或-SO2R35；其中所述R30的C1-6烷基、C2-6烯基、C3-7环烷基和C3-7杂环基任选取代有一至四个R40；或两个R30基团与和它们所连结的母体部分一同形成环，该环任选取代有一至四个R40；
R31和R32各自独立地为氢或C1-6烷基；或R31和R32与和它们所连结的氮原子一同形成C3-7杂环基，该杂环基任选取代有一至四个R40；
R33和R34各自独立地为氢或C1-6烷基；
R35为C1-6烷基；
各个R40独立选自卤素、氰基、氧代、-NR41R42、-SO2NR41R42、-C(O)NR41R42、-C(O)OR43、-OR43、-NR43C(O)R44、-NR43SO2R45或-SO2R45；C1-6烷基、C1-6卤代烷基[例如，-CHF2或-CF3]、C2-9杂芳基、C6-10芳基、氧代；或两个R40基团与和它们所连结的母体部分一同形成环，该环任选取代有一至三个选自C1-6烷基、C1-6卤代烷基、羟基和氧代的取代基；
R41和R42各自独立地为氢或C1-6烷基；或R41和R42与和它们所连结的氮原子一同形成C3-7杂环基，该杂环基任选取代有一至三个选自C1-6烷基、C1-6卤代烷基、羟基和氧代的取代基；
R43和R44各自独立地为氢或C1-6烷基；且
R45为C1-6烷基。
在一些实施方案中，D为：
Figure BDA0002289356600000511
其中q为0、1、2、3、4、5或6；R36独立地为氢或R30；且R20和R30如本文所详述。在这些实施方案的一些实施方案中，R20为氢、C1-6烷基(例如，甲基)、卤素(例如，氟)、羟基或C1-6烷氧基(例如，甲氧基)。在一些实施方案中，R20为H、Me、F或OH。在这些实施方案的一些实施方案中，R36为氢或C1-6烷基(例如，甲基)。在这些实施方案的一些实施方案中，q为0。
在一些实施方案中，D为：
Figure BDA0002289356600000512
其中q为0、1、2、3、4、5或6；且R20和R30如本文所详述。在这些实施方案的一些实施方案中，q为0。在这些实施方案的一些实施方案中，R20为氢、C1-6烷基(例如，甲基)、卤素(例如，氟)、羟基或C1-6烷氧基(例如，甲氧基)。在一些实施方案中，R20为H、Me、F或OH。
在一些实施方案中，D为：
Figure BDA0002289356600000521
其中R36独立地为氢或R30；且R20和R30如本文所详述。在一些实施方案中，R36为氢或C1-6烷基(例如，甲基)；且R20为氢。
在一些实施方案中，其中D为
Figure BDA0002289356600000522
其中p为0、1、2、3或4；R36独立地为氢或R30；且R20和R30如本文所详述。在一些实施方案中，p为0。在一些实施方案中，R36为氢或C1-6烷基(例如，甲基)；且R20为氢。
在一些实施方案中，其中D为
其中X为CH2、N、O或S；n为1、2、3或4；p为0、1、2、3或4；R36为氢或R30；且R20和R30如本文所详述。在这些实施方案的一些实施方案中，X为CH2且n为1。在一些实施方案中，R36为氢或C1-6烷基(例如，甲基)；且R20为氢。
在一些实施方案中，其中D为
Figure BDA0002289356600000531
其中q为0、1、2、3、4、5或6；G独立地为C或N；G’独立地为N、NR46、CR47、S或O；R46和R47独立地为氢或R40，且R20和R40如本文所详述。在一些实施方案中，两个基团R46和R47一同形成环。在这些实施方案的一些实施方案中，一个G为C且另一个G为N。在一些实施方案中，各个G为C。在一些实施方案中，至少一个G’为N。在一些实施方案中，至少一个G’为CR47。在一些实施方案中，R47为H。在一些实施方案中，R20为氢。
在一些实施方案中，其中D为
Figure BDA0002289356600000532
其中R20和R46如本文所详述。在一些实施方案中，R46为氢或C1-6烷基(例如，甲基)；且R20为氢。
在一些实施方案中，其中D为
Figure BDA0002289356600000533
在一些实施方案中，其中D为
Figure BDA0002289356600000541
其中Q为NR20、O或S；X为CR38aR38b、NR36、S或O；X’为CR39aR39b、NR36、S、SO2或O；R36、R37a、R37b、R38a和R38b独立地为氢或R30；R39a和R39b独立地为氢或R30，或R39a和R39b与和它们所连结的碳原子一同形成C3-7环烷基或C3-7杂环基；且R20和R30如本文所详述。在这些实施方案的一些实施方案中，Q为NR20。在这些实施方案的一些实施方案中，Q为S。在一些实施方案中，X为CH2或NR36。在一些实施方案中，X’为CH2。在一些实施方案中，X’为SO2。在一些实施方案中，X’为CR39aR39b，其中R39a和R39b与和它们所连结的碳原子一同形成环丙基。在一些实施方案中，R36为氢或C1-6烷基(例如，甲基)；且R20为氢。
在一些实施方案中，其中D为
Figure BDA0002289356600000542
其中X、X’、R20和R36如本文所详述。在这些实施方案的一些实施方案中，X为CH2或NR36。在一些实施方案中，X’为CH2。在一些实施方案中，X’为SO2。在一些实施方案中，X’为CR39aR39b，其中R39a和R39b与和它们所连结的碳原子一同形成环丙基。在一些实施方案中，R36为氢或C1-6烷基(例如，甲基)。在一些实施方案中，R20为氢。
在所有其它变量如任何上述实施方案中所定义的实施方案中，所述化合物中R1’为任选取代的C2-9杂芳基。
在所有其它变量如任何上述实施方案中所定义的实施方案中，所述化合物中该任选取代的C2-9杂芳基为任选取代的含有一个或两个氮原子的5元杂芳基。
在所有其它变量如任何上述实施方案中所定义的实施方案中，所述化合物中该5元杂芳基为吡唑。
在所有其它变量如任何上述实施方案中所定义的实施方案中，所述化合物中R1’为卤素。
在所有其它变量如任何上述实施方案中所定义的实施方案中，所述化合物中该卤素为氟或氯。
在所有其它变量如任何上述实施方案中所定义的实施方案中，所述化合物中R1’为任选取代的C1-6烷基、C2-6烯基或C3-6环烷基。
在所有其它变量如任何上述实施方案中所定义的实施方案中，所述化合物中R1’为任选取代的C1-6烷基。
在所有其它变量如任何上述实施方案中所定义的实施方案中，所述化合物中R1’为任选取代的甲基或乙基。
在所有其它变量如任何上述实施方案中所定义的实施方案中，所述化合物中R1’为甲基。
在所有其它变量如任何上述实施方案中所定义的实施方案中，所述化合物中R1为任选取代的C6-10芳基。
在所有其它变量如任何上述实施方案中所定义的实施方案中，所述化合物中该任选取代的C6-10芳基为任选取代的苯基。
在所有其它变量如任何上述实施方案中所定义的实施方案中，所述化合物中该任选取代的苯基取代有任选取代的支链的或直链的C1-6烷基、C1-6烷氧基、卤素、氰基、羟基、氨基、-CF3或-(CO)NRcRd；其中Rc和Rd如上文所述。
在所有其它变量如上文任一实施方案所定义的实施方案中，化合物包括化合物编号1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、70、71、72、73、74、75、76、77、78、79、80、81、82、83、84、85、86、87、88、89、90、91、92、93、94、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、118、119、120、121、122、123、124、125、126、127、128、129、130、131、132、133、134、135、136、137、138、139、140、141、142、143、144、145、146、147、148、149、150、151、152、153、154、155、156、157、158、159、160、161、162、163、164、165、166、167、168、169、170、171、172、173、174、175、176、177、178、179、180、181、182、183、184、185、186、187、188、189、190、191、192、193、194、195、196、197、198、199、200、201、202、203、204、205、206、207、208、209、210、211、212、213、214、215、216、217、218、219、220、221、222、223、224、225、226、227、228、229、230、231、232、233、234、235、236、237、238、239、240、241、242、243、244、245、246、247、248、249、250、251、252、253、254、255、256、257、258、259、260、261、262、263、264、265、266、267、268、269、270、271、272、273、274、275、276、277、278、279、280、281、282、283、284、285、286、287、288、289、290、291、292、293、294、295、296、297、298、299、300、301、302、303、304、305、306、307、308、309、310、311、312、313、314、315、316、317、318、319、320、321、322、323、324、325、326、327、328、329、330、331、332、333、334、335、336、337、338、339、340、341、342、343、344、345、346、347和348。
在一些实施方案中，本公开提供式I或Ia化合物或其药学上可接受的盐，其中该化合物选自表1、表2和表3中的一种或多种化合物。在一些实施方案中，所述化合物选自表1中的化合物编号1-348，或其药学上可接受的盐。在一些实施方案中，所述化合物选自表2中的化合物编号349-429，或其药学上可接受的盐。在一些实施方案中，所述化合物选自表3中的化合物编号430-572，或其药学上可接受的盐。
表1
Figure BDA0002289356600000561
Figure BDA0002289356600000571
Figure BDA0002289356600000581
Figure BDA0002289356600000591
Figure BDA0002289356600000601
Figure BDA0002289356600000611
Figure BDA0002289356600000621
Figure BDA0002289356600000631
Figure BDA0002289356600000641
Figure BDA0002289356600000651
Figure BDA0002289356600000661
Figure BDA0002289356600000671
Figure BDA0002289356600000681
Figure BDA0002289356600000691
Figure BDA0002289356600000701
Figure BDA0002289356600000711
Figure BDA0002289356600000721
Figure BDA0002289356600000731
Figure BDA0002289356600000751
Figure BDA0002289356600000771
Figure BDA0002289356600000781
Figure BDA0002289356600000791
Figure BDA0002289356600000811
Figure BDA0002289356600000821
Figure BDA0002289356600000831
Figure BDA0002289356600000841
Figure BDA0002289356600000861
Figure BDA0002289356600000871
Figure BDA0002289356600000881
Figure BDA0002289356600000891
Figure BDA0002289356600000901
Figure BDA0002289356600000911
Figure BDA0002289356600000921
Figure BDA0002289356600000931
Figure BDA0002289356600000941
Figure BDA0002289356600000951
Figure BDA0002289356600000961
Figure BDA0002289356600000971
Figure BDA0002289356600000981
Figure BDA0002289356600000991
Figure BDA0002289356600001001
Figure BDA0002289356600001011
Figure BDA0002289356600001021
Figure BDA0002289356600001051
Figure BDA0002289356600001061
Figure BDA0002289356600001071
Figure BDA0002289356600001081
Figure BDA0002289356600001091
Figure BDA0002289356600001101
Figure BDA0002289356600001131
Figure BDA0002289356600001141
Figure BDA0002289356600001151
Figure BDA0002289356600001171
Figure BDA0002289356600001181
Figure BDA0002289356600001191
Figure BDA0002289356600001201
Figure BDA0002289356600001231
Figure BDA0002289356600001241
Figure BDA0002289356600001251
Figure BDA0002289356600001281
Figure BDA0002289356600001291
Figure BDA0002289356600001301
Figure BDA0002289356600001311
Figure BDA0002289356600001321
Figure BDA0002289356600001331
Figure BDA0002289356600001341
Figure BDA0002289356600001351
Figure BDA0002289356600001361
表2
Figure BDA0002289356600001381
Figure BDA0002289356600001391
Figure BDA0002289356600001401
Figure BDA0002289356600001411
Figure BDA0002289356600001421
Figure BDA0002289356600001431
Figure BDA0002289356600001441
Figure BDA0002289356600001451
Figure BDA0002289356600001461
Figure BDA0002289356600001481
Figure BDA0002289356600001511
表3
Figure BDA0002289356600001512
Figure BDA0002289356600001521
Figure BDA0002289356600001531
Figure BDA0002289356600001541
Figure BDA0002289356600001551
Figure BDA0002289356600001571
Figure BDA0002289356600001581
Figure BDA0002289356600001591
Figure BDA0002289356600001601
Figure BDA0002289356600001611
Figure BDA0002289356600001621
Figure BDA0002289356600001641
Figure BDA0002289356600001651
Figure BDA0002289356600001661
Figure BDA0002289356600001671
Figure BDA0002289356600001691
Figure BDA0002289356600001711
Figure BDA0002289356600001721
Figure BDA0002289356600001731
Figure BDA0002289356600001741
Figure BDA0002289356600001751
Figure BDA0002289356600001761
Figure BDA0002289356600001771
Figure BDA0002289356600001781
Figure BDA0002289356600001791
Figure BDA0002289356600001801
Figure BDA0002289356600001811
Figure BDA0002289356600001851
Figure BDA0002289356600001861
Figure BDA0002289356600001871
Figure BDA0002289356600001881
Figure BDA0002289356600001891
Figure BDA0002289356600001911
Figure BDA0002289356600001931
Figure BDA0002289356600001941
Figure BDA0002289356600001951
在一些实施方案中，所述化合物选自表1中的化合物编号1-348，或其药学上可接受的盐。在一些实施方案中，所述化合物选自表2中的化合物编号349-429，或其药学上可接受的盐。在一些实施方案中，所述化合物选自表3中的化合物编号430-572，或其药学上可接受的盐。
本文所述的式I或Ia化合物或其盐可以立体异构的形式存在(例如，其含有一个或多个不对称碳原子)。所述单独的立体异构体(对映异构体和非对映异构体)和它们的混合物包括在本文所公开的主题的范围内。同样地，应理解的是，式I或Ia化合物或盐可以不同于式中所示的互变异构形式存在，并且这些也包括在本文所公开的主题的范围内。应理解的是，本文所公开的主题包括本文所描述的具体基团的组合和子集。本文所公开的主题的范围包括立体异构体的混合物以及纯化的对映异构体或对映异构/非对映异构富集混合物。应理解的是，本文所公开的主题包括本文所定义的具体基团的组合和子集。
本文所公开的主题还包括同位素标记形式的本文所述化合物，但事实上，一个或多个原子被具有与自然中通常发现的原子质量或质量数不同的原子质量或质量数的原子取代。可掺入本文所述化合物中的同位素及其药学上可接受的盐的实例包括氢、碳、氮、氧、磷、硫、氟、碘和氯的同位素，例如2H、3H、11C、13C、14C、15N、17O、18O、31P、32P、35S、18F、36Cl、123I和125I。
在实施方案中，一种药物组合物包含化合物(其中所有变量如上文任何实施方案中所定义)和药学上可接受的载体。
本文所公开的主题包括式I或Ia化合物的前药、代谢物、衍生物和药学上可接受的盐。所述式I或Ia化合物的代谢物包括通过如下方法制备的化合物，该方法包括使式I或Ia化合物与哺乳动物接触足以产生其代谢产物的一段时间。
若式I或Ia化合物为碱，则可通过本领域可用的任何适合的方法制备所需的药学上可接受的盐，例如用无机酸处理该游离碱，该无机酸例如盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸、甲磺酸、磷酸等，或使用有机酸处理该游离碱，该有机酸例如乙酸、马来酸、琥珀酸、扁桃酸、富马酸、丙二酸、丙酮酸、草酸、乙醇酸、水杨酸、吡喃糖苷酸(例如葡萄糖醛酸或半乳糖醛酸)、α-羟基酸(例如柠檬酸或酒石酸)、氨基酸(例如天冬氨酸或谷氨酸)、芳族酸(例如苯甲酸或肉桂酸)、磺酸(例如对甲苯磺酸或乙磺酸)等。
若式I或Ia化合物为酸，则可以通过任何适合的方法制备所需的药学上可接受的盐，例如，用无机或有机碱处理该游离酸，例如胺(伯、仲、叔胺)、碱金属氢氧化物或碱土金属氢氧化物等。适合的盐的说明性实例包括但不限于衍生自氨基酸(例如甘氨酸和精氨酸)、氨、伯胺、仲胺、叔胺和环胺(例如哌啶、吗啉和哌嗪)的有机盐，以及衍生自钠、钙、钾、镁、锰、铁、铜、锌、铝和锂的无机盐。
式I或Ia化合物可为“前药”的形式，其包括具有可在体内代谢的部分的化合物。通常，所述前药通过酯酶或通过其它机制在体内代谢为活性药物。前药及其用途的实例为本领域熟知的(参见，例如Berge et al.(1977)"Pharmaceutical Salts",J.Pharm.Sci.66:1-19)。所述前药可在化合物的最终分离和提纯过程中原位制备，或者通过使提纯的化合物以其游离酸形式或羟基与适当的酯化剂分别反应来制备。通过用羧酸处理，可将羟基基团转化为酯。前药部分的实例包括经取代和未经取代的、支链的或无支链的低级烷基酯部分(例如，丙酸酯)、低级烯基酯、二-低级烷基-氨基低级烷基酯(例如，二甲基氨基乙基酯)、酰基氨基低级烷基酯(例如，乙酰基氧基甲基酯)、酰基氧基低级烷基酯(例如，新戊酰基氧基甲基酯)、芳基酯(苯基酯)、芳基-低级烷基酯(例如，苄基酯)、经取代的(例如，经甲基、卤素或甲氧基取代基取代的)芳基和芳基-低级烷基酯、酰胺、低级烷基酰胺、二-低级烷基酰胺和羟基酰胺。还包括通过体内其它机制转化为活性形式的前药。在一些方面，本发明的化合物为本文任何式的前药。
一般合成方案
式I或Ia化合物可通过所述实施例的操作和一般通过方案1和2制备，其中R基团如式I或Ia所述，或其前体。
方案1
方案1示出制备式I或Ia化合物的一般合成方法，其中R2为A-C(O)-。6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-胺与胺前体HNRR’的反应得到化合物A，其中R和R’为胺保护基团(例如，4-甲氧基苄基或PMB)。使用活化的酰基化合物(例如A-C(O)-X，其中X为离去基团例如Cl、Br或I)，酰化化合物A的3-氨基基团，得到化合物B。Pd-催化的化合物B与硼酸酯R1-B(OR)2的偶联得到化合物C。化合物C的脱保护得到式(I-A)的产物，其中A和R1如式I或Ia所定义。
提供制备式(I-A)化合物的方法，其包括使化合物B与硼酸酯R1-B(OR)2(其中R为烷基或芳基，或两个OR基团在一同与硼原子形成环)和Pd催化剂反应形成化合物C，并使化合物C经受胺脱保护的条件。该方法可进一步包括酰化化合物A(包括使化合物A与A-C(O)-X反应，其中X为离去基团例如Cl、Br或I)，形成化合物B。
方案2
方案2示出制备式I或Ia化合物的一般合成方法，其中R2为D。6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-胺与胺前体HNRR’的反应得到化合物A，其中R和R’为胺保护基团(例如，4-甲氧基苄基)。Pd催化的化合物A与硼酸酯R1-B(OR)2的偶联得到化合物D。Pd催化的化合物D与化合物D-X的偶联得到化合物E。化合物C的脱保护产生式(I-D)的产物，其中D和R1如式I或Ia所定义。
提供制备式(I-D)化合物的方法，其包括使化合物A与硼酸酯R1-B(OR)2(其中R为烷基或芳基，或两个OR基团一同与硼原子形成环)和Pd催化剂反应形成化合物D；使化合物D与化合物D-X(其中X为离去基团例如Cl、Br或I)和Pd催化剂反应形成化合物E，并使化合物E经受胺脱保护的条件。
组合物
可将本发明化合物与药学上可接受的载体一起配制成药物组合物。
式I或Ia化合物可根据标准的药学实践被配制成药物组合物。根据这一方面，提供一种药物组合物，其包含式I或Ia化合物与药学上可接受的稀释剂或载体的联合。
通过将式I或Ia化合物与载体、稀释剂或赋形剂混合，制备典型的制剂。适合的载体、稀释剂和赋形剂为本领域技术人员熟知的，且包括例如碳水化合物、蜡、水溶性和/或可溶胀聚合物、亲水或疏水材料、明胶、油、溶剂、水等等。所用的具体载体、稀释剂或赋形剂将取决于应用式I或Ia化合物的方式和目的。通常，基于本领域技术人员认可的施用于哺乳动物的安全溶剂(GRAS)来选择溶剂。通常，安全溶剂为无毒的水性溶剂，例如水和其它在水中可溶或可混溶的无毒溶剂。适合的水性溶剂包括水、乙醇、丙二醇、聚乙二醇(例如，PEG400、PEG 300)等，以及它们的混合物。制剂还可包含一种或多种缓冲剂、稳定剂、表面活性剂、润湿剂、润滑剂、乳化剂、悬浮剂、防腐剂、抗氧化剂、遮光剂、助流剂、加工助剂、着色剂、甜味剂、芳香剂、调味剂和其它已知的添加剂，以提供药物(即，式I或Ia化合物或其药物组合物)的优雅呈现或有助于制造药物产品(即药物)。
可使用常规的溶解和混合操作制备制剂。例如，在上述一种或多种赋形剂存在下，原料药物(即，式I或Ia化合物或式I或Ia化合物的稳定形式(例如，与环糊精衍生物或其它已知的配合剂的配合物))溶于适合的溶剂中。式I或Ia化合物通常配制成药物剂型，以提供易于控制的药物剂量并使患者顺应处方方案。
取决于用于给药该药物的方法，用于施用的药物组合物(或制剂)可以多种方式包装。通常，用于分配的物品包括以适当的形式在其中存放药物制剂的容器。适合的容器是本领域技术人员熟知的，且包括例如瓶子(塑料和玻璃)、小袋、安瓿、塑料袋、金属圆筒等材料。该容器还可包括防篡改(tamper-proof)组件，以防止对包装内容物的不慎接触。此外，该容器上放置标签，用于描述该容器的内容物。标签还可包括适当的警告。
可制备用于各种给药途径和给药类型的药物制剂。例如，具有所需纯度的式I或Ia化合物可任选地与药学上可接受的稀释剂、载体、赋形剂或稳定剂混合(Remington’sPharmaceutical Sciences(1980)16th edition,Osol,A.Ed.)，呈冻干制剂、经研磨的粉末或水溶液的形式。可在环境温度、适当的pH和所需的纯度，通过与生理学上可接受的载体(即在所用剂量和浓度下对接受者无毒的载体)混合进行配制。制剂的pH主要取决于具体用途和化合物的浓度，但可在约3至约8的范围内。在pH5的乙酸盐缓冲液中的制剂为适合的实施方案。
式I或Ia化合物可为无菌的。特别是，用于体内给药的制剂应该为无菌的。这种无菌化容易通过用无菌过滤膜过滤完成。
该化合物通常可作为固体组合物、冻干制剂或水溶液储存。
包含式I或Ia化合物的药物组合物可以一种方式(即给药的量、浓度、时序安排、疗程、媒介物和给药途径)配制、服药和给药，且与良好的医学实践一致。在这方面考虑的因素包括所治疗的具体病症、所治疗的具体哺乳动物、个体患者的临床状况、病症的原因、药剂的递送部位、给药方法、给药时序安排和医学从业者已知的其它因素。所给药化合物的“治疗有效量”将受这些考虑因素影响，且其为预防、改善或治疗凝血因子介导的病症所需的最小量。这样的量优选低于对宿主有毒的量或使宿主显著更容易出血的量。
可接受的稀释剂、载体、赋形剂和稳定剂在所使用的剂量和浓度下对接受者无毒，且包括缓冲剂，例如磷酸盐、柠檬酸盐和其它有机酸；抗氧化剂，包括抗坏血酸和蛋氨酸；防腐剂(例如十八烷基二甲基苄基氯化铵；六甲基氯化铵；氯化苯甲烃铵(benzalkoniumchloride)、苄索氯铵(benzethonium chloride)；苯酚、丁醇或苄醇；对羟基苯甲酸烷基酯，例如对羟基苯甲酸甲基酯或对羟基苯甲酸丙基酯；邻苯二酚(catechol)；间苯二酚(resorcinol)；环己醇；3-戊醇；和间甲酚)；低分子量(少于约10个残基)的多肽；蛋白质，例如血清白蛋白、明胶或免疫球蛋白；亲水性聚合物，例如聚乙烯吡咯烷酮；氨基酸，例如甘氨酸、谷氨酰胺、天冬酰胺、组氨酸、精氨酸或赖氨酸；单糖、二糖和其它碳水化合物(包括葡萄糖、甘露糖或糊精)；螯合剂，例如EDTA；糖类，例如蔗糖、甘露糖醇、海藻糖或山梨糖醇；成盐抗衡离子，例如钠；金属配合物(例如，Zn-蛋白配合物)；和/或非离子表面活性剂，例如TWEENTM、PLURONICSTM或聚乙二醇(PEG)。活性药物成分也可包裹于微胶囊中，例如通过凝聚技术或通过界面聚合制备的微胶囊，例如在胶体药物递送系统(例如，脂质体、白蛋白微球、微乳液、纳米颗粒和纳米胶囊)中或巨乳液中，分别为羟基甲基纤维素或明胶-微胶囊和聚-(甲基丙烯酸甲基酯)微胶囊。这些技术公开于Remington’s Pharmaceutical Sciences16th edition,Osol,A.Ed.(1980)中。
可制备式I或Ia化合物的缓释制剂。缓释制剂适合的实例包括含有式I或Ia化合物的固体疏水聚合物的半透性基质，该基质为成型制品的形式，例如膜或微胶囊。缓释基质的实例包括聚酯、水凝胶(例如，聚(2-羟基乙基-甲基丙烯酸酯)或聚(乙烯醇))、聚乳酸(US3773919)、L-谷氨酸和γ-乙基-L-谷氨酸酯的共聚物、不可降解的乙烯-乙酸乙烯酯、可降解的乳酸-乙醇酸共聚物例如LUPRON DEPOTTM(由乳酸-乙醇酸共聚物和乙酸亮丙瑞林构成的可注射微球)和聚-D-(-)-3-羟基丁酸。
所述制剂包括适于本文详述的给药途径的制剂。该制剂可方便地以单位剂型存在且可通过药学领域熟知的任何方法制备。技术和制剂通常在Remington’s PharmaceuticalSciences(Mack Publishing Co.,Easton,PA)中找到。这些方法包括使所述活性成分与构成一种或多种辅助成分的载体结合的步骤。通常，通过将所述活性成分与液体载体或细碎固体载体或它们两者均匀且紧密地结合，来制备该制剂，然后，若需要，则使该产物成型。
适于口服给药的式I或Ia化合物的制剂可制备成离散的单位，例如丸剂、胶囊、扁囊剂或片剂，它们每个含有预定量的式I或Ia化合物。
可通过在适当的机器上压缩自由流动形式的所述活性成分(例如粉末或颗粒)来制备压缩的片剂，其任选地与粘合剂、润滑剂、惰性稀释剂、防腐剂、表面活性试剂或表面分散剂混合。可通过在适当的机器上模塑粉末状活性成分(其经惰性液体稀释剂润湿)来制备模制片剂。该片剂可任选地经包衣或刻痕，并任选地配制成便于从中缓慢或控制释放该活性成分。
可制备片剂、锭剂、糖锭剂、水性或油性悬浮液、可分散的粉末或颗粒、乳液、硬胶囊或软胶囊(例如明胶胶囊)、糖浆或酏剂用于口服用途。可根据本领域已知的用于制造药物组合物的任何方法，制备用于口服的式I或Ia化合物的制剂，且该组合物可含有一种或多种包括甜味剂、调味剂、着色剂和防腐剂的试剂，以提供适口的制剂。含有所述活性成分与无毒的、药学上可接受的赋形剂(其适于制备片剂)的混合物的片剂是可接受的。这些赋形剂可为，例如，惰性稀释剂，例如钙或碳酸钠、乳糖、磷酸钙或磷酸钠；造粒剂和崩解剂，例如玉米淀粉或海藻酸；粘合剂，例如淀粉、明胶或阿拉伯胶；以及润滑剂，例如硬脂酸镁、硬脂酸或滑石。片剂可以是未经包衣的，或可通过已知技术包衣，这些技术包括微囊化以延迟在胃肠道中的崩解和吸附(adsorption)，从而在更长的时间内提供持续作用。例如，可施用延时材料，例如可单独施用或与蜡一同施用单硬脂酸甘油酯或二硬脂酸甘油酯。
用于治疗眼睛或其它外部组织，例如口腔和皮肤，所述制剂优选地作为含有活性成分的局部软膏或乳膏，以例如0.075至20％w/w的量施用。当配制成软膏时，该活性成分可与石蜡基或水混溶性软膏基质一起施用。或者，该活性成分可配制成具有水包油乳膏基质的乳膏。
若需要，则该乳膏基质的水相可包括多元醇，即具有两个或更多个羟基基团的醇，例如丙二醇、1,3-丁二醇、甘露糖醇、山梨糖醇、甘油和聚乙二醇(包括PEG 400)及它们的混合物。局部制剂可理想地包括增强该活性成分通过皮肤或其它受影响区域的吸收或渗透的化合物。这种皮肤渗透促进剂的实例包括二甲基亚砜和相关类似物。
乳液的油相可以已知的方式由已知的成分构成。虽然该相可仅包含乳化剂，但它也可包含至少一种乳化剂和脂肪或油或者脂肪和油两者的混合物。所含有的亲水性乳化剂与亲脂性乳化剂一起可起到稳定剂的作用。同时，含有或不含稳定剂的乳化剂构成所谓的乳化蜡，蜡与油和脂肪一起构成所谓乳化软膏基质(该基质形成乳膏制剂的油性分散相)。适用于制剂的乳化剂和乳化稳定剂包括
Figure BDA0002289356600002021
60、
Figure BDA0002289356600002022
80、鲸蜡硬脂醇(cetostearylalcohol)、苄醇、肉豆蔻醇、单硬脂酸甘油酯和月桂基硫酸钠。
式I或Ia化合物的水性悬浮液含有与适于制备水性悬浮液的赋形剂混合的所述活性物质。这种赋形剂包括悬浮剂，例如羧基甲基纤维素钠、交联羧甲基纤维素(croscarmellose)、聚维酮(povidone)、甲基纤维素、羟基丙基甲基纤维素、海藻酸钠、聚乙烯吡咯烷酮、黄蓍胶和阿拉伯胶，以及分散剂或润湿剂，例如天然存在的磷脂(例如，卵磷脂)、环氧烷与脂肪酸的缩合产物(例如，聚氧乙烯硬脂酸酯)、环氧乙烷与长链脂族醇(例如十七碳亚乙氧基鲸蜡醇，heptadecaethyleneoxycetanol)的缩合产物、环氧乙烷与偏酯(其衍生自脂肪酸和己糖醇酐)的缩合产物(例如，聚氧乙烯单油酸脱水山梨糖醇酯)。该水性悬浮液还可含有一种或多种防腐剂(例如对羟基苯甲酸乙酯或对羟基苯甲酸正丙酯)、一种或多种着色剂、一种或多种调味剂和一种或多种甜味剂(例如蔗糖或糖精)。
式I或Ia化合物的药物组合物可为无菌可注射制剂的形式，例如无菌可注射水性或油性悬浮液。可根据已知技术，使用那些上述的适合的分散剂或湿润剂和悬浮剂，配制该悬浮液。该无菌可注射制剂也可为无毒的可注射溶液或悬浮液，其在无毒的肠胃外可接受的稀释剂或溶剂(例如1,3-丁二醇)中。该无菌注射制剂也可制备成冻干粉末。可使用的可接受的媒介物和溶剂为水、林格氏溶液(Ringer’s solution)和等渗氯化钠溶液。此外，通常可使用无菌固定油用作溶剂或悬浮介质。为此目的，可使用任何温和的固定油，其包括合成的甘油单酯或甘油二酯。此外，脂肪酸如油酸同样可用于注射剂的制备。
将根据所治疗的宿主和特定的给药方式，改变可与载体材料组合以产生单一剂型的活性成分的量。例如，用于向人类口服给药的时间缓释制剂可含有约1至1000mg活性物质，该活性物质与适当和方便的量的载体物质(其可占总组合物的约5至约95％(重量:重量))混合。该药物组合物可制备成提供容易测量的给药量。例如，用于静脉内输注的水溶液可含有每毫升溶液约3至500μg的活性成分，以便以约30mL/小时的速率输注适合的体积。
适用于肠胃外给药的制剂包括水性和非水性无菌注射溶液，其可含有抗氧化剂、缓冲剂、抑菌剂和使该制剂与预期接受者的血液等渗的溶质；以及水性和非水性无菌悬浮液液体，其可包含悬浮剂和增稠剂。
适于对眼睛局部给药的制剂还包括滴眼剂，其中所述活性成分溶解或悬浮在适合的载体中，尤其是在活性成分的水性溶剂中。在此制剂中，该活性成分优选以约0.5至20％w/w的浓度存在，例如约0.5至10％w/w，例如约1.5％w/w。
适于在口中局部给药的制剂包括含有在调味基质中的所述活性成分的糖锭剂，该基质通常为蔗糖和阿拉伯胶或黄蓍胶；糖锭剂，其包含在惰性基质中的所述活性成分，该基质例如明胶和甘油，或蔗糖和阿拉伯胶；以及在适合的液体载体中的含有所述活性成分的漱口水。
用于直肠给药的制剂可作为栓剂存在，其具有适合的基质(包括例如可可脂或水杨酸酯)。
适用于肺内或经鼻给药的制剂具有例如0.1至500微米的粒径(包括粒径在0.1至500微米之间，以微米为增量，例如0.5、1、30微米、35微米等等)，该制剂通过鼻腔通道快速吸入或通过口腔吸入来给药以到达肺泡囊。适合的制剂包括所述活性成分的水溶液或油溶液。可根据常规方法制备适用于气溶胶或干粉给药的制剂，并且该制剂可与其它治疗剂(例如迄今为止用于治疗或预防如下所述病症的化合物)一同递送。
适合于阴道给药的制剂可作为阴道栓剂、棉塞、乳膏剂、凝胶剂、糊剂，泡沫剂或喷雾制剂提供，除活性成分外，该制剂还含有本领域已知的适当载体。
所述制剂可以包装在单位剂量或多剂量容器中，例如密封的安瓿和小瓶，且可以冷冻干燥(冻干)条件储存，该条件仅需要添加无菌液体载体(例如水)用于临使用前的注射。现用现配的注射溶液和悬浮液由前述类型的无菌粉末、颗粒和片剂制备。优选的单位剂量制剂是含有每日剂量或单位每日亚剂量单位剂量的活性成分的那些，如本文所述，或它们的适当部分。
所述主题还提供兽医用组合物，其包含至少一种如上定义的活性成分以及由此的兽医用载体。该兽医用载体为可用于给药所述组合物的材料，并且可以为固体、液体或气体材料，在兽医领域中，它们是惰性的或可接受的并且与活性成分相容。这些兽医用组合物可肠胃外给药、口服给药或通过任何其它所需的途径给药。
在具体实施方案中，包含本发明化合物的药物组合物进一步包含化疗剂。在这些实施方案的一些实施方案中，所述化疗剂为免疫治疗剂。
方法
本发明化合物可用于抑制所述酶HPK1的活性。HPK1，也称为有丝分裂原活化蛋白激酶激酶激酶激酶1或MAP4K1，是Ste20相关的丝氨酸/苏氨酸激酶的生发中心激酶亚家族的成员。HPK1通过磷酸化和激活MAP3K蛋白(包括MEKK1、MLK3和TAK1)起到MAP4K的作用，导致MAPK Jnk的激活。
在实施方案中，本文所公开的主题涉及抑制HPK1的方法，该方法包括使HPK1与有效量的本文所述的式I或Ia化合物或药物组合物接触。
在实施方案中，本所文公开的主题涉及用于增强在有此需要的受试者中的免疫应答的方法，其中该方法包括向所述受试者给药有效量的本文所述的式I或Ia化合物或药物组合物。在该实施方案的某些方面，相对于给药所述化合物或药物组合物之前，受试者中的T细胞具有增强的引发、增强的活化、增强的迁移、增强的增殖、增强的存活和增强的细胞溶解活性中的至少一种。在该实施方案的某些方面，所述T细胞活化的特征在于相对于给药所述化合物或药物组合物之前，γ-IFN+ CD8 T细胞频率升高或T细胞产生的IL-2水平或颗粒酶B水平升高。在该实施方案的某些方面，相对于给药所述化合物或药物组合物之前，T细胞的数量升高。在该实施方案的某些方面，所述T细胞为抗原特异性CD8 T细胞。在该实施方案的某些方面，相对于给药所述化合物或药物组合物之前，受试者中的抗原呈递细胞具有增强的成熟和活化。在该实施方案的某些方面，所述抗原呈递细胞为树突细胞。在该实施方案的某些方面，抗原呈递细胞成熟的特征在于CD83+树突细胞的频率增加。在该实施方案的某些方面，所述抗原呈递细胞活化的特征在于树突细胞上CD80和CD86的升高的表达。
在本文所述的方法中，将式I或Ia化合物或其药物组合物给予患有癌症的受试者，如本文其它地方所述。
在实施方案中，本文公开的主题涉及治疗HPK1依赖性病症的方法，该方法包括向有此需要的受试者给药有效量的如本文所述的式I或Ia化合物或药物组合物。在该实施方案的某些方面，所述HPK1依赖性病症为癌症。在该实施方案的某些方面，所述癌症包括至少一种选自以下的癌症：结肠直肠癌、黑色素瘤、非小细胞肺癌、卵巢癌、乳腺癌、胰腺癌、血液系统恶性肿瘤和肾细胞癌。在该实施方案的某些方面，所述癌症具有升高的T细胞浸润水平。在该实施方案的某些方面，相对于给药所述化合物或组合物之前，所述受试者中的癌细胞选择性地具有MHC I类抗原表达的增加表达。
在本文所述的方法中，该方法可进一步包括向所述受试者给药化疗剂。在该实施方案的某些方面，该化疗剂与所述化合物或所述组合物同时给予所述受试者。在该实施方案的某些方面，在给药所述化合物或所述组合物之前，将该化疗剂给予所述受试者。在该实施方案的某些方面，在给药所述化合物或所述组合物之后，将该化疗剂给予所述受试者。
HPK1多核苷酸和多肽是本领域已知的(Hu et al.(1996)Genes Dev.10：2251-2264，其通过引用整体并入本文)。HPK1多核苷酸和多肽的非限制性实例包括如SEQ ID NO：1所示的人HPK1多核苷酸(GenBank登记号No.NM_007181.5的核苷酸141-2642)和编码的人HPK1多肽(登记号No.NP_009112.1，如SEQ ID NO：2所示)。人类中存在较短的HPK1的821氨基酸同工型(isoform)，其编码序列和氨基酸序列分别在SEQ ID NO：3和1中列出(分别为GenBank登记号No.NM_001042600.2和GenBank登记号No.NP_001036065.1的核苷酸141-2606)。
HPK1多肽包含多种保守结构基序。为了便于参考，这样的基序将被讨论，因为它们涉及较长的人HPK1同工型(其在SEQ ID NO：2中列出，包含833个氨基酸残基)。HPK1多肽包含氨基末端的Ste20样激酶结构域(该结构域跨越氨基酸残基17-293)，其包括来自氨基酸残基23-46的ATP结合位点。该激酶结构域之后是四个富含脯氨酸(PR)的基序，其作为含SH3的蛋白质的结合位点，例如CrkL、Grb2、HIP-55、Gads、Nck和Crk。所述四个PR基序分别跨越氨基酸残基308-407、394-402、432-443和468-477。HPK1响应TCR或BCR刺激而磷酸化并被激活。TCR-和BCR-诱导的位于PR1和PR2之间381位的酪氨酸的磷酸化，通过SLP-76或BLNK SH2结构域，介导与T细胞的SLP-76的结合或与B细胞的BLNK的结合，且为激酶激活所需。在HPK1的C末端发现的香橼同源结构域(citron homology domain)(大约跨越残基495-800)，可充当调节结构域并且可参与大分子相互作用。
本发明化合物直接与HPK1结合并抑制其激酶活性。在一些实施方案中，本发明化合物减少、抑制或以其它方式减少所述由HPK1介导的SLP76和/或Gads的磷酸化作用。
本发明化合物可为或可不为特异性HPK1拮抗剂。特异性HPK1拮抗剂通过在统计学上大于该拮抗剂对任何其它蛋白质(例如，其它丝氨酸/苏氨酸激酶)的抑制作用的量降低HPK1的生物活性。在某些实施方案中，本发明化合物特别地抑制HPK1的丝氨酸/苏氨酸激酶活性。在这些实施方案的一些实施方案中，HPK1拮抗剂对HPK1的IC50为该HPK1拮抗剂对另一种丝氨酸/苏氨酸激酶或其它类型激酶(例如酪氨酸激酶)的IC50的约90％、80％、70％、60％、50％、40％、30％、20％、10％、0.1％、0.01％、0.001％或更低。
本发明化合物可用于抑制HPK1的方法中。这些方法包括使HPK1与有效量的本发明化合物接触。“接触”意指使该化合物足够接近分离的HPK1酶或表达HPK1的细胞(例如，T细胞、B细胞、树突细胞)，使得该化合物能够结合并抑制HPK1的活性。通过将该化合物给予受试者，可使该化合物在体外或体内与HPK1接触。
本领域已知的用于测量HPK1的激酶活性的任何方法可被用于确定HPK1是否已被抑制，包括体外激酶测定、使用对HPK1的磷酸化靶标(例如SLP76和Gads)具有特异性的抗体的免疫印迹，或测量HPK1激酶活性的下游生物学效应，例如14-3-3蛋白质募集到磷酸化SLP7和Gads上，从含LAT的微团簇中释放SLP76-Gads-14-3-3配合物，或T细胞或B细胞激活。
本发明化合物可用于治疗HPK1依赖性病症。如本文所用，“HPK1依赖性病症”是一种病理病况，其中HPK1活性为该病理病况的发生或维持所必需的。在一些实施方案中，所述HPK1依赖性病症为癌症。
本发明化合物还可用于在有此需要的受试者中增强免疫应答。这些方法包括给药有效量的本发明化合物(即式I或Ia化合物或其药学上可接受的盐、前药、代谢物或衍生物)。
如本文所用，“增强免疫应答”是指对抗原的任何免疫原性应答的改善。对抗原的免疫原性应答的改善的非限制性实例包括增强树突细胞的成熟或迁移、增强T细胞(例如，CD4T细胞、CD8T细胞)的活化、增强T细胞(例如，CD4 T细胞、CD8 T细胞)的增殖、增强B细胞增殖、增加T细胞和/或B细胞的存活、改善抗原呈递细胞(例如，树突细胞)的抗原呈递、改善的抗原清除、增加T细胞产生的细胞因子(例如，白细胞介素-2)、增加对前列腺素E2诱导的免疫抑制的抵抗，以及增强CD8 T细胞的引发和/或细胞溶解活性。
在一些实施方案中，相对于在给药式I或Ia化合物或其药学上可接受的盐、前药、代谢物或衍生物之前，受试者中的CD8 T细胞具有增强的引发、活化、增殖和/或细胞溶解活性。在一些实施方案中，所述CD8 T细胞引发的特征在于CD8 T细胞中CD44升高的表达和/或增强的细胞溶解活性。在一些实施方案中，所述CD8 T细胞活化的特征在于γ-IFN+ CD8 T细胞频率的升高。在一些实施方案中，所述CD8 T细胞为抗原特异性T细胞。
在一些实施方案中，相对于在给药式I或Ia化合物或其药学上可接受的盐、前药、代谢物或衍生物之前，受试者中的抗原呈递细胞具有增强的成熟和活化。在一些实施方案中，所述抗原呈递细胞为树突细胞。在一些实施方案中，所述抗原呈递细胞的成熟的特征在于CD83+树突细胞的频率增加。在一些实施方案中，所述抗原呈递细胞的活化的特征在于在树突细胞上的CD80和CD86升高的表达。
在一些实施方案中，相对于在给药式I或Ia化合物或其药学上可接受的盐、前药、代谢物或衍生物之前，受试者中细胞因子IL-10和/或趋化因子IL-8(鼠科动物KC(murineKC)的人类同族体)的血清水平降低。
所述TCR的参与导致HPK1活化，其作为TCR诱导的AP-1应答途径的负调节物。据信，HPK1通过减少信号传导微团簇的持久性来负调节T细胞活化，减少该持久性是通过在Ser376磷酸化SLP76(Di Bartolo et al.(2007)JEM 204:681-691)和在Thr254磷酸化Gads来实现，这导致与磷酸化的SLP76和Gads结合的14-3-3蛋白质的募集，从含LAT的微团簇中释放SLP76-Gads-14-3-3配合物，其导致T细胞功能障碍，包括无反应性和耗竭(Lasserreet al.(2011)J Cell Biol 195(5):839-853)。
在免疫功能障碍的背景下，术语“功能障碍”是指对抗原刺激的免疫应答降低的状态。该术语包括耗竭和/或无反应性的共同要素，其中可能发生抗原识别，但随后的免疫应答对控制感染或肿瘤生长无效。
如本文所用，术语“功能障碍”还包括对抗原识别的难治性或无反应性，具体地，将抗原识别转化为下游T细胞效应物功能的能力受损，例如增殖、细胞因子产生(例如，IL-2、γ-IFN)和/或靶细胞杀伤。
术语“无反应性”(anergy)是指对抗原刺激的无反应状态，其由通过T细胞受体递送的不完全或不充分的信号引起(例如，在没有ras-激活的情况下细胞内Ca+2的增加)。在没有共刺激的情况下，在用抗原刺激时也可产生T细胞无反应性，导致该细胞即使在共刺激的情况下也变得难以被抗原随后激活。白细胞介素-2的存在通常可推翻该无应答性的状态。无反应性T细胞不经历克隆扩增和/或获得效应物功能。
术语“耗竭”表示作为T细胞功能障碍状态的T细胞耗竭，其源自在许多慢性感染和癌症期间发生的持续TCR信号传导。它与无反应性的区别在于，它不是通过不完全的或不充分的信号传导产生的，而是通过持续信号传导产生的。它被限定为效应功能差、抑制性受体的持续表达和不同于功能性效应物或记忆T细胞的转录状态的转录状态。耗竭阻止了对感染和肿瘤的最佳控制。耗竭可来自外在的负调节途径(例如，免疫调节细胞因子)以及细胞内在的负调节(共刺激)途径(PD-1、B7-H3、B7-H4等)。
在一些实施方案中，将式I或Ia化合物或其药学上可接受的盐、前药、代谢物或衍生物给予受试者，导致T细胞功能的增强。
“增强T细胞功能”意指诱导、引起或刺激T细胞，以具有持续或扩增的生物学功能，或者更新或重新激活耗竭或失活的T细胞。增强T细胞功能的实例包括：增加细胞因子(例如，γ-干扰素、IL-2、IL-12和TNFα)的分泌、增加增殖、相对于干预前的水平增加抗原应答性(例如，病毒、病原体或肿瘤清除)，以及增加由CD8 T细胞(例如颗粒酶B等)产生的效应物颗粒。在一个实施方案中，所述增强水平为至少50％，或者60％、70％、80％、90％、100％、120％、150％、200％。测量该增强的方式为本领域普通技术人员所知。
因此，本发明式I或Ia化合物或其药学上可接受的盐、前药、代谢物或衍生物可用于治疗T细胞功能障碍性病症。“T细胞功能障碍性病症”是T细胞的病症或病况，其特征在于对抗原刺激的响应性降低。在一个特定的实施方案中，T细胞功能障碍性病症是与HPK1激酶活性增加特异性相关的病症。在另一个实施方案中，T细胞功能障碍性病症为其中的T细胞是无反应性的或具有降低的分泌细胞因子、增殖或执行细胞溶解活性的能力的病症。在一个具体方面，降低的应答性导致对表达免疫原的病原体或肿瘤的无效控制。以T细胞功能障碍为特征的T细胞功能障碍性病症的实例包括未解决的急性感染、慢性感染和肿瘤免疫。
因此，本发明化合物可用于治疗需要增强免疫原性的病况，例如增加肿瘤免疫原性以治疗癌症。
“免疫原性”是指特定物质引发免疫应答的能力。肿瘤是免疫原性的，并且增强肿瘤免疫原性有助于通过所述免疫应答清除肿瘤细胞。
“肿瘤免疫”是指肿瘤逃避免疫识别和清除的过程。因此，作为一个治疗概念，当这种逃避减弱时，肿瘤免疫被“治疗”，且该肿瘤被免疫系统识别和攻击。肿瘤识别的实例包括肿瘤结合、肿瘤缩小和肿瘤清除。
在一个方面，本文提供治疗有此需要的受试者的癌症的方法，其包括向受试者给药有效量的式I或Ia化合物或其药学上可接受的盐、前药、代谢物或衍生物。在一些实施方案中，所述受试者患有黑色素瘤。该黑色素瘤可处于早期阶段或晚期阶段。在一些实施方案中，所述受试者患有结肠直肠癌。该结肠直肠癌可处于早期阶段或晚期阶段。在一些实施方案中，所述受试者患有非小细胞肺癌。该非小细胞肺癌可处于早期或晚期阶段。在一些实施方案中，所述受试者患有胰腺癌。该胰腺癌可处于早期或晚期阶段。在一些实施方案中，所述受试者患有血液恶性肿瘤。该血液系统恶性肿瘤可处于早期阶段或晚期阶段。在一些实施方案中，所述受试者患有卵巢癌。该卵巢癌可处于早期阶段或晚期阶段。在一些实施方案中，所述受试者患有乳腺癌。该乳腺癌可处于早期阶段或处于晚期阶段。在一些实施方案中，所述受试者患有肾细胞癌。该肾细胞癌可处于早期或晚期阶段。在一些实施方案中，所述癌症具有升高的T细胞浸润水平。
本发明化合物可以本领域已知的任何适合的方式给药。在一些实施方案中，式I或Ia化合物或其药学上可接受的盐、前药、代谢物或衍生物，通过静脉内、肌肉内、皮下、局部、口服、经皮、腹膜内、眶内、植入、吸入、鞘内、心室内、肿瘤内或鼻内给药。
在一些实施方案中，连续地给药所述HPK1拮抗剂。在其它实施方案中，间歇地所述HPK1拮抗剂。此外，用有效量的HPK1拮抗剂治疗受试者可包括单次治疗或可包括一系列治疗。
应理解的是，活性化合物的适当剂量取决于许多因素，这些因素在普通技术医师或兽医的知识范围内。该活性化合物的剂量可取决于以下因素变化，例如，受试者的年龄、体重、一般健康状况、性别和饮食、给药时间、给药途径、排泄速率和任何药物组合。
还应理解的是，在特定治疗过程中，用于治疗的式I或Ia化合物或其药学上可接受的盐、前药、代谢物或衍生物的有效剂量可增加或减少。诊断测定的结果可导致剂量的变化，且使其变得显而易见。
在一些实施方案中，所述HPK1拮抗剂以约0.001μg/kg至约1000mg/kg的剂量给予所述受试者，包括但不限于约0.001μg/kg、0.01μg/kg、0.05μg/kg、0.1μg/kg、0.5μg/kg、1μg/kg、10μg/kg、25μg/kg、50μg/kg、100μg/kg、250μg/kg、500μg/kg、1mg/kg、5mg/kg、10mg/kg、25mg/kg、50mg/kg、100mg/kg和200mg/kg。
在一些实施方案中，提供治疗有此需要的受试者的癌症的方法，其包括向受试者给药有效量的式I或Ia化合物或其药学上可接受的盐、前药、代谢物或衍生物，所述方法进一步包括施用其它疗法。该其它疗法可为放射疗法、手术(例如，乳房肿瘤切除术和乳房切除术)、化学疗法、基因疗法、DNA疗法、病毒疗法、RNA疗法、免疫疗法、骨髓移植、纳米疗法、单克隆抗体疗法或前述疗法的组合。所述其它疗法可为辅助或新辅助疗法的形式。在一些实施方案中，所述其它疗法为给药抗转移剂。在一些实施方案中，所述其它疗法为给药副作用限制剂(例如，旨在减轻治疗副作用的发生和/或严重性的药剂，例如止吐剂等)。在一些实施方案中，所述其它疗法为放射疗法。在一些实施方案中，所述其它疗法为手术。在一些实施方案中，所述其它疗法为放射疗法和手术的组合。在一些实施方案中，所述其它疗法是γ辐射。在一些实施方案中，所述其它疗法为靶向PI3K/AKT/mTOR途径的疗法、HSP90抑制剂、微管蛋白抑制剂、凋亡抑制剂和/或化学预防剂。
所述其它疗法可为一种或多种化疗剂。因此，所述治疗癌症的方法可包括将本发明的HPK1拮抗剂与至少一种化疗剂联合给药。
如本文所用，“与...联合”是指，在另一种治疗方式之外还施用一种治疗方式。因此，“与...联合”是指在向所述受试者施用其它治疗方式之前、期间或之后施用一种治疗方式。
例如，HPK1拮抗剂和化疗剂可依次(在不同时间)或同时(在同一时间)给药。HPK1拮抗剂和化疗剂可通过相同的给药途径或通过不同的给药途径给药。
在某些实施方案中，HPK1拮抗剂与另一种免疫疗法联合施用。例如，所述HPK1拮抗剂可与靶向PDL1/PD1途径的化疗剂或生物制剂组合。已知的抑制性检查点途径涉及通过PD-1受体的信号传导。该程序性死亡1(PD-1)受体及其配体PD-L1和PD-L2为与CTLA-4相同的共调节分子家族的一部分。请参阅：http://www.onclive.com/web-exclusives/the-role-of-anti-pd-l1-immunotherapy-in-cancer/2#sthash.cGfYa1T1.dpuf。阻断PD-L1与PD-1和CD80的结合的化疗剂或生物制剂可阻止由PD-L1介导的T细胞活化的抑制/压制。程序性细胞死亡配体-1(PD-L1)在抗原呈递细胞(APC)和其它免疫细胞上广泛表达。它在来自大范围人类癌症的肿瘤细胞上被上调，并且涉及抗肿瘤T细胞免疫的抑制。PD-L1是一种与活化的T细胞、B细胞和其它骨髓细胞上的受体PD-1和CD80结合的细胞表面蛋白。已经发现的是，与活化的T细胞上的PD-1结合的PD-L1会干扰T细胞增殖并抑制免疫应答。PD-L1在癌细胞上的过度表达可使这些细胞免于免疫检测和消除。肿瘤细胞上高水平的PD-L1表达与增加的肿瘤侵袭性和预后不良有关。阻断PD-L1与PD-1结合的化疗剂或生物制剂包括抗PD-L1抗体，例如德瓦鲁单抗(durvalumab)、纳武单抗、皮地利珠单抗(pidlizumab)、MPDL3280A、MK-3475和BMS-936559等。
在另一个实例中，HPK1拮抗剂可与靶向OX40和其配体OX40L(其为TNF超家族的成员)的化疗剂或生物制剂组合。OX40在活化的CD4(+)和CD8(+)T细胞以及许多其它淋巴和非淋巴细胞上表达。从OX40到常规T细胞的共刺激信号促进分裂和存活，增加效应物和记忆群体的克隆扩增，因为它们产生至抗原。OX40还抑制T调节细胞的分化和活性，进一步放大了这一过程。OX40和OX40L还调节T细胞、抗原呈递细胞、自然杀伤细胞和自然杀伤T细胞的细胞因子产生，并调节细胞因子受体信号传导。作为已知控制T细胞最突出的共刺激分子之一，刺激OX40已被证明是癌症治疗性免疫策略的靶标。某些OX40激动剂包括GBR 830，以及在Linch,et al.,Frontiers in Oncology,v.5,pp.1-10(2015)中公开的那些激动剂，其全部内容通过引用并入本文。
在一些实施方案中，本发明还提供本文所述的式I或Ia化合物或本文所述的药物组合物，其用于如本文所述的抑制HPK1的方法，或用于如本文所述的在有此需要的受试者中增强免疫应答的方法，和/或用于如本文所述的治疗HPK1依赖性病症的方法。
在一些实施方案中，本发明还提供本文所述的式I或Ia化合物或本文所述的药物组合物，其用于如本文所述的抑制HPK1的方法。
在一些实施方案中，本发明还提供本文所述的式I或Ia化合物或本文所述的药物组合物，其用于如本文所述的在有此需要的受试者中增强免疫应答的方法。
在一些实施方案中，本发明还提供本文所述的式I或Ia化合物或本文所述的药物组合物，其用于治疗如本文所述的HPK1依赖性病症的方法。
在一些实施方案中，本发明还提供本文所述的式I或Ia化合物或本文所述的药物组合物在制备用于抑制HPK1的药物、用于增强有此需要的受试者免疫应答的药物和/或用于治疗HPK1依赖性病症的药物中的用途。
在一些实施方案中，本发明还提供本文所述的式I或Ia化合物或本文所述的药物组合物在制备用于抑制HPK1的药物中的用途。
在一些实施方案中，本发明还提供本文所述的式I或Ia化合物或本文所述的药物组合物在制备用于增强有此需要的受试者中免疫应答的药物中的用途。
在一些实施方案中，本发明还提供本文所述的式I或Ia化合物或本文所述的药物组合物在制备用于治疗HPK1依赖性病症的药物中的用途。
在一些实施方案中，本发明还提供本文所述的式I或Ia化合物或本文所述的药物组合物在如本文所述的抑制HPK1的方法中、用于如本文所述的增强有此需要的受试者免疫应答的方法中和/或用于如本文所述的治疗HPK1依赖性病症的方法中的用途。
在一些实施方案中，本发明还提供本文所述的式I或Ia化合物或本文所述的药物组合物在如本文所述的抑制HPK1的方法中的用途。
在一些实施方案中，本发明还提供本文所述的式I或Ia化合物或本文所述的药物组合物在如本文所述的增强有此需要的受试者免疫应答的方法中的用途。
在一些实施方案中，本发明还提供本文所述的式I或Ia化合物或本文所述的药物组合物在如本文所述的治疗HPK1依赖性病症的方法中的用途。
在一些实施方案中，在停止治疗后所述治疗导致所述受试者的持续响应。“持续响应”是指在停止治疗后对减少肿瘤生长的持续作用。例如，与给药阶段开始时的大小相比，所述肿瘤大小可保持相同或更小。在一些实施方案中，持续响应的持续时间至少与治疗持续时间相同，至少为治疗持续时间长度的1.5倍、2.0倍、2.5倍或3.0倍。
本文的治疗方法可导致部分或完全响应。如本文所用，“完全响应”或“CR”表示所有目标病变的消失；“部分响应”或“PR”是指目标病变的最长直径之和(SLD)至少减少30％，以基线SLD为参考；以及“稳定疾病”或“SD”是指目标病变的充分缩小既不符合PR的要求，也没有足够的增大以符合PD的要求，以自治疗开始以来最小的SLD为参考。如本文所用，“总响应率”(ORR)是指完全响应(CR)率和部分响应(PR)率之和。
本文的治疗方法可增加经给药HPK1拮抗剂的受试者的无进展生存期和总体生存期。如本文所用，“无进展生存期”(PFS)是指治疗期间和治疗后，在此期间所治疗的疾病(例如癌症)不恶化的时间长度。无进展生存期可包括患者经历完全响应或部分响应的时间量，以及患者经历稳定疾病的时间量。
如本文所用，“总体生存率”是指在特定持续时间后，组中可存活的受试者的百分比。
在一些实施方案中，给药HPK1拮抗剂的受试者为哺乳动物，例如家养动物(例如，牛、绵羊、猫、狗和马)、灵长类动物(例如人和非人类灵长类动物，例如猴)、兔和啮齿动物(例如小鼠和大鼠)。在一些实施方案中，所治疗的受试者为人。
需要治疗癌症的所述受试者可为表现出癌症症状的人、已经被诊断患有癌症的人、从癌症中缓解的受试者或者具有增加的患癌症风险的受试者(例如，遗传倾向、某些饮食或环境暴露)。
提供以下实施例是为了说明而非限制。
实施例
材料与方法
方法A：在使用Agilent SunFire-C18 3.5μm，4.6x50柱和2.0ml/分钟的流速的Agilent 1100 HPLC(配有使用ESI作为电离源的Agilent MSD质谱仪)上进行实验。溶剂体系是从含有0.05％TFA的95％水(溶剂A)以及含有0.05％TFA的5％乙腈(溶剂B)开始，在1.3分钟内升至100％溶剂B的梯度。最终溶剂体系进一步保持恒定1.2分钟。
方法B：在使用Agilent SunFire-C18 3.5μm，4.6x50柱和2.0ml/分钟的流速的Agilent 1200 HPLC(配有使用ESI作为电离源的Agilent MSD质谱仪)上进行实验。溶剂体系是从含有0.01％TFA的95％水(溶剂A)以及含有0.01％TFA的5％乙腈(溶剂B)开始，在1.4分钟内升至5％溶剂A和95％溶剂B的梯度。最终溶剂体系进一步保持恒定1.0分钟。
方法C：在使用Agilent Xbridge-C18，3.5μm，4.6x50mm柱和1.8ml/分钟的流速的Agilent 1200 HPLC(配有使用ESI作为电离源的Agilent MSD质谱仪)上进行实验。溶剂体系是从含有10mM NH4HCO3的95％水(溶剂A)与5％乙腈(溶剂B)开始，在1.3分钟内升至5％溶剂A和95％溶剂B的梯度。最终溶剂体系进一步保持恒定1.2分钟。
方法D：在使用Agilent Xbridge-C18，3.5μm，4.6x50mm柱和1.8ml/分钟的流速的Agilent 1200 HPLC(配有使用ESI作为电离源的Agilent MSD质谱仪)上进行实验。所述溶剂体系是从含有10mM NH4HCO3的95％水(溶剂A)与5％乙腈(溶剂B)开始，在1.6分钟内升至5％溶剂A和95％溶剂B的梯度。该最终溶剂体系进一步保持恒定1.0分钟。
方法E：在使用Agilent SunFire-C18 3.5μm，4.6x50柱和2.0ml/分钟的流速的Agilent 1200 HPLC(配有使用ESI作为电离源的Agilent MSD质谱仪)上进行实验。所述溶剂体系是从含有0.01％TFA的95％水(溶剂A)与含有0.01％TFA的5％乙腈(溶剂B)开始，在1.5分钟内升至5％溶剂A和95％溶剂B的梯度。该最终溶剂体系进一步保持恒定1.0分钟。
方法F：在使用Agilent Xbridge-C18，3.5um，4.6x50mm柱和1.8ml/分钟的流速的Agilent 1200 HPLC(配有使用ESI作为电离源的Agilent MSD质谱仪)上进行实验。所述溶剂体系是从含有10mM NH4HCO3的90％水(溶剂A)与10％乙腈(溶剂B)开始，在1.5分钟内升至5％溶剂A和95％溶剂B的梯度。该最终溶剂体系进一步保持恒定1.0分钟。
方法G：在使用Agilent Xbridge-C18，3.5μm，4.6x50mm柱和1.8ml/分钟的流速的Agilent 1200 HPLC(配有使用ESI作为电离源的Agilent MSD质谱仪)上进行实验。所述溶剂体系是从含有10mM NH4HCO3的95％水(溶剂A)与5％乙腈(溶剂B)开始，在1.4分钟内升至5％溶剂A和95％溶剂B的梯度。该最终溶剂体系进一步保持恒定1.0分钟。
方法H：在使用Gemini-Nx 3μ，C18，3μm，4.6x50mm柱和1.8ml/分钟的流速的Agilent 1200 HPLC(配有使用ESI作为电离源的Agilent MSD质谱仪)上进行实验。所述溶剂体系是从含有10mM NH4HCO3的90％水(溶剂A)与10％乙腈(溶剂B)开始，在1.5分钟内升至5％溶剂A和95％溶剂B的梯度。该最终溶剂体系进一步保持恒定1.0分钟。
方法I：在连接至Waters Acquity H-级UPLC系统(配有PDA检测器)的Waters QDa质谱上进行实验。该光谱仪具有以正离子和负离子模式操作的电喷雾源。该系统使用Acquity BEH C18 1.7μm，50x2.1mm柱，保持50℃以及1.0ml/分钟的流速。该溶剂体系是从含有0.1％甲酸的97％水(溶剂A)和含有0.1％甲酸的3％乙腈(溶剂B)开始，在1.5分钟内升至1％溶剂A和99％溶剂B的梯度。保持0.4分钟，然后在随后的0.1分钟内，返回至97％溶剂A和3％溶剂B。总运行时间为2.5分钟。
方法I-1：在使用XBridge-C18，3.5μm，4.6x50mm柱和1.8ml/分钟的流速的Agilent1200 HPLC(配有使用ESI作为电离源的Agilent MSD质谱仪)上进行实验。所述溶剂体系是从含有10mM NH4HCO3的95％水(溶剂A)与5％乙腈(溶剂B)开始，在1.6分钟内升至5％溶剂A和95％溶剂B的梯度。该最终溶剂体系进一步保持恒定1.0分钟。
方法J：在连接至Waters Acquity UPLC系统(配有PDA检测器)的WatersMicromass ZQ质谱上进行实验。该光谱仪具有以正离子和负离子模式操作的电喷雾源。该系统使用Acquity BEH C18 1.7μm 100x2.1mm柱，保持40℃以及0.4ml/分钟的流速。在开始的0.4分钟内，该起始溶剂体系为含有0.1％甲酸的95％水(溶剂A)和含有0.1％甲酸的5％乙腈(溶剂B)，然后在随后的5.6分钟内梯度升至5％溶剂A和95％溶剂B。保持0.8分钟，然后在随后的0.2分钟内，返回至95％溶剂A和5％溶剂B。总运行时间为8分钟。
方法K：在连接至Agilent HP1100 HPLC系统(配有PDA检测器)的WatersMicromass ZQ质谱上进行实验。该光谱仪具有以正离子和负离子模式操作的电喷雾源。该系统使用Phenomenex Luna C18 3μm，30x4.6mm柱和2.0ml/分钟的流速。在开始的0.3分钟内，该起始溶剂体系为含有0.1％甲酸的95％水(溶剂A)和含有0.1％甲酸的5％乙腈(溶剂B)，然后在随后的4分钟内，梯度升至5％溶剂A和95％溶剂B。保持1.0分钟，然后在随后的0.5分钟，返回至95％溶剂A和5％溶剂B。总运行时间为6分钟。
方法K-1：在使用Shim-Pack XR-ODS 2.2μm，3.0x50柱和1.2ml/分钟的流速的Shimadzu LC-20AD(配有使用ESI作为电离源的LCMS-2020质谱仪)上进行实验。所述溶剂体系是从含有0.05％TFA的95％水(溶剂A)和含有0.05％TFA的5％乙腈(溶剂B)开始，在2.0分钟内升至5％溶剂A和95％溶剂B的梯度。该最终溶剂体系进一步保持恒定0.7分钟。
方法L：在使用Ascentis Express C18 2.7μm，3.0x50mm柱和1.0ml/分钟的流速的Shimadzu LC-30AD(配有使用ESI作为电离源的LCMS-2020质谱仪)上进行实验。所述溶剂体系是从含有0.05％TFA的95％水(溶剂A)与含有0.05％TFA的5％乙腈(溶剂B)开始，在2.0分钟内升至5％溶剂A和95％溶剂B的梯度。该最终溶剂体系进一步保持恒定0.7分钟。
方法M：在使用poroshell HPH-C18，2.7um，3.0x50柱和1.2ml/分钟流速的Shimadzu LC-20ADXR(配有使用ESI作为电离源的LCMS-2020质谱仪)上进行实验。所述溶剂体系是从含有5mM NH4HCO3的95％水(溶剂A)与5％乙腈(溶剂B)开始，在2.0分钟内升至95％溶剂B的梯度。该最终溶剂体系进一步保持恒定0.7分钟。
方法N：在使用CAPCELL CORE C18，2.7μm，2.1x50mm柱和1.0ml/分钟的流速的Shimadzu LC-30AD(配有使用ESI作为电离源的LCMS-2020质谱仪)上进行实验。所述溶剂体系是从含有0.1％FA的95％水(溶剂A)与含有0.1％FA的5％乙腈(溶剂B)开始，在2.0分钟内升至5％溶剂A和95％溶剂B的梯度。该最终溶剂体系进一步保持恒定0.7分钟。
方法O：在使用kinetex EVO C18，2.7μm，2.1x50柱和1.2ml/分钟流速的ShimadzuLC-30AD(配有使用ESI作为电离源的LCMS-2020质谱仪)上进行实验。所述溶剂体系是从含有6.5mM NH4HCO3的95％水(溶剂A)与5％乙腈(溶剂B)开始，在2.0分钟内升至95％溶剂B的梯度。该最终溶剂体系进一步保持恒定0.7分钟。
方法P：在使用Shim-Pack XR-ODS 2.2um，3.0x50柱和1.2ml/分钟的流速的Shimadzu LC-20AD(配有使用ESI作为电离源的LCMS-2010质谱仪)上进行实验。所述溶剂体系是从含有0.05％TFA的95％水(溶剂A)与含有0.05％TFA的5％乙腈(溶剂B)开始，在2.0分钟内升至5％溶剂A和95％溶剂B的梯度。该最终溶剂体系进一步保持恒定0.7分钟。
方法Q：在与使用ESI作为电离源的Agilent MSD(6140)质谱仪联用的Agilent1290 UHPLC上进行实验。该LC分离使用Phenomenex XB-C18，1.7μm，50×2.1mm柱和0.4ml/分钟的流速。溶剂A为含有0.1％FA的水，且溶剂B为含有0.1％FA的乙腈。在7分钟内，该梯度由2-98％溶剂B组成，并在平衡1.5分钟后，在1.5分钟内保持98％B。LC柱温度为40℃。在220nm和254nm处收集UV吸光度，并且对所有实验应用质谱全扫描。
化合物的制备
实施例1：合成中间体
实施例I.1
中间体1：N-(6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-基)氨基甲酸叔丁基酯
Figure BDA0002289356600002171
步骤1：2,6-二氯-4-碘吡啶-3-甲酸
Figure BDA0002289356600002172
在-78℃、N2中，向2,6-二氯-3-碘-吡啶(13.69g,50mmol)在无水THF(150mL)的溶液中逐滴添加LDA(2.0M，在THF中，27.5mL,55mmol)。添加完成后，在-78℃搅拌该反应溶液2小时。在CO2鼓泡5分钟后，在室温搅拌该反应混合物2小时。该反应溶液经浓HCl淬灭，并用二氯甲烷萃取。该合并的有机层在Na2SO4上干燥，过滤并浓缩，得到2,6-二氯-4-碘-吡啶-3-甲酸(8.1g,51％产率)，其为淡黄色固体。LCMS(ESI)[M+H]+＝317.8。
步骤2：(2,6-二氯-4-碘吡啶-3-基)甲醇
将2,6-二氯-4-碘-吡啶-3-甲酸(6g,18.87mmol)在THF(10mL)种的混合物冷却至0℃。缓慢添加BH3-THF(1M，在THF中，94mL,94.37mmol)，然后在85℃搅拌16小时。将该混合物倒入冰水中，且添加K2CO3以调节pH至8。该反应混合物经乙酸乙酯萃取(30mL x 2)。该合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤并浓缩。该粗产物经快速色谱提纯(石油醚/乙酸乙酯＝10/1)，得到(2,6-二氯-4-碘-3-吡啶基)甲醇(4g,69％产率)，其为黄色固体。LCMS(ESI)[M+H]+＝303.9。
步骤3：2,6-二氯-4-碘吡啶-3-甲醛
Figure BDA0002289356600002181
向(2,6-二氯-4-碘-3-吡啶基)甲醇(2.5g,8.23mmol)在二氯甲烷(100mL)的溶液中添加PCC(5g,23.26mmol)。在25℃搅拌该反应混合物1小时。将该反应混合物通过硅胶柱过滤并浓缩。该残余物用快速色谱提纯(石油醚/乙酸乙酯＝20/1)，得到2,6-二氯-4-碘-吡啶-3-甲醛(1.6g,64％产率)，其为黄色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ10.17(s,1H),7.99(s,1H)。
步骤4：(E)-N-叔丁基-1-(2,6-二氯-4-碘吡啶-3-基)甲亚胺(methanimine)
在室温将2,6-二氯-4-碘-吡啶-3-甲醛(6.2g,20mmol)和叔丁胺(7.51g,103mmol)在水(50mL)中的混合物搅拌18小时。该反应混合物经乙酸乙酯萃取。该合并的有机层在Na2SO4上干燥，过滤并浓缩，得到N-叔丁基-1-(2,6-二氯-4-碘-3-吡啶基)甲亚胺(7.2g,96％产率)，其为白色固体。LCMS(ESI)[M+H]+＝356.9。
步骤5：6-((叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)甲基)-1,3-二氯-2,7-二氮杂萘
Figure BDA0002289356600002183
在N2中，将N-叔丁基-1-(2,6-二氯-4-碘-3-吡啶基)甲亚胺(7.2g,20mmol)、叔丁基二甲基(丙-2-炔基氧基)硅烷(3.78g,22mmol)、NiCl2(DPPP)(546mg,1.01mmol)、Zn(196mg,3.03mmol)在乙腈(40mL)中的混合物加热至85℃18小时。将该反应混合物过滤。该滤液用乙酸乙酯稀释，用水洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩。该粗产物用快速色谱提纯(石油醚/乙酸乙酯＝15/1)，得到叔丁基-[(6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-基)甲氧基]-二甲基-硅烷(4g,44％产率)，其为淡黄色固体。LCMS(ESI)[M+H]+＝343.0。
步骤6：(6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-基)甲醇
Figure BDA0002289356600002191
在25℃，将叔丁基-[(6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-基)甲氧基]-二甲基-硅烷(4g,11.65mmol)在HCl的乙醇溶液(20mL,40mmol)中的溶液搅拌4小时。将该反应混合物过滤。收集该固体，溶于NaHCO3水溶液中，并用二氯甲烷萃取。该合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤并浓缩得到(6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-基)甲醇(2.5g,81％产率)，其为黄色固体。LCMS(ESI)[M+H]+＝343.0。
步骤7：6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-甲醛
Figure BDA0002289356600002192
在0℃，向(6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-基)甲醇(2.8g,12mmol)在二氯甲烷(100mL)和DMSO(25mL)的溶液中添加IBX(5.13g,18mmol)。在室温搅拌该反应溶液18小时。用二氯甲烷稀释该反应混合物，用10％K2CO3水溶液和盐水洗涤，用MgSO4干燥，过滤并浓缩得到6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-甲醛(2.2g,78％产率)，其为白色固体。LCMS(ESI)[M+H]+＝226.9。
步骤8：6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-甲酸
Figure BDA0002289356600002193
在室温，向6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-甲醛(2.2g,9.69mmol)在1,4-二噁烷(80mL)和水(30mL)的溶液中添加NH2SO3H(1.13g,11.63mmol)和NaClO2(1.05g,11.63mmol)。在室温搅拌该反应溶液18小时。然后添加水。通过过滤收集该沉淀物，用水和丙酮洗涤，得到6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-甲酸(2.2g,74％产率)，其为白色固体。LCMS(ESI)[M+H]+＝242.9。
步骤9：N-(6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-基)氨基甲酸叔丁基酯
Figure BDA0002289356600002201
在90℃、在N2中，向6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-甲酸(230mg,0.94mmol)、t-BuOH(1.4g,18.93mmol)和DIPEA(158mg,1.23mmol)在甲苯(20mL)的溶液中添加DPPA(338mg,1.23mmol)的甲苯(2mL)溶液。该反应溶液回流2小时。该反应溶液冷却至室温，添加甲醇(40mL)。在室温搅拌所得溶液20分钟，然后浓缩。该残余物用甲醇洗涤并干燥，得到N-(6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-基)氨基甲酸叔丁基酯(250mg,75％产率)，其为白色固体。LCMS(ESI)[M-55]+＝257.9。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.56(s,1H),9.37(s,1H),8.23(s,1H),8.10(s,1H),1.52(s,9H)。
实施例I.2
中间体2：6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-胺
Figure BDA0002289356600002202
向小瓶中添加N-(6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-基)氨基甲酸叔丁基酯(1.05g,3.34mmol)、HCl/1,4-二噁烷(10mL,4N，40mmol)和二氯甲烷(5mL)。在40℃搅拌该混合物4小时。浓缩该混合物并在真空中干燥，得到6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-胺盐酸盐(823mg,96％产率)，其为黄色固体。LCMS(ESI)[M+H]+＝214.1.
实施例I.3
中间体3：3-氯-N1,N1-双(4-甲氧基苄基)-2,7-二氮杂萘-1,6-二胺
Figure BDA0002289356600002203
向微波管中添加6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-胺盐酸盐(800mg,3.19mmol)、1-(4-甲氧基苯基)-N-[(4-甲氧基苯基)甲基]甲胺(2.47g,9.58mmol)、DIPEA(1.0mL,6.39mmol)和1,4-二噁烷(4mL)。在140℃搅拌该混合物48小时。冷却该混合物，浓缩，并用硅胶色谱提纯(二氯甲烷/甲醇/7N NH3-甲醇，200/5/1)，得到3-氯-N1,N1-双[(4-甲氧基苯基)甲基]-2,7-二氮杂萘-1,6-二胺(1.02g,73％产率)，其为黄色固体。LCMS(ESI)[M+H]+＝435.1。
实施例I.4
中间体4：(±)-顺式-N-(6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氟环丙烷甲酰胺
Figure BDA0002289356600002211
向(±)-顺式-2-氟环丙烷甲酸(200mg,1.92mmol)在二氯甲烷(10mL)和DMF(0.10mL)的溶液中逐滴添加草酰氯(489mg,3.84mmol)。在20℃搅拌该混合物1小时。然后，在真空下浓缩该反应混合物，得到(±)-顺式-2-氟环丙烷碳酰氯的粗产物，其为黄色固体。
向6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-胺盐酸盐(400mg,1.6mmol)在二氯甲烷(15mL)和吡啶(3mL)的溶液中添加(±)-顺式-2-氟环丙烷碳酰氯(220mg,1.8mmol)。在20℃搅拌该混合物2小时。然后，将该反应混合物用水洗涤(50mL)，并用二氯甲烷(100mL x 3)萃取。合并且浓缩该有机萃取物。该残余物经硅胶快速色谱提纯(石油醚/乙酸乙酯＝10:1至3:1)，得到(±)-顺式-N-(6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氟-环丙烷甲酰胺(350mg,66％产率)，其为淡黄色固体。LCMS(ESI)[M+H]+＝300.2。
实施例I.5
中间体5：(±)-顺式-N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氟环丙烷甲酰胺
Figure BDA0002289356600002212
向密封管内添加N-(6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氟-环丙烷甲酰胺(100mg,0.33mmol)、NH4OH(1.0mL)和1,4-二噁烷(2mL)。在80℃搅拌该混合物6小时。然后，在真空中将该反应混合物浓缩，且该残余物经硅胶快速色谱提纯(石油醚/乙酸乙酯＝3:1至1:5)，得到N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氟-环丙烷甲酰胺(70mg,71％产率)，其为白色固体。LCMS(ESI)[M+H]+＝281.1。
实施例I.6
中间体6：(±)-反式-2-氰基-N-(6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-基)环丙烷甲酰胺
Figure BDA0002289356600002221
在0℃，向6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-胺盐酸盐(250mg,1.0mmol)的吡啶(5mL)溶液中逐滴添加(±)-反式-2-氰基环丙烷碳酰氯(200mg,1.8mmol)的二氯甲烷(5mL)溶液。在20℃搅拌该混合物2小时，然后将溶剂减压去除。所得残余物经硅胶色谱提纯(石油醚/乙酸乙酯10:1至1:2)，得到(±)-反式-2-氰基-N-(6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-基)环丙烷甲酰胺(255mg,79％产率)，其为白色固体。LCMS(ESI)[M+H]+＝307.2。
实施例I.7
中间体7：(±)-反式-N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氰基环丙烷甲酰 胺
Figure BDA0002289356600002222
向密封管内添加(±)-反式-2-氰基-N-(6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-基)环丙烷甲酰胺(150mg,0.49mmol)、1,4-二噁烷(8mL)和氢氧化铵(6mL)。在100℃，搅拌该混合物4小时然后浓缩，得到N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氰基-环丙烷甲酰胺(220mg,94％产率)，其为白色固体。LCMS(ESI)[M+H]+＝288.2。
实施例I.8
中间体8：(1S,2S)-N-(6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氟环丙烷甲酰胺
Figure BDA0002289356600002223
向(1S,2S)-2-氟环丙烷甲酸(200mg,1.92mmol)在二氯甲烷(15mL)和DMF(3mL)的溶液中逐滴添加草酰氯(0.24mL,2.88mmol)。在20℃搅拌该混合物2小时。然后，在真空中将该反应混合物浓缩，得到黄色残余物，其随后被直接用于下一步骤。
向6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-胺盐酸盐(300mg,1.2mmol)在二氯甲烷(15mL)和吡啶(3mL)的溶液中添加(1R,2S)-2-氟环丙烷碳酰氯(220mg,1.8mmol)溶于二氯甲烷(2mL)的溶液。在20℃搅拌该混合物2小时。用水(50mL)洗涤该反应混合物，并用二氯甲烷(100mL x3)萃取。合并该有机萃取物，在真空中浓缩，且该残余物经硅胶快速色谱提纯(石油醚/乙酸乙酯＝10:1至1:1)，得到(1S,2S)-N-(6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氟-环丙烷甲酰胺(330mg,71％产率)，其为淡黄色固体。LCMS(ESI)[M+H]+＝300.2。
实施例I.9
中间体9：(1S,2S)-N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氟环丙烷甲酰胺
Figure BDA0002289356600002231
向密封管内添加(1S,2S)-N-(6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氟-环丙烷甲酰胺(80mg,0.27mmol)、NH4OH(1.0mL)和1,4-二噁烷(2mL)。在85℃搅拌该混合物16小时。然后，在真空中浓缩该反应混合物。该残余物经硅胶快速色谱提纯(石油醚/乙酸乙酯＝3:1至1:5)，得到(1S,2S)-N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氟-环丙烷甲酰胺(51mg,63％产率)，其为白色固体。LCMS(ESI)[M+H]+＝281.2。
实施例I.10
中间体10：反式-N-(6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氟环丙烷甲酰胺
Figure BDA0002289356600002232
向(±)-反式-2-氟环丙烷甲酸(250mg,2.4mmol)在二氯甲烷(5mL)和DMF(0.1mL)的溶液中逐滴添加草酰氯(375mg,2.95mmol)。在20℃搅拌该混合物2小时。然后，在真空中浓缩该反应混合物，得到黄色残余物，其随后被直接用于下一步骤。
向6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-胺盐酸盐(250mg,1.0mmol)在吡啶(5mL)的溶液中添加(±)-反式-2-氟环丙烷碳酰氯(240mg,1.96mmol)溶于二氯甲烷(2mL)的溶液。在20℃搅拌该混合物2小时。然后，在真空中浓缩该反应。该残余物经硅胶快速色谱提纯(石油醚/乙酸乙酯＝10:1至3:1)，得到(±)-反式-N-(6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氟-环丙烷甲酰胺(225mg,71％产率)，其为淡黄色固体。LCMS(ESI)[M+H]+＝300.0。
实施例I.11
中间体11：反式-N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氟环丙烷甲酰胺
Figure BDA0002289356600002241
向密封管内添加(±)-反式-N-(6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氟-环丙烷甲酰胺(125mg,0.42mmol)、NH4OH(1.0mL)和1,4-二噁烷(2mL)。在90℃搅拌该混合物16小时。在16小时后，在真空中浓缩该反应混合物。该残余物经硅胶快速色谱提纯(石油醚/乙酸乙酯＝3:1至1:5)，得到(1S,2R)-N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氟-环丙烷甲酰胺(75mg,64％产率)，其为白色固体。LCMS(ESI)[M+H]+＝281.2。
实施例I.12
中间体12：N-(6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2,2-二氟环丙烷甲酰胺
Figure BDA0002289356600002242
向2,2-二氟环丙烷甲酸(200mg,1.64mmol)在二氯甲烷(3mL)和DMF(0.05mL)的溶液中逐滴添加草酰氯(0.21mL,2.46mmol)。在20℃搅拌该混合物2小时。该反应混合物无需浓缩直接用于下一步骤中。
向6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-胺盐酸盐(200mg,0.80mmol)在吡啶(3mL)的溶液中添加溶于DMA(1mL)的2,2-二氟环丙烷碳酰氯(200mg,1.42mmol)。在20℃搅拌该混合物2小时。然后浓缩该反应混合物。该残余物经硅胶快速色谱提纯(石油醚/乙酸乙酯＝20:1至3:1)，得到N-(6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2,2-二氟-环丙烷甲酰胺(150mg,58％产率)，其为黄色固体。LCMS(ESI)[M+H]+＝318.2。
实施例I.13
中间体13：N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2,2-二氟环丙烷甲酰胺
Figure BDA0002289356600002251
向密封管内添加N-(6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2,2-二氟-环丙烷甲酰胺(100mg,0.31mmol)、NH4OH(1.0mL)和1,4-二噁烷(2mL)。在95℃搅拌该混合物6小时。6小时后，将在真空中浓缩该反应混合物，且该残余物经硅胶快速色谱提纯(石油醚/乙酸乙酯＝3:1至1:5)，得到N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2,2-二氟-环丙烷甲酰胺(55mg,59％产率)，其为白色固体。LCMS(ESI)[M+H]+＝299.2。
实施例I.14
中间体14：4-乙基吡啶-3-基硼酸
Figure BDA0002289356600002252
在-78℃，0.5小时内，将n-BuLi(2.5M在己烷中，25mL,62.5mmol)的溶液逐滴添加至3-溴-4-乙基-吡啶(9.8g,52.69mmol)和硼酸三异丙基酯(12.0g,63.81mmol)的THF(150mL)溶液中。在-78℃，继续搅拌该反应混合物0.5小时，然后缓慢温热至室温并搅拌0.5小时。用水淬灭该反应(120mL)。分离该水层，用乙酸乙酯(150mL)洗涤，并用3N HCl酸化至pH 4-5。析出淡黄色固体。通过过滤收集该沉淀物并干燥，得到(4-乙基-3-吡啶基)硼酸(1.8g,23％产率)，为淡黄色固体。LCMS(ESI)[M+H]+＝152.1。
实施例I.15
中间体15：4-乙基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡啶
Figure BDA0002289356600002261
在90℃、在氩气中，将3-溴-4-乙基-吡啶(5.0g,26.88mmol)、双(频哪醇合)二硼(8.5g,33.47mmol)、PdCl2dppf(1.0g,1.37mmol)、乙酸钾(8.0g,81.63mmol)在1,4-二噁烷(150mL)中的混合物搅拌过夜。将该反应混合物冷却至室温。然后添加双(频哪醇合)二硼(12.0g,47.26mmol)、PdCl2dppf(1.0g,1.37mmol)和1,4-二噁烷(150mL)，并在90℃、在氩气中将该反应混合物搅拌过夜。将该反应混合物冷却至室温并蒸发。该残余物经硅胶色谱提纯(石油醚/乙酸乙酯＝1/1)，得到4-乙基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡啶(4.3g,69％产率)，其为黑色油状物。LCMS(ESI)[M+H]+＝234.1。
实施例I.16
中间体16：3-(4-乙基吡啶-3-基)-N1,N1-双(4-甲氧基苄基)-2,7-二氮杂萘-1,6- 二胺
Figure BDA0002289356600002262
在100℃、在氩气中，将3-氯-N1,N1-双[(4-甲氧基苯基)甲基]-2,7-二氮杂萘-1,6-二胺(2.8g,6.44mmol)、4-乙基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡啶(2.5g,10.73mol)、Xphos Pd G2(250mg,0.32mmol)、Xphos(250mg,0.53mmol)、K2CO3(2g,14.49mmol)在1,4-二噁烷(100mL)和水(25mL)中的混合物搅拌2小时。将该反应混合物冷却至室温，用乙酸乙酯稀释(200mL)，并用盐水洗涤(100mL)。将该有机层分离，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩。该残余物经硅胶色谱提纯(石油醚/乙酸乙酯＝1:2)，得到3-(4-乙基-3-吡啶基)-N1,N1-双[(4-甲氧基苯基)甲基]-2,7-二氮杂萘-1,6-二胺(1g,31％产率)，其为棕色固体。LCMS(ESI)[M+H]+＝506.2。
实施例I.17
中间体17：N1,N1-双(4-甲氧基苄基)-3-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-1,6- 二胺
Figure BDA0002289356600002271
向小瓶中添加XPhos Pd G2(120mg,0.15mmol)、X-phos(100mg,0.21mmol)、3-氯-N1,N1-双[(4-甲氧基苯基)甲基]-2,7-二氮杂萘-1,6-二胺(600mg,1.38mmol)、乙酸钾(300mg,3mmol)、4-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡啶(360mg,1.64mmol)、水(5mL)和1,4-二噁烷(50mL)。用N2鼓泡该反应混合物，并在100℃搅拌6小时。浓缩该混合物并用硅胶色谱提纯(二氯甲烷/甲醇，从30:1至10:1)，得到N1,N1-双[(4-甲氧基苯基)甲基]-3-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-1,6-二胺(340mg,50％产率)，其为黄色固体。LCMS(ESI)[M+H]+＝492.1。
实施例I.18
中间体18：N-(6-氯-8-(二苯基亚甲基氨基)-2,7-二氮杂萘-3-基)环丙烷甲酰胺
步骤1：N-(6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-基)环丙烷甲酰胺
Figure BDA0002289356600002273
在0℃，向6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-胺(270mg,1.26mmol)在吡啶(5mL)中的混合物添加环丙烷碳酰氯(197mg,1.89mmol)。在室温搅拌该混合物2小时。添加水(10mL)并用二氯甲烷(10mL x 2)萃取该混合物经。用水(20mL x 3)、盐水(20mL x 1)洗涤该有机层，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩。该粗产物用快速色谱提纯(石油醚/乙酸乙酯＝3/1)，得到N-(6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-基)环丙烷甲酰胺(240mg,59％产率)，其为黄色固体。LCMS(ESI)[M-55]+＝282.0。
步骤2：N-(6-氯-8-(二苯基亚甲基氨基)-2,7-二氮杂萘-3-基)环丙烷甲酰胺
在微波反应器中，将N-(6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-基)环丙烷甲酰胺(200mg,0.71mmol)、二苯甲酮亚胺(128mg,0.71mmol)、Pd(OAc)2(15mg,0.07mmol)、Xantphos(40mg,0.07mmol)、Cs2CO3(462mg,1.42mmol)、DMF(1mL)和甲苯(1mL)的混合物加热至145℃1小时。将该反应混合物冷却至室温，用乙酸乙酯稀释并通过硅藻土(celite)过滤。该滤液用盐水洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩。该残余物用制备型TLC提纯(正相硅胶，二氯甲烷/甲醇＝50/1)，得到N-(6-氯-8-(二苯基亚甲基氨基)-2,7-二氮杂萘-3-基)环丙烷甲酰胺(45mg,12％产率)，其为黄色固体。LCMS(ESI)[M-55]+＝427.1。
实施例I.19
中间体19：3-氯-N1,N1-双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]-2,7-二氮杂萘-1,6-二胺
Figure BDA0002289356600002282
在120℃，将6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-胺盐酸盐(2.5g,9.98mmol)、双(2,4-二甲氧基苄基)胺(12.67g,39.92mmol)和Et3N(5.04g,49.9mmol)在1,4-二噁烷(100mL)中的混合物搅拌24小时。浓缩该混合物且用柱色谱提纯(乙酸乙酯/己烷＝2:3)，得到3-氯-N1,N1-双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]-2,7-二氮杂萘-1,6-二胺(3.8g,73％产率)，其为白色固体。LCMS(ESI)[M+H]+＝495.1。
实施例I.20
中间体20：N1,N1-双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]-3-(4-乙基-3-吡啶基)-2,7-二 氮杂萘-1,6-二胺
Figure BDA0002289356600002291
在100℃、在氩气中，将3-氯-N1,N1-双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]-2,7-二氮杂萘-1,6-二胺(2.6g,5.25mmol)、4-乙基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡啶(1.42g,5.78mmol)、Xphos Pd G2(0.41g,0.53mmol)、乙酸钾(1.03g,10.51mmol)和XPhos(0.5g,1.05mmol)在1,4-二噁烷(100mL)和水(10mL)中的混合物搅拌3小时。该混合物经浓缩，并用反相制备型HPLC提纯(C-18，乙腈/水+0.05％NH4HCO3)，得到N1,N1-双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]-3-(4-乙基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-1,6-二胺(1.1g,27％产率)，其为白色固体。LCMS(ESI)[M+H]+＝566.3。
实施例I.21
中间体21：1-羟基-3H-氧杂硼杂环戊并[3,4-c]吡啶
向冷却(-78℃)的(3-溴-4-吡啶基)甲醇(960mg,5.11mmol)在THF(40mL)中的溶液逐滴添加n-BuLi(2.5M在己烷中，7.5mL,12mmol)。在-78℃，搅拌该混合物2小时，然后添加硼酸三异丙基酯(1.6mL,6.91mmol)。在-78℃，搅拌该混合物30分钟，然后缓慢温热至室温，并继续搅拌1小时。然后，该反应再次冷却至-78℃，并加水(10mL)淬灭。该混合物用2N HCl酸化至pH＝5，并用乙酸乙酯(30ml x 2)洗涤。在真空中浓缩该水相，得到粗的1-羟基-3H-氧杂硼杂环戊并[3,4-c]吡啶(1.8g,52％产率)，其为浅棕色固体且被直接用于下一步骤中。LCMS(ESI)[M+H]+＝136.2。
实施例I.22
中间体22：(±)-顺式-N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氰基环丙烷甲酰 胺
Figure BDA0002289356600002301
步骤1：(±)-顺式-2-氰基-N-(6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-基)环丙烷甲酰胺
在室温将(±)-顺式-2-氰基环丙烷甲酸(1500.0mg,13.5mmol)和草酰氯(2.0mL,23.48mmol)在二氯甲烷(30mL)中的混合物搅拌1小时。在室温通过旋蒸去除过量的草酰氯。然后添加二氯甲烷(30mL)、6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-胺(850.0mg,3.97mmol)和吡啶(5.0mL,61.82mmol)。在0℃搅拌该反应混合物1小时。通过旋蒸除去该溶剂，且用水洗涤该残余物并过滤，得到(±)-顺式-2-氰基-N-(6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-基)环丙烷甲酰胺(1100mg,80％产率)，其为黄色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝307.0。
步骤2：(±)-顺式-N-(6-氯-8-(2,4-二甲氧基苄基氨基)-2,7-二氮杂萘-3-基)- 2-氰基环丙烷甲酰胺
Figure BDA0002289356600002303
在80℃，将(±)-顺式-2-氰基-N-(6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-基)环丙烷甲酰胺(1.0g,3.26mmol)、2,4-二甲氧基苄基胺(1.5g,8.97mmol)在1,4-二噁烷(10mL)中的混合物搅拌4小时。将该反应浓缩至干燥。该粗产物经硅胶柱色谱提纯(二氯甲烷:甲醇，15:1)，得到粗的(±)-顺式-N-(6-氯-8-(2,4-二甲氧基苄基氨基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氰基环丙烷甲酰胺(1.5g)，LCMS(ESI):[M+H]+＝438.1。
步骤3：(±)-顺式-N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氰基环丙烷甲酰胺
Figure BDA0002289356600002311
在室温将(±)-顺式-N-[6-氯-8-[(2,4-二甲氧基苯基)甲基氨基]-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-氰基-环丙烷甲酰胺(400mg,0.91mmol)的三氟乙酸(2.0mL)溶液搅拌4小时。将该反应浓缩至干燥，且该粗产物经硅胶柱色谱提纯(乙酸乙酯)，得到(±)-顺式-N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氰基-环丙烷甲酰胺(170mg,58％产率)，其为黄色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝288.1。
实施例I.23
中间体23：2-甲基-3-(1-甲基吡唑-4-基)环丙烷甲酸叔丁基酯
Figure BDA0002289356600002312
步骤1：乙基二苯基锍四氟硼氢盐
Figure BDA0002289356600002313
在氮气中，向AgBF4(37.48g,192.53mmol)在二氯甲烷(450mL)的溶液中添加碘乙烷(30g,192.35mmol)。在室温搅拌该溶液30分钟。添加(苯基硫基)苯(106.92g,573.99mmol)，然后在35℃搅拌16小时。过滤该混合物并在真空下浓缩该滤液。该残余物用二氯甲烷/醚(1/1)洗涤，得到四氟硼氢化乙基二苯基锍(25g,116.28mmol)，其为灰白色固体。LCMS(ESI)[M+H]+＝215。
步骤2：反式-2-甲基-3-(1-甲基吡唑-4-基)环丙烷甲酸叔丁基酯
Figure BDA0002289356600002314
在-78℃，向乙基(二苯基)锍(1.55g,7.2mmol)在二氯甲烷(2mL)和1,2-2甲氧基乙烷(20mL)的溶液中添加二乙丙基氨基锂(4.2mL,8.4mmol)。在-78℃，搅拌所得溶液1小时。在-78℃，添加(E)-3-(1-甲基吡唑-4-基)丙-2-烯酸叔丁基酯(500mg,2.4mmol)。在25℃，搅拌该混合物6小时。用水淬灭该反应，然后经二氯甲烷萃取。合并该有机层，经无水硫酸钠干燥并在真空下浓缩，得到反式-2-甲基-3-(1-甲基吡唑-4-基)环丙烷甲酸叔丁基酯(550mg,粗品)，其为黄色油状物。LCMS(ESI)[M+H]+＝237。
步骤3：反式-2-甲基-3-(1-甲基吡唑-4-基)环丙烷甲酸叔丁基酯
25℃，将反式-2-甲基-3-(1-甲基吡唑-4-基)环丙烷甲酸叔丁基酯(500mg,粗品)在二氯甲烷(3mL)和2,2,2-三氟乙酸(4mL)中的溶液搅拌2小时。在真空下浓缩该溶剂。用氨/甲醇(7mol/L)将该反应混合物调节至pH 7。该残余物用反相色谱提纯(乙腈0-40/0.1％HCl在水中)，得到2-甲基-3-(1-甲基吡唑-4-基)环丙烷甲酸(180mg,0.99mmol)的4种立体异构体，其为黄色油状物。LCMS(ESI)[M+H]+＝181。(异构体的环丙烷立体化学：吡唑与羧酸处于反式位置；任意指定所有的绝对立体化学)
实施例I.24
中间体24：2-乙基-3-(1-甲基吡唑-4-基)环丙烷甲酸
步骤1：二苯基(丙基)锍四氟硼酸盐
Figure BDA0002289356600002322
在0℃，向四氟硼酸银(2g,10.31mmol)在二氯甲烷(20mL)的溶液中添加1-碘丙烷(1.75g,10.31mmol)和二苯基硫醚(5.76g,30.93mmol)。在35℃，搅拌该反应15小时。过滤该混合物并在真空下浓缩该滤液。该残余物用二氯甲烷-醚洗涤，得到二苯基(丙基)锍四氟硼酸盐(2g,6.32mmol)，其为白色固体。LCMS(ESI)[M+H]+＝229。
步骤2：2-乙基-3-(1-甲基吡唑-4-基)环丙烷甲酸叔丁基酯
Figure BDA0002289356600002331
在-78℃，向二苯基(丙基)锍四氟硼酸盐(1.50g,4.75mmol)在1,2-2甲氧基乙烷(30mL)和二氯甲烷(3mL)的溶液中添加二乙丙基氨基锂(5.54ml，11.09mmol)。所得混合物搅拌1小时。然后在-78℃，添加(Z)-3-(1-甲基吡唑-4-基)丙-2-烯酸叔丁基酯(330mg,1.58mmol)，并在25℃搅拌15小时。用水淬灭该反应。所得混合物经二氯甲烷萃取并用无水硫酸钠干燥。过滤后，在真空下浓缩该滤液，得到2-乙基-3-(1-甲基吡唑-4-基)环丙烷甲酸叔丁基酯(350mg,1.40mmol)，其为棕色油状物。LCMS(ESI)[M+H]+＝251。
步骤3：2-乙基-3-(1-甲基吡唑-4-基)环丙烷甲酸
Figure BDA0002289356600002332
在25℃，将反式-2-乙基-3-(1-甲基吡唑-4-基)环丙烷甲酸叔丁基酯(350mg,1.4mmol)和2,2,2-三氟乙酸(8mL)在二氯甲烷(3mL)中的溶液搅拌1小时。在真空下浓缩该混合物。所得残余物用反相色谱提纯(乙腈0-40/0.1％HCl在水中)，得到2-乙基-3-(1-甲基吡唑-4-基)环丙烷甲酸(260mg,1.34mmol)，其为棕色油状物。产物混合物由4种立体异构体组成，其中吡唑与羧酸处于反式位置以及2,2-二甲基-3-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)环丙烷-1-甲酸为杂质。LCMS(ESI)[M+H]+＝195。
实施例I.25
中间体25：2-溴-6-异丙基-5,6-二氢-4H-吡唑并[1,5-d][1,4]二氮杂 -7(8H)- 酮
Figure BDA0002289356600002333
在0℃，将2-溴-4,5,6,8-四氢吡唑并[1,5-d][1,4]二氮杂
Figure BDA0002289356600002335
-7-酮(3.0g,13.04mmol)和NaH(1.56g,39.12mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(75mL)中的溶液搅拌10分钟。然后添加2-碘丙烷(11.08g,65.2mmol)。在25℃，搅拌该混合物1小时。用水淬灭该反应。在真空下浓缩该混合物。所得残余物用反相色谱提纯(乙腈0-40/0.1％NH4HCO3/水)，得到2-溴-6-异丙基-5,8-二氢-4H-吡唑并[1,5-d][1,4]二氮杂
Figure BDA0002289356600002345
-7-酮(2.1g,7.7166mmol，59.2％产率)，其为白色固体。LCMS(ESI)[M+H]+＝272。
实施例I.26
中间体26：2-溴-5,5,6-三甲基-4,8-二氢吡唑并[1,5-d][1,4]二氮杂 -7-酮
Figure BDA0002289356600002341
步骤1：2-(3,5-二溴吡唑-1-基)乙腈
在25℃，将3,5-二溴-1H-吡唑(1.0g,4.43mmol)和碳酸钾(1.22g,8.85mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(20mL)中的混合物搅拌10分钟。添加溴乙腈(796.59mg,6.64mmol)，并在25℃搅拌该反应2小时。过滤后，用乙酸乙酯(30mL)稀释该滤液。用水洗涤该反应。用无水硫酸钠干燥该有机相。过滤后，在真空下浓缩该滤液。该残余物在硅胶上用快速色谱提纯，用石油醚/二氯甲醇(1/1)洗脱，得到2-(3,5-二溴吡唑-1-基)乙腈(950mg,3.59mmol)，其为白色固体。LCMS(ESI)[M+H]+＝264。
步骤2：2-[3-溴-5-(2-甲基丙-1-烯基)吡唑-1-基]乙腈
Figure BDA0002289356600002343
在100℃、在氮气中，将2-(3,5-二溴吡唑-1-基)乙腈(1.0g,3.77mmol)、4,4,5,5-四甲基-2-(2-甲基丙-1-烯-1-基)-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷(687.29mg,3.77mmol)、Pd(dppf)Cl2(552.64mg,0.75mmol)和碳酸钾(1.56g,11.32mmol)在1,4-二噁烷(20mL)和水(2mL)中的混合物搅拌1小时。过滤后，在真空下浓缩该滤液。该残余物经硅胶快速色谱提纯，用乙酸乙酯/石油醚(1/3)洗脱，得到2-[3-溴-5-(2-甲基丙-1-烯基)吡唑-1-基]乙腈(700mg,2.92mmol)，其为白色固体。LCMS(ESI)[M+H]+＝240。
步骤3：2-溴-5,5-二甲基-6,8-二氢-4H-吡唑并[1,5-d][1,4]二氮杂
Figure BDA0002289356600002354
-7-酮
Figure BDA0002289356600002351
在65℃，将2-[3-溴-5-(2-甲基丙-1-烯基)吡唑-1-基]乙腈(700mg,2.92mmol)在甲基磺酸(15mL)中的混合物搅拌3天。该反应经冰水淬灭。用氢氧化钠水溶液将该反应混合物调节至pH 9-10。所得溶液经二氯甲烷萃取，并用无水硫酸钠干燥。过滤后，在真空下浓缩该滤液。该残余物用反相色谱提纯(乙腈0-40/0.1％NH4HCO3/水)，得到2-溴-5,5-二甲基-6,8-二氢-4H-吡唑并[1,5-d][1,4]二氮杂
Figure BDA0002289356600002355
-7-酮(300mg,1.16mmol)，其为白色固体。LCMS(ESI)[M+H]+＝258。
步骤4：2-溴-5,5,6-三甲基-4,8-二氢吡唑并[1,5-d][1,4]二氮杂 -7-酮
Figure BDA0002289356600002352
在25℃，将2-溴-5,5-二甲基-6,8-二氢-4H-吡唑并[1,5-d][1,4]二氮杂
Figure BDA0002289356600002357
-7-酮(100mg,0.39mmol)和叔丁醇钾(52.07mg,0.46mmol)在四氢呋喃(10mL)中的混合物搅拌10分钟。添加碘甲烷(82.52mg,0.58mmol)。在25℃搅拌该反应1小时。在真空下浓缩该反应，并在硅胶上经快速色谱提纯，用二氯甲烷/甲醇(95/5)洗脱，得到2-溴-5,5,6-三甲基-4,8-二氢吡唑并[1,5-d][1,4]二氮杂
Figure BDA0002289356600002358
-7-酮(80mg,0.29mmol，其为白色固体。LCMS(ESI)[M+H]+＝272。
实施例I.27
中间体27：2-溴-4-亚甲基-5,6-二氢-4H-吡唑并[1,5-d][1,4]二氮杂 -7(8H)- 酮
Figure BDA0002289356600002353
步骤1：3,5-二溴-1H-吡唑
Figure BDA0002289356600002361
在N2中，向3L三颈圆底烧瓶中添加在二甲基四氢呋喃(1000mL)中的化合物1(200g,656mmol，1.0eq)，然后将该溶液冷却至-78℃。1小时内，在-78℃，将n-BuLi(2.5M，525mL,2.0eq)逐滴添加至上述溶液中，并在-78℃搅拌该混合物3小时。TLC(石油醚/乙酸乙酯＝3/1，Rf＝0.51)显示该反应已完成，且形成一个主要的新点。合并两个反应，并在0℃将该反应混合物倒入水中(1000mL)，且用2N HCl将该溶液的pH值酸化至4～5。所得溶液用乙酸乙酯(1000mL,800mL,400mL)萃取。用盐水(800mL)洗涤该合并的有机相，用无水Na2SO4干燥并在真空下浓缩，得到所述标题化合物(284g,1.26mol，95.8％产率)，其为黄色固体。该粗产物被直接用于下一步骤中，无需进一步提纯。
步骤2：2-(3,5-二溴-1H-吡唑-1-基)乙酸叔丁基酯
Figure BDA0002289356600002362
向3,5-二溴-1H-吡唑(137g,607mmol，1.0eq)的MeCN(959mL)溶液中添加2-氯乙酸叔丁基酯(137g,910mmol，131mL,1.5eq)、K2CO3(137g,989mmol，1.63eq)和TBAI(11.0g,29.7mmol，0.049eq)。在25℃，搅拌所得溶液12小时。TLC(石油醚/乙酸乙酯＝5/1，Rf＝0.74)显示该反应已完成，且形成一个主要的新点。将该反应混合物过滤，该滤饼用EtOAc(500mL x3，300mL,200mL)洗涤。浓缩该合并的滤液得到残余物。将该残余物溶于EtOAc(2.0L)中，用水(1.0L)、盐水(1.0L)洗涤。用无水Na2SO4干燥该有机相，过滤并在真空中浓缩，得到所述标题化合物(744g,粗品)，其为棕色油状物。1H NMR：(400MHz,CDCl3)：δ6.35(s,1H),4.80(s,2H),1.46(s,9H)。
步骤3：2-(3,5-二溴-1H-吡唑-1-基)乙酸
Figure BDA0002289356600002371
向2-(3,5-二溴-1H-吡唑-1-基)乙酸叔丁基酯(248g,729mmol，1.0eq)的DCM(140mL)溶液中添加TFA(2.08kg,18.2mol，1.35L，25eq)，所得溶液加热至80℃并搅拌2小时。TLC(石油醚/乙酸乙酯＝5/1，Rf＝0.03)显示该反应已完成，且形成一个主要的新点。重复该反应两次。在减压下浓缩该合并的反应混合物，得到粗产物。该粗产物用石油醚/乙酸乙酯(4/1，1.0L)稀释，且在25℃搅拌所得的悬浮液1小时，然后过滤。收集该滤饼并在真空中干燥，得到所述标题化合物(471g,1.66mol，75.8％产率)，其为乳白色固体。1H NMR：(400MHz,DMSO)δ13.3(br s,1H),6.70(s,1H),4.96(s,2H)。
步骤4：N-烯丙基-2-(3,5-二溴-1H-吡唑-1-基)乙酰胺
Figure BDA0002289356600002372
在0℃，向2-(3,5-二溴-1H-吡唑-1-基)乙酸(157g,553mmol，1.0eq)的DMF(1.10L)溶液中添加DIPEA(357g,2.77mol，482mL,5.0eq)和EDCI(138g,719mmol，1.3eq)，在0℃搅拌所得溶液30分钟。然后，在0℃，添加HOBt(97.1g,719mmol，1.3eq)，并在0℃继续搅拌该混合物30分钟。然后，在0℃，添加丙-2-烯-1-胺(47.4g,830mmol，62.2mL,1.5eq)，并将该混合物温热至25℃并搅拌16小时。TLC(石油醚/乙酸乙酯＝1/1，Rf＝0.60)显示该反应已完成，且形成一个主要的新点。重复该反应两次。合并三批次的反应，并将该反应混合物倒入冰水(12.0L)中，经乙酸乙酯(2.00L，2.00L，1.00L)萃取。用盐水(2.0L)洗涤该合并的有机相，然后在真空中浓缩，得到粗产物。该粗产物在硅胶上经柱色谱提纯(石油醚/乙酸乙酯＝3/1)，得到所述标题化合物(340g,1.05mol，63.5％产率)，其为白色固体。1H NMR：(400MHz,CDCl3)δ6.41(s,1H),5.89(br s,1H),5.79(m,1H),5.08-5.17(m,2H),4.85(s,2H),3.86-3.93(m,2H)。
步骤5：N-烯丙基-2-(3,5-二溴-1H-吡唑-1-基)-N-(4-甲氧基苄基)乙酰胺
Figure BDA0002289356600002381
向N-烯丙基-2-(3,5-二溴-1H-吡唑-1-基)乙酰胺(103g,319mmol，1.0eq)的THF(721mL)溶液中在添加KOH(32.2g,574mmol，1.8eq)、18-冠醚-6(3.37g,12.8mmol，0.04eq)和1-(氯甲基)-4-甲氧基-苯(64.9g,415mmol，56.5mL,1.3eq)，然后在25℃搅拌该混合物64小时。TLC(石油醚/乙酸乙酯＝2/1，Rf＝0.50)显示形成一个主要的新点。再重复该反应两次。合并三批次的反应，并向该反应混合物中添加水(1.00L)，且用1M HCl调节该pH值至7～8，然后用EtOAc(1.00L，800mL x 3)萃取。用盐水(800mL)洗涤该合并的有机相，用无水Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩，得到粗产物。该粗产物在硅胶上经柱色谱提纯(石油醚/乙酸乙酯＝2/1)，得到所述标题化合物(320g,722mmol，75.5％产率)，其为黄色油状物。
步骤6：2-溴-6-(4-甲氧基苄基)-4-亚甲基-5,6-二氢-4H-吡唑并[1,5-d][1,4]二 氮杂
Figure BDA0002289356600002383
-7(8H)-酮
Figure BDA0002289356600002382
在氩气中，向N-烯丙基-2-(3,5-二溴-1H-吡唑-1-基)-N-(4-甲氧基苄基)乙酰胺(50.0g,113mmol，1.0eq)的DMF(1.0L)溶液中添加K2CO3(31.2g,226mmol，2.0eq)、Pd(PPh3)4(17.0g,14.7mmol，0.13eq)，然后在120℃搅拌该混合物16小时。再重复该反应6次。合并7批次的反应，并将在真空中浓缩该反应混合物以去除溶剂，得到残余物。然后，向该残余物加水(2.0L)，用乙酸乙酯(2.0L，1.0L，1.0L)萃取。用盐水(1.0L)洗涤该合并的有机相并浓缩，得到粗产物。该粗产物在硅胶上经柱色谱提纯(石油醚/乙酸乙酯＝2/1)，得到所述标题化合物(74.1g,204mmol，25.9％产率，98.7％纯度)，其为白色固体。1H NMR：(400MHz,CDCl3)δ7.21(d,J＝8.8Hz,2H),6.86-6.92(m,2H),6.52(s,1H),5.50(s,1H),5.20(s,2H),5.02(s,1H),4.58(s,2H),4.13(s,2H),3.83(s,3H)。
步骤7：2-溴-4-亚甲基-5,6-二氢-4H-吡唑并[1,5-d][1,4]二氮杂
Figure BDA0002289356600002393
-7(8H)-酮
Figure BDA0002289356600002391
在25℃，将2-溴-6-(4-甲氧基苄基)-4-亚甲基-5,6-二氢-4H-吡唑并[1,5-d][1,4]二氮杂
Figure BDA0002289356600002394
-7(8H)-酮(3.90g,10.8mmol，1.0eq)、TFA(38.4g,336mmol，24.9mL,31.3eq)和三氟甲磺酸(16.2g,108mmol，9.5mL,10eq)的DCM(28mL)溶液搅拌12小时。将该反应混合物浓缩，得到残余物。向该残余物加水(100mL)，然后用饱和NaHCO3水溶液调节该pH值至6～7，用经EtOAc(100mL x 3，60mL x 3)萃取。用无水Na2SO4干燥该合并的有机相，过滤并在真空中浓缩，得到粗产物。该粗产物在硅胶上经柱色谱提纯(石油醚/乙酸乙酯＝1/1)，得到所述标题化合物(1.90g,7.85mmol，72.9％产率)，其为灰色固体。1H NMR：(400MHz,CDCl3)δ6.88(s,1H),6.54(s,1H),5.55(s,1H),5.21(s,1H),5.08(s,2H),4.15(d,J＝6.0Hz,2H)。
实施例I.28
中间体28：2-溴-6-甲基-4-亚甲基-4H,5H,6H,7H,8H-吡唑并[1,5-d][1,4]二氮杂
Figure BDA0002289356600002395
-7-酮
步骤1：2-(3,5-二溴-1H-吡唑-1-基)-N-甲基-N-(丙-2-烯-1-基)乙酰胺
Figure BDA0002289356600002392
在室温，将2-(3,5-二溴-1H-吡唑-1-基)乙酸(15g,52.84mmol)、甲基(丙-2-烯-1-基)胺(5.7g,80.15mmol)、N,N-二异丙基乙胺(27g,208.9mmol)和HATU(30g,78.9mmol)的N,N-二甲基甲酰胺(500mL)溶液搅拌16小时。所得混合物用乙酸乙酯稀释，然后用氯化钠溶液洗涤。用无水硫酸钠干燥该有机相。过滤后，在真空下浓缩该滤液。该残余物在硅胶上用快速色谱提纯，用乙酸乙酯/石油醚(2/3)洗脱，得到2-(3,5-二溴-1H-吡唑-1-基)-N-甲基-N-(丙-2-烯-1-基)乙酰胺(16.3g,92％)，其为黄色油状物。LCMS(ESI)[M+H]+＝338.0。
步骤2：2-溴-6-甲基-4-亚甲基-4H,5H,6H,7H,8H-吡唑并[1,5-d][1,4]二氮杂
Figure BDA0002289356600002403
- 7-酮
Figure BDA0002289356600002401
在80℃，将2-(3,5-二溴-1H-吡唑-1-基)-N-甲基-N-(丙-2-烯-1-基)乙酰胺(5g,14.84mmol)、乙酸钯(166mg,0.74mmol)、三苯基膦(388mg,1.48mmol)、TBAB(4.8g,14.890mmol)和乙酸钾(4.2g,42.80mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(100mL)中的混合物搅拌10小时。过滤后，在真空下浓缩该滤液。该残余物在硅胶柱上提纯，用乙酸乙酯/石油醚(2/1)洗脱，得到2-溴-6-甲基-4-亚甲基-4H,5H,6H,7H,8H-吡唑并[1,5-d][1,4]二氮杂-7-酮(3.2g,84％)，其为棕色油状物。LCMS(ESI)[M+H]+＝258.1。
中间体XX：2'-溴-6'-甲基-5',6'-二氢螺[环丙烷-1,4'-吡唑并[1,5-d][1,4]二 氮杂 ]-7'(8'H)-酮
Figure BDA0002289356600002402
在室温，将三甲基氧化锍碘化物(1.29g,5.86mmol)和叔丁醇钾(656mg,5.85mmol)在二甲基亚砜(30mL)中的混合物搅拌30分钟。然后，添加2-溴-6-甲基-4-亚甲基-4H,5H,6H,7H,8H-吡唑并[1,5-d][1,4]二氮杂
Figure BDA0002289356600002406
-7-酮(500mg,1.95mmol)的二甲基亚砜(3mL)溶液。然后在50℃搅拌该混合物12小时。该反应混合物用乙酸乙酯稀释并用水洗涤。将该有机层经无水硫酸钠干燥，过滤并在真空中浓缩。该残余物用二氯甲烷/甲醇(10/1)经硅胶柱提纯，得到2'-溴-6'-甲基-5',6'-二氢螺[环丙烷-1,4'-吡唑并[1,5-d][1,4]二氮杂
Figure BDA0002289356600002407
]-7'(8'H)-酮(120mg,23％)，其为白色固体。LCMS(ESI)[M+H]+＝270。
实施例I.29
中间体29：8-溴-5,6-二氢-11H-咪唑并[1,2-a]吡唑并[1,5-d][1,4]二氮杂
Figure BDA0002289356600002414
Figure BDA0002289356600002411
步骤1：2-溴-4,5,6,8-四氢吡唑并[1,5-d][1,4]二氮杂
Figure BDA0002289356600002415
-7-硫酮
Figure BDA0002289356600002412
在90℃，将2-溴-4,5,6,8-四氢吡唑并[1,5-d][1,4]二氮杂
Figure BDA0002289356600002416
-7-酮(314mg,1.36mmol)和Lawsson试剂(551.4mg,1.36mmol)在1,4-二噁烷(10mL)中的混合物搅拌1小时。在真空下浓缩该反应。该残余物在硅胶上用快速色谱提纯，用二氯甲烷/甲醇(96/4)洗脱，得到2-溴-4,5,6,8-四氢吡唑并[1,5-d][1,4]二氮杂
Figure BDA0002289356600002417
-7-硫酮(265mg,78.9％)，其为白色固体。LCMS(ESI)[M+H]+＝246.0。
步骤2：2-溴-N-(2,2-二乙氧基乙基-5,8-二氢-4H-吡唑并[1,5-d][1,4]二氮杂
Figure BDA0002289356600002418
-7-胺
Figure BDA0002289356600002413
在80℃，将2-溴-5,6-二氢-4H-吡唑并[1,5-d][1,4]二氮杂
Figure BDA0002289356600002419
-7(8H)-硫酮(265.0mg,1.07mmol)、2,2-二乙氧基乙-1-胺(1.42g,10.7mmol)和碳酸银(590mg,2.14mmol)在四氢呋喃(10mL)中的混合物搅拌1小时。在真空下浓缩该溶剂。该残余物经反相柱提纯，用水(0.05％TFA)/CH3CN(85/15)洗脱，得到2-溴-N-(2,2-二乙氧基乙基-5,8-二氢-4H-吡唑并[1,5-d][1,4]二氮杂
Figure BDA00022893566000024110
-7-胺(295mg,80％)，其为棕色油状物。LCMS(ESI)[M+H]+＝345.0。
步骤3：8-溴-5,6-二氢-11H-咪唑并[1,2-a]吡唑并[1,5-d][1,4]二氮杂
Figure BDA00022893566000024111
在80℃，将2-溴-N-(2,2-二乙氧基乙基-5,8-二氢-4H-吡唑并[1,5-d][1,4]二氮杂
Figure BDA0002289356600002424
-7-胺(228mg,0.66mmol)和浓盐酸(0.17mL,0.66mmol)的乙酸(5mL)溶液搅拌1小时。在真空下浓缩该反应。该残余物经反相柱提纯，用水(0.05％TFA)/ACN(85/15)洗脱，得到8-溴-5,6-二氢-11H-咪唑并[1,2-a]吡唑并[1,5-d][1,4]二氮杂
Figure BDA0002289356600002425
(150mg,89.7％)，其为棕色油状物。LCMS(ESI)[M+H]+＝253.0。
实施例I.30
中间体30：8-甲基-7-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-2,3-二 氢吡啶并[2,3-b][1,4]噁嗪-1-甲酸叔丁基酯
Figure BDA0002289356600002422
步骤1：7-溴-8-甲基-2,3-二氢吡啶并[2,3-b][1,4]噁嗪-1-甲酸叔丁基酯
Figure BDA0002289356600002423
在0℃，向7-溴-8-甲基-2,3-二氢-1H-吡啶并[2,3-b][1,4]噁嗪(1g,4.37mmol)的四氢呋喃(2mL)溶液中逐滴添加LiHMDS(8.73mL,8.73mmol，1mol/L)。在0℃、在氮气中，搅拌所得溶液0.5小时。然后，添加一缩二碳酸二叔丁基酯(2.85g,13.07mmol)，并在室温搅拌该反应2小时。该反应用甲醇(50mL)淬灭。在真空下浓缩该溶剂。该残余物经硅胶快速色谱提纯(乙酸乙酯/石油醚，1/4)，得到7-溴-8-甲基-2,3-二氢吡啶并[2,3-b][1,4]噁嗪-1-甲酸叔丁基酯(800mg,2.43mmol)，其为黄色油状物。LCMS(ESI)[M+H]+＝329.2。
步骤2：8-甲基-7-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-2,3-二氢 吡啶并[2,3-b][1,4]噁嗪-1-甲酸叔丁基酯
Figure BDA0002289356600002431
在90℃、在氮气中，将7-溴-8-甲基-2,3-二氢吡啶并[2,3-b][1,4]噁嗪-1-甲酸叔丁基酯(6.2g,18.83mmol)、二频哪醇合二硼(23.93g,94.22mmol)、[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯钯(II)(2.76g,3.77mmol)和乙酸钾(5.55g,56.62mmol)在1,4-二噁烷(2mL)中的混合物搅拌2.5小时。在真空下浓缩该溶剂。该残余物在硅胶上用快速色谱提纯，用乙酸乙酯/石油醚(30％)洗脱，得到8-甲基-7-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-2,3-二氢吡啶并[2,3-b][1,4]噁嗪-1-甲酸叔丁基酯(5g,13.29mmol)，其为黄色油状物。LCMS(ESI)[M+H]+＝376.3。
实施例2：
(±)-顺式-N-(8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氟环丙烷 甲酰胺(化合物1)
Figure BDA0002289356600002432
向密封管内添加N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氟-环丙烷甲酰胺(50mg,0.18mmol)、4-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡啶(50mg,0.23mmol)、Xphos Pd G2(14mg,0.02mmol)、Xphos(17mg,0.04mmol)、乙酸钾(52mg,0.53mmol)、1,4-二噁烷(1mL)和水(0.2mL)。在100℃搅拌该混合物2小时。然后，将该反应混合物过滤。浓缩该滤液，得到黄色残余物，其经硅胶快速色谱提纯(二氯甲烷/甲醇，梯度由20:1至10:1)，得到N-[8-氨基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-氟-环丙烷甲酰胺(21mg,35％产率)，其为白色固体。LCMS(ESI):RT(分钟)＝0.974，[M+H]+＝338.1，方法＝B；1H NMR(400MHz,CD3OD)δ9.30(s,1H),8.54(s,1H),8.43(d,J＝5.2Hz,1H),8.33(s,1H),7.40(d,J＝5.2Hz,1H),6.70(s,1H),4.99-4.80(m,1H),2.46(s,3H),2.19-2.15(m,1H),1.87-1.80(m,1H),1.26-1.21(m,1H)。
实施例3：
(±)-顺式-N-(8-氨基-6-(1,5-二甲基-1H-吡唑-4-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2- 氟环丙烷甲酰胺(化合物2)
Figure BDA0002289356600002441
向密封管内添加N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氟-环丙烷甲酰胺(30mg,0.11mmol)、1,5-二甲基-1H-吡唑-4-硼酸频哪醇酯(31mg,0.14mmol)、XphosPdG2(8mg,0.01mmol)、Xphos(10mg,0.02mmol)、乙酸钾(31mg,0.32mmol)、1,4-二噁烷(1mL)和水(0.4mL)。在100℃搅拌该混合物4小时。将该反应混合物浓缩，且该残余物经硅胶快速色谱提纯(二氯甲烷/甲醇，梯度＝20:1至10:1)，得到顺式-N-[8-氨基-6-(1,5-二甲基吡唑-4-基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-氟-环丙烷甲酰胺(8mg,21％产率)，其为淡黄色固体。LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.051，[M+H]+＝341.2，方法＝B；1H NMR(400MHz,CD3OD)δ9.18(s,1H),8.23(s,1H),7.85(s,1H),7.00(s,1H),4.99-4.83(m,1H),3.86(s,3H),2.64(s,3H),2.18-2.15(m,1H),1.86-1.80(m,1H),1.25-1.20(m,1H)。
实施例4：
(±)-顺式-N-(8-氨基-6-(1,3,5-三甲基-1H-吡唑-4-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)- 2-氟环丙烷甲酰胺(化合物3)
Figure BDA0002289356600002442
向密封管内添加N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氟-环丙烷甲酰胺(20mg,0.07mmol)、1,3,5-三甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑(22mg,0.09mmol)、Xphos Pd G2(6mg,0.01mmol)、Xphos(7mg,0.01mmol)、乙酸钾(21mg,0.21mmol)、1,4-二噁烷(1mL)和水(0.20mL)。在100℃搅拌该混合物5小时。然后，将该反应混合物过滤并浓缩，得到黄色残余物，其经硅胶快速色谱提纯(二氯甲烷/甲醇，梯度＝20:1至8:1)，得到黄色固体。该黄色固体随后经反相快速色谱提纯(Biotage，ODS，50g柱，uv 254nm)，用甲醇/水(+0.5％NH4HCO3)洗脱，得到顺式-N-[8-氨基-6-(1,3,5-三甲基吡唑-4-基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-氟-环丙烷甲酰胺(9mg,35％产率)，其为白色固体。LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.055，[M+H]+＝355.2，方法＝B；1H NMR(400MHz,CD3OD)δ9.21(s,1H),8.24(s,1H),6.82(s,1H),4.98-4.80(m,1H),3.78(s,3H),2.42(s,3H),2.33(s,3H),2.19-2.13(m,1H),1.88-1.78(m,1H),1.27-1.18(m,1H)。
实施例5：
N-(8-氨基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氟环丙烷甲酰胺 (化合物4)
Figure BDA0002289356600002451
向密封管内添加N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氟-环丙烷甲酰胺(20mg,0.07mmol)、1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑(19mg,0.09mmol)、Xphos Pd G2(6mg,0.01mmol)、Xphos(7mg,0.01mmol)、乙酸钾(21mg,0.21mmol)、1,4-二噁烷(1mL)和水(0.2mL)。在100℃搅拌该混合物4小时。然后，将该反应混合物过滤并浓缩，得到黄色残余物，其随后用硅胶快速色谱提纯(二氯甲烷/甲醇，梯度＝20:1至10:1)，得到N-[8-氨基-6-(1-甲基吡唑-4-基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-氟-环丙烷甲酰胺(9mg,37％产率)，其为白色固体。LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.027，[M+H]+＝327.1，方法＝B；1H NMR(400MHz,CD3OD)δ9.16(s,1H),8.22(s,1H),8.14(s,1H),8.03(s,1H),7.13(s,1H),4.99-4.82(m,1H),3.96(s,3H),2.18-2.15(m,1H),1.86-1.80(m,1H),1.26-1.21(m,1H)。
实施例6：
(±)-反式-N-(8-氨基-6-(4-乙基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氰基环丙 烷甲酰胺(化合物5)
Figure BDA0002289356600002452
向小瓶中添加N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氰基-环丙烷甲酰胺(220mg,0.46mmol)、X-phos(43mg,0.09mmol)、Xphos Pd G2(54mg,0.07mmol)、乙酸钾(135mg,1.38mmol)、(4-乙基-3-吡啶基)硼酸(69mg,0.46mmol)、水(1mL)和1,4-二噁烷(10mL)。该反应混合物通过鼓泡N2脱气，然后在100℃搅拌6小时。浓缩该混合物，并用硅胶色谱提纯(二氯甲烷/甲醇由100:1至10:1)，得到(±)-反式-N-[8-氨基-6-(4-乙基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-氰基-环丙烷甲酰胺(102mg,64％产率)，其为浅黄色固体。LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.112，[M+H]+＝359.0，方法＝B；1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ11.28(s,1H),9.41(s,1H),8.50(s,1H),8.49(d,J＝5.2Hz,1H),8.20(s,1H),7.38-7.36(m,2H),7.35(d,J＝5.2Hz,1H),6.95(s,1H),2.80-2.72(m,1H),2.78(q,J＝7.6Hz,2H),2.20-2.12(m,1H),1.65-1.57(m,1H),1.48-1.39(m,1H),1.09(t,J＝7.6Hz,3H)。
实施例7：
(1S,2S)-N-(8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氟环丙烷甲 酰胺(化合物6)
Figure BDA0002289356600002461
向密封管内添加(1S,2S)-N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氟-环丙烷甲酰胺(50mg,0.18mmol)、4-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡啶(51mg,0.23mmol)、Xphos Pd G2(14mg,0.02mmol)、Xphos(178mg,0.04mmol)、乙酸钾(52mg,0.53mmol)、1,4-二噁烷(1mL)和水(0.20mL)。在100℃搅拌该混合物2小时，然后过滤。浓缩该滤液，得到黄色残余物，其随后用硅胶快速色谱提纯(二氯甲烷/甲醇，梯度＝20:1至10:1)，得到黄色固体。该黄色固体随后经反相快速色谱提纯(Biotage，ODS，40.0g柱，uv254nm)，用甲醇/水(+0.5％NH4HCO3)洗脱，得到(1S,2S)-N-[8-氨基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-氟-环丙烷甲酰胺(12mg,20％产率)，其为白色固体。LCMS(ESI):RT(分钟)＝0.990，[M+H]+＝338.1，方法＝B；1H NMR(400MHz,CD3OD)δ9.30(s,1H),8.54(s,1H),8.44(d,J＝4.8Hz,1H),8.34(s,1H),7.40(d,J＝4.8Hz,1H),7.00(s,1H),4.98-4.80(m,1H),2.46(s,3H),2.19-2.16(m,1H),1.87-1.80(m,1H),1.26-1.21(m,1H)。
实施例8：
(1S,2S)-N-(8-氨基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氟环丙 烷甲酰胺(化合物7)
向密封管内添加(1S,2S)-N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氟-环丙烷甲酰胺(50mg,0.18mmol)、1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑(48mg,0.23mmol)、Xphos Pd G2(14mg,0.02mmol)、Xphos(17mg,0.04mmol)、乙酸钾(52mg,0.53mmol)、1,4-二噁烷(1mL)和水(0.20mL)。在100℃搅拌该混合物4小时。过滤并浓缩该反应混合物，得到黄色残余物，其随后经硅胶快速色谱提纯(二氯甲烷/甲醇，梯度＝20:1至10:1)，得到黄色固体。该黄色固体随后经反相快速色谱提纯(Biotage，40.0g柱，ODS，uv 254nm)，用甲醇/水(+0.5％NH4HCO3)洗脱，得到(1S,2S)-N-[8-氨基-6-(1-甲基吡唑-4-基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-氟-环丙烷甲酰胺(29mg,50％产率)，其为白色固体。LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.038，[M+H]+＝327.1，方法＝B；1H NMR(400MHz,CD3OD)δ9.16(s,1H),8.22(s,1H),8.14(s,1H),8.03(s,1H),7.12(s,1H),4.99-4.79(m,1H),3.96(s,3H),2.18-2.15(m,1H),1.88-1.78(m,1H),1.27-1.19(m,1H)。
实施例9：
反式-N-(8-氨基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氟环丙烷 甲酰胺(化合物8)
Figure BDA0002289356600002472
向密封管内添加(±)-反式-N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氟-环丙烷甲酰胺(75mg,0.27mmol)、1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑(72mg,0.35mmol)、Xphos Pd G2(21mg,0.03mmol)、Xphos(25mg,0.05mmol)、乙酸钾(79mg,0.80mmol)、1,4-二噁烷(1mL)和水(0.20mL)。在100℃搅拌该混合物4小时。过滤并浓缩该反应混合物，得到黄色残余物，其随后经硅胶快速色谱提纯(二氯甲烷/甲醇，梯度＝20:1至10:1)，得到黄色固体。该黄色固体用反相快速色谱提纯(Biotage，40.0g柱，ODS，uv254nm)，用甲醇/水(+0.5％NH4HCO3)洗脱，得到反式-N-[8-氨基-6-(1-甲基吡唑-4-基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-氟-环丙烷甲酰胺(32mg,37％产率)，其为白色固体。LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.063，[M+H]+＝327.1，方法＝B；1H NMR(400MHz,CD3OD)δ9.16(s,1H),8.17(s,1H),8.13(s,1H),8.02(s,1H),7.10(s,1H),4.97-4.79(m,1H),3.96(s,3H),2.49-2.40(m,1H),1.59-1.50(m,1H),1.49-1.38(m,1H)。
实施例10：
1-(8-氨基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-3-甲基脲(化合物 9)
Figure BDA0002289356600002481
步骤1：1-(6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-3-甲基脲
Figure BDA0002289356600002482
向6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-胺盐酸盐(200mg,0.8mmol)的THF(15mL)溶液中添加Et3N(403mg,3.99mmol)和三光气(308mg,1.04mmol)。在20℃搅拌该混合物0.5小时。添加甲胺盐酸盐(108mg,1.6mmol)。在20℃继续搅拌所得混合物1小时。该反应混合物经水(10mL)淬灭，用二氯甲烷(80mL x 3)萃取。合并浓缩该有机萃取物，并用硅胶快速色谱提纯(石油醚/乙酸乙酯＝5:1至1:2)，得到1-(6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-3-甲基-脲(120mg,55％产率)，其为淡黄色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝271.1。
步骤2：1-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-3-甲基脲
Figure BDA0002289356600002491
向密封管内添加1-(6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-3-甲基-脲(120mg,0.44mmol)、NH4OH(0.5mL)和1,4-二噁烷(1.5mL)。在80℃，搅拌该混合物6小时。将该反应混合物浓缩并用硅胶快速色谱提纯(石油醚/乙酸乙酯＝3:1至1:5)，得到1-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-3-甲基-脲(80mg,62％产率)，其为白色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝252.2。
步骤3：1-(8-氨基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-3-甲基脲
Figure BDA0002289356600002492
向密封管内添加1-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-3-甲基-脲(50mg,0.20mmol)、1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑(54mg,0.26mmol)、Xphos Pd G2(16mg,0.02mmol)、Xphos(19mg,0.04mmol)、乙酸钾(58mg,0.60mmol)、1,4-二噁烷(1mL)和水(0.20mL)。在100℃搅拌该混合物4小时。过滤并浓缩该反应混合物，得到黄色残余物，其经硅胶快速色谱提纯(二氯甲烷/甲醇，20:1至8:1)，得到黄色固体。该黄色固体经反相快速色谱提纯(Biotage，50g柱，ODS，uv 254nm)，用甲醇/水(+0.5％NH4HCO3)洗脱，得到1-[8-氨基-6-(1-甲基吡唑-4-基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-3-甲基-脲(19mg,32％产率)，其为淡黄色固体。LCMS(ESI):RT(分钟)＝0.934，[M+H]+＝298.2，方法＝B；1H NMR(400MHz,CD3OD)δ9.10(s,1H),8.12(s,1H),8.00(s,1H),7.32(s,1H),7.02(s,1H),3.96(s,3H),2.90(s,3H)。
实施例11：
(1S,2S)-N-(8-氨基-6-(4-甲氧基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氟环丙烷 甲酰胺(化合物10)
Figure BDA0002289356600002501
步骤1：4-甲氧基吡啶-3-基硼酸
Figure BDA0002289356600002502
向密封管内添加3-溴-4-甲氧基-吡啶(350mg,1.86mmol)、双(频哪醇合)二硼(709mg,2.79mmol)、Pd(dppf)Cl2(136mg,0.19mmol)、乙酸钾(548mg,5.58mmol)和1,4-二噁烷(10mL)。在微波反应器中，将该混合物在130℃加热2小时。该反应混合物直接用于下一步骤中。LCMS(ESI):[M+H]+＝154.2。
步骤2：(1S,2S)-N-(8-氨基-6-(4-甲氧基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氟 环丙烷甲酰胺
Figure BDA0002289356600002503
向密封管内添加(1S,2S)-N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氟-环丙烷甲酰胺(50mg,0.18mmol)、粗的4-甲氧基吡啶-3-基硼酸(35mg,0.23mmol)、Xphos Pd G2(14mg,0.02mmol)、Xphos(17mg,0.04mmol)、乙酸钾(52mg,0.53mmol)、1,4-二噁烷(1.0mL)和水(0.20mL)。在95℃搅拌该混合物5小时。将该反应混合物过滤并在真空中浓缩，得到黄色残余物，其随后用硅胶快速色谱提纯(二氯甲烷/甲醇，20:1至10:1)，得到黄色固体。该黄色固体随后经反相快速色谱提纯(Biotage，40.0g柱，ODS，uv 254nm)，用甲醇/水(+0.5％NH4HCO3)洗脱，得到(1S,2S)-N-[8-氨基-6-(4-甲氧基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-氟-环丙烷甲酰胺(4mg,6.4％产率)，其为灰白色固体。LCMS(ESI):RT(分钟)＝0.790，[M+H]+＝354.1，方法＝B；1H NMR(CD3OD，400MHz)δ9.24(s,1H),8.78(s,1H),8.43(d,J＝5.6Hz,1H),7.35(s,1H),7.19(d,J＝4.2Hz,1H),4.97-4.77(m,1H),4.00(s,3H),2.17-2.15(m,1H),1.90-1.78(m,1H),1.28-1.18(m,1H)。
实施例12：
N-(8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2,2-二氟环丙烷甲酰胺 (化合物11)
Figure BDA0002289356600002511
向密封管内添加N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2,2-二氟-环丙烷甲酰胺(55mg,0.18mmol)、4-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡啶(52mg,0.24mmol)、XphosPdG2(14mg,0.02mmol)、Xphos(17mg,0.04mmol)、乙酸钾(54mg,0.55mmol)、1,4-二噁烷(1.0mL)和水(0.20mL)。在95℃搅拌该反应混合物4小时。过滤并在真空中浓缩该反应混合物，得到黄色残余物，其随后经硅胶快速色谱提纯(二氯甲烷/甲醇，20:1至10:1)，得到黄色固体。然后，该黄色固体经反相快速色谱提纯(Biotage，40.0g柱，ODS，uv 254nm)，用甲醇/水(+0.5％NH4HCO3)洗脱，得到N-[8-氨基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2,2-二氟-环丙烷甲酰胺(23mg,34％产率)，其为黄色固体。LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.074，[M+H]+＝356.1，方法＝B；1H NMR(400MHz,CD3OD)δ9.31(s,1H),8.55(s,1H),8.44(d,J＝5.2Hz,1H),8.34(s,1H),7.41(d,J＝5.2Hz,1H),7.01(s,1H),2.95-2.87(m,1H),2.47(s,3H),2.19-2.13(m,1H),1.93-1.86(m,1H)。
实施例13：
(1S,2S)-N-(8-氨基-6-(4-甲基嘧啶-5-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氟环丙烷甲 酰胺(化合物12)
Figure BDA0002289356600002512
步骤1：4-甲基嘧啶-5-基硼酸
Figure BDA0002289356600002521
向密封管内添加双(频哪醇合)二硼(220mg,0.87mmol)、5-溴-4-甲基-嘧啶(100mg,0.58mmol)、Pd(dppf)Cl2(42mg,0.06mmol)、乙酸钾(170mg,1.73mmol)和1,4-二噁烷(1.5mL)。在90℃搅拌该混合物2小时。LCMS表示该反应已完成。该反应混合物直接用于下一步骤中。LCMS(ESI):[M+H]+＝139.2。
步骤2：(1S,2S)-N-(8-氨基-6-(4-甲基嘧啶-5-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氟环 丙烷甲酰胺
向密封管内添加(1S,2S)-N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氟-环丙烷甲酰胺(70mg,0.25mmol)、(4-甲基嘧啶-5-基)硼酸(45mg,0.32mmol)(该反应混合物)、XphosPd G2(20mg,0.02mmol)、Xphos(24mg,0.05mmol)、乙酸钾(73mg,0.75mmol)、1,4-二噁烷(1.0mL)和水(0.20mL)。在95℃，搅拌该混合物2小时。过滤并在真空中浓缩该反应混合物，得到黄色残余物，其随后用硅胶快速色谱提纯(二氯甲烷/甲醇，20:1至10:1)，得到黄色固体。该固体经反相快速色谱提纯(Biotage，40.0g柱，硅胶，uv 254nm)，用甲醇/水洗脱，得到(1S,2S)-N-[8-氨基-6-(4-甲基嘧啶-5-基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-氟-环丙烷甲酰胺(32mg,35％产率)，其为白色固体。LCMS(ESI):RT(分钟)＝0.973，[M+H]+＝339.1，方法＝B；1H NMR(400MHz,CD3OD)δ9.31(s,1H),9.05(s,1H),8.80(s,1H),9.36(s,1H),7.09(s,1H),4.97-4.81(m,1H),2.63(s,3H),2.19-2.16(m,1H),1.87-1.80(m,1H),1.26-1.21(m,1H)。
实施例14：
(1S,2S)-N-(8-氨基-6-(4-乙基嘧啶-5-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氟环丙烷甲 酰胺(化合物13)
Figure BDA0002289356600002531
步骤1：4-乙基嘧啶-5-基硼酸
向密封管内添加双(频哪醇合)二硼(203mg,0.80mmol)、5-溴-4-乙基-嘧啶(100mg,0.53mmol)、Pd(dppf)Cl2(39mg,0.05mmol)、乙酸钾(157mg,1.6mmol)和1,4-二噁烷(1.5mL)。在100℃搅拌该混合物2小时。LCMS表示该反应已完成。将该反应混合物过滤并直接用于下一步骤中。LCMS(ESI):[M+H]+＝153.1。
步骤2：(1S,2S)-N-(8-氨基-6-(4-乙基嘧啶-5-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氟环 丙烷甲酰胺
Figure BDA0002289356600002533
向密封管内添加(1S,2S)-N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氟-环丙烷甲酰胺(60mg,0.21mmol)、粗的(4-乙基嘧啶-5-基)硼酸(49mg,0.32mmol)、Xphos Pd G2(17mg,0.02mmol)、Xphos(20mg,0.04mmol)、乙酸钾(63mg,0.64mmol)、1,4-二噁烷(1.0mL)和水(0.20mL)。在100℃搅拌该混合物4小时。过滤并在真空中浓缩该反应混合物，得到黄色残余物，其随后用硅胶快速色谱提纯(二氯甲烷/甲醇，20:1至10:1)，得到黄色固体。该黄色固体随后用反相快速色谱提纯(Biotage，40.0g柱，ODS，uv 254nm)，用甲醇/水(+0.5％NH4HCO3)洗脱，得到(1S,2S)-N-[8-氨基-6-(4-乙基嘧啶-5-基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-氟-环丙烷甲酰胺(22mg,27％产率)，其为白色固体。LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.065，[M+H]+＝353.1，方法＝B；1H NMR(400MHz,CD3OD)δ9.31(s,1H),9.09(s,1H),8.76(s,1H),8.35(s,1H),7.05(s,1H),4.98-4.81(m,1H),2.98(q,J＝7.6Hz,2H),2.19-2.16(m,1H),1.87-1.80(m,1H),1.29-1.21(m,4H)。
实施例15：
(1S,2S)-N-(8-氨基-6-(4-(二氟甲基)吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氟环 丙烷甲酰胺(化合物14)
Figure BDA0002289356600002541
步骤1：3-溴-4-(二氟甲基)吡啶
在0℃，向3-溴吡啶-4-甲醛(200mg,1.08mmol)在二氯甲烷(10mL)的溶液中逐滴添加DAST(693mg,4.3mmol)。在0℃，搅拌该混合物2小时。该反应混合物经NaHCO3饱和水溶液(5mL)淬灭，并用二氯甲烷(50mL x 3)萃取。合并浓缩该有机萃取物，并用硅胶快速色谱提纯(石油醚/乙酸乙酯＝10:1至3:1)，得到3-溴-4-(二氟甲基)吡啶(150mg,67％产率)，其为无色油状物。LCMS(ESI):[M+H]+＝208.2。
步骤2：4-(二氟甲基)吡啶-3-基硼酸。
向密封管内添加双(频哪醇合)二硼(183mg,0.72mmol)、3-溴-4-(二氟甲基)吡啶(100mg,0.48mmol)、乙酸钾(141mg,1.44mmol)、Pd(dppf)Cl2(35mg,0.05mmol)和1,4-二噁烷(1.5mL)。在100℃搅拌该混合物2小时。将该反应混合物过滤，且该滤液直接用于下一步骤中。LCMS(ESI):[M+H]+＝174.1。
步骤3：(1S,2S)-N-(8-氨基-6-(4-(二氟甲基)吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)- 2-氟环丙烷甲酰胺
Figure BDA0002289356600002544
向密封管内添加(1S,2S)-N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氟-环丙烷甲酰胺(50mg,0.18mmol)、粗的[4-(二氟甲基)-3-吡啶基]硼酸(46mg,0.27mmol)、Xphos PdG2(14mg,0.02mmol)、Xphos(17mg,0.04mmol)、乙酸钾(52mg,0.53mmol)、1,4-二噁烷(1.0mL)和水(0.20mL)。在100℃搅拌该混合物4小时。将在真空中浓缩该反应混合物，并用硅胶快速色谱提纯(二氯甲烷/甲醇，20:1至10:1)，得到黄色固体。该黄色固体随后用反相快速色谱提纯(Biotage，40.0g柱，ODS，uv 254nm)，用甲醇/水(+0.5％NH4HCO3)洗脱，得到(1S,2S)-N-[8-氨基-6-[4-(二氟甲基)-3-吡啶基]-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-氟-环丙烷甲酰胺(18mg,26％产率)，其为白色固体。LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.142，[M+H]+＝374.1，方法＝B；1H NMR(400MHz,CD3OD)δ9.30(s,1H),8.89(s,1H),8.77(d,J＝5.2Hz,1H),8.37(s,1H),7.79(d,J＝5.2Hz,1H),7.54(t,J＝14.8Hz,1H),7.15(s,1H),5.00-4.79(m,1H),2.19-2.14(m,1H),1.88-1.78(m,1H),1.28-1.21(m,1H)。
实施例16：
(1S,2S)-N-(8-氨基-6-(4-氰基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氟环丙烷甲 酰胺(化合物15)
Figure BDA0002289356600002551
向密封管内添加(1S,2S)-N-(8-氨基-6-氯-1,7-二氮杂萘-3-基)-2-氟-环丙烷甲酰胺(60mg,0.21mmol)、3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡啶-4-腈(59mg,0.26mmol)、Xphos Pd G2(17mg,0.02mmol)、乙酸钾(63mg,0.64mmol)、Xphos(20mg,0.04mmol)、1,4-二噁烷(3.0mL)和水(0.50mL)。在100℃搅拌该混合物2小时。将该反应混合物浓缩并用硅胶快速色谱提纯(二氯甲烷/甲醇，20:1至10:1)，得到(1S,2S)-N-(8-氨基-6-(4-氰基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氟环丙烷甲酰胺(8mg,10.7％产率)，其为黄色固体。LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.603，[M+H]+＝349.1，方法＝C；1H NMR(400MHz,CD3OD)δ9.32(s,1H),9.18(s,1H),8.80(d,J＝5.2Hz,1H),8.40(s,1H),7.87(d,J＝4.8Hz,1H),7.40(s,1H),5.00-4.79(m,1H),2.21-2.15(m,1H),1.89-1.79(m,1H),1.30-1.19(m,1H)。
实施例17：
(±)-顺式-N-(8-氨基-6-(6-氨基-4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2- 氟环丙烷甲酰胺(化合物16)
步骤1：5-溴-4-甲基吡啶-2-基氨基甲酸叔丁基酯
Figure BDA0002289356600002562
向5-溴-4-甲基-2-吡啶胺(2.0g,10.69mmol)的二氯甲烷(100mL)溶液中添加Boc2O(2.8g,12.83mmol)和DMAP(3.26g,26.73mmol)。在20℃搅拌该混合物16小时。将在真空中浓缩该反应混合物，且该残余物经硅胶快速色谱提纯(石油醚/乙酸乙酯，20:1至5:1)，得到N-(5-溴-4-甲基-2-吡啶基)氨基甲酸叔丁基酯(1.6g,47％产率)，其为白色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝289.1。
步骤2：4-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡啶-2-基 氨基甲酸叔丁基酯
Figure BDA0002289356600002563
向密封管内添加N-(5-溴-4-甲基-2-吡啶基)氨基甲酸叔丁基酯(1.0g,3.48mmol)、双(频哪醇合)二硼(1.06g,4.18mmol)、Pd(dppf)Cl2(254mg,0.35mmol)、乙酸钾(682mg,6.97mmol)和1,4-二噁烷(10mL)。在100℃搅拌该混合物2小时。将该反应混合物浓缩并用硅胶快速色谱提纯(石油醚/乙酸乙酯，20:1至5:1)，得到N-[4-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁基酯(800mg,52％产率)，其为白色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝335.2。
步骤3：(±)-5-(1-氨基-6-(顺式-2-氟环丙烷甲酰氨基)-2,7-二氮杂萘-3-基)- 4-甲基吡啶-2-基氨基甲酸叔丁基酯
Figure BDA0002289356600002571
向密封管内添加N-[4-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁基酯(200mg,0.60mmol)、Pd(PPh3)4(69mg,0.06mmol)、(±)-顺式-N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氟-环丙烷甲酰胺(184mg,0.66mmol)、K3PO4(117mg,1.2mmol)、水(0.2mL)和1,4-二噁烷(2mL)。在100℃搅拌该混合物4小时。将该反应混合物浓缩，并用硅胶快速色谱提纯(二氯甲烷/甲醇，50:1至10:1)，得到(±)-N-[5-[1-氨基-6-[[2-氟环丙烷羰基]氨基]-2,7-二氮杂萘-3-基]-4-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁基酯(151mg,42％产率)，其为黄色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝453.0。
步骤4：(±)-顺式-N-(8-氨基-6-(6-氨基-4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3- 基)-2-氟环丙烷甲酰胺
Figure BDA0002289356600002572
向(±)-N-[5-[1-氨基-6-[[顺式-2-氟环丙烷羰基]氨基]-2,7-二氮杂萘-3-基]-4-甲基-2-吡啶基]氨基甲酸叔丁基酯(150mg,0.33mmol)的二氯甲烷(5mL)溶液中添加TFA(2.0mL,0.33mmol)。在20℃搅拌该混合物3小时。将在真空中浓缩该反应混合物，且通过添加NH3溶液(7M在甲醇中)将该残余物调至pH 8.0。在真空中浓缩所得混合物，且该残余物经硅胶快速色谱提纯(二氯甲烷/甲醇，20:1至10:1)，得到黄色固体，其随后经反相快速色谱提纯(Biotage，40.0g柱，ODS，uv 254nm)，用甲醇/水(+0.5％NH4HCO3)洗脱，得到顺式-N-[8-氨基-6-(6-氨基-4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-氟-环丙烷甲酰胺(60mg,49％产率)，其为白色固体。LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.408，[M+H]+＝353.2，方法＝G；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.94(s,1H),9.31(s,1H),8.18(s,1H),8.02(s,1H),7.17(s,2H),6.84(s,1H),6.31(s,1H),5.96(s,2H),5.03-4.86(m,1H),2.30(s,3H),2.28-2.24(m,1H),1.70-1.63(m,1H),1.21-1.14(m,1H)。
实施例18：
(1S,2S)-N-(8-氨基-6-(5-氟-4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氟环 丙烷甲酰胺(化合物17)
在100℃、在N2中，将(1S,2S)-N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氟-环丙烷甲酰胺(184mg,0.66mmol)、3-氟-4-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡啶(120mg,0.51mmol)、Xphos Pd G2(40mg,0.05mmol)、X-phos(48mg,0.1mmol)和乙酰氧基钾(149mg,1.52mmol)在1,4-二噁烷(5mL)和水(0.5mL)中的混合物搅拌8小时。浓缩该混合物，且该残余物用反相快速色谱提纯(C18胶，0-30％乙腈在水中，有0.1％甲酸)，得到该(1S,2S)-N-[8-氨基-6-(5-氟-4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-氟-环丙烷甲酰胺(42mg,23％产率)，其为黄色固体。LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.099，[M+H]+＝356.1，方法＝B；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.05(s,1H),8.52(s,1H),8.48(s,1H),8.27(s,1H),8.15(s,1H),7.40(s,2H),7.03(s,1H),5.09-4.83(m,1H),4.35(d,J＝2.0Hz,3H),2.32-2.21(m,1H),1.75-1.62(m,1H),1.25-1.14(m,1H)。
实施例19：
(1S,2S)-N-(8-氨基-6-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氟环丙 烷甲酰胺(化合物18)
Figure BDA0002289356600002582
在100℃、在N2中，将(1S,2S)-N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氟-环丙烷甲酰胺(150mg,0.53mmol)、1-甲基-1H-吡唑-5-硼酸频哪醇酯(166mg,0.8mmol)、乙酸钾(157mg,1.6mmol)、X-phos(51mg,0.11mmol)和XPhos PdG2(42mg,0.05mmol)在1,4-二噁烷(5mL)和水(0.5mL)的混合物搅拌4小时。浓缩该混合物，且该残余物经反相制备型HPLC提纯(C-18)，用0-33％乙腈/水(含有0.1％甲酸)洗脱，得到所需产物(1S,2S)-N-[8-氨基-6-(2-甲基吡唑-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-氟-环丙烷甲酰胺(27mg,15％产率)，其为黄色固体。LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.055，[M+H]+＝327.1，方法＝B；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.02(s,1H),8.24(s,1H),8.15(s,1H),7.45(d,J＝2.0Hz,1H),7.40(s,2H),7.21(s,1H),6.73(d,J＝2.0Hz,1H),5.07-4.84(m,1H),4.19(s,3H),2.32-2.21(m,1H),1.75-1.62(m,1H),1.25-1.14(m,1H)。
实施例20：
(±)-顺式-N-(8-氨基-6-(6-甲基-1H-苯并[d]咪唑-5-基)-2,7-二氮杂萘-3- 基)-2-氟环丙烷甲酰胺(化合物19)
将顺式-N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氟-环丙烷甲酰胺(50mg,0.18mmol)、6-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯并咪唑-1-甲酸叔丁基酯(70mg,0.20mmol)、Pd(dppf)Cl2(13mg,0.02mmol)和K2CO3(73mg,0.53mmol)在1,4-二噁烷(6mL)和水(1mL)中的混合物加热至110℃16小时。将该反应混合物浓缩。该残余物用制备型TLC提纯(正相硅胶，二氯甲烷/甲醇，10/1)，得到黄色油状物，其经制备型HPLC进一步提纯(Column Xbridge 21.2*250mm c18，10μm流动相A：水(10mmol/LNH4HCO3)B：乙腈)，得到(±)--N-[8-氨基-6-(6-甲基-1H-苯并咪唑-5-基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-氟-环丙烷甲酰胺(17mg,25％产率)，其为白色固体。LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.269，[M+H]+＝377.1，方法＝A；1H NMR(400MHz,CD3OD)δ9.29(s,1H),8.32(s,1H),8.18(s,1H),7.66(s,1H),7.53(s,1H),6.95(s,1H),4.95-4.84(m,1H),2.45(s,3H),2.22-2.14(m,1H),1.88-1.78(m,1H),1.26-1.18(m,1H)。
实施例21：
N-[8-氨基-6-(4-乙基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]环丁烷甲酰胺(化合物 20)
Figure BDA0002289356600002601
步骤1：N-[8-[双[(4-甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-(4-乙基-3-吡啶基)-2,7-二氮 杂萘-3-基]环丁烷甲酰胺
Figure BDA0002289356600002602
在0℃，将环丁烷碳酰氯(60mg,0.51mmol)的二氯甲烷(0.3mL)溶液逐滴添加至3-(4-乙基-3-吡啶基)-N1,N1-双[(4-甲氧基苯基)甲基]-2,7-二氮杂萘-1,6-二胺(300mg,0.59mmol)、三乙胺(200.0mg,1.98mmol)的二氯甲烷(5mL)溶液中，并在0℃搅拌1小时。将该反应混合物蒸发，得到残余物，其经硅胶色谱提纯(石油醚/乙酸乙酯＝1:1至1:2)，得到N-[8-[双[(4-甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-(4-乙基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]环丁烷甲酰胺(90mg,25％产率)，其为棕色固体。LCMS(ESI)[M+H]+＝588.3。
步骤2：N-[8-氨基-6-(4-乙基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]环丁烷甲酰胺
Figure BDA0002289356600002603
在25℃，将N-[8-[双[(4-甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-(4-乙基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]环丁烷甲酰胺(90mg,0.15mmol)在TFA(3mL)中的混合物搅拌1小时，并在80℃继续搅拌2小时。将该反应混合物蒸发。将该残余物悬浮在甲醇中(1mL)，并添加7N NH3-甲醇直至pH＝10-11(棕色悬浮物)。通过过滤收集该固体，且该粗产物经反相快速色谱提纯(C18，甲醇/水至甲酸/甲醇/水)，得到N-[8-氨基-6-(4-乙基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]环丁烷甲酰胺的甲酸盐(21mg,35％产率)，其为棕色固体。LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.752，[M+H]+＝348.2，方法＝C；1H NMR(400MHz,CD3OD)δ9.30(s,1H),8.51-8.49(m,2H),8.37(s,1H),8.30(brs，1H),7.46(d,J＝5.2Hz,1H),7.00(s,1H),3.45-3.41(m,1H),2.85(q,J＝7.6Hz,2H),2.43-2.36(m,2H),2.31-2.23(m,2H),2.12-2.05(m,1H),1.98-1.93(m,1H),1.20(t,J＝7.6Hz,3H)。
实施例22：
(±)-顺式-N-(8-氨基-6-(1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-4-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)- 2-氰基环丙烷甲酰胺(化合物21)
Figure BDA0002289356600002611
步骤1：1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-4-基硼酸
Figure BDA0002289356600002612
在120℃下、在氩气中，将4-溴-1H-吡咯并[2,3-c]吡啶(500mg,2.54mmol)、双(频哪醇合)二硼(6.4g,25.2mmol)、PdCl2dppf(371mg,0.51mmol)和乙酸钾(746mg,7.61mmol)在1,4-二噁烷(20mL)中的混合物加热16小时。将该反应过滤并浓缩至干燥。该残余物溶于乙酸乙酯(10mL)中并用NaOH调节至pH7-8。该水层pH用浓HCl调节至3-4，添加乙酸乙酯(20mL)。分离该水层，并浓缩至干燥。该残余物溶于乙酸乙酯:乙醇(1:1)并过滤。所得液体浓缩至干燥。此提供所述标题化合物，其为棕色固体(350mg,85％产率)。LCMS(ESI)[M+H]+＝163.1。
步骤2：(±)-顺式-N-(8-氨基-6-(1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-4-基)-2,7-二氮杂萘- 3-基)-2-氰基环丙烷甲酰胺
Figure BDA0002289356600002613
在100℃、在氩气中，将1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-4-基硼酸(200mg,1.23mmol)，顺式-N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氰基-环丙烷甲酰胺(100mg,0.35mmol)、Pd(PPh3)4(40mg,0.03mmol)、K2CO3(144mg,1.04mmol)在1,4-二噁烷(4mL)和水(1mL)中的混合物加热3小时。将该反应浓缩至干燥。该残余物经硅胶色谱提纯(乙酸乙酯比乙酸乙酯/甲醇＝10:1)，得到所述标题化合物，其为黄色固体(14.7mg,11.4％产率)。LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.035，[M+H]+＝370.1，方法＝B。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ9.30(s,1H),8.91(s,1H),8.67(s,1H),8.03(s,1H),7.47(s,1H),7.32(s,1H),7.31(s,1H),2.56-2.54(m,1H),2.19-2.17(m,1H),1.72-1.70(m,1H),1.55-1.53(m,1H)。
实施例23：
(±)-顺式-N-(8-氨基-6-(3-甲基吡啶-4-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氟环丙烷 甲酰胺(化合物22)
步骤1：3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡啶
Figure BDA0002289356600002622
在110℃、在氩气中，将4-溴-3-甲基-吡啶(5.0g,29.07mmol)、双(频哪醇合)二硼(7.38g,29.06mmol)、PdCl2dppf(2.12g,2.9mmol)和乙酸钾(8.54g,87.14mmol)在1,4-二噁烷(100mL)中的混合物加热3小时。将该反应混合物过滤并浓缩至干燥。将残余物溶于水(40mL)中并用NaOH水溶液将pH调节至11-12。该液体用乙酸乙酯(100mL)洗涤。该水性层用HCl调节pH至5-6。然后，分离该有机物并干燥(NaSO4)，随后浓缩至干燥。该产物最终为棕色固体(4g,60％产率)。LCMS(ESI)[M+H]+＝220.2。
步骤2：(±)-顺式-N-(8-氨基-6-(3-甲基吡啶-4-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氟 环丙烷甲酰胺
Figure BDA0002289356600002631
在110℃、在氩气中，将3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡啶(100mg,0.46mmol)、(±)-顺式-N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氟-环丙烷甲酰胺(128mg,0.46mmol)、Xphos Pd G2(36mg,0.05mmol)、Xphos(22mg,0.05mmol)和乙酸钾(134mg,1.37mmol)在1,4-二噁烷(8mL)和水(2mL)中的混合物加热3小时。将该反应浓缩至干燥，且所得残余物经硅胶色谱提纯(石油醚/乙酸乙酯＝1:1)。提供所述标题化合物，其为白色固体(25.1mg,16％产率)。LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.059，[M+H]+＝338.1，方法＝B.1H NMR(400MHz,CD3OD)δ8.51(s,1H),8.47(s,1H),8.35(s,1H),8.21(s,1H),7.51(d,J＝4.8Hz,1H),7.03(s,1H),2.43(s,3H),4.99-4.97(m,0.5H),4.83-4.80(m,0.5H),2.19-2.16(m,1H),1.87-1.80(m,1H),1.28-1.21(m,1H)。
实施例24：
N-(8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)环丙烷甲酰胺(化合物 24)
Figure BDA0002289356600002632
在手套箱中，将N-(6-氯-8-(二苯基亚甲基氨基)-2,7-二氮杂萘-3-基)环丙烷甲酰胺(45mg,0.11mmol)、4-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡啶(34mg,0.16mmol)、Pd(PPh3)4(12mg,0.01mmol)和Cs2CO3(68mg,0.21mmol)在1,4-二噁烷(10mL)中的混合物加热至100℃18小时。将该反应混合物冷却至室温，并通过硅藻土过滤。然后浓缩该滤液并将所得残余物溶于THF(5mL)中。添加HCl的二噁烷溶液(4mL,4M，16mmol)并在25℃搅拌该反应混合物2小时。将该反应混合物浓缩。用乙酸乙酯稀释该残余物，用7NNH3的甲醇溶液调节至pH>7并浓缩。该残余物经二氯甲烷/甲醇(25/1)萃取，得到该粗产物。该粗产物经制备型HPLC提纯，得到所述产物N-(8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)环丙烷甲酰胺(12mg,30％产率)，其为白色固体。LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.580，[M+H]+＝320.1，方法＝F；1H NMR(400MHz,CD3OD)δ9.29(s,1H),8.56(s,1H),8.43(d,1H，J＝5.2Hz)，8.31(s,1H),7.39(d,1H，J＝5.2Hz)，6.98(s,1H),2.46(s,3H),1.92-2.00(m,1H),1.01-1.06(m,2H),0.92-0.97(m,2H)。
实施例25：
N-(8-氨基-6-(6-(羟基甲基)-4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)环丙烷甲 酰胺(化合物25)
Figure BDA0002289356600002641
步骤1：N-(8-(二苯基亚甲基氨基)-6-(6-(羟基甲基)-4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二 氮杂萘-3-基)环丙烷甲酰胺
在N2中，将N-[8-(二苯亚甲基氨基)-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基]环丙烷甲酰胺(78mg,0.18mmol)、[4-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-2-吡啶基]甲醇(200mg,0.80mmol)、X-phos(8.7mg,0.02mmol)、Xphos PdG2(14mg,0.02mmol)和乙酸钾(53mg,0.55mmol)在1,4-二噁烷(10mL)和水(1mL)中的混合物加热至100℃16小时。然后，将该反应混合物浓缩。该残余物用制备型TLC提纯(正相硅胶，二氯甲烷/甲醇＝25/1)，得到所述产物N-[8-(二苯亚甲基氨基)-6-[6-(羟基甲基)-4-甲基-3-吡啶基]-2,7-二氮杂萘-3基]环丙烷甲酰胺(30mg,23.3％产率)，其为黄色固体。LCMS(ESI)[M+H]+＝514.2。
步骤2：N-(8-氨基-6-(6-(羟基甲基)-4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)环 丙烷甲酰胺
在室温，将N-[8-(二苯亚甲基氨基)-6-[6-(羟基甲基)-4-甲基-3-吡啶基]-2,7-二氮杂萘-3-基]环丙烷甲酰胺(30mg,0.06mmol)的HCl/二噁烷(4mL,4M，16mmol)溶液搅拌2小时。将该反应混合物浓缩，通过添加7N NH3/甲醇将该残余物的pH调节至>7，然后浓缩。该残余物经反相制备型HPLC提纯，得到所述产物N-[8-氨基-6-[6-(羟基甲基)-4-甲基-3-吡啶基]-2,7-二氮杂萘-3-基]环丙烷甲酰胺(6mg,27.6％产率)，其为白色固体。LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.627，[M+H]+＝350.1，方法＝G；1H NMR(400MHz,CD3OD)δ9.30(s,1H),8.49(s,1H),8.30(s,1H),7.52(s,1H),6.99(s,1H),4.74(s,2H),2.48(s,3H),1.92-2.03(m,1H),1.01-1.04(m,2H),0.88-0.90(m,2H)。
实施例26：
N-(8-氨基-6-(4-乙基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)环丙烷甲酰胺(化合物 26)
Figure BDA0002289356600002652
步骤1：N-(8-(二苯基亚甲基氨基)-6-(4-乙基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基) 环丙烷甲酰胺
Figure BDA0002289356600002653
在手套箱中、在100℃，将N-[8-(二苯亚甲基氨基)-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基]环丙烷甲酰胺(200mg,0.47mmol)、4-乙基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡啶(655mg,2.81mmol)、Pd(PPh3)4(54mg,0.05mmol)和Cs2CO3(305mg,0.94mmol)在1,4-二噁烷(1mL)中的混合物加热18小时。用乙酸乙酯稀释该反应混合物，用水洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩，得到该粗产物，其被用于下一步骤中且无需提纯。LCMS(ESI)[M+H]+＝498.3。
步骤2：N-(8-氨基-6-(4-乙基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)环丙烷甲酰胺
在25℃，将N-[8-(二苯亚甲基氨基)-6-(4-乙基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]环丙烷甲酰胺(150mg,0.17mmol)的HCl/二噁烷(3.3mL,4M，13.2mmol)溶液搅拌2小时，然后浓缩。通过添加7N NH3/甲醇该残余物的pH调节至>7，然后浓缩。该残余物经反相制备型HPLC提纯，得到N-[8-氨基-6-(4-乙基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]环丙烷甲酰胺(10mg,18.1％产率)，其为白色固体。LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.623，[M+H]+＝334.2，方法＝G；1H NMR(400MHz,CD3OD)δ9.18(s,1H),8.39(s,1H),8.37(d,1H，J＝5.6Hz)，8.17(s,1H),7.33(d,1H，J＝5.6Hz)，6.81(s,1H),2.72(q,2H，J＝7.6Hz)，1.78-1.88(m,1H),1.07(t,3H，J＝7.6Hz)，0.87-0.95(m,2H),0.74-0.82(m,2H)。
实施例27：
N-[8-氨基-6-(1-甲基吡唑-4-基)-2,7-二氮杂萘-3-基]环丙烷甲酰胺(化合物 27)
Figure BDA0002289356600002662
步骤1：N-(8-(二苯基亚甲基氨基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2,7-二氮杂萘-3- 基)环丙烷甲酰胺
Figure BDA0002289356600002663
在手套箱中，将N-[8-(二苯亚甲基氨基)-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基]环丙烷甲酰胺(50mg,0.12mmol)、1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑(36mg,0.18mmol)、Pd(PPh3)4(14mg,0.01mmol)和Cs2CO3(76mg,0.23mmol)在1,4-二噁烷(5mL)中的混合物加热至100℃4小时。添加乙酸乙酯(50mL)，过滤并浓缩该混合物，得到N-(8-(二苯基亚甲基氨基)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)环丙烷甲酰胺(68mg,59％产率)，其为黄色油状物，其被用于下一步骤中且无需进一步提纯。LCMS(ESI)[M+H]+＝473.2。
步骤2：N-[8-氨基-6-(1-甲基吡唑-4-基)-2,7-二氮杂萘-3-基]环丙烷甲酰胺
向N-[8-(二苯亚甲基氨基)-6-(1-甲基吡唑-4-基)-2,7-二氮杂萘-3-基]环丙烷甲酰胺(68mg,0.10mmol)在THF(5mL)的溶液中添加HCl/1,4-二噁烷(1mL,4M，4mmol)。搅拌该混合物1小时。将该反应混合物浓缩，并经反相制备型HPLC提纯，得到N-[8-氨基-6-(1-甲基吡唑-4-基)-2,7-二氮杂萘-3-基]环丙烷甲酰胺(18mg,59％产率)，其为白色固体。LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.646，[M+H]+＝309.1，方法＝G；1H NMR(400MHz,CD3OD-d4)δ9.15(s,1H),8.19(s,1H),8.14(s,1H),8.02(s,1H),7.11(s,1H),3.96(s,3H),1.98-1.92(m,1H),1.05-1.02(m,2H),0.96-0.91(m,2H)。
实施例28：
N-[8-氨基-6-(4-乙基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-3-氰基-丙酰胺(化合物 28)
Figure BDA0002289356600002672
步骤1：N-[8-[双[(4-甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-(4-乙基-3-吡啶基)-2,7-二氮 杂萘-3-基]-3-氰基-丙酰胺
Figure BDA0002289356600002681
在0℃，向3-氰基丙酸(64mg,0.64mmol)和DMF(1滴)的二氯甲烷(6mL)溶液中添加草酰氯(125mg,0.98mmol)，然后在室温搅拌1小时。浓缩该混合物并溶于二氯甲烷(3mL)。然后在0℃，将该混合物添加至3-(4-乙基-3-吡啶基)-N1,N1-双[(4-甲氧基苯基)甲基]-2,7-二氮杂萘-1,6-二胺(216mg,0.43mmol)和Et3N(216mg,2.14mmol)的二氯甲烷(5mL)溶液中，并在室温搅拌1小时。浓缩该混合物且用柱色谱提纯，用乙酸乙酯/己烷(1:1)洗脱，得到N-[8-[双[(4-甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-(4-乙基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-3-氰基-丙酰胺(160mg,29％产率)，其为黄色固体。LCMS(ESI)[M+H]+＝587.3。
步骤2：N-[8-氨基-6-(4-乙基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-3-氰基-丙酰胺 和N'-[8-氨基-6-(4-乙基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]丁烷二酰胺
Figure BDA0002289356600002682
在80℃，将N-[8-[双[(4-甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-(4-乙基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-3-氰基-丙酰胺(160mg,0.13mmol)在TFA(10mL)中的混合物搅拌1小时。将该反应混合物浓缩并用NH4OH中和(37％产率)至pH＝7-8。浓缩该混合物，且用制备型反相HPLC提纯(C-18)，用乙腈/水+0.05％NH4HCO3洗脱，得到N-[8-氨基-6-(4-乙基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-3-氰基-丙酰胺(24mg,55％产率)。LCMS(ESI)RT(分钟)＝1.57，[M+H]+＝347.2，方法＝F。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.85(s,1H),9.39(s,1H),8.51(s,1H),8.49(d,J＝5.2Hz,1H),8.26(s,1H),7.36(s,1H),7.34(s,2H),6.98(s,1H),2.86-2.74(m,6H),1.10(t,J＝7.6Hz,3H)。
实施例29：
N'-[8-氨基-6-(4-乙基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]丁烷二酰胺(化合物29)
Figure BDA0002289356600002691
在80℃，将N-[8-[双[(4-甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-(4-乙基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-3-氰基-丙酰胺(160mg,0.13mmol)在TFA(10mL)中的混合物搅拌1小时。将该反应混合物浓缩并用NH4OH中和(37％产率)至pH7-8.浓缩该混合物且用制备型反相HPLC提纯(C-18)，用乙腈/水+0.05％NH4HCO3洗脱，得到N'-[8-氨基-6-(4-乙基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]丁烷二酰胺(11mg,22％产率)，其为白色固体。LCMS(ESI)RT(分钟)＝1.372，[M+H]+＝365.2，方法＝G。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.65(s,1H),9.36(s,1H),8.50(s,1H),8.48(d,J＝4.8Hz,1H),8.23(s,1H),7.35(s,1H),7.34(d,J＝5.2Hz,1H),7.31(s,2H),6.93(s,1H),6.79(s,1H),2.78(q,J＝7.6Hz,2H),2.65(t,J＝7.0Hz,2H),2.41(t,J＝7.0Hz,2H),1.10(t,J＝7.6Hz,3H)。
实施例30：
1-[8-氨基-6-(4-乙基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-3-(噻唑-5-基甲基)脲 (化合物30)
Figure BDA0002289356600002692
步骤1：1-[8-[双[(4-甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-(4-乙基-3-吡啶基)-2,7-二氮 杂萘-3-基]-3-(噻唑-5-基甲基)脲
Figure BDA0002289356600002701
向三光气(183mg,0.62mmol)的THF(8mL)溶液中添加THF(3mL)中的3-(4-乙基-3-吡啶基)-N1,N1-双[(4-甲氧基苯基)甲基]-2,7-二氮杂萘-1,6-二胺(260mg,0.31mmol)和Et3N(1.24g,12.34mmol)。在0℃，搅拌该混合物1小时。添加噻唑-5-基甲胺盐酸盐(930mg,6.17mmol)并温热至室温过夜。浓缩该混合物，并用硅胶色谱提纯，用二氯甲烷/甲醇(20:1)洗脱，得到1-[8-[双[(4-甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-(4-乙基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-3-(噻唑-5-基甲基)脲(35mg,15％产率)，其为黄色固体。LCMS(ESI)[M+H]+＝646.3。
步骤2：1-[8-氨基-6-(4-乙基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-3-(噻唑-5-基甲 基)脲
Figure BDA0002289356600002702
在80℃，将1-[8-[双[(4-甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-(4-乙基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-3-(噻唑-5-基甲基)脲(35mg,0.05mmol)在TFA(5mL)中的混合物搅拌3小时。浓缩该混合物并用NH4OH中和(纯度：37％产率)至pH7-8。该混合物经制备型反相HPLC提纯(C-18)，用乙腈/水+0.05％NH4HCO3洗脱，得到1-[8-氨基-6-(4-乙基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-3-(噻唑-5-基甲基)脲(13mg,59％产率)，其为黄色固体。LCMS(ESI)RT(分钟)＝1.56，[M+H]+＝406.1，方法＝C。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.41(s,1H),9.28(s,1H),8.99(d,J＝0.8Hz,1H),8.49(s,1H),8.48(d,J＝5.2Hz,1H),7.83(s,1H),7.82(s,1H),7.80(s,1H),7.34(d,J＝5.2Hz,1H),7.27(s,2H),6.87(s,1H),4.61(d,J＝6.0Hz,2H),2.79(q,J＝7.6Hz,2H),2.65(t,J＝7.6Hz,3H)。
实施例31：
1-[8-氨基-6-(4-乙基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-3-异丙基-脲(化合物 31)
Figure BDA0002289356600002711
步骤1：1-[8-[双[(4-甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-(4-乙基-3-吡啶基)-2,7-二氮 杂萘-3-基]-3-异丙基-脲
在110℃，将3-(4-乙基-3-吡啶基)-N1,N1-双[(4-甲氧基苯基)甲基]-2,7-二氮杂萘-1,6-二胺(150mg,0.15mmol)、异氰酸异丙基酯(114mg,1.34mmol)和DBU(113mg,0.74mmol)在1,4-二噁烷(8mL)中的混合物搅拌16小时。浓缩该混合物，并用反相制备型HPLC提纯(C-18)，用乙腈/水+0.05％NH4HCO3洗脱，得到1-[8-[双[(4-甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-(4-乙基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-3-异丙基-脲(50mg,43％产率)，其为黄色固体。LCMS(ESI)[M+H]+＝591.3。
步骤2：1-[8-氨基-6-(4-乙基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-3-异丙基-脲
Figure BDA0002289356600002713
在80℃，将1-[8-[双[(4-甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-(4-乙基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-3-异丙基-脲(50mg,0.08mmol)在TFA(8mL)中的混合物搅拌3小时。将该反应混合物浓缩并用NH4OH中和(37％产率)至pH7-8。浓缩该混合物且用制备型反相HPLC提纯(C-18)，用乙腈/水+0.05％NH4HCO3洗脱，得到1-[8-氨基-6-(4-乙基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-3-异丙基-脲(17mg,57％产率)，其为黄色固体。LCMS(ESI)RT(分钟)＝1.581，[M+H]+＝351.2，方法＝G。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.33(s,1H),9.11(s,1H),8.55(s,1H),8.54(d,J＝5.2Hz,1H),7.86(s,1H),8.39(d,J＝5.2Hz,1H),7.30(s,2H),7.16(d,J＝6.8Hz,1H),6.89(s,1H),3.91-3.83(m,1H),2.84(q,J＝7.6Hz,2H),1.20(d,J＝6.4Hz,6H),1.15(t,J＝7.6Hz,3H)。
实施例32：
N-[8-氨基-6-(4-乙基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-氰基-乙酰胺(化合物 32)
Figure BDA0002289356600002721
步骤1：2-氰基-N-(6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-基)乙酰胺
在0℃，向氰基乙酸(340mg,3.99mmol)和DMF(1滴)的二氯甲烷(20mL)溶液中添加草酰氯(0.34mL,3.99mmol)，并在室温搅拌2小时。在0℃，将该混合物添加6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-胺盐酸盐(500mg,2mmol)的吡啶(10mL)和二氯甲烷(20mL)溶液中。在0℃，搅拌该反应混合物1小时。浓缩该混合物，并用硅胶色谱提纯，用THF洗脱，得到2-氰基-N-(6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-基)乙酰胺(600mg,60％产率)，其为黄色固体。LCMS(ESI)[M+H]+＝281.0。
步骤2：N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氰基-乙酰胺
Figure BDA0002289356600002731
在110℃，将2-氰基-N-(6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-基)乙酰胺(600mg,1.19mmol)在0.5M NH3/二噁烷(40mL,20mmol)中的混合物搅拌24小时。浓缩该混合物并用制备型反相HPLC提纯(C18)，用乙腈/水+0.05％NH4HCO3洗脱，得到N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氰基-乙酰胺(130mg,32％产率)，其为黄色固体。LCMS(ESI)[M+H]+＝262.3。
步骤3：N-[8-氨基-6-(4-乙基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-氰基-乙酰胺
Figure BDA0002289356600002732
在100℃、在氩气中，将N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氰基-乙酰胺(100mg,0.38mmol)、4-乙基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡啶(216mg,0.76mmol)、Xphos Pd G2(45mg,0.06mmol)、乙酸钾(75mg,0.76mmol)和XPhos(55mg,0.11mmol)在1,4-二噁烷(10mL)和水(0.4mL)中的混合物搅拌8小时。浓缩该混合物并用制备型反相HPLC提纯(C-18)，用乙腈/水+0.05％NH4HCO3洗脱，得到N-[8-氨基-6-(4-乙基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-氰基-乙酰胺(5mg,4％产率)，其为黄色固体。LCMS(ESI)RT(分钟)＝1.568，[M+H]+＝333.1，方法＝C。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.02(s,1H),9.39(s,1H),8.51(s,1H),8.49(d,J＝5.2Hz,1H),8.19(s,1H),7.36(s,2H),7.35(s,1H),7.01(s,1H),4.04(s,2H),2.79(q,J＝7.6Hz,2H),1.10(t,J＝7.6Hz,3H)。
实施例33：
3-[8-氨基-6-(4-乙基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-1,1-二甲基-脲(化合物 33)
Figure BDA0002289356600002741
步骤1：3-[8-[双[(4-甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-(4-乙基-3-吡啶基)-2,7-二氮 杂萘-3-基]-1,1-二甲基-脲
Figure BDA0002289356600002742
向三光气(293mg,0.99mmol)的THF(6mL)溶液中添加在THF(10mL)中的3-(4-乙基-3-吡啶基)-N1,N1-双[(4-甲氧基苯基)甲基]-2,7-二氮杂萘-1,6-二胺(500mg,0.49mmol)和Et3N(10.0g,9.89mmol)。在0℃搅拌该混合物1小时。添加N,N-二甲胺(446mg,9.89mmol)。然后将该反应在室温搅拌2小时。浓缩该混合物，并用硅胶色谱提纯(乙酸乙酯/己烷，9:1)，得到3-[8-[双[(4-甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-(4-乙基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-1,1-二甲基-脲(42mg,13％产率)，其为黄色固体。LCMS(ESI)[M+H]+＝577.3。
步骤2：3-[8-氨基-6-(4-乙基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-1,1-二甲基-脲
在80℃，将3-[8-[双[(4-甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-(4-乙基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-1,1-二甲基-脲(42mg,0.07mmol)在TFA(8mL)中的混合物搅拌3小时浓缩该混合物并用NH4OH中和(37％产率)至pH7-8。浓缩该混合物，且用制备型反相HPLC提纯(C-18)，用乙腈/水+0.05％NH4HCO3洗脱，得到3-[8-氨基-6-(4-乙基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-1,1-二甲基-脲(15mg,57％产率)，其为黄色固体。LCMS(ESI)RT(分钟)＝1.567，[M+H]+＝337.1，方法＝C。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.33(s,1H),8.98(s,1H),8.49(s,1H),8.48(d,J＝4.8Hz,1H),7.96(s,1H),7.34(d,J＝4.8Hz,1H),7.25(s,2H),6.87(s,1H),2.98(s,6H),2.78(q,J＝7.6Hz,2H),1.10(t,J＝7.6Hz,3H)。
实施例34：
2-[[8-氨基-6-(4-乙基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]氨基甲酰基氨基]丙酰 胺(化合物34)
Figure BDA0002289356600002751
步骤1：2-[[8-[双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-(4-乙基-3-吡啶基)-2,7- 二氮杂萘-3-基]氨基甲酰基氨基]丙酰胺
Figure BDA0002289356600002752
向三光气(210mg,0.71mmol)在THF(6mL)的溶液中添加在THF(10mL)中的N1,N1-双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]-3-(4-乙基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-1,6-二胺(200mg,0.35mmol)和Et3N(714mg,7.07mmol)。在0℃搅拌该混合物1小时。添加2-氨基丙酰胺盐酸盐(881mg,7.07mmol)并在室温搅拌2小时。浓缩该混合物，并用硅胶色谱提纯，用乙酸乙酯洗脱，得到2-[[8-[双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-(4-乙基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]氨基甲酰基氨基]丙酰胺(57mg,18％产率)，其为黄色固体。LCMS(ESI)[M+H]+＝680.3。
步骤2：2-[[8-氨基-6-(4-乙基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]氨基甲酰基氨 基]丙酰胺
Figure BDA0002289356600002761
在26℃，将2-[[8-[双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-(4-乙基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]氨基甲酰基氨基]丙酰胺(57mg,0.06mmol)在TFA(5mL)中的混合物搅拌6小时。将该反应混合物浓缩并用NH4OH中和(37％产率)至pH7-8。浓缩该混合物且用制备型反相HPLC提纯(C-18)，用乙腈/水+0.05％NH4HCO3洗脱，得到2-[[8-氨基-6-(4-乙基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]氨基甲酰基氨基]丙酰胺(10mg,46％产率)，其为黄色固体。LCMS(ESI)RT(分钟)＝1.378，[M+H]+＝380.2，方法＝G。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.33(s,1H),9.28(s,1H),8.49(s,1H),8.48(d,J＝5.2Hz,1H),7.78(s,1H),7.58(s,1H),7.53(s,1H),7.30(d,J＝1.2Hz,1H),7.25(s,2H),7.06(s,1H),6.84(s,1H),4.29-4.22(m,1H),2.78(q,J＝7.6Hz,2H),1.28(d,J＝6.8Hz,3H),1.10(t,J＝7.6Hz,3H)。
实施例35：
N-(8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氰基-2-甲基丙酰胺 (化合物35)
Figure BDA0002289356600002762
步骤1：2-氰基-2-甲基丙酸
向小瓶中添加2-氰基-2-甲基丙酸乙基酯(1.0g,7.08mmol)、水(5mL)和KOH(795mg,14.1mmol)。在40℃搅拌该混合物2小时。将该反应混合物浓缩以除去甲醇，用1NHCl酸化至pH 5，并用乙酸乙酯(50ml x 2)萃取。用盐水洗涤该合并的有机层(10mL)，经Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩，得到2-氰基-2-甲基-丙酸(600mg,73％产率)，其为浅黄色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.59(br，1H),1.52(s,6H)。
步骤2：2-氰基-2-甲基丙酰氯
Figure BDA0002289356600002771
向小瓶中添加2-氰基-2-甲基-丙酸(600mg,5.3mmol)和二氯甲烷(20mL)。在0℃逐滴添加草酰氯(1mL,11.72mmol)。然后添加DMF(0.01mL)。在室温搅拌该混合物3小时。在真空中将该反应混合物浓缩，得到粗产物丙直接用于下一步骤中。
步骤3：2-氰基-N-(6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-甲基丙酰胺
向小瓶中添加6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-胺盐酸盐(200mg,0.80mmol)、2-氰基-2-甲基-丙酰氯(720mg,4.38mmol)和吡啶(5mL)。在20℃搅拌该混合物2小时。将该混合物倒入水(10mL)中并用1N HCl调节至pH＝6，经乙酸乙酯(80mL x 2)萃取，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩。该残余物经硅胶色谱提纯(石油醚/乙酸乙酯，10:1至3:1)，得到2-氰基-N-(6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-甲基-丙酰胺(230mg,93％产率)，其为浅黄色固体。LCMS(ESI)[M+H]+＝309.1。
步骤4：N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氰基-2-甲基丙酰胺
Figure BDA0002289356600002773
向微波管中添加2-氰基-N-(6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-甲基-丙酰胺(130mg,0.42mmol)和NH3(0.5N在二噁烷中，15mL,7.5mmol)。在80℃，搅拌该混合物40小时。然后在真空中浓缩该混合物，并用硅胶色谱提纯(石油醚/乙酸乙酯，1:1至0:100)，得到N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氰基-2-甲基-丙酰胺(86mg,70％产率)，其为浅黄色固体。LCMS(ESI)[M+H]+＝290.1。
步骤5：N-(8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氰基-2-甲基 丙酰胺
Figure BDA0002289356600002781
向小瓶中添加N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氰基-2-甲基-丙酰胺(86mg,0.3mmol)、4-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡啶(84mg,0.39mmol)、Xphos Pd G2(35mg,0.04mmol)、X-phos(28mg,0.06mmol)、乙酸钾(87mg,0.89mmol)、水(0.5mL)和1,4-二噁烷(20mL)。通过用氮气鼓泡，将该反应混合物脱气，然后在100℃搅拌6小时。将该反应混合物浓缩，并用硅胶色谱提纯(二氯甲烷/甲醇，20:1至10:1)，得到N-[8-氨基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-氰基-2-甲基-丙酰胺(73mg,71％产率)，其为黄色固体。LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.041，[M+H]+＝347.1，方法＝B；1H NMR(400MHz,CD3OD)δ9.30(s,1H),8.53,(s,1H),8.41(d,J＝5.2Hz,1H),8.09(s,1H),7.37(d,J＝5.2Hz,1H),7.00(s,1H),2.44(s,3H),1.74(s,6H)。
实施例36：
N-(8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-甲氧基-2-甲基丙酰 胺(化合物36)
Figure BDA0002289356600002782
步骤1：2-甲氧基-2-甲基丙酸
Figure BDA0002289356600002783
向小瓶中添加2-甲氧基-2-甲基-丙酸甲基酯(3.6g,27.24mmol)、甲醇(5mL)、水(3mL)和NaOH(1.28g,31.97mmol)。在40℃搅拌该混合物2小时，并在真空中浓缩以除去甲醇。随后该混合物用2N HCl酸化至pH 4-5，经乙酸乙酯(100ml x 2)萃取，用盐水洗涤(30mL)，经Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩，得到2-甲氧基-2-甲基-丙酸(2.5g,77％产率)，其为浅黄色油状物。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ3.35(s,3H),1.47(s,6H)。
步骤2：2-甲氧基-2-甲基丙酰氯
Figure BDA0002289356600002791
向小瓶中添加2-甲氧基-2-甲基-丙酸(300mg,2.54mmol)和二氯甲烷(10mL)。然后，将该混合物冷却至0℃并逐滴添加草酰氯(0.5mL,5.61mmol)。然后添加DMF(0.01mL,0.07mmol)。在40℃搅拌该混合物1小时。在真空中，将该反应混合物浓缩得到粗产物，其被直接用于下一步骤中。
步骤3：N-(8-(双(4-甲氧基苄基)氨基)-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3- 基)-2-甲氧基-2-甲基丙酰胺
Figure BDA0002289356600002792
向小瓶中添加N1,N1-双[(4-甲氧基苯基)甲基]-3-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-1,6-二胺(70mg,0.14mmol)、2-甲氧基-2-甲基-丙酰氯(300mg,2.2mmol)和吡啶(5mL)。在20℃搅拌该混合物2小时，然后浓缩。该残余物经硅胶色谱提纯(石油醚/乙酸乙酯，10:1至3:1)，得到N-[8-[双[(4-甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-甲氧基-2-甲基-丙酰胺(300mg,71％产率)，其为黄色固体。LCMS(ESI)[M+H]+＝592.1。
步骤4：N-(8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-甲氧基-2-甲 基丙酰胺
Figure BDA0002289356600002801
向小瓶中添加N-[8-[双[(4-甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-甲氧基-2-甲基-丙酰胺(300mg,0.10mmol)和TFA(5mL)。在80℃，搅拌该混合物2小时。然后浓缩该混合物，并添加NH3(7N在甲醇中，5mL)。然后浓缩该混合物，且该残余物经硅胶色谱提纯(二氯甲烷/甲醇，10:1)，得到N-[8-氨基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-甲氧基-2-甲基-丙酰胺(26mg,73％产率)，其为浅黄色固体。LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.071，[M+H]+＝352.1，方法＝B；1H NMR(400MHz,CD3OD)δ9.30(s,1H),8.54(s,1H),8.43(d,J＝5.6Hz,1H),8.37(s,1H),7.28(d,J＝5.6Hz,1H),6.99(s,1H),3.41(s,3H),2.45(s,3H),1.49(s,6H)。
实施例37：
N-(8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)异丁酰胺(化合物37)
Figure BDA0002289356600002802
步骤1：N-(6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-基)异丁酰胺
Figure BDA0002289356600002803
向小瓶中添加6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-胺盐酸盐(310.0mg,1.24mmol)、异丁酰氯(0.2mL,1.9mmol)和吡啶(5mL)。在20℃搅拌该混合物2小时。然后将该混合物倒入水(10mL)中，并用1N HCl调节pH至6。该混合物经二氯甲烷(50ml x 2)萃取，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩。该残余物经硅胶色谱提纯(石油醚/乙酸乙酯，10:1至3:1)，得到N-(6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-甲基-丙酰胺(345mg,98％产率)，其为浅黄色固体。LCMS(ESI)[M+H]+＝284.1。
步骤2：N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)异丁酰胺
Figure BDA0002289356600002811
向微波管中添加N-(6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-甲基-丙酰胺(150mg,0.53mmol)和氢氧化铵(5mL,130mmol)。在100℃搅拌该混合物6小时。在真空中浓缩该混合物，得到N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-甲基-丙酰胺(180mg,96％产率)，其为浅黄色固体。LCMS(ESI)[M+H]+＝265.1。
步骤3：N-(8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)异丁酰胺
Figure BDA0002289356600002812
向小瓶中添加N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-甲基-丙酰胺(139mg,0.53mmol)、Xphos Pd G2(50mg,0.06mmol)、X-phos(45mg,0.1mmol)、乙酸钾(124mg,1.27mmol)、4-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡啶(172mg,0.79mmol)、1,4-二噁烷(5mL)和水(0.3mL)。在N2中、在110℃，搅拌该反应16小时。浓缩该混合物，并用硅胶色谱提纯(二氯甲烷/甲醇，100:1至100:7)，得到N-[8-氨基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-甲基-丙酰胺(82mg,49％产率)，其为浅黄色固体。LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.221，[M+H]+＝322.1，方法＝B；1H NMR(400MHz,CDCl3)δ9.00(s,1H),8.65(s,1H),8.50(d,J＝5.2Hz,1H),8.47(s,1H),8.05(br，1H),7.21(d,J＝5.2Hz,1H),7.06(s,1H),5.42(br，2H),2.62(七重峰，J＝6.8Hz,1H),2.43(s,3H),1.31(d,J＝6.8Hz,6H)。
实施例38：
N-(8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氰基丙酰胺(化合物 38)
Figure BDA0002289356600002821
步骤1：2-氰基丙酸
Figure BDA0002289356600002822
向小瓶中添加2-氰基丙酸乙基酯(1.0g,7.87mmol)、甲醇(4mL)和水(4mL)。该混合物随后冷却至0℃，并添加KOH(882mg,16mmol)。在40℃搅拌该混合物2小时。将该反应混合物浓缩以除去甲醇，用1N HCl酸化至pH 5，并用乙酸乙酯(50ml x 2)萃取。用盐水洗涤该合并的有机层，经Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩，得到2-氰基丙酸(660mg,85％产率)，其为紫色油状物。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.59(br，1H),4.03(q,J＝7.2Hz,1H),1.41(d,J＝7.2Hz,3H)。
步骤2：2-氰基丙酰氯
Figure BDA0002289356600002823
向小瓶中添加2-氰基丙酸(660mg,6.66mmol)和二氯甲烷(20mL)。该溶液冷却至0℃。逐滴添加草酰氯(1.3mL,14.72mmol)，然后添加DMF(0.01mL)。在室温搅拌该混合物3小时。将在真空中浓缩该反应混合物，得到粗产物并直接用于下一步骤中。
步骤3：2-氰基-N-(6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-基)丙酰胺
Figure BDA0002289356600002824
向小瓶中添加6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-胺盐酸盐(400mg,1.6mmol)、2-氰基丙酰氯(1.6g,10.89mmol)和吡啶(5mL)。在20℃搅拌该混合物2小时。将该混合物倒入水(10mL)，并用1N HCl调节pH至6，经乙酸乙酯(50ml x 2)萃取，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩。该残余物经硅胶色谱提纯(石油醚/乙酸乙酯，10:1至3:1)，得到2-氰基-N-(6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-基)丙酰胺(450mg,96％产率)，其为浅黄色固体。LCMS(ESI)[M+H]+＝295.1。
步骤4：N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氰基丙酰胺
Figure BDA0002289356600002831
向微波管中添加2-氰基-N-(6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-基)丙酰胺(150mg,0.51mmol)和0.5N NH3/二噁烷(12.5mL,6.25mmol)。在80℃，搅拌该混合物40小时。浓缩该混合物，并经硅胶色谱提纯(石油醚/乙酸乙酯，1:1至0:100)，得到N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氰基-丙酰胺(50mg,36％产率)，其为黄色固体。LCMS(ESI)[M+H]+＝276.1。
步骤5：N-(8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氰基丙酰胺
向小瓶中添加N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氰基-丙酰胺(50mg,0.18mmol)、4-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡啶(52mg,0.24mmol)、Xphos Pd G2(21mg,0.03mmol)、X-phos(17mg,0.04mmol)、乙酸钾(53mg,0.54mmol)、水(2mL)和1,4-二噁烷(20mL)。该反应混合物用氮气鼓泡，然后在100℃搅拌6小时。浓缩该混合物，并用硅胶色谱提纯(二氯甲烷/甲醇，100:1至10:1)，得到N-[8-氨基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-氰基-丙酰胺(15mg,25％产率)，其为浅黄色固体。LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.541，[M+H]+＝333.2，方法＝F；1H NMR(400MHz,CD3OD)δ9.31(s,1H),8.54(s,1H),8.43(d,J＝5.2Hz,1H),8.33(s,1H),7.39(d,J＝5.2Hz,1H),7.01(s,1H),2.45(s,3H),1.64(s,3H)。
实施例39：
N-(8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-羟基-2-甲基丙酰胺 (化合物39)
Figure BDA0002289356600002841
步骤1：甲酸1-氯-2-甲基-1-氧代丙烷-2-基酯
Figure BDA0002289356600002842
向小瓶中添加2-羟基-2-甲基-丙酸(0.5g,4.8mmol)和二氯甲烷(20mL)，并将该溶液冷却至0℃。逐滴添加草酰氯(0.61mL,7.2mmol)和DMF(0.1mL,1.30mmol)。在室温搅拌该混合物3小时。将该反应混合物在高真空中浓缩，得到粗产物并直接用于下一步骤中。
步骤2：甲酸1-(6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-基氨基)-2-甲基-1-氧代丙烷-2-基酯
向小瓶中添加6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-胺盐酸盐(200mg,0.80mmol)、甲酸(2-氯-1,1-二甲基-2-氧代-乙基)酯(1.3mL,2.16mmol)和吡啶(5mL)。在20℃搅拌该混合物2小时。将该混合物倒入水(10mL)，用1N HCl将pH调节至6，经二氯甲烷(50ml x 2)萃取，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩。该残余物经硅胶色谱提纯(石油醚/乙酸乙酯，10:1至3:1)，得到甲酸[2-[(6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-基)氨基]-1,1-二甲基-2-氧代-乙基]酯(160mg,61％产率)，其为浅黄色固体。LCMS(ESI)[M+H]+＝328.0。
步骤3：N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-羟基-2-甲基丙酰胺
向微波管中添加甲酸[2-[(6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-基)氨基]-1,1-二甲基-2-氧代-乙基]酯(150mg,0.46mmol)和氢氧化铵(17mL,112mmol)。在80℃，搅拌该混合物6小时。然后在真空中浓缩该混合物，得到粗产物N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-羟基-2-甲基-丙酰胺(100mg,57％产率)，其为浅黄色固体。LCMS(ESI)[M+H]+＝281.1。
步骤4：N-(8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-羟基-2-甲基 丙酰胺
Figure BDA0002289356600002852
向小瓶中添加N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-羟基-2-甲基-丙酰胺(150mg,0.53mmol)、Xphos Pd G2(54mg,0.07mmol)、X-phos(49mg,0.1mmol)、乙酸钾(134mg,1.37mmol)、4-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡啶(175mg,0.80mmol)、1,4-二噁烷(5mL)和水(0.3mL)。然后，在110℃、在氮气中，搅拌该反应16小时。然后，该反应冷却至0℃，添加HCl/二噁烷(10mL,4M，40mmol)。在室温搅拌该混合物30分钟。浓缩该混合物并添加NH3(7N在甲醇中，30mL)。然后浓缩该混合物，并用硅胶色谱提纯(二氯甲烷/甲醇，100:1至10:1)，得到N-[8-氨基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-羟基-2-甲基-丙酰胺(7mg,4％产率)，其为浅黄色固体。LCMS(ESI):RT(分钟)＝0.9660，[M+H]+＝338.1，方法＝B；1H NMR(400MHz,CD3OD)δ9.29(s,1H),8.53(s,1H),8.42(d,J＝5.2Hz 1H),8.38(s,1H),7.37(d,J＝5.2Hz,1H),6.99(s,1H),2.45(s,3H),1.50(s,6H)。
实施例40：
N-(8-氨基-6-(2-氧代噁唑烷-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)环丙烷甲酰胺(化合物 40)
Figure BDA0002289356600002861
向小瓶中添加N-[8-(二苯亚甲基氨基)-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基]环丙烷甲酰胺(100mg,0.23mmol)、Pd2(dba)3(21.45mg,0.0200mmol)、Xantphos(20mg,0.04mmol)、Cs2CO3(152mg,0.47mmol)、1,3-噁唑烷-2-酮(30mg,0.35mmol)和1,4-二噁烷(5mL)。在110℃、在氮气中，搅拌该反应8小时。浓缩该反应，并用硅胶色谱提纯(二氯甲烷/甲醇，100:1至10:1)，得到N-[8-氨基-6-(2-氧代噁唑烷-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基]环丙烷甲酰胺(45mg,60％产率)，其为浅黄色固体。LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.092，[M+H]+＝314.1，方法＝B；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ：10.86(s,1H),9.24(s,1H),8.05(s,1H),7.36-7.33(m,3H),4.42(t,J＝8.0Hz,2H),4.17(t,J＝8.0Hz,2H),2.08-2.01(m,1H),0.85-0.80(m,4H)。
实施例41：
N-(8-氨基-6-(2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)环丙烷甲酰胺 (化合物42)
Figure BDA0002289356600002862
步骤1：2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基硼酸
Figure BDA0002289356600002863
在微波反应器中，在130℃将3-溴-1H-吡啶-2-酮(0.5g,2.87mmol)、双(频哪醇合)二硼(0.77g,3.02mmol)、乙酸钾(0.83g,8.49mmol)和Pd(dppf)2Cl2(0.23g,0.29mmol)在1,4-二噁烷(10mL)中的混合物搅拌2小时。该混合物被直接用于下一步骤中。LCMS(ESI)[M+H]+＝140.1。
步骤2：N-(8-(双(4-甲氧基苄基)氨基)-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)环丙烷甲酰胺
Figure BDA0002289356600002871
向小瓶中添加3-氯-N1,N1-双[(4-甲氧基苯基)甲基]-2,7-二氮杂萘-1,6-二胺(165mg,0.38mmol)、环丙烷碳酰氯(0.1mL,1.13mmol)和吡啶(5mL)。在20℃搅拌该混合物2小时。浓缩该混合物。该残余物经硅胶色谱提纯(石油醚/乙酸乙酯，10:1至3:1)，得到N-[8-[双[(4-甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基]环丙烷甲酰胺(188mg,97％产率)，其为浅黄色固体。LCMS(ESI)[M+H]+＝503.1。
步骤3：N-(8-(双(4-甲氧基苄基)氨基)-6-(2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)-2,7-二 氮杂萘-3-基)环丙烷甲酰胺
Figure BDA0002289356600002872
向小瓶中添加XPhos Pd G2(24mg,0.03mmol)、X-phos(21mg,0.04mmol)、N-[8-[双[(4-甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基]环丙烷甲酰胺(150mg,0.3mmol)、乙酸钾(150mg,1.53mmol)、(2-氧代-1H-吡啶-3-基)硼酸(300mg,1.08mmol)、水(2mL)和1,4-二噁烷(20mL)。该反应混合物通过鼓泡氮气来脱气，然后在100℃搅拌16小时。然后浓缩该混合物，并用硅胶色谱提纯(乙酸乙酯)，得到N-[8-[双[(4-甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-(2-氧代-1H-吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基]环丙烷甲酰胺(180mg,43％产率)，其为黄色固体。LCMS(ESI)[M+H]+＝562.2。
步骤4：N-(8-氨基-6-(2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)环丙烷 甲酰胺
Figure BDA0002289356600002873
向小瓶中添加N-[8-[双[(4-甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-(2-氧代-1H-吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基]环丙烷甲酰胺(180mg,0.1300mmol)和TFA(5mL)。在80℃，搅拌该混合物48小时，然后在真空中浓缩。向此添加NH3(7N在甲醇中，3mL)并将在真空中浓缩该反应混合物。该残余物经硅胶色谱提纯(二氯甲烷/甲醇/NH3-水，100:5:1)，得到N-[8-氨基-6-(2-氧代-1H-吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基]环丙烷甲酰胺(24mg,58％产率)，其为黄色固体。LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.034，[M+H]+＝322.1，方法＝B；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.01(br，1H),10.95(s,1H),9.31(s,1H),8.60(d,J＝6.4Hz,1H),8.26(s,1H),8.17(s,1H),7.52(br，1H),7.15(br，2H),6.47-6.35(m,1H),2.12-2.02(m 1H),0.91-076(m,4H)。
实施例42：
反式-N-(8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氰基环丙烷甲 酰胺(化合物43)
Figure BDA0002289356600002881
向小瓶中添加(±)-反式-N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氰基-环丙烷甲酰胺(78mg,0.27mmol)、K2CO3(60mg,0.61mmol)、Pd(dppf)Cl2(30mg,0.04mmol)、4-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡啶(89mg,0.41mmol)、水(1mL)和1,4-二噁烷(10mL)。该混合物用氮气鼓泡20分钟，然后在100℃搅拌2小时。浓缩该混合物，并用硅胶色谱提纯(二氯甲烷/甲醇，100:1至10:1)随后反相色谱(Boston 40g ODS柱，NaHCO310mmol/L：乙腈由100:0至1:4洗脱，uv 254nm，214nm)，得到(±)-反式-N-[8-氨基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-氰基-环丙烷甲酰胺(25mg,29％产率)，其为浅黄色固体。LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.094，[M+H]+＝345.2，方法＝B；1H NMR(400MHz,CD3OD)δ9.28(s,1H),8.51(s,1H),8.41(d,J＝5.2Hz,1H),8.28(s,1H),7.37(d,J＝5.2Hz,1H),6.95(s,1H),2.68-2.59(m,1H),2.44(s,3H),2.14-2.07(m,1H),1.63-1.51(m,2H)。
实施例43：
(1S,2S)-N-(8-氨基-6-(4-(羟基甲基)吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氟环 丙烷甲酰胺(化合物44)
Figure BDA0002289356600002891
步骤1：(3-(6-氨基-1-(双(4-甲氧基苄基)氨基)-2,7-二氮杂萘-3-基)吡啶-4- 基)甲醇
Figure BDA0002289356600002892
向小瓶中添加Pd(Ph3P)4(80mg,0.07mmol)、Cs2CO3(300mg,0.92mmol)、3-氯-N1,N1-双[(4-甲氧基苯基)甲基]-2,7-二氮杂萘-1,6-二胺(200mg,0.46mmol)、1-羟基-3H-氧杂硼杂环戊并[3,4-c]吡啶(1.0g,2.22mmol)、水(1mL)和1,4-二噁烷(10mL)。该反应混合物用氮气鼓泡脱气20分钟，然后在100℃搅16小时。浓缩该混合物，并用硅胶色谱提纯(二氯甲烷/甲醇，100:1至10:1)，得到[3-[6-氨基-1-[双[(4-甲氧基苯基)甲基]氨基]-2,7-二氮杂萘-3-基]-4-吡啶基]甲醇(205mg,88％产率)，其为黄色固体。LCMS(ESI)[M+H]+＝508.2。
步骤2：(1S,2S)-N-(8-(双(4-甲氧基苄基)氨基)-6-(4-(羟基甲基)吡啶-3-基)- 2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氟环丙烷甲酰胺
Figure BDA0002289356600002893
向小瓶中添加[3-[6-氨基-1-[双[(4-甲氧基苯基)甲基]氨基]-2,7-二氮杂萘-3-基]-4-吡啶基]甲醇(150mg,0.3mmol)、二氯甲烷(3mL)和吡啶(2mL)。逐滴添加(1S,2S)-2-氟环丙烷碳酰氯(181mg,1.48mmol)溶液。在室温搅拌该混合物2小时。浓缩该混合物，溶于甲醇(10mL)，并添加K2CO3(300mg,2.17mmol)。在80℃，搅拌该混合物30分钟。然后，在真空中浓缩该混合物，得到粗产物，(1S,2S)-N-[8-[双[(4-甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-[4-(羟基甲基)-3-吡啶基]-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-氟-环丙烷甲酰胺(560mg,96％产率)，其被直接用于下一步骤中。LCMS(ESI)[M+H]+＝594.2。
步骤3：(1S,2S)-N-(8-氨基-6-(4-(羟基甲基)吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)- 2-氟环丙烷甲酰胺
Figure BDA0002289356600002901
向小瓶中添加(1S,2S)-N-[8-[双[(4-甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-[4-(羟基甲基)-3-吡啶基]-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-氟-环丙烷甲酰胺(560mg,0.28mmol)和TFA(5mL)。在80℃，搅拌该混合物16小时，然后在真空中浓缩。将该残余物溶于NH3(7N在甲醇中，10mL)，浓缩并经制备型TLC提纯(硅胶，二氯甲烷/甲醇/NH3-水，100:10:1)，得到(1S,2S)-N-[8-氨基-6-[4-(羟基甲基)-3-吡啶基]-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-氟-环丙烷甲酰胺(95mg,90％产率)，其为浅黄色固体。LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.414，[M+H]+＝354.2，方法＝F；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ：11.08(s,1H),9.45(s,1H),8.70(s,1H),8.64(d,J＝5.2Hz,1H),8.32(s,1H),7.67(d,J＝5.2Hz,1H),7.44(br，2H),7.11(s,1H),5.52(t,J＝5.6Hz,1H),5.13-4.90(m,1H),4.74(d,J＝5.6Hz,2H),2.40-2.29(m,1H),1.80-1.68(m,1H),1.32-1.20(m,1H)。
实施例44：
(±)-(1S,2S)-N-(8-氨基-6-(2-乙基吡咯烷-1-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氟 环丙烷甲酰胺(化合物45)
Figure BDA0002289356600002902
步骤1：3-(2-乙基吡咯烷-1-基)-N1,N1-双(4-甲氧基苄基)-2,7-二氮杂萘-1,6- 二胺
Figure BDA0002289356600002911
向密封管内添加3-氯-N1,N1-双[(4-甲氧基苯基)甲基]-2,7-二氮杂萘-1,6-二胺(200mg,0.46mmol)、1-甲基-2-吡咯烷酮(3mL)和(±)-2-乙基吡咯烷(400mg,4mmol)。在微波反应器中将该反应加热至200℃8小时。将该反应混合物倒入水(30mL)中，并用乙酸乙酯(50mL x 2)萃取。该合并的有机萃取物用盐水(30mL)、1N HCl(5mL)、盐水(20mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩。该残余物经硅胶色谱提纯(二氯甲烷/甲醇，100:1至20:1)，得到(±)-3-(2-乙基吡咯烷-1-基)-N1,N1-双[(4-甲氧基苯基)甲基]-2,7-二氮杂萘-1,6-二胺(130mg,57％产率)，其为黄色固体。LCMS(ESI)[M+H]+＝498.2。
步骤2：(1S,2S)-N-(8-(双(4-甲氧基苄基)氨基)-6-(2-乙基吡咯烷-1-基)-2,7- 二氮杂萘-3-基)-2-氟环丙烷甲酰胺
Figure BDA0002289356600002912
向小瓶中添加(±)-3-(2-乙基吡咯烷-1-基)-N1,N1-双[(4-甲氧基苯基)甲基]-2,7-二氮杂萘-1,6-二胺(130mg,0.24mmol)、吡啶(96mg,1.22mmol)和二氯甲烷(5mL)。逐滴添加(1S,2S)-2-氟环丙烷碳酰氯(89mg,0.7300mmol)的二氯甲烷(5mL)溶液。在室温搅拌该混合物2小时。浓缩该混合物，并用硅胶色谱提纯(二氯甲烷/甲醇/NH3-水，100:5:1)，得到(1S,2S)-N-[8-[双[(4-甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-(2-乙基吡咯烷-1-基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-氟-环丙烷甲酰胺(60mg,40％产率)，其为黄色油状物。LCMS(ESI)[M+H]+＝584.3。
步骤3：(±)-(1S,2S)-N-(8-氨基-6-(2-乙基吡咯烷-1-基)-2,7-二氮杂萘-3- 基)-2-氟环丙烷甲酰胺
Figure BDA0002289356600002921
向小瓶中添加(1S,2S)-N-[8-[双[(4-甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-(2-乙基吡咯烷-1-基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-氟-环丙烷甲酰胺(60mg,0.1mmol)和TFA(5mL)。在80℃，搅拌该混合物16小时。浓缩该混合物并添加NH3(7N在甲醇中，10mL)。将该反应混合物浓缩，并经制备型TLC提纯(硅胶，二氯甲烷/甲醇/NH3水＝100:10:1，uv 254nm)，得到(±)-(1S,2S)-N-[8-氨基-6-(2-乙基吡咯烷-1-基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-氟-环丙烷甲酰胺(20mg,60％产率)，其为浅黄色固体。LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.223，[M+H]+＝344.2，方法＝B；1H NMR(400MHz,CD3OD)δ：8.68(s,1H),7.69(s,1H),5.57(s,1H),4.87-4.63(m,1H),3.93-3.84(m,1H),3.45-3.37(m,1H),3.35-3.27(m,1H),2.03-1.81(m,4H),1.80-1.60(m,3H),1.36-1.23(m,1H),1.14-1.03(m,1H),0.84(t,J＝7.6Hz,3H)。
实施例45：
(±)-顺式-N-(8-氨基-6-(4-环丙基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氟环丙 烷甲酰胺(化合物46)
Figure BDA0002289356600002922
步骤1：3-溴-4-环丙基吡啶
Figure BDA0002289356600002923
向圆底烧瓶中添加LiCl(644mg,15mmol)和环丙基溴化镁(30mL,15mmol)。在室温、在氮气中，搅拌该混合物30分钟。在另一烧瓶中，在0℃混合3-溴吡啶(2.0g,12.66mmol)、THF(50mL)和三氟化硼二乙基醚合物(1.8mL,14mmol)。在室温搅拌该混合物30分钟。该溶液随后再次冷却至-55℃，然后逐滴添加环丙基溴化镁和LiCl配合物的溶液。在-55℃搅拌该混合物30分钟，然后缓慢温热至室温。在室温搅拌过夜后，该反应经水性NaHCO3(10mL)和水(20mL)淬灭。该反应混合物经乙酸乙酯萃取(50ml x 3)，经Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩。该残余物经硅胶色谱提纯(石油醚/乙酸乙酯由10:1至3:1)，得到3-溴-4-环丙基-吡啶(220mg,9％产率)，其为无色油状物。LCMS(ESI)[M+H]+＝198.0。
步骤2：4-环丙基吡啶-3-基硼酸
Figure BDA0002289356600002931
向小瓶中添加3-溴-4-环丙基-吡啶(120mg,0.61mmol)、硼酸三异丙基酯(230mg,1.22mmol)和THF(5mL)。该混合物随后冷却至-78℃，然后逐滴添加n-BuLi(2.5M在己烷中，0.5mL,1.25mmol)。该混合物缓慢温热至室温。在室温搅拌2小时后，该混合物用水(10mL)淬灭，用乙酸乙酯(20mL x 2)洗涤，用2N HCl酸化至pH 5，并在真空中浓缩。将该残余物重新悬浮于乙醇(30mL)中，过滤并在真空中浓缩，得到(4-环丙基-3-吡啶基)硼酸(120mg,97％产率)，其为浅黄色油状物。LCMS(ESI)[M+H]+＝164.2。
步骤3：(±)-顺式-N-(8-氨基-6-(4-环丙基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2- 氟环丙烷甲酰胺
Figure BDA0002289356600002932
向小瓶中添加顺式-N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氟-环丙烷甲酰胺(120mg,0.43mmol)、X-phos(40mg,0.09mmol)、Xphos Pd G2(50mg,0.06mmol)、乙酸钾(126mg,1.28mmol)、(4-环丙基-3-吡啶基)硼酸(80mg,0.39mmol)、水(1mL)和1,4-二噁烷(10mL)。该反应混合物用氮气鼓泡20分钟来脱气，然后在100℃搅拌6小时。浓缩该混合物，并用硅胶色谱提纯(二氯甲烷/甲醇，100:1至10:1)，得到(±)-顺式-N-[8-氨基-6-(4-环丙基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-氟-环丙烷甲酰胺(39mg,24％产率)，其为浅黄色固体。LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.104，[M+H]+＝364.1，方法＝B；1H NMR(400MHz,CD3OD)δ：9.38(s,1H),8.47(s,1H),8.39(d,J＝5.6Hz,1H),8.32(s,1H),7.04(s,1H),6.97(d,J＝5.6Hz,1H),4.98--4.76(m,1H),2.22-2.11(m,2H),1.89-1.77(m,1H),1.24-1.18(m,1H),1.11-1.04(m,2H),0.92-0.85(m,2H)。
实施例46：
(±)-反式-N-(8-氨基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-甲基 环丙烷甲酰胺(化合物47)
步骤1：(±)-反式-2-甲基环丙烷碳酰氯
Figure BDA0002289356600002942
向小瓶中添加(±)-反式-2-甲基环丙烷甲酸(200mg,2.0mmol)和二氯甲烷(10mL)。该混合物冷却至0℃，然后逐滴添加草酰氯(0.3mL,4mmol)和DMF(0.01mL)。在20℃搅拌该混合物2小时。将在真空中浓缩该反应混合物，得到粗产物并直接用于下一步骤中。
步骤2：(±)-反式-N-(6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-甲基环丙烷甲酰胺
Figure BDA0002289356600002943
向小瓶中添加6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-胺(60mg,0.28mmol)、吡啶(2mL)和(±)-反式-2-甲基环丙烷碳酰氯(166mg,1.4mmol)的二氯甲烷(3mL)溶液。在室温搅拌该反应2小时。在真空中浓缩该混合物，并用硅胶色谱提纯(二氯甲烷/甲醇，20:1)，得到(±)-反式-N-(6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-甲基-环丙烷甲酰胺(80mg,93％产率)。LCMS(ESI)[M+H]+＝296.0。
步骤3：N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-甲基环丙烷甲酰胺
Figure BDA0002289356600002951
向10mL的微波管中添加(±)-反式-N-(6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-甲基-环丙烷甲酰胺(80mg,0.27mmol)、NH3-水(2mL,13.51mmol)和1,4-二噁烷(2mL)。在80℃，搅拌该混合物16小时。在真空中浓缩该混合物，并用硅胶色谱提纯(二氯甲烷/甲醇/NH3-水，100:5:1)，得到(±)-反式-N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-甲基-环丙烷甲酰胺(80mg,99％产率)，其为白色固体。LCMS(ESI)[M+H]+＝277.1。
步骤4：(±)-反式-N-(8-氨基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)- 2-甲基环丙烷甲酰胺
Figure BDA0002289356600002952
向小瓶中添加XPhos Pd G2(20mg,0.03mmol)、X-phos(18mg,0.04mmol)、N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-甲基-环丙烷甲酰胺(80mg,0.26mmol)、乙酸钾(51mg,0.52mmol)、1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑(81mg,0.39mmol)、水(0.5mL)和1,4-二噁烷(5mL)。该反应通过鼓泡N2脱气，然后在100℃搅拌16小时。浓缩该混合物并经硅胶色谱提纯(二氯甲烷/甲醇，30:1至10:1)，得到N-[8-氨基-6-(1-甲基吡唑-4-基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-甲基-环丙烷甲酰胺(42mg,50％产率，1H NMR显示3:1的反式:顺式)的(±)-顺式和(±)-反式-异构体混合物，其为黄色固体。LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.661，[M+H]+＝323.2，方法＝F；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ：10.77(s,1H),9.24(s,1H),8.15(s,1H),8.11(s,1H),7.96(s,1H),7.12(br，2H),7.04(s,1H),3.88(s,3H),2.12-2.02(m,0.3H),1.86-1.77(m,0.7H),1.34-1.20(m,1H),1.18-0.94(m,4H),0.85-0.79(m,0.3H),0.72-0.63(m,0.7H)。
实施例47：
(±)-4-(1-氨基-6-((顺式)-2-氟环丙烷甲酰氨基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-3-甲 基苯酰胺(化合物48)
Figure BDA0002289356600002961
步骤1：3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯酰胺
Figure BDA0002289356600002962
向密封管内添加4-溴-3-甲基-苯酰胺(1.0g,4.67mmol)、双(频哪醇合)二硼(1.4g,5.61mol)、乙酸钾(1.4g,14.01mmol)、Pd(dppf)Cl2(341mg,0.47mmol)和1,4-二噁烷(10mL)。该混合物鼓泡N22分钟，并在100℃搅拌3小时。在真空中浓缩该混合物，并用硅胶色谱提纯(石油醚/乙酸乙酯，1:1至0:100)，得到3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯酰胺(920mg,71％产率)，其为白色固体。LCMS(ESI)[M+H]+＝262.2。
步骤2：(±)-4-(1-氨基-6-((顺式)-2-氟环丙烷甲酰氨基)-2,7-二氮杂萘-3- 基)-3-甲基苯酰胺
Figure BDA0002289356600002963
向小瓶中添加(±)-顺式-N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氟-环丙烷甲酰胺(70mg,0.25mmol)、K2CO3(49mg,0.5mmol)、Pd(dppf)Cl2(30mg,0.04mmol)、3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯酰胺(98mg,0.37mmol)、水(0.5mL)和1,4-二噁烷(5mL)。该反应鼓泡N220分钟，然后在90℃搅拌5小时。然后浓缩该混合物，并用硅胶色谱提纯(二氯甲烷/甲醇，100:1至10:1)，然后反相色谱(Boston 40g ODS柱，NaHCO310mmol/L：乙腈由100:0至1:4洗脱，uv 254nm，214nm)，得到(±)-4-[1-氨基-6-[[(顺式)-2-氟环丙烷羰基]氨基]-2,7-二氮杂萘-3-基]-3-甲基-苯酰胺(35mg,37％产率)，其为白色固体。LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.086，[M+H]+＝380.2，方法＝B；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ：10.99(s,1H),9.37(s,1H),8.24(s,1H),7.97(s,1H),7.79(s,1H),7.75(d,J＝8.0Hz,1H),7.48(d,J＝8.0Hz,1H),7.35(br，1H),7.28(br，2H),6.92(s,1H),5.07-4.83(m,1H),2.41(s,3H),2.32-2.22(m,1H),1.74-1.61(m,1H),1.24-1.14(m 1H)。
实施例48：
4-(1-氨基-6-((顺式)-2-氟环丙烷甲酰氨基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-N,3-二甲基 苯酰胺(化合物49)
步骤1：4-溴-N,3-二甲基苯酰胺
Figure BDA0002289356600002972
向小瓶中添加4-溴-3-甲基苯甲酸(1.0g,4.65mmol)、二氯甲烷(10mL)和DMF(0.1mL,4.65mmol)。逐滴添加草酰氯(1.2mL,13.95mmol)。在室温搅拌该混合物2小时。在真空中浓缩该反应，并再次溶于二氯甲烷(10mL)中。添加甲胺(30％在乙醇中，10mL)并在室温搅拌30分钟。在真空中浓缩该混合物。该残余物经硅胶色谱提纯(石油醚/乙酸乙酯，1:1至0:100)，得到4-溴-N,3-二甲基-苯酰胺(1g,94％产率)，其为白色固体。LCMS(ESI)[M+H]+＝228.0
步骤2.N,3-二甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯酰胺
向密封管内添加4-溴-N,3-二甲基-苯酰胺(0.99g,4.34mmol)、双(频哪醇合)二硼(1.32g,5.21mmol)、乙酸钾(1.28g,13mmol)、Pd(dppf)Cl2(317mg,0.43mmol)和1,4-二噁烷(100mL)。该混合物通过鼓泡N2脱气2分钟，并在100℃搅拌3小时。浓缩该混合物，并用硅胶色谱提纯(石油醚/乙酸乙酯，3:1至1:1)，得到N,3-二甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯酰胺(1.05g,77％产率)，其为灰白色固体。LCMS(ESI)[M+H]+＝276.2。
步骤3：(±)-4-(1-氨基-6-((顺式)-2-氟环丙烷甲酰氨基)-2,7-二氮杂萘-3- 基)-N,3-二甲基苯酰胺
向小瓶中添加(±)-顺式-N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氟-环丙烷甲酰胺(70mg,0.25mmol)、K2CO3(50mg,0.51mmol)、Pd(dppf)Cl2(40mg,0.05mmol)、N,3-二甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯酰胺(150mg,0.55mmol)、水(0.5mL)和1,4-二噁烷(5mL)。该混合物通过鼓泡N2脱气2分钟，然后在100℃搅拌2小时。浓缩该混合物，并用硅胶色谱提纯(二氯甲烷/甲醇，100:1至10:1)和反相色谱(Boston 40gODS柱，NaHCO310mmol/L：乙腈由2:1至1：2洗脱)，得到4-[1-氨基-6-[[顺式-2-氟环丙烷羰基]氨基]-2,7-二氮杂萘-3-基]-N,3-二甲基-苯酰胺(35mg,35％产率)，其为白色固体。LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.124，[M+H]+＝394.1，方法＝B；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ：10.99(s,1H),9.37(s,1H),8.44(q,J＝4.4Hz,1H),8.23(s,1H),7.75(s,1H),7.71(d,J＝8.0Hz,1H),7.48(d,J＝8.0Hz,1H),7.28(br，2H),6.92(s,1H),5.06-4.83(m,1H),2.80(d,J＝4.4Hz,3H),2.41(s,3H),2.32-2.22(m,1H),1.73-1.60(m,1H),1.24-1.15(m,1H)。
实施例49：
反式-N-(8-氨基-6-(4-异丙基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氰基环丙烷 甲酰胺(化合物50)
步骤1：3-溴-4-异丙基吡啶
Figure BDA0002289356600002991
向烧瓶中添加3-溴吡啶(3.0g,18.99mmol)，并逐滴添加三氟化硼二乙基醚合物(3mL,23.55mmol)。在室温、在N2中，搅拌该混合物30分钟，冷却至-55℃，并逐滴添加氯(异丙基)镁氯化锂配合物(18mL,23.4mmol)。在-55℃搅拌该混合物2小时。该反应温热至室温，并在室温搅拌2小时。该反应经添加NaHCO3水溶液(10mL)、水(20mL)淬灭，经乙酸乙酯(50mlx 3)萃取，经Na2SO4干燥，在真空中过滤并浓缩。该残余物经硅胶色谱提纯(石油醚/乙酸乙酯，10:1至3:1)，得到3-溴-4-异丙基-吡啶(600mg,16％产率)，其为浅黄色油状物。LCMS(ESI)[M+H]+＝200.0。
步骤2：4-异丙基吡啶-3-基硼酸
向小瓶中添加硼酸三异丙基酯(1.2g,6.38mmol)、3-溴-4-异丙基-吡啶(600mg,3mmol)和THF(20mL)。将该混合物冷却至-78℃。逐滴添加n-BuLi(1.5mL,3.75mmol，2.5M在己烷中)溶液。该混合物缓慢温热至室温并在室温搅拌2小时。该混合物经水(10mL)淬灭，用乙酸乙酯(20mL x 2)洗涤，用2N HCl酸化至pH＝5，并在真空中浓缩。该残余物经乙醇(30mL)萃取，过滤并在真空中浓缩，得到(4-异丙基-3-吡啶基)硼酸(600mg,36％产率)，其为浅黄色固体，并直接用于下一步骤中。LCMS(ESI)[M+H]+＝166.1。
步骤3：(±)-反式-N-(8-氨基-6-(4-异丙基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2- 氰基环丙烷甲酰胺
Figure BDA0002289356600002993
向小瓶中添加(±)-反式-N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氰基-环丙烷甲酰胺(120mg,0.42mmol)、X-phos(40mg,0.08mmol)、Xphos Pd G2(49mg,0.06mmol)、(4-异丙基-3-吡啶基)硼酸(70mg,0.42mmol)、水(1mL)和1,4-二噁烷(10mL)。该反应鼓泡氮气脱气2分钟，然后在100℃搅拌6小时。浓缩该混合物，并用硅胶色谱提纯(二氯甲烷/甲醇，100:1至10:1)，得到(±)-反式-N-[8-氨基-6-(4-异丙基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-氰基-环丙烷甲酰胺(17mg,11％产率)，其为浅黄色固体。LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.696，[M+H]+＝373.2，方法＝F；1H NMR(400MHz,CD3OD)δ：9.30(s,1H),8.50(d,J＝5.6Hz,1H),8.44(s,1H),8.28(s,1H),7.49(d,J＝5.6Hz,1H),6.91(s,1H),3.40-3.20(m,1H),2.70-2.60(m,1H),2.15-2.05(m,1H),1.65-1.50(m,2H),1.22(d,J＝6.8Hz,6H)。
实施例50：
(±)-反式-N-(8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氟环丙烷 甲酰胺(化合物51)
Figure BDA0002289356600003001
在110℃、在惰性氩气氛围中，将(±)-反式-N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氟-环丙烷甲酰胺(500mg,1.78mmol)、4-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡啶(450mg,2.05mmol)、X-phos(90mg,0.19mmol)、X-phos-Pd-G2(90mg,0.11mmol)、K2CO3(800mg,5.8mmol)在1,4-二噁烷(6mL)和水(1mL)中的混合物搅拌2小时。浓缩该反应并将所得残余物用反相色谱提纯(甲醇45-55/0.05％甲酸在水中)，得到(±)-反式-N-[8-氨基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-氟-环丙烷甲酰胺(57mg,9.5％产率)，其为白色固体。LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.440，[M+H]+＝338.1，方法＝E；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.13(s,1H),9.39(s,1H),8.56(s,1H),8.43(d，J＝4.8Hz,1H),8.19(s,1H),7.34(s,2H),7.30(d,J＝5.2Hz,1H),6.97(s,1H),5.00-4.83(m,1H),2.66-2.57(m,1H),2.41(s,3H),1.60-1.51(m,1H),1.31-1.23(m,1H)。
实施例51：
(±)-顺式-N-(8-氨基-6-(7-甲基-1H-咪唑[4，5-b]吡啶-6-基)-2,7-二氮杂萘- 3-基)-2-氟环丙烷甲酰胺(化合物52)
步骤1：7-甲基-6-(4，4，5，5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-3H-咪唑并 [4,5-b]吡啶
Figure BDA0002289356600003012
在100℃、在氮气氛围中，将6-溴-7-甲基-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶(320mg,1.51mmol)、Pd(dppf)Cl2(100mg,0.14mmol)、乙酸钾(600mg,6.12mmol)和双(频哪醇合)二硼(3.8g,14.96mmol)在DMF(10mL)中的混合物搅拌3小时。向此添加盐水(40mL)，且该混合物经乙酸乙酯(20mL x 3)萃取。该合并的有机层用MgSO4干燥并浓缩至干燥。该粗产物在硅胶上用柱色谱提纯，用乙酸乙酯洗脱，得到7-甲基-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶(180mg,35％产率)，其为白色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝260.2。
步骤2：(±)-顺式-N-(8-氨基-6-(7-甲基-1H-咪唑[4，5-b]吡啶-6-基)-2,7-二氮 杂萘-3-基)-2-氟环丙烷甲酰胺
在110℃、在氩气氛围中，将7-甲基-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-3H-咪唑并[4,5-b]吡啶(60mg,0.23mmol)、(±)-顺式-N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氟环丙烷甲酰胺(60mg,0.21mmol)、Pd(dppf)Cl2(15mg,0.02mmol)、K2CO3(100mg,0.72mmol)在1,4-二噁烷(5mL)和水(1mL)中的混合物搅拌3小时。将该反应浓缩至干燥。所得残余物用反相色谱提纯(乙腈0-45/0.1％NH4HCO3在水中)，得到(±)-顺式-N-[8-氨基-6-(7-甲基-1H-咪唑并[4,5-b]吡啶-6-基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-氟-环丙烷甲酰胺(10.6mg,13.1％产率)，其为白色固体。LCMS：(ESI)：RT(分钟)＝1.03，[M+H]+＝378.1，方法＝B；1H NMR(400MHz,CD3OD)δ9.31(s,1H),8.48(s,1H),8.44(s,1H),8.34(s,1H),7.05(s,1H),5.00-4.80(m,1H),2.71(s,3H),2.20-2.16(m,1H),1.88-1.81(m,1H),1.26-1.21(m,1H)。
实施例52：
(±)-反式-N-(8-氨基-6-(4-乙基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(甲氧基 甲基)环丙烷甲酰胺(化合物53)
Figure BDA0002289356600003021
步骤1：(±)-反式-2-(甲氧基甲基)环丙烷甲酸乙基酯
Figure BDA0002289356600003022
在室温向(±)-反式-2-(羟基甲基)环丙烷甲酸乙基酯(1.4g,9.71mmol)的THF(10mL)溶液中在添加氢化钠(60％在矿物油中，350mg,8.75mmol)。在室温搅拌该反应混合物20分钟。然后添加碘甲烷(1.0mL,15.5mmol)。在室温搅拌该反应混合物3小时并用LCMS监测。该反应用饱和NaCl溶液淬灭。该反应混合物经乙酸乙酯萃取(30mL x 3)，经无水硫酸钠干燥，并在真空中浓缩，得到反式-2-(甲氧基甲基)环丙烷甲酸乙基酯(1.0g,91％产率)，其为黄色液体。LCMS：(ESI)[M+H]+＝159.1。
步骤2：(±)-反式-2-(甲氧基甲基)环丙烷甲酸
Figure BDA0002289356600003023
在70℃，将(±)-反式-2-(甲氧基甲基)环丙烷甲酸乙基酯(1.0g,6.32mmol)、氢氧化钠(800mg,20mmol)在THF(20mL)和水(5mL)中的混合物搅拌6小时。通过旋蒸除去THF，且用2M HCl溶液将pH调节至1。该反应混合物经乙酸乙酯萃取(20x 3mL)。合并该有机萃取物，经无水硫酸钠干燥，然后在真空中浓缩，得到(±)-反式-2-(甲氧基甲基)环丙烷甲酸(700mg,85％产率)，其为无色液体。
步骤3：(±)-反式-N-(6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(甲氧基甲基)环丙烷甲 酰胺
向(±)-反式-2-(甲氧基甲基)环丙烷甲酸(700mg,5.38mmol)和DMF(1滴)的二氯甲烷(20mL)溶液中添加过量的草酰氯。在室温搅拌该混合物1小时。浓缩该混合物以除去过量的草酰氯，并添加二氯甲烷(10mL)。将该溶液逐滴添加至6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-胺(400mg,1.87mmol)、三乙胺(2.0mL,14.85mmol)的二氯甲烷(10mL)溶液中。在室温搅拌该混合物1小时。然后，将该反应混合物浓缩，得到该粗的(±)-反式-N-(6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(甲氧基甲基)环丙烷甲酰胺(400mg,17.1％产率)，其为黄色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝326.0。
步骤4：(±)-反式-N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2(甲氧基甲基)环丙烷 甲酰胺
Figure BDA0002289356600003032
在110℃，将(±)-反式-N-(6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(甲氧基甲基)环丙烷甲酰胺(400.0mg,0.3200mmol)和氨(25％在水中)(2.0mL,105.88mmol)在1,4-二噁烷(4mL)中的混合物搅拌2小时。将该反应浓缩至干燥。然后，该粗产物在硅胶上用柱色谱提纯，用二氯甲烷/甲醇(10:1)洗脱，得到N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(甲氧基甲基)环丙烷甲酰胺(90mg,71％产率)，其为黄色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝307.1。
步骤5：(±)-反式-N-(8-氨基-6-(4-乙基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2- (甲氧基甲基)环丙烷甲酰胺
Figure BDA0002289356600003041
向压力反应管中添加(±)-反式-N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(甲氧基甲基)环丙烷甲酰胺(84mg,0.27mmol)、(4-乙基-3-吡啶基)硼酸(60mg,0.4mmol)、Pd(PPh3)4(40mg,0.03mmol)、K2CO3(120mg,0.87mmol)、1,4-二噁烷(5mL)和水(1mL)。在110℃、在氩气氛围中，搅拌该反应混合物6小时，然后浓缩至干燥。所得残余物用反相色谱提纯(乙腈0-40/0.1％NH4HCO3/水)，得到(±)-反式-N-[8-氨基-6-(4-乙基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-(甲氧基甲基)环丙烷甲酰胺(12mg,11.6％产率)，其为白色固体。LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.16，[M+H]+＝378.2，方法＝B；1H NMR(400MHz,CD3OD)δ9.18(s,1H),8.38(s,1H),8.36(s,1H),8.17(s,1H),7.32(d,J＝4.0Hz,1H),6.83(s,1H),3.42-3.39(m,1H),3.22-3.18(m,4H),2.72(q,J＝6.0Hz,2H),1.80-1.79(m,1H),1.64-1.60(m,1H),1.17-1.13(m,1H),1.06(t,J＝6.0Hz,3H),0.86-0.82(m,1H)。
实施例53：
(±)-顺式-N-(8-氨基-6-(2-(2-羟基乙基)吡咯烷-1-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)- 2-氟环丙烷甲酰胺(化合物54)
Figure BDA0002289356600003042
步骤1：(±)-2-(1-(6-氨基-1-(双(4-甲氧基苄基)氨基)-2,7-二氮杂萘-3-基)吡 咯烷-2-基)乙醇
Figure BDA0002289356600003051
向微波管中添加3-氯-N1,N1-双[(4-甲氧基苯基)甲基]-2,7-二氮杂萘-1,6-二胺(200mg,0.46mmol)、(±)-2-吡咯烷-2-基乙醇(450mg,3.91mmol)和1-甲基-2-吡咯烷酮(3mL)。在微波反应器中，该混合物在200℃加热4小时。将该混合物倒入20mL水中，并用乙酸乙酯(30ml x 2)萃取。该合并的萃取物用1N HCl(10mL)、盐水(20ml x 2)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩。该残余物经硅胶色谱提纯(二氯甲烷/甲醇/NH3-水，100:5:1)，得到2-[1-[6-氨基-1-[双[(4-甲氧基苯基)甲基]氨基]-2,7-二氮杂萘-3-基]吡咯烷-2-基]乙醇(140mg,56％产率)，其为浅黄色固体。LCMS(ESI)[M+H]+＝514.2。
步骤2：顺式-2-氟环丙烷甲酸(±)-2-[1-[6-[双[顺式-2-氟环丙烷羰基]氨基]- 1-[双[(4-甲氧基苯基)甲基]氨基]-2,7-二氮杂萘-3-基]吡咯烷-2-基]乙基酯
向小瓶中添加2-[1-[6-氨基-1-[双[(4-甲氧基苯基)甲基]氨基]-2,7-二氮杂萘-3-基]吡咯烷-2-基]乙醇(140mg,0.27mmol)、二氯甲烷(5mL)和吡啶(215mg,2.73mmol)。逐滴添加2-[1-[6-氨基-1-[双[(4-甲氧基苯基)甲基]氨基]-2,7-二氮杂萘-3-基]吡咯烷-2-基]乙醇(140mg,0.27mmol)的二氯甲烷(5mL)溶液。在室温搅拌该混合物2小时。在真空中浓缩该混合物，得到粗产物并直接用于下一步骤。LCMS(ESI)[M+H]+＝772.2。
步骤3：(±)-顺式-N-(8-(双(4-甲氧基苄基)氨基)-6-(2-(2-羟基乙基)吡咯烷- 1-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氟环丙烷甲酰胺
Figure BDA0002289356600003061
向微波管中添加顺式-2-氟环丙烷甲酸2-[1-[6-[双[顺式-2-氟环丙烷羰基]氨基]-1-[双[(4-甲氧基苯基)甲基]氨基]-2,7-二氮杂萘-3-基]吡咯烷-2-基]乙基酯(300mg,0.27mmol)、1,4-二噁烷(4mL)和氢氧化铵(3.6mL,47.62mmol)。该混合物在100℃加热48小时。在真空中浓缩该混合物，并经制备型TLC提纯(硅胶，二氯甲烷/甲醇，10:1)，得到(±)-顺式-N-[8-[双[(4-甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-[2-(2-羟基乙基)吡咯烷-1-基]-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-氟-环丙烷甲酰胺(180mg,55％产率)，其为黄色油状物。LCMS(ESI)[M+H]+＝600.3。
步骤4：(±)-顺式-N-(8-氨基-6-(2-(2-羟基乙基)吡咯烷-1-基)-2,7-二氮杂萘- 3-基)-2-氟环丙烷甲酰胺
Figure BDA0002289356600003062
向小瓶中添加(±)-顺式-N-[8-[双[(4-甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-[2-(2-羟基乙基)吡咯烷-1-基]-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-氟-环丙烷甲酰胺(180mg,0.15mmol)和TFA(5mL)。在90℃搅拌该反应16小时。浓缩该混合物，并溶于NH3(7N在甲醇中，10mL)的溶液中。添加K2CO3(200mg)。在60℃搅拌该反应30分钟，过滤并在真空中浓缩。该残余物用制备型TLC提纯(硅胶，二氯甲烷/甲醇＝10:1)，得到(±)-顺式-N-[8-氨基-6-[2-(2-羟基乙基)吡咯烷-1-基]-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-氟-环丙烷甲酰胺(35mg,65％产率)，其为黄色固体。LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.100，[M+H]+＝360.2，方法＝B；1H NMR(400MHz,CD3OD)δ：8.80(s,1H),7.84(s,1H),5.75(s,1H),4.96-4.73(m,1H),4.45-4.35(m,1H),3.65-3.55(m,2H),3.53-3.45(m,1H),3.39-3.31(m,1H),2.16-1.93(m,4H),1.93-1.73(m,3H),1.70-1.58(m,1H),1.24-1.12(m,1H)。
实施例54：
顺式-N-(8-氨基-6-(2-甲氧基-5-甲基吡啶-4-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氟环 丙烷甲酰胺(化合物55)
Figure BDA0002289356600003071
步骤1：4-碘-2-甲氧基-5-甲基吡啶
Figure BDA0002289356600003072
在室温，将2-氟-4-碘-5-甲基吡啶(2.37g,10mmol)、甲醇钠(1.0g,18.51mmol)在二甲基亚砜(10mL)中的混合物搅拌2小时。向此混合物中添加NaCl饱和溶液(20mL)，然后该混合物经乙酸乙酯(15mL x 3)萃取。合并该有机萃取物，用MgSO4干燥，并浓缩，得到该粗产物。该粗产物在硅胶上用柱色谱提纯，用石油醚:乙酸乙酯(10:1)洗脱，得到4-碘-2-甲氧基-5-甲基-吡啶(2.3g,81％产率)，其为无色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝249.9。
步骤2：2-甲氧基-5-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基) 吡啶
Figure BDA0002289356600003073
在100℃、在氩气中，将4-碘-2-甲氧基-5-甲基-吡啶(830mg,3.33mmol)、Pd(dppf)Cl2(200mg,0.27mmol)、乙酸钾(1.0g,10.2mmol)和双(频哪醇合)二硼(6.0g,23.63mmol)在无水1,4-二噁烷(30mL)中的混合物搅拌5小时。将该反应浓缩至干燥。该粗产物在硅胶上用柱色谱提纯，用石油醚:乙酸乙酯(10:1)洗脱，得到粗的2-甲氧基-5-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡啶(1.1g)，其为黄色液体。LCMS(ESI):[M+H]+＝250.1。
步骤3：(±)-顺式-N-(8-氨基-6-(2-甲氧基-5-甲基吡啶-4-基)-2,7-二氮杂萘- 3-基)-2-氟环丙烷甲酰胺
Figure BDA0002289356600003081
在110℃、在氩气中，将2-甲氧基-5-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡啶(600mg,2.41mmol)、(±)-顺式-N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氟环丙烷甲酰胺(280mg,1.0mmol)、Pd(dppf)Cl2(70mg,0.10mmol)、K2CO3(420mg,3.04mmol)在1,4-二噁烷(5mL)和水(1mL)中的混合物)搅拌3小时。将该反应浓缩至干燥。所得残余物用反相色谱提纯(乙腈0-45/0.1％NH4HCO3/水)，得到(±)-顺式-N-[8-氨基-6-(2-甲氧基-5-甲基-4-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-氟-环丙烷甲酰胺(55mg,14.6％产率)，其为白色固体。LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.20，[M+H]+＝368.2，方法＝B；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.02(s,1H),9.38(s,1H),8.25(s,1H),8.05(s,1H),7.34(s,2H),6.98(s,1H),6.85(s,1H),5.04-4.86(m,1H),3.85(s,3H),2.30-2.23(m,4H),1.70-1.64(m,1H),1.22-1.17(m,1H)。
实施例55：
(±)-顺式-N-[8-氨基-6-(5-甲基-2-氧代-1H-吡啶-4-基)-2,7-二氮杂萘-3- 基]-2-氟-环丙烷甲酰胺(化合物56)
Figure BDA0002289356600003082
在80℃，将(±)-顺式-N-[8-氨基-6-(2-甲氧基-5-甲基-4-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-氟-环丙烷甲酰胺(45mg,0.12mmol)、碘甲基硅烷(200mg,1.0mmol)的乙腈(5mL)溶液中搅拌2小时。浓缩该反应，且经反相色谱提纯(乙腈0-40/0.1％甲酸在水中)，得到顺式-N-[8-氨基-6-(5-甲基-2-氧代-1H-吡啶-4-基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-氟-环丙烷甲酰胺(13.3mg,30.7％产率)，其为黄色固体的甲酸盐。LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.02，[M+H]+＝354.1，方法＝B；1H NMR(400MHz,CD3OD)δ9.30(s,1H),8.34(s,1H),7.35(s,1H),6.98(s,1H),6.63(s,1H),5.00-4.79(m,1H),2.19-2.16(m,1H),2.114(s,3H),1.87-1.80(m,1H),1.28-1.19(m,1H)。
实施例56：
8-氨基-6-(4-乙基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基氨基甲酸苄基酯(化合物57)
Figure BDA0002289356600003091
步骤1：6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-基氨基甲酸苄基酯
Figure BDA0002289356600003092
在室温，将6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-胺(100mg,0.47mmol)、氯甲酸苄基酯(1.0mL,7.33mmol)和吡啶(1.0mL,12.36mmol)在二氯甲烷(10mL)中的混合物搅拌过夜。浓缩该反应，且所得残余物用水洗涤并过滤，得到N-(6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-基)氨基甲酸苄基酯(120mg,53％产率)，其为黄色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝348.0。
步骤2：8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基氨基甲酸苄基酯
Figure BDA0002289356600003093
在110℃，将N-(6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-基)氨基甲酸苄基酯(120mg,0.34mmol)和氨(25％在水中，2.0mL,105.88mmol)在1,4-二噁烷(2mL)中的混合物搅拌2小时。浓缩该反应，得到N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)氨基甲酸苄基酯(110mg,89％产率)，其为黄色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝329.1。
步骤3：8-氨基-6-(4-乙基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基氨基甲酸苄基酯
Figure BDA0002289356600003101
在110℃、在氩气中，将N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)氨基甲酸苄基酯(105mg,0.32mmol)、4-乙基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡啶(150mg,0.64mmol)、X-phos(20mg,0.04mmol)、Xphos Pd G2(20mg,0.03mmol)和K2CO3(150mg,1.09mmol)在1,4-二噁烷(6mL)和水(1mL)中的混合物搅拌2小时。浓缩该反应，并经反相色谱提纯(甲醇45-55/0.05％甲酸/水)，得到N-[8-氨基-6-(4-乙基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]氨基甲酸苄基酯(9mg,7％产率)，其为白色固体(甲酸盐)。LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.53，[M+H]+＝400.2，方法＝B；1H NMR(400MHz,CD3OD)δ9.26(s,1H),8.48(s,1H),8.50(s,1H),8.10(s,1H),7.48-7.34(m,6H),6.97(s,1H),5.27(s,2H),2.83(q,J＝7.6Hz,2H),1.19(t,J＝7.6Hz,3H)。
实施例57：
(±)-顺式-N-(8-氨基-6-(6-甲基-2-氧代吲哚-5-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2- 氟环丙烷甲酰胺(化合物58)
Figure BDA0002289356600003102
步骤1：5-溴-6-甲基吲哚-2-酮
Figure BDA0002289356600003103
在20℃，将5-甲基-3H-1,3-苯并噁唑-2-酮(500mg,3.35mmol)和1-溴-2,5-吡咯烷二酮(656mg,3.69mmol)在乙酸(10mL)中的混合物搅拌16小时。该反应混合物用水稀释(25mL)并继续搅拌15分钟。然后过滤该混合物并用水洗涤(5mL x 2)，得到6-溴-5-甲基-3H-1,3-苯并噁唑-2-酮(600mg,77％产率)，其为白色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝228.2。
步骤2：6-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吲哚-2-酮
Figure BDA0002289356600003111
在100℃、在N2中，将5-溴-6-甲基-吲哚-2-酮(200mg,0.88mmol)、4,4,4',4',5,5,5',5'-八甲基-2,2'-双(1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷)(336mg,1.33mmol)、Pd(dppf)Cl2(64mg,0.09mmol)、乙酸钾(86mg,0.88mmol)和1,4-二噁烷(10mL)的混合物搅拌3小时。将该反应混合物浓缩，并用硅胶色谱提纯，用0-30％乙酸乙酯/石油醚洗脱，得到6-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吲哚-2-酮(150mg,56％产率)，其为黄色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝274.2。
步骤3：(±)-顺式-N-(8-氨基-6-(6-甲基-2-氧代吲哚-5-基)-2,7-二氮杂萘-3- 基)-2-氟环丙烷甲酰胺
Figure BDA0002289356600003112
在105℃、在N2中，将6-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吲哚-2-酮(100mg,0.33mmol)、顺式-N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氟-环丙烷甲酰胺(93mg,0.33mmol)、Pd(PPh3)4(38mg,0.03mmol)、K2CO3(91mg,0.67mmol)在1,4-二噁烷(10mL)和水(1mL)中的混合物搅拌5小时。将该反应混合物浓缩，并经硅胶色谱提纯，用0-10％甲醇/二氯甲烷洗脱，得到(±)-顺式-N-[8-氨基-6-(6-甲基-2-氧代-吲哚-5-基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-氟-环丙烷甲酰胺(20mg 15％产率)，其为白色固体。LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.535，[M+H]+＝392.1，方法＝C；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.95(s,1H),10.42(s,1H),9.33(s,1H),8.19(s,1H),7.28(s,1H),7.20(s,2H),6.82(s,1H),6.70(s,1H),5.05-4.83(m,1H),3.46(s 2H),2.35(s,3H),2.30-2.21(m,1H),1.71-1.59(m,1H),1.23-1.13(m,1H)。
实施例58：
(±)-顺式-N-(8-氨基-6-(6-(2-羟基丙-2-基)-4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂 萘-3-基)-2-氟环丙烷甲酰胺(化合物59)
步骤1：2-(5-溴-4-甲基吡啶-2-基)丙-2-醇
Figure BDA0002289356600003122
在-78℃、在N2中，向2,5-二溴-4-甲基吡啶(2g,7.97mmol)的甲苯(30mL)溶液中添加n-BuLi溶液(2.5M在己烷中，4.8mL,11.96mmol)。在-78℃，搅拌该混合物30分钟。在-78℃，逐滴添加丙酮(1.85g,31.88mmol)。在20℃搅拌该混合物2小时。该反应混合物用饱和NH4Cl水溶液(100mL)洗涤，且该混合物经乙酸乙酯(100mL x 3)萃取。合并该有机萃取物，在真空下浓缩。该残余物经硅胶快速色谱提纯，用石油醚/乙酸乙酯(20:1至3:1)洗脱，得到2-(5-溴-4-甲基-2-吡啶基)丙-2-醇(1.5g,82％产率)，其为白色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝230.2。
步骤2：2-(4-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡啶-2- 基)丙-2-醇
Figure BDA0002289356600003123
向压力反应管中添加2-(5-溴-4-甲基-2-吡啶基)丙-2-醇(200mg,0.87mmol)、双(频哪醇合)二硼(264mg,1.04mmol)、Pd(dppf)Cl2(63mg,0.09mmol)、乙酸钾(170mg,1.74mmol)和1,4-二噁烷(8mL)。在95℃搅拌该混合物4小时。该粗产物被用于下一步骤中且无需进一步提纯。LCMS(ESI):[M+H]+＝278.2。
步骤3：(±)-顺式-N-(8-氨基-6-(6-甲基-2-氧代吲哚-5-基)-2,7-二氮杂萘-3- 基)-2-氟环丙烷甲酰胺
Figure BDA0002289356600003131
在100℃、在氮气中，将2-[4-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-2-吡啶基]丙-2-醇(100mg,0.36mmol)、Pd(t-Bu3P)2(18mg,0.04mmol)、(±)-顺式-N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氟-环丙烷甲酰胺(101mg,0.36mmol)和K2CO3(99mg,0.72mmol)在1,4-二噁烷(10mL)和水(1mL)中的混合物搅拌3小时。浓缩该反应混合物，且该残余物经硅胶色谱提纯，用0-100％乙酸乙酯/石油醚洗脱，得到(±)-顺式-N-[8-氨基-6-[6-(1-羟基-1-甲基-乙基)-4-甲基-3-吡啶基]-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-氟-环丙烷甲酰胺(61mg,43％产率)，其为白色固体。LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.309，[M+H]+＝396.1，方法＝A；1H NMR(400MHz,CD3OD)δ9.29(s,1H),8.48(s,1H),8.32(s,1H),7.65(s,1H),6.98(s,1H),4.99-4.78(m,1H),2.46(s,3H),2.19-2.15(m,1H),1.86-1.80(m,1H),1.59(s 6H),1.26-1.20(m,1H)。
实施例59：
顺式-N-(8-氨基-6-(4-乙基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氰基环丙烷甲 酰胺(化合物60)
Figure BDA0002289356600003132
步骤1：(±)-顺式-N-(8-(双(4-甲氧基苄基)氨基)-6-(4-乙基吡啶-3-基)-2,7- 二氮杂萘-3-基)-2-氰基环丙烷甲酰胺
Figure BDA0002289356600003133
向(±)-顺式-2-氰基环丙烷甲酸(100mg,0.77mmol)和DMF(0.01mL)的二氯甲烷(10mL)溶液中添加草酰氯(ethanedioyl dichloride)(0.09mL,0.93mmol)，在室温搅拌该混合物2小时。浓缩该混合物，且在0℃将该残余物逐滴添加至3-(4-乙基-3-吡啶基)-N1,N1-双[(4-甲氧基苯基)甲基]-2,7-二氮杂萘-1,6-二胺(390mg,0.77mmol)和吡啶(2mL)在二氯甲烷(10mL)中的混合物中。在室温搅拌所得混合物2小时，然后用二氯甲烷(40mL)稀释，并用水洗涤(10mL x 2)。合并浓缩该合并的有机层，且该残余物经硅胶色谱提纯，用0-100％乙酸乙酯/石油醚洗脱，得到(±)-反式-N-[8-[双[(4-甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-(4-乙基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-氰基-环丙烷甲酰胺(200mg,43％产率)，其为棕色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝599.2。
步骤2：(±)-顺式-N-(8-氨基-6-(4-乙基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氰 基环丙烷甲酰胺
Figure BDA0002289356600003141
在80℃，将(±)-反式-N-[8-[双[(4-甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-(4-乙基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-氰基-环丙烷甲酰胺(200mg,0.33mmol)和TFA(8mL)的混合物搅拌1小时。浓缩该混合物，并用NH3/甲醇(7N)碱化。该残余物经硅胶色谱提纯，用0-100％乙酸乙酯/石油醚洗脱，得到(±)-反式-N-[8-氨基-6-(4-乙基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-氰基-环丙烷甲酰胺(60mg,50％产率)，其为白色固体。LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.593，[M+H]+＝359.1，方法＝C；1H NMR(400MHz,CD3OD)δ9.32(s,1H),8.50(s,1H),8.48(d,J＝5.2Hz,1H),8.37(s,1H),7.44(d,J＝5.2Hz,1H),7.00(s,1H),2.83(q,J＝7.6Hz,2H),2.56-2.50(m,1H),2.18-2.12(m,1H),1.71-1.67(m,1H),1.55-1.50(m,1H),1.19(t,J＝7.2Hz,3H)。
实施例60：
(±)-顺式-N1-(8-氨基-6-(4-乙基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)环丙烷-1, 2-二甲酰胺(化合物61)
Figure BDA0002289356600003151
将(±)-顺式-N-[8-[双[(4-甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-(4-乙基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-氰基-环丙烷甲酰胺(200mg,0.33mmol)和TFA(8mL)的混合物在80℃搅拌1小时。浓缩该混合物，并用中的NH3/甲醇(7N)碱化。该残余物经硅胶色谱提纯，用0-100％乙酸乙酯/石油醚洗脱，得到(±)-顺式-N1-(8-氨基-6-(4-乙基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)环丙烷-1,2-二甲酰胺(23mg,18.4％产率)，其为白色固体。LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.449，[M+H]+＝377.1，方法＝C；1H NMR(400MHz,CD3OD)δ9.28(s,1H),8.49(s,1H),8.47(d,J＝5.2Hz,1H),8.37(s,1H),7.44(d,J＝5.2Hz,1H),6.95(s,1H),2.83(q,J＝7.6Hz,2H),2.35-2.29(m,1H),2.19-2.13(m,1H),1.73-1.68(m,1H),1.37-1.32(m,1H),1.18(t,J＝7.2Hz,3H)。
实施例61：
(±)-顺式-N-(8-氨基-6-(2,4-二甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氟环 丙烷甲酰胺(化合物62)
步骤1：2,4-二甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡啶
Figure BDA0002289356600003153
在110℃、在N2中，将3-溴-2,4-二甲基-吡啶(500mg,2.69mmol)，4,4,4',4',5,5,5',5'-八甲基-2,2'-bi(1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷)(1023mg,4.03mmol)、Pd(dppf)Cl2(219mg,0.27mmol)和乙酸钾(526mg,5.37mmol)在1,4-二噁烷(15mL)中的混合物搅拌5小时。该混合物无需提纯直接用于下一步骤中。LCMS(ESI):[M+H]+＝234.1。
步骤2：(±)-顺式-N-(8-氨基-6-(2,4-二甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)- 2-氟环丙烷甲酰胺
Figure BDA0002289356600003161
在110℃、在N2中，将2,4-二甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡啶(100mg,0.43mmol)、(±)-顺式-N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氟-环丙烷甲酰胺(120mg,0.43mmol)、Pd(PPh3)4(49mg,0.04mmol)和K2CO3(118mg,0.86mmol)在含水(1mL)的1,4-二噁烷(10mL)中的混合物搅拌5小时。将该反应混合物浓缩，且该残余物经硅胶色谱提纯，用0-15％甲醇/二氯甲烷洗脱，得到(±)-顺式-N-[8-氨基-6-(2,4-二甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-氟-环丙烷甲酰胺(25mg,16.6％产率)，其为白色固体。LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.556，[M+H]+＝352.1，方法＝C；1H NMR(400MHz,CD3OD)δ9.32(s,1H),8.32(d,J＝5.2Hz,1H),8.31(s,1H),7.25(d,J＝5.2Hz,1H),6.86(s,1H),4.98-4.80(m,1H),2.35(s,3H),2.20(s,3H),2.18-2.15(m,1H),1.87-1.79(m,1H),1.26-1.20(m,1H)。
实施例62：
(±)-顺式-N-(8-氨基-6-(1-甲基-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-7-基)-2,7-二氮杂 萘-3-基)-2-氟环丙烷甲酰胺(化合物63)
Figure BDA0002289356600003162
步骤1：7-溴-1-甲基-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶
Figure BDA0002289356600003163
向7-溴-1H-吡咯并[3,2-C]吡啶(700mg,3.55mmol)的DMF(7mL)溶液中添加氢化钠(171mg,4.26mmol)。在25℃，将所得混合物搅拌0.5小时。添加碘甲烷(656mg,4.62mmol)并搅拌1小时。该反应混合物经水(30mL)淬灭，并用乙酸乙酯(30mL x 2)萃取。合并的乙酸乙酯层用水和盐水洗涤，经Na2SO4干燥，并在真空中浓缩，得到7-溴-1-甲基-吡咯并[3,2-c]吡啶(640mg,81％产率)，其为黄色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝211.0。
步骤2：1-甲基-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-7-基硼酸
Figure BDA0002289356600003171
在-78℃，向7-溴-1-甲基-吡咯并[3,2-c]吡啶(640mg,3.03mmol)的THF(15mL)溶液中添加n-BuLi(2.5M在己烷中)(1.8mL,4.55mmol)。所得混合物搅拌0.5小时。添加硼酸三-异丙基酯(855mg,4.55mmol)，且该反应缓慢温热至室温。该反应混合物经水淬灭。在真空中除去THF。该混合物用乙酸乙酯洗涤。用1M HCl将该水相调节至pH＝5，然后过滤。该湿滤饼用水和乙酸乙酯洗涤，并在真空中干燥，得到(1-甲基吡咯并[3,2-c]吡啶-7-基)硼酸(520mg,97％产率)，其为米色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝177.1。
步骤3：(±)-顺式-N-(8-氨基-6-(1-甲基-1H-吡咯并[3,2-c]吡啶-7-基)-2,7-二 氮杂萘-3-基)-2-氟环丙烷甲酰胺
在100℃，将(±)-顺式-N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氟-环丙烷甲酰胺(70mg,0.25mmol)、(1-甲基吡咯并[3,2-c]吡啶-7-基)硼酸(110mg,0.62mmol)、Xphos PdG2(10mg,0.01mmol)、X-phos(12mg,0.02mmol)和乙酸钾(73mg,0.75mmol)在1,4-二噁烷(2mL)和水(0.2mL)中的混合物搅拌2小时。该反应混合物用乙酸乙酯稀释(10mL)并过滤。浓缩该滤液，且该残余物经制备型TLC和反相快速色谱提纯(ODS,乙腈/水+0.5％NH4HCO3，0:1至1:1)，得到(±)-顺式-N-[8-氨基-6-(1-甲基吡咯并[3,2-c]吡啶-7-基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-氟-环丙烷甲酰胺(9mg,9.6％产率)，其为黄色固体。LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.58，[M+H]+＝377.1，方法＝C；1H NMR(400MHz,CD3OD)：9.28(s,1H),8.84(s,1H),8.35(s,1H),8.25(d,J＝6.0Hz,1H),7.55(d,J＝6.0Hz,1H),7.32(s,1H),7.06(s,1H),4.99-4.82(m,1H),4.07(s,3H),2.20-2.16(m,1H),1.88-1.81(m,1H),1.27-1.23(m,1H)。
实施例63：
(±)-顺式-N-[8-氨基-6-(4-乙基-1-甲基-6-氧代-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3- 基]-2-氟-环丙烷甲酰胺(化合物64)
步骤1：5-溴-4-乙基-吡啶-2-胺
Figure BDA0002289356600003182
在0℃、15分钟内，向搅拌中的2-氨基-4-乙基吡啶(5.0g,40.9mmol)的氯仿(200mL)溶液分批添加NBS(8.7g,48.9mmol)。在该反应完成后，直接通过硅胶色谱提纯该混合物(乙酸乙酯：石油醚＝1:5至1:2)，得到5-溴-4-乙基-吡啶-2-胺(7g,72％产率)，其为淡黄色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝201.1。
步骤2：5-溴-4-乙基-吡啶-2-醇
Figure BDA0002289356600003183
在-20℃，向5-溴-4-乙基-吡啶-2-胺(7.0g,33.8mmol)的浓盐酸(70mL)溶液中分批添加NaNO2水溶液(4.8g,69.6mmol)。在搅拌1小时后，在3小时内将该反应混合物温热至室温。添加10M NaOH水溶液(16g NaOH在40mL水中)以调节该pH至12，同时温度保持在0℃。该反应混合物经二氯甲烷(3x25mL)萃取。然后，用水洗涤该合并的萃取物，干燥并浓缩，得到5-溴-4-乙基-吡啶-2-醇(2.0g,24％产率)，其为白色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝202.1。
步骤3：5-溴-4-乙基-1-甲基-吡啶-2-酮
Figure BDA0002289356600003191
在烧瓶中，将K2CO3(1.4g,10.1mmol)和碘甲烷(1.1g,7.8mmol)添加5-溴-4-乙基-吡啶-2-醇(1.0g,4.9mmol)的乙腈(20mL)溶液中。在25℃搅拌该反应混合物过夜，然后过滤。该滤液在H2O(15mL)和CH2Cl2(2x 10mL)之间分隔。该合并的有机层经Na2SO4干燥并浓缩。该残余物经硅胶色谱提纯(石油醚：乙酸乙酯＝9:1)，得到5-溴-4-乙基-1-甲基-吡啶-2-酮(754mg,71％产率)，其为白色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝216.1。
步骤4：4-乙基-1-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡 啶-2-酮
将5-溴-4-乙基-1-甲基-吡啶-2-酮(700mg,3.2mmol)、双(频哪醇合)二硼(2060mg,8.1mmol)、Pd(dppf)Cl2(470mg,0.6mmol)和乙酸钾(1270mg,13mmol)的1,4-二噁烷(20mL)溶液加热至70℃2小时。然后过滤该混合物，并用硅胶色谱提纯(乙酸乙酯:石油醚＝1:4)，得到4-乙基-1-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡啶-2-酮(600mg,70％产率)，其为白色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝264.1。
步骤5：(±)-顺式-N-[8-氨基-6-(4-乙基-1-甲基-6-氧代-3-吡啶基)-2,7-二氮 杂萘-3-基]-2-氟-环丙烷甲酰胺
Figure BDA0002289356600003193
依次将(±)-顺式-N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氟-环丙烷甲酰胺(100mg,0.4mmol)、Pd(PPh3)4(41mg,0.04mmol)和K3PO4(151mg,0.7mmol)添加4-乙基-1-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡啶-2-酮(375mg,1.4mmol)在1,4-二噁烷(8mL)和水(1.5mL)中的溶液中。在100℃搅拌该反应混合物2小时。在真空中将该反应混合物浓缩，并在硅胶色谱上提纯(甲醇/二氯甲烷，1:9)，得到(±)-顺式-N-[8-氨基-6-(4-乙基-1-甲基-6-氧代-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-氟-环丙烷甲酰胺(6mg,4.4％产率)，其为白色固体。LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.43，[M+H]+＝382.1，方法＝G；1H NMR(400MHz,CD3OD)δ9.16(s,1H),8.19(s,1H),7.65(s,1H),6.84(s,1H),6.40(s,1H),4.88-4.67(m,1H),3.50(s,3H),2.64(q,J＝7.6Hz,2H),2.12-1.99(m,1H),1.79-1.63(m,1H),1.12-1.10(m,1H),0.98(t,J＝7.6Hz,3H)。
实施例64：
(R)-1-(8-氨基-6-(4-乙基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-3-(1-甲基-2-氧代 吡咯烷-3-基)脲(化合物65)
步骤1：(R)-1-(8-(双(4-甲氧基苄基)氨基)-6-(4-乙基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂 萘-3-基)-3-(1-甲基-2-氧代吡咯烷-3-基)脲
Figure BDA0002289356600003202
在0℃，向三光气(108mg,0.36mmol)的THF(4mL)溶液中添加在THF(5mL)中的3-(4-乙基-3-吡啶基)-N1,N1-双[(4-甲氧基苯基)甲基]-2,7-二氮杂萘-1,6-二胺(180mg,0.18mmol)和Et3N(0.5mL,3.56mmol)。在0℃搅拌该混合物1小时。向此添加(3R)-3-氨基-1-甲基-吡咯烷-2-酮(450mg,3.94mmol)。该混合物温热至室温过夜。该混合物直接经硅胶色谱提纯(二氯甲烷/甲醇，20:1)，得到1-[8-[双[(4-甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-(4-乙基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-3-[(3R)-1-甲基-2-氧代-吡咯烷-3-基]脲(32mg,28％产率)，其为淡黄色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝646.3。
步骤2：(R)-1-(8-氨基-6-(4-乙基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-3-(1-甲基- 2-氧代吡咯烷-3-基)脲
Figure BDA0002289356600003211
将1-[8-[双[(4-甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-(4-乙基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-3-[(3R)-1-甲基-2-氧代-吡咯烷-3-基]脲(27mg,0.04mmol)的TFA(3mL)溶液加热至回流3小时。蒸发该混合物，并用铵/甲醇中和。所得残余物用反相色谱提纯(乙腈0-40/0.1％NH4HCO3/水)，得到1-[8-氨基-6-(4-乙基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-3-[(3R)-1-甲基-2-氧代-吡咯烷-3-基]脲(5.5mg,33％产率)，其为白色固体。LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.501，[M+H]+＝406.2，方法＝C；1H NMR(400MHz,CD3OD)：δ9.29(s,1H),8.50(s,2H),7.52(s,1H),7.45(d,J＝5.2Hz,1H),6.89(s,1H),4.49(t,J＝9.2Hz,1H),3.47(dd,J＝4.0,9.2Hz,2H),2.93(s,3H),2.83(q,J＝7.6Hz,2H),2.62-2.57(m,1H),2.09-2.04(m,1H),1.19(t,J＝7.6Hz,3H)。
实施例65：
(±)-顺式-N-(8-氨基-6-(4-乙基-6-甲氧基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)- 2-氟环丙烷甲酰胺(化合物66)
Figure BDA0002289356600003212
步骤1：4-乙基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡啶-2-胺
将5-溴-4-乙基-2-甲氧基-吡啶(400mg,1.85mmol)、双(频哪醇合)二硼(940mg,3.7mmol)、Pd(dppf)Cl2(270mg,0.37mmol)和乙酸钾(560mg,5.71mmol)的1,4-二噁烷(30mL)溶液加热至70℃2小时。过滤该混合物并蒸发后，得到4-乙基-2-甲氧基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡啶(400mg,82％产率)，其为黑色固体，直接用于下一反应中。LCMS(ESI):[M+H]+＝264.2。
步骤2：(±)-顺式-N-(8-氨基-6-(4-乙基-6-甲氧基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘- 3-基)-2-氟环丙烷甲酰胺
Figure BDA0002289356600003221
在氩气氛围中，将4-乙基-2-甲氧基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡啶(380mg,1.44mmol)、(±)-顺式-N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氟-环丙烷甲酰胺(100mg,0.36mmol)、K3PO4(630mg,2.99mmol)、Pd2(dba)3(140mg,0.15mmol)和X-phos(76mg,0.16mmol)在1,4-二噁烷(24mL)和水(4mL)中的溶液加热至80℃3小时。该混合物用反相色谱提纯(乙腈17-47/0.05％碳酸氢铵)，得到(1S,2S)-N-[8-氨基-6-(4-乙基-6-甲氧基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-氟-环丙烷甲酰胺(6mg,1.1％产率)，其为白色固体。LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.782，[M+H]+＝382.1，方法＝C；1H NMR(400MHz,CD3OD)：δ9.29(s,1H),8.30(s,1H),8.11(s,1H),6.94(s,1H),6.79(s,1H),4.98-4.87(m,1H),3.96(s,3H),2.81(q,J＝6.0Hz,2H),2.19-2.16(m,1H),1.86-1.81(m,1H),1.26-1.22(m,1H),1.14(t,J＝6.0Hz,3H)。
实施例66：
顺式-N-(8-氨基-6-(6-氨基-4-乙基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氟环丙 烷甲酰胺(化合物67)
Figure BDA0002289356600003222
步骤1：4-乙基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡啶-2-胺
Figure BDA0002289356600003231
将5-溴-4-乙基-吡啶-2-胺(500mg,2.49mmol)、双(频哪醇合)二硼(750mg,2.95mmol)、Pd(dppf)Cl2(200mg,0.27mmol)和乙酸钾(750mg,7.65mmol)在1,4-二噁烷(30mL)中的溶液加热至120℃2小时。过滤该混合物并蒸发，得到4-乙基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡啶-2-胺(500mg,35％产率)，其为黑色浆液并直接用于下一反应中。LCMS(ESI)[M+H]+＝249.1。
步骤2：(±)-顺式-N-(8-氨基-6-(6-氨基-4-乙基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3- 基)-2-氟环丙烷甲酰胺
Figure BDA0002289356600003232
将4-乙基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡啶-2-胺(400mg,0.64mmol)、(±)-顺式-N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氟-环丙烷甲酰胺(100mg,0.36mmol)、Pd(PPh3)4(80mg,0.07mmol)和K3PO4(280mg,1.33mmol)在1,4-二噁烷(24mL)和水(4mL)中的溶液加热至100℃3小时。该混合物经硅胶色谱提纯(二氯甲烷:甲醇，10:1)，得到(1S,2S)-N-[8-氨基-6-(6-氨基-4-乙基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-氟-环丙烷甲酰胺(30mg,13％产率)，其为白色固体。LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.476，[M+H]+＝367.2，方法＝G；1H NMR(400MHz,CD3OD)：δ9.26(s,1H),8.28(s,1H),7.90(s,1H),6.90(s,1H),6.57(s,1H),5.00-4.79(m,1H),2.74(q,J＝7.6Hz,2H),2.19-2.13(m,1H),1.88-1.80(m,1H),1.29-1.19(m,1H),1.11(t,J＝7.6Hz,3H)。
实施例67：
N-[8-氨基-6-(4-乙基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]环丙烯-1-甲酰胺(化合 物68)
Figure BDA0002289356600003241
步骤1：N-[8-[双[(4-甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-(4-乙基-3-吡啶基)-2,7-二氮 杂萘-3-基]-2-硝基-环丙烷甲酰胺
Figure BDA0002289356600003242
在25℃，将草酰氯(0.2mL,2.35mmol)逐滴添加至2-硝基环丙烷甲酸(200mg,1.53mmol)和DMF(20mg,0.27mmol)在二氯甲烷(4mL)中的悬浮液中，并在25℃搅拌该混合物1小时。该反应混合物由悬浮液变为溶液。在室温浓缩该混合物，以除去过量的草酰氯。将该残余物溶于二氯甲烷(1mL)，并在0℃逐滴添加至3-(4-乙基-3-吡啶基)-N1,N1-双[(4-甲氧基苯基)甲基]-2,7-二氮杂萘-1,6-二胺(800mg,1.58mmol)和三乙胺(700mg,6.93mmol)的二氯甲烷(8mL)溶液中，并在0℃搅拌1小时。将该反应混合物蒸发，且所得残余物经硅胶色谱提纯(石油醚/乙酸乙酯＝1:1至1:2，当石油醚/乙酸乙酯为1/2时Rf＝0.8)，得到N-[8-[双[(4-甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-(4-乙基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-硝基-环丙烷甲酰胺(240mg,25％产率)，其为棕色固体。LCMS(ESI)[M+H]+＝619.2。
步骤2：N-[8-[双[(4-甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-(4-乙基-3-吡啶基)-2,7-二氮 杂萘-3-基]-2-硝基-环丙烷甲酰胺
Figure BDA0002289356600003243
在50℃，将N-[8-[双[(4-甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-(4-乙基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-硝基-环丙烷甲酰胺(230mg,0.37mmol)和铁(400mg,7.14mmol)在乙酸(5mL)中的混合物搅拌1小时。将该反应混合物冷却至室温。添加乙酸乙酯/甲醇的5:1混合物(150mL)。然后过滤并浓缩该混合物。向该残余物中添加水(20mL)，用饱和NaHCO3调节至pH7-8并用乙酸乙酯(50mL x 3)萃取。合并该乙酸乙酯层，经Na2SO4干燥，过滤并蒸发。该残余物经提纯(石油醚/乙酸乙酯1/2，当石油醚/乙酸乙酯为1/2时Rf＝0.2)，得到N-[8-[双[(4-甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-(4-乙基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-羟基-环丙烷甲酰胺(45mg,20％产率)，其为棕色固体。LCMS(ESI)[M+H]+＝590.2。
步骤3：N-[8-氨基-6-(4-乙基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]环丙烯-1-甲酰胺
Figure BDA0002289356600003251
在80℃，将N-[8-[双[(4-甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-(4-乙基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-羟基-环丙烷甲酰胺(42mg,0.071mmol)在TFA(4mL)中的混合物搅拌1.5小时，然后蒸发。将该残余物悬浮在甲醇中(1mL)。添加7N NH3-甲醇溶液直至pH在9-10之间。然后，该混合物经快速色谱提纯(C18，甲醇/水至甲酸/甲醇/水)，得到N-[8-氨基-6-(4-乙基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]环丙烯-1-甲酰胺(15mg,56％产率)的甲酸盐，其为浅棕色固体。LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.336，[M+H]+＝332.1，方法＝A；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.42(s,1H),8.52-8.48(m,3H),8.4(brs，1H),7.58(dd,J＝1.6,5.6Hz,1H),7.39(s,2H),7.35(d,J＝4.8Hz,1H),7.01(s,1H),6.34(dd,J＝1.6,4.4Hz,1H),4.79(s,2H),2.80(q,J＝7.6Hz,2H),1.10(t,J＝7.6Hz,3H)。
实施例68：
5-甲基-1H-吡唑-3-甲酸[8-氨基-6-(4-乙基吡啶-3-基)-[2,7]二氮杂萘-3-基] 酰胺(化合物70)
Figure BDA0002289356600003252
步骤1：5-甲基-1H-吡唑-3-甲酸[8-[双-(4-甲氧基苄基)氨基]-6-(4-乙基吡啶-3 基)-[2,7]二氮杂萘-3-基]酰胺
Figure BDA0002289356600003261
向5-甲基-1H-吡唑-3-甲酸(126mg,1mmol)在无水二氯甲烷(5mL)的悬浮液中添加草酰氯(0.423mL,5mmol)和DMF(2滴)。在室温搅拌该混合物4.5小时，然后浓缩。用无水氯仿共沸该残余物两次，然后在真空下浓缩，得到粗的酰氯。其溶于无水二氯甲烷(2mL)中。将此溶液的一半(0.5mmol)添加至3-(4-乙基吡啶-3-基)-N1,N1-双-(4-甲氧基苄基)-[2,7]二氮杂萘-1,6-二胺(126mg,0.25mmol)的二氯甲烷(2mL)溶液中，然后添加吡啶(0.1mL,1.24mmol)。在室温搅拌该混合物4.5小时，然后添加水(约5mL)，并分离该相。该水相经二氯甲烷(3x)萃取。将该合并的有机萃取物干燥(Na2SO4)并蒸发。该粗产物经硅胶色谱提纯(50-100％乙酸乙酯/环己烷)，得到所述标题化合物(47mg,31％产率)。LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.51，[M+H]+＝614，方法＝I。
步骤2：5-甲基-1H-吡唑-3-甲酸[8-氨基-6-(4-乙基吡啶-3-基)-[2,7]二氮杂萘- 3-基]酰胺
Figure BDA0002289356600003262
在80℃，将5-甲基-1H-吡唑-3-甲酸[8-[双-(4-甲氧基苄基)氨基]-6-(4-乙基吡啶-3基)-[2,7]二氮杂萘-3-基]酰胺(47mg,0.077mmol)的TFA(2mL)溶液加热5小时，然后蒸发。将该残余物悬浮于2M氨/甲醇溶液中。添加甲醇以溶解所有的物质。将该溶液吸收入
Figure BDA0002289356600003263
HM-N中，加载到硅胶柱上并用0-10％甲醇/二氯甲烷洗脱，得到所述标题化合物(27mg,94％产率)。LCMS(ESI):RT(分钟)＝2.47，[M+H]+＝374，方法＝J；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.28(宽s，1H),9.65(宽s，1H),9.43(s,1H),8.54(s,1H),8.52(d,J＝5.1Hz,1H),8.35,(s,1H),7.49(宽s，2H),7.38(d,J＝5.1Hz,1H),7.04(s,1H),6.62(s,1H),2.80(q,J＝7.2Hz,2H),2.31(s,3H),1.11(t,J＝7.2Hz,3H)。
实施例69：
2H-吡唑-3-甲酸[8-氨基-6-(4-乙基吡啶-3-基)-[2,7]二氮杂萘-3-基]酰胺(化 合物71)
Figure BDA0002289356600003271
步骤1：2H-吡唑-3-甲酸[8-[双-(4-甲氧基苄基)氨基]-6-(4-乙基吡啶-3-基)- [2,7]二氮杂萘-3-基]酰胺
Figure BDA0002289356600003272
向1H-吡唑-3-甲酸(224mg,2mmol)在无水二氯甲烷(10mL)中的悬浮液中添加草酰氯(0.846mL,10mmol)和DMF(2滴)。在室温搅拌该混合物4.5小时，然后蒸发。用无水氯仿共沸该残余物两次，然后在真空中干燥，得到粗的酰氯。向此物质(80mg,0.6mmol)和3-(4-乙基吡啶-3-基)-N1,N1-双-(4-甲氧基苄基)-[2,7]二氮杂萘-1,6-二胺(150mg,0.29mmol)在二氯甲烷(2.5mL)中的混合物中添加吡啶(0.12mL,1.44mmol)。在室温搅拌该混合物5小时，然后添加水，且分离该相。该水相用二氯甲烷萃取三次。干燥该合并的有机萃取物(Na2SO4)并蒸发。该粗产物在硅胶上经色谱分离(用50-100％乙酸乙酯/环己烷洗脱)，得到所述标题化合物(66mg,38％产率)。LCMS(ESI):RT(分钟)＝3.10，[M+H]+＝600，方法＝K。
步骤2：2H-吡唑-3-甲酸[8-氨基-6-(4-乙基吡啶-3-基)-[2,7]二氮杂萘-3-基]酰 胺
Figure BDA0002289356600003273
在80℃，将2H-吡唑-3-甲酸[8-[双-(4-甲氧基苄基)氨基-6-(4-乙基吡啶-3-基)-[2,7]二氮杂萘-3-基]酰胺(66mg,0.11mmol)的TFA(2mL)溶液加热3.5小时，然后蒸发。将该残余物悬浮于2M氨/甲醇溶液中。另添加二氯甲烷和甲醇以溶解所有物质。将此溶液蒸发到
Figure BDA0002289356600003283
HM-N上，负载于硅胶柱上并用0-10％甲醇/二氯甲烷洗脱。所得产物用水研磨，且滤出该固体，用水洗涤并干燥(真空，60℃)，得到所述标题化合物(17mg,43％产率)。LCMS(ESI):RT(分钟)＝2.28，[M+H]+＝360，方法＝J；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.05(宽，s，1H),9.59(s,1H),8.65(m,2H),8.47,(s,1H),8.31(宽，s,1H),7.94(s,1H),7.58(d,J＝5.2Hz,1H),7.25(s,1H),6.96(s,1H),2.80(q,J＝7.2Hz,2H),1.16(t,J＝7.2Hz,3H)。
实施例70：
2-甲基-2H-吡唑-3-甲酸[8-氨基-6-(4-乙基吡啶-3-基)-[2,7]二氮杂萘-3-基] 酰胺(化合物72)
步骤1：2-甲基-2H-吡唑-3-甲酸[8-[双-(4-甲氧基苄基)氨基]-6-(4-乙基吡啶- 3-基)-[2,7]二氮杂萘-3-基]酰胺
Figure BDA0002289356600003282
向2-甲基-1H-吡唑-3-甲酸(126mg,1mmol)在无水二氯甲烷(5mL)中的悬浮液添加草酰氯(0.423mL,5mmol)和DMF(2滴)。在室温搅拌该混合物4.5小时并蒸发。用无水氯仿共沸该残余物两次，然后在真空中干燥，得到粗的酰氯。其溶于无水二氯甲烷(2mL)。将此溶液的一半(0.5mmol)添加至3-(4-乙基吡啶-3-基)-N1,N1-双-(4-甲氧基苄基)-[2,7]二氮杂萘-1,6-二胺(126mg,0.25mmol)的二氯甲烷(2mL)溶液中，然后添加吡啶(0.1mL,1.24mmol)。在室温搅拌该混合物4.5小时，然后添加水(约5mL)，并分离该相。该水相经二氯甲烷(3x)萃取。干燥该合并的有机物部分(Na2SO4)并蒸发。该粗产物在硅胶上色谱分离，用50-100％乙酸乙酯/环己烷洗脱，得到所述标题化合物(61mg,40％产率)。LCMS(ESI):RT(分钟)＝3.26，[M+H]+＝614，方法＝K。
步骤2：2-甲基-2H-吡唑-3-甲酸[8-氨基-6-(4-乙基吡啶-3-基)-[2,7]二氮杂萘- 3-基]酰胺
Figure BDA0002289356600003291
在80℃，将2-甲基-1H-吡唑-3-甲酸[8-[双-(4-甲氧基苄基)氨基]-6-(4-乙基吡啶-3基)-[2,7]二氮杂萘-3-基]酰胺(61mg,0.1mmol)的TFA(2mL)溶液加热2.5小时，然后蒸发。该残余物悬浮于2M氨/甲醇。另添加甲醇以溶解所有物质。此溶液蒸发到
Figure BDA0002289356600003292
HM-N上，负载于硅胶柱上并用0-7％甲醇/二氯甲烷洗脱，得到所述标题化合物(35mg,94％产率)。LCMS(ESI):RT(分钟)＝2.44，[M+H]+＝374，方法＝J；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.06(s,1H),9.52(s,1H),8.56(s,1H),8.55(d,J＝5.4Hz,1H),8.42(s,1H),7.69(宽s，2H),7.55(d,J＝2.1Hz,1H),7.43(d,J＝5.4Hz,1H),7.38(d,J＝2.1Hz,1H),7.10(s,1H),4.14(s,3H),2.81(q,J＝7.5Hz,2H),1.13(t,J＝7.5Hz,3H)。
实施例71：
1-甲基-1H-吡唑-4-甲酸[8-氨基-6-(4-乙基吡啶-3-基)-[2,7]二氮杂萘-3-基] 酰胺(化合物73)
Figure BDA0002289356600003293
步骤1：1-甲基-1H-吡唑-4-甲酸[8-双-(4-甲氧基苄基)氨基-6-(4-乙基吡啶-3- 基)-[2,7]二氮杂萘-3-基]酰胺
Figure BDA0002289356600003294
向1-甲基-1H-吡唑-4-甲酸(126mg,1mmol)在二氯甲烷(3mL)中的悬浮液中添加草酰氯(0.43mL,5mmol)和DMF(2滴)。在室温搅拌该混合物16小时，然后蒸发。用甲苯共沸该残余物两次，得到粗的酰氯。其溶于无水二氯甲烷(1mL)中。将此溶液的一半(0.5mmol)添加至3-(4-乙基吡啶-3-基)-N1,N1-双-(4-甲氧基苄基)-[2,7]二氮杂萘-1,6-二胺(100mg,0.20mmol)的二氯甲烷(2mL)溶液中，然后添加吡啶(0.1mL,1.24mmol)。在室温搅拌该混合物1小时，然后蒸发。将该残余物再次溶于二氯甲烷并用水洗涤。干燥该有机相(PTFE筒)并蒸发。该粗产物在硅胶上色谱分离(用0-100％乙酸乙酯/二氯甲烷洗脱)，得到所述标题化合物(100mg,80％产率)。LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.57，[M+H]+＝614，方法＝I。
步骤2：1-甲基-1H-吡唑-4-甲酸[8-氨基-6-(4-乙基吡啶-3-基)-[2,7]二氮杂萘- 3-基]酰胺
在80℃，将1-甲基-1H-吡唑-4-甲酸[8-双-(4-甲氧基苄基)氨基-6-(4-乙基吡啶-3-基)-[2,7]二氮杂萘-3-基]酰胺(98mg,0.155mmol)的TFA(3mL)溶液加热1小时，然后蒸发。将该残余物溶于2M氨/甲醇。然后蒸发该混合物。将该残余物溶于热的氯仿/甲醇，且将该溶液蒸发至
Figure BDA0002289356600003303
HM-N上，负载于硅胶柱上，并用0-10％甲醇/二氯甲烷洗脱，从乙酸乙酯重结晶得到所述标题化合物。LCMS(ESI):RT(分钟)＝2.21，[M+H]+＝374，方法＝J；1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.64(s,1H),9.43(s,1H),8.51(s,1H),8.49(d,J＝5.1Hz,1H),8.47(s,1H),8.36(s,1H),8.18(s,1H),7.35(d,J＝5.1Hz,1H),7.33(宽，2H),6.97(s,1H),3.90(s,3H),2.80(q,J＝7.3Hz,2H),1.11(t,J＝7.3Hz,3H)。
实施例72：
3-(4-乙基吡啶-3-基)-N6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-[2,7]二氮杂萘-1,6-二胺 (化合物74)
Figure BDA0002289356600003302
步骤1：3-(4-乙基吡啶-3-基)-N1,N1-双-(4-甲氧基苄基)-N6-(1-甲基-1H-吡唑- 4-基)-[2,7]二氮杂萘-1,6-二胺
将3-(4-乙基吡啶-3-基)-N1,N1-双-(4-甲氧基苄基)-[2,7]二氮杂萘-1,6-二胺(126mg,0.25mmol)、4-溴-1-甲基-1H-吡唑(56mg,0.35mmol)、2-(二-叔丁基膦基)-2',4',6'-三异丙基-3,6-二甲氧基联苯(3.5mg,0.007mmol)和t-BuBrettPhos PalladacycleGen.3(6mg,0.007mmol)的混合物在无水THF(3mL)中用氩气冲洗。添加双(三甲基甲硅烷基)氨基锂(1M在甲苯中，0.77mL,0.77mmol)，并将该混合物在80℃加热18小时。添加另外量的4-溴-1-甲基-1H-吡唑(56mg)、2-(二-叔丁基膦基)-2',4',6'-三异丙基-3,6-二甲氧基联苯(7mg)和t-BuBrettPhos Palladacycle Gen.3(12mg)并继续加热24小时。该冷却的混合物用水稀释并用乙酸乙酯萃取三次。干燥该萃取物(Na2SO4)并蒸发。该粗产物在硅胶上色谱分离，用50-100％乙酸乙酯/环己烷洗脱，得到所述标题化合物(27mg,18％产率)。LCMS(ESI):RT(分钟)＝2.88，[M+H]+＝586，方法＝K。
步骤2：3-(4-乙基吡啶-3-基)-N6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-[2,7]二氮杂萘-1,6- 二胺
Figure BDA0002289356600003312
在80℃，将3-(4-乙基吡啶-3-基)-N1,N1-双-(4-甲氧基苄基)-N6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-[2,7]二氮杂萘-1,6-二胺(27mg,0.046mmol)的TFA(1.5mL)溶液加热4小时，然后蒸发。将该残余物负载于2g SCX-2筒并用甲醇洗脱然后用2M氨/甲醇洗脱。蒸发含氨的级分，得到所述标题化合物(14mg,88％产率)。LCMS(ESI):RT(分钟)＝2.10，[M+H]+＝346，方法＝J；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.21(s,1H),8.84(s,1H),8.46(s,1H&d，J＝5.0Hz,1H),7.87(s,1H),7.45(s,1H),7.32(d,J＝5.0Hz,1H),7.07(宽，2H),6.72(s,1H),6.62(s,1H),3.83(s,3H),2.78(q,J＝7.1Hz,2H),1.10(t,J＝7.1Hz,3H)。
实施例73：
3-(4-乙基吡啶-3-基)-N6-(1H-吡唑-4-基)-[2,7]二氮杂萘-1,6-二胺(化合物 75)
Figure BDA0002289356600003321
步骤1：3-(4-乙基吡啶-3-基)-N1,N1-双-(4-甲氧基苄基)-N6-(1H-吡唑-4-基)- [2,7]二氮杂萘-1,6-二胺
Figure BDA0002289356600003322
将3-(4-乙基吡啶-3-基)-N1,N1-双-(4-甲氧基苄基)-[2,7]二氮杂萘-1,6-二胺(126mg,0.25mmol)、4-溴-1H-吡唑(74mg,0.50mmol)、2-(二-叔丁基膦基)-2',4',6'-三异丙基-3,6-二甲氧基联苯(12mg,0.025mmol)和t-BuBrettPhos Palladacycle Gen.3(21mg,0.025mmol)在无水1,4-二噁烷(3mL)中的混合物用氩气冲洗。添加双(三甲基甲硅烷基)氨基锂(1M在甲苯中，1.0mL,1.0mmol)且在100℃将该混合物加热16小时。用水稀释该冷却的混合物并用乙酸乙酯萃取三次。干燥该萃取物(Na2SO4)并蒸发。该粗产物在硅胶上色谱分离(用0-5％甲醇/乙酸乙酯洗脱)，得到所述标题化合物(63mg,44％产率)。LCMS(ESI):RT(分钟)＝2.72，[M+H]+＝572，方法＝K。
步骤2：3-(4-乙基吡啶-3-基)-N6-(1H-吡唑-4-基)-[2,7]二氮杂萘-1,6-二胺
Figure BDA0002289356600003323
在80℃，将3-(4-乙基吡啶-3-基)-N1,N1-双-(4-甲氧基苄基)-N6-(1H-吡唑-4-基)-[2,7]二氮杂萘-1,6-二胺(63mg,0.11mmol)的TFA(2mL)溶液加热3小时，然后蒸发。该残余物悬浮于2M氨/甲醇。另添加甲醇以溶解所有固体。该溶液蒸发至
Figure BDA0002289356600003331
HM-N上，负载于硅胶柱上，并用0-10％甲醇/二氯甲烷洗脱，所得固体用水研磨，滤出并干燥(真空，50℃)，得到所述标题化合物(23mg,63％产率)。LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.92，[M+H]+＝332，方法＝J；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.83(v.宽，1H),9.66(宽，1H),9.47(s,1H),8.65(d,J＝5.3Hz,1H),8.58(s,1H),7.79(宽，2H),7.50(d,J＝5.3Hz,1H),6.99(s,1H),6.78(s,1H),2.68(q,J＝7.4Hz,2H),1.14(t,J＝7.4Hz,3H)。
实施例74：
3-(4-乙基吡啶-3-基)-N6-(1-甲基-1H-吡唑-3-基)-[2,7]二氮杂萘-1,6-二胺 (化合物76)
Figure BDA0002289356600003332
步骤1：3-(4-乙基吡啶-3-基)-N1,N1-双-(4-甲氧基苄基)-N6-(1-甲基-1H-吡唑- 3-基)-[2,7]二氮杂萘-1,6-二胺
Figure BDA0002289356600003333
将3-(4-乙基吡啶-3-基)-N1,N1-双-(4-甲氧基苄基)-[2,7]二氮杂萘-1,6-二胺(126mg,0.25mmol)、3-溴-1-甲基-1H-吡唑(81mg,0.50mmol)、2-(二-叔丁基膦基)-2',4',6'-三异丙基-3,6-二甲氧基联苯(12mg,0.025mmol)和t-BuBrettPhos PalladacycleGen.3(21mg,0.025mmol)在无水1,4-二噁烷(3mL)中的混合物用氩气冲洗。添加双(三甲基甲硅烷基)氨基锂(1M在甲苯中，1.0mL,1.0mmol)，并在100℃加热该混合物16小时。该冷却的混合物用水稀释，并用乙酸乙酯萃取三次。干燥该萃取物(Na2SO4)并蒸发。该粗产物在硅胶上色谱分离(用0-5％甲醇/乙酸乙酯洗脱)，得到所述标题化合物(60mg,41％产率)。LCMS(ESI):RT(分钟)＝2.94，[M+H]+＝586，方法＝K。
步骤2：3-(4-乙基吡啶-3-基)-N6-(1-甲基-1H-吡唑-3-基)-[2,7]二氮杂萘-1,6- 二胺
Figure BDA0002289356600003341
在80℃，将3-(4-乙基吡啶-3-基)-N1,N1-双-(4-甲氧基苄基)-N6-(1-甲基-1H-吡唑-3-基)-[2,7]二氮杂萘-1,6-二胺(60mg,0.10mmol)的TFA(2mL)溶液加热4.25小时，然后蒸发。将该残余物负载于2g SCX-2筒，并用甲醇洗脱然后用2M氨/甲醇洗脱。蒸发含氨的部分，得到所述标题化合物(23mg,67％产率)。LCMS(ESI):RT(分钟)＝2.24，[M+H]+＝346，方法＝J；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.37(s,1H),9.22(s,1H),8.48(s,1H),8.47(d,J＝5.1Hz,1H),7.55(d,J＝2.1Hz,1H),7.49(s,1H),7.32(d,J＝5.1Hz,1H),7.07(宽，2H),6.74(s,1H),6.10(d,J＝2.1Hz,1H),3.80(s,3H),2.79(q,J＝7.0Hz,2H),1.10(t,J＝7.0Hz,3H)。
实施例75：
3-(4-乙基吡啶-3-基)-N6-(1H-吡唑-3-基)-[2,7]二氮杂萘-1,6-二胺(化合物 77)
Figure BDA0002289356600003342
步骤1：3-(4-乙基吡啶-3-基)-N1,N1-双-(4-甲氧基苄基)-N6-(1H-吡唑-3-基)-[2,7]二氮杂萘-1,6-二胺
Figure BDA0002289356600003343
将3-(4-乙基吡啶-3-基)-N1,N1-双-(4-甲氧基苄基)-[2,7]二氮杂萘-1,6-二胺(140mg,0.28mmol)、3-溴-1-甲基-1H-吡唑(82mg,0.56mmol)、2-(二-叔丁基膦基)-2',4',6'-三异丙基-3,6-二甲氧基联苯(13mg,0.028mmol)和t-BuBrettPhos PalladacycleGen.3(24mg,0.028mmol)在无水二噁烷(3mL)中的混合物用氩气冲洗。添加双(三甲基甲硅烷基)氨基锂(1M在甲苯中，1.16mL,1.16mmol)，并在100℃加热该混合物16小时。添加另一部分的3-溴-1-甲基-1H-吡唑(82mg,0.56mmol)和双(三甲基甲硅烷基)氨基锂(1.16mL,1.16mmol)，并在100℃加热该混合物22小时。用水稀释该冷却的混合物并分离该相。该水相经乙酸乙酯萃取三次。干燥该有机部分(Na2SO4)并蒸发。在硅胶上色谱分离该粗产物(用0-5％甲醇/乙酸乙酯洗脱)，得到稍微不纯的产物，其经质谱引导型HPLC提纯(C18柱，10-95％乙腈/水+0.1％甲酸)，得到所述标题化合物(44mg,28％产率)。LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.57，[M+H]+＝572，方法＝I。
步骤2：3-(4-乙基吡啶-3-基)-N6-(1H-吡唑-3-基)-[2,7]二氮杂萘-1,6-二胺
在80℃，将3-(4-乙基吡啶-3-基)-N1,N1-双-(4-甲氧基苄基)-N6-(1H-吡唑-3-基)-[2,7]二氮杂萘-1,6-二胺(44mg,0.077mmol)的TFA(0.5mL)溶液加热1小时。用甲醇和二氯甲烷稀释该冷却的混合物，负载于2g SCX-2筒上，并用甲醇洗脱，然后用2M氨/甲醇洗脱。蒸发氨的部分且该残余物经乙醚研磨，得到所述标题化合物(20mg,80％产率)。LCMS(ESI):RT(分钟)＝2.09，[M+H]+＝332，方法＝J；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.17(宽，1H),9.40(s,1H),9.23(s,1H),8.49(s,1H),8.47(d,J＝5.2Hz,1H),7.61(宽，2H),7.33(d,J＝5.2Hz,1H),7.10(宽s，2H),6.74(s,1H),6.12(d,J＝2.1Hz,1H),2.79(q,J＝7.5Hz,2H),1.10(t,J＝7.5Hz,3H)。
实施例76：
3-(4-乙基吡啶-3-基)-N6-(1-哌啶-4-基-1H-吡唑-4-基)-[2,7]二氮杂萘-1,6- 二胺(化合物78)
Figure BDA0002289356600003352
步骤1：4-{4-[8-[双-(4-甲氧基苄基)氨基]-6-(4-乙基吡啶-3-基)-[2,7]二氮杂 萘-3-基氨基]吡唑-1-基}哌啶-1-甲酸叔丁基酯
Figure BDA0002289356600003361
将3-(4-乙基吡啶-3-基)-N1,N1-双-(4-甲氧基苄基)-[2,7]二氮杂萘-1,6-二胺(150mg,0.29mmol)、4-(4-溴吡唑-1-基)哌啶-1-甲酸叔丁基酯(195mg,0.59mmol)、2-(二-叔丁基膦基)-2',4',6'-三异丙基-3,6-二甲氧基联苯(14mg,0.029mmol)和t-BuBrettPhosPalladacycle Gen.3(24mg,0.029mmol)在无水1,4-二噁烷(3mL)中的混合物用氩气冲洗。添加双(三甲基甲硅烷基)氨基锂(1M在甲苯中，1.16mL,1.16mmol)，并将该混合物在100℃加热5.5小时。用水稀释该冷却的混合物，并用乙酸乙酯萃取三次。干燥该萃取物(Na2SO4)并蒸发。该粗产物在硅胶上色谱分离，用0-100％乙酸乙酯/环己烷洗脱，得到所述标题化合物(89mg,41％产率)。LCMS(ESI):RT(分钟)＝3.50，[M+H]+＝755，方法＝K。
步骤2：3-(4-乙基吡啶-3-基)-N6-(1-哌啶-4-基-1H-吡唑-4-基)-[2,7]二氮杂 萘-1,6-二胺
Figure BDA0002289356600003362
在80℃下，将4-{4-[8-[双-(4-甲氧基苄基)氨基]-6-(4-乙基吡啶-3-基)-[2,7]二氮杂萘-3-基氨基]吡唑-1-基}哌啶-1-甲酸叔丁基酯(89mg,0.118mmol)的TFA(2mL)溶液加热4小时，然后蒸发。将该残余物负载于2g SCX-2筒上，用甲醇洗脱，然后用2M氨/甲醇洗脱。蒸发含氨的部分，得到所述标题化合物(43mg,88％产率)。LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.72，[M+H]+＝415，方法＝J；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.21(s,1H),8.87&8.82(2x s*，1H),8.46(m,2H),7.94&7.93(2x s*，1H),7.52&7.49(2x s*，1H),7.32(d,J＝5.1Hz,1H),7.06(宽，2H),6.72(s,1H),6.64(s,1H),4.32&4.13(2x m*，1H),3.23&3.10(2xm*，2H),2.84(m,2H),2.79(q,J＝7.5Hz,2H),2.08(m,2H),1.97(m,2H)1.09(t,J＝7.5Hz,3H).*＝主要&次要构象。
实施例77：
环丙烷磺酸[8-氨基-6-(4-乙基吡啶-3-基)-[2,7]二氮杂萘-3-基]酰胺(化合物 79)
Figure BDA0002289356600003371
步骤1：4-溴-1-环丙烷磺酰基-1H-吡唑
Figure BDA0002289356600003372
将三乙胺(0.21mL,1.50mmol)添加至4-溴-1H-吡唑(200mg,1.36mmol)和环丙烷磺酰氯(0.15mL,1.50mmol)在无水二氯甲烷(2mL)中的混合物中。在室温搅拌该混合物19小时，然后添加另一部分的环丙烷磺酰氯(0.075mL)和三乙胺(0.105mL)，并继续搅拌6.5小时。添加水并分离该相。用二氯甲烷萃取该水相两次。干燥有机部分(Na2SO4)并蒸发，且该粗产物在硅胶上经色谱分离(用0-20％乙酸乙酯/环己烷洗脱)，得到所述标题化合物(226mg,66％产率)。LCMS(ESI):RT(分钟)＝2.79，[M+H]+＝251/253，方法＝K。
步骤2：环丙烷磺酸[8-[双-(4-甲氧基苄基)氨基-6-(4-乙基吡啶-3-基)-[2,7]二 氮杂萘-3-基]酰胺
将3-(4-乙基吡啶-3-基)-N1,N1-双-(4-甲氧基苄基)-[2,7]二氮杂萘-1,6-二胺(150mg,0.29mmol)、4-溴-1-环丙烷磺酰基-1H-吡唑(149mg,0.59mmol)、2-(二-叔丁基膦基)-2',4',6'-三异丙基-3,6-二甲氧基联苯(14mg,0.029mmol)和t-BuBrettPhosPalladacycle Gen.3(24mg,0.029mmol)在无水二噁烷(3mL)中的混合物用氩气冲洗。添加双(三甲基甲硅烷基)氨基锂(1M在甲苯中，1.16mL,1.16mmol)，并在100℃加热该混合物17.5小时。用水稀释该冷却的混合物，并用乙酸乙酯萃取5次。干燥该萃取物(Na2SO4)并蒸发。该粗产物在硅胶上经色谱分离(用50-100％乙酸乙酯/环己烷洗脱)，得到所述标题化合物(45mg,25％产率)。LCMS(ESI):RT(分钟)＝2.75，[M+H]+＝572，方法＝K。
步骤3：环丙烷磺酸[8-氨基-6-(4-乙基吡啶-3-基)-[2,7]二氮杂萘-3-基]酰胺
Figure BDA0002289356600003381
在80℃加热环丙烷磺酸[8-[双-(4-甲氧基苄基)氨基-6-(4-乙基吡啶-3-基)-[2,7]二氮杂萘-3-基]酰胺(45mg,0.074mmol)的TFA(2mL)溶液4小时，然后蒸发。该残余物悬浮于2M氨/甲醇，然后添加甲醇和二氯甲烷以溶解所有固体。蒸发该溶液至
Figure BDA0002289356600003382
HM-N上，负载于硅胶柱上并用0-10％甲醇/二氯甲烷洗脱，得到所述标题化合物(26mg,95％产率)。LCMS(ESI):RT(分钟)＝2.23，[M+H]+＝370，方法＝J；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.84(宽s，1H),9.38(s,1H),8.52(s,1H&d，J＝5.1Hz,1H),7.58(宽，2H),7.38(d,J＝5.1Hz,1H),7.23(s,1H),6.97(s,1H),3.08(m,1H),2.78(q,J＝7.2Hz,2H),1.10(m,5H),1.03(m,2H)。
实施例78：
3-(4-乙基吡啶-3-基)-N6-(6-甲基嘧啶-4-基)-[2,7]二氮杂萘-1,6-二胺(化合 物80)
步骤1：3-(4-乙基吡啶-3-基)-N1,N1-双-(4-甲氧基苄基)-N6-(6-甲基嘧啶-4- 基)-[2,7]二氮杂萘-1,6-二胺
Figure BDA0002289356600003391
将3-(4-乙基吡啶-3-基)-N1,N1-双-(4-甲氧基苄基)-[2,7]二氮杂萘-1,6-二胺(150mg,0.29mmol)、4-氯-6-甲基嘧啶(58mg,0.45mmol)、三(二亚苄基丙酮)二钯(0)(13mg,0.015mmol)、X-phos(15mg,0.03mmol)和碳酸铯(189mg,0.58mmol)在无水1,4-二噁烷(2mL)中的混合物用氩气冲洗，并在120℃加热18小时。用水稀释该冷却的混合物，并用乙酸乙酯萃取5次。干燥该有机萃取物(Na2SO4)并蒸发。该粗产物经质谱引导型HPLC提纯(C18柱，10-95％乙腈/水+0.1％氨)，得到所述标题化合物(40mg,23％产率)。LCMS(ESI):RT(分钟)＝2.64，[M+H]+＝598，方法＝K。
步骤2：3-(4-乙基吡啶-3-基)-N6-(6-甲基嘧啶-4-基)-[2,7]二氮杂萘-1,6-二胺
在80℃加热3-(4-乙基吡啶-3-基)-N1,N1-双-(4-甲氧基苄基)-N6-(6-甲基嘧啶-4-基)-[2,7]二氮杂萘-1,6-二胺(40mg,0.067mmol)的TFA(2mL)溶液4.5小时，然后蒸发。将该残余物负载于2g SCX-2筒上，并用甲醇洗脱，然后用2M氨/甲醇洗脱。蒸发氨的部分，得到所述标题化合物(25mg,100％产率)。LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.86，[M+H]+＝358，方法＝J；1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.33(s,1H),9.39(s,1H),8.65(s,1H),8.51(s,1H),8.49(d，J＝5.1Hz,1H),8.19(s,1H),7.35(d,J＝5.1Hz,1H),7.31(宽，2H),7.28(s,1H),6.92(s,1H),2.80(q,J＝7.5Hz,2H),2.36(s,3H),1.10(t,3H)。
实施例79：
2-[8-氨基-6-(4-乙基吡啶-3-基)-[2,7]二氮杂萘-3-基氨基]-N-乙基-N-甲基吡 啶-4-甲酰胺(化合物81)
Figure BDA0002289356600003401
步骤1：2-氯-N-乙基-N-甲基吡啶-4-甲酰胺
Figure BDA0002289356600003402
向2-氯吡啶-4-甲酸(0.29g,1.85mmol)的DMF(15mL)溶液中添加O-(7-氮杂苯丙三唑-1-基)-N,N,N’N’-四甲基脲鎓六氟磷酸盐(1.06g,2.78mmol)、N-乙基甲胺(0.24mL,2.78mmol)和N,N-二异丙基乙胺(1,25mL,7.4mmol)。在室温搅拌该混合物18小时，然后用水稀释并用乙酸乙酯萃取4次。用水和盐水洗涤该萃取物，干燥(Na2SO4)并蒸发。将该粗产物在硅胶上色谱分离，用0-50％乙酸乙酯/环己烷洗脱，得到所述标题化合物(273mg,75％产率)。LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.99，[M+H]+＝199，方法＝K。
步骤2：2-[8-[双-(4-甲氧基苄基)氨基]-6-(4-乙基吡啶-3-基)-[2,7]二氮杂萘-3-基氨基]-N-乙基-N-甲基吡啶-4-甲酰胺
Figure BDA0002289356600003403
将3-(4-乙基吡啶-3-基)-N1,N1-双-(4-甲氧基苄基)-[2,7]二氮杂萘-1,6-二胺(150mg,0.29mmol)、2-氯-N-乙基-N-甲基吡啶-4-甲酰胺(115mg,0.58mmol)、三(二亚苄基丙酮)二钯(0)(13mg,0.015mmol)、X-phos(15mg,0.03mmol)和碳酸铯(189mg,0.58mmol)在无水二噁烷(2mL)中的混合物用氩气冲洗，并在120℃加热18小时。用水稀释该冷却的混合物并用乙酸乙酯萃取三次。干燥该有机萃取物(Na2SO4)并蒸发。粗产物在硅胶上色谱分离(用50-100％乙酸乙酯/环己烷洗脱)，得到所述标题化合物(85mg,44％产率)。LCMS(ESI):RT(分钟)＝2.67，[M+H]+＝668，方法＝K。
步骤3：2-[8-氨基-6-(4-乙基吡啶-3-基)-[2,7]二氮杂萘-3-基氨基]-N-乙基-N- 甲基吡啶-4-甲酰胺
Figure BDA0002289356600003411
在80℃加热2-[8-[双-(4-甲氧基苄基)氨基]-6-(4-乙基吡啶-3-基)-[2,7]二氮杂萘-3-基氨基]-N-乙基-N-甲基吡啶-4-甲酰胺(85mg,0.13mmol)的TFA(2mL)溶液4小时，然后蒸发。将该残余物负载于2g SCX-2筒上并用甲醇洗脱，然后用2M氨/甲醇洗脱。蒸发含氨的部分，且将该残余物在硅胶上色谱分离(用0-7％甲醇/二氯甲烷洗脱)，得到所述标题化合物(46mg,83％产率)。LCMS(ESI):RT(分钟)＝2.30，[M+H]+＝428，方法＝J；1H NMR(400MHz,DMSO-d6,80℃)δ9.73(宽s，1H),9.32(s,1H),8.50(s,1H),8.46(d,J＝5.5Hz,1H),8.31(d,J＝5.0Hz,1H),8.07(s,1H),7.43(s,1H),7.29(d,J＝5.5Hz,1H),6.91(宽，2H),6.84(s,1H),6.82(d,J＝5.1Hz,1H),3.34(宽，2H),2.93(s,3H),2.80(q,J＝7.5Hz,2H),1.12(m,6H)。
实施例80：
(±)-1-{2-[8-氨基-6-(4-乙基吡啶-3-基)-[2,7]二氮杂萘-3-基氨基]-吡啶-4- 基}丙-1-醇(化合物82)
Figure BDA0002289356600003412
步骤1：(±)-1-(2-氯吡啶-4-基)丙-1-醇
向2-氯吡啶-4-甲醛(0.71g,5.06mmol)的无水THF(16mL)溶液中添加氯化镧(III)双(氯化锂)配合物(0.6M在THF中，16.7mL,10.03mmol)的溶液，并在室温搅拌该混合物0.75小时，然后冷却至0℃。在5-10分钟内，逐滴添加乙基溴化镁(3M在乙醚中，3.34mL,10.03mmol)。在0℃搅拌该混合物80分钟，然后用氯化铵水溶液淬灭，用水稀释并用乙酸乙酯萃取(3x)。干燥该有机萃取物(Na2SO4)并蒸发。该粗产物在硅胶上经色谱分离(用0-50％乙酸乙酯/环己烷洗脱)，得到所述标题化合物(423mg,49％产率)。LCMS(ESI):RT(分钟)＝2.14，[M+H]+＝172，方法＝K.进一步洗脱得到(2-氯吡啶-4-基)甲醇(191mg,26％产率)。LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.46，[M+H]+＝144，方法＝K。
步骤2：(±)-1-{2-[8-[双-(4-甲氧基苄基)氨基]-6-(4-乙基吡啶-3-基)-[2,7] 二氮杂萘-3-基氨基]吡啶-4-基}丙-1-醇
Figure BDA0002289356600003421
将3-(4-乙基吡啶-3-基)-N1,N1-双-(4-甲氧基苄基)-[2,7]二氮杂萘-1,6-二胺(150mg,0.29mmol)、(±)-1-(2-氯吡啶-4-基)丙-1-醇(100mg,0.58mmol)、三(二亚苄基丙酮)二钯(0)(13mg,0.015mmol)、X-phos(15mg,0.03mmol)和碳酸铯(189mg,0.58mmol)在无水二噁烷(2mL)中的混合物用氩气冲洗，并在120℃加热16小时。用水稀释该冷却的混合物，并用乙酸乙酯萃取(5x)。干燥该有机萃取物(Na2SO4)并蒸发。该粗产物经质谱引导型HPLC提纯(C18柱，10-95％乙腈/水+0.1％甲酸)，得到所述标题化合物(68mg,36％产率)。LCMS(ESI):RT(分钟)＝2.47，[M+H]+＝641，方法＝K。
步骤3：(±)-1-{2-[8-氨基-6-(4-乙基吡啶-3-基)-[2,7]二氮杂萘-3-基氨基]- 吡啶-4-基}丙-1-醇
Figure BDA0002289356600003422
在80℃加热(±)-1-{2-[8-[双-(4-甲氧基苄基)氨基]-6-(4-乙基吡啶-3-基)-[2,7]二氮杂萘-3-基氨基]吡啶-4-基}丙-1-醇(68mg,0.106mmol)的TFA(2mL)溶液4.5小时，然后蒸发。将该残余物负载于2g SCX-2筒上，并用甲醇洗脱，然后用2M氨/甲醇洗脱。蒸发含氨的部分且将该残余物在硅胶上色谱分离(用0-10％甲醇/二氯甲烷洗脱)，得到所述标题化合物(26mg,61％产率)。LCMS(ESI):RT(分钟)＝2.04，[M+H]+＝401，方法＝J；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.94(宽s，1H),9.35(s,1H),8.51(s,1H),8.50(d,J＝5.1Hz,1H),8.25(s,1H),8.20(d，J＝5.1Hz,1H),7.35(宽m，4H),6.87(宽m，2H),5.33(d,J＝4.2Hz,1H),4.43(m,1H),2.79(q,J＝7.5Hz,2H),1.61(m,2H),1.11(t,J＝7.5Hz,3H),0.87(t,J＝7.3Hz,3H)。
实施例81：
{6-[8-氨基-6-(4-乙基吡啶-3-基)-[2,7]二氮杂萘-3-基氨基]吡啶-2-基}甲醇 (化合物83)
Figure BDA0002289356600003431
步骤1：{6-[8-[双-(4-甲氧基苄基)氨基]-6-(4-乙基吡啶-3-基)-[2,7]二氮杂 萘-3-基氨基]吡啶-2-基}甲醇
Figure BDA0002289356600003432
将3-(4-乙基吡啶-3-基)-N1,N1-双-(4-甲氧基苄基)-[2,7]二氮杂萘-1,6-二胺(150mg,0.29mmol)、(6-氯吡啶-2-基)甲醇(83mg,0.58mmol)、三(二亚苄基丙酮)二钯(0)(13mg,0.015mmol)、X-phos(15mg,0.03mmol)和碳酸铯(189mg,0.58mmol)在无水二噁烷(2mL)中的混合物用氩气冲洗，并在120℃加热16小时。用水稀释该冷却的混合物并用乙酸乙酯萃取4次。干燥该有机萃取物(Na2SO4)并蒸发。将该粗产物在硅胶上色谱分离(用50-100％乙酸乙酯/环己烷洗脱)，得到所述标题化合物(56mg,32％产率)。LCMS(ESI):RT(分钟)＝2.36，[M+H]+＝613，方法＝K。
步骤2：{6-[8-氨基-6-(4-乙基吡啶-3-基)-[2,7]二氮杂萘-3-基氨基]吡啶-2- 基}甲醇
Figure BDA0002289356600003433
在80℃加热{6-[8-[双-(4-甲氧基苄基)氨基]-6-(4-乙基吡啶-3-基)-[2,7]二氮杂萘-3-基氨基]吡啶-2-基}甲醇(56mg,0.092mmol)的TFA(2mL)溶液4小时，然后蒸发。将该残余物负载于2g SCX-2筒上并用甲醇洗脱，然后用2M氨/甲醇洗脱。蒸发含氨的部分，且将该残余物在硅胶上色谱分离(用0-10％甲醇/二氯甲烷洗脱)，得到所述标题化合物(25mg,73％产率)。LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.81，[M+H]+＝373，方法＝J；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.86(s,1H),9.31(s,1H),8.50(s,1H),8.48(d,J＝5.1Hz,1H),8.27(s,1H),7.66(t,J＝7.7Hz,1H),7.34(d，J＝5.1Hz,1H),7.25(d,J＝7.7Hz,1H),7.16(宽，2H),6.97(d,J＝5.1Hz,1H))，6.86(s,1H),5.34(t,J＝6.0Hz,1H),4.55(d,J＝6.0Hz,2H),2.80(q,J＝7.5Hz,2H),1.11(t,J＝7.5Hz,3H)。
实施例82：
1-哌啶-4-基-1H-吡唑-4-甲酸[8-氨基-6-(4-乙基吡啶-3-基)-[2,7]二氮杂萘- 3-基]酰胺(化合物84)
Figure BDA0002289356600003441
步骤1：4-(4-乙氧基羰基吡唑-1-基)哌啶-1-甲酸叔丁基酯
Figure BDA0002289356600003442
将1H-吡唑-4-甲酸乙基酯(0.20g,1.40mmol)和4-甲磺酰基氧基哌啶-1-甲酸叔丁基酯(0.36g,1.30mmol)在无水DMF(5mL)中的混合物冷却至0℃。添加氢化钠(60％在矿物油中，78mg,1.95mmol)并在0℃搅拌该混合物0.5小时，然后在50℃加热16小时。用乙醚和水稀释该冷却的混合物并分离该相。用醚再次萃取该水相。用水(4x)和盐水洗涤该合并的有机物部分，干燥(Na2SO4)并蒸发。该粗产物在硅胶上色谱分离(用0-40％乙酸乙酯/环己烷洗脱)，得到所述标题化合物(0.183g,44％产率)。LCMS(ESI):RT(分钟)＝3.27，[M+H]+-C4H8-乙醇＝222，方法＝K。
步骤2：4-(4-羧基吡唑-1-基)哌啶-1-甲酸叔丁基酯
在室温，将4-(4-乙氧基羰基吡唑-1-基)哌啶-1-甲酸叔丁基酯(0.183g,0.57mmol)和氢氧化钾(0.127g,2.27mmol)在甲醇(2mL)和水(0.5mL)中的混合物搅拌16小时。在真空中除去该溶剂且用5％硫酸氢钾水溶液处理该残余物以酸化，然后经乙酸乙酯萃取(5x)。干燥该萃取物(Na2SO4)并蒸发，得到所述标题化合物(0.158g,94％产率)。LCMS(ESI):RT(分钟)＝2.58，[M+H]+-C4H8＝240，[M-H]-＝294，方法＝K。
步骤3：4-{4-[8-[双-(4-甲氧基苄基)氨基]-6-(4-乙基吡啶-3-基)-[2,7]二氮杂 萘-3-基氨基甲酰基]吡唑-1-基}哌啶-1-甲酸叔丁基酯
Figure BDA0002289356600003451
向4-(4-羧基吡唑-1-基)哌啶-1-甲酸叔丁基酯(158mg,0.54mmol)的无水二氯甲烷(10mL)溶液中添加草酰氯(0.091mL,1.07mmol)和DMF(2滴)。在室温搅拌该混合物3小时。添加另一部分的草酰氯(0.09mL)并继续搅拌2小时。然后蒸发该混合物。用无水氯仿共沸该残余物两次，然后在真空中干燥，得到粗的酰氯。在室温将此物质(0.54mmol粗品)、3-(4-乙基吡啶-3-基)-N1,N1-双-(4-甲氧基苄基)-[2,7]二氮杂萘-1,6-二胺(150mg,0.29mmol)和吡啶(0.12mL,1.44mmol)在无水二氯甲烷(2.5mL)中的混合物搅拌22小时，然后添加水并分离该相。该水相经二氯甲烷萃取(4x)。该合并的有机物部分用甲醇处理，干燥(Na2SO4)并蒸发。该粗产物经质谱引导型HPLC提纯(C18柱，10-95％乙腈/水+0.1％甲酸)，得到所述标题化合物(34mg,8％产率)。LCMS(ESI):RT(分钟)＝3.69，[M+H]+＝783，方法＝K。
步骤4：1-哌啶-4-基-1H-吡唑-4-甲酸[8-氨基-6-(4-乙基吡啶-3-基)-[2,7]二氮 杂萘-3-基]酰胺
Figure BDA0002289356600003452
在80℃加热4-{4-[8-[双-(4-甲氧基苄基)氨基]-6-(4-乙基吡啶-3-基)-[2,7]二氮杂萘-3-基氨基甲酰基]吡唑-1-基}哌啶-1-甲酸叔丁基酯(34mg,0.043mmol)的TFA(2mL)溶液2.5小时，然后蒸发。将该残余物负载于2gSCX-2筒上并用甲醇洗脱，然后用2M氨/甲醇洗脱。蒸发含氨的部分，且该残余物用二氯甲烷研磨，并在真空中干燥，得到所述标题化合物(12mg,63％产率)。LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.81，[M+H]+＝443，方法＝J；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.28(宽s，1H),9.40(s,1H),8.55(s,1H),8.51(s,1H),8.47(d,J＝5.1Hz,1H),8.32(s,1H),8.11(s,1H),7.30(d,J＝5.1Hz,1H),7.04(宽，2H),6.95(s,1H),4.25(m,1H),3.07(m,2H，被水遮盖)，2.80(q,J＝7.5Hz,2H),2.64(m,2H),2.02(m,2H),1.80(m,2H),1.11(t,J＝7.5Hz,3H)。
实施例83：
2-{4-[8-氨基-6-(4-乙基吡啶-3-基)-[2,7]二氮杂萘-3-基氨基]吡唑-1-基}乙 醇(化合物85)
Figure BDA0002289356600003461
步骤1：4-溴-1-[2-(四氢吡喃-2-基氧基)乙基]-1H-吡唑
Figure BDA0002289356600003462
在0℃，将氢化钠(60％在矿物油中，0.65g,16.3mmol)添加4-溴-1H-吡唑(0.80g,5.44mmol)的干燥DMF(20mL)溶液中。在0℃，搅拌该混合物0.5小时，然后逐滴添加2-(2-溴乙氧基)四氢吡喃(1.71g,8.16mmol)。在0℃，继续搅拌该混合物1小时，然后温热至室温过夜。小心地添加水，然后添加乙酸乙酯和更多的水。分离该相，且该水相经乙酸乙酯萃取(2x)。该合并的有机物部分用盐水洗涤，干燥(Na2SO4)并蒸发。将该残余物在硅胶上色谱分离(用0-50％乙酸乙酯/环己烷洗脱)，得到所述标题化合物(1.40g,94％产率)。LCMS(ESI):RT(分钟)＝2.96，[M+H-THP]+＝191/193，方法＝K。
步骤2：3-(4-乙基吡啶-3-基)-N1,N1-双-(4-甲氧基苄基)-N6-{1-[2-(四氢吡喃- 2-基氧基)乙基]-1H-吡唑-4-基}-[2,7]二氮杂萘-1,6-二胺
Figure BDA0002289356600003471
将3-(4-乙基吡啶-3-基)-N1,N1-双-(4-甲氧基苄基)-[2,7]二氮杂萘-1,6-二胺(160mg,0.32mmol)、4-溴-1-[2-(四氢吡喃-2-基氧基)乙基]-1H-吡唑(176mg,0.64mmol)、2-(二-叔丁基膦基)-2',4',6'-三异丙基-3,6-二甲氧基联苯(15mg,0.03mmol)和t-BuBrettPhos Palladacycle Gen.3(27mg,0.03mmol)在无水1,4-二噁烷(3mL)中的混合物用氩气冲洗。添加双(三甲基甲硅烷基)氨基锂(1M在甲苯中，1.32mL,1.32mmol)，在100℃加热该混合物16小时。用水稀释该冷却的混合物并用乙酸乙酯萃取(5x)。干燥该萃取物(Na2SO4)并蒸发。该粗产物在硅胶上色谱分离(用0-100％乙酸乙酯/环己烷洗脱)，得到所述标题化合物(70mg,31％产率)。LCMS(ESI):RT(分钟)＝3.14，[M+H]+＝700，方法＝K。
步骤3：2-{4-[8-氨基-6-(4-乙基吡啶-3-基)-[2,7]二氮杂萘-3-基氨基]吡唑-1- 基}乙醇
Figure BDA0002289356600003472
在80℃加热3-(4-乙基吡啶-3-基)-N1,N1-双-(4-甲氧基苄基)-N6-{1-[2-(四氢吡喃-2-基氧基)乙基]-1H-吡唑-4-基}-[2,7]二氮杂萘-1,6-二胺(70mg,0.10mmol)的TFA(2mL)溶液4小时，然后蒸发。将该残余物负载于2g SCX-2筒上并用甲醇洗脱，然后用2M氨/甲醇洗脱。蒸发含氨的部分且该残余物在硅胶上色谱分离(用0-10％甲醇/二氯甲烷洗脱)，得到所述标题化合物(22mg,59％产率)。LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.93，[M+H]+＝376，方法＝J；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.21(s,1H),8.84(s,1H),8.46(s,1H&d，J＝5.1Hz,1H),7.91(s,1H),7.49(s,1H),7.32(d,J＝5.1Hz,1H),7.04(宽，2H),6.71(s,1H),6.63(s,1H),4.89(t,J＝5.5Hz,1H),4.12(t,J＝5.8Hz,2H),3.74(q,J＝5.8Hz,2H),2.78(q,J＝7.5Hz,2H),1.09(t,J＝7.5Hz,3H)
实施例84：
(±)-3-(4-甲基-3-吡啶基)-N6-吡咯烷-3-基-2,7-二氮杂萘-1,6-二胺(化合物 120)
Figure BDA0002289356600003481
步骤1：3-羟基吡咯烷-1-甲酸叔丁基酯
Figure BDA0002289356600003482
将NaBH4(0.3g,7.9mmol)分批添加N-Boc-3-吡咯烷酮(1.2g,6.48mmol)的甲醇(15mL)溶液中。在25℃搅拌所得混合物1小时。向该反应混合物中添加H2O(3mL)并浓缩该混合物。该残余物经硅胶色谱提纯(PE:EA＝1:1至EA)，得到(±)-3-羟基吡咯烷-1-甲酸叔丁基酯(1.1g,91％产率)，其为无色油状物。LCMS(ESI)[M+23]+＝210.1。
步骤2：(±)-3-[叔丁基氧基羰基-(6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-基)氨基]吡咯烷- 1-甲酸叔丁基酯
Figure BDA0002289356600003483
将DIAD(550mg,2.72mmol)添加N-(6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-基)氨基甲酸叔丁基酯(300mg,0.95mmol)、(±)-3-羟基吡咯烷-1-甲酸叔丁基酯(400mg,2.14mmol)和PPh3(550mg,2.1mmol)在四氢呋喃(15mL)中的混合物中。在50℃、在氩气中搅拌所得混合物18小时。将该反应混合物浓缩，且该残余物经硅胶色谱提纯(PE:EA＝4:1)，得到(±)-3-[叔丁基氧基羰基-(6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-基)氨基]吡咯烷-1-甲酸叔丁基酯(粗品，600mg,与一些DIAD+2混合)，其为黄色油状物。LCMS(ESI)[M-Boc]+＝383.1。
步骤3：(±)-3-[(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-叔丁基氧基羰基-氨基]吡 咯烷-1-甲酸叔丁基酯
Figure BDA0002289356600003484
在90℃，在密封管内将(±)-3-[叔丁基氧基羰基-(6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-基)氨基]吡咯烷-1-甲酸叔丁基酯(600mg,粗品)在氢氧化铵(10mL)、1,4-二噁烷(10mL)中的混合物搅拌3小时。将该反应混合物冷却至室温并蒸发。该残余物经硅胶色谱提纯(PE:EA＝1:2至1:3)，得到(±)-3-[(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-叔丁基氧基羰基-氨基]吡咯烷-1-甲酸叔丁基酯(310mg,两步，70％产率)，其为无色油状物。LCMS(ESI)[M+H]+＝464.2。
步骤4：(±)-3-[[8-氨基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-叔丁基氧 基羰基-氨基]吡咯烷-1-甲酸叔丁基酯
Figure BDA0002289356600003491
在100℃、在氩气中，将(±)-3-[(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-叔丁基氧基羰基-氨基]吡咯烷-1-甲酸叔丁基酯(310mg,0.67mmol)、4-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡啶(170mg,0.78mmol)、Xphos Pd G2(70mg,0.09mmol)、Xphos(70mg,0.15mmol)和K2CO3(310mg,2.25mmol)在1,4-二噁烷(16mL)和水(4mL)中的混合物搅拌2小时。将该反应混合物冷却至室温，且用乙酸乙酯稀释(100mL)，并用盐水洗涤(30mL)。将该有机层分离，经Na2SO4干燥，过滤并蒸发。该残余物经硅胶色谱提纯(EA至EA:MeOH＝20:1)，得到(±)-3-[[8-氨基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-叔丁基氧基羰基-氨基]吡咯烷-1-甲酸叔丁基酯(250mg,72％产率)，其为棕色固体。LCMS(ESI)[M+H]+＝521.3。
步骤5：(±)-3-(4-甲基-3-吡啶基)-N6-吡咯烷-3-基-2,7-二氮杂萘-1,6-二胺
Figure BDA0002289356600003492
在25℃，将(±)-3-[[8-氨基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-叔丁基氧基羰基-氨基]吡咯烷-1-甲酸叔丁基酯(250mg,0.48mmol)在2,2,2-三氟乙酸(4mL)、二氯甲烷(12mL)中的混合物搅拌1小时。将该反应混合物蒸发。将该残余物溶于MeOH(2mL)中，并添加7N NH3/MeOH将pH调节至9-10。该混合物用快速色谱提纯(C18，HCOOH/MeOH/H2O)，得到(±)-3-(4-甲基-3-吡啶基)-N6-吡咯烷-3-基-2,7-二氮杂萘-1,6-二胺(140mg,71％产率)的双-甲酸盐，其为黄色固体。LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.34，[M+H]+＝321.1，方法＝C；1HNMR(400MHz,CD3OD)：δ9.20(s,1H),8.52(s,1H),8.47(d,J＝5.2Hz,1H),8.41(brs，2H),7.42(d,J＝5.2Hz,1H),6.78(s,1H),6.65(s,1H),4.69-4.66(m,1H),3.66-3.54(m,2H),3.48-3.37(m,2H),2.48-2.41(m,1H),2.44(s,3H),2.20-2.15(m,1H)。
实施例85：
(±)-反式-N-[8-氨基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-(1H-吡 唑-3-基)环丙烷甲酰胺(化合物121)
Figure BDA0002289356600003501
步骤1：3-碘-1-四氢吡喃-2-基-吡唑
Figure BDA0002289356600003502
将3-碘-1H-吡唑(5g,25.78mmol)、3,4-二氢-2H-吡喃(10g,118.88mmol)、p-TsOH(900mg,5.23mmol)在四氢呋喃(100mL)中的混合物回流过夜。将该反应混合物冷却至室温，并用饱和NaHCO3(20mL)洗涤。将该有机层分离，经Na2SO4干燥，过滤并蒸发。该残余物经硅胶柱色谱提纯(PE:EA＝20:1至10:1)，得到3-碘-1-四氢吡喃-2-基-吡唑(7g,98％产率)，其为淡黄色油状物。LCMS(ESI)[M+Na]+＝300.9.1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.45(d,J＝2.4Hz,1H),6.46(d,J＝2.4Hz,1H),5.39-5.36(m,1H),4.08-4.04(m,1H),3.72-3.66(m,1H),2.10-2.01(m,2H),1.73-1.54(m,4H)。
步骤2：(E)-3-(1-四氢吡喃-2-基吡唑-3-基)丙-2-烯酸甲基酯
Figure BDA0002289356600003503
在110℃、在氩气中，将3-碘-1-四氢吡喃-2-基-吡唑(6.6g,23.73mmol)、丙烯酸甲基酯(7.5mL,83.29mmol)、Pd(OAc)2(660mg,2.95mmol)，三-(邻-甲苯基)膦(2g,6.58mmol)、TEA(7g,69.31mmol)在乙腈(80mL)中的混合物剧烈回流2小时。将该反应混合物冷却至室温并蒸发。该残余物经硅胶柱色谱提纯(PE:EA＝8:1至6:1至4:1)，得到(E)-3-(1-四氢吡喃-2-基吡唑-3-基)丙-2-烯酸甲基酯(4.6g,82％产率)，其为棕色油状物。LCMS(ESI)[M+H]+＝237.1.1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.71(d,J＝16.0Hz,1H),7.61(d,J＝2.4Hz,1H),6.55(d,J＝2.4Hz,1H),6.44(d,J＝16.0Hz,1H),5.42-5.38(m,1H),4.10-4.07(m,1H),3.76-3.69(m,1H),2.15-2.04(m,2H),1.74-1.62(m,4H)。
步骤3：(±)-反式-2-(1-四氢吡喃-2-基吡唑-3-基)环丙烷甲酸甲基酯
Figure BDA0002289356600003511
在25℃，将t-BuOK(3.87g,34.55mmol)分批添加至三甲基氧化锍碘化物(7.74g,35.17mmol)的二甲基亚砜(50mL)溶液中。在25℃搅拌该混合物0.5小时。然后，在25℃，将(E)-3-(1-四氢吡喃-2-基吡唑-3-基)丙-2-烯酸甲基酯(3.87g,16.38mmol)的二甲基亚砜(10mL)溶液逐滴添加至该反应混合物中。在25℃搅拌该混合物2小时。用饱和NH4Cl(150mL)中和该反应混合物，并用EA(50mL x 3)萃取。合并该合并的EA层，经Na2SO4干燥，过滤并蒸发。该残余物经硅胶柱色谱提纯(PE:EA＝4:1)，得到反式-2-(1-四氢吡喃-2-基吡唑-3-基)环丙烷甲酸甲基酯(1.1g,27％产率)，其为淡黄色油状物。LCMS(ESI)[M+H]+＝251.1。
步骤4：(±)-反式-2-(1-四氢吡喃-2-基吡唑-3-基)环丙烷甲酸
Figure BDA0002289356600003512
在20℃，将(±)-反式-2-(1-四氢吡喃-2-基吡唑-3-基)环丙烷甲酸甲基酯(1.07g,4.28mmol)和LiOH H2O(1.07g,25.48mmol)在四氢呋喃(20mL)和水(20mL)中的混合物搅拌3小时。将该反应混合物蒸发以除去有机溶剂。该残余水性层用浓HCl酸化至pH＝4，并用EA(50mL x 3)萃取。合并该合并的EA层，经Na2SO4干燥，过滤并蒸发，得到粗的(±)-反式-2-(1-四氢吡喃-2-基吡唑-3-基)环丙烷甲酸(1g,99％产率)，其为淡黄色油状物。LCMS(ESI)[M+Na]+＝259.1。
步骤5：(±)-反式-N-(6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(1-四氢吡喃-2-基吡 唑-3-基)环丙烷甲酰胺
Figure BDA0002289356600003521
在0℃，将POCl3(500mg,3.27mmol)逐滴添加至(±)-反式-2-(1-四氢吡喃-2-基吡唑-3-基)环丙烷甲酸(350mg,1.48mmol)、6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-胺盐酸盐(250mg,1mmol)和吡啶(2mL,24.73mmol)在二氯甲烷(40mL)中的混合物中。在20℃搅拌该混合物1小时。用水(15mL)稀释该反应混合物。将该有机层分离，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩。该残余物经硅胶柱色谱提纯(PE:EA:DCM＝4:2:1至2:2:1)，得到(±)-反式-N-(6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(1-四氢吡喃-2-基吡唑-3-基)环丙烷甲酰胺(340mg,79％产率)，其为白色固体。LCMS(ESI)[M+Na]+＝454.0。
步骤6：(±)-反式-N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(1-四氢吡喃-2-基 吡唑-3-基)环丙烷甲酰胺
在90℃，在密封管中将(±)-反式-N-(6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(1-四氢吡喃-2-基吡唑-3-基)环丙烷甲酰胺(340mg,0.79mmol)和氢氧化铵(10mL)在1,4-二噁烷(10mL)中的混合物搅拌3.5小时。将该反应混合物冷却至室温并蒸发，得到粗的(±)-反式-N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(1-四氢吡喃-2-基吡唑-3-基)环丙烷甲酰胺(320mg,99％产率)，其为淡黄色固体。该粗产物直接用于下一步骤中。LCMS(ESI)[M+H]+＝413.1。
步骤7：(±)-反式-N-[8-氨基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2- (1-四氢吡喃-2-基吡唑-3-基)环丙烷甲酰胺
Figure BDA0002289356600003531
在100℃、在氩气中，将(±)-反式-N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(1-四氢吡喃-2-基吡唑-3-基)环丙烷甲酰胺(320mg,0.78mmol)、4-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡啶(200mg,0.91mmol)、Xphos Pd G2(50mg,0.06mmol)、Xphos(60mg,0.13mmol)和K2CO3(350mg,2.54mmol)在1,4-二噁烷(16mL)、水(4mL)中的混合物搅拌2小时。将该反应混合物冷却至室温，并用EA稀释(50mL)。该混合物用盐水洗涤(20mL)，经Na2SO4干燥，过滤并蒸发。该残余物经硅胶柱色谱提纯(EA至EA:MeOH＝10:1)，得到(±)-反式-N-[8-氨基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-(1-四氢吡喃-2-基吡唑-3-基)环丙烷甲酰胺(340mg,93％产率)，其为棕色固体。LCMS(ESI)[M+H]+＝470.2。
步骤8：(±)-反式-N-[8-氨基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2- (1H-吡唑-3-基)环丙烷甲酰胺
Figure BDA0002289356600003532
在20℃，将(±)-反式-N-[8-氨基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-(1-四氢吡喃-2-基吡唑-3-基)环丙烷甲酰胺(340mg,0.72mmol)和2,2,2-三氟乙酸(2mL)在二氯甲烷(10mL)中的混合物搅拌3小时。将该反应混合物浓缩。将该残余物再次溶于MeOH(3mL)。添加7N NH3/MeOH直至pH＝9-10。该混合物经快速色谱提纯(C18，NH4HCO3/MeOH/H2O)，得到(±)-反式-N-[8-氨基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-(1H-吡唑-3-基)环丙烷甲酰胺(110mg,39％产率)，其为淡黄色固体。LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.54，[M+H]+＝386.1，方法＝C；1H NMR(400MHz,CD3OD)：δ9.29(s,1H),8.54(s,1H),8.43(d,J＝5.2Hz,1H),8.34(s,1H),7.54(s,1H),7.40(d,J＝5.2Hz,1H),6.99(s,1H),6.16(d,J＝1.6Hz,1H),2.62-2.57(m,1H),2.46(s,3H),2.31-2.27(m,1H),1.67-1.62(m,1H),1.46-1.41(m,1H)。
实施例86：
(±)-反式-N-[8-氨基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-(1-四氢 吡喃-2-基吡唑-4-基)环丙烷甲酰胺(化合物122)
Figure BDA0002289356600003541
步骤1：4-碘-1-四氢吡喃-2-基-吡唑
Figure BDA0002289356600003542
向搅拌中的4-碘吡唑(5.0g,25.8mmol)的二氯甲烷(10mL)溶液添加TsOH H2O(0.5g,2.9mmol)和3,4-二氢-2H-吡喃(4.5g,53.5mmol)。在室温搅拌所得混合物2小时。在真空中将该反应混合物浓缩。该残余物经硅胶柱提纯，用乙酸乙酯/石油醚(1:3)洗脱，得到所需产物4-碘-1-四氢吡喃-2-基-吡唑(7g,93％产率)，其为无色油状物。LCMS(ESI):[M-84+H]+＝195.1。
步骤2：(E)-3-(1-四氢吡喃-2-基吡唑-4-基)丙-2-烯酸甲基酯
Figure BDA0002289356600003543
在110℃、在N2中，将4-碘-1-四氢吡喃-2-基-吡唑(6.7g,24.1mmol)、丙烯酸甲基酯(7.0g,81.3mmol)、TEA(4mL,28.8mmol)、Pd(OAc)2(550mg,2.5mmol)和三甲基亚磷酸盐(600mg,4.8mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(50mL)中的溶液搅拌3小时。过滤并浓缩该反应。该反应混合物经水(50mL)和EtOAc(100mL)稀释。然后将该有机层用水和盐水溶液洗涤，干燥(MgSO4)并浓缩。然后该粗产物经快速柱色谱提纯，用50％EtOAc/异己烷洗脱，得到(E)-3-(1-四氢吡喃-2-基吡唑-4-基)丙-2-烯酸甲基酯(4g,70％产率)，其为黄色油状物。LCMS(ESI):[M+23]+＝259.1。
步骤3：(±)-反式-2-(1-四氢吡喃-2-基吡唑-4-基)环丙烷甲酸甲基酯
Figure BDA0002289356600003551
在N2中、在室温，将三甲基氧化锍碘化物(2.7g,12.3mmol)、NaH(500mg,12.5mmol，60％在油中)在二甲基亚砜(25mL)中的混合物搅拌0.5小时。添加二甲基亚砜(50mL)中的(E)-3-(1-四氢吡喃-2-基吡唑-4-基)丙-2-烯酸甲基酯(2.5g,10.6mmol)。在N2中搅拌该混合物，该起始烯烃完全消失。添加饱和氯化铵水溶液和水，且该产物经乙酸乙酯萃取。将该有机层用水和盐水洗涤，用无水硫酸镁干燥，过滤并浓缩。该残余物经硅胶柱色谱提纯(己烷-乙酸乙酯100:0-60:40)，得到2-(1-四氢吡喃-2-基吡唑-4-基)环丙烷甲酸甲基酯(750mg,25.5％产率)，其为无色油状物。LCMS(ESI):[M+23]+＝273.1。
步骤4：(±)-反式-2-(1-四氢吡喃-2-基吡唑-4-基)环丙烷甲酸
Figure BDA0002289356600003552
向2-(1-四氢吡喃-2-基吡唑-4-基)环丙烷甲酸甲基酯(300mg,1.2mmol)的四氢呋喃(27mL)和水(9mL)溶液中添加一水合氢氧化锂(300mg,7.2mmol)，并在室温搅拌该反应混合物8小时。所得反应混合物浓缩至干燥，用水稀释(10mL)并用EtOAc洗涤(3×80mL)。该水相经浓HCl水溶液酸化至pH＝4，并用DCM(3×20mL)萃取。合并该DCM萃取物并在减压下干燥，得到所述标题化合物(270mg,95％产率)，其为无色油状物。LCMS(ESI):[M+H]+＝237.2。
步骤5：(±)-反式-N-(6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(1-四氢吡喃-2-基吡 唑-4-基)环丙烷甲酰胺
Figure BDA0002289356600003561
在0℃，向6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-胺(270mg,1.3mmol)和(±)-反式-2-(1-四氢吡喃-2-基吡唑-4-基)环丙烷甲酸(270mg,1.1mmol)在吡啶(10mL)中的混合物添加三氯氧磷(270mg,1.8mmol)。在0℃，将所得混合物搅拌1小时。然后，用饱和NaHCO3水溶液淬灭该反应，并用EA萃取(20mL×2)。该合并的EA萃取物在真空中浓缩。该残余物经快速柱色谱提纯(PE:EA＝3:1-1:3)，得到(±)-反式-N-(6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(1-四氢吡喃-2-基吡唑-4-基)环丙烷甲酰胺(300mg,61％产率)，其为无色油状物。LCMS(ESI):[M+H]+＝432.1。
步骤6：(±)-反式-N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(1-四氢吡喃-2-基 吡唑-4-基)环丙烷甲酰胺
在90℃、在氩气中，将(±)-反式-N-(6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(1-四氢吡喃-2-基吡唑-4-基)环丙烷甲酰胺(300mg,0.69mmol)和NH4OH(8mL,0.69mmol)在1,4-二噁烷(8mL)中的混合物加热4小时。将该反应浓缩至干燥。该粗产物材料直接使用无需进一步提纯。LCMS(ESI):[M+H]+＝413.1。
步骤7：(±)-反式-N-[8-氨基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2- (1-四氢吡喃-2-基吡唑-4-基)环丙烷甲酰胺
在100℃、在氩气中，将(±)-反式-N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(1-四氢吡喃-2-基吡唑-4-基)环丙烷甲酰胺(240mg,0.58mmol)、4-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡啶(160mg,0.73mmol)、Pd(dppf)Cl2(80mg,0.11mmol)和Na2CO3(200mg,1.89mmol)在1,4-二噁烷(8mL)和水(1mL)中的混合物加热1小时。该粗产物(±)-反式-N-[8-氨基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-(1-四氢吡喃-2-基吡唑-4-基)环丙烷甲酰胺(300mg,88％产率)直接用于下一步骤中无需进一步提纯。LCMS(ESI):[M+H]+＝470.2。
步骤8：(±)-反式-N-[8-氨基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2- (1H-吡唑-4-基)环丙烷甲酰胺
Figure BDA0002289356600003571
在室温，将(±)-反式-N-[8-氨基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-(1-四氢吡喃-2-基吡唑-4-基)环丙烷甲酰胺(300mg,0.64mmol)和TFA(10mL,134.6mmol)在二氯甲烷(20mL)中的混合物搅拌1小时。用MeOH中的NH3中和该混合物并浓缩。该残余物经制备型HPLC提纯，得到(±)-反式-N-[8-氨基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-(1H-吡唑-4-基)环丙烷甲酰胺(68mg,28％产率)，其为白色固体。LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.240，[M+H]+＝386.1，方法＝G；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.62(s,1H),10.94(s,1H),9.37(s,1H),8.57(s,1H),8.44(d,J＝5.2Hz,1H),8.26(s,1H),7.62(s,1H),7.37(s,1H),7.32-7.31(m,3H),6.97(s,1H),2.41(s,3H),2.27-2.19(m,2H),1.50-1.36(m,1H),1.27-1.11(m,1H)。
实施例87：
外型-N-[8-氨基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-3-(2-甲氧基乙 基)-3-氮杂双环[3.1.0]己烷-6-甲酰胺(化合物124)
Figure BDA0002289356600003581
向外型-N-[8-氨基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-3-氮杂双环[3.1.0]己烷-6-甲酰胺(100mg,0.28mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(1mL)中的混合物中，添加2-溴乙基甲基酯(50mg,0.36mmol)和DIPEA(107mg,0.83mmol)。在25℃搅拌该混合物3天。该混合物经制备型HPLC提纯，得到外型-N-[8-氨基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-3-(2-甲氧基乙基)-3-氮杂双环[3.1.0]己烷-6-甲酰胺(39mg,34％产率)，其为黄色固体。LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.775，[M+H]+＝419.2，方法＝I-1；1H NMR(400MHz,CD3OD)δ9.28(s,1H),8.53(s,1H),8.43(d,J＝5.2Hz,1H),8.27(s,1H),7.39(d,J＝5.2Hz,1H),6.96(s,1H),3.51(t,J＝5.6Hz,2H),3.37(s,3H),3.20-3.18(m,2H),2.70(t,J＝5.6Hz,2H),2.56-2.63(m,2H),2.45(s,3H),2.24-2.22(m,1H),2.05(s,2H)。
实施例88：
(±)-反式-N-(8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-5-氮杂螺 [2.4]庚烷-1-甲酰胺(化合物125)
Figure BDA0002289356600003582
步骤1：(±)-反式-1-(6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-基氨基甲酰基)-5-氮杂螺 [2.4]庚烷-5-甲酸叔丁基酯
Figure BDA0002289356600003591
在0℃，向6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-胺(270mg,1.26mmol)、5-叔丁基氧基羰基-5-氮杂螺[2.4]庚烷-2-甲酸(365mg,1.51mmol)和吡啶(1.0mL,12.61mmol)在DCM(5mL)中的混合物中添加POCl3(212mg,1.39mmol)。添加完成后，在室温搅拌该反应溶液1小时。将该反应浓缩至干燥并经快速柱色谱提纯，用20％EA/PE洗脱，得到(±)-反式-1-(6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-基氨基甲酰基)-5-氮杂螺[2.4]庚烷-5-甲酸叔丁基酯(290mg,52％产率)，其为白色固体。LCMS(ESI):[M-56]+＝381.1。
步骤2：(±)-反式-1-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基氨基甲酰基)-5-氮杂螺 [2.4]庚烷-5-甲酸叔丁基酯
Figure BDA0002289356600003592
在密封管中，在80℃，将(±)-反式-1-(6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-基氨基甲酰基)-5-氮杂螺[2.4]庚烷-5-甲酸叔丁基酯(290mg,0.66mmol)和NH4OH(2mL)在1,4-二噁烷(5mL)中的混合物加热3小时。浓缩该混合物，且该粗产物用水和PE洗涤，得到反式-1-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基氨基甲酰基)-5-氮杂螺[2.4]庚烷-5-甲酸叔丁基酯(213mg,77％产率)，其为白色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝418.2。
步骤3：(±)-反式-N-(8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-5-氮 杂螺[2.4]庚烷-1-甲酰胺
Figure BDA0002289356600003601
向密封管内添加(±)-反式-1-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基氨基甲酰基)-5-氮杂螺[2.4]庚烷-5-甲酸叔丁基酯(340mg)、K2CO3(3eq)、Pd(dppf)Cl2(0.2eq)、4-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡啶(1.3eq)、1,4-二噁烷(20mL)和水(1mL)。该混合物用N2鼓泡2分钟并在110℃搅拌3小时。浓缩该反应并向所得残余物添加DCM(3mL)和TFA(0.5mL)。在室温搅拌该混合物2小时。浓缩该混合物并经制备型HPLC提纯，得到(±)-反式-N-(8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-5-氮杂螺[2.4]庚烷-1-甲酰胺(47mg,37％产率)，其为白色固体。LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.390，[M+H]+＝375.2，方法＝G；1H NMR(400MHz,CD3OD)δ9.29(s,1H),8.53(s,1H),8.43(d,J＝4.8Hz,1H),8.33(s,1H),7.40(d,J＝4.8Hz,1H),6.97(s,1H),3.29-3.20(m,4H),2.45(s,3H),2.25-2.22(m,1H),2.11-2.04(m,1H),2.00-1.1.94(m,1H),1.45-1.43(m,1H),1.34-1.31(m,1H)。
实施例89：
(±)-顺式-N-(8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-5-氮杂螺 [2.4]庚烷-1-甲酰胺(化合物126)
Figure BDA0002289356600003602
步骤1：(±)-顺式-1-(6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-基氨基甲酰基)-5-氮杂螺 [2.4]庚烷-5-甲酸叔丁基酯
Figure BDA0002289356600003611
在0℃，向6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-胺(270mg,1.26mmol)、5-叔丁基氧基羰基-5-氮杂螺[2.4]庚烷-2-甲酸(365mg,1.51mmol)和吡啶(1.0mL,12.61mmol)在DCM(5mL)中的混合物中添加POCl3(212mg,1.39mmol)。在室温搅拌该反应溶液1小时。将该反应浓缩至干燥，并经快速柱色谱提纯，用20％EA/PE洗脱，得到(±)-顺式-1-(6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-基氨基甲酰基)-5-氮杂螺[2.4]庚烷-5-甲酸叔丁基酯(210mg,38％产率)，其为白色固体。LCMS(ESI):[M-56]+＝381.1。
步骤2：(±)-顺式-1-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基氨基甲酰基)-5-氮杂螺 [2.4]庚烷-5-甲酸叔丁基酯
Figure BDA0002289356600003612
在密封管中，将(±)-顺式-1-(6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-基氨基甲酰基)-5-氮杂螺[2.4]庚烷-5-甲酸叔丁基酯(210mg,0.48m(±)-mol)和NH4OH(2mL)在1,4-二噁烷(5mL)的混合物加热至80℃3小时。浓缩该混合物，且该粗产物用水和PE洗涤，得到(±)-顺式-1-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基氨基甲酰基)-5-氮杂螺[2.4]庚烷-5-甲酸叔丁基酯(155mg,77％产率)，其为白色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝418.2。
步骤3：(±)-顺式-N-(8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-5-氮 杂螺[2.4]庚烷-1-甲酰胺
Figure BDA0002289356600003621
向密封管内添加(±)-顺式-1-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基氨基甲酰基)-5-氮杂螺[2.4]庚烷-5-甲酸叔丁基酯(340mg)、K2CO3(3eq)、Pd(dppf)Cl2(0.2eq)和4-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡啶(1.3eq)、1,4-二噁烷(20mL)和水(1mL)。该混合物用N2鼓泡2分钟并在110℃搅拌3小时。将该反应混合物浓缩并向该残余物添加DCM(3mL)和TFA(0.5mL)。在室温搅拌该混合物2小时。浓缩该混合物，并经制备型HPLC提纯，得到(±)-顺式-N-(8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-5-氮杂螺[2.4]庚烷-1-甲酰胺(44mg,31％产率)，其为白色固体。LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.413，[M+H]+＝375.2，方法＝G；1H NMR(400MHz,CD3OD)δ9.30(s,1H),8.54(s,1H),8.43(d,J＝5.2Hz,1H),8.33(s,1H),7.40(d,J＝5.2Hz,1H),6.98(s,1H),3.15-3.08(m,2H),3.03-2.91(m,2H),2.46(s,3H),2.16-2.13(m,1H),2.03-1.98(m,2H),1.48-1.45(m,1H),1.26-1.24(m,1H)。
实施例90：
(±)-反式-N-(8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-5-(2-甲氧 基乙基)-5-氮杂螺[2.4]庚烷-1-甲酰胺(化合物127)
Figure BDA0002289356600003622
向(±)-反式-N-(8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-5-氮杂螺[2.4]庚烷-1-甲酰胺(30mg,0.08mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(1mL)中的混合物中添加2-溴乙基甲基酯(14mg,0.10mmol)和DIPEA(31mg,0.24mmol)。在25℃，搅拌该混合物3天。浓缩该混合物，并经制备型HPLC提纯，得到(±)-反式-N-(8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-5-(2-甲氧基乙基)-5-氮杂螺[2.4]庚烷-1-甲酰胺(13mg,38％产率)，其为白色固体。LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.723，[M+H]+＝433.2，方法＝I-1；1H NMR(400MHz,CD3OD)δ9.29(s,1H),8.54(s,1H),8.43(d,J＝5.2Hz,1H),8.32(s,1H),7.40(d,J＝5.2Hz,1H),6.98(s,1H),3.53-3.50(m,2H),3.33(s,3H),2.87-2.69(m,6H),2.45(s,3H),2.13-1.92(m,3H),1.43-1.41(m,1H),1.22-1.19(m,1H)。
实施例91：
(±)-顺式-N-(8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-5-(2-甲氧 基乙基)-5-氮杂螺[2.4]庚烷-1-甲酰胺(化合物128)
Figure BDA0002289356600003631
向(±)-顺式-N-(8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-5-氮杂螺[2.4]庚烷-1-甲酰胺(30mg,0.08mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(1mL)中的混合物添加2-溴乙基甲基酯(14mg,0.10mmol)和DIPEA(31mg,0.24mmol)。在25℃搅拌该混合物3天。浓缩该混合物，并经制备型HPLC提纯，得到(±)-顺式-N-(8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-5-(2-甲氧基乙基)-5-氮杂螺[2.4]庚烷-1-甲酰胺(22mg,64％产率)，其为白色固体。LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.763，[M+H]+＝433.3，方法＝I-1；1H NMR(400MHz,CD3OD)δ9.29(s,1H),8.54(s,1H),8.43(d,J＝5.2Hz,1H),8.32(s,1H),7.39(d,J＝5.2Hz,1H),6.97(s,1H),3.56-3.53(m,2H),3.36(s,3H),2.91-2.60(m,6H),2.45(s,3H),2.12-1.96(m,3H),1.40-1.37(m,1H),1.21-1.18(m,1H)。
实施例92：
(±)-反式-N-[8-氨基-6-(4-乙氧基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-氰基- 环丙烷甲酰胺(化合物129)
步骤1：(4-乙氧基-3-吡啶基)硼酸
在-78℃，将n-BuLi(2.5M在己烷中，1.1mL,2.75mmol)溶液逐滴添加至3-溴-4-乙氧基-吡啶(500mg,2.47mmol)、硼酸三异丙基酯(930mg,4.94mmol)的四氢呋喃(5mL)中。在-78℃搅拌该混合物0.5小时然后温热至20℃并搅拌0.5小时。该反应混合物经H2O(5mL)淬灭，且分离该水性层并用EA洗涤(10mL)。该水性层被浓HCl酸化至pH 4-5，并用EA洗涤(10mLx 3)。分离该水层并蒸发，且该残余物经快速色谱提纯(C18，HCOOH/MeOH/H2O)，得到(4-乙氧基-3-吡啶基)硼酸(110mg,27％产率)，其为白色固体。LCMS(ESI)[M+H]+＝168.1。
步骤2：(±)-反式-N-[8-氨基-6-(4-乙氧基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2- 氰基-环丙烷甲酰胺
在100℃、在氩气中，将(±)-反式-N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氰基-环丙烷甲酰胺(100mg,0.35mmol)、(4-乙氧基-3-吡啶基)硼酸(110mg,0.66mmol)、XphosPd G2(30mg,0.04mmol)、Xphos(40mg,0.08mmol)和K2CO3(150mg,1.09mmol)在1,4-二噁烷(16mL)和水(4mL)中的混合物搅拌2小时。将该反应混合物冷却至室温并用EA稀释(100mL)。该混合物用盐水洗涤(20mL)。将该有机层分离，经Na2SO4干燥，过滤并蒸发。该残余物经硅胶柱色谱提纯(EA至EA:MeOH＝10:1)，得到(±)-反式-N-[8-氨基-6-(4-乙氧基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-氰基-环丙烷甲酰胺(75mg,58％产率)，其为淡黄色固体。LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.639，[M+H]+＝375.1，方法＝C；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ11.28(brs，1H),9.37(s,1H),8.95(s,1H),8.42(d,J＝5.6Hz,1H),8.15(s,1H),7.42(s,1H),7.31(brs，2H),7.14(d,J＝5.6Hz,1H),4.23(q,J＝7.2Hz,2H),2.78-2.74(m,1H),2.19-2.15(m,1H),1.64-1.59(m,1H),1.47-1.42(m,1H),1.39(t,J＝7.2Hz,3H)。
实施例93：
1-[8-氨基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-3-甲基-脲(化合物130)
Figure BDA0002289356600003651
步骤1：1-(6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-3-甲基-脲
Figure BDA0002289356600003652
向6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-胺盐酸盐(500mg,2.0mmol)在四氢呋喃(30mL)中的混合物添加三乙胺(8mL,57.4mmol)和三光气(600mg,2.02mmol)。在室温搅拌该混合物，10分钟后添加甲胺盐酸盐(1400mg,20.73mmol)。在室温搅拌该反应混合物1小时。将该反应混合物浓缩至干燥，且用柱色谱提纯，用乙酸乙酯/石油醚(1/1)洗脱，得到1-(6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-3-甲基-脲(190mg,31％产率)，其为黄色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝271.0。
步骤2：1-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-3-甲基-脲
在90℃，将1-(6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-3-甲基-脲(170mg,0.63mmol)在1，4-二噁烷(4mL)和氢氧化铵(25％,4mL,212.71mmol)中的混合物搅拌4小时。浓缩该混合物至干燥，得到粗的1-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-3-甲基-脲(220mg)，其为黄色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝252.1。
步骤3：1-[8-氨基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-3-甲基-脲
在90℃、在氩气中，将1-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-3-甲基-脲(220mg,0.87mmol)、4-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡啶(176mg,0.80mmol)、X-phos-Pd-G2(48mg,0.06mmol)、X-phos(56mg,0.12mmol)和K2CO3(180mg,1.3mmol)在1,4-二噁烷(6mL)和水(1mL)的混合物搅拌1小时。将该反应浓缩至干燥，且在硅胶上用柱色谱提纯，用甲醇/二氯甲烷(1/10-1/7)洗脱，得到1-[8-氨基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-3-甲基-脲(64mg,24％产率)，其为黄色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝309.2，RT(分钟)＝1.35，方法＝E；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.26(s,2H),8.56(s,1H),8.43(d,J＝4.8Hz,1H),7.76(s,1H),7.30(d,J＝4.8Hz,1H),7.26(s,2H),7.13(d,J＝4.4Hz,1H),6.88(s,1H),2.72(d,J＝4.8Hz,3H),2.41(s,3H)。
实施例94：
(±)-反式-N-[8-氨基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-(3-吡啶 基)环丙烷甲酰胺(化合物131)
Figure BDA0002289356600003662
步骤1：(E)-3-(3-吡啶基)丙-2-烯酸叔丁基酯
Figure BDA0002289356600003663
在95℃、在氩气中，将丙烯酸叔丁基酯(12mL,81.92mmol)、3-碘吡啶(6.15g,30mmol)，三-(邻-甲苯基)膦(2.1g,6.91mmol)、Pd(OAc)2(767mg,3.42mmol)和三乙胺(12mL,86.1mmol)在乙腈(50mL)中的混合物搅拌2小时。浓缩该混合物，且用柱色谱提纯(乙酸乙酯/石油1/3至1/1)，得到(E)-3-(3-吡啶基)丙-2-烯酸叔丁基酯(5.55g,90％产率)，其为黄色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝206.1。
步骤2：(±)-(反式)-2-(3-吡啶基)环丙烷甲酸叔丁基酯
在室温，将叔丁醇钠(520mg,5.41mmol)添加至三甲基氧化锍碘化物(1.1g,5mmol)的二甲基亚砜(10mL)溶液中。在室温、在氩气中，搅拌该混合物20分钟。将该反应混合物缓慢逐滴添加至(E)-3-(3-吡啶基)丙-2-烯酸叔丁基酯(1.0g,4.87mmol)的二甲基亚砜(10mL)溶液中。在室温、在氩气中，搅拌该混合物1小时。用饱和NH4Cl稀释该反应混合物，并用乙酸乙酯萃取。将该有机层浓缩，并经硅胶柱色谱提纯(乙酸乙酯/石油醚)，得到(±)-(反式)-2-(3-吡啶基)环丙烷甲酸叔丁基酯(550mg,43％产率)，其为黄色液体。LCMS(ESI):[M+H]+＝220.2。
步骤3：(±)-反式-2-(3-吡啶基)环丙烷甲酸
Figure BDA0002289356600003672
在室温，将(±)-(反式)-2-(3-吡啶基)环丙烷甲酸叔丁基酯(550mg,2.51mmol)的三氟乙酸(2mL,25.96mmol)溶液搅拌1小时。浓缩该溶液至干燥，得到粗的(±)-反式-2-(3-吡啶基)环丙烷甲酸(300mg)，其为无色液体。LCMS(ESI):[M+H]+＝164.1。
步骤4：(±)-反式-N-(6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(3-吡啶基)环丙烷甲酰 胺
Figure BDA0002289356600003673
在室温，将(±)-反式-2-(3-吡啶基)环丙烷甲酸(300mg,1.84mmol)，6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-胺(400mg,1.87mmol)和吡啶(3mL,37.09mmol)在二氯甲烷(10mL)中的混合物搅拌。在室温，将POCl3(0.5mL,5.36mmol)逐滴添加至该混合物。在室温搅拌该混合物1小时，然后用1ml水稀释。浓缩该混合物，且用柱色谱提纯(乙酸乙酯/石油醚30-100％)，得到(±)-反式-N-(6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(3-吡啶基)环丙烷甲酰胺(220mg,31％产率)，其为黄色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝359.0。
步骤5：(±)-反式-N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(3-吡啶基)环丙烷 甲酰胺
Figure BDA0002289356600003681
在95℃，将(±)-反式-N-(6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(3-吡啶基)环丙烷甲酰胺(220mg,0.61mmol)在1,4-二噁烷(4mL)和氢氧化铵(25％,3mL,159.53mmol)的混合物搅拌3小时。浓缩该混合物至干燥，得到(±)-反式-N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(3-吡啶基)环丙烷甲酰胺(250mg)，其为黄色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝340.1。
步骤6：(±)-反式-N-[8-氨基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2- (3-吡啶基)环丙烷甲酰胺
Figure BDA0002289356600003682
在100℃、在氩气中，将(±)-反式-N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(3-吡啶基)环丙烷甲酰胺(250mg,0.74mmol)、4-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡啶(180mg,0.82mmol)、X-phos-Pd-G2(46mg,0.06mmol)、X-phos(68mg,0.14mmol)和K2CO3(266mg,1.93mmol)在1,4-二噁烷(7mL)和水(1mL)中的混合物搅拌1小时。浓缩该反应并用柱色谱提纯(甲醇/二氯甲烷，1/10-1/7)，得到(±)-反式-N-[8-氨基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-(3-吡啶基)环丙烷甲酰胺(130mg,45％产率)，其为黄色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝397.2，RT(分钟)＝1.27，方法＝B；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.00(s,1H),9.37(s,1H),8.57(s,1H),8.51(d,J＝2.0Hz,1H),8.45-8.42(m,2H),8.28(s,1H),7.57(d,J＝8.0Hz,1H),7.35-7.31(m,4H),6.99(s,1H),2.48-2.46(m,1H),2.46-2.45(m,1H),2.42(s,3H),1.59-1.54(m,1H),1.50-1.46(m,1H)。
实施例95：
(±)-反式-N-[8-氨基-6-[5-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-基]-2,7-二氮杂萘-3-基]- 2-氰基-环丙烷甲酰胺(化合物132)
Figure BDA0002289356600003691
在微波反应器中，将含有(±)-反式-N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氰基-环丙烷甲酰胺(120mg,0.42mmol)、4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑(130mg,0.50mmol)、X-phos-Pd-G2(22mg,0.03mmol)、X-phos(27mg,0.06mmol)和乙酸钾(100mg,1.02mmol)的密封管中加热至130℃1小时。将该反应浓缩至干燥，并经反相色谱提纯(甲醇0-60/0.1％氨/水)，得到(±)-反式-N-[8-氨基-6-[5-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-基]-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-氰基-环丙烷甲酰胺(28mg,17％产率)，其为黄色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝388.0，RT(分钟)＝1.76，方法＝E；1H NMR(400MHz,CD3OD)δ9.11(s,1H),8.09(s,2H),6.93(s,1H),2.55-2.50(m,1H),2.06-2.01(m,1H),1.52-1.42(m,2H)。
实施例96：
1-[8-氨基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-3-[(1R,2R)-2-羟基环 戊基]脲(化合物133)
Figure BDA0002289356600003701
步骤1：1-[8-[双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基]- 3-[(1S,2S)-2-羟基环戊基]脲
Figure BDA0002289356600003702
将三光气(110mg,0.37mmol)的四氢呋喃(5mL)溶液添加至3-氯-N1,N1-双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]-2,7-二氮杂萘-1,6-二胺(100mg,0.2mmol)和三乙胺(0.5mL,3.59mmol)的混合物中。在室温搅拌该混合物10分钟，然后添加(3R)-3-羟基吡咯烷-2-酮(200mg,1.98mmol)。在室温搅拌该反应混合物1小时。将该反应混合物浓缩至干燥，且用柱色谱提纯(乙酸乙酯随后甲醇/二氯甲烷，1/15)，得到N-[8-[双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基]氨基甲酸[(3R)-2-氧代吡咯烷-3-基]酯(52mg,31％产率)，其为黄色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝622.2。
步骤2：N-[8-[双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7- 二氮杂萘-3-基]氨基甲酸[(3R)-2-氧代吡咯烷-3-基]酯
Figure BDA0002289356600003711
在100℃、在氩气中，将含有N-[8-[双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基]氨基甲酸[(3R)-2-氧代吡咯烷-3-基]酯(52mg,0.08mmol)、4-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡啶(30mg,0.14mmol)、X-Phos-Pd-G2(8.0mg,0.01mmol)、X-Phos(10.0mg,0.02mmol)和乙酸钾(30mg,0.31mmol)的密封管搅拌1小时。将该反应浓缩至干燥且用柱色谱提纯(甲醇/二氯甲烷1/15)，得到N-[8-[双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]氨基甲酸[(3R)-2-氧代吡咯烷-3-基]酯(47mg,44.5％产率)，其为黄色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝679.3。
步骤3：N-[8-氨基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]氨基甲酸[(3R)- 2-氧代吡咯烷-3-基]酯
Figure BDA0002289356600003712
在55℃，将N-[8-[双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]氨基甲酸[(3R)-2-氧代吡咯烷-3-基]酯(47mg,0.07mmol)的三氟乙酸(3.0mL,38.94mmol)溶液搅拌1小时。将该反应浓缩至干燥，并经反相色谱提纯(甲醇50％/0.05％氨/水)，得到N-[8-氨基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]氨基甲酸[(3R)-2-氧代吡咯烷-3-基]酯(8mg,30％产率)，其为白色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝379.2，RT(分钟)＝1.45，方法＝F；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.50(s,1H),9.33(s,1H),8.57(s,1H),8.44(d,J＝4.8Hz,1H),8.09(s,1H),7.97(s,1H),7.32-7.27(m,3H),6.99(s,1H),5.24(t,J＝4.4Hz,1H),3.29-3.24(m,2H),2.42(s,3H),2.06-1.88(m,2H)。
实施例97：
1-[8-氨基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-3-[(1S,2S)-2-羟基环 戊基]脲(化合物134)
Figure BDA0002289356600003721
步骤1：1-[8-[双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基]- 3-[(1S,2S)-2-羟基环戊基]脲
在90℃，将N-[8-[双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基]氨基甲酸苯基酯(500mg,0.81mmol)、(1S,2S)-2-氨基环戊醇(300mg,2.97mmol)和三乙胺(1.0mL)的N,N-二甲基甲酰胺(5mL)溶液搅拌2小时。向该反应混合物添加20mL盐水，且该混合物经乙酸乙酯萃取(20mL)。然后，分离该有机物，浓缩至干燥，且所得残余物用柱色谱提纯(乙酸乙酯)，得到1-[8-[双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基]-3-[(1S,2S)-2-羟基环戊基]脲(148mg,25％产率)，其为白色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝622.2。
步骤2：1-[8-[双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7- 二氮杂萘-3-基]-3-[(1S,2S)-2-羟基环戊基]脲
Figure BDA0002289356600003731
在100℃、在氩气中，将含有1-[8-[双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基]-3-[(1S,2S)-2-羟基环戊基]脲(148mg,0.24mmol)、4-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡啶(70mg,0.32mmol)、X-phos-Pd-G2(20mg,0.03mmol)、X-phos(24mg,0.05mmol)和K2CO3(100.0mg,0.72mmol)的密封管搅拌1小时。将该反应浓缩至干燥且用柱色谱提纯(甲醇/二氯甲烷，1/10)，得到1-[8-[双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-3-[(1S,2S)-2-羟基环戊基]脲(140mg,59％产率)，其为黄色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝679.3。
步骤3：1-[8-氨基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-3-[(1S,2S)-2- 羟基环戊基]脲
Figure BDA0002289356600003732
在55℃，将1-[8-[双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-3-[(1S,2S)-2-羟基环戊基]脲(140mg,0.21mmol)的三氟乙酸(3.0mL,38.94mmol)溶液搅拌1小时。将该反应浓缩至干燥，并经制备型HPLC提纯(乙腈/0.1％HCOOH/水)，得到1-[8-氨基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-3-[(1S,2S)-2-羟基环戊基]脲(14mg,18％产率)的甲酸盐，其为白色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝379.1，RT(分钟)＝1.64，方法＝E；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.26(s,1H),9.09(s,1H),8.56(s,1H),8.43(d,J＝4.8Hz,1H),8.20(s,1H),7.79(s,1H),7.30(d,J＝4.8Hz,1H),7.24(s,3H),3.87-3.83(m,1H),3.78-3.72(m,1H),2.41(s,3H),2.05-2.00(m,1H),1.85-1.78(m,1H),1.71-1.60(m,2H),1.53-1.46(m,1H),1.42-1.35(m,1H)。
实施例98：
(±)-((反式-)-N-(8-氨基-6-(5-甲基-2-氧代-2,3-二氢苯并[d]噁唑-6-基)-2, 7-二氮杂萘-3-基)-2-氰基环丙烷甲酰胺(化合物135)
步骤1：(±)-(反式-)-N-(8-氨基-6-(3-(4-甲氧基苄基)-5-甲基-2-氧代-2,3-二 氢苯并[d]噁唑-6-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氰基环丙烷甲酰胺
Figure BDA0002289356600003742
在100℃，将(±)-反式-N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氰基-环丙烷甲酰胺(130mg,0.45mmol)、3-[(4-甲氧基苯基)甲基]-5-甲基-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3-苯并噁唑-2-酮(178mg,0.45mmol)、K2CO3(146mg,0.45mmol)和Pd(dppf)Cl2(33mg,0.045mmol)在1,4-二噁烷(10mL)和水(1mL)中的混合物搅拌2小时。浓缩该混合物，并经快速柱色谱提纯(0-100％EA/PE)，得到(±)-反式-N-[8-氨基-6-[3-[(4-甲氧基苯基)甲基]-5-甲基-2-氧代-1,3-苯并噁唑-6-基]-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-氰基-环丙烷甲酰胺(120mg,51％产率)，其为棕色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝521.2。
步骤2：(±)-(反式-)-N-(8-氨基-6-(5-甲基-2-氧代-2,3-二氢苯并[d]噁唑-6- 基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氰基环丙烷甲酰胺
Figure BDA0002289356600003751
在25℃，将(±)-反式-N-[8-氨基-6-[3-[(4-甲氧基苯基)甲基]-5-甲基-2-氧代-1,3-苯并噁唑-6-基]-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-氰基-环丙烷甲酰胺(100mg,0.19mmol)、TFA(1mL)和TfOH(1mL)的混合物搅拌2小时。浓缩该混合物并用NH3/甲醇(7M)碱化。所得残余物用反相色谱提纯(乙腈17-47％/0.05％HCOOH/水)，得到(±)-反式-N-[8-氨基-6-(5-甲基-2-氧代-3H-1,3-苯并噁唑-6-基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-氰基-环丙烷甲酰胺(18mg,24％产率)，其为白色固体。LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.419，[M+H]+＝401.1，方法＝B；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.24(s,1H),9.37(s,1H),8.17(s,1H),8.15(s,1H),7.31(s,1H),7.27(s,2H),6.98(s,1H),6.88(s,1H),2.78-2.73(m,1H),2.37(s,3H),2.17-2.12(m,1H),1.63-1.58(m,1H),1.45-1.41(m,1H)。
实施例99：
(±)-顺式-N1-(8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-N2,N2-二 甲基环丙烷-1,2-二甲酰胺(化合物136)
Figure BDA0002289356600003752
步骤1：(±)-顺式-2-(8-(双(4-甲氧基苄基)氨基)-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 二氮杂萘-3-基氨基甲酰基)环丙烷甲酸甲基酯
Figure BDA0002289356600003753
向(±)-顺式-2-(甲氧基羰基)环丙烷甲酸(263mg,1.83mmol)和DMF(10mg)的二氯甲烷(10mL)溶液中添加草酰氯(278mg,2.2mmol)。在25℃搅拌该混合物1小时。浓缩该混合物，并添加N1,N1-双[(4-甲氧基苯基)甲基]-3-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-1,6-二胺(900mg,1.83mmol)和吡啶(2mL)的二氯甲烷(10mL)溶液。在25℃搅拌该混合物1小时。浓缩该混合物，并经快速柱色谱提纯(0-100％EA/PE)，得到N1,N1-双[(4-甲氧基苯基)甲基]-3-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-1,6-二胺(700mg,75％产率)，其为棕色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝618.2。
步骤2：(±)-顺式-2-(8-(双(4-甲氧基苄基)氨基)-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 二氮杂萘-3-基氨基甲酰基)环丙烷甲酸
Figure BDA0002289356600003761
向(±)-顺式-2-[[8-[双[(4-甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]氨基甲酰基]环丙烷甲酸甲基酯(100mg,0.16mmol)的THF(10mL)溶液中添加1N NaOH(0.32mL)。在25℃搅拌该混合物16小时。该混合物经2N HCl酸化，经EA萃取(30mLx2)，经Na2SO4干燥并浓缩，得到粗的(±)-顺式-2-[[8-[双[(4-甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]氨基甲酰基]环丙烷甲酸(70mg,72％产率)，其为棕色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝604.2。
步骤3：(±)-(顺式)-N1-(8-(双(4-甲氧基苄基)氨基)-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2, 7-二氮杂萘-3-基)-N2,N2-二甲基环丙烷-1,2-二甲酰胺
Figure BDA0002289356600003762
向(±)-顺式-2-[[8-[双[(4-甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]氨基甲酰基]环丙烷甲酸(200mg,0.33mmol)、HATU(125mg,0.33mmol)和DIPEA(128mg,0.99mmol)的二氯甲烷(10mL)溶液中添加N,N-二甲胺盐酸盐(135mg,1.66mmol)。在25℃搅拌该混合物16小时。该混合物用水洗涤(5mL)并浓缩，得到粗的(±)-顺式-N2-[8-[双[(4-甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-N1,N1-二甲基-环丙烷-1,2-二甲酰胺(160mg,51％产率)，其为棕色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝631.3。
步骤4：(±)-(顺式)-N1-(8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)- N2,N2-二甲基环丙烷-1,2-二甲酰胺
Figure BDA0002289356600003771
在25℃，将(±)-顺式-N2-[8-[双[(4-甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-N1,N1-二甲基-环丙烷-1,2-二甲酰胺(80mg,0.13mmol)在TFA(3mL)中的混合物搅拌4小时。浓缩该混合物并用NH3/甲醇(7M)碱化。所得残余物用反相色谱提纯(乙腈0-70/0.05％NH4HCO3/水)，得到(±)-顺式-N2-[8-氨基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-N1,N1-二甲基-环丙烷-1,2-二甲酰胺(3mg,6.1％产率)，其为白色固体。LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.402，[M+H]+＝391.2，方法＝C；1H NMR(400MHz,CD3OD)δ9.26(s,1H),8.53(s,1H),8.43(d,J＝4.8Hz,1H),8.28(s,1H),7.40(d,J＝4.8Hz,1H),6.98(s,1H),3.18(s,3H),2.93(s,3H),2.45(s,3H),2.43-2.41(m,1H),2.35-2.29(m,1H),1.73-1.69(m,1H),1.38-1.33(m,1H)。
实施例100：
(±)-(顺式)-N1-(8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-N2-乙基 环丙烷-1,2-二甲酰胺(化合物137)
Figure BDA0002289356600003781
步骤1：(±)-顺式-N1-(8-(双(4-甲氧基苄基)氨基)-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 二氮杂萘-3-基)-N2-乙基环丙烷-1,2-二甲酰胺
Figure BDA0002289356600003782
向(±)-顺式-2-[[8-[双[(4-甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]氨基甲酰基]环丙烷甲酸(200mg,0.33mmol)、HATU(125mg,0.33mmol)和DIPEA(128mg,0.99mmol)在二氯甲烷(10mL)的溶液中添加乙胺盐酸盐(135mg,1.66mmol)。在25℃搅拌该混合物16小时。该混合物用水洗涤，并用DCM(15mLx2)萃取。合并该有机物，得到粗的(±)-顺式-N1-[8-[双[(4-甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-N2-乙基-环丙烷-1,2-二甲酰胺(150mg,72％产率)，其为棕色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝631.2。
步骤2：(±)-顺式-N1-(8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-N2- 乙基环丙烷-1,2-二甲酰胺
Figure BDA0002289356600003783
在60℃，将(±)-顺式-N1-[8-[双[(4-甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-N2-乙基-环丙烷-1,2-二甲酰胺(80mg,0.13mmol)和TFA(2mL)的混合物搅拌2小时。浓缩该混合物并用NH3/甲醇(7M)碱化。所得残余物用反相色谱提纯(乙腈0-70％/0.05％NH4HCO3/水)，得到(±)-顺式-N1-[8-氨基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-N2-乙基-环丙烷-1,2-二甲酰胺(6mg,12.1％产率)，其为白色固体。LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.428，[M+H]+＝391.1，方法＝C；1H NMR(400MHz,CD3OD)δ9.28(s,1H),8.54(s,1H),8.43(d,J＝5.2Hz,1H),8.31(s,1H),7.40(d,J＝5.2Hz,1H),6.98(s,1H),3.24-3.18(m,2H),2.45(s,3H),2.30-2.26(m,1H),2.14-2.12(m,1H),1.72-1.69(m,1H),1.34-1.30(m,1H),1.11(t,J＝7.2Hz,3H)。
实施例101：
(±)-反式-N1-(8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-N2,N2-二 甲基环丙烷-1,2-二甲酰胺(化合物138)
Figure BDA0002289356600003791
步骤1：(±)-反式-2-(8-(双(2,4-二甲氧基苄基)氨基)-6-(4-甲基吡啶-3-基)- 2,7-二氮杂萘-3-基氨基甲酰基)环丙烷甲酸甲基酯
Figure BDA0002289356600003792
向(±)-反式-2-甲氧基羰基环丙烷甲酸(109mg,0.76mmol)和DMF(10mg)的二氯甲烷(15mL)溶液中添加草酰氯(120mg,0.95mmol)。在25℃搅拌该混合物1小时，然后浓缩。将该残余物添加N1,N1-双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]-3-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-1,6-二胺(350mg,0.63mmol)和吡啶(0.5mL)的二氯甲烷(15mL)溶液中。在25℃继续搅拌该混合物1小时。浓缩该混合物，得到(±)-反式-2-[[8-[双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]氨基甲酰基]环丙烷甲酸甲基酯(560mg,29％产率)。LCMS(ESI):[M+H]+＝678.3。
步骤2：(±)-反式-2-(8-(双(2,4-二甲氧基苄基)氨基)-6-(4-甲基吡啶-3-基)- 2,7-二氮杂萘-3-基氨基甲酰基)环丙烷甲酸
Figure BDA0002289356600003801
在25℃，将(反式)-2-[[8-[双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]氨基甲酰基]环丙烷甲酸甲基酯(560mg,0.18mmol)和1N LiOH(0.73mL)在四氢呋喃(10mL)中的混合物搅拌16小时。该混合物用乙酸乙酯稀释(10mL)。该水性层用1N HCl酸化并用乙酸乙酯萃取(15mLx2)。将该有机层浓缩，得到(±)-(反式-)-2-[[8-[双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]氨基甲酰基]环丙烷甲酸(120mg,40％产率)，其为棕色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝664.3。
步骤3：(±)-反式-N1-(8-(双(2,4-二甲氧基苄基)氨基)-6-(4-甲基吡啶-3-基)- 2,7-二氮杂萘-3-基)-N2,N2-二甲基环丙烷-1,2-二甲酰胺
Figure BDA0002289356600003802
在25℃，将(±)-反式-2-[[8-[双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]氨基甲酰基]环丙烷甲酸(120mg,0.07mmol)、N,N-二甲胺盐酸盐(29mg,0.36mmol)、HATU(27mg,0.07mmol)和DIPEA(27mg,0.22mmol)在二氯甲烷(10mL)中的混合物搅拌16小时。该混合物用H2O洗涤(10mL)，浓缩且该残余物直接用于下一步骤中，无需进一步提纯。LCMS(ESI):[M+H]+＝691.3。
步骤4：(±)-反式-N1-(8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-N2, N2-二甲基环丙烷-1,2-二甲酰胺
Figure BDA0002289356600003811
在50℃，将(±)-反式-N2-[8-[双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-N1,N1-二甲基-环丙烷-1,2-二甲酰胺(150mg,0.22mmol)在TFA(8mL)中的混合物搅拌3小时。浓缩该混合物并用NH3/甲醇(7M)碱化。所得残余物用反相色谱提纯(乙腈0-70/0.5％NH4HCO3/水)，得到(±)-反式-N2-[8-氨基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-N1,N1-二甲基-环丙烷-1,2-二甲酰胺(40mg,47％产率)，其为白色固体。LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.522，[M+H]+＝391.2，方法＝C；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.05(s,1H),9.37(s,1H),8.56(s,1H),8.44(d,J＝4.8Hz,1H),8.25(s,1H),7.32(d,J＝4.8Hz,1H),7.30(s,2H),6.97(s,1H),3.12(s,3H),2.86(s,3H),2.48-2.45(m,1H),2.41(s,3H),2.39-2.35(m,1H),1.28-1.25(m,1H)。
实施例102：
(±)-反式-N-(8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-甲基环丙 烷甲酰胺(化合物139)
Figure BDA0002289356600003812
步骤1：(±)-反式-N-(6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-甲基环丙烷甲酰胺
Figure BDA0002289356600003813
在0℃，将6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-胺(200mg,0.93mmol)、(±)-(反式)-2-甲基环丙烷甲酸(113mg,1.13mmol)在吡啶(0.5mL)和二氯甲烷(4mL)中的混合物搅拌0.5小时。分批添加POCl3(0.1mL,1.07mmol)。在室温搅拌该混合物1小时。用EtOAc(10mL)稀释该反应，并用饱和NaHCO3将pH调节至7-8。然后，分离该有机物，干燥(NaSO4)并浓缩至干燥。该残余物经硅胶柱色谱提纯(PE:EA＝10:1至PE:EA＝4:1)，得到为固体的所述标题化合物(200mg,70％产率。LCMS(ESI)[M+H]+＝296.1。
步骤2：(±)-反式-N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-甲基环丙烷甲酰胺
Figure BDA0002289356600003821
在90℃、在氩气中，将(±)-反式-N-(6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-甲基-环丙烷甲酰胺(195mg,0.66mmol)、NH4OH(2mL,0.66mmol)在1,4-二噁烷(2mL)的混合物加热3小时。浓缩该反应，并用硅胶色谱提纯(PE:EA＝2:1至PE:EA＝1:1)，得到所述标题化合物，其为白色固体(150mg,82％产率)。LCMS(ESI)[M+H]+＝277.1。
步骤3：(±)-反式-N-(8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-甲 基环丙烷甲酰胺
在100℃、在氩气中，将(±)-反式-N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-甲基-环丙烷甲酰胺(80mg,0.29mmol)、4-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡啶(76mg,0.35mmol)、Xphos Pd G2(23mg,0.03mmol)、Xphos(14mg,0.03mmol)和K2CO3(120mg,0.87mmol)在1,4-二噁烷(4mL)和水(1mL)的混合物加热3小时。将该反应浓缩至干燥，并用硅胶色谱提纯(PE:EA＝1:1至EA)，得到所述标题化合物，其为白色固体(67.3mg,70％产率)。LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.39，[M+H]+＝334.2，方法＝B。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.87(s,1H),9.36(s,1H),8.56(s,1H),8.43(d,J＝4.8Hz,1H),8.22(s,1H),7.31-7.30(m,3H),6.95(s,1H),2.40(s,3H),1.85-1.81(m,1H),1.29-1.24(m,1H),1.10(d,J＝6.0Hz,3H),1.07-1.02(m,1H),0.71-0.66(m,1H)。
实施例103：
(±)-反式-N-(8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(三氟甲 基)环丙烷甲酰胺(化合物140)
步骤1：(±)-反式-N-(6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(三氟甲基)环丙烷甲酰 胺
Figure BDA0002289356600003832
在0℃，将6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-胺(200mg,0.93mmol)、(±)-反式-2-(三氟甲基)环丙烷甲酸(173mg,1.12mmol)在吡啶(0.5mL)和二氯甲烷(4mL)中的混合物搅拌0.5小时。然后，将POCl3(0.1mL,1.07mmol)添加该反应混合物并在室温搅拌该混合物1小时。该反应混合物用EtOAc稀释(20mL)并用饱和NaHCO3调节pH至7-8。将该有机物分离，干燥(NaSO4)并浓缩至干燥。该残余物经硅胶柱色谱提纯(PE:EA＝10:1至PE:EA＝4:1)，得到所述标题化合物，其为白色固体(220mg,65％产率)。LCMS(ESI)[M+H]+＝350.0。
步骤2：(±)-反式-N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(三氟甲基)环丙烷 甲酰胺
Figure BDA0002289356600003833
在90℃、在氩气中，将(±)-反式-N-(6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(三氟甲基)环丙烷甲酰胺(215mg,0.61mmol)和NH4OH(2mL,0.61mmol)在1,4-二噁烷(2mL)中的混合物加热3小时。浓缩该反应，并经硅胶柱色谱提纯(PE:EA＝4:1PE:EA＝2:1)，得到所述标题化合物，其为白色固体(180mg,88％产率)。LCMS(ESI)[M+H]+＝331.1。
步骤3：(±)-反式-N-(8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2- (三氟甲基)环丙烷甲酰胺
Figure BDA0002289356600003841
在100℃、在氩气中，将4-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡啶(64mg,0.29mmol)、(反式)-N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(三氟甲基)环丙烷甲酰胺(80mg,0.24mmol)、Xphos Pd G2(19mg,0.02mmol)、Xphos(12mg,0.03mmol)和K2CO3(101mg,0.73mmol)在1,4-二噁烷(4mL)和水(1mL)中的混合物加热3小时。浓缩该反应，并用硅胶色谱提纯(PE:EA＝3:1)，得到所述标题化合物，其为白色固体(50.3mg,54％产率)。LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.46，[M+H]+＝388.2，方法＝B。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.20(s,1H),9.39(s,1H),8.56(s,1H),8.43(d,J＝4.8Hz,1H),8.23(s,1H),7.35(s,2H),7.31(d,J＝4.8Hz,1H),6.99(s,1H),2.32-2.59(m,1H),2.41(s,3H),2.33-2.30(m,1H),1.35-1.31(m,2H)。
实施例104：
(±)-顺式-N-(8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-甲基环丙 烷甲酰胺(化合物141)
步骤1：(±)-顺式-N-(6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-甲基环丙烷甲酰胺
Figure BDA0002289356600003851
在0℃，将6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-胺(200mg,0.93mmol)、(±)-顺式-2-甲基环丙烷甲酸(113mg,1.13mmol)在吡啶(0.5mL)和二氯甲烷(4mL)中的混合物搅拌0.5小时。然后分批添加POCl3(0.1mL,1.07mmol)。在室温搅拌该混合物1小时。该反应混合物用EtOAc稀释(10mL)并用饱和NaHCO3将pH调节至7-8。然后，分离该有机物，干燥(Na2SO4)，浓缩，并用硅胶色谱提纯(PE:EA＝10:1至PE:EA＝4:1)，得到(±)-顺式-N-(6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-甲基-环丙烷甲酰胺(200mg,72％产率)，其为白色固体。LCMS(ESI)[M+H]+＝296.1。
步骤2：(±)-顺式-N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-甲基环丙烷甲酰胺
Figure BDA0002289356600003852
在90℃、在氩气中，将(±)-顺式-N-(6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-甲基-环丙烷甲酰胺(180mg,0.61mmol)、NH4OH(4mL,0.61mmol)在1,4-二噁烷(4mL)中的混合物加热3小时。浓缩该反应，并用硅胶色谱提纯(PE:EA＝2:1至PE:EA＝1:1)，得到(±)-顺式-N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-甲基-环丙烷甲酰胺(150mg,89％产率)，其为白色固体。LCMS(ESI)[M+H]+＝277.1。
步骤3：(±)-顺式-N-(8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-甲 基环丙烷甲酰胺
Figure BDA0002289356600003853
在100℃、在氩气中，将(±)-顺式-N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-甲基-环丙烷甲酰胺(130mg,0.47mmol)、4-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡啶(124mg,0.57mmol)、Xphos Pd G2(74mg,0.09mmol)、Xphos(90mg,0.19mmol)和K2CO3(195mg,1.41mmol)在1,4-二噁烷(15mL)和水(3mL)中的混合物加热3小时。浓缩该反应，并用硅胶色谱提纯(PE:EA＝1:1至EA至DCM:MeOH＝20))，得到(±)-顺式-N-[8-氨基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-甲基-环丙烷甲酰胺(71mg,46％产率)，其为白色固体。LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.72，[M+H]+＝334.1，方法＝C；1H NMR(CD3OD，400MHz)：δ9.29(s,1H),8.54(s,1H),8.43(d,J＝5.2Hz,1H),8.32(s,1H),7.41(d,J＝5.2Hz,1H),7.00(s,1H),2.46(s,3H),2.03-1.98(m,1H),1.45-1.38(m,1H),1.22(d,J＝6.0Hz,3H),1.10-1.05(m,1H),1.02-0.98(m,1H)。
实施例105：
(±)-反式-N-(8-氨基-6-(3,5-二甲基-2-氧代-2,3-二氢苯并[d]噁唑-6-基)-2, 7-二氮杂萘-3-基)-2-氰基环丙烷甲酰胺(化合物142)
Figure BDA0002289356600003861
步骤1：6-溴-5-甲基苯并[d]噁唑-2(3H)-酮
Figure BDA0002289356600003862
在20℃，将5-甲基-3H-1,3-苯并噁唑-2-酮(1.0g,6.70mmol)和1-溴-2,5-吡咯烷二酮(1.3g,7.30mmol)在乙酸(15mL)中的混合物搅拌16小时。该混合物用水稀释(50mL)并继续搅拌15分钟。然后过滤该混合物并用水洗涤(10mL)，得到6-溴-5-甲基-3H-1,3-苯并噁唑-2-酮(1.2g,79％产率)，其为白色固体。LCMS(ESI)[M+H]+＝228.1。
步骤2：6-溴-3,5-二甲基苯并[d]噁唑-2(3H)-酮
Figure BDA0002289356600003863
在0℃，向6-溴-5-甲基-3H-1,3-苯并噁唑-2-酮(200mg,0.88mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(4mL)的溶液中添加氢化钠(60％在矿物油中，50mg,1.25mmol)。在0℃搅拌该混合物15分钟。添加碘甲烷(0.1mL,1.61mmol)。在0℃搅拌该反应混合物1小时，然后用20mL盐水稀释。该反应混合物经乙酸乙酯萃取(10mL)，且该有机物用盐水洗涤。将该有机物分离，浓缩并经硅胶柱色谱提纯(EA:PE＝1:4)，得到为白色固体的6-溴-3,5-二甲基-1,3-苯并噁唑-2-酮(190mg,0.78mmol，89.5％产率)。LCMS(ESI)[M+H]+＝242.1。
步骤3：3,5-二甲基-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯并 [d]噁唑-2(3H)-酮
向密封管内添加6-溴-3,5-二甲基-1,3-苯并噁唑-2-酮(180mg,0.74mmol)、双(频哪醇合)二硼(220mg,0.87mmol)、Pd(dppf)Cl2(52mg,0.07mmol)、乙酰氧基钾(220mg,2.24mmol)和1,4-二噁烷(10mL)。该混合物用N2鼓泡2分钟，在100℃并搅拌3小时。随后该混合物直接经硅胶柱色谱提纯(EA:PE＝1:4)，得到3,5-二甲基-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3-苯并噁唑-2-酮(180mg,84％产率)，其为白色固体。LCMS(ESI)[M+H]+＝290.1。
步骤4：(±)-反式-N-(8-氨基-6-(3,5-二甲基-2-氧代-2,3-二氢苯并[d]噁唑-6- 基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氰基环丙烷甲酰胺
Figure BDA0002289356600003872
在100℃、在氩气中，将(±)-反式-N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氰基-环丙烷甲酰胺(100mg,0.35mmol)、3,5-二甲基-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3-苯并噁唑-2-酮(207.0mg,0.72mmol)、Xphos Pd G2(60mg,0.08mmol)、AcOK(80mg,0.82mmol)和XPhos(70mg,0.15mmol)在1,4-二噁烷(15mL)和水(3mL)中的混合物搅拌2小时。该混合物直接经硅胶柱色谱提纯(EA:PE＝1:1至EA至DCM:MeOH＝20:1)，然后反相色谱(乙腈0-50/0.1％NH4HCO3/水)，得到(±)-反式-N-[8-氨基-6-(3,5-二甲基-2-氧代-1,3-苯并噁唑-6-基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-氰基-环丙烷甲酰胺(7.7mg,5.3％产率)，其为白色固体。LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.76，[M+H]+＝415.1，方法＝C；1HNMR(400MHz,DMSO-d6)：δ11.24(s,1H),9.37(s,1H),8.18(s,1H),7.36(s,1H),7.29(s,2H),7.17(s,1H),6.89(s,1H),3.36(s,3H),2.79-2.73(m,1H),2.42(s,3H),2.18-2.13(m,1H),1.63-1.59(m,1H),1.46-1.41(m,1H)。
实施例106：
外型-3-乙酰基-N-[8-氨基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-3-氮杂 双环[3.1.0]己烷-6-甲酰胺(化合物143)
Figure BDA0002289356600003881
在25℃，将外型-N-[8-氨基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-3-氮杂双环[3.1.0]己烷-6-甲酰胺(80mg,0.22mmol)、TEA(67mg,0.66mmol)和CH3COCl(22mg,0.28mmol)在二氯甲烷(6mL)中的混合物搅拌2小时。将该反应混合物浓缩，并经制备型HPLC提纯(柱Xbridge 21.2x250mm C18，10um，流动相A：水(10mmol/L NH4HCO3)B：ACN)，得到外型-3-乙酰基-N-[8-氨基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-3-氮杂双环[3.1.0]己烷-6-甲酰胺(4mg,4.5％产率)，其为白色固体。LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.436，[M+H]+＝403.1，方法＝H；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.82(s,1H),9.36(s,1H),8.56(s,1H),8.43(d,J＝5.2Hz,1H),8.22(s,1H),7.32-7.31(m,3H),6.95(s,1H),3.70-3.66(m,2H),3.38-3.33(m,2H),2.41(s,3H),2.14-2.12(m,1H),2.07-2.05(m,1H),1.95-1.93(m,4H)。
实施例107：
(±)-反式-N-[8-氨基-6-(5-甲基-2-氧代-3H-1,3-苯并噁唑-6-基)-2,7-二氮杂 萘-3-基]-2-(1H-吡唑-4-基)环丙烷甲酰胺(化合物144)
步骤1：(±)-反式-N-[8-氨基-6-[3-[(4-甲氧基苯基)甲基]-5-甲基-2-氧代-1, 3-苯并噁唑-6-基]-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-(1-四氢吡喃-2-基吡唑-4-基)环丙烷甲酰胺
在100℃、在氩气中，将(±)-反式-N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(1-四氢吡喃-2-基吡唑-4-基)环丙烷甲酰胺(280mg,0.7mmol)、X-phos-Pd-G2(98mg,0.12mmol)、K2CO3(280mg,2mmol)和3-[(4-甲氧基苯基)甲基]-5-甲基-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3-苯并噁唑-2-酮(280mg,0.7mmol)在1,4-二噁烷(2mL)和水(0.5mL)中的混合物加热3小时。浓缩该反应，并经快速柱色谱提纯，得到(±)-反式-N-[8-氨基-6-[3-[(4-甲氧基苯基)甲基]-5-甲基-2-氧代-1,3-苯并噁唑-6-基]-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-(1-四氢吡喃-2-基吡唑-4-基)环丙烷甲酰胺(180mg,33％产率)，其为黄色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝645.1。
步骤2：(±)-反式-N-[8-氨基-6-(5-甲基-2-氧代-3H-1,3-苯并噁唑-6-基)-2,7- 二氮杂萘-3-基]-2-(1H-吡唑-4-基)环丙烷甲酰胺
Figure BDA0002289356600003892
在25℃将(±)-反式-N-[8-氨基-6-[3-[(4-甲氧基苯基)甲基]-5-甲基-2-氧代-1,3-苯并噁唑-6-基]-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-(1-四氢吡喃-2-基吡唑-4-基)环丙烷甲酰胺(140mg,0.2mmol)、TFA(3mL,0.2mmol)和TfOH(3mL,0.2mmol)的混合物搅拌2小时。用MeOH中的NH3中和该混合物，浓缩并经制备型HPLC提纯，得到(±)-反式-N-[8-氨基-6-(5-甲基-2-氧代-3H-1,3-苯并噁唑-6-基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-(1H-吡唑-4-基)环丙烷甲酰胺(7mg,7.3％产率)，其为黄色固体。LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.504，[M+H]+＝442.1，方法＝E；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.27(s,1H),8.30(s,1H),7.27(s,1H),7.03(s,1H),6.91(s,1H),2.46-2.41(m,1H),2.38(s,3H),2.15-2.13(m,1H),1.63-1.56(m,1H),1.31-1.28(m,1H)。
实施例108：
(±)-反式-N-[8-氨基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-[3-[(4- 甲氧基苯基)甲基]咪唑-4-基]环丙烷甲酰胺(化合物145)
Figure BDA0002289356600003901
步骤1：(E)-3-(1H-咪唑-5-基)丙-2-烯酸甲基酯
Figure BDA0002289356600003902
在0℃，向(E)-3-(1H-咪唑-5-基)丙-2-烯酸(5g,36mmol)的甲醇(50mL)溶液中添加亚硫酰氯(5.5mL,75mmol)。将该混合物加热至70℃并回流过夜。然后浓缩该混合物并将所得残余物溶于乙酸乙酯，并用水洗涤。将该有机层浓缩，得到(E)-3-(1H-咪唑-5-基)丙-2-烯酸甲基酯(6g,98％产率)，其为白色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝153.1。
步骤2：(E)-3-[3-[(4-甲氧基苯基)甲基]咪唑-4-基]丙-2-烯酸甲基酯
在0℃，向(E)-3-(1H-咪唑-5-基)丙-2-烯酸甲基酯(6g,39mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(50mL)中的混合物中添加NaH(1.6g,40mmol)。搅拌该反应0.5小时，然后添加4-甲氧基苄基氯(6.2g,39mmol)。在25℃搅拌该反应过夜。该混合物用乙酸乙酯稀释(200mL)，用盐水洗涤(10mLx3)，并将该有机物干燥浓缩。所得残余物经快速柱色谱提纯(10％EtOAc/PE)，得到(E)-3-[3-[(4-甲氧基苯基)甲基]咪唑-4-基]丙-2-烯酸甲基酯(10g,74％产率)，其为白色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝273.1。
步骤3：(±)-2-[3-[(4-甲氧基苯基)甲基]咪唑-4-基]环丙烷甲酸甲基酯
Figure BDA0002289356600003911
向三甲基氧化锍碘化物(10.5g,47mmol)在二甲基亚砜(100mL)中的混合物中添加NaH(2g,50mmol)。在室温、在N2中，搅拌该混合物0.5小时，然后添加在二甲基亚砜(150mL)中的(E)-3-[3-[(4-甲氧基苯基)甲基]咪唑-4-基]丙-2-烯酸甲基酯(10g,36mmol)。在室温、在N2中，搅拌该混合物1小时。将饱和氯化铵水溶液和水添加该反应混合物中，且该混合物经乙酸乙酯萃取。将该有机层用水和饱和盐水洗涤，经无水硫酸镁干燥，过滤，并浓缩。该残余物经硅胶柱色谱提纯(乙烷-乙酸乙酯100:0-60:40，v/v)，得到2-[3-[(4-甲氧基苯基)甲基]咪唑-4-基]环丙烷甲酸甲基酯(1.8g,10％产率)，其为无色油状物。LCMS(ESI):[M+H]+＝287.1。
步骤4：(±)-反式-2-[3-[(4-甲氧基苯基)甲基]咪唑-4-基]环丙烷甲酸
Figure BDA0002289356600003912
在室温，向2-[3-[(4-甲氧基苯基)甲基]咪唑-4-基]环丙烷甲酸甲基酯(2g,7mmol)的四氢呋喃(60mL)和水(20mL)溶液中添加一水合氢氧化锂(2g,47mmol)。搅拌该反应3小时。将所得反应浓缩至干燥。该残余物用水稀释(10mL)，然后经EtOAc(3×80mL)萃取。用浓HCl溶液将该水相酸化至pH＝4，并在减压下干燥，得到所述标题化合物2-[3-[(4-甲氧基苯基)甲基]咪唑-4-基]环丙烷甲酸(1.6g,73％产率)，其为白色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝272.2。
步骤5：(±)-反式-N-(6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-[3-[(4-甲氧基苯基)甲 基]咪唑-4-基]环丙烷甲酰胺
Figure BDA0002289356600003921
在0℃，向6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-胺(200mg,0.9mmol)和三氯氧磷(120mg,0.8mmol)在吡啶(8mL)中的混合物添加(±)-反式-2-[3-[(4-甲氧基苯基)甲基]咪唑-4-基]环丙烷甲酸(200mg,0.7mmol)。在0℃将所得混合物搅拌1小时。然后，用饱和NaHCO3水溶液稀释该反应并用乙酸乙酯萃取(20mLx2)。浓缩该合并的乙酸乙酯层，并用快速柱色谱提纯(PE:EA＝3:1-1:3)，得到(±)-反式-N-(6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-[3-[(4-甲氧基苯基)甲基]咪唑-4-基]环丙烷甲酰胺(400mg,81％产率)，其为淡黄色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝467.1。
步骤6：(±)-反式-N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-[3-[(4-甲氧基苯 基)甲基]咪唑-4-基]环丙烷甲酰胺
Figure BDA0002289356600003922
在90℃、在氩气中，将(±)-反式-N-(6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(1-四氢吡喃-2-基吡唑-4-基)环丙烷甲酰胺(300mg,0.69mmol)、NH4OH(8mL,0.69mmol)在1,4-二噁烷(8mL)中的混合物加热4小时。将该反应浓缩至干燥。该粗产物直接使用，无需进一步提纯。LCMS(ESI):[M+H]+＝449.1。
步骤7：(±)-反式-N-[8-氨基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2- [3-[(4-甲氧基苯基)甲基]咪唑-4-基]环丙烷甲酰胺
Figure BDA0002289356600003923
在100℃、在氩气中，将4-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡啶(175mg,0.8mmol)、(±)-反式-N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-[3-[(4-甲氧基苯基)甲基]咪唑-4-基]环丙烷甲酰胺(250mg,0.5mmol)、Xphos Pd G2(50mg,0.06mmol)、Xphos(60mg,0.1mmol)和K2CO3(250mg,1.8mmol)在1,4-二噁烷(10mL)和水(2mL)中的混合物加热3小时。将该反应混合物浓缩并在硅胶柱上提纯(乙酸乙酯/石油醚，1:1)，得到(±)-反式-N-[8-氨基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-[3-[(4-甲氧基苯基)甲基]咪唑-4-基]环丙烷甲酰胺(69mg,24.5％产率)，其为淡黄色固体。LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.40，[M+H]+＝506.1，方法＝B；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.28(s,1H),8.54(s,1H),8.43(d,J＝5.2Hz,1H),8.32(s,1H),7.63(s,1H),7.40(d,J＝5.2Hz,1H),7.23(d,J＝8.5Hz,2H),7.01-6.89(m,4H),5.09(s,2H),3.80(s,3H),2.54-2.39(m,4H),2.26-2.15(m,1H),1.57-1.52(m,1H),1.42-1.38(m,1H)。
实施例109：
(±)-反式-N-[8-氨基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-(1-乙基 磺酰基吡唑-4-基)环丙烷甲酰胺(化合物146)
步骤1：(±)-反式-N-(6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(1H-吡唑-4-基)环丙烷 甲酰胺
Figure BDA0002289356600003932
向(±)-反式-N-(6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(1-四氢吡喃-2-基吡唑-4-基)环丙烷甲酰胺(290mg,0.6mmol)在二氯甲烷(5mL)中的混合物添加TFA(5mL,67.3mmol)。在室温搅拌该混合物1小时。该粗产物直接使用无需进一步提纯。LCMS(ESI):[M+H]+＝348.1。
步骤2：(±)-反式-N-(6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(1-乙基磺酰基吡唑-4- 基)环丙烷甲酰胺
Figure BDA0002289356600003941
向乙磺酰氯(2mL)和(±)-反式-N-(6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(1H-吡唑-4-基)环丙烷甲酰胺(190mg,0.5mmol)的二氯甲烷(10mL)溶液中添加NEt3(2mL,0.5mmol)。在20℃搅拌该混合物2小时。将该反应混合物浓缩，并在硅胶上经柱色谱提纯，用乙酸乙酯/石油醚(1:1)洗脱，得到(±)-反式-N-(6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(1-乙基磺酰基吡唑-4-基)环丙烷甲酰胺(150mg,56％产率)，其为淡黄色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝440.1。
步骤3：(±)-反式-N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(1H-吡唑-4-基)环 丙烷甲酰胺
Figure BDA0002289356600003942
在90℃、在氩气中，将NH4OH(8mL,0.6mmol)、(±)-反式-N-(6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(1-乙基磺酰基吡唑-4-基)环丙烷甲酰胺(290mg,0.6mmol)在1,4-二噁烷(8mL)中的混合物加热4小时。浓缩该反应，并直接使用无需进一步提纯。LCMS(ESI):[M+H]+＝329.1。
步骤4：(±)-反式-N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(1-乙基磺酰基吡 唑-4-基)环丙烷甲酰胺
Figure BDA0002289356600003951
向乙磺酰氯(2mL)和(±)-反式-N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(1H-吡唑-4-基)环丙烷甲酰胺(140mg,0.4mmol)的二氯甲烷(2mL)溶液中添加NEt3(2mL,0.5mmol)。在20℃搅拌该混合物2小时。浓缩该反应混合物，并经快速色谱提纯，得到(±)-反式-N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(1-乙基磺酰基吡唑-4-基)环丙烷甲酰胺(100mg,50％产率)，其为白色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝420.1。
步骤5：(±)-反式-N-[8-氨基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2- (1-乙基磺酰基吡唑-4-基)环丙烷甲酰胺
Figure BDA0002289356600003952
在100℃、在氩气中，将4-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡啶(80mg,0.3mmol)、Xphos Pd G2(20mg,0.03mmol)、Xphos(30mg,0.06mmol)、K2CO3(110mg,0.8mmol)和(±)-反式-N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(1-乙基磺酰基吡唑-4-基)环丙烷甲酰胺(100mg,0.2mmol)在1,4-二噁烷(10mL)和水(2mL)中的混合物加热3小时。将该反应混合物浓缩，并经制备型HPLC提纯，得到(±)-反式-N-[8-氨基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-(1-乙基磺酰基吡唑-4-基)环丙烷甲酰胺(40mg,35％产率)，其为白色固体。LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.560，[M+H]+＝478.1，方法＝B；1H NMR(400MHz,CD3OD)δ9.30(s,1H),8.55(s,1H),8.44(d,J＝5.2Hz,1H),8.34(s,1H),8.12(s,1H),7.85(s,1H),7.41(d,J＝5.2Hz,1H),7.00(s,1H),3.56(q,J＝7.6Hz,2H),2.48-2.47(m,4H),2.28-2.13(m,1H),1.67-1.62(m,1H),1.39-1.34(m,1H),1.21(t,J＝7.6Hz,3H)。
实施例110：
(±)-反式-N-(8-氨基-6-(5-(二氟甲基)-4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3- 基)-2-氰基环丙烷甲酰胺(化合物147)
Figure BDA0002289356600003961
步骤1：3-溴-5-(二氟甲基)-4-甲基吡啶
Figure BDA0002289356600003962
在氩气中，向5-溴-4-甲基-吡啶-3-甲醛(300mg,1.50mmol)的二氯甲烷(20mL)溶液中添加二乙基氨基三氟化硫(290mg,1.80mmol)，在氩气中搅拌该反应混合物16小时。该混合物经饱和NaHCO3(5mL)淬灭并分离该相。收集该有机层，用盐水洗涤(5mL×3)，经Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩。该残余物用制备型TLC提纯(EtOAc/PE＝1:5)，得到3-溴-5-(二氟甲基)-4-甲基-吡啶(220mg,63％产率)，其为黄色油状物。LCMS(ESI)[M+H]+＝221.7。
步骤2：3-(二氟甲基)-4-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2- 基)吡啶
Figure BDA0002289356600003963
向反应管中添加3-溴-5-(二氟甲基)-4-甲基-吡啶(80mg,0.36mmol)、KOAc(70mg,0.72mmol)、Pd(dppf)Cl2(13mg,0.02mmol)、双(频哪醇合)二硼(183mg,0.72mmol)和1,4-二噁烷(10mL)。在100℃、在N2中，搅拌该混合物16小时。将该反应混合物过滤并在真空中浓缩。该粗产物材料直接用于下一步骤中无需进一步提纯。LCMS(ESI)[M+H]+＝187.7。
步骤3：(±)-反式-N-(8-氨基-6-(5-(二氟甲基)-4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂 萘-3-基)-2-氰基环丙烷甲酰胺
向3-(二氟甲基)-4-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡啶(84mg,0.31mmol)在1,4-二噁烷(10mL)和水(2mL)中的混合物添加(±)-反式-N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氰基-环丙烷甲酰胺(60mg,0.21mmol)、XphosPdG2(16mg,0.02mmol)、Xphos(20mg,0.04mmol)和KOAc(61mg,0.63mmol)。将该混合物加热至100℃2小时。将在真空中浓缩该反应混合物并经制备型TLC提纯(DCM/MeOH＝20/1)，随后经制备型HPLC提纯，得到(±)-反式-N-[8-氨基-6-[5-(二氟甲基)-4-甲基-3-吡啶基]-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-氰基-环丙烷甲酰胺(14mg,16.8％产率)，其为白色固体。LCMS(ESI)[M+H]+＝394.7，RT(分钟)＝1.591，方法＝G；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.29(s,1H),9.42(s,1H),8.69(s,1H),8.68(s,1H),8.22(s,1H),7.21-7.48(m,3H),7.00(s,1H),2.74-2.79(m,1H),2.40(s,3H),2.13-2.18(m,1H),1.59-1.64(m,1H),1.41-1.46(m,1H)。
实施例111：
(±)-反式-N-(8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-5-(甲基磺 酰基)-5-氮杂螺[2.4]庚烷-1-甲酰胺(化合物148)
Figure BDA0002289356600003972
在0℃，向N,N-二乙胺(0.50mL,4.65mmol)在二氯甲烷(15mL)中的悬浮液中添加甲磺酰氯(0.17mL,2.20mmol)和(±)-反式-N-[8-氨基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-5-氮杂螺[2.4]庚烷-2-甲酰胺盐酸盐(50mg,0.12mmol)。在0℃搅拌该混合物30分钟。在0℃将甲磺酰氯(84mg)添加该混合物中。继续搅拌该反应混合物30分钟，然后用水稀释(3mL)。浓缩该混合物，并经制备型HPLC提纯，得到(±)-反式-N-[8-氨基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-5-甲基磺酰基-5-氮杂螺[2.4]庚烷-2-甲酰胺(29mg,51％产率)，其为白色固体。LCMS(ESI)[M+H]+＝452.7，RT(分钟)＝1.494，方法＝G.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.00(s,1H),9.37(s,1H),8.56(s,1H),8.43(d,J＝4.8Hz,1H),8.27(s,1H),7.30-7.32(m,3H),6.99(s,1H),3.33-3.39(m,4H),2.84(s,3H),2.41(s,3H),2.26-2.30(m,1H),1.88-2.01(m,2H),1.22-1.29(m,2H)。
实施例112：
(±)-顺式-N-(8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-5-(甲基磺 酰基)-5-氮杂螺[2.4]庚烷-1-甲酰胺(化合物149)
Figure BDA0002289356600003981
在0℃，向(±)-顺式-N-[8-氨基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-5-氮杂螺[2.4]庚烷-2-甲酰胺盐酸盐(25mg,0.06mmol)在二氯甲烷(10mL)中的悬浮液中添加N,N-二乙胺(0.29mL,2.79mmol)和甲磺酰氯(140mg)。在0℃搅拌该混合物30分钟。在0℃将甲磺酰氯(84mg)添加该混合物，并在0℃继续搅拌该反应混合物30分钟。该反应混合物用水稀释(3mL)并浓缩。该粗物质经制备型HPLC提纯，得到(±)-顺式-N-[8-氨基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-5-甲基磺酰基-5-氮杂螺[2.4]庚烷-2-甲酰胺(9mg,33％产率)，其为白色固体。LCMS(ESI)[M+H]+＝452.7，RT(分钟)＝1.504，方法＝G。1HNMR(400MHz,CD3OD)δ9.30(s,1H),8.54(s,1H),8.43(d,J＝5.2Hz,1H),8.34(s,1H),7.40(d,J＝4.8Hz,1H),6.99(s,1H),3.35-3.54(m,4H),2.94(s,3H),2.46(s,3H),2.12-2.23(m,3H),1.45-1.48(m,1H),1.28-1.32(m,1H)。
实施例113：
N-(8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-5-(3-氰基吡啶-2-基)- 5-氮杂螺[2.3]己烷-1-甲酰胺(化合物150)
Figure BDA0002289356600003991
步骤1：5-氮杂螺[2.3]己烷-1-甲酸盐酸盐
Figure BDA0002289356600003992
在25℃，将5-叔丁基氧基羰基-5-氮杂螺[2.3]己烷-2-甲酸(590mg,2.6mmol)的HCl/二噁烷(5mL,20mmol)溶液搅拌1小时。在真空中浓缩该混合物且将该残余物溶于MeOH。通过添加EtOA沉淀该产物，并通过过滤收集，得到5-氮杂螺[2.3]己烷-2-甲酸盐酸盐，其为白色固体(420mg,99％)：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.60(bs，1H),4.09-3.96(m,4H),1.94-1.92(m,1H),1.37-1.29(m,1H),1.09-1.05(m,1H)。
步骤2：5-(3-氰基吡啶-2-基)-5-氮杂螺[2.3]己烷-1-甲酸
向5-氮杂螺[2.3]己烷-2-甲酸(400mg,3.15mmol)、3-氰基-2-氟吡啶(640mg,5.24mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(3mL)中的混合物添加K2CO3(1.6g,11.59mmol)。在85℃，搅拌该混合物15小时。通过添加1N HCl溶液将pH调节至约6。该产物经乙酸乙酯萃取(20ml x3)。将该有机层干燥，浓缩，并经制备型TLC提纯(DCM/MeOH＝20/1)，得到5-(3-氰基-2-吡啶基)-5-氮杂螺[2.3]己烷-2-甲酸，其为黄色固体(400mg,55％产率)：LCMS(ESI)[M+H]+＝230.1。
步骤3：5-(3-氰基吡啶-2-基)-N-(6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-5-氮杂螺 [2.3]己烷-1-甲酰胺
在0℃，向吡啶(0.76mL,9.34mmol)、6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-胺(200mg,0.93mmol)和5-(3-氰基-2-吡啶基)-5-氮杂螺[2.3]己烷-2-甲酸(350mg,1.53mmol)在二氯甲烷(5mL)中的混合物添加POCl3(186mg,1.21mmol)。在室温搅拌该混合物1小时，用NaHCO3水溶液淬灭，并用DCM(50mL x 3)萃取。将该合并的有机物干燥，浓缩，并将所得粗残余物用制备型TLC提纯(EA/PE＝1/1)，得到5-(3-氰基-2-吡啶基)-N-(6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-5-氮杂螺[2.3]己烷-2-甲酰胺，其为黄色固体(200mg,50％产率)。LCMS(ESI)[M+H]+＝425.2。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ9.39(s,1H),8.50-8.46(m,2H),8.28(d,J＝4.8Hz,1H),7.69-7.59(m,2H),6.66-6.63(m,1H),4.58-4.48(m,4H),3.19-3.18(m,1H),1.42-1.26(m,2H)。
步骤4：N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-5-(3-氰基吡啶-2-基)-5-氮杂螺 [2.3]己烷-1-甲酰胺
Figure BDA0002289356600004002
在90℃，将5-(3-氰基-2-吡啶基)-N-(6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-5-氮杂螺[2.3]己烷-2-甲酰胺(180mg,0.42mmol)的NH3.H2O(5mL,18mmol)和1,4-二噁烷(5mL)溶液搅拌3小时。浓缩该溶液。该粗产物混合物用乙酯(3mL)和PE(10mL)的混合物洗涤，得到粗的N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-5-(3-氰基-2-吡啶基)-5-氮杂螺[2.3]己烷-2-甲酰胺(200mg,37％产率)，其为黄色固体。LCMS(ESI)[M+H]+＝406.2。
步骤5：N-(8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-5-(3-氰基吡啶- 2-基)-5-氮杂螺[2.3]己烷-1-甲酰胺
Figure BDA0002289356600004011
向密封管内添加Na2CO3(50mg,0.47mmol)、Pd(dppf)Cl2(23mg,0.03mmol)、4-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡啶(69mg,0.32mmol)和在1,4-二噁烷(20mL)和水(4mL)中的N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-5-(3-氰基-2-吡啶基)-5-氮杂螺[2.3]己烷-2-甲酰胺(200mg,0.16mmol)。该混合物用N2鼓泡2分钟，并在100℃搅拌4小时。将该反应浓缩至干燥，并经制备型HPLC提纯(C18)，得到N-[8-氨基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-5-(3-氰基-2-吡啶基)-5-氮杂螺[2.3]己烷-2-甲酰胺，其为黄色固体(15mg,21％产率)。(ESI)：RT(分钟)＝1.641，[M+H]+＝463.2，方法＝G；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.05(s,1H),9.38(s,1H),8.57(s,1H),8.43(d,J＝4.8Hz,1H),8.32(dd,J＝2.0,4.8Hz,1H),8.28(s,1H),7.96(dd,J＝1.6,7.6Hz,1H),7.32-7.31(m,3H),7.00(s,1H),6.78(dd,J＝4.8,7.6Hz,1H),4.39-4.30(m,4H),2.41-2.36(m,4H),1.39-1.27(m,2H)。
实施例114：
外型-N-[8-氨基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-3-甲基磺酰基-3- 氮杂双环[3.1.0]己烷-6-甲酰胺(化合物151)
Figure BDA0002289356600004012
在25℃，将外型-N-[8-氨基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-3-氮杂双环[3.1.0]己烷-6-甲酰胺(78mg,0.22mmol)、TEA(110mg,1.09mmol)和MsCl(28mg,0.25mmol)在二氯甲烷(10mL)中的混合物搅拌2小时。将该反应混合物浓缩且该残余物经制备型HPLC提纯(C18)，得到外型-N-[8-氨基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-3-甲基磺酰基-3-氮杂双环[3.1.0]己烷-6-甲酰胺(27mg,29％产率)，其为白色固体。LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.467，[M+H]+＝439.1，方法＝H；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.95(s,1H),9.37(s,1H),8.56(s,1H),8.43(d,J＝5.2Hz,1H),8.22(s,1H),7.32-7.30(m,3H),6.96(s,1H),3.45-3.43(m,4H),2.95(s,3H),2.41(s,3H),2.19-2.17(m,1H),2.11-2.09(m,2H)。
实施例115：
(±)-反式-N-(8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(异噻唑- 4-基)环丙烷甲酰胺(化合物152)
Figure BDA0002289356600004021
步骤1：(E)-3-异噻唑-4-基丙-2-烯酸叔丁基酯
Figure BDA0002289356600004022
在125℃、在氩气中，将4-溴-异噻唑(4.7g,28.66mmol)、丙烯酸叔丁基酯(13mL,96.96mmol)、Pd(OAc)2(700mg,3.13mmol)、三-(邻-甲苯基)膦(2.1g,6.91mmol)和TEA(10g,99.01mmol)在1,4-二噁烷(100mL)的混合物剧烈回流2小时。将该反应混合物冷却至室温并浓缩。该残余物经硅胶色谱提纯(PE:EA＝15:1至10:1)，得到(E)-3-异噻唑-4-基丙-2-烯酸叔丁基酯(2.7g,44.6％产率)，其为淡黄色固体。LCMS(ESI)[M+Na]+＝212.1。1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ8.72(s,1H),8.69(s,1H),7.63(d,J＝16.0Hz,1H),6.36(d,J＝16.0Hz,1H),1.55(s,9H)。
步骤2：(±)-反式-2-异噻唑-4-基环丙烷甲酸叔丁基酯
Figure BDA0002289356600004023
在25℃，将t-BuOK(3g,26.79mmol)分批添加三甲基氧化锍碘化物(6.1g,27.72mmol)的二甲基亚砜(30mL)溶液中，并在25℃搅拌该混合物0.5小时。在25℃，将(E)-3-异噻唑-4-基丙-2-烯酸叔丁基酯(2.7g,12.78mmol)的二甲基亚砜(10mL)溶液逐滴添加至该反应混合物中。在25℃搅拌该混合物1小时。该反应混合物经饱和NH4Cl(150mL)溶液稀释，并用EA(50mLx3)萃取。合并该乙酸乙酯层，经Na2SO4干燥，过滤并蒸发。该残余物经硅胶色谱提纯(PE:EA＝10:1)，得到反式-2-异噻唑-4-基环丙烷甲酸叔丁基酯(1.94g,67.4％产率)，其为淡黄色油状物。LCMS(ESI)[M+H]+＝226.1。
步骤3：(±)-反式-2-异噻唑-4-基环丙烷甲酸
Figure BDA0002289356600004031
在20℃，将(±)-反式-2-异噻唑-4-基环丙烷甲酸叔丁基酯(1.94g,8.61mmol)在2,2,2-三氟乙酸(15mL)中的混合物搅拌1小时。将该反应混合物蒸发，且所得残余物经硅胶色谱提纯(PE:EA＝1:1至1:2)，得到(±)-反式-2-异噻唑-4-基环丙烷甲酸(1.37g,94％产率)，其为淡棕色油状物。LCMS(ESI)[M+H]+＝170.0。
步骤4：(±)-反式-N-(6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-异噻唑-4-基-环丙烷甲 酰胺
Figure BDA0002289356600004032
在0℃，将POCl3(150mg,0.98mmol)逐滴添加至6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-胺盐酸盐(200mg,0.80mmol)、(±)-反式-2-异噻唑-4-基环丙烷甲酸(250mg,1.48mmol)和吡啶(1mL,12.36mmol)在二氯甲烷(10mL)中的混合物中。然后，该反应混合物温热至20℃并搅拌1小时。向该反应混合物中添加DCM(20mL)，且该混合物用H2O洗涤(10mL)。分离该DCM层，经Na2SO4干燥，过滤并蒸发。该残余物经硅胶色谱提纯(PE:EA＝3:1PE:EA:THF＝3:1:1)，得到(±)-反式-N-(6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-异噻唑-4-基-环丙烷甲酰胺(220mg,75％产率)，其为淡黄色固体。LCMS(ESI)[M+Na]+＝365.0。
步骤5：(±)-反式-N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-异噻唑-4-基-环丙 烷甲酰胺
Figure BDA0002289356600004041
在90℃，在密封管中将(±)-反式-N-(6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-异噻唑-4-基-环丙烷甲酰胺(220mg,0.60mmol)在氢氧化铵(10mL)中的混合物在1,4-二噁烷(10mL)中搅拌3小时。将该反应混合物冷却至室温并蒸发，得到反式-N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-异噻唑-4-基-环丙烷甲酰胺(230mg)，其为棕色固体。该粗产物直接用于下一步骤中。LCMS(ESI)[M+Na]+＝346.1/348.1。
步骤6：(±)-反式-N-[8-氨基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-异 噻唑-4-基-环丙烷甲酰胺
Figure BDA0002289356600004042
在100℃、在氩气中，将(±)-反式-N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-异噻唑-4-基-环丙烷甲酰胺(粗品230mg,约0.60mmol)、4-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡啶(250mg,1.14mmol)、Xphos Pd G2(50mg,0.06mmol)、Xphos(60mg,0.13mmol)和K2CO3(250mg,1.81mmol)在1,4-二噁烷(16mL)和水(4mL)中的混合物搅拌2小时。将该反应混合物冷却至室温，并用乙酸乙酯稀释(100mL)。将该有机层用盐水洗涤(30mL)。分离有机层，经Na2SO4干燥，过滤并蒸发。该残余物经硅胶色谱提纯(PE:THF＝1:3)，然后经快速色谱提纯(C18，NH4HCO3/MeOH/H2O)，得到(±)-反式-N-[8-氨基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-异噻唑-4-基-环丙烷甲酰胺(45mg,两步18.6％产率)，其为淡黄色固体。LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.67，[M+H]+＝403.1，方法＝C；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ11.00(brs，1H),9.37(s,1H),8.77(s,1H),8.57(s,1H),8.53(s,1H),8.44(d,J＝4.8Hz,1H),8.27(s,1H),7.32(brs，2H),7.31(s,1H),6.98(s,1H),2.60-2.55(m,1H),2.41(s,3H),2.44-2.40(m,1H),1.56-1.51(m,1H),1.47-1.44(m,1H)。
实施例116：
(±)-反式-N-(8-氨基-5-氟-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氰 基环丙烷甲酰胺(化合物153)
Figure BDA0002289356600004051
向密封管内添加(±)-反式-N-[8-氨基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-氰基-环丙烷甲酰胺(160mg,0.46mmol)、乙腈(20mL)和Selectfluor(105mg,0.28mmol)。在75℃搅拌该混合物2小时。过滤该混合物，浓缩并经硅胶柱色谱提纯(用DCM/MeOH＝30:1至10:1洗脱)，随后经制备型HPLC提纯(乙腈30-80％/0.1％NH4HCO3/水)，得到(±)-反式-N-[8-氨基-5-氟-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-氰基-环丙烷甲酰胺(25mg,15％产率)，其为白色固体。LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.546，[M+H]+＝363.2，方法＝G；1H NMR(400MHz,CD3OD)δ9.32(s,1H),8.51(s,1H),8.47(s,1H),8.45(d,J＝5.2Hz,1H),7.41(d,J＝5.2Hz,1H),2.70-2.62(m,1H),2.37(s,3H),2.15-2.09(m,1H),1.65-1.52(m,2H)。
实施例117：
(±)-反式-N-(8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(羟基甲 基)环丙烷甲酰胺(化合物154)
Figure BDA0002289356600004052
步骤1：(±)-反式-2-(羟基甲基)环丙烷甲酸
Figure BDA0002289356600004053
向小瓶中添加(反式)-2-(羟基甲基)环丙烷甲酸甲基酯(520mg,4mmol)、水(5mL)、四氢呋喃(5mL)、甲醇(5mL)和NaOH(728mg,18.2mmol)。在40℃搅拌该混合物2小时。浓缩该反应以除去该有机溶剂，并用2N HCl酸化至pH＝3～4。该产物经乙酸乙酯A萃取(50mL x2)，该合并的萃取物用盐水洗涤(20mL)，经Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩，得到(±)-反式-2-(羟基甲基)环丙烷甲酸(320mg,69％产率)，其为浅黄色油状物。
步骤2：(±)-反式-2-(乙酰氧基甲基)环丙烷甲酸
Figure BDA0002289356600004061
向小瓶中添加(±)-反式-2-(羟基甲基)环丙烷甲酸(320mg,2.76mmol)、二氯甲烷(20mL)和乙酰氯(1.5mL,21mmol)。在40℃搅拌该混合物2小时。在真空中浓缩该混合物得到粗的标题化合物，其为浅黄色油状物。
步骤3：乙酸(±)-反式-2-(氯羰基)环丙基)甲基酯
向小瓶中添加(±)-反式-2-(乙酰氧基甲基)环丙烷甲酸(430mg,2.7mmol)和DCM(30mL)。在0℃，逐滴添加草酰氯(0.5mL,5.4mmol)。添加N,N-二甲基甲酰胺(0.01mL)。在20℃搅拌该混合物2小时。将该反应混合物浓缩，得到所述标题化合物。
步骤4：乙酸(±)-反式-2-(6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-基氨基甲酰基)环丙基)甲 基酯
Figure BDA0002289356600004063
向小瓶中添加6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-胺盐酸盐(300mg,1.2mmol)、吡啶(1mL,12mmol)和DCM(5mL)。逐滴添加乙酸(±)-[反式-2-氯羰基环丙基]甲基酯(430mg,2.43mmol)的DCM(5mL)溶液。在室温搅拌该混合物2小时。浓缩该混合物，并经硅胶色谱提纯(用PE/EA洗脱由1:1至0:100)，得到乙酸(±)-[反式-2-[(6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-基)氨基甲酰基]环丙基]甲基酯(430mg,61％产率)，其为黄色固体。LCMS(ESI)[M+H]+＝354.0。
步骤5：乙酸(±)-反式-2-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基氨基甲酰基)环丙 基)甲基酯
Figure BDA0002289356600004071
向密封管内添加乙酸(±)-[反式-2-[(6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-基)氨基甲酰基]环丙基]甲基酯(430mg,0.73mmol)、NH3(0.5N在二噁烷中，18mL,9mmol)和氢氧化铵(14mL)。在90℃搅拌该混合物4小时。浓缩该混合物，得到粗的乙酸(±)-[反式-2-[(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)氨基甲酰基]环丙基]甲基酯(440mg,90％产率)，其为黄色固体。LCMS(ESI)[M+H]+＝335.1。
步骤6：乙酸(±)-反式-2-(8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基氨 基甲酰基)环丙基)甲基酯
Figure BDA0002289356600004072
向密封管内添加Na2CO3(215mg,2.0mmol)、Pd(dppf)Cl2(112mg,0.15mmol)、乙酸(±)-[反式-2-[(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)氨基甲酰基]环丙基]甲基酯(440mg,0.66mmol)和4-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡啶(292mg,1.33mmol)、1,4-二噁烷(10mL)和水(1mL)。该混合物用N2鼓泡2分钟，并在100℃搅拌4小时。该混合物过滤并浓缩，得到粗的乙酸(±)-[反式-2-[[8-氨基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]氨基甲酰基]环丙基]甲基酯(500mg,58％产率)，其为棕色固体。该粗产物被直接用于下一步骤中。LCMS(ESI)[M+H]+＝392.2。
步骤7：(±)-反式-N-(8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2- (羟基甲基)环丙烷甲酰胺
Figure BDA0002289356600004073
向小瓶中添加乙酸(±)-[反式-2-[[8-氨基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]氨基甲酰基]环丙基]甲基酯(500mg,0.38mmol)、Na2CO3(500mg,4.7mmol)和MeOH(10mL)。在室温搅拌该混合物2小时。过滤并浓缩该混合物。该残余物先后经硅胶柱色谱(DCM/MeOH由50:1至10:1)和制备型HPLC(流动相：A：水(10mmol NH4HCO3)，B：乙腈)提纯，得到(±)-反式-N-[8-氨基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-(羟基甲基)环丙烷甲酰胺(21mg,16％产率)，其为白色固体。LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.285，[M+H]+＝350.2，方法＝B；1H NMR(400MHz,CD3OD)δ9.27(s,1H),8.52(s,1H),8.41(d,J＝5.2Hz,1H),8.28(s,1H),7.37(d,J＝5.2Hz,1H),6.94(s,1H),3.64(dd,J＝6.0,11.6Hz,1H),3.46(dd,J＝6.4,11.6Hz,1H),2.44(s,3H),1.90-1.84(m,1H),1.76-1.68(m,1H),1.29-1.21(m,1H),0.97-0.91(m,1H)。
实施例118：
(±)-反式-N-(8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(氨基甲 基)环丙烷甲酰胺(化合物155)
Figure BDA0002289356600004081
步骤1：(±)-反式-N-(8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-甲 酰基环丙烷甲酰胺
Figure BDA0002289356600004082
向小瓶中添加(±)-反式-N-[8-氨基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-氰基-环丙烷甲酰胺(230mg,0.67mmol)和二氯甲烷(20mL)。将该混合物冷却至-30℃，然后逐滴添加DIBAL-H(1N在甲苯中，4mL,4mmol)。在-30℃搅拌该混合物2小时。在-30℃，通过添加饱和NH4Cl水溶液(2mL)将该反应淬灭，然后浓缩。将固体再次溶于DCM/MeOH＝10:1(50mL)，过滤并浓缩，得到粗的(±)-反式-N-[8-氨基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-甲酰基-环丙烷甲酰胺(300mg,26％产率)。LCMS(ESI)[M+H]+＝348.1。
步骤2：(±)-反式-N-(8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2- (氨基甲基)环丙烷甲酰胺
Figure BDA0002289356600004083
向小瓶中添加(±)-反式-N-[8-氨基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-甲酰基-环丙烷甲酰胺(300mg,0.17mmol)和NH3(7N在MeOH中，10mL,70mmol)。在室温搅拌该混合物60分钟。冷却至0℃后，分批添加NaBH4(200mg,5.29mmol)并搅拌10分钟。通过添加饱和NH4Cl水溶液(1mL)将该混合物淬灭。添加Na2SO4(5g)，在室温搅拌该反应混合物5分钟，过滤并在真空中浓缩。该残余物用制备型TLC提纯(DCM/MeOH/NH4OH＝100:10:1)，得到(±)-反式-2-(氨基甲基)-N-[8-氨基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]环丙烷甲酰胺(23mg,36％产率)，其为棕色固体。LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.373，[M+H]+＝349.2，方法＝G；1H NMR(400MHz,CD3OD)δ：9.18(s,1H),8.42(s,1H),8.31(d,J＝5.2Hz,1H),8.17(s,1H),7.28(d,J＝5.2Hz,1H),6.86(s,1H),2.66(dd,J＝6.8,13.2Hz,1H),2.55(dd,J＝7.2,13.2Hz,1H),2.34(s,3H),1.77-1.71(m,1H),1.56-1.51(m,1H),1.20-1.15(m,1H),0.86-0.79(m,1H)。
实施例119：
N-(8-氨基-5-氟-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)乙酰胺(化合物 156)
Figure BDA0002289356600004091
步骤1：N-(6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-基)乙酰胺
Figure BDA0002289356600004092
向小瓶中添加6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-胺盐酸盐(615mg,2.45mmol)、1,2-二氯乙烷(30mL)、吡啶(2mL,24.93mmol)和乙酰氯(1mL,14.18mmol)，在室温搅拌该混合物2小时。浓缩该混合物，并经硅胶柱色谱提纯(PE/EA由1:1至0:100)，得到N-(6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-基)乙酰胺(780mg,99％产率)，其为黄色固体。LCMS(ESI)[M+H]+＝256.0。
步骤2：N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)乙酰胺
Figure BDA0002289356600004101
向密封管内添加NH3(0.5N在二噁烷中，6mL,3mmol)、NH3.H2O(6mL,39mmol)和N-(6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-基)乙酰胺(780mg,2.44mmol)。在90℃搅拌该混合物4小时。浓缩该混合物，得到粗的N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)乙酰胺(810mg,98％产率)，其为黄色固体。LCMS(ESI)[M+H]+＝237.1。
步骤3：N-(8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)乙酰胺
Figure BDA0002289356600004102
向小瓶中添加Pd(dppf)Cl2(120mg,0.17mmol)、4-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡啶(606mg,2.77mmol)、Na2CO3(746mg,7mmol)、N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)乙酰胺(810mg,2.4mmol)、1,4-二噁烷(50mL)和水(5mL)，在100℃、在N2中，搅拌该混合物1.5小时。浓缩该混合物，并经硅胶柱色谱提纯(DCM/MeOH由100:1至10:1)，得到N-[8-氨基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]乙酰胺(665mg,85％产率)，其为黄色固体。LCMS(ESI)[M+H]+＝294.1。
步骤4：N-(8-氨基-5-氟-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)乙酰胺
Figure BDA0002289356600004103
向小瓶中添加N-[8-氨基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]乙酰胺(600mg,2.05mmol)、乙腈(70mL)和Selectfluor(600mg,1.61mmol)。在60℃搅拌该混合物16小时。过滤并浓缩该混合物。该残余物经制备型HPLC提纯(乙腈30-70％/0.1％NH4OH/水)，得到N-[8-氨基-5-氟-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]乙酰胺(120mg,17％产率)，其为白色固体。LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.489，[M+H]+＝312.0，方法＝C；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.88(s,1H),9.42(s,1H),8.52(s,1H),8.49(d,J＝4.8Hz,1H),8.37(s,1H),7.37(d,J＝4.8Hz,1H),7.30(br，2H),2.28(s,3H),2.17(s,3H)。
实施例120：
(±)-反式-N-[8-氨基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-(氰基甲 基)环丙烷甲酰胺(化合物157)
Figure BDA0002289356600004111
步骤1：(±)-反式-2-(氰基甲基)环丙烷甲酸
向反式-2-(氰基甲基)环丙烷甲酸乙基酯(500mg,3.26mmol)的四氢呋喃(8mL)、水(8mL)溶液中添加LiOH·H2O(268mg,6.53mmol)。在25℃搅拌该反应混合物过夜。浓缩该溶液且该残余物经水稀释(20mL)，并用乙酸乙酯(20mL)洗涤。该水性层经4N HCl酸化至pH＝3，并用乙酸乙酯萃取(30mLx3)。该合并的有机层用盐水洗涤，经Na2SO4干燥并在减压下浓缩，得到(±)-反式-2-(氰基甲基)环丙烷甲酸(380mg,3.04mmol，95％产率)，其为无色油状物。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.28(s,1H),2.67-2.64(m,2H),1.59-1.50(m,2H),1.07-1.03(m,1H),0.91-0.88(m,1H)。
步骤2：(±)-反式-2-(氰基甲基)-N-(6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-基)环丙烷甲酰 胺
Figure BDA0002289356600004113
在0℃，向(±)-反式-2-(氰基甲基)环丙烷甲酸(342mg,2.73mmol)、6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-胺(450mg,2.1mmol)和吡啶(1.7mL,21.02mmol)在二氯甲烷(20mL)中的混合物添加POCl3(419mg,2.73mmol)。在室温搅拌该混合物1小时。浓缩该混合物，并经快速柱色谱提纯(EtOAc/PE＝1/1)，得到(±)-反式-2-(氰基甲基)-N-(6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-基)环丙烷甲酰胺(536mg,79％产率)，其为黄色固体。LCMS(ESI):[M+H-100]+＝321.0；
步骤3：(±)-反式-N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(氰基甲基)环丙烷 甲酰胺
Figure BDA0002289356600004121
在密封管中，将(±)-反式-2-(氰基甲基)-N-(6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-基)环丙烷甲酰胺(486mg,1.51mmol)和NH3·H2O(5mL,1.51mmol)在1,4-二噁烷(20mL)中的混合物加热至80℃5小时。浓缩该溶液，且该粗产物用EA/PE＝1:1洗涤，得到(±)-反式-N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(氰基甲基)环丙烷甲酰胺(435mg,95％产率)，其为黄色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝302.0。
步骤4：(±)-反式-N-[8-氨基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2- (氰基甲基)环丙烷甲酰胺
Figure BDA0002289356600004122
在110℃，将(±)-反式-N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(氰基甲基)环丙烷甲酰胺(250mg,0.83mmol)、4-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡啶(236mg,1.08mmol)、Pd(dppf)Cl2(61mg,0.08mmol)和Na2CO3(263mg,2.49mmol)在1,4-二噁烷(12mL)和水(3mL)的混合物搅拌2小时。该混合物用水稀释(20mL)并用EA萃取(30mLx3)。该有机物用饱和NaCl溶液(50mL)洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤并浓缩。该粗产物经制备型HPLC提纯(流动相：A水(0.01％NH3)+10mm(NH4HCO3)，B乙腈)，得到(±)-反式-N-[8-氨基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-(氰基甲基)环丙烷甲酰胺(62mg,20.9％产率)，其为白色固体。LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.543，[M+H]+＝359.1，方法＝C；1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.45(s,1H),8.58(s,1H),8.44(d,J＝5.2Hz,1H),8.38(s,1H),7.45(s,2H),7.32(d,J＝4.8Hz,1H),7.08(s,1H),5.04(d,J＝3.6Hz,1H),3.14-3.11(m,2H),2.91-2.86(m,1H),2.59-2.55(m,1H),2.47-2.45(m,4H),2.01-2.00(m,1H)。
实施例121：
外型-N-(8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氧代-3-氮杂双 环[3.1.0]己烷-6-甲酰胺(化合物158)
Figure BDA0002289356600004131
步骤1：外型-3-(叔丁基氧基羰基)-2-氧代-3-氮杂双环[3.1.0]己烷-6-甲酸
Figure BDA0002289356600004132
在25℃将外型-3-叔丁基氧基羰基-3-氮杂双环[3.1.0]己烷-6-甲酸(360mg,1.58mmol)、NaIO4(847mg,3.96mmol)和RuCl3·3H2O(36mg,0.17mmol)在乙酸乙酯(10mL)和水(10mL)中的混合物搅拌过夜，然后过滤该混合物，添加乙酸乙酯(30mL)。该混合物用水(30mLx1)、盐水(30mLx1)洗涤，无水Na2SO4上干燥，过滤并通过旋蒸浓缩，得到粗的外型-3-叔丁基氧基羰基-4-氧代-3-氮杂双环[3.1.0]己烷-6-甲酸(287mg,75％产率)，其为黄色油状物。LCMS(ESI):[M+H-56]+＝186.1。
步骤2：外型-6-(6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-基氨基甲酰基)-2-氧代-3-氮杂双环 [3.1.0]己烷-3-甲酸叔丁基酯
Figure BDA0002289356600004133
向冷却在0℃的6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-胺(45mg,0.21mmol)、外型-3-叔丁基氧基羰基-4-氧代-3-氮杂双环[3.1.0]己烷-6-甲酸(80mg,0.33mmol)和吡啶(0.34mL,4.2mmol)在二氯甲烷(10mL)中的混合物中添加POCl3(97mg,0.63mmol)。在室温搅拌该混合物1小时。然后浓缩该混合物，经快速柱色谱提纯(EtOAc/PE＝1/1洗脱)，得到外型-6-(6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-基氨基甲酰基)-2-氧代-3-氮杂双环[3.1.0]己烷-3-甲酸叔丁基酯(90mg,98％产率)，其为黄色固体。LCMS(ESI):[M+H-100]+＝337.0。
步骤3：外型-N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氧代-3-氮杂双环[3.1.0] 己烷-6-甲酰胺
Figure BDA0002289356600004141
在密封管中，将外型-6-[(6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-基)氨基甲酰基]-4-氧代-3-氮杂双环[3.1.0]己烷-3-甲酸叔丁基酯(52mg,0.12mmol)和NH3·H2O(2.0mL,0.12mmol)在1,4-二噁烷(6mL)中的混合物加热至80℃过夜。浓缩该混合物。将该残余物溶于EtOAc(20mL)，并用水(10mLx2)、饱和NaCl溶液(10mL)洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤并浓缩。该粗产物外型-N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-4-氧代-3-氮杂双环[3.1.0]己烷-6-甲酰胺(35mg,94％产率)被用于下一步骤中且无需提纯。LCMS(ESI):[M+H]+＝318.0。
步骤4：外型-N-[8-氨基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-4-氧代-3- 氮杂双环[3.1.0]己烷-6-甲酰胺
在110℃，将外型-N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-4-氧代-3-氮杂双环[3.1.0]己烷-6-甲酰胺(35mg,0.11mmol)、4-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡啶(31mg,0.14mmol)、Pd(dppf)Cl2(8.0mg,0.011mmol)、K2CO3(46mg,0.33mmol)在1,4-二噁烷(4.0mL)和水(0.8mL)中的混合物搅拌2小时。通过硅胶垫过滤该反应，且在真空中浓缩该滤液。该粗产物进一步经制备型HPLC提纯(流动相：A水(0.01％NH3)+10mm(NH4HCO3)，B乙腈)，得到外型-N-[8-氨基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-4-氧代-3-氮杂双环[3.1.0]己烷-6-甲酰胺(6mg,14.6％产率)，其为白色固体。LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.326，[M+H]+＝375.1，方法＝G；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.08(s,1H),9.38(s,1H),8.56(s,1H),8.43(d,J＝4.8Hz,1H),8.21(s,1H),7.43(s,1H),7.34-7.31(m,3H),6.98(s,1H),3.51-3.48(m,2H),2.41-2.40(m,4H),2.18-2.16(m,1H),2.09-2.08(m,1H)。
实施例122：
(±)-反式-N-[8-氨基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-(1-甲基 吡唑-4-基)环丙烷甲酰胺(化合物159)
Figure BDA0002289356600004151
步骤1：(E)-3-(1-甲基吡唑-4-基)丙-2-烯酸叔丁基酯
Figure BDA0002289356600004152
在110℃、在氩气中，将1-甲基-4-碘-1h-吡唑(12g,57.69mmol)、丙烯酸叔丁基酯(30g,234.06mmol)、Pd(OAc)2(0.9g,4.02mmol)、三-对甲苯基膦(3.45g,11.35mmol)和TEA(58g,574.26mmol)在乙腈(100mL)中的混合物搅拌3小时。浓缩该混合物且用柱色谱提纯，用EtOAc/己烷＝1:2洗脱，得到(E)-3-(1-甲基吡唑-4-基)丙-2-烯酸叔丁基酯(4.6g,21.87mmol，38％产率)，其为棕色油状物。LCMS(ESI)[M+H]+＝209.2。
步骤2：(±)-反式-2-(1-甲基吡唑-4-基)环丙烷甲酸叔丁基酯
Figure BDA0002289356600004153
向三甲基氧化锍碘化物(5.96g,27.08mmol)的二甲基亚砜(60mL)溶液中添加叔丁醇钠(2.71g,28.23mmol)。在25℃搅拌该混合物0.5小时。将在DMSO(40mL)中的(E)-3-(1-甲基吡唑-4-基)丙-2-烯酸叔丁基酯(4.7g,22.57mmol)添加该混合物中，并在室温搅拌过夜。添加饱和NH4Cl(80mL)。该混合物经EtOAc(3x200mL)萃取。用盐水洗涤(3x100mL)该合并的萃取物，经Na2SO4,干燥，过滤并浓缩，得到粗的(±)-反式-2-(1-甲基吡唑-4-基)环丙烷甲酸叔丁基酯(3.2g,13.25mmol，59％产率)，其为棕色油状物。LCMS(ESI)[M+H]+＝223.1。
步骤3：(±)-反式-2-(1-甲基吡唑-4-基)环丙烷甲酸
Figure BDA0002289356600004161
在25℃，将(±)-反式-2-(1-甲基吡唑-4-基)环丙烷甲酸叔丁基酯(3.2g,14.4mmol)在2,2,2-三氟乙酸(30mL)中的混合物搅拌1小时。用饱和NaHCO3(水溶液)将该反应混合物中和至pH＝8。将该混合物重新调节至pH4。浓缩该混合物，并经制备型反相HPLC提纯(C-18)，用乙腈/水+0.05％NH4HCO3洗脱，得到(±)-反式-2-(1-甲基吡唑-4-基)环丙烷甲酸(1.7g,10.23mmol，71％产率)，其为白色固体。LCMS(ESI)[M+H]+＝167.1。
步骤4：(±)-反式-N-(6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(1-甲基吡唑-4-基)环 丙烷甲酰胺
Figure BDA0002289356600004162
在0℃，向(±)-反式-2-(1-甲基吡唑-4-基)环丙烷甲酸(300mg,1.81mmol)、吡啶(3mL,37.09mmol)和6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-胺盐酸盐(452mg,1.8mmol)的二氯甲烷(25mL)溶液中添加POCl3(900mg,5.88mmol)。将该混合物温热至室温并在室温搅拌2小时。添加H2O(100mL)，且该混合物经DCM(3x150mL)萃取。该合并的萃取物用盐水洗涤(150mL)，用Na2SO4干燥，过滤并浓缩，得到粗的(±)-(反式)-N-(6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(1-甲基吡唑-4-基)环丙烷甲酰胺(700mg,1.39mmol，77％产率)，其为黄色固体。LCMS(ESI)[M+H]+＝362.1。
步骤5：(±)-反式-N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(1-甲基吡唑-4-基) 环丙烷甲酰胺
Figure BDA0002289356600004171
在90℃，将(±)-反式-N-(6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(1-甲基吡唑-4-基)环丙烷甲酰胺(500mg,1.38mmol)和NH4OH(12mL,1.38mmol)在1,4-二噁烷(12mL)中的混合物搅拌3小时。浓缩该混合物且用柱色谱提纯，用EtOAc洗脱，得到(±)-反式-N-(6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(1-甲基吡唑-4-基)环丙烷甲酰胺(500mg,1.38mmol)，其为黄色固体。LCMS(ESI)[M+H]+＝343.1。
步骤6:(±)-反式-N-[8-氨基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2- (1-甲基吡唑-4-基)环丙烷甲酰胺
Figure BDA0002289356600004172
在100℃、在氩气中，将(±)-反式-N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(1-甲基吡唑-4-基)环丙烷甲酰胺(180mg,0.53mmol)、4-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡啶(138mg,0.63mmol)、X-phos-Pd-G2(83mg,0.11mmol)、X-phos(100mg,0.21mmol)和K2CO3(145mg,1.05mmol)在1,4-二噁烷(7mL)和水(1mL)中的混合物搅拌1小时。浓缩该混合物且用柱色谱提纯，用DCM/MeOH＝10:1洗脱，得到(±)-反式-N-[8-氨基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-(1-甲基吡唑-4-基)环丙烷甲酰胺(105mg,0.26mmol，50％产率)，其为黄色固体。LCMS(ESI)RT(分钟)＝1.497，[M+H]+＝400.2，方法＝G。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.95(s,1H),9.37(s,1H),8.57(s,1H),8.44(d,J＝5.2Hz,1H),8.26(s,1H),7.56(s,1H),7.32(s,2H),7.31(d,J＝5.2Hz,1H),7.30(s,1H),6.97(s,1H),3.77(s,3H),2.41(s,3H),2.23-2.19(m,2H),1.40-1.38(m,1H),1.23-1.18(m,1H)。
实施例123：
反式-N-[8-氨基-6-(3-羟基-6-甲基-2-氧代-吲哚-5-基)-2,7-二氮杂萘-3-基]- 2-氰基-环丙烷甲酰胺(化合物160)
Figure BDA0002289356600004181
步骤1：5-溴-3-羟基-6-甲基-吲哚-2-酮
Figure BDA0002289356600004182
在0℃，向5-溴-6-甲基-吲哚-2,3-二酮(980mg,4.08mmol)的四氢呋喃(50mL)溶液中添加NaBH4(124mg,3.26mmol)。在0℃搅拌该混合物10分钟。添加H2O(50mL)，且该混合物经EtOAc(3x200mL)萃取。该合并的萃取物用盐水洗涤(100mL)，用Na2SO4干燥，过滤并浓缩，得到粗的5-溴-3-羟基-6-甲基-吲哚-2-酮(650mg,2.5mmol，61％产率)，其为棕色固体。LCMS(ESI)[M+Na]+＝265.9。
步骤2：6-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吲哚-2,3- 二酮
Figure BDA0002289356600004183
在95℃、在氩气中，将5-溴-3-羟基-6-甲基-吲哚-2-酮(630mg,2.6mmol)、双(频哪醇合)二硼(331mg,13.01mmol)、Pd(dppf)Cl2(380mg,0.52mmol)和AcOK(510mg,5.2mmol)在1,4-二噁烷(12mL)的混合物搅拌2小时。浓缩该混合物且用柱色谱提纯，用EtOAc/己烷＝5:1洗脱，得到6-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吲哚-2,3-二酮(650mg,1.45mmol，56％产率)，其为棕色固体。LCMS(ESI)[M+H]+＝288.1。
步骤3：(±)-反式-N-[8-氨基-6-(6-甲基-2,3-二氧代-吲哚-5-基)-2,7-二氮杂 萘-3-基]-2-氰基-环丙烷甲酰胺
Figure BDA0002289356600004191
在100℃，在氩气氛围中，将(±)-反式-N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氰基-环丙烷甲酰胺(300mg,1.04mmol)、6-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吲哚-2,3-二酮(449mg,1.56mmol)、X-phos(199mg,0.42mmol)、X-phos-Pd-G2(164mg,0.21mmol)和K2CO3(288mg,2.09mmol)在1,4-二噁烷(12mL)和水(1mL)中的混合物搅拌1小时。浓缩该混合物且用柱色谱提纯，用DCM/MeOH＝10:1洗脱，得到反式-N-[8-氨基-6-(6-甲基-2,3-二氧代-吲哚-5-基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-氰基-环丙烷甲酰胺(300mg,0.27mmol，26％产率)，其为棕色固体。LCMS(ESI)[M+H]+＝413.2。
步骤4：反式-N-[8-氨基-6-(3-羟基-6-甲基-2-氧代-吲哚-5-基)-2,7-二氮杂萘- 3-基]-2-氰基-环丙烷甲酰胺
Figure BDA0002289356600004192
在0℃，向反式-N-[8-氨基-6-(6-甲基-2,3-二氧代-吲哚-5-基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-氰基-环丙烷甲酰胺(300mg,0.27mmol)的四氢呋喃(15mL)溶液中添加NaBH4(4mg,0.11mmol)。在0℃搅拌该混合物10分钟。浓缩该混合物且用柱色谱提纯，用DCM/MeOH＝10:1洗脱，得到反式-N-[8-氨基-6-(3-羟基-6-甲基-2-氧代-吲哚-5-基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-氰基-环丙烷甲酰胺(38mg,0.085mmol，32％产率)，其为黄色固体。LCMS(ESI)RT(分钟)＝1.437，[M+H]+＝415.1，方法＝C。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.23(s,1H),10.3(s,1H),9.35(s,1H),8.16(s,1H),7.37(s,1H),7.26(s,2H),6.84(s,1H),6.68(s,1H),6.16(d,J＝7.6Hz,1H),4.84(d,J＝7.6Hz,1H),2.78-2.74(m,1H),2.36(s,3H),2.17-2.13(m,1H),1.63-1.59(m,1H),1.46-1.41(m,1H)。
实施例124：
1-[3-[4-[[8-氨基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]氨基]吡唑-1- 基]氮杂环丁烷-1-基]乙酮(化合物161)
步骤1：3-(4-溴吡唑-1-基)氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁基酯
Figure BDA0002289356600004202
在0℃向4-溴-1H-吡唑(2.0g,13.61mmol)的N,N-二甲基甲酰胺(40mL)溶液中添加NaH(1.63g,40.75mmol)。在0℃搅拌该混合物0.5小时。1-Boc-3-碘氮杂环丁烷(5.0g,17.66mmol)添加并在0℃搅拌1小时。将该混合物温热至环境温度并搅拌过夜。添加H2O(100mL)。该混合物经EtOAc(3x200mL)萃取。用盐水洗涤(3x100mL)该合并的萃取物，用Na2SO4干燥，过滤并在减压下蒸发。该残余物用柱色谱提纯，用EtOAc/己烷＝1:5洗脱，得到3-(4-溴吡唑-1-基)氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁基酯(1.8g,4.38mmol，32％产率)，其为无色油状物。LCMS(ESI)[M+H-56]+＝247.9。
步骤2：1-(氮杂环丁烷-3-基)-4-溴-吡唑
Figure BDA0002289356600004203
在25℃，将3-(4-溴吡唑-1-基)氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁基酯(1.8g,4.35mmol)和2,2,2-三氟乙酸(8mL)在二氯甲烷(15mL)中的混合物搅拌2小时。用饱和NaHCO3(水溶液)将该反应混合物中和至pH＝7-8。浓缩该混合物，并经制备型反相HPLC提纯(C-18)，用乙腈/水+0.05％NH4HCO3洗脱，得到1-(氮杂环丁烷-3-基)-4-溴-吡唑(875mg,3.55mmol，82％产率)，其为白色固体。LCMS(ESI)[M+H]+＝202.0。
步骤3：1-[3-(4-溴吡唑-1-基)氮杂环丁烷-1-基]乙酮
Figure BDA0002289356600004211
在0℃，向1-(氮杂环丁烷-3-基)-4-溴-吡唑(400mg,1.98mmol)和吡啶(1.61mL,19.85mmol)的二氯甲烷(20mL)溶液中添加乙酰氯(466mg,5.94mmol)。在0℃搅拌该混合物3小时，浓缩该混合物且用柱色谱提纯，用DCM/MeOH＝20:1洗脱，得到1-[3-(4-溴吡唑-1-基)氮杂环丁烷-1-基]乙酮(400mg,1.27mmol，64％产率)，其为棕色固体。LCM(ESI)[M+H]+＝244.0。
步骤4：1-[3-[4-[[8-[双[2,4-二甲氧基苄基]氨基]-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7- 二氮杂萘-3-基]氨基]吡唑-1-基]氮杂环丁烷-1-基]乙酮
Figure BDA0002289356600004212
在100℃、在氩气中，将N1,N1-双[(2,4-二甲氧基苄基)]-3-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-1,6-二胺(250mg,0.45mmol)、1-[3-(4-溴吡唑-1-基)氮杂环丁烷-1-基]乙酮(359mg,1.13mmol)、t-BuBrettPhos Palladacycle Gen.3(82mg,0.09mmol)、t-BuBrettPhos(44mg,0.09mmol)和LiHMDS(1.8mL,1.8mmol)在1,4-二噁烷(10mL)中的混合物搅拌20小时。浓缩该混合物且用柱色谱提纯，用MeOH/DCM＝1:25洗脱，得到1-[3-[4-[[8-[双[(2,4-二甲氧基苄基)]氨基]-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]氨基]吡唑-1-基]氮杂环丁烷-1-基]乙酮(120mg,0.12mmol，26％产率)，其为黄色固体。LCMS(ESI)[M+H]+＝715.4。
步骤5：1-[3-[4-[[8-氨基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]氨基]吡 唑-1-基]氮杂环丁烷-1-基]乙酮
Figure BDA0002289356600004221
在50℃，将1-[3-[4-[[8-[双[(2,4-二甲氧基苄基)]氨基]-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]氨基]吡唑-1-基]氮杂环丁烷-1-基]乙酮(120mg,0.12mmol)在2,2,2-三氟乙酸(5mL)中的混合物搅拌1小时。将该反应混合物浓缩，并用7N NH3/MeOH中和至pH＝7-8。浓缩该混合物，并经制备型反相HPLC提纯(C-18)，用乙腈/水+0.05％NH4HCO3洗脱，得到1-[3-[4-[[8-氨基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]氨基]吡唑-1-基]氮杂环丁烷-1-基]乙酮(35mg,0.084mmol，73％产率)，其为黄色固体。LC-MS(ESI)RT(分钟)＝1.413，[M+H]+＝415.2，方法＝C。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.23(s,1H),8.98(s,1H),8.53(s,1H),8.42(d,J＝4.8Hz,1H),8.09(s,1H),7.63(s,1H),7.29(d,J＝5.2Hz,1H),7.10(s,2H),6.77(s,1H),6.68(s,1H),5.27-5.21(m,1H),4.55(t,J＝13.8Hz,1H),4.41(q,J＝4.8Hz,1H),4.29(t,J＝9.0Hz,1H),4.14-4.09(m,1H),2.40(s,3H),1.83(s,3H)。
实施例125：
1-[8-氨基-5-氟-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-3-(1-甲基吡唑- 4-基)脲(化合物162)
步骤1：N-[8-[双[(2,4-二甲氧基苄基)]氨基]-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基]氨基甲 酸苯基酯
Figure BDA0002289356600004231
在0℃，向3-氯-N1,N1-双[(2,4-二甲氧基苄基)]-2,7-二氮杂萘-1,6-二胺(2.0g,4.04mmol)和吡啶(10mL,123.64mmol)的二氯甲烷(40mL)溶液中添加氯甲酸苯基酯(0.65mL,5.18mmol)。在0℃搅拌该混合物2小时。浓缩该混合物且用柱色谱提纯，用EtOAc/己烷＝1:2洗脱，得到N-[8-[双[(2,4-二甲氧基苄基)]氨基]-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基]氨基甲酸苯基酯(1.8g,2.9mmol，72％产率)，其为黄色固体。LCMS(ESI)[M+H]+＝615.2。
步骤2：1-[8-[双[(2,4-二甲氧基苄基)]氨基]-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基]-3-(1- 甲基吡唑-4-基)脲
Figure BDA0002289356600004232
在90℃，将N-[8-[双[(2,4-二甲氧基苄基)]氨基]-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基]氨基甲酸苯基酯(1.8g,2.93mmol)、1-甲基-1H-吡唑-4-胺(1.42g,14.62mmol)和Et3N(3.0g,29.7mmol)在1,4-二噁烷(80mL)中的混合物搅拌2小时。浓缩该混合物且用柱色谱提纯，用EtOAc/己烷＝4:1洗脱，得到1-[8-[双[(2,4-二甲氧基苄基)]氨基]-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基]-3-(1-甲基吡唑-4-基)脲(1.6g,2.59mmol，89％产率)，其为白色固体。LCMS(ESI)[M+H]+＝618.1。
步骤3：1-[8-[双[(2,4-二甲氧基苄基)]氨基]-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮 杂萘-3-基]-3-(1-甲基吡唑-4-基)脲
在100℃、在氩气中，将1-[8-[双[(2,4-二甲氧基苄基)]氨基]-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基]-3-(1-甲基吡唑-4-基)脲(1.6g,2.59mmol)、4-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡啶(0.68g,3.1mmol)、X-phos-Pd-G2(407mg,0.52mmol)、X-phos(493mg,1.04mmol)和K2CO3(0.74g,5.36mmol)在1,4-二噁烷(80mL)和水(10mL)中的混合物搅拌1.5小时。浓缩该混合物且用柱色谱提纯，用DCM/MeOH＝20:1洗脱，得到1-[8-[双[(2,4-二甲氧基苄基)]氨基]-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-3-(1-甲基吡唑-4-基)脲(1.7g,2.29mmol，89％产率)，其为黄色固体。LCMS(ESI)[M+H]+＝675.3。
步骤4：1-[8-氨基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-3-(1-甲基吡唑- 4-基)脲
Figure BDA0002289356600004241
在50℃，将1-[8-[双[(2,4-二甲氧基苄基)]氨基]-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-3-(1-甲基吡唑-4-基)脲(1.7g,2.29mmol)在2,2,2-三氟乙酸(30mL)中的混合物搅拌1小时。浓缩该混合物并用7N NH3/MeOH中和至pH＝9-10。浓缩该混合物，过滤，用DCM(200mL)和H2O(100mL)洗涤，并干燥，得到粗的1-[8-氨基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-3-(1-甲基吡唑-4-基)脲(1.7g)，其为黄色固体。LCMS(ESI)[M+H]+＝375.2。
步骤5：1-[8-氨基-5-氟-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-3-(1-甲基 吡唑-4-基)脲
Figure BDA0002289356600004242
向1-[8-氨基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-3-(1-甲基吡唑-4-基)脲(300mg,0.8mmol)的N,N-二甲基甲酰胺(20mL)溶液中添加Selectfluor(149mg,0.4mmol)。在50℃搅拌该混合物3小时。浓缩该混合物，并经制备型HPLC提纯(C-18)，用乙腈/水+0.05％NH4HCO3洗脱，得到1-[8-氨基-5-氟-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-3-(1-甲基吡唑-4-基)脲(2.7mg,0.0063mmol，0.8％产率)，其为黄色固体。LC-MS(ESI)RT(分钟)＝1.713，[M+H]+＝393.2，方法＝G。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.48(s,1H),9.27(s,1H),9.19(s,1H),8.43(s,1H),8.40(d,J＝5.2Hz,1H),7.97(s,1H),7.77(s,1H),7.34(s,1H),7.29(d,J＝4.8Hz,1H),7.19(s,2H),3.71(s,3H),2.20(s,3H)。
实施例126：
1-[8-氨基-5-氯-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-3-(1-甲基吡唑- 4-基)脲(化合物163)
Figure BDA0002289356600004251
向1-[8-氨基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-3-(1-甲基吡唑-4-基)脲(100mg,0.27mmol)的N,N-二甲基甲酰胺(10mL)溶液中添加NCS(178mg,1.34mmol)。在25℃搅拌该混合物过夜。该混合物经制备型HPLC提纯(C-18)，用乙腈/水+0.05％NH4HCO3洗脱，得到1-[8-氨基-5-氯-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-3-(1-甲基吡唑-4-基)脲(44mg,0.11mmol，40％产率)，其为黄色固体。LC-MS(ESI)RT(分钟)＝1.765，[M+H]+＝409.2，方法＝G。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.57(s,1H),9.38(s,1H),9.26(s,1H),8.49(d,J＝4.8Hz,1H),8.42(s,1H),8.26(s,1H),7.90(s,1H),7.56(s,2H),7.44(s,1H),7.37(d,J＝5.2Hz,1H),3.81(s,3H),2.19(s,3H)。
实施例127：
(±)-反式-4-(1-氨基-6-((反式)-2-氰基环丙烷甲酰氨基)-2,7-二氮杂萘-3- 基)-3-甲基-N-(2,2,2-三氟乙基)苯酰胺)(化合物164)
Figure BDA0002289356600004252
步骤1：4-溴-3-甲基-N-(2,2,2-三氟乙基)苯酰胺
Figure BDA0002289356600004253
在0℃，向4-溴-3-甲基苯甲酸(500.0mg,2.33mmol)和2,2,2-三氟乙胺(210.0mg,2.12mmol)的吡啶(5mL)溶液中添加三氯氧磷(1300mg,8.48mmol)。搅拌所得混合物1小时。该反应经饱和NaHCO3(水溶液)淬灭并用乙酸乙酯萃取(40mLx2)。将该合并的乙酸乙酯萃取物在真空中浓缩，并经快速柱色谱提纯(PE:EA＝3:1-1:3)，得到4-溴-3-甲基-N-(2,2,2-三氟乙基)苯酰胺(490mg,72.7％产率)，其为黄色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝296.0。
步骤2：3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-N-(2,2,2- 三氟乙基)苯酰胺
Figure BDA0002289356600004261
在80℃，将4-溴-3-甲基-N-(2,2,2-三氟乙基)苯酰胺(200mg,0.680mmol)、KOAc(133mg,1.35mmol)、双(频哪醇合)二硼(206mg,0.810mmol)和Pd(dppf)Cl2(49mg,0.07mmol)在1,4-二噁烷(5mL)中的混合物搅拌3小时。浓缩该混合物，并经快速柱色谱提纯(PE/EA＝10％-50％)，得到3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-N-(2,2,2-三氟乙基)苯酰胺(200mg,86％产率)，其为白色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝344.1。
步骤3：4-(1-氨基-6-((反式)-2-氰基环丙烷甲酰氨基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-3- 甲基-N-(2,2,2-三氟乙基)苯酰胺)
Figure BDA0002289356600004262
在100℃，将(±)-反式-N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氰基-环丙烷甲酰胺(168mg,0.58mmol)、3-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-N-(2,2,2-三氟乙基)苯酰胺(100mg,0.29mmol)、乙酰氧基钾(86mg,0.87mmol)、XphosPdG2(23mg,0.03mmol)和Xphos(28mg,0.06mmol)在1,4-二噁烷(4mL)和H2O(0.4mL)中的混合物搅拌48小时。浓缩该混合物并经反相色谱提纯(乙腈10-45％/0.05％NH4HCO3/水)，得到4-[1-氨基-6-[[(反式)-2-氰基环丙烷羰基]氨基]-2,7-二氮杂萘-3-基]-3-甲基-N-(2,2,2-三氟乙基)苯酰胺(6.2mg,4.5％产率)，其为黄色固体。LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.75，[M+H]+＝469.1，方法＝C；1H NMR(400MHz,CD3OD)：9.30(s,1H),8.29(s,2H),7.31(s,1H),7.79(dd,J＝1.2,8.0Hz,1H),7.53(d,J＝8.0Hz,1H),4.16(q,J＝9.2Hz,2H),2.66-2.64(m,1H),2.16-2.11(m,1H),1.62-1.55(m,2H)。
实施例128：
(±)-反式-N-(8-氨基-6-(5-氨基-4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2- 氰基环丙烷甲酰胺(化合物165)
Figure BDA0002289356600004271
步骤1：5-溴-4-甲基吡啶-3-胺
在70℃，将铁(3.1g,55.3mmol)和3-溴-4-甲基-5-硝基吡啶(2.0g,9.22mmol)在乙醇(20mL)和饱和NH4Cl(4mL)中的混合物搅拌4小时。该反应冷却至室温，并用乙酸乙酯稀释(200mL)。添加Na2SO4并搅拌该反应0.5小时，然后过滤。浓缩该滤液，得到5-溴-4-甲基-吡啶-3-胺(1.4g,74.5％产率)，其为黄色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝187.1。
步骤2：(5-溴-4-甲基吡啶-3-基氨基甲酸叔丁基酯
Figure BDA0002289356600004273
向5-溴-4-甲基-吡啶-3-胺(600mg,3.21mmol)的四氢呋喃(10mL)溶液中添加NaHMDS(6.5mL,6.5mmol)并在0℃搅拌0.5小时。添加一缩二碳酸二叔丁基脂(770mg,3.53mmol)。在室温搅拌该混合物2小时。然后，该反应用水稀释(0.5mL)并浓缩。该残余物经快速柱色谱提纯(PE/EA＝20％)，得到N-(5-溴-4-甲基-3-吡啶基)氨基甲酸叔丁基酯(710mg,66.7％产率)，其为白色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝287.0。
步骤3：4-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡啶-3-基 氨基甲酸叔丁基酯
Figure BDA0002289356600004274
在90℃，将N-(5-溴-4-甲基-3-吡啶基)氨基甲酸叔丁基酯(710mg,2.47mmol)、乙酰氧基钾(486mg,4.95mmol)和双(频哪醇合)二硼(756mg,2.98mmol)和Pd(dppf)Cl2(91mg,0.12mmol)在1,4-二噁烷(10mL)中的混合物搅拌18小时。浓缩该混合物，并经快速柱色谱提纯(PE/EA＝30％-70％)，得到N-[4-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁基酯(510mg,56.9％产率)，其为黄色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝335.2。
步骤4：(±)-5-(1-氨基-6-((反式)-2-氰基环丙烷甲酰氨基)-2,7-二氮杂萘-3- 基)-4-甲基吡啶-3-基氨基甲酸叔丁基酯
在100℃，将N-[4-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁基酯(140mg,0.42mmol)、(±)-反式-N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氰基-环丙烷甲酰胺(100mg,0.35mmol)、Pd(dppf)Cl2(13mg,0.02mmol)和Na2CO3(74.0mg,0.7mmol)在1,4-二噁烷(4mL)和H2O(0.4mL)的混合物搅拌18小时。该混合物冷却至室温并用水稀释(10mL)。然后该混合物经乙酸乙酯萃取(30mL x 2)。该合并的乙酸乙酯萃取物经Na2SO4干燥并在真空中浓缩，得到(±)-N-[5-[1-氨基-6-[[(反式)-2-氰基环丙烷羰基]氨基]-2,7-二氮杂萘-3-基]-4-甲基-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁基酯(160mg,41.6％产率)，其为棕色油状物。LCMS(ESI):[M+H]+＝460.2。
步骤5：(±)-反式-N-(8-氨基-6-(5-氨基-4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3- 基)-2-氰基环丙烷甲酰胺
Figure BDA0002289356600004282
在25℃，将(±)-N-[5-[1-氨基-6-[[(反式)-2-氰基环丙烷羰基]氨基]-2,7-二氮杂萘-3-基]-4-甲基-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁基酯(160mg,0.14mmol)的二氯甲烷(1mL)和2,2,2-三氟乙酸(1mL)溶液搅拌4小时。浓缩该混合物，并经制备型HPLC提纯(乙腈5-40％在0.05％NH4HCO3在水中)，得到(±)-反式-N-[8-氨基-6-(5-氨基-4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-氰基-环丙烷甲酰胺(34.5mg,66.4％产率)，其为黄色固体。LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.43，[M+H]+＝360.1，方法＝C；1H NMR(400MHz,CD3OD)：9.30(s,1H),8.23(s,1H),8.00(s,1H),7.85(s,1H),6.95(s,1H),2.66-2.64(m,1H),2.17(s,3H),2.15-2.11(m,1H),1.62-1.55(m,2H)。
实施例129：
(±)-反式-2-(1-乙酰基哌啶-4-基)-N-(8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二 氮杂萘-3-基)环丙烷甲酰胺(化合物166)
步骤1：(E)-4-(3-叔丁基氧基-3-氧代丙-1-烯基)哌啶-1-甲酸叔丁基酯
Figure BDA0002289356600004292
在0℃，向二乙基膦酰基乙酸叔丁基酯(2.6g,10.32mmol)的四氢呋喃(20mL)溶液中添加甲基基溴化镁(3.44mL,10.32mmol)。搅拌该混合物0.5小时。然后向该反应溶液添加4-甲酰基-1-哌啶甲酸叔丁基酯(2.0g,9.38mmol)。在25℃搅拌该混合物5小时。用饱和NH4Cl稀释该混合物，并浓缩。该残余物经快速柱色谱提纯(PE/EA＝1％-10％)，得到4-[(E)-3-叔丁基氧基-3-氧代-丙-1-烯基]哌啶-1-甲酸叔丁基酯(2.4g,82.2％产率)，其为黄色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝334.2。
步骤2：(±)-4-((反式)-2-(叔丁基氧基羰基)环丙基)哌啶-1-甲酸叔丁基酯
向三甲基氧化锍碘化物(1979mg,8.99mmol)的二甲基亚砜(10mL)溶液中添加叔丁基氧基钾(1009mg,8.99mmol)。搅拌该混合物0.5小时。添加4-[(E)-3-叔丁基氧基-3-氧代-丙-1-烯基]哌啶-1-甲酸叔丁基酯(1.4g,4.5mmol)并在25℃搅拌该混合物4小时。该混合物用水稀释(50mL)并用PE(50mLx3)萃取。该合并的PE经Na2SO4干燥并在真空中浓缩，得到4-[(反式)-2-叔丁基氧基羰基环丙基]哌啶-1-甲酸叔丁基酯(830mg,56.7％产率)，其为无色油状物。
步骤3：(±)-反式-2-(哌啶-4-基)环丙烷甲酸
Figure BDA0002289356600004301
在25℃，将(±)-4-[(反式)-2-叔丁基氧基羰基环丙基]哌啶-1-甲酸叔丁基酯(830mg,1.99mmol)在5mL 4M HCl/二噁烷中的混合物搅拌18小时。浓缩该反应，得到(±)-反式-2-(4-哌啶基)环丙烷甲酸(640mg,90％产率)，其为白色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝170.1。
步骤4：(±)-反式-2-(1-乙酰基哌啶-4-基)环丙烷甲酸
Figure BDA0002289356600004302
在25℃，将(±)-反式-2-(4-哌啶基)环丙烷甲酸(640mg,3.78mmol)、Ac2O(1158.0mg,11.35mmol)和TEA(574mg,5.67mmol)在甲醇(5mL)中的混合物搅拌18小时。然后浓缩该混合物，并经快速柱色谱提纯(MeOH 5％-40％/0.02％HCOOH/水)，得到(±)-反式-2-(1-乙酰基-4-哌啶基)环丙烷甲酸(450mg,56.3％产率)，其为白色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝212.2。
步骤5：(±)-反式-2-(1-乙酰基哌啶-4-基)-N-(6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-基) 环丙烷甲酰胺
Figure BDA0002289356600004303
向(±)-反式-2-(1-乙酰基-4-哌啶基)环丙烷甲酸(430mg,2.04mmol)、6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-胺(436mg,2.04mmol)、吡啶(644mg,8.14mmol)在二氯甲烷(4mL)中的混合物添加POCl3(1248mg,8.14mmol)。在25℃搅拌该反应1小时。该混合物经饱和NaHCO3稀释并用乙酸乙酯萃取(30mLx2)。将该合并的乙酸乙酯萃取物经Na2SO4干燥并在真空中浓缩，得到(±)-反式-2-(1-乙酰基-4-哌啶基)-N-(6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-基)环丙烷甲酰胺(720mg,54.3％产率)，其为粗的黄色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝407.1。
步骤6：(±)-反式-2-(1-乙酰基哌啶-4-基)-N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3- 基)环丙烷甲酰胺
Figure BDA0002289356600004304
在90℃，将(±)-反式-2-(1-乙酰基-4-哌啶基)-N-(6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-基)环丙烷甲酰胺(700mg,1.72mmol)在1,4-二噁烷(5mL)和氢氧化铵(25％,10mL)中的混合物搅拌2小时。该混合物经2mL MeOH和乙酸乙酯(20mL)稀释。在室温搅拌该悬浮液0.5小时。然后过滤该悬浮液。该湿饼用乙酸乙酯洗涤，并在真空中干燥，得到(±)-反式-2-(1-乙酰基-4-哌啶基)-N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)环丙烷甲酰胺(580mg,82.7％产率)，其为黄色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝288.2。
步骤7：(±)-反式-2-(1-乙酰基哌啶-4-基)-N-(8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)- 2,7-二氮杂萘-3-基)环丙烷甲酰胺
Figure BDA0002289356600004311
在100℃，将(±)-反式-2-(1-乙酰基-4-哌啶基)-N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)环丙烷甲酰胺(380mg,0.98mmol)、4-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡啶(322mg,1.47mmol)、Pd(dppf)Cl2(36mg,0.05mmol)和Na2CO3(312mg,2.94mmol)在1,4-二噁烷(15mL)和水(2mL)中的混合物搅拌5小时。该混合物随后冷却至室温并过滤。浓缩该滤液并经制备型HPLC提纯(乙腈10-60％/0.1％NH4HCO3/水)，得到(±)-反式-2-(1-乙酰基-4-哌啶基)-N-[8-氨基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]环丙烷甲酰胺(169mg,38.8％产率)，其为白色固体。LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.49，[M+H]+＝445.3，方法＝C；1H NMR(400MHz,CD3OD)：9.29(s,1H),8.54(s,1H),8.44(d,J＝4.8Hz,1H),8.29(s,1H),7.40(d,J＝4.8Hz,1H),6.97(s,1H),6.26(s,1H),4.54-4.52(m,1H),3.96-3.94(m,1H),3.09-3.07(m,1H),2.63-2.61(m,1H),2.45(s,3H),2.12(s,3H),1.90-1.86(m,3H),1.31-1.14(m,5H),1.01-0.99(s,1H)。
实施例130：
(±)-顺式-N-(8-氨基-6-(4-甲基-6-(2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)吡啶-3-基)- 2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氟环丙烷甲酰胺(化合物167)
Figure BDA0002289356600004321
步骤1：(3-(5-溴-4-甲基吡啶-2-基)吡啶-2(1H)-酮
Figure BDA0002289356600004322
在90℃将2,5-二溴-4-甲基吡啶(500mg,1.99mmol)、(2-氧代-1H-吡啶-3-基)硼酸(415mg,2.99mmol)、Na2CO3(422mg,3.99mmol)和Pd(dppf)Cl2(73mg,0.10mmol)在1,4-二噁烷(10mL)和水(0.4mL)中的混合物搅拌18小时。该混合物冷却至室温并用水稀释。该产物经乙酸乙酯萃取(50mLx3)。该合并的乙酸乙酯经Na2SO4干燥并在真空中浓缩。该残余物经快速柱色谱提纯(PE/EA＝50％-80％)，得到3-(5-溴-4-甲基-2-吡啶基)-1H-吡啶-2-酮(320mg,60.6％产率)，其为白色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝267.0。
步骤2：3-(4-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡啶-2- 基)吡啶-2(1H)-酮
Figure BDA0002289356600004323
在110℃将3-(5-溴-4-甲基-2-吡啶基)-1H-吡啶-2-酮(350mg,1.32mmol)、双(频哪醇合)二硼(402mg,1.58mmol)、乙酰氧基钾(259mg,2.64mmol)和Pd(dppf)Cl2(48mg,0.070mmol)在1,4-二噁烷(10mL)中的混合物搅拌18小时。该反应冷却至室温并用水稀释。该反应混合物经乙酸乙酯萃取(50mLx3)。该合并的乙酸乙酯层经Na2SO4干燥，并在真空中浓缩。该残余物用PE(20mL)洗涤并过滤。所收集的固体滤饼在真空中干燥，得到3-[4-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-2-吡啶基]-1H-吡啶-2-酮(620mg,48.3％产率)，其为黑色固体。该粗物质被用于下一步骤中且无需提纯。LCMS(ESI):[M+H]+＝313.2。
步骤3：(±)-顺式-N-(8-氨基-6-(4-甲基-6-(2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)吡啶- 3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氟环丙烷甲酰胺
Figure BDA0002289356600004331
在100℃，将3-[4-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-2-吡啶基]-1H-吡啶-2-酮(620mg,0.87mmol)、(±)-顺式-N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氟-环丙烷甲酰胺(180mg,0.64mmol)、Na2CO3(170mg,1.6mmol)和Pd(dppf)Cl2(23mg,0.030mmol)在1,4-二噁烷(2mL)和H2O(0.2mL)中的混合物搅拌4小时。该反应冷却至室温并过滤。浓缩该滤液经制备型HPLC提纯(乙腈10-70％/0.1％NH4HCO3/水)，得到(±)-顺式-N-[8-氨基-6-[4-甲基-6-(2-氧代-1H-吡啶-3-基)-3-吡啶基]-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-氟-环丙烷甲酰胺(42.5mg,14.7％产率)，其为黄色固体。LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.43，[M+H]+＝431.2，方法＝C；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)：11.99(s,1H),10.02(s,1H),9.39(s,1H),8.65(s,1H),8.56(s,1H),8.51(d,J＝5.2Hz,1H),8.26(s,1H),7.54(d,J＝5.2Hz,1H),7.34(s,1H),7.03(s,2H),6.43-6.40(m,0.5H),5.05-4.87(m,0.5H),2.40(s,3H),2.28-2.45(m,1H),1.71-1.64(m,1H),1.23-1.18(m,1H)。
实施例131：
2-[4-[[8-氨基-6-(4-乙基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]氨基]吡唑-1-基]乙 醇(化合物168)
Figure BDA0002289356600004332
步骤1：N1,N1-双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]-3-(4-乙基-3-吡啶基)-N6-[1-(2- 四氢吡喃-2-基氧基乙基)吡唑-4-基]-2,7-二氮杂萘-1,6-二胺
Figure BDA0002289356600004341
在100℃、在氩气中，在密封管内将N1,N1-双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]-3-(4-乙基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-1,6-二胺(600mg,1.06mmol)、4-溴-1-(2-四氢吡喃-2-基氧基乙基)吡唑(1200mg,4.36mmol)、t-BuBrettPhos Pd G3(150mg,0.18mmol)、t-BuBrettPhos(120mg,0.25mmol)、t-BuONa(400mg,4.17mmol)在甲苯(20mL)中的混合物搅拌24小时。将该反应混合物冷却至室温，并用乙酸乙酯稀释(100mL)。该混合物用饱和NH4Cl(20mL)洗涤。将该有机层分离，经Na2SO4干燥，过滤并蒸发。该残余物经硅胶色谱提纯(PE:EA＝1:3)，得到N1,N1-双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]-3-(4-乙基-3-吡啶基)-N6-[1-(2-四氢吡喃-2-基氧基乙基)吡唑-4-基]-2,7-二氮杂萘-1,6-二胺(470mg,58.3％产率)，其为棕色固体。LCMS(ESI)[M+H]+＝760.3。
步骤2：2-[4-[[8-氨基-6-(4-乙基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]氨基]吡唑- 1-基]乙醇
Figure BDA0002289356600004342
在80℃，将N1,N1-双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]-3-(4-乙基-3-吡啶基)-N6-[1-(2-四氢吡喃-2-基氧基乙基)吡唑-4-基]-2,7-二氮杂萘-1,6-二胺(470mg,0.62mmol)在2,2,2-三氟乙酸(5mL)中的混合物搅拌1小时。将该反应混合物浓缩。将该残余物再次溶于MeOH(3mL)并用7N NH3/MeOH碱化至pH 9-10。该物质经快速色谱提纯(C18，NH4HCO3/MeOH/H2O)，得到2-[4-[[8-氨基-6-(4-乙基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]氨基]吡唑-1-基]乙醇(125mg,53.8％产率)，其为黄色固体。LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.45，[M+H]+＝376.1，方法＝C；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ9.22(s,1H),8.85(brs，1H),8.47-8.46(m,2H),7.91(s,1H),7.49(s,1H),7.32(d,J＝5.2Hz,1H),7.06(brs，2H),6.71(s,1H),6.64(s,1H),4.92-4.89(m,1H),4.14-4.09(m,2H),3.76-3.72(m,2H),2.79(q,J＝7.6Hz,2H),1.10(t,J＝7.6Hz,3H)。
实施例132：
2-[4-[[8-氨基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]氨基]吡唑-1-基]乙 醇(化合物169)
Figure BDA0002289356600004351
步骤1：4-溴-1-(2-四氢吡喃-2-基氧基乙基)吡唑
Figure BDA0002289356600004352
在0℃将NaH(60％在油中，580mg,14.5mmol)分批添加4-溴-1H-吡唑(2g,13.61mmol)的N,N-二甲基甲酰胺(25mL)溶液中。在0℃搅拌该混合物2小时。将2-(2-溴乙氧基)四氢-2h-吡喃(3g,14.35mmol)添加该反应混合物中。在15℃将所得混合物搅拌2小时。该反应混合物用水(20mL)和NH4Cl(50mL)稀释。该产物经乙酸乙酯萃取(100mL x 3)。合并该乙酸乙酯层，用盐水洗涤(100mL x 2)，经Na2SO4干燥，过滤并蒸发。该残余物经硅胶色谱提纯(PE:EA＝4:1)，得到4-溴-1-(2-四氢吡喃-2-基氧基乙基)吡唑(3g,80.1％产率)，其为无色油状物。LCMS(ESI)[M+23]+＝297.0。
步骤2：N1,N1-双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]-3-(4-甲基-3-吡啶基)-N6-[1-(2- 四氢吡喃-2-基氧基乙基)吡唑-4-基]-2,7-二氮杂萘-1,6-二胺
Figure BDA0002289356600004361
在100℃、在氩气中，于密封管内将N1,N1-双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]-3-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-1,6-二胺(200mg,0.36mmol)、4-溴-1-(2-四氢吡喃-2-基氧基乙基)吡唑(400mg,1.45mmol)、t-BuBrettPhos Pd G3(40mg,0.05mmol)、t-BuBrettPhos(40mg,0.08mmol)、t-BuONa(120mg,1.25mmol)在甲苯(10mL)中的混合物搅拌16小时。将该反应混合物冷却至室温，并用乙酸乙酯稀释(30mL)。该混合物用饱和NH4Cl(10mL)洗涤。将该有机层分离，经Na2SO4干燥，过滤并蒸发。该残余物经硅胶色谱提纯(PE:EA＝1:3至EA)，得到N1,N1-双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]-3-(4-甲基-3-吡啶基)-N6-[1-(2-四氢吡喃-2-基氧基乙基)吡唑-4-基]-2,7-二氮杂萘-1,6-二胺(90mg,33.3％产率)，其为棕色固体。LCMS(ESI)[M+H]+＝746.4。
步骤3：2-[4-[[8-氨基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]氨基]吡唑- 1-基]乙醇
Figure BDA0002289356600004362
在80℃，将N1,N1-双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]-3-(4-甲基-3-吡啶基)-N6-[1-(2-四氢吡喃-2-基氧基乙基)吡唑-4-基]-2,7-二氮杂萘-1,6-二胺(90mg,0.12mmol)在2,2,2-三氟乙酸(5mL)中的混合物搅拌1小时。将该反应混合物蒸发。该残余物经CH3CN(1mL)和DMF(1mL)稀释，然后经制备型HPLC提纯，得到2-[4-[[8-氨基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]氨基]吡唑-1-基]乙醇(23.4mg,53.7％产率)，其为淡黄色固体。LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.39，[M+H]+＝362.1，方法＝C；1H NMR(400MHz,CD3OD)：δ9.14(s,1H),8.50(s,1H),8.42(d,J＝5.2Hz,1H),7.93(s,1H),7.60(s,1H),7.39(d,J＝5.2Hz,1H),6.75(s,1H),6.71(s,1H),4.24(t,J＝5.2Hz,2H),3.93(t,J＝5.2Hz,2H),2.44(s,3H)。
实施例133：
4-[[8-氨基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]氨基]-1-甲基-吡啶-2- 酮(化合物170)
Figure BDA0002289356600004371
步骤1：4-[[8-[双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7- 二氮杂萘-3-基]氨基]-1-甲基-吡啶-2-酮
Figure BDA0002289356600004372
在100℃、在氩气中，于密封管内将N1,N1-双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]-3-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-1,6-二胺(300mg,0.54mmol)、4-溴-1-甲基-吡啶-2-酮(300mg,1.6mmol)、Pd2dba3(100mg,0.11mmol)、t-BuBrettPhos(140mg,0.29mmol)和Cs2CO3(300mg,0.92mmol)在1,4-二噁烷(15mL)中的混合物搅拌16小时。将该反应混合物冷却至室温，并用乙酸乙酯稀释(50mL)。该混合物用盐水洗涤(20mL)，经Na2SO4干燥，过滤并蒸发。该残余物经硅胶色谱提纯(EA至EA:MeOH＝10:1)，得到4-[[8-[双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]氨基]-1-甲基-吡啶-2-酮(140mg,39.1％产率)，其为棕色固体。LCMS(ESI)[M+H]+＝659.3。
步骤2：4-[[8-氨基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]氨基]-1-甲基- 吡啶-2-酮
Figure BDA0002289356600004381
在80℃，将4-[[8-[双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]氨基]-1-甲基-吡啶-2-酮(140mg,0.21mmol)在2,2,2-三氟乙酸(5mL)中的混合物搅拌1小时。将该反应混合物浓缩，并经快速色谱提纯(C18，NH4HCO3/MeOH/H2O)，得到4-[[8-氨基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]氨基]-1-甲基-吡啶-2-酮(48mg,63％产率)，其为白色固体。LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.36，[M+H]+＝359.2，方法＝G；1HNMR(400MHz,DMSO-d6+D2O)：δ9.34(s,1H),8.54(s,1H),8.42(d,J＝4.8Hz,1H),7.52(d,J＝7.6Hz,1H),7.32(d,J＝4.8Hz,1H),7.05(s,1H),6.91(s,1H),6.89(d,J＝2.0Hz,1H),6.38(dd,J＝2.0,7.6Hz,1H),3.34(s,3H),2.40(s,3H)。
实施例134：
1-[8-氨基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-3-(2-氰基苯基)脲(化 合物171)
Figure BDA0002289356600004382
步骤1：1-[8-[双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基]- 3-(2-氰基苯基)脲
Figure BDA0002289356600004383
在15℃，将Me3Al(2M在甲苯中，0.8mL,1.6mmol)逐滴添加至2-氨基苯甲腈(200mg,1.69mmol)的甲苯(10mL)溶液中。在15℃搅拌该混合物1小时。将N-[8-[双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基]氨基甲酸苯基酯(170mg,0.28mmol)一次性添加该反应混合物中，在15℃搅拌该混合物1小时。该反应混合物经水(1mL)和乙酸乙酯(100mL)稀释。将该有机层用饱和NH4Cl(30mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并蒸发。该残余物经硅胶色谱提纯(PE:EA＝2:1至EA)，得到1-[8-[双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基]-3-(2-氰基苯基)脲(130mg,73.6％产率)，其为淡黄色固体。LCMS(ESI)[M+H]+＝639.3。
步骤2：1-[8-[双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7- 二氮杂萘-3-基]-3-(2-氰基苯基)脲
在100℃、在氩气中，于密封管内将1-[8-[双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基]-3-(2-氰基苯基)脲(110mg,0.17mmol)、4-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡啶(110mg,0.50mmol)、Xphos Pd G2(40mg,0.05mmol)、Xphos(40mg,0.08mmol)和K2CO3(110mg,0.80mmol)在1,4-二噁烷(16mL)和水(4mL)中的混合物搅拌3小时。将该反应混合物冷却至室温，并用乙酸乙酯稀释(100mL)。将该有机层用盐水洗涤(20mL)，经Na2SO4干燥，过滤并蒸发。该残余物经硅胶色谱提纯(PE:EA＝1:2至EA至EA：MeOH＝10:1)，得到1-[8-[双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-3-(2-氰基苯基)脲(80mg,66.8％产率)，其为棕色固体。LCMS(ESI)[M+H]+＝696.3。
步骤3：1-[8-氨基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-3-(2-氰基苯基) 脲
Figure BDA0002289356600004392
在50℃，将1-[8-[双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-3-(2-氰基苯基)脲(80mg,0.11mmol)在2,2,2-三氟乙酸(5mL)中的混合物搅拌1小时。将该反应混合物浓缩，并经制备型HPLC提纯(NH4HCO3/CH3CN/H2O)，得到1-[8-氨基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-3-(2-氰基苯基)脲(12.4mg,27.3％产率)，其为白色固体。LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.43，[M+H]+＝396.1，方法＝C；1H NMR(400MHz,CD3OD)：δ9.60(s,1H),8.60(s,1H),8.45(d,J＝4.0Hz,1H),8.13(s,1H),7.84(s,1H),7.65-7.61(m,1H),7.42(d,J＝4.0Hz,1H),7.28-7.19(m,3H),2.50(s,3H)。
实施例135：
(±)-反式-N-(8-氨基-5-氟-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2- (1H-吡唑-4-基)环丙烷甲酰胺(化合物172)
Figure BDA0002289356600004401
向(±)-反式-N-[8-氨基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-(1H-吡唑-4-基)环丙烷甲酰胺(190mg,0.49mmol)的N,N-二甲基甲酰胺(10mL)溶液中添加Selectfluor(95mg,0.25mmol)。在50℃，搅拌该混合物3小时。该混合物直接经反相色谱提纯(乙腈17-47％/0.05％氨/水)，得到(±)-反式-N-[8-氨基-5-氟-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-(1H-吡唑-4-基)环丙烷甲酰胺(33mg,16.6％产率)。LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.538，[M+H]+＝404.1，方法＝C；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ12.64(s,1H),11.19(s,1H),9.43(s,1H),8.52(s,1H),8.49(d,J＝5.2Hz,1H),8.41(s,1H),7.63(s,1H),7.38(s,1H),7.37(d,J＝5.2Hz,1H),7.32(s,2H),2.28(s,3H),2.25-2.21(m,2H),1.45-1.40(m,1H),1.29-1.24(m,1H)。
实施例136：
(±)-反式-N-(8-氨基-5-氯-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2- (1H-吡唑-4-基)环丙烷甲酰胺(化合物173)
Figure BDA0002289356600004411
向搅拌中的(±)-反式-N-[8-氨基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-(1H-吡唑-4-基)环丙烷甲酰胺(100mg,0.26mmol)的N,N-二甲基甲酰胺(8mL)溶液添加N-氯琥珀酰亚胺(180mg,1.35mmol)。在室温将所得混合物搅拌过夜。该混合物直接经反相色谱提纯(乙腈17-47％/0.05％氨/水)，得到(±)-反式-N-[8-氨基-5-氯-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-(1H-吡唑-4-基)环丙烷甲酰胺(38mg,35％产率)，其为白色固体。LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.486，[M+H]+＝420.1，方法＝G；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ12.65(s,1H),11.19(s,1H),9.44(s,1H),8.61(s,1H),8.48(d,J＝5.2Hz,1H),8.41(s,1H),7.60(br，4H),7.36(d,J＝5.2Hz,1H),2.30-2.21(m,2H),2.17(s,3H),1.45-1.42(m,1H),1.29-1.26(m,1H)。
实施例137：
1-(8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-3-(1-(2-甲氧基乙基) 氮杂环丁烷-3-基)脲(化合物174)
Figure BDA0002289356600004412
步骤1：1-(2-甲氧基乙基)氮杂环丁烷-3-基氨基甲酸叔丁基酯
Figure BDA0002289356600004413
将3-boc-氨基氮杂环丁烷盐酸盐(900mg,4.31mmol)、2-溴乙基甲基酯(1.26g,9.07mmol)和碳酸钾(1.26g,9.13mmol)的乙腈(50mL)溶液加热至80℃24小时。过滤并在真空中浓缩该混合物，得到N-[1-(2-甲氧基乙基)氮杂环丁烷-3-基]氨基甲酸叔丁基酯(800mg,81％产率)，其为橙色固体。LCMS(ESI)[M+H]+＝231.1。
步骤2：1-(2-甲氧基乙基)氮杂环丁烷-3-胺盐酸盐
Figure BDA0002289356600004421
在室温将N-[1-(2-甲氧基乙基)氮杂环丁烷-3-基]氨基甲酸叔丁基酯(800mg,3.47mmol)的HCl/二噁烷(4M，16.mL,64mmol)溶液搅拌1小时。蒸发该混合物，且所得固体用(EA:PE＝1:1)洗涤，得到1-(2-甲氧基乙基)氮杂环丁烷-3-胺盐酸盐(600mg,51.8％产率)，其为黄色固体。LCMS(ESI)[M+H]+＝261.2。
步骤3：1-(8-(双(2,4-二甲氧基苄基)氨基)-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-3-(1- (2-甲氧基乙基)氮杂环丁烷-3-基)脲
Figure BDA0002289356600004422
在90℃，将N-[8-[双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基]氨基甲酸苯基酯(800mg,30％纯度，0.39mmol)、1-(2-甲氧基乙基)氮杂环丁烷-3-胺盐酸盐(600mg,1.8mmol)和Et3N(0.8g,7.92mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(15mL)中的混合物搅拌3小时。该混合物用乙酸乙酯稀释(50mL)，用水(30mLx3)和盐水(30mLx2)洗涤。将该有机层经硫酸钠干燥，过滤并在真空中浓缩。该残余物经硅胶柱提纯(EA:PE＝1:1至DCM:MeOH＝20:1)，得到1-[8-[双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基]-3-[1-(2-甲氧基乙基)氮杂环丁烷-3-基]脲(150mg,39.6％产率)，其为白色固体。LCMS(ESI)[M+H]+＝651.3。
步骤4：1-(8-(双(2,4-二甲氧基苄基)氨基)-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂 萘-3-基)-3-(1-(2-甲氧基乙基)氮杂环丁烷-3-基)脲
将1-[8-[双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基]-3-[1-(2-甲氧基乙基)氮杂环丁烷-3-基]脲(140mg,0.14mmol)、4-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡啶(60mg,0.27mmol)、Pd(dppf)Cl2(25mg,0.03mmol)和K2CO3(50mg,0.36mmol)的1,4-二噁烷(10mL)和水(2mL)溶液加热至105℃3小时。该混合物直接经硅胶柱提纯(EA至DCM:MeOH＝10:1)，得到1-[8-[双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-3-[1-(2-甲氧基乙基)氮杂环丁烷-3-基]脲(80mg,75％产率)，其为灰色固体。LCMS(ESI)[M+H]+＝708.3。
步骤5：1-(8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-3-(1-(2-甲氧基 乙基)氮杂环丁烷-3-基)脲
将1-[8-[双[(4-甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-3-[1-(2-甲氧基乙基)氮杂环丁烷-3-基]脲(80mg,0.12mmol)的2,2,2-三氟乙酸(5mL)溶液加热至45℃1小时。在蒸发该溶剂后，该残余物用MeOH中的氨中和。所得混合物用反相色谱提纯(乙腈17-47％/0.05％氨/水)，得到1-[8-氨基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-3-[1-(2-甲氧基乙基)氮杂环丁烷-3-基]脲(23.1mg,46％产率)，其为白色固体。LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.473，[M+H]+＝408.3，方法＝F；1HNMR(400MHz,CD3OD)：δ9.24(s,1H),8.52(s,1H),8.42(d,J＝5.2Hz,1H),7.54(s,1H),7.39(d,J＝5.2Hz,1H),6.89(s,1H),4.50(t,J＝6.8Hz,1H),3.79(dt，J＝2.0，6.8Hz,2H),3.45(t,J＝5.6Hz,2H),3.35(s,3H),3.15(dt，J＝2.0，6.8Hz,2H),2.74(t,J＝5.6Hz,2H),2.45(s,3H)。
实施例138：
1-(8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-3-(氮杂环丁烷-3-基) 脲(化合物175)
Figure BDA0002289356600004441
步骤1：3-(3-(8-(双(2,4-二甲氧基苄基)氨基)-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)脲基) 氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁基酯
Figure BDA0002289356600004442
在90℃，将N-[8-[双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基]氨基甲酸苯基酯(240mg,0.39mmol)、1-Boc-3-(氨基)氮杂环丁烷(400mg,2.32mmol)和Et3N(0.8g,7.92mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(15mL)中的混合物搅拌3小时。该混合物用乙酸乙酯稀释(50mL)，用水(30mLx3)和盐水(30mLx2)洗涤。将该有机层经硫酸钠干燥，过滤并在真空中浓缩。该残余物经硅胶柱提纯(EA:PE＝1:2至1:1)，得到3-[[8-[双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基]氨基甲酰基氨基]氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁基酯(110mg,27％产率)，其为白色固体。LCMS(ESI)[M+H]+＝693.3。
步骤2：3-(3-(8-(双(2,4-二甲氧基苄基)氨基)-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮 杂萘-3-基)脲基)氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁基酯
Figure BDA0002289356600004451
在100℃、在氩气中，将3-[[8-[双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基]氨基甲酰基氨基]氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁基酯(100mg,0.10mmol)、4-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡啶(28mg,0.13mmol)、Xphos Pd G2(12mg,0.02mmol)、AcOK(23mg,0.23mmol)和XPhos(18mg,0.04mmol)在1,4-二噁烷(10mL)和水(2mL)的混合物搅拌2小时。浓缩该混合物并经硅胶柱提纯(EA:PE＝1:1至100％EA至DCM:MeOH＝10:1)，得到3-[[8-[双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]氨基甲酰基氨基]氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁基酯(80mg,88％产率)，其为淡黄色固体。LCMS(ESI)[M+H]+＝750.3。
步骤3：1-(8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-3-(氮杂环丁烷- 3-基)脲
Figure BDA0002289356600004452
将3-[[8-[双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]氨基甲酰基氨基]氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁基酯(75mg,0.08mmol)的2,2,2-三氟乙酸(5mL)溶液加热至45℃1小时。蒸发该溶剂后，用氨/MeOH中和该混合物。所得残余物用反相色谱提纯(乙腈17-47％/0.05％碳酸氢铵/水)，得到1-[8-氨基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-3-(氮杂环丁烷-3-基)脲(14.3mg,51％产率)，其为白色固体。LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.366，[M+H]+＝350.1，方法＝C；1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.26(s,1H),9.17(s,1H),8.56(s,1H),8.42(d,J＝5.2Hz,1H),7.80(s,1H),7.67(d,J＝5.2Hz,1H),7.30(d,J＝5.2Hz,1H),7.26(s,2H),6.88(s,1H),4.5-4.47(m,1H),3.63-3.59(m,2H),3.40-3.32(m,2H),2.41(s,3H)。
实施例139：
(R)-1-(8-氨基-6-(4-乙基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-3-(1-甲基-2-氧代 吡咯烷-3-基)脲(化合物176)
Figure BDA0002289356600004461
步骤1：(R)-1-(8-(双(4-甲氧基苄基)氨基)-6-(4-乙基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂 萘-3-基)-3-(1-甲基-2-氧代吡咯烷-3-基)脲
Figure BDA0002289356600004462
在0℃，向三光气(108mg,0.36mmol)的四氢呋喃(4mL)溶液中添加3-(4-乙基-3-吡啶基)-N1,N1-双[(4-甲氧基苯基)甲基]-2,7-二氮杂萘-1,6-二胺(180mg,0.18mmol)和Et3N(0.5mL,3.56mmol)/四氢呋喃(5mL)。在0℃搅拌该混合物1小时。添加(3R)-3-氨基-1-甲基-吡咯烷-2-酮(450mg,3.94mmol)。该混合物温热至室温过夜。该混合物直接经硅胶柱色谱提纯(DCM:MeOH＝20:1)，得到1-[8-[双[(4-甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-(4-乙基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-3-[(3R)-1-甲基-2-氧代-吡咯烷-3-基]脲(32mg,28％产率)，其为淡黄色固体。LCMS(ESI)[M+H]+＝646.3。
步骤2：(R)-1-(8-氨基-6-(4-乙基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-3-(1-甲基- 2-氧代吡咯烷-3-基)脲
Figure BDA0002289356600004471
将1-[8-[双[(4-甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-(4-乙基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-3-[(3R)-1-甲基-2-氧代-吡咯烷-3-基]脲(27mg,0.0400mmol)的2,2,2-三氟乙酸(3mL)溶液加热至回流3小时。蒸发该混合物并用氨/MeOH中和。所得残余物用反相色谱提纯(乙腈0-40/0.1％NH4HCO3/水)，得到1-[8-氨基-6-(4-乙基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-3-[(3R)-1-甲基-2-氧代-吡咯烷-3-基]脲(5.5mg,33％产率)，其为白色固体。LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.50，[M+H]+＝406.2，方法＝C；1HNMR(400MHz,CD3OD)δ9.29(s,1H),8.50(s,2H),7.52(s,1H),7.45(d,J＝5.2Hz,1H),6.89(s,1H),4.49(t,J＝9.2Hz,1H),3.47(dd,J＝4.0,9.2Hz,2H),2.93(s,3H),2.83(q,J＝7.6Hz,2H),2.62-2.57(m,1H),2.09-2.04(m,1H),1.19(t,J＝7.6Hz,3H)。
实施例140：
1-(8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-3-(1-羟基丙-2-基)脲 (化合物177)
步骤1：1-(8-(双(2,4-二甲氧基苄基)氨基)-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-3-(1-羟 基丙-2-基)脲
Figure BDA0002289356600004481
在90℃，将N-[8-[双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基]氨基甲酸苯基酯(150mg,0.24mmol)、DL-丙氨醇(75mg,1mmol)和Et3N(500mg,4.95mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(10mL)中的混合物搅拌2小时。该混合物用乙酸乙酯稀释(80mL)，用水(30mL x 3)和盐水(30mL x2)洗涤。将该有机层经硫酸钠干燥，过滤并在真空中浓缩。该残余物经硅胶柱提纯(EA:PE＝1:1至4:1)，得到1-[8-[双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基]-3-(2-羟基-1-甲基-乙基)脲(110mg,0.18mmol，76％产率)，其为白色固体。LCMS(ESI)[M+H]+＝596.2。
步骤2：1-(8-(双(2,4-二甲氧基苄基)氨基)-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂 萘-3-基)-3-(1-羟基丙-2-基)脲
Figure BDA0002289356600004482
在100℃、在氩气中，将1-[8-[双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基]-3-(2-羟基-1-甲基-乙基)脲(100mg,0.17mmol)、4-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡啶(50mg,0.23mmol)、Xphos Pd G2(20mg,0.03mmol)、AcOK(40mg,0.41mmol)和XPhos(30mg,0.06mmol)在1,4-二噁烷(10mL)和水(2mL)中的混合物搅拌2小时。浓缩该混合物，并经硅胶柱色谱提纯(DCM:MeOH＝10:1)，得到1-[8-[双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-3-(2-羟基-1-甲基-乙基)脲(85mg,78％产率)，其为淡黄色固体。LCMS(ESI)[M+H]+＝653.3。
步骤3：1-(8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-3-(1-羟基丙-2- 基)脲
Figure BDA0002289356600004491
将1-[8-[双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-3-(2-羟基-1-甲基-乙基)脲(80mg,0.12mmol)的2,2,2-三氟乙酸(5mL)溶液加热至45℃1小时。蒸发该溶剂后，该残余物经氨/甲醇中和。该混合物直接经反相HPLC提纯(乙腈17-47％/0.05％碳酸氢铵/水)，得到1-[8-氨基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-3-(2-羟基-1-甲基-乙基)脲(28.9mg,67％产率)，其为白色固体。LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.432，[M+H]+＝353.1，方法＝C；1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.26(s,1H),9.16(s,1H),8.56(s,1H),8.42(d,J＝5.2Hz,1H),7.78(s,1H),7.29(d,J＝5.2Hz,1H),7.23-7.21(m,3H),6.87(s,1H),4.83(t,J＝5.2Hz,1H),3.79-3.70(m,1H),3.43-3.32(m,2H),2.41(s,3H),1.11(d,J＝6.8Hz,3H)。
实施例141：
1-[8-氨基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-3-[1-(1-氰基乙基)吡 唑-4-基]脲(化合物178)
Figure BDA0002289356600004492
步骤1：(±)-2-(4-硝基吡唑-1-基)丙腈
Figure BDA0002289356600004493
在80℃，将4-硝基-1H-吡唑(500mg,4.42mmol)、2-溴丙腈(1185mg,8.85mmol)和碳酸钾(610mg,4.42mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(15mL)中的混合物搅拌2小时。将该反应混合物浓缩且该残余物经快速柱色谱提纯，用PE/EA(5/1)洗脱，得到(±)-2-(4-硝基吡唑-1-基)丙腈(720mg,4.334mmol，98％产率)，其为黄色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝167.1。
步骤2：(±)-2-(4-氨基吡唑-1-基)丙腈
Figure BDA0002289356600004501
在25℃，将(±)-2-(4-硝基吡唑-1-基)丙腈(720mg,4.33mmol)和铁(1230mg,21.96mmol)在乙酸(20mL)中的混合物搅拌过夜。过滤并浓缩该反应混合物。该残余物经快速柱色谱提纯，用DCM/MeOH(20/1)洗脱，得到(±)-2-(4-氨基吡唑-1-基)丙腈(200mg,33.9％产率)，其为黄色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝137.1。
步骤3：(±)-1-[8-[双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-氯-2,7-二氮杂萘-3- 基]-3-[1-(1-氰基乙基)吡唑-4-基]脲
在110℃，将(±)-2-(4-氨基吡唑-1-基)丙腈(176mg,1.29mmol)、N-[8-[双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基]氨基甲酸苯基酯(160mg,0.26mmol)和三乙胺(100mg,0.99mmol)在1,4-二噁烷(5mL)的混合物搅拌过夜。将该反应混合物浓缩并经制备型TLC提纯(DCM/MeOH＝10/1)，得到1-[8-[双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基]-3-[1-(1-氰基乙基)吡唑-4-基]脲(165mg,96.5％产率)，其为黄色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝657.1。
步骤4：(±)-1-[8-[双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-(4-甲基-3-吡啶基)- 2,7-二氮杂萘-3-基]-3-[1-(1-氰基乙基)吡唑-4-基]脲
Figure BDA0002289356600004511
在100℃，将(±)-1-[8-[双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基]-3-[1-(1-氰基乙基)吡唑-4-基]脲(200mg,0.3mmol)、4-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡啶(80mg,0.37mmol)、Xphos-Pd-G2(24mg,0.030mmol)、Xphos(28mg,0.06mmol)和碳酸钾(84mg,0.61mmol)在1,4-二噁烷(8mL)和水(0.8mL)中的混合物搅拌2小时。将该反应混合物浓缩并经制备型TLC提纯(DCM/MeOH＝10/1)，得到(±)-1-[8-[双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-3-[1-(1-氰基乙基)吡唑-4-基]脲(200mg,92.1％产率)，其为黄色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝714.1。
步骤5：(±)-1-[8-氨基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-3-[1-(1- 氰基乙基)吡唑-4-基]脲
Figure BDA0002289356600004512
在50℃，将(±)-1-[8-[双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-3-[1-(1-氰基乙基)吡唑-4-基]脲(220mg,0.31mmol)的2,2,2-三氟乙酸(10mL)溶液搅拌3小时。将该反应混合物浓缩并经制备型HPLC提纯(流动相A：水(10mmol/L NH4HCO3)B：ACN)，得到(±)-1-[8-氨基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-3-[1-(1-氰基乙基)吡唑-4-基]脲(60mg,47.1％产率)，其为白色固体。LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.532，[M+H]+＝414.1，方法＝H；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.44(s,2H),9.32(s,1H),8.56(s,1H),8.43(d,J＝5.2Hz,1H),8.07(s,1H),7.87(s,1H),7.65(s,1H),7.32-7.31(m,2H),6.94(s,1H),5.82-5.83(m,1H),2.42(s,3H),1.78(d,J＝6.8Hz,3H)。
实施例142：
(±)-顺式-N-[8-氨基-6-[6-[(3S)-3-氨基吡咯烷-1-基]-4-甲基-3-吡啶基]-2, 7-二氮杂萘-3-基]-2-氟-环丙烷甲酰胺(化合物179)
Figure BDA0002289356600004521
步骤1：N-[(3S)-1-(5-溴-4-甲基-2-吡啶基)吡咯烷-3-基]氨基甲酸叔丁基酯
在100℃，将5-溴-2-氟-4-甲基-吡啶(1000mg,5.26mmol)、(3S)-3-吡咯烷基氨基甲酸叔丁基酯(1200mg,6.44mmol)和碳酸钾(2200mg,15.94mmol)在二甲基亚砜(15mL)中的混合物搅拌过夜。该反应混合物用水稀释(30mL)并用乙酸乙酯萃取(3x20mL)。该合并的有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并浓缩。该残余物经快速柱色谱提纯，用PE/EA(10/1)洗脱，得到N-[(3S)-1-(5-溴-4-甲基-2-吡啶基)吡咯烷-3-基]氨基甲酸叔丁基酯(1700mg,90.7％产率)，其为白色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝356.1。
步骤2：N-[(3S)-1-[4-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2- 基)-2-吡啶基]吡咯烷-3-基]氨基甲酸叔丁基酯
在90℃，将N-[(3S)-1-(5-溴-4-甲基-2-吡啶基)吡咯烷-3-基]氨基甲酸叔丁基酯(1000mg,2.81mmol)、双(频哪醇合)二硼(3500mg,13.78mmol)、[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯钯(II)(229mg,0.28mmol)和乙酸钾(835mg,8.52mmol)在1,4-二噁烷(20mL)中的混合物搅拌过夜。将该反应混合物浓缩并经制备型TLC提纯(PE/EA＝1/1)，得到N-[(3S)-1-[4-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-2-吡啶基]吡咯烷-3-基]氨基甲酸叔丁基酯(1000mg,1.24mmol，44.2％产率)，其为黄色油状物。LCMS(ESI):[M+H]+＝404.1。
步骤3：(±)-N-[(3S)-1-[5-[1-氨基-6-[[顺式-2-氟环丙烷羰基]氨基]-2,7-二 氮杂萘-3-基]-4-甲基-2-吡啶基]吡咯烷-3-基]氨基甲酸叔丁基酯
Figure BDA0002289356600004531
在100℃，将(±)-顺式-N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氟-环丙烷甲酰胺(70mg,0.25mmol)、N-[(3S)-1-[4-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-2-吡啶基]吡咯烷-3-基]氨基甲酸叔丁基酯(100mg,0.25mmol)、Xphos-Pd-G2(19mg,0.02mmol)、Xphos(24mg,0.05mmol)和碳酸钾(68mg,0.49mmol)在1,4-二噁烷(8mL)和水(2mL)的混合物搅拌2小时。将该反应混合物浓缩并经制备型TLC提纯(PE/EA＝1/1)，得到N-[(3S)-1-[5-[1-氨基-6-[[(1R,2R)-2-氟环丙烷羰基]氨基]-2,7-二氮杂萘-3-基]-4-甲基-2-吡啶基]吡咯烷-3-基]氨基甲酸叔丁基酯(100mg,77.3％产率)，其为黄色油状物。LCMS(ESI):[M+H]+＝522.1。
步骤4：(±)-顺式-N-[8-氨基-6-[6-[(3S)-3-氨基吡咯烷-1-基]-4-甲基-3-吡啶 基]-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-氟-环丙烷甲酰胺
在25℃，将N-[(3S)-1-[5-[1-氨基-6-[[顺式-2-氟环丙烷羰基]氨基]-2,7-二氮杂萘-3-基]-4-甲基-2-吡啶基]吡咯烷-3-基]氨基甲酸叔丁基酯(100mg,0.19mmol)和氯化氢/1,4-二噁烷(4N，0.5mL,1.9mmol)在1,4-二噁烷(5mL)中搅拌1小时。将该反应混合物浓缩，然后添加氨/甲醇。浓缩该溶液，并经制备型HPLC提纯(流动相A：水(10mmol/L NH4HCO3)B：ACN)，得到(±)-顺式-N-[8-氨基-6-[6-[(3S)-3-氨基吡咯烷-1-基]-4-甲基-3-吡啶基]-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-氟-环丙烷甲酰胺(45mg,55.7％产率)，其为黄色固体。LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.407，[M+H]+＝422.1，方法＝H；1HNMR(400MHz,CD3OD)δ9.24(s,1H),8.26(s,1H),8.07(s,1H),6.88(s,1H),6.41(s,1H),4.98-4.95(m,1H),4.81-4.79(m,1H),3.72-3.63(m,3H),3.54-3.48(m,1H),3.27-3.25(m,1H),2.38(s,3H),2.30-2.25(m,1H),2.18-2.15(m,1H),1.96-1.80(m,2H),1.26-1.20(m,1H)。
实施例143：
(±)-反式-4-[1-氨基-6-[[反式-2-氰基环丙烷羰基]氨基]-2,7-二氮杂萘-3- 基]-N,1,3,5-四甲基-吡咯-2-甲酰胺(化合物180)
Figure BDA0002289356600004541
步骤1：4-溴-3,5-二甲基-1H-吡咯-2-甲酸乙基酯
Figure BDA0002289356600004542
在0℃，将N-溴琥珀酰亚胺(385mg,2.16mmol)分批添加到3,5-二甲基-1H-吡咯-2-甲酸乙基酯(350mg,2.09mmol)和碳酸钾(307mg,2.22mmol)在乙腈(20mL)中的混合物。将该混合物温热至室温，用水稀释，然后搅拌30分钟。通过真空过滤收集该沉淀物，用乙醇:水(1:2)洗涤并干燥，得到4-溴-3,5-二甲基-1H-吡咯-2-甲酸乙基酯(450mg,1.8285mmol，87.4％产率)，其为白色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝246.1。
步骤2：4-溴-1,3,5-三甲基-吡咯-2-甲酸乙基酯
在0℃，将4-溴-3,5-二甲基-1H-吡咯-2-甲酸乙基酯(450mg,1.83mmol)在四氢呋喃(20mL)中的混合物搅拌10分钟。在0℃，添加氢化钠(60mg,2.5mmol)。在0℃，搅拌该反应混合物10分钟。然后添加碘甲烷(312mg,2.2mmol)。将该反应混合物温热至25℃并搅拌2小时。将该反应混合物浓缩，并经快速柱色谱提纯(PE/EA＝20/1)，得到4-溴-1,3,5-三甲基-吡咯-2-甲酸乙基酯(320mg,1.23mmol，67.3％产率)，其为黄色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝260.1。
步骤3：4-溴-1,3,5-三甲基-吡咯-2-甲酸
在100℃，将4-溴-1,3,5-三甲基-吡咯-2-甲酸乙基酯(320mg,1.23mmol)和氢氧化钾(138mg,2.46mmol)在乙醇(10mL)和水(5mL)中的混合物搅拌4小时。浓缩该反应，然后用水稀释(20mL)。该混合物用乙酸乙酯(2×20mL)洗涤。将该水相调节至pH 4并用乙酸乙酯萃取(2×20mL)。将该有机层经硫酸钠干燥，过滤并浓缩，得到4-溴-1,3,5-三甲基-吡咯-2-甲酸(270mg,1.1634mmol，94.6％产率)，其为白色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝232.1。
步骤4：4-溴-N,1,3,5-四甲基-吡咯-2-甲酰胺
Figure BDA0002289356600004552
在25℃，将4-溴-1,3,5-三甲基-吡咯-2-甲酸(260mg,1.12mmol)、2-(7-氮杂-1H-苯并三唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基脲鎓六氟磷酸盐(0.64g,1.68mmol)、碳酸钾(462.0mg,3.35mmol)和甲胺(105.0mg,3.38mmol)在二氯甲烷(10mL)中的混合物搅拌1小时。将该反应混合物浓缩，并经快速柱色谱提纯(50％乙酸乙酯/石油醚)，得到4-溴-N,1,3,5-四甲基-吡咯-2-甲酰胺(250mg,1.02mmol，91％产率)，其为白色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝245.1。
步骤5：N,1,3,5-四甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡 咯-2-甲酰胺
Figure BDA0002289356600004553
在85℃，将4-溴-N,1,3,5-四甲基-吡咯-2-甲酰胺(100mg,0.41mmol)、双(频哪醇合)二硼(510mg,2.01mmol)、[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯钯(II)(34mg,0.04mmol)和磷酸钾(260mg,1.23mmol)在1,4-二噁烷(10mL)中的混合物搅拌过夜。将该反应混合物浓缩并经制备型TLC提纯(PE/EA，1/1)，得到N,1,3,5-四甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡咯-2-甲酰胺(120mg,49.3％产率)，其为黄色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝245.1。
步骤6：(±)-反式-4-[1-氨基-6-[[反式-2-氰基环丙烷羰基]氨基]-2,7-二氮杂 萘-3-基]-N,1,3,5-四甲基-吡咯-2-甲酰胺
Figure BDA0002289356600004561
在82℃，将(±)-反式-N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氰基-环丙烷甲酰胺(95mg,0.33mmol)、N,1,3,5-四甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡咯-2-甲酰胺(100mg,0.34mmol)、Xphos-Pd-G2(27mg,0.03mmol)、Xphos(32mg,0.07mmol)和碳酸钾(95mg,0.69mmol)的1,4-二噁烷(5mL)和水(1mL)溶液搅拌过夜。浓缩该反应混合物，并经制备型HPLC提纯(流动相A：水(10mmol/L NH4HCO3)B：ACN)，得到4-[1-氨基-6-[[(1S,2S)-2-氰基环丙烷羰基]氨基]-2,7-二氮杂萘-3-基]-N,1,3,5-四甲基-吡咯-2-甲酰胺(11mg,0.0250mmol，7.3％产率)，其为黄色固体。LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.47，[M+H]+＝418.1，方法＝H；1H NMR(400MHz,CD3OD)δ9.23(s,1H),8.21(s,1H),6.75(s,1H),6.41(s,2H),3.68(s,3H),2.93(s,3H),2.63-2.62(m,1H),2.31(s,3H),2.22(s,3H),2.16-2.11(m,1H),1.62-1.54(m,2H)。
实施例144：
(±)-反式-N-[8-氨基-6-(5-氨基-2,4-二甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3- 基]-2-甲基-环丙烷甲酰胺(化合物181)
步骤1：N-(5-溴-4,6-二甲基-3-吡啶基)氨基甲酸叔丁基酯
Figure BDA0002289356600004563
在90℃，将3,5-二溴-2,4-二甲基-吡啶(670mg,2.53mmol)、氨基甲酸叔丁基酯(300mg,2.56mmol)、Pd2(dba)3(183mg,0.2mmol)、Xantphos(235mg,0.41mmol)、Cs2CO3(1500mg,4.62mmol)在1,4-二噁烷(10mL)的混合物在氩气中搅拌16小时。将该反应混合物浓缩且在硅胶上用柱色谱提纯(乙酸乙酯/石油醚，1/5)，得到N-(5-溴-4,6-二甲基-3-吡啶基)氨基甲酸叔丁基酯(470mg,60.4％产率)，其为黄色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝303.0。
步骤2：N-[4,6-二甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-3- 吡啶基]氨基甲酸叔丁基酯
Figure BDA0002289356600004571
在100℃、在氩气中，将N-(5-溴-4,6-二甲基-3-吡啶基)氨基甲酸叔丁基酯(600mg,1.99mmol)、双(频哪醇合)二硼(1000mg,3.94mmol)、乙酸钾(400mg,4.08mmol)、Pd(dppf)Cl2(150mg,0.2mmol)在1,4-二噁烷(10mL)的混合物搅拌2小时。将该反应混合物浓缩且在硅胶上用柱色谱提纯(乙酸乙酯/石油醚20＝50％)，得到N-[4,6-二甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁基酯(620mg,63.6％产率)，其为黄色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝349.2。
步骤3：(±)-反式-N-(6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-甲基-环丙烷甲酰胺
Figure BDA0002289356600004572
在室温搅拌6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-胺(320mg,1.49mmol)、吡啶(2mL,24.73mmol)和POCl3(0.4mL,5.87mmol)的混合物。然后添加(±)-反式-2-甲基环丙烷甲酸(160mg,1.6mmol)。在室温搅拌该反应混合物1小时。将该反应混合物浓缩，经反相色谱提纯(甲醇0-80％/0.05％氨/水)，得到(±)-反式-N-(6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-甲基-环丙烷甲酰胺(270mg,59％产率)，其为黄色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝296.0。
步骤4：(±)-反式-N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-甲基-环丙烷甲酰胺
Figure BDA0002289356600004581
在90℃，将(±)-反式-N-(6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-甲基-环丙烷甲酰胺(270mg,0.91mmol)在氢氧化铵(25％,4mL)和1,4-二噁烷(4mL)中的混合物搅拌4小时。浓缩该混合物至干燥，得到粗的(±)-反式-N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-甲基-环丙烷甲酰胺(310mg)，其为黄色液体。LCMS(ESI):[M+H]+＝277.1。
步骤5：(±)-反式-N-[5-[1-氨基-6-[[(反式)-2-甲基环丙烷羰基]氨基]-2,7-二 氮杂萘-3-基]-4,6-二甲基-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁基酯
Figure BDA0002289356600004582
在100℃、在氩气中，将X-Phos-Pd-G2(40mg,0.05mmol)、K2CO3(200mg,1.45mmol)、X-phos(50mg,0.11mmol)、N-[4,6-二甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁基酯(300mg,0.86mmol)和(±)-反式-N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-甲基-环丙烷甲酰胺(150mg,0.54mmol)在1,4-二噁烷(6mL)和水(1mL)中的混合物搅拌1小时。浓缩该反应且用柱色谱提纯(甲醇/二氯甲烷，1/10)，得到(±)-N-[5-[1-氨基-6-[[(反式)-2-甲基环丙烷羰基]氨基]-2,7-二氮杂萘-3-基]-4,6-二甲基-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁基酯(80mg,21.8％产率)，其为黄色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝463.3。
步骤6：(±)-反式-N-[8-氨基-6-(5-氨基-2,4-二甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂 萘-3-基]-2-甲基-环丙烷甲酰胺
Figure BDA0002289356600004583
在室温搅拌(±)-N-[5-[1-氨基-6-[[(反式)-2-甲基环丙烷羰基]氨基]-2,7-二氮杂萘-3-基]-4,6-二甲基-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁基酯(80mg,0.17mmol)在二噁烷/HCl(4M，2mL,8mmol)溶液1小时。浓缩该反应溶液，并经反相色谱提纯(甲醇0-30％％/0.05％氨/水)，得到(±)-反式-N-[8-氨基-6-(5-氨基-2,4-二甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-甲基-环丙烷甲酰胺(27mg,42.6％产率)，其为黄色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝363.2，RT(分钟)＝1.56，方法＝F；1H NMR(400MHz,CD3OD)δ9.30(s,1H),8.25(s,1H),7.92(s,1H),6.78(s,1H),2.19(s,3H),1.97(s,3H),1.72-1.67(m,1H),1.48-1.45(m,1H),1.25-1.22(m,1H),1.19(d,J＝6.0Hz,3H),0.79-0.75(m,1H)。
实施例145：
2-[4-[[8-氨基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]氨基]吡唑-1-基]- N,2-二甲基-丙酰胺(化合物182)
Figure BDA0002289356600004591
步骤1：2-溴-N,2-二甲基-丙酰胺
在0℃，向甲胺(2M在THF中，10.mL,20mmol)溶液中添加2-溴-2-甲基丙酰溴(1mL,8.09mmol)。将该混合物温热至室温30分钟。浓缩该反应，并用1N碳酸氢钠洗涤。该水性层经二氯甲烷萃取(15mLx2)并分离。该有机物经硫酸钠干燥，过滤并浓缩，得到2-溴-N,2-二甲基-丙酰胺(1.2g,82.4％产率)，其为无色晶体。LCMS(ESI):[M+H]+＝182.0。
步骤2：2-(4-溴吡唑-1-基)-N,2-二甲基-丙酰胺
Figure BDA0002289356600004593
在室温搅拌4-溴-1H-吡唑(735mg,5mmol)、NaH(60％在矿物油中，310mg,7.75mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(5mL)中的混合物10分钟。添加2-溴-N,2-二甲基-丙酰胺(1130mg,6.28mmol)的N,N-二甲基甲酰胺(5mL)溶液。在室温搅拌该反应混合物1小时。用饱和NH4Cl水溶液(5ml)和50mL盐水稀释该反应。该反应混合物经乙酸乙酯萃取(20mL×3)。将该有机物分离并用Na2SO4干燥，浓缩且用柱色谱提纯(乙酸乙酯/石油醚1/1)，得到2-(4-溴吡唑-1-基)-N,2-二甲基-丙酰胺(1400mg,92.9％产率)，其为无色液体。LCMS(ESI):[M+H]+＝246.0。
步骤3：2-[4-[[8-[双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-(4-甲基-3-吡啶基)- 2,7-二氮杂萘-3-基]氨基]吡唑-1-基]-N,2-二甲基-丙酰胺
Figure BDA0002289356600004601
在130℃、在氩气中，将N1,N1-双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]-3-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-1,6-二胺(220mg,0.4mmol)、t-BuONa(250mg,2.6mmol)、t-BuXPhos(200mg,0.42mmol)、Pd2(dba)3(183mg,0.2mmol)、2-(4-溴吡唑-1-基)-N,2-二甲基-丙酰胺(600mg,2.44mmol)在1,4-二噁烷(10mL)中的混合物搅拌16小时。将该反应混合物浓缩且用柱色谱提纯(甲醇/二氯甲烷，1/10)，得到2-[4-[[8-[双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]氨基]吡唑-1-基]-N,2-二甲基-丙酰胺(130mg,41.7％产率)，其为黄色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝717.4。
步骤4：2-[4-[[8-氨基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]氨基]吡唑- 1-基]-N,2-二甲基-丙酰胺
Figure BDA0002289356600004611
在80℃搅拌2-[4-[[8-[双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]氨基]吡唑-1-基]-N,2-二甲基-丙酰胺(130mg,0.18mmol)的三氟乙酸(2mL)溶液1小时。浓缩该反应，并经反相色谱提纯(乙腈26-35％/0.05％氨/水)，得到2-[4-[[8-氨基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]氨基]吡唑-1-基]-N,2-二甲基-丙酰胺(40mg,48.7％产率)，其为黄色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝417.2，RT(分钟)＝1.40，方法＝F；1H NMR(400MHz,CD3OD)δ9.16(s,1H),8.51(s,1H),8.43(d,J＝5.2Hz,1H),8.05(s,1H),7.68(s,1H),7.39(d,J＝5.2Hz,1H),6.77(s,1H),6.75(s,1H),2.74(s,3H),2.45(s,3H),1.83(s,6H)。
实施例146：
2-[4-[[8-氨基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]氨基]吡唑-1-基]- N,N,2-三甲基-丙酰胺(化合物183)
Figure BDA0002289356600004612
步骤1：2-(4-溴吡唑-1-基)-2-甲基-丙酸甲基酯
Figure BDA0002289356600004613
在0℃，向4-溴-1H-吡唑(3.0g,20.4mmol)的N,N-二甲基甲酰胺(10mL)溶液中添加NaH(60％在矿物油中，1.0g,25mmol)。在0℃搅拌该反应混合物10分钟。添加2-溴-2-甲基丙酸基甲基酯(5mL,38.67mmol)。在室温搅拌该反应混合物1小时，然后添加50mL盐水。该反应混合物经乙酸乙酯萃取(20mL×3)。该有机物用Na2SO4干燥，浓缩且用柱色谱提纯(乙酸乙酯/石油醚，1:3)，得到2-(4-溴吡唑-1-基)-2-甲基-丙酸甲基酯(4.7g,93.2％产率)，其为无色液体。LCMS(ESI):[M+H]+＝249.0。
步骤2：2-(4-溴吡唑-1-基)-2-甲基-丙酸
在室温，将2-(4-溴吡唑-1-基)-2-甲基-丙酸甲基酯(2.0g,8.09mmol)、NaOH(600mg,15mmol)在甲醇(10mL)和水(1mL)中的混合物搅拌4小时。该反应经HCl溶液(3mL,36mmol)中和。将该反应浓缩至干燥且用柱色谱提纯(乙酸乙酯/石油醚30-50％)，得到2-(4-溴吡唑-1-基)-2-甲基-丙酸(1.42g,75.3％产率)，其为白色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝233.1。
步骤3：2-(4-溴吡唑-1-基)-N,N,2-三甲基-丙酰胺
Figure BDA0002289356600004622
在0℃搅拌2-(4-溴吡唑-1-基)-2-甲基-丙酸(700mg,3mmol)、N,N-二甲胺(2M在THF中，6mL,12mmol)的二氯甲烷(20mL)溶液。逐滴添加POCl3(0.5mL,5.38mmol)，并在室温搅拌该反应混合物过夜。用20mL水稀释该反应混合物。然后，分离该有机物，浓缩且用柱色谱提纯(乙酸乙酯/石油醚，30-50％)，得到2-(4-溴吡唑-1-基)-N,N,2-三甲基-丙酰胺(400mg,51.2％产率)，其为白色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝262.0。
步骤4：2-[4-[[8-[双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-(4-甲基-3-吡啶基)- 2,7-二氮杂萘-3-基]氨基]吡唑-1-基]-N,N,2-三甲基-丙酰胺
Figure BDA0002289356600004631
在130℃、在氩气中，将N1,N1-双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]-3-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-1,6-二胺(200mg,0.36mmol)、t-BuONa(150mg,1.56mmol)、t-BuXPhos(150mg,0.31mmol)、Pd2(dba)3(140mg,0.15mmol)和2-(4-溴吡唑-1-基)-N,N,2-三甲基-丙酰胺(370mg,1.42mmol)在1,4-二噁烷(10mL)中的混合物搅拌7小时。将该反应浓缩至干燥，且用柱色谱提纯(乙酸乙酯至5％甲醇/二氯甲烷)，得到2-[4-[[8-[双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]氨基]吡唑-1-基]-N,N,2-三甲基-丙酰胺(220mg,70.5％产率)，其为黄色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝731.4。
步骤5：2-[4-[[8-氨基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]氨基]吡唑- 1-基]-N,N,2-三甲基-丙酰胺
Figure BDA0002289356600004632
在80℃搅拌2-[4-[[8-[双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]氨基]吡唑-1-基]-N,N,2-三甲基-丙酰胺(220mg,0.3mmol)的三氟乙酸(2mL)溶液1小时。将该反应浓缩至干燥，并经反相色谱提纯(甲醇45-55％％/0.05％氨/水)，得到2-[4-[[8-氨基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]氨基]吡唑-1-基]-N,N,2-三甲基-丙酰胺(73mg,56.3％产率)，其为黄色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝431.2，RT(分钟)＝1.29，方法＝A；1H NMR(400MHz,CD3OD)δ9.18(s,1H),8.50(s,1H),8.42(d,J＝5.2Hz,1H),8.06(s,1H),7.67(s,1H),7.39(d,J＝5.2Hz,1H),6.77(s,1H),6.72(s,1H),2.99(s,3H),2.54(s,3H),2.45(s,3H),1.82(s,6H)。
实施例147：
2-[4-[[8-氨基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]氨基]吡唑-1-基]- N-甲基-乙酰胺(化合物184)
Figure BDA0002289356600004641
步骤1：2-(4-溴吡唑-1-基)-N-甲基-乙酰胺
Figure BDA0002289356600004642
在室温，将4-溴-1H-吡唑(735mg,5mmol)、NaH(60％在矿物油中，330mg,8.25mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(5mL)中的混合物搅拌10分钟。然后添加2-溴-N-甲基-乙酰胺(910mg,5.99mmol)的N,N-二甲基甲酰胺(5mL)溶液。在室温搅拌该反应混合物1小时。用饱和NH4Cl溶液(5mL)和盐水(50mL)稀释该反应。该混合物经乙酸乙酯萃取(20mL×3)。将该有机物分离并用Na2SO4干燥。浓缩该有机物至干燥且用柱色谱提纯(甲醇/DCM，1:10)，得到2-(4-溴吡唑-1-基)-N-甲基-乙酰胺(870mg,79.8％产率)，其为白色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝220.0。
步骤2：2-[4-[[8-[双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-(4-甲基-3-吡啶基)- 2,7-二氮杂萘-3-基]氨基]吡唑-1-基]-N-甲基-乙酰胺
Figure BDA0002289356600004651
在130℃、在氩气氛围中，搅拌t-BuONa(500mg,5.2mmol)、t-BuXPhos(180mg,0.37mmol)、Pd2(dba)3(183.0mg,0.2mmol)、2-(4-溴吡唑-1-基)-N-甲基-乙酰胺(440mg,2.02mmol)和N1,N1-双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]-3-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-1,6-二胺(220mg,0.4mmol)在1,4-二噁烷(10mL)中的混合物7小时。将该反应浓缩至干燥，然后该粗品残余物在硅胶上用柱色谱提纯，用乙酸乙酯/甲醇1/10洗脱，得到2-[4-[[8-[双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]氨基]吡唑-1-基]-N-甲基-乙酰胺(40mg,10.7％产率)，其为黄色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝689.4。
步骤3：2-[4-[[8-氨基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]氨基]吡唑- 1-基]-N-甲基-乙酰胺
Figure BDA0002289356600004652
在80℃，将2-[4-[[8-[双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]氨基]吡唑-1-基]-N-甲基-乙酰胺(40mg,0.06mmol)的三氟乙酸(1mL)溶液搅拌1小时。将该反应浓缩至干燥，并经反相色谱提纯(甲醇45-55％％/0.05％氨/水)，得到2-[4-[[8-氨基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]氨基]吡唑-1-基]-N-甲基-乙酰胺(8mg,35.5％产率)，其为黄色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝389.2，RT(分钟)＝1.18，方法＝A；1H NMR(400MHz,CD3OD)δ9.15(s,1H),8.50(s,1H),8.42(d,J＝5.2Hz,1H),7.98(s,1H),7.64(s,1H),7.39(d,J＝5.2Hz,1H),6.76(s,1H),6.75(s,1H),4.86(s,2H),2.80(s,3H),2.44(s,3H)。
实施例148：
(±)-反式-2-氰基-N-(6-((S)-4-甲基-2-氧代噁唑烷-3-基)异喹啉-3-基)环丙 烷甲酰胺(化合物185)
Figure BDA0002289356600004661
步骤1：5-溴-2,4-二甲基苯甲酸
Figure BDA0002289356600004662
在70℃、在N2中，将5-溴-2,4-二甲基-苯甲酸甲基酯(400mg,1.65mmol)、LiOH(197mg,8.21mmol)在四氢呋喃(3mL)和水(3mL)中的混合物搅拌3小时。然后，用30mL水和20mL的EtOAc稀释该反应。然后，用1N HCl将该混合物pH调节至4-5。将该有机层浓缩至干燥，得到所述标题化合物，其为白色固体(350mg,92.9％产率)。LCMS(ESI)[M+H]+＝230.9。
步骤2：5-溴-2,4-二甲基苯酰胺
Figure BDA0002289356600004663
在室温，将5-溴-2,4-二甲基-苯甲酸(350mg,1.53mmol)、氯化铵(162mg,3.03mmol)、DIEA(798mg,6.19mmol)、HATU(754mg,1.98mmol)在二氯甲烷(20mL)中的混合物搅拌2小时。将该反应浓缩至干燥。将该残余物溶于EtOAc(10mL)，用150mL盐水洗涤，干燥(NaSO4)并浓缩。该残余物经柱色谱提纯(PE:EA＝5:1至PE:EA＝1:1)，得到所述标题化合物，其为白色固体(340mg,92％产率)。LCMS(ESI)[M+H]+＝230.1。
步骤3：2,4-二甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯酰胺
Figure BDA0002289356600004671
在100℃、在氩气中，将5-溴-2,4-二甲基-苯酰胺(340mg,1.49mmol)、双(频哪醇合)二硼(567mg,2.23mmol)、PdCl2dppf(218mg,0.3mmol)、KOAc(438mg,4.47mmol)在1,4-二噁烷(15mL)中的混合物搅拌3小时。浓缩该反应，并经硅胶色谱提纯(PE:EA＝4:1至PE:EA＝2:1)，得到所述标题化合物，其为白色固体(370mg,62.1％产率)。LCMS(ESI)[M+H]+＝276.2。
步骤4：(±)-5-(1-氨基-6-(反式-2-氰基环丙烷甲酰氨基)-2,7-二氮杂萘-3- 基)-2,4-二甲基苯酰胺
Figure BDA0002289356600004672
在氩气中，将2,4-二甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯酰胺(300mg,1.09mmol)、反式-N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氰基-环丙烷甲酰胺(100mg,0.35mmol)、PdCl2dppf(80mg,0.11mmol)、K2CO3(450mg,3.26mmol)在1,4-二噁烷(10mL)中的混合物在100℃加热3小时。将该反应浓缩至干燥。该残余物经硅胶色谱提纯(PE:EA＝4:1至PE:EA＝1:1，Rf＝0.4在PE/EA 1/1时)。该产物为白色固体(50.9mg,11.7％产率)。LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.45，[M+H]+＝401.2，方法＝B。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.25(s,1H),9.37(s,1H),8.18(s,1H),7.69(s,1H),7.50(s,1H),7.28-7.26(m,3H),7.12(s,1H),6.94(s,1H),2.77-2.75(m,1H),2.38(s,6H),2.15-2.13(m,1H),1.61-1.57(m,1H),1.43-1.41(m,1H)。
实施例149：
反式-N-(8-氨基-6-((S)-4-甲基-2-氧代噁唑烷-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2- 氰基环丙烷甲酰胺(化合物186)
Figure BDA0002289356600004681
步骤1：(±)-反式-N-[8-[双[(2,4-二甲氧基苄基)甲基]氨基]-6-氯-2,7-二氮杂 萘-3-基]-2-氰基-环丙烷甲酰胺
Figure BDA0002289356600004682
在120℃、在氩气中，将(±)-反式-2-氰基-N-(6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-基)环丙烷甲酰胺(1g,3.26mmol)、双(2,4-二甲氧基苄基)胺(5g,15.75mmol)、TEA(2.5mL,18.07mmol)在1,4-二噁烷(40mL)中的混合物搅拌16小时。将该反应浓缩至干燥，并用硅胶色谱提纯(PE:EA＝4:1至PE:EA＝2:1)，得到所述标题化合物，其为黄色固体(520mg,21.8％产率。LCMS(ESI)[M+H]+＝588.2。
步骤2：反式-N-[8-[双[(2,4-二甲氧基苄基)甲基]氨基]-6-[(4S)-4-甲基-2-氧 代-噁唑烷-3-基]-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-氰基-环丙烷甲酰胺
Figure BDA0002289356600004683
在100℃、在氩气中，将(±)-反式-N-[8-[双[(2,4-二甲氧基苄基)甲基]氨基]-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-氰基-环丙烷甲酰胺(470mg,0.8mmol)、(4S)-4-甲基噁唑烷-2-酮(300mg,2.97mmol)、Xantphos(200mg,0.35mmol)、Pd2(dba)3(300mg,0.33mmol)和K2CO3(330mg,2.39mmol)在1,4-二噁烷(40mL)中的混合物搅拌3小时。浓缩该反应，并先后用硅胶色谱(PE:EA＝4:1)和制备型HPLC(洗脱液：5％-95％甲醇和0.1mL/L％TFA/水)提纯，得到所述标题化合物，其为黄色固体(190mg,24.3％产率)。LCMS(ESI)[M+H]+＝653.3。
步骤3：反式-N-(8-氨基-6-((S)-4-甲基-2-氧代噁唑烷-3-基)-2,7-二氮杂萘-3- 基)-2-氰基环丙烷甲酰胺
在氩气中，将反式-N-[8-[双[(2,4-二甲氧基苄基)]氨基]-6-[(4S)-4-甲基-2-氧代-噁唑烷-3-基]-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-氰基-环丙烷甲酰胺(180mg,0.28mmol)在TFA(4mL,0.28mmol)中的混合物在70℃加热4小时。浓缩该反应，并经制备型HPLC提纯(洗脱液：5％-95％甲醇和0.8g/L NH4HCO3/水)，得到所述标题化合物，其为白色固体(43.3mg,42.6％产率)。LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.60，[M+H]+＝353.2，方法＝B。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.17(s,1H),9.26(s,1H),8.01(s,1H),7.38(s,2H),7.30(s,1H),4.85-4.81(m,1H),4.50(t,J＝8.4Hz,1H),4.06-4.03(m,1H),2.76-2.71(m,1H),2.17-2.13(m,1H),1.61-1.57(m,1H),1.45-1.40(m,1H),1.38(d,J＝6.4Hz,3H)。
实施例150：
(±)-反式-N-(8-氨基-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(三 氟甲基)环丙烷甲酰胺(化合物187)
步骤1：(±)-反式-N-(6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(三氟甲基)环丙烷甲酰 胺
Figure BDA0002289356600004693
在室温，将(±)-反式-2-(三氟甲基)环丙烷甲酸(734mg,4.76mmol)、6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-胺(850mg,3.97mmol)在吡啶(1mL)和二氯甲烷(20mL)的混合物搅拌0.5小时。在室温分批添加POCl3(0.4mL,4.29mmol)。搅拌该混合物1小时。用饱和NaHCO3中和该反应。然后，分离该有机物并干燥(NaSO4)，然后浓缩，并用硅胶色谱提纯(PE:EA＝10:1至PE:EA＝4:1)，得到所述标题化合物，其为白色固体(1.1g,76.7％产率)。LCMS(ESI)[M+H]+＝350.0。
步骤2：(±)-反式-N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(三氟甲基)环丙烷 甲酰胺
在90℃、在氩气中，将(±)-反式-N-(6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(三氟甲基)环丙烷甲酰胺(1.1g,3.14mmol)、NH4OH(10mL,3.14mmol)在1,4-二噁烷(10mL)中的混合物搅拌3小时。浓缩该反应，并用硅胶色谱提纯(PE:EA＝4:1)，得到所述标题化合物，其为白色固体(0.9g,85.3％产率)。LCMS(ESI)[M+H]+＝331.1。
步骤3：(±)-反式-N-(8-氨基-6-(5-甲基-1H-吡唑-4-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)- 2-(三氟甲基)环丙烷甲酰胺
Figure BDA0002289356600004702
在120℃、在氩气中，将(±)-反式-N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(三氟甲基)环丙烷甲酰胺(150mg,0.45mmol)、5-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑(113mg,0.54mmol)、Xphos(22mg,0.05mmol)、Xphos Pd G2(36mg,0.05mmol)和K2CO3(187mg,1.36mmol)在1,4-二噁烷(8mL)和水(2mL)中的混合物搅拌3小时。浓缩该反应，并用硅胶色谱提纯(PE:EA＝1:1)，得到所述标题化合物，其为白色固体(58.1mg,33.8％产率)。LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.56，[M+H]+＝377.2，方法＝B.1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.64(s,1H),11.09(s,1H),9.26(s,1H),8.12(s,1H),7.96(d,J＝8.4Hz,1H),7.12(s,2H),6.98(s,1H),2.62-2.56(m,4H),2.33-2.27(m,1H),1.32-1.30(m,2H)。
实施例151：
(±)-反式-N-(8-氨基-6-(1,3,5-三甲基-1H-吡唑-4-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)- 2-(三氟甲基)环丙烷甲酰胺(化合物188)
Figure BDA0002289356600004711
在100℃、在氩气中，将1,3,5-三甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1h-吡唑(161mg,0.68mmol)、(±)-反式-N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(三氟甲基)环丙烷甲酰胺(150mg,0.45mmol)、Pd(PPh3)4(104mg,0.09mmol)和K2CO3(186mg,1.35mmol)在1,4-二噁烷(8mL)和水(2mL)中的混合物搅拌3小时。浓缩该反应，并用硅胶色谱提纯(PE:EA＝1:1至EA:DCM＝4:1)，得到所述标题化合物，其为白色固体(72.3mg,39.1％产率)。LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.57，[M+H]+＝405.2，方法＝B。1HNMR(400MHz,CD3OD)δ9.21(s,1H),8.23(s,1H),6.81(s,1H),3.77(s,3H),2.46--2.43(m,1H),2.41(s,3H),2.33(s,3H),2.30-2.26(m,1H),1.45-1.41(m,1H),1.37-1.32(m,1H)。
实施例152：
(±)-反式-N-(8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(嘧啶-2- 基)环丙烷甲酰胺(化合物189)
Figure BDA0002289356600004712
步骤1：(E)-3-(嘧啶-2-基)丙烯酸叔丁基酯
Figure BDA0002289356600004713
在0℃，将二乙基膦酰基乙酸叔丁基酯(4.5g,17.84mmol)、NaH(0.84g,35mmol)在四氢呋喃(50mL)中的混合物搅拌0.5小时。在室温添加2-嘧啶甲醛(1.9g,17.58mmol)。搅拌该混合物2小时。该反应经EtOAc(50mL)稀释，并用饱和NH4Cl将pH调节至7-8。然后，分离该有机物，干燥(NaSO4)并浓缩至干燥。该残余物经硅胶色谱提纯(PE:EA＝2:1)，得到所述标题化合物，其为无色油状物(2.5g,67.9％产率)。LCMS(ESI)[M+H]+＝207.1。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.88(s,1H),8.87(s,1H),7.48(t,J＝4.8Hz,1H),7.41(d,J＝15.6Hz,1H),6.94(d,J＝15.6Hz,1H),1.48(s,9H)。
步骤2：(±)-反式-2-(嘧啶-2-基)环丙烷甲酸叔丁基酯
Figure BDA0002289356600004721
在室温，将三甲基氧化锍碘化物(2.7g,11.64mmol)和tBuOK(1.3g,11.61mmol)在二甲基亚砜(50mL)中的混合物搅拌0.5小时。然后添加(E)-3-嘧啶-2-基丙-2-烯酸叔丁基酯(2.4g,11.64mmol)。搅拌该混合物2小时。该反应经EtOAc稀释(50mL)，并用饱和NH4Cl调节pH至7-8。然后，分离该有机物，干燥(NaSO4)并浓缩至干燥。该残余物经硅胶色谱提纯(PE:EA＝10:1至PE:EA＝4:1)，得到所述标题化合物，其为无色油状物(370mg,14.4％产率)。LCMS(ESI)[M+H]+＝165.2。
步骤3：(±)-反式-2-(嘧啶-2-基)环丙烷甲酸
Figure BDA0002289356600004722
在室温搅拌(±)-反式-2-嘧啶-2-基环丙烷甲酸叔丁基酯(370mg,1.68mmol)在HCl/二噁烷溶液(4mL,1.68mmol)和一滴水中的混合物1小时。浓缩该反应，得到所述标题化合物，其为白色固体(380mg,粗品)。LCMS(ESI)[M+H]+＝165.1。
步骤4：(±)-反式-N-(6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(嘧啶-2-基)环丙烷甲 酰胺
Figure BDA0002289356600004731
在室温，将(±)-反式-2-嘧啶-2-基环丙烷甲酸(370mg,2.25mmol)、6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-胺(200mg,0.93mmol)在吡啶(1.5mL)/二氯甲烷(20mL)中的混合物搅拌0.5小时。在室温分批添加POCl3(0.3mL,2.25mmol)至该反应中。在室温搅拌该混合物1小时。该反应经EtOAc稀释(50mL)并用饱和NaHCO3将pH调节至7-8。然后，分离该有机物，干燥(Na2SO4)并浓缩至干燥。该残余物经硅胶色谱提纯(PE:EA＝2:1至PE:EA＝1:1)，得到为白色固体的所述标题化合物(330mg,39.8％产率)。LCMS(ESI)[M+H]+＝360.0。
步骤5：(±)-反式-N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(嘧啶-2-基)环丙烷 甲酰胺
Figure BDA0002289356600004732
在90℃、在氩气中，将(±)-反式-N-(6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-嘧啶-2-基-环丙烷甲酰胺(330mg,0.92mmol)和NH4OH(5mL,0.92mmol)在1,4-二噁烷(5mL)中的混合物加热3小时。将该反应浓缩至干燥，得到所述标题化合物，其为黄色固体(380mg,粗品)。LCMS(ESI)[M+H]+＝341.1。
步骤6：(±)-反式-N-(8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2- (嘧啶-2-基)环丙烷甲酰胺
在100℃、在氩气中，将(±)-反式-N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-嘧啶-2-基-环丙烷甲酰胺(187mg,0.55mmol)、4-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡啶(144mg,0.66mmol)、Xphos Pd G2(45mg,0.06mmol)、Xphos(27mg,0.06mmol)和K2CO3(228mg,1.65mmol)在1,4-二噁烷(8mL)和水(2mL)的混合物搅拌3小时。浓缩该反应，并用硅胶色谱提纯(PE:EA＝2:1至PE:EA＝1:2)，得到所述标题化合物，其为白色固体(92.1mg,42.2％产率)。LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.38，[M+H]+＝398.2，方法＝B。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.09(s,1H),9.36(s,1H),8.72(s,1H),8.71(s,1H),8.57(s,1H),8.44(d,J＝4.8Hz,1H),8.27(s,1H),7.37-7.31(m,4H),6.99(s,1H),2.76-2.71(m,1H),2.65-2.61(m,1H),2.41(s,3H),1.59-1.57(m,2H)。
实施例153：
(±)-反式-N-(8-氨基-6-(5-氨基-4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2- (三氟甲基)环丙烷甲酰胺(化合物190)
Figure BDA0002289356600004741
步骤1：4-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡啶-3-基 氨基甲酸叔丁基酯
Figure BDA0002289356600004742
在85℃、在氩气中，将双(频哪醇合)二硼(2.2g,8.66mmol)、N-(5-溴-4-甲基-3-吡啶基)氨基甲酸叔丁基酯(500mg,1.74mmol)、PdCl2dppf(254mg,0.35mmol)和KOAc(340mg,3.47mmol)在1,4-二噁烷(15mL)中的混合物加热16小时。过滤并浓缩该反应，得到所述标题化合物，其为黑色固体(3.2g,粗品)。LCMS(ESI)[M+H]+＝335.2。
步骤2：(±)-反式-5-(1-氨基-6-((反式)-2-(三氟甲基)环丙烷甲酰氨基)-2,7- 二氮杂萘-3-基)-4-甲基吡啶-3-基氨基甲酸叔丁基酯
Figure BDA0002289356600004743
在100℃、在氩气中，将(±)-反式-N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(三氟甲基)环丙烷甲酰胺(200mg,0.6mmol)、N-[4-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁基酯(1.5g,4.49mmol)、Pd(PPh3)4(140mg,0.12mmol)和K2CO3(250mg,1.81mmol)在1,4-二噁烷(16mL)和水(4mL)中的混合物加热3小时。浓缩该反应，并用硅胶色谱提纯(PE:EA＝1:1至EA:MeOH＝20:1)，得到所述标题化合物，其为白色固体(190mg,40.8％产率)。LCMS(ESI)[M+H]+＝503.2。
步骤3：(±)-反式-N-(8-氨基-6-(5-氨基-4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3- 基)-2-(三氟甲基)环丙烷甲酰胺
Figure BDA0002289356600004751
在室温，将(±)-反式-N-[5-[1-氨基-6-[[(反式)-2-(三氟甲基)环丙烷羰基]氨基]-2,7-二氮杂萘-3-基]-4-甲基-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁基酯(190mg,0.38mmol)、TFA(1mL,0.38mmol)在二氯甲烷(4mL)中的混合物搅拌2小时。将该反应浓缩至干燥。将该残余物溶于MeOH(2mL)中并用饱和NaHCO3将pH调节至7-8。该混合物经制备型HPLC提纯(洗脱液：5％-95％甲醇和0.8g/LNH4HCO3/水)，得到所述标题化合物，其为白色固体(92.8mg,57.4％产率)。LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.57，[M+H]+＝403.2，方法＝G。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.19(s,1H),9.37(s,1H),8.19(s,1H),7.93(s,1H),7.77(s,1H),7.30(s,2H),6.85(s,1H),5.16(s,2H),2.60-2.58(m,1H),2.32-2.30(m,1H),2.06(s,3H),1.33-1.30(m,2H)。
实施例154：
(±)-反式-N-(8-氨基-6-(4-(2-羟基乙基)吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2- 氰基环丙烷甲酰胺(化合物191)
Figure BDA0002289356600004752
步骤1：3,4-二氢-1H-[1,2]氧杂硼杂环己烷并[3,4-c]吡啶-1-醇
Figure BDA0002289356600004761
在-78℃，向搅拌中的2-(3-溴-4-吡啶基)乙醇(1.0g,4.95mmol)和硼酸三异丙基酯(1.1g,5.85mmol)的四氢呋喃(30mL)溶液中逐滴添加n-BuLi(4mL,10mmol)。在-78℃搅拌所得混合物0.5小时。该混合物缓慢温热至室温并搅拌1小时。然后，将该反应混合物用水(10mL)稀释，并用EA(10mLx2)洗涤。通过添加6N HCl将该水性层酸化至pH 4-5并浓缩至干燥。将该残余物悬浮于乙酸乙酯和EtOH(10mL)的1:1溶液中并过滤。浓缩该滤液，得到1-羟基-3,4-二氢氧杂硼杂环己烷并[3,4-c]吡啶(700mg,95％产率)，其为黄色油状物。LCMS(ESI)[M+H]+＝150.1。
步骤2：(±)-反式-N-(8-氨基-6-(4-(2-羟基乙基)吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3- 基)-2-氰基环丙烷甲酰胺
Figure BDA0002289356600004762
在氩气中，将1-羟基-3,4-二氢氧杂硼杂环己烷并[3,4-c]吡啶(700mg,4.7mmol)、(±)-反式-N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氰基-环丙烷甲酰胺(140mg,0.49mmol)、Xphos Pd G2(56mg,0.07mmol)、Xphos(65mg,0.14mmol)和K2CO3(140mg,1.01mmol)在1,4-二噁烷(10mL)和水(2mL)的混合物加热至100℃3小时。该混合物直接经反相HPLC提纯(乙腈0-40/0.1％NH4HCO3/水)，得到(±)-反式-N-[8-氨基-6-[4-(2-羟基乙基)-3-吡啶基]-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-氰基-环丙烷甲酰胺(72mg,39.5％产率)，其为白色固体。LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.169，[M+H]+＝375.1，方法＝A。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.29(s,1H),9.41(s,1H),8.51(s,1H),8.47(d,J＝5.2Hz,1H),8.20(s,1H),7.36(d,J＝5.2Hz,1H),7.34(s,2H),6.98(s,1H),4.77(t,J＝4.8Hz,1H),3.57-3.55(m,2H),2.93(t,J＝6.8Hz,2H),2.78-2.74(m,1H),2.18-2.14(m,1H),1.64-1.59(m,1H),1.46-1.41(m,1H)。
实施例155：
(±)-反式-N-(8-氨基-6-(4-(2-羟基乙基)吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2- (氰基甲基)环丙烷甲酰胺(化合物192)
Figure BDA0002289356600004771
在100℃、在氩气中，将(±)-反式-N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(氰基甲基)环丙烷甲酰胺(140mg,0.46mmol)、1-羟基-3,4-二氢-2H-硼烷并[2,3-c]吡啶(800mg,5.44mmol)、Xphos(56mg,0.12mmol)、Xphos PdG2(56mg,0.07mmol)和K2CO3(140mg,1.01mmol)在水(2mL)和1,4-二噁烷(10mL)中的溶液加热3小时。该混合物直接经硅胶柱色谱(DCM:MeOH＝10:1)和反相HPLC提纯(乙腈17-47％/0.05％氨/水)，得到所述标题化合物(36mg,20％产率)，其为白色固体。LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.404，[M+H]+＝389.0，方法＝C。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.08(s,1H),9.39(s,1H),8.52(s,1H),8.47(d,J＝5.2Hz,1H),8.23(s,1H),7.36(d,J＝5.2Hz,1H),7.34(s,2H),6.97(s,1H),4.80(t,J＝4.8Hz,1H),3.60-3.56(m,2H),2.93(t,J＝6.8Hz,2H),2.76-2.73(m,2H),2.12-2.09(m,1H),1.59-1.58(m,1H),1.16-1.13(m,1H),0.99-0.96(m,1H)。
实施例156：
(1S,2R)-N-(8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(氰基甲基) 环丙烷-1-甲酰胺(化合物193)和(1R,2S)-N-(8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂 萘-3-基)-2-(氰基甲基)环丙烷-1-甲酰胺(化合物194)
Figure BDA0002289356600004772
根据为(±)-反式-N-[8-氨基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-(氰基甲基)环丙烷甲酰胺(化合物157)所描述的操作制备所述标题化合物。通过手性SFC分离单一立体异构体。(化合物193)：1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.04(s,1H),9.37(s,1H),8.56(s,1H),8.43(d,J＝5.0Hz,1H),8.22(s,1H),7.30-7.31(m,3H),6.97(s,1H),3.74(m,2H),2.41(s,3H),2.11(m,1H),1.58(m,1H),1.13(m,1H),0.96(m,1H)。(化合物194)：1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.04(s,1H),9.37(s,1H),8.56(s,1H),8.43(d,J＝5.0Hz,1H),8.22(s,1H),7.30-7.31(m,3H),6.97(s,1H),3.74(m,2H),2.41(s,3H),2.11(m,1H),1.58(m,1H),1.13(m,1H),0.96(m,1H)。
实施例157：
(1S,2S)-N-(8-氨基-5-氟-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(1H- 吡唑-4-基)环丙烷-1-甲酰胺(化合物195)和(1R,2R)-N-(8-氨基-5-氟-6-(4-甲基吡啶-3- 基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(1H-吡唑-4-基)环丙烷-1-甲酰胺(化合物196)
根据为(±)-反式-N-(8-氨基-5-氟-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(1H-吡唑-4-基)环丙烷甲酰胺(化合物172)所描述的操作制备所述标题化合物。通过手性SFC分离单一立体异构体。(化合物195)：1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.63(br s,1H),11.19(s,1H),9.42(s,1H),8.51(s,1H),8.48(d,J＝5.1Hz,1H),8.40(s,1H),7.61(br s,1H),7.38(d,J＝5.1Hz,2H),7.32(br s,2H),2.27(s,3H),2.19-2.26(m,2H),1.41(m,1H),1.26(m,1H)。(化合物196)：1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.63(br s,1H),11.19(s,1H),9.42(s,1H),8.51(s,1H),8.48(d,J＝5.1Hz,1H),8.40(s,1H),7.61(br s,1H),7.38(d,J＝5.1Hz,2H),7.32(br s,2H),2.27(s,3H),2.19-2.26(m,2H),1.41(m,1H),1.26(m,1H)。
实施例158：
(1S,2S)-N-(8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(1-甲基- 1H-吡唑-4-基)环丙烷-1-甲酰胺(化合物197)和(1R,2R)-N-(8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3- 基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)环丙烷-1-甲酰胺(化合物198)
Figure BDA0002289356600004791
根据为(±)-反式-N-[8-氨基-6-(4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-(1-甲基吡唑-4-基)环丙烷甲酰胺(化合物159)所描述的操作制备所述标题化合物。通过手性SFC分离单一立体异构体。(化合物197)：1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.93(s,1H),9.36(s,1H),8.57(br s,1H),8.43(br s,1H),8.25(s,1H),7.56(s,1H),7.29-7.32(m,4H),6.97(s,1H),3.77(s,3H),2.41(s,3H),2.19-2.22(m,2H),1.39(m,1H),1.19(m,1H)。(化合物198)：1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.93(s,1H),9.36(s,1H),8.57(br s,1H),8.43(br s,1H),8.25(s,1H),7.56(s,1H),7.29-7.32(m,4H),6.97(s,1H),3.77(s,3H),2.41(s,3H),2.19-2.22(m,2H),1.39(m,1H),1.19(m,1H)。
实施例159：
(1R,2R)-N-(8-氨基-6-(5-氨基-4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氰 基环丙烷-1-甲酰胺(化合物199)和(1S,2S)-N-(8-氨基-6-(5-氨基-4-甲基吡啶-3-基)-2, 7-二氮杂萘-3-基)-2-氰基环丙烷-1-甲酰胺(化合物200)
Figure BDA0002289356600004792
根据为(±)-(反式)-N-(8-氨基-6-(5-氨基-4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氰基环丙烷甲酰胺(化合物165)所描述的操作制备所述标题化合物。通过手性SFC分离单一立体异构体。(化合物199)：1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.24(s,1H),9.38(s,1H),8.17(s,1H),7.93(s,1H),7.76(s,1H),7.29(s,2H),6.84(s,1H),5.13(br s,2H),2.76(m,1H),2.15(m,1H),2.06(s,3H),1.61(m,1H),1.43(m,1H)。(化合物200)：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.24(s,1H),9.38(s,1H),8.17(s,1H),7.93(s,1H),7.76(s,1H),7.29(s,2H),6.84(s,1H),5.13(br s,2H),2.76(m,1H),2.15(m,1H),2.06(s,3H),1.61(m,1H),1.43(m,1H)。
实施例160：
(±)-反式-N-(8-氨基-6-(4-(三氟甲基)吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氰 基环丙烷-1-甲酰胺(化合物201)
所述标题化合物是以类似(±)-反式-N-[8-氨基-6-(4-乙氧基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-氰基-环丙烷甲酰胺(化合物129)的方式制备的。LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.55，[M+H]+＝399.1，方法＝B。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.3(s,1H),9.43(s,1H),8.89(d,1H),8.83(s,1H),8.20(s,1H),7.85(d,1H),7.42(s,2H),6.97(s,1H),2.74-2.79(m,1H),2.13-2.18(m,1H),1.59-1.64(m,1H),1.41-1.46(m,1H)。
实施例161：
(1S,2S)-N-(8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氰基环丙 烷-1-甲酰胺(化合物202)和(1R,2R)-N-(8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3- 基)-2-氰基环丙烷-1-甲酰胺(化合物203)
Figure BDA0002289356600004802
根据为(±)-反式-N-(8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氰基环丙烷-1-甲酰胺(化合物43)所描述的操作制备所述标题化合物。通过手性SFC分离单一立体异构体。(化合物202)：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.26(s,1H),9.39(s,1H),8.56(s,1H),8.43(d,J＝5.0Hz,1H),8.20(s,1H),7.34(br s,2H),7.30(d,J＝5.0Hz,1H),6.98(s,1H),2.76(m,1H),2.40(s,3H),2.15(m,1H),1.61(m,1H),1.44(m,1H)。(化合物203)：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.26(s,1H),9.39(s,1H),8.56(s,1H),8.43(d,J＝5.0Hz,1H),8.20(s,1H),7.34(br s,2H),7.30(d,J＝5.0Hz,1H),6.98(s,1H),2.76(m,1H),2.40(s,3H),2.15(m,1H),1.61(m,1H),1.44(m,1H)。
实施例162：
N-(8-氨基-5-(3-羟基环戊-1-烯基)-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3- 基)环丙烷甲酰胺(化合物204)
Figure BDA0002289356600004811
步骤1：三氟甲磺酸3-氧代环戊-1-烯基酯
Figure BDA0002289356600004812
在0℃搅拌环戊烷-1,3-二酮(3g,30.58mmol)、Tf2O(8.6g,30.48mmol)和TEA(9.3g,91.90mmol)的二氯甲烷(30mL)溶液1小时。该反应经水稀释并用DCM萃取。所收集的有机物经Na2SO4干燥，过滤，并在真空下浓缩。该残余物经硅胶色谱提纯，用PE/EA(10:1)洗脱，得到三氟甲磺酸3-氧代环戊-1-烯-1-基酯(2.8g,40％)，其为黄色油状物。LCMS(ESI):[M+H]+＝231.1。
步骤2：3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)环戊-2-烯酮
Figure BDA0002289356600004813
向三氟甲磺酸3-氧代环戊-1-烯-1-基酯(2.5g,10.86mmol)的二噁烷(50mL)溶液中添加4,4,5,5-四甲基-2-(四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷(5.5g,21.65mmol)、Pd(dppf)Cl2(720mg,0.98mmol)、KOAc(2.1g,21.39mmol)。在100℃、在氮气中搅拌所得溶液1小时。该溶液冷却至室温，用水稀释，并经二氯甲烷萃取。所收集的有机物经Na2SO4干燥，过滤，并在真空下浓缩。该残余物经硅胶柱提纯，用PE/EA(10/1)洗脱，得到3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)环戊-2-烯酮(2g,粗产物)，其为黄色油状物。LCMS(ESI):[M+H]+＝127.1。
步骤3：N-(8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-5-(3-氧代环戊-1-烯基)-2,7-二氮杂 萘-3-基)环丙烷甲酰胺
Figure BDA0002289356600004821
将N-[8-氨基-5-溴-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基]环丙烷甲酰胺(500mg,1.25mmol)在二噁烷中(10mL)/水(2mL)中的溶液添加3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)环戊-2-烯酮(320mg,2.54mmol)、Pd(dppf)Cl2(280mg,0.38mmol)和碳酸氢钠(220mg,2.61mmol)的混合物中。在100℃、在氮气中搅拌该混合物。6小时后，将该反应混合物浓缩。该残余物经硅胶色谱提纯，用DCM/MeOH(10:1)洗脱。得到N-[8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-5-(3-氧代环戊-1-烯-1-基)-2,7-二氮杂萘-3-基]环丙烷甲酰胺(200mg,40％)，其为黄色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝400.1。
步骤4：N-(8-氨基-5-(3-羟基环戊-1-烯基)-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂 萘-3-基)环丙烷甲酰胺
Figure BDA0002289356600004822
在室温，将NaBH4(50mg,1.32mmol)添加至N-[8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-5-(3-氧代环戊-1-烯-1-基)-2,7-二氮杂萘-3-基]环丙烷甲酰胺(50mg,0.12mmol)的甲醇(10mL)溶液中。1小时后，将该反应混合物浓缩。该残余物经硅胶色谱提纯，用DCM/MeOH(10:1)洗脱，得到N-[8-氨基-5-(3-羟基环戊-1-烯-1-基)-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基]环丙烷甲酰胺(2.8mg,6％)，其为黄色固体。LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.52，[M+H]+＝402.1，方法＝M；1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ10.96(s,1H),9.38(s,1H),8.37(d,J＝4.8Hz,1H),8.31(s,1H),8.24(s,1H),7.30(s,2H),7.25(d,J＝4.8Hz,1H),5.49(s,1H),4.71(d,J＝4.5Hz,1H),4.65(s,1H),2.30(s,1H),2.14(s,3H),2.07-2.03(m,3H),1.48-1.45(m,1H),0.85-0.80(m,4H)。
实施例163：
(+/-)-反式-N-(8-氨基-5-甲基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2- (氰基甲基)环丙烷甲酰胺(化合物205)
Figure BDA0002289356600004831
步骤1：反式-N-(8-氨基-5-甲基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2- (氰基甲基)环丙烷甲酰胺
Figure BDA0002289356600004832
在100℃、在氮气中，将反式-N-[8-氨基-5-溴-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-(氰基甲基)环丙烷-1-甲酰胺(120mg,0.27mmol)、三甲基-1,3,5,2,4,6-三氧杂三硼杂环己烷(52mg,0.41mmol)、Pd(PPh3)4(32mg,0.03mmol)和K3PO4(175mg,0.82mmol)在二噁烷中(5mL)/水(1mL)的混合物搅拌15小时。将该反应混合物浓缩，且该残余物经制备型HPLC提纯，得到反式-N-(8-氨基-5-甲基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(氰基甲基)环丙烷甲酰胺(3.0mg,3％)，其为白色固体。LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.69，[M+H]+＝373.3，方法＝K-1-1；1H NMR(400MHz,CD3OD)δ9.32(s,1H),8.48(s,1H),8.46(d,J＝5.2Hz,1H),8.37(s,1H),7.45(d,J＝5.2Hz,1H),2.78-2.65(m,2H),2.23(s,3H),2.14(s,3H),2.06-2.00(m,1H),1.81-1.70(m,1H),1.41-1.30(m,1H),1.12-1.02(m,1H)。
实施例164：
(+/-)-N-(8-氨基-6-(4-甲基-2-苯基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(氰基 甲基)环丙烷甲酰胺(化合物206)
Figure BDA0002289356600004833
在100℃、在氮气中，将反式-N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(氰基甲基)环丙烷-1-甲酰胺(10mg,0.03mmol)、4-甲基-2-苯基-3-(四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡啶(20mg,0.07mmol)、Pd(amphos)Cl2(3mg,0.01mmol)、K3PO4(21mg,0.10mmol)在二噁烷中(0.9mL)/水(0.3mL)中的混合物搅拌20分钟。过滤该固体，且浓缩该滤液。该残余物经硅胶色谱提纯，用二氯甲烷/甲醇(15:1)洗脱。合并且浓缩所收集的部分。该产物进一步经制备型HPLC提纯，得到反式-N-[8-氨基-6-(4-甲基-2-苯基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-(氰基甲基)环丙烷-1-甲酰胺(3mg,21％)，其为绿色固体。LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.14，[M+H]+＝435.3，方法＝K-1-1；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.01(s,1H),9.33(s,1H),8.54(d,J＝4.7Hz,1H),7.96(s,1H),7.48-7.28(m,5H),7.23-7.10(m,3H),6.48(s,1H),2.81-2.71(m,2H),2.17(s,3H),2.11-2.03(m,1H),1.61-1.51(m,1H),1.10-1.06(m,1H),1.03-0.93(m,1H)。
实施例165：
乙酸((1S,2S)-2-(8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基氨基甲酰 基)-1-甲基环丙基)甲基酯(化合物207)
乙酸((1R,2S)-2-(8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基氨基甲酰 基)-1-甲基环丙基)甲基酯(化合物208)
N-(8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(羟基甲基)-2-甲基 环丙烷甲酰胺(化合物209)
Figure BDA0002289356600004841
步骤1：2-[(乙酰氧基)甲基]-2-甲基环丙烷-1-甲酸叔丁基酯
Figure BDA0002289356600004842
在95℃，将乙酸2-甲基丙-2-烯-1-基酯(10g,87.61mmol)、Cu(OAc)2(950mg,5.23mmol)和2-重氮基乙酸叔丁基酯(20g,140.69mmol)在甲苯(300mL)中的混合物搅拌3小时。过滤该固体，且浓缩该滤液，得到2-[(乙酰氧基)甲基]-2-甲基环丙烷-1-甲酸叔丁基酯(18g,粗品)，其为棕色油状物。
步骤2：2-[(乙酰氧基)甲基]-2-甲基环丙烷-1-甲酸
Figure BDA0002289356600004843
将2-[(乙酰氧基)甲基]-2-甲基环丙烷-1-甲酸叔丁基酯(18g,78.85mmol)的二氯甲烷(80mL)/三氟乙酸(150mL)溶液搅拌16小时。浓缩所得混合物。将该残余物溶于水，并用20％氢氧化钠水溶液将该溶液的pH调节至11。所得混合物经乙酸乙酯萃取。用盐酸(2M)将该水性层的pH调节至3。所得溶液用乙酸乙酯萃取，且该有机层经Na2SO4干燥，并在真空下浓缩，得到2-[(乙酰氧基)甲基]-2-甲基环丙烷-1-甲酸(10g,74％)，其为红色油状物。LCMS(ESI):[M-H]+＝171.1。
步骤3：乙酸(2-(6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-基氨基甲酰基)-1-甲基环丙基)甲基 酯
Figure BDA0002289356600004851
在室温、在氮气中，将POCl3(4g,26.09mmol)逐滴添加6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-胺(2g,9.34mmol)、2-[(乙酰氧基)甲基]-2-甲基环丙烷-1-甲酸(4g,23.23mmol)的吡啶(5mL)/二氯甲烷(50mL)溶液中。30分钟后，用冰水稀释该反应，且所得溶液经二氯甲烷萃取。所收集的有机萃取物经Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩。该残余物经硅胶色谱提纯，用乙酸乙酯/石油醚(1:3)洗脱，得到乙酸[2-[(6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-基)氨基甲酰基]-1-甲基环丙基]甲基酯(2.2g,64％)，其为红色油状物。LCMS(ESI):[M+H]+＝368.1。
步骤4：乙酸(2-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基氨基甲酰基)-1-甲基环丙基) 甲基酯
Figure BDA0002289356600004852
在90℃，将乙酸[2-[(6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-基)氨基甲酰基]-1-甲基环丙基]甲基酯(2.2g,5.98mmol)的氢氧化铵(20mL)和1,4-二噁烷(27mL)溶液加热。3小时后，在真空中浓缩该反应混合物，得到乙酸(2-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基氨基甲酰基)-1-甲基环丙基)甲基酯(2.4g,粗品)，其为黄色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝349.1。
步骤5：乙酸(±)-((1S,2S)-2-(8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3- 基氨基甲酰基)-1-甲基环丙基)甲基酯(化合物207)
乙酸(±)-((1R,2S)-2-(8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基氨基 甲酰基)-1-甲基环丙基)甲基酯(化合物208)
Figure BDA0002289356600004861
在100℃、在氮气中，将乙酸[2-[(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)氨基甲酰基]-1-甲基环丙基]甲基酯(2.4g,6.88mmol)、(4-甲基吡啶-3-基)硼酸(1.8g,13.14mmol)、Pd(dppf)Cl2(600mg,0.82mmol)和碳酸钠(1.6g,15.10mmol)在1,4-二噁烷(80mL)/水(13mL)中的混合物加热。2小时后，过滤该固体并在真空中浓缩该滤液。所得残余物经制备型HPLC和手性SFC提纯，得到两种非对映异构体。(化合物207)：LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.13，[M+H]+＝406.2，方法＝K-1；1H NMR(300MHz,CD3OD)δ9.29(s,1H),8.54(s,1H),8.43(d,J＝5.1Hz,1H),8.33(s,1H),7.40(d,J＝5.1Hz,1H),6.99(s,1H),4.07-3.95(m,2H),2.46(s,3H),2.11(s,3H),2.09-2.04(m,1H),1.31(s,3H),1.27-1.24(m,1H),1.06-1.01(m,1H)。(化合物208)：LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.28，[M+H]+＝406.2，方法＝M；1H NMR(300MHz,CD3OD)δ1H NMR(300MHz,CD3OD)δ9.29(s,1H),8.54(s,1H),8.43(d,J＝5.1Hz,1H),8.29(s,1H),7.40(d,J＝5.1Hz,1H),6.99(s,1H),4.38(d,J＝11.4Hz,1H),4.19(d,J＝11.4Hz,1H),2.46(s,3H),2.03-1.99(m,1H),1.94(s,3H),1.42-1.39(m,1H),1.32(s,3H),1.06-1.01(m,1H)。
步骤6：N-(8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(羟基甲基)- 2-甲基环丙烷甲酰胺(化合物209)
在室温，将在水中(50mL)的LiOH·H2O(930mg,22.16mmol)逐滴添加至乙酸(2-[[8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基]氨基甲酰基]-1-甲基环丙基)甲基酯(3g,7.40mmol)的四氢呋喃(150mL)溶液中。4小时后，过滤该反应，并在真空下浓缩该滤液。所得残余物经制备型HPLC提纯，得到N-[8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-(羟基甲基)-2-甲基环丙烷-1-甲酰胺(282.5mg,11％)，其为白色固体。LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.13，[M+H]+＝364.2，方法＝M；1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ10.69(s,1H),9.35(s,1H),8.56(s,1H),8.43(d,J＝5.1Hz,1H),8.25(s,1H),7.31(d,J＝5.1Hz,1H),7.30(s,2H),6.97(s,1H),4.65(t,J＝9.0Hz,1H),3.31-3.29(m,2H),2.41(s,3H),2.06-1.95(m,1H),1.18(s,3H),0.99-0.91(m,2H)。
实施例166：
(+/-)-N-(8-氨基-5-溴-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(氰基甲 基)环丙烷甲酰胺(化合物210)
Figure BDA0002289356600004871
在室温、在氮气中，将反式-N-[8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-(氰基甲基)环丙烷-1-甲酰胺(160mg,0.44mmol)和NBS(210mg,1.18mmol)在二氯甲烷(10mL)中的混合物搅拌2小时。该反应溶液在真空下浓缩。所得残余物经快速制备型HPLC提纯，得到反式-N-[8-氨基-5-溴-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-(氰基甲基)环丙烷-1-甲酰胺(31mg,16％)，其为棕色固体。LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.54，[M+H]+＝437.1，方法＝K-1；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.25(s,1H),9.40(s,1H),8.58(s,1H),8.47(d,J＝6.0Hz,1H),8.36(s,1H),7.59(s,2H),7.35(d,J＝6.0Hz,1H),2.76-2.73(m,2H),2.14-2.10(m,4H),1.64-1.58(m,1H),1.19-1.14(m,1H),1.02-0.95(m,1H)。
实施例167：
(+/-)-顺式-N-(8-氨基-6-(2,3-二氢-1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-4-基)-2,7-二氮 杂萘-3-基)-2-氟环丙烷甲酰胺(化合物211)
Figure BDA0002289356600004872
步骤1：1-(叔丁基氧基羰基)-2,3-二氢-1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-4-基硼酸
Figure BDA0002289356600004873
向4-[(三氟甲烷)磺酰基氧基]-1H,2H,3H-吡咯并[2,3-c]吡啶-1-甲酸叔丁基酯(1g,2.71mmol((J.Med.Chem.2014，57，2462)的二噁烷(40mL)溶液中添加4,4,5,5-四甲基-2-(四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷(2g,7.87mmol)、Pd(dppf)Cl2(400mg,0.54mmol)和KOAc(800mg,8.15mmol)。在100℃、在氮气中，搅拌该反应3小时，然后冷却至室温。用氢氧化钠将所得混合物的pH调节至14。所得溶液用乙酸乙酯洗涤并收集该水性层。用2N HCl将该水性层的pH调节至1。所得溶液用乙酸乙酯萃取。所收集的有机物经Na2SO4干燥，过滤，并在真空下浓缩，得到[1-[(叔丁基氧基)羰基]-1H,2H,3H-吡咯并[2,3-c]吡啶-4-基]硼酸(500mg,70％)，其为黄色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝265.1。
步骤2：顺式-4-(1-氨基-6-((1S,2S)-2-氟环丙烷甲酰氨基)-2,7-二氮杂萘-3- 基)-2,3-二氢吡咯并[2,3-c]吡啶-1-甲酸叔丁基酯
Figure BDA0002289356600004881
在100℃，将顺式-N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氟环丙烷-1-甲酰胺(200mg,0.71mmol)、1-[(叔丁基氧基)羰基]-1H,2H,3H-吡咯并[2,3-c]吡啶-4-基硼酸(200mg,0.75mmol)、Pd(PPh3)4(164mg,0.14mmol)和Cs2CO3(464mg,1.42mmol)在二噁烷中(10mL)/水(1mL)中的悬浮液搅拌。3小时后，将在真空中浓缩该反应混合物，得到粗的顺式-4-(1-氨基-6-[[(1S,2S)-2-氟环丙烷]酰氨基]-2,7-二氮杂萘-3-基)-1H,2H,3H-吡咯并[2,3-c]吡啶-1-甲酸叔丁基酯(200mg)，其为白色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝253.1。
步骤3：顺式-N-(8-氨基-6-(2,3-二氢-1H-吡咯并[2,3-c]吡啶-4-基)-2,7-二氮 杂萘-3-基)-2-氟环丙烷甲酰胺
Figure BDA0002289356600004882
在室温，将顺式-4-(1-氨基-6-[[(1S,2S)-2-氟环丙烷]酰氨基]-2,7-二氮杂萘-3-基)-1H,2H,3H-吡咯并[2,3-c]吡啶-1-甲酸叔丁基酯(200mg,0.43mmol)和三氟乙酸(10mL)的二氯甲烷(50mL)溶液搅拌3小时。然后，在真空中浓缩该反应混合物，且所得残余物经制备型HPLC提纯，得到顺式-N-(8-氨基-6-[1H,2H,3H-吡咯并[2,3-c]吡啶-4-基]-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氟环丙烷-1-甲酰胺甲酸盐(9.1mg,5％)，其为黄色固体。LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.68，[M+H]+＝365.1，方法＝K-1；1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ11.07(s,1H),9.41(s,1H),8.41(s,1H),8.35(s,1H),7.83(s,1H),7.48(s,2H),7.31(s,1H),6.54(s,1H),5.08-5.11(m,1H),4.86-4.89(m,1H),3.66-3.49(m,4H),2.32(s,1H),1.76-1.62(m,1H),1.21-1.26(m,1H)。
实施例168：
(+/-)-反式-N-(8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(氰基甲 基)环丙烷甲酰胺(化合物212)
在110℃、在氮气中，将反式-N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(氰基甲基)环丙烷-1-甲酰胺(250mg,0.83mmol)、(4-甲基吡啶-3-基)硼酸(170mg,1.24mmol)、Pd(dppf)Cl2(61mg,0.08mmol)和碳酸钾(343mg,2.48mmol)在二噁烷中(8mL)/水(2mL)中的悬浮液搅拌2小时。过滤该固体，并在真空下浓缩该滤液。所得残余物经制备型HPLC提纯，得到反式-N-(8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(氰基甲基)环丙烷甲酰胺(101mg,34％)，其为白色固体。LCMS(ESI):RT(分钟)＝0.96，[M+H]+＝359.2，方法＝K-1；1H NMR(400MHz,CD3OD)δ9.30(s,1H),8.54(s,1H),8.43(d,J＝5.1Hz,1H),8.30(s,1H),7.40(d,J＝5.1Hz,1H),6.99(s,1H),2.80-2.63(m,2H),2.46(s,3H),2.02-1.98(m,1H),1.81-1.69(m,1H),1.35-1.20(m,1H),1.10-0.98(m,1H)。
实施例169：
(+/-)-2-(4-(8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基氨基)-1H-吡 唑-1-基)丙-1-醇(化合物213)
Figure BDA0002289356600004901
步骤1：2-(4-溴-1H-吡唑-1-基)丙酸甲基酯
在80℃，将4-溴-1H-吡唑(5g,34.02mmol)、2-溴丙酸甲基酯(6.82g,40.85mmol)和碳酸钾(9.43g,68.30mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(10mL)中的悬浮液搅拌5小时。该反应经水(30mL)淬灭，且所得溶液经乙酸乙酯萃取。该合并的有机萃取物经Na2SO4干燥，过滤，并在真空下浓缩，得到2-(4-溴-1H-吡唑-1-基)丙酸甲基酯(7.1g,90％)，其为无色油状物。LCMS(ESI):[M+H]+＝233.1。
步骤2：2-(4-溴-1H-吡唑-1-基)丙-1-醇
Figure BDA0002289356600004903
在25℃，将NaBH4(489mg,12.92mmol)分批添加至搅拌中的2-(4-溴-1H-吡唑-1-基)丙酸甲基酯(1g,4.29mmol)的甲醇(10mL)溶液中。3小时后，该反应经水(30mL)淬灭，且所得溶液经乙酸乙酯萃取(100mL)。所收集的有机物经Na2SO4干燥，过滤，并在真空下浓缩，得到2-(4-溴-1H-吡唑-1-基)丙-1-醇(716mg,81％)，其为无色油状物。LCMS(ESI):[M+H]+＝205.2。
步骤3：2-(4-(8-(双(2,4-二甲氧基苄基)氨基)-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮 杂萘-3-基氨基)-1H-吡唑-1-基)丙-1-醇
Figure BDA0002289356600004911
在120℃、在氮气中，将1-N,1-N-双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]-3-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-1,6-二胺(300mg,0.54mmol)、2-(4-溴-1H-吡唑-1-基)丙-1-醇(223mg,1.09mmol)、Cs2CO3(1.062g,3.26mmol)、t-BuBrettPhos(131mg,0.27mmol)和第三代t-BuBrettPhos预催化剂(232mg,0.27mmol)在二噁烷中(5mL)中的悬浮液搅拌2小时。过滤该固体，并在真空下浓缩该滤液。所得残余物经硅胶色谱提纯(20:1二氯甲烷/甲醇)，得到2-[4-[(8-[双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)氨基]-1H-吡唑-1-基]丙-1-醇(288mg,8％)，其为棕色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝676.2。
步骤4：2-(4-(8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基氨基)-1H-吡 唑-1-基)丙-1-醇
Figure BDA0002289356600004912
将2-[4-[(8-[双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)氨基]-1H-吡唑-1-基]丙-1-醇(278mg,0.41mmol)的三氟乙酸(8mL)溶液在50℃加热。2小时后在真空下浓缩该反应。该残余物经氢氧化铵稀释至pH＝13，且所得溶液经制备型HPLC提纯，得到2-(4-(8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基氨基)-1H-吡唑-1-基)丙-1-醇(3mg,2％)，其为白色固体。LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.58，[M+H]+＝376.4，方法＝N；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.22(s,1H),8.83(s,1H),8.53(s,1H),8.42(d,J＝5.0Hz,1H),7.90(s,1H),7.50(s,1H),7.29(d,J＝5.0Hz,1H),7.06(s,2H),6.75(s,1H),6.64(s,1H),4.92(t,J＝5.5Hz,1H),4.45-4.32(m,1H),3.73-3.55(m,2H),2.40(s,3H),1.40(d,J＝6.8Hz,3H)。
实施例170：
(1R,2R)-N-(8-氨基-6-(4-(2-羟基乙基)吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2- (1-甲基-1H-吡唑-4-基)环丙烷甲酰胺(化合物214)和(1S,2S)-N-(8-氨基-6-(4-(2-羟基 乙基)吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)环丙烷甲酰胺(化合物 215)
Figure BDA0002289356600004921
步骤1：反式-N-(6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)环丙 烷-1-甲酰胺
Figure BDA0002289356600004922
在0℃，将草酰氯(1.16g,9.14mmol)逐滴添加至反式-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)环丙烷-1-甲酸(1.00g,6.01mmol)和N,N-二甲基甲酰胺(3滴，催化剂)在2:1的二氯甲烷/吡啶(30mL)中的溶液。在室温搅拌该反应30分钟。然后在0℃将该反应溶液逐滴添加至搅拌中的6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-胺盐酸盐(1.25g,4.99mmol)的二氯甲烷(50mL)溶液中。在氮气中将该混合物温热至室温2小时。该反应经水稀释(30mL)，且所得溶液经二氯甲烷萃取(100mL)。该有机萃取物经Na2SO4干燥，过滤，并在真空下浓缩。经硅胶柱色谱提纯(20:1DCM/MeOH)，得到反式-N-(6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)环丙烷-1-甲酰胺(800mg,40％)，其为灰白色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝362.0。
步骤2：反式-N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基) 环丙烷-1-甲酰胺
在100℃、在氮气中，将反式-N-(6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)环丙烷-1-甲酰胺(300mg,0.83mmol)和氢氧化铵(8mL)的二噁烷(8mL)溶液加热。在16小时后，在真空中浓缩该反应混合物，且所得残余物经硅胶柱色谱提纯(10:1DCM/MeOH)，得到反式-N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)环丙烷-1-甲酰胺(250mg,88％)，其为灰白色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝343.0。
步骤3：反式-N-(8-氨基-6-(4-(2-羟基乙基)吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)- 2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)环丙烷甲酰胺(化合物214)和反式-N-(8-氨基-6-(4-(2-羟基乙 基)吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)环丙烷甲酰胺(化合物 215)
Figure BDA0002289356600004931
在100℃、在氮气中，将反式-N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)环丙烷-1-甲酰胺(300mg,0.87mmol)、1H,3H,4H-[1,2]氧杂硼杂环己烷并[3,4-c]吡啶-1-醇(390.05mg,2.61mmol)、Xphos(83.86mg,0.17mmol)、Xphos-PdCl-2nd G(71.81mg,0.09mmol)和KOAc(258.02mg,2.62mmol)在10:1的二噁烷/水(16.5mL)中的悬浮液搅拌2小时。在真空下浓缩该反应，且所得残余物经硅胶柱色谱提纯(15:1二氯甲烷/甲醇)，得到反式-N-[8-氨基-6-[4-(2-羟基乙基)吡啶-3-基]-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)环丙烷-1-甲酰胺(70mg,18％)，其为白色固体。通过手性SFC分离对映异构体。化合物214：LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.04，[M+H]+＝430.0，方法＝M；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.95(s,1H),9.38(s,1H),8.52(s,1H),8.48(d,J＝4.8Hz,1H),8.25(s,1H),7.56(s,1H),7.37(d,J＝4.8Hz,1H),7.32(s,2H),7.29(s,1H),6.97(s,1H),4.78(t,J＝5.2Hz,1H),3.77(s,3H),3.60-3.55(m,2H),2.95-2.91(m,2H),2.23-2.19(m,2H),1.41-1.37(m,1H),1.22-1.19(m,1H)。化合物215：LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.04，[M+H]+＝430.0，方法＝M；1H NMR(400MHz,CD3OD)δ10.95(s,1H),9.38(s,1H),8.52(s,1H),8.48(d,J＝4.8Hz,1H),8.25(s,1H),7.56(s,1H),7.37(d,J＝4.8Hz,1H),7.32(s,2H),7.29(s,1H),6.97(s,1H),4.78(t,J＝5.2Hz,1H),3.77(s,3H),3.60-3.55(m,2H),2.95-2.91(m,2H),2.23-2.19(m,2H),1.41-1.37(m,1H),1.22-1.19(m,1H)。
实施例171：
(+/-)-顺式-N-(8-氨基-6-(4-甲基-5-(甲基氨基)吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3- 基)-2-氟环丙烷甲酰胺(化合物216)
Figure BDA0002289356600004941
步骤1：5-溴-N,4-二甲基吡啶-3-胺
Figure BDA0002289356600004942
将3,5-二溴-4-甲基吡啶(1g,3.98mmol)、Cu(52mg,0.81mmol)和CH3NH2(8mL)在二噁烷中(5mL)的混合物在100℃加热。在5小时后，在真空下浓缩该混合物，且所得残余物经硅胶色谱提纯(10:1二氯甲烷/甲醇)，得到5-溴-N,4-二甲基吡啶-3-胺(400mg,50％)，其为淡黄色固体。LCMS(ESI):M+H+＝201.0。
步骤2：[4-甲基-5-(甲基氨基)吡啶-3-基]硼酸
Figure BDA0002289356600004943
在100℃、在氮气中，将5-溴-N,4-二甲基吡啶-3-胺(1.648g,8.19mmol)、4,4,5,5-四甲基-2-(四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷(8.3g,32.68mmol)、Pd(dppf)Cl2(599mg,0.81mmol)、KOAc(2.41g,24.55mmol)在二噁烷(80mL)中的悬浮液搅拌3小时。过滤该固体，且在真空下浓缩该滤液。所得残余物用水稀释(30mL)，且用NaOH水溶液将该溶液的pH调节至10。该碱性溶液用乙酸乙酯洗涤。收集该水性层并用HCl酸化至pH＝3。该酸性溶液经乙酸乙酯萃取，且将所收集的萃取物经Na2SO4干燥，过滤，并在真空下浓缩。所得残余物溶于1:1的乙酸乙酯/乙醇并过滤。在真空下浓缩该滤液，得到[4-甲基-5-(甲基氨基)吡啶-3-基]硼酸(595mg,44％)，其为棕色油状物。LCMS(ESI):[M+H]+＝167.1。
步骤3：顺式-N-[8-氨基-6-[4-甲基-5-(甲基氨基)吡啶-3-基]-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-氟环丙烷-1-甲酰胺
Figure BDA0002289356600004951
在100℃、在氮气中，将顺式-N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氟环丙烷-1-甲酰胺(506mg,1.80mmol)、[4-甲基-5-(甲基氨基)吡啶-3-基]硼酸(1.09g,6.56mmol)、X-phos(86mg,0.18mmol)、Xphos钯(II)联苯-2-胺氯化物(142mg,0.18mmol)和碳酸钾(745mg,5.39mmol)在4:1的二噁烷/水(25mL)中的悬浮物搅拌2小时。过滤该固体，且在真空下浓缩该滤液。该粗产物经快速-制备型HPLC提纯，得到顺式-N-[8-氨基-6-[4-甲基-5-(甲基氨基)吡啶-3-基]-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-氟环丙烷-1-甲酰胺(60mg,9％)，其为浅棕色固体。LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.46，[M+H]+＝367.2，方法＝M；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.99(s,1H),9.37(s,1H),8.21(s,1H),7.87(s,1H),7.83(s,1H),7.28(s,2H),6.85(s,1H),5.33-5.03(m,1H),5.09-4.82(m,1H),2.82(d,J＝6.0Hz,3H),2.30-2.23(m,1H),2.09(s,3H),1.76-1.61(m,1H),1.25-1.14(m,1H)。
实施例172：
(+/-)-2-(4-(8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基氨基)-1H-吡 唑-1-基)丙腈(化合物217)
Figure BDA0002289356600004952
步骤1：2-(4-溴-1H-吡唑-1-基)丙腈
Figure BDA0002289356600004953
将4-溴-1H-吡唑(1g,6.80mmol)、2-氯丙腈(612mg,6.83mmol)、Cs2CO3(2.43g,7.45mmol)在四氢呋喃(10mL)中的悬浮液在100℃加热。2小时后过滤该固体，且在真空下浓缩该滤液。经硅胶色谱提纯(10:1二氯甲烷/甲醇)，得到2-(4-溴-1H-吡唑-1-基)丙腈(952mg,70％)，其为白色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝200.0。
步骤2：2-(4-(8-(双(2,4-二甲氧基苄基)氨基)-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮 杂萘-3-基氨基)-1H-吡唑-1-基)丙腈
Figure BDA0002289356600004961
将1-N,1-N-双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]-3-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-1,6-二胺(552mg,1.00mmol)、2-(4-溴-1H-吡唑-1-基)丙腈(800mg,3.99mmol)、t-BuBrettPhos(97mg,0.20mmol)，第三代t-BuBrettPhos预催化剂(171mg,0.20mmol)和碳酸钾(828mg,5.99mmol)在二噁烷(15mL)中的悬浮液在120℃加热。5小时后，在真空下浓缩该反应，所得残余物经硅胶色谱提纯(10:1二氯甲烷/甲醇)，得到2-[4-[(8-[双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)氨基]-1H-吡唑-1-基]丙腈(302mg,45％)，其为棕色油状物。LCMS(ESI):[M+H]+＝671.3。
步骤3：2-(4-(8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基氨基)-1H-吡 唑-1-基)丙腈
Figure BDA0002289356600004962
将2-[4-[(8-[双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)氨基]-1H-吡唑-1-基]丙腈(248mg,0.37mmol)的TFA(20mL)溶液在80℃加热。在45分钟后，在真空下浓缩该反应，且该残余物用甲醇稀释。该溶液用氢氧化铵碱化至pH＝8，并经制备型HPLC提纯，得到2-(4-[[8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基]氨基]-1H-吡唑-1-基)丙腈(65.4mg,48％)，其为黄色固体。LCMS(ESI):RT(分钟)＝2.00，[M+H]+＝371.2，方法＝M；1H NMR(400MHz,CD3OD)δ9.19(s,1H),8.50(s,1H),8.42(d,J＝6.0Hz,1H),8.13(s,1H),7.70(s,1H),7.39(d,J＝6.0Hz,1H),6.78(s,1H),6.74(s,1H),5.64(q,J＝6.0Hz,1H),2.44(s,3H),1.91(d,J＝6.0Hz,3H)。
实施例173：
(+/-)-1-(3-(4-(8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基氨基)-1H- 吡唑-1-基)吡咯烷-1-基)乙酮(化合物218)
Figure BDA0002289356600004971
步骤1：3-(4-溴-1H-吡唑-1-基)吡咯烷-1-甲酸叔丁基酯
Figure BDA0002289356600004972
将4-溴-1H-吡唑(200mg,1.36mmol)、3-溴吡咯烷-1-甲酸叔丁基酯(409mg,1.64mmol)和碳酸钾(567mg,4.10mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(4mL)中的悬浮液在100℃加热。12小时后，在真空中浓缩该反应混合物，且所得残余物经硅胶色谱提纯(100:1二氯甲烷/甲醇)，得到3-(4-溴-1H-吡唑-1-基)吡咯烷-1-甲酸叔丁基酯(310mg,72％)，其为黄色油状物。LCMS(ESI):[M+H]+＝316.2。
步骤2：4-溴-1-(吡咯烷-3-基)-1H-吡唑
Figure BDA0002289356600004973
在25℃，将3-(4-溴-1H-吡唑-1-基)吡咯烷-1-甲酸叔丁基酯(3.0g,9.49mmol)的三氟乙酸(5mL)和二氯甲烷(15mL)溶液搅拌2小时。在真空下浓缩所得混合物，得到粗的4-溴-1-(吡咯烷-3-基)-1H-吡唑(2.6g)。LCMS(ESI):[M+H]+＝216.1。
步骤3：1-(3-(4-溴-1H-吡唑-1-基)吡咯烷-1-基)乙酮
Figure BDA0002289356600004981
向冰冷却的4-溴-1-(吡咯烷-3-基)-1H-吡唑(2g,9.25mmol)和三乙胺(5mL,35.97mmol)的二氯甲烷(15mL)溶液中逐滴添加乙酰氯(1.1g,14.01mmol)。将该反应温热至25℃。1小时后，该反应经水稀释(30mL)，且该溶液经乙酸乙酯萃取。该有机萃取物经Na2SO4干燥，过滤，并在真空下浓缩。经硅胶色谱提纯(98:1二氯甲烷/甲醇)，得到1-[3-(4-溴-1H-吡唑-1-基)吡咯烷-1-基]乙-1-酮(1.2g,50％)，其为黄色油状物。LCMS(ESI):[M+H]+＝258.2。
步骤4：1-(3-(4-(8-(双(2,4-二甲氧基苄基)氨基)-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 二氮杂萘-3-基氨基)-1H-吡唑-1-基)吡咯烷-1-基)乙酮
Figure BDA0002289356600004982
将1-N,1-N-双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]-3-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-1,6-二胺(350mg,0.63mmol)、1-[3-(4-溴-1H-吡唑-1-基)吡咯烷-1-基]乙-1-酮(409mg,1.58mmol)、碳酸钾(525mg,3.79mmol)、t-BuBrettPhos(154mg,0.32mmol)和第三代t-BuBrettPhos预催化剂(271mg,0.32mmol)在二噁烷(5mL)中的悬浮液在120℃加热。2小时后，将该反应冷却至室温并过滤。在真空下浓缩该滤液，且所得残余物经硅胶色谱提纯(25:1二氯甲烷/甲醇)，得到1-(3-[4-[(8-[双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)氨基]-1H-吡唑-1-基]吡咯烷-1-基)乙-1-酮(349mg,30％)，其为棕色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝729.8。
步骤5：1-(3-(4-(8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基氨基)-1H- 吡唑-1-基)吡咯烷-1-基)乙酮
Figure BDA0002289356600004991
将1-(3-[4-[(8-[双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)氨基]-1H-吡唑-1-基]吡咯烷-1-基)乙-1-酮(299mg,0.41mmol)的三氟乙酸(6mL)溶液在50℃加热。2小时后，在真空下浓缩该反应溶液。将所得残余物溶于甲醇，且该溶液用氢氧化铵水溶液碱化至pH＝9。经制备型HPLC提纯，得到-(3-(4-(8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基氨基)-1H-吡唑-1-基)吡咯烷-1-基)乙酮(40mg,23％)，其为白色固体。LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.51，[M+H]+＝429.2，方法＝K-1；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.22(s,1H),8.91(d,J＝6.6Hz,1H),8.53(s,1H),8.42(d,J＝5.0Hz,1H),8.00(d,J＝11.7Hz,1H),7.55(d,J＝5.0Hz,1H),7.29(d,J＝6.6Hz,1H),7.08(s,2H),6.76(s,1H),6.66(s,1H),5.10-4.90(m,0.5H),3.98-3.90(m,1H),3.81-3.71(m,1H),3.71-3.58(m,1.5H),3.54-3.40(m,1H),2.40(s,4H),2.34-2.26(m,1H),1.97(d,J＝5.3Hz,3H)。
实施例174：
(+/-)-反式-3-(4-(8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基氨基)- 1H-吡唑-1-基)-1-(氧杂环丁烷-3-基)哌啶-4-醇(化合物219)和(+/-)-反式-4-(4-(8-氨 基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基氨基)-1H-吡唑-1-基)-1-(氧杂环丁烷-3- 基)哌啶-3-醇(化合物220)
Figure BDA0002289356600004992
步骤1：反式-4-(4-溴-1H-吡唑-1-基)-3-羟基哌啶-1-甲酸叔丁基酯和反式-3- (4-溴-1H-吡唑-1-基)-4-羟基哌啶-1-甲酸叔丁基酯
向冰冷却的4-溴-1H-吡唑(10.0g,68.04mmol)的四氢呋喃(100mL)溶液中分批添加氢化钠(2.28g,95.01mmol)。将该反应温热至室温。1小时后，将7-氧杂-3-氮杂双环[4.1.0]庚烷-3-甲酸叔丁基酯(20.0g,100.38mmol)添加至该反应，且将所得溶液在70℃加热16小时。该反应经水稀释，且该混合物经二氯甲烷萃取。该有机萃取物经Na2SO4干燥，过滤，并在真空下浓缩。经硅胶色谱提纯(1:2乙酸乙酯/石油醚)，得到反式-4-(4-溴-1H-吡唑-1-基)-3-羟基哌啶-1-甲酸叔丁基酯和反式-3-(4-溴-1H-吡唑-1-基)-4-羟基哌啶-1-甲酸叔丁基酯(1.4g,6％)的混合物，其为白色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝346.1。
步骤2：反式-4-(4-溴-1H-吡唑-1-基)哌啶-3-醇和反式-3-(4-溴-1H-吡唑-1-基) 哌啶-4-醇
Figure BDA0002289356600005002
在室温，将4M氯化氢的1,4-二噁烷溶液(20mL)逐滴添加至4-(4-溴-1H-吡唑-1-基)-3-羟基哌啶-1-甲酸叔丁基酯和反式-3-(4-溴-1H-吡唑-1-基)-4-羟基哌啶-1-甲酸叔丁基酯(650mg,1.88mmol)的二氯甲烷(10mL)溶液中。2小时后，在真空下浓缩该反应，得到4-(4-溴-1H-吡唑-1-基)哌啶-3-醇盐酸盐和3-(4-溴-1H-吡唑-1-基)哌啶-4-醇盐酸盐(670mg)的混合物，其为白色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝248.0。
步骤3：反式-4-(4-溴-1H-吡唑-1-基)-1-(氧杂环丁烷-3-基)哌啶-3-醇和反式- 3-(4-溴-1H-吡唑-1-基)-1-(氧杂环丁烷-3-基)哌啶-4-醇
Figure BDA0002289356600005003
在室温，将NaBH3CN(250mg,3.98mmol)添加至4-(4-溴-1H-吡唑-1-基)哌啶-3-醇和3-(4-溴-1H-吡唑-1-基)哌啶-4-醇(650mg,2.64mmol)的上述混合物以及氧杂环丁烷-3-酮(250mg,3.47mmol)的甲醇(20mL)溶液中。在16小时后，该反应经水稀释并在真空下浓缩。所得残余物经硅胶色谱提纯(10:1二氯甲烷/甲醇)，得到4-(4-溴-1H-吡唑-1-基)-1-(氧杂环丁烷-3-基)哌啶-3-醇和3-(4-溴-1H-吡唑-1-基)-1-(氧杂环丁烷-3-基)哌啶-4-醇(600mg,75％)的混合物，其为淡黄色油状物。LCMS(ESI):[M+H]+＝302.2。
步骤4：4-[4-[(8-[双[(2,4-二甲氧基苄基)]氨基]-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 二氮杂萘-3-基)氨基]-1H-吡唑-1-基]-1-(氧杂环丁烷-3-基)哌啶-3-醇和3-(4-((8-(双 (3,4-二甲基苄基)氨基)-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)氨基)-1H-吡唑-1- 基)-1-(氧杂环丁烷-3-基)哌啶-4-醇
Figure BDA0002289356600005011
在135℃，将1-N,1-N-双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]-3-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-1,6-二胺(100mg,0.18mmol)、4-(4-溴-1H-吡唑-1-基)-1-(氧杂环丁烷-3-基)哌啶-3-醇/3-(4-溴-1H-吡唑-1-基)-1-(氧杂环丁烷-3-基)哌啶-4-醇(218mg,0.72mmol)、LiHMDS(226mg,1.35mmol)、第三代t-BuBrett Phos预催化剂(80mg,0.09mmol)和t-BuBrettPhos(43mg,0.09mmol)在1,4-二噁烷(3.5mL)中的混合物用微波辐射加热2小时。过滤该固体，且浓缩该滤液。所得残余物经硅胶色谱提纯(10:1二氯甲烷/甲醇)，得到4-[4-[(8-[双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)氨基]-1H-吡唑-1-基]-1-(氧杂环丁烷-3-基)哌啶-3-醇和3-(4-((8-(双(3,4-二甲基苄基)氨基)-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)氨基)-1H-吡唑-1-基)-1-(氧杂环丁烷-3-基)哌啶-4-醇(72.5mg,52％)，其为黄色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝773.0。
步骤5：(±)-反式-4-(4-(8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基氨 基)-1H-吡唑-1-基)-1-(氧杂环丁烷-3-基)哌啶-3-醇和(±)-反式-3-(4-(8-氨基-6-(4- 甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基氨基)-1H-吡唑-1-基)-1-(氧杂环丁烷-3-基)哌啶- 4-醇
将4-[4-[(8-[双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)氨基]-1H-吡唑-1-基]-1-(氧杂环丁烷-3-基)哌啶-3-醇/3-(4-(8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基氨基)-1H-吡唑-1-基)-1-(氧杂环丁烷-3-基)哌啶-4-醇(300mg,0.39mmol)的三氟乙酸(15mL)溶液在80℃加热。2小时后，将该反应溶液在真空下浓缩。将所得残余物溶于甲醇，且该溶液的pH经氢氧化铵调节至9。经制备型HPLC提纯，得到区域异构体的混合物(32mg)。该区域异构体经手性制备型HPLC分离。化合物219：LCMS(ESI):RT(分钟)＝2.12，[M+H]+＝473.2，方法＝M；1H NMR(300MHz,CD3OD)δ9.15(s,1H),8.50(s,1H),8.43(d,J＝5.1Hz,1H),8.00(s,1H),7.61(s,1H),7.40(d,J＝5.1Hz,1H),6.80(s,1H),6.70(s,1H),4.88-4.60(m,4H),4.18-4.11(m,1H),4.05-3.96(m,1H),3.66-3.55(m,1H),3.04-3.00(m,1H),2.87-2.84(m,1H),2.44-2.38(m,4H),2.14-2.07(m,2H),1.78-1.73(m,1H)。化合物220：LCMS(ESI):RT(分钟)＝0.92，[M+H]+＝473.2，方法＝K-1；1HNMR(300MHz,CD3OD)δ9.15(s,1H),8.51(s,1H),8.45(d,J＝5.1Hz,1H),7.96(s,1H),7.62(s,1H),7.41(d,J＝5.1Hz,1H),6.80(s,1H),6.70(s,1H),4.88-4.60(m,4H),4.07-4.00(m,1H),3.98-3.94(m,1H),3.65-3.55(m,1H),3.09-3.03(m,1H),2.92-2.89(m,1H),2.44(s,3H),2.23-2.20(m,1H),2.13-2.06(m,2H),1.95-1.88(m,1H)。
实施例175：
(+/-)-1-(3-(8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基氨基)-1-甲基- 1H-吡唑-5-基)乙醇(化合物221)
Figure BDA0002289356600005031
步骤1：1-(3-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)乙-1-醇
Figure BDA0002289356600005032
在-70℃、在氮气中，将n-BuLi(3.1mL,2.5M在己烷中)逐滴添加至3,5-二溴-1-甲基-1H-吡唑(1.70g,7.09mmol)的四氢呋喃(30mL)溶液中。1小时后，添加乙醛(374mg,8.49mmol)。将该反应的温度缓慢升至室温。1小时后，该反应经水稀释，且所得混合物经乙酸乙酯萃取。在真空下浓缩所收集的有机物。经硅胶色谱提纯(1:1二氯甲烷/乙酸乙酯)，得到1-(3-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)乙-1-醇(370mg,25％)，其为黄色油状物。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ6.25(s,1H),5.38(d,J＝5.7Hz,1H),4.82-4.74(m,1H),3.77(s,3H),1.38(d,J＝6.6Hz,3H)。
步骤2：1-[3-[(8-[双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-(4-甲基吡啶-3-基)- 2,7-二氮杂萘-3-基)氨基]-1-甲基-1H-吡唑-5-基]乙-1-醇
在130℃，将1-N,1-N-双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]-3-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-1,6-二胺(200mg,0.36mmol)、1-(3-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-基)乙-1-醇(185mg,0.90mmol)、LiHMDS(450mg,2.69mmol)、第三代t-BuBrettPhos预催化剂(155mg,0.18mmol)和t-BuBrettPhos(87mg,0.18mmol)在1,4-二噁烷(10mL)中的混合物用微波辐射加热2小时。过滤该固体，且在真空下浓缩该滤液。所得残余物经硅胶色谱提纯(10:1二氯甲烷/甲醇)，得到1-[3-[(8-[双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)氨基]-1-甲基-1H-吡唑-5-基]乙-1-醇(170mg,69％)，其为黄色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝676.3。
步骤3：1-(3-(8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基氨基)-1-甲基- 1H-吡唑-5-基)乙醇
Figure BDA0002289356600005041
在80℃，将1-[3-[(8-[双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)氨基]-1-甲基-1H-吡唑-5-基]乙-1-醇(250mg,0.37mmol)的三氟乙酸(12mL)溶液搅拌2小时。然后在真空下浓缩该反应溶液。将所得残余物溶于甲醇，且用氢氧化铵将该溶液的pH调节至9。经制备型HPLC提纯，得到1-(3-(8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基氨基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基)乙醇(32.5mg,23％)，其为黄色固体。LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.72，[M+H]+＝376.2，方法＝M；1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ9.34(s,1H),9.21(s,1H),8.54(s,1H),8.41(d,J＝4.8Hz,1H),7.48(s,1H),7.29(d,J＝4.8Hz,1H),7.08(s,2H),6.76(s,1H),6.06(s,1H),5.30(d,J＝6.6Hz,1H),4.82-4.74(m,1H),3.74(s,3H),2.40(s,3H),1.41(d,J＝6.6Hz,3H)。
实施例176：
(+/-)-顺式-N-(8-氨基-6-(3-氧代-3,4-二氢-2H-吡啶并[4,3-b][1,4]噁嗪-8- 基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氟环丙烷甲酰胺(化合物222)
Figure BDA0002289356600005042
步骤1：3-氧代-3,4-二氢-2H-吡啶并[4,3-b][1,4]噁嗪-8-基硼酸
Figure BDA0002289356600005051
在氮气中，将8-溴-2H,3H,4H-吡啶并[4,3-b][1,4]噁嗪-3-酮(500mg,2.18mmol)、4,4,5,5-四甲基-2-(四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷(1.7g,6.69mmol)、Pd(dppf)Cl2(320mg,0.43mmol)和KOAc(640mg,6.52mmol)在1,4-二噁烷(15mL)中的混合物在100℃加热12小时。过滤该固体，且用NaOH将该滤液的pH调节至～9。用乙酸乙酯洗涤所得溶液。该水性层用稀释的HCl水溶液酸化至pH值～3。所得溶液用乙酸乙酯萃取。所收集的有机物经Na2SO4干燥，过滤，并在真空下浓缩，得到[3-氧代-2H,3H,4H-吡啶并[4,3-b][1,4]噁嗪-8-基]硼酸(300mg,71％)，其为黄色油状物。
步骤2：顺式-N-(8-氨基-6-(3-氧代-3,4-二氢-2H-吡啶并[4,3-b][1,4]噁嗪-8- 基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氟环丙烷甲酰胺
Figure BDA0002289356600005052
在氮气中，将顺式-N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氟环丙烷-1-甲酰胺(200mg,0.71mmol)、[3-氧代-2H,3H,4H-吡啶并[4,3-b][1,4]噁嗪-8-基]硼酸(277mg,1.42mmol)、Pd(dppf)Cl2(104mg,0.14mmol)和碳酸钾(197mg,1.42mmol)在二噁烷中(10mL)和水(1mL)中的混合物在100℃加热2小时。过滤该固体，且在真空下浓缩该滤液。所得残余物依次经快速柱色谱和制备型HPLC提纯，得到顺式-N-(8-氨基-6-[3-氧代-2H,3H,4H-吡啶并[4,3-b][1,4]噁嗪-8-基]-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氟环丙烷-1-甲酰胺(4.9mg,2％)，其为黄色固体。LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.08，[M+H]+＝395.1，方法＝K-1；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.02(s,1H),10.99(s,1H),9.37(s,1H),8.72(s,1H),8.23(s,1H),8.09(s,1H),7.42(s,1H),7.33(s,2H),4.86(s,3H),2.36-2.17(m,1H),1.79-1.59(m,1H),1.32-1.11(m,1H)。
实施例177：
(+/-)-顺式-N-(8-氨基-6-(3,4-二氢-2H-吡啶并[4,3-b][1,4]噁嗪-8-基)-2,7- 二氮杂萘-3-基)-2-氟环丙烷甲酰胺(化合物223)
Figure BDA0002289356600005061
步骤1：8-溴-2H-吡啶并[4,3-b][1,4]噁嗪-3(4H)-酮
Figure BDA0002289356600005062
在室温、在氮气中，将3-氨基-5-溴吡啶-4-醇(1g,5.29mmol)、2-氯乙酰氯(658mg,5.82mmol)、碳酸钾(1.82g,13.16mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(25mL)中的混合物搅拌过夜。该反应经水稀释，且所得溶液经乙酸乙酯萃取。所收集的有机物经Na2SO4干燥，过滤，并在真空下浓缩，得到8-溴-2H-吡啶并[4,3-b][1,4]噁嗪-3(4H)-酮(500mg,39％)，其为白色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝230.0，232.0。
步骤2：8-溴-3,4-二氢-2H-吡啶并[4,3-b][1,4]噁嗪
Figure BDA0002289356600005063
将1M硼烷-四氢呋喃溶液(19.6mL,19.6mmol)逐滴添加至8-溴-2H,3H,4H-吡啶并[4,3-b][1,4]噁嗪-3-酮(1.5g,6.54mmol)的四氢呋喃(30mL)和甲醇(10mL)溶液中。在室温搅拌该反应混合物1小时，在65℃搅拌另外1小时。在真空中浓缩该反应混合物。将所得残余物溶于水中，且用NaOH水溶液(1mol/L)将该溶液的pH调节至8-9。该碱性溶液经乙酸乙酯萃取。所收集的有机物经Na2SO4干燥，过滤，并在真空下浓缩，得到8-溴-2H,3H,4H-吡啶并[4,3-b][1,4]噁嗪(900mg,64％)，其为白色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝215.0，217.0。
步骤3：3,4-二氢-2H-吡啶并[4,3-b][1,4]噁嗪-8-基硼酸
Figure BDA0002289356600005071
在100℃、在氮气中，将8-溴-2H,3H,4H-吡啶并[4,3-b][1,4]噁嗪(400mg,1.86mmol)、Pd(dppf)Cl2(272mg,0.37mmol)、KOAc(547mg,5.57mmol)和4,4,5,5-四甲基-2-(四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷(1.42g,5.59mmol)在二噁烷中(10mL)中的混合物搅拌12小时。过滤该固体，且用NaOH水溶液将该滤液的pH调节至9-10。所得溶液用乙酸乙酯洗涤。用HCl水溶液将该水性层的pH调节至3-4。然后该酸性溶液经乙酸乙酯萃取。所收集的有机物经Na2SO4干燥，过滤，并在真空下浓缩，得到3,4-二氢-2H-吡啶并[4,3-b][1,4]噁嗪-8-基硼酸(350mg)，其为棕色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝181.0，183.0。
步骤4：顺式-N-(6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氟环丙烷甲酰胺
Figure BDA0002289356600005072
在氮气中，将草酰氯(414mg,3.26mmol)逐滴添加至冰冷却的顺式-2-氟环丙烷-1-甲酸(228mg,2.19mmol)、吡啶(3mL)和N,N-二甲基甲酰胺(0.05mL)的二氯甲烷(15mL)溶液中。在30分钟后，在室温将该反应添加至6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-胺盐酸盐(500mg,2.33mmol)的二氯甲烷(20mL)溶液中。2小时后，用水稀释该反应，且所得混合物经二氯甲烷萃取。所收集的有机物经Na2SO4干燥，过滤，并在真空下浓缩。经快速柱色谱提纯(15:1二氯甲烷/甲醇)，得到顺式-N-(6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氟环丙烷-1-甲酰胺(300mg,39％)，其为淡黄色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝301.1。
步骤5：顺式-N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氟环丙烷甲酰胺
Figure BDA0002289356600005073
将顺式-N-(6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氟环丙烷-1-甲酰胺(100mg,0.33mmol)和氢氧化铵(2mL)的1,4-二噁烷(4mL)溶液在90℃加热16小时。在真空中浓缩该反应混合物。所得残余物经快速柱色谱提纯(8:1二氯甲烷/甲醇)，得到顺式-N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氟环丙烷-1-甲酰胺(60mg,58％)，其为淡黄色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝281.6。
步骤6：顺式-N-(8-氨基-6-(3,4-二氢-2H-吡啶并[4,3-b][1,4]噁嗪-8-基)-2,7- 二氮杂萘-3-基)-2-氟环丙烷甲酰胺
Figure BDA0002289356600005081
在100℃、在氮气中，将顺式-N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氟环丙烷-1-甲酰胺(200mg,0.71mmol)、[2H,3H,4H-吡啶并[4,3-b][1,4]噁嗪-8-基]硼酸(258mg,1.43mmol)、Pd(PPh3)4(165mg,0.14mmol)和Cs2CO3(466mg,1.43mmol)在10:1的1,4-二噁烷/水(11mL)中的悬浮液加热12小时。过滤该固体，且在真空下浓缩该滤液。所得残余物经快速柱色谱提纯(10:1的二氯甲烷/甲醇)，得到顺式-N-(8-氨基-6-[2H,3H,4H-吡啶并[4,3-b][1,4]噁嗪-8-基]-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氟环丙烷-1-甲酰胺(18.4mg,7％)，其为黄色固体。LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.16，[M+H]+＝381.1，方法＝M；1H NMR(300MHz,CD3OD)δ9.24(s,1H),8.32-8.22(s,1H),8.16(s,1H),7.83(s,1H),7.34(s,1H),5.02-4.97(m,1H),4.80-4.75(m,1H),4.45-4.33(m,2H),3.51-3.41(m,2H),2.21-2.11(m,1H),1.90-1.76(m,1H),1.28-1.17(m,1H)。
实施例178：
(+/-)-反式-N-(8-氨基-6-(2-氰基苯基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氰基环丙烷甲 酰胺(化合物224)
步骤1：反式-N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氰基环丙烷-1-甲酰胺
Figure BDA0002289356600005091
在氮气中，将反式-2-氰基-N-(6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-基)环丙烷-1-甲酰胺(200mg,0.65mmol)的1,4-二噁烷(8mL)和氢氧化铵(6mL)溶液在100℃加热1小时。在真空下浓缩该反应溶液，得到粗的反式-N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氰基环丙烷-1-甲酰胺(208mg)，其为黄色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝288.1。
步骤2：反式-N-(8-氨基-6-(2-氰基苯基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氰基环丙烷甲 酰胺
Figure BDA0002289356600005092
在氮气中，将反式-N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氰基环丙烷-1-甲酰胺(200mg,0.70mmol)、(2-氰基苯基)硼酸(256mg,1.74mmol)、第二代XPhos预催化剂(82mg,0.11mmol)、Xphos(66mg,0.14mmol)和KOAc(204mg,2.08mmol)在5:1的1,4-二噁烷/水(12mL)中的混合物在100℃加热6小时。过滤该固体，且在真空下浓缩该滤液。所得残余物经制备型HPLC提纯，得到反式-N-[8-氨基-6-(2-氰基苯基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-氰基环丙烷-1-甲酰胺(40.5mg,16％)，其为黄色固体。LCMS(ESI):RT(分钟)＝2.32，[M+H]+＝355.1，方法＝M；1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ11.32(s,1H),9.43(s,1H),8.24(s,1H),7.94-7.89(m,2H),7.87-7.81(m,1H),7.63-7.58(m,1H),7.43(s,2H),7.22(s,1H),2.79-2.72(m,1H),2.20-2.13(m,1H),1.65-1.61(m,1H),1.60-1.47(m,1H)。
实施例179：
(+/-)-反式-N-(8-氨基-6-(4-(2-羟基-2-甲基丙基)吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘- 3-基)-2-氰基环丙烷甲酰胺(化合物225)
Figure BDA0002289356600005101
步骤1：1-(3-溴吡啶-4-基)-2-甲基丙-2-醇
Figure BDA0002289356600005102
在-78℃，将LDA/四氢呋喃(4.3mL,31.71mmol)逐滴添加至3-溴-4-甲基吡啶(1g,5.81mmol)的四氢呋喃(30mL)溶液中。30分钟后，在-78℃添加丙酮(405mg,6.973mmol)，并在氮气中另外搅拌该反应混合物2小时。该反应经水稀释，且所得混合物经乙酸乙酯萃取。所收集的有机物经Na2SO4干燥，过滤，并在真空下浓缩。经快速柱色谱提纯(10:1乙酸乙酯/石油醚)，得到1-(3-溴吡啶-4-基)-2-甲基丙-2-醇(1.0g,74％产率)，其为黄色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝230.1。
步骤2：3,3-二甲基-3,4-二氢-[1,2]氧杂硼杂环己烷并[3,4-c]吡啶-1-醇
Figure BDA0002289356600005103
在氮气中，将1-(3-溴吡啶-4-基)-2-甲基丙-2-醇(500mg,2.17mmol)、4,4,5,5-四甲基-2-(四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷、Pd(dppf)Cl2(360mg,0.44mmol)和KOAc(660mg,6.72mmol)在二噁烷中(10mL)中的混合物在100℃加热4小时。在真空中浓缩该反应混合物，且将该残余物溶于水。用氢氧化钠水溶液(1mol/L)将该溶液的pH调节至～10。然后所得溶液用乙酸乙酯洗涤。该碱性水层用HCl水溶液(1mol/L)酸化至pH＝4。所得酸性溶液经乙酸乙酯萃取。所收集的有机物经Na2SO4干燥，过滤，并在真空下浓缩，得到3,3-二甲基-1H,3H,4H-[1,2]氧杂硼杂环己烷并[3,4-c]吡啶-1-醇(260mg,68％)，其为黄色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝178.1。
步骤3：反式-N-(8-氨基-6-(4-(2-羟基-2-甲基丙基)吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘- 3-基)-2-氰基环丙烷甲酰胺
Figure BDA0002289356600005111
在100℃、在氮气中，将反式-N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氰基环丙烷-1-甲酰胺(200mg,0.69mmol)、3,3-二甲基-1H,3H,4H-[1,2]氧杂硼杂环己烷并[3,4-c]吡啶-1-醇(600mg,3.39mmol)、Pd(PPh3)4(120mg,0.10mmol)和Cs2CO3(452mg,1.38mmol)在10:1的二噁烷/水(11mL)中的悬浮液加热4小时。在真空中浓缩该反应混合物。经硅胶色谱提纯(10:1二氯甲烷/甲醇)，得到反式-N-[8-氨基-6-[4-(2-羟基-2-甲基丙基)吡啶-3-基]-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-氰基环丙烷-1-甲酰胺(13.3mg 5％)，其为黄色固体。LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.85，[M+H]+＝403.1，方法＝K-1；1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ9.34(s,1H),8.56(s,1H),8.50(d,J＝1.8Hz,1H),8.30(s,1H),7.46(d,J＝1.8Hz,1H),7.00(s,1H),3.02(s,2H),2.70-2.59(m,1H),2.14-2.12(m,1H),1.67-1.53(m,2H),1.26(s,6H)。
实施例180：
顺式-5-(1-氨基-6-(-2-氟环丙烷甲酰氨基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-N,4-二甲基 吡啶-3-甲酰胺(化合物226)
Figure BDA0002289356600005112
步骤1：5-溴-4-甲基吡啶-3-甲酸
Figure BDA0002289356600005113
在-78℃、在氮气中，将n-BuLi(0.72mL,7.64mmol，11M在己烷中)逐滴添加至3,5-二溴-4-甲基吡啶(500mg,1.99mmol)的四氢呋喃(10mL)溶液中。1小时后，在-78℃将CO2(g)引入该溶液中，且将所得溶液温热至室温。1小时后，用1M HCl水溶液稀释该反应。所得溶液用乙酸乙酯萃取。该合并的有机萃取物经Na2SO4干燥，过滤，并在真空下浓缩，得到5-溴-4-甲基吡啶-3-甲酸(0.23g,53％)，其为白色固体。
步骤2：5-溴-N,4-二甲基吡啶-3-甲酰胺
Figure BDA0002289356600005121
将5-溴-4-甲基吡啶-3-甲酸(1g,4.62mmol)、HATU(2.64g,6.94mmol)，三乙胺(1.4g,13.83mmol)和甲胺(2.6mL,167.43mmol)的二氯甲烷(50mL)溶液在室温搅拌8小时。该反应经水稀释，且所得混合物经二氯甲烷萃取。所收集的有机物经Na2SO4干燥，过滤，并在真空下浓缩。经硅胶柱色谱提纯(10:1二氯甲烷/甲醇)，得到5-溴-N,4-二甲基吡啶-3-甲酰胺(0.6g,57％)，其为白色固体。
步骤3：4-甲基-5-(甲基氨基甲酰基)吡啶-3-基硼酸
Figure BDA0002289356600005122
在氮气中，将5-溴-N,4-二甲基吡啶-3-甲酰胺(400mg,1.74mmol)、Pd(dppf)Cl2(255mg,0.34mmol)、KOAc(513mg,5.22mmol)和4,4,5,5-四甲基-2-(四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷(2.22g,8.74mmol)在1,4-二噁烷(15mL)中的混合物在100℃加热5小时。过滤该固体，且用HCl水溶液将该滤液酸化至pH＝3-4。该酸性溶液经乙酸乙酯萃取。该有机萃取物经Na2SO4干燥，过滤，并在真空下浓缩，得到[4-甲基-5-(甲基氨基甲酰基)吡啶-3-基]硼酸(280mg,粗品)，其为白色固体。
步骤4：顺式-5-(1-氨基-6(2-氟环丙烷甲酰氨基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-N,4-二 甲基吡啶-3-甲酰胺
Figure BDA0002289356600005123
在氮气中，将顺式-N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氟环丙烷-1-甲酰胺(200mg,0.71mmol)、[4-甲基-5-(甲基氨基甲酰基)吡啶-3-基]硼酸(277mg,1.42mmol)、Pd(dppf)Cl2(104mg,0.14mmol)和碳酸钾(197mg,1.42mmol)在10:1的1,4-二噁烷/水(16.5mL)中的混合物在100℃加热2小时。过滤该固体，且在真空下浓缩该滤液。经硅胶柱色谱提纯(10:1二氯甲烷/甲醇)，得到顺式-5-(1-氨基-6-[[-2-氟环丙烷]酰氨基]-2,7-二氮杂萘-3-基)-N,4-二甲基吡啶-3-甲酰胺(35.6mg,13％)，其为白色固体。LCMS(ESI):RT(分钟)＝0.95，[M+H]+＝395.2，方法＝M；1H NMR(300MHz,CD3OD)δ9.38(s,1H),8.58(s,1H),8.50(s,1H),8.33(s,1H),6.98(s,1H),5.02-4.97(m,1H),4.80-4.75(m,1H),2.96(s,3H),2.44(s,3H),2.21-2.12(m,1H),1.89-1.76(m,1H),1.30-1.17(m,1H)。
实施例181：
(+/-)-反式-N-(8-氨基-6-(4-(氰基甲基)吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2- 氰基环丙烷甲酰胺(化合物227)
Figure BDA0002289356600005131
步骤1：3-溴-4-(氯甲基)吡啶盐酸化物
Figure BDA0002289356600005132
将(3-溴吡啶-4-基)甲醇(3.0g,15.95mmol)和亚硫酰氯(3.8g,31.94mmol)在二氯甲烷(80mL)中的混合物在室温搅拌2小时。在真空中浓缩该反应混合物，得到粗的3-溴-4-(氯甲基)吡啶盐酸化物(3.7g,95％)，其为白色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝206.0。
步骤2：2-(3-溴吡啶-4-基)乙腈
Figure BDA0002289356600005133
将3-溴-4-(氯甲基)吡啶盐酸化物(4.1g,16.88mmol)、KCN(2.2g,33.79mmol)在1:1的乙醇/水(100mL)中的混合物在100℃加热3小时。在真空下浓缩该反应，且将所得残余物溶于水(50mL)。该水溶液经乙酸乙酯萃取。该有机萃取物经Na2SO4干燥，过滤，并在真空下浓缩。经硅胶色谱提纯(1:2乙酸乙酯/石油醚)，得到2-(3-溴吡啶-4-基)乙腈(2.4g,72％)，其为淡黄色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝197.0。
步骤3：[4-(氰基甲基)吡啶-3-基]硼酸
Figure BDA0002289356600005141
在氮气中，将2-(3-溴吡啶-4-基)乙腈(1g,5.08mmol)、4,4,5,5-四甲基-2-(四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷(1.93g,7.6mmol)、Pd(dppf)Cl2(371mg,0.51mmol)和KOAc(1.49g,15.18mmol)在二噁烷(30mL)中的混合物在100℃加热3小时。过滤该固体，且在真空下浓缩该滤液。将所得残余物溶于H2O，且该溶液用NaOH水溶液碱化至pH＝10。该碱性溶液用乙酸乙酯洗涤。用HCl水溶液将该水性层酸化至pH＝5-6，并在高真空中浓缩。所得残余物被悬浮于1:1的乙酸乙酯/乙醇中并过滤。在真空下浓缩该滤液，得到[4-(氰基甲基)吡啶-3-基]硼酸(658mg,80％)，其为棕色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝163.1。
步骤4：反式-N-[8-氨基-6-[4-(氰基甲基)吡啶-3-基]-2,7-二氮杂萘-3-基]-2- 氰基环丙烷-1-甲酰胺
Figure BDA0002289356600005142
在氮气中，将反式-N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氰基环丙烷-1-甲酰胺(440mg,1.53mmol)、[4-(氰基甲基)吡啶-3-基]硼酸(495mg,3.06mmol)、Xphos(73mg,0.15)、Xphos钯(II)联苯-2-胺氯化物(121mg,0.15)、碳酸钾(633mg,4.58)和5:1的二噁烷/水(12mL)的混合物在100℃加热1小时。浓缩该反应，且该粗产物经快速-制备型HPLC提纯，得到反式-N-[8-氨基-6-[4-(氰基甲基)吡啶-3-基]-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-氰基环丙烷-1-甲酰胺(160，28％)，其为棕色固体。LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.12，[M+H]+＝370.1，方法＝M；1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ11.31(s,1H),9.41(s,1H),8.77(s,1H),8.64(d,J＝6.0Hz,1H),8.25(s,1H),7.54(d,J＝6.0Hz,1H),7.44(s,2H),7.16(s,1H),4.48(s,2H),2.80-2.74(m,1H),2.21-2.14(m,1H),1.66-1.59(m,1H),1.48-1.42(m,1H)。
实施例182：
(+/-)-反式-N-(8-氨基-6-(4-(甲氧基甲基)吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)- 2-氰基环丙烷甲酰胺(化合物228)
Figure BDA0002289356600005151
步骤1：3-溴-4-(甲氧基甲基)吡啶
Figure BDA0002289356600005152
向冰冷却的氢化钠(255mg,10.62mmol)的四氢呋喃(30mL)溶液中添加(3-溴吡啶-4-基)甲醇(1g,5.31mmol)。30分钟后，在0℃添加CH3I(0.336mL,5.39mmol)，且该反应温度继续保持在0℃30分钟，然后温热至室温。在12小时后，该反应经水稀释，且所得溶液经二氯甲烷萃取。该有机萃取物经Na2SO4干燥，过滤，并在真空下浓缩。经硅胶色谱提纯(5:1乙酸乙酯/石油醚)，得到3-溴-4-(甲氧基甲基)吡啶(500mg,47％)，其为黄色油状物。LCMS(ESI):[M+H]+＝202.1。
步骤2：4-(甲氧基甲基)吡啶-3-基硼酸
Figure BDA0002289356600005153
在氮气中，将3-溴-4-(甲氧基甲基)吡啶(500mg,2.47mmol)，4,4,5,5-四甲基-2-(四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷(1.8g,7.08mmol)、Pd(dppf)Cl2(406mg,0.49mmol)和KOAc(731mg,7.44mmol)在二噁烷中(10mL)中的混合物在100℃加热4小时。在真空下浓缩该反应，并将所得残余物溶于H2O。用NaOH水溶液将该溶液的pH调节至10，且该碱性溶液用乙酸乙酯洗涤。然后，用HCl水溶液将该水性层酸化至pH＝5-6并在真空下浓缩。将该残余物悬浮于1:1的乙酸乙酯/乙醇中并过滤。在真空下浓缩该滤液，得到粗的[4-(甲氧基甲基)吡啶-3-基]硼酸(400，mg 97％)，其为黄色固体。LCMS(ESI)：[M+H]+＝168.1。
步骤3：反式-N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氰基环丙烷甲酰胺
Figure BDA0002289356600005161
将反式-2-氰基-N-(6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-基)环丙烷-1-甲酰胺(200mg,0.65mmol)和氢氧化铵(6mL)的二噁烷(8mL)溶液在100℃加热1小时。将该反应混合物浓缩，得到粗的反式-N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氰基环丙烷-1-甲酰胺(200mg)，其为白色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝288.1。
步骤4：反式-N-(8-氨基-6-(4-(甲氧基甲基)吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)- 2-氰基环丙烷甲酰胺
Figure BDA0002289356600005162
在氮气中，将反式-N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氰基环丙烷-1-甲酰胺(200mg,0.69mmol)、[4-(甲氧基甲基)吡啶-3-基]硼酸(139mg,0.83mmol)、Xphos-PdCl-第二代(55mg,0.07mmol)、Xphos(32mg,0.06mmol)和碳酸钾(200mg,1.44mmol)在10:1的二噁烷/水(11mL)中的悬浮液在100℃加热4小时。在真空中浓缩该反应混合物，且所得残余物经快速柱色谱提纯(10:1二氯甲烷/甲醇)，得到反式-N-[8-氨基-6-[4-(甲氧基甲基)吡啶-3-基]-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-氰基环丙烷-1-甲酰胺(54.7mg,18％)，其为黄色固体。LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.02，[M+H]+＝375.1，方法＝K-1；1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ11.31(s,1H),9.41(s,1H),8.69(s,1H),8.59(d,J＝5.1Hz,1H),8.23(s,1H),7.54(d,J＝5.2Hz,1H),7.40(s,2H),7.06(d,J＝2.2Hz,1H),4.69(s,2H),3.31(s,3H),2.78-2.75(m,1H),2.22-2.13(m,1H),1.68-1.55(m,1H),1.52-1.34(m,1H)。
实施例183：
(+/-)-反式-N-(8-氨基-6-(4-(2-甲氧基乙基)吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3- 基)-2-氰基环丙烷甲酰胺(化合物229)
Figure BDA0002289356600005171
步骤1：3-溴-4-(2-甲氧基乙基)吡啶
Figure BDA0002289356600005172
向冰冷却的2-(3-溴吡啶-4-基)乙-1-醇(4.83g,23.91mmol)的四氢呋喃(100mL)溶液中添加氢化钠(1.44g,60.0mmol)。将该反应温热至室温。在4小时后，添加CH3I(5.11g,36.0)，并将该反应保持在室温12小时。过量的氢化钠经甲醇淬灭，并将该反应混合物浓缩。经快速柱色谱提纯(1:5乙酸乙酯/石油醚)，得到3-溴-4-(2-甲氧基乙基)吡啶(2.3g,45％)，其为淡黄色油状物。LCMS:(ESI)[M+H]+＝216.0。
步骤2：[4-(2-甲氧基乙基)吡啶-3-基]硼酸
Figure BDA0002289356600005173
将3-溴-4-(2-甲氧基乙基)吡啶(2.11g,9.77mmol)、4,4,5,5-四甲基-2-(四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷(7.44g,29.29)、Pd(dppf)Cl2(715mg,0.98mmol)和KOAc(2.87g,29.24mmol)在二噁烷中(50mL)的混合物在100℃加热12小时。过滤该固体，且在真空下浓缩该滤液。将所得残余物溶于H2O，并用NaOH水溶液将该溶液碱化至pH＝7-8。该碱性溶液用乙酸乙酯洗涤。水相随后被HCl酸化至pH＝3-4。在真空下浓缩该酸性溶液。所得残余物悬浮于1:1的乙酸乙酯/乙醇中，并过滤。在真空下浓缩该滤液，得到[4-(2-甲氧基乙基)吡啶-3-基]硼酸(1.6g,91％)，其为淡黄色固体。LCMS：(ESI)[M+H]+＝182.1。
步骤3：反式-N-[8-氨基-6-[4-(2-甲氧基乙基)吡啶-3-基]-2,7-二氮杂萘-3- 基]-2-氰基环丙烷-1-甲酰胺：
Figure BDA0002289356600005181
在氮气中，将反式-N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氰基环丙烷-1-甲酰胺(205mg,0.71mmol)、[4-(2-甲氧基乙基)吡啶-3-基]硼酸(155mg,0.86mmol)、Xphos(34mg,0.07mmol)、碳酸钾(209mg,1.51mmol)和XPhos钯(II)联苯-2-胺氯化物(56mg,0.07mmol)在4:1的二噁烷/水(5mL)中的混合物在100℃加热3小时。过滤该固体，且在真空下浓缩该滤液。所得残余物经快速-制备型HPLC提纯，得到反式-N-[8-氨基-6-[4-(2-甲氧基乙基)吡啶-3-基]-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-氰基环丙烷-1-甲酰胺(70.9mg,26％)，其为白色固体。LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.14，[M+H]+＝389.2，方法＝M；1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ11.29(s,1H),9.41(s,1H),8.53(s,1H),8.48(d,J＝6.0Hz,1H),8.20(s,1H),7.37-7.36(m,3H),6.98(s,1H),3.50(t,J＝6.0Hz,2H),3.15(s,3H),3.03(t,J＝6.0Hz,2H),2.80-2.74(m,1H),2.20-2.13(m,1H),1.65-1.59(m,1H),1.48-1.41(m,1H)。
实施例184：
(1R,5R,6S)-N-(8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氰基双 环[3.1.0]己烷-6-甲酰胺(化合物230)
Figure BDA0002289356600005182
步骤1：(外型)-N-(8-(双(2,4-二甲氧基苄基)氨基)-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)- 2-羟基双环[3.1.0]己烷-6-甲酰胺
Figure BDA0002289356600005183
在室温，将NaBH4(550mg,14.54mmol)分批添加至(外型)-N-(8-[双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氧代双环[3.1.0]己烷-6-甲酰胺(1.5g,2.43mmol)在甲醇(20mL)、二氯甲烷(10mL)和四氢呋喃(5mL)中的溶液中。1小时后，过量的硼氢化钠经H2O淬灭，且在真空下浓缩该悬浮液。该残余物经硅胶色谱提纯(10:1二氯甲烷/甲醇)，得到(外型)-N-(8-[双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-羟基双环[3.1.0]己烷-6-甲酰胺(1.3g,86％)，其为黄色固体。LCMS(ESI)[M+H]+＝619.3。
步骤2：(外型)-N-(8-(双(2,4-二甲氧基苄基)氨基)-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)- 2-氰基双环[3.1.0]己烷-6-甲酰胺
Figure BDA0002289356600005191
在室温，向(外型)-N-(8-[双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-羟基双环[3.1.0]己烷-6-甲酰胺(600mg,0.96mmol)、三乙胺(980mg,9.691mmol)的二氯甲烷(5mL)溶液中添加MsCl(555mg,4.84mmol)。30分钟后，该反应经水稀释，且该溶液经二氯甲烷萃取。该有机萃取物经Na2SO4干燥，过滤，并在真空下浓缩。向该粗的甲磺酸酯的四氢呋喃(5mL)溶液中添加KCN(504mg,7.75mmol)和18-冠醚-6(256mg,0.96mmol)。在60℃加热该反应16小时，然后浓缩。所得残余物经硅胶色谱提纯(1:3石油醚/乙酸乙酯)，得到(外型)-N-(8-[双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氰基双环[3.1.0]己烷-6-甲酰胺(100mg,16％)，其为棕色固体。LCMS：(ESI)[M+H]+＝628.3。
步骤3：(外型)-N-(8-(双(2,4-二甲氧基苄基)氨基)-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 二氮杂萘-3-基)-2-氰基双环[3.1.0]己烷-6-甲酰胺
Figure BDA0002289356600005192
将(外型)-N-(8-[双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氰基双环[3.1.0]己烷-6-甲酰胺(100mg,0.16mmol)、4-甲基吡啶-3-基)硼酸(65mg,0.47mmol)、X-phos G2 Pd(25mg,0.03mmol)、X-phos(22mg,0.05mmol)和KOAc(78mg,0.79mmol)在9:1的1,4-二噁烷/水(2mL)中的混合物在100℃加热。2.5小时后，在真空下浓缩该反应，且所得残余物经硅胶色谱提纯(10:1二氯甲烷/甲醇)，得到(外型)-N-(8-[双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氰基双环[3.1.0]己烷-6-甲酰胺(80mg,73％)，其为棕色固体。LCMS：(ESI)[M+H]+＝685.4。
步骤4：(外型)-N-(8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氰基 双环[3.1.0]己烷-6-甲酰胺
在室温，将(外型)-N-(8-[双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氰基双环[3.1.0]己烷-6-甲酰胺(60mg,0.08mmol)的二氯甲烷(2mL)溶液添加三氟乙酸(4mL)中。在4小时后，在真空下浓缩该反应。经快速柱色谱(10:1二氯甲烷/甲醇)随后制备型HPLC提纯，得到(外型)-N-[8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-氰基双环[3.1.0]己烷-6-甲酰胺(6mg,18％)，其为灰白色固体。LCMS(ESI):RT(分钟)＝2.34，[M+H]+＝385.2，方法＝K-1；1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ10.80(s,1H),9.35(s,1H),8.55(s,1H),8.43(d,J＝5.0Hz,1H),8.20(s,1H),7.40-7.22(m,3H),6.97(s,1H),3.36(d,J＝5.0Hz,1H),2.40(s,3H),2.14-2.02(m,2H),2.02-1.80(m,4H),1.55-1.45(m,1H)。
实施例185：
反式-N-(8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-((S)-2-氧代噁 唑烷-5-基)环丙烷甲酰胺(化合物231)
Figure BDA0002289356600005202
步骤1：5-[[(叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基]甲基]-1,3-噁唑烷-2-酮
Figure BDA0002289356600005203
在室温，将5-(羟基甲基)-1,3-噁唑烷-2-酮(3g,25.61mmol)、咪唑(3.49g,51.26mmol)和TBSCl(4.65g,30.85mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(120mL)中的混合物搅拌4小时。用水稀释该反应，且所得混合物经乙酸乙酯萃取。所收集的有机萃取物经Na2SO4干燥，过滤，并在真空下浓缩，得到5-[[(叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基]甲基]-1,3-噁唑烷-2-酮(5.03g,85％)，其为淡黄色油状物。LCMS(ESI):[M+H]+＝232.1。
步骤2：5-[[(叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基]甲基]-3-[(4-甲氧基苯基)甲基]-1, 3-噁唑烷-2-酮
Figure BDA0002289356600005211
在室温、在氮气中，经30分钟将氢化钠(2.4g,100.01mmol)添加至5-[[(叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基]甲基]-1,3-噁唑烷-2-酮(4.6g,19.88mmol)的N,N-二甲基甲酰胺(100mL)溶液中。将对甲氧基苄基氯(PMBCl)(3.1g,19.79mmol)添加至该反应中，并在室温搅拌该混合物2小时。过量的氢化钠用水淬灭，且所得溶液经乙酸乙酯萃取。所收集的有机物经Na2SO4干燥，过滤，并在真空下浓缩。经快速柱色谱提纯(10:1二氯甲烷/甲醇)，得到5-[[(叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基]甲基]-3-[(4-甲氧基苯基)甲基]-1,3-噁唑烷-2-酮(6.3g,90％)，其为淡黄色油状物。LCMS(ESI):[M+H]+＝352.2。
步骤3：5-(羟基甲基)-3-[(4-甲氧基苯基)甲基]-1,3-噁唑烷-2-酮
Figure BDA0002289356600005212
在室温，将5-[[(叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基]甲基]-3-[(4-甲氧基苯基)甲基]-1,3-噁唑烷-2-酮(6.2g,17.63mmol)和TBAF(9.12g,34.88mmol)在四氢呋喃(100mL)中的混合物搅拌3小时。用水稀释该反应，且所得混合物经二氯甲烷萃取。该有机萃取物经Na2SO4干燥，过滤，并在真空下浓缩。经快速柱色谱提纯(10:1二氯甲烷/甲醇)，得到5-(羟基甲基)-3-[(4-甲氧基苯基)甲基]-1,3-噁唑烷-2-酮(93.7g,88％)，其为淡黄色油状物。LCMS(ESI):[M+H]+＝238.1。
步骤4：3-[(4-甲氧基苯基)甲基]-2-氧代-1,3-噁唑烷-5-甲醛
在-78℃，将DMSO(1.56g,19.96mmol)的二氯甲烷(20mL)溶液逐滴添加至草酰氯(1.27g,10.00mmol)/二氯甲烷(20mL)中。30分钟后，在-78℃，将5-(羟基甲基)-3-[(4-甲氧基苯基)甲基]-1,3-噁唑烷-2-酮(1.98g,8.34mmol)添加至该反应中。1小时后添加三乙胺(1.69g,16.70mmol)，且将该反应混合物温热至室温16小时。在真空下浓缩该混合物，得到3-[(4-甲氧基苯基)甲基]-2-氧代-1,3-噁唑烷-5-甲醛(1.2g,粗品)，其为淡黄色固体。
步骤5：(2E)-3-[3-[(4-甲氧基苯基)甲基]-2-氧代-1,3-噁唑烷-5-基]丙-2-烯酸 乙基酯
Figure BDA0002289356600005221
在室温，将3-[(4-甲氧基苯基)甲基]-2-氧代-1,3-噁唑烷-5-甲醛(1.2g,5.10mmol)和2-(三苯基膦乙烯基)乙酸乙基酯(2.67g,7.66mmol)在四氢呋喃(50mL)中的混合物搅拌12小时。在真空中浓缩该反应混合物。该残余物经快速柱色谱提纯(1:1乙酸乙酯/石油醚)，得到(2E)-3-[3-[(4-甲氧基苯基)甲基]-2-氧代-1,3-噁唑烷-5-基]丙-2-烯酸乙基酯(1.14g,73％)，其为淡黄色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝306.1。
步骤6：反式-2-[3-[(4-甲氧基苯基)甲基]-2-氧代-1,3-噁唑烷-5-基]环丙烷-1- 甲酸乙基酯
Figure BDA0002289356600005222
在室温，将三甲基氧化锍碘化物(1.5g,6.81mmol)和t-BuOK(762mg,6.79mmol)在DMSO(15mL)中的混合物搅拌30分钟。添加(2E)-3-[3-[(4-甲氧基苯基)甲基]-2-氧代-1,3-噁唑烷-5-基]丙-2-烯酸乙基酯(1.04g,3.40mmol)。该混合物在室温反应12小时，然后用水稀释。该溶液经乙酸乙酯萃取，且将该萃取物合并且浓缩。经硅胶色谱提纯(1:1乙酸乙酯/石油醚)，得到反式-2-[3-[(4-甲氧基苯基)甲基]-2-氧代-1,3-噁唑烷-5-基]环丙烷-1-甲酸乙基酯(278mg,26％)，其为无色油状物。LCMS(ESI):[M+H]+＝320.1；
步骤7：反式-2-[3-[(4-甲氧基苯基)甲基]-2-氧代-1,3-噁唑烷-5-基]环丙烷-1- 甲酸
Figure BDA0002289356600005231
在室温，将反式-2-[3-[(4-甲氧基苯基)甲基]-2-氧代-1,3-噁唑烷-5-基]环丙烷-1-甲酸乙基酯(241mg,0.75mmol)和LiOH(55mg,2.29mmol)在1:1四氢呋喃/水(10mL)中的混合物搅拌1小时。该反应溶液用水稀释，并用2M氯化氢酸化至pH 5。该溶液经DCM萃取。用Na2SO4干燥该萃取物，过滤，并在真空下浓缩，得到粗的反式-2-[3-[(4-甲氧基苯基)甲基]-2-氧代-1,3-噁唑烷-5-基]环丙烷-1-甲酸(260mg)，其为淡黄色固体。
步骤8：反式-N-(8-[双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-(4-甲基吡啶-3-基)- 2,7-二氮杂萘-3-基)-2-[3-[(4-甲氧基苯基)甲基]-2-氧代-1,3-噁唑烷-5-基]环丙烷-1- 甲酰胺
Figure BDA0002289356600005232
向冰冷却的反式-2-[3-[(4-甲氧基苯基)甲基]-2-氧代-1,3-噁唑烷-5-基]环丙烷-1-甲酸(216mg,0.74mmol)、1-N,1-N-双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]-3-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-1,6-二胺(341mg,0.62mmol)和吡啶(1mL)的二氯甲烷(5mL)溶液中逐滴添加POCl3(285mg,1.85mmol)。1小时后，该反应混合物用水稀释，且该溶液经二氯甲烷萃取。所收集的有机物经Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩，得到粗的反式-N-(8-[双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-[3-[(4-甲氧基苯基)甲基]-2-氧代-1,3-噁唑烷-5-基]环丙烷-1-甲酰胺(200mg)，其为棕色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝825.4。
步骤9：反式-N-[8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-(2-氧 代-1,3-噁唑烷-5-基)环丙烷-1-甲酰胺
Figure BDA0002289356600005233
将反式-N-(8-[双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-[3-[(4-甲氧基苯基)甲基]-2-氧代-1,3-噁唑烷-5-基]环丙烷-1-甲酰胺(241mg,0.29mmol)在三氟乙酸(5mL)中的混合物在80℃加热1小时。该溶液随后冷却至室温。添加CF3SO3H(3mL)，并在室温继续搅拌该反应混合物1小时。在真空下浓缩该混合物，得到残余物并将其溶于MeOH。该溶液用氢氧化铵碱化至pH 8～9，并经制备型HPLC提纯，得到反式-N-[8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-(2-氧代-1,3-噁唑烷-5-基)环丙烷-1-甲酰胺(7.7mg,7％)，其为淡黄色固体。LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.40，[M+H]+＝405.2，方法＝M；1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ11.07-11.0(m,1H),9.38(s,1H),8.57(s,1H),8.44(d,J＝6.0Hz,1H),8.23(s,1H),7.55(s,1H),7.34(s,2H),7.30(d,J＝6.0Hz,1H),6.98(s,1H),4.42-4.18(m,1H),3.64-3.58(m,1H),3.32-3.23(m,1H),2.41(s,3H),2.25-2.12(m,1H),1.67-1.62(m,1H),1.17-0.96(m,2H)。
实施例186：
(+/-)-反式-N-(8-氨基-6-(4-(2-羟基丙基)吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)- 2-氰基环丙烷甲酰胺(化合物232)
Figure BDA0002289356600005241
步骤1：1-(3-溴吡啶-4-基)丙-2-醇
Figure BDA0002289356600005242
在-78℃，将LDA(4.4mL,32.44mmol)逐滴添加至3-溴-4-甲基吡啶(1g,5.81mmol)的四氢呋喃(30mL)溶液中。1小时后，添加乙醛(386mg,8.762mmol)并在-78℃继续搅拌该反应溶液2小时。然后，该反应用水稀释，且所得溶液经乙酸乙酯萃取。所收集的有机物经Na2SO4干燥，过滤，并在真空下浓缩。该残余物经快速柱色谱提纯(10:1二氯甲烷/甲醇)，得到1-(3-溴吡啶-4-基)丙-2-醇(100mg,8％)，其为黄色油状物。LCMS(ESI):[M+H]+＝216.1。
步骤2：3-甲基-3,4-二氢-[1,2]氧杂硼杂环己烷并[3,4-c]吡啶-1-醇
Figure BDA0002289356600005251
在氮气中，将1-(3-溴吡啶-4-基)丙-2-醇(500mg,2.31mmol)、4,4,5,5-四甲基-2-(四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷(2.9g,10.74mmol)、Pd(dppf)Cl2(380mg,0.46mmol)、KOAc(684mg,6.96mmol)在二噁烷中(10mL)中的混合物在100℃加热4小时。在真空中浓缩该反应混合物，且所得残余物溶于H2O。用NaOH水溶液将该水溶液碱化至pH～10，然后用乙酸乙酯洗涤。该水性层用HCl酸化至pH 5-6并在真空中浓缩。该残余物悬浮于1:1乙酸乙酯/乙醇中并过滤。在真空下浓缩该滤液，得到粗的3-甲基-1H,3H,4H-[1,2]氧杂硼杂环己烷并[3,4-c]吡啶-1-醇(300mg,80％)，其为黄色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝164.1。
步骤3：反式-N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氰基环丙烷甲酰胺
Figure BDA0002289356600005252
在100℃、在氮气中，将反式-2-氰基-N-(6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-基)环丙烷-1-甲酰胺(200mg,0.65mmol)和氢氧化铵(0.17mmol)在二噁烷中(8mL)中的混合物加热1小时。在真空中浓缩该反应混合物，得到粗的反式-N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氰基环丙烷-1-甲酰胺(200mg)，其为白色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝288.1。
步骤4：反式-N-(8-氨基-6-(4-(2-羟基丙基)吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)- 2-氰基环丙烷甲酰胺
Figure BDA0002289356600005253
在氮气中，将反式-N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氰基环丙烷-1-甲酰胺(200mg,0.69mmol)、3-甲基-1H,3H,4H-[1,2]氧杂硼杂环己烷并[3,4-c]吡啶-1-醇(546mg,3.35mmol)、Pd(PPh3)4(120mg,0.10mmol)和Cs2CO3(452mg,1.38mmol)在10:1的二噁烷/水(11mL)中的混合物在100℃加热4小时。在真空中浓缩该反应混合物，且所得残余物经快速柱色谱提纯(10:1二氯甲烷/甲醇)，得到反式-N-[8-氨基-6-[4-(2-羟基丙基)吡啶-3-基]-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-氰基环丙烷-1-甲酰胺(80.1mg 30％)，其为黄色固体。LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.71，[M+H]+＝389.1，方法＝K-1；1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ11.31(s,1H),9.41(s,1H),8.69(s,1H),8.59(d,J＝2.2Hz,1H),8.23(s,1H),7.54(d,J＝2.2Hz,1H),7.40(s,2H),7.06(s,1H),4.82-4.80(m,1H),3.81-3.79(m,1H),2.92-2.77(m,3H),2.22-2.13(m,1H),1.68-1.55(m,1H),1.52-1.34(m,1H),0.98(d,J＝4.8Hz,3H)。
实施例187：
(1S,2S)-N-(8-氨基-5-氯-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(1-甲 基-1H-吡唑-4-基)环丙烷甲酰胺(化合物233)和(1R,2R)-N-(8-氨基-5-氯-6-(4-甲基吡 啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)环丙烷甲酰胺(化合物234)
Figure BDA0002289356600005261
步骤1：反式-N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基) 环丙烷甲酰胺
将反式-N-(6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)环丙烷-1-甲酰胺(1.8g,4.97mmol)和氢氧化铵(36mL)在1,4-二噁烷(36mL)中的混合物在100℃加热15小时。在真空下浓缩所得混合物，得到粗的反式-N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)环丙烷甲酰胺，其为白色固体(1.7g,粗品)。LCMS(ESI)[M+H]+＝343.1。
步骤2：反式-N-(8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(1-甲 基-1H-吡唑-4-基)环丙烷甲酰胺
Figure BDA0002289356600005263
在100℃、在氮气中，将反式-N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)环丙烷-1-甲酰胺(280mg,0.82mmol)、(4-甲基吡啶-3-基)硼酸(168mg,1.23mmol)、Xphos(78mg,0.16mmol)、Xphos-PdCl-2nd G(62mg,0.08mmol)和碳酸钾(339mg,2.45mmol)在10:1的1,4-二噁烷/水(11mL)中的混合物加热1小时。过滤该固体，且浓缩该滤液。经快速柱色谱提纯(15:1二氯甲烷/甲醇)，得到反式-N-[8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)环丙烷-1-甲酰胺(122mg,37％产率)，其为黄色固体。LCMS(ESI)[M+H]+＝400.2。
步骤3：(1S,2S)-N-(8-氨基-5-氯-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)- 2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)环丙烷甲酰胺和(1R,2R)-N-(8-氨基-5-氯-6-(4-甲基吡啶-3- 基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)环丙烷甲酰胺
Figure BDA0002289356600005271
在室温，分两批向反式-N-[8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)环丙烷-1-甲酰胺(50mg,0.125mmol)的N,N-二甲基甲酰胺(10mL)溶液中添加NCS(20.06mg,0.150mmol)。在5小时后，在真空下浓缩该反应，且该残余物经快速柱色谱提纯(20:1二氯甲烷/甲醇)，得到外消旋产物(15mg,26％产率)，其为淡黄色固体。该对映异构体经手性SFC分离。化合物233：LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.15，[M+H]+＝434.1，方法＝K-1；1H NMR(300MHz,CD3OD)δ9.34(d,J＝0.9Hz,1H),8.72(d,J＝0.9Hz,1H),8.48(d,J＝5.2Hz,1H),8.41(s,1H),7.51(s,1H),7.44(d,J＝5.3Hz,1H),7.38(d,J＝0.8Hz,1H),3.86(s,3H),2.41-2.39(m,1H),2.29(s,3H),2.14-2.11(m,1H),1.60-1.58(m,1H),1.29-1.26(m,1H)。化合物234：LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.16，[M+H]+＝434.1，方法＝K-1；1H NMR(400MHz,CD3OD)δ9.34(d,J＝0.9Hz,1H),8.72(d,J＝0.9Hz,1H),8.48(d,J＝5.2Hz,1H),8.41(s,1H),7.51(s,1H),7.44(d,J＝5.3Hz,1H),7.38(d,J＝0.8Hz,1H),3.86(s,3H),2.41-2.39(m,1H),2.29(s,3H),2.14-2.11(m,1H),1.60-1.58(m,1H),1.29-1.26(m,1H)。
实施例188：
(1R,2R)-N-(6-(4-(1H-吡唑-4-基)吡啶-3-基)-8-氨基-2,7-二氮杂萘-3-基)-2- 氰基环丙烷甲酰胺(化合物235)和(1S,2S)-N-(6-(4-(1H-吡唑-4-基)吡啶-3-基)-8-氨基- 2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氰基环丙烷甲酰胺(化合物236)
Figure BDA0002289356600005281
步骤1：3-溴-4-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-4-基)吡啶
Figure BDA0002289356600005282
在氮气中，将1-(噁烷-2-基)-4-(四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑(2.94g,10.57mmol)、3-溴-4-碘吡啶(2.00g,7.05mmol)、碳酸钾(2.92g,21.12mmol)和Pd(dppf)Cl2.CH2Cl2(580mg,0.710mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(20mL)/水(4mL)中的混合物在80℃加热6小时。所得溶液用乙酸乙酯萃取，且将该合并的萃取物经Na2SO4干燥，过滤，并在真空下浓缩。经硅胶色谱提纯(7:3乙酸乙酯/石油醚)，得到3-溴-4-[1-(噁烷-2-基)-1H-吡唑-4-基]吡啶(2.75g)，其为黄色油状物。LCMS(ESI):[M+H]+＝308.2。
步骤2：4-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-4-基)吡啶-3-基硼酸
Figure BDA0002289356600005283
在氮气中，将3-溴-4-[1-(噁烷-2-基)-1H-吡唑-4-基]吡啶(2.70g,8.76mmol)、4,4,5,5-四甲基-2-(四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷(8.90g,35.04mmol)、Pd(dppf)Cl2二氯甲烷(720mg,0.88mmol)和KOAc(3.44g,35.05mmol)在1,4-二噁烷(40mL)中的混合物在100℃加热4小时。在真空下浓缩该混合物，且所得残余物经硅胶色谱提纯(9:1二氯甲烷/甲醇)，得到[4-[1-(噁烷-2-基)-1H-吡唑-4-基]-1,3-氮杂硼杂环己烷-5-基]硼酸(1.5g,63％产率)，其为黑色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝274.1.
步骤3：反式-N-(8-氨基-6-(4-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-4-基)吡啶-3- 基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氰基环丙烷甲酰胺
Figure BDA0002289356600005291
在氮气中，将反式-N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氰基环丙烷-1-甲酰胺(400mg,1.39mmol)、[4-[1-(噁烷-2-基)-1H-吡唑-4-基]吡啶-3-基]硼酸(1139.07mg,4.17mmol)、X-phos(66.28mg,0.13mmol)、Xphos-PdOMs(111.14mg,0.13mmol)和碳酸钾(576mg,4.17mmol)在5:1的二噁烷/水(36mL)中的混合物在100℃加热6小时。在真空下浓缩该反应，且所得残余物经硅胶色谱提纯(9:1二氯甲烷/甲醇)，得到反式-N-(8-氨基-6-[4-[1-(噁烷-2-基)-1H-吡唑-4-基]吡啶-3-基]-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氰基环丙烷-1-甲酰胺(510mg,76％产率)，其为棕色油状物。LCMS53(ESI)：[M+H]+＝481.1。
步骤4：(1R,2R)-N-(6-(4-(1H-吡唑-4-基)吡啶-3-基)-8-氨基-2,7-二氮杂萘-3- 基)-2-氰基环丙烷甲酰胺和(1S,2S)-N-(6-(4-(1H-吡唑-4-基)吡啶-3-基)-8-氨基-2,7- 二氮杂萘-3-基)-2-氰基环丙烷甲酰胺
Figure BDA0002289356600005292
在25℃，将(1S,2S)-N-(8-氨基-6-[4-[1-(噁烷-2-基)-1H-吡唑-4-基]吡啶-3-基]-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氰基环丙烷-1-甲酰胺(510mg,1.06mmol)和三氟乙酸(4mL)在二氯甲烷(10mL)中的混合物搅拌5小时。在真空下浓缩所得混合物。该粗产物经制备型HPLC和手性SFC提纯，得到两种对映异构体。化合物235：LCMS(ESI):[M+H]+＝397.15，RT(分钟)＝1.46，方法＝K-1；1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ12.91(s,1H),11.28(s,1H),9.41(s,1H),8.52(d,J＝5.3Hz,1H),8.46(s,1H),8.12(s,1H),7.61-7.58(m,3H),7.40(s,2H),6.83(s,1H),2.81-2.69(m,1H),2.14-2.12(m,1H),1.60-1.58(m,1H),1.42-1.40(m,1H)。化合物236：LCMS(ESI):[M+H]+＝397.15，RT(分钟)＝0.92，方法＝K-1；1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ12.91(s,1H),11.28(s,1H),9.41(s,1H),8.52(d,J＝5.3Hz,1H),8.46(s,1H),8.12(s,1H),7.61-7.58(m,3H),7.40(s,2H),6.83(s,1H),2.81-2.69(m,1H),2.14-2.12(m,1H),1.60-1.58(m,1H),1.42-1.40(m,1H)。
实施例189：
(1R,2S)-N-(8-氨基-6-(4-甲基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-3-基)-2,7-二 氮杂萘-3-基)-2-(氰基甲基)环丙烷甲酰胺(化合物237)和(1S,2R)-N-(8-氨基-6-(4-甲 基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(氰基甲基)环丙烷甲 酰胺(化合物238)
Figure BDA0002289356600005301
通过为(1R,2R)-N-(6-(4-(1H-吡唑-4-基)吡啶-3-基)-8-氨基-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氰基环丙烷甲酰胺(化合物235)描述的操作制备所述标题化合物。该对映异构体经手性SFC分离。化合物237：LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.09，[M+H]+＝439.2，方法＝M；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.05(s,1H),9.37(s,1H),8.51(s,1H),8.30(s,1H),8.23(s,1H),8.02(s,1H),7.59(s,1H),7.31(s,1H),6.98(s,2H),3.97(s,3H),2.74(d,J＝9.0Hz,2H),2.45(s,3H),2.14-2.09(m,1H),1.62-1.55(m,1H),1.17-1.11(m,1H),1.00-0.94(m,1H)。化合物238：LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.09，[M+H]+＝439.2，方法＝M；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.05(s,1H),9.37(s,1H),8.51(s,1H),8.30(s,1H),8.23(s,1H),8.02(s,1H),7.59(s,1H),7.31(s,1H),6.98(s,2H),3.97(s,3H),2.74(d,J＝9.0Hz,2H),2.45(s,3H),2.14-2.09(m,1H),1.62-1.55(m,1H),1.17-1.11(m,1H),1.00-0.94(m,1H)。
实施例190：
(1R,2R)-N-[8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-(2-甲氧基 丙-2-基)环丙烷-1-甲酰胺(化合物239)和(1S,2S)-N-[8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2, 7-二氮杂萘-3-基]-2-(2-甲氧基丙-2-基)环丙烷-1-甲酰胺(化合物240)
Figure BDA0002289356600005311
通过为(1R,2R)-N-[8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-(2-羟基丙-2-基)环丙烷-1-甲酰胺(化合物241)描述的操作制备所述标题化合物。化合物239)：LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.08，[M+H]+＝392.2，方法＝K-1；1H NMR(300MHz,CD3OD)δ9.30(s,1H),8.54(s,1H),8.43(d,J＝5.1Hz,1H),8.31(s,1H),7.40(d,J＝5.1Hz,1H),6.98(s,1H),3.28(s,3H),2.46(s,3H),2.10-2.02(m,1H),1.67-1.58(m,1H),1.24(s,3H),1.21(s,3H),1.24-1.15(m,1H),1.10-1.01(m,1H)。化合物240：LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.08，[M+H]+＝392.2，方法＝K-1；1H NMR(300MHz,CD3OD)δ9.30(s,1H),8.54(s,1H),8.43(d,J＝5.1Hz,1H),8.31(s,1H),7.40(d,J＝5.1Hz,1H),6.98(s,1H),3.28(s,3H),2.46(s,3H),2.10-2.02(m,1H),1.67-1.58(m,1H),1.24(s,3H),1.21(s,3H),1.24-1.15(m,1H),1.10-1.01(m,1H)。
实施例191：
(1R,2R)-N-[8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-(2-羟基丙- 2-基)环丙烷-1-甲酰胺(化合物241)和(1S,2S)-N-[8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二 氮杂萘-3-基]-2-(2-羟基丙-2-基)环丙烷-1-甲酰胺(化合物242)
Figure BDA0002289356600005312
步骤1：2-[(8-[双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 二氮杂萘-3-基)氨基甲酰基]环丙烷-1-甲酸甲基酯
Figure BDA0002289356600005313
向冰冷却的反式-2-(甲氧基羰基)环丙烷-1-甲酸(210mg,1.46mmol)、吡啶(3mL,37.271mmol)和N,N-二甲基甲酰胺(0.05mL)的二氯甲烷(6mL)溶液中添加草酰氯(320mg,2.521mmol)。将该反应混合物温热至室温30分钟。添加1-N,1-N-双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]-3-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-1,6-二胺(0.5g,0.906mmol)。在1.5小时后，在真空中浓缩该反应混合物，且所得残余物经硅胶色谱提纯(1:6乙酸乙酯/石油醚)，得到2-[(8-[双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)氨基甲酰基]环丙烷-1-甲酸甲基酯(0.56g,91％)，其为黄色固体。LCMS(ESI)[M+H]+ 402.1。
步骤2：N-(8-[[(2,4-二甲氧基苯基)甲基][(2-甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-(4-甲 基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(2-羟基丙-2-基)环丙烷-1-甲酰胺
Figure BDA0002289356600005321
向冰冷却的2-[(8-[双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)氨基甲酰基]环丙烷-1-甲酸甲基酯(650mg,0.959mmol)的四氢呋喃(15.00mL)溶液中添加甲基锂(1.51mL,2.405mmol)。将该反应温热至25℃3小时，然后在真空中浓缩。经硅胶色谱提纯(15:1二氯甲烷/甲醇)，得到N-(8-[[(2,4-二甲氧基苯基)甲基][(2-甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(2-羟基丙-2-基)环丙烷-1-甲酰胺(0.36g,58％)，其为黄色固体。LCMS(ESI)[M+H]+ 402.2。
步骤3：(1R,2R)-N-[8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-(2- 羟基丙-2-基)环丙烷-1-甲酰胺和(1S,2S)-N-[8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂 萘-3-基]-2-(2-羟基丙-2-基)环丙烷-1-甲酰胺
将N-(8-[双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(2-羟基丙-2-基)环丙烷-1-甲酰胺(100mg,0.148mmol)的三氟乙酸(4mL)溶液在50℃加热。1小时后，在真空下浓缩该反应，且该粗产物(70mg)经手性制备型HPLC分离，得到(1S,2S)-N-[8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-(2-羟基丙-2-基)环丙烷-1-甲酰胺(18.7mg,27％)，其为白色固体，以及(1R,2R)-N-[8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-(2-羟基丙-2-基)环丙烷-1-甲酰胺(19.6mg,28％)，其为白色固体。化合物241：LCMS(ESI):RT(分钟)＝0.98，[M+H]+＝378，方法＝K-1；1H NMR(300MHz,CD3OD)δ9.29(s,1H),8.53(s,1H),8.42(d,J＝5.1Hz,1H),8.29(s,1H),7.39(d,J＝5.1Hz,1H),6.97(s,1H),2.45(s,3H),2.04-1.95(m,1H),1.65-1.55(m,1H),1.28(d,J＝3.0Hz,6H),1.17-1.06(m,2H)。化合物242：LCMS(ESI):RT(分钟)＝0.98，[M+H]+＝378，方法＝K-1；1H NMR(300MHz,CD3OD)δ9.29(s,1H),8.53(s,1H),8.42(d,J＝5.1Hz,1H),8.29(s,1H),7.39(d,J＝5.1Hz,1H),6.97(s,1H),2.45(s,3H),2.04-1.95(m,1H),1.65-1.55(m,1H),1.28(d,J＝3.0Hz,6H),1.17-1.06(m,2H)。
实施例192：
(1R,2R)-N-(6-(4-(1H-吡唑-3-基)吡啶-3-基)-8-氨基-2,7-二氮杂萘-3-基)-2- 氰基环丙烷甲酰胺(化合物243)和(1S,2S)-N-(6-(4-(1H-吡唑-3-基)吡啶-3-基)-8-氨基- 2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氰基环丙烷甲酰胺(化合物244)
Figure BDA0002289356600005331
通过为(1R,2R)-N-(6-(4-(1H-吡唑-4-基)吡啶-3-基)-8-氨基-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-氰基环丙烷甲酰胺(化合物235)描述的操作制备所述标题化合物。通过手性SFC分离对映异构体。化合物243：LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.01，[M+H]+＝397.2，方法＝K-1；1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ13.02(s,1H),11.26(s,1H),9.39(s,1H),8.73-8.45(m,2H),8.08(s,1H),7.81(d,J＝5.2Hz,1H),7.59(s,1H),7.35(s,2H),6.77(s,1H),5.80(d,J＝2.5Hz,1H),2.75-2.73(m,1H),2.14-2.12(m,1H),1.60-1.58(m,1H),1.49-1.32(m,1H)。化合物244：LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.01，[M+H]+＝397.2，方法＝K-1；1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ13.02(s,1H),11.26(s,1H),9.39(s,1H),8.73-8.45(m,2H),8.08(s,1H),7.81(d,J＝5.2Hz,1H),7.59(s,1H),7.35(s,2H),6.77(s,1H),5.80(d,J＝2.5Hz,1H),2.75-2.73(m,1H),2.14-2.12(m,1H),1.60-1.58(m,1H),1.49-1.32(m,1H)。
实施例193：
(1S,2S)-N-(8-氨基-6-(4-(2-羟基乙基)吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2- (异噻唑-4-基)环丙烷甲酰胺(化合物245)和(1R,2R)-N-(8-氨基-6-(4-(2-羟基乙基)吡 啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(异噻唑-4-基)环丙烷甲酰胺(化合物246)
Figure BDA0002289356600005341
步骤1：(2E)-3-(1,2-噻唑-4-基)丙-2-烯酸叔丁基酯
Figure BDA0002289356600005342
向4-溴-1,2-噻唑(5.0g,30.5mmol)的二噁烷(100mL)溶液中添加丙-2-烯酸叔丁基酯(13.7g,107mmol)、Pd(OAc)2(67mg,0.298mmol)、P(o-Tol)3(2.3g,7.6mmol)和三乙胺(9.3g,91.9mmol)。在125℃加热该反应2小时，然后在真空中浓缩。经快速柱色谱提纯(10:1乙酸乙酯/石油醚)，得到(2E)-3-(1,2-噻唑-4-基)丙-2-烯酸叔丁基酯(2.7g,42％)，其为黄色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝212.1。
步骤2：反式-2-(1,2-噻唑-4-基)环丙烷-1-甲酸叔丁基酯
Figure BDA0002289356600005343
在25℃，向(2E)-3-(1,2-噻唑-4-基)丙-2-烯酸叔丁基酯(1.3g,6.2mmol)的DMSO(10mL)溶液中添加三甲基氧化锍碘化物(3g,13.6mmol)和t-BuOK(1.5g,13.368mmol)。1小时后，所得溶液经乙酸乙酯萃取，且该萃取物在真空下浓缩。经快速柱色谱提纯(10：乙酸乙酯/石油醚)，得到反式-2-(1,2-噻唑-4-基)环丙烷-1-甲酸叔丁基酯(510mg,37％)，其为黄色油状物。LCMS(ESI):[M+H]+＝226.1。
步骤3：反式-2-(1,2-噻唑-4-基)环丙烷-1-甲酸
Figure BDA0002289356600005351
在25℃，将反式-叔丁基-2-(1,2-噻唑-4-基)环丙烷-1-甲酸酯(0.50g,2.22mmol)的三氟乙酸(4mL)溶液搅拌1小时。浓缩所得混合物，且该残余物经快速柱色谱提纯(1:1乙酸乙酯/石油醚)，得到反式-2-(1,2-噻唑-4-基)环丙烷-1-甲酸(346mg,92％)，其为棕色油状物。LCMS(ESI):[M+H]+＝170.1。
步骤4：反式-N-(6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(1,2-噻唑-4-基)环丙烷-1- 甲酰胺
Figure BDA0002289356600005352
在25℃，向6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-胺(232mg,1.08mmol)的二氯甲烷(10mL)溶液中添加(1R,2R)-2-(1,2-噻唑-4-基)环丙烷-1-甲酸(290mg,1.71mmol)、POCl3(174mg,1.14mmol)和吡啶(1mL,12mmol)。1小时后，在真空下浓缩该反应。经快速柱色谱提纯(1:1乙酸乙酯/石油醚)，得到(反式)-N-(6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(1,2-噻唑-4-基)环丙烷-1-甲酰胺(330mg,83％)，其为黄色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝365.1。
步骤5：反式-N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(1,2-噻唑-4-基)环丙烷- 1-甲酰胺
Figure BDA0002289356600005353
在90℃，将反式-N-(6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(1,2-噻唑-4-基)环丙烷-1-甲酰胺(110mg,0.301mmol)和氢氧化铵(5mL)在1,4-二噁烷(5mL)中的混合物加热3小时。在真空下浓缩该混合物，得到粗的反式-N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(1,2-噻唑-4-基)环丙烷-1-甲酰胺(120mg)，其为黄色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝346.1。
步骤6：(1S,2S)-N-(8-氨基-6-(4-(2-羟基乙基)吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3- 基)-2-(异噻唑-4-基)环丙烷甲酰胺和(1R,2R)-N-(8-氨基-6-(4-(2-羟基乙基)吡啶-3- 基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(异噻唑-4-基)环丙烷甲酰胺
Figure BDA0002289356600005361
向反式-N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(1,2-噻唑-4-基)环丙烷-1-甲酰胺(350mg,1.01mmol)的10:1的二噁烷/水(11mL)溶液中添加1H,3H,4H-[1,2]氧杂硼杂环己烷并[3,4-c]吡啶-1-醇(605mg,4.06mmol)、第二代XPhos预催化剂(84mg,0.107mmol)、Xphos(50mg,0.105mmol)和碳酸钾(420mg,3.039mmol)。将所得悬浮液在100℃加热。1小时后，在真空下浓缩该反应。经快速柱色谱提纯(10:1二氯甲烷/甲醇)，得到外消旋产物。通过手性SFC分离对映异构体。化合物245：LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.17，[M+H]+＝433.1，方法＝K-1；1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ11.00(s,1H),9.37(s,1H),8.76(s,1H),8.49(d,J＝18.5Hz,3H),8.26(s,1H),7.40-7.28(m,3H),6.97(s,1H),4.77-4.66(m,1H),3.58-3.52(m,2H),2.93-2.85(m,2H),2.57-2.50(m,1H),2.48-2.35(m,1H),1.59-1.39(m,2H)。化合物246：LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.17，[M+H]+＝433.1，方法＝K-1；1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ11.00(s,1H),9.37(s,1H),8.76(s,1H),8.49(d,J＝18.5Hz,3H),8.26(s,1H),7.40-7.28(m,3H),6.97(s,1H),4.77-4.66(m,1H),3.58-3.52(m,2H),2.93-2.85(m,2H),2.57-2.50(m,1H),2.48-2.35(m,1H),1.59-1.39(m,2H)。
实施例194：
(1S,2R)-N-[8-氨基-6-(5-氨基-4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-(氰 基甲基)环丙烷-1-甲酰胺(化合物247)和(1R,2S)-N-[8-氨基-6-(5-氨基-4-甲基吡啶-3- 基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-(氰基甲基)环丙烷-1-甲酰胺(化合物248)
步骤1：N-(5-溴-4-甲基吡啶-3-基)氨基甲酸叔丁基酯
Figure BDA0002289356600005372
向冰冷却的5-溴-4-甲基吡啶-3-胺(8.10g,43.31mmol)的四氢呋喃(165mL)溶液中添加NaHMDS(94.5mL,1M在四氢呋喃中)。30分钟后添加Boc2O(12.2g,55.90mmol)，且该反应温热至室温3.5小时。然后，该反应经甲醇稀释并在真空下浓缩。经硅胶色谱提纯(3:1二氯甲烷/乙酸乙酯)，得到N-(5-溴-4-甲基吡啶-3-基)氨基甲酸叔丁基酯(8.0g,64％)，其为淡黄色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝287.0。
步骤2：(5-[[(叔丁基氧基)羰基]氨基]-4-甲基吡啶-3-基)硼酸
Figure BDA0002289356600005373
向N-(5-溴-4-甲基吡啶-3-基)氨基甲酸叔丁基酯(5g,17.41mmol)的1,4-二噁烷(200mL)溶液中添加4,4,5,5-四甲基-2-(四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷(39g,153.58mmol)、Pd(dppf)Cl2(3.77g,5.15mmol)和KOAc(5.1g,51.97mmol)。在100℃加热所得溶液。6小时后，过滤该反应，且在真空下浓缩该滤液。将该残余物溶于水，且用NaOH水溶液将该水溶液碱化至pH 10。该碱性溶液用乙酸乙酯洗涤。用1NHCl将水相酸化至pH＝4。在真空下浓缩该水溶液，且将所得残余物悬浮于1:1乙酸乙酯/乙醇。过滤该固体，且在真空下浓缩该滤液，得到(5-[[(叔丁基氧基)羰基]氨基]-4-甲基吡啶-3-基)硼酸(2.5g,57％)，其为微红色油状物。LCMS(ESI):[M+H]+＝253.2。
步骤3：(1S,2R)-N-[8-氨基-6-(5-氨基-4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3- 基]-2-(氰基甲基)环丙烷-1-甲酰胺和(1R,2S)-N-[8-氨基-6-(5-氨基-4-甲基吡啶-3- 基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-(氰基甲基)环丙烷-1-甲酰胺
Figure BDA0002289356600005381
向反式-N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(氰基甲基)环丙烷-1-甲酰胺(200mg,0.66mmol)的1,4-二噁烷(12mL)/水(2mL)溶液中添加(5-[[(叔丁基氧基)羰基]氨基]-4-甲基吡啶-3-基)硼酸(834mg,3.31mmol)、碳酸钾(320mg,2.32mmol)和Pd(dppf)Cl2(120mg,0.16mmol)。在120℃搅拌所得溶液3小时。过滤该反应，且在真空下浓缩该滤液。经制备型HPLC随后经手性SFC提纯，得到对映异构纯的产物。化合物247：LCMS(ESI):RT(分钟)＝0.99，[M+H]+＝374.1，方法＝M；1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ11.03(s,1H),9.35(s,1H),8.20(s,1H),7.93(s,1H),7.76(s,1H),7.26(s,2H),6.82(s,1H),5.14(s,2H),2.73(d,J＝6.9Hz,2H),2.13-2.06(m,4H),1.60-1.54(m,1H),1.15-1.11(m,1H),0.98-0.95(m,1H)。化合物248：LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.58，[M+H]+＝374.1，方法＝M；1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ11.03(s,1H),9.35(s,1H),8.20(s,1H),7.93(s,1H),7.76(s,1H),7.26(s,2H),6.82(s,1H),5.14(s,2H),2.73(d,J＝6.9Hz,2H),2.13-2.06(m,4H),1.60-1.54(m,1H),1.15-1.11(m,1H),0.98-0.95(m,1H)。
实施例195：
(3R)-3-(4-[[8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基]氨基]-1H-吡 唑-1-基)-1-甲基吡咯烷-2-酮(化合物249)和(3S)-3-(4-[[8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3- 基)-2,7-二氮杂萘-3-基]氨基]-1H-吡唑-1-基)-1-甲基吡咯烷-2-酮(化合物250)
Figure BDA0002289356600005382
步骤1：3-(4-溴-1H-吡唑-1-基)-1-甲基吡咯烷-2-酮
Figure BDA0002289356600005391
在60℃，将4-溴-1H-吡唑(1.00g,6.80mmol)、3-溴-1-甲基吡咯烷-2-酮(1.33g,7.47mmol)和碳酸钾(1.88g,13.60mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(12mL)中的悬浮液加热。1小时后，该反应经水稀释(35mL)，且该溶液经乙酸乙酯萃取(3×70mL)。该合并的萃取物经Na2SO4干燥，过滤，并在真空下浓缩，得到3-(4-溴-1H-吡唑-1-基)-1-甲基吡咯烷-2-酮，其为灰白色固体(930mg,56％)。LCMS(ESI)[M+H]+244,246。
步骤2：3-[4-[(8-[双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-(4-甲基吡啶-3-基)- 2,7-二氮杂萘-3-基)氨基]-1H-吡唑-1-基]-1-甲基吡咯烷-2-酮
Figure BDA0002289356600005392
将1-N,1-N-双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]-3-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-1,6-二胺(0.40g,0.725mmol)、3-(4-溴-1H-吡唑-1-基)-1-甲基吡咯烷-2-酮(360mg,1.47mmol)、Cs2CO3(1.42g,4.36mmol)、t-BuBrettPhos(179.95mg,0.37mmol)和第三代t-BuBrettPhos预催化剂(300mg,0.35mmol)在二噁烷中(16.00mL,188.86mmol)的溶液在100℃加热。2小时后，在真空下浓缩该反应，且所得残余物经硅胶色谱提纯(15:1二氯甲烷/甲醇)，得到3-[4-[(8-[双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)氨基]-1H-吡唑-1-基]-1-甲基吡咯烷-2-酮，其为黄色固体(470mg,45％)。LCMS(ESI)[M+H]+＝715。
步骤3：3-(4-[[8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基]氨基]-1H-吡 唑-1-基)-1-甲基吡咯烷-2-酮
Figure BDA0002289356600005401
将3-[4-[(8-[[(3,4-二甲氧基苯基)甲基][(3,5-二甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)氨基]-1H-吡唑-1-基]-1-甲基吡咯烷-2-酮(250mg,0.35mmol)的三氟乙酸(25mL)溶液在70℃加热2小时。浓缩该反应，且所得残余物经硅胶色谱提纯(15:1二氯甲烷/甲醇)，得到该标题化合物(110mg,74％)，其为黄色固体。LCMS(ESI)[M+H]+415.2。
步骤4：(3R)-3-(4-[[8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基]氨基]- 1H-吡唑-1-基)-1-甲基吡咯烷-2-酮和(3S)-3-(4-[[8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 二氮杂萘-3-基]氨基]-1H-吡唑-1-基)-1-甲基吡咯烷-2-酮
Figure BDA0002289356600005402
外消旋的3-(4-[[8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基]氨基]-1H-吡唑-1-基)-1-甲基吡咯烷-2-酮经手性SFC分离。化合物249：LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.01，[M+H]+＝415.2，方法＝K-1；1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ9.23(s,1H),8.94(s,1H),8.53(s,1H),8.42(d,J＝5.2Hz,1H),7.99(s,1H),7.54(s,1H),7.29(d,J＝5.2Hz,1H),6.76(s,2H),6.76(s,1H),6.66(s,1H),5.11-5.07(m,1H),3.53-3.47(m,1H),3.44-3.38(m,1H),2.82(s,3H),2.60-2.57(m,1H),2.50-2.43(m,1H),3.40(m,3H)。化合物250：LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.01，[M+H]+＝415.2，方法＝K-1；1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ9.23(s,1H),8.94(s,1H),8.53(s,1H),8.42(d,J＝5.2Hz,1H),7.99(s,1H),7.54(s,1H),7.29(d,J＝5.2Hz,1H),6.76(s,2H),6.76(s,1H),6.66(s,1H),5.11-5.07(m,1H),3.53-3.47(m,1H),3.44-3.38(m,1H),2.82(s,3H),2.60-2.57(m,1H),2.50-2.43(m,1H),3.40(m,3H)。
实施例196：
(3R)-3-(4-[[8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基]氨基]-1H-吡 唑-1-基)-1-甲基哌啶-2-酮(化合物251)和(3S)-3-(4-[[8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)- 2,7-二氮杂萘-3-基]氨基]-1H-吡唑-1-基)-1-甲基哌啶-2-酮(化合物252)
Figure BDA0002289356600005411
通过为(3R)-3-(4-[[8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基]氨基]-1H-吡唑-1-基)-1-甲基吡咯烷-2-酮(化合物249)描述的操作制备所述标题化合物。该对映异构体经手性SFC分离。化合物251：LCMS(ESI):[M+H]+＝429.3，RT(分钟)＝1.04，方法＝K-1；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.22(s,1H),8.92(s,1H),8.54(s,1H),8.42(d,J＝5.0Hz,1H),7.91(s,1H),7.49(s,1H),7.29(d,J＝5.0Hz,1H),7.10(s,2H),6.76(s,1H),6.65(s,1H),4.95-4.92(m,1H),3.44-3.42(m,1H),3.32(s,1H),2.87(s,3H),2.41(s,3H),2.37-2.27(m,1H),2.25-2.13(m,1H),2.02-2.00(m,1H),1.92-1.90(m,1H)。化合物252：LCMS(ESI):[M+H]+＝429.2，RT(分钟)＝1.05，方法＝K-1；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.22(s,1H),8.92(s,1H),8.54(s,1H),8.42(d,J＝5.0Hz,1H),7.91(s,1H),7.49(s,1H),7.29(d,J＝5.0Hz,1H),7.10(s,2H),6.76(s,1H),6.65(s,1H),4.95-4.92(m,1H),3.44-3.42(m,1H),3.32(s,1H),2.87(s,3H),2.41(s,3H),2.37-2.27(m,1H),2.25-2.13(m,1H),2.02-2.00(m,1H),1.92-1.90(m,1H)。
实施例197：
(1R,2R)-N-[8-氨基-6-[4-(2-羟基乙基)吡啶-3-基]-2,7-二氮杂萘-3-基]-2- (吡啶-3-基)环丙烷-1-甲酰胺(化合物253)和(1S,2S)-N-[8-氨基-6-[4-(2-羟基乙基)吡 啶-3-基]-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-(吡啶-3-基)环丙烷-1-甲酰胺(化合物254)
Figure BDA0002289356600005421
步骤1：1H,3H,4H-[1,2]氧杂硼杂环己烷并[3,4-c]吡啶-1-醇
Figure BDA0002289356600005422
将2-(2-溴吡啶-3-基)乙-1-醇(5.0g,24.7mmol)、4,4,5,5-四甲基-2-(四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷(25.1g,98.8mmol)、KOAc(7.28g,74.17mmol)、Pd(dppf)Cl2(1.8g,2.46mmol)在二噁烷中(120mL)中的混合物在100℃加热。1小时后过滤该反应，且在真空下浓缩该滤液。将所得残余物溶于水中，且用NaOH水溶液将该溶液的pH调节至7-8。用乙酸乙酯洗涤该碱性溶液。然后，用HCl将该水性层酸化至pH 5-6。在真空下浓缩该酸性溶液。将所得残余物悬浮于1:1的乙酸乙酯/乙醇中并过滤。在真空下浓缩该滤液，得到粗的1H,3H,4H-[1,2]氧杂硼杂环己烷并[3,4-c]吡啶-1-醇(3.34g,91％)，其为棕色油状物。LCMS(ESI):[M+H]+＝150.1。
步骤2：(1R,2R)-N-[8-氨基-6-[4-(2-羟基乙基)吡啶-3-基]-2,7-二氮杂萘-3- 基]-2-(吡啶-3-基)环丙烷-1-甲酰胺和(1S,2S)-N-[8-氨基-6-[4-(2-羟基乙基)吡啶-3- 基]-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-(吡啶-3-基)环丙烷-1-甲酰胺
Figure BDA0002289356600005423
将反式-N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(吡啶-3-基)环丙烷-1-甲酰胺(0.40g,1.17mmol)、1H,3H,4H-[1,2]氧杂硼杂环己烷并[3,4-c]吡啶-1-醇(701mg,4.70mmol)、Xphos钯(II)联苯-2-胺氯化物(93mg,0.11mmol)、X-phos(56mg,0.11mmol)和碳酸钾(489mg,3.53mmol)在5:1的二噁烷/水(12mL)中的混合物在100℃加热1小时。在真空中浓缩该反应混合物，且该粗材料经快速制备型HPLC提纯，得到外消旋产物。通过手性SFC分离对映异构体。化合物253：LCMS(ESI):[M+H]+＝427.2，RT(分钟)＝1.88，方法＝M；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.03(s,1H),9.38(s,1H),8.53(s,1H),8.52-8.51(m,1H),8.48(d,J＝6Hz,1H),8.45-8.42(m,1H),8.28(s,1H),7.59-7.55(m,1H),7.43-7.32(m,4H),6.99(s,1H),4.79(t,J＝6Hz,1H),3.62-3.55(m,2H),2.94(t,J＝6Hz,2H),2.55-2.45(m,2H),1.60-1.46(m,2H)。化合物254：LCMS(ESI):[M+H]+＝427.2，RT(分钟)＝1.24，方法＝M；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.03(s,1H),9.38(s,1H),8.53(s,1H),8.52-8.51(m,1H),8.48(d,J＝6Hz,1H),8.45-8.42(m,1H),8.28(s,1H),7.59-7.55(m,1H),7.43-7.32(m,4H),6.99(s,1H),4.79(t,J＝6Hz,1H),3.62-3.55(m,2H),2.94(t,J＝6Hz,2H),2.55-2.45(m,2H),1.60-1.46(m,2H)。
实施例198：
(外型)-N-[8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-3-(氧杂环丁 烷-3-基)-3-氮杂双环[3.1.0]己烷-6-甲酰胺(化合物255)
步骤1：(外型)-6-[(6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-基)氨基甲酰基]-3-氮杂双环 [3.1.0]己烷-3-甲酸叔丁基酯
Figure BDA0002289356600005432
在室温，将(外型)-3-[(叔丁基氧基)羰基]-3-氮杂双环[3.1.0]己烷-6-甲酸(2.0g,8.8mmol)、6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-胺盐酸盐(1.8g,7.2mmol)、吡啶(10mL)和POCl3(1.67g,10.891mmol)在二氯甲烷(100mL)中的混合物搅拌1小时。通过缓慢添加饱和碳酸氢钠水溶液将该反应淬灭。所得溶液经二氯甲烷萃取，且该合并的有机物在真空下浓缩。经快速柱色谱提纯(10:1二氯甲烷/甲醇)，得到(外型)-6-[(6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-基)氨基甲酰基]-3-氮杂双环[3.1.0]己烷-3-甲酸叔丁基酯(2g,66％)，其为黄色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝423.1。
步骤2：(1R,5S,6R)-6-[(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)氨基甲酰基]-3-氮杂双环[3.1.0]己烷-3-甲酸叔丁基酯
Figure BDA0002289356600005441
将(1R,5S,6R)-6-[(6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-基)氨基甲酰基]-3-氮杂双环[3.1.0]己烷-3-甲酸叔丁基酯(2g,4.725mmol)和氢氧化铵(20mL)在二噁烷(20mL)中的混合物在90℃加热3小时。浓缩该反应，得到粗的(外型)-6-[(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)氨基甲酰基]-3-氮杂双环[3.1.0]己烷-3-甲酸叔丁基酯(2g)，其为黄色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝404.1。
步骤3：(外型)-6-[[8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基]氨基甲 酰基]-3-氮杂双环[3.1.0]己烷-3-甲酸叔丁基酯
在氮气中，将(4-甲基吡啶-3-基)硼酸(510mg,3.72mmol)、(外型)-6-[(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)氨基甲酰基]-3-氮杂双环[3.1.0]己烷-3-甲酸叔丁基酯(0.50g,1.24mmol)、Pd(dppf)Cl2(90mg,0.12mmol)和碳酸钠(400mg,3.77mmol)在10:1二噁烷/水(16.5mL)中的混合物在100℃加热12小时。过滤该反应，且将该滤液浓缩。经快速柱色谱提纯(10:1二氯甲烷/甲醇)，得到(外型)-6-[[8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基]氨基甲酰基]-3-氮杂双环[3.1.0]己烷-3-甲酸叔丁基酯(380mg,67％)，其为黄色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝461.2。
步骤4：(外型)-N-[8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-3-氮杂 双环[3.1.0]己烷-6-甲酰胺
在室温，将(外型)-6-[[8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基]氨基甲酰基]-3-氮杂双环[3.1.0]己烷-3-甲酸叔丁基酯(380mg,0.825mmol)和CF3COOH(4mL)的二氯甲烷(20mL)溶液搅拌1小时。浓缩该反应，得到粗的(外型)-N-[8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-3-氮杂双环[3.1.0]己烷-6-甲酰胺(0.3g)，其为黄色油状物。LCMS(ESI):[M+H]+＝361.2。
步骤5：(外型)-N-[8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-3-(氧杂 环丁烷-3-基)-3-氮杂双环[3.1.0]己烷-6-甲酰胺
Figure BDA0002289356600005451
在室温，向(外型)-N-[8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-3-氮杂双环[3.1.0]己烷-6-甲酰胺(0.30g,0.83mmol)、氧杂环丁烷-3-酮(180mg,2.5mmol)的甲醇(20mL)溶液中添加NaBH3CN(157mg,2.5mmol)。2小时后，在真空下浓缩该反应，且所得残余物经制备型HPLC提纯，得到(外型)-N-[8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-3-(氧杂环丁烷-3-基)-3-氮杂双环[3.1.0]己烷-6-甲酰胺(125mg,36％)，其为白色固体。LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.25，[M+H]+＝417.2，方法＝K-1；1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ10.79(s,1H),9.35(s,1H),8.57(s,1H),8.44(d,J＝5.0Hz,1H),8.23(s,1H),7.48-7.21(m,3H),6.96(s,1H),4.56(t,J＝6.6Hz,2H),4.44(t,J＝6.0Hz,2H),3.73(m,1H),3.05(d,J＝8.9Hz,2H),2.47-2.42(m,3H),2.41(s,3H),1.95(t,J＝2.2Hz,2H)。
实施例199：
2-[[8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基]氨基]-6-甲基-4H,5H, 6H,7H,8H-吡唑并[1,5-d][1,4]二氮杂
Figure BDA0002289356600005453
-7-酮(化合物256)
Figure BDA0002289356600005452
步骤1：3-溴-1-(噁烷-2-基)-1H-吡唑-5-甲酸甲基酯
Figure BDA0002289356600005461
将3-溴-1H-吡唑-5-甲酸甲基酯(10.0g,48.8mmol)、TsOH(830mg,4.82mmol)、3,4-二氢-2H-吡喃(12.2g,145mmol)在乙酸乙酯(150mL)中的混合物回流4小时。将该反应混合物浓缩，且所得残余物用快速色谱提纯(1:3乙酸乙酯/石油醚)，得到3-溴-1-(噁烷-2-基)-1H-吡唑-5-甲酸甲基酯(8g,57％)，其为油状物。LCMS(ESI):[M+H]+＝289.0。
步骤2：[3-溴-1-(噁烷-2-基)-1H-吡唑-5-基]甲醇
在氮气中，向冰冷却的3-溴-1-(噁烷-2-基)-1H-吡唑-5-甲酸甲基酯(7.4g,25.6mmol)的二氯甲烷(100mL)溶液中逐滴添加二异丁基氢化铝(102mL,608mmol)。1小时后，用水稀释该反应(100mL)，且所得溶液经二氯甲烷萃取。该合并的有机物经Na2SO4干燥，过滤，并在真空下浓缩，得到粗的[3-溴-1-(噁烷-2-基)-1H-吡唑-5-基]甲醇(5.2g)，其为淡黄色油状物。LCMS(ESI):[M+H]+＝261.0。
步骤3：甲磺酸[3-溴-1-(噁烷-2-基)-1H-吡唑-5-基]甲基酯
Figure BDA0002289356600005463
向冰冷却的[3-溴-1-(噁烷-2-基)-1H-吡唑-5-基]甲醇(5.5g,21mmol)、三乙胺(6.38g,63.0mmol)的二氯甲烷(100mL)溶液中添加MsCl(5.3g,46mmol)。15分钟后，该反应经水稀释，且所得溶液经二氯甲烷萃取。所收集的有机物经Na2SO4干燥，过滤，并在真空下浓缩，得到粗的甲磺酸[3-溴-1-(噁烷-2-基)-1H-吡唑-5-基]甲基酯(6.3g)，其为无色油状物。LCMS(ESI):[M+H]+＝339.0。
步骤4：2-[3-溴-1-(噁烷-2-基)-1H-吡唑-5-基]乙腈
Figure BDA0002289356600005471
将甲磺酸[3-溴-1-(噁烷-2-基)-1H-吡唑-5-基]甲基酯(4.0g,11.8mmol)和KCN(2.3g,35mmol)在DMSO(100mL)中的混合物在50℃加热。2小时后，用水稀释该反应(500mL)，且所得溶液经乙酸乙酯萃取。该合并的萃取物经Na2SO4干燥，过滤，并在真空下浓缩。经快速柱色谱提纯(10:1二氯甲烷/甲醇)，得到2-[3-溴-1-(噁烷-2-基)-1H-吡唑-5-基]乙腈(2.1g,66％)，其为无色油状物。LCMS(ESI):[M+H]+＝270.0。
步骤5：2-(3-溴-1H-吡唑-5-基)乙腈
Figure BDA0002289356600005472
在室温，向2-[3-溴-1-(噁烷-2-基)-1H-吡唑-5-基]乙腈(2.2g,8.1mmol)的二氯甲烷(30mL)溶液添加三氟乙酸(6mL)。2小时后，浓缩该反应，且所得残余物用二氯甲烷(20mL)稀释。该溶液用7MNH3/甲醇碱化至pH＝8。在真空下浓缩该溶液，且该粗产物经快速柱色谱提纯(10:1二氯甲烷/甲醇)，得到2-(3-溴-1H-吡唑-5-基)乙腈(1.44g,95％)，其为淡黄色油状物。LCMS(ESI):[M+H]+＝186.0。
步骤6：2-[3-溴-5-(氰基甲基)-1H-吡唑-1-基]乙酸甲基酯
Figure BDA0002289356600005473
在室温，向2-(3-溴-1H-吡唑-5-基)乙腈(1.66g,8.92mmol)、四丁基碘化铵(328mg,0.88mmol)、碳酸钾(1.2g,8.68mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(80mL)中的悬浮液中添加2-氯乙酸甲基酯(961mg,8.85mmol)。1小时后，该反应混合物经水稀释(100mL)，且所得溶液经乙酸乙酯萃取。浓缩该合并的有机物。经快速制备型HPLC提纯，得到2-[3-溴-5-(氰基甲基)-1H-吡唑-1-基]乙酸甲基酯(760mg,33％)，其为无色油状物。LCMS(ESI):[M+H]+＝258.0。
步骤7：2-溴-4H,5H,6H,7H,8H-吡唑并[1,5-d][1,4]二氮杂 -7-酮
在室温、在氢气(2atm)中，将2-[3-溴-5-(氰基甲基)-1H-吡唑-1-基]乙酸甲基酯(394mg,1.52mmol)和PtO2(173mg,0.762mmol)在甲醇(20mL)中的混合物搅拌2小时。过滤该反应，且浓缩该滤液。经快速柱色谱提纯(10:1二氯甲烷/甲醇)，得到2-溴-4H,5H,6H,7H,8H-吡唑并[1,5-d][1,4]二氮杂-7-酮(155mg,44％)，其为白色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝230.0。
步骤8：2-溴-6-甲基-4H,5H,6H,7H,8H-吡唑并[1,5-d][1,4]二氮杂
Figure BDA0002289356600005488
-7-酮
Figure BDA0002289356600005482
在室温，向2-溴-4H-吡唑并[1,5-d][1,4]二氮杂
Figure BDA0002289356600005489
-7-酮(105mg,0.45mmol)和t-BuOK(56mg,0.50mmol)在四氢呋喃(5mL)中的混合物添加CH3I(98mg,0.69mmol)。2小时后，在真空下浓缩该溶液。经快速柱色谱提纯(10:1二氯甲烷/甲醇)，得到2-溴-6-甲基-4H-吡唑并[1,5-d][1,4]二氮杂
Figure BDA0002289356600005485
-7-酮(90mg,81％)，其为白色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝244.0。
步骤9：2-[(8-[双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 二氮杂萘-3-基)氨基]-6-甲基-4H-吡唑并[1,5-d][1,4]二氮杂
Figure BDA0002289356600005486
-7-酮
Figure BDA0002289356600005483
在130℃，将1-N,1-N-双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]-3-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-1,6-二胺(380mg,0.68mmol)、2-溴-6-甲基-4H-吡唑并[1,5-d][1,4]二氮杂-7-酮(112mg,0.45mmol)、第三代t-BuBrettPhos预催化剂(157mg,0.18mmol)、t-BuBrettPhos(87mg,0.17mmol)和Cs2CO3(747mg,2.29mmol)在二噁烷(8mL)中的悬浮液加热4小时。在真空中浓缩该反应混合物，且该粗产物经快速柱色谱提纯(10:1二氯甲烷/甲醇)，得到2-[(8-[双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)氨基]-6-甲基-4H-吡唑并[1,5-d][1,4]二氮杂
Figure BDA0002289356600005493
-7-酮(0.20g,41％)，其为淡黄色油状物。LCMS(ESI):[M+H]+＝715.3。
步骤10：2-[[8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基]氨基]-6-甲基- 4H-吡唑并[1,5-d][1,4]二氮杂
Figure BDA0002289356600005494
-7-酮
Figure BDA0002289356600005491
将2-[(8-[双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)氨基]-6-甲基-4H-吡唑并[1,5-d][1,4]二氮杂-7-酮(190mg,0.26mmol)和三氟乙酸(5mL)的溶液在80℃加热30分钟。在真空下浓缩该混合物，且所得残余物经制备型HPLC提纯，得到2-[[8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基]氨基]-6-甲基-4H-吡唑并[1,5-d][1,4]二氮杂
Figure BDA0002289356600005496
-7-酮(36.7mg,33％)，其为黄色固体。LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.10，[M+H]+＝415.2，方法＝K-1；1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ9.43(s,1H),9.22(s,1H),8.56(s,1H),8.42(d,J＝6.0Hz,1H),7.55(s,1H),7.30(d,J＝6.0Hz,1H),7.10(s,2H),6.82(s,1H),6.05(s,1H),4.99(s,2H),3.84(t,J＝6.0Hz,2H),3.06(t,J＝6.0Hz,2H),2.96(s,3H),2.42(s,3H)。
实施例200：
6-N-[1-(2,2-二氟乙基)-1H-吡唑-4-基]-3-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘- 1,6-二胺(化合物257)
Figure BDA0002289356600005492
通过为(3R)-3-(4-[[8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基]氨基]-1H-吡唑-1-基)-1-甲基吡咯烷-2-酮(化合物249)描述的操作制备所述标题化合物。LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.05，[M+H]+＝382.2，方法＝M；1H NMR(300MHz,CD3OD)δ9.22-9.15(m,1H),8.51(s,1H),8.43(d,J＝5.1Hz,1H),8.04(s,1H),7.67(d,J＝0.8Hz,1H),7.44-7.36(m,1H),6.75(dd,J＝13.6,0.9Hz,2H),6.49-5.95(m,1H),4.58(td，J＝14.4,3.9Hz,2H),2.45(s,3H)。
实施例201：
N-(8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-5-(1H-吡唑-4-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)环丙 烷甲酰胺(化合物258)
Figure BDA0002289356600005501
步骤1：N-(8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)环丙烷甲酰胺
Figure BDA0002289356600005502
将N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)环丙烷甲酰胺(0.50g,1.9mmol)、(4-甲基吡啶-3-基)硼酸(391mg,2.86mmol)、Xphos(181mg,0.38mmol)、Xphos-PdCl-2nd G(144mg,0.19mmol)和碳酸钾(787mg,5.69mmol)在10:1的1,4-二噁烷/水(11mL)中的混合物在100℃加热1小时。过滤该反应，且在真空下浓缩该滤液。经硅胶色谱提纯(20:1二氯甲烷/甲醇)，得到N-[8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基]环丙烷甲酰胺(534mg,88％)，其为棕色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝320.1。
步骤2：N-(8-氨基-5-溴-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)环丙烷甲酰 胺
Figure BDA0002289356600005503
在25℃，将N-[8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基]环丙烷甲酰胺(524mg,1.64mmol)、NBS(350mg,1.97mmol)和二氯甲烷(20mL)的混合物搅拌30分钟。该反应混合物经二氯甲烷萃取，该合并的萃取物经无水硫酸钠干燥，过滤，并在真空下浓缩。经硅胶色谱提纯(20:1二氯甲烷/甲醇)，得到N-[8-氨基-5-溴-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基]环丙烷甲酰胺(427mg,65％)，其为棕色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝398.2。
步骤3：N-(8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-5-(1H-吡唑-4-基)-2,7-二氮杂萘-3- 基)环丙烷甲酰胺
Figure BDA0002289356600005511
在100℃，将N-[8-氨基-5-溴-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基]环丙烷甲酰胺(0.10g,0.25mmol)、(1H-吡唑-4-基)硼酸(42mg,0.38mmol)、Pd(dppf)Cl2(19mg,0.03mmol)和碳酸钾(104mg,0.75mmol)在4:1的二噁烷/水(10mL)中的混合物加热。15小时后，过滤该反应，且在真空下浓缩该滤液。经制备型HPLC提纯，得到N-[8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-5-(1H-吡唑-4-基)-2,7-二氮杂萘-3-基]环丙烷甲酰胺(27.6mg,29％)，其为绿色固体。LCMS(ESI):RT(分钟)＝0.91，[M+H]+＝386.2，方法＝K-1；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.72(s,1H),10.95(s,1H),9.41(d,J＝0.9Hz,1H),8.39-8.22(m,2H),8.20(s,1H),7.45(s,1H),7.33(s,2H),7.14(d,J＝4.4Hz,2H),2.03(s,4H),1.01-0.51(m,4H)。
实施例202：
2-(3-[[8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基]氨基]-5-环丙基- 1H-吡唑-1-基)乙-1-醇(化合物259)
Figure BDA0002289356600005512
步骤1：3-环丙基-5-碘-1-[2-(噁烷-2-基氧基)乙基]-1H-吡唑
Figure BDA0002289356600005521
向冰冷却的3-环丙基-5-碘-1H-吡唑(950mg,4.06mmol)的N,N-二甲基甲酰胺(10mL)溶液中添加氢化钠(292mg,12.168mmol)。2小时后，将2-(2-溴乙氧基)噁烷(1.242g,5.940mmol)添加至该反应中，且将该反应混合物温热至25℃3小时。该反应经水稀释，且所得溶液经乙酸乙酯萃取。该合并的有机萃取物经Na2SO4干燥，过滤，并在真空下浓缩。经硅胶色谱提纯(1:4乙酸乙酯/石油醚)，得到3-环丙基-5-碘-1-[2-(噁烷-2-基氧基)乙基]-1H-吡唑(1.30g,89％)，其为黄色油状物。LCMS(ESI):[M+H]+＝363.0。
步骤2：6-N-[5-环丙基-1-[2-(噁烷-2-基氧基)乙基]-1H-吡唑-3-基]-1-N,1-N- 双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]-3-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-1,6-二胺
Figure BDA0002289356600005522
在110℃、在氮气中，将1-N,1-N-双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]-3-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-1,6-二胺(0.30g,0.54mmol)、5-环丙基-3-碘-1-[2-(噁烷-2-基氧基)乙基]-1H-吡唑(394mg,1.09mmol)、Cs2CO3(1.06g,3.25mmol)、第三代t-BuBrettPhos预催化剂(93mg,0.11mmol)和t-BuBrettPhos(132mg,0.27mmol)在二噁烷(8mL)中的悬浮液加热12小时。将该反应混合物冷却至室温，并在真空下浓缩。经硅胶色谱提纯(25:1二氯甲烷/甲醇)，得到6-N-[5-环丙基-1-[2-(噁烷-2-基氧基)乙基]-1H-吡唑-3-基]-1-N,1-N-双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]-3-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-1,6-二胺(0.24g,56％)，其为黄色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝786.4。
步骤3：2-(3-[[8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基]氨基]-5-环 丙基-1H-吡唑-1-基)乙-1-醇
Figure BDA0002289356600005531
将6-N-[5-环丙基-1-[2-(噁烷-2-基氧基)乙基]-1H-吡唑-3-基]-1-N,1-N-双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]-3-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-1,6-二胺(320mg,0.41mmol)的三氟乙酸(10mL)溶液在50℃加热。1小时后，在真空下浓缩该反应，且所得残余物经硅胶色谱提纯(15:1二氯甲烷/甲醇)，得到2-(3-[[8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基]氨基]-5-环丙基-1H-吡唑-1-基)乙-1-醇(0.136g,83％)，其为黄色固体。LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.07，[M+H]+＝402.2，方法＝K-1；1H NMR(300MHz,CD3OD)δ9.32(s,1H),8.56(s,1H),8.54(d,J＝5.4Hz,1H),7.78(s,1H),7.47(d,J＝5.4Hz,1H),6.85(s,1H),6.71(s,1H),4.15(t,J＝5.2Hz,2H),3.87(t,J＝5.2Hz,2H),2.44(s,3H),1.84-1.75(m,1H),0.85-0.83(m,4H)。
实施例203：
1-(4-[[8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基]氨基]-1H-吡唑-1- 基)-2-甲基丙-2-醇(化合物260)
Figure BDA0002289356600005532
通过为2-(3-[[8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基]氨基]-5-环丙基-1H-吡唑-1-基)乙-1-醇(化合物259)描述的操作制备所述标题化合物。LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.50，[M+H]+＝390.1，方法＝K-1；1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ9.20(s,1H),8.86(s,1H),8.52(s,1H),8.40(d,J＝5.0Hz,1H),7.88(s,1H),7.48(s,1H),7.28(d,J＝5.0Hz,1H),7.06(s,2H),6.73(s,1H),6.62(s,1H),4.69(s,1H),3.98(s,2H),2.39(s,3H),1.07(s,6H)。
实施例204：
2-(5-[[8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基]氨基]-3-甲基-1H- 吡唑-1-基)乙-1-醇(化合物261)
Figure BDA0002289356600005541
通过为2-(3-[[8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基]氨基]-5-环丙基-1H-吡唑-1-基)乙-1-醇(化合物259)描述的操作制备所述标题化合物。LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.01，[M+H]+＝376.1，方法＝K-1；1H NMR(300MHz,CD3OD)δ9.17(t,J＝0.9Hz,1H),8.51(s,1H),8.42(d,J＝5.1Hz,1H),7.49-7.30(m,1H),6.84(dd,J＝7.3,0.9Hz,2H),6.16(d,J＝0.6Hz,1H),4.16(t,J＝5.4Hz,2H),3.89(dd,J＝5.7,5.0Hz,2H),2.44(d,J＝0.6Hz,3H),2.27(d,J＝0.5Hz,3H)。
实施例205：
2-(3-[[8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基]氨基]-5-甲基-1H- 吡唑-1-基)乙-1-醇(化合物262)
Figure BDA0002289356600005542
通过为2-(3-[[8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基]氨基]-5-环丙基-1H-吡唑-1-基)乙-1-醇(化合物259)描述的操作制备所述标题化合物。LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.01，[M+H]+＝376.1，方法＝K-1；1H NMR(300MHz,CD3OD)δ9.16(t,J＝0.8Hz,1H),8.52(s,1H),8.43(d,J＝5.1Hz,1H),7.48-7.34(m,2H),6.89-6.78(m,1H),6.03(d,J＝0.8Hz,1H),4.13(t,J＝5.4Hz,2H),3.93(t,J＝5.4Hz,2H),2.46(s,3H),2.36(d,J＝0.8Hz,3H)。
实施例206：
3-[[8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基]氨基]-N,1-二甲基-1H- 吡唑-5-甲酰胺(化合物263)
Figure BDA0002289356600005551
步骤1：3-溴-N,1-二甲基-1H-吡唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002289356600005552
在25℃，向3-溴-1-甲基-1H-吡唑-5-甲酸(0.50g,2.44mmol)的N,N-二甲基甲酰胺(8mL)溶液中依次添加甲胺盐酸盐(0.30g,4.44mmol)、二异丙基乙胺(2.5mL,15mmol)和HATU(1.1g,2.9mmol)。12小时后，将该反应混合物浓缩，且所得残余物经硅胶色谱提纯(1:3乙酸乙酯/石油醚)，得到3-溴-N,1-二甲基-1H-吡唑-5-甲酰胺(480mg,90％)，其为白色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝218.1。
步骤2：3-[(8-[双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 二氮杂萘-3-基)氨基]-N,1-二甲基-1H-吡唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002289356600005553
在110℃、在氮气中，将1-N,1-N-双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]-3-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-1,6-二胺(0.50g,0.906mmol)、3-溴-N,1-二甲基-1H-吡唑-5-甲酰胺(0.50g,2.293mmol)、t-BuBrettPhos(225mg,0.464mmol)、第三代t-BuBrettPhos预催化剂(120mg,0.140mmol)和Cs2CO3(1.78g,5.463mmol)在二噁烷(12mL)中的悬浮液加热2小时。过滤该反应，且在真空下浓缩该滤液，得到粗的3-[(8-[双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)氨基]-N,1-二甲基-1H-吡唑-5-甲酰胺(0.58g,93％)，其为黄色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝689.3。
步骤3：3-[[8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基]氨基]-N,1-二甲 基-1H-吡唑-5-甲酰胺
Figure BDA0002289356600005561
将3-[(8-[双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)氨基]-N,1-二甲基-1H-吡唑-5-甲酰胺(0.50g,0.73mmol)的三氟乙酸(8mL)溶液在50℃加热。2小时后，在真空下浓缩该反应，且所得残余物经制备型HPLC提纯，得到3-[[8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基]氨基]-N,1-二甲基-1H-吡唑-5-甲酰胺(75.1mg,27％)，其为黄色固体。LCMS(ESI):RT(分钟)＝0.91，[M+H]+＝389.2，方法＝K-1；1H NMR(300MHz,CD3OD)δ9.19(s,1H),8.52(s,1H),8.43(d,J＝5.1Hz,1H),7.42(s,1H),7.39(d,J＝5.1Hz,1H),6.85(s,1H),6.72(s,1H),4.07(s,3H),2.89(s,3H),2.45(s,3H)。
实施例207：
(4-[[8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基]氨基]苯基)甲烷磺酰 胺(化合物264)
Figure BDA0002289356600005562
步骤1：(4-溴苯基)甲烷磺酰胺
Figure BDA0002289356600005563
将NH3在1,4-二噁烷中的溶液(80mL,0.5M)逐滴添加至冰冷却的(4-溴苯基)甲磺酰氯(2.00g,7.42mmol)的二氯甲烷(20mL)溶液中。所得混合物温热至室温30分钟。在真空下浓缩该反应，且所得残余物悬浮于10:1的二氯甲烷/乙酸乙酯(20mL)中，并通过过滤收集该固体，得到(4-溴苯基)甲烷磺酰胺(1.6g,86％)，其为白色固体。1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ7.58(d,J＝8.4Hz,2H),7.32(d,J＝8.4Hz,2H),6.85(s,2H),4.25(s,2H)。
步骤2：[4-[(8-[双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2, 7-二氮杂萘-3-基)氨基]苯基]甲烷磺酰胺
Figure BDA0002289356600005571
向1-N,1-N-双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]-3-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-1,6-二胺(0.25g,0.45mmol)的1,4-二噁烷(12.5mL)溶液中依次添加(4-溴苯基)甲烷磺酰胺(453mg,1.81mmol)、Pd2(dba)3(41.5mg,0.045mmol)、Xphos(43mg,0.091mmol)和t-BuONa(261mg,2.72mmol)。在110℃，用微波辐射将该反应混合物加热1小时。过滤该反应，且在真空下浓缩该滤液。经硅胶色谱提纯(15:1二氯甲烷/甲醇)，得到[4-[(8-[双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)氨基]苯基]甲烷磺酰胺(160mg,49％)，其为黄色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝721.0。
步骤3：(4-[[8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基]氨基]苯基)甲 烷磺酰胺
Figure BDA0002289356600005572
将[4-[(8-[双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)氨基]苯基]甲烷磺酰胺(130mg,0.18mmol)的三氟乙酸(10mL)溶液在45℃加热5小时。在真空中浓缩该反应混合物，且所得残余物经制备型HPLC提纯，得到(4-[[8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基]氨基]苯基)甲烷磺酰胺(36.6mg,48％)，其为黄色固体。LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.07，[M+H]+＝421.1，方法＝M；1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ13.07-12.83(m,1H),9.97(s,1H),9.58(s,1H),8.98-8.42(m,3H),7.60(d,J＝8.4Hz,2H),7.54(s,1H),7.48(d,J＝4.8Hz,2H),7.07(s,1H),7.01(s,1H),6.82(s,2H),4.24(s,2H),2.38(s,3H)。
实施例208：
1-(4-[[8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基]氨基]苯基)哌嗪-2- 酮(化合物265)
Figure BDA0002289356600005581
步骤1：4-(4-溴苯基)-3-氧代哌嗪-1-甲酸叔丁基酯
将1-溴-4-碘苯(5.0g,17.7mmol)、3-氧代哌嗪-1-甲酸叔丁基酯(3.53g,17.6mmol)、甲基[2-(甲基氨基)乙基]胺(310mg,3.52mmol)、CuI(670mg,3.52mmol)和K3PO4(11.2g,52.8mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(100mL)中的悬浮液在100℃加热。3小时后，将该反应冷却至室温，并用水稀释。所得溶液用乙酸乙酯萃取，且该合并的有机萃取物在真空下浓缩。经硅胶色谱提纯(1:1乙酸乙酯/石油醚)，得到4-(4-溴苯基)-3-氧代哌嗪-1-甲酸叔丁基酯(2.8g,45％)，其为白色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝355.1。
步骤2：4-[4-[(8-[双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-(4-甲基吡啶-3-基)- 2,7-二氮杂萘-3-基)氨基]苯基]-3-氧代哌嗪-1-甲酸叔丁基酯
Figure BDA0002289356600005591
将1-N,1-N-双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]-3-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-1,6-二胺(20mg,0.036mmol)、4-(4-溴苯基)-3-氧代哌嗪-1-甲酸叔丁基酯(32mg,0.090mmol)、Pd2(dba)3(1.6mg,0.002mmol)、Xphos(1.7mg,0.004mmol)和Cs2CO3(23.6mg,0.072mmol)在二噁烷中(2mL)中的混合物在100℃加热12小时。过滤该反应，且在真空下浓缩该滤液。经硅胶色谱提纯(15:1二氯甲烷/甲醇)，得到4-[4-[(8-[双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)氨基]苯基]-3-氧代哌嗪-1-甲酸酯(10mg,34％)，其为黄色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝826.9。
步骤3：1-(4-[[8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基]氨基]苯基) 哌嗪-2-酮
Figure BDA0002289356600005592
将4-[4-[(8-[双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)氨基]苯基]-3-氧代哌嗪-1-甲酸叔丁基酯(0.20g,0.242mmol)的三氟乙酸(5mL)溶液在80℃加热2小时。在真空下浓缩该混合物，且所得残余物经制备型HPLC提纯，得到1-(4-[[8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基]氨基]苯基)哌嗪-2-酮(57.1mg,55％)，其为白色固体。LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.67，[M+H]+＝426.2，方法＝M；1HNMR(300MHz,CD3OD)δ9.19(t,J＝0.9Hz,1H),8.50(s,1H),8.41(d,J＝5.1Hz,1H),7.65-7.55(m,2H),7.38(d,J＝5.2Hz,1H),7.31-7.23(m,2H),6.95(d,J＝0.9Hz,1H),6.79(d,J＝0.8Hz,1H),3.72(t,J＝5.5Hz,2H),3.57(s,2H),3.19(t,J＝5.5Hz,2H),2.44(s,3H)。
实施例209：
2-(4-[[8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基]氨基]-1H-吡唑-1- 基)-2-甲基丙-1-醇(化合物266)
Figure BDA0002289356600005601
通过为(3R)-3-(4-[[8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基]氨基]-1H-吡唑-1-基)-1-甲基吡咯烷-2-酮(化合物249)描述的操作制备所述标题化合物。LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.83，[M+H]+＝390.2，方法＝M；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.21(s,1H),8.78(s,1H),8.52(s,1H),8.42-8.40(m,1H),7.91(s,1H),7.51(s,1H),7.29-7.27(m,1H),7.04(m,2H),6.74(s,1H),6.62(s,1H),4.97(t,J＝5.7Hz,1H),5.58(d,J＝5.7Hz,2H),2.39(s,3H),1.47(s,6H)。
实施例210：
(+/-)-反式-N-(8-氨基-6-(5-氟-2-甲基苯基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(1-甲 基-1H-吡唑-4-基)环丙烷甲酰胺(化合物267)
Figure BDA0002289356600005602
步骤1：反式-N-(8-氨基-6-(5-氟-2-甲基苯基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(1-甲 基-1H-吡唑-4-基)环丙烷甲酰胺
Figure BDA0002289356600005603
将反式-N-(8-氨基-6-(5-氟-2-甲基苯基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)环丙烷甲酰胺(0.20g,0.58mmol)、5-氟-2-甲基苯基硼酸(269mg,1.75mmol)、Pd(PPh3)4(135mg,0.11mmol)和K3PO4(372mg,1.75mmol)在4:1的1,4-二噁烷/水(10mL)中的混合物在100℃加热6小时。在真空下浓缩所得混合物，且所得残余物经硅胶色谱(乙酸乙酯)随后制备型HPLC提纯，得到反式-N-(8-氨基-6-(5-氟-2-甲基苯基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)环丙烷甲酰胺(3mg)，其为白色固体。LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.67，[M+H]+＝417.2，方法＝K-1；1H NMR(300MHz,CD3OD)δ9.27(t,J＝0.9Hz,1H),8.32-8.26(m,1H),7.50(s,1H),7.36(d,J＝0.8Hz,1H),7.30-7.28(m,1H),7.14-7.11(m,1H),7.05-7.03(m,1H),6.90(d,J＝0.8Hz,1H),3.84(s,3H),2.37-2.35(m,1H),2.32(s,3H),2.15-2.03(m,1H),1.56-1.53(m,1H),1.25-1.22(m,1H)。
实施例211：
(+/-)-反式-N-[8-氨基-6-(5-羟基-2-甲基苯基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-(1-甲 基-1H-吡唑-4-基)环丙烷-1-甲酰胺(化合物268)
Figure BDA0002289356600005611
向反式-N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)环丙烷-1-甲酰胺(0.20g,0.58mmol)在5:1的1,4-二噁烷/水(12mL)中的溶液中依次添加(5-羟基-2-甲基苯基)硼酸(134mg,0.88mmol)、Pd(PPh3)4(135mg,0.12mmol)和K3PO4(372mg,1.75mmol)。在100℃加热所得溶液。在5小时后，过滤该反应，且在真空下浓缩该滤液。经制备型HPLC提纯，得到反式-N-[8-氨基-6-(5-羟基-2-甲基苯基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)环丙烷-1-甲酰胺(120mg,50％)，其为白色固体。LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.26，[M+H]+＝415.2，方法＝K-1；1H NMR(400MHz,CD3OD)δ9.26(s,1H),8.27(s,1H),7.50(s,1H),7.37(s,1H),7.10(d,J＝8.0Hz,1H),6.84(d,J＝8.0Hz,2H),6.77-6.75(m,1H),3.85(s,3H),2.40-2.35(m,1H),2.24(s,3H),2.13-2.08(m,1H),1.59-1.55(m,1H),1.28-1.26(m,1H)。
实施例212：
(1R,2S)-N-[8-氨基-5-氯-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-(氰基 甲基)环丙烷-1-甲酰胺(化合物269)和(1S,2R)-N-[8-氨基-5-氯-6-(4-甲基吡啶-3-基)- 2,7-二氮杂萘-3-基]-2-(氰基甲基)环丙烷-1-甲酰胺(化合物270)
Figure BDA0002289356600005621
在25℃，向反式-N-[8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-(氰基甲基)环丙烷-1-甲酰胺(210mg,0.59mmol)的N,N-二甲基甲酰胺(7mL)溶液中添加NCS(156mg,1.17mmol)。在15小时后，浓缩该反应，并经制备型HPLC提纯，得到外消旋产物(0.10g,43％)，其为白色固体。通过手性SFC分离对映异构体。化合物269：LCMS(ESI):RT(分钟)＝2.06，[M+H]+＝393，方法＝K-1；1H NMR(400MHz,CD3OD)δ9.34(s,1H),8.69(s,1H),8.48(d,J＝5.2Hz,1H),8.41(s,1H),7.44(d,J＝5.2Hz,1H),2.81-2.62(m,2H),2.29(s,3H),2.07-2.02(m,1H),1.79-1.75(m,1H),1.39-1.33(m,1H),1.09-1.05(m,1H)。化合物270：LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.14，[M+H]+＝393，方法＝K-1；1H NMR(400MHz,CD3OD)δ9.34(s,1H),8.69(s,1H),8.48(d,J＝5.2Hz,1H),8.41(s,1H),7.44(d,J＝5.2Hz,1H),2.81-2.62(m,2H),2.29(s,3H),2.07-2.02(m,1H),1.79-1.75(m,1H),1.39-1.35(m,1H),1.10-1.05(m,1H)。
实施例213：
(1R,2S)-N-[8-氨基-5-乙基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-(氰 基甲基)环丙烷-1-甲酰胺(化合物271)和(1R,2S)-N-[8-氨基-5-乙基-6-(4-甲基吡啶-3- 基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-(氰基甲基)环丙烷-1-甲酰胺(化合物272)
Figure BDA0002289356600005622
在氢气(1atm)中将反式-N-[8-氨基-5-乙烯基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-(氰基甲基)环丙烷-1-甲酰胺(68mg,0.18mmol)(化合物275)和钯碳(50mg,0.47mmol)在甲醇(6mL)中的悬浮液在25℃搅拌30分钟。将该反应混合物过滤，且在真空下浓缩该滤液。经制备型HPLC提纯，得到外消旋产物(11mg,16％)，其为黄色固体。通过手性SFC分离对映异构体。化合物271：LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.06，[M+H]+＝387，方法＝K-1；1HNMR(400MHz,CD3OD)δ9.34(s,1H),8.57(s,1H),8.49(d,J＝5.2Hz,1H),8.38(s,1H),7.46(d,J＝5.2Hz,1H),2.78-2.68(m,3H),2.52-2.39(m,1H),2.22(s,3H),2.07-2.02(m,1H),1.79-1.74(m,1H),1.39-1.36(m,1H),1.12-1.02(m,4H)。化合物272：LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.05，[M+H]+＝387，方法＝K-1；1H NMR(300MHz,CD3OD)δ9.34(s,1H),8.58(s,1H),8.49(d,J＝5.2Hz,1H),8.38(s,1H),7.46(d,J＝5.2Hz,1H),2.78-2.68(m,3H),2.52-2.39(m,1H),2.22(s,3H),2.07-2.02(m,1H),1.79-1.74(m,1H),1.39-1.36(m,1H),1.12-1.02(m,4H)。
实施例214：
(R)-2-(4-(8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基氨基)-1H-吡唑- 1-基)丙腈(化合物273)和(S)-2-(4-(8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基 氨基)-1H-吡唑-1-基)丙腈(化合物274)
Figure BDA0002289356600005631
步骤1：2-(4-溴-1H-吡唑-1-基)丙腈
Figure BDA0002289356600005632
将4-溴-1H-吡唑(1g,6.80mmol)、2-氯丙腈(612mg,6.83mmol)、Cs2CO3(2.43g,7.45mmol)在四氢呋喃(10mL)中的悬浮液在100℃加热。2小时后，过滤该反应，且在真空下浓缩该滤液。经硅胶色谱提纯(10:1二氯甲烷/甲醇)，得到2-(4-溴-1H-吡唑-1-基)丙腈(952mg,70％)，其为白色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝200.0。
步骤2：2-[4-[(8-[双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-(4-甲基吡啶-3-基)- 2,7-二氮杂萘-3-基)氨基]-1H-吡唑-1-基]丙腈
在120℃、在氮气中，将1-N,1-N-双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]-3-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-1,6-二胺(552mg,1.00mmol)、2-(4-溴-1H-吡唑-1-基)丙腈(800mg,3.99mmol)、t-BuBrettPhos(97mg,0.20mmol)、第三代t-BuBrettPhos预催化剂(171mg,0.20mmol)和碳酸钾(828mg,5.99mmol)在二噁烷(15mL)中的混合物加热。5小时后，在真空下浓缩该混合物。经硅胶色谱提纯(10:1二氯甲烷/甲醇)，得到2-[4-[(8-[双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)氨基]-1H-吡唑-1-基]丙腈(302mg,45％)，其为棕色油状物。LCMS(ESI):[M+H]+＝671.3。
步骤3：(R)-2-(4-(8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基氨基)-1H- 吡唑-1-基)丙腈和(S)-2-(4-(8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基氨基)- 1H-吡唑-1-基)丙腈
Figure BDA0002289356600005642
将2-[4-[(8-[双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)氨基]-1H-吡唑-1-基]丙腈(248mg,0.37mmol)和CF3COOH(20mL)的溶液在80℃加热45分钟。在真空下浓缩该混合物，且将所得残余物溶于DCM(10mL)。用NH3/甲醇将该溶液调节至pH＝8。经制备型HPLC提纯，得到外消旋产物(65.4mg,48％)，其为黄色固体。通过手性SFC分离对映异构体。化合物273：LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.62，[M+H]+＝371，方法＝K-1；1H NMR(300MHz,CD3OD)δ9.19(s,1H),8.50(s,1H),8.42(d,J＝6.0Hz,1H),8.13(s,1H),7.70(s,1H),7.39(d,J＝6.0Hz,1H),6.78(s,1H),6.74(s,1H),5.64(q,J＝6.0Hz,1H),2.44(s,3H),1.91(d,J＝6.0Hz,3H)。化合物274：LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.61，[M+H]+＝371，方法＝K-1；1H NMR(300MHz,CD3OD)δ9.19(s,1H),8.50(s,1H),8.42(d,J＝6.0Hz,1H),8.13(s,1H),7.70(s,1H),7.39(d,J＝6.0Hz,1H),6.78(s,1H),6.74(s,1H),5.64(q,J＝6Hz,1H),2.44(s,3H),1.91(d,J＝6Hz,3H)。
实施例215：
(+/-)-反式-N-[8-氨基-5-乙烯基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基]- 2-(氰基甲基)环丙烷-1-甲酰胺(化合物275)
Figure BDA0002289356600005651
向反式-N-[8-氨基-5-溴-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-(氰基甲基)环丙烷-1-甲酰胺(0.050g,0.11mmol)的二噁烷(2mL)和水(0.1mL)溶液中依次添加乙烯基三氟硼酸钾(23mg,0.17mmol)、Pd(PPh3)4(13mg,0.01mmol)和碳酸钠(37mg,0.35mmol)。在85℃加热所得混合物15小时。过滤并在真空中浓缩该反应。经硅胶(15:1二氯甲烷/甲醇)随后制备型HPLC提纯，得到外消旋产物(2.5mg,6％)，其为白色固体。化合物275：LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.86分钟[M+H]+＝385.2，方法＝K-1；1H NMR(300MHz,CD3OD)δ9.34(s,1H),8.71(s,1H),8.44(d,J＝5.2Hz,1H),8.35(s,1H),7.40(d,J＝5.2Hz,1H),6.59-6.52(m,1H),5.40-5.37(m,1H),5.25-5.21(m,1H),2.82-2.63(m,2H),2.23(s,3H),2.05-2.01(m,1H),1.77-1.72(m,1H),1.37-1.34(m,1H),1.08-1.03(m,1H)。
实施例216：
(1S,2S,3R)-N-[8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-(氰基甲 基)-3-甲基环丙烷-1-甲酰胺(化合物276)、(1R,2R,3S)-N-[8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3- 基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-(氰基甲基)-3-甲基环丙烷-1-甲酰胺(化合物277)、(1S,2S, 3S)-N-[8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-(氰基甲基)-3-甲基环丙 烷-1-甲酰胺(化合物278)和(1R,2R,3R)-N-[8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂 萘-3-基]-2-(氰基甲基)-3-甲基环丙烷-1-甲酰胺(化合物279)。
Figure BDA0002289356600005661
步骤1：(2E)-4-(苄基氧基)丁-2-烯酸叔丁基酯
Figure BDA0002289356600005662
将2-(苄基氧基)乙醛(10.0g,66.6mmol)、2-(二乙氧基磷酰基)乙酸叔丁基酯(16.8g,66.6mmol)、LiCl(16.7g,394mmol)、THF(200mL)和二异丙基乙胺(8.5g,66mmol)的混合物在室温搅拌1天。该反应经水稀释(10mL)并在真空下浓缩。经硅胶色谱提纯(100:1→10:1石油醚/乙酸乙酯)，得到(2E)-4-(苄基氧基)丁-2-烯酸叔丁基酯(3.5g,21％)，其为淡黄色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝249.3。
步骤2：叔丁基-2-[(苄基氧基)甲基]-3-甲基环丙烷-1-甲酸酯
Figure BDA0002289356600005663
在-30℃，向乙基二苯基锍四氟硼酸盐(10.5g,34.75mmol)的1,2-2甲氧基乙烷(250mL)和二氯甲烷(25mL)溶液中添加LDA(41mL,2M在THF中)。1小时后，添加(2E)-4-(苄基氧基)丁-2-烯酸叔丁基酯(2.9g,11.68mmol)，且将该反应温热至室温16小时。该反应经水稀释(100mL)，且所得溶液经乙酸乙酯萃取。浓缩所收集的有机物。经硅胶色谱提纯(100:1→10:1石油醚/乙酸乙酯)，得到2-[(苄基氧基)甲基]-3-甲基环丙烷-1-甲酸叔丁基酯(1.5g,46％)，其为淡黄色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝277.0。
步骤3：2-[(苄基氧基)甲基]-3-甲基环丙烷-1-甲酸
Figure BDA0002289356600005671
在室温，将2-[(苄基氧基)甲基]-3-甲基环丙烷-1-甲酸叔丁基酯(1.2g,4.34mmol)的二氯甲烷(5mL)和三氟乙酸(5mL)溶液搅拌16小时。在真空下浓缩该混合物，且所得残余物经硅胶色谱提纯，得到2-[(苄基氧基)甲基]-3-甲基环丙烷-1-甲酸(700mg,73％)，其为淡黄色油状物。
步骤4：2-[(苄基氧基)甲基]-N-(8-[双[(3,4-二甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-(4- 甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-3-甲基环丙烷-1-甲酰胺
在室温，将2-[(苄基氧基)甲基]-3-甲基环丙烷-1-甲酸(1.1g,4.99mmol)、1-N,1-N-双[(3,4-二甲氧基苯基)甲基]-3-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-1,6-二胺(0.390g,0.71mmol)、吡啶(2mL)和POCl3(2mL)在二氯甲烷(20mL)中的混合物搅拌1小时。该反应经水稀释，且所得溶液经乙酸乙酯萃取。合并且在真空中浓缩有机层。经硅胶色谱提纯，用(100:1→1:1石油醚/乙酸乙酯)洗脱，得到2-[(苄基氧基)甲基]-N-(8-[双[(3,4-二甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-3-甲基环丙烷-1-甲酰胺(700mg)，其为淡黄色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝754.4。
步骤5：N-(8-[双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 二氮杂萘-3-基)-2-(羟基甲基)-3-甲基环丙烷-1-甲酰胺
Figure BDA0002289356600005673
在室温、在氢气中(2atm)，搅拌2-[(苄基氧基)甲基]-N-(8-[双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-3-甲基环丙烷-1-甲酰胺(0.60g,0.80mmol)和钯碳(3g,28.19mmol)在甲醇(30mL)中的悬浮液。在16小时后，过滤该反应，且在真空下浓缩该滤液。经硅胶色谱提纯(100:1石油醚/乙酸乙酯→乙酸乙酯)，得到N-(8-[双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(羟基甲基)-3-甲基环丙烷-1-甲酰胺(0.50g,95％)，其为淡黄色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝664.8。
步骤6：甲磺酸[反式-2-[(8-[双[(3,4-二甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-(4-甲基吡 啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)氨基甲酰基]-3-甲基环丙基]甲基酯
Figure BDA0002289356600005681
向冰冷却的N-(8-[双[(3,4-二甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(羟基甲基)-3-甲基环丙烷-1-甲酰胺(0.10g,0.15mmol)和三乙胺(45mg,0.45mmol)的二氯甲烷(10mL)溶液中添加MsCl(34mg,0.30mmol)。将所得溶液温热至室温。1小时后，该反应经水稀释，且该溶液经乙酸乙酯萃取。在真空下浓缩所收集的有机层，得到粗的甲磺酸[2-[(8-[双[(3,4-二甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)氨基甲酰基]-3-甲基环丙基]甲基酯(90mg,81％)，其为淡黄色油状物。
步骤7：反式-N-(8-[双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-(4-甲基吡啶-3-基)- 2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(氰基甲基)-3-甲基环丙烷-1-甲酰胺
Figure BDA0002289356600005682
在50℃，将N-(8-[双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(羟基甲基)-3-甲基环丙烷-1-甲酰胺(550mg,0.83mmol)和KCN(234mg,3.59mmol)在DMSO(15mL)中的混合物加热3小时。用水稀释该反应，且所得溶液经乙酸乙酯萃取。该合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤，并在真空下浓缩，得到N-(8-[双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(氰基甲基)-3-甲基环丙烷-1-甲酰胺(0.50g,90％)，其为淡黄色固体。
步骤8：(1S,2S,3R)-N-[8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2- (氰基甲基)-3-甲基环丙烷-1-甲酰胺、(1R,2R,3S)-N-[8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2, 7-二氮杂萘-3-基]-2-(氰基甲基)-3-甲基环丙烷-1-甲酰胺、(1S,2S,3S)-N-[8-氨基-6- (4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-(氰基甲基)-3-甲基环丙烷-1-甲酰胺、(1R, 2R,3R)-N-[8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-(氰基甲基)-3-甲基环 丙烷-1-甲酰胺
Figure BDA0002289356600005691
在室温，将N-[8-[1,3-双(2,4-二甲氧基苯基)丙-2-基]-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-(氰基甲基)-3-甲基环丙烷-1-甲酰胺(0.20g,0.30mmol)的三氟乙酸(10mL)溶液搅拌16小时。在真空中浓缩该反应混合物。依次经制备型HPLC和手性SFC提纯，得到4种化合物。化合物276：LCMS(ESI):RT(分钟)＝3.24，[M+H]+＝372，方法＝M；1H NMR(300MHz,CD3OD)δ9.32(s,1H),8.55(s,1H),8.42(d,J＝5.2Hz,1H),8.34(s,1H),7.42(d,J＝5.2Hz,1H),7.01(s,1H),2.74-2.68(m,2H),2.46(s,3H),2.07-2.03(m,1H),1.73-1.68(m,1H),1.51-1.44(m,1H),1.27(d,J＝8.0Hz,3H)。化合物277：LCMS(ESI):RT(分钟)＝0.85，[M+H]+＝372，方法＝K-1；1H NMR(300MHz,CD3OD)δ9.32(s,1H),8.55(s,1H),8.42(d,J＝5.2Hz,1H),8.34(s,1H),7.42(d,J＝5.2Hz,1H),7.01(s,1H),2.74-2.68(m,2H),2.46(s,3H),2.07-2.03(m,1H),1.73-1.68(m,1H),1.51-1.44(m,1H),1.27(d,J＝8.0Hz,3H)。化合物278：LCMS(ESI):RT(分钟)＝0.99，[M+H]+＝372，方法＝K-1；1H NMR(300MHz,CD3OD)δ9.30(s,1H),8.54(s,1H),8.43(d,J＝5.2Hz,1H),8.30(s,1H),7.41(d,J＝5.2Hz,1H),6.98(s,1H),2.74-2.67(m,2H),2.46(s,3H),1.88-1.81(m,1H),1.73-1.68(m,2H),1.28(d,J＝8.0Hz,3H)。化合物279：LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.79，[M+H]+＝372，方法＝M；1H NMR(300MHz,CD3OD)δ9.30(s,1H),8.54(s,1H),8.43(d,J＝5.2Hz,1H),8.30(s,1H),7.41(d,J＝5.2Hz,1H),6.98(s,1H),2.74-2.67(m,2H),2.46(s,3H),1.88-1.81(m,1H),1.73-1.68(m,2H),1.28(d,J＝8.0Hz,3H)。
实施例217：
(1S,2S)-N-[8-氨基-6-(2-氟-6-甲基苯基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-(1-甲基- 1H-吡唑-4-基)环丙烷-1-甲酰胺(化合物280)和(1R,2R)-N-[8-氨基-6-(2-氟-6-甲基苯 基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)环丙烷-1-甲酰胺(化合物281)
Figure BDA0002289356600005701
向反式-N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)环丙烷-1-甲酰胺(0.20g,0.58mmol)在4:1的二噁烷/水(10mL)中的溶液中依次添加(2-氟-6-甲基苯基)硼酸(0.270g,1.75mmol)、Pd(PPh3)4(135mg,0.117mmol)和K3PO4(371.55mg,1.75mmol)。在氮气中，在100℃加热所得溶液16小时。浓缩该反应，且所得残余物经硅胶色谱提纯(乙酸乙酯)。该产物进一步经制备型HPLC提纯，随后经手性SFC提纯，得到该标题化合物。化合物280：LCMS(ESI):RT(分钟)＝2.89，[M+H]+＝417.2，方法＝K-1；1H NMR(300MHz,CD3OD)δ9.28(s,1H),8.28(s,1H),7.48(s,1H),7.35-7.27(m,2H),7.12(d,J＝7.8Hz,1H),7.01(t,J＝9.0Hz,1H),6.85(s,1H),3.83(s,3H),2.39-2.32(m,1H),2.22(s,3H),2.12-2.06(m,1H),1.58-1.52(m,1H),1.27-1.20(m,1H)。化合物281：LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.67，[M+H]+＝417.20，方法＝K-1；1H NMR(300MHz,CD3OD)δ9.28(s,1H),8.28(s,1H),7.48(s,1H),7.35-7.27(m,2H),7.12(d,J＝7.8Hz,1H),7.01(t,J＝9.0Hz,1H),6.85(s,1H),3.83(s,3H),2.39-2.32(m,1H),2.22(s,3H),2.12-2.06(m,1H),1.58-1.52(m,1H),1.27-1.20(m,1H)。
实施例218：
(1S,2S)-N-[8-氨基-6-[5-(羟基甲基)-2-甲基苯基]-2,7-二氮杂萘-3-基]-2- (1-甲基-1H-吡唑-4-基)环丙烷-1-甲酰胺(化合物282)和(1R,2R)-N-[8-氨基-6-[5-(羟基 甲基)-2-甲基苯基]-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)环丙烷-1-甲酰胺 (化合物283)
Figure BDA0002289356600005711
向反式-N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)环丙烷-1-甲酰胺(150mg,0.44mmol)在5:1的二噁烷/水(12mL)的溶液中依次添加[4-甲基-3-(四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基]甲醇(162.87mg,0.66mmol)、K3PO4(278.66mg,1.31mmol)和Pd(PPh3)4(101.13mg,0.09mmol)。在氮气中将所得溶液在100℃加热2小时。浓缩该反应，且所得残余物依次经硅胶色谱(15:1二氯甲烷/甲醇)、制备型HPLC和手性SFC提纯，得到该标题化合物。化合物282：LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.59，[M+H]+＝429.2，方法＝K-1；1H NMR(400MHz,CD3OD)δ9.30(s,1H),8.28(s,1H),7.50(s,1H),7.38-7.37(m,2H),7.34-7.27(m,2H),6.89(s,1H),4.64(s,2H),3.85(s,3H),2.41-2.37(m,1H),2.35(s,3H),2.13-2.09(m,1H),1.60-1.55(m,1H),1.29-1.24(m,1H)。化合物283：LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.52，[M+H]+＝429.3，方法＝K-1；1H NMR(400MHz,CD3OD)δ9.30(s,1H),8.28(s,1H),7.50(s,1H),7.38-7.37(m,2H),7.34-7.27(m,2H),6.89(s,1H),4.64(s,2H),3.85(s,3H),2.41-2.37(m,1H),2.35(s,3H),2.13-2.09(m,1H),1.60-1.55(m,1H),1.29-1.24(m,1H)。
实施例219：
(1S,2S)-N-[8-氨基-6-(3-氨基-2-甲基苯基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-(1-甲基- 1H-吡唑-4-基)环丙烷-1-甲酰胺(化合物284)和(1R,2R)-N-[8-氨基-6-(3-氨基-2-甲基苯 基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)环丙烷-1-甲酰胺(化合物285)
Figure BDA0002289356600005712
向反式-N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)环丙烷-1-甲酰胺(250mg,0.729mmol)在5:1的二噁烷/水(12mL)中的溶液中依次添加2-甲基-3-(四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯胺(425mg,1.82mmol)、Pd(PPh3)4(170mg,0.147mmol)和K3PO4(465mg,2.19mmol)。在100℃、在氮气中，将所得溶液加热12小时。浓缩该反应，且所得残余物依次经快速柱色谱(30:1二氯甲烷/甲醇)、制备型HPLC和手性SFC提纯，得到该标题化合物。化合物284：LCMS(ESI):RT(分钟)＝2.09，[M+H]+＝414.3，方法＝K-1；1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ10.89(s,1H),9.32(s,1H),8.18(s,1H),7.56(s,1H),7.29(s,1H),7.17(s,2H),6.92(t,J＝7.8Hz,1H),6.72(s,1H),6.65(d,J＝7.2Hz,1H),6.57(t,J＝7.2Hz,1H),4.87(s,2H),3.76(s,3H),2.22-2.17(m,2H),2.00(s,3H),1.41-1.35(m,1H),1.23-1.16(m,1H)。化合物285：LCMS(ESI):RT(分钟)＝2.09，[M+H]+＝414.3，方法＝K-1；1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ10.89(s,1H),9.32(s,1H),8.18(s,1H),7.56(s,1H),7.29(s,1H),7.17(s,2H),6.92(t,J＝7.8Hz,1H),6.72(s,1H),6.65(d,J＝7.2Hz,1H),6.57(t,J＝7.2Hz,1H),4.87(s,2H),3.76(s,3H),2.22-2.17(m,2H),2.00(s,3H),1.41-1.35(m,1H),1.23-1.16(m,1H)。
实施例220：
(1S,2S)-N-[8-氨基-6-(5-羟基-2-甲基苯基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-(1-甲基- 1H-吡唑-4-基)环丙烷-1-甲酰胺(化合物286)和(1R,2R)-N-[8-氨基-6-(5-羟基-2-甲基苯 基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)环丙烷-1-甲酰胺(化合物287)
Figure BDA0002289356600005721
向反式-N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)环丙烷-1-甲酰胺(0.20g,0.58mmol)在5:1的1,4-二噁烷/水(12mL)中的溶液中依次添加(5-羟基-2-甲基苯基)硼酸(134mg,0.88mmol)、Pd(PPh3)4(135mg,0.12mmol)和K3PO4(372mg,1.75mmol)。在100℃、在氮气中，将所得溶液加热5小时。过滤该反应，且在真空下浓缩该滤液。经制备型HPLC提纯，随后经手性SFC提纯，得到该标题化合物。化合物286：LCMS(ESI):RT(分钟)＝2.22，[M+H]+＝415.3，方法＝K-1；1H NMR(300MHz,CD3OD)δ9.26(s,1H),8.27(s,1H),7.50(s,1H),7.37(s,1H),7.10(d,J＝8.0Hz,1H),6.84(d,J＝8.0Hz,2H),6.77-6.75(m,1H),3.85(s,3H),2.40-2.35(m,1H),2.24(s,3H),2.13-2.08(m,1H),1.59-1.55(m,1H),1.28-1.26(m,1H)。化合物287：LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.26，[M+H]+＝415.3，方法＝K-1；1HNMR(300MHz,CD3OD)δ9.26(s,1H),8.27(s,1H),7.50(s,1H),7.37(s,1H),7.10(d,J＝8.0Hz,1H),6.84(d,J＝8.0Hz,2H),6.77-6.75(m,1H),3.85(s,3H),2.40-2.35(m,1H),2.24(s,3H),2.13-2.08(m,1H),1.59-1.55(m,1H),1.28-1.26(m,1H)。
实施例221：
(1S,2S)-N-[8-氨基-6-(5-甲氧基-2-甲基苯基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-(1-甲 基-1H-吡唑-4-基)环丙烷-1-甲酰胺(化合物288)和(1R,2R)-N-[8-氨基-6-(5-甲氧基-2- 甲基苯基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)环丙烷-1-甲酰胺(化合物 289)
Figure BDA0002289356600005731
向反式-N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)环丙烷-1-甲酰胺(216mg,0.63mmol)在5:1的1,4-二噁烷/水(12mL)中的溶液中添加2-(5-甲氧基-2-甲基苯基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷(0.20g,0.81mmol)、Pd(PPh3)4(136mg,0.12mmol)和K3PO4(372mg,1.75mmol)。在100℃、在氮气中将所得溶液加热12小时。过滤该反应，且在真空下浓缩该滤液。经制备型HPLC提纯后经手性SFC提纯，得到该标题化合物。化合物288：LCMS(ESI):RT(分钟)＝2.29，[M+H]+＝429.3，方法＝K-1；1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ10.93(s,1H),9.34(s,1H),8.22(s,1H),7.56(s,1H),7.29-7.16(m,4H),6.96(d,J＝2.7Hz,1H),6.88-6.85(m,2H),3.76(d,J＝3.9Hz,6H),2.27(s,3H),2.22-2.17(m,2H),1.40-1.38(m,1H),1.19-1.18(m,1H)。化合物289：LCMS(ESI):RT(分钟)＝2.30，[M+H]+＝429.3，方法＝K-1；1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ10.93(s,1H),9.34(s,1H),8.22(s,1H),7.56(s,1H),7.29-7.16(m,4H),6.96(d,J＝2.7Hz,1H),6.88-6.85(m,2H),3.76(d,J＝3.9Hz,6H),2.27(s,3H),2.22-2.17(m,2H),1.40-1.38(m,1H),1.19-1.18(m,1H)。
实施例222：
3-(1-氨基-6-[[(1S,2S)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)环丙烷]酰氨基]-2,7-二氮 杂萘-3-基)-N,N,4-三甲基苯酰胺(化合物290)和3-(1-氨基-6-[[(1R,2R)-2-(1-甲基-1H- 吡唑-4-基)环丙烷]酰氨基]-2,7-二氮杂萘-3-基)-N,N,4-三甲基苯酰胺(化合物291)
Figure BDA0002289356600005741
步骤1：3-溴-N,N,4-三甲基苯酰胺
Figure BDA0002289356600005742
在室温，向3-溴-4-甲基苯甲酸(5.00g,23.2mmol)的二氯甲烷(100mL)溶液中添加二异丙基乙胺(12.02g,93.00mmol)、HATU(13.26g,34.87mmol)和二甲胺(2.10g,46.6mmol)。在16小时后，在真空下浓缩该反应，且所得残余物经硅胶色谱提纯(1:1乙酸乙酯/石油醚)，得到3-溴-N,N,4-三甲基苯酰胺(4.7g,83％)，其为白色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝242.1。
步骤2：N,N,4-三甲基-3-(四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯酰胺
Figure BDA0002289356600005743
向3-溴-N,N,4-三甲基苯酰胺(2.50g,10.3mmol)的二噁烷中(100mL)溶液中添加4,4,5,5-四甲基-2-(四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷(5.24g,20.6mmol)、KOAc(3.04g,30.97mmol)和Pd(dppf)Cl2(755.54mg,1.03mmol)。在100℃、在氮气中，加热所得溶液。16小时后，在真空下浓缩该反应，且所得残余物经硅胶色谱提纯(10:1二氯甲烷/甲醇)，得到N,N,4-三甲基-3-(四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯酰胺(1.1g,37％)，其为橙色油状物。LCMS(ESI):[M+H]+＝290.2。
步骤3：3-(1-氨基-6-[[(1S,2S)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)环丙烷]酰氨基]-2, 7-二氮杂萘-3-基)-N,N,4-三甲基苯酰胺和3-(1-氨基-6-[[(1R,2R)-2-(1-甲基-1H-吡唑- 4-基)环丙烷]酰氨基]-2,7-二氮杂萘-3-基)-N,N,4-三甲基苯酰胺
Figure BDA0002289356600005744
向反式-N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)环丙烷-1-甲酰胺(0.20g,0.58mmol)在5:1的二噁烷/水(12mL)中的溶液中添加K3PO4(372mg,1.75mmol)、N,N,4-三甲基-3-(四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯酰胺(506mg,1.75mmol)和Pd(PPh3)4(134.84mg,0.11mmol)。在100℃、在氮气中，将所得溶液加热2小时。浓缩该反应，且所得残余物依次经硅胶色谱(20:1二氯甲烷/甲醇)和手性SFC提纯，得到该标题化合物。化合物290：LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.25，[M+H]+＝470.3，方法＝K-1；1H NMR(300MHz,CD3OD)δ9.30(s,1H),8.33(s,1H),7.55-7.47(m,2H),7.46-7.36(m,3H),6.95(s,1H),3.86(s,3H),3.12(d,J＝10.1Hz,6H),2.43-2.30(m,4H),2.18-2.05(m,1H),1.65-1.50(m,1H),1.35-1.20(m,1H)。化合物291：LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.25，[M+H]+＝470.3，方法＝K-1；1H NMR(300MHz,CD3OD)δ9.30(s,1H),8.33(s,1H),7.55-7.47(m,2H),7.46-7.36(m,3H),6.95(s,1H),3.86(s,3H),3.12(d,J＝10.1Hz,6H),2.43-2.30(m,4H),2.18-2.05(m,1H),1.65-1.50(m,1H),1.35-1.20(m,1H)。
实施例223：
(1S,2S)-N-[8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-[1-[2-(2- 氨基乙氧基)乙基]-1H-吡唑-4-基]环丙烷-1-甲酰胺(化合物292)和(1R,2R)-N-[8-氨基- 6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-[1-[2-(2-氨基乙氧基)乙基]-1H-吡唑-4- 基]环丙烷-1-甲酰胺(化合物293)
Figure BDA0002289356600005751
步骤1：4-碘-1-(噁烷-2-基)-1H-吡唑
Figure BDA0002289356600005752
将4-碘-1H-吡唑(50.0g,258mmol)、3,4-二氢-2H-吡喃(65.05g,773.3mmol)和对甲苯磺酸(3.11g,18.1mmol)的乙酸乙酯(300mL)溶液在90℃加热。2小时后浓缩该反应，且该残余物经硅胶色谱提纯(95:5石油醚/乙酸乙酯)，得到4-碘-1-(噁烷-2-基)-1H-吡唑(65g,91％)，其为黄色油状物。LCMS(ESI):[M+H]+＝279.1。
步骤2：(2E)-3-[1-(噁烷-2-基)-1H-吡唑-4-基]丙-2-烯酸乙基酯
Figure BDA0002289356600005761
在110℃、在氮气中，将4-碘-1-(噁烷-2-基)-1H-吡唑(50.0g,180mmol)、丙-2-烯酸乙基酯(72g,720mmol)、Pd(OAc)2(6.05g,27.0mmol)、P(o-Tol)3(16.4g,54mmol)和三乙胺(109g,1.08mol)在CH3CN(250mL)中的混合物加热3小时。浓缩该反应，且所得残余物经硅胶色谱提纯(9:1石油醚/乙酸乙酯)，得到(2E)-3-[1-(噁烷-2-基)-1H-吡唑-4-基]丙-2-烯酸酯(35g,78％)，其为黄色油状物。LCMS(ESI):[M+H]+＝251.3。
步骤3：反式-2-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-4-基)环丙烷甲酸乙基酯
Figure BDA0002289356600005762
在室温，向三甲基氧化锍碘化物(21g,95mmol)的DMSO(300mL)溶液中添加氢化钠(3.68g,153.35mmol)。30分钟后，添加(2E)-3-[1-(噁烷-2-基)-1H-吡唑-4-基]丙-2-烯酸乙基酯(20.0g,79.9mmol)，且将所得溶液保持在25℃16小时。用水稀释该反应，且该溶液经乙酸乙酯萃取。浓缩所收集的有机层。经快速柱色谱提纯(99:1二氯甲烷/甲醇)，得到反式-2-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-4-基)环丙烷甲酸乙基酯(5.7g,27％)，其为黄色油状物。LCMS(ESI):[M+H]+＝265.3。
步骤4：(1S,2S)-2-(1H-吡唑-4-基)环丙烷甲酸乙基酯
Figure BDA0002289356600005763
在25℃，将反式-2-(1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吡唑-4-基)环丙烷甲酸乙基酯(5.7g,21.6mmol)的三氟乙酸(10mL)和二氯甲烷(50mL)溶液搅拌3小时。浓缩该反应，且所得残余物经快速柱色谱提纯(97:3二氯甲烷/甲醇)，得到反式-2-(1H-吡唑-4-基)环丙烷甲酸乙基酯(2.4g,62％)，其为黄色油状物。LCMS(ESI):[M+H]+＝181.2。
步骤5：N-[2-[2-(甲磺酰基氧基)乙氧基]乙基]氨基甲酸叔丁基酯
Figure BDA0002289356600005764
向冰冷却的N-[2-(2-羟基乙氧基)乙基]氨基甲酸叔丁基酯(12.0g,58.5mmol)和三乙胺(17.8g,175mmol)的二氯甲烷(100mL)溶液中添加MsCl(10.05g,87.73mmol)。15分钟后，用H2O洗涤该反应混合物。该水性层经二氯甲烷萃取。在真空下浓缩该合并的有机层，得到粗的N-[2-[2-(甲磺酰基氧基)乙氧基]乙基]氨基甲酸叔丁基酯(20g)，其为黄色油状物。
步骤6：反式-乙基-2-[1-[2-(2-[[(叔丁基氧基)羰基]氨基]乙氧基)乙基]-1H-吡 唑-4-基]环丙烷-1-甲酸酯
Figure BDA0002289356600005771
将N-[2-[2-(甲磺酰基氧基)乙氧基]乙基]氨基甲酸叔丁基酯(16.04g,56.61mmol)、反式-乙基-2-(1H-吡唑-4-基)环丙烷-1-甲酸酯(6.80g,37.7mmol)、Cs2CO3(12.29g,37.72mmol)和N,N-二甲基甲酰胺(120mL)的悬浮液在80℃加热。4小时后，所得混合物经水稀释。该水溶液经乙酸乙酯萃取，且浓缩该合并的有机萃取物。经快速柱色谱提纯(96:4二氯甲烷/甲醇)，得到反式-乙基-2-[1-[2-(2-[[(叔丁基氧基)羰基]氨基]乙氧基)乙基]-1H-吡唑-4-基]环丙烷-1-甲酸酯(12.2g,88％)，其为黄色油状物。LCMS(ESI):[M+H]+＝368.4。
步骤7：反式-2-[1-[2-(2-[[(叔丁基氧基)羰基]氨基]乙氧基)乙基]-1H-吡唑-4- 基]环丙烷-1-甲酸
Figure BDA0002289356600005772
在25℃，向反式-乙基-2-[1-[2-(2-[[(叔丁基氧基)羰基]氨基]乙氧基)乙基]-1H-吡唑-4-基]环丙烷-1-甲酸酯(12.2g,33.2mmol)的四氢呋喃(100mL)/乙醇(100mL)/水(40mL)溶液中添加LiOH·H2O(9.75g,232mmol)。16小时后，用H2O洗涤该反应混合物。用二氯甲烷洗涤该水溶液。用12％的氯化氢水溶液将水相酸化至pH＝5。该酸性溶液经乙酸乙酯萃取，且浓缩萃取物，得到粗的反式-2-[1-[2-(2-[[(叔丁基氧基)羰基]氨基]乙氧基)乙基]-1H-吡唑-4-基]环丙烷-1-甲酸(4g,35％)，其为黄色油状物。LCMS(ESI):[M-H]-＝338.1。
步骤8：2-(2-(4-((1S,2S)-2-(8-(双(2,4-二甲氧基苄基)氨基)-6-(4-甲基吡啶- 3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基氨基甲酰基)环丙基)-1H-吡唑-1-基)乙氧基)乙基氨基甲酸叔 丁基酯
在室温，将1-N,1-N-双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]-3-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-1,6-二胺(55mg,0.10mmol)、反式-2-[1-[2-(2-[[(叔丁基氧基)羰基]氨基]乙氧基)乙基]-1H-吡唑-4-基]环丙烷-1-甲酸(0.040g,0.12mmol)、吡啶(1mL)和POCl3(30mg,0.196mmol)在二氯甲烷(5mL)中的混合物搅拌30分钟。然后，用水稀释该反应，且所得溶液经乙酸乙酯萃取。浓缩该合并的有机物，并经快速柱色谱提纯(10:1二氯甲烷/甲醇)，得到反式-2-(2-(4-(2-(8-(双(2,4-二甲氧基苄基)氨基)-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基氨基甲酰基)环丙基)-1H-吡唑-1-基)乙氧基)乙基氨基甲酸叔丁基酯(60mg)，其为黄色固体。LCMS(ESI):[M-H]-＝873.6。
步骤9：(1S,2S)-N-[8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-[1- [2-(2-氨基乙氧基)乙基]-1H-吡唑-4-基]环丙烷-1-甲酰胺和(1R,2R)-N-[8-氨基-6-(4- 甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-[1-[2-(2-氨基乙氧基)乙基]-1H-吡唑-4-基]环 丙烷-1-甲酰胺
Figure BDA0002289356600005782
在25℃，将N-[2-(2-[4-[(1S,2S)-2-[(8-[双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)氨基甲酰基]环丙基]-1H-吡唑-1-基]乙氧基)乙基]氨基甲酸叔丁基酯(0.20g,0.23mmol)的三氟乙酸(4mL)和二氯甲烷(4mL)溶液搅拌6小时。在真空下浓缩所得混合物，且该粗产物经制备型HPLC提纯后经手性SFC提纯，得到该标题化合物。化合物292：LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.94，[M+H]+＝473.3，方法＝K-1；1H NMR(400MHz,CD3OD)δ9.30(s,1H),8.54(s,1H),8.44(d,J＝5.1Hz,1H),8.33(s,1H),7.61(s,1H),7.48-7.36(m,2H),6.99(m,1H),4.30-4.28(m,2H),3.82-3.80(m,2H),3.66-3.49(m,2H),2.85-2.82(m,2H),2.46(s,3H),2.42-2.37(m,1H),2.14-2.10(m,1H),1.61-1.56(m,1H),1.29-1.26(m,1H)。化合物293：LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.94，[M+H]+＝473.2，方法＝K-1；1H NMR(400MHz,CD3OD)δ9.30(s,1H),8.54(s,1H),8.44(d,J＝5.1Hz,1H),8.33(s,1H),7.61(s,1H),7.48-7.36(m,2H),6.99(m,1H),4.30-4.28(m,2H),3.82-3.80(m,2H),3.66-3.49(m,2H),2.85-2.82(m,2H),2.46(s,3H),2.42-2.37(m,1H),2.14-2.10(m,1H),1.61-1.56(m,1H),1.29-1.26(m,1H)。
实施例224：
(1S,3r,5R,6r)-N-(8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-3-(3- 甲氧基氮杂环丁烷-1-基)双环[3.1.0]己烷-6-甲酰胺(化合物294)
Figure BDA0002289356600005791
步骤1：(1S,3r,5R,6r)-N-(8-(2,4-二甲氧基苄基氨基)-6-(4-甲基吡啶-3-基)- 2,7-二氮杂萘-3-基)-3-(3-甲氧基氮杂环丁烷-1-基)双环[3.1.0]己烷-6-甲酰胺
Figure BDA0002289356600005792
将(1R,5S,6R)-N-(8-[双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-3-氧代双环[3.1.0]己烷-6-甲酰胺(0.20g,0.29mmol)(参见实施例226)、3-甲氧基氮杂环丁烷盐酸盐(183mg,1.48mmol)、NaBH3CN(55.96mg,0.89mmol)和AcOH(0.89mg,0.01mmol)在甲醇(10mL)中的混合物在60℃加热。16小时后，将该反应混合物浓缩，且所得残余物经硅胶色谱提纯(92:8二氯甲烷/甲醇)，得到(1R,3r,5S,6S)-N-[8-[(2,4-二甲氧基苯基)氨基]-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-3-(3-甲氧基氮杂环丁烷-1-基)双环[3.1.0]己烷-6-甲酰胺(0.20g)，其为黄色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝595.4。
步骤2：(1S,3r,5R,6r)-N-(8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)- 3-(3-甲氧基氮杂环丁烷-1-基)双环[3.1.0]己烷-6-甲酰胺
Figure BDA0002289356600005801
在25℃，将(1R,3r,5S,6S)-N-(8-[[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-3-(3-甲氧基氮杂环丁烷-1-基)双环[3.1.0]己烷-6-甲酰胺(0.20g,0.33mmol)的三氟乙酸(10mL)/二氯甲烷(5mL)溶液搅拌6小时。将该反应混合物浓缩，且该粗产物经制备型HPLC提纯，得到(1R,3r,5S,6S)-N-[8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-3-(3-甲氧基氮杂环丁烷-1-基)双环[3.1.0]己烷-6-甲酰胺的甲酸盐(4.4mg,3％)，其为灰白色固体。LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.91，[M+H]+＝445.2，方法＝K-1；1H NMR(400MHz,CD3OD)δ9.29(s,1H),8.53(s,1H),8.44(d,J＝5.1Hz,1H),8.26(s,1H),7.40(d,J＝5.1Hz,1H),6.97(s,1H),4.08-4.02(m,1H),3.69-3.49(m,2H),3.32(s,3H),3.24(s,1H),3.18-3.07(m,2H),2.46(s,3H),2.30(t,J＝3.0Hz,1H),2.18-2.16(m,2H),2.01-1.92(m,2H),1.73-1.69(m,2H)。
实施例225：
(1S,2S)-N-[8-氨基-6-(2,6-二氯苯基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-[1-[2-(2-氨基 乙氧基)乙基]-1H-吡唑-4-基]环丙烷-1-甲酰胺(化合物295)和(1R,2R)-N-[8-氨基-6-(2, 6-二氯苯基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-[1-[2-(2-氨基乙氧基)乙基]-1H-吡唑-4-基]环丙 烷-1-甲酰胺(化合物296)
Figure BDA0002289356600005802
步骤1：N-[2-(2-[4-[(1S,2S)-2-[(6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-基)氨基甲酰基] 环丙基]-1H-吡唑-1-基]乙氧基)乙基]氨基甲酸2-羟基丙-2-基酯
Figure BDA0002289356600005811
向冰冷却的反式-2-[1-[2-(2-[[(叔丁基氧基)羰基]氨基]乙氧基)乙基]-1H-吡唑-4-基]环丙烷-1-甲酸(1.73g,5.09mmol)、6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-胺(1.28g,5.98mmol)和吡啶(5mL)的二氯甲烷(25mL)溶液中添加POCl3(2.34g,15.26mmol)。将所得溶液温热至室温30分钟。缓慢用水稀释该反应，且该水溶液经乙酸乙酯萃取。所收集的有机物在真空下浓缩，且该残余物经硅胶色谱提纯(10:1二氯甲烷/甲醇)，得到反式-N-[2-(2-[4-[2-[(6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-基)氨基甲酰基]环丙基]-1H-吡唑-1-基]乙氧基)乙基]氨基甲酸2-羟基丙-2-基酯(2.0g,73％)，其为淡黄色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝535.4。
步骤2：反式-N-[2-(2-[4-[2-[(8-[双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-氯-2, 7-二氮杂萘-3-基)氨基甲酰基]环丙基]-1H-吡唑-1-基]乙氧基)乙基]氨基甲酸叔丁基酯
Figure BDA0002289356600005812
将反式-N-[2-(2-[4-[2-[(6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-基)氨基甲酰基]环丙基]-1H-吡唑-1-基]乙氧基)乙基]氨基甲酸叔丁基酯(2.0g,3.73mmol)、双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]胺(4.74g,14.9mmol)和三乙胺(1.89g,18.7mmol)在二噁烷(40mL)中的混合物在110℃加热。在12小时后，浓缩该反应，且所得残余物经硅胶色谱提纯(10:1二氯甲烷/甲醇)，得到反式-N-[2-(2-[4-[2-[(8-[双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)氨基甲酰基]环丙基]-1H-吡唑-1-基]乙氧基)乙基]氨基甲酸叔丁基酯(2.5g,82％)，其为淡黄色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝816.3。
步骤3：反式-2-(2-(4-(2-(8-(双(2,4-二甲氧基苄基)氨基)-6-(2,6-二氯苯基)- 2,7-二氮杂萘-3-基氨基甲酰基)环丙基)-1H-吡唑-1-基)乙氧基)乙基氨基甲酸叔丁基酯
Figure BDA0002289356600005821
在氮气中，将反式-N-[2-(2-[4-[2-[(8-[双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)氨基甲酰基]环丙基]-1H-吡唑-1-基]乙氧基)乙基]氨基甲酸叔丁基酯(2.28g,2.79mmol)、(2,6-二氯苯基)硼酸(6.39g,33.48mmol)、Pd(PPh3)4(645mg,0.55mmol)和碳酸氢钠(2.81g,33.45mmol)在乙醇(60mL)/水(6mL)/甲苯(60mL)中的混合物在100℃加热。在12小时后，浓缩该反应，且所得残余物经硅胶色谱提纯(10:1二氯甲烷/甲醇)，得到2-(2-(4-((1S,2S)-2-(8-(双(2,4-二甲氧基苄基)氨基)-6-(2,6-二氯苯基)-2,7-二氮杂萘-3-基氨基甲酰基)环丙基)-1H-吡唑-1-基)乙氧基)乙基氨基甲酸叔丁基酯(2.0g,77％)，其为棕色油状物。LCMS(ESI):[M+H]+＝926.9。
步骤4：(1S,2S)-N-[8-氨基-6-(2,6-二氯苯基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-[1-[2- (2-氨基乙氧基)乙基]-1H-吡唑-4-基]环丙烷-1-甲酰胺和(1R,2R)-N-[8-氨基-6-(2,6-二 氯苯基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-[1-[2-(2-氨基乙氧基)乙基]-1H-吡唑-4-基]环丙烷-1- 甲酰胺
在80℃加热反式-N-[2-(2-[4-[2-[(8-[双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-(2,6-二氯苯基)-2,7-二氮杂萘-3-基)氨基甲酰基]环丙基]-1H-吡唑-1-基]乙氧基)乙基]氨基甲酸叔丁基酯(2.55g,2.75mmol)的三氟乙酸(10mL)溶液。20分钟后，在真空下浓缩该混合物，且用二氯甲烷稀释所得残余物。该溶液用7M NH3/甲醇碱化至pH＝8并浓缩。经制备型HPLC提纯，然后用手性SFC提纯，得到该标题化合物。化合物295：LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.43，[M+H]+＝526.1，方法＝K-1；1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ10.98(s,1H),9.38(s,1H),8.23(s,1H),7.62(s,1H),7.58-7.55(m,2H),7.48-7.42(m,3H),7.32(s,1H),6.80(s,1H),4.19(t,J＝6.0Hz,2H),3.71(t,J＝6.0Hz,2H),3.35-3.26(m,2H),2.62(t,J＝6.0Hz,2H),2.22(t,J＝6.0Hz,2H),2.00-1.80(m,2H),1.42-1.36(m,1H),1.24-1.17(m,1H)。化合物296：LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.43，[M+H]+＝526.1，方法＝K-1；1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ10.98(s,1H),9.38(s,1H),8.23(s,1H),7.62(s,1H),7.58-7.55(m,2H),7.48-7.42(m,3H),7.32(s,1H),6.80(s,1H),4.19(t,J＝6.0Hz,2H),3.71(t,J＝6.0Hz,2H),3.35-3.26(m,2H),2.62(t,J＝6.0Hz,2H),2.22(t,J＝6.0Hz,2H),2.00-1.80(m,2H),1.42-1.36(m,1H),1.24-1.17(m,1H)。
实施例226：
(外型)-N-[8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-3-(吗啉-4-基) 双环[3.1.0]己烷-6-甲酰胺(化合物297)
Figure BDA0002289356600005831
步骤1：(外型)-3-[(叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基]双环[3.1.0]己烷-6-甲酸
Figure BDA0002289356600005832
在25℃，向(外型)-3-[(叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基]双环[3.1.0]己烷-6-甲酸乙基酯(3.20g,7.83mmol)的乙醇(30mL)和水(30mL)溶液中添加氢氧化钠(1.88g,47.0mmol)，6小时后，在真空中除去有机物。所剩的水溶液用乙酸乙酯洗涤。用浓盐酸将该水溶液酸化至pH＝3，并在真空下浓缩，得到粗的(外型)-3-[(叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基]双环[3.1.0]己烷-6-甲酸(3g)，其为白色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝379.2。
步骤2：(外型)-3-[(叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基]-N-(6,8-二氯-2,7-二氮杂萘- 3-基)双环[3.1.0]己烷-6-甲酰胺
Figure BDA0002289356600005833
在25℃，将(外型)-3-[(叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基]双环[3.1.0]己烷-6-甲酸(3.00g,7.88mmol)、6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-胺(1.69g,7.90mmol)、POCl3(3.63g,23.67mmol)和吡啶(4mL)在二氯甲烷(40mL)中的混合物搅拌30分钟。用水缓慢稀释该反应，且所得混合物经二氯甲烷萃取。浓缩该有机萃取物，且所得残余物经硅胶色谱提纯(1:9乙酸乙酯/石油醚)，得到(1R,5S,6R)-3-[(叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基]-N-(6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-基)双环[3.1.0]己烷-6-甲酰胺(3.7g,81％)，其为黄色油状物。LCMS(ESI):[M+H]+＝576.3。
步骤3：(外型)-N-(8-[双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-氯-2,7-二氮杂萘- 3-基)-3-[(叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基]双环[3.1.0]己烷-6-甲酰胺
Figure BDA0002289356600005841
将(外型)-3-[(叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基]-N-(6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-基)双环[3.1.0]己烷-6-甲酰胺(3.60g,6.24mmol)、双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]胺(7.93g,25.0mmol)、三乙胺(3.16g,31.2mmol)和二噁烷(100mL)的混合物在110℃加热。16小时后，浓缩该反应，且所得残余物经硅胶色谱提纯(3:7乙酸乙酯/石油醚)，得到(外型)-N-(8-[双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-3-[(叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基]双环[3.1.0]己烷-6-甲酰胺(4.0g,75％)，其为黄色油状物。LCMS(ESI):[M+H]+＝857.5。
步骤4：(外型)-N-(8-[双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-(4-甲基吡啶-3- 基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-3-[(叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基]双环[3.1.0]己烷-6-甲酰胺
Figure BDA0002289356600005842
向(外型)-N-(8-[双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-3-[(叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基]双环[3.1.0]己烷-6-甲酰胺(4.0g,4.7mmol)的二噁烷(50mL)/水(8mL)溶液中添加(4-甲基吡啶-3-基)硼酸(1.15g,8.40mmol)、Xphos钯(II)联苯-2-胺氯化物(730mg,0.93mmol)、Xphos(670mg,1.41mmol)和KOAc(1.60g,16.3mmol)。在氮气中，将所得溶液在100℃加热。2小时后，过滤该反应，且在真空下浓缩该滤液。经硅胶色谱提纯(20:1二氯甲烷/甲醇)，得到(外型)-N-(8-[双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-3-[(叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基]双环[3.1.0]己烷-6-甲酰胺(4g,94％)，其为黄色油状物。LCMS(ESI):[M+H]+＝913.5。
步骤5：(外型)-N-(8-[双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-(4-甲基吡啶-3- 基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-3-羟基双环[3.1.0]己烷-6-甲酰胺
Figure BDA0002289356600005851
在25℃，向(外型)-N-(8-[双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-3-[(叔丁基二苯基甲硅烷基)氧基]双环[3.1.0]己烷-6-甲酰胺(3.2g,3.5mmol)的四氢呋喃(40mL)溶液中添加TBAF三水合物(5.5g,17.5mmol)。在4小时后，该反应经水稀释，且所得溶液经二氯甲烷萃取。该合并的有机物用饱和氯化钠水溶液洗涤，经Na2SO4干燥，过滤，并在真空下浓缩。经硅胶提纯(10:1二氯甲烷/甲醇)，得到(1R,5S,6R)-N-(8-[双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-3-羟基双环[3.1.0]己烷-6-甲酰胺(2.1g,89％)，其为淡黄色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝676.4。
步骤6：(外型)-N-(8-[双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-(4-甲基吡啶-3- 基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-3-氧代双环[3.1.0]己烷-6-甲酰胺
Figure BDA0002289356600005852
在室温，向(外型)-N-(8-[双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-3-羟基双环[3.1.0]己烷-6-甲酰胺(0.80g,1.18mmol)的二氯甲烷(20mL)溶液中添加戴斯马丁高碘烷(3.51g,8.29mmol)。将所得溶液温热至45℃。3小时后，在真空下浓缩该反应，且所得残余物经硅胶色谱提纯(95:5二氯甲烷/甲醇)，得到(外型)-N-(8-[双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-3-氧代双环[3.1.0]己烷-6-甲酰胺(0.80g)，其为黄色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝674.4。
步骤7：(外型)-N-(8-[双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-(4-甲基吡啶-3- 基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-3-(吗啉-4-基)双环[3.1.0]己烷-6-甲酰胺
Figure BDA0002289356600005861
在60℃，加热(外型)-N-(8-[双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-3-氧代双环[3.1.0]己烷-6-甲酰胺(0.20g,0.30mmol)、吗啉(129mg,1.48mmol)、NaBH3CN(56mg,0.89mmol)和AcOH(0.89mg,0.02mmol)在甲醇(10mL)中的混合物。6小时后，在真空下浓缩该反应，且所得残余物经硅胶色谱提纯(95:5二氯甲烷/甲醇)，得到(外型)-N-(8-[双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-3-(吗啉-4-基)双环[3.1.0]己烷-6-甲酰胺(0.20g,90％)，其为黄色油状物。LCMS(ESI):[M+H]+＝745.5。
步骤8：(外型)-N-[8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-3-(吗 啉-4-基)双环[3.1.0]己烷-6-甲酰胺
Figure BDA0002289356600005862
在25℃，将(外型)-N-(8-[双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-3-(吗啉-4-基)双环[3.1.0]己烷-6-甲酰胺(0.20g,0.27mmol)的三氟乙酸(10mL)和二氯甲烷(10mL)溶液搅拌6小时。在真空下浓缩所得混合物。该粗产物经制备型HPLC提纯，得到(外型)-N-[8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-3-(吗啉-4-基)双环[3.1.0]己烷-6-甲酰胺(17.2mg,14％)，其为灰白色固体。LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.75，[M+H]+＝445.2，方法＝K-1；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.87(s,1H),9.37(s,1H),8.56(s,1H),8.43(d,J＝5.1Hz,1H),8.21(s,1H),7.31(d,J＝5.3Hz,3H),6.95(s,1H),3.59-3.57(m,4H),2.89-2.72(m,1H),2.41(s,3H),2.32(d,J＝5.5Hz,4H),2.16-2.06(m,3H),1.77-1.74(m,2H),1.59-1.56(m,2H)。
实施例227：
(1R,2R)-N-[8-氨基-6-(2-甲基苯基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-(1-甲基-1H-吡 唑-4-基)环丙烷-1-甲酰胺(化合物298)和(1S,2S)-N-[8-氨基-6-(2-甲基苯基)-2,7-二氮 杂萘-3-基]-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)环丙烷-1-甲酰胺(化合物299)
Figure BDA0002289356600005871
向反式-N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)环丙烷-1-甲酰胺(0.10g,0.29mmol)的二噁烷(5mL)和水(1mL)溶液中添加(2-甲基苯基)硼酸(0.060g,0.44mmol)、Pd(PPh3)4(68mg,0.06mmol)和K3PO4(186mg,0.87mmol)。在100℃、在氮气中，搅拌加热该溶液。在12小时后，在真空下浓缩该反应，且该粗产物经制备型HPLC提纯，得到反式-N-[8-氨基-6-(2-甲基苯基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)环丙烷-1-甲酰胺(50mg,43％)，其为白色固体。通过手性SFC分离对映异构体。化合物298：LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.33[M+H]+＝399.1，方法＝K-1；1H NMR(400MHz,CD3OD)δ9.28(s,1H),8.29(s,1H),7.51(s,1H),7.41-7.35(m,2H),7.35-7.25(m,3H),6.89(d,J＝0.9Hz,1H),3.86(s,3H),2.41-2.37(m,1H),2.36(s,3H),2.14-2.09(m,1H),1.60-1.55(m,1H),1.33-1.23(m,1H)。化合物299：LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.84[M+H]+＝399.1，方法＝K；1H NMR(400MHz,CD3OD)δ9.28(s,1H),8.29(s,1H),7.51(s,1H),7.41-7.35(m,2H),7.35-7.25(m,3H),6.89(d,J＝0.9Hz,1H),3.86(s,3H),2.41-2.37(m,1H),2.36(s,3H),2.14-2.09(m,1H),1.60-1.55(m,1H),1.33-1.23(m,1H)。
实施例228：
(1R,2R)-N-[8-氨基-6-(5-氰基-2-甲基苯基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-(1-甲基- 1H-吡唑-4-基)环丙烷-1-甲酰胺(化合物300)和(1S,2S)-N-[8-氨基-6-(5-氰基-2-甲基苯 基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)环丙烷-1-甲酰胺(化合物301)
向反式-N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)环丙烷-1-甲酰胺(0.15g,0.44mmol)的二噁烷中(5mL)和水(1mL)溶液中添加4-甲基-3-(四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯甲腈(532mg,2.19mmol)、Cs2CO3(428mg,1.31mmol)、Xphos(21mg,0.04mmol)和XPhos-PdCl-2ndG(33mg,0.04mmol)。在100℃、在氮气中加热该混合物。12小时后，在真空下浓缩该溶液，且该粗产物经制备型HPLC提纯，得到反式-N-[8-氨基-6-(5-氰基-2-甲基苯基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)环丙烷-1-甲酰胺(68mg,37％)，其为黄色固体。通过手性SFC分离对映异构体。化合物300：LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.33[M+H]+＝424.2，方法＝K-1；1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ10.97(s,1H),9.38(s,1H),8.27(s,1H),7.87(s,1H),7.77(d,J＝9.0Hz,1H),7.58(s,1H),7.52(d,J＝9.0Hz,1H),7.35(s,2H),7.31(s,1H),6.99(s,1H),3.77(s,3H),2.46(s,3H),2.24-2.20(m,2H),1.43-1.37(m,1H),1.23-1.18(m,1H)。化合物301：LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.33，[M+H]+＝424.2，方法＝K；1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ10.97(s,1H),9.38(s,1H),8.27(s,1H),7.87(s,1H),7.77(d,J＝9.0Hz,1H),7.58(s,1H),7.52(d,J＝9.0Hz,1H),7.35(s,2H),7.31(s,1H),6.99(s,1H),3.77(s,3H),2.46(s,3H),2.24-2.20(m,2H),1.43-1.37(m,1H),1.23-1.18(m,1H)。
实施例229：
(1R,2R)-N-(8-氨基-6-(2-氯-6-氟苯基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(1-甲基-1H- 吡唑-4-基)环丙烷甲酰胺(化合物302)和(1S,2S)-N-(8-氨基-6-(2-氯-6-氟苯基)-2,7-二 氮杂萘-3-基)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)环丙烷甲酰胺(化合物303)
Figure BDA0002289356600005882
在25℃、在氮气中，将KHF2(91mg,1.17mmol)、(2-氯-6-氟苯基)硼酸(122mg,0.70mmol)在水中(1.5mL)和叔丁醇(6mL)中的混合物搅拌15分钟。将反式-N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)环丙烷-1-甲酰胺(0.20g,0.58mmol)、Pd(PPh3)4(68mg,0.06mmol)和K3PO4(149mg,0.70mmol)的混合物添加上述溶液中，且在氮气中将该合并的混合物加热至120℃。45分钟后，在真空下浓缩该反应，且该粗产物经制备型HPLC提纯，得到反式-N-[8-氨基-6-(2-氯-6-氟苯基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)环丙烷-1-甲酰胺(50mg,20％)，其为白色固体。通过手性SFC分离对映异构体。化合物302：LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.34，[M+H]+＝437.2，方法＝K-1；1H NMR(400MHz,CD3OD)δ9.55(s,1H),8.55(s,1H),7.68-7.62(m,1H),7.55-7.51(m,2H),7.40-7.33(m,2H),7.24(s,1H),3.86(s,3H),2.45-2.39(m,1H),2.18-2.12(m,1H),1.63-1.58(m,1H),1.34-1.27(m,1H)。化合物303：LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.35，[M+H]+＝437.2，方法＝K-1；1H NMR(400MHz,CD3OD)δ9.55(s,1H),8.55(s,1H),7.68-7.62(m,1H),7.55-7.51(m,2H),7.40-7.33(m,2H),7.24(s,1H),3.86(s,3H),2.45-2.39(m,1H),2.18-2.12(m,1H),1.63-1.58(m,1H),1.34-1.27(m,1H)。
实施例230：
(1S,2S)-N-[8-氨基-6-(2-氯苯基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-(1-甲基-1H-吡唑- 4-基)环丙烷-1-甲酰胺(化合物304)和(1R,2R)-N-[8-氨基-6-(2-氯苯基)-2,7-二氮杂萘- 3-基]-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)环丙烷-1-甲酰胺(化合物305)
在100℃、在氮气中，加热反式-N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)环丙烷-1-甲酰胺(190mg,0.55mmol)、(2-氯苯基)硼酸(433mg,2.76mmol)、Pd(PPh3)4(63mg,0.06mmol)和碳酸钾(117mg,0.84mmol)在二噁烷(3mL)/水(0.3mL)中的悬浮液。3小时后，在真空下浓缩该反应，且所得残余物经制备型HPLC提纯，得到反式-N-[8-氨基-6-(2-氯苯基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)环丙烷-1-甲酰胺(60mg,23％)，其为淡黄色固体。通过手性SFC分离对映异构体。化合物304：LCMS(ESI):RT(分钟)＝0.95，[M+H]+＝419，方法＝K-1；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.98(s,1H),9.39(s,1H),8.25(s,1H),7.61-7.54(m,3H),7.45-7.42(m,2H),7.35(s,2H),7.31(s,1H),7.00(s,1H),3.78(s,3H),2.24-2.18(m,2H),1.14-1.37(m,1H),1.24-1.17(m,1H)。化合物305：LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.31[M+H]+＝419，方法＝K-1；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.98(s,1H),9.39(s,1H),8.25(s,1H),7.61-7.54(m,3H),7.45-7.42(m,2H),7.35(s,2H),7.31(s,1H),7.00(s,1H),3.78(s,3H),2.24-2.18(m,2H),1.14-1.37(m,1H),1.24-1.17(m,1H)。
实施例231：
(1S,2S)-N-[8-氨基-6-(2,6-二氟苯基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-(1-甲基-1H-吡 唑-4-基)环丙烷-1-甲酰胺(化合物306)和(1R,2R)-N-[8-氨基-6-(2,6-二氟苯基)-2,7-二 氮杂萘-3-基]-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)环丙烷-1-甲酰胺(化合物307)
Figure BDA0002289356600005901
在氮气中，将反式-N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)环丙烷-1-甲酰胺(455mg,1.32mmol)、(2,6-二氟苯基)硼酸(0.20g,1.26mmol)、X-phos(27mg,0.08mmol)、Xphos钯(II)联苯-2-胺氯化物(45mg,0.05mmol)和AcOK(171mg,1.74mmol)在二噁烷(5mL)/水(0.5mL)中的混合物在110℃加热。3小时后，在真空下浓缩该反应，且所得残余物经制备型HPLC提纯，得到外消旋的(反式)-N-[8-氨基-6-(2,6-二氟苯基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)环丙烷-1-甲酰胺(60mg,11％)，其为淡黄色固体。通过手性SFC分离对映异构体。化合物306：LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.280，[M+H]+＝421，方法＝K-1；1H NMR(400MHz,CD3OD)δ9.30(s,1H),8.31(s,1H),7.52-7.44(m,2H),7.37(s,1H),7.13-7.05(m,2H),6.99(s,1H),3.02(s,3H),2.41-2.34(m,1H),2.13-2.10(m,1H),1.61-1.56(m,1H),1.29-1.25(m,1H)。化合物307：LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.272，[M+H]+＝421，方法＝K-1；1H NMR(400MHz,CD3OD)δ9.30(s,1H),8.31(s,1H),7.52-7.44(m,2H),7.37(s,1H),7.13-7.05(m,2H),6.99(s,1H),3.02(s,3H),2.41-2.34(m,1H),2.13-2.10(m,1H),1.61-1.56(m,1H),1.29-1.25(m,1H)。
实施例232：
(1S,2S)-N-[8-氨基-6-[4-甲基-6-(1,3-噁唑-2-基)吡啶-3-基]-2,7-二氮杂萘- 3-基]-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)环丙烷-1-甲酰胺(化合物308)和(1R,2R)-N-[8-氨基-6- [4-甲基-6-(1,3-噁唑-2-基)吡啶-3-基]-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-(1-甲基-1H-吡唑-4- 基)环丙烷-1-甲酰胺(化合物309)
步骤1：5-溴-4-甲基-2-(1,3-噁唑-2-基)吡啶
Figure BDA0002289356600005912
在氮气中，将2,5-二溴-4-甲基吡啶(0.60g,2.39mmol)、2-(三丁基甲锡烷基)-1,3-噁唑(1.02g,2.86mmol)和Pd(PPh3)4(276.32mg,0.23mmol)在二噁烷中(15mL)的混合物在90℃加热。16小时后，在真空下浓缩该混合物，且所得残余物经快速柱色谱提纯(1:3乙酸乙酯/石油醚)，得到5-溴-4-甲基-2-(1,3-噁唑-2-基)吡啶(0.20g,35％)，其为淡黄色固体。LCMS(ESI)[M+H]+＝239.0。
步骤2：4-甲基-2-(1,3-噁唑-2-基)-5-(四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基) 吡啶
Figure BDA0002289356600005913
在氮气中，将5-溴-4-甲基-2-(1,3-噁唑-2-基)吡啶(0.10g,0.41mmol)，4,4,5,5-四甲基-2-(四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷(1.06g,4.18mmol)、Pd(dppf)Cl2(31mg,0.04mmol)和KOAc(103mg,1.05mmol)在二噁烷中(5mL)的混合物在90℃加热。2小时后，过滤该固体，且在真空下浓缩该滤液，得到粗的4-甲基-2-(1,3-噁唑-2-基)-5-(四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡啶(0.10g)，其为白色固体。LCMS(ESI)[M+H]+＝287.0。
步骤3：(1R,2R)-N-[8-氨基-6-[4-甲基-6-(1,3-噁唑-2-基)吡啶-3-基]-2,7-二 氮杂萘-3-基]-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)环丙烷-1-甲酰胺和(1S,2S)-N-[8-氨基-6-[4- 甲基-6-(1,3-噁唑-2-基)吡啶-3-基]-2,7-二氮杂萘-3-基]2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)环 丙烷-1-甲酰胺
Figure BDA0002289356600005921
在氮气中，将4-甲基-2-(1,3-噁唑-2-基)-5-(四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡啶(167mg,0.58mmol)、反式-N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)环丙烷-1-甲酰胺(0.10g,0.29mmol)、第二代XPhos预催化剂(22mg,0.028mmol)、X-phos(13mg,0.03mmol)和碳酸钾(80mg,0.57mmol)在水(1mL)/二噁烷(5mL)中的混合物在90℃加热。2小时后，在真空下浓缩该混合物，且该粗产物经制备型HPLC提纯，得到外消旋的(反式)-N-[8-氨基-6-[4-甲基-6-(1,3-噁唑-2-基)吡啶-3-基]-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)环丙烷-1-甲酰胺(45mg,17％)，其为棕色固体。用手性制备型HPLC分离该对映异构体。化合物308：LCMS(ESI):[M+H]+＝467，RT(分钟)＝1.272，方法＝K-1；1H NMR(400MHz,CD3OD)δ9.33(s,1H),8.70(s,1H),8.38(s,1H),8.15-8.14(m,2H),7.51(s,1H),7.45-7.44(m,1H),7.38(s,1H),7.09(s,1H),3.86(s,3H),2.57(s,3H),2.42-2.37(m,1H),2.14-2.10(m,1H),1.61-1.56(m,1H),1.34-1.25(m,1H)。化合物309：LCMS(ESI):[M+H]+＝467，RT(分钟)＝1.280，方法＝K-1；1H NMR(400MHz,CD3OD)δ9.33(s,1H),8.70(s,1H),8.38(s,1H),8.15-8.14(m,2H),7.51(s,1H),7.45-7.44(m,1H),7.38(s,1H),7.09(s,1H),3.86(s,3H),2.57(s,3H),2.42-2.37(m,1H),2.14-2.10(m,1H),1.61-1.56(m,1H),1.34-1.25(m,1H)。
实施例233：
(1S,2R)-N-(8-氨基-6-(2,6-二氯苯基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(氰基甲基)环 丙烷甲酰胺(化合物310)和(1R,2S)-N-(8-氨基-6-(2,6-二氯苯基)-2,7-二氮杂萘-3-基)- 2-(氰基甲基)环丙烷甲酰胺(化合物311)
在氮气中，将反式-N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(氰基甲基)环丙烷-1-甲酰胺(160mg,2.7mmol)、(2,6-二氯苯基)硼酸(2.52g,13.2mmol)、Pd(PPh3)4(310mg,0.23mmol)和碳酸氢钠(1.12g,13.30mmol)在水(2mL)/乙醇(20mL)/甲苯(20mL)中的混合物在110℃加热。在15小时后，过滤该固体，且在真空下浓缩该滤液。该粗产物经制备型HPLC提纯，得到外消旋产物(110mg,10％)，其为白色固体。通过手性SFC分离对映异构体。化合物310：LCMS(ESI):RT＝2.46分钟，[M+H]+＝412.1，方法＝K-1；1H NMR(400MHz,CD3OD)δ9.33(s,1H),8.29(s,1H),7.56-7.48(m,2H),7.42(dd,J＝8.0,8.0Hz,1H),6.86(s,1H),2.79-2.64(m,2H),2.03(m,1H),1.81-1.70(m,1H),1.35(m,1H),1.06(m,1H)。化合物311：LCMS(ESI):RT＝1.37分钟，[M+H]+＝412.1，方法＝K-1；1H NMR(400MHz,CD3OD)δ9.33(s,1H),8.29(s,1H),7.56-7.48(m,2H),7.42(dd,J＝8.0,8.0Hz,1H),6.86(s,1H),2.79-2.64(m,2H),2.03(m,1H),1.81-1.70(m,1H),1.35(m,1H),1.06(m,1H)。
实施例234：
(1R,3R)-N-[8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-5-氧代-6-氮 杂螺[2.5]辛烷-1-甲酰胺(化合物315)、(1S,3S)-N-[8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 二氮杂萘-3-基]-5-氧代-6-氮杂螺[2.5]辛烷-1-甲酰胺(化合物314)、(1S,3R)-N-[8-氨 基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-5-氧代-6-氮杂螺[2.5]辛烷-1-甲酰胺 (化合物313)和(1R,3S)-N-[8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-5-氧代- 6-氮杂螺[2.5]辛烷-1-甲酰胺(化合物312)
Figure BDA0002289356600005932
步骤1：1-[(8-[双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 二氮杂萘-3-基)氨基甲酰基]-5-氧代-6-氮杂螺[2.5]辛烷-6-甲酸叔丁基酯
Figure BDA0002289356600005941
向冰冷却的6-[(叔丁基氧基)羰基]-5-氧代-6-氮杂螺[2.5]辛烷-1-甲酸(740mg,2.74mmol)和1-N,1-N-双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]-3-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-1,6-二胺(1.16g,2.10mmol)的吡啶(3mL)/二氯甲烷(15mL)溶液中添加POCl3(643mg,4.19mmol)。30分钟后，过量的POCl3经水淬灭。在真空下浓缩所得混合物，得到粗的1-[(8-[双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)氨基甲酰基]-5-氧代-6-氮杂螺[2.5]辛烷-6-甲酸叔丁基酯(660mg)，其为棕色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝803.4。
步骤2：(1R,3R)-N-[8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-5-氧 代-6-氮杂螺[2.5]辛烷-1-甲酰胺、(1S,3S)-N-[8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮 杂萘-3-基]-5-氧代-6-氮杂螺[2.5]辛烷-1-甲酰胺、(1S,3R)-N-[8-氨基-6-(4-甲基吡啶- 3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-5-氧代-6-氮杂螺[2.5]辛烷-1-甲酰胺和(1R,3S)-N-[8-氨 基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-5-氧代-6-氮杂螺[2.5]辛烷-1-甲酰胺
Figure BDA0002289356600005942
将1-[(8-[双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)氨基甲酰基]-5-氧代-6-氮杂螺[2.5]辛烷-6-甲酸叔丁基酯(660mg,0.82mmol)和三氟乙酸(10mL)的混合物在80℃加热。在40分钟后，浓缩该混合物，且所得残余物经MeOH(10mL)稀释。该溶液用NH3甲醇溶液(7mol/L)碱化至pH＝8。该粗产物经制备型HPLC提纯随后经手性SFC提纯。化合物315：LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.007，[M+H]+＝403.2，方法＝K-1；1HNMR(300MHz,CD3OD)δ9.30(s,1H),8.54(s,1H),8.44(d,J＝6.0Hz,1H),8.32(s,1H),7.41(d,J＝6.0Hz,1H),6.99(s,1H),3.27-3.21(m,2H),2.46-2.30(m,5H),2.06-1.99(m,3H),1.47-1.39(m,1H),1.11-1.07(m,1H)。化合物314：LCMS(ESI):RT＝1.014分钟，[M+H]+＝403.2，方法＝K-1；1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ10.96(s,1H),9.37(s,1H),8.57(s,1H),8.43(d,J＝6.0Hz,1H),8.25(s,1H),7.58(s,1H),7.32-7.30(m,3H),6.97(s,1H),3.15-3.12(m,1H),3.02-2.99(m,1H),2.41(s,3H),2.31-2.25(m,1H),2.11-2.04(m,2H),1.92-1.78(m,2H),1.19-1.16(m,1H),1.10-0.96(m,1H)。化合物313：LCMS(ESI):RT(分钟)＝0.903，[M+H]+＝403.2，方法＝K-1；1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ10.97(s,1H),9.39(s,1H),8.58(s,1H),8.45(d,J＝6.0Hz,1H),8.27(s,1H),7.53(s,1H),7.41(s,2H),7.33(d,J＝6.0Hz,1H),7.01(s,1H),3.21-3.16(m,2H),2.42(s,3H),2.38-2.36(m,2H),2.12-2.08(m,1H),1.97-1.70(m,1H),1.53-1.45(m,1H),1.12-1.05(m,2H)。化合物312：LCMS(ESI):RT(分钟)＝0.903，[M+H]+＝403.2，方法＝K-1；1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ10.95(s,1H),9.37(s,1H),8.57(s,1H),8.43(d,J＝6.0Hz,1H),8.25(s,1H),7.53(s,1H),7.32-7.31(m,3H),6.99(s,1H),3.22-3.20(m,2H),2.42(s,3H),2.38-2.36(m,2H),2.12-2.08(m,1H),1.76-1.74(m,1H),1.52-1.49(m,1H),1.10-1.06(m,2H)。
实施例235：
(1R,2S)-N-(8-氨基-5-环丙基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2- (氰基甲基)环丙烷甲酰胺(化合物316)和(1S,2R)-N-(8-氨基-5-环丙基-6-(4-甲基吡啶- 3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(氰基甲基)环丙烷甲酰胺(化合物317)
Figure BDA0002289356600005951
在氮气中，将反式-N-[8-氨基-5-溴-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-(氰基甲基)环丙烷-1-甲酰胺(0.30g,0.69mmol)、环丙基三氟硼酸钾(153mg,1.03mmol)、Pd(OAc)2(15mg,0.07mmol)、PCy3(39mg,0.14mmol)和碳酸钾(285mg,2.06mmol)在水(0.5mL)/甲苯(5mL)中的混合物在90℃加热。在15小时后，过滤该固体，且在真空下浓缩该滤液。该粗产物经制备型HPLC提纯，得到N-[8-氨基-5-环丙基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-(氰基甲基)环丙烷-1-甲酰胺甲酸(20mg,7％)，其为白色固体。通过手性SFC分离对映异构体。化合物316：LCMS(ESI):RT(分钟)＝2.182，[M+H]+＝399.2，方法＝K-1；1H NMR(400MHz,CD3OD)δ9.39(s,1H),9.04(s,1H),8.51(d,J＝4Hz,1H),8.50(s,1H),8.51(d,J＝4Hz,1H),2.81-2.66(m,2H),2.34(s,3H),2.09-2.03(m,1H),1.90-1.75(m,2H),1.41-1.36(m,1H),1.11-1.07(m,1H),0.88-0.77(s,2H),0.17-0.07(m,2H)。化合物317：LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.079，[M+H]+＝399.2，方法＝K-1；1H NMR(400MHz,CD3OD)δ9.39(s,1H),9.04(s,1H),8.51(d,J＝4Hz,1H),8.50(s,1H),8.51(d,J＝4Hz,1H),2.81-2.66(m,2H),2.34(s,3H),2.09-2.03(m,1H),1.90-1.75(m,2H),1.41-1.36(m,1H),1.11-1.07(m,1H),0.88-0.77(s,2H),0.17-0.07(m,2H)。
实施例236：
(1S,2S)-N-(8-氨基-6-(4-甲基-2-苯基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(1- 甲基-1H-吡唑-4-基)环丙烷甲酰胺(化合物318)和(1R,2R)-N-(8-氨基-6-(4-甲基-2-苯基 吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)环丙烷甲酰胺(化合物319)
Figure BDA0002289356600005961
在氮气中，将反式-N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)环丙烷-1-甲酰胺(311mg,0.91mmol)、4-甲基-2-苯基-3-(四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡啶(402mg,1.36mmol)、Pd-AMPHOS(64mg,0.09mmol)和K3PO4(577mg,2.72mmol)在水中(2mL)/二噁烷(6mL)的混合物在100℃加热。20分钟后，过滤该固体，且在真空下浓缩该滤液。该粗产物经制备型HPLC提纯，得到N-[8-氨基-6-(4-甲基-2-苯基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)环丙烷-1-甲酰胺(2.4mg,1％)，其为白色固体。通过手性SFC分离对映异构体。化合物318：LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.196，[M+H]+＝476.3，方法＝K-1；1H NMR(400MHz,CD3OD)δ9.22(s,1H),8.52(d,J＝4Hz,1H),8.05(s,1H),7.48(s,1H),7.42(d,J＝4.0Hz,1H),7.40-7.38(m,2H),7.35(s,1H),7.23-7.20(m,3H),6.57(s,1H),3.85(s,3H),2.37-2.33(m,1H),2.31(s,3H),2.09-2.058(m,1H),1.56-1.51(m,1H),1.26-1.21(m,1H)。化合物319：LCMS(ESI):[M+H]+＝476.3，RT(分钟)＝1.197，方法＝K-1；1H NMR(400MHz,CD3OD)δ9.22(s,1H),8.52(d,J＝4Hz,1H),8.05(s,1H),7.48(s,1H),7.42(d,J＝4.0Hz,1H),7.40-7.38(m,2H),7.35(s,1H),7.23-7.20(m,3H),6.57(s,1H),3.85(s,3H),2.37-2.33(m,1H),2.31(s,3H),2.09-2.06(m,1H),1.56-1.51(m,1H),1.26-1.21(m,1H)。
实施例237：
(1S,2S)-N-(8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-甲基环丁烷 甲酰胺(化合物320)、(1S,2R)-N-(8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2- 甲基环丁烷甲酰胺(化合物321)、(1R,2R)-N-(8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂 萘-3-基)-2-甲基环丁烷甲酰胺(化合物322)、(1R,2S)-N-(8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)- 2,7-二氮杂萘-3-基)-2-甲基环丁烷甲酰胺(化合物323)。
Figure BDA0002289356600005971
步骤1：N-(6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-甲基环丁烷甲酰胺
在0℃，向6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-胺盐酸盐(847mg,3.38mmol)和2-甲基环丁烷-1-甲酸(0.50g,4.38mmol)在吡啶(8mL)/二氯甲烷(40mL)中的混合物添加POCl3(1.03g,6.72mmol)。在室温搅拌该反应30分钟，并用水稀释。该溶液经二氯甲烷萃取。该合并的有机物经无水硫酸钠干燥，过滤，并在真空下浓缩，得到N-(6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-甲基环丁烷-1-甲酰胺(890mg,85％)，其为黄色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝310.2。
步骤2：N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-甲基环丁烷甲酰胺
将N-(6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-甲基环丁烷-1-甲酰胺(490mg,1.58mmol)在氢氧化铵(10mL,257mmol)和二噁烷(10mL)中的混合物在80℃加热2小时。在真空下浓缩该反应，得到粗的N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-甲基环丁烷-1-甲酰胺(910mg)，其为黄色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝291.1。
步骤3：(1S,2S)-N-(8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-甲基 环丁烷甲酰胺、(1S,2R)-N-(8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-甲基 环丁烷甲酰胺、(1R,2R)-N-(8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-甲基 环丁烷甲酰胺、(1R,2S)-N-(8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-甲基 环丁烷甲酰胺。
Figure BDA0002289356600005982
在氮气中，将N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-甲基环丁烷-1-甲酰胺(440mg,1.51mmol)、(4-甲基吡啶-3-基)硼酸(311mg,2.27mmol)、Xphos(144mg,0.30mmol)、Xphos-PdCl-2nd G(115mg,0.15mmol)和碳酸钾(626mg,4.53mmol)在10:1的二噁烷/水(11mL)中的混合物在100℃加热。1小时后，过滤该固体，且在真空下浓缩该滤液。该粗产物经手性-制备型HPLC提纯，随后经手性SFC提纯。化合物320：LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.29，[M+H]+＝348.1，方法＝K-1；1H NMR(400MHz,CD3OD)δ9.29(s,1H),8.55(s,1H),8.44(d,J＝4.0Hz,1H),8.37(s,1H),7.41(d,J＝4Hz,1H),7.01(s,1H),2.99-2.92(m,1H),2.76-2.68(m,1H),2.47(s,3H),2.25-2.05(m,3H),1.69-1.60(m,1H),1.19(d,J＝8.0Hz,3H)。化合物321：LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.42，[M+H]+＝348.1，方法＝K-1；1H NMR(400MHz,CD3OD)δ9.29(s,1H),8.56(s,1H),8.44(d,J＝4.0Hz,1H),8.39(s,1H),7.41(d,J＝4.0Hz,1H),7.01(s,1H),3.51-3.45(m,1H),2.96-2.89(m,1H),2.55-2.48(m,1H),2.47(s,3H),2.27-2.18(m,1H),2.09-2.00(m,1H),1.73-1.65(m,1H),1.11(d,J＝8.0Hz,3H)。化合物322：LCMS(ESI):[M+H]+＝348.1，RT(分钟)＝0.98，方法＝K-1；1H NMR(400MHz,CD3OD)δ9.29(s,1H),8.55(s,1H),8.44(d,J＝4.0Hz,1H),8.37(s,1H),7.41(d,J＝4.0Hz,1H),7.01(s,1H),2.99-2.92(m,1H),2.76-2.68(m,1H),2.47(s,3H),2.25-2.05(m,3H),1.69-1.60(m,1H),1.19(d,J＝8.0Hz,3H)。化合物323：LCMS(ESI):[M+H]+＝348.1，RT(分钟)＝0.98，方法＝K-1；1H NMR(400MHz,CD3OD)δ9.29(s,1H),8.56(s,1H),8.44(d,J＝4.0Hz,1H),8.39(s,1H),7.41(d,J＝4.0Hz,1H),7.01(s,1H),3.51-3.45(m,1H),2.96-2.89(m,1H),2.55-2.48(m,1H),2.47(s,3H),2.27-2.18(m,1H),2.09-2.00(m,1H),1.73-1.65(m,1H),1.11(d,J＝8.0Hz,3H)。
实施例238：
(1S,2R)-N-[8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-(噁烷-4- 基)环丙烷-1-甲酰胺(化合物324)和(1R,2S)-N-[8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮 杂萘-3-基]-2-(噁烷-4-基)环丙烷-1-甲酰胺(化合物325)
Figure BDA0002289356600005991
步骤1：(E)-3-(四氢-2H-吡喃-4-基)丙烯酸叔丁基酯
Figure BDA0002289356600006001
将噁烷-4-甲醛(2.0g,17.5mmol)和2-(三苯基亚膦基)乙酸叔丁基酯(7.2g,19mmol)的四氢呋喃(100mL)溶液在室温搅拌6小时。在真空下浓缩所得混合物，且所得残余物经硅胶色谱提纯(3:1石油醚/乙酸乙酯)，得到(2E)-3-(噁烷-4-基)丙-2-烯酸叔丁基酯(3g,81％)，其为白色固体。
步骤2：反式-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)环丙烷甲酸叔丁基酯
Figure BDA0002289356600006002
在室温、在N2中，将三甲基锍碘化物(5.5g,24.99mmol)、t-BuOK(2.78g,24.77mmol)、(2E)-3-(噁烷-4-基)丙-2-烯酸叔丁基酯(2.5g,11.77mmol)在DMSO(30mL)中的混合物搅拌3小时。该反应经水稀释，且该水性层经乙酸乙酯萃取。该合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤，并在真空下浓缩，得到反式-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)环丙烷甲酸叔丁基酯(1.5g,56％)，其为白色固体。
步骤3：反式-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)环丙烷甲酸
Figure BDA0002289356600006003
将反式-2-(噁烷-4-基)环丙烷-1-甲酸叔丁基酯(1.5g,6.62mmol)的二氯甲烷(20mL)/三氟乙酸(20mL)溶液在室温搅拌6小时。该反应溶液用1M NaOH水溶液碱化至pH 8。该水溶液用乙酸乙酯洗涤，并用HCl水溶液酸化至pH2-3。该酸性溶液经乙酸乙酯萃取。所收集的萃取物经Na2SO4干燥，过滤，并在真空下浓缩，得到粗的反式-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)环丙烷甲酸(1g,89％)，其为油状物。
步骤4：反式-N-(6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)环丙烷 甲酰胺
Figure BDA0002289356600006004
将POCl3(1.49g,9.71mmol)逐滴添加至冰冷却的反式-2-(噁烷-4-基)环丙烷-1-甲酸(1.0g,5.87mmol)、6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-胺盐酸盐(1.23g,4.91mmol)和吡啶(2mL,24.84mmol)的二氯甲烷(20mL)溶液中。将该反应混合物温热至室温1小时。用H2O(15mL)洗涤该反应，并将该有机层经Na2SO4干燥，过滤，并在真空下浓缩。经快速柱色谱提纯(1:1石油醚/乙酸乙酯)，得到反式-N-(6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(噁烷-4-基)环丙烷-1-甲酰胺(0.60g,28％)，其为黄色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝367.2。
步骤5：反式-N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(四氢-2H-吡喃-4-基)环 丙烷甲酰胺
Figure BDA0002289356600006011
将反式-N-(6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(噁烷-4-基)环丙烷-1-甲酰胺(500mg,1.36mmol)在氢氧化铵(6mL)和二噁烷(6mL)中的溶液在100℃加热。1小时后，在真空中浓缩该反应混合物，得到反式-N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(噁烷-4-基)环丙烷-1-甲酰胺(550mg,93％)，其为黄色固体。
步骤6：(1S,2R)-N-[8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-(噁 烷-4-基)环丙烷-1-甲酰胺和(1R,2S)-N-[8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘- 3-基]-2-(噁烷-4-基)环丙烷-1-甲酰胺
Figure BDA0002289356600006012
在氮气中，将反式-N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(噁烷-4-基)环丙烷-1-甲酰胺(0.50g,1.44mmol)、(4-甲基吡啶-3-基)硼酸(590mg,4.30mmol)、Pd(dppf)Cl2(110mg,0.15mmol)和碳酸钠(460mg,4.34mmol)在10:1的二噁烷/水(16.5mL)中的混合物在100℃加热。4小时后，在真空中浓缩该反应混合物，且该残余物经快速柱色谱提纯(10:1二氯甲烷/甲醇)，得到反式-N-[8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-(噁烷-4-基)环丙烷-1-甲酰胺(200mg,34％)，其为白色固体。用手性制备型HPLC分离该对映异构体。化合物324：LCMS(ESI):[M+H]+＝404.2，RT(分钟)＝1.10，方法＝K-1；1H NMR(400MHz,CD3OD)δ9.32(s,1H),8.55(s,1H),8.46(d,J＝5.1Hz,1H),8.32(s,1H),7.43(d,J＝5.1Hz,1H),7.01(s,1H),4.03-3.92(m,2H),3.47-3.37(m,2H),2.47(s,3H),1.87-1.83(m,1H),1.76(t,J＝14.6Hz,2H),1.57-1.42(m,2H),1.38-1.31(m,1H),1.25-1.21(m,1H),1.19-1.07(m,1H),0.93-0.89(m,1H)。化合物325：LCMS(ESI):[M+H]+＝404.2，RT(分钟)＝1.08分钟，方法＝K-1；1H NMR(400MHz,CD3OD)δ9.32(s,1H),8.55(s,1H),8.46(d,J＝5.1Hz,1H),8.32(s,1H),7.43(d,J＝5.1Hz,1H),7.01(s,1H),4.03-3.92(m,2H),3.47-3.37(m,2H),2.47(s,3H),1.87-1.83(m,1H),1.76(t,J＝14.6Hz,2H),1.57-1.42(m,2H),1.38-1.31(m,1H),1.25-1.21(m,1H),1.19-1.07(m,1H),0.93-0.89(m,1H)。
实施例239：
(1R,2S,3R)-N-[8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-甲基-3- (1-甲基-1H-吡唑-4-基)环丙烷-1-甲酰胺(化合物326)、
(1S,2R,3S)-N-[8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-甲基-3- (1-甲基-1H-吡唑-4-基)环丙烷-1-甲酰胺(化合物327)、
(1S,2S,3S)-N-[8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-甲基-3- (1-甲基-1H-吡唑-4-基)环丙烷-1-甲酰胺(化合物328)和
(1R,2R,3R)-N-[8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-甲基-3- (1-甲基-1H-吡唑-4-基)环丙烷-1-甲酰胺(化合物329)
Figure BDA0002289356600006021
步骤1：乙基二苯基锍四氟硼酸盐
Figure BDA0002289356600006031
向碘乙烷(3.00g,19.23mmol)的二氯甲烷(45mL)溶液中添加二苯基硫醚(10.69g,57.39mmol)和AgBF4(3.75g,19.26mmol)。在室温搅拌所得溶液30分钟，并在35℃搅拌过夜。过滤该固体，且在真空下浓缩该滤液。所得残余物用二氯甲烷/醚(3×50mL)研磨，得到乙基二苯基锍四氟硼酸盐，其为灰白色固体(2.5g,34％)。LCMS(ESI):[M+H]+＝215.0；
步骤2：(2E)-3-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)丙-2-烯酸叔丁基酯
Figure BDA0002289356600006032
向4-碘-1-甲基-1H-吡唑(5.0g,24mmol)的N,N-二甲基甲酰胺(20mL)溶液中添加丙-2-烯酸叔丁基酯(9.23g,72.0mmol)、三乙胺(2.91g,28.8mmol)、Pd(OAc)2(538mg,2.40mmol)和P(o-Tol)3(1.46g,4.80mmol)。在氮气中，将所得混合物在110℃加热过夜。浓缩该反应，且所得残余物经快速柱色谱提纯(1:3乙酸乙酯/石油醚)，得到(2E)-3-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)丙-2-烯酸叔丁基酯，其为淡黄色油状物(3.9g,74％)。LCMS(ESI):[M+H]+＝209.0。
步骤3：2-甲基-3-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)环丙烷-1-甲酸叔丁基酯
在-78℃，向二苯基乙基锍四氟硼酸盐(1.45g,4.80mmol)的1,2-二甲氧基乙烷(75mL)和二氯甲烷(12.5mL)溶液中逐滴添加LDA(1.06mL,19.79mmol)。30分钟后，添加(2E)-3-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)丙-2-烯酸叔丁基酯(0.50g,2.4mmol)，并在室温搅拌所得溶液过夜。该反应经水稀释，并经二氯甲烷萃取。该合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤，并在真空下浓缩，得到粗的2-甲基-3-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)环丙烷-1-甲酸叔丁基酯，其为黄色固体(0.60g)。LCMS(ESI):[M+H]+＝237.0。
步骤4：2-甲基-3-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)环丙烷-1-甲酸
Figure BDA0002289356600006041
向2-甲基-3-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)环丙烷-1-甲酸叔丁基酯(0.60g,2.5mmol)的二氯甲烷(10mL)溶液中添加三氟乙酸(10mL)。在室温搅拌所得溶液5小时。在真空下浓缩该反应，且将所得残余物溶于水中(45mL)。该水溶液用10M氢氧化钠水溶液碱化至pH＝9-10。该碱性溶液用醚洗涤。然后用1M盐酸水溶液将该水相酸化至pH＝3-4。该酸性溶液经乙酸乙酯萃取，且在真空下浓缩有机相，得到粗的2-甲基-3-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)环丙烷-1-甲酸，其为灰白色固体(0.50g)。LCMS[M+H]+＝181.0。
步骤5：N-(6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-甲基-3-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)环 丙烷-1-甲酰胺
Figure BDA0002289356600006042
向冰冷却的6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-胺盐酸盐(0.50g,2.0mmol)和反式-2-甲基-3-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)环丙烷-1-甲酸(432mg,2.39mmol)的吡啶(8.00mL)/二氯甲烷(45mL)溶液中添加POCl3(612mg,3.99mmol)。将该反应温热至室温。30分钟后，该反应经水稀释(30mL)，且所得溶液经二氯甲烷萃取(3×70mL)。该合并的有机层经无水硫酸钠干燥，过滤，并浓缩。经快速柱色谱提纯(1:2乙酸乙酯/石油醚)，得到N-(6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-甲基-3-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)环丙烷-1-甲酰胺，其为淡黄色固体(350mg,42％)。LCMS(ESI)[M+H]+＝376.0。
步骤6：N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-甲基-3-(1-甲基-1H-吡唑-4- 基)环丙烷-1-甲酰胺
Figure BDA0002289356600006043
向N-(6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-甲基-3-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)环丙烷-1-甲酰胺(0.60g,1.59mmol)的二噁烷中(10mL)溶液中添加氢氧化铵(10mL)。该溶液在100℃加热。2小时后，在真空下浓缩该混合物，得到粗的N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-甲基-3-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)环丙烷-1-甲酰胺，其为灰白色固体(550mg,77％)。LCMS(ESI)[M+H]+＝357.0。
步骤7：(1R,2S,3R)-N-[8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2- 甲基-3-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)环丙烷-1-甲酰胺、(1S,2R,3S)-N-[8-氨基-6-(4-甲基吡 啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-甲基-3-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)环丙烷-1-甲酰胺、 (1S,2S,3S)-N-[8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-甲基-3-(1-甲基- 1H-吡唑-4-基)环丙烷-1-甲酰胺和(1R,2R,3R)-N-[8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二 氮杂萘-3-基]-2-甲基-3-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)环丙烷-1-甲酰胺
Figure BDA0002289356600006051
向N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-甲基-3-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)环丙烷-1-甲酰胺(550mg,1.54mmol)的二噁烷中(16mL)/水(4mL)溶液中在添加(4-甲基吡啶-3-基)硼酸(422mg,3.08mmol)、KOAc(454mg,4.62mmol)、第二代XPhos预催化剂(121mg,0.15mmol)和XPhos(147mg,0.31mmol)。在氮气中，将所得溶液在100℃加热。2小时后，在真空下浓缩该反应，且所得残余物经硅胶色谱提纯(15:1二氯甲烷/甲醇)后用手性制备型HPLC提纯。化合物326：LCMS(ESI):RT(分钟)＝1.98，[M+H]+＝414.2，方法＝K-1；1H NMR(400MHz,CD3OD)δ9.29(s,1H),8.53(s,1H),8.43-8.41(m,1H),8.32(s,1H),7.50(s,1H),7.40-7.38(m,1H),7.33(s,1H),6.98(s,1H),3.87(s,3H),2.54-2.49(m,1H),2.45(s,3H),2.00-1.97(m,1H),1.79-1.72(m,1H),1.06-1.04(m,3H)。(吡唑与酰胺处于反式位置；任意指定甲基相关的立体化学；任意指定绝对立体化学)。化合物327：LCMS(ESI):[M+H]+＝414.2；RT(分钟)＝1.09分钟，方法＝K-1；1H NMR(400MHz,CD3OD)δ9.28(s,1H),8.54(s,1H),8.43-8.41(m,1H),8.34(s,1H),7.45(s,1H),7.40-7.38(m,1H),7.33(s,1H),6.99(s,1H),3.84(s,3H),2.45(s,3H),2.31-2.35(m,1H),2.14-2.18(m,1H),1.63-1.67(m,1H),1.33-1.35(m,3H)。(吡唑与酰胺处于反式位置；任意指定甲基相关的立体化学；任意指定绝对立体化学)。化合物328：LCMS(ESI):[M+H]+＝414.2；RT(分钟)＝1.08，方法＝K-1；1H NMR(400MHz,CD3OD)δ9.29(s,1H),8.53(s,1H),8.43-8.41(m,1H),8.32(s,1H),7.50(s,1H),7.40-7.38(m,1H),7.33(s,1H),6.98(s,1H),3.93(s,3H),2.54-2.49(m,1H),2.45(s,3H),2.00-1.97(m,1H),1.79-1.72(m,1H),1.06-1.04(m,3H)。(吡唑与酰胺处于反式位置；任意指定甲基相关的立体化学；任意指定绝对立体化学)。化合物329：LCMS(ESI):[M+H]+＝414.2；RT(分钟)＝1.07，方法＝K-1；1H NMR(400MHz,CD3OD)δ9.29(s,1H),8.53(s,1H),8.43-8.41(m,1H),8.34(s,1H),7.45(s,1H),7.40-7.38(m,1H),7.33(s,1H),6.98(s,1H),3.84(s,3H),2.45(s,3H),2.31-2.35(m,1H),2.14-2.18(m,1H),1.63-1.67(m,1H),1.33-1.35(m,3H)。(吡唑与酰胺处于反式位置；任意指定甲基相关的立体化学；任意指定绝对立体化学)。
实施例240：
(1R,2R)-N-(8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(1-(2-甲氧 基乙基)-1H-吡唑-4-基)环丙烷甲酰胺(化合物330)和(1S,2S)-N-(8-氨基-6-(4-甲基吡 啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(1-(2-甲氧基乙基)-1H-吡唑-4-基)环丙烷甲酰胺(化 合物331)
Figure BDA0002289356600006061
步骤1：4-碘-1-(2-甲氧基乙基)-1H-吡唑
Figure BDA0002289356600006062
将4-碘-1H-吡唑(10.00g,51.553mmol)、1-氯-2-甲氧基乙烷(14.62g,154.64mmol)、氢氧化钾(5.78g,103.02mmol)和KBr(610mg,5.12mmol)在乙醇(200mL)中的混合物在100℃加热。在16小时后，在真空下浓缩该混合物，且所得残余物经硅胶色谱提纯(95:5二氯甲烷/甲醇)，得到4-碘-1-(2-甲氧基乙基)-1H-吡唑(12g,92％)，其为黄色油状物。LCMS(ESI):[M+H]+＝292.95。
步骤2：(E)-3-(1-(2-甲氧基乙基)-1H-吡唑-4-基)丙烯酸甲基酯
Figure BDA0002289356600006071
在氮气中，将4-碘-1-(2-甲氧基乙基)-1H-吡唑(11.0g,43.6mmol)、丙-2-烯酸甲基酯(15.03g,174.5mmol)、Pd(OAc)2(1.47g,6.54mmol)、P(p-Tol)3(3.98g,13.1mmol)和三乙胺(26.5g,262mmol)在CH3CN(200mL)中的混合物在110℃加热。2小时后，在真空下浓缩该反应，且该残余物经硅胶色谱提纯(3:2乙酸乙酯/石油醚)，得到(2E)-3-[1-(2-甲氧基乙基)-1H-吡唑-4-基]丙-2-烯酸甲基酯(6.95g,76％)，其为黄色油状物。LCMS(ESI):[M+H]+＝211.15。
步骤3：反式-2-(1-(2-甲氧基乙基)-1H-吡唑-4-基)环丙烷甲酸甲基酯
Figure BDA0002289356600006072
将新鲜制备的重氮甲烷的乙醚溶液添加冰冷却的(2E)-3-[1-(2-甲氧基乙基)-1H-吡唑-4-基]丙-2-烯酸酯(0.50g,2.37mmol)、Pd(OAc)2(53mg,0.23mmol)在二氯甲烷(40mL)中的混合物中。30分钟后，该反应经乙酸(1mL)淬灭并浓缩。所得残余物用水稀释，且该水溶液经乙酸乙酯萃取。所收集的有机物用饱和NaHCO3水溶液洗涤，经Na2SO4干燥，过滤，并浓缩，得到粗的反式-2-[1-(2-甲氧基乙基)-1H-吡唑-4-基]环丙烷-1-甲酸甲基酯(230mg)，其为淡棕色油状物。LCMS(ESI):[M+H]+＝225.2。
步骤4：反式-2-(1-(2-甲氧基乙基)-1H-吡唑-4-基)环丙烷甲酸
在25℃，将反式-2-[1-(2-甲氧基乙基)-1H-吡唑-4-基]环丙烷-1-甲酸酯(1.3g,5.8mmol)、LiOH·H2O(1.46g,34.8mmol)在四氢呋喃(5mL)/水(5mL)中的混合物搅拌3小时。在真空下浓缩该反应，且将该残余物溶于水。该水溶液用盐酸被酸化至pH＝3。该酸性溶液经乙酸乙酯萃取。在真空下浓缩该合并的有机层，得到粗的反式-2-[1-(2-甲氧基乙基)-1H-吡唑-4-基]环丙烷-1-甲酸(1.0g,82％)，其为黄色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝211.10。
步骤5：反式-N-(6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(1-(2-甲氧基乙基)-1H-吡 唑-4-基)环丙烷甲酰胺
Figure BDA0002289356600006081
向冰冷却的反式-2-[1-(2-甲氧基乙基)-1H-吡唑-4-基]环丙烷-1-甲酸(0.90g,4.28mmol)、6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-胺盐酸盐(896mg,3.58mmol)和吡啶(4mL)二氯甲烷(20mL)的溶液中添加POCl3(2.73g,17.8mmol)。将该溶液温热至25℃。1小时后，向该反应中添加饱和碳酸氢钠水溶液(100mL)，且该混合物经二氯甲烷萃取。该合并的有机层经Na2SO4干燥，过滤，并在真空下浓缩。用快速柱色谱提纯(97:3二氯甲烷/甲醇)，得到反式-N-(6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-[1-(2-甲氧基乙基)-1H-吡唑-4-基]环丙烷-1-甲酰胺(0.70g,48％)，其为黄色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝405.9。
步骤6：反式-N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(1-(2-甲氧基乙基)-1H- 吡唑-4-基)环丙烷甲酰胺
将N-(6,8-二氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-[1-(2-甲氧基乙基)-1H-吡唑-4-基]环丙烷-1-甲酰胺(0.60g,1.47mmol)和NH4OH(18mL)在二噁烷(18mL)中的混合物在100℃加热。在4小时后，在真空下浓缩该混合物，得到粗的反式-N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-[1-(2-甲氧基乙基)-1H-吡唑-4-基]环丙烷-1-甲酰胺(0.60g)，其为淡黄色固体，LCMS(ESI):[M+H]+＝387.10。
步骤7：(1S,2S)-N-(8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(1- (2-甲氧基乙基)-1H-吡唑-4-基)环丙烷甲酰胺和(1R,2R)-N-(8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3- 基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(1-(2-甲氧基乙基)-1H-吡唑-4-基)环丙烷甲酰胺
Figure BDA0002289356600006091
在氮气中，将反式-N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-[1-(2-甲氧基乙基)-1H-吡唑-4-基]环丙烷-1-甲酰胺(550mg,1.42mmol)、(4-甲基吡啶-3-基)硼酸(389mg,2.84mmol)、碳酸钾(786mg,5.68mmol)、Pd(dppf)Cl2(116mg,0.14mmol)在二噁烷(20mL)/水(4mL)中的混合物在100℃加热。3小时后，在真空下浓缩该混合物。经制备型HPLC提纯，得到反式-N-[8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-[1-(2-甲氧基乙基)-1H-吡唑-4-基]环丙烷-1-甲酰胺(270mg)，其为白色固体。用手性-制备型HPLC分离该对映异构体。化合物330：LCMS(ESI):[M+H]+＝444.2；RT(分钟)＝1.06，方法＝K-1；1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ10.97(s,1H),9.38(s,1H),8.57(s,1H),8.45(d,J＝6.0Hz,1H),8.26(s,1H),7.59(s,1H),7.41(s,2H),7.38-7.22(m,2H),6.99(s,1H),4.17(t,J＝6.0Hz,2H),3.64(t,J＝6.0Hz,2H),3.22(s,3H),2.41(s,3H),2.22(t,J＝6.0Hz,2H),1.52-1.33(m,1H),1.23-1.27(m,1H)。化合物331：LCMS(ESI):[M+H]+＝444.2；RT(分钟)＝1.05，方法＝K-1；1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ10.97(s,1H),9.38(s,1H),8.57(s,1H),8.45(d,J＝6.0Hz,1H),8.26(s,1H),7.59(s,1H),7.41(s,2H),7.38-7.22(m,2H),6.99(s,1H),4.17(t,J＝6.0Hz,2H),3.64(t,J＝6.0Hz,2H),3.22(s,3H),2.41(s,3H),2.22(t,J＝6.0Hz,2H),1.52-1.33(m,1H),1.23-1.27(m,1H)。
实施例241：
(1S,2S)-N-(8-氨基-5-氯-6-(4-(2-羟基乙基)吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3- 基)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)环丙烷甲酰胺(化合物332)和(1R,2R)-N-(8-氨基-5-氯-6- (4-(2-羟基乙基)吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)环丙烷甲 酰胺(化合物333)
Figure BDA0002289356600006092
步骤1：反式-N-(8-氨基-6-(4-(2-羟基乙基)吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)- 2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)环丙烷甲酰胺
Figure BDA0002289356600006101
在氮气中，将反式-N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)环丙烷-1-甲酰胺(280mg,0.82mmol)、1H,3H,4H-[1,2]氧杂硼杂环己烷并[3,4-c]吡啶-1-醇(183mg,1.23mmol)、Xphos(78mg,0.16mmol)、Xphos-PdCl-2nd G(63mg,0.08mmol)和KOAc(241mg,2.46mmol)在二噁烷(10mL)/水(1mL)中的混合物在110℃加热。在15小时后，过滤该固体，且在真空下浓缩该滤液。经硅胶色谱提纯(15:1二氯甲烷/甲醇)，得到反式-N-[8-氨基-6-[4-(2-羟基乙基)吡啶-3-基]-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)环丙烷-1-甲酰胺(61mg,17％)，其为黄色固体。LCMS(ESI):[M+H]+＝430.3。
步骤3：(1S,2S)-N-(8-氨基-5-氯-6-(4-(2-羟基乙基)吡啶-3-基)-2,7-二氮杂 萘-3-基)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)环丙烷甲酰胺和(1R,2R)-N-(8-氨基-5-氯-6-(4-(2- 羟基乙基)吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)环丙烷甲酰胺
Figure BDA0002289356600006102
在25℃，将反式-N-[8-氨基-6-[4-(2-羟基乙基)吡啶-3-基]-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)环丙烷-1-甲酰胺(79mg,0.18mmol)和NCS(49mg,0.37mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(6mL)中的混合物搅拌5小时。浓缩该反应，且该粗产物经制备型HPLC提纯，得到反式-N-[8-氨基-5-氯-6-[4-(2-羟基乙基)吡啶-3-基]-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)环丙烷-1-甲酰胺(3mg,4％)，其为黄色固体。用手性制备型HPLC分离该对映异构体。化合物332：LCMS(ESI):[M+H]+＝464.2，RT(分钟)＝1.09，方法＝K-1；1HNMR(400MHz,CD3OD)δ9.36(s,1H),8.74(s,1H),8.59(d,J＝8.0Hz,1H),8.53(s,1H),7.65(d,J＝8.0Hz,1H),7.51(s,1H),7.38(s,1H),3.86(s,3H),3.75(t,J＝8.0Hz,2H),2.89(t,J＝8.0Hz,2H),2.44-2.39(m,1H),2.16-2.12(m,1H),1.62-1.58(m,1H),1.32-1.27(m,1H)。化合物333：LCMS(ESI):[M+H]+＝464.2，RT(分钟)＝1.09，方法＝K-1。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ9.36(s,1H),8.74(s,1H),8.59(d,J＝8.0Hz,1H),8.53(s,1H),7.65(d,J＝8.0Hz,1H),7.51(s,1H),7.38(s,1H),3.86(s,3H),3.75(t,J＝8.0Hz,2H),2.89(t,J＝8.0Hz,2H),2.44-2.39(m,1H),2.16-2.12(m,1H),1.62-1.58(m,1H),1.32-1.27(m,1H)。
实施例242：
(1R,2S)-N-[8-氨基-6-(4-甲基-6-苯基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-(氰 基甲基)环丙烷-1-甲酰胺(化合物334)和(1S,2R)-N-[8-氨基-6-(4-甲基-6-苯基吡啶-3- 基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-(氰基甲基)环丙烷-1-甲酰胺(化合物335)
步骤1：5-溴-4-甲基-2-苯基吡啶
Figure BDA0002289356600006112
在氮气中，将2,5-二溴-4-甲基吡啶(2.0g,8.0mmol)，苯基硼酸(1.069g,8.77mmol)、Pd(PPh3)4(921mg,0.79mmol)和碳酸钾(3.3g,23.87mmol)在水(10mL)/1,2-2甲氧基乙烷(40mL)中的混合物在90℃加热。在12小时后，该反应混合物经水稀释，且所得溶液经乙酸乙酯萃取。该合并的萃取物经Na2SO4干燥，过滤，并在真空下浓缩。经快速柱色谱提纯(1％乙酸乙酯/石油醚)，得到5-溴-4-甲基-2-苯基吡啶(1.78g,90％)，其为无色油状物。LCMS(ESI):[M+H]+＝248.0。
步骤2：(4-甲基-6-苯基吡啶-3-基)硼酸
Figure BDA0002289356600006113
在氮气中，将5-溴-4-甲基-2-苯基吡啶(1.68g,6.77mmol)、4,4,5,5-四甲基-2-(四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷(5.16g,20.3mmol)、Pd(dppf)Cl2(494g,675mmol)和KOAc(1.99g,20.3mmol)在二噁烷(30mL)中的混合物在100℃加热。3小时后，过滤该固体，且在真空下浓缩该滤液。经快速柱色谱提纯(1:5乙酸乙酯/石油醚)，得到(4-甲基-6-苯基吡啶-3-基)硼酸(1.25g,87％)，其为浅棕色固体。LCMS(ESI):M+H+＝214.1。
步骤3：(1R,2S)-N-[8-氨基-6-(4-甲基-6-苯基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3- 基]-2-(氰基甲基)环丙烷-1-甲酰胺和(1S,2R)-N-[8-氨基-6-(4-甲基-6-苯基吡啶-3- 基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-(氰基甲基)环丙烷-1-甲酰胺
在氮气中，将反式-N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(氰基甲基)环丙烷-1-甲酰胺(0.30g,0.99mmol)、(4-甲基-6-苯基吡啶-3-基)硼酸(852mg,3.99mmol)、Xphos钯(II)联苯-2-胺氯化物(79mg,0.10mmol)、X-phos(48mg,0.10mmol)和碳酸钾(414mg,2.99mmol)在水(2mL)/二噁烷(10mL)中的混合物在100℃加热。1小时后，过滤该固体，且在真空下浓缩该滤液。经制备型HPLC提纯，得到反式-N-[8-氨基-6-(4-甲基-6-苯基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-(氰基甲基)环丙烷-1-甲酰胺(50mg,12％)，其为白色固体。用手性制备型HPLC分离该对映异构体。化合物334：LCMS(ESI):[M+H]+＝435.2；RT(分钟)＝1.37，方法＝K-1；1H NMR(300MHz,CD3OD)δ9.31(s,1H),8.62(s,1H),8.32(s,1H),8.02-7.98(m,2H),7.82(s,1H),7.56-7.54(m,3H),7.03(s,1H),2.79-2.69(m,2H),2.54(s,3H),2.06-2.00(m,1H),1.97-1.72(m,1H),1.39-1.31(m,1H),1.09-1.02(m,1H)。化合物335：LCMS(ESI):[M+H]+＝435.2；RT(分钟)＝1.37，方法＝K-1；1H NMR(300MHz,CD3OD)δ9.31(s,1H),8.62(s,1H),8.32(s,1H),8.02-7.98(m,2H),7.82(s,1H),7.56-7.54(m,3H),7.03(s,1H),2.79-2.69(m,2H),2.54(s,3H),2.06-2.00(m,1H),1.97-1.72(m,1H),1.39-1.31(m,1H),1.09-1.02(m,1H)。
实施例243：
(±)-N-(8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)螺[2.2]戊烷-1-甲 酰胺(化合物336)
向螺[2.2]戊烷-1-甲酸(32mg,0.0272mmol)、N1,N1-双(2,4-二甲氧基苄基)-3-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-1,6-二胺(150mg,0.272mmol)的吡啶(2.7mL)溶液中添加POCl3(0.050mL,0.54mmol)。2天后，向该反应中添加饱和碳酸氢钠水溶液，且该混合物经二氯甲烷萃取。该合并的有机物用MgSO4干燥，过滤，并在真空下浓缩。经快速柱色谱提纯(100:0-95:5二氯甲烷/甲醇)，得到该中间体化合物，将其溶于二氯甲烷(3mL)和TFA(0.2mL)的混合物中。搅拌该反应20小时，用氨/甲醇(7M)中和，除去溶剂且该残余物经HPLC提纯，得到该目标化合物，其为白色固体(7.9mg,5％,两步)；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.75(s,1H),9.35(s,1H),8.56(s,1H),8.43(d,J＝5.0Hz,1H),8.26(s,1H),7.28(br s,2H),7.33-7.21(m,1H),6.95(s,1H),2.43-2.40(m,1H),2.41(s,3H),1.42(t,J＝3.8Hz,1H),1.35(dd,J＝7.4,3.4Hz,1H),0.95-0.73(m,4H)。
实施例244：
(±)-N6-((2,2-二氟环丙基)甲基)-3-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-1,6- 二胺(化合物337)
Figure BDA0002289356600006132
步骤1：(±)-(8-(双(2,4-二甲氧基苄基)氨基)-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮 杂萘-3-基)((2,2-二氟环丙基)甲基)氨基甲酸叔丁基酯
Figure BDA0002289356600006141
向(8-(双(2,4-二甲氧基苄基)氨基)-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)氨基甲酸叔丁基酯(200mg,0.336mmol)的DMF(1.7mL)溶液中添加1-溴甲基-2,2-二氟环丙烷(182mg,1.01mmol)。在氮气中，在80℃搅拌该反应混合物3小时。用二氯甲烷稀释该反应混合物并过滤。浓缩后，在该粗中间体残余物上称量添加4-甲基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)吡啶(81.0mg,0.370mmol)、氯(2-二环己基膦基-2′,4′,6′-三异丙基-1,1′-联苯)[2-(2′-氨基-1,1′-联苯)]钯(II)(14.2mg,0.0168mmol)、2-二环己基膦基-2′,4′,6′-三异丙基联苯(8.2mg,0.018mmol)和碳酸钾(139mg,1.01mmol)。用氮气吹扫小瓶，装入脱气的四氢呋喃(1.7mL)和蒸馏水(0.3mL)，然后密封，并在80℃搅拌该反应混合物1小时。在冷却至室温后，浓缩该混合物至干燥。所得的该反应残余物经快速柱色谱提纯(庚烷/iPrOAc，100:0-0:100)，得到所述标题化合物，其为黄色泡沫(175mg,70％,两步)；1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ9.25(s,1H),8.57(s,1H),8.43(d,J＝5.0Hz,1H),7.88(s,1H),7.24-7.19(m,2H),7.11(d,J＝5.1Hz,1H),7.08(s,1H),6.45-6.37(m,4H),4.78(s,4H),4.24-4.11(m,2H),3.79(s,6H),3.64(s,6H),2.21(s,3H),2.15-2.04(m,1H),1.56(s,9H),1.44-1.26(m,2H)。
步骤2：(±)-N6-((2,2-二氟环丙基)甲基)-3-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂 萘-1,6-二胺
Figure BDA0002289356600006142
向(±)-(8-(双(2,4-二甲氧基苄基)氨基)-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)((2,2-二氟环丙基)甲基)氨基甲酸叔丁基酯(175mg,0.236mmol)的二氯甲烷(0.7mL)溶液中添加三氟乙酸(0.7mL)，并在室温搅拌该混合物22小时。然后，添加0.4mL的三氟乙酸，并在40℃将该混合物搅拌22小时。浓缩该混合物至干燥，然后用HPLC提纯，得到该目标化合物，其为黄色固体(60.3mg,75％)；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.20(s,1H),8.54(s,1H),8.46(d,J＝5.0Hz,1H),7.33(d,J＝5.0Hz,1H),7.25(br s,2H),6.75(s,1H),6.51(s,1H),3.53-3.39(m,2H),2.38(s,3H),2.14-1.98(m,1H),1.66-1.52(m,1H),1.39-1.28(m,1H)。
实施例245：
N6-(2,2-二氟乙基)-3-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-1,6-二胺(化合物 338)
Figure BDA0002289356600006151
如制备(±)-N6-((2,2-二氟环丙基)甲基)-3-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-1,6-二胺(化合物337)相同的操作，除了使用1,1-二氟-2-碘乙烷作为烷化剂，且该反应直接进行Suzuki反应和脱保护。由此，(8-(双(2,4-二甲氧基苄基)氨基)-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)氨基甲酸叔丁基酯(162mg,0.272mmol)的反应得到该目标化合物，其为白色固体(58.9mg,68％,三步)；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.14(s,1H),8.52(s,1H),8.41(d,J＝5.0Hz,1H),7.28(d,J＝5.0Hz,1H),7.14(t,J＝6.4Hz,1H),7.04(br s,2H),6.69(s,1H),6.56(s,1H),6.13(tt，J＝56.3，4.0Hz,1H),3.84-3.69(m,2H),2.39(s,3H)。
实施例246：
(±)-(反式)-N-(8-氨基-6-(7-甲基-8-氧代-7,8-二氢吡啶并[2,3-d]哒嗪-3- 基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)环丙烷-1-甲酰胺(化合物339)
Figure BDA0002289356600006161
步骤1：5-溴-3-(二溴甲基)吡啶-2-甲酸甲基酯
Figure BDA0002289356600006162
向N-溴琥珀酰亚胺(20.89g,117.4mmol)和过氧化苯甲酰(2.84g,11.74mmol)的四氯化碳(150mL)溶液中添加5-溴-3-甲基-吡啶-2-甲酸甲基酯(9.0g,39mmol)。在氮气中，在80℃搅拌该混合物16小时。然后浓缩该溶液，且该残余物用快速色谱提纯(5％-10％-20％乙酸乙酯/石油醚)，得到5-溴-3-(二溴甲基)吡啶-2-甲酸甲基酯，其为黄色油状物(12g,79％产率)；LCMS(ESI)[M+H]+＝385.8。
步骤2：3-溴-7H-吡啶并[2,3-d]哒嗪-8-酮
Figure BDA0002289356600006163
向5-溴-3-(二溴甲基)吡啶-2-甲酸甲基酯(1.0g,2.58mmol)的乙醇(15mL)溶液中添加水合肼(0.77mL,15.47mmol)。在80℃搅拌该反应混合物1.5小时，然后冷却至15℃。过滤该固体，用MeOH洗涤并干燥，得到一批次的期望产物。浓缩该滤液并用MeOH研磨。过滤该固体，用MeOH冲洗并干燥，得到另一批次的期望产物。合并两个批次，得到3-溴-7H-吡啶并[2,3-d]哒嗪-8-酮，其为黄色固体(500mg,2.2121mmol，86％产率)；LCMS(ESI)[M+H]+＝226.0。
步骤3：3-溴-7-甲基-吡啶并[2,3-d]哒嗪-8-酮
在0℃，向3-溴-7H-吡啶并[2,3-d]哒嗪-8-酮(500mg,2.21mmol)和碳酸铯(2.52g,7.74mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(5mL)中的悬浮液中添加碘甲烷(0.59mL,9.51mmol)。在15℃搅拌该反应混合物16小时。除去该溶剂且该残余物用水稀释(15mL)。悬浮液经乙酸乙酯萃取(15mL x 4)。用盐水洗涤该有机层，经硫酸钠干燥，过滤并浓缩，得到3-溴-7-甲基-吡啶并[2,3-d]哒嗪-8-酮，其为黄色固体(140mg,26％产率)；LCMS(ESI)[M+H]+＝240.0。
步骤4：(±)-(反式)-N-(8-氨基-6-(7-甲基-8-氧代-7,8-二氢吡啶并[2,3-d]哒 嗪-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)环丙烷-1-甲酰胺
Figure BDA0002289356600006171
在一个小瓶内称量3-溴-7-甲基吡啶并[2,3-d]哒嗪-8(7H)-酮(80.0mg,0.333mmol)、[1,1′-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯钯(II)-二氯甲烷配合物(13.9mg,0.0167mmol)、双(频哪醇合)二硼(102mg,0.400mmol)和乙酸钾(98.1mg,1.00mmol)。在氮气中，添加无水1,4-二噁烷(1.7mL)并将小瓶密封。在100℃搅拌该反应混合物3天。在冷却至室温后，在氮气中，向该反应容器添加(±)-(反式)-N-(8-(双(2,4-二甲氧基苄基)氨基)-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)环丙烷-1-甲酰胺(214mg,0.333mmol)、氯(2-二环己基膦基-2′,4′,6′-三异丙基-1,1′-联苯)[2-(2′-氨基-1,1′-联苯)]钯(II)(14.1mg,0.0168mmol)、2-二环己基膦基-2′,4′,6′-三异丙基联苯(8.1mg,0.0168mmol)和一水合磷酸三钾(237mg,1.00mmol)和水(0.3mL)。密封小瓶，并在100℃搅拌2小时。将该反应混合物浓缩至干燥，且残余物经快速柱色谱提纯(CH2Cl2/MeOH，100:0-90:10)。将所得的粗产物化合物溶于苯甲硫醚(0.4mL)并添加三氟乙酸(1.7mL)。在搅拌18小时后，浓缩该混合物，并经HPLCT提纯，得到该目标化合物，其为黄色固体(68.0mg,44％,两步)；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.01(s,1H),9.77(d,J＝2.3Hz,1H),9.41(s,1H),9.00(d,J＝2.3Hz,1H),8.50(s,1H),8.37(s,1H),7.75(s,1H),7.57(s,1H),7.50(s,2H),7.30(s,1H),3.78(s,3H),3.77(s,3H),2.28-2.18(m,2H),1.46-1.36(m,1H),1.28-1.15(m,1H)。
实施例247：
(±)-5-(1-氨基-6-((反式)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)环丙烷-1-甲酰氨基)-2, 7-二氮杂萘-3-基)-N,N,4-三甲基吡啶酰胺(化合物340)
Figure BDA0002289356600006181
步骤1：(±)-5-(1-(双(2,4-二甲氧基苄基)氨基)-6-((反式)-2-(1-甲基-1H-吡 唑-4-基)环丙烷-1-甲酰氨基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-4-甲基吡啶-2-甲酸
Figure BDA0002289356600006182
在小瓶中称量5-溴-4-甲基吡啶-2-甲酸甲基酯(1.00g,4.35mmol)、[1,1′-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯钯(II)-二氯甲烷配合物181mg,0.217mmol)、双(频哪醇合)二硼(1.21g,4.78mmol)和乙酸钾(1.28g,13.0mmol).在氮气中，添加无水1,4-二噁烷(11mL)并将小瓶密封。在100℃搅拌该反应混合物18小时。在冷却至室温后，将该反应混合物浓缩，且该残余物经快速柱色谱提纯(CH2Cl2/MeOH，100:0-90:10)，得到756mg粗的频哪醇硼烷芳基酯(arylpinacolboranate)中间体(掺杂有频哪醇硼烷，1H NMR测定)。将该中间体(323mg,～1.17mmol)与(±)-(1S,2S)-N-(8-(双(2,4-二甲氧基苄基)氨基)-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)环丙烷-1-甲酰胺(500mg,0.777mmol)、氯(2-二环己基膦基-2′,4′,6′-三异丙基-1,1′-联苯)[2-(2′-氨基-1,1′-联苯)]钯(II)(32.8mg,0.0389mmol)、2-二环己基膦基-2′,4′,6′-三异丙基联苯(18.9mg,0.0389mmol)和一水合磷酸三钾(554mg,2.33mmol)在小瓶内合并，在氮气中添加四氢呋喃(3.9mL)和水(0.7mL)，并将小瓶密封，在80℃搅拌19小时。该反应混合物仍含有起始物质，因此添加等量的催化剂、配体和水，以及一水合磷酸三钾(184mg,0.777mmol)和粗的频哪醇硼烷芳基酯(215mg,～0.77mmol)，并在80℃搅拌3天。浓缩该混合物至干燥，且残余物经快速柱色谱提纯(CH2Cl2/MeOH，100:0-90:10)。所得的粗产物为黄色油状物，根据HPLC-MS，其含有该产物。
步骤2：(±)-5-(1-氨基-6-((反式)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)环丙烷-1-甲酰氨 基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-N,N,4-三甲基吡啶酰胺
Figure BDA0002289356600006191
向粗的(±)-5-(1-(双(2,4-二甲氧基苄基)氨基)-6-((反式)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)环丙烷-1-甲酰氨基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-4-甲基吡啶-2-甲酸(100mg,～0.13mmol)和HATU(104mg,0.269mmol)的DMF(0.5mL)溶液中添加二甲胺盐酸盐(16.4mg,0.201mmol)和三乙胺(0.094mL,0.672mmol)。搅拌该反应混合物18小时，然后用iPrOAc稀释，用饱和NaHCO3洗涤，并用MgSO4干燥。浓缩后，所得的反应残余物经快速柱色谱提纯(CH2Cl2/MeOH，100:0-90:10)，得到44mg的粗酰胺，将其溶于苯甲硫醚(0.033mL)。向该溶液中添加TFA(0.300mL)，并搅拌22小时，然后浓缩并经HPLC提纯，得到为白色固体的该目标化合物(9.6mg,36％,两步)；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.96(s,1H),9.38(s,1H),8.58(s,1H),8.25(s,1H),7.56(s,1H),7.48(s,1H),7.34(br s,2H),7.29(s,1H),7.03(s,1H),3.76(s,3H),3.02(s,3H),2.99(s,3H),2.46(s,3H),2.24-2.16(m,2H),1.44-1.33(m,1H),1.24-1.12(m,1H)。
实施例248：
(±)-5-(1-氨基-6-((反式)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)环丙烷-1-甲酰氨基)-2, 7-二氮杂萘-3-基)-4-甲基吡啶-2-甲酸甲基酯(化合物341)
Figure BDA0002289356600006201
在小瓶中称量5-溴-4-甲基吡啶-2-甲酸甲基酯(300mg,1.30mmol)、[1,1′-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯钯(II)-二氯甲烷配合物54.3mg,0.0652mmol)、双(频哪醇合)二硼(364mg,1.43mmol)和乙酸钾(384mg,3.91mmol)。在氮气中，添加无水1,4-二噁烷(6.5mL)并将小瓶密封。在120℃搅拌该反应混合物18小时。在冷却至室温后，在氮气中向该反应容器中添加(±)-(反式)-N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)环丙烷-1-甲酰胺(447mg,1.30mmol)、[1,1′-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯钯(II)-二氯甲烷配合物54.3mg,0.0652mmol)和碳酸钾(540mg,3.91mmol)和水(1.3mL)。将小瓶密封，并在100℃搅拌23小时。将该反应混合物浓缩至干燥，且残余物经快速柱色谱提纯(CH2Cl2/MeOH，100:0-85:15)，得到该目标化合物，其为棕色固体(126mg,21％,两步)；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.95(s,1H),9.38(s,1H),8.71(s,1H),8.28(s,1H),8.01(s,1H),7.56(s,1H),7.37(br s,2H),7.29(s,1H),7.05(s,1H),3.91(s,3H),3.77(s,3H),2.25-2.16(m,2H),1.90(s,3H),1.43-1.34(m,1H),1.24-1.14(m,1H)。
实施例249：
(±)-反式-5-(1-氨基-6-((1S,2S)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)环丙烷-1-甲酰氨 基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-4-甲基吡啶-2-甲酸(化合物342)
Figure BDA0002289356600006202
将(±)-5-(1-氨基-6-((1S,2S)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)环丙烷-1-甲酰氨基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-4-甲基吡啶-2-甲酸甲基酯(95.6mg,0.209mmol)和氢氧化锂水合物(29.4mg,0.700mmol)的四氢呋喃(2.1mL)和水(0.7mL)溶液搅拌2天。添加盐酸/二噁烷(0.162mL,0.648mmol，4.0M)，从该反应混合物中析出该产物，且通过过滤收集产物，用iPrOAc和1,4-二噁烷冲洗，得到灰色固体(92.5mg,99％)；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.94(s,1H),9.37(s,1H),8.59(s,1H),8.27(s,1H),7.90(s,1H),7.56(s,1H),7.34(br s,2H),7.29(s,1H),7.01(s,1H),3.77(s,3H),2.46(s,3H),2.25-2.16(m,2H),1.43-1.34(m,1H),1.23-1.13(m,1H)。
实施例250：
(±)-(反式)-N-(8-氨基-6-(4-甲基-6-(2-氧代氮杂环丁烷-1-基)吡啶-3-基)- 2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)环丙烷-1-甲酰胺(化合物343)
Figure BDA0002289356600006211
步骤1：1-(5-溴-4-甲基吡啶-2-基)氮杂环丁烷-2-酮
Figure BDA0002289356600006212
在小瓶中称量2,5-二溴-4-甲基吡啶(1.22g,4.84mmol)、2-氮杂环丁烷酮(421mg,5.81mmol)、三(二亚苄基丙酮)二钯(0)(111mg,0.121mmol)、4,5-双(二苯基膦基)-9,9-二甲基呫吨(140mg,0.242mmol)、分子筛(600mg)和碳酸铯(3.16g,9.69mmol)。在氮气流下，向容器中添加无水甲苯(16mL)并将小瓶密封。在120℃搅拌该反应混合物19.5小时，然后冷却至室温。将该反应混合物通过硅藻土过滤，用二氯甲烷冲洗。浓缩后，该粗残余物经快速色谱提纯(100:0-70:30庚烷/iPrOAc)，得到所述标题化合物，其为白色固体(828mg,71％)；1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ8.31(s,1H),7.66(s,1H),3.77(dd,J＝4.7,4.7Hz,2H),3.12(dd,J＝4.7,4.7Hz,2H),2.39(s,3H)。
步骤2：(±)-(反式)-N-(8-氨基-6-(4-甲基-6-(2-氧代氮杂环丁烷-1-基)吡啶- 3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)环丙烷-1-甲酰胺
在小瓶中称量1-(5-溴-4-甲基吡啶-2-基)氮杂环丁烷-2-酮(50mg,0.207mmol)、[1,1′-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯钯(II)-二氯甲烷配合物8.6mg,0.0103mmol)、双(频哪醇合)二硼(52.7mg,0.207mmol)和乙酸钾(61.1mg,0.622mmol)。在氮气中，添加无水1,4-二噁烷(1.0mL)并将小瓶密封。在100℃搅拌该反应混合物17小时。在冷却至室温后，在氮气中，向该反应容器添加(±)-(1S,2S)-N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)环丙烷-1-甲酰胺(71.1mg,0.207mmol)、氯(2-二环己基膦基-2′,4′,6′-三异丙基-1,1′-联苯)[2-(2′-氨基-1,1′-联苯)]钯(II)(8.8mg,0.0104mmol)、2-二环己基膦基-2′,4′,6′-三异丙基联苯(5.0mg,0.0104mmol)、碳酸钾(86mg,0.622mmol)和水(0.2mL)。将小瓶密封，并在100℃搅拌19小时。将该反应混合物浓缩至干燥，且残余物经快速柱色谱提纯(CH2Cl2/MeOH，100:0-85:15)，然后经HPLC提纯，得到该目标化合物，其为白色固体(29.6mg,31％,两步)；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.92(s,1H),9.35(s,1H),8.34(s,1H),8.24(s,1H),7.56(s,1H),7.52(s,1H),7.29(s,1H),7.28(br s,2H),6.93(s,1H),3.77(s,3H),3.73(dd,J＝4.7,4.7Hz,2H),3.12(dd,J＝4.7,4.7Hz,2H),2.44(s,3H),2.24-2.17(m,2H),1.43-1.33(m,1H),1.23-1.14(m,1H)。
实施例251：
(±)-(反式)-N-(8-氨基-6-(4-甲基-6-(1-甲基-1H-吡唑-3-基)吡啶-3-基)-2, 7-二氮杂萘-3-基)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)环丙烷-1-甲酰胺(化合物344)
Figure BDA0002289356600006222
步骤1：5-溴-4-甲基-2-(1-甲基-1H-吡唑-3-基)吡啶
Figure BDA0002289356600006231
在小瓶中称量2,5-二溴-4-甲基吡啶(300mg,1.20mmol)、1-甲基-1H-吡唑-3-硼酸频哪醇酯(251mg,1.20mmol)、[1,1′-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯钯(II)-二氯甲烷配合物49.3mg,0.0600mmol)和碳酸钠(380mg,3.59mmol)。在氮气中，添加无水1,4-二噁烷(6.0mL)和水(1.2mL)并将小瓶密封。在100℃搅拌该反应混合物18小时。在冷却至室温后，将该反应混合物浓缩且该残余物经快速柱色谱提纯(100:0-40:60庚烷/iPrOAc)，得到该目标化合物，其为白色固体(144mg,48％)；1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ8.62(s,1H),7.81(s,1H),7.40(d,J＝2.4Hz,1H),6.84(d,J＝2.4Hz,1H),3.97(s,3H),2.43(s,3H)。
步骤2：(±)-(反式)-N-(8-氨基-6-(4-甲基-6-(1-甲基-1H-吡唑-3-基)吡啶-3- 基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)环丙烷-1-甲酰胺
Figure BDA0002289356600006232
如同制备(±)-(反式)-N-(8-氨基-6-(4-甲基-6-(2-氧代氮杂环丁烷-1-基)吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)环丙烷-1-甲酰胺(化合物343)的操作，除了使用5-溴-4-甲基-2-(1-甲基-1H-吡唑-3-基)吡啶(53mg,0.210mmol)作为起始物质，得到该目标化合物，其为白色固体(27.3mg,27％,两步)；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.93(s,1H),9.36(s,1H),8.56(s,1H),8.26(s,1H),7.83(s,1H),7.78(d,J＝2.1Hz,1H),7.56(s,1H),7.30(br s,2H),7.29(d,J＝2.1Hz,1H),7.00(s,1H),6.81(s,1H),3.93(s,3H),3.77(s,3H),2.47(s,3H),2.26-2.14(m,2H),1.45-1.32(m,1H),1.28-1.15(m,1H)。
实施例252：
(±)-(反式)-N-(8-氨基-6-(4-甲基-6-(1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)-2,7-二氮杂 萘-3-基)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)环丙烷-1-甲酰胺(化合物345)
Figure BDA0002289356600006241
步骤1：5-溴-4-甲基-2-(1H-吡唑-1-基)吡啶
向搅拌中的吡唑(81.4mg,1.20mmol)的无水DMF(2.4mL)溶液中添加氢化钠(71.7mg,1.79mmol，[60％在矿物油中])。20分钟后，添加2,5-二溴-4-甲基吡啶(300mg,1.19mmol)并将小瓶密封。在100℃搅拌该反应混合物20.5小时，然后冷却至室温，用乙酸异丙基酯稀释，用水(1x)、盐水(1x)洗涤，并经硫酸镁干燥。浓缩后，该粗残余物经快速柱色谱(100:0-95:5庚烷/iPrOAc)，得到所述标题化合物，其为白色固体(141mg,49％)；1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ8.51(d,J＝2.7Hz,1H),8.42(s,1H),7.90(s,1H),7.73(d,J＝1.8Hz,1H),6.46(dd,J＝2.7,1.8Hz 1H),2.47(s,3H)。
步骤2：(±)-(反式)-N-(8-氨基-6-(4-甲基-6-(1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)-2,7- 二氮杂萘-3-基)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)环丙烷-1-甲酰胺
Figure BDA0002289356600006243
如同制备(±)-(反式)-N-(8-氨基-6-(4-甲基-6-(2-氧代氮杂环丁烷-1-基)吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)环丙烷-1-甲酰胺(化合物343)的操作，除了使用5-溴-4-甲基-2-(1H-吡唑-1-基)吡啶(50mg,0.210mmol)作为起始物质，得到该目标化合物，其为白色固体(32.4mg,33％,两步)；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.94(s,1H),9.37(s,1H),8.65(d,J＝3.0Hz,1H),8.48(s,1H),8.27(s,1H),7.88(s,1H),7.85(d,J＝3.0Hz,1H),7.56(s,1H),7.33(br s,2H),7.29(s,1H),7.03(s,1H),6.60(s,1H),3.77(s,3H),2.54(s,3H),2.25-2.16(m,2H),1.43-1.34(m,1H),1.23-1.16(m,1H)。
实施例253：
(±)-5-(1-氨基-6-((反式)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)环丙烷-1-甲酰氨基)-2, 7-二氮杂萘-3-基)-N,4-二甲基吡啶酰胺(化合物346)
Figure BDA0002289356600006251
向(±)-5-(1-氨基-6-((1S,2S)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)环丙烷-1-甲酰氨基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-4-甲基吡啶-2-甲酸(37.1mg,0.0837mmol)和HATU(64.9mg,0.167mmol)的DMF(0.8mL)溶液中添加甲胺盐酸盐(11.3mg,0.167mmol)和三乙胺(0.070mL,0.50mmol)。搅拌该反应混合物18小时，然后用二氯甲烷稀释，用饱和NaHCO3洗涤，并用MgSO4干燥。浓缩后，所得的反应残余物经快速柱色谱(CH2Cl2/MeOH，100:0-85:15)和HPLC提纯，得到该目标化合物，其为白色固体(10.2mg,27％)；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.95(s,1H),9.38(s,1H),8.79(q,J＝4.9Hz,1H),8.61(s,1H),8.27(s,1H),7.96(s,1H),7.56(s,1H),7.36(br s,2H),7.29(s,1H),7.04(s,1H),3.77(s,3H),2.84(d,J＝4.9Hz,3H),2.26-2.16(m,2H),1.43-1.32(m,1H),1.23-1.15(m,1H)。
实施例254：
(±)-(反式)-N-(8-氨基-6-(6-氨基-5-(三氟甲基)吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘- 3-基)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)环丙烷-1-甲酰胺(化合物347)
Figure BDA0002289356600006252
在小瓶中称量(±)-(1S,2S)-N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)环丙烷-1-甲酰胺(60.0mg,0.175mmol)，5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-3-(三氟甲基)吡啶-2-胺(50.4mg,0.175mmol)、氯(2-二环己基膦基-2′,4′,6′-三异丙基-1,1′-联苯)[2-(2′-氨基-1,1′-联苯)]钯(II)(7.4mg,0.0088mmol)、2-二环己基膦基-2′,4′,6′-三异丙基联苯(4.3mg,0.0088mmol)和碳酸钾(73mg,0.53mmol)。在氮气中，添加无水四氢呋喃(0.9mL)和水(0.2mL)并将小瓶密封。在80℃搅拌该反应混合物17小时。在冷却至室温后，该反应混合物通过硅藻土过滤，用二氯甲烷和甲醇冲洗。浓缩至干燥后，该残余物经HPLC提纯，得到该目标化合物，其为白色固体(17.2mg,21％)；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.87(s,1H),9.28(s,1H),8.98(d,J＝2.3Hz,1H),8.47(d,J＝2.3Hz,1H),8.24(s,1H),7.56(s,1H),7.42(s,1H),7.29(s,1H),7.28(br s,2H),6.75(br s,2H),3.77(s,3H),2.26-2.15(m,2H),1.44-1.30(m,1H),1.24-1.16(m,1H)。
实施例255：
(±)-5-(1-氨基-6-((反式)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)环丙烷-1-甲酰氨基)-2, 7-二氮杂萘-3-基)-4-甲基吡啶-2-甲酸苄基酯(化合物348)
Figure BDA0002289356600006261
向(±)-5-(1-氨基-6-((1S,2S)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)环丙烷-1-甲酰氨基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-4-甲基吡啶-2-甲酸(33.3mg,0.0751mmol)在无水二甲基亚砜(0.8mL)中的悬浮液中添加碳酸钾(21mg,0.11mmol)和苄基溴化物(0.013mL,0.11mmol)。密封该反应容器并在80℃搅拌24小时。将该混合物过滤并浓缩。残余物经HPLC提纯，得到该目标化合物，其为黄色固体(8.3mg,21％)；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.95(s,1H),9.38(s,1H),8.71(s,1H),8.27(s,1H),8.04(s,1H),7.56(s,1H),7.53-7.47(m,2H),7.45-7.34(m,5H),7.29(s,1H),7.04(s,1H),5.41(s,2H),3.77(s,3H),2.25-2.16(m,2H),1.45-1.33(m,1H),1.26-1.16(m,1H)。
实施例256：
(1S,2R,3S)-N-[8-氨基-6-(2-氟-6-甲基苯基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-甲基-3-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)环丙烷-1-甲酰胺(化合物357)、(1R,2R,3R)-N-[8-氨基-6-(2-氟-6-甲基苯基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-甲基-3-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)环丙烷-1-甲酰胺(化合物356)、(1S,2S,3S)-N-[8-氨基-6-(2-氟-6-甲基苯基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-甲基-3-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)环丙烷-1-甲酰胺(化合物355)和(1R,2S,3R)-N-[8-氨基-6-(2-氟-6-甲基苯基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-甲基-3-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)环丙烷-1-甲酰胺(化合物354)
Figure BDA0002289356600006271
步骤1：(2E)-3-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)丙-2-烯酸叔丁基酯
Figure BDA0002289356600006272
向4-碘-1-甲基-1H-吡唑(20g,96.15mmol)的N,N-二甲基甲酰胺(100mL)溶液中添加丙-2-烯酸叔丁基酯(40.6g,316.77mmol)、三乙胺(13.6g,134.40mmol)、二乙酸钯(3.23g,14.39mmol)和三(2-甲基苯基)膦(5.85g,19.22mmol)。在110℃搅拌该反应16小时。将所得混合物冷却至室温，然后在真空中浓缩。该残余物在硅胶柱上提纯，用乙酸乙酯/石油醚(1/2)洗脱，得到(2E)-3-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)丙-2-烯酸叔丁基酯(14.5g,69.38mmol)，其为红色油状物。LCMS(ESI)[M+H]+＝209.1。
步骤2：反式-2-甲基-3-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)环丙烷-1-甲酸叔丁基酯
Figure BDA0002289356600006273
在-65℃，在10分钟内，向四氟硼氢化乙基二苯基锍(13.7g,45.34mmol)的乙二醇二甲基醚(150mL)和二氯甲烷(10mL)溶液中逐滴添加LDA(23ml，2mmol在THF中)。在-65℃，搅拌该反应1小时。在-65℃，5分钟逐滴添加(2E)-3-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)丙-2-烯酸叔丁基酯(3g,14.41mmol)的乙二醇二甲基醚(5mL)溶液。在室温搅拌所得溶液5小时。该反应通过添加水淬灭。所得混合物经二氯甲烷萃取，并用无水硫酸钠干燥。过滤后，在真空下浓缩该滤液，得到反式-2-甲基-3-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)环丙烷-1-甲酸叔丁基酯(4.5g,粗品)，其为棕色油状物。LCMS(ESI)[M+H]+＝237.1。
步骤3：反式-2-甲基-3-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)环丙烷-1-甲酸
在室温，将反式-2-甲基-3-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)环丙烷-1-甲酸叔丁基酯(4.5g,19.04mmol)的三氟乙酸(10mL)和二氯甲烷(10mL)溶液搅拌3小时。在真空下浓缩所得混合物。用12％氢氧化钠水溶液将该溶液的pH调节至pH 11。所得溶液经二氯甲烷萃取，且用12％氯化氢水溶液将该水性层调节至pH 3。所得溶液用乙酸乙酯萃取，用无水硫酸钠干燥。过滤后，在真空下浓缩该滤液，得到反式-2-甲基-3-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)环丙烷-1-甲酸(3g,16.57mmol)，其为淡黄色油状物。LCMS(ESI)[M+H]+＝181.1。
步骤3：反式-N-(8-[双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-(2-氟-6-甲基苯基)- 2,7-二氮杂萘-3-基)-2-甲基-3-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)环丙烷-1-甲酰胺
Figure BDA0002289356600006282
在0℃，在5分钟内，向1-N,1-N-双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]-3-(2-氟-6-甲基苯基)-2,7-二氮杂萘-1,6-二胺(600mg,1.05mmol)、反式-2-甲基-3-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)环丙烷-1-甲酸(247mg,1.37mmol)的二氯甲烷(20mL)和吡啶(4mL)溶液中添加POCl3(323mg,2.10mmol)。在25℃搅拌该反应30分钟。然后，通过添加水将该反应淬灭。所得溶液用3x100 mL的二氯甲烷萃取，合并该有机层并经无水硫酸钠干燥，在真空下浓缩，得到反式-N-(8-[双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-(2-氟-6-甲基苯基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-甲基-3-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)环丙烷-1-甲酰胺(700mg,0.96mmol)，其为棕色固体。LCMS(ESI)[M+H]+＝731。
步骤4：(1S,2R,3S)-N-[8-氨基-6-(2-氟-6-甲基苯基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2- 甲基-3-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)环丙烷-1-甲酰胺(化合物357)、(1R,2R,3R)-N-[8-氨基- 6-(2-氟-6-甲基苯基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-甲基-3-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)环丙烷- 1-甲酰胺(化合物356)、(1S,2S,3S)-N-[8-氨基-6-(2-氟-6-甲基苯基)-2,7-二氮杂萘-3- 基]-2-甲基-3-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)环丙烷-1-甲酰胺(化合物355)和(1R,2S,3R)-N- [8-氨基-6-(2-氟-6-甲基苯基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-甲基-3-(1-甲基-1H-吡唑-4-基) 环丙烷-1-甲酰胺(化合物354)
Figure BDA0002289356600006291
在25℃，将反式-N-(8-[[(2,4-二甲氧基苯基)甲基][(3,5-二甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-(2-氟-6-甲基苯基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-甲基-3-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)环丙烷-1-甲酰胺(700mg,0.96mmol)在三氟乙酸(10mL)中的混合物搅拌1小时。在真空下浓缩该混合物。用氨/甲醇(7mol/L)将该反应混合物调节至pH 10。该粗产物经制备型HPLC提纯(C18 OBD柱；0.5％NH4HCO3/水：ACN＝30％-60％,在9分钟内)，得到反式-N-[8-氨基-6-(2-氟-6-甲基苯基)-2,7-二氮杂萘-3-基]-2-甲基-3-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)环丙烷-1-甲酰胺(400mg,0.93mmol)，其为白色固体。该外消旋物经手性SFC分离，得到4种异构体：(异构体的环丙烷立体化学：吡唑与酰胺处于反式位置；任意指定甲基相关的立体化学；任意指定所有的绝对立体化学)异构体1：(109.1mg,0.25mmol)，其为白色固体。保留时间：1.823分钟(Lux 3u纤维素-3100*4.6mm，2um；MeOH(20nM NH3)；4mL/分钟)；LCMS(ESI)[M+H]+＝431；1HNMR(400MHz,CD3OD)δ9.31(s,1H),8.29(s,1H),7.51(s,1H),7.40(s,1H),7.33-7.31(m,1H),7.13(d,J＝7.6Hz,1H),7.03(t,J＝8.9Hz,1H),6.86(s,1H),3.88(s,3H),2.53-2.50(m,1H),2.23(s,3H),2.01-2.00(m,1H),1.82-1.71(m,1H),1.06(d,J＝6.3Hz,3H)；异构体2：(19.4mg,0.045mmol)，其为白色固体。保留时间：2.833分钟(CHIRALPAK AD-3,3*100mm,3um；ACN:EtOH＝1:1(0.1％DEA)；2mL/分钟)；LCMS(ESI)[M+H]+＝431；1H NMR(400MHz,CD3OD)δ9.30(s,1H),8.31(s,1H),7.47(s,1H),7.35-7.30(m,2H),7.14(d,J＝7.6Hz,1H),7.04(t,J＝8.8Hz,1H),6.87(s,1H),3.85(s,3H),2.35-2.32(m,1H),2.24(s,3H),2.18-2.15(m,1H),1.69-1.63(m,1H),1.35(d,J＝6.2Hz,3H)；异构体3：(26.5mg,0.061mmol)，其为白色固体。保留时间：2.031分钟(Lux 3u纤维素-3100*4.6mm，2um；MeOH(20nM NH3)；4mL/分钟)；LCMS(ESI)[M+H]+＝431；1H NMR(400MHz,CD3OD)δ9.30(s,1H),8.31(s,1H),7.47(s,1H),7.35-7.30(m,2H),7.14(d,J＝7.6Hz,1H),7.04(t,J＝8.8Hz,1H),6.87(s,1H),3.85(s,3H),2.35-2.32(m,1H),2.24(s,3H),2.18-2.15(m,1H),1.69-1.63(m,1H),1.35(d,J＝6.2Hz,3H)；异构体4：(93.7mg,0.22mmol)，其为白色固体。保留时间：3.994分钟(CHIRALPAKAD-3，3*100mm，3um；ACN:EtOH＝1:1(0.1％DEA)；2mL/分钟)；LCMS(ESI)[M+H]+＝431；1H NMR(400MHz,CD3OD)δ9.31(s,1H),8.29(s,1H),7.51(s,1H),7.40(s,1H),7.33-7.31(m,1H),7.13(d,J＝7.6Hz,1H),7.03(t,J＝8.9Hz,1H),6.86(s,1H),3.88(s,3H),2.53-2.50(m,1H),2.23(s,3H),2.01-2.00(m,1H),1.82-1.71(m,1H),1.06(d,J＝6.3Hz,3H)。
实施例257：
化合物编号349、350、351、352、353、358、359、360、361、362、363、364、365、366、367、368、369、370、371、372、373、374、375、376、377、378、379、380、381、382、383、421、422、423、424、425、428和429以类似实施例256的方式制备。
实施例258：
(1R,2R)-N-(8-氨基-6-((4-甲基吡啶-3-基)乙炔基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2- (1-甲基-1H-吡唑-4-基)环丙烷甲酰胺(化合物392)和(1S,2S)-N-(8-氨基-6-((4-甲基吡 啶-3-基)乙炔基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)环丙烷甲酰胺(化合物 391)
Figure BDA0002289356600006311
步骤1：4-甲基-3-((三甲基甲硅烷基)乙炔基)吡啶
在100℃、在氮气中，将3-溴-4-甲基吡啶(3g,17.44mmol)、乙炔基三甲基硅烷(2.56g,26.06mmol)、Pd(PPh3)2Cl2(612mg,0.87mmol)、CuI(165mg,0.86mmol)、TEA(7g,69.17mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(200mL)中的混合物搅拌12小时。所得溶液用乙酸乙酯稀释(300mL)，然后用水洗涤。在真空下浓缩所得混合物。该残余物在硅胶柱上用快速色谱提纯，用石油醚/乙酸乙酯(10/1)洗脱，得到4-甲基-3-[2-(三甲基甲硅烷基)乙炔基]吡啶(1g,5.26mmol)，其为无色油状物。LCMS(ESI)[M+H]+＝190。
步骤2：3-乙炔基-4-甲基吡啶
在室温，将4-甲基-3-[2-(三甲基甲硅烷基)乙炔基]吡啶(1g,5.28mmol)和碳酸钾(2.2g,15.91mmol)在甲醇(30mL)中的混合物搅拌3小时。过滤后，在真空下浓缩该滤液。该残余物在硅胶柱上用快速色谱提纯，用石油醚/乙酸乙酯(10/1)洗脱，得到3-乙炔基-4-甲基吡啶(500mg,4.23mmol)，其为无色油状物。LCMS(ESI)[M+H]+＝118。
步骤3：(1R,2R)-N-(8-氨基-6-((4-甲基吡啶-3-基)乙炔基)-2,7-二氮杂萘-3- 基)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)环丙烷甲酰胺和(1S,2S)-N-(8-氨基-6-((4-甲基吡啶-3- 基)乙炔基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)环丙烷甲酰胺
Figure BDA0002289356600006314
在110℃、在氮气中，将3-乙炔基-4-甲基吡啶(855mg,7.30mmol)、(1R,2R)-N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)环丙烷-1-甲酰胺(500mg,1.46mmol)、碳酸钾(404mg,2.92mmol)、Pd(AcO)2(33mg,0.15mmol)和PPh3(77mg,0.29mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(10mL)中的混合物搅拌12小时。过滤后，在真空下浓缩该滤液。该残余物经制备型HPLC提纯(XBridge Prep C18 OBD，19x150mm 5um；水(0.05％NH3H2O):ACN＝0％ACN高至50％,在7分钟内)，得到外消旋产物(40mg)。该外消旋产物经手性HPLC分离，得到两种异构体：(异构体的环丙烷立体化学：吡唑与酰胺处于反式位置；任意指定所有的绝对立体化学)异构体1：(51.4mg,0.1215mmol，8％产率)(假设的)，其为黄色固体。保留时间：2.527分钟(CHIRALPAK IC-3.0.46*5cm；3um；Hex(0.1％DEA):EtOH＝50:50；1.0ml/分钟)；LCMS(53)[M+H]+＝424.3，1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.01(s,1H),9.34(s,1H),8.67(s,1H),8.47(d,J＝5.0Hz,1H),8.23(s,1H),7.57(s,1H),7.48-7.37(m,3H),7.30(s,1H),7.20(s,1H),3.77(s,3H),2.49(s,3H),2.28-2.12(m,2H),1.50-1.36(m,1H),1.26-1.12(m,1H)；异构体2：(51.2mg,0.1210mmol，8％产率)(假设的)，其为黄色固体。保留时间：3.588分钟(CHIRALPAK IC-3。0.46*5cm；3um；Hex(0.1％DEA):EtOH＝50:50；1.0ml/分钟)；LCMS(53)[M+H]+＝424.2，1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.01(s,1H),9.34(s,1H),8.67(s,1H),8.47(d,J＝5.0Hz,1H),8.23(s,1H),7.57(s,1H),7.48-7.37(m,3H),7.30(s,1H),7.20(s,1H),3.77(s,3H),2.49(s,3H),2.28-2.12(m,2H),1.50-1.36(m,1H),1.26-1.12(m,1H)。
实施例259：
N-(8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-3-(甲基亚磺酰氨基)双 环[3.1.0]己烷-6-甲酰胺(化合物412)
Figure BDA0002289356600006321
步骤1：3-氨基-N-(8-(双(2,4-二甲氧基苄基)氨基)-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7- 二氮杂萘-3-基)双环[3.1.0]己烷-6-甲酰胺
Figure BDA0002289356600006331
在60℃，将N-(8-[双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-3-氧代双环[3.1.0]己烷-6-甲酰胺(200.00mg,0.29mmol)、NH4OAc(228.81mg,2.96mmol)、NaBH3CN(27.98mg,0.44mmol)在甲醇(5mL)中的混合物搅拌2小时。在真空中浓缩该反应混合物。该残余物经硅胶色谱提纯(DCM:MeOH＝10:1)，得到3-氨基-N-(8-(双(2,4-二甲氧基苄基)氨基)-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)双环[3.1.0]己烷-6-甲酰胺(80mg,40％)，其为棕色油状物，LCMS(ESI)[M+H]+＝675.3。
步骤2：N-(8-(双(2,4-二甲氧基苄基)氨基)-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂 萘-3-基)-3-(甲基亚磺酰氨基)双环[3.1.0]己烷-6-甲酰胺
在0℃，向3-氨基-N-(8-[双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)双环[3.1.0]己烷-6-甲酰胺(80.00mg,0.12mmol)和TEA(59.98mg,0.59mmol)在二氯甲烷中的混合物添加Ms2O。在0℃搅拌该反应溶液10分钟。该反应通过添加水淬灭，经二氯甲烷萃取，合并该有机层并在减压下在烘箱中干燥，其为黄色固体。该固体用于下一步骤中。LCMS(ESI)[M+H]+＝753.3。
步骤3：N-(8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-3-(甲基亚磺酰 氨基)双环[3.1.0]己烷-6-甲酰胺
向N-(8-[双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-3-甲烷亚磺酰氨基双环[3.1.0]己烷-6-甲酰胺(60mg,0.08mmol)的二氯甲烷溶液中添加三氟乙酸(2.5mL)。在25℃搅拌该反应溶液4小时，然后在真空下浓缩。该残余物经制备型HPLC提纯(XBridge Prep C18 OBD，19x150mm 5um；水(0.05％NH3H2O):CH3CN＝0％CAN高至50％在7分钟内)，得到(1R,5S,6R)-N-(8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-3-(甲基亚磺酰氨基)双环[3.1.0]己烷-6-甲酰胺，其为白色固体。LCMS(ESI)[M+H]+＝453.3，1H NMR(300MHz,CD3OD)δ9.35(s,1H),8.52(s,1H),8.46-8.40(m,2H),7.38(d,J＝5.1Hz,1H),7.01(s,1H),5.32-5.00(m,1H),3.98-3.72(m,1H),3.22-3.02(m,1H),3.01-2.94(m,1H),2.92(s,3H),2.90-2.71(m,1H),2.62-2.49(m,1H),2.41(s,3H),2.19-1.98(m,1H),1.70-1.50(m,1H)。
实施例260：
(1S,2S)-N-(8-氨基-6-(2,4,7-三甲基-8-氧代-7,8-二氢吡啶并[2,3-d]哒嗪-3- 基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)环丙烷-1-甲酰胺，(化合物410)、 (1R,2R)-N-(8-氨基-6-(2,4,7-三甲基-8-氧代-7,8-二氢吡啶并[2,3-d]哒嗪-3-基)-2,7- 二氮杂萘-3-基)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)环丙烷-1-甲酰胺，(化合物411)；(1S,2S)-N- (8-氨基-6-(4,7-二甲基-8-氧代-7,8-二氢吡啶并[2,3-d]哒嗪-3-基)-2,7-二氮杂萘-3- 基)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)环丙烷-1-甲酰胺，(化合物408)、(1R,2R)-N-(8-氨基-6- (4,7-二甲基-8-氧代-7,8-二氢吡啶并[2,3-d]哒嗪-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(1-甲 基-1H-吡唑-4-基)环丙烷-1-甲酰胺(化合物409)；(1S,2S)-N-(8-氨基-6-(2,7-二甲基-8- 氧代-7,8-二氢吡啶并[2,3-d]哒嗪-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4- 基)环丙烷-1-甲酰胺(化合物406)和(1R,2R)-N-(8-氨基-6-(2,7-二甲基-8-氧代-7,8-二 氢吡啶并[2,3-d]哒嗪-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)环丙烷-1- 甲酰胺(化合物407)
Figure BDA0002289356600006351
向耐压烧瓶中称量3-溴-7-甲基-吡啶并[2,3-d]哒嗪-8-酮(400mg,1.67mmol)和(4,4'-二-叔丁基-2,2'-联吡啶)双[(2-吡啶基)苯基]铱(III)六氟磷酸盐[Ir(ppy)2(dtbpy)]PF6(27.7mg,2mol％)。在氮气流下添加乙腈(8.3mL)、三氟乙酸(8.3mL)和过氧乙酸叔丁基酯(0.640mL,2.00mmol)，且密封该烧瓶。搅拌该反应混合物20小时，同时用KessilH150B蓝色LED灯照射，配有指向灯和该混合物之间空域的风扇。该混合物经二氯甲烷稀释，并用饱和碳酸氢钠水溶液洗涤，然后干燥(MgSO4)有机物并浓缩。该残余物经快速柱色谱提纯(CH2Cl2/MeOH，100:0-95:5)，得到单甲基化和二甲基化的产物(410mg,粗品)的混合物。向小瓶中的混合物中称量[1,1′-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯钯(II)-二氯甲烷配合物63.7mg,0.0764mmol)、双(频哪醇合)二硼(388mg,1.53mmol)和乙酸钾(450mg,4.59mmol)。在氮气中，添加无水1,4-二噁烷(5.1mL)并将小瓶密封。在100℃搅拌该反应混合物25小时。在冷却至室温后，在氮气中向该反应容器添加(±)-(1R,2R)-N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)环丙烷-1-甲酰胺(524mg,1.53mmol)、氯(2-二环己基膦基-2′,4′,6′-三异丙基-1,1′-联苯)[2-(2′-氨基-1,1′-联苯)]钯(II)(61.4mg,0.0765mmol)、2-二环己基膦基-2′,4′,6′-三异丙基联苯(37.2mg,0.0765mmol)和碳酸钾(634mg,4.59mmol)和水(1.5mL)。将小瓶密封，并在80℃搅拌69小时。将该反应混合物浓缩至干燥，且残余物经快速柱色谱提纯(CH2Cl2/MeOH，100:0-85:15)并经对映异构拆分SFC提纯，得到该二甲基目标化合物，其为红色固体(3.1mg,0.4％历经三步，以及3.4mg,0.4％历经三步)，且该C5-和C7-单甲基化的产物为白色和红色固体(8.0mg,1.0％历经三步；8.8mg,1.0％历经三步；6.9mg,0.8％历经三步；6.6mg,0.8％历经三步)。未确定5-和7-指定，并任意指定(异构体的环丙烷立体化学：吡唑与酰胺处于反式位置；任意指定所有的绝对立体化学。)二甲基的数据：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.97(s,1H),9.40(s,1H),8.57(s,1H),8.24(s,1H),7.56(s,1H),7.45(br s,2H),7.29(s,1H),6.85(s,1H),3.77(s,3H),3.77(s,3H),2.45(s,3H),2.41(s,3H),2.20(dd,J＝6.9,6.9Hz,2H),1.42-1.33(m,1H),1.22-1.15(m,1H)。5-甲基的数据(任意指定)：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.98(s,1H),9.41(s,1H),8.45(s,1H),8.40(s,1H),8.29(s,1H),7.56(s,1H),7.44(br s,2H),7.29(s,1H),7.12(s,1H),3.77(s,6H),2.78(s,3H),2.26-2.17(m,2H),1.45-1.34(m,1H),1.27-1.13(m,1H)。7-甲基的数据(任意指定)：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.98(s,1H),9.41(s,1H),9.03(s,1H),8.67(s,1H),8.30(s,1H),7.56(s,1H),7.45(br s,2H),7.29(s,1H),7.08(s,1H),3.79(s,3H),3.77(s,3H),2.71(s,3H),2.21(dd,J＝7.2,7.2Hz,2H),1.44-1.36(m,1H),1.23-1.14(m,1H)。
实施例261：
(1S,2S)-N-(8-氨基-6-(6-甲氧基-4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2- (1-甲基-1H-吡唑-4-基)环丙烷-1-甲酰胺((化合物395)、(1R,2R)-N-(8-氨基-6-(6-甲氧 基-4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)环丙烷-1-甲酰胺 (化合物396))
Figure BDA0002289356600006361
在小瓶中称量(±)-(1S,2S)-N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)环丙烷-1-甲酰胺(100.0mg,0.292mmol)、(6-甲氧基-4-甲基吡啶-3-基)硼酸(51.3mg,0.292mmol)、氯(2-二环己基膦基-2′,4′,6′-三异丙基-1,1′-联苯)[2-(2′-氨基-1,1′-联苯)]钯(II)(12.3mg,0.0146mmol)、2-二环己基膦基-2′,4′,6′-三异丙基联苯(7.1mg,0.0146mmol)和碳酸钾(121mg,0.875mmol)。在氮气中，添加无水四氢呋喃(1.5mL)和水(0.3mL)并将小瓶密封。在100℃搅拌该反应混合物17小时。在冷却至室温后，该反应混合物通过硅藻土过滤，用二氯甲烷和甲醇冲洗。在浓缩至干燥后，该残余物经HPLC和手性SFC提纯，得到该目标化合物，其为白色固体(23.9mg,19％和29.4mg,24％)；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.91(s,1H),9.34(s,1H),8.23(s,1H),8.19(s,1H),7.56(s,1H),7.29(s,1H),7.24(br s,2H),6.91(s,1H),6.74(s,1H),3.87(s,3H),3.77(s,3H),2.38(s,3H),2.26-2.14(m,2H),1.46-1.32(m,1H),1.27-1.05(m,1H)。(异构体的环丙烷立体化学：吡唑与酰胺处于反式位置；任意指定所有的绝对立体化学。)
实施例262：
(1S,2S)-N-(8-氨基-6-(5-甲氧基-4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2- (1-甲基-1H-吡唑-4-基)环丙烷-1-甲酰胺((化合物393)、
(1R,2R)-N-(8-氨基-6-(5-甲氧基-4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)环丙烷-1-甲酰胺(化合物394))
Figure BDA0002289356600006371
在小瓶中称量3-溴-5-甲氧基-4-甲基吡啶(120mg,0.594mmol)、[1,1′-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯钯(II)-二氯甲烷配合物24.7mg,0.0297mmol)、双(频哪醇合)二硼(151mg,0.594mmol)和乙酸钾(175mg,1.78mmol)。在氮气中，添加无水1,4-二噁烷(3.0mL)并将小瓶密封。在100℃搅拌该反应混合物40.5小时。冷却至室温后，在氮气中向该反应容器添加(±)-(1S,2S)-N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)环丙烷-1-甲酰胺(447mg,1.30mmol)、[1,1′-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯钯(II)-二氯甲烷配合物(24.7mg,0.0297mmol)和碳酸钾(246mg,1.78mmol)和水(0.6mL)。将小瓶密封，并在80℃搅拌4.5天。将该反应混合物浓缩至干燥，且残余物经快速柱色谱提纯(CH2Cl2/MeOH，100:0-85:15)，得到该目标化合物，其为棕色固体(85mg,33％,两步)。经手性SFC进一步分离对映异构体，得到该目标化合物，其为白色固体；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.93(s,1H),9.36(s,1H),8.29(s,1H),8.24(s,1H),8.23(s,1H),7.56(s,1H),7.31(br s,2H),7.29(s,1H),6.91(s,1H),3.94(s,3H),3.77(s,3H),2.25-2.14(m,2H),2.21(s,3H),1.45-1.33(m,1H),1.23-1.12(m,1H)。(异构体的环丙烷立体化学：吡唑与酰胺处于反式位置；任意指定所有的绝对立体化学。)
实施例263：
(1S,2S)-N-(8-氨基-6-(6-(甲氧基甲基)-4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3- 基)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)环丙烷-1-甲酰胺((化合物387)、
(1R,2R)-N-(8-氨基-6-(6-(甲氧基甲基)-4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3- 基)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)环丙烷-1-甲酰胺(化合物388))
Figure BDA0002289356600006381
如同制备(±)-(1S,2S)-N-(8-氨基-6-(4-甲基-6-(2-氧代氮杂环丁烷-1-基)吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)环丙烷-1-甲酰胺((化合物343))的操作，除了使用5-溴-4-甲基-吡啶-2-甲酸甲基酯(140mg,0.648mmol)作为起始物质，在柱色谱(CH2Cl2/MeOH，100:0-85:15)和手性SFC分离后，得到该目标化合物，其为白色固体(28.0mg,10％,历经两步以及24.5mg,9％,历经两步)；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.93(s,1H),9.36(s,1H),8.51(s,1H),8.25(s,1H),7.56(s,1H),7.35-7.21(m,4H),6.96(s,1H),4.51(s,2H),3.77(s,3H),3.39(s,3H),2.43(s,3H),2.24-2.13(m,2H),1.44-1.32(m,1H),1.24-1.13(m,1H)。(异构体的环丙烷立体化学：吡唑与酰胺处于反式位置；任意指定所有的绝对立体化学。)
实施例264：
(S)-2-(5-(1-氨基-6-((1S,2S)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)环丙烷-1-甲酰氨 基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-4-甲基吡啶-2-基)-4,5-二氢噁唑-4-甲酸甲基酯(化合物385)、 (S)-2-(5-(1-氨基-6-((1R,2R)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)环丙烷-1-甲酰氨基)-2,7-二 氮杂萘-3-基)-4-甲基吡啶-2-基)-4,5-二氢噁唑-4-甲酸甲基酯(化合物386)
Figure BDA0002289356600006391
步骤1：(5-溴-4-甲基吡啶-2-甲酰基)-L-丝氨酸甲基酯
Figure BDA0002289356600006392
在0℃、在氮气中，向5-溴-4-甲基吡啶-2-甲酸(3.00g,13.9mmol)的无水四氢呋喃(46mL)溶液中添加无水DMF(0.10mL,1.4mmol)，然后在10分钟内逐滴添加草酰氯(1.80mL,20.8mmol)。搅拌5分钟后，移去冰浴，使该混合物回到室温。19小时后，浓缩该混合物至干燥。在另一个烧瓶中，向L-丝氨酸甲基酯盐酸盐(2.38g,15.3mmol)的无水四氢呋喃(25mL)溶液中添加三乙胺(2.3mL,17mmol)并搅拌1小时，然后倒入上文制备的无水酰氯中。继续搅拌该合并的反应混合物1.5小时，然后倒入饱和碳酸氢钠水溶液并用乙酸异丙基酯萃取。用盐水洗涤该有机物，经硫酸镁干燥，然后浓缩至干燥。所得残余物经快速柱色谱提纯(CH2Cl2/MeOH，100:0-95:5)，得到所述标题化合物，其为黄色固体(1.457g,33％)；1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ8.69(brd，J＝7.9Hz,1H),8.60(s,1H),8.04(s,1H),4.85(dt，J＝7.9，3.9Hz,1H),4.17-3.98(m,2H),3.83(s,3H),2.57(t,J＝6.1Hz,1H),2.47(s,3H)。
步骤2：(S)-2-(5-(1-氨基-6-(反式-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)环丙烷-1-甲酰氨 基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-4-甲基吡啶-2-基)-4,5-二氢噁唑-4-甲酸甲基酯
在氮气中、在-78℃，向(5-溴-4-甲基吡啶-2-甲酰基)-L-丝氨酸甲基酯(400mg,1.26mmol)的无水二氯甲烷(6.3mL)溶液中添加无水二乙基氨基三氟化硫(0.33mL,2.5mmol)，并温热至室温。搅拌1小时后，通过添加饱和碳酸氢钠水溶液小心淬灭该反应，并用二氯甲烷萃取。该有机物经硫酸镁干燥并浓缩至粗的橙色固体。向在小瓶中的此粗固体上称量[1,1′-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯钯(II)-二氯甲烷配合物(52.5mg,0.0630mmol)、双(频哪醇合)二硼(320mg,1.26mmol)和乙酸钾(371mg,3.78mmol)。在氮气中，添加无水1,4-二噁烷(6.3mL)并将小瓶密封。在100℃搅拌该反应混合物22小时。冷却至室温后，在氮气中，向该反应容器添加(±)-(1R,2R)-N-(8-氨基-6-氯-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)环丙烷-1-甲酰胺(432mg,1.26mmol)、氯(2-二环己基膦基-2′,4′,6′-三异丙基-1,1′-联苯)[2-(2′-氨基-1,1′-联苯)]钯(II)(53.2mg,0.0630mmol)、2-二环己基膦基-2′,4′,6′-三异丙基联苯(30.7mg,0.0630mmol)和碳酸钾(523mg,3.78mmol)和水(1.3mL)。将小瓶密封，并在100℃搅拌18.5小时。将该反应混合物浓缩至干燥，且残余物经快速柱色谱提纯(CH2Cl2/MeOH，100:0-85:15)，得到外消旋的化合物，其为白色固体(62.2mg,9％历经三步)。通过手性SFC将对映异构体进一步分离，得到该目标化合物，其为白色固体；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.96(s,1H),10.36(s,1H),9.39(s,1H),8.71(s,1H),8.28(s,1H),8.08(s,1H),7.56(s,1H),7.37(br s,2H),7.29(s,1H),7.07(s,1H),6.63(s,1H),5.90(d,J＝1.5Hz,1H),3.86(s,3H),3.77(s,3H),2.54(s,3H),2.24-2.17(m,2H),1.44-1.34(m,1H),1.29-1.06(m,1H)。(吡唑与酰胺处于反式位置；任意指定所有的绝对立体化学)。
实施例265：
反式-N-(8-氨基-6-(6-((S)-4-异丙基-4,5-二氢噁唑-2-基)-4-甲基吡啶-3- 基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)环丙烷-1-甲酰胺(化合物384)
Figure BDA0002289356600006401
步骤1：(S)-5-溴-N-(1-羟基-3-甲基丁烷-2-基)-4-甲基吡啶-2-甲酰胺
Figure BDA0002289356600006402
在氮气中、在0℃，在10分钟内向5-溴-4-甲基吡啶-2-甲酸(2.00g,9.26mmol)和无水DMF(0.14mL,1.9mmol)的无水四氢呋喃(31mL)溶液中添加草酰氯(1.61mL,18.5mmol)。移去冰浴，使该混合物回到室温。42小时后，浓缩该混合物至干燥。然后将该粗的酰氯溶于无水四氢呋喃(31mL)，并添加L-缬氨醇(1.1mL,9.3mmol)。搅拌该反应混合物7天，然后倒入饱和碳酸氢钠水溶液并用乙酸异丙基酯萃取。用盐水洗涤该有机物，经硫酸镁干燥，然后浓缩至干燥。所得残余物经快速柱色谱提纯(庚烷/iPrOAc，100:0-0:100)，得到所述标题化合物，其为黄色液体(1.08g,39％)；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.73(s,1H),8.24(br d，J＝9.7Hz,1H),8.03(s,1H),4.73(t,J＝5.4Hz,1H),3.78-3.70(m,1H),3.63-3.54(m,1H),3.54-3.44(m,1H),2.46(s,3H),1.96-1.87(m,1H),0.91(d,J＝6.6Hz,3H),0.86(d,J＝6.9Hz,3H)。
步骤2：反式-N-(8-氨基-6-(6-((S)-4-异丙基-4,5-二氢噁唑-2-基)-4-甲基吡 啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)-2-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)环丙烷-1-甲酰胺
如同实施例264的操作，除了使用(S)-5-溴-N-(1-羟基-3-甲基丁烷-2-基)-4-甲基吡啶-2-甲酰胺(118mg,0.417mmol)作为起始物质，在柱色谱(CH2Cl2/MeOH，100:0-85:15)和HPLC提纯后，得到该目标化合物，其为白色固体(10.8mg,5％,历经两步)；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.95(s,1H),9.38(s,1H),8.65(s,1H),8.27(s,1H),7.93(s,1H),7.56(s,1H),7.36(br s,2H),7.29(s,1H),7.03(s,1H),4.54-4.37(m,1H),4.22-4.05(m,2H),3.77(s,3H),2.25-2.13(m,2H),1.87-1.71(m,1H),1.45-1.30(m,1H),1.24-1.10(m,1H),0.98(d,J＝6.7Hz,3H),0.91(d,J＝6.7Hz,3H)。(异构体的环丙烷立体化学：吡唑与酰胺处于反式位置；任意指定绝对立体化学。)
实施例266：
化合物编号397、398、399、400、401、402、403、404、405、413、419、420和427以类似实施例263或实施例265中的操作的方式制备。
实施例267：
2'-((8-氨基-6-(5-氨基-4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)氨基)-6'-甲 基-5',6'-二氢螺[环丙烷-1,4'-吡唑并[1,5-d][1,4]二氮杂
Figure BDA0002289356600006411
]-7'(8'H)-酮(化合物414)
Figure BDA0002289356600006421
步骤1：2-(3,5-二溴-1H-吡唑-1-基)-N-甲基-N-(丙-2-烯-1-基)乙酰胺
Figure BDA0002289356600006422
在室温，将2-(3,5-二溴-1H-吡唑-1-基)乙酸(15g,52.84mmol)、甲基(丙-2-烯-1-基)胺(5.7g,80.15mmol)、N,N-二异丙基乙胺(27g,208.9mmol)和HATU(30g,78.9mmol)的N,N-二甲基甲酰胺(500mL)溶液搅拌16小时。所得混合物用乙酸乙酯稀释，并将该有机层用氯化钠溶液洗涤，用无水硫酸钠干燥，过滤并在真空中浓缩。该残余物在硅胶上用快速色谱提纯，用乙酸乙酯/石油醚(2/3)洗脱，得到2-(3,5-二溴-1H-吡唑-1-基)-N-甲基-N-(丙-2-烯-1-基)乙酰胺(16.3g,92％)，其为黄色油状物。LCMS(ESI)[M+H]+＝338.0。
步骤2：2-溴-6-甲基-4-亚甲基-4H,5H,6H,7H,8H-吡唑并[1,5-d][1,4]二氮杂 - 7-酮
将2-(3,5-二溴-1H-吡唑-1-基)-N-甲基-N-(丙-2-烯-1-基)乙酰胺(5g,14.84mmol)、乙酸钯(166mg,0.74mmol)、三苯基膦(388mg,1.48mmol)，TBAB(4.8g,14.890mmol)和乙酸钾(4.2g,42.80mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(100mL)中的混合物在80℃搅拌10小时。过滤后，在真空下浓缩该滤液。该残余物在硅胶柱上提纯，用乙酸乙酯/石油醚(2/1)洗脱，得到2-溴-6-甲基-4-亚甲基-4H,5H,6H,7H,8H-吡唑并[1,5-d][1,4]二氮杂
Figure BDA0002289356600006425
-7-酮(3.2g,84％)，其为棕色油状物。LCMS(ESI)[M+H]+＝258.1。
步骤3：2'-溴-6'-甲基-5',6'-二氢螺[环丙烷-1,4'-吡唑并[1,5-d][1,4]二氮杂
Figure BDA0002289356600006433
]-7'(8'H)-酮
在室温，将三甲基氧化锍碘化物(1.29g,5.86mmol)和叔丁醇钾(656mg,5.85mmol)在二甲基亚砜(30mL)中的混合物搅拌30分钟。然后添加2-溴-6-甲基-4-亚甲基-4H,5H,6H,7H,8H-吡唑并[1,5-d][1,4]二氮杂-7-酮(500mg,1.95mmol)的二甲基亚砜(3mL)溶液。该混合物随后在50℃搅拌12小时。该反应混合物用乙酸乙酯稀释，然后用水洗涤。将该有机层经无水硫酸钠干燥，过滤并在真空中浓缩。该残余物在硅胶柱用二氯甲烷/甲醇(10/1)提纯，得到2'-溴-6'-甲基-5',6'-二氢螺[环丙烷-1,4'-吡唑并[1,5-d][1,4]二氮杂
Figure BDA0002289356600006435
]-7'(8'H)-酮(120mg,23％)，其为白色固体。LCMS(ESI)[M+H]+＝270。
步骤4：N-[5-[6-氨基-1-[双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]氨基]-2,7-二氮杂萘-3- 基]-4-甲基-3-吡啶基]-N-叔丁基氧基羰基-氨基甲酸叔丁基酯
在100℃，将3-氯-N1,N1-双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]-2,7-二氮杂萘-1,6-二胺(560mg,1.13mmol)、N-叔丁基氧基羰基-N-[4-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-3-吡啶基]氨基甲酸叔丁基酯(737mg,1.7mmol)、XphosPdG2(171mg,0.23mmol)、Xphos(215mg,0.45mmol)和KOAc(332mg,3.39mmol)在1,4-二噁烷(15mL)和水(1.5mL)中的混合物搅拌1小时。在真空下浓缩该混合物。该残余物用反相色谱提纯(水/CH3CN(15/85))，得到N-[5-[6-氨基-1-[双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]氨基]-2,7-二氮杂萘-3-基]-4-甲基-3-吡啶基]-N-叔丁基氧基羰基-氨基甲酸叔丁基酯(220mg,0.28mmol)，其为棕色固体。LCMS(ESI)[M+H]+＝767。
步骤5：N-[5-[1-[双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-[(6-甲基-7-氧代-螺 [5,8-二氢吡唑并[1,5-d][1,4]二氮杂
Figure BDA0002289356600006443
-4,1'-环丙烷]-2-基)氨基]-2,7-二氮杂萘-3- 基]-4-甲基-3-吡啶基]-N-叔丁基氧基羰基-氨基甲酸叔丁基酯
Figure BDA0002289356600006441
在130℃，将N-[5-[6-氨基-1-[双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]氨基]-2,7-二氮杂萘-3-基]-4-甲基-3-吡啶基]-N-叔丁基氧基羰基-氨基甲酸叔丁基酯(215.0mg,0.2800mmol)、2-溴-6-甲基-螺[5,8-二氢吡唑并[1,5-d][1,4]二氮杂
Figure BDA0002289356600006444
-4,1'-环丙烷]-7-酮(90mg,0.34mmol)、t-BuBrettphos Pd G3(95mg,0.11mmol)、t-BuBrettphos(54mg,0.11mmol)和Cs2CO3(456mg,1.4mmol)在1,4-二噁烷(15mL)中的混合物搅拌2小时。在真空下浓缩该反应。该残余物在硅胶上用快速色谱提纯，用DCM/MeOH(97/3)洗脱，得到N-[5-[1-[双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-[(6-甲基-7-氧代-螺[5,8-二氢吡唑并[1,5-d][1,4]二氮杂
Figure BDA0002289356600006445
-4,1'-环丙烷]-2-基)氨基]-2,7-二氮杂萘-3-基]-4-甲基-3-吡啶基]-N-叔丁基氧基羰基-氨基甲酸叔丁基酯(140mg,0.14mmol)，其为棕色固体。LCMS(ESI)[M+H]+＝956。
步骤6：2-[[8-氨基-6-(5-氨基-4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]氨基]- 6-甲基-螺[5,8-二氢吡唑并[1,5-d][1,4]二氮杂
Figure BDA0002289356600006446
-4,1'-环丙烷]-7-酮
Figure BDA0002289356600006442
将N-[5-[1-[双[(2,4-二甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-[(6-甲基-7-氧代-螺[5,8-二氢吡唑并[1,5-d][1,4]二氮杂-4,1'-环丙烷]-2-基)氨基]-2,7-二氮杂萘-3-基]-4-甲基-3-吡啶基]-N-叔丁基氧基羰基-氨基甲酸叔丁基酯(140mg,0.15mmol)和TFA(5mL)的二氯甲烷(0.5mL)溶液在80℃搅拌0.5小时。在真空下浓缩该混合物。用NH3.H2O将该反应混合物调节至pH 10。该粗产物经制备型HPLC提纯，使用下述条件：柱：XBridge Shield RP18OBD柱30*150mm,5um；流动相A：水(10mmol/L NH4HCO3)，流动相B：ACN；流速：60mL/分钟；梯度：20％B至27％B在7分钟内；254nm；Rt：5.9分钟，得到2-[[8-氨基-6-(5-氨基-4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]氨基]-6-甲基-螺[5,8-二氢吡唑并[1,5-d][1,4]二氮杂
Figure BDA0002289356600006453
-4,1'-环丙烷]-7-酮(20.4mg,0.044mmol)，其为白色固体。LCMS(ESI)[M+H]+＝456.3；1H NMR(300MHz,DMSO-d6)δ9.31(s,1H),9.19(s,1H),7.92(s,1H),7.75(s,1H),7.45(s,1H),7.02(s,2H),6.68(s,1H),5.67(s,1H),5.10-5.06(m,4H),3.72(s,2H),2.99(s,3H),2.06(s,3H),1.23-1.16(m,2H),0.96-0.92(m,2H)。
实施例268：
2-((8-氨基-6-(5-氨基-4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)氨基)-6-甲基- 5,6-二氢-4H-吡唑并[1,5-d][1,4]二氮杂
Figure BDA0002289356600006454
-7(8H)-酮(化合物415)
Figure BDA0002289356600006451
步骤1：2-(3-溴-5-甲基-吡唑-1-基)乙酸甲基酯
Figure BDA0002289356600006452
向3-溴-5-甲基-1H-吡唑(100g,621.12mmol)、2-氯乙酸甲基酯(101.11g,931.68mmol)和K2CO3(154.29g,1118mmol)的N,N-二甲基甲酰胺(1L)溶液添加TBAI(11.46g,31.06mmol)。在20℃搅拌所得溶液12小时。该反应混合物用EA(5000mL)稀释。该溶液用水洗涤(300mLx3)，并且合并该有机层。将该有机层经无水硫酸钠干燥并在真空下浓缩。该残余物在硅胶上用快速色谱提纯，用PE/DCM(60/40)洗脱，得到2-(3-溴-5-甲基-吡唑-1-基)乙酸甲基酯(120g,82.9％产率)，其为白色固体。
步骤2：2-[3-溴-5-(溴甲基)吡唑-1-基]乙酸甲基酯
将2-(3-溴-5-甲基-吡唑-1-基)乙酸甲基酯(50.0g,214.54mmol)和AIBN(3.52g,21.45mmol)的四氯化碳(1500mL)溶液在室温搅拌5分钟。添加1-溴-2,5-吡咯烷二酮(40.09g,225.26mmol)。在80℃搅拌该混合物1小时。在真空中浓缩该反应混合物。该残余物在硅胶上用快速色谱提纯，用PE/EA(92/8)洗脱，得到2-[3-溴-5-(溴甲基)吡唑-1-基]乙酸甲基酯(35.5g,53％产率)，其为白色固体。
步骤3：2-(3-溴-5-(氰基甲基)-1H-吡唑-1-基)乙酸甲基酯
将2-[3-溴-5-(溴甲基)吡唑-1-基]乙酸甲基酯(35.4g,113.48mmol)和氰化钠(8.87g,181.02mmol)的二甲基亚砜(550mL)溶液在室温搅拌1小时。该反应溶液用EA(2.5L)稀释。该溶液用水洗涤(200mLx5)，并合并该有机层。将该有机层经无水硫酸钠干燥，过滤并在真空中浓缩。该残余物在硅胶上用快速色谱提纯，用DCM/MeOH(99/1)洗脱，得到2-(3-溴-5-(氰基甲基)-1H-吡唑-1-基)乙酸甲基酯(17.6g,60％产率)，其为白色固体。
步骤4：2-(5-(2-氨基乙基)-3-溴-1H-吡唑-1-基)乙酸甲基酯
Figure BDA0002289356600006463
向2-[3-溴-5-(氰基甲基)吡唑-1-基]乙酸甲基酯(3.0g,11.62mmol)的甲醇(600mL)溶液中添加PtO2(600mg,2.64mmol)。在25℃、在10atm的氢气下，搅拌该混合物15小时。过滤该混合物。该滤液直接用于下一步骤中，无需提纯。
步骤5：2-溴-4,5,6,8-四氢吡唑并[1,5-d][1,4]二氮杂
Figure BDA0002289356600006465
-7-酮
Figure BDA0002289356600006464
向2-[5-(2-氨基乙基)-3-溴-吡唑-1-基]乙酸甲基酯溶液(600mL)中添加TEA(70mL)。在25℃搅拌该混合物15小时。在真空下浓缩所得溶液。该残余物在硅胶上用快速色谱提纯，经DCM/MeOH(98/2)洗脱，得到2-溴-4,5,6,8-四氢吡唑并[1,5-d][1,4]二氮杂
Figure BDA0002289356600006473
-7-酮(1.12g,41.9％产率，两步)，其为白色固体。
步骤6：2-溴-6-甲基-5,6-二氢-4H-吡唑并[1,5-d][1,4]二氮杂
Figure BDA0002289356600006474
-7(8H)-酮
Figure BDA0002289356600006471
在20℃，向2-溴-5,6,7,8-四氢-4H-吡唑并[1,5-d][1,4]二氮杂
Figure BDA0002289356600006475
(469.53mg,2.17mmol)和叔丁醇钾(365.74mg,3.26mmol)在四氢呋喃(20mL)中的混合物添加碘甲烷(616.86mg,4.35mmol)。在20℃搅拌所得溶液1小时。在真空下浓缩该混合物。该残余物在硅胶上用快速色谱提纯，用二氯甲烷/甲醇(20/1)洗脱，得到2-溴-6-甲基-4,5,7,8-四氢吡唑并[1,5-d][1,4]二氮杂
Figure BDA0002289356600006476
(400mg,1.74mmol，80％产率)。LCMS(ESI)[M+H]+＝244。
步骤7：N-[5-[1-[双[(2,6-二甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-[(6-甲基-7-氧代-5,8- 二氢-4H-吡唑并[1,5-d][1,4]二氮杂
Figure BDA0002289356600006477
-2-基)氨基]-2,7-二氮杂萘-3-基]-4-甲基-3-吡 啶基]-N-叔丁基氧基羰基-氨基甲酸叔丁基酯
在120℃，将N-[5-[6-氨基-1-[双[(2,6-二甲氧基苯基)甲基]氨基]-2,7-二氮杂萘-3-基]-4-甲基-3-吡啶基]-N-叔丁基氧基羰基-氨基甲酸叔丁基酯(130mg,0.17mmol)、2-溴-6-甲基-5,8-二氢-4H-吡唑并[1,5-d][1,4]二氮杂
Figure BDA0002289356600006478
-7-酮(67mg,0.26mmol)、tBuBrettphos Pd G3(60mg,0.07mmol)、tBuBrettphos(41mg,0.09mmol)和Cs2CO3(166mg,0.51mmol)在1,4-二噁烷(10mL)中的混合物搅拌1小时。在真空下浓缩该混合物。该残余物在硅胶上用快速色谱提纯，用MeOH/DCM(1/10)洗脱，得到N-[5-[1-[双[(2,6-二甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-[(6-甲基-7-氧代-5,8-二氢-4H-吡唑并[1,5-d][1,4]二氮杂
Figure BDA0002289356600006479
-2-基)氨基]-2,7-二氮杂萘-3-基]-4-甲基-3-吡啶基]-N-叔丁基氧基羰基-氨基甲酸叔丁基酯(50mg,0.05mmol)，其为黄色固体。LCMS(ESI)[M+H]+＝931。
步骤8：2-[[8-氨基-6-(5-氨基-4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]氨基]- 6-甲基-5,8-二氢-4H-吡唑并[1,5-d][1,4]二氮杂
Figure BDA0002289356600006482
-7-酮
Figure BDA0002289356600006481
将N-[5-[1-[双[(2,6-二甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-[(6-甲基-7-氧代-5,8-二氢-4H-吡唑并[1,5-d][1,4]二氮杂-2-基)氨基]-2,7-二氮杂萘-3-基]-4-甲基-3-吡啶基]-N-叔丁基氧基羰基-氨基甲酸叔丁基酯(50.0mg,0.05mmol)在CF3COOH(1.0mL)中的混合物在80℃搅拌30分钟。在真空下浓缩该混合物。用NH3的甲醇溶液将该反应混合物调节至pH＝8。该粗产物经制备型HPLC提纯，使用下述条件：柱，XBridge Prep C18 OBD柱19x150mm；流动相：水(0.05％NH3H2O)和ACN(10％-50％)；检测器，UV 254nm.RT：[7分钟]，得到2-[[8-氨基-6-(5-氨基-4-甲基-3-吡啶基)-2,7-二氮杂萘-3-基]氨基]-6-甲基-5,8-二氢-4H-吡唑并[1,5-d][1,4]二氮杂-7-酮(10mg,0.023mmol)，其为黄色固体。LCMS(ESI)[M+H]+＝430.2。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.37(s,1H),9.20(s,1H),7.93(s,1H),7.77(s,1H),7.51(s,1H),7.03(s,2H),6.68(s,1H),6.06(s,1H),5.11(s,2H),4.99(s,2H),3.84(t,J＝6Hz,2H),3.06(t,J＝6Hz,2H),2.96(s,3H),2.08(s,3H)。
实施例269：
(S)-2-((8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)氨基)-6,7-二氢- 4H-吡唑并[5,1-c][1,4]噁嗪-7-腈(化合物416)和(R)-2-((8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3- 基)-2,7-二氮杂萘-3-基)氨基)-6,7-二氢-4H-吡唑并[5,1-c][1,4]噁嗪-7-腈(化合物 417)
步骤1：3-溴-1-(噁烷-2-基)-1H-吡唑-5-甲酸甲基酯
Figure BDA0002289356600006492
在80℃，将3-溴-1H-吡唑-5-甲酸甲基酯(10g,48.77mmol)、4-甲基苯-1-磺酸(500mg,2.90mmol)和3,4-二氢-2H-吡喃(12.2g,145.03mmol)在乙酸乙酯(150mL)中的混合物搅拌4小时。在真空下浓缩该反应。使用二氯甲烷/甲醇(10/1)，该残余物经硅胶柱提纯，得到3-溴-1-(噁烷-2-基)-1H-吡唑-5-甲酸甲基酯(9g,31.14mmol)，其为黄色油状物。LCMS(ESI)[M+H]+＝289。
步骤2：[3-溴-1-(噁烷-2-基)-1H-吡唑-5-基]甲醇
Figure BDA0002289356600006493
在0℃，向3-溴-1-(噁烷-2-基)-1H-吡唑-5-甲酸甲基酯(7.5g,25.94mmol)的二氯甲烷(200mL)溶液中添加DIBALH(103mL,51.88mmol)。在0℃，在水/冰浴中搅拌所得溶液1小时。该反应经冰水淬灭。过滤后，所得溶液经二氯甲烷萃取，合并该有机层并经无水硫酸钠干燥。滤出该固体。在真空下浓缩所得混合物，得到[3-溴-1-(噁烷-2-基)-1H-吡唑-5-基]甲醇(6g,23.07mmol)，其为无色油状物。LCMS(ESI)[M+H]+＝261。
步骤3：3-[[3-溴-1-(噁烷-2-基)-1H-吡唑-5-基]甲氧基]-2-羟基丙酸
在室温、在氮气中，将[3-溴-1-(噁烷-2-基)-1H-吡唑-5-基]甲醇(200mg,0.76mmol)、氢化钠(62mg,2.58mmol)、氧杂环丙烷-2-甲酸乙基酯(134mg,1.15mmol)在四氢呋喃(10mL)中的混合物搅拌12小时。然后，用水淬灭该反应。用氯化氢将该反应混合物调节至pH 4。所得溶液用乙酸乙酯萃取，并用无水硫酸钠干燥。过滤后，在真空下浓缩该滤液。该残余物用反相色谱提纯(乙腈0-40/0.1％HCl/水)，得到3-[[3-溴-1-(噁烷-2-基)-1H-吡唑-5-基]甲氧基]-2-羟基丙酸(130mg,0.37mmol)，其为白色固体。LCMS(ESI)[M+H]+＝349。
步骤4：3-[[3-溴-1-(噁烷-2-基)-1H-吡唑-5-基]甲氧基]-2-羟基丙酸甲基酯
Figure BDA0002289356600006501
向3-[[3-溴-1-(噁烷-2-基)-1H-吡唑-5-基]甲氧基]-2-羟基丙酸(130mg,0.37mmol)的四氢呋喃(10mL)和甲醇(2mL)溶液中添加TMSCHN2(0.22mL,3.852mmol)。在室温搅拌所得溶液2小时。在真空下浓缩所得混合物，得到3-[[3-溴-1-(噁烷-2-基)-1H-吡唑-5-基]甲氧基]-2-羟基丙酸甲基酯(140mg,粗品)，其为白色固体。LCMS(ESI)[M+H]+＝363。
步骤5：3-[(3-溴-1H-吡唑-5-基)甲氧基]-2-羟基丙酸甲基酯
Figure BDA0002289356600006502
在室温，将3-[[3-溴-1-(噁烷-2-基)-1H-吡唑-5-基]甲氧基]-2-羟基丙酸甲基酯(130mg,0.35mmol)在二氯甲烷(4mL)和三氟乙酸(2mL)中的混合物搅拌3小时。在真空下浓缩所得混合物，得到3-[(3-溴-1H-吡唑-5-基)甲氧基]-2-羟基丙酸甲基酯(50mg,0.18mmol)，其为白色固体。LCMS(ESI)[M+H]+＝279。
步骤6：3-[(3-溴-1H-吡唑-5-基)甲氧基]-2-氯丙酸甲基酯
Figure BDA0002289356600006503
在70℃，将3-[(3-溴-1H-吡唑-5-基)甲氧基]-2-羟基丙酸甲基酯(100mg,0.35mmol)和亚硫酰氯(1mL)在二氯甲烷(10mL)中的混合物搅拌5小时。在真空下浓缩所得混合物，得到3-[(3-溴-1H-吡唑-5-基)甲氧基]-2-氯丙酸甲基酯(80mg,0.27mmol)，其为白色固体。LCMS(ESI)[M+H]+＝297。
步骤7：2-溴-4H,6H,7H-吡唑并[3,2-c][1,4]噁嗪-7-甲酸甲基酯
Figure BDA0002289356600006511
将3-[(3-溴-1H-吡唑-5-基)甲氧基]-2-氯丙酸甲基酯(650mg,2.18mmol)和碳酸钾(909mg,6.57mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(10mL)中的混合物在室温搅拌12小时。所得溶液经水稀释并用乙酸乙酯萃取，合并该有机层并在真空下浓缩。该残余物在硅胶上用快速色谱提纯，用二氯甲烷/甲醇(10/1)洗脱，得到2-溴-4H,6H,7H-吡唑并[3,2-c][1,4]噁嗪-7-甲酸甲基酯(300mg,1.15mmol)，其为灰色固体。LCMS(ESI)[M+H]+＝261。
步骤8：2-溴-4H,6H,7H-吡唑并[3,2-c][1,4]噁嗪-7-甲酰胺
在90℃，将2-溴-4H,6H,7H-吡唑并[3,2-c][1,4]噁嗪-7-甲酸甲基酯(300mg,1.15mmol)和NH3/甲醇(10mL,7M)的混合物搅拌6小时。在真空下浓缩所得混合物，得到2-溴-4H,6H,7H-吡唑并[3,2-c][1,4]噁嗪-7-甲酰胺(200mg,0.81mmol)，其为白色固体。LCMS(ESI)[M+H]+＝246。
步骤9：2-溴-4H,6H,7H-吡唑并[3,2-c][1,4]噁嗪-7-腈
Figure BDA0002289356600006513
在0℃，向2-溴-4H,6H,7H-吡唑并[3,2-c][1,4]噁嗪-7-甲酰胺(200mg,0.81mmol)和TEA(247mg,2.44mmol)的二氯甲烷(10mL)溶液中添加TFAA(343mg,1.63mmol)，然后在室温搅拌2小时。在真空下浓缩所得混合物。该残余物经硅胶柱用二氯甲烷/甲醇(98/2)提纯，得到2-溴-4H,6H,7H-吡唑并[3,2-c][1,4]噁嗪-7-腈(100mg,0.44mmol)，其为白色固体。LCMS(ESI)[M+H]+＝228。
步骤10：2-[(8-[双[(3,4-二甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2, 7-二氮杂萘-3-基)氨基]-4H,6H,7H-吡唑并[3,2-c][1,4]噁嗪-7-腈
在120℃，将1-N,1-N-双[(3,4-二甲氧基苯基)甲基]-3-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-1,6-二胺(242mg,0.44mmol)、2-溴-4H,6H,7H-吡唑并[3,2-c][1,4]噁嗪-7-腈(100mg,0.44mmol)、BrettPhos Pd G3(75mg,0.08mmol)、t-BuBrettPhos(85mg,0.17mmol)和Cs2CO3(575mg,1.76mmol)在二噁烷(10mL)中的混合物搅拌0.5小时。过滤后，在真空下浓缩该滤液。该残余物在硅胶上用快速色谱提纯，用二氯甲烷/甲醇(10/1)洗脱，得到2-[(8-[双[(3,4-二甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)氨基]-4H,6H,7H-吡唑并[3,2-c][1,4]噁嗪-7-腈(100mg,0.25mmol)，其为白色固体。LCMS(ESI)[M+H]+＝699。
步骤11：(7S)-2-[[8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基]氨基]- 4H,6H,7H-吡唑并[3,2-c][1,4]噁嗪-7-腈和(7R)-2-[[8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2, 7-二氮杂萘-3-基]氨基]-4H,6H,7H-吡唑并[3,2-c][1,4]噁嗪-7-腈
Figure BDA0002289356600006522
在80℃，将2-[(8-[双[(3,4-二甲氧基苯基)甲基]氨基]-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基)氨基]-4H,6H,7H-吡唑并[3,2-c][1,4]噁嗪-7-腈(100mg,0.14mmol)在三氟乙酸(5mL)中的混合物搅拌30分钟。在真空下浓缩所得混合物。该残余物用反相色谱提纯(乙腈0-50/0.1％NH4HCO3/水)，得到2-[[8-氨基-6-(4-甲基吡啶-3-基)-2,7-二氮杂萘-3-基]氨基]-4H,6H,7H-吡唑并[3,2-c][1,4]噁嗪-7-腈(50mg,0.12mmol)，其为黄色固体。该外消旋物经手性HPLC分离，得到两种异构体：异构体1：保留时间：3.37分钟(手性纤维素-SB，0.46*15cm；5um；100％MeOH(0.1％DEA)；1ml/分钟)；LCMS(ESI)[M+H]+＝399；1H NMR(400MHz,CD3OD)δ9.17(s,1H),8.51(s,1H),8.41(d,J＝4Hz,1H),7.67(s,1H),7.37(d,J＝8Hz,1H),6.85(s,1H),6.14(s,1H),5.33-5.32(m,1H),4.98(d,J＝12Hz,1H),4.77(s,1H),4.45(d,J＝4Hz,1H),4.29-4.25(m,1H),2.44(s,3H)；异构体2：保留时间：4.13分钟(手性纤维素-SB，0.46*15cm；5um；100％MeOH(0.1％DEA)；1ml/分钟)；LCMS(ESI)[M+H]+＝399；1HNMR(400MHz,CD3OD)δ9.17(s,1H),8.51(s,1H),8.41(d,J＝4Hz,1H),7.67(s,1H),7.37(d,J＝8Hz,1H),6.85(s,1H),6.14(s,1H),5.33-5.32(m,1H),4.98(d,J＝12Hz,1H),4.77(s,1H),4.45(d,J＝4Hz,1H),4.29-4.25(m,1H),2.44(s,3H)。
实施例270：
化合物编号418和426以类似实施例166中的操作的方式制备。
实施例271：
化合物编号430、431、432、433、434、435、436、437、438、439、440、441、442、443、444、445、446、447、448、449、450、451、452、453、454、455、456、457、458、459、460、461、462、463、464、465、466、467、468、469、470、471、472、473、474、475、476、477、478、479、480、481、482、483、484、485、486、487、488、489、490、491、492、493、494、495、496、497、498、499、500、501、502、503、504、505、506、507、508、509、510、511、512、513、514、515、516、517、518、519、520、521、522、523、524、525、526、527、528、529、530、531、532、533、534、535、536、537、538、539、540、541、542、543、544、545、546、547、548、549、550、551、552、553、554、555、556、557、558、559、560、561、562、563、564、565、566、567、568、569、570、571和572使用类似于本文所述的方法或本领域已知的方法制备。
实施例272：
化合物编号86、87、88、89、90、91、92、93、94、96、97、98、99、100、101、102、103、104、105、106、107、108、109、110、111、112、113、114、115、116、117、118、119、123、160和389使用类似于本文所述的方法或本领域已知的方法制备。
化合物的评价
化学分析
示例性的式I或Ia化合物。表A-1和A-2包括某些化合物的制备与表征。
表A-1
Figure BDA0002289356600006541
Figure BDA0002289356600006551
Figure BDA0002289356600006561
Figure BDA0002289356600006571
Figure BDA0002289356600006581
Figure BDA0002289356600006601
Figure BDA0002289356600006611
Figure BDA0002289356600006621
Figure BDA0002289356600006631
Figure BDA0002289356600006641
Figure BDA0002289356600006661
Figure BDA0002289356600006671
Figure BDA0002289356600006681
Figure BDA0002289356600006691
Figure BDA0002289356600006701
Figure BDA0002289356600006711
Figure BDA0002289356600006731
Figure BDA0002289356600006741
Figure BDA0002289356600006751
Figure BDA0002289356600006761
Figure BDA0002289356600006771
Figure BDA0002289356600006791
Figure BDA0002289356600006801
Figure BDA0002289356600006811
Figure BDA0002289356600006831
Figure BDA0002289356600006841
Figure BDA0002289356600006851
Figure BDA0002289356600006861
Figure BDA0002289356600006881
Figure BDA0002289356600006901
Figure BDA0002289356600006911
Figure BDA0002289356600006921
Figure BDA0002289356600006931
Figure BDA0002289356600006941
Figure BDA0002289356600006951
Figure BDA0002289356600006961
Figure BDA0002289356600006971
Figure BDA0002289356600006981
Figure BDA0002289356600006991
Figure BDA0002289356600007001
Figure BDA0002289356600007011
Figure BDA0002289356600007021
Figure BDA0002289356600007031
Figure BDA0002289356600007041
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表A-2
Figure BDA0002289356600008062
Figure BDA0002289356600008071
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Figure BDA0002289356600008381
“-”表示未报告的数据。
生物评价
测试示例性的式I或Ia化合物以评价化合物对HPK-1的抑制。测定各个示例性化合物的Ki。
实施例B1：HPK1 Ki测定
实施例B1A：HPK1-FL HTRF酶测定(“HTRF”)
测定原则：
HPK-FL酶磷酸化生物素-SLP-76底物，在1mM ATP存在的条件下，且变化测试化合物的浓度。通过使用Eu-抗-pSLP76 Ab和SA-XL665通过FRET检测产物。更多HTRF技术的信息参见www.cisbio.com/HTRF。
仪器：
Echo555化合物分配器
Agilent Bravo
Perkin Elmer Envision
最终测定条件：
材料：
测定板：White ProxiPlate 384 F(PerkinElmer编号6008289)
激酶：HPK全长双突变体
底物：生物素-SLP76
ATP：100mM ATP
BSG：2％BSG
DMSO：DMSO(Sigma编号34869-100ML)
反应缓冲液：H2O/50mM HEPES、pH 7.5/10mM MgCl2/2mM TCEP/0.01％Brij-35/0.01％BSG
检测混合物：Eu-抗-pSLP76/SA-XL665(Cisbio,#610SAXAC)
确定Ki的测定操作：
向具有80nL化合物或DMSO点样的384孔Proxiplate中添加4μl/孔的激酶混合物。将该混合物预温育30分钟，然后添加4μl/孔的底物混合物。将该溶液温育60分钟，然后添加4μl/孔的检测混合物。将该溶液继续温育60分钟。然后将该板负载于Perkin ElmerEnvision，且在615和665nm测量TR-FRET信号。使用665/620的比例来计算每种化合物浓度的％活性。
实施例B1B：HPK1 Lantha结合测定(“Lanth”)
材料：
Figure BDA0002289356600008401
操作：
I.化合物稀释：
通过以下方式稀释待测化合物：用Bravo液体处理平台，制备柱2和柱13中的12.5uL/孔的5mM化合物(100X)，以及柱3-12、14-23和化合物板的孔A1-H1、I24-P24中的10ul/孔DMSO。对于参考化合物，最高浓度为1mM；向该板的孔J1-P1和A24-H24中添加10ul的2mM星孢菌素；用Bravo液体处理平台进行11点5倍化合物连续稀释。从柱2和柱13转移2.5ul化合物到柱3和柱14的10ul DMSO中，等等。以2500rpm离心化合物板1分钟；使用Echo液体处理平台转移80nl化合物至测定板中。一个化合物板制作两个测定板；密封每个测定板并储存在N2柜中。
II.测定条件：
使用以下测定浓度和时间：2nM HPK1，2nM Eu-抗-GST Ab和15nM示踪物222，60分钟温育时间。
III.HPK Lantha结合测定：
对于该结合测定，使用Multidrop试剂分配器将4ul 2X HPK1和Eu-抗-GST抗体添加至该测定板的每个孔中。该溶液在23℃温箱中温育1小时。使用Multidrop试剂分配器向该板中的每个孔添加4ul 2X示踪物-222。该溶液在23℃温箱中再次温育1小时。使用具有以下参数的Envision读板仪读取测定结果：TR_FRET，340ex/615和665em；100usec延迟；以及200usec积分。
IV.分析：
通过使用XL-fit中的Morrison ki拟合模型分析化合物Ki
a.fit＝(1-((((E+x)+(Ki*(1+(S/Kd))))-(((((E+x)+(Ki*(1+(S/Kd))))^2)-((4*E)*x))^0.5))/(2*E)))
res＝(y-fit)
b.参数：
E＝酶浓度
S＝示踪物222浓度，Kd＝示踪物222Kd
使用相同单位(uM)报告所有测量值
在结合测定中测试示例性的式I或Ia化合物。所测的Ki值列于表B1-1和B1-2中。表B1-1的Ki数据基于所述“Lanth”测定。
表B1-1
Figure BDA0002289356600008411
Figure BDA0002289356600008421
Figure BDA0002289356600008441
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Figure BDA0002289356600008511
Figure BDA0002289356600008521
表B1-2
Figure BDA0002289356600008532
Figure BDA0002289356600008541
Figure BDA0002289356600008551
实施例B2：人类T-cell IL2诱导测定
测定原则：
抗CD3和抗CD28激活原代人泛T细胞中的TCR信号传导，导致IL-2启动子诱导。使用针对IL-2的捕获抗体和用SULFO-标签标记的抗IL-2抗体，通过电化学荧光检测细胞培养上清液中分泌的IL-2。
文献：
更多额外的电化学荧光技术信息参见www.mesoscale.com。
测定操作：
使用不同浓度的测试化合物，在37℃和5％CO2的加湿温箱中温育原代人泛T细胞30分钟。将细胞转移到预先涂有固定浓度的抗-人CD3的板上(对每个供体批次分别测定)并加入可溶性抗-人CD28(终浓度＝1μg/ml)。在37℃和5％CO2的加湿温箱中刺激细胞4小时。将25μl上清液转移至预涂有抗-人IL-2抗体的MSD单点板。将MSD板在4℃温育过夜，并轻轻振荡。用洗涤缓冲液洗涤MSD板4次。以1:50稀释度添加带SULFO标签的检测抗体，并在室温振荡温育2小时。用洗涤缓冲液洗涤MSD板4次并加入150μl2X MSD读数缓冲液。在MSD仪器上读数。将数据对经刺激的/未处理对照进行归一化，以计算每种化合物浓度的％活性。
材料：
冷冻原代人泛T细胞(StemCell Technologies#70024)
抗-人CD3(OKT3克隆)(eBioscience#16-0037-81)
抗-人CD28(CD28.2克隆)(BD#555725)
96-孔人IL-2组织培养试剂盒(MSD#K151AHB-4)
仪器：
Biomek FX用于液体处理(Beckman Coulter)
MSD SECTOR S 600(Meso Scale Discovery)
在人T-细胞IL-2诱导测定中测试示例性的式I或Ia化合物。对于某些化合物(例如所示结构，具有HPK1的Ki值)，表B2中提供经测试化合物处理的细胞中IL-2相对于未处理细胞的％增加。
表B2
Figure BDA0002289356600008561
Figure BDA0002289356600008571
应注意的是，术语“一”或“一个/种”实体是指一个/种或多个/种该实体；例如，“一个/种多肽”应理解为表示一个/种或多个/种多肽。因此，术语“一个/种”、“一个/种或多个/种”和“至少一个/种”在本文中可互换使用。
本文使用的所有技术术语和科学术语具有相同的含义。已经努力确保关于所使用的数字(例如量、温度等)的准确性，但应该考虑到一些实验误差和偏差。
在整个本说明书和权利要求书中，除非上下文另有要求，否则词语“含有”、“包含”和“包括”以非排他性的含义使用。应理解的是，本文描述的实施方案包括“由......构成”和/或“基本上由......构成”的实施方案。
如本文所用，当提及一个值时，术语“约”意在涵盖具体量的变量，在一些实施方案中具体量±50％、在一些实施方案中具体量±20％、在一些实施方案中具体量±10％、在一些实施方案中具体量±5％、在一些实施方案中具体量±1％、在一些实施方案中具体量±0.5％以及在一些实施方案中具体量±0.1％，因为这样的变量适于实施所公开的方法或使用所公开的组合物。
应理解的是，在提供数值范围的情况下，除非该上下文另有明确规定，否则本发明涵盖在所述范围的上限和下限之间的每个介入值(到下限单位的十分之一)，以及该规定范围内的任何其它规定的或介入值。本发明也涵盖这些小范围的上限和下限(可独立地包括在较小的范围内)，其受所述范围内的任何特别排除的限制的约束。在所述范围包括一个或两个所述限值的情况下，本发明也涵盖排除一个或两个那些包括的限值的范围。
受益于前述说明书和相关附图中呈现的教导，本发明所属领域的技术人员将想到本文所阐述的本发明的许多变型和其它方案。因此，应理解的是，本发明不限于所公开的具体实施方案，且那些变型和其它实施方案旨在涵盖在所附权利要求的范围内。尽管本文采用特定术语，但它们仅以一般性和描述性意义使用，而非出于限制的目的。
其它实施方案
实施方案1.式I化合物：
Figure BDA0002289356600008581
或其药学上可接受的盐，其中，
R1为：
C2-9杂芳基、C2-9杂环基或C6-10芳基，其中所述杂芳基或杂环基具有1-4个选自O、S和N的杂原子；且其中所述芳基、杂芳基和杂环基可任选取代有一个、两个、三个或四个取代基R6、R7、R8和R8’，它们各自独立选自：
i.支链的或直链的C1-6烷基、C1-6烯基、C1-6亚烯基和C3-9环烷基，其中所述烷基、烯基、亚烯基和环烷基可任选取代有羟基、卤素、-CF2、-CF3、氨基、二(C1-6)烷基氨基、单(C1-6)烷基氨基、氰基、C3-7环烷基、C1-6烷氧基、-SO2R’、-SO2NR’R”、-(CO)NR’R”或-NR’(CO)R”，其中R’和R”独立地为H或C1-6烷基；
ii.NRaRb-C(O)-，
其中，Ra和Rb各自独立地为氢或C1-6烷基，其中所述烷基可任选取代有羟基、卤素、-CF2或-CF3；
iii.C1-6烷氧基；
iv.卤素；
v.氰基；
vi.羟基；
vii.氨基；
viii.二(C1-6)烷基氨基；
ix.单(C1-6)烷基氨基；
x.-NRc(CO)Rd，其中Rc和Rd独立地为H或C1-6烷基；
xi.-CF3；
xii.-CF2；
xiii.-SO2R’，其中R’如上所述；
xiv.-SO2NR’R”，其中R’和R”如上所述；
xv.-(CO)NRcRd；其中Rc和Rd如上所述；
xvi.-(CO)ORe；其中Re为H、C1-6烷基或CH2-芳基；
xvii.经取代或未经取代的C6-10芳基或C3-5杂环基；和
其中嵌入所述芳基、杂芳基或杂环基的碳与和它所连结的氧一同可形成羰基；
R1’为：
C1-6烷基、C2-6烯基、C3-6环烷基、C2-9杂芳基或卤素，其中所述烷基、烯基、环烷基和杂芳基可任选取代有羟基、卤素或氨基；
R2为A-C(O)-，其中，A为：
i.C3-7环烷基(C1-6)j烷基-或C2-9杂环基(C1-6)j烷基-，其中，j为1或0；且其中所述环烷基或杂环基可任选取代有一个、两个、三个或四个R5，其中，在各种情况下，R5独立选自支链的或直链的C1-6烷基、卤素、氰基、氰基(C1-6)烷基-、-CF3、-CF2、羟基(C1-6)烷基、卤代(C1-6)烷基、羟基、(C1-6烷基)-O-(C1-6烷基)-、氨基、二(C1-6)烷基氨基、单(C1-6)烷基氨基、氨基(C1-6)烷基、C1-6烷氧基、CH3CO2-(C1-6烷基)-、-SO2R’、-SO2NR’R”、-(CO)NR’R”、-NR’(CO)R”，其中，在各种情况下，R’和R”如上所述为任选取代的C2-9杂芳基、任选取代的C2-9杂环基、任选取代的C6-10芳基和NReRf-C(O)-(C1-6烷基)k-，
其中Re和Rf各自独立选自氢和支链的或直链的C1-6烷基，或Re和Rf与和各自所连结的氮一同可形成C3-7环烷基，其可任选取代有支链的或直链的C1-6烷基、C3-4环烷基、卤素、氰基、-CF3、-CF2或羟基；
且k为1或0；
或者，所述环烷基或杂环基与两个R5一同形成双环或螺环，其中两个连至不同碳的R5与和各自所连结的碳一同形成双环，或两个连至相同碳上的R5与和各自所连结的碳一同形成螺环；
ii.-NRgRh，其中
Rg为H或支链的或直链的C1-6烷基，其中所述烷基可任选取代有羟基、卤素、氰基、氨基、二(C1-6)烷基氨基、单(C1-6)烷基氨基；-CF2或-CF3；
Rh选自：
a.支链的或直链的C1-6烷基，其中所述烷基可任选取代有羟基、卤素、氰基、氨基、二(C1-6)烷基氨基、单(C1-6)烷基氨基、-CF2、-CF3或NRe’Rf’-C(O)-，其中Re’和Rf’各自独立地为氢或支链的或直链的C1-6烷基；
和，
b.C3-7环烷基(C1-6烷基)m-、C2-9杂芳基(C1-6烷基)m-、C6-10芳基(C1-6烷基)m-或C2-9杂环基(C1-6烷基)m-，其中，m为1或0；且其中所述环烷基、杂芳基、芳基或杂环基可任选取代有一个或两个R5’，
其中，在各种情况下，R5’独立选自支链的或直链的C1-6烷基、卤素、氰基、-CF3、-CF2、羟基(C1-6)烷基、卤代(C1-6)烷基、羟基、C1-6烷氧基、氨基、氨基(C1-6)烷基和NRiRj-C(O)-(C1-6烷基)k’-，
其中Ri和Rj独立选自氢和支链的或直链的C1-6烷基，且k’为1或0；
iii.R9-(C1-6烷基)-，其中R9选自羟基、卤素、-CF2、-CF3、氰基、C1-6烷氧基、-NRoRp，其中，Ro和Rp各自独立地为氢或支链的或直链的C1-6烷基、NRo’Rp’-CO-，其中Ro’和Rp’各自独立地为氢或支链的或直链的C1-6烷基；
iv.B-(C1-6烷基)t-，其中，B为C3-9杂芳基或C3-7杂环基，其中，所述杂芳基或杂环基具有1-3个选自O、S和N的杂原子；且其中所述杂芳基或杂环基可任选取代有一个、两个或三个R10、R10’和R10”，它们各自独立选自：
a.支链的或直链的C1-6烷基或C3-4环烷基，其中所述烷基或环烷基可任选取代有羟基、卤素、-CF2、-CF3、氨基、二(C1-6)烷基氨基、单(C1-6)烷基氨基、氰基、-(CO)NRqRr或-NRq(CO)Rr，其中Rq和Rr独立地为H或C1-6烷基；
b.C3-7环烷基；和
c.C3-7杂环基；
d.羟基；
e.卤素；
f.-CF2；
g.-CF3；
h.氨基；
i.二(C1-6)烷基氨基；
j.单(C1-6)烷基氨基；
k.氰基；
l.-(CO)NRsRt，其中Rs和Rt独立地为H或C1-6烷基；和
m.-NRs(CO)Rt，其中Rs和Rt独立地为H或C1-6烷基；
且，t为1或0；
v.(C6-10芳基)q’-(C1-6烷基)n-O-或吡咯烷基-O-，其中，所述芳基可任选取代有一个、两个或三个R11、R12和R13，它们各自选自支链的或直链的C1-6烷基、羟基、卤素、-CF2、-CF3、氰基、C1-6烷氧基和NRuRv-，其中Ru和Rv各自独立地为氢或支链的或直链的C1-6烷基，
且，n为1或0，q’为1或0，其条件为n和q’中的一个为1；
vi.支链的或直链的C1-6烷基、C1-6烯基、C1-6亚烯基，其中所述烷基、烯基和亚烯基可任选取代有羟基、卤素、-CF2、-CF3、氨基、二(C1-6)烷基氨基、单(C1-6)烷基氨基、氰基、C3-7环烷基、C1-6烷氧基、-SO2R’、-SO2NR’R”、-(CO)NR’R”或-NR’(CO)R”，其中R’和R”独立地为H或C1-6烷基；
或，R2为D，其中D为：
i.C6-10芳基-(C1-6烷基)z-或C3-9杂芳基-(C1-6烷基)z-，其中，所述杂芳基具有1-4个选自O、S和N的杂原子；且其中所述芳基或杂芳基可任选取代有一个、两个、三个或四个R14、R15、R16’和R16，它们各自独立选自：
a.支链的或直链的C1-6烷基，其中所述烷基可任选取代有羟基、卤素、-CF2、-CF3、氨基、二(C1-6)烷基氨基、单(C1-6)烷基氨基、氰基C1-6烷氧基、-SO2R’、-SO2NR’R”、-(CO)NRwRx或-NRw(CO)Rx，其中Rw和Rx独立地为H或C1-6烷基，其中连至不同原子的R14、R15、R16’和R16中的两个与和各自所连结的原子一同形成双环；
b.C3-7环烷基；
c.C3-7杂环基；
d.羟基；
e.卤素；
f.-CF2；
g.-CF3；
h.氨基；
i.二(C1-6)烷基氨基；
j.单(C1-6)烷基氨基；
k.氰基；
l.-NRy(CO)Rz，其中Ry和Rz独立地为H或C1-6烷基；
m.-(CO)NRyRz，其中Ry和Rz独立地为H或C1-6烷基；
n.-SO2NRyRz，其中Ry和Rz独立地为H或C1-6烷基；和
o.-(CO)ORy，其中Ry为H或C1-6烷基；
且，z为1或0；
ii.C3-7环烷基-(SO2)-，其中所述环烷基可任选取代有一个或两个R6’，其中，在各种情况下，R6’独立选自支链的或直链的C1-6烷基、卤素、氰基、-CF3、-CF2、羟基(C1-6)烷基、卤代(C1-6)烷基、羟基、(C1-6烷基)-O-(C1-6烷基)-、C1-6烷氧基、氨基、二(C1-6)烷基氨基、单(C1-6)烷基氨基、氨基(C1-6)烷基和NRe’Rf’-C(O)-(C1-6烷基)n-，其中Re’和Rf’独立选自氢和支链的或直链的C1-6烷基，且n为1或0；和
iii.C1-6烷基或吡咯烷，其中所述烷基任选取代有卤素取代；
且，R2’为H或支链的或直链的C1-6烷基。
实施方案2.实施方案1所述的化合物，其中R1为任选取代的C2-9杂芳基或C3-7杂环基。
实施方案3.实施方案2所述的化合物，其中R1选自：
Figure BDA0002289356600008621
Figure BDA0002289356600008631
Figure BDA0002289356600008641
它们各自可任选取代有1个、2个或3个取代基，R6、R7和R8。
实施方案4.实施方案3所述的化合物，其中R1选自：
Figure BDA0002289356600008642
Figure BDA0002289356600008643
它们各自可任选取代有1个、2个或3个取代基，R6、R7和R8。
实施方案5.实施方案4所述的化合物，其中R1为：
Figure BDA0002289356600008644
实施方案6.实施方案5所述的化合物，其中R1为：
Figure BDA0002289356600008651
实施方案7.实施方案6所述的化合物，其中R1为：
Figure BDA0002289356600008652
实施方案8.实施方案7所述的化合物，其中R1为：
Figure BDA0002289356600008653
其中，R6为C1-6烷基，其任选取代有羟基、-CF2、-CF3或卤素。
实施方案9.实施方案7所述的化合物，其中R6为甲基。
实施方案10.实施方案2所述的化合物，其中A为i。
实施方案11.实施方案10所述的化合物，其中A为任选取代的C3-7环烷基(C1-6)j烷基-。
实施方案12.实施方案11所述的化合物，其中j为0。
实施方案13.实施方案12所述的化合物，其中R2为：
Figure BDA0002289356600008654
其中，v为0、1、2、3或4；X、Y和Z各自独立地不存在或为-CH2-，且其中，若存在，则各个X、Y和Z上的0个、1个或2个H可为R5。
实施方案14.实施方案12所述的化合物，其中R2为：
Figure BDA0002289356600008661
其中，v为0、1、2、3或4；X、Y和Z各自独立地不存在或为-CH2-，且其中，若存在，则各个X、Y和Z上的0个、1个或2个H可为R5。
实施方案15.实施方案12所述的化合物，其中R2为：
其中，v为0、1或2。
实施方案16.实施方案15所述的化合物，其中R2为：
Figure BDA0002289356600008663
其中，v为0、1或2。
实施方案17.实施方案16所述的化合物，其中R5不为氢，且R2为：
实施方案18.实施方案15所述的化合物，其中R2为：
Figure BDA0002289356600008665
其中，v为0、1或2。
实施方案19.实施方案18所述的化合物，其中R5不为氢，且R2为：
Figure BDA0002289356600008671
实施方案20.实施方案11所述的化合物，其中所述环烷基为双环的、螺或不饱和的。
实施方案21.实施方案13所述的化合物，其中R5选自氢、氟、氰基、NH2-C(O)-、烷基-(C1-6)烷氧基-、任选取代的C2-9杂芳基和氰基(C1-6)烷基。
实施方案22.实施方案21所述的化合物，其中R5为氟或氰基。
实施方案23.实施方案21所述的化合物，其中R5为氢。
实施方案24.实施方案12所述的化合物，其具有以下结构中的一种：
Figure BDA0002289356600008672
Figure BDA0002289356600008691
Figure BDA0002289356600008701
Figure BDA0002289356600008711
Figure BDA0002289356600008741
Figure BDA0002289356600008751
Figure BDA0002289356600008761
Figure BDA0002289356600008771
Figure BDA0002289356600008781
Figure BDA0002289356600008801
Figure BDA0002289356600008811
Figure BDA0002289356600008821
Figure BDA0002289356600008831
Figure BDA0002289356600008841
Figure BDA0002289356600008851
Figure BDA0002289356600008861
Figure BDA0002289356600008871
Figure BDA0002289356600008891
Figure BDA0002289356600008901
Figure BDA0002289356600008911
Figure BDA0002289356600008921
Figure BDA0002289356600008971
Figure BDA0002289356600008981
实施方案25.实施方案21所述的化合物，其中至少一个R5为任选取代的C2-9杂芳基或氰基(C1-6)烷基。
实施方案26.实施方案25所述的化合物，其中至少一个R5为氰基(C1-6)烷基。
实施方案27.实施方案26所述的化合物，其中至少一个R5为氰基-CH2-。
实施方案28.实施方案27所述的化合物，其具有以下结构中的一种：
Figure BDA0002289356600008991
Figure BDA0002289356600009001
Figure BDA0002289356600009011
实施方案29.实施方案21所述的化合物，其中至少一个R5为任选取代的C2-9杂芳基。
实施方案30.实施方案29所述的化合物，其中所述任选取代的C2-9杂芳基为任选取代的含有1个或2个氮原子的5元杂芳基。
实施方案31.实施方案30所述的化合物，其中所述任选取代的5元杂芳基为任选取代的吡唑。
实施方案32.实施方案31所述的化合物，其中所述任选取代的吡唑为
Figure BDA0002289356600009012
其中所述波浪线表示与该环丙基环所连接的点；且其中RB为：
支链的或直链的C1-6烷基，其中所述烷基可任选取代有一至四个羟基、卤素、腈、氨基、-O-(C1-6)烷基、-O-(C1-6)烷基氨基-、二(C1-6)烷基氨基-或-NRy(CO)Rz，其中，在各种情况下，Ry和Rz独立地为氢或C1-6烷基；
或-SO2R’，其中R’为C1-6烷基。
实施方案33.实施方案32所述的化合物，其中RB1为任选取代的直链C1-6烷基。
实施方案34.实施方案33所述的化合物，其中所述任选取代的直链C1-6烷基为甲基。
实施方案35.实施方案32所述的化合物，其具有以下结构中的一种：
Figure BDA0002289356600009013
Figure BDA0002289356600009031
Figure BDA0002289356600009051
实施方案36.实施方案2所述的化合物，其中A为-NRgRh。
实施方案37.实施方案36所述的化合物，其中Rg为H或甲基。
实施方案38.实施方案37所述的化合物，其中Rg为H。
实施方案39.实施方案38所述的化合物，其中m为0。
实施方案40.实施方案39所述的化合物，其具有以下结构中的一种：
Figure BDA0002289356600009062
Figure BDA0002289356600009071
Figure BDA0002289356600009081
实施方案41.实施方案37所述的化合物，其具有以下结构中的一种：
Figure BDA0002289356600009091
实施方案42.实施方案2所述的化合物，其中A为R9-(C1-6烷基)-。
实施方案43.实施方案42所述的化合物，其中所述R9-(C1-6烷基)-为R9-(C1-4烷基)-，其中所述烷基为直链的或支链的且可为任选取代的。
实施方案44.实施方案43所述的化合物，其具有以下结构中的一种：
Figure BDA0002289356600009092
Figure BDA0002289356600009101
实施方案45.实施方案2所述的化合物，其中A为B-(C1-6烷基)t-。
实施方案46.实施方案45所述的化合物，其中t为0。
实施方案47.实施方案46所述的化合物，其中B为C3-9杂芳基。
实施方案48.实施方案47所述的化合物，其中所述杂芳基选自：
Figure BDA0002289356600009102
Figure BDA0002289356600009111
它们各自可任选取代有1个、2个或3个取代基R10、R10’和R10”。
实施方案49.实施方案48所述的化合物，其中所述杂芳基为：
Figure BDA0002289356600009121
实施方案50.实施方案49所述的化合物，其中所述杂芳基为：其中，R10为C1-6烷基。
实施方案51.实施方案50所述的化合物，其具有以下结构中的一种：
Figure BDA0002289356600009123
Figure BDA0002289356600009131
实施方案52.实施方案2所述的化合物，其中R2为D。
实施方案53.实施方案52所述的化合物，其中z为0。
实施方案54.实施方案53所述的化合物，其中所述杂芳基选自
Figure BDA0002289356600009141
它们各自可任选取代有1个、2个或3个取代基R14、R15和R16。
实施方案55.实施方案54所述的化合物，其中所述杂芳基为：
Figure BDA0002289356600009142
实施方案56.实施方案55所述的化合物，其中所述杂芳基为：
Figure BDA0002289356600009143
实施方案57.实施方案56所述的化合物，其具有以下结构中的一种：
Figure BDA0002289356600009144
Figure BDA0002289356600009151
Figure BDA0002289356600009161
Figure BDA0002289356600009191
Figure BDA0002289356600009201
实施方案58.实施方案53所述的化合物，其中D为任选取代的C6-10芳基。
实施方案59.实施方案58所述的化合物，其中所述任选取代的C6-10芳基为任选取代的苯基。
实施方案60.实施方案59所述的化合物，其中所述任选取代的苯基取代有任选取代的支链的或直链的C1-6烷基或C3-7杂环基。
实施方案61.实施方案60所述的化合物，其具有以下结构中的一种：
Figure BDA0002289356600009221
实施方案62.实施方案2所述的化合物，其中R1’为任选取代的C2-9杂芳基。
实施方案63.实施方案62所述的化合物，其中所述任选取代的C2-9杂芳基为任选取代的含有1个或2个氮原子的5元杂芳基。
实施方案64.实施方案63所述的化合物，其中所述5元杂芳基为吡唑基团。
实施方案65.实施方案2所述的化合物，其中R1’为卤素。
实施方案66.实施方案65所述的化合物，其中所述卤素为氟或氯。
实施方案67.实施方案2所述的化合物，其中R1’为任选取代的C1-6烷基、C2-6烯基或C3-6环烷基。
实施方案68.实施方案67所述的化合物，其中R1’为任选取代的C1-6烷基。
实施方案69.实施方案68所述的化合物，其中R1’为任选取代的甲基或乙基。
实施方案70.实施方案69所述的化合物，其中R1’为甲基。
实施方案71.实施方案64、66或67中任一项所述的化合物，其具有以下结构中的一种：
Figure BDA0002289356600009222
Figure BDA0002289356600009241
实施方案72.实施方案1所述的化合物，其中R1为任选取代的C6-10芳基。
实施方案73.实施方案72所述的化合物，其中所述任选取代的C6-10芳基为任选取代的苯基。
实施方案74.实施方案73所述的化合物，其中所述任选取代的苯基取代有任选取代的支链的或直链的C1-6烷基、C1-6烷氧基、卤素、氰基、羟基、氨基、-CF3或-(CO)NRcRd；其中Rc和Rd如上文所述。
实施方案75.实施方案74所述的化合物，其具有以下结构中的一种：
Figure BDA0002289356600009261
Figure BDA0002289356600009271
Figure BDA0002289356600009281
Figure BDA0002289356600009291
实施方案76.一种药物组合物，其包含实施方案1-75中任一项所述的化合物和药学上可接受的载体。
实施方案77.实施方案76所述的药物组合物，其中所述组合物进一步包含化疗剂。
实施方案78.实施方案77所述的药物组合物，其中所述化疗剂为免疫治疗剂。
实施方案79.一种抑制HPK1的方法，所述方法包括将HPK1与有效量的实施方案1-75中任一项所述的化合物或实施方案76-78中任一项所述的药物组合物接触。
实施方案80.一种用于增强有此需要的受试者的免疫应答的方法，其中所述方法包括向所述受试者给药有效量的实施方案1-75中任一项所述的化合物或实施方案76-78中任一项所述的药物组合物。
实施方案81.实施方案80所述的方法，相对于给药所述化合物或药物组合物之前，所述受试者中的T细胞具有增强的引发、增强的活化、增强的迁移、增强的增殖、增强的存活和增强的细胞溶解活性中的至少一种。
实施方案82.实施方案81所述的方法，其中所述T细胞活化的特征在于相对于给药所述化合物或药物组合物之前，γ-IFN+CD8 T细胞频率升高或T细胞产生的IL-2水平或颗粒酶B水平升高。
实施方案83.实施方案81所述的方法，其中相对于给药所述化合物或药物组合物之前，T细胞的数量增加。
实施方案84.实施方案81-83中任一项所述的方法，其中所述T细胞为抗原特异性CD8 T细胞。
实施方案85.实施方案84所述的方法，其中相对于给药所述化合物或药物组合物之前，所述受试者中的抗原呈递细胞具有增强的成熟和活化。
实施方案86.实施方案85所述的方法，其中所述抗原呈递细胞为树突细胞。
实施方案87.实施方案85所述的方法，其中所述抗原呈递细胞的成熟的特征在于CD83+树突细胞的频率增加。
实施方案88.实施方案85所述的方法，其中所述抗原呈递细胞的活化的特征在于树突细胞上CD80和CD86的表达增加。
实施方案89.实施方案79-88中任一项所述的方法，其中所述受试者患有癌症。
实施方案90.一种用于治疗HPK1依赖性病症的方法，所述方法包括向有此需要的受试者给药有效量的实施方案1-75中任一项所述的化合物或实施方案76-78中任一项所述的药物组合物。
实施方案91.实施方案90所述的方法，其中所述HPK1依赖性病症为癌症。
实施方案92.实施方案89或91所述的方法，其中所述癌症包括至少一种选自以下的癌症：结肠直肠癌、黑色素瘤、非小细胞肺癌、卵巢癌、乳腺癌、胰腺癌、血液系统恶性肿瘤和肾细胞癌。
实施方案93.实施方案89、91或92中任一项所述的方法，其中所述癌症具有升高的T细胞浸润水平。
实施方案94.实施方案89、91、92或93中任一项所述的方法，其中相对于给药所述化合物或组合物之前，所述受试者中的癌细胞选择性地具有MHC I类抗原表达的增加表达。
实施方案95.实施方案89、91、92、93或94中任一项所述的方法，其中所述方法进一步包括向所述受试者给药化疗剂。
实施方案96.实施方案95所述的方法，其中所述化疗剂与所述化合物或所述组合物同时向所述受试者给药。
实施方案97.实施方案95所述的方法，其中在给药所述化合物或所述组合物之前，向所述受试者给药所述化疗剂。
实施方案98.实施方案95所述的方法，其中在给药所述化合物或所述组合物之后，向所述受试者给药所述化疗剂。
序列表
<110> 豪夫迈-罗氏有限公司(F. HOFFMANN-LA ROCHE AG)
基因泰克公司(GENENTECH, INC.)
<120> 作为HPK1抑制剂的二氮杂萘类
<130> P34139-WO-2
<140> 待指定
<141>
<150> PCT/CN2017/078792
<151> 2017-03-30
<150> PCT/CN2018/076909
<151> 2018-02-15
<160> 4
<170> PatentIn version 3.5
<210> 1
<211> 2502
<212> DNA
<213> 智人
<400> 1
atggacgtcg tggaccctga cattttcaat agagaccccc gggaccacta tgacctgcta 60
cagcggctgg gtggcggcac gtatggggaa gtctttaagg ctcgagacaa ggtgtcaggg 120
gacctggtgg cactgaagat ggtgaagatg gagcctgatg atgatgtctc cacccttcag 180
aaggaaatcc tcatattgaa aacttgccgg cacgccaaca tcgtggccta ccatgggagt 240
tatctctggt tgcagaaact ctggatctgc atggaattct gtggggctgg ttctctccag 300
gacatctacc aagtgacagg ctccctgtca gagctccaga ttagctatgt ctgccgggaa 360
gtgctccagg gactggccta tttgcactca cagaagaaga tacacaggga catcaaggga 420
gctaacatcc tcatcaatga tgctggggag gtcagattgg ctgactttgg catctcggcc 480
cagattgggg ctacactggc cagacgcctc tctttcattg ggacacccta ctggatggct 540
ccggaagtgg cagctgtggc cctgaaggga ggatacaatg agctgtgtga catctggtcc 600
ctgggcatca cggccatcga actggccgag ctacagccac cgctctttga tgtgcaccct 660
ctcagagttc tcttcctcat gaccaagagt ggctaccagc ctccccgact gaaggaaaaa 720
ggcaaatggt cggctgcctt ccacaacttc atcaaagtca ctctgactaa gagtcccaag 780
aaacgaccca gcgccaccaa gatgctcagt catcaactgg tatcccagcc tgggctgaat 840
cgaggcctga tcctggatct tcttgacaaa ctgaagaatc ccgggaaagg accctccatt 900
ggggacattg aggatgagga gcccgagcta ccccctgcta tccctcggcg gatcagatcc 960
acccaccgct ccagctctct ggggatccca gatgcagact gctgtcggcg gcacatggag 1020
ttcaggaagc tccgaggaat ggagaccaga cccccagcca acaccgctcg cctacagcct 1080
cctcgagacc tcaggagcag cagccccagg aagcaactgt cagagtcgtc tgacgatgac 1140
tatgacgacg tggacatccc cacccctgca gaggacacac ctcctccact tccccccaag 1200
cccaagttcc gttctccatc agacgagggt cctgggagca tgggggatga tgggcagctg 1260
agcccggggg tgctggtccg gtgtgccagt gggcccccac caaacagccc ccgtcctggg 1320
cctcccccat ccaccagcag cccccacctc accgcccatt cagaaccctc actctggaac 1380
ccaccctccc gggagcttga caagccccca cttctgcccc ccaagaagga aaagatgaag 1440
agaaagggat gtgcccttct cgtaaagttg ttcaatggct gccccctccg gatccacagc 1500
acggccgcct ggacacatcc ctccaccaag gaccagcacc tgctcctggg ggcagaggaa 1560
ggcatcttca tcctgaaccg gaatgaccag gaggccacgc tggaaatgct ctttcctagc 1620
cggactacgt gggtgtactc catcaacaac gttctcatgt ctctctcagg aaagaccccc 1680
cacctgtatt ctcatagcat ccttggcctg ctggaacgga aagagaccag agcaggaaac 1740
cccatcgctc acattagccc ccaccgccta ctggcaagga agaacatggt ttccaccaag 1800
atccaggaca ccaaaggctg ccgggcgtgc tgtgtggcgg agggtgcgag ctctgggggc 1860
ccgttcctgt gcggtgcatt ggagacgtcc gttgtcctgc ttcagtggta ccagcccatg 1920
aacaaattcc tgcttgtccg gcaggtgctg ttcccactgc cgacgcctct gtccgtgttc 1980
gcgctgctga ccgggccagg ctctgagctg cccgctgtgt gcatcggcgt gagccccggg 2040
cggccgggga agtcggtgct cttccacacg gtgcgctttg gcgcgctctc ttgctggctg 2100
ggcgagatga gcaccgagca caggggaccc gtgcaggtga cccaggtaga ggaagatatg 2160
gtgatggtgt tgatggatgg ctctgtgaag ctggtgaccc cggaggggtc cccagtccgg 2220
ggacttcgca cacctgagat ccccatgacc gaagcggtgg aggccgtggc tatggttgga 2280
ggtcagcttc aggccttctg gaagcatgga gtgcaggtgt gggctctagg ctcggatcag 2340
ctgctacagg agctgagaga ccctaccctc actttccgtc tgcttggctc ccccaggctg 2400
gagtgcagtg gcacgatctc gcctcactgc aacctcctcc tcccaggttc aagcaattct 2460
cctgcctcag cctcccgagt agctgggatt acaggcctgt ag 2502
<210> 2
<211> 833
<212> PRT
<213> 智人
<400> 2
Met Asp Val Val Asp Pro Asp Ile Phe Asn Arg Asp Pro Arg Asp His
1 5 10 15
Tyr Asp Leu Leu Gln Arg Leu Gly Gly Gly Thr Tyr Gly Glu Val Phe
20 25 30
Lys Ala Arg Asp Lys Val Ser Gly Asp Leu Val Ala Leu Lys Met Val
35 40 45
Lys Met Glu Pro Asp Asp Asp Val Ser Thr Leu Gln Lys Glu Ile Leu
50 55 60
Ile Leu Lys Thr Cys Arg His Ala Asn Ile Val Ala Tyr His Gly Ser
65 70 75 80
Tyr Leu Trp Leu Gln Lys Leu Trp Ile Cys Met Glu Phe Cys Gly Ala
85 90 95
Gly Ser Leu Gln Asp Ile Tyr Gln Val Thr Gly Ser Leu Ser Glu Leu
100 105 110
Gln Ile Ser Tyr Val Cys Arg Glu Val Leu Gln Gly Leu Ala Tyr Leu
115 120 125
His Ser Gln Lys Lys Ile His Arg Asp Ile Lys Gly Ala Asn Ile Leu
130 135 140
Ile Asn Asp Ala Gly Glu Val Arg Leu Ala Asp Phe Gly Ile Ser Ala
145 150 155 160
Gln Ile Gly Ala Thr Leu Ala Arg Arg Leu Ser Phe Ile Gly Thr Pro
165 170 175
Tyr Trp Met Ala Pro Glu Val Ala Ala Val Ala Leu Lys Gly Gly Tyr
180 185 190
Asn Glu Leu Cys Asp Ile Trp Ser Leu Gly Ile Thr Ala Ile Glu Leu
195 200 205
Ala Glu Leu Gln Pro Pro Leu Phe Asp Val His Pro Leu Arg Val Leu
210 215 220
Phe Leu Met Thr Lys Ser Gly Tyr Gln Pro Pro Arg Leu Lys Glu Lys
225 230 235 240
Gly Lys Trp Ser Ala Ala Phe His Asn Phe Ile Lys Val Thr Leu Thr
245 250 255
Lys Ser Pro Lys Lys Arg Pro Ser Ala Thr Lys Met Leu Ser His Gln
260 265 270
Leu Val Ser Gln Pro Gly Leu Asn Arg Gly Leu Ile Leu Asp Leu Leu
275 280 285
Asp Lys Leu Lys Asn Pro Gly Lys Gly Pro Ser Ile Gly Asp Ile Glu
290 295 300
Asp Glu Glu Pro Glu Leu Pro Pro Ala Ile Pro Arg Arg Ile Arg Ser
305 310 315 320
Thr His Arg Ser Ser Ser Leu Gly Ile Pro Asp Ala Asp Cys Cys Arg
325 330 335
Arg His Met Glu Phe Arg Lys Leu Arg Gly Met Glu Thr Arg Pro Pro
340 345 350
Ala Asn Thr Ala Arg Leu Gln Pro Pro Arg Asp Leu Arg Ser Ser Ser
355 360 365
Pro Arg Lys Gln Leu Ser Glu Ser Ser Asp Asp Asp Tyr Asp Asp Val
370 375 380
Asp Ile Pro Thr Pro Ala Glu Asp Thr Pro Pro Pro Leu Pro Pro Lys
385 390 395 400
Pro Lys Phe Arg Ser Pro Ser Asp Glu Gly Pro Gly Ser Met Gly Asp
405 410 415
Asp Gly Gln Leu Ser Pro Gly Val Leu Val Arg Cys Ala Ser Gly Pro
420 425 430
Pro Pro Asn Ser Pro Arg Pro Gly Pro Pro Pro Ser Thr Ser Ser Pro
435 440 445
His Leu Thr Ala His Ser Glu Pro Ser Leu Trp Asn Pro Pro Ser Arg
450 455 460
Glu Leu Asp Lys Pro Pro Leu Leu Pro Pro Lys Lys Glu Lys Met Lys
465 470 475 480
Arg Lys Gly Cys Ala Leu Leu Val Lys Leu Phe Asn Gly Cys Pro Leu
485 490 495
Arg Ile His Ser Thr Ala Ala Trp Thr His Pro Ser Thr Lys Asp Gln
500 505 510
His Leu Leu Leu Gly Ala Glu Glu Gly Ile Phe Ile Leu Asn Arg Asn
515 520 525
Asp Gln Glu Ala Thr Leu Glu Met Leu Phe Pro Ser Arg Thr Thr Trp
530 535 540
Val Tyr Ser Ile Asn Asn Val Leu Met Ser Leu Ser Gly Lys Thr Pro
545 550 555 560
His Leu Tyr Ser His Ser Ile Leu Gly Leu Leu Glu Arg Lys Glu Thr
565 570 575
Arg Ala Gly Asn Pro Ile Ala His Ile Ser Pro His Arg Leu Leu Ala
580 585 590
Arg Lys Asn Met Val Ser Thr Lys Ile Gln Asp Thr Lys Gly Cys Arg
595 600 605
Ala Cys Cys Val Ala Glu Gly Ala Ser Ser Gly Gly Pro Phe Leu Cys
610 615 620
Gly Ala Leu Glu Thr Ser Val Val Leu Leu Gln Trp Tyr Gln Pro Met
625 630 635 640
Asn Lys Phe Leu Leu Val Arg Gln Val Leu Phe Pro Leu Pro Thr Pro
645 650 655
Leu Ser Val Phe Ala Leu Leu Thr Gly Pro Gly Ser Glu Leu Pro Ala
660 665 670
Val Cys Ile Gly Val Ser Pro Gly Arg Pro Gly Lys Ser Val Leu Phe
675 680 685
His Thr Val Arg Phe Gly Ala Leu Ser Cys Trp Leu Gly Glu Met Ser
690 695 700
Thr Glu His Arg Gly Pro Val Gln Val Thr Gln Val Glu Glu Asp Met
705 710 715 720
Val Met Val Leu Met Asp Gly Ser Val Lys Leu Val Thr Pro Glu Gly
725 730 735
Ser Pro Val Arg Gly Leu Arg Thr Pro Glu Ile Pro Met Thr Glu Ala
740 745 750
Val Glu Ala Val Ala Met Val Gly Gly Gln Leu Gln Ala Phe Trp Lys
755 760 765
His Gly Val Gln Val Trp Ala Leu Gly Ser Asp Gln Leu Leu Gln Glu
770 775 780
Leu Arg Asp Pro Thr Leu Thr Phe Arg Leu Leu Gly Ser Pro Arg Leu
785 790 795 800
Glu Cys Ser Gly Thr Ile Ser Pro His Cys Asn Leu Leu Leu Pro Gly
805 810 815
Ser Ser Asn Ser Pro Ala Ser Ala Ser Arg Val Ala Gly Ile Thr Gly
820 825 830
Leu
<210> 3
<211> 2466
<212> DNA
<213> 智人
<400> 3
atggacgtcg tggaccctga cattttcaat agagaccccc gggaccacta tgacctgcta 60
cagcggctgg gtggcggcac gtatggggaa gtctttaagg ctcgagacaa ggtgtcaggg 120
gacctggtgg cactgaagat ggtgaagatg gagcctgatg atgatgtctc cacccttcag 180
aaggaaatcc tcatattgaa aacttgccgg cacgccaaca tcgtggccta ccatgggagt 240
tatctctggt tgcagaaact ctggatctgc atggaattct gtggggctgg ttctctccag 300
gacatctacc aagtgacagg ctccctgtca gagctccaga ttagctatgt ctgccgggaa 360
gtgctccagg gactggccta tttgcactca cagaagaaga tacacaggga catcaaggga 420
gctaacatcc tcatcaatga tgctggggag gtcagattgg ctgactttgg catctcggcc 480
cagattgggg ctacactggc cagacgcctc tctttcattg ggacacccta ctggatggct 540
ccggaagtgg cagctgtggc cctgaaggga ggatacaatg agctgtgtga catctggtcc 600
ctgggcatca cggccatcga actggccgag ctacagccac cgctctttga tgtgcaccct 660
ctcagagttc tcttcctcat gaccaagagt ggctaccagc ctccccgact gaaggaaaaa 720
ggcaaatggt cggctgcctt ccacaacttc atcaaagtca ctctgactaa gagtcccaag 780
aaacgaccca gcgccaccaa gatgctcagt catcaactgg tatcccagcc tgggctgaat 840
cgaggcctga tcctggatct tcttgacaaa ctgaagaatc ccgggaaagg accctccatt 900
ggggacattg aggatgagga gcccgagcta ccccctgcta tccctcggcg gatcagatcc 960
acccaccgct ccagctctct ggggatccca gatgcagact gctgtcggcg gcacatggag 1020
ttcaggaagc tccgaggaat ggagaccaga cccccagcca acaccgctcg cctacagcct 1080
cctcgagacc tcaggagcag cagccccagg aagcaactgt cagagtcgtc tgacgatgac 1140
tatgacgacg tggacatccc cacccctgca gaggacacac ctcctccact tccccccaag 1200
cccaagttcc gttctccatc agacgagggt cctgggagca tgggggatga tgggcagctg 1260
agcccggggg tgctggtccg gtgtgccagt gggcccccac caaacagccc ccgtcctggg 1320
cctcccccat ccaccagcag cccccacctc accgcccatt cagaaccctc actctggaac 1380
ccaccctccc gggagcttga caagccccca cttctgcccc ccaagaagga aaagatgaag 1440
agaaagggat gtgcccttct cgtaaagttg ttcaatggct gccccctccg gatccacagc 1500
acggccgcct ggacacatcc ctccaccaag gaccagcacc tgctcctggg ggcagaggaa 1560
ggcatcttca tcctgaaccg gaatgaccag gaggccacgc tggaaatgct ctttcctagc 1620
cggactacgt gggtgtactc catcaacaac gttctcatgt ctctctcagg aaagaccccc 1680
cacctgtatt ctcatagcat ccttggcctg ctggaacgga aagagaccag agcaggaaac 1740
cccatcgctc acattagccc ccaccgccta ctggcaagga agaacatggt ttccaccaag 1800
atccaggaca ccaaaggctg ccgggcgtgc tgtgtggcgg agggtgcgag ctctgggggc 1860
ccgttcctgt gcggtgcatt ggagacgtcc gttgtcctgc ttcagtggta ccagcccatg 1920
aacaaattcc tgcttgtccg gcaggtgctg ttcccactgc cgacgcctct gtccgtgttc 1980
gcgctgctga ccgggccagg ctctgagctg cccgctgtgt gcatcggcgt gagccccggg 2040
cggccgggga agtcggtgct cttccacacg gtgcgctttg gcgcgctctc ttgctggctg 2100
ggcgagatga gcaccgagca caggggaccc gtgcaggtga cccaggtaga ggaagatatg 2160
gtgatggtgt tgatggatgg ctctgtgaag ctggtgaccc cggaggggtc cccagtccgg 2220
ggacttcgca cacctgagat ccccatgacc gaagcggtgg aggccgtggc tatggttgga 2280
ggtcagcttc aggccttctg gaagcatgga gtgcaggtgt gggctctagg ctcggatcag 2340
ctgctacagg agctgagaga ccctaccctc actttccgtc tgcttggctc ccccaggcct 2400
gtagtggtgg agacacgccc agtggatgat cctactgctc ccagcaacct ctacatccag 2460
gaatga 2466
<210> 4
<211> 821
<212> PRT
<213> 智人
<400> 4
Met Asp Val Val Asp Pro Asp Ile Phe Asn Arg Asp Pro Arg Asp His
1 5 10 15
Tyr Asp Leu Leu Gln Arg Leu Gly Gly Gly Thr Tyr Gly Glu Val Phe
20 25 30
Lys Ala Arg Asp Lys Val Ser Gly Asp Leu Val Ala Leu Lys Met Val
35 40 45
Lys Met Glu Pro Asp Asp Asp Val Ser Thr Leu Gln Lys Glu Ile Leu
50 55 60
Ile Leu Lys Thr Cys Arg His Ala Asn Ile Val Ala Tyr His Gly Ser
65 70 75 80
Tyr Leu Trp Leu Gln Lys Leu Trp Ile Cys Met Glu Phe Cys Gly Ala
85 90 95
Gly Ser Leu Gln Asp Ile Tyr Gln Val Thr Gly Ser Leu Ser Glu Leu
100 105 110
Gln Ile Ser Tyr Val Cys Arg Glu Val Leu Gln Gly Leu Ala Tyr Leu
115 120 125
His Ser Gln Lys Lys Ile His Arg Asp Ile Lys Gly Ala Asn Ile Leu
130 135 140
Ile Asn Asp Ala Gly Glu Val Arg Leu Ala Asp Phe Gly Ile Ser Ala
145 150 155 160
Gln Ile Gly Ala Thr Leu Ala Arg Arg Leu Ser Phe Ile Gly Thr Pro
165 170 175
Tyr Trp Met Ala Pro Glu Val Ala Ala Val Ala Leu Lys Gly Gly Tyr
180 185 190
Asn Glu Leu Cys Asp Ile Trp Ser Leu Gly Ile Thr Ala Ile Glu Leu
195 200 205
Ala Glu Leu Gln Pro Pro Leu Phe Asp Val His Pro Leu Arg Val Leu
210 215 220
Phe Leu Met Thr Lys Ser Gly Tyr Gln Pro Pro Arg Leu Lys Glu Lys
225 230 235 240
Gly Lys Trp Ser Ala Ala Phe His Asn Phe Ile Lys Val Thr Leu Thr
245 250 255
Lys Ser Pro Lys Lys Arg Pro Ser Ala Thr Lys Met Leu Ser His Gln
260 265 270
Leu Val Ser Gln Pro Gly Leu Asn Arg Gly Leu Ile Leu Asp Leu Leu
275 280 285
Asp Lys Leu Lys Asn Pro Gly Lys Gly Pro Ser Ile Gly Asp Ile Glu
290 295 300
Asp Glu Glu Pro Glu Leu Pro Pro Ala Ile Pro Arg Arg Ile Arg Ser
305 310 315 320
Thr His Arg Ser Ser Ser Leu Gly Ile Pro Asp Ala Asp Cys Cys Arg
325 330 335
Arg His Met Glu Phe Arg Lys Leu Arg Gly Met Glu Thr Arg Pro Pro
340 345 350
Ala Asn Thr Ala Arg Leu Gln Pro Pro Arg Asp Leu Arg Ser Ser Ser
355 360 365
Pro Arg Lys Gln Leu Ser Glu Ser Ser Asp Asp Asp Tyr Asp Asp Val
370 375 380
Asp Ile Pro Thr Pro Ala Glu Asp Thr Pro Pro Pro Leu Pro Pro Lys
385 390 395 400
Pro Lys Phe Arg Ser Pro Ser Asp Glu Gly Pro Gly Ser Met Gly Asp
405 410 415
Asp Gly Gln Leu Ser Pro Gly Val Leu Val Arg Cys Ala Ser Gly Pro
420 425 430
Pro Pro Asn Ser Pro Arg Pro Gly Pro Pro Pro Ser Thr Ser Ser Pro
435 440 445
His Leu Thr Ala His Ser Glu Pro Ser Leu Trp Asn Pro Pro Ser Arg
450 455 460
Glu Leu Asp Lys Pro Pro Leu Leu Pro Pro Lys Lys Glu Lys Met Lys
465 470 475 480
Arg Lys Gly Cys Ala Leu Leu Val Lys Leu Phe Asn Gly Cys Pro Leu
485 490 495
Arg Ile His Ser Thr Ala Ala Trp Thr His Pro Ser Thr Lys Asp Gln
500 505 510
His Leu Leu Leu Gly Ala Glu Glu Gly Ile Phe Ile Leu Asn Arg Asn
515 520 525
Asp Gln Glu Ala Thr Leu Glu Met Leu Phe Pro Ser Arg Thr Thr Trp
530 535 540
Val Tyr Ser Ile Asn Asn Val Leu Met Ser Leu Ser Gly Lys Thr Pro
545 550 555 560
His Leu Tyr Ser His Ser Ile Leu Gly Leu Leu Glu Arg Lys Glu Thr
565 570 575
Arg Ala Gly Asn Pro Ile Ala His Ile Ser Pro His Arg Leu Leu Ala
580 585 590
Arg Lys Asn Met Val Ser Thr Lys Ile Gln Asp Thr Lys Gly Cys Arg
595 600 605
Ala Cys Cys Val Ala Glu Gly Ala Ser Ser Gly Gly Pro Phe Leu Cys
610 615 620
Gly Ala Leu Glu Thr Ser Val Val Leu Leu Gln Trp Tyr Gln Pro Met
625 630 635 640
Asn Lys Phe Leu Leu Val Arg Gln Val Leu Phe Pro Leu Pro Thr Pro
645 650 655
Leu Ser Val Phe Ala Leu Leu Thr Gly Pro Gly Ser Glu Leu Pro Ala
660 665 670
Val Cys Ile Gly Val Ser Pro Gly Arg Pro Gly Lys Ser Val Leu Phe
675 680 685
His Thr Val Arg Phe Gly Ala Leu Ser Cys Trp Leu Gly Glu Met Ser
690 695 700
Thr Glu His Arg Gly Pro Val Gln Val Thr Gln Val Glu Glu Asp Met
705 710 715 720
Val Met Val Leu Met Asp Gly Ser Val Lys Leu Val Thr Pro Glu Gly
725 730 735
Ser Pro Val Arg Gly Leu Arg Thr Pro Glu Ile Pro Met Thr Glu Ala
740 745 750
Val Glu Ala Val Ala Met Val Gly Gly Gln Leu Gln Ala Phe Trp Lys
755 760 765
His Gly Val Gln Val Trp Ala Leu Gly Ser Asp Gln Leu Leu Gln Glu
770 775 780
Leu Arg Asp Pro Thr Leu Thr Phe Arg Leu Leu Gly Ser Pro Arg Pro
785 790 795 800
Val Val Val Glu Thr Arg Pro Val Asp Asp Pro Thr Ala Pro Ser Asn
805 810 815
Leu Tyr Ile Gln Glu
820

Claims (62)

1.式I化合物或其药学上可接受的盐：
Figure FDA0002289356590000011
其中，
R1为C2-9杂芳基、C2-9杂环基、C6-10芳基、C3-9环烷基、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、-C≡C-(C2-9杂芳基)、-C≡C-(C6-10芳基)、-CH(Rj’)-O-(C2-9杂芳基)、-CH(Rj’)-O-(C2-9杂环基)、-CH(Rj’)-O-(C6-10芳基)、-CH(Rj’)-O-(C3-9环烷基)、-CH(Rj’)-O-(C1-6烷基)、-C(O)N(Rj’)(C2-9杂芳基)、-C(O)N(Rj’)(C2-9杂环基)、-C(O)NR24R25、-C(O)OR26、-C(＝NR29)R27、-C(＝NR29)NR24R25、-C(＝NOR29)R27、氰基、氢、卤素、-R24R25、-NR28C(O)R27、-NR28C(O)NR24R25、-NR28C(O)OR26、-NR28S(O)R29；-NR28SO2R29、-NR28SO2NR24R25、-OR26、-OC(O)R27、-OC(O)NR24R25、-S(O)R29；-SO2R29或-SO2NR24R25；
其中所述R1的C2-9杂芳基和C2-9杂环基独立地具有1-4个选自O、S和N的杂原子；且其中所述R1的C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-9环烷基、C6-10芳基、C2-9杂芳基和C2-9杂环基独立地任选取代有一个、两个、三个、四个或五个取代基；
其中所述R1的C3-9环烷基、C6-10芳基、C2-9杂芳基或C2-9杂环基与所述取代基中的两个一同可形成任选取代的双环；
其中嵌入所述环烷基、芳基、杂芳基或杂环基的碳与和它所连结的氧一同可形成羰基；
各个Rj’独立地为氢或任选取代的C1-6烷基；
各个R24和R25独立地为氢或任选取代的C1-6烷基；或R24和R25与和它们所连结的氮原子一同形成任选取代有一至四个取代基的C3-7杂环基；
各个R26、R27和R28独立地为氢或任选取代的C1-6烷基；
各个R29独立地为任选取代的C1-6烷基；
R1’为氢、C1-6烷基、C2-6烯基、C3-6环烷基、C6-10芳基、C2-9杂芳基或卤素，其中所述烷基、烯基、环烷基、芳基和杂芳基可任选取代有一个、两个、三个、四个或五个取代基；其条件为R1和R1’的至少一个不为氢；
R2为A-C(O)-或D；
A为C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-7环烷基、C6-10芳基、C2-9杂芳基、C2-9杂环基、(C3-7环烷基)-(C1-6亚烷基)-、(C6-10芳基)-(C1-6亚烷基)-、(C2-9杂芳基)-(C1-6亚烷基)-、(C2-9杂环基)-(C1-6亚烷基)-、-NRgRh或-ORh；
其中所述A的C1-6烷基、C3-9环烷基、C6-10芳基、C2-9杂芳基和C2-9杂环基独立地任选取代有一个、两个、三个、四个或五个取代基；
Rg为H或任选取代有一至四个独立选自羟基、卤素、氰基、氨基、二(C1-6烷基)氨基、单(C1-6烷基)氨基的取代基的C1-6烷基；-CHF2和-CF3；
Rh为C1-6烷基、C3-7环烷基、C6-10芳基、C2-9杂芳基、C2-9杂环基、(C3-7环烷基)-(C1-6亚烷基)-、(C6-10芳基)-(C1-6亚烷基)-、(C2-9杂芳基)-(C1-6亚烷基)-、或(C2-9杂环基)-(C1-6亚烷基)-；
其中所述Rh的C1-6烷基、C3-7环烷基、C6-10芳基、C2-9杂芳基和C2-9杂环基独立地任选取代有一个、两个、三个、四个或五个取代基；
D为H、C1-6烷基、C3-7环烷基、C6-10芳基、C2-9杂芳基、C2-9杂环基、(C3-7环烷基)-(C1-6亚烷基)-、(C6-10芳基)-(C1-6亚烷基)-、(C2-9杂芳基)-(C1-6亚烷基)-、(C2-9杂环基)-(C1-6亚烷基)-或(C3-7环烷基)-S(O)2-；
其中所述D的C2-9杂芳基和C2-9杂环基独立地具有1-4个选自O、S和N的杂原子；且其中所述D的C1-6烷基、C3-7环烷基、C6-10芳基、C2-9杂芳基和C2-9杂环基独立地任选取代有一个、两个、三个、四个或五个取代基；
其中，所述连结至不同原子的取代基中的两个与和它们所连结的原子一同形成双环或三环，其中所述双环或三环为任选取代的；且其中嵌入所述杂芳基或杂环基的碳与和它所连结的氧一同可形成羰基；
且R2’为H或任选取代的C1-6烷基。
2.根据权利要求1所述的化合物，其中R1为任选取代的C2-9杂芳基或C2-9杂环基。
3.根据权利要求2所述的化合物，其中R1选自：
Figure FDA0002289356590000031
Figure FDA0002289356590000041
它们各自为任选取代的。
4.根据权利要求2所述的化合物，其中R1选自：
Figure FDA0002289356590000042
Figure FDA0002289356590000051
它们各自为任选取代的。
5.根据权利要求4所述的化合物，其中R1为：
其中R6、R7和R8各自独立地选自：
i.支链的或直链的C1-6烷基、C1-6烯基、C1-6亚烯基和C3-9环烷基，其中所述烷基、烯基、亚烯基和环烷基任选取代有一至四个独立选自羟基、卤素、-CHF2、-CF3、氨基、二(C1-6烷基)氨基、单(C1-6烷基)氨基、氰基、C3-7环烷基、C1-6烷氧基、-S(O)R’、-SO2R’、-SO2NR’R”、-C(O)NR’R”和-NR’C(O)R”的取代基，其中R’和R”独立地为H或C1-6烷基；
ii.NRaRb-C(O)-，其中，Ra和Rb各自独立地为氢或C1-6烷基，其中所述烷基可任选取代有羟基、卤素、-CHF2或-CF3；
iii.C1-6烷氧基；
iv.卤素；
v.氰基；
vi.羟基；
vii.氨基；
viii.二(C1-6烷基)氨基；
ix.单(C1-6烷基)氨基；
x.-NRcC(O)Rd，其中Rc和Rd独立地为H或C1-6烷基；
xi.-CF3；
xii.-CHF2；
xiii.-SO2R’，其中R’为H或C1-6烷基；
xiv.-SO2NR’R”，其中R’和R”独立地为H或C1-6烷基；
xv.-C(O)NRcRd；其中Rc和Rd独立地为H或C1-6烷基；
xvi.-C(O)ORe；其中Re为H、C1-6烷基或CH2-芳基；
xvii.C3-5杂环基、C6-10芳基、-(C1-6烷基)(C6-10芳基)或C2-9杂芳基，其中所述杂环基、芳基或杂芳基可任选取代有C1-6烷基、C6-10芳基或-C(O)ORe；其中Re为H、C1-6烷基或CH2-芳基；
xviii.-O-(C2-9杂芳基)；
xix.-NR’S(O)k’R”，其中k’为1或2，且R’和R”独立地为H或C1-6烷基；
其中所述R1的C6-10芳基、C2-9杂芳基或C2-9杂环基与R6、R7和R8中的两个可形成双环；且
其中嵌入所述芳基、杂芳基或杂环基的碳与和它所连结的氧一同可形成羰基。
6.根据权利要求5所述的化合物，其中R1为：
Figure FDA0002289356590000061
7.根据权利要求6所述的化合物，其中R1为：
Figure FDA0002289356590000062
8.根据权利要求7所述的化合物，其中R1为：
Figure FDA0002289356590000063
其中R6、R7和R8各自独立地选自氢、羟基、氨基、C1-6烷基、C1-6烷氧基和单(C1-6烷基)氨基；或R6、R7和R8中的两个可形成双环。
9.根据权利要求8所述的化合物，其中R6为C1-6烷基；R7为氢、氨基或单(C1-6烷基)氨基；且R8为氢、羟基或C1-6烷氧基；或R6和R7一同形成双环；或R7和R8一同形成双环。
10.根据权利要求9所述的化合物，其中R6为甲基。
11.根据权利要求9或10所述的化合物，其中R7为氨基。
12.根据权利要求10所述的化合物，其中R1为
Figure FDA0002289356590000071
13.根据权利要求1至12中任一项所述的化合物，其中R2为-A-C(O)-。
14.根据权利要求13所述的化合物，其中A为：
i.(C3-7环烷基)(C1-6烷基)j-或(C2-9杂环基)(C1-6烷基)j-，其中，j为1或0；且其中所述环烷基或杂环基可任选取代有一个、两个、三个或四个R5，其中，在各种情况下，R5独立选自支链的或直链的C1-6烷基、卤素、氰基、氰基(C1-6烷基)-、-CF3、-CHF2、羟基(C1-6烷基)、卤代(C1-6烷基)、羟基、(C1-6烷基)-O-(C1-6烷基)-、-(C1-6烷基)-NHC(O)-(C1-6烷基)、氨基、-NR’C(O)R”、乙酰基、二(C1-6烷基)氨基、单(C1-6烷基)氨基、氨基(C1-6烷基)、C1-6烷氧基、CH3CO2-(C1-6烷基)-、-NR’SO2R”、-SO2R’、-SO2NR’R”、-C(O)NR’R”、-NR’C(O)R”、任选取代的C2-9杂芳基、任选取代的C2-9杂环基、任选取代的C6-10芳基、任选取代的C3-9环烷基-C(O)-和NReRf-C(O)-(C1-6烷基)k-，
其中所述C2-9杂芳基、C2-9杂环基和C6-10芳基可任选取代有C1-6烷基或(C1-6烷基)-O-(C1-6烷基)-，其中所述(C1-6烷基)-O-(C1-6烷基)-可任选取代有氨基，
其中，在各种情况下，R’和R”独立地为H或C1-6烷基，
其中Re和Rf各自独立选自氢和支链的或直链的C1-6烷基，或Re和Rf与和各自所连结的氮一同可形成C3-7环烷基，其可任选取代有支链的或直链的C1-6烷基、C3-4环烷基、卤素、氰基、-CF3、-CHF2或羟基；
且k为1或0；
或者，所述环烷基或杂环基与两个R5形成双环或螺环，其中两个连至不同碳上的R5与和各自所连结的碳形成双环，或两个连至相同碳上的R5与和各自所连结的碳形成螺环，其中所述双环或螺环可取代有一个、两个、三个或四个如上所述的R5；
ii.-NRgRh，其中
Rg为H或支链的或直链的C1-6烷基，其中所述烷基可任选取代有一至四个独立选自羟基、卤素、氰基、氨基、二(C1-6烷基)氨基、单(C1-6烷基)氨基的取代基；-CHF2和-CF3；
Rh选自：
a.支链的或直链的C1-6烷基，其中所述烷基可任选取代有羟基、卤素、氰基、氨基、二(C1-6烷基)氨基、单(C1-6烷基)氨基、-CHF2、-CF3或NRe’Rf’-C(O)-，其中Re’和Rf’各自独立地为氢或支链的或直链的C1-6烷基；
和，
b.(C3-7环烷基)(C1-6烷基)m-、(C2-9杂芳基)(C1-6烷基)m-、(C6-10芳基)(C1-6烷基)m-或(C2-9杂环基)(C1-6烷基)m-，其中，m为1或0；且其中所述环烷基、杂芳基、芳基或杂环基可任选取代有一个或两个R5’，
其中，在各种情况下，R5’独立选自支链的或直链的C1-6烷基、卤素、氰基、氰基(C1-6烷基)-、-CF3、-CHF2、羟基(C1-6烷基)、卤代(C1-6烷基)、羟基、C1-6烷氧基、氨基、氨基(C1-6烷基)和NRiRj-C(O)-(C1-6烷基)k’-，
其中Ri和Rj独立选自氢和支链的或直链的C1-6烷基，且k’为1或0；
iii.R9-(C1-6烷基)-，其中R9选自羟基、卤素、-CHF2、-CF3、氰基、C1-6烷氧基、-NRoRp、NRo’Rp’-C(O)-；其中Ro、Rp、Ro’和Rp’各自独立地为氢或支链的或直链的C1-6烷基；
iv.B-(C1-6烷基)t-，其中，B为C3-9杂芳基或C3-7杂环基，其中，所述杂芳基或杂环基具有1-3个选自O、S和N的杂原子；且其中所述杂芳基或杂环基可任选取代有R10、R10’和R10”中的一个、两个或三个，它们各自独立选自：
a.支链的或直链的C1-6烷基或C3-4环烷基，其中所述烷基或环烷基可任选取代有羟基、卤素、-CHF2、-CF3、氨基、二(C1-6烷基)氨基、单(C1-6烷基)氨基、氰基、-C(O)NRqRr或-NRqC(O)Rr，其中Rq和Rr独立地为H或C1-6烷基；
b.C3-7环烷基；
c.C3-7杂环基；
d.羟基；
e.卤素；
f.-CHF2；
g.-CF3；
h.氨基；
i.二(C1-6烷基)氨基；
j.单(C1-6烷基)氨基；
k.氰基；
l.-C(O)NRsRt，其中Rs和Rt独立地为H或C1-6烷基；和
m.-NRsC(O)Rt，其中Rs和Rt独立地为H或C1-6烷基；
且t为1或0；
v.(C6-10芳基)q’-(C1-6烷基)n-O-或(C2-7杂环基)-O-，其中，所述芳基或杂环基可任选取代有R11、R12和R13中的一个、两个或三个，它们各自选自支链的或直链的C1-6烷基、羟基、卤素、-CHF2、-CF3、氰基、C1-6烷氧基、乙酰基和NRuRv-；其中Ru和Rv各自独立地为氢或支链的或直链的C1-6烷基；其中，若存在，嵌入所述杂环基的硫与一个氧一同可形成亚砜，或与两个氧一同可形成砜；
且n为1或0，q’为1或0，其条件为n和q’中的一个为1；
或
vi.支链的或直链的C1-6烷基、C1-6烯基、C1-6亚烯基，其中所述烷基、烯基和亚烯基可任选取代有羟基、卤素、-CHF2、-CF3、氨基、二(C1-6烷基)氨基、单(C1-6烷基)氨基、氰基、C3-7环烷基、C1-6烷氧基、-SO2R’、-SO2NR’R”、-C(O)NR’R”或-NR’C(O)R”，其中R’和R”独立地为H或C1-6烷基。
15.根据权利要求14所述的化合物，其中A为(C3-7环烷基)(C1-6烷基)j-、(C2-9杂环基)(C1-6烷基)j-、(C6-10芳基)q’-(C1-6烷基)n-O-或(C2-7杂环基)-O-，其中所述环烷基、烷基、芳基或杂环基可为任选取代的；j为1或0；且n为1或0且q’为1或0，其条件为n和q’中的一个为1。
16.根据权利要求13所述的化合物，其中A为任选取代的C3-7环烷基。
17.根据权利要求1至12中任一项所述的化合物，其中R2为：
Figure FDA0002289356590000101
其中，v为0、1、2或3；且
在各种情况下，R5独立选自C1-6烷基、卤素、氰基、氰基(C1-6烷基)-、-CF3、-CHF2、羟基(C1-6烷基)、卤代(C1-6烷基)、羟基、(C1-6烷基)-O-(C1-6烷基)-、-(C1-6烷基)-NHC(O)-(C1-6烷基)、氨基、-NR’C(O)R”、乙酰基、二(C1-6烷基)氨基、单(C1-6烷基)氨基、氨基(C1-6烷基)、C1-6烷氧基、CH3CO2-(C1-6烷基)-、-NR’SO2R”、-SO2R’、-SO2NR’R”、-C(O)NR’R”、-NR’C(O)OR”、-NR’C(O)NR’R”、任选取代的C2-9杂芳基、任选取代的C2-9杂环基、任选取代的C6-10芳基、任选取代的C3-9环烷基、任选取代的C3-9环烷基-C(O)-和NReRf-C(O)-(C1-6烷基)k-，
其中所述C2-9杂芳基、C2-9杂环基和C6-10芳基可任选取代有C1-6烷基或(C1-6烷基)-O-(C1-6烷基)-，其中所述(C1-6烷基)-O-(C1-6烷基)-可任选取代有氨基，
其中，在各种情况下，R’和R”独立地为H或C1-6烷基，
其中Re和Rf各自独立地选自氢和支链的或直链的C1-6烷基，或Re和Rf与和各自所连结的氮一同可形成C3-7环烷基，其可为任选取代的(例如，取代有支链的或直链的C1-6烷基、C3-4环烷基、卤素、氰基、-CF3、-CHF2或羟基)；
且k为1或0。
18.根据权利要求17所述的化合物，其中，在各种情况下，R5独立选自C1-6烷基、氟、氰基、NH2-C(O)-、烷基-(C1-6)烷氧基-、C2-9杂芳基和氰基(C1-6)烷基；其中各个烷基和C2-9杂芳基为任选取代的。
19.根据权利要求18所述的化合物，其中至少一个R5为C1-6烷基。
20.根据权利要求19所述的化合物，其中至少一个R5为甲基。
21.根据权利要求19或20所述的化合物，其中R5中的一个为任选取代的C2-9杂芳基。
22.根据权利要求21所述的化合物，其中所述任选取代的C2-9杂芳基为任选取代的吡唑基团。
23.根据权利要求22所述的化合物，其中所述任选取代的吡唑基团为
Figure FDA0002289356590000111
其中所述波浪线表示与该环丙基环所连接的点；且其中RB1为C1-6烷基。
24.根据权利要求18所述的化合物，其中R2为：
Figure FDA0002289356590000112
25.根据权利要求1至12中任一项所述的化合物，其中R2为D。
26.根据权利要求25所述的化合物，其中D为
i.(C6-10芳基)(C1-6烷基)z-、(C3-7环烷基)(C1-6烷基)z-或(C3-9杂芳基)(C1-6烷基)z-，其中，所述杂芳基具有1-4个选自O、S和N的杂原子；且其中所述芳基、环烷基或杂芳基可任选取代有R14、R15、R16’和R16中的一个、两个、三个或四个，它们各自独立选自：
a.支链的或直链的C1-6烷基或C2-6烯基，其中所述烷基或烯基可任选取代有一至四个独立选自羟基、卤素、-CHF2、-CF3、氨基、二(C1-6烷基)氨基、单(C1-6烷基)氨基、氰基C1-6烷氧基、-SO2R’、-SO2NR’R”、-C(O)NRwRx和-NRwC(O)Rx的取代基，其中Rw和Rx独立地为H或C1-6烷基；其中连至不同原子的R14、R15、R16’和R16中的两个与和各自所连结的原子一同形成双环或三环，其中所述双环或三环可取代有如上所述的R14、R15、R16’和R16中的一个、两个、三个或四个；
b.C3-7环烷基；
c.C3-7杂环基，其中所述杂环基可任选取代有羟基、乙酰基或氧杂环丁烷基团；
d.羟基；
e.卤素；
f.-CHF2；
g.-CF3；
h.氨基；
i.二(C1-6烷基)氨基；
j.单(C1-6烷基)氨基；
k.氰基；
l.-NRyC(O)Rz，其中Ry和Rz独立地为H或C1-6烷基；
m.-C(O)NRyRz，其中Ry和Rz独立地为H或C1-6烷基；
n.-SO2NRyRz，其中Ry和Rz独立地为H或C1-6烷基；和
o.-C(O)ORy，其中Ry为H或C1-6烷基；
且z为1或0；
ii.C3-7环烷基-SO2-，其中所述环烷基可任选取代有一个或两个R6’，其中，在各种情况下，R6’独立选自支链的或直链的C1-6烷基、卤素、氰基、-CF3、-CHF2、羟基(C1-6烷基)、卤代(C1-6烷基)、羟基、(C1-6烷基)-O-(C1-6烷基)-、C1-6烷氧基、氨基、二(C1-6烷基)氨基、单(C1-6烷基)氨基、氨基(C1-6烷基)和NRe’Rf’-C(O)-(C1-6烷基)n-，其中Re’和Rf’独立选自氢和支链的或直链的C1-6烷基，且n为1或0；
或
iii.H、C1-6烷基或吡咯烷基团，其中所述烷基任选取代有卤素。
27.根据权利要求26所述的化合物，其中D为(C6-10芳基)(C1-6烷基)z-、(C3-7环烷基)(C1-6烷基)z-或(C3-9杂芳基)(C1-6烷基)z-，其中，所述杂芳基具有1-4个选自O、S和N的杂原子；且其中所述芳基、环烷基或杂芳基可任选取代有一个、两个、三个或四个取代基；其中两个连至不同原子的所述取代基与和各自所连结的原子一同形成双环或三环，其中所述双环或三环为任选取代的。
28.根据权利要求27所述的化合物，其中D为任选取代的(C3-9杂芳基)(C1-6烷基)z-，且z为0或1。
29.根据权利要求27所述的化合物，其中所述C3-9杂芳基选自：
Figure FDA0002289356590000141
它们各自可任选取代有一个、两个或三个取代基。
30.根据权利要求27所述的化合物，其中所述C3-9杂芳基选自
Figure FDA0002289356590000142
它们各自可任选取代有一个、两个或三个取代基。
31.根据权利要求30所述的化合物，其中所述C3-9杂芳基为：
Figure FDA0002289356590000143
其中R14、R15和R16各自独立选自：
a.支链的或直链的C1-6烷基，其中所述烷基可任选取代有羟基、卤素、-CF2、-CF3、氨基、二(C1-6)烷基氨基、单(C1-6)烷基氨基、氰基C1-6烷氧基、-SO2R’、-SO2NR’R”、-(CO)NRwRx或-NRw(CO)Rx，其中Rw和Rx独立地为H或C1-6烷基，或其中如本文所述的R14、R15和R16中的两个，当连至不同原子时，与和各自所连结的原子一同形成双环；
b.C3-7环烷基；
c.C3-7杂环基；
d.羟基；
e.卤素；
f.-CF2；
g.-CF3；
h.氨基；
i.二(C1-6)烷基氨基；
j.单(C1-6)烷基氨基；
k.氰基；
l.-NRy(CO)Rz，其中Ry和Rz独立地为H或C1-6烷基；
m.-(CO)NRyRz，其中Ry和Rz独立地为H或C1-6烷基；
n.-SO2NRyRz，其中Ry和Rz独立地为H或C1-6烷基；和
o.-(CO)ORy，其中Ry为H或C1-6烷基；
其中连至不同原子的所述R14、R15和R16中的两个与和各自所连结的原子一同形成双环或三环；其中所述双环或三环为任选取代的。
32.根据权利要求31所述的化合物，其中连至不同原子的R14、R15和R16中的两个与和各自所连结的原子一同形成双环或三环。
33.根据权利要求32所述的化合物，其中所述双环为
Figure FDA0002289356590000151
其中X’和Y’各自独立地为C、N、S或O；且
其中所述双环任选取代有R17、R18、R19和R20，其中R17、R18、R19和R20各自独立选自氢、羟基、氨基和C1-6烷基，且其中R17、R18、R19和R20中的两个与和它们所连结的碳可形成C3-C5螺环或C2-9杂芳基环。
34.根据权利要求33所述的化合物，其中X’或Y’的至少一个为N。
35.根据权利要求34所述的化合物，其中所述双环为：
Figure FDA0002289356590000152
36.根据权利要求25所述的化合物，其中D为具有式
Figure FDA0002289356590000161
的5元杂芳基或具有式
Figure FDA0002289356590000162
的6元杂芳基，其中：
Q为NR20、CR20、O或S；
各个T独立地为N或CR21；
各个Z独立地为N或C，其条件为只有一个Z为N；
各个R20和R21独立地为氢、烷基、卤代烷基、烷氧基、卤素、羟基或氰基；且
R22和R23与和它们所连结的原子一同形成双环；其中所述双环可含有一个或多个选自N、S和O的杂原子；且其中所述双环任选取代有一个、两个、三个、四个或五个R30；
其中各个R30独立地为C1-6烷基、C2-6烯基、C3-7环烷基、C3-7杂环基、卤素、氰基、氧代、-NR31R32、-SO2NR31R32、-C(O)NR31R32、-C(O)OR33、-OR33、-NR33C(O)R34、-NR33SO2R35或-SO2R35；其中所述R30的C1-6烷基、C2-6烯基、C3-7环烷基和C3-7杂环基任选取代有一至四个R40；或两个R30基团与和它们所连结的母体部分一同形成环，该环任选取代有一至四个R40；
各个R31和R32独立地为氢或C1-6烷基；或R31和R32与和它们所连结的氮原子一同形成任选取代有一至四个R40的C3-7杂环基；
各个R33和R34独立地为氢或C1-6烷基；
R35为C1-6烷基；
各个R40独立选自卤素、氰基、氧代、-NR41R42、-SO2NR41R42、-C(O)NR41R42、-C(O)OR43、-OR43、-NR43C(O)R44、-NR43SO2R45或-SO2R45；C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C2-9杂芳基、C6-10芳基、氧代；或两个R40基团与和它们所连结的母体部分一同形成环，该环任选取代有一至三个选自C1-6烷基、C1-6卤代烷基、羟基和氧代的取代基；
各个R41和R42独立地为氢或C1-6烷基；或R41和R42与和它们所连结的氮原子一同形成C3-7杂环基，该杂环基任选取代有一至三个选自C1-6烷基、C1-6卤代烷基、羟基和氧代的取代基；
各个R43和R44独立地为氢或C1-6烷基；且
R45为C1-6烷基。
37.根据权利要求36所述的化合物，其中D为
Figure FDA0002289356590000171
其中q为0、1、2、3、4、5或6；
R36独立地为氢或R30；且
R20和R30如权利要求36所定义。
38.根据权利要求378所述的化合物，其中D为
Figure FDA0002289356590000172
其中R36独立地为氢或C1-6烷基；且R20为氢。
39.根据权利要求36所述的化合物，其中D为
Figure FDA0002289356590000181
其中p为0、1、2、3或4；
R36独立地为氢或R30；且
R20和R30如权利要求36所定义。
40.根据权利要求36所述的化合物，其中D为
Figure FDA0002289356590000182
其中X为CH2、N、O或S；
n为1、2、3或4；
p为0、1、2、3或4；
R36为氢或R30；且
R20和R30如权利要求36所定义。
41.根据权利要求36所述的化合物，其中D为
Figure FDA0002289356590000183
其中q为0、1、2、3、4、5或6；
G独立地为C或N；
G’独立地为N、NR46、CR47、S或O；
R46和R47独立地为氢或R40；或两个基团R46和R47一同形成环；且
R20和R40如权利要求36所定义。
42.根据权利要求41所述的化合物，其中D为
Figure FDA0002289356590000191
43.根据权利要求36所述的化合物，其中D为
Figure FDA0002289356590000192
其中Q为NR20、O或S；
X为CR38aR38b、NR36、S或O；
X’为CR39aR39b、NR36、S、SO2或O；
R36、R37a、R37b、R38a和R38b独立地为氢或R30；
R39a和R39b独立地为氢或R30，或R39a和R39b与和它们所连结的碳原子一同形成C3-7环烷基或C3-7杂环基；且
R20和R30如权利要求36所定义。
44.根据权利要求43所述的化合物，其中D为
45.根据权利要求1至44中任一项所述的化合物，其中R1’为氢、卤素或C1-6烷基。
46.根据权利要求45所述的化合物，其中R1’为氢。
47.根据权利要求1至46中任一项所述的化合物，其中R2’为氢。
48.根据权利要求1所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中所述化合物选自表1中的化合物编号1-348。
49.根据权利要求1所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中所述化合物选自表2中的化合物编号349-429。
50.根据权利要求1所述的化合物或其药学上可接受的盐，其中所述化合物选自表3中的化合物编号430-572。
51.一种药物组合物，其包含根据权利要求1至50中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐和药学上可接受的载体。
52.根据权利要求51所述的药物组合物，其中所述组合物进一步包含化疗剂。
53.一种抑制HPK1的方法，所述方法包括使受试者的HPK1与有效量的根据权利要求1至50中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐或根据权利要求51或52所述的药物组合物接触。
54.一种用于增强有此需要的受试者的免疫应答的方法，其中所述方法包括向所述受试者给药有效量的根据权利要求1至50中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐或根据权利要求51或52所述的药物组合物。
55.根据权利要求53或54所述的方法，其中所述受试者患有癌症。
56.一种治疗HPK1依赖性病症的方法，所述方法包括向有此需要的受试者给药有效量的根据权利要求1至50中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐或根据权利要求51或52所述的药物组合物。
57.根据权利要求56所述的方法，其中所述HPK1依赖性病症为癌症。
58.根据权利要求55或57所述的方法，其中所述癌症包括至少一种选自结肠直肠癌、黑色素瘤、非小细胞肺癌、卵巢癌、乳腺癌、胰腺癌、血液系统恶性肿瘤和肾细胞癌的癌症。
59.根据权利要求53至58中任一项所述的方法，其中所述方法进一步包括向所述受试者给药化疗剂。
60.根据权利要求1至50中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐或根据权利要求51或52所述的药物组合物，其用于根据权利要求53至59中任一项所述的方法。
61.根据权利要求1至50中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐或根据权利要求51或52所述的药物组合物在制备用于根据权利要求53至59中任一项所述的方法的药物中的用途。
62.根据权利要求1至50中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐或根据权利要求51或52所述的药物组合物在根据权利要求53至59中任一项所述的方法中的用途。
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Cited By (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2021175271A1 (zh) * 2020-03-03 2021-09-10 轶诺(浙江)药业有限公司 新型hpk1抑制剂及其制备方法和应用
CN115073308A (zh) * 2021-03-15 2022-09-20 苏州信礼发医药技术有限公司 1-氨甲基-1-环丙醇的合成方法
WO2022214009A1 (zh) * 2021-04-08 2022-10-13 杭州阿诺生物医药科技有限公司 一种高活性的hpk1激酶抑制剂
CN115279771A (zh) * 2020-01-15 2022-11-01 缆图药品公司 Map4k1抑制剂
WO2023193759A1 (en) * 2022-04-07 2023-10-12 Insilico Medicine Ip Limited Hpk1 antagonists and uses thereof

Families Citing this family (53)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20190136028A (ko) * 2017-03-30 2019-12-09 에프. 호프만-라 로슈 아게 Hpk1 억제제로서의 나프티리딘
JP6836693B2 (ja) * 2017-09-28 2021-03-03 シーストーン・ファーマスーティカルズ・（スージョウ）・カンパニー・リミテッドＣｓｔｏｎｅ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ （Ｓｕｚｈｏｕ） Ｃｏ．， Ｌｔｄ． Ａ２ａ受容体アンタゴニストとしての縮合環誘導体
JP7167146B2 (ja) 2017-11-06 2022-11-08 ブリストル－マイヤーズ スクイブ カンパニー Ｈｐｋ１阻害剤として有用なイソフラノン化合物
KR102586510B1 (ko) 2018-02-13 2023-10-12 길리애드 사이언시즈, 인코포레이티드 Pd-1/pd-l1 억제제
WO2019204609A1 (en) 2018-04-19 2019-10-24 Gilead Sciences, Inc. Pd-1/pd-l1 inhibitors
PT3820572T (pt) 2018-07-13 2023-11-10 Gilead Sciences Inc Inibidores pd-1/pd-l1
TW202012405A (zh) * 2018-07-24 2020-04-01 瑞士商赫孚孟拉羅股份公司 萘啶化合物及其用途
JP7433304B2 (ja) * 2018-09-30 2024-02-19 エフ・ホフマン－ラ・ロシュ・アクチェンゲゼルシャフト シンノリン化合物および癌などのｈｐｋ１依存性障害の治療
WO2020092528A1 (en) 2018-10-31 2020-05-07 Gilead Sciences, Inc. Substituted 6-azabenzimidazole compounds having hpk1 inhibitory activity
FI3873903T3 (fi) 2018-10-31 2024-03-26 Gilead Sciences Inc Substituoituja 6-azabentsiimidatsoliyhdisteitä HPK1-inhibiittoreina
EP3894406A1 (en) 2018-12-11 2021-10-20 Bayer Aktiengesellschaft Substituted pyrrolopyridine-derivatives
EP3947373A1 (en) 2019-03-26 2022-02-09 Janssen Pharmaceutica NV Bicyclic hpk1 inhibitors
US20220177458A1 (en) 2019-03-26 2022-06-09 Janssen Pharmaceutica Nv Hpk1 inhibitors
EP3972695A1 (en) 2019-05-23 2022-03-30 Gilead Sciences, Inc. Substituted exo-methylene-oxindoles which are hpk1/map4k1 inhibitors
CA3142513A1 (en) 2019-06-25 2020-12-30 Gilead Sciences, Inc. Flt3l-fc fusion proteins and methods of use
TW202116753A (zh) * 2019-07-11 2021-05-01 大陸商南京征祥醫藥有限公司 以噌啉作為hpk1的抑制劑
CN110483402B (zh) * 2019-08-12 2021-07-23 上海毕得医药科技股份有限公司 一种3-溴-5-苯基-1h-吡唑的合成方法
CN114341127A (zh) * 2019-08-21 2022-04-12 百济神州有限公司 作为hpk1抑制剂的氨基吡嗪化合物及其用途
CN114945366A (zh) 2019-09-13 2022-08-26 林伯士萨顿公司 Hpk1拮抗剂和其用途
WO2021055621A1 (en) 2019-09-18 2021-03-25 Shire Human Genetic Therapies, Inc. Plasma kallikrein inhibitors and uses thereof
CN118178645A (zh) 2019-10-18 2024-06-14 四十七公司 用于治疗骨髓增生异常综合征和急性髓系白血病的联合疗法
JP2022552748A (ja) 2019-10-31 2022-12-19 フォーティ セブン， インコーポレイテッド 抗ｃｄ４７及び抗ｃｄ２０による血液癌の治療
TWI778443B (zh) 2019-11-12 2022-09-21 美商基利科學股份有限公司 Mcl1抑制劑
KR20220131918A (ko) 2019-12-24 2022-09-29 카나 바이오사이언스, 인코포레이션 다이아실글리세롤 키나제 조절 화합물
TWI832035B (zh) 2020-02-14 2024-02-11 美商基利科學股份有限公司 結合ccr8之抗體及融合蛋白及其用途
WO2021222522A1 (en) 2020-05-01 2021-11-04 Gilead Sciences, Inc. Cd73 inhibiting 2,4-dioxopyrimidine compounds
WO2021249913A1 (en) 2020-06-09 2021-12-16 Bayer Aktiengesellschaft 2'-(quinolin-3-yl)-5',6'-dihydrospiro[azetidine-3,4'-pyrrolo[1,2-b]pyrazole]-1-carboxylate derivatives and related compounds as map4k1 (hpk1) inhibitors for the treatment of cancer
CN111965367A (zh) * 2020-07-23 2020-11-20 北京大学第三医院（北京大学第三临床医学院） Hip-55在作为gpcr偏向药物靶点中的应用
EP4288437A1 (en) 2021-02-05 2023-12-13 Bayer Aktiengesellschaft Map4k1 inhibitors
WO2022187856A1 (en) 2021-03-05 2022-09-09 Nimbus Saturn, Inc. Hpk1 antagonists and uses thereof
CN117396469A (zh) * 2021-03-17 2024-01-12 武田药品工业株式会社 血浆激肽释放酶的抑制剂
TW202302145A (zh) 2021-04-14 2023-01-16 美商基利科學股份有限公司 ＣＤ４７／ＳＩＲＰα結合及ＮＥＤＤ８活化酶Ｅ１調節次單元之共抑制以用於治療癌症
WO2022222951A1 (zh) * 2021-04-22 2022-10-27 浙江海正药业股份有限公司 芳香稠合环类衍生物及其制备方法和用途
WO2022245671A1 (en) 2021-05-18 2022-11-24 Gilead Sciences, Inc. Methods of using flt3l-fc fusion proteins
CN117480155A (zh) 2021-06-23 2024-01-30 吉利德科学公司 二酰基甘油激酶调节化合物
AU2022299051A1 (en) 2021-06-23 2023-12-07 Gilead Sciences, Inc. Diacylglyercol kinase modulating compounds
EP4359413A1 (en) 2021-06-23 2024-05-01 Gilead Sciences, Inc. Diacylglyercol kinase modulating compounds
CA3222439A1 (en) 2021-06-23 2022-12-29 Gilead Sciences, Inc. Diacylglyercol kinase modulating compounds
CA3234909A1 (en) 2021-10-28 2023-05-04 Gilead Sciences, Inc. Pyridizin-3(2h)-one derivatives
AU2022376954A1 (en) 2021-10-29 2024-05-02 Gilead Sciences, Inc. Cd73 compounds
WO2023107956A1 (en) 2021-12-08 2023-06-15 Dragonfly Therapeutics, Inc. Proteins binding nkg2d, cd16 and 5t4
US20230220106A1 (en) 2021-12-08 2023-07-13 Dragonfly Therapeutics, Inc. Antibodies targeting 5t4 and uses thereof
US20240124412A1 (en) 2021-12-22 2024-04-18 Gilead Sciences, Inc. Ikaros zinc finger family degraders and uses thereof
WO2023122615A1 (en) 2021-12-22 2023-06-29 Gilead Sciences, Inc. Ikaros zinc finger family degraders and uses thereof
TW202340168A (zh) 2022-01-28 2023-10-16 美商基利科學股份有限公司 Ｐａｒｐ７抑制劑
EP4245756A1 (en) 2022-03-17 2023-09-20 Gilead Sciences, Inc. Ikaros zinc finger family degraders and uses thereof
US20230355796A1 (en) 2022-03-24 2023-11-09 Gilead Sciences, Inc. Combination therapy for treating trop-2 expressing cancers
TW202345901A (zh) 2022-04-05 2023-12-01 美商基利科學股份有限公司 用於治療結腸直腸癌之組合療法
TW202400138A (zh) 2022-04-21 2024-01-01 美商基利科學股份有限公司 Ｋｒａｓ ｇ１２ｄ調節化合物
WO2024006929A1 (en) 2022-07-01 2024-01-04 Gilead Sciences, Inc. Cd73 compounds
WO2024003773A1 (en) * 2022-07-01 2024-01-04 Pfizer Inc. 2,7-naphthyridine compounds as mastl inhibitors
WO2024064214A2 (en) * 2022-09-21 2024-03-28 Takeda Pharmaceutical Company Limited Synthesis of cyclopropane carboxylic acids
WO2024064668A1 (en) 2022-09-21 2024-03-28 Gilead Sciences, Inc. FOCAL IONIZING RADIATION AND CD47/SIRPα DISRUPTION ANTICANCER COMBINATION THERAPY

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2013063068A1 (en) * 2011-10-27 2013-05-02 Merck Sharp & Dohme Corp. Factor ixa inhibitors
CN104379583A (zh) * 2012-06-15 2015-02-25 广州源生医药科技有限公司 作为wnt信号传导抑制剂的化合物、组合物及其应用
CN105142641A (zh) * 2013-03-12 2015-12-09 广州源生医药科技有限公司 用于治疗癌症的化合物
WO2016205942A1 (en) * 2015-06-25 2016-12-29 University Health Network Hpk1 inhibitors and methods of using same

Family Cites Families (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3773919A (en) 1969-10-23 1973-11-20 Du Pont Polylactide-drug mixtures
KR101607288B1 (ko) 2005-07-01 2016-04-05 이. 알. 스퀴부 앤드 선즈, 엘.엘.씨. 예정 사멸 리간드 1 (피디-엘1)에 대한 인간 모노클로날 항체
WO2009023193A1 (en) 2007-08-15 2009-02-19 Cytokinetics, Incorporated Certain chemical entities, compositions, and methods
AU2009288289B2 (en) 2008-08-25 2012-11-08 Amplimmune, Inc. PD-1 antagonists and methods of use thereof
EP3929216A1 (en) 2008-12-09 2021-12-29 F. Hoffmann-La Roche AG Anti-pd-l1 antibodies and their use to enhance t-cell function
JP2013512251A (ja) 2009-11-24 2013-04-11 アンプリミューン、インコーポレーテッド Ｐｄ−ｌ１／ｐｄ−ｌ２の同時阻害
NO2504364T3 (zh) 2009-11-24 2018-01-06
KR20190136028A (ko) * 2017-03-30 2019-12-09 에프. 호프만-라 로슈 아게 Hpk1 억제제로서의 나프티리딘

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2013063068A1 (en) * 2011-10-27 2013-05-02 Merck Sharp & Dohme Corp. Factor ixa inhibitors
CN104379583A (zh) * 2012-06-15 2015-02-25 广州源生医药科技有限公司 作为wnt信号传导抑制剂的化合物、组合物及其应用
CN105142641A (zh) * 2013-03-12 2015-12-09 广州源生医药科技有限公司 用于治疗癌症的化合物
WO2016205942A1 (en) * 2015-06-25 2016-12-29 University Health Network Hpk1 inhibitors and methods of using same

Cited By (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN115279771A (zh) * 2020-01-15 2022-11-01 缆图药品公司 Map4k1抑制剂
WO2021175271A1 (zh) * 2020-03-03 2021-09-10 轶诺(浙江)药业有限公司 新型hpk1抑制剂及其制备方法和应用
CN115244050A (zh) * 2020-03-03 2022-10-25 轶诺(浙江)药业有限公司 新型hpk1抑制剂及其制备方法和应用
CN115073308A (zh) * 2021-03-15 2022-09-20 苏州信礼发医药技术有限公司 1-氨甲基-1-环丙醇的合成方法
WO2022214009A1 (zh) * 2021-04-08 2022-10-13 杭州阿诺生物医药科技有限公司 一种高活性的hpk1激酶抑制剂
WO2023193759A1 (en) * 2022-04-07 2023-10-12 Insilico Medicine Ip Limited Hpk1 antagonists and uses thereof

Also Published As

Publication number Publication date
EP3601284A1 (en) 2020-02-05
WO2018183956A1 (en) 2018-10-04
US11034692B1 (en) 2021-06-15
AU2018244935A1 (en) 2019-08-15
MX2019011511A (es) 2019-11-18
JP7154221B2 (ja) 2022-10-17
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CN110678466B (zh) 2023-01-31
TW201904964A (zh) 2019-02-01
EP3601284C0 (en) 2023-12-27
US10407424B2 (en) 2019-09-10
CA3052492A1 (en) 2018-10-04
IL268262A (en) 2019-09-26
BR112019018093A2 (pt) 2020-06-16
KR20190136028A (ko) 2019-12-09
US20180282328A1 (en) 2018-10-04
EP3601284B1 (en) 2023-12-27

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