KR20240026911A - 골수성 세포 2 작용제 상에서 발현되는 유발 수용체로서의 헤테로고리 화합물 및 사용 방법 - Google Patents

골수성 세포 2 작용제 상에서 발현되는 유발 수용체로서의 헤테로고리 화합물 및 사용 방법 Download PDF

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Abstract

본 개시는 골수성 세포 2 상에서 발현되는 유발 수용체("TREM2")의 활성화에 유용한 식 I의 화합물을 제공한다. 본 개시는 또한 화합물을 포함하는 약학적 조성물, 화합물의 용도, 및 예를 들어 신경퇴행성 장애의 치료를 위한 조성물을 제공한다. 추가로, 본 개시는 식 I의 화합물의 합성에 유용한 중간체를 제공한다.

I

Description

골수성 세포 2 작용제 상에서 발현되는 유발 수용체로서의 헤테로고리 화합물 및 사용 방법
관련 출원에 대한 상호 참조
본 출원은 2021년 5월 4일에 출원된 미국 특허 가출원 제63/201,531호 및 2021년 11월 9일에 출원된 미국 특허 가출원 제63/263,811호의 이익을 주장하며, 이들 각각은 그 전체가 참조로서 본원에 통합된다.
기술분야
본 개시는 골수성 세포 2 상에서 발현되는 유발 수용체(“TREM2”, Triggering Receptor Expressed on Myeloid Cells 2)의 활성화에 유용한 화합물을 제공한다. 본 개시는 또한 화합물을 포함하는 약학적 조성물, 화합물의 용도, 및 예를 들어 신경퇴행성 장애의 치료를 위한 조성물을 제공한다. 추가로, 본 개시는 식 I의 화합물의 합성에 유용한 중간체를 제공한다.
소교세포는 뇌에 상주하는 선천 면역 세포이며 중추신경계에서 항상성 상태를 유지하는 데 중요하다(Hickman 등의 Nat Neurosci 2018, Li 및 Barres의 Nat Rev Immunol., 2018). 이들 상주하는 대식세포는 이들로 하여금 미세환경에서 변화를 감지하고 이들의 표현형을 변경하여 침입 병원균, 단백질독성 스트레스, 세포 손상, 및 건강할 때와 질환 상태에서 발생할 수 있는 다른 경색에 대한 반응을 매개할 수 있게 하는 다양한 수용체를 발현한다. Id. 소교세포는 뇌와 척수의 실질에 상주하며, 여기서 소교세포는 다른 유형의 교세포(Domingues 등의 Front Cell Dev Biol 2016; Liddelow 등의 Nature, 2017, Shinozaki 등의 Cell Rep., 2017) 이외에도 뉴런 세포체(Cserep 등의 Science, 2019), 뉴런 돌기(Paolicelli 등의 Science, 2011, Ikegami 등의 Neruopathology, 2019)와 상호작용하여, 다수의 생리학적 과정에서 역할을 한다. 자극에 반응하여 신속하게 증식하는 능력으로, 소교세포는 식균작용, 사이토카인/케모카인 방출, 항원 제시, 및 이동과 같은 골수 세포 기능을 특징적으로 나타낸다(Colonna 및 Butovsky의 Annu Rev Immunol, 2017). 소교세포의 보다 특화된 기능은 뉴런으로부터 시냅스를 제거하고, 뉴런 세포체를 둘러싼 영역을 조사하는 고도로 수지상으로 분기된(aborized) 세포 과정과 직접 통신하는 능력을 포함한다(Hong 등의 Curr Opin Neurobiol, 2016; Sellgren 등의 Nat Neurosci, 2019).
단일 세포 RNASeq 프로파일링을 통해 기술된 바와 같은 소교세포 및 이들의 다양한 상태의 가소성은 다양한 세포 표면 수용체 어레이로부터의 신호 전달을 통합함으로써 발생하는 것으로 여겨진다(Hickman 등의 Nat Neurosci 2013). 집합적으로 소교세포 “센솜(sensome)”으로 알려진 이들 수용체는 세포내 신호전달, 신호전달의 활성화, 또는 활성화 억제를 담당하며, 시알산-결합 면역글로불린형 렉틴(“SIGLEC”, Sialic acid-binding immunoglobulin-type lectin), 톨-유사 수용체(“TLR”, Toll-like receptor), Fc 수용체, 뉴클레오티드-결합 올리고머화 도메인(“NOD”, nucleotide-binding oligomerization domain), 및 퓨린성 G 단백질-결합 수용체와 같은 단백질 계열을 포함한다. Doens 및 Fernandez 2014, Madry 및 Attwell의 2015, Hickman 및 El Khoury의 2019. 골수 계통의 다른 세포와 유사하게, 소교세포 센솜의 조성은 동적으로 조절되고, 중추 신경계(“CNS”, central nervous system)의 항상성 변화에 대한 표현형 반응을 유도하는 분자 패턴을 인식하도록 작용한다. Id. 뇌 소교세포에 의해 선택적으로 발현되는 수용체 중 하나는 TREM2이며, 이는 단일 통과 막관통 도메인, 세포외 줄기 영역, 및 리간드 상호작용을 담당하는 세포외 면역글로불린 가변(“IgV”, immunoglobulin variable)-유사 도메인으로 이루어진다(Kleinberger 등의 Sci Transl Med, 2014). TREM2는 세포내 신호 전달-매개 도메인을 갖지 않으므로, 어댑터 단백질 DAP10 및 DAP12와의 상호작용을 통해 리간드 인식 후 하류 신호 전달을 매개한다는 것을 생화학적 분석을 통해 예시한 적이 있다(Peng 등의 Sci Signal 2010; Jay 등의 Mol Neurodegener, 2017). 특히 TREM2/DAP12 복합체는 특히 말초 대식세포 및 파골세포 외에도 소교세포 표현형에 대한 전-활성화로 특징지어질 수 있는 신호전달 단위로서 작용한다. (Otero 등의 J Immunol, 2012; Kobayashi 등의 J Neurosci, 2016; Jaitin 등의 Cell, 2019). 인지질, 세포 잔해, 아포지단백질, 및 수초(myelin)와 같은 리간드의 맥락에서 CNS에서 TREM2를 통한 신호전달을 연구한 적이 있다(Wang 등의 Cell, 2015; Kober 및 Brett의 J Mol Biol, 2017; Shirotani 등의 Sci Rep, 2019). 기능적 TREM2 발현이 결여되었거나 돌연변이된 형태의 수용체를 발현하는 마우스에서, 핵심적으로 관찰된 것은 희소돌기아교세포 탈수초화, 뇌에서의 뇌졸중-유도 조직 손상, 및 생체 내 단백질독성 세포함유물과 같은 손상에 대한 무딘 소교세포 반응이다(Cantoni 등의 Acta Neuropathol, 2015, Wu 등의 Mol Brain, 2017).
TREM2 유전자좌에서 코딩 변이체는 인간 게놈 차원의 연관성 연구에서 후기 발병 알츠하이머병(“LOAD”, late onset Alzheimer’s disease)과 연관이 있었는데, 이는 수용체 기능 상실을 질환 위험의 증가와 연결시킨다(Jonsson 등의 N Engl J Med 2013, Sims 등의 Nat Genet 2017). CD33, PLCg2, 및 MS4A4A/6A와 같이 CNS에서 소교세포에 의해 선택적으로 발현되는 다른 유전자의 유전적 변이는 이들이 LOAD 위험과 연관이 있다는 점에서 게놈 수준의 중요한 문제가 되었다(Hollingworth 등의 Nat Genet 2011, Sims 등의 Nat Genet 2017, Deming 등의 Sci Transl Med 2019). 종합적으로, 이들 유전적 소견은 LOAD에 있어서 소교세포 선천 면역 기능의 중요성을 강조하는 추정 생화학 회로에서 함께 연결된다. 또한, 인간 대상체의 뇌척수액(CSF, cerebrospinal fluid)에서 가용성 형태의 TREM2(“sTREM2”, soluble form of TREM2)의 증가 또는 상승은 질환 진행 및 LOAD의 병리학적 특징(인산화된 타우(Tau)를 포함함)의 출현과 연관이 있다(Suarez-Calvet 등의 Mol Neurodegener 2019). 또한, 자연사 연구 및 인간 생물학 연구는 CSF에서의 베이스라인 sTREM2 수준이 종방향으로 모니터링된 코호트에서 측두엽 부피 소실 및 에피소드 기억 감소의 속도를 계층화할 수 있음을 나타낸다(Ewers 등의 Sci Transl Med 2019).
LOAD에서 TREM2의 역할을 뒷받침하는 인간 유전적 증거에 추가하여, TREM2에서의 동형접합성 기능 상실 돌연변이는 경화성 백질뇌병증(“PLOSL”, Polycystic lipomembranous osteodysplasia with sclerosing leukoencephalopathy) 동반하는 다낭성 지방막 골이형성증 또는 나수-하코라병(“NHD”, Nasu-Hakola disease)으로 알려진 조기 발병 치매 증후군의 원인이다(Golde 등의 Alzheimers Res Ther 2013, Dardiotis 등의 Neurobiol Aging 2017). 이러한 진행성 신경퇴행성 질환은 일반적으로 30대에 나타나며, 교증(gliosis)을 동반하는 뇌에서의 수초 상실, 미해결 신경염증, 및 뇌 위축증을 병리학적 특징으로 한다. 일반적인 신경정신의학적 발현에 앞서 종종 골낭종 및 말초 골밀도 상실과 같은 골 이상이 선행한다. (Bianchin 등의 Cell Mol Neurobiol 2004; Madry 등의 Clin Orthop Relat Res 2007, Bianchin 등의 Nat Rev Neurol 2010). 골수 계통의 파골세포도 TREM2를 발현하는 것으로 알려져 있다는 점을 감안하면, 손목 및 발목 동통, 부종, 및 골절의 PLOSL 관련 증상은 TREM2가 CNS에서 소교세포와 평행한 정의된 신호전달 경로를 통해 골 항상성을 조절하는 작용을 할 수 있음을 나타낸다(Paloneva 등의 J Exp Med 2003, Otero 등의 J Immunol 2012). TREM2 기능과 PLOSL 간의 연관성은 인간 신체에서 골수 세포 기능의 주요 생리학적 측면을 유지하는 데 있어서 수용체가 중요함을 예시하였다.
마우스를 대상으로 TREM2의 생물학을 모델링하기 위한 노력이 이루어져 왔고, 이는 LOAD-관련 TREM2 R47H 기능 상실 돌연변이 유전자이식 마우스에 추가하여 TREM2 녹아웃(“KO”, knock out) 마우스를 생성하도록 고무하였다(Ulland 등의 Cell, 2017, Kang 등의 Hum Mol Genet 2018). PLOSL의 신경학적 발현을 재현할 수는 없지만, TREM2 KO 마우스는 골 초미세구조에서 이상을 나타낸다(Otero 등의 J Immunol 2012). TREM2 KO 또는 돌연변이체 마우스를 5XFAD 아밀로이드 생성 돌연변이 계통과 같은 가족성 알츠하이머병 배경을 가진 유전자이식 마우스와 교배시켰을 때, 현저한 표현형이 관찰되었다(Ulrich 등의 Neuron, 2017). CNS에서 TREM2 기능 상실의 이러한 생체 내 표현형은 플라크 부담(plaque burden)의 증가 및 소교세포 인자 SPP1 및 오스테오폰틴의 낮은 수준 분비를 포함하는데, 이들은 아밀로이드 병리에 대한 소교세포 반응의 특징이다(Ulland 등의 Cell, 2017). 다른 설치류 연구는 TREM2의 상실이 플라크 주위의 소교세포 클러스터링의 감소 및 가족 AD 아밀로이드 모델에서 덜 다져진 플라크 형태의 출현으로 이어짐을 입증하였다(Parhizkar 등의 Nat Neurosci 2019). LOAD에서 관찰된 타우(Tau) 단백질 병리와 관련하여, 가족성 타우병증 마우스 모델은, TREM2 KO 마우스에서, 주입 지점으로부터 마우스 뇌 내로 병리학적 인간 타우 응집체의 확산이 강화되었음을 입증하였다(Leyns 등의 Nat Neurosci 2019). 또한, 노화 시나리오에서의 TREM2 KO 마우스를 사용한 단일 세포 RNASeq 연구, 5XFAD 가족성 알츠하이머병 모델 마우스, 및 근위축성 측색 경화증 SOD1 돌연변이 마우스 배경은, 소교세포 모집단 내에서 CNS 병리에 반응하여 보존된 표현형 형질전환 세트에게 TREM2 수용체 기능이 중요함을 나타낸다(Keren-Shaul 등의 Cell 2017).
TREM2 발현 수준이 상승된 설치류 모델에서, 5XFAD 유전자이식 마우스의 뇌 아밀로이드 병리는 플라크 부피 감소 및 형태 변경을 나타냈다(Lee 등의 Neuron, 2018). 뇌 아밀로이드 병리와 관련된 면역조직학적 마커의 변화와 함께, 이양양성 신경돌기의 존재도 TREM2가 과발현될 때 약화되었다. Id. 따라서, TREM2의 약리학적 활성화는 신경 질환, 신경퇴행성 질환, 및 기타 질환을 치료하거나 예방하기 위한 관심 표적이다. 항-아밀로이드 및 항-타우 치료제를 통해 LOAD의 병리학적 특징을 표적화함으로써 질환 진행을 변경시키려는 많은 시도에도 불구하고, 예를 들어 LOAD의 유전적으로 연루된 신경면역 측면을 해결하기 위한 TREM2의 활성화제가 필요하다. 이러한 TREM2 활성화제는 치료제로서 사용하기에 적합할 수 있고, 알츠하이머병과 같은 질환에 대해 여전히 경감되지 않은 상당한 지속적 사회적 부담을 고려할 때 남아 있을 수 있다.
첫째, 식 I”의 화합물
I”
또는 이의 호변이성질체, 또는 상기 화합물 또는 상기 호변이성질체의 약학적으로 허용 가능한 염이 본원에서 제공되며, 여기서
고리 A는 고리 A가 융합되는 6원 고리 시스템과 함께 다음 식의 이환 고리 시스템을 형성하고
, , 또는; 여기서
X1은 CH, C(OH), C(OCH3), CF, 또는 N이고;
X2는 CH2, CHF, CF2, (C=O), O, S(O)2, 또는 NH이고;
X3은 CH 또는 N이고;
X4는 CH 또는 N이고;
X5는 CH 또는 N이고;
X6은 CH 또는 N이고;
R1은 H, C1-3알킬, 또는 CH2OH이고;
R2는 H, C1-3알킬, C1-6할로알킬, 또는 C3-6시클로알킬이고;
R3은 H 또는 C1-3알킬이고;
또는 R1 및 R3은 이들의 개재 원자와 함께 취해져 3-8원 포화 또는 부분 불포화 단환 헤테로환 고리로부터 선택된 환형 기를 형성하고;
R4는 C1-6알킬, C1-6할로알킬, 디C1-3알킬아미노, -C(=O)O(C1-6알킬), -C(=O)(헤테로아릴), C3-6시클로알킬, C3-6헤테로시클로알킬, 페닐, 5원 헤테로아릴, 또는 6원 헤테로아릴이고; 여기서
(1) C1-6알킬, C3-6시클로알킬, 또는 C3-6헤테로시클로알킬은 C=O, C(=O)CH3, -OH, C1-6할로알킬, 5원 헤테로아릴, 및 C(=O)OCH2-페닐로부터 독립적으로 선택된 1 내지 6개의 치환기로 임의 치환되고;
(2) 페닐, 5원 헤테로아릴, 6원 헤테로아릴, 또는 -C(=O)(헤테로아릴)은 할로겐, CD3, C1-6알킬, C1-6할로알킬, C1-6알콕시, C1-6할로알콕시, -(C1-3알킬)O(C1-3알킬), CH2OH, -CN, C2-4알케닐, C3-6시클로알킬, 및 C3-6헤테로시클로알킬로부터 독립적으로 선택된 1 내지 3개의 치환기로 임의 치환되고; 여기서
하위섹션 (2)의 C1-6알킬, C1-6할로알킬, 및 C3-6시클로알킬은 할로겐, C1-6알킬, C1-6알콕시, OH, C3-6시클로알킬, N(CH3)C(=O)CH3, 또는 페닐로부터 독립적으로 선택된 1 내지 6개의 치환기로 임의 치환되고, 여기서 페닐은 할로겐, C1-6알킬, 및 C1-6알콕시로부터 독립적으로 선택된 1 내지 6개의 치환기로 임의 치환되고; 여기서 C1-6알킬 중 하나 이상은 이들의 개재 원자와 함께 취해져 C3-6시클로알킬을 형성하고;
하위섹션 (2)의 C3-6헤테로시클로알킬은 할로겐, C1-3알킬, 및 -C(=O)O(C1-6알킬)로부터 선택된 1 내지 3개의 치환기로 임의 치환되고;
하위섹션 (1)의 5원 헤테로아릴은 할로겐 및 C3-6시클로알킬로부터 선택된 1 내지 3개의 치환기로 임의 치환되고;
R5는 C1-6알킬, C2-6알케닐, C2-6알키닐, C1-6할로알킬, C3-6시클로알킬, C3-6시클로알케닐, C5-8스피로알킬, C5-8트리시클로알킬, 시클로펜트-1-엔-1-일, 시클로헥스-1-엔-1-일, 페닐, 5원 헤테로아릴, 6원 헤테로아릴, 아지리딘-1-일, 스피로[3.3]헵탄-6-일, 피롤리딘-1-일, 3-아자바이시클로[3.1.0]헥산-3-일, 모르폴린-4-일, 피페리딘-1-일, 벤조티아졸-5-일, 디히드로-인덴-5-일, 바이시클로[4.2.0]옥타-1(6),2,4-트리엔-3-일, 또는 -OCH2-(C3-6시클로알킬)이고,
여기서 C1-6알킬, C2-6알케닐, C2-6알키닐, C3-6시클로알킬, C3-6시클로알케닐, C5-8스피로알킬, C5-8트리시클로알킬, 스피로[3.3]헵탄-6-일, 시클로펜트-1-엔-1-일, 시클로헥스-1-엔-1-일, 페닐, 5원 헤테로아릴, 및 6원 헤테로아릴은 중수소, 할로겐, C1-3알킬, C1-3할로알킬, C1-3알콕시, C1-3할로알콕시, 및 C3-6시클로알킬로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 치환기로 추가로 임의 치환되고;
여기서 아지리딘-1-일, 피롤리딘-1-일, 3-아자바이시클로[3.1.0]헥산-3-일, 모르폴린-4-일, 피페리딘-1-일, 2-벤조티아졸-5-일, 및 -OCH2-(C3-6시클로알킬)은 할로겐, C1-3알킬, C1-3할로알킬, C1-3알콕시, 5원 헤테로아릴, 및 C1-3할로알콕시로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 치환기로 추가로 임의 치환되고;
여기서 5원 헤테로아릴은 C3-6시클로알킬로 추가로 치환되고,
여기서 C1-3알킬은 할로겐 또는 -CN으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 치환기로 추가로 임의 치환되고;
여기서 C1-6알킬, C2-6알케닐, C2-6알키닐 및 C1-6할로알킬 중 하나 이상은 이들의 개재 원자와 함께 취해져 할로겐, C1-3알킬로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 치환기로 임의 치환된 C3-6시클로알킬을 형성하고;
R6은 H, 할로겐, CD3, C1-3알킬, CH2CN, C(=O)NH2, C(=O)NC(CH3)2, C2-4알콕시, C1-6할로알킬, C1-6할로알콕시, 또는 C3-6시클로알킬이고;
R7은 H, 할로겐, CD3, C1-3알킬, C1-6할로알킬, 또는 C3-6시클로알킬이고;
R8은 H 또는 C1-3알킬이고;
R9는 H 또는 C1-5알킬이고;
n은 0, 1 또는 2이고; X1이 N이고 n이 0인 경우, X2는 NH 또는 O가 아니다.
둘째, 식 I"의 화합물, 또는 이의 호변이성질체, 또는 상기 화합물 또는 상기 호변이성질체의 약학적으로 허용 가능한 염, 및 약학적으로 허용 가능한 부형제를 포함하는 약학적 조성물이 본원에 제공된다.
셋째, 인간 TREM2의 기능 상실과 관련된 병태를 치료하거나 예방하는 데 사용하기 위한 전술한 것과 같은 식 I"의 화합물, 또는 이의 호변이성질체, 또는 상기 화합물 또는 상기 호변이성질체의 약학적으로 허용 가능한 염, 또는 약학적 조성물이 본원에 제공된다.
넷째, 파킨슨병, 류마티스 관절염, 알츠하이머병, 나수-하콜라병, 전두측두엽 치매, 다발성 경화증, 프리온 질환(prion disease), 또는 뇌졸중을 치료하거나 예방하는 데 사용하기 위한 전술한 것과 같은 식 I"의 화합물, 또는 이의 호변이성질체, 또는 상기 화합물 또는 상기 호변이성질체의 약학적으로 허용 가능한 염, 또는 약학적 조성물이 본원에 제공된다.
이제 본 개시내용의 실시예를 상세히 참조한다. 본 개시내용의 소정의 실시예들이 기술되는 동안, 본 개시의 실시예가 기술된 실시예로 한정되도록 의도되지 않는다는 것을 이해할 것이다. 반대로, 본 개시내용의 실시예를 참조하는 것은, 이들 실시예의 대안, 변형, 및 균등물이 첨부된 청구범위에 의해 정의된 본 개시의 실시예의 사상 및 범주 내에 포함될 수 있는 것처럼 이들을 포함하도록 의도된다.
식 I’의 화합물
또는 이의 호변이성질체, 또는 상기 화합물 또는 상기 호변이성질체의 약학적으로 허용 가능한 염이 본원에서 제공되며, 여기서
고리 A는 고리 A가 융합되는 6원 고리 시스템과 함께 다음 식의 이환 고리 시스템을 형성하고
, , 또는;
고리 B는 , 또는 이고;
X1은 CH 또는 N이고;
X2는 CH2, CHF, CF2, O, 또는 NH이고;
X3은 CR18, CH 또는 N이고;
X4는 CR19, CH 또는 N이고;
X5는 CR20, CH 또는 N이고;
X6은 CR21, CH 또는 N이고;
R1은 H 또는 C1-3알킬이고;
R2는 H 또는 C1-3알킬이고;
R3은 H 또는 C1-3알킬이고;
R4는 C1-6알킬, C1-6할로알킬, 디C1-3알킬아미노, -C(=O)O(C1-6알킬), C3-6시클로알킬, C3-6헤테로시클로알킬, 페닐, 5원 헤테로아릴, 또는 6원 헤테로아릴이고; 여기서
(1) C3-6시클로알킬 또는 C3-6헤테로시클로알킬은 C=O로 임의 치환되고;
(2) 페닐, 5원 헤테로아릴, 또는 6원 헤테로아릴기는 할로겐, C1-6알킬, C1-6할로알킬, C1-6알콕시, C1-6할로알콕시, -(C1-3알킬)O(C1-3알킬), -CN, C2-4알케닐, C3-6시클로알킬, 및 C3-6헤테로시클로알킬로부터 독립적으로 선택된 1 내지 3개의 치환기로 임의 치환되고; 여기서
하위섹션 (2)의 C1-6알킬 및 C1-6할로알킬은 OH로 임의 치환되고; 여기서
하위섹션 (2)의 C3-6헤테로시클로알킬은 할로겐, C1-3알킬, 및 -C(=O)O(C1-6알킬)로부터 선택된 1 내지 3개의 치환기로 임의 치환되고;
R5는 임의 치환된 C1-6 지방족기, -OR, -CN, -NR2, -C(=O)R, -C(=O)OR, -C(=O)NR2, -SO2R, -SO2NR2, C1-6할로알킬, 임의 치환된 OCH2-(C3-6시클로알킬)이거나, 3-8원 포화 또는 부분 불포화 단환 탄소환 고리, 6-12원 포화 또는 부분 불포화 가교 탄소환 고리, 7-12원 포화 또는 부분 불포화 이환 탄소환 고리, 페닐, 8-10원 이환 방향족 탄소환 고리, 3-8원 포화 또는 부분 불포화 단환 헤테로환 고리(질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 2개의 헤테로원자를 가짐), 6-12원 포화 또는 부분 불포화 가교 헤테로환 고리(질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 헤테로원자를 가짐), 7-12원 포화 또는 부분 불포화 이환 헤테로환 고리(질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 헤테로원자를 가짐), 5-6원 단환 헤테로방향족 고리(질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 헤테로원자를 가짐), 및 8-10원 이환 헤테로방향족 고리(질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 5개의 헤테로원자를 가짐)로부터 선택된 환형 기이고, 여기서 환형 기는 임의 치환되고;
R6 및 R7은 수소, 임의 치환된 C1-6 지방족기, 할로겐, -OR, -CN, -NR2, -C(=O)R, -C(=O)OR, -C(=O)NR2, -SO2R, -SO2NR2, C1-6할로알킬, C1-6할로알콕시, 또는 3-8원 포화 또는 부분 불포화 단환 탄소환 고리, 7-12원 포화 또는 부분 불포화 이환 탄소환 고리, 페닐, 8-10원 이환 방향족 탄소환 고리, 3-8원 포화 또는 부분 불포화 단환 헤테로환 고리(질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 2개의 헤테로원자를 가짐), 7-12원 포화 또는 부분 불포화 이환 헤테로환 고리(질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 헤테로원자를 가짐), 5-6원 단환 헤테로방향족 고리(질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 헤테로원자를 가짐), 및 8-10원 이환 헤테로방향족 고리(질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 5개의 헤테로원자를 가짐)로부터 선택된 환형 기로부터 각각 독립적으로 선택되고, 여기서 환형 기는 임의 치환되거나;
R6 및 R7은 이들의 개재 원자와 함께 취해져 3-8원 포화 또는 부분 불포화 단환 탄소환 고리, 7-12원 포화 또는 부분 불포화 이환 탄소환 고리, 페닐, 8-10원 이환 방향족 탄소환 고리, 3-8원 포화 또는 부분 불포화 단환 헤테로환 고리(질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 2개의 헤테로원자를 가짐), 7-12원 포화 또는 부분 불포화 이환 헤테로환 고리(질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 헤테로원자를 가짐), 5-6원 단환 헤테로방향족 고리(질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 헤테로원자를 가짐), 및 8-10원 이환 헤테로방향족 고리(질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 5개의 헤테로원자를 가짐)로부터 선택된 환형 기를 형성하고, 여기서 환형 기는 임의 치환되고;
R8은 H 또는 C1-3알킬이고;
R9는 H 또는 C1-5알킬이고;
n은 0 또는 1이고; X1이 N이고 n이 0인 경우, X2는 NH 또는 O가 아니고;
L은 결합 또는 임의 치환된 직쇄 또는 분지형 C1-6 알킬렌이고;
X10은 CH, N 또는 CR10이고;
X11은 CH, N 또는 CR11이고;
X10 또는 X11 중 하나가 N인 경우, 다른 하나는 N이 아니고;
R10 및 R11은 수소, 임의 치환된 C1-6 지방족기, -OR, -CN, -NR2, -C(=O)R, -C(=O)OR, -C(=O)NR2, -SO2R, -SO2NR2, 할로겐, C1-6할로알킬, C1-6할로알콕시, 또는 3-8원 포화 또는 부분 불포화 단환 탄소환 고리, 7-12원 포화 또는 부분 불포화 이환 탄소환 고리, 페닐, 8-10원 이환 방향족 탄소환 고리, 3-8원 포화 또는 부분 불포화 단환 헤테로환 고리(질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 2개의 헤테로원자를 가짐), 7-12원 포화 또는 부분 불포화 이환 헤테로환 고리(질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 헤테로원자를 가짐), 5-6원 단환 헤테로방향족 고리(질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 헤테로원자를 가짐), 및 8-10원 이환 헤테로방향족 고리(질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 5개의 헤테로원자를 가짐)로부터 선택된 환형 기로부터 각각 독립적으로 선택되고, 여기서 환형 기는 임의 치환되거나;
R10 및 R11은 이들의 개재 원자와 함께 취해져 3-8원 포화 또는 부분 불포화 단환 탄소환 고리, 7-12원 포화 또는 부분 불포화 이환 탄소환 고리, 페닐, 8-10원 이환 방향족 탄소환 고리, 3-8원 포화 또는 부분 불포화 단환 헤테로환 고리(질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 2개의 헤테로원자를 가짐), 7-12원 포화 또는 부분 불포화 이환 헤테로환 고리(질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 헤테로원자를 가짐), 5-6원 단환 헤테로방향족 고리(질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 헤테로원자를 가짐), 및 8-10원 이환 헤테로방향족 고리(질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 5개의 헤테로원자를 가짐)로부터 선택된 환형 기를 형성하고, 여기서 환형 기는 임의 치환되고;
X12는 N, CH, 또는 CR12이고;
X13은 O, NR13, C(R13)2, CHR13, SO2, 또는 C=O이고;
X14는 O, NR14, C(R14)2, CHR14, SO2, 또는 C=O이고;
X15는 O, NR15, C(R15)2, CHR15, SO2, 또는 C=O이고;
X16은 O, NR16, C(R16)2, CHR16, SO2, 또는 C=O이고;
X17은 직접 결합, O, NR17, C(R17)2, CHR17, -CH2CH2-, -OCH2-, SO2, 또는 C=O이고;
R12는 임의 치환된 지방족기, 할로겐, -OR, -CN, -NR2, -C(=O)R, -C(=O)OR, -C(=O)NR2, -SO2R, -SO2NR2, C1-6할로알킬, 또는 C1-6할로알콕시이고;
각각의 R13, R14, R15, R16, 및 R17은 수소, 임의 치환된 C1-6 지방족기, -OR, -CN, -NR2, -C(=O)R, -C(=O)OR, -C(=O)NR2, -SO2R, -SO2NR2, C1-6할로알킬, C1-6할로알콕시, 또는 3-8원 포화 또는 부분 불포화 단환 탄소환 고리, 7-12원 포화 또는 부분 불포화 이환 탄소환 고리, 페닐, 8-10원 이환 방향족 탄소환 고리, 3-8원 포화 또는 부분 불포화 단환 헤테로환 고리(질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 2개의 헤테로원자를 가짐), 7-12원 포화 또는 부분 불포화 이환 헤테로환 고리(질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 헤테로원자를 가짐), 5-6원 단환 헤테로방향족 고리(질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 헤테로원자를 가짐), 및 8-10원 이환 헤테로방향족 고리(질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 5개의 헤테로원자를 가짐)로부터 선택된 환형 기로부터 독립적으로 선택되고, 여기서 환형 기는 임의 치환되거나;
R12, R13, R14, R15, R16, 및 R17 중 임의의 2개는 이들의 개재 원자와 함께 취해져 3-8원 포화 또는 부분 불포화 단환 탄소환 고리, 7-12원 포화 또는 부분 불포화 이환 탄소환 고리, 페닐, 8-10원 이환 방향족 탄소환 고리, 3-8원 포화 또는 부분 불포화 단환 헤테로환 고리(질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 2개의 헤테로원자를 가짐), 7-12원 포화 또는 부분 불포화 이환 헤테로환 고리(질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 헤테로원자를 가짐), 5-6원 단환 헤테로방향족 고리(질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 헤테로원자를 가짐), 및 8-10원 이환 헤테로방향족 고리(질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 5개의 헤테로원자를 가짐)로부터 선택된 환형 기를 형성하고, 여기서 환형 기는 임의 치환되고;
R18, R19, R20, 및 R21은 각각 독립적으로 수소, 임의 치환된 C1-6 지방족기, 할로겐, -OR, -CN, -NR2, -C(=O)R, -C(=O)OR, -C(=O)NR2, -SO2R, -SO2NR2, C1-6할로알킬, 또는 C1-6할로알콕시이고;
R22는 임의 치환된 C1-6 지방족기, 할로겐, -OR, -CN, -NR2, -C(=O)R, -C(=O)OR, -C(=O)NR2, -SO2R, -SO2NR2, C1-6할로알킬, 또는 C1-6할로알콕시이고;
m은 0, 1 또는 2이고;
각각의 R은 독립적으로 수소, 또는 임의 치환된 C1-6 지방족기, 임의 치환된 페닐, 임의 치환된 3-7원 포화 또는 부분 불포화 탄소환 고리, 임의 치환된 3-7원 포화 또는 부분 불포화 헤테로환 고리(질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 2개의 헤테로원자를 가짐), 또는 임의 치환된 5-6원 헤테로아릴 고리(질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 헤테로원자를 가짐)이거나;
동일한 질소 상의 2개의 R기는 이들의 개재 원자와 함께 취해져 임의 치환된 4-7원 포화, 부분 불포화, 또는 헤테로아릴 고리(질소 외에 질소, 산소, 및 황으로부터 독립적으로 선택된 0 내지 3개의 헤테로원자를 가짐)를 형성한다.
식 I"의 화합물
I"
또는 이의 호변이성질체, 또는 상기 화합물 또는 상기 호변이성질체의 약학적으로 허용 가능한 염이 추가로 제공되며, 여기서
고리 A는 고리 A가 융합되는 6원 고리 시스템과 함께 다음 식의 이환 고리 시스템을 형성하고
, , 또는; 여기서
X1은 CH, C(OH), C(OCH3), CF, 또는 N이고;
X2는 CH2, CHF, CF2, (C=O), O, S(O)2, 또는 NH이고;
X3은 CH 또는 N이고;
X4는 CH 또는 N이고;
X5는 CH 또는 N이고;
X6은 CH 또는 N이고;
R1은 H, C1-3알킬, 또는 CH2OH이고;
R2는 H, C1-3알킬, C1-6할로알킬, 또는 C3-6시클로알킬이고;
R3은 H 또는 C1-3알킬이고;
또는 R1 및 R3은 이들의 개재 원자와 함께 취해져 3-8원 포화 또는 부분 불포화 단환 헤테로환 고리로부터 선택된 환형 기를 형성하고;
R4는 C1-6알킬, C1-6할로알킬, 디C1-3알킬아미노, -C(=O)O(C1-6알킬), -C(=O)(헤테로아릴), C3-6시클로알킬, C3-6헤테로시클로알킬, 페닐, 5원 헤테로아릴, 또는 6원 헤테로아릴이고; 여기서
(1) C1-6알킬, C3-6시클로알킬, 또는 C3-6헤테로시클로알킬은 C=O, C(=O)CH3, -OH, C1-6할로알킬, 5원 헤테로아릴, 및 C(=O)OCH2-페닐로부터 독립적으로 선택된 1 내지 6개의 치환기로 임의 치환되고;
(2) 페닐, 5원 헤테로아릴, 6원 헤테로아릴, 또는 -C(=O)(헤테로아릴)은 할로겐, CD3, C1-6알킬, C1-6할로알킬, C1-6알콕시, C1-6할로알콕시, -(C1-3알킬)O(C1-3알킬), CH2OH, -CN, C2-4알케닐, C3-6시클로알킬, 및 C3-6헤테로시클로알킬로부터 독립적으로 선택된 1 내지 3개의 치환기로 임의 치환되고; 여기서
하위섹션 (2)의 C1-6알킬, C1-6할로알킬, 및 C3-6시클로알킬은 할로겐, C1-6알킬, C1-6알콕시, OH, C3-6시클로알킬, N(CH3)C(=O)CH3, 또는 페닐로부터 독립적으로 선택된 1 내지 6개의 치환기로 임의 치환되고, 여기서 페닐은 할로겐, C1-6알킬, 및 C1-6알콕시로부터 독립적으로 선택된 1 내지 6개의 치환기로 임의 치환되고; 여기서 C1-6알킬 중 하나 이상은 이들의 개재 원자와 함께 취해져 C3-6시클로알킬을 형성하고;
하위섹션 (2)의 C3-6헤테로시클로알킬은 할로겐, C1-3알킬, 및 -C(=O)O(C1-6알킬)로부터 선택된 1 내지 3개의 치환기로 임의 치환되고;
하위섹션 (1)의 5원 헤테로아릴은 할로겐 및 C3-6시클로알킬로부터 선택된 1 내지 3개의 치환기로 임의 치환되고;
R5는 C1-6알킬, C2-6알케닐, C2-6알키닐, C1-6할로알킬, C3-6시클로알킬, C3-6시클로알케닐, C5-8스피로알킬, C5-8트리시클로알킬, 시클로펜트-1-엔-1-일, 시클로헥스-1-엔-1-일, 페닐, 5원 헤테로아릴, 6원 헤테로아릴, 아지리딘-1-일, 스피로[3.3]헵탄-6-일, 피롤리딘-1-일, 3-아자바이시클로[3.1.0]헥산-3-일, 모르폴린-4-일, 피페리딘-1-일, 벤조티아졸-5-일, 디히드로-인덴-5-일, 바이시클로[4.2.0]옥타-1(6),2,4-트리엔-3-일, 또는 -OCH2-(C3-6시클로알킬)이고,
여기서 C1-6알킬, C2-6알케닐, C2-6알키닐, C3-6시클로알킬, C3-6시클로알케닐, C5-8스피로알킬, C5-8트리시클로알킬, 스피로[3.3]헵탄-6-일, 시클로펜트-1-엔-1-일, 시클로헥스-1-엔-1-일, 페닐, 5원 헤테로아릴, 및 6원 헤테로아릴은 중수소, 할로겐, C1-3알킬, C1-3할로알킬, C1-3알콕시, C1-3할로알콕시, 및 C3-6시클로알킬로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 치환기로 추가로 임의 치환되고;
여기서 아지리딘-1-일, 피롤리딘-1-일, 3-아자바이시클로[3.1.0]헥산-3-일, 모르폴린-4-일, 피페리딘-1-일, 2-벤조티아졸-5-일, 및 -OCH2-(C3-6시클로알킬)은 할로겐, C1-3알킬, C1-3할로알킬, C1-3알콕시, 5원 헤테로아릴, 및 C1-3할로알콕시로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 치환기로 추가로 임의 치환되고;
여기서 5원 헤테로아릴은 C3-6시클로알킬로 추가로 치환되고,
여기서 C1-3알킬은 할로겐 또는 -CN으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 치환기로 추가로 임의 치환되고;
여기서 C1-6알킬, C2-6알케닐, C2-6알키닐 및 C1-6할로알킬 중 하나 이상은 이들의 개재 원자와 함께 취해져 할로겐, C1-3알킬로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 치환기로 임의 치환된 C3-6시클로알킬을 형성하고;
R6은 H, 할로겐, CD3, C1-3알킬, CH2CN, C(=O)NH2, C(=O)NC(CH3)2, C2-4알콕시, C1-6할로알킬, C1-6할로알콕시, 또는 C3-6시클로알킬이고;
R7은 H, 할로겐, CD3, C1-3알킬, C1-6할로알킬, 또는 C3-6시클로알킬이고;
R8은 H 또는 C1-3알킬이고;
R9는 H 또는 C1-5알킬이고;
n은 0, 1 또는 2이고; X1이 N이고 n이 0인 경우, X2는 NH 또는 O가 아니다.
식 I의 화합물
I
또는 이의 호변이성질체, 또는 상기 화합물 또는 상기 호변이성질체의 약학적으로 허용 가능한 염이 본원에서 추가로 제공되며, 여기서
고리 A는 고리 A가 융합되는 6원 고리 시스템과 함께 다음 식의 이환 고리 시스템을 형성하고
, , 또는; 여기서
X1은 CH 또는 N이고;
X2는 CH2, CHF, CF2, O, 또는 NH이고;
X3은 CH 또는 N이고;
X4는 CH 또는 N이고;
X5는 CH 또는 N이고;
X6은 CH 또는 N이고;
R1은 H 또는 C1-3알킬이고;
R2는 H 또는 C1-3알킬이고;
R3은 H 또는 C1-3알킬이고;
R4는 C1-6알킬, C1-6할로알킬, 디C1-3알킬아미노, -C(=O)O(C1-6알킬), C3-6시클로알킬, C3-6헤테로시클로알킬, 페닐, 5원 헤테로아릴, 또는 6원 헤테로아릴이고; 여기서
(1) C3-6시클로알킬 또는 C3-6헤테로시클로알킬은 C=O로 임의 치환되고;
(2) 페닐, 5원 헤테로아릴, 또는 6원 헤테로아릴기는 할로겐, C1-6알킬, C1-6할로알킬, C1-6알콕시, C1-6할로알콕시, -(C1-3알킬)O(C1-3알킬), -CN, C2-4알케닐, C3-6시클로알킬, 및 C3-6헤테로시클로알킬로부터 독립적으로 선택된 1 내지 3개의 치환기로 임의 치환되고; 여기서
하위섹션 (2)의 C1-6알킬 및 C1-6할로알킬은 OH로 임의 치환되고; 여기서
하위섹션 (2)의 C3-6헤테로시클로알킬은 할로겐, C1-3알킬, 및 -C(=O)O(C1-6알킬)로부터 선택된 1 내지 3개의 치환기로 임의 치환되고;
R5는 C1-6알킬, C1-6할로알킬, C3-6시클로알킬, C5-8스피로알킬, C5-8트리시클로알킬, 시클로펜트-1-엔-1-일, 시클로헥스-1-엔-1-일, 페닐, 6원 헤테로아릴, 아지리딘-1-일, 피롤리딘-1-일, 3-아자바이시클로[3.1.0]헥산-3-일, 4-메틸벤조[1,3]디옥솔릴, 5-메틸벤조[1,3]디옥솔릴, 피페리딘-1-일, 또는 -OCH2-(C3-6시클로알킬)이고,
여기서 C1-6알킬, C3-6시클로알킬, C5-8스피로알킬, C5-8트리시클로알킬, 시클로펜트-1-엔-1-일, 시클로헥스-1-엔-1-일, 페닐, 및 6원 헤테로아릴은 할로겐, C1-3알킬, 및 C1-3할로알킬로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 치환기로 추가로 임의 치환되고,
여기서 아지리딘-1-일, 피롤리딘-1-일, 3-아자바이시클로[3.1.0]헥산-3-일, 피페리딘-1-일, 및 -OCH2-(C3-6시클로알킬)은 할로겐, C1-3알킬, C1-3할로알킬, C1-3알콕시, 및 C1-3할로알콕시로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 치환기로 추가로 치환되고;
R6은 H, 할로겐, C1-3알킬, C1-6할로알콕시, -(C1-3알킬)O(C1-3알킬)(C3-6시클로알킬)이고;
R7은 H, 할로겐, 또는 C1-3알킬이고;
R8은 H 또는 C1-3알킬이고;
R9는 H 또는 C1-5알킬이고;
n은 0 또는 1이고; X1이 N이고 n이 0인 경우, X2는 NH 또는 O가 아니다.
일부 실시예에서, 화합물은 다음이 아니다:
4-(3-플루오로-1-아제티디닐)-6,7-디메틸-2-((2S)-2-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-4-모르폴리닐)프테리딘;
4-(3,3-디플루오로-1-피페리디닐)-6,7-디메틸-2-((2S)-2-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-4-모르폴리닐)프테리딘;
2-((2S)-2-(1-시클로프로필-1H-피라졸-4-일)-4-모르폴리닐)-7-메틸-4-(3-(트리플루오로메틸)바이시클로[1.1.1]펜탄-1-일)피리도[2,3-d]피리미딘;
6,7-디메틸-2-((2S)-2-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-4-모르폴리닐)-4-((시스-3-(트리플루오로메틸)시클로부틸)메톡시)피리도[2,3-d]피리미딘; 또는
2-메틸-6-((2S)-2-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-4-모르폴리닐)-4-(시스-3-(트리플루오로메틸)시클로부틸)-2,3-디히드로-1H-피롤로[3,4-c]피리딘-1-온.
일반적으로 위에서 정의된 바와 같이, 고리 B는 또는 이다. 일부 실시예에서, 고리 B는 이다.
식 I"'의 화합물
I"'
또는 이의 호변이성질체, 또는 상기 화합물 또는 상기 호변이성질체의 약학적으로 허용 가능한 염이 본원에서 추가로 제공되며, 여기서
고리 A는 고리 A가 융합되는 6원 고리 시스템과 함께 다음 식의 이환 고리 시스템을 형성하고
, , 또는; 여기서
X1은 CH, C(OH), C(OCH3), CF, 또는 N이고;
X2는 CH2, CHF, CF2, (C=O), O, S(O)2, 또는 NH이고;
X3은 CH 또는 N이고;
X4는 CH 또는 N이고;
X5는 CH 또는 N이고;
X6은 CH 또는 N이고;
X7은 CH 또는 N이고;
R1은 H, C1-3알킬, 또는 CH2OH이고;
R2는 H, C1-3알킬, C1-6할로알킬, 또는 C3-6시클로알킬이고;
R3은 H 또는 C1-3알킬이고;
또는 R1 및 R3은 이들의 개재 원자와 함께 취해져 3-8원 포화 또는 부분 불포화 단환 헤테로환 고리로부터 선택된 환형 기를 형성하고;
R4는 C1-6알킬, C1-6할로알킬, 디C1-3알킬아미노, -C(=O)O(C1-6알킬), -C(=O)(헤테로아릴), C3-6시클로알킬, C3-6헤테로시클로알킬, 페닐, 5원 헤테로아릴, 또는 6원 헤테로아릴이고; 여기서
(1) C1-6알킬, C3-6시클로알킬, 또는 C3-6헤테로시클로알킬은 C=O, C(=O)CH3, -OH, C1-6할로알킬, 5원 헤테로아릴, 및 C(=O)OCH2-페닐로부터 독립적으로 선택된 1 내지 6개의 치환기로 임의 치환되고;
(2) 페닐, 5원 헤테로아릴, 6원 헤테로아릴, 또는 -C(=O)(헤테로아릴)은 할로겐, CD3, C1-6알킬, C1-6할로알킬, C1-6알콕시, C1-6할로알콕시, -(C1-3알킬)O(C1-3알킬), CH2OH, -CN, C2-4알케닐, C3-6시클로알킬, 및 C3-6헤테로시클로알킬로부터 독립적으로 선택된 1 내지 3개의 치환기로 임의 치환되고; 여기서
하위섹션 (2)의 C1-6알킬, C1-6할로알킬, 및 C3-6시클로알킬은 할로겐, C1-6알킬, C1-6알콕시, OH, C3-6시클로알킬, N(CH3)C(=O)CH3, 또는 페닐로부터 독립적으로 선택된 1 내지 6개의 치환기로 임의 치환되고, 여기서 페닐은 할로겐, C1-6알킬, 및 C1-6알콕시로부터 독립적으로 선택된 1 내지 6개의 치환기로 임의 치환되고; 여기서 C1-6알킬 중 하나 이상은 이들의 개재 원자와 함께 취해져 C3-6시클로알킬을 형성하고;
하위섹션 (2)의 C3-6헤테로시클로알킬은 할로겐, C1-3알킬, 및 -C(=O)O(C1-6알킬)로부터 선택된 1 내지 3개의 치환기로 임의 치환되고;
하위섹션 (1)의 5원 헤테로아릴은 할로겐 및 C3-6시클로알킬로부터 선택된 1 내지 3개의 치환기로 임의 치환되고;
R5는 C1-6알킬, C2-6알케닐, C2-6알키닐, C1-6할로알킬, C3-6시클로알킬, C3-6시클로알케닐, C5-8스피로알킬, C5-8트리시클로알킬, 시클로펜트-1-엔-1-일, 시클로헥스-1-엔-1-일, 페닐, 5원 헤테로아릴, 6원 헤테로아릴, 아지리딘-1-일, 스피로[3.3]헵탄-6-일, 피롤리딘-1-일, 3-아자바이시클로[3.1.0]헥산-3-일, 모르폴린-4-일, 피페리딘-1-일, 벤조티아졸-5-일, 디히드로-인덴-5-일, 바이시클로[4.2.0]옥타-1(6),2,4-트리엔-3-일, 또는 -OCH2-(C3-6시클로알킬)이고,
여기서 C1-6알킬, C2-6알케닐, C2-6알키닐, C3-6시클로알킬, C3-6시클로알케닐, C5-8스피로알킬, C5-8트리시클로알킬, 스피로[3.3]헵탄-6-일, 시클로펜트-1-엔-1-일, 시클로헥스-1-엔-1-일, 페닐, 5원 헤테로아릴, 및 6원 헤테로아릴은 중수소, 할로겐, C1-3알킬, C1-3할로알킬, C1-3알콕시, C1-3할로알콕시, 및 C3-6시클로알킬로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 치환기로 추가로 임의 치환되고;
여기서 아지리딘-1-일, 피롤리딘-1-일, 3-아자바이시클로[3.1.0]헥산-3-일, 모르폴린-4-일, 피페리딘-1-일, 2-벤조티아졸-5-일, 및 -OCH2-(C3-6시클로알킬)은 할로겐, C1-3알킬, C1-3할로알킬, C1-3알콕시, 5원 헤테로아릴, 및 C1-3할로알콕시로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 치환기로 추가로 임의 치환되고;
여기서 5원 헤테로아릴은 C3-6시클로알킬로 추가로 치환되고,
여기서 C1-3알킬은 할로겐 또는 -CN으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 치환기로 추가로 임의 치환되고;
여기서 C1-6알킬, C2-6알케닐, C2-6알키닐 및 C1-6할로알킬 중 하나 이상은 이들의 개재 원자와 함께 취해져 할로겐, C1-3알킬로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 치환기로 임의 치환된 C3-6시클로알킬을 형성하고;
R6은 H, 할로겐, CD3, C1-3알킬, CH2CN, C(=O)NH2, C(=O)NC(CH3)2, C2-4알콕시, C1-6할로알킬, C1-6할로알콕시, 또는 C3-6시클로알킬이고;
R7은 H, 할로겐, CD3, C1-3알킬, C1-6할로알킬, 또는 C3-6시클로알킬이고;
R8은 H 또는 C1-3알킬이고;
R9는 H 또는 C1-5알킬이고;
n은 0, 1 또는 2이고; X1이 N이고 n이 0인 경우, X2는 NH 또는 O가 아니다.
일부 실시예에서, 화합물은 식 II의 화합물
II
또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이고, 여기서 각각의 변수는 위에서 정의된 것과 같고 본원의 실시예에서 단독으로 및 조합으로 기술된 것과 같다.
일부 실시예에서, 화합물은 식 IIA의 화합물
IIA
또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이고, 여기서 각각의 변수는 위에서 정의된 것과 같고 본원의 실시예에서 단독으로 및 조합으로 기술된 것과 같다.
일부 실시예에서, 화합물은 식 IIB의 화합물
IIB
또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이고, 여기서 각각의 변수는 위에서 정의된 것과 같고 본원의 실시예에서 단독으로 및 조합으로 기술된 것과 같다.
일부 실시예에서, 화합물은 식 IIC의 화합물
IIC
또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이고, 여기서 각각의 변수는 위에서 정의된 것과 같고 본원의 실시예에서 단독으로 및 조합으로 기술된 것과 같다.
일부 실시예에서, 화합물은 식 IID의 화합물
IID
또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이고, 여기서 각각의 변수는 위에서 정의된 것과 같고 본원의 실시예에서 단독으로 및 조합으로 기술된 것과 같다.
일부 실시예에서, 화합물은 식 IIE의 화합물
IIE
또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이고, 여기서 각각의 변수는 위에서 정의된 것과 같고 본원의 실시예에서 단독으로 및 조합으로 기술된 것과 같다.
일부 실시예에서, 화합물은 식 IIF의 화합물
IIF
또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이고, 여기서 각각의 변수는 위에서 정의된 것과 같고 본원의 실시예에서 단독으로 및 조합으로 기술된 것과 같다.
일부 실시예에서, 화합물은 식 IIG의 화합물
IIG
또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이고, 여기서 각각의 변수는 위에서 정의된 것과 같고 본원의 실시예에서 단독으로 및 조합으로 기술된 것과 같다.
일부 실시예에서, 화합물은 식 IIH의 화합물
IIH
또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이고, 여기서 각각의 변수는 위에서 정의된 것과 같고 본원의 실시예에서 단독으로 및 조합으로 기술된 것과 같다.
일부 실시예에서, 화합물은 식 IIJ의 화합물
IIJ
또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이고, 여기서 각각의 변수는 위에서 정의된 것과 같고 본원의 실시예에서 단독으로 및 조합으로 기술된 것과 같다.
일부 실시예에서, 화합물은 식 IIK의 화합물
IIK
또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이고, 여기서 각각의 변수는 위에서 정의된 것과 같고 본원의 실시예에서 단독으로 및 조합으로 기술된 것과 같다.
일부 실시예에서, 화합물은 식 IIL의 화합물
IIL
또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이고, 여기서 각각의 변수는 위에서 정의된 것과 같고 본원의 실시예에서 단독으로 및 조합으로 기술된 것과 같다.
일부 실시예에서, 화합물은 식 IIM의 화합물
IIM
또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이고, 여기서 각각의 변수는 위에서 정의된 것과 같고 본원의 실시예에서 단독으로 및 조합으로 기술된 것과 같다.
일부 실시예에서, 화합물은 식 IIN의 화합물
IIN
또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이고, 여기서 각각의 변수는 위에서 정의된 것과 같고 본원의 실시예에서 단독으로 및 조합으로 기술된 것과 같다.
일부 실시예에서, 화합물은 식 IIO의 화합물
IIO
또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이고, 여기서 각각의 변수는 위에서 정의된 것과 같고 본원의 실시예에서 단독으로 및 조합으로 기술된 것과 같다.
일부 실시예에서, 화합물은 식 IIP의 화합물
IIP
또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이고, 여기서 각각의 변수는 위에서 정의된 것과 같고 본원의 실시예에서 단독으로 및 조합으로 기술된 것과 같다.
일부 실시예에서, 화합물은 식 IIQ의 화합물
IIQ
또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이고, 여기서 각각의 변수는 위에서 정의된 것과 같고 본원의 실시예에서 단독으로 및 조합으로 기술된 것과 같다.
일부 실시예에서, 화합물은 식 IIR의 화합물
IIR
또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이고, 여기서 각각의 변수는 위에서 정의된 것과 같고 본원의 실시예에서 단독으로 및 조합으로 기술된 것과 같다.
일부 실시예에서, 화합물은 식 IIS의 화합물
IIS
또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이고, 여기서 각각의 변수는 위에서 정의된 것과 같고 본원의 실시예에서 단독으로 및 조합으로 기술된 것과 같다.
일부 실시예에서, 화합물은 식 IIT의 화합물
IIT
또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이고, 여기서 각각의 변수는 위에서 정의된 것과 같고 본원의 실시예에서 단독으로 및 조합으로 기술된 것과 같다.
일부 실시예에서, 화합물은 식 IIU의 화합물
IIU
또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이고, 여기서 각각의 변수는 위에서 정의된 것과 같고 본원의 실시예에서 단독으로 및 조합으로 기술된 것과 같다.
일반적으로 위에서 정의된 바와 같이, X1은 CH 또는 N이다. 일부 실시예에서, X1은 CH이다. 일부 실시예에서, X1은 N이다. 일부 실시예에서, X1은 아래 표 A에 도시된 것들로부터 선택된다.
일반적으로 위에서 정의된 바와 같이, X2는 CH2, CHF, CF2, (C=O), O, S(O)2, 또는 NH이다. 일부 실시예에서, X2는 CH2, CHF, CF2, O, 또는 NH이다. 일부 실시예에서, X2는 CH2, CF2, 또는 O이다. 일부 실시예에서, X2는 O이다. 일부 실시예에서, X2는 (C=O) 또는 S(O)2이다. 일부 실시예에서, X2는 아래 표 A에 도시된 것들로부터 선택된다. 일부 실시예에서, X2는 아래 표 A-2에 도시된 것들로부터 선택된다.
일반적으로 위에서 정의된 바와 같이, X3은 CR18, CH 또는 N이다. 식 I에서 일반적으로 위에서 정의된 바와 같이, X3은 CH 또는 N이다. 일부 실시예에서, X3은 CH 또는 N이다. 일부 실시예에서, X3은 CH이다. 일부 실시예에서, X3은 CR18이다. 일부 실시예에서, X3은 N이다. 일부 실시예에서, X3은 아래 표 A에 도시된 것들로부터 선택된다. 일부 실시예에서, X3은 아래 표 A-2에 도시된 것들로부터 선택된다.
일반적으로 위에서 정의된 바와 같이, X4는 CR19, CH 또는 N이다. 식 I에서 일반적으로 위에서 정의된 바와 같이, X4는 CH 또는 N이다. 일부 실시예에서, X4는 CH 또는 N이다. 일부 실시예에서, X4는 CH이다. 일부 실시예에서, X4는 CR19이다. 일부 실시예에서, X4는 N이다. 일부 실시예에서, X4는 아래 표 A에 도시된 것들로부터 선택된다. 일부 실시예에서, X4는 아래 표 A-2에 도시된 것들로부터 선택된다.
일반적으로 위에서 정의된 바와 같이, X5는 CR20, CH 또는 N이다. 식 I에서 일반적으로 위에서 정의된 바와 같이, X5는 CH 또는 N이다. 일부 실시예에서, X5는 CH 또는 N이다. 일부 실시예에서, X5는 CH이다. 일부 실시예에서, X5는 CR20이다. 일부 실시예에서, X5는 N이다. 일부 실시예에서, X5는 아래 표 A에 도시된 것들로부터 선택된다. 일부 실시예에서, X5는 아래 표 A-2에 도시된 것들로부터 선택된다.
일반적으로 위에서 정의된 바와 같이, X6은 CR21, CH 또는 N이다. 일반적으로 식 I에서 위에서 정의된 바와 같이, X6은 CH 또는 N이다. 일부 실시예에서, X6은 CH 또는 N이다. 일부 실시예에서, X6은 CH이다. 일부 실시예에서, X6은 CR21이다. 일부 실시예에서, X6은 N이다. 일부 실시예에서, X6은 아래 표 A에 도시된 것들로부터 선택된다. 일부 실시예에서, X6은 아래 표 A-2에 도시된 것들로부터 선택된다.
일반적으로 위에서 정의된 바와 같이, X7은 CH 또는 N이다. 일부 실시예에서, X7은 N이다. 실시예에서, X7은 CH이다. 일부 실시예에서, X6는 아래 표 A에 도시된 것들로부터 선택된다. 일부 실시예에서, X6은 아래 표 A-2에 도시된 것들로부터 선택된다.
일반적으로 위에서 정의된 바와 같이, R18, R19, R20, 및 R21은 각각 독립적으로 수소, 임의 치환된 C1-6 지방족기, 할로겐, -OR, -CN, -NR2, -C(=O)R, -C(=O)OR, -C(=O)NR2, -SO2R, -SO2NR2, C1-6할로알킬, 또는 C1-6할로알콕시이다.
일부 실시예에서, R18은 수소이다. 일부 실시예에서, R18은 임의 치환된 C1-6 지방족기이다. 일부 실시예에서, R18은 할로겐이다. 일부 실시예에서, R18은 -OR이다. 일부 실시예에서, R18은 -CN이다. 일부 실시예에서, R18은 -NR2이다. 일부 실시예에서, R18은 -C(=O)R이다. 일부 실시예에서, R18은 -C(=O)OR이다. 일부 실시예에서, R18은 -C(=O)NR2이다. 일부 실시예에서, R18은 -SO2R이다. 일부 실시예에서, R18은 -SO2NR2이다. 일부 실시예에서, R18은 C1-6할로알킬이다. 일부 실시예에서, R18은 C1-6할로알콕시이다. 일부 실시예에서, R18은 -CD3이다. 일부 실시예에서, R18은 아래 표 A에 도시된 것들로부터 선택된다. 일부 실시예에서, R18은 아래 표 A-2에 도시된 것들로부터 선택된다.
일부 실시예에서, R19는 수소이다. 일부 실시예에서, R19는 임의 치환된 C1-6 지방족기이다. 일부 실시예에서, R19는 할로겐이다. 일부 실시예에서, R19는 -OR이다. 일부 실시예에서, R19는 -CN이다. 일부 실시예에서, R19는 -NR2이다. 일부 실시예에서, R19는 -C(=O)R이다. 일부 실시예에서, R19는 -C(=O)OR이다. 일부 실시예에서, R19는 -C(=O)NR2이다. 일부 실시예에서, R19는 -SO2R이다. 일부 실시예에서, R19는 -SO2NR2이다. 일부 실시예에서, R19는 C1-6할로알킬이다. 일부 실시예에서, R19는 C1-6할로알콕시이다. 일부 실시예에서, R19는 -CD3이다. 일부 실시예에서, R19는 아래 표 A에 도시된 것들로부터 선택된다. 일부 실시예에서, R19는 아래 표 A-2에 도시된 것들로부터 선택된다.
일부 실시예에서, R20은 수소이다. 일부 실시예에서, R20은 임의 치환된 C1-6 지방족기이다. 일부 실시예에서, R20은 할로겐이다. 일부 실시예에서, R20은 -OR이다. 일부 실시예에서, R20은 -CN이다. 일부 실시예에서, R20은 -NR2이다. 일부 실시예에서, R20은 -C(=O)R이다. 일부 실시예에서, R20은 -C(=O)OR이다. 일부 실시예에서, R20은 -C(=O)NR2이다. 일부 실시예에서, R20은 -SO2R이다. 일부 실시예에서, R20은 -SO2NR2이다. 일부 실시예에서, R20은 C1-6할로알킬이다. 일부 실시예에서, R20은 C1-6할로알콕시이다. 일부 실시예에서, R20은 -CD3이다. 일부 실시예에서, R20은 아래 표 A에 도시된 것들로부터 선택된다. 일부 실시예에서, R20은 아래 표 A-2에 도시된 것들로부터 선택된다.
일부 실시예에서, R21은 수소이다. 일부 실시예에서, R21은 임의 치환된 C1-6 지방족기이다. 일부 실시예에서, R21은 할로겐이다. 일부 실시예에서, R21은 -OR이다. 일부 실시예에서, R21은 -CN이다. 일부 실시예에서, R21은 -NR2이다. 일부 실시예에서, R21은 -C(=O)R이다. 일부 실시예에서, R21은 -C(=O)OR이다. 일부 실시예에서, R21은 -C(=O)NR2이다. 일부 실시예에서, R21은 -SO2R이다. 일부 실시예에서, R21은 -SO2NR2이다. 일부 실시예에서, R21은 C1-6할로알킬이다. 일부 실시예에서, R21은 C1-6할로알콕시이다. 일부 실시예에서, R21은 -CD3이다. 일부 실시예에서, R21은 아래 표 A에 도시된 것들로부터 선택된다. 일부 실시예에서, R21은 아래 표 A-2에 도시된 것들로부터 선택된다.
일반적으로 위에서 정의된 바와 같이, n은 0 또는 1이고; X1이 N이고 n이 0인 경우, X2는 NH 또는 O가 아니다. 일부 실시예에서, n은 0이다. 일부 실시예에서, n은 1이다. 일부 실시예에서, X1은 N이고, n은 0이고, X2는 NH 또는 O가 아니다.
일반적으로 위에서 정의된 바와 같이, R1은 H 또는 C1-3 알킬이다. 일부 실시예에서, R1은 H 또는 메틸이다. 일부 실시예에서, R1은 H이다. 일부 실시예에서, R1은 아래 표 A에 도시된 것들로부터 선택된다. 일부 실시예에서, R1은 아래 표 A-2에 도시된 것들로부터 선택된다.
일부 실시예에서, 화합물은 식 IIIa의 화합물:
IIIa, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이며, 여기서 각각의 변수는 위에서 정의된 것과 같고 본원의 실시예에서 단독으로 및 조합으로 기술된 것과 같다.
일부 실시예에서, 화합물은 식 IIIb의 화합물:
IIIb, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이며, 여기서 각각의 변수는 위에서 정의된 것과 같고 본원의 실시예에서 단독으로 및 조합으로 기술된 것과 같다.
일부 실시예에서, 화합물은 식 IIIc의 화합물:
IIIc, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이며, 여기서 각각의 변수는 위에서 정의된 것과 같고 본원의 실시예에서 단독으로 및 조합으로 기술된 것과 같다.
일부 실시예에서, 화합물은 식 IIId의 화합물:
IIId, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이며, 여기서 각각의 변수는 위에서 정의된 것과 같고 본원의 실시예에서 단독으로 및 조합으로 기술된 것과 같다.
일부 실시예에서, 화합물은 식 IIIe의 화합물:
IIIe, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이며, 여기서 각각의 변수는 위에서 정의된 것과 같고 본원의 실시예에서 단독으로 및 조합으로 기술된 것과 같다.
일부 실시예에서, 화합물은 식 IIIf의 화합물:
IIIf, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이며, 여기서 각각의 변수는 위에서 정의된 것과 같고 본원의 실시예에서 단독으로 및 조합으로 기술된 것과 같다.
일부 실시예에서, 화합물은 식 IVa의 화합물:
IVa, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이며, 여기서 각각의 변수는 위에서 정의된 것과 같고 본원의 실시예에서 단독으로 및 조합으로 기술된 것과 같다.
일부 실시예에서, 화합물은 식 IVb의 화합물:
IVb, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이며, 여기서 각각의 변수는 위에서 정의된 것과 같고 본원의 실시예에서 단독으로 및 조합으로 기술된 것과 같다.
일부 실시예에서, 화합물은 식 IVc의 화합물:
IVc, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이며, 여기서 각각의 변수는 위에서 정의된 것과 같고 본원의 실시예에서 단독으로 및 조합으로 기술된 것과 같다.
일부 실시예에서, 화합물은 식 IVd의 화합물:
IVd, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이며, 여기서 각각의 변수는 위에서 정의된 것과 같고 본원의 실시예에서 단독으로 및 조합으로 기술된 것과 같다.
일부 실시예에서, 화합물은 식 Va의 화합물:
Va, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이며, 여기서 각각의 변수는 위에서 정의된 것과 같고 본원의 실시예에서 단독으로 및 조합으로 기술된 것과 같다.
일부 실시예에서, 화합물은 식 Vb의 화합물:
Vb, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이며, 여기서 각각의 변수는 위에서 정의된 것과 같고 본원의 실시예에서 단독으로 및 조합으로 기술된 것과 같다.
일부 실시예에서, 화합물은 식 Vc의 화합물:
Vc, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이며, 여기서 각각의 변수는 위에서 정의된 것과 같고 본원의 실시예에서 단독으로 및 조합으로 기술된 것과 같다.
일부 실시예에서, 화합물은 식 Vd의 화합물:
Vd, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이며, 여기서 각각의 변수는 위에서 정의된 것과 같고 본원의 실시예에서 단독으로 및 조합으로 기술된 것과 같다.
일부 실시예에서, 화합물은 식 VIa의 화합물:
VIa, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이며, 여기서 각각의 변수는 위에서 정의된 것과 같고 본원의 실시예에서 단독으로 및 조합으로 기술된 것과 같다.
일부 실시예에서, 화합물은 식 VIb의 화합물:
VIb, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이며, 여기서 각각의 변수는 위에서 정의된 것과 같고 본원의 실시예에서 단독으로 및 조합으로 기술된 것과 같다.
일부 실시예에서, 화합물은 식 Vic의 화합물:
VIc, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이며, 여기서 각각의 변수는 위에서 정의된 것과 같고 본원의 실시예에서 단독으로 및 조합으로 기술된 것과 같다.
일부 실시예에서, 화합물은 식 VId의 화합물:
VId, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이며, 여기서 각각의 변수는 위에서 정의된 것과 같고 본원의 실시예에서 단독으로 및 조합으로 기술된 것과 같다.
일부 실시예에서, 화합물은 식 VIIa의 화합물:
VIIa, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이며, 여기서 각각의 변수는 위에서 정의된 것과 같고 본원의 실시예에서 단독으로 및 조합으로 기술된 것과 같다.
일부 실시예에서, 화합물은 식 VIIb의 화합물:
VIIb, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이며, 여기서 각각의 변수는 위에서 정의된 것과 같고 본원의 실시예에서 단독으로 및 조합으로 기술된 것과 같다.
일부 실시예에서, 화합물은 식 VIIc의 화합물:
VIIc, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이며, 여기서 각각의 변수는 위에서 정의된 것과 같고 본원의 실시예에서 단독으로 및 조합으로 기술된 것과 같다.
일부 실시예에서, 화합물은 식 VIIIa의 화합물:
VIIIa, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이며, 여기서 각각의 변수는 위에서 정의된 것과 같고 본원의 실시예에서 단독으로 및 조합으로 기술된 것과 같다.
일부 실시예에서, 화합물은 식 VIIIb의 화합물:
VIIIb, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이며, 여기서 각각의 변수는 위에서 정의된 것과 같고 본원의 실시예에서 단독으로 및 조합으로 기술된 것과 같다.
일부 실시예에서, 화합물은 식 VIIIc의 화합물:
VIIIc, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이며, 여기서 각각의 변수는 위에서 정의된 것과 같고 본원의 실시예에서 단독으로 및 조합으로 기술된 것과 같다.
일부 실시예에서, 화합물은 식 VIIId의 화합물:
VIId, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이며, 여기서 각각의 변수는 위에서 정의된 것과 같고 본원의 실시예에서 단독으로 및 조합으로 기술된 것과 같다.
일부 실시예에서, 화합물은 식 IXa의 화합물:
IXa, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이며, 여기서 각각의 변수는 위에서 정의된 것과 같고 본원의 실시예에서 단독으로 및 조합으로 기술된 것과 같다.
일부 실시예에서, 화합물은 식 IXb의 화합물:
IXb, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이며, 여기서 각각의 변수는 위에서 정의된 것과 같고 본원의 실시예에서 단독으로 및 조합으로 기술된 것과 같다.
일부 실시예에서, 화합물은 식 IXc의 화합물:
IXc, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이며, 여기서 각각의 변수는 위에서 정의된 것과 같고 본원의 실시예에서 단독으로 및 조합으로 기술된 것과 같다.
일부 실시예에서, 화합물은 식 IXd의 화합물:
IXd, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이며, 여기서 각각의 변수는 위에서 정의된 것과 같고 본원의 실시예에서 단독으로 및 조합으로 기술된 것과 같다.
일부 실시예에서, 화합물은 식 Xa의 화합물:
Xa, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이며, 여기서 각각의 변수는 위에서 정의된 것과 같고 본원의 실시예에서 단독으로 및 조합으로 기술된 것과 같다.
일부 실시예에서, 화합물은 식 Xb의 화합물:
Xb, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이며, 여기서 각각의 변수는 위에서 정의된 것과 같고 본원의 실시예에서 단독으로 및 조합으로 기술된 것과 같다.
일부 실시예에서, 화합물은 식 XIa의 화합물:
XIa, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이며, 여기서 각각의 변수는 위에서 정의된 것과 같고 본원의 실시예에서 단독으로 및 조합으로 기술된 것과 같다.
일부 실시예에서, 화합물은 식 XIb의 화합물:
XIb, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이며, 여기서 각각의 변수는 위에서 정의된 것과 같고 본원의 실시예에서 단독으로 및 조합으로 기술된 것과 같다.
일부 실시예에서, 화합물은 식 XIIa의 화합물:
XIIa, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이며, 여기서 각각의 변수는 위에서 정의된 것과 같고 본원의 실시예에서 단독으로 및 조합으로 기술된 것과 같다.
일부 실시예에서, 화합물은 식 XIIb의 화합물:
XIIb, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이며, 여기서 각각의 변수는 위에서 정의된 것과 같고 본원의 실시예에서 단독으로 및 조합으로 기술된 것과 같다.
일반적으로 위에서 정의된 바와 같이, R2는 H 또는 C1-3 알킬이다. 일부 실시예에서, R2는 H 또는 메틸이다. 일부 실시예에서, R2는 H이다. 일부 실시예에서, R2는 메틸이다. 일부 실시예에서, R2는 아래 표 A에 도시된 것들로부터 선택된다.
일반적으로 위에서 정의된 바와 같이, R3은 H 또는 C1-3 알킬이다. 일부 실시예에서, R3은 H 또는 메틸이다. 일부 실시예에서, R3은 H이다. 일부 실시예에서, R3은 아래 표 A에 도시된 것들로부터 선택된다.
일반적으로 위에서 정의된 바와 같이, R4는 C1-6알킬, C1-6할로알킬, 디C1-3알킬아미노, -C(=O)O(C1-6알킬), C3-6시클로알킬, C3-6헤테로시클로알킬, 페닐, 5원 헤테로아릴, 또는 6원 헤테로아릴이고; 여기서
(1) C3-6시클로알킬 또는 C3-6헤테로시클로알킬은 C=O로 임의 치환되고;
(2) 페닐, 5원 헤테로아릴, 또는 6원 헤테로아릴기는 할로겐, C1-6알킬, C1-6할로알킬, C1-6알콕시, C1-6할로알콕시, -(C1-3알킬)O(C1-3알킬), -CN, C2-4알케닐, C3-6시클로알킬, 및 C3-6헤테로시클로알킬로부터 독립적으로 선택된 1 내지 3개의 치환기로 임의 치환되고; 여기서
하위섹션 (2)의 C1-6알킬 및 C1-6할로알킬은 OH로 임의 치환되고; 여기서
하위섹션 (2)의 C3-6헤테로시클로알킬은 할로겐, C1-3알킬, 및 -C(=O)O(C1-6알킬)로부터 선택된 1 내지 3개의 치환기로 임의 치환된다.
일부 실시예에서, R4는 C1-6알킬, C3-6헤테로시클로알킬, 5원 헤테로아릴, 또는 6원 헤테로아릴이고; 여기서 5원 헤테로아릴 또는 6원 헤테로아릴기는 C1-6알킬, C1-6알콕시, C3-6시클로알킬, 및 C3-6헤테로시클로알킬로부터 독립적으로 선택된 1 내지 3개의 치환기로 임의 치환된다. 일부 실시예에서, R4는 5원 헤테로아릴 또는 6원 헤테로아릴이고; 여기서 5원 헤테로아릴 또는 6원 헤테로아릴기는 C1-6알킬, C1-6알콕시, 및 C3-6시클로알킬로부터 독립적으로 선택된 1 내지 3개의 치환기로 임의 치환된다. 일부 실시예에서, R4는 5원 헤테로아릴 또는 6원 헤테로아릴이고; 여기서 5원 헤테로아릴 또는 6원 헤테로아릴기는 C1-6알킬 및 C3-6시클로알킬로부터 독립적으로 선택된 1 내지 3개의 치환기로 임의 치환된다. 일부 실시예에서, R4는 C1-6알킬 및 C3-6시클로알킬로부터 독립적으로 선택된 1 내지 3개의 치환기로 임의 치환된 5원 헤테로아릴이다. 일부 실시예에서, R4는 C1-6알킬 및 C3-6 시클로알킬로부터 독립적으로 선택된 1 내지 3개의 치환기로 임의 치환된 6원 헤테로아릴이다.
일부 실시예에서, R4는 5원 헤테로아릴 또는 6원 헤테로아릴이고; 여기서 5원 헤테로아릴 또는 6원 헤테로아릴기는 C3-6시클로알킬로 치환되고; 여기서 C3-6시클로알킬은 할로겐, C1-3알킬, 및 -C(=O)O(C1-6알킬)로부터 선택된 1 내지 3개의 치환기로 임의 치환된다. 일부 실시예에서, R4는 C3-6시클로알킬로 치환된 5원 헤테로아릴이고; 여기서 C3-6시클로알킬은 할로겐, C1-3알킬, 및 -C(=O)O(C1-6알킬)로부터 선택된 1 내지 3개의 치환기로 임의 치환된다. 일부 실시예에서, R4는 C3-6시클로알킬로 치환된 6원 헤테로아릴이고; 여기서 C3-6시클로알킬은 할로겐, C1-3알킬, 및 -C(=O)O(C1-6알킬)로부터 선택된 1 내지 3개의 치환기로 임의 치환된다. 일부 실시예에서, R4는 5원 헤테로아릴 또는 6원 헤테로아릴이고; 여기서 5원 헤테로아릴 또는 6원 헤테로아릴기는 C1-6할로알킬로 치환된다. 일부 실시예에서, R4는 C1-6할로알킬로 치환된 5원 헤테로아릴이다. 일부 실시예에서, R4는 C1-6할로알킬로 치환된 6원 헤테로아릴이다. 일부 실시예에서, R4는 5원 헤테로아릴 또는 6원 헤테로아릴이고; 여기서 5원 헤테로아릴 또는 6원 헤테로아릴기는 C1-6알콕시로 치환된다. 일부 실시예에서, R4는 C1-6알콕시로 치환된 5원 헤테로아릴이다. 일부 실시예에서, R4는 C1-6알콕시로 치환된 6원 헤테로아릴이다.
일부 실시예에서, R4는 할로겐, C1-6알킬, C1-6할로알킬, C1-6알콕시, C1-6할로알콕시, -(C1-3알킬)O(C1-3알킬), -CN, C2-4알케닐, C3-6시클로알킬, 및 C3-6헤테로시클로알킬로부터 독립적으로 선택된 1 내지 3개의 치환기로 임의 치환된 피리디닐이고; 여기서 하위섹션 (2)의 C1-6알킬 및 C1-6할로알킬은 OH로 임의 치환되고; 여기서 하위섹션 (2)의 C3-6헤테로시클로알킬은 할로겐, C1-3알킬, 및 -C(=O)O(C1-6알킬)로부터 선택된 1 내지 3개의 치환기로 임의 치환된다.
일부 실시예에서, R4는 할로겐, C1-6알킬, C1-6할로알킬, C1-6알콕시, C1-6할로알콕시, -(C1-3알킬)O(C1-3알킬), -CN, C2-4알케닐, C3-6시클로알킬, 및 C3-6헤테로시클로알킬로부터 선택된 1 내지 3개의 치환기로 임의 치환된 피라졸릴이고; 여기서 하위섹션 (2)의 C1-6알킬 및 C1-6할로알킬은 OH로 임의 치환되고; 여기서 하위섹션 (2)의 C3-6헤테로시클로알킬은 할로겐, C1-3알킬, 및 -C(=O)O(C1-6알킬)로부터 선택된 1 내지 3개의 치환기로 임의 치환된다.
일부 실시예에서, R4는 할로겐, C1-6알킬, C1-6할로알킬, C1-6알콕시, C1-6할로알콕시, -(C1-3알킬)O(C1-3알킬), -CN, C2-4알케닐, C3-6시클로알킬, 및 C3-6헤테로시클로알킬로부터 선택된 1 내지 3개의 치환기로 임의 치환된 피리미디닐이고; 여기서 하위섹션 (2)의 C1-6알킬 및 C1-6할로알킬은 OH로 임의 치환되고; 여기서 하위섹션 (2)의 C3-6헤테로시클로알킬은 할로겐, C1-3알킬, 및 -C(=O)O(C1-6알킬)로부터 선택된 1 내지 3개의 치환기로 임의 치환된다.
일부 실시예에서, R4는 할로겐, C1-6알킬, C1-6할로알킬, C1-6알콕시, C1-6할로알콕시, -(C1-3알킬)O(C1-3알킬), -CN, C2-4알케닐, C3-6시클로알킬, 및 C3-6헤테로시클로알킬로부터 선택된 1 내지 3개의 치환기로 임의 치환된 피리다지닐이고; 여기서 하위섹션 (2)의 C1-6알킬 및 C1-6할로알킬은 OH로 임의 치환되고; 여기서 하위섹션 (2)의 C3-6헤테로시클로알킬은 할로겐, C1-3알킬, 및 -C(=O)O(C1-6알킬)로부터 선택된 1 내지 3개의 치환기로 임의 치환된다.
일부 실시예에서, R4는 할로겐, C1-6알킬, C1-6할로알킬, C1-6알콕시, C1-6할로알콕시, -(C1-3알킬)O(C1-3알킬), -CN, C2-4알케닐, C3-6시클로알킬, 및 C3-6헤테로시클로알킬로부터 선택된 1 내지 3개의 치환기로 임의 치환된 트리아졸릴이고; 여기서 하위섹션 (2)의 C1-6알킬 및 C1-6할로알킬은 OH로 임의 치환되고; 여기서 하위섹션 (2)의 C3-6헤테로시클로알킬은 할로겐, C1-3알킬, 및 -C(=O)O(C1-6알킬)로부터 선택된 1 내지 3개의 치환기로 임의 치환된다.
일부 실시예에서, R4는 할로겐, C1-6알킬, C1-6할로알킬, C1-6알콕시, C1-6할로알콕시, -(C1-3알킬)O(C1-3알킬), -CN, C2-4알케닐, C3-6시클로알킬, 및 C3-6헤테로시클로알킬로부터 선택된 1 내지 3개의 치환기로 임의 치환된 옥사디아졸릴이고; 여기서 하위섹션 (2)의 C1-6알킬 및 C1-6할로알킬은 OH로 임의 치환되고; 여기서 하위섹션 (2)의 C3-6헤테로시클로알킬은 할로겐, C1-3알킬, 및 -C(=O)O(C1-6알킬)로부터 선택된 1 내지 3개의 치환기로 임의 치환된다.
일부 실시예에서, R4는 메틸, 테트라히드로푸란-3-일, , , , , , , , 또는이다.
일부 실시예에서, R4는 메틸, 테트라히드로푸란-3-일, , , , , , , , 또는이다.
일부 실시예에서, R4는 메틸, 테트라히드로푸란-3-일,
또는 이다.
일부 실시예에서, R4는 , , 또는 이다.
일부 실시예에서, R4는 , 또는 이다.
일부 실시예에서, R4는 이다.
일부 실시예에서, R4는 이다.
일부 실시예에서, R4는 이다.
일부 실시예에서, R4는 이다.
일부 실시예에서, R4는 아래에 도시된 것들로부터 선택된 치환기이다:
일부 실시예에서, R4는 하나 이상의 중수소를 포함하는 C1-3알킬로 치환된다. 일부 실시예에서, R4는 -CD3, -CHD2, 및 -CH2D로부터 선택된 1 내지 3개의 치환기로 치환된다.
일부 실시예에서, R4는 아래 표 A에 도시된 것들로부터 선택된다.
일반적으로 위에서 정의된 바와 같이, R5는 임의 치환된 C1-6 지방족기, -OR, -CN, -NR2, -C(=O)R, -C(=O)OR, -C(=O)NR2, -SO2R, -SO2NR2, C1-6할로알킬, 임의 치환된 OCH2-(C3-6시클로알킬), 또는 3-8원 포화 또는 부분 불포화 단환 탄소환 고리, 6-12원 포화 또는 부분 불포화 가교 탄소환 고리, 7-12원 포화 또는 부분 불포화 이환 탄소환 고리, 페닐, 8-10원 이환 방향족 탄소환 고리, 3-8원 포화 또는 부분 불포화 단환 헤테로환 고리(질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 2개의 헤테로원자를 가짐), 6-12원 포화 또는 부분 불포화 가교 헤테로환 고리(질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 헤테로원자를 가짐), 7-12원 포화 또는 부분 불포화 이환 헤테로환 고리(질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 헤테로원자를 가짐), 5-6원 단환 헤테로방향족 고리(질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 헤테로원자를 가짐), 및 8-10원 이환 헤테로방향족 고리(질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 5개의 헤테로원자를 가짐)로부터 선택된 환형 기이고, 여기서 환형 기는 임의 치환된다.
일부 실시예에서, R5는 임의 치환된 C1-6 지방족기이다. 일부 실시예에서, R5는 -OR이다. 일부 실시예에서, R5는 -NR2이다. 일부 실시예에서, R5는 -C(=O)R이다. 일부 실시예에서, R5는 -C(=O)OR이다. 일부 실시예에서, R5는 -C(=O)NR2이다. 일부 실시예에서, R5는 -SO2R이다. 일부 실시예에서, R5는 -SO2NR2이다. 일부 실시예에서, R5는 C1-6할로알킬이다. 일부 실시예에서, R5는 임의 치환된 OCH2-(C3-6시클로알킬)이다. 일부 실시예에서, R5는 임의 치환된 3-8원 포화 또는 부분 불포화 단환 탄소환 고리이다. 일부 실시예에서, R5는 임의 치환된 5-12원 포화 또는 부분 불포화 가교 탄소환 고리이다. 일부 실시예에서, R5는 임의 치환된 7-12원 포화 또는 부분 불포화 이환 탄소환 고리이다. 일부 실시예에서, R5는 임의 치환된 페닐이다. 일부 실시예에서, R5는 임의 치환된 8-10원 이환 방향족 탄소환 고리이다. 일부 실시예에서, R5는 임의 치환된 3-8원 포화 또는 부분 불포화 단환 헤테로환 고리(질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 2개의 헤테로원자를 가짐)이다. 일부 실시예에서, R5는 임의 치환된 6-12원 포화 또는 부분 불포화 가교 헤테로환 고리(질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 헤테로원자를 가짐)이다. 일부 실시예에서, R5는 임의 치환된 7-12원 포화 또는 부분 불포화 이환 헤테로환 고리(질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 헤테로원자를 가짐)이다. 일부 실시예에서, R5는 임의 치환된 5-6원 단환 헤테로방향족 고리(질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 헤테로원자를 가짐)이다. 일부 실시예에서, R5는 임의 치환된 8-10원 이환 헤테로방향족 고리(질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 5개의 헤테로원자를 가짐)이다.
일부 실시예에서, R5는 3-8원 포화 또는 부분 불포화 단환 탄소환 고리, 6-12원 포화 또는 부분 불포화 가교 탄소환 고리, 7-12원 포화 또는 부분 불포화 이환 탄소환 고리, 페닐, 8-10원 이환 방향족 탄소환 고리, 3-8원 포화 또는 부분 불포화 단환 헤테로환 고리(질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 2개의 헤테로원자를 가짐), 6-12원 포화 또는 부분 불포화 가교 헤테로환 고리(질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 헤테로원자를 가짐), 7-12원 포화 또는 부분 불포화 이환 헤테로환 고리(질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 헤테로원자를 가짐), 5-6원 단환 헤테로방향족 고리(질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 헤테로원자를 가짐), 및 8-10원 이환 헤테로방향족 고리(질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 5개의 헤테로원자를 가짐)로부터 선택되는 환형 기이고, 여기서 환형 기는 임의 치환된다.
일부 실시예에서, R5는 독립적으로 할로겐; -(CH2)0-6R°; -(CH2)0-6OR°; -O(CH2)0-6Ro, -O-(CH2)0-6C(O)OR°; -(CH2)0-6CH(OR°)2; -(CH2)0-6SR°; -(CH2)0-6Ph(상기 pH는 R°로 치환될 수 있음); -(CH2)0-46O(CH2)0-1Ph(상기 Ph는 R로 치환될 수 있음); -CH=CHPh(상기 Ph는 R°로 치환될 수 있음); -(CH2)0-6O(CH2)0-1-피리딜(상기 피리딜은 R°로 치환될 수 있음); -NO2; -CN; -N3; -(CH2)0-6N(R°)2; -(CH2)0-6N(R°)C(O)R°; -N(R°)C(S)R°; -(CH2)0-6N(R°)C(O)NR°2; -N(R°)C(S)NR°2; -(CH2)0-6N(R°)C(O)OR°; -N(R°)N(R°)C(O)R°; -N(R°)N(R°)C(O)NR°2; -N(R°)N(R°)C(O)OR°; -(CH2)0-6C(O)R°; -C(S)R°; -(CH2)0-6C(O)OR°; -(CH2)0-6C(O)SR°; -(CH2)0-6C(O)OSiR°3; -(CH2)0-6OC(O)R°; -OC(O)(CH2)0-6SR°,-(CH2)0-6SC(O)R°; -(CH2)0-6C(O)NR°2; -C(S)NR°2; -C(S)SR°; -SC(S)SR°, -(CH2)0-6OC(O)NR°2; -C(O)N(OR°)R°; -C(O)C(O)R°; -C(O)CH2C(O)R°; -C(NOR°)R°; -(CH2)0-6SSR°; -(CH2)0-6S(O)2R°; -(CH2)0-6S(O)2OR°; -(CH2)0-6OS(O)2R°; -S(O)2NR°2; -(CH2)0-6S(O)R°; -N(R°)S(O)2NR°2; -N(R°)S(O)2R°; -N(OR°)R°; -C(NH)NR°2; -P(O)2R°; -P(O)R°2; -P(O)(OR°)2; -OP(O)(R°)OR°; -OP(O)R°2; -OP(O)(OR°)2; SiR°3; -(C1-4 직쇄 또는 분지형 알킬렌)O-N(R°)2; 또는 -(C1-4 직쇄 또는 분지형 알킬렌)C(O)O-N(R°)2인 1 내지 3개의 기로 임의 치환되고, 여기서 각각의 R°은 본원의 다른 곳에서 정의된 바와 같이 치환될 수 있고 독립적으로 수소, C1-6 지방족, -CH2Ph, -O(CH2)0-1Ph, -CH2-(5- 내지 6원 헤테로아릴 고리), 또는 3- 내지 6원 포화, 부분 불포화, 또는 아릴 고리(질소, 산소, 및 황으로부터 독립적으로 선택된 0 내지 4개의 헤테로원자를 가짐)이거나, 상기 정의에도 불구하고, R°의 2개의 독립적인 발생은, 이들의 개재 원자와 함께 취해져, 3 내지 12원 포화, 부분 불포화, 또는 아릴 단환 또는 이환 고리(질소, 산소, 및 황으로부터 독립적으로 선택된 0 내지 4개의 헤테로원자를 가짐)를 형성한다. 일부 실시예에서, R5는 하나 이상의 -SF5기로 임의 치환된다.
일부 실시예에서, R5는 할로겐, C1-6 지방족, -OR°, 또는 C1-6할로알킬로부터 독립적으로 선택된 1 내지 3개의 치환기로 임의 치환된 페닐이다. 일부 실시예에서, R5는 1 내지 3개의 할로겐으로 임의 치환된 페닐이다. 일부 실시예에서, R5는 할로겐, C1-6 지방족, -OR°, 또는 C1-6할로알킬로부터 독립적으로 선택된 1 내지 3개의 치환기로 임의 치환된 5-12원 포화 또는 부분 불포화 가교 탄소환 고리이다. 일부 실시예에서, R5는 할로겐, C1-6 지방족, -OR°, 또는 C1-6할로알킬로부터 독립적으로 선택된 1 내지 3개의 치환기로 임의 치환된 C5-8트리시클로알킬 고리이다. 일부 실시예에서, R5는 할로겐, C1-6 지방족, -OR°, 또는 C1-6할로알킬로부터 독립적으로 선택된 1 내지 3개의 치환기로 임의 치환된 5-6원 단환 헤테로방향족 고리(질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 헤테로원자를 가짐)이다. 일부 실시예에서, R5는 1 내지 3개의 할로겐으로 임의 치환된 5-6원 단환 헤테로방향족 고리(질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 헤테로원자를 가짐)이다.
일반적으로 상기 식 I에 정의된 바와 같이, R5는 C1-6알킬, C1-6할로알킬, C3-6시클로알킬, C5-8스피로알킬, C5-8트리시클로알킬, 시클로펜트-1-엔-1-일, 시클로헥스-1-엔-1-일, 페닐, 6원 헤테로아릴, 아지리딘-1-일, 피롤리딘-1-일, 3-아자바이시클로[3.1.0]헥산-3-일, 피페리딘-1-일, 또는 -OCH2-(C3-6시클로알킬)이고,
여기서 C1-6알킬, C3-6시클로알킬, C5-8스피로알킬, C5-8트리시클로알킬, 시클로펜트-1-엔-1-일, 시클로헥스-1-엔-1-일, 페닐, 및 6원 헤테로아릴은 할로겐, C1-3알킬, 및 C1-3할로알킬로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 치환기로 추가로 임의 치환되고,
여기서 아지리딘-1-일, 피롤리딘-1-일, 3-아자바이시클로[3.1.0]헥산-3-일, 피페리딘-1-일, 및 -OCH2-(C3-6시클로알킬)은 할로겐, C1-3알킬, C1-3할로알킬, C1-3알콕시, 및 C1-3할로알콕시로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 치환기로 추가로 치환된다.
일부 실시예에서, R5는 C1-6할로알킬, C3-6시클로알킬, C5-8스피로알킬, C5-8트리시클로알킬, 시클로펜트-1-엔-1-일, 시클로헥스-1-엔-1-일, 페닐, 6원 헤테로아릴, 아지리딘-1-일, 피롤리딘-1-일, 3-아자바이시클로[3.1.0]헥산-3-일, 피페리딘-1-일, 또는 -OCH2-(C3-6시클로알킬)이고,
여기서 C3-6시클로알킬, C5-8스피로알킬, C5-8트리시클로알킬, 시클로펜트-1-엔-1-일, 시클로헥스-1-엔-1-일, 페닐, 및 6원 헤테로아릴은 할로겐, C1-3알킬, 및 C1-3할로알킬로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 치환기로 추가로 임의 치환되고,
여기서 아지리딘-1-일, 피롤리딘-1-일, 3-아자바이시클로[3.1.0]헥산-3-일, 피페리딘-1-일, 및 -OCH2-(C3-6시클로알킬)은 할로겐, C1-3알킬, C1-3할로알킬, 및 C1-3알콕시로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 치환기로 추가로 치환된다.
일부 실시예에서, R5는 C1-6할로알킬이다. 일부 실시예에서, R5는 할로겐, C1-3알킬, 및 C1-3할로알킬로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 치환기로 임의 치환된 C3-6시클로알킬이다. 일부 실시예에서, R5는 할로겐, C1-3알킬, 및 C1-3할로알킬로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 치환기로 임의 치환된 C5-8스피로알킬이다. 일부 실시예에서, R5는 할로겐, C1-3알킬, 및 C1-3할로알킬로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 치환기로 임의 치환된 C5-8트리시클로알킬이다. 일부 실시예에서, R5는 할로겐, C1-3알킬, 및 C1-3할로알킬로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 치환기로 임의 치환된 시클로펜트-1-엔-1-일이다. 일부 실시예에서, R5는 할로겐, C1-3알킬, 및 C1-3할로알킬로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 치환기로 임의 치환된 시클로헥스-1-엔-1-일이다. 일부 실시예에서, R5는 할로겐, C1-3알킬, 및 C1-3할로알킬로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 치환기로 임의 치환된 페닐이다. 일부 실시예에서, R5는 할로겐, C1-3알킬, 및 C1-3할로알킬로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 치환기로 임의 치환된 6원 헤테로아릴이다. 일부 실시예에서, R5는 할로겐, C1-3알킬, C1-3할로알킬, 및 C1-3알콕시로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 치환기로 치환된 아지리딘-1-일이다. 일부 실시예에서, R5는 할로겐, C1-3알킬, C1-3할로알킬, 및 C1-3알콕시로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 치환기로 치환된 피롤리딘-1-일이다. 일부 실시예에서, R5는 할로겐, C1-3알킬, C1-3할로알킬, 및 C1-3알콕시로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 치환기로 치환된 아자바이시클로[3.1.0]헥산-3-일이다. 일부 실시예에서, R5는 할로겐, C1-3알킬, C1-3할로알킬, 및 C1-3알콕시로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 치환기로 치환된 피레리딘-1-일이다. 일부 실시예에서, R5는 할로겐, C1-3알킬, C1-3할로알킬, 및 C1-3알콕시로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 치환기로 치환된 -OCH2-(C3-6시클로알킬)이다.
일부 실시예에서, R5는 -CH2CH2CF3, 임의 치환된 C3-6시클로알킬, 임의 치환된 스피로[3.3]헵타닐, 임의 치환된 스피로[5.2]옥타닐, 임의 치환된 , 임의 치환된 시클로펜트-1-엔-1-일, 임의 치환된 시클로헥스-1-엔-1-일, 임의 치환된 페닐, 임의 치환된 피리디닐, 임의 치환된 아지리딘-1-일, 임의 치환된 피롤리딘-1-일, 임의 치환된 아자바이시클로[3.1.0]헥산-3-일, 임의 치환된 피페리딘-1-일, 또는 임의 치환된 -OCH2-(C3-4시클로알킬)이다. 일부 실시예에서, R5는 -CH2CH2CF3이다. 일부 실시예에서, R5는 임의 치환된 C3-6시클로알킬이다. 일부 실시예에서, R5는 임의 치환된 스피로[3.3]헵타닐이다. 일부 실시예에서, R5는 임의 치환된 스피로[5.2]옥타닐이다. 일부 실시예에서, R5는 임의 치환된 이다. 일부 실시예에서, R5는 임의 치환된 시클로펜트-1-엔-1-일이다. 일부 실시예에서, R5는 임의 치환된 시클로헥스-1-엔-1-일이다. 일부 실시예에서, R5는 임의 치환된 페닐이다. 일부 실시예에서, R5는 임의 치환된 피리디닐이다. 일부 실시예에서, R5는 임의 치환된 아지리딘-1-일이다. 일부 실시예에서, R5는 임의 치환된 피롤리딘-1-일이다. 일부 실시예에서, R5는 임의 치환된 아자바이시클로[3.1.0]헥산-3-일이다. 일부 실시예에서, R5는 임의 치환된 피페리딘-1-일이다. 일부 실시예에서, R5는 임의 치환된 -OCH2-(C3-4시클로알킬)이다.
일부 실시예에서, R5는 아래에 도시된 것들로부터 선택된 치환기이다:
일부 실시예에서, R5는 -CH2CH2CF3, , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , , ,, 또는 이다.
일부 실시예에서, R5는 , , , , , , , , , , , , , , 또는 이다.
일부 실시예에서, R5는 -CH2CH2CF3,
,, 또는 이다. 일부 실시예에서, R5는 , , , , , 또는 이다. 일부 실시예에서, R5는 이다. 일부 실시예에서, R5는 이다. 일부 실시예에서, R5는 이다. 일부 실시예에서, R5는 이다.
일부 실시예에서, R5는 임의 치환된 C3-6시클로알킬, 임의 치환된 스피로[3.3]헵타닐, 임의 치환된 스피로[5.2]옥타닐, 또는 임의 치환된 이다.
일부 실시예에서, R5는 , , , , , , , , , , , , , 또는 이다.
일부 실시예에서, R5는 이다.
일부 실시예에서, R5는 이다.
일부 실시예에서, R5는 이다.
일부 실시예에서, R5는 임의 치환된 시클로펜트-1-엔-1-일, 또는 임의 치환된 시클로헥스-1-엔-1-일이다. 일부 실시예에서, R5는 , , 또는 이다.
일부 실시예에서, R5는 임의 치환된 피리디닐이다. 일부 실시예에서, R5는 , 또는 이다.
일부 실시예에서, R5는 치환된 아지리딘-1-일, 치환된 피롤리딘-1-일, 치환된 아자바이시클로[3.1.0]헥산-3-일, 또는 치환된 피페리딘-1-일이다. 일부 실시예에서, R5는 , , , , , , , , , 또는 이다.
일부 실시예에서, R5는 , ,, 또는 이다.
일부 실시예에서, R5는 아래 표 A에 도시된 것들로부터 선택된다.
일반적으로 위에서 정의된 바와 같이, R6 및 R7은 수소, 임의 치환된 C1-6 지방족기, 할로겐, -OR, -CN, -NR2, -C(=O)R, -C(=O)OR, -C(=O)NR2, -SO2R, -SO2NR2, C1-6할로알킬, C1-6할로알콕시, 또는 3-8원 포화 또는 부분 불포화 단환 탄소환 고리, 7-12원 포화 또는 부분 불포화 이환 탄소환 고리, 페닐, 8-10원 이환 방향족 탄소환 고리, 3-8원 포화 또는 부분 불포화 단환 헤테로환 고리(질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 2개의 헤테로원자를 가짐), 7-12원 포화 또는 부분 불포화 이환 헤테로환 고리(질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 헤테로원자를 가짐), 5-6원 단환 헤테로방향족 고리(질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 헤테로원자를 가짐), 및 8-10원 이환 헤테로방향족 고리(질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 5개의 헤테로원자를 가짐)로부터 선택된 환형 기로부터 각각 독립적으로 선택되고, 여기서 환형 기는 임의 치환되고거나; R6 및 R7은 이들의 개재 원자와 함께 취해져 3-8원 포화 또는 부분 불포화 단환 탄소환 고리, 7-12원 포화 또는 부분 불포화 이환 탄소환 고리, 페닐, 8-10원 이환 방향족 탄소환 고리, 3-8원 포화 또는 부분 불포화 단환 헤테로환 고리(질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 2개의 헤테로원자를 가짐), 7-12원 포화 또는 부분 불포화 이환 헤테로환 고리(질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 헤테로원자를 가짐), 5-6원 단환 헤테로방향족 고리(질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 헤테로원자를 가짐), 및 8-10원 이환 헤테로방향족 고리(질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 5개의 헤테로원자를 가짐)로부터 선택된 환형 기를 형성하고, 여기서 환형 기는 임의 치환된다.
일부 실시예에서, R6은 임의 치환된 C1-6 지방족기이다. 일부 실시예에서, R6은 할로겐이다. 일부 실시예에서, R6은 -OR이다. 일부 실시예에서, R6은 -NR2이다. 일부 실시예에서, R6은 -C(=O)R이다. 일부 실시예에서, R6은 -C(=O)OR이다. 일부 실시예에서, R6은 -C(=O)NR2이다. 일부 실시예에서, R6은 -SO2R이다. 일부 실시예에서, R6은 -SO2NR2이다. 일부 실시예에서, R6은 C1-6할로알킬이다. 일부 실시예에서, R6은 C1-6할로알콕시이다. 일부 실시예에서, R6은 임의 치환된 3-8원 포화 또는 부분 불포화 단환 탄소환 고리이다. 일부 실시예에서, R6은 임의 치환된 6-12원 포화 또는 부분 불포화 가교 탄소환 고리이다. 일부 실시예에서, R6은 임의 치환된 7-12원 포화 또는 부분 불포화 이환 탄소환 고리이다. 일부 실시예에서, R6은 임의 치환된 페닐이다. 일부 실시예에서, R6은 임의 치환된 8-10원 이환 방향족 탄소환 고리이다. 일부 실시예에서, R6은 임의 치환된 3-8원 포화 또는 부분 불포화 단환 헤테로환 고리(질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 2개의 헤테로원자를 가짐)이다. 일부 실시예에서, R6은 임의 치환된 6-12원 포화 또는 부분 불포화 가교 헤테로환 고리(질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 헤테로원자를 가짐)이다. 일부 실시예에서, R6은 임의 치환된 7-12원 포화 또는 부분 불포화 이환 헤테로환 고리(질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 헤테로원자를 가짐)이다. 일부 실시예에서, R6은 임의 치환된 5-6원 단환 헤테로방향족 고리(질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 헤테로원자를 가짐)이다. 일부 실시예에서, R6은 임의 치환된 8-10원 이환 헤테로방향족 고리(질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 5개의 헤테로원자를 가짐)이다.
일부 실시예에서, R7은 임의 치환된 C1-6 지방족기이다. 일부 실시예에서, R7은 할로겐이다. 일부 실시예에서, R7은 -OR이다. 일부 실시예에서, R7은 -NR2이다. 일부 실시예에서, R7은 -C(=O)R이다. 일부 실시예에서, R7은 -C(=O)OR이다. 일부 실시예에서, R7은 -C(=O)NR2이다. 일부 실시예에서, R7은 -SO2R이다. 일부 실시예에서, R7은 -SO2NR2이다. 일부 실시예에서, R7은 C1-6할로알킬이다. 일부 실시예에서, R7은 C1-6할로알콕시이다. 일부 실시예에서, R7은 임의 치환된 3-8원 포화 또는 부분 불포화 단환 탄소환 고리이다. 일부 실시예에서, R7은 임의 치환된 6-12원 포화 또는 부분 불포화 가교 탄소환 고리이다. 일부 실시예에서, R7은 임의 치환된 7-12원 포화 또는 부분 불포화 이환 탄소환 고리이다. 일부 실시예에서, R7은 임의 치환된 페닐이다. 일부 실시예에서, R7은 임의 치환된 8-10원 이환 방향족 탄소환 고리이다. 일부 실시예에서, R7은 임의 치환된 3-8원 포화 또는 부분 불포화 단환 헤테로환 고리(질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 2개의 헤테로원자를 가짐)이다. 일부 실시예에서, R7은 임의 치환된 6-12원 포화 또는 부분 불포화 가교 헤테로환 고리(질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 헤테로원자를 가짐)이다. 일부 실시예에서, R7은 임의 치환된 7-12원 포화 또는 부분 불포화 이환 헤테로환 고리(질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 헤테로원자를 가짐)이다. 일부 실시예에서, R7은 임의 치환된 5-6원 단환 헤테로방향족 고리(질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 헤테로원자를 가짐)이다. 일부 실시예에서, R7은 임의 치환된 8-10원 이환 헤테로방향족 고리(질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 5개의 헤테로원자를 가짐)이다.
일부 실시예에서, R6은 수소이다. 일부 실시예에서, R6은 메틸이다. 일부 실시예에서, R6은 Cl이다. 일부 실시예에서, R6은 C1-3 할로알킬이다. 일부 실시예에서, R6은 3-8원 포화 단환 헤테로환 고리(질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 2개의 헤테로원자를 가짐)이다. 일부 실시예에서, R6은 아제티디닐기이다. 일부 실시예에서, R6은 임의 치환된 에틸이다. 일부 실시예에서, R6은 메톡시이다. 일부 실시예에서, R6은 -CH2F이다. 일부 실시예에서, R6은 -OCH2F이다. 일부 실시예에서, R6은 -CD3이다.
일부 실시예에서, R7은 수소이다. 일부 실시예에서, R7은 메틸이다. 일부 실시예에서, R7은 Cl이다. 일부 실시예에서, R7은 -CD3이다.
일부 실시예에서, R6 및 R7은 이들의 개재 원자와 함께 취해져 3-8원 포화 또는 부분 불포화 단환 탄소환 고리, 7-12원 포화 또는 부분 불포화 이환 탄소환 고리, 페닐, 8-10원 이환 방향족 탄소환 고리, 3-8원 포화 또는 부분 불포화 단환 헤테로환 고리(질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 2개의 헤테로원자를 가짐), 7-12원 포화 또는 부분 불포화 이환 헤테로환 고리(질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 헤테로원자를 가짐), 5-6원 단환 헤테로방향족 고리(질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 헤테로원자를 가짐), 및 8-10원 이환 헤테로방향족 고리(질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 5개의 헤테로원자를 가짐)로부터 선택된 환형 기를 형성하고, 여기서 환형 기는 임의 치환된다.
일부 실시예에서, R6 및 R7은 이들의 개재 원자와 함께 취해져 임의 치환된 3-8원 포화 또는 부분 불포화 단환 탄소환 고리를 형성한다. 일부 실시예에서, R6 및 R7은 이들의 개재 원자와 함께 취해져 임의 치환된 6-12원 포화 또는 부분 불포화 가교 탄소환 고리를 형성한다. 일부 실시예에서, R6 및 R7은 이들의 개재 원자와 함께 취해져 임의 치환된 7-12원 포화 또는 부분 불포화 이환 탄소환 고리를 형성한다. 일부 실시예에서, R6 및 R7은 이들의 개재 원자와 함께 취해져 임의 치환된 페닐을 형성한다. 일부 실시예에서, R6 및 R7은 이들의 개재 원자와 함께 취해져 임의 치환된 8-10원 이환 방향족 탄소환 고리를 형성한다. 일부 실시예에서, R6 및 R7은 이들의 개재 원자와 함께 취해져 임의 치환된 3-8원 포화 또는 부분 불포화 단환 헤테로환 고리(질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 2개의 헤테로원자를 가짐)를 형성한다. 일부 실시예에서, R6 및 R7은 이들의 개재 원자와 함께 취해져 임의 치환된 6-12원 포화 또는 부분 불포화 가교 헤테로환 고리(질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 헤테로원자를 가짐)를 형성한다. 일부 실시예에서, R6 및 R7은 이들의 개재 원자와 함께 취해져 임의 치환된 7-12원 포화 또는 부분 불포화 이환 헤테로환 고리(질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 헤테로원자를 가짐)를 형성한다. 일부 실시예에서, R6 및 R7은 이들의 개재 원자와 함께 취해져 임의 치환된 5-6원 단환 헤테로방향족 고리(질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 헤테로원자를 가짐)를 형성한다. 일부 실시예에서, R6 및 R7은 이들의 개재 원자와 함께 취해져 임의 치환된 8-10원 이환 헤테로방향족 고리(질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 5개의 헤테로원자를 가짐)를 형성한다.
식 I에서 일반적으로 위에서 정의된 바와 같이, R6은 H, 할로겐, 또는 C1-3알킬이다. 일부 실시예에서, R6은 H, 염소, 또는 메틸이다. 일부 실시예에서, R6은 H 또는 메틸이다. 일부 실시예에서, R6은 H이다. 일부 실시예에서, R6은 메틸이다. 일부 실시예에서, R6은 아래 표 A에 도시된 것들로부터 선택된다.
식 I에서 일반적으로 위에서 정의된 바와 같이, R7은 H, 할로겐, 또는 C1-3알킬이다. 일부 실시예에서, R7은 H, 메틸, 또는 에틸이다. 일부 실시예에서, R7은 H이다. 일부 실시예에서, R7은 메틸이다. 일부 실시예에서, R7은 에틸이다. 일부 실시예에서, R7은 아래 표 A에 도시된 것들로부터 선택된다.
일부 실시예에서, R6은 H 또는 메틸이고, R7은 H 또는 메틸이다. 일부 실시예에서, R6은 H 또는 메틸이고, R7은 메틸이다. 일부 실시예에서, R6은 H이고 R7은 메틸이다. 일부 실시예에서, R6은 메틸이고 R7은 메틸이다. 일부 실시예에서, R6은 Cl이고 R7은 메틸이다. 일부 실시예에서, R6은 H이고 R7은 에틸이다.
일반적으로 위에서 정의된 바와 같이, R9는 H 또는 C1-5알킬이다. 일부 실시예에서, R9는 H, 메틸, 에틸, 또는 이소-프로필이다. 일부 실시예에서, R9는 메틸, 에틸, 또는 이소-프로필이다. 일부 실시예에서, R9는 메틸이다. 일부 실시예에서, R9는 에틸이다. 일부 실시예에서, R9는 이소-프로필이다. 일부 실시예에서, R9는 아래 표 A에 도시된 것들로부터 선택된다.
일부 실시예에서, 고리 B는 이다.
위에서 정의된 바와 같이, L은 결합 또는 임의 치환된 직쇄 또는 분지형 C1-6 알킬렌이다. 일부 실시예에서, L은 결합이다. 일부 실시예에서, L은 임의 치환된 직쇄 또는 분지형 C1-6 알킬렌이다. 일부 실시예에서, L은 임의 치환된 에틸렌이다. 일부 실시예에서, L은 임의 치환된 메틸렌이다.
일반적으로 위에서 정의된 바와 같이, X10은 CH, N 또는 CR10이다. 일부 실시예에서, X10은 CH이다. 일부 실시예에서, X10은 N이다. 일부 실시예에서, X10은 CR10이다.
일반적으로 위에서 정의된 바와 같이, X11은 CH, N 또는 CR11이다. 일부 실시예에서, X11은 CH이다. 일부 실시예에서, X11은 N이다. 일부 실시예에서, X11은 CR11이다.
일부 실시예에서, X10은 N이고 X11은 CH이다. 일부 실시예에서, X10은 N이고 X11은 CR11이다. 일부 실시예에서, X10은 CH이고 X11은 N이다. 일부 실시예에서, X10은 CR10이고 X11은 N이다. 일부 실시예에서, X10은 CH이고 X11은 CH이다. 일부 실시예에서, X10은 CH이고 X11은 CR11이다. 일부 실시예에서, X10은 CR10이고 X11은 H이다.
일반적으로 위에서 정의된 바와 같이, R22 는 임의 치환된 C1-6 지방족기, 할로겐, -OR, -CN, -NR2, -C(=O)R, -C(=O)OR, -C(=O)NR2, -SO2R, -SO2NR2, C1-6할로알킬, 또는 C1-6할로알콕시이다. 일부 실시예에서, R22 는 수소이다. 일부 실시예에서, R22 는 임의 치환된 C1-6 지방족기이다. 일부 실시예에서, R22 는 할로겐이다. 일부 실시예에서, R22 는 -OR이다. 일부 실시예에서, R22 는 -CN이다. 일부 실시예에서, R22 는 -NR2이다. 일부 실시예에서, R22 는 -C(=O)R이다. 일부 실시예에서, R22 는 -C(=O)OR이다. 일부 실시예에서, R22 는 -C(=O)NR2이다. 일부 실시예에서, R22 는 -SO2R이다. 일부 실시예에서, R22 는 -SO2NR2이다. 일부 실시예에서, R22 는 C1-6할로알킬이다. 일부 실시예에서, R22 는 C1-6할로알콕시이다. 일부 실시예에서, R22 는 -CD3이다. 일부 실시예에서, R22는 아래 표 A에 도시된 것들로부터 선택된다.
일반적으로 위에서 정의된 바와 같이, m은 0, 1 또는 2이다. 일부 실시예에서, m은 0이다. 일부 실시예에서, m은 1이다. 일부 실시예에서, m은 2이다.
일부 실시예에서, 고리 B는 이다. 일부 실시예에서, 고리 B는 이다. 일부 실시예에서, 고리 B는 이다. 일부 실시예에서, 고리 B는 이다. 일부 실시예에서, 고리 B는 이다. 일부 실시예에서, 고리 B는 아래 표 A에 도시된 것들로부터 선택된다.
일반적으로 위에서 정의된 바와 같이, R10 및 R11은 수소, 임의 치환된 C1-6 지방족기, -OR, -CN, -NR2, -C(=O)R, -C(=O)OR, -C(=O)NR2, -SO2R, -SO2NR2, 할로겐, C1-6할로알킬, C1-6할로알콕시, 또는 3-8원 포화 또는 부분 불포화 단환 탄소환 고리, 7-12원 포화 또는 부분 불포화 이환 탄소환 고리, 페닐, 8-10원 이환 방향족 탄소환 고리, 3-8원 포화 또는 부분 불포화 단환 헤테로환 고리(질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 2개의 헤테로원자를 가짐), 7-12원 포화 또는 부분 불포화 이환 헤테로환 고리(질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 헤테로원자를 가짐), 5-6원 단환 헤테로방향족 고리(질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 헤테로원자를 가짐), 및 8-10원 이환 헤테로방향족 고리(질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 5개의 헤테로원자를 가짐)로부터 선택된 환형 기로부터 각각 독립적으로 선택되고, 여기서 환형 기는 임의 치환되거나; R10 및 R11은 이들의 개재 원자와 함께 취해져 3-8원 포화 또는 부분 불포화 단환 탄소환 고리, 7-12원 포화 또는 부분 불포화 이환 탄소환 고리, 페닐, 8-10원 이환 방향족 탄소환 고리, 3-8원 포화 또는 부분 불포화 단환 헤테로환 고리(질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 2개의 헤테로원자를 가짐), 7-12원 포화 또는 부분 불포화 이환 헤테로환 고리(질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 헤테로원자를 가짐), 5-6원 단환 헤테로방향족 고리(질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 헤테로원자를 가짐), 및 8-10원 이환 헤테로방향족 고리(질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 5개의 헤테로원자를 가짐)로부터 선택된 환형 기를 형성하고, 여기서 환형 기는 임의 치환된다.
일부 실시예에서, R10은 임의 치환된 C1-6 지방족기이다. 일부 실시예에서, R10은 -OR이다. 일부 실시예에서, R10은 -NR2이다. 일부 실시예에서, R10은 -C(=O)R이다. 일부 실시예에서, R10은 -C(=O)OR이다. 일부 실시예에서, R10은 -C(=O)NR2이다. 일부 실시예에서, R5는 -SO2R이다. 일부 실시예에서, R10은 -SO2NR2이다. 일부 실시예에서, R10은 할로겐이다. 일부 실시예에서, R10은 C1-6할로알킬이다. 일부 실시예에서, R10은 C1-6할로알콕시이다. 일부 실시예에서, R10은 임의 치환된 3-8원 포화 또는 부분 불포화 단환 탄소환 고리이다. 일부 실시예에서, R10은 임의 치환된 6-12원 포화 또는 부분 불포화 가교 탄소환 고리이다. 일부 실시예에서, R10은 임의 치환된 7-12원 포화 또는 부분 불포화 이환 탄소환 고리이다. 일부 실시예에서, R10은 임의 치환된 페닐이다. 일부 실시예에서, R10은 임의 치환된 8-10원 이환 방향족 탄소환 고리이다. 일부 실시예에서, R10은 임의 치환된 3-8원 포화 또는 부분 불포화 단환 헤테로환 고리(질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 2개의 헤테로원자를 가짐)이다. 일부 실시예에서, R10은 임의 치환된 6-12원 포화 또는 부분 불포화 가교 헤테로환 고리(질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 헤테로원자를 가짐)이다. 일부 실시예에서, R10은 임의 치환된 7-12원 포화 또는 부분 불포화 이환 헤테로환 고리(질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 헤테로원자를 가짐)이다. 일부 실시예에서, R10은 임의 치환된 5-6원 단환 헤테로방향족 고리(질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 헤테로원자를 가짐)이다. 일부 실시예에서, R10은 임의 치환된 8-10원 이환 헤테로방향족 고리(질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 5개의 헤테로원자를 가짐)이다.
일부 실시예에서, R10은 -OCF3이다. 일부 실시예에서, R10은 시클로프로필이다. 일부 실시예에서, R10은 시클로부틸이다. 일부 실시예에서, R10은 임의 치환된 피라졸릴이다. 일부 실시예에서, R10은 임의 치환된 피리디닐이다. 일부 실시예에서, R10은 임의 치환된 피리미디닐이다. 일부 실시예에서, R10은 임의 치환된 피리다지닐이다. 일부 실시예에서, R10은 임의 치환된 이미다졸릴이다. 일부 실시예에서, R10은 임의 치환된 트리아졸릴이다. 일부 실시예에서, R10은 임의 치환된 옥사졸릴이다. 일부 실시예에서, R10은 임의 치환된 티아졸릴이다. 일부 실시예에서, R10은 임의 치환된 옥사디아졸릴이다. 일부 실시예에서, R10은 임의 치환된 티아디아졸릴이다. 일부 실시예에서, R10은 임의 치환된 옥세타닐이다. 일부 실시예에서, R10은 임의 치환된 아제티디닐이다. 일부 실시예에서, R10은 임의 치환된 피페리디닐이다. 일부 실시예에서, R10은 임의 치환된 피페라지닐이다. 일부 실시예에서, R10 아래 표 A에 도시된 것들로부터 선택된다.
일부 실시예에서, R11은 임의 치환된 C1-6 지방족기이다. 일부 실시예에서, R11은 -OR이다. 일부 실시예에서, R11은 -NR2이다. 일부 실시예에서, R11은 -C(=O)R이다. 일부 실시예에서, R11은 -C(=O)OR이다. 일부 실시예에서, R11은 -C(=O)NR2이다. 일부 실시예에서, R11은 -SO2R이다. 일부 실시예에서, R11은 -SO2NR2이다. 일부 실시예에서, R11은 할로겐이다. 일부 실시예에서, R11은 C1-6할로알킬이다. 일부 실시예에서, R11은 C1-6할로알콕시이다. 일부 실시예에서, R11은 임의 치환된 3-8원 포화 또는 부분 불포화 단환 탄소환 고리이다. 일부 실시예에서, R11은 임의 치환된 6-12원 포화 또는 부분 불포화 가교 탄소환 고리이다. 일부 실시예에서, R11은 임의 치환된 7-12원 포화 또는 부분 불포화 이환 탄소환 고리이다. 일부 실시예에서, R11은 임의 치환된 페닐이다. 일부 실시예에서, R11은 임의 치환된 8-10원 이환 방향족 탄소환 고리이다. 일부 실시예에서, R11은 임의 치환된 3-8원 포화 또는 부분 불포화 단환 헤테로환 고리(질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 2개의 헤테로원자를 가짐)이다. 일부 실시예에서, R11은 임의 치환된 6-12원 포화 또는 부분 불포화 가교 헤테로환 고리(질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 헤테로원자를 가짐)이다. 일부 실시예에서, R11은 임의 치환된 7-12원 포화 또는 부분 불포화 이환 헤테로환 고리(질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 헤테로원자를 가짐)이다. 일부 실시예에서, R11은 임의 치환된 5-6원 단환 헤테로방향족 고리(질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 헤테로원자를 가짐)이다. 일부 실시예에서, R11은 임의 치환된 8-10원 이환 헤테로방향족 고리(질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 5개의 헤테로원자를 가짐)이다.
일부 실시예에서, R11은 -OCF3이다. 일부 실시예에서, R11은 시클로프로필이다. 일부 실시예에서, R11은 시클로부틸이다. 일부 실시예에서, R11은 임의 치환된 피라졸릴이다. 일부 실시예에서, R11은 임의 치환된 피리디닐이다. 일부 실시예에서, R11은 임의 치환된 피리미디닐이다. 일부 실시예에서, R11은 임의 치환된 피리다지닐이다. 일부 실시예에서, R11은 임의 치환된 이미다졸릴이다. 일부 실시예에서, R11은 임의 치환된 트리아졸릴이다. 일부 실시예에서, R11은 임의 치환된 옥사졸릴이다. 일부 실시예에서, R11은 임의 치환된 티아졸릴이다. 일부 실시예에서, R11은 임의 치환된 옥사디아졸릴이다. 일부 실시예에서, R11은 임의 치환된 티아디아졸릴이다. 일부 실시예에서, R11은 임의 치환된 옥세타닐이다. 일부 실시예에서, R11은 임의 치환된 아제티디닐이다. 일부 실시예에서, R11은 임의 치환된 피페리디닐이다. 일부 실시예에서, R11은 임의 치환된 피페라지닐이다. 일부 실시예에서, R11은 아래 표 A에 도시된 것들로부터 선택된다.
일부 실시예에서, R10 및 R11은 독립적으로 수소로부터 선택되는 치환기이며, 아래에 도시된 것들이다:
일부 실시예에서, R10 및 R11은 이들의 개재 원자와 함께 취해져 3-8원 포화 또는 부분 불포화 단환 탄소환 고리, 7-12원 포화 또는 부분 불포화 이환 탄소환 고리, 페닐, 8-10원 이환 방향족 탄소환 고리, 3-8원 포화 또는 부분 불포화 단환 헤테로환 고리(질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 2개의 헤테로원자를 가짐), 7-12원 포화 또는 부분 불포화 이환 헤테로환 고리(질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 헤테로원자를 가짐), 5-6원 단환 헤테로방향족 고리(질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 헤테로원자를 가짐), 및 8-10원 이환 헤테로방향족 고리(질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 5개의 헤테로원자를 가짐)로부터 선택된 환형 기를 형성하며, 여기서 환형 기는 임의 치환된다.
일부 실시예에서, R10 및 R11은 이들의 개재 원자와 함께 취해져 임의 치환된 3-8원 포화 또는 부분 불포화 단환 탄소환 고리를 형성한다. 일부 실시예에서, R10 및 R11은 이들의 개재 원자와 함께 취해져 임의 치환된 6-12원 포화 또는 부분 불포화 가교 탄소환 고리를 형성한다. 일부 실시예에서, R10 및 R11은 이들의 개재 원자와 함께 취해져 임의 치환된 7-12원 포화 또는 부분 불포화 이환 탄소환 고리를 형성한다. 일부 실시예에서, R10 및 R11은 이들의 개재 원자와 함께 취해져 임의 치환된 페닐을 형성한다. 일부 실시예에서, R10 및 R11은 이들의 개재 원자와 함께 취해져 임의 치환된 8-10원 이환 방향족 탄소환 고리를 형성한다. 일부 실시예에서, R10 및 R11은 이들의 개재 원자와 함께 취해져 임의 치환된 3-8원 포화 또는 부분 불포화 단환 헤테로환 고리(질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 2개의 헤테로원자를 가짐)를 형성한다. 일부 실시예에서, R10 및 R11은 이들의 개재 원자와 함께 취해져 임의 치환된 6-12원 포화 또는 부분 불포화 가교 헤테로환 고리(질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 헤테로원자를 가짐)를 형성한다. 일부 실시예에서, R10 및 R11은 이들의 개재 원자와 함께 취해져 임의 치환된 7-12원 포화 또는 부분 불포화 이환 헤테로환 고리(질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 헤테로원자를 가짐)를 형성한다. 일부 실시예에서, R10 및 R11은 이들의 개재 원자와 함께 취해져 임의 치환된 5-6원 단환 헤테로방향족 고리(질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 헤테로원자를 가짐)를 형성한다. 일부 실시예에서, R10 및 R11은 이들의 개재 원자와 함께 취해져 임의 치환된 8-10원 이환 헤테로방향족 고리(질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 5개의 헤테로원자를 가짐)를 형성한다.
일부 실시예에서, R10 및 R11은 이들의 개재 원자와 함께 취해져 디옥솔 고리를 형성한다.
일부 실시예에서, 고리 B는 이다. 일부 실시예에서, 고리 B는 이다. 일부 실시예에서, 고리 B는 이다.
일반적으로 위에서 정의된 바와 같이, X12는 N, CH, 또는 CR12이다. 일부 실시예에서, X12는 N이다. 일부 실시예에서, X12는 CH이다. 일부 실시예에서, X12는 CCH3이다. 일부 실시예에서, X12는 COH이다. 일부 실시예에서, X12는 CF이다. 일부 실시예에서, X12는 CR12이다. 일부 실시예에서, X12는 아래 표 A에 도시된 것들로부터 선택된다.
일반적으로 위에서 정의된 바와 같이, X13은 O, NR13, C(R13)2, CHR13, SO2, 또는 C=O이다. 일부 실시예에서, X13은 O이다. 일부 실시예에서, X13은 NR13이다. 일부 실시예에서, X13은 C(R13)2이다. 일부 실시예에서, X13은 CHR13이다. 일부 실시예에서, X13은 CH2이다. 일부 실시예에서, X13은 SO2이다. 일부 실시예에서, X13은 C=O이다. 일부 실시예에서, X13은 아래 표 A에 도시된 것들로부터 선택된다.
일반적으로 위에서 정의된 바와 같이, X14는 O, NR14, C(R14)2, CHR14, SO2, 또는 C=O이다. 일부 실시예에서, X14는 O이다. 일부 실시예에서, X14는 NR14이다. 일부 실시예에서, X14는 C(R14)2이다. 일부 실시예에서, X14는 CHR14이다. 일부 실시예에서, X14는 CH2이다. 일부 실시예에서, X14는 SO2이다. 일부 실시예에서, X14는 C=O이다. 일부 실시예에서, X14는 아래 표 A에 도시된 것들로부터 선택된다.
일반적으로 위에서 정의된 바와 같이, X15는 O, NR15, C(R15)2, CHR15, SO2, 또는 C=O이다. 일부 실시예에서, X15는 O이다. 일부 실시예에서, X15는 NR15이다. 일부 실시예에서, X15는 C(R15)2이다. 일부 실시예에서, X15는 CHR15이다. 일부 실시예에서, X15는 SO2이다. 일부 실시예에서, X15는 C=O이다. 일부 실시예에서, X15는 CH2, CF2, 또는 O이다. 일부 실시예에서, X15는 CH2이다. 일부 실시예에서, X15는 NR10, 또는 O이다. 일부 실시예에서, X15는 NMe, NH, 또는 O이다. 일부 실시예에서, X15는 아래 표 A에 도시된 것들로부터 선택된다.
일반적으로 위에서 정의된 바와 같이, X16은 O, NR16, C(R16)2, CHR16, SO2, 또는 C=O이다. 일부 실시예에서, X16은 O이다. 일부 실시예에서, X16은 NR16이다. 일부 실시예에서, X16은 C(R16)2이다. 일부 실시예에서, X16은 CHR16이다. 일부 실시예에서, X16은 SO2이다. 일부 실시예에서, X16은 C=O이다. 일부 실시예에서, X16은 CH2이다. 일부 실시예에서, X16은 아래 표 A에 도시된 것들로부터 선택된다.
일반적으로 위에서 정의된 바와 같이, X17은 직접 결합, O, NR17, C(R17)2, CHR17, -CH2CH2-, -OCH2-, SO2, 또는 C=O이다. 일부 실시예에서, X17은 O이다. 일부 실시예에서, X17은 NR17이다. 일부 실시예에서, X17은 C(R17)2이다. 일부 실시예에서, X17은 CHR17이다. 일부 실시예에서, X17은 SO2이다. 일부 실시예에서, X17은 C=O이다. 일부 실시예에서, X17은 -CH2CH2-이다. 일부 실시예에서, X17은 -OCH2-이다. 일부 실시예에서, X17은 CH2이다. 일부 실시예에서, X17은 직접 결합이다. 일부 실시예에서, X17은 아래 표 A에 도시된 것들로부터 선택된다.
일부 실시예에서, X12, X13, X14, X15, X16, 또는 X17 중 어느 하나가 N, O, 또는 SO2인 경우, 고리 B 내의 이웃 위치 중 어느 것도 N, O, 또는 SO-2가 아니다.
일부 실시예에서, X13, X14, X15, X16, 또는 X17 중 어느 하나가 C=O인 경우, 고리 B 내의 이웃 위치 중 어느 것도 C=O 또는 SO2가 아니다.
일반적으로 위에서 정의된 바와 같이, R12는 임의 치환된 지방족기, 할로겐, -OR, -CN, -NR2, -C(=O)R, -C(=O)OR, -C(=O)NR2, -SO2R, -SO2NR2, C1-6할로알킬, 또는 C1-6할로알콕시이다. 일부 실시예에서, R12는 임의 치환된 지방족기이다. 일부 실시예에서, R12는 할로겐이다. 일부 실시예에서, R12는 -OR이다. 일부 실시예에서, R12는 -NR2이다. 일부 실시예에서, R12는 -C(=O)R이다. 일부 실시예에서, R12는 -C(=O)OR이다. 일부 실시예에서, R12는 -C(=O)NR2이다. 일부 실시예에서, R12는 -SO2R이다. 일부 실시예에서, R12는 -SO2NR2이다. 일부 실시예에서, R12는 C1-6할로알킬이다. 일부 실시예에서, R12는 C1-6할로알콕시이다. 일부 실시예에서, R12는 메틸이다. 일부 실시예에서, R12는 OH이다. 일부 실시예에서, R12는 F이다. 일부 실시예에서, R12는 아래 표 A에 도시된 것들로부터 선택된다.
일반적으로 위에서 정의된 바와 같이, R13, R14, R15, R16, 및 R17 각각은 수소, 임의 치환된 C1-6 지방족기, -OR, -CN, -NR2, -C(=O)R, -C(=O)OR, -C(=O)NR2, -SO2R, -SO2NR2, C1-6할로알킬, C1-6할로알콕시, 또는 3-8원 포화 또는 부분 불포화 단환 탄소환 고리, 7-12원 포화 또는 부분 불포화 이환 탄소환 고리, 페닐, 8-10원 이환 방향족 탄소환 고리, 3-8원 포화 또는 부분 불포화 단환 헤테로환 고리(질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 2개의 헤테로원자를 가짐), 7-12원 포화 또는 부분 불포화 이환 헤테로환 고리(질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 헤테로원자를 가짐), 5-6원 단환 헤테로방향족 고리(질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 헤테로원자를 가짐), 및 8-10원 이환 헤테로방향족 고리(질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 5개의 헤테로원자를 가짐)로부터 선택된 환형 기로부터 독립적으로 선택되고, 여기서 환형 기는 임의 치환되거나; R12, R13, R14, R15, R16, 및 R17 중 임의의 2개는 이들의 개재 원자와 함께 취해져 3-8원 포화 또는 부분 불포화 단환 탄소환 고리, 7-12원 포화 또는 부분 불포화 이환 탄소환 고리, 페닐, 8-10원 이환 방향족 탄소환 고리, 3-8원 포화 또는 부분 불포화 단환 헤테로환 고리(질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 2개의 헤테로원자를 가짐), 7-12원 포화 또는 부분 불포화 이환 헤테로환 고리(질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 헤테로원자를 가짐), 5-6원 단환 헤테로방향족 고리(질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 헤테로원자를 가짐), 및 8-10원 이환 헤테로방향족 고리(질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 5개의 헤테로원자를 가짐)로부터 선택된 환형 기를 형성하고, 여기서 환형 기는 임의 치환된다.
일부 실시예에서, R13은 수소이다. 일부 실시예에서, R13은 임의 치환된 C1-6 지방족기이다. 일부 실시예에서, R13은 -OR이다. 일부 실시예에서, R13은 -NR2이다. 일부 실시예에서, R13은 -C(=O)R이다. 일부 실시예에서, R13은 -C(=O)OR이다. 일부 실시예에서, R13은 -C(=O)NR2이다. 일부 실시예에서, R13은 -SO2R이다. 일부 실시예에서, R13은 -SO2NR2이다. 일부 실시예에서, R13은 C1-6할로알킬이다. 일부 실시예에서, R13은 C1-6할로알콕시이다. 일부 실시예에서, R13은 임의 치환된 3-8원 포화 또는 부분 불포화 단환 탄소환 고리이다. 일부 실시예에서, R13은 임의 치환된 7-12원 포화 또는 부분 불포화 이환 탄소환 고리이다. 일부 실시예에서, R13은 임의 치환된 페닐이다. 일부 실시예에서, R13은 임의 치환된 8-10원 이환 방향족 탄소환 고리이다. 일부 실시예에서, R13은 임의 치환된 3-8원 포화 또는 부분 불포화 단환 헤테로환 고리(질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 2개의 헤테로원자를 가짐)이다. 일부 실시예에서, R13은 임의 치환된 7-12원 포화 또는 부분 불포화 이환 헤테로환 고리(질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 헤테로원자를 가짐)이다. 일부 실시예에서, R13은 임의 치환된 5-6원 단환 헤테로방향족 고리(질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 헤테로원자를 가짐)이다. 일부 실시예에서, R13은 임의 치환된 8-10원 이환 헤테로방향족 고리(질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 5개의 헤테로원자를 가짐)이다. 일부 실시예에서, R13은 메틸이다. 일부 실시예에서, R13은 -OH이다. 일부 실시예에서, R13은 F이다. 일부 실시예에서, R13은 메톡시이다. 일부 실시예에서, R13은 -CH2OH이다. 일부 실시예에서, X13은 C(R13)2이고, 각각의 R13은 전술한 치환기 중 어느 하나로부터 독립적으로 선택된다. 일부 실시예에서, X13은 C(R13)2이고, R13 둘 모두는 동일하다. 일부 실시예에서, R13은 아래 표 A에 도시된 것들로부터 선택된다.
일부 실시예에서, R14는 수소이다. 일부 실시예에서, R14는 임의 치환된 C1-6 지방족기이다. 일부 실시예에서, R14는 -OR이다. 일부 실시예에서, R14는 -NR2이다. 일부 실시예에서, R14는 -C(=O)R이다. 일부 실시예에서, R14는 -C(=O)OR이다. 일부 실시예에서, R14는 -C(=O)NR2이다. 일부 실시예에서, R14는 -SO2R이다. 일부 실시예에서, R14는 -SO2NR2이다. 일부 실시예에서, R14는 C1-6할로알킬이다. 일부 실시예에서, R14는 C1-6할로알콕시이다. 일부 실시예에서, R14는 임의 치환된 3-8원 포화 또는 부분 불포화 단환 탄소환 고리이다. 일부 실시예에서, R14는 임의 치환된 7-12원 포화 또는 부분 불포화 이환 탄소환 고리이다. 일부 실시예에서, R14는 임의 치환된 페닐이다. 일부 실시예에서, R14는 임의 치환된 8-10원 이환 방향족 탄소환 고리이다. 일부 실시예에서, R14는 임의 치환된 3-8원 포화 또는 부분 불포화 단환 헤테로환 고리(질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 2개의 헤테로원자를 가짐)이다. 일부 실시예에서, R14는 임의 치환된 7-12원 포화 또는 부분 불포화 이환 헤테로환 고리(질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 헤테로원자를 가짐)이다. 일부 실시예에서, R14는 임의 치환된 5-6원 단환 헤테로방향족 고리(질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 헤테로원자를 가짐)이다. 일부 실시예에서, R14는 임의 치환된 8-10원 이환 헤테로방향족 고리(질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 5개의 헤테로원자를 가짐)이다.
일부 실시예에서, R14는 임의 치환된 피라졸릴이다. 일부 실시예에서, R14는 임의 치환된 피리디닐이다. 일부 실시예에서, R14는 임의 치환된 피리미디닐이다. 일부 실시예에서, R14는 임의 치환된 피리다지닐이다. 일부 실시예에서, R14는 임의 치환된 이미다졸릴이다. 일부 실시예에서, R14는 임의 치환된 트리아졸릴이다. 일부 실시예에서, R14는 임의 치환된 옥사졸릴이다. 일부 실시예에서, R14는 임의 치환된 티아졸릴이다. 일부 실시예에서, R14는 임의 치환된 옥사디아졸릴이다. 일부 실시예에서, R14는 임의 치환된 티아디아졸릴이다. 일부 실시예에서, R14는 임의 치환된 옥세타닐이다. 일부 실시예에서, R14는 임의 치환된 아제티디닐이다. 일부 실시예에서, R14는 임의 치환된 피페리디닐이다. 일부 실시예에서, R14는 임의 치환된 피페라지닐이다. 일부 실시예에서, R14는 메틸이다. 일부 실시예에서, R14는 -OH이다. 일부 실시예에서, R14는 F이다. 일부 실시예에서, R14는 메톡시이다. 일부 실시예에서, R14는 -CH2OH이다. 일부 실시예에서, X14는 C(R14 )2이고, 각각의 R14는 전술한 치환기 중 어느 하나로부터 독립적으로 선택된다. 일부 실시예에서, X14는 C(R14)2이고, R14 둘 모두는 동일하다. 일부 실시예에서, R14는 아래 표 A에 도시된 것들로부터 선택된다.
일부 실시예에서, R14는 임의 치환된 3-6원 포화 또는 부분 불포화 단환 탄소환 고리로 치환된다. 일부 실시예에서, R14는 임의 치환된 5-8원 포화 또는 부분 불포화 이환 탄소환 고리로 치환된다. 일부 실시예에서, R14는 임의 치환된 3-6원 포화 또는 부분 불포화 단환 헤테로환 고리로 치환된다. 일부 실시예에서, R14는 임의 치환된 C1-6 지방족기로 치환된다. 일부 실시예에서, R14는 메틸기로 치환된다. 일부 실시예에서, R14는 -CD3기로 치환된다. 일부 실시예에서, R14는 메톡시기로 치환된다. 일부 실시예에서, R14는 시클로프로필기로 치환된다. 일부 실시예에서, R14는 임의 치환된 로 치환된다.
일부 실시예에서, R14는 -OR이고, 여기서 R은 임의 치환된 5-6원 헤테로아릴 고리(질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 헤테로원자를 가짐)이다. 일부 실시예에서, R14는 -NHR이고, 여기서 R은 임의 치환된 5-6원 헤테로아릴 고리(질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 헤테로원자를 가짐)이다. 일부 실시예에서, R14는 -N(CH3)R이고, 여기서 R은 임의 치환된 5-6원 헤테로아릴 고리(질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 헤테로원자를 가짐)이다. 일부 실시예에서, R14는 -C(=O)N(CH3)R이고, 여기서 R은 임의 치환된 5-6원 헤테로아릴 고리(질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 헤테로원자를 가짐)이다. 일부 실시예에서, R14는 -C(=O)NHR이고, 여기서 R은 임의 치환된 5-6원 헤테로아릴 고리(질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 헤테로원자를 가짐)이다.
일부 실시예에서, R14는 아래에 도시된 것들로부터 선택된 치환기이다:
일부 실시예에서, R14는 메틸, 테트라히드로푸란-3-일, , , , , , , , 또는 이다.
일부 실시예에서, R14는 메틸, 테트라히드로푸란-3-일, , , , , , , , 또는이다.
일부 실시예에서, R14는 , , 또는 이다.
일부 실시예에서, R14는 , 또는 이다.
일부 실시예에서, R14는 이다.
일부 실시예에서, R14는 이다.
일부 실시예에서, R14는 이다.
일부 실시예에서, R15는 수소이다. 일부 실시예에서, R15는 임의 치환된 C1-6 지방족기이다. 일부 실시예에서, R15는 -OR이다. 일부 실시예에서, R15는 -NR2이다. 일부 실시예에서, R15는 -C(=O)R이다. 일부 실시예에서, R15는 -C(=O)OR이다. 일부 실시예에서, R15는 -C(=O)NR2이다. 일부 실시예에서, R15는 -SO2R이다. 일부 실시예에서, R15는 -SO2NR2이다. 일부 실시예에서, R15는 C1-6할로알킬이다. 일부 실시예에서, R15는 C1-6할로알콕시이다. 일부 실시예에서, R15는 임의 치환된 3-8원 포화 또는 부분 불포화 단환 탄소환 고리이다. 일부 실시예에서, R15는 임의 치환된 7-12원 포화 또는 부분 불포화 이환 탄소환 고리이다. 일부 실시예에서, R15는 임의 치환된 페닐이다. 일부 실시예에서, R15는 임의 치환된 8-10원 이환 방향족 탄소환 고리이다. 일부 실시예에서, R15는 임의 치환된 3-8원 포화 또는 부분 불포화 단환 헤테로환 고리(질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 2개의 헤테로원자를 가짐)이다. 일부 실시예에서, R15는 임의 치환된 7-12원 포화 또는 부분 불포화 이환 헤테로환 고리(질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 헤테로원자를 가짐)이다. 일부 실시예에서, R15는 임의 치환된 5-6원 단환 헤테로방향족 고리(질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 헤테로원자를 가짐)이다. 일부 실시예에서, R15는 임의 치환된 8-10원 이환 헤테로방향족 고리(질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 5개의 헤테로원자를 가짐)이다. 일부 실시예에서, R15는 메틸이다. 일부 실시예에서, R15는 -OH이다. 일부 실시예에서, R15는 F이다. 일부 실시예에서, R15는 메톡시이다. 일부 실시예에서, R15는 -CH2OH이다. 일부 실시예에서, X15는 C(R15)2이고, 각각의 R15는 전술한 치환기 중 어느 하나로부터 독립적으로 선택된다. 일부 실시예에서, X15는 C(R15)2이고, R15 둘 모두는 동일하다. 일부 실시예에서, R15는 아래 표 A에 도시된 것들로부터 선택된다.
일부 실시예에서, R16은 수소이다. 일부 실시예에서, R16은 임의 치환된 C1-6 지방족기이다. 일부 실시예에서, R16은 -OR이다. 일부 실시예에서, R16은 -NR2이다. 일부 실시예에서, R16은 -C(=O)R이다. 일부 실시예에서, R16은 -C(=O)OR이다. 일부 실시예에서, R16은 -C(=O)NR2이다. 일부 실시예에서, R16은 -SO2R이다. 일부 실시예에서, R16은 -SO2NR2이다. 일부 실시예에서, R16은 C1-6할로알킬이다. 일부 실시예에서, R16은 C1-6할로알콕시이다. 일부 실시예에서, R16은 임의 치환된 3-8원 포화 또는 부분 불포화 단환 탄소환 고리이다. 일부 실시예에서, R16은 임의 치환된 7-12원 포화 또는 부분 불포화 이환 탄소환 고리이다. 일부 실시예에서, R16은 임의 치환된 페닐이다. 일부 실시예에서, R16은 임의 치환된 8-10원 이환 방향족 탄소환 고리이다. 일부 실시예에서, R16은 임의 치환된 3-8원 포화 또는 부분 불포화 단환 헤테로환 고리(질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 2개의 헤테로원자를 가짐)이다. 일부 실시예에서, R16은 임의 치환된 7-12원 포화 또는 부분 불포화 이환 헤테로환 고리(질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 헤테로원자를 가짐)이다. 일부 실시예에서, R16은 임의 치환된 5-6원 단환 헤테로방향족 고리(질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 헤테로원자를 가짐)이다. 일부 실시예에서, R16은 임의 치환된 8-10원 이환 헤테로방향족 고리(질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 5개의 헤테로원자를 가짐)이다. 일부 실시예에서, R16은 메틸이다. 일부 실시예에서, R16은 -OH이다. 일부 실시예에서, R16은 F이다. 일부 실시예에서, R16은 메톡시이다. 일부 실시예에서, R16은 -CH2OH이다. 일부 실시예에서, X16은 C(R16)2이고, 각각의 R16은 전술한 치환기 중 어느 하나로부터 독립적으로 선택된다. 일부 실시예에서, X16은 C(R16)2이고, R16 둘 모두는 동일하다. 일부 실시예에서, R16은 아래 표 A에 도시된 것들로부터 선택된다.
일부 실시예에서, R17은 수소이다. 일부 실시예에서, R17은 임의 치환된 C1-6 지방족기이다. 일부 실시예에서, R17은 -OR이다. 일부 실시예에서, R17은 -NR2이다. 일부 실시예에서, R17은 -C(=O)R이다. 일부 실시예에서, R17은 -C(=O)OR이다. 일부 실시예에서, R17은 -C(=O)NR2이다. 일부 실시예에서, R17은 -SO2R이다. 일부 실시예에서, R17은 -SO2NR2이다. 일부 실시예에서, R17은 C1-6할로알킬이다. 일부 실시예에서, R17은 C1-6할로알콕시이다. 일부 실시예에서, R17은 임의 치환된 3-8원 포화 또는 부분 불포화 단환 탄소환 고리이다. 일부 실시예에서, R17은 임의 치환된 7-12원 포화 또는 부분 불포화 이환 탄소환 고리이다. 일부 실시예에서, R17은 임의 치환된 페닐이다. 일부 실시예에서, R17은 임의 치환된 8-10원 이환 방향족 탄소환 고리이다. 일부 실시예에서, R17은 임의 치환된 3-8원 포화 또는 부분 불포화 단환 헤테로환 고리(질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 2개의 헤테로원자를 가짐)이다. 일부 실시예에서, R17은 임의 치환된 7-12원 포화 또는 부분 불포화 이환 헤테로환 고리(질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 헤테로원자를 가짐)이다. 일부 실시예에서, R17은 임의 치환된 5-6원 단환 헤테로방향족 고리(질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 헤테로원자를 가짐)이다. 일부 실시예에서, R17은 임의 치환된 8-10원 이환 헤테로방향족 고리(질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 1 내지 5개의 헤테로원자를 가짐)이다. 일부 실시예에서, R17은 메틸이다. 일부 실시예에서, R17은 -OH이다. 일부 실시예에서, R17은 F이다. 일부 실시예에서, R17은 메톡시이다. 일부 실시예에서, R17은 -CH2OH이다. 일부 실시예에서, X17은 C(R17)2이고, 각각의 R17은 전술한 치환기 중 어느 하나로부터 독립적으로 선택된다. 일부 실시예에서, X17은 C(R17)2이고, R17 둘 모두는 동일하다. 일부 실시예에서, R17은 아래 표 A에 도시된 것들로부터 선택된다.
일부 실시예에서, 고리 B는 아래에 도시된 것들로부터 선택된 치환기이다:
일부 실시예에서, 고리 B는 , , , , 또는 이다.
일부 실시예에서, 고리 B는 이다. 일부 실시예에서, 고리 B는 이다. 일부 실시예에서, 고리 B는 이다. 일부 실시예에서, 고리 B는 이다. 일부 실시예에서, 고리 B는 이다. 일부 실시예에서, 고리 B는 이다. 일부 실시예에서, 고리 B는 이다. 일부 실시예에서, 고리 B는 이다. 일부 실시예에서, 고리 B는 이다. 일부 실시예에서, 고리 B는 이다. 일부 실시예에서, 고리 B는 이다. 일부 실시예에서, 고리 B는 이다. 일부 실시예에서, 고리 B는 이다. 일부 실시예에서, 고리 B는 이다.
일부 실시예에서, 고리 B는 이다. 일부 실시예에서, 고리 B는 이다. 일부 실시예에서, 고리 B는 이다. 일부 실시예에서, 고리 B는 이다. 일부 실시예에서, 고리 B는 이다. 일부 실시예에서, 고리 B는 이다. 일부 실시예에서, 고리 B는 이다. 일부 실시예에서, 고리 B는 이다. 일부 실시예에서, 고리 B는 이다. 일부 실시예에서, 고리 B는 이다. 일부 실시예에서, 고리 B는 이다. 일부 실시예에서, 고리 B는 이다. 일부 실시예에서, 고리 B는 이다. 일부 실시예에서, 고리 B는 이다. 일부 실시예에서, 고리 B는 이다. 일부 실시예에서, 고리 B는 이다. 일부 실시예에서, 고리 B는 이다. 일부 실시예에서, 고리 B는 이다. 일부 실시예에서, 고리 B는 이다. 일부 실시예에서, 고리 B는 이다. 일부 실시예에서, 고리 B는 이다. 일부 실시예에서, 고리 B는 이다. 일부 실시예에서, 고리 B는 이다.
일부 실시예에서, 고리 B는 이다. 일부 실시예에서, 고리 B는 이다. 일부 실시예에서, 고리 B는 이다. 일부 실시예에서, 고리 B는 이다. 일부 실시예에서, 고리 B는 이다. 일부 실시예에서, 고리 B는 이다. 일부 실시예에서, 고리 B는 이다. 일부 실시예에서, 고리 B는 이다. 일부 실시예에서, 고리 B는 이다. 일부 실시예에서, 고리 B는 이다. 일부 실시예에서, 고리 B는 이다. 일부 실시예에서, 고리 B는 이다.
일부 실시예에서, R2는 H 또는 메틸이고; R4는 ,, 또는 이고; R5는 , , , 또는 이고; R6은 또는 메틸이고 R7은 메틸이다.
일부 실시예에서, R2는 H 또는 메틸이고; R4는 이고; R5는 , , , 또는 이고; R6은 H 또는 메틸이고 R7은 메틸이다.
일부 실시예에서, R2는 H 또는 메틸이고; R4는 이고; R5는 , , , 또는 이고; R6은 H 또는 메틸이고 R7은 메틸이다.
일부 실시예에서, R2는 H 또는 메틸이고; R4는 이고; R5는 , , , 또는 이고; R6은 H 또는 메틸이고 R7은 메틸이다.
일부 실시예에서, R2는 H 또는 메틸이고; R4는 ,, 또는 이고; R5는 이고; R6은 H 또는 메틸이고 R7은 메틸이다.
일부 실시예에서, R2는 H 또는 메틸이고; R4는 ,, 또는 이고; R5는 이고; R6은 H 또는 메틸이고 R7은 메틸이다.
일부 실시예에서, R2는 H 또는 메틸이고; R4는 ,, 또는 이고; R5는 이고; R6은 H 또는 메틸이고 R7은 메틸이다.
일부 실시예에서, R2는 H 또는 메틸이고; R4는 ,, 또는 이고; R5는 이고; R6은 H 또는 메틸이고 R7은 메틸이다.
일부 실시예에서, R2는 H 또는 메틸이고; R4는 ,, 또는 이고; R5는 , , , 또는 이고; R9는 메틸, 에틸 또는 이소-프로필이다.
일부 실시예에서, 화합물의 적어도 하나의 수소 원자는 중수소 원자이다. 일부 실시예에서, 화합물의 적어도 하나의 C1-C6알킬기는 적어도 하나의 중수소 원자로 치환된다. 일부 실시예에서, R6은 -CD3이다. 일부 실시예에서, R7은 -CD3이다. 일부 실시예에서, R6 및 R7은 모두 -CD3이다. 일부 실시예에서, R6 및 R7은 H, D, -CH3, -CD3, -CHD2, 및 -CH2D로부터 각각 독립적으로 선택된다. 일부 실시예에서, R6 및 R7은 -CH3, -CD3, -CHD2, 및 -CH2D로부터 각각 독립적으로 선택된다. 일부 실시예에서, R2는 중수소이다. 일부 실시예에서, R2와 동일한 탄소에 부착된 수소 원자는 중수소이다. 일부 실시예에서, R4는 하나 이상의 중수소를 포함하는 C1-3알킬로 치환된다. 일부 실시예에서, R4는 -CD3, -CHD2, 및 -CH2D로부터 선택된 1 내지 3개의 치환기로 치환된다.
일부 실시예에서, 화합물은 식 IIIa의 화합물
IIIa, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이며;
여기서
R2는 H 또는 메틸이고;
R4는 , , 또는 이고;
R5는 C3-6시클로알킬, C5-8스피로알킬, C5-8트리시클로알킬, 시클로펜트-1-엔-1-일, 시클로헥스-1-엔-1-일, 페닐, 6원 헤테로아릴, 아지리딘-1-일, 피롤리딘-1-일, 3-아자바이시클로[3.1.0]헥산-3-일, 피페리딘-1-일, 또는 -OCH2-(C3-6시클로알킬)이고,
여기서 C3-6시클로알킬, C5-8스피로알킬, C5-8트리시클로알킬, 시클로펜트-1-엔-1-일, 시클로헥스-1-엔-1-일, 페닐, 및 6원 헤테로아릴은 할로겐, C1-3알킬, 및 C1-3할로알킬로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 치환기로 추가로 임의 치환되고,
여기서 아지리딘-1-일, 피롤리딘-1-일, 3-아자바이시클로[3.1.0]헥산-3-일, 피페리딘-1-일, 및 -OCH2-(C3-6시클로알킬)은 할로겐, C1-3알킬, C1-3할로알킬, 및 C1-3알콕시로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 치환기로 추가로 치환되고;
R6은 H 또는 메틸이고;
R7은 메틸이고;
단,
R4가 이고 R2가 H인 경우, R5는 , , , , , , , , 또는 이 아니며;
R4가 이고 R2가 H인 경우, R5는 , , , , , , , 또는 이 아니다.
일부 실시예에서, 화합물은 식 IIIa의 화합물
IIIa, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이며;
여기서
R2는 H 또는 메틸이고;
R4는 이고;
R5는 C3-6시클로알킬, C5-8스피로알킬, C5-8트리시클로알킬, 시클로펜트-1-엔-1-일, 시클로헥스-1-엔-1-일, 페닐, 6원 헤테로아릴, 아지리딘-1-일, 피롤리딘-1-일, 3-아자바이시클로[3.1.0]헥산-3-일, 피페리딘-1-일, 또는 -OCH2-(C3-6시클로알킬)이고,
여기서 C3-6시클로알킬, C5-8스피로알킬, C5-8트리시클로알킬, 시클로펜트-1-엔-1-일, 시클로헥스-1-엔-1-일, 페닐, 및 6원 헤테로아릴은 할로겐, C1-3알킬, 및 C1-3할로알킬로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 치환기로 추가로 임의 치환되고,
여기서 아지리딘-1-일, 피롤리딘-1-일, 3-아자바이시클로[3.1.0]헥산-3-일, 피페리딘-1-일, 및 -OCH2-(C3-6시클로알킬)은 할로겐, C1-3알킬, C1-3할로알킬, 및 C1-3알콕시로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 치환기로 추가로 치환되고;
R6은 H 또는 메틸이고;
R7은 메틸이다.
일부 실시예에서, 화합물은 식 IIIa의 화합물
IIIa, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이며;
여기서
R2는 메틸이고;
R4는 , , 또는 이고;
R5는 C3-6시클로알킬, C5-8스피로알킬, C5-8트리시클로알킬, 시클로펜트-1-엔-1-일, 시클로헥스-1-엔-1-일, 페닐, 6원 헤테로아릴, 아지리딘-1-일, 피롤리딘-1-일, 3-아자바이시클로[3.1.0]헥산-3-일, 피페리딘-1-일, 또는 -OCH2-(C3-6시클로알킬)이고,
여기서 C3-6시클로알킬, C5-8스피로알킬, C5-8트리시클로알킬, 시클로펜트-1-엔-1-일, 시클로헥스-1-엔-1-일, 페닐, 및 6원 헤테로아릴은 할로겐, C1-3알킬, 및 C1-3할로알킬로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 치환기로 추가로 임의 치환되고,
여기서 아지리딘-1-일, 피롤리딘-1-일, 3-아자바이시클로[3.1.0]헥산-3-일, 피페리딘-1-일, 및 -OCH2-(C3-6시클로알킬)은 할로겐, C1-3알킬, C1-3할로알킬, 및 C1-3알콕시로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 치환기로 추가로 치환되고;
R6은 H 또는 메틸이고;
R7은 Me이다.
일부 실시예에서, 화합물은 식 IIIa의 화합물
IIIa, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이며;
여기서
R2는 H 또는 메틸이고;
R4는 5원 헤테로아릴 또는 6원 헤테로아릴이고; 여기서 5원 헤테로아릴 또는 6원 헤테로아릴기는 C1-6알킬, C1-6알콕시, 및 C3-6시클로알킬로부터 독립적으로 선택된 1 내지 3개의 치환기로 임의 치환되고;
R5는 또는 이고;
R6은 H 또는 메틸이고;
R7은 Me이다.
일부 실시예에서, 화합물은 식 IIIb의 화합물
IIIb, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이며;
여기서
R2는 H 또는 메틸이고;
R4는 또는 이고;
R5는 C3-6시클로알킬, C5-8스피로알킬, C5-8트리시클로알킬, 시클로펜트-1-엔-1-일, 시클로헥스-1-엔-1-일, 페닐, 6원 헤테로아릴, 아지리딘-1-일, 피롤리딘-1-일, 3-아자바이시클로[3.1.0]헥산-3-일, 피페리딘-1-일, 또는 -OCH2-(C3-6시클로알킬)이고,
여기서 C3-6시클로알킬, C5-8스피로알킬, C5-8트리시클로알킬, 시클로펜트-1-엔-1-일, 시클로헥스-1-엔-1-일, 페닐, 및 6원 헤테로아릴은 할로겐, C1-3알킬, 및 C1-3할로알킬로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 치환기로 추가로 임의 치환되고,
여기서 아지리딘-1-일, 피롤리딘-1-일, 3-아자바이시클로[3.1.0]헥산-3-일, 피페리딘-1-일, 및 -OCH2-(C3-6시클로알킬)은 할로겐, C1-3알킬, C1-3할로알킬, 및 C1-3알콕시로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 치환기로 추가로 치환되고;
R6은 H 또는 메틸이고;
R7은 메틸이고;
단,
R4가 인 경우, R5는 , , 또는 이 아니고;
R4가 인 경우, R5는 , , , 또는 이 아니다.
일부 실시예에서, 화합물은 식 IIIb의 화합물
IIIb, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이며;
여기서
R2는 H 또는 메틸이고;
R4는 5원 헤테로아릴 또는 6원 헤테로아릴이고; 여기서 5원 헤테로아릴 또는 6원 헤테로아릴기는 C1-6알킬, C1-6알콕시, 및 C3-6시클로알킬로부터 독립적으로 선택된 1 내지 3개의 치환기로 임의 치환되고;
R5는 , , 또는 이고;
R6은 H 또는 메틸이고;
R7은 메틸이고;
단, R4가 인 경우, R5는 이 아니다.
일부 실시예에서, 화합물은 식 IIIb의 화합물
IIIb, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이며;
여기서
R2는 H 또는 메틸이고;
R4는 이고;
R5는 , 또는 이고;
R6은 H 또는 메틸이고;
R7은 메틸이다.
일부 실시예에서, 화합물은 식 IIIb의 화합물
IIIb, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이며;
여기서
R4는 이고;
R5는 또는 이고;
R6은 H 또는 메틸이고;
R7은 Me이다.
일부 실시예에서, 화합물은 식 Va의 화합물
Va, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이며;
여기서
R2는 H 또는 메틸이고;
R4는 또는 이고;
R5는 C1-6할로알킬, C3-6시클로알킬, C5-8스피로알킬, C5-8트리시클로알킬, 시클로펜트-1-엔-1-일, 시클로헥스-1-엔-1-일, 페닐, 6원 헤테로아릴, 아지리딘-1-일, 피롤리딘-1-일, 3-아자바이시클로[3.1.0]헥산-3-일, 피페리딘-1-일, 또는 -OCH2-(C3-6시클로알킬)이고,
여기서 C3-6시클로알킬, C5-8스피로알킬, C5-8트리시클로알킬, 시클로펜트-1-엔-1-일, 시클로헥스-1-엔-1-일, 페닐, 및 6원 헤테로아릴은 할로겐, C1-3알킬, 및 C1-3할로알킬로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 치환기로 추가로 임의 치환되고,
여기서 아지리딘-1-일, 피롤리딘-1-일, 3-아자바이시클로[3.1.0]헥산-3-일, 피페리딘-1-일, 및 -OCH2-(C3-6시클로알킬)은 할로겐, C1-3알킬, C1-3할로알킬, 및 C1-3알콕시로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 치환기로 추가로 치환되고;
R6은 H 또는 메틸이고;
R7은 메틸이고;
단,
R6이 Me이고 R2가 H인 경우, R5는 이 아니며;
R2 및 R6 모두가 H인 경우, R5는 이 아니다.
일부 실시예에서, 화합물은 식 Vb의 화합물
Vb, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이며;
여기서
R2는 H 또는 메틸이고;
R4는 또는 이고;
R5는 C1-6할로알킬, C3-6시클로알킬, C5-8스피로알킬, C5-8트리시클로알킬, 시클로펜트-1-엔-1-일, 시클로헥스-1-엔-1-일, 페닐, 6원 헤테로아릴, 아지리딘-1-일, 피롤리딘-1-일, 3-아자바이시클로[3.1.0]헥산-3-일, 피페리딘-1-일, 또는 -OCH2-(C3-6시클로알킬)이고,
여기서 C3-6시클로알킬, C5-8스피로알킬, C5-8트리시클로알킬, 시클로펜트-1-엔-1-일, 시클로헥스-1-엔-1-일, 페닐, 및 6원 헤테로아릴은 할로겐, C1-3알킬, 및 C1-3할로알킬로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 치환기로 추가로 임의 치환되고,
여기서 아지리딘-1-일, 피롤리딘-1-일, 3-아자바이시클로[3.1.0]헥산-3-일, 피페리딘-1-일, 및 -OCH2-(C3-6시클로알킬)은 할로겐, C1-3알킬, C1-3할로알킬, 및 C1-3알콕시로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 치환기로 추가로 치환되고;
R6은 H 또는 메틸이고;
R7은 메틸이고;
단, R2가 H인 경우, R5는 이 아니다.
일부 실시예에서, 화합물은 식 Va 또는 Vb의 화합물
Vb, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이며;
여기서
R2는 H 또는 메틸이고;
R4는 5원 헤테로아릴 또는 6원 헤테로아릴이고; 여기서 5원 헤테로아릴 또는 6원 헤테로아릴기는 C1-6알킬, C1-6알콕시, 및 C3-6시클로알킬로부터 독립적으로 선택된 1 내지 3개의 치환기로 임의 치환되고;
R5는 , , 또는 이고;
R6은 H 또는 메틸이고;
R7은 메틸이다.
일부 실시예에서, 화합물은 식 Va 또는 Vb의 화합물
Vb, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이며;
여기서
R2는 H 또는 메틸이고;
R4는 또는 이고;
R5는 , , 또는 이고;
R6은 H 또는 메틸이고;
R7은 메틸이다.
일부 실시예에서, 화합물은 식 Va 또는 Vb의 화합물
Vb, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이며;
여기서
R2는 메틸이고;
R4는 또는 이고;
R5는 C1-6할로알킬, C3-6시클로알킬, C5-8스피로알킬, C5-8트리시클로알킬, 시클로펜트-1-엔-1-일, 시클로헥스-1-엔-1-일, 페닐, 6원 헤테로아릴, 아지리딘-1-일, 피롤리딘-1-일, 3-아자바이시클로[3.1.0]헥산-3-일, 피페리딘-1-일, 또는 -OCH2-(C3-6시클로알킬)이고,
여기서 C3-6시클로알킬, C5-8스피로알킬, C5-8트리시클로알킬, 시클로펜트-1-엔-1-일, 시클로헥스-1-엔-1-일, 페닐, 및 6원 헤테로아릴은 할로겐, C1-3알킬, 및 C1-3할로알킬로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 치환기로 추가로 임의 치환되고,
여기서 아지리딘-1-일, 피롤리딘-1-일, 3-아자바이시클로[3.1.0]헥산-3-일, 피페리딘-1-일, 및 -OCH2-(C3-6시클로알킬)은 할로겐, C1-3알킬, C1-3할로알킬, 및 C1-3알콕시로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 치환기로 추가로 치환되고;
R6은 H 또는 메틸이고;
R7은 메틸이다.
일부 실시예에서, 화합물은 식 Vb의 화합물
Vb, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이며;
여기서
R2는 H 또는 메틸이고;
R4는 이고;
R5는 , , , 또는 이고;
R6은 H 또는 메틸이고;
R7은 메틸이고;
단, R2가 H인 경우, R5는 이 아니다.
일부 실시예에서, 화합물은 식 VIIIa의 화합물
VIIIa, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이며;
여기서
R2는 H 또는 메틸이고;
R4는 이고;
R5는 C1-6할로알킬, C3-6시클로알킬, C5-8스피로알킬, C5-8트리시클로알킬, 시클로펜트-1-엔-1-일, 시클로헥스-1-엔-1-일, 페닐, 6원 헤테로아릴, 아지리딘-1-일, 피롤리딘-1-일, 3-아자바이시클로[3.1.0]헥산-3-일, 피페리딘-1-일, 또는 -OCH2-(C3-6시클로알킬)이고,
여기서 C3-6시클로알킬, C5-8스피로알킬, C5-8트리시클로알킬, 시클로펜트-1-엔-1-일, 시클로헥스-1-엔-1-일, 페닐, 및 6원 헤테로아릴은 할로겐, C1-3알킬, 및 C1-3할로알킬로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 치환기로 추가로 임의 치환되고,
여기서 아지리딘-1-일, 피롤리딘-1-일, 3-아자바이시클로[3.1.0]헥산-3-일, 피페리딘-1-일, 및 -OCH2-(C3-6시클로알킬)은 할로겐, C1-3알킬, C1-3할로알킬, 및 C1-3알콕시로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 치환기로 추가로 치환되고;
R6은 H 또는 메틸이고;
R7은 Me이고
단, R5는 이 아니다.
일부 실시예에서, 화합물은 식 VIIIa의 화합물
VIIIa, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이며;
여기서
R2는 H 또는 메틸이고;
R4는 이고;
R5는 또는 이고;
R6은 H 또는 메틸이고;
R7은 메틸이다.
일부 실시예에서, 화합물은 식 VIIIb의 화합물
VIIIb, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이며;
여기서
R2는 H 또는 메틸이고;
R4는 5원 헤테로아릴 또는 6원 헤테로아릴이고; 여기서 5원 헤테로아릴 또는 6원 헤테로아릴기는 C1-6알킬, C1-6알콕시, 및 C3-6시클로알킬로부터 독립적으로 선택된 1 내지 3개의 치환기로 임의 치환되고;
R5는 C1-6할로알킬, C3-6시클로알킬, C5-8스피로알킬, C5-8트리시클로알킬, 시클로펜트-1-엔-1-일, 시클로헥스-1-엔-1-일, 페닐, 6원 헤테로아릴, 아지리딘-1-일, 피롤리딘-1-일, 3-아자바이시클로[3.1.0]헥산-3-일, 피페리딘-1-일, 또는 -OCH2-(C3-6시클로알킬)이고,
여기서 C3-6시클로알킬, C5-8스피로알킬, C5-8트리시클로알킬, 시클로펜트-1-엔-1-일, 시클로헥스-1-엔-1-일, 페닐, 및 6원 헤테로아릴은 할로겐, C1-3알킬, 및 C1-3할로알킬로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 치환기로 추가로 임의 치환되고,
여기서 아지리딘-1-일, 피롤리딘-1-일, 3-아자바이시클로[3.1.0]헥산-3-일, 피페리딘-1-일, 및 -OCH2-(C3-6시클로알킬)은 할로겐, C1-3알킬, C1-3할로알킬, 및 C1-3알콕시로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 치환기로 추가로 치환되고;
R6은 H 또는 메틸이고;
R7은 메틸이다.
일부 실시예에서, 화합물은 식 IVb의 화합물이며
IVb;
여기서
R2는 H 또는 메틸이고;
R4는 또는 이고;
R5는 C3-6시클로알킬, C5-8스피로알킬, C5-8트리시클로알킬, 시클로펜트-1-엔-1-일, 시클로헥스-1-엔-1-일, 페닐, 6원 헤테로아릴, 아지리딘-1-일, 피롤리딘-1-일, 3-아자바이시클로[3.1.0]헥산-3-일, 피페리딘-1-일, 또는 -OCH2-(C3-6시클로알킬)이고,
여기서 C3-6시클로알킬, C5-8스피로알킬, C5-8트리시클로알킬, 시클로펜트-1-엔-1-일, 시클로헥스-1-엔-1-일, 페닐, 및 6원 헤테로아릴은 할로겐, C1-3알킬, 및 C1-3할로알킬로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 치환기로 추가로 임의 치환되고,
여기서 아지리딘-1-일, 피롤리딘-1-일, 3-아자바이시클로[3.1.0]헥산-3-일, 피페리딘-1-일, 및 -OCH2-(C3-6시클로알킬)은 할로겐, C1-3알킬, C1-3할로알킬, 및 C1-3알콕시로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 치환기로 추가로 치환되고;
R6은 H 또는 메틸이고;
R7은 Me이고;
단, R2가 H인 경우, R5는 , , 또는 이 아니다.
본 발명의 예시적인 화합물은 아래 표 A에 제시되어 있다. 일부 실시예에서, 화합물은 표 A에 제시된 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이다.
표 A. 예시적인 화합물
일부 실시예에서, 본 발명의 예시적인 화합물은 아래 표 A-2에 제시되어 있다. 일부 실시예에서, 화합물은 표 A-2에 제시된 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염이다.
표 A-2. 예시적인 화합물
전술한 내용은 단지 본 개시의 특정 측면을 요약한 것이며, 어떠한 방식으로도 본 개시를 제한하는 것으로 의도되거나 그렇게 간주되어서는 안된다.
제형 및 투여 경로
본원에 개시된 화합물을 기술된 용도로 단독으로 투여하는 것이 가능할 수 있지만, 일반적으로 투여되는 화합물은 약학적 조성물 내에 활성 성분으로 존재할 것이다. 따라서, 일 실시예에서, 본원에 개시된 화합물을 하나 이상의 약학적으로 허용 가능한 부형제, 예컨대 희석제, 담체, 보조제 등, 및 원하는 경우 다른 활성 성분과 함께 포함하는 약학적 약학적 조성물이 본원에 제공된다. 예를 들어, Remington: The Science and Practice of Pharmacy, Volume I and Volume II, 22판, Loyd V. Allen Jr.(ed.), Philadelphia, PA, Pharmaceutical Press, 2012; Pharmaceutical Dosage Forms (Vol. 1-3), Liberman 등 (Eds.), Marcel Dekker, New York, NY, 1992; Handbook of Pharmaceutical Excipients (3rd Ed.), Arthur H. Kibbe (ed.), American Pharmaceutical Association, Washington, 2000; Pharmaceutical Formulation: The Science and Technology of Dosage Forms (Drug Discovery), first edition, GD Tovey (ed.), Royal Society of Chemistry, 2018 참조. 일 실시예에서, 약학적 조성물은 본원에 개시된 화합물의 치료적 유효량을 포함한다.
본원에 개시된 화합물(들)은 임의의 적합한 경로를 통해, 이러한 경로에 적합한 약학적 조성물의 형태로, 및 의도된 치료에 유효한 투여량으로 투여될 수 있다. 본원에 제시된 화합물 및 조성물은, 예를 들어 경구, 점막, 국소, 경피, 직장, 폐, 비경구, 비강내, 혈관내, 정맥내, 동맥내, 복강내, 경막내, 피하, 설하, 근육내, 흉골내, 질내, 또는 주입 기술에 의해, 종래의 약학적으로 허용 가능한 부형제를 함유하는 투여량 단위 제형으로 투여될 수 있다.
약학적 조성물은, 예를 들어 정제, 저작성 정제, 미니정제, 당의정, 알약, 비드, 경질 캡슐, 연질 캡슐, 젤라틴 캡슐, 과립, 분말, 캔디, 패치, 크림, 겔, 봉지, 미세침 어레이, 시럽, 가향 시럽, 주스, 점적, 주사 용액, 유화액, 마이크로에멀젼, 연고, 에어로졸, 수성 현탁액, 또는 유성 현탁액의 형태일 수 있다. 약학적 조성물은 일반적으로 특정량의 활성 성분을 함유하는 투여량 단위의 형태로 만들어진다.
일 측면에서, 본 발명은 본 개시내용의 화합물, 또는 이의 호변이성질체, 또는 상기 화합물 또는 상기 호변이성질체의 약학적으로 허용 가능한 염, 및 약학적으로 허용 가능한 부형제를 포함하는 약학적 조성물을 제공한다.
또 다른 측면에서, 본 발명은 의약으로서 사용하기 위한 본 개시내용의 화합물, 또는 이의 호변이성질체, 또는 상기 화합물 또는 상기 호변이성질체의 약학적으로 허용 가능한 염, 또는 상기 화합물, 또는 상기 호변이성질체, 또는 상기 염을 포함하는 약학적 조성물을 제공한다.
약학적으로 허용 가능한 조성물
일부 실시예에 따르면, 본 개시내용은 본 개시내용의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 유도체 및 약학적으로 허용 가능한 담체, 보조제, 또는 비히클을 포함하는 조성물을 제공한다. 본 개시내용의 조성물 중 화합물의 양은 생물학적 샘플 또는 환자에서 TREM2 단백질 또는 이의 돌연변이체를 측정 가능하게 활성화시키는 데 유효한 양이다. 소정의 실시예에서, 본 개시내용의 조성물 중 화합물의 양은 생물학적 샘플 또는 환자에서 TREM2 단백질 또는 이의 돌연변이체를 측정 가능하게 활성화시키는 데 유효한 양이다. 소정의 실시예에서, 본 개시내용의 조성물은 이러한 조성물을 필요로 하는 환자에게 투여하도록 제형화된다. 일부 실시예에서, 본 개시내용의 조성물은 환자에게 경구 투여하도록 제형화된다.
본 개시내용의 조성물은 경구, 비경구, 흡입 분무에 의해, 국소, 직장, 비강, 구강, 질, 또는 이식된 저장조를 통해 투여될 수 있다. 본원에서 사용되는 용어 "비경구"는 피하, 정맥내, 근육내, 관절내, 활액내, 흉골내, 경막내, 간내, 병변내, 및 두개내 주사 또는 주입 기술을 포함한다. 바람직하게는, 조성물은 경구 투여되거나, 복강내 투여되거나, 정맥내 투여된다. 본 개시의 조성물의 멸균 주사식 형태는 수성 현탁액 또는 유성(oleaginous) 현탁액일 수 있다. 이들 현탁액은 적절한 분산제 또는 습윤제 및 현탁제를 사용하여 당업계에 공지된 기술에 따라 제형화될 수 있다. 멸균 주사식 제제는 또한 비독성 비경구적으로 허용 가능한 희석제 또는 용매 중 멸균 주사식 용액 또는 현탁액, 예를 들어 1,3-부탄디올 중 용액일 수 있다. 사용할 수 있는 허용 가능한 비히클 및 용매 중에는 물, 링거 용액, 및 등장성 염화나트륨 용액이 있다. 또한, 멸균된 고정 오일이 용매 또는 현탁 매질로서 통상적으로 사용된다.
이를 위해, 합성 모노- 또는 디-글리세리드를 포함하여, 임의의 무자극성(bland) 고정 오일이 사용될 수 있다. 올레산 및 이의 글리세리드 유도체와 같은 지방산이 주사제를 제조하는 데 유용한데, 이는 지방산, 특히 이의 폴리옥시에틸화된 버전이 올리브유 또는 피마자유와 같이 약학적으로 허용 가능한 천연 오일이기 때문이다. 이들 오일 용액 또는 현탁액은 장쇄 알코올 희석제 또는 분산제, 예컨대 유화액 및 현탁액을 포함하는 약학적으로 허용 가능한 투여 형태의 제형에 일반적으로 사용되는 카르복시메틸 셀룰로오스 또는 유사한 분산제를 함유할 수도 있다. 흔히 사용되는 다른 계면활성제, 예컨대 약학적으로 허용 가능한 고형분, 액상, 또는 다른 투여 형태를 제조하는 데 흔히 사용되는 Tweens, Spans, 및 다른 유화제 또는 생체이용률 증강제가 제형화를 목적으로 사용될 수도 있다.
본 개시내용의 약학적으로 허용 가능한 조성물은 캡슐, 정제, 수성 현탁액, 또는 용액을 포함하지만 이에 한정되지 않는 임의의 경구 투여 가능한 투여 형태로 경구 투여될 수 있다. 경구용 정제의 경우, 흔히 사용되는 담체는 락토오스 및 옥수수 전분을 포함한다. 일반적으로, 스테아린산 마그네슘과 같은 윤활제도 첨가된다. 캡슐 형태로 경구 투여하는 경우, 유용한 희석제는 락토오스 및 건조된 옥수수 전분을 포함한다. 경구용으로 수성 현탁액을 사용해야 하는 경우, 활성 성분은 유화제 및 현탁제와 조합된다. 원하는 경우, 소정의 감미제, 향미제, 또는 착색제가 첨가될 수도 있다.
대안적으로, 본 개시내용의 약학적으로 허용 가능한 조성물은 직장 투여용 좌제의 형태로 투여될 수 있다. 이들은 제제를 적절한 비자극성 부형제와 혼합하여 제조할 수 있는데, 부형제는 실온에서 고형이지만 직장 온도에서는 액체이므로, 직장 내에서 용융되어 약물을 방출하게 된다. 이러한 물질은 코코아 버터, 밀랍, 및 폴리에틸렌 글리콜을 포함한다.
눈, 피부, 또는 하부 장관의 질환과 같이, 특히 치료 표적이 국소 도포에 의해 쉽게 접근 가능한 영역 또는 기관을 포함하는 경우, 본 개시의 약학적으로 허용 가능한 조성물은, 국소 투여될 수도 있다. 이들 영역 또는 기관 각각에 적절한 국소 제형은 쉽게 제조된다.
하부 장관에 대한 국소 도포는 직장 좌제 제형(상기 참조) 또는 적절한 관장 제형으로 수행될 수 있다. 국소 경피 패치가 사용될 수도 있다.
국소 도포의 경우, 제공된 약학적으로 허용 가능한 조성물은 하나 이상의 담체에 현탁되거나 용해된 활성 성분을 함유하는 적절한 연고로 제형화될 수 있다. 본 개시내용의 화합물의 국소 투여를 위한 담체는 광유, 액상 바셀린(petrolatum), 백색 바셀린, 플루오로렌 글리콜, 폴리옥시에틸렌, 폴리옥시프로필렌 화합물, 유화 왁스, 및 물을 포함하지만, 이들로 한정되지는 않는다. 대안적으로, 제공된 약학적으로 허용 가능한 조성물은 하나 이상의 약학적으로 허용 가능한 담체에 현탁되거나 용해된 활성 성분을 함유하는 적절한 로션 또는 크림으로 제형화될 수 있다. 적합한 담체는 광유, 소르비탄 모노스테아레이트, 폴리소르베이트 60, 세틸 에스테르 왁스, 세테아릴 알코올, 2-옥틸도데카놀, 벤질 알코올, 및 물을 포함하지만, 이들로 한정되지는 않는다.
안과적 사용의 경우, 제공된 약학적으로 허용 가능한 조성물은 등장성 pH 조절된 멸균 식염수 중 미분화된 현탁액으로서 제형화되거나, 바람직하게는, 염화 벤질알코늄과 같은 보존제가 포함되거나 포함되지 않은 등장성 pH 조절된 멸균 식염수 중 용액으로서 제형화될 수 있다. 대안적으로, 안과적 사용의 경우, 약학적으로 허용 가능한 조성물은 바셀린과 같은 연고로 제형화될 수 있다.
본 개시내용의 약학적으로 허용 가능한 조성물은 비강 에어로졸 또는 흡입에 의해 투여될 수도 있다. 이러한 조성물은 약학적 제형 분야에 잘 알려진 기술에 따라 제조되며, 벤질 알코올 또는 다른 적절한 보존제, 생체이용률을 향상시키기 위한 흡수 프로모터, 탄화플루오로르, 및/또는 다른 종래의 가용화제 또는 분산제를 사용하여 식염수 중 용액으로서 제조될 수 있다.
가장 바람직하게는, 본 개시내용의 약학적으로 허용 가능한 조성물은 경구 투여용으로 제형화된다. 이러한 제형은 음식물과 함께 또는 음식물 없이 투여될 수 있다. 일부 실시예에서, 본 개시내용의 약학적으로 허용 가능한 조성물은 음식물 없이 투여된다. 다른 실시예에서, 본 개시내용의 약학적으로 허용 가능한 조성물은 음식물과 함께 투여된다.
단일 투여 형태의 조성물을 생산하기 위해 담체 물질과 조합할 수 있는 본 개시내용의 화합물의 양은 치료되는 숙주, 특정 투여 방식에 따라 달라질 것이다. 바람직하게는, 제공된 조성물은 0.01-100 mg/kg(체중)/일의 화합물의 투여량이 이들 조성물을 투여받는 환자에게 투여될 수 있도록 제형화되어야 한다.
또한, 임의의 특정 환자에 대한 특정 투여량 및 치료 요법은 사용된 특정 화합물의 활성, 연령, 체중, 전반적 건강, 성별, 식단, 투여 시간, 배설 속도, 병용 약물, 및 치료 의사의 판단 및 치료 중인 특정 질환의 중증도를 포함하는 다양한 인자에 따라 달라질 것임을 이해해야 한다. 조성물 중 본 개시내용의 화합물의 양은 조성물 중의 특정 화합물에 따라서도 달라질 것이다.
사용 방법
본원에서 논의된 바와 같이(“정의” 섹션 참조), 본원에 기술된 화합물은 모든 입체이성질체, 호변이성질체, 또는 전술한 것 중 어느 하나의 약학적으로 허용 가능한 염 또는 전술한 것 중 어느 하나의 용매화물을 포함하는 것으로 이해되어야 한다. 따라서, 본 개시내용에서 제공된 방법 및 용도의 범주 또한 이러한 모든 형태를 사용하는 방법 및 용도를 포함하는 것으로 이해되어야 한다.
인간 치료에 유용한 것 외에도, 본원에 제공된 화합물은 포유류, 설치류 등을 포함하여 반려 동물, 희귀 반려 동물, 및 가축의 수의과적 치료에 유용할 수 있다. 예를 들어 말, 개, 및 고양이를 포함하는 동물을 본원에 제공된 화합물로 치료할 수 있다.
임의의 특정 이론에 구속되고자 하는 것은 아니지만, 다음을 주목한다: TREM2는 포식작용, 증식, 생존, 및 염증성 사이토카인의 생성 조절을 포함하여 여러 골수 세포 과정에 관여하였다. Ulrich 및 Holtzman 2016 문헌. 최근 몇 년 동안, TREM2는 여러 질환과 관련이 있었다. 예를 들어, TREM2 및 DAP12 모두에서의 돌연변이는 골 낭종, 근육 감소, 및 탈수초 표현형을 특징으로 하는 상염색체 열성 장애인 나수-하콜라병과 관련이 있었다. Guerreiro 등의 2013. 보다 최근에, TREM2 유전자의 변이체는 알츠하이머병(AD) 및 전두측두엽 치매를 포함하는 다른 형태의 치매의 위험 증가와 관련이 있었다. Jonsson 등의 2013 문헌, Guerreiro, Lohmann 등의 2013 문헌, 및 Jay, Miller 등의2015 문헌. 특히, R47H 변이체는 범 게놈 연구에서 후기 발병 AD에 대한 위험 증가와 연관이 있는 것으로 식별되었는데, (전 연령의 모집단을 대상으로 한) 조정된 오즈비(adjusted odds ratio)는 2.3으로, 알츠하이머병에 대한 ApoE와 유전적 연관성에 이어서 두 번째로 강력한 것이다. R47H 돌연변이는 TREM2 단백질의 세포외 lg V-세트 도메인에 상주하며, 지질 결합과 자멸 세포 및 Abeta의 흡수에 영향을 미치는 것으로 나타났는데(Wang 등의 2015 문헌; Yeh 등의 2016 문헌), 이는 질환과 관련된 기능 상실을 시사한다. 또한, R47H 돌연변이가 있는 AD 환자의 뇌와 R47H 돌연변이가 없는 AD 환자의 뇌의 사후 비교는 돌연변이의 담체에 대한 신규한 소교세포의 장벽기능 상실을 뒷받침하며, R47H 담체 소교세포는 플라크를 압축하고 이들의 확산을 제한하는 능력의 감소를 추정적으로 입증한다. Yuan 등의 2016 문헌. 프리온 질환, 다발성 경화증, 및 뇌졸중의 동물 모델에서 소교세포증 장애가 보고되었는데, 이는 TREM2가 병리 또는 중추 신경계의 손상에 대한 반응으로 소교세포증을 지지하는 데 중요한 역할을 할 수 있음을 시사한다. Ulrich 및 Holtzman 2016 문헌. 또한, TREM2의 녹다운은 시험관 내에서 a-syn-유도성 염증 반응을 악화시키고, 생체 내에서 AAV-SYN에 반응하여 도파민성 뉴런 상실을 악화시키는 것으로 나타났는데(파킨슨병 모델), 이는 손상된 소교 TREM2 신호전달이 소교 활성화 상태를 조절함으로써 신경퇴행을 악화시킨다는 것을 시사한다. Guo 등의 2019 문헌. 다양한 동물 모델 또한, 톨 유사 수용체(TLR) 신호전달이 대식세포에 의한 전염증성 사이토카인의 지속적인 발현을 통해 류마티스 관절염(RA)의 발병기전(pathogenesis)에 중요하다는 것을 시사한다. TREM2/DAP12를 통한 신호 전달은 MAPK(Erk1/2) 활성화를 감소시킴으로써 TLR 반응을 억제하는데, 이는 TREM2 활성화가 TLR 유발성 RA 발병기전의 음성 조절자로서 작용할 수 있음을 시사한다. Huang 및 Pope의 2009 문헌.
TREM2 활성의 결핍이 대식세포 및 소교세포 기능에 영향을 미친다는 것을 나타내는 데이터를 고려하면, 본원에 개시된 화합물은 전술한 것들과 같은 장애, 후술하는 실시예, 및 보다 일반적으로는 신경퇴행성 장애에 특히 유용하다.
일 측면에서, 본 발명은 인간 TREM2의 기능 상실과 관련된 병태를 치료하거나 예방하는 데 사용하기 위한 본 개시내용의 화합물, 또는 이의 호변이성질체, 또는 상기 화합물 또는 상기 호변이성질체의 약학적으로 허용 가능한 염, 또는 이의 약학적 조성물을 제공한다.
일 측면에서, 본 발명은 파킨슨병, 류마티스 관절염, 알츠하이머병, 나수-하콜라병, 전두측두엽 치매, 다발성 경화증, 프리온 질환, 또는 뇌졸중을 치료하거나 예방하는 데 사용하기 위한 본 개시내용의 화합물, 또는 이의 호변이성질체, 또는 상기 화합물 또는 상기 호변이성질체의 약학적으로 허용 가능한 염, 또는 이의 약학적 조성물을 제공한다.
일 측면에서, 본 발명은 인간 TREM2의 기능 상실과 연관된 병태를 치료하거나 예방하기 위한 의약을 제조하는 데 사용하기 위한 본 개시내용의 화합물, 또는 이의 호변이성질체, 또는 상기 화합물 또는 상기 호변이성질체의 약학적으로 허용 가능한 염, 또는 이의 약학적 조성물을 제공한다.
일 측면에서, 본 발명은 파킨슨병, 류마티스 관절염, 알츠하이머병, 나수-하콜라병, 전두측두엽 치매, 다발성 경화증, 프리온 질환, 또는 뇌졸중을 치료하거나 예방하기 위한 의약을 제조하는 데 사용하기 위한 본 개시내용의 화합물, 또는 이의 호변이성질체, 또는 상기 화합물 또는 상기 호변이성질체의 약학적으로 허용 가능한 염, 또는 이의 약학적 조성물을 제공한다.
또 다른 측면에서, 본 발명은 인간 TREM2의 기능 상실과 연관된 병태의 치료 또는 예방을 필요로 하는 대상체에서 이를 치료하거나 예방하는 방법을 제공하며, 상기 방법은 본 개시내용의 화합물, 또는 이의 호변이성질체, 또는 상기 화합물 또는 상기 호변이성질체의 약학적으로 허용 가능한 염, 또는 이의 약학적 조성물의 치료적 유효량을 대상체에게 투여하는 단계를 포함한다.
또 다른 측면에서, 본 발명은 파킨슨병, 류마티스 관절염, 알츠하이머병, 나수-하콜라병, 전두측두엽 치매, 다발성 경화증, 프리온 질환, 또는 뇌졸중의 치료 또는 예방을 필요로 하는 대상체에서 이를 치료하거나 예방하는 방법을 제공하며, 상기 방법은 본 개시내용의 화합물, 또는 이의 호변이성질체, 또는 상기 화합물 또는 상기 호변이성질체의 약학적으로 허용 가능한 염, 또는 이의 약학적 조성물의 치료적 유효량을 대상체에게 투여하는 단계를 포함한다.
CSF1R
CSF1R은 주로 최근까지 대식세포 콜로니 자극 인자(M-CSF)로도 알려진 사이토카인 콜로니 자극 인자 1(CSF-1)에 대한 세포 표면 수용체이며, 중추 신경계의 소교세포를 포함하여, 단핵 식세포의 생존, 증식, 분화, 및 기능을 조절한다. CSF1R은 고도로 당화된 세포외 리간드 결합 도메인, 막관통 도메인, 및 세포내 티로신-키나아제 도메인으로 구성된다. CSF-1이 CSF1R에 결합하면 수용체 동종이량체가 형성되고, 이어서 세포질 도메인, 특히 Syk에서 여러 개의 티로신 잔기가 자가 인산화된다. 뇌에서, CSF1R은 소교세포에서 주로 발현된다. CSF1R +/- 환자의 소교세포는 고갈되고 세포자멸사 증가가 나타나는 것으로 밝혀졌다(Oosterhof 등의 2018 문헌).
본 발명은 TREM2 작용제의 투여가 CSF1R에서 돌연변이를 갖는 세포에서 소교세포의 상실을 구제할 수 있다는 예상치 못한 발견에 관한 것이다. TREM2 작용제 항체 4D9는, 배지 내 M-CSF의 수준이 5 ng/mL로 감소될 때 ATP 발광(세포 수 및 활성의 척도)을 투여량 의존적 방식으로 증가시키고(Schlepckow 등의 EMBO Mol Med., 2020), TREM2 작용제 AL002c는, M-CSF가 완전히 배지로부터 제거될 때 ATP 발광을 증가시키는 것으로 이전에 나타났다(Wang 등의 J. Exp. Med.; 2020, 217(9): e20200785). 이러한 소견은 TREM2 작용성이 CSF1R 리간드의 농도 감소로 인한 CSF1R 신호 전달의 결핍을 보상할 수 있음을 시사한다. 아밀로이드 병리의 5xFAD 쥣과 알츠하이머병 모델에서, 야생형 동물의 뇌에서 소교세포를 거의 완전히 제거하는 CSF1R 억제제의 투여량은 아밀로이드 플라크 주위에 클러스터링된 생존 소교세포를 보여준다(Spangenberg 등의 2019 문헌 Nature Communications). 플라크 아밀로이드는 TREM2에 대한 리간드인 것으로 과거에 입증된 적이 있으며, 아밀로이드와 소교세포의 결합은 TREM2에 의존적인 것으로 나타났다(Condello 등의 2015 문헌 Nat Comm.). 본 발명은, CSF1R 억제제가 존재할 때 소교세포를 구제한 것이 TREM2의 활성화이고, 이러한 효과는 CSF1R 돌연변이로 인한 소교세포 상실로 고통받고 있는 환자에서도 관찰된다는 예상치 못한 발견에 관한 것이다. 이러한 발견은 이용 가능한 기술 분야에서 이전에 교지되거나 제안된 적이 없다.
현재까지, CSF1R 키나아제 도메인의 돌연변이가 CSF1R 활성을 감소시키는 세포에서 소교세포 상실을 구제할 수 있는 것이 CSF1R 억제제의 존재 또는 CSF1R 리간드의 결핍이 아니라 TREM2 작용성임을 보여준 이전 연구는 없었다. 또한, CSF1R 돌연변이로 인한 소교세포 상실을 TREM2 작용성을 통한 역전시키는 것이 CSF1R 돌연변이에 의해 야기된 및/또는 이와 연관된 질환 또는 장애를 치료하는 데 사용될 수 있다는 것을 교지하거나 시사한 이전 연구는 없었다.
축삭 구상체를 동반한 유전성 미만성 백질뇌병증(HDLS) 또는 색소성 정염성 백질이영양증(POLD)으로서 이전에 인식된, 축삭 구상체 및 착색된 아교세포를 동반한 성인 발병형 백질뇌병증(ALSP)은 상염색체 우성 중추신경계 질환으로서, 질환을 앓고 있는 환자에서 가변적인 거동, 인지, 및 운동 기능 변화의 형태로 그 징후가 나타난다. ALSP는 자기 공명 영상으로 볼 수 있는 반점형 뇌 백질 이상을 특징으로 한다. 그러나, 임상 증상 및 MRI의 변화는 ALSP에 특이적이지 않고, 나수-하콜라병(NHD) 및 AD를 포함하는 다른 신경학적 병태의 경우 흔한 것이어서, ALSP의 진단과 치료는 매우 어렵다.
최근의 연구를 통해 ALSP는 환자가 CSF1R의 키나아제 도메인에서 이형접합성 기능 상실 돌연변이를 지니는 멘델 장애라는 것이 밝혀졌는데, 이는 대식세포 콜로니-자극 인자(M-CSF)/CSF1R 축에 대한 신호 전달 수준이 감소하였음을 시사한다(Rademakers 등의 2012 문헌 Nat Genet; Konno 등의 2018 문헌 Neurology). 일 측면에서, 본 발명은 TREM2 경로의 활성화가 CSF1R +/- ALSP 환자에서 소교세포 상실을 구제함으로써, 소교세포 세포자멸사를 예방하여 ALSP 병태를 치료할 수 있다는 놀라운 발견에 관한 것이다.
일 측면에서, 본 발명은 콜로니 자극 인자 1 수용체(대식세포 콜로니 자극 인자 수용체/M-CSFR, 또는 분화 클러스터 115/CD115로도 알려진 CSF1R)의 기능 장애와 연관된 병태를 치료하거나 예방하는 데 사용하기 위한 본 개시내용의 화합물, 또는 이의 호변이성질체, 또는 상기 화합물 또는 상기 호변이성질체의 약학적으로 허용 가능한 염, 또는 이의 약학적 조성물을 제공한다.
일 측면에서, 본 발명은 착색된 아교세포를 동반한 성인 발병형 백질뇌병증(ALSP), 축삭 구상체를 동반한 유전성 미만성 백질뇌병증(HDLS), 색소성 정염성 백질이영양증(POLD), 소아 발병형 백질뇌병증, 소교세포의 선천성 부재, 또는 뇌 이상 신경퇴행 및 이상골경화증(BANDDOS)을 치료하거나 예방하는 데 사용하기 위한 본 개시내용의 화합물, 또는 이의 호변이성질체, 또는 상기 화합물 또는 상기 호변이성질체의 약학적으로 허용 가능한 염, 또는 이의 약학적 조성물을 제공한다.
일 측면에서, 본 발명은 CSF1R의 기능 장애와 연관된 병태를 치료하거나 예방하기 위한 의약을 제조하는 데 사용하기 위한 본 개시내용의 화합물, 또는 이의 호변이성질체, 또는 상기 화합물 또는 상기 호변이성질체의 약학적으로 허용 가능한 염, 또는 이의 약학적 조성물을 제공한다.
일 측면에서, 본 발명은 착색된 아교세포를 동반한 성인 발병형 백질뇌병증(ALSP), 축삭 구상체를 동반한 유전성 미만성 백질뇌병증(HDLS), 색소성 정염성 백질이영양증(POLD), 소아 발병형 백질뇌병증, 소교세포의 선천성 부재, 또는 뇌 이상 신경퇴행 및 이상골경화증(BANDDOS).을 치료하거나 예방하기 위한 의약을 제조하는 데 사용하기 위한 본 개시내용의 화합물, 또는 이의 호변이성질체, 또는 상기 화합물 또는 상기 호변이성질체의 약학적으로 허용 가능한 염, 또는 이의 약학적 조성물을 제공한다.
또 다른 측면에서, 본 발명은, CSF1R의 기능장애와 연관된 질환 또는 장애의 치료 또는 예방을 필요로 하는 대상체에서 이를 치료하거나 예방하는 방법을 제공하며, 상기 방법은 본 개시내용의 화합물, 또는 이의 호변이성질체, 또는 상기 화합물 또는 상기 호변이성질체의 약학적으로 허용 가능한 염, 또는 이의 약학적 조성물의 치료적 유효량을 대상체에게 투여하는 단계를 포함한다. 일부 실시예에서, 대상체는 CSF1R의 기능에 영향을 미치는 CSF1R 유전자에서의 돌연변이의 존재를 포함하는 진단에 기초하여 치료를 위해 선택된다. 일부 실시예에서, CSF1R 유전자에서의 돌연변이는 CSF1R 활성의 감소 또는 CSF1R 활성의 중단을 유발하는 돌연변이이다. 일부 실시예에서, 질환 또는 장애는 이형접합성 CSF1R 돌연변이에 의해 야기된다. 일부 실시예에서, 질환 또는 장애는 동형접합성 CSF1R 돌연변이에 의해 야기된다. 일부 실시예에서, 질환 또는 장애는 csf1r 유전자의 스플라이스 돌연변이에 의해 야기된다. 일부 실시예에서, 질환 또는 장애는 csf1r 유전자의 미스센스 돌연변이에 의해 야기된다. 일부 실시예에서, 질환 또는 장애는 CSF1R의 촉매 키나아제 도메인에서의 돌연변이에 의해 야기된다. 일부 실시예에서, 질환 또는 장애는 CSF1R의 면역글로불린 도메인에서의 돌연변이에 의해 야기된다. 일부 실시예에서, 질환 또는 장애는 CSF1R의 엑토도메인에서의 돌연변이에 의해 야기된다. 일부 실시예에서, 질환 또는 장애는 CSF1R의 활성 변화(예: 증가, 감소, 또는 중단)로 인한 질환 또는 장애이다. 일부 실시예에서, 질환 또는 장애는 CSF1R의 활성 감소 또는 중단에 의한 질환 또는 장애이다. 질환 또는 장애에서 변하는 CSF1R 관련 활성은 다음을 포함하지만 이에 한정되지는 않는다: 소교세포 기능의 감소 또는 상실; 소교세포 세포자멸사 증가; Src 신호전달의 감소; Syk 신호전달의 감소; 소교세포 증식의 감소; 세포 잔해에 대한 소교세포 반응의 감소; 식균작용의 감소; 및 자극에 대한 반응으로서 사이토카인의 방출 감소. 일부 실시예에서, 질환 또는 장애는 CSF1R에서의 기능 상실 돌연변이에 의해 야기된다. 일부 실시예에서, 기능 상실 돌연변이는 CSF1R 기능을 완전히 중단시킨다. 일부 실시예에서, 기능 상실 돌연변이는 CSF1R 기능을 부분적으로 상실시키거나 CSF1R 활성을 감소시킨다.
또 다른 측면에서, 본 발명은, 착색된 아교세포를 동반한 성인 발병형 백질뇌병증(ALSP), 축삭 구상체를 동반한 유전성 미만성 백질뇌병증(HDLS), 색소성 정염성 백질이영양증(POLD), 소아 발병형 백질뇌병증, 소교세포의 선천성 부재, 또는 뇌 이상 신경퇴행 및 이상골경화증(BANDDOS)의 치료 또는 예방을 필요로 하는 대상체에서 이를 치료하거나 예방하는 방법을 제공하며, 상기 방법은 본 개시내용의 화합물, 또는 이의 호변이성질체, 또는 상기 화합물 또는 상기 호변이성질체의 약학적으로 허용 가능한 염, 또는 이의 약학적 조성물의 치료적 유효량을 대상체에게 투여하는 단계를 포함한다. 일부 실시예에서, 상기 방법은 HDLS 및 POLD 둘 다를 포괄하고 대체하는 명칭인 ALSP를 치료하거나 예방한다. 일부 실시예에서, 질환 또는 장애는 CSF1R에서의 동형접합성 돌연변이이다. 일부 실시예에서, 상기 방법은 소아 발병형 백질뇌병증을 치료하거나 예방한다. 일부 실시예에서, 상기 방법은 소교세포의 선천성 부재를 치료하거나 예방한다. 일부 실시예에서, 상기 방법은 뇌 이상 신경퇴행 및 이상골경화(BANDDOS)를 치료하거나 예방한다.
또 다른 측면에서 본 발명은, 나수-하콜라병, 알츠하이머병, 전두측두엽 치매, 다발성 경화증, 길랑-바레 증후군, 근위축성 측색 경화증(ALS), 파킨슨병, 외상성 뇌손상, 척수 손상, 전신 홍반성 루푸스, 류마티스 관절염, 프리온 질환, 뇌졸중, 골다공증, 골화석증, 골경화증, 골격 이형성증, 골형성이상, 파일병(Pyle disease), 피질하 경색 및 백질뇌병증을 동반한 대뇌 상염색체 우성 동맥병증, 피질하 경색 및 백질뇌병증을 동반한 대뇌 상염색체 열성 동맥병증, 뇌망막 혈관병증, 또는 이염성 백질이영양증을 치료하거나 예방하는 방법을 제공하며, 여기서 전술한 질환 또는 장애 중 어느 하나는 CSF1R 기능장애를 나타내거나 CSF1R의 기능에 영향을 미치는 유전자에서의 돌연변이를 갖는 환자에서 존재하고, 상기 방법은 본 개시내용의 화합물, 또는 이의 호변이성질체, 또는 상기 화합물 또는 상기 호변이성질체의 약학적으로 허용 가능한 염, 또는 이의 약학적 조성물의 치료적 유효량을 대상체에게 투여하는 단계를 포함한다.
ABCD1
ABCD1 유전자는 부신백질이영양증 단백질(ALDP)을 생산하도록 지시한다. ABCD1(ALDP)은 Xq28에 맵핑된다. ABCD1은 ATP 결합 카세트(ABC) 수송체 상과의 구성원이다. 상과는 대사 산물, 지질과 스테롤, 및 약물을 포함하여 매우 다양한 기질을 세포외 및 세포내 막에 걸쳐 전위시키는 막 단백질을 함유한다. ALDP는 퍼옥시좀(peroxisome)이라 불리는 세포 구조의 막 내에 위치한다. 퍼옥시좀은 세포 내의 작은 주머니로, 많은 유형의 분자를 가공한다. ALDP는 매우 긴-사슬 지방산(VLCFA)이라 불리는 지방 군을 퍼옥시좀 내로 운반하고, 이들은 퍼옥시좀 내에서 분해된다. ABCD1은 소교세포에서 고도로 발현되므로, 소교세포 기능장애 및 다른 세포 유형과의 밀접한 상호작용이 신경퇴행성 과정에 적극적으로 참여하는 것이 가능하다(Gong 등의 Annals of Neurology. 2017; 82(5):813-827.). 심각한 소교세포 상실 및 손상은 ABCD1 돌연변이를 가진 대뇌형 x-연관 ALD(cALD) 환자에서의 초기 특징인 것으로 나타났다(Bergner 등의 Glia. 2019; 67: 1196-1209). 또한, ABCD1-결핍은, 항염증 반응의 불완전한 확립에 반영되는 골수 계통 세포의 가소성 손상을 초래하여, 뇌 부신백질이영양증에서 파괴적이고 급속히 진행되는 탈수초화에 기여할 가능성이 있는 것으로 나타났다(Weinhor 등의 2018 문헌 BRAIN: 141; 2329-2342). 이러한 소견은 X-연관 부신백질이영양증 환자에서 수초 파괴를 예방하거나 중단시키기 위한 중요한 치료 표적으로서의 소교세포/단핵구/대식세포를 강조한다.
본 발명은 TREM2 작용제의 투여가 ABCD1 유전자에서 돌연변이를 갖는 세포에서 소교세포의 상실을 구제할 수 있다는 예상치 못한 발견에 관한 것이다. TREM2 작용제 항체 4D9는, 배지 내 M-CSF의 수준이 5 ng/mL로 감소될 때 ATP 발광(세포 수 및 활성의 척도)을 투여량 의존적 방식으로 증가시키고(Schlepckow 등의 EMBO Mol Med., 2020), TREM2 작용제 AL002c는, M-CSF가 완전히 배지로부터 제거될 때 ATP 발광을 증가시키는 것으로 이전에 나타났다(Wang 등의 J. Exp. Med.; 2020, 217(9): e20200785). 이러한 소견은 TREM2 작용성이 ABCD1 기능의 결핍을 보상하여 소교세포의 활성화, 증식, 주화성을 지속시키고, 항염증 환경을 유지시키고, ABCD1의 감소 및 VLCFA의 축적에 의해 야기되는 성상세포증을 감소시킬 수 있음을 시사한다. 본 발명은, ABCD1 돌연변가 존재하고 VLCFA가 증가할 때 TREM2가 소교세포를 구제할 수 있고, 이러한 효과는 ABCD1 돌연변이로 인한 소교세포 상실로 고통받고 있는 환자에서도 관찰될 수 있다는 예상치 못한 발견에 관한 것이다. 이러한 발견은 이용 가능한 기술 분야에서 이전에 교지되거나 제안된 적이 없다.
현재까지, TREM2 작용성이 ABCD1에서의 돌연변이가 존재하고 VLCFA가 증가하는 세포에서 소교세포 상실을 구제할 수 있음을 보여준 이전 연구는 없었다. ABCD1 돌연변이로 인한 소교세포 상실을 TREM2 작용성을 통한 역전시키는 것이 ABCD1 돌연변이에 의해 야기된 및/또는 이와 연관된 질환 또는 장애를 치료하는 데 사용될 수 있다는 것을 교지하거나 시사한 이전 연구는 없었다.
일 측면에서, 본 발명은, ATP-결합 카세트 수송체 1(ABCD1, ATP-binding cassette transporter 1)의 기능장애와 연관된 병태를 치료하거나 예방하는 데 사용하기 위한 본 개시내용의 화합물, 또는 이의 호변이성질체, 또는 상기 화합물 또는 상기 호변이성질체의 약학적으로 허용 가능한 염, 또는 이의 약학적 조성물을 제공한다.
일 측면에서, 본 발명은 X-연관 부신백질이영양증(x-ALD), 구형 세포 백질이영양증(크라베병으로도 알려짐), 이염성 백질이영양증(MLD), 피질하 경색 및 백질뇌병증을 동반한 대뇌 상염색체 우성 동맥병증(CADASIL), 백질 소실 질환(VWM), 알렉산더병, 취약한 X-연관 진전 운동실조 증후군(FXTAS), 성인 발병형 상염색체 우성 백질이영양증(ADLD), 및 X-연관 샤르코-마리-투스 질환(CMTX)을 치료하거나 예방하는 데 사용하기 위한 본 개시내용의 화합물, 또는 이의 호변이성질체, 또는 상기 화합물 또는 상기 호변이성질체의 약학적으로 허용 가능한 염, 또는 이의 약학적 조성물을 제공한다.
일 측면에서, 본 발명은 ABCD1의 기능장애와 연관된 병태를 치료하거나 예방하기 위한 의약을 제조하는 데 사용하기 위한, 본 개시내용의 화합물, 또는 이의 호변이성질체, 또는 상기 화합물 또는 상기 호변이성질체의 약학적으로 허용 가능한 염, 또는 이의 약학적 조성물을 제공한다.
일 측면에서, 본 발명은 X-연관 부신백질이영양증(x-ALD), 구형 세포 백질이영양증(크라베병으로도 알려짐), 이염성 백질이영양증(MLD), 피질하 경색 및 백질뇌병증을 동반한 대뇌 상염색체 우성 동맥병증(CADASIL), 백질 소실 질환(VWM), 알렉산더병, 취약한 X-연관 진전 운동실조 증후군(FXTAS), 성인 발병형 상염색체 우성 백질이영양증(ADLD), 및 X-연관 샤르코-마리-투스 질환(CMTX)을 치료하거나 예방하기 위한 의약을 제조하는 데 사용하기 위한, 본 개시내용의 화합물, 또는 이의 호변이성질체, 또는 상기 화합물 또는 상기 호변이성질체의 약학적으로 허용 가능한 염, 또는 이의 약학적 조성물을 제공한다.
또 다른 측면에서, 본 발명은 ABCD1의 기능장애와 연관된 질환 또는 장애의 치료 또는 예방을 필요로 하는 대상체에서 이를 치료하거나 예방하는 방법을 제공하며, 상기 방법은 본 개시내용의 화합물, 또는 이의 호변이성질체, 또는 상기 화합물 또는 상기 호변이성질체의 약학적으로 허용 가능한 염, 또는 이의 약학적 조성물의 치료적 유효량을 대상체에게 투여하는 단계를 포함한다. 일부 실시예에서, 환자는 ABCD1의 기능에 영향을 미치는 ABCD1 유전자에서의 돌연변이의 존재를 포함하는 진단에 기초하여 치료를 위해 선택된다. 일부 실시예에서, ABCD1 유전자에서의 돌연변이는 ABCD1 활성의 감소 또는 ABCD1 활성의 중단을 유발하는 돌연변이이다. 일부 실시예에서, 질환 또는 장애는 이형접합성 ABCD1 돌연변이에 의해 야기된다. 일부 실시예에서, 질환 또는 장애는 동형접합성 ABCD1 돌연변이에 의해 야기된다. 일부 실시예에서, 질환 또는 장애는 ABCD1 유전자에서의 스플라이스 돌연변이에 의해 야기된다. 일부 실시예에서, 질환 또는 장애는 ABCD1 유전자에서의 미스센스 돌연변이에 의해 야기된다. 일부 실시예에서, 질환 또는 장애는 ABCD1의 활성 변화(예: 증가, 감소, 또는 중단)에 기인하는 질환 또는 장애이다. 일부 실시예에서, 질환 또는 장애는 ABCD1의 활성 감소 또는 중단에 기인하는 질환 또는 장애이다. 질환 또는 장애에서 변하는 ABCD1 관련 활성은, 지방산 및/또는 지방 아실-CoA의 퍼옥시좀 유입 및 부신백질이영양증 단백질(ALDP)의 생산을 포함하지만 이에 한정되지는 않는다. 일부 실시예에서, 질환 또는 장애는 ABCD1에서의 기능 상실 돌연변이에 의해 야기된다. 일부 실시예에서, 기능 상실 돌연변이는 ABCD1 기능을 완전히 중단시킨다. 일부 실시예에서, 기능 상실 돌연변이는 ABCD1 기능을 부분적 상실시키거나 ABCD1 활성을 감소시킨다. 일부 실시예에서, 질환 또는 장애는 ABCD1에서의 동형접합성 돌연변이에 의해 야기된다. 일부 실시예에서, 질환 또는 장애는 신경퇴행성 장애이다. 일부 실시예에서, 질환 또는 장애는 ABCD1 기능 장애에 의해 야기된 및/또는 이와 연관된 신경퇴행성 장애이다. 일부 실시예에서, 질환 또는 장애는 면역학적 장애이다. 일부 실시예에서, 질환 또는 장애는 ABCD1 기능 장애에 의해 야기된 및/또는 이와 연관된 면역학적 장애이다.
또 다른 측면에서, 본 발명은 X-연관 부신백질이영양증(x-ALD), 구형 세포 백질이영양증(크라베병으로도 알려짐), 이염성 백질이영양증(MLD), 피질하 경색 및 백질뇌병증을 동반한 대뇌 상염색체 우성 동맥병증(CADASIL), 백질 소실 질환(VWM), 알렉산더병, 취약한 X-연관 진전 운동실조 증후군(FXTAS), 성인 발병형 상염색체 우성 백질이영양증(ADLD), 및 X-연관 샤르코-마리-투스 질환(CMTX)의 치료 또는 예방을 필요로 하는 대상체에서 이를 치료하거나 예방하는 방법을 제공하며, 상기 방법은 본 개시내용의 화합물, 또는 이의 호변이성질체, 또는 상기 화합물 또는 상기 호변이성질체의 약학적으로 허용 가능한 염, 또는 이의 약학적 조성물의 치료적 유효량을 대상체에게 투여하는 단계를 포함한다. 일부 실시예에서, 전술한 질환 중 어느 하나는 ABCD1 기능장애를 나타내거나 ABCD1의 기능에 영향을 미치는 유전자에서 돌연변이를 갖는 환자에서 존재한다. 일부 실시예에서, 상기 방법은 X-연관 부신백질이영양증(x-ALD)을 치료하거나 예방한다. 일부 실시예에서, x-ALD는 대뇌형 x-연관 ALD(cALD)이다. 일부 실시예에서, 상기 방법은 환자가 ABCD1 기능에 영향을 미치는 하나 이상의 ABCD1 유전자에서 돌연변이를 갖는 것으로 밝혀진 애디슨병을 치료하거나 예방한다. 일부 실시예에서, 상기 방법은 환자가 ABCD1에서 기능상실 돌연변이를 갖는 애디슨병을 치료하거나 예방한다.
또 다른 측면에서, 본 발명은 나수-하콜라병, 알츠하이머병, 전두측두엽 치매, 다발성 경화증, 길랑-바레 증후군, 근위축성 측색 경화증(ALS), 또는 파키슨병을 치료하거나 예방하는 방법을 제공하며, 여기서 전술한 질환 또는 장애 중 어느 하나는 ABCD1 기능장애를 나타내거나 ABCD1의 기능에 영향을 미치는 유전자에서의 돌연변이를 갖는 환자에서 존재하고, 상기 방법은 본 개시내용의 화합물, 또는 이의 호변이성질체, 또는 상기 화합물 또는 상기 호변이성질체의 약학적으로 허용 가능한 염, 또는 이의 약학적 조성물의 치료적 유효량을 대상체에게 투여하는 단계를 포함한다.
자폐 스펙트럼 장애
TREM2 결핍 마우스는 자폐 스펙트럼 장애(ASD)를 연상시키는 증상을 나타내는 것으로 밝혀졌다(Filipello 등의 2018 문헌 Immunity, 48, 979-991). 또한, 자가포식성 Aatg7 유전자의 소교세포 고갈은 시냅스 가지치기(synaptic pruning)에 결함을 초래하고, 수지상 척추 밀도를 증가시키고, ASD를 나타내는 비정상적인 사회적 상호작용 및 반복적인 거동을 초래한다(Kim 등의 2017 문헌 Molecular Psychiatry, 22, 1576-1584). 추가 연구에 따르면, 손상된 시냅스 가지치기에 의해 야기되었을 가능성이 있는, 사후 ASD 뇌에서 검출된 수지상 스핀 밀도의 증가가 회로 저연결성 및 거동 결함을 초래하고, 다수의 신경발달 질환의 잠재적 기원인 것으로 나타났다(Tang 등의 2014 문헌 Neuron, 83, 1131-1143). 임의의 특정 이론에 제한되고자 하는 것은 아니지만, 이러한 소견은 TREM2 활성화가 소교세포 고갈을 역전시켜, ASD와 같은 신경발달 질환의 중심인 결함 있는 시냅스 가지치기를 바로잡을 수 있음을 시사한다. 본 발명은, 본 발명의 화합물을 사용하는 TREM2의 활성화가 ASD를 앓고 있는 대상체에서 소교세포를 구제할 수 있다는 예상치 못한 발견에 관한 것이다. 이러한 발견은 이용 가능한 기술 분야에서 이전에 교지되거나 제안된 적이 없다.
또 다른 측면에서, 본 발명은 자폐증 또는 자폐 스펙트럼 장애를 치료하는 데 사용하기 위한 본 개시내용의 화합물, 또는 이의 호변이성질체, 또는 상기 화합물 또는 상기 호변이성질체의 약학적으로 허용 가능한 염, 또는 이의 약학적 조성물을 제공한다.
또 다른 측면에서, 본 발명은 자폐증 또는 자폐 스펙트럼 장애를 치료하기 위한 의약의 제조에 사용하기 위한 본 개시내용의 화합물, 또는 이의 호변이성질체, 또는 상기 화합물 또는 상기 호변이성질체의 약학적으로 허용 가능한 염, 또는 이의 약학적 조성물을 제공한다.
또 다른 측면에서, 본 발명은 자폐증 또는 자폐 스펙트럼 장애의 치료를 필요로 하는 대상체에서 이를 치료하는 방법을 제공하며, 상기 방법은 본 개시내용의 화합물, 또는 이의 호변이성질체, 또는 상기 화합물 또는 상기 호변이성질체의 약학적으로 허용 가능한 염, 또는 이의 약학적 조성물의 치료적 유효량을 대상체에게 투여하는 단계를 포함한다. 일부 실시예에서, 상기 방법은 자폐증을 치료한다. 일부 실시예에서, 상기 방법은 아스퍼거 증후군을 치료한다.
일부 실시예에서, 본 개시내용은 TREM2의 활성을 증가시키는 방법을 제공하며, 상기 방법은 본 개시내용의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염을 TREM2와 접촉시키는 단계를 포함한다. 일부 실시예에서, 접촉시키는 단계는 시험관 내에서 이루어진다. 일부 실시예에서, 접촉시키는 단계는 생체 내에서 이루어진다. 일부 실시예에서, TREM2는 인간 TREM2이다.
병용 요법
치료 대상 특정 병태 또는 질환에 따라, 해당 병태를 치료하기 위해 일반적으로 투여되는 추가 치료제가 본 개시내용의 화합물 및 조성물과 병용으로 투여될 수 있다. 본원에서 사용되는 바와 같이, 특정 질환 또는 병태를 치료하기 위해 일반적으로 투여되는 추가 치료제는 “치료 중인 질환 또는 병태에 적절한” 것으로 알려져 있다.
소정의 실시예에서, 제공된 조합 또는 이의 조성물은 또 다른 치료제와 병용으로 투여된다.
일부 실시예에서, 본 개시내용은 개시된 질환 또는 병태를 치료하는 방법을 제공하며, 상기 방법은 본원에 개시된 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염의 유효량을 이를 필요로 하는 환자에게 투여하는 단계, 및 본원에 기술된 것과 같은 하나 이상의 추가 치료제의 유효량을 동시에 또는 순차적으로 공동 투여하는 단계를 포함한다. 일부 실시예에서, 상기 방법은 하나의 추가 치료제를 공동 투여하는 단계를 포함한다. 일부 실시예에서, 상기 방법은 2개의 추가 치료제를 공동 투여하는 단계를 포함한다. 일부 실시예에서, 개시된 화합물과 추가 치료제의 조합은 상승적으로 작용한다.
본 개시내용의 조합과 조합될 수 있는 제제의 예는 다음을 포함하지만 이에 한정되지는 않는다: 파킨슨병, 류마티스 관절염, 알츠하이머병, 나수-하콜라병, 전두측두엽 치매, 다발성 경화증, 프리온 질환, 또는 뇌졸중에 대한 치료제.
본원에서 사용되는 바와 같이, 용어 “조합(combination, combined)” 및 이와 관련된 용어는 본 개시에 따라 치료제들이 동시에 또는 순차적으로 투여되는 것을 지칭한다. 예를 들어, 본 개시내용의 조합은 또 다른 치료제와 별도의 단위 투여 형태로 동시에 또는 순차적으로 투여되거나, 단일 단위 투여 형태로 함께 투여될 수 있다.
본 개시내용의 조성물에 존재하는 추가 치료제의 양은 해당 치료제를 유일한 활성제로서 포함하는 조성물로 정상적으로 투여될 양을 초과하지는 않을 것이다. 바람직하게는, 현재 개시된 조성물 중 추가 치료제의 양은 해당 제제를 유일한 치료적 활성제로서 포함하는 조성물에 정상적으로 존재하는 양의 약 50% 내지 100%의 범위일 것이다.
하나 이상의 다른 치료제는 다중 투여 요법의 일부로서, 본 개시내용의 화합물 또는 조성물과 별도로 투여될 수 있다. 대안적으로, 하나 이상의 다른 치료제는 본 개시내용의 화합물과 함께 단일 조성물로 혼합된 단일 투여 형태의 일부일 수 있다. 다중 투여 요법으로서 투여되는 경우, 하나 이상의 다른 치료제 및 본 개시내용의 화합물 또는 조성물은 동시에, 순차적으로, 또는 서로 일정 시간 간격을 두고, 예를 들어 서로 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 18, 20, 21, 22, 23, 또는 24시간 이내에 투여될 수 있다. 일부 실시예에서, 하나 이상의 다른 치료제 및 본 개시내용의 화합물 또는 조성물은 다중 투여 요법으로서 24시간을 초과하는 시간 간격을 두고 투여된다.
일 실시예에서, 본 개시내용은 제공된 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염 및 하나 이상의 추가 치료제를 포함하는 조성물을 제공한다. 치료제는 제공된 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염과 함께 투여되거나, 제공된 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염의 투여 전 또는 후에 투여될 수 있다. 적절한 치료제는 이하에서 더욱 상세히 기술된다. 소정의 실시예에서, 제공된 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염은 치료제보다 최대 5분, 10분, 15분, 30분, 1시간, 2시간, 3시간, 4시간, 5시간, 6시간, 7시간, 8시간, 9시간, 10시간, 11시간, 12시간, 13시간, 14시간, 15시간, 16시간, 17시간, 또는 18시간 전에 투여될 수 있다. 다른 실시예에서, 제공된 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염은 치료제보다 최대 5분, 10분, 15분, 30분, 1시간, 2시간, 3시간, 4시간, 5시간, 6시간, 7시간, 8시간, 9시간, 10시간, 11시간, 12시간, 13시간, 14시간, 15시간, 16시간, 17시간, 또는 18시간 후에 투여될 수 있다.
정의
다음의 정의는 본 개시내용의 범주를 이해하는 것을 돕기 위해 제공된다.
달리 명시되지 않는 한, 본 명세서 또는 청구범위에서 사용된 성분의 양, 반응 조건 등을 표현하는 모든 숫자는 모든 경우에 용어 “약”에 의해 수식되는 것으로 이해해야 한다. 따라서, 반대로 표시되지 않는 한, 다음의 명세서 및 첨부된 청구범위에 제시된 수치 파라미터는 각각의 시험 측정에서 발견되는 표준 편차에 따라 달라질 수 있는 근사치이다.
본원에서 사용되는 바와 같이, 임의의 변수가 화학식에서 1회를 초과하여 발생하는 경우, 각각의 발생에 대한 정의는 다른 모든 발생 시의 정의와 독립적이다. 화학 구조 및 화학 명칭이 충돌하는 경우, 화학 구조가 화합물의 동일성을 결정한다.
본원에서 사용되는 바와 같이, 달리 명시되지 않는 한, 다음의 정의가 적용된다. 본 개시내용의 목적을 위해, 화학 원소는 CAS 버전, Handbook of Chemistry 및 Physics(101 개정판)의 원소 주기율표에 따라 식별된다. 또한, 유기 화학의 일반 원리는 문헌[“Organic Chemistry”, Thomas Sorrell, University Science Books, Sausalito: 2005], 및 문헌[“March’s Advanced Organic Chemistry: Reactions Mechanisms 및 Structure”, 8th Ed., Ed.: Smith, M.B., John Wiley & Sons, New York: 2019]에 기술되어 있으며, 이들의 전체 내용은 참조로서 본원에 통합된다.
입체이성질체
본 개시내용의 화합물은, 예를 들어 이중 결합, 하나 이상의 비대칭 탄소 원자, 및 회전이 제약된 결합을 함유할 수 있으므로, 이중 결합 이성질체(즉, 기하 이성질체(E/Z)), 거울상이성질체, 부분 입체이성질체, 및 회전장애이성질체와 같은 입체이성질체로서 존재할 수 있다. 따라서, 본 개시내용의 범주는, 입체화학이 구체적으로 식별되지 않는 한, 도시된 화합물의 모든 가능한 입체이성질체를 포함하는 것으로 이해되어야 하며, 이에는 (전체적으로 또는 부분적으로) 본원에 개시된 임의의 화학 구조의 입체이성질체적 순수 형태(예를 들어 기하학적 순수, 거울상이성질체적 순수, 부분입체이성질체적 순수, 및 회전장애이성질체적 순수 형태) 및 입체이성질체 혼합물(예를 들어 기하 이성질체의 혼합물, 거울상이성질체 혼합물, 부분 입체이성질체 혼합물, 및 회전장애이성질체 혼합물, 또는 전술한 것 중 어느 하나의 혼합물)이 포함된다.
구조 또는 구조의 일부분의 입체화학이 예를 들어 굵은 선 또는 파선으로 표시되지 않는 경우, 구조 또는 구조의 일부분은 구조의 모든 입체이성질체를 포함하는 것으로 해석되어야 한다. 구조 또는 구조의 일부분의 입체화학이 예를 들어 굵은 선 또는 파선으로 표시되는 경우, 구조 또는 구조의 일부분은 구조의 표시된 입체이성질체만을 포함하는 것으로 해석되어야 한다. 예를 들어, (1R)-1-메틸-2-(트리플루오로메틸)시클로헥산은 (1R,2R)-1-메틸-2-(트리플루오로메틸)시클로헥산 및 (1R,2S)-1-메틸-2-(트리플루오로메틸)시클로헥산을 포함하는 것을 의미한다. 물결선으로 도시된 결합은 두 입체이성질체가 모두 포함된다는 것을 나타낸다. 이는 분자의 결합에 수직으로 도시된 물결선과 혼동되어서는 안되는데, 결합에 수직인 물결선은 분자의 나머지 부분에 대한 기의 부착점을 나타낸다.
본원에서 사용되는 용어 “입체이성질체” 또는 “입체이성질체적 순수” 화합물은 해당 화합물의 다른 입체이성질체가 실질적으로 없는, 화합물의 하나의 입체이성질체(예를 들어, 기하 이성질체, 거울상이성질체, 부분 입체이성질체, 및 회전장애이성질체)를 지칭한다. 예를 들어, 하나의 키랄 중심을 갖는 입체이성질체 순수 화합물은 화합물의 거울상인 거울상이성질체가 실질적으로 없을 것이고, 2개의 키랄 중심을 갖는 입체이성질체 순수 화합물은 화합물의 다른 거울상이성질체 및 부분 입체이성질체가 실질적으로 없을 것이다. 전형적인 입체이성질체 순수 화합물은 화합물의 약 80중량% 초과의 하나의 입체이성질체 및 화합물의 약 20중량% 이하의 다른 입체이성질체, 화합물의 약 90중량% 초과의 하나의 입체이성질체 및 화합물의 약 10중량% 이하의 다른 입체이성질체, 화합물의 약 95중량% 초과의 하나의 입체이성질체 및 화합물의 약 5중량% 이하의 다른 입체이성질체, 또는 화합물의 약 97중량% 초과의 하나의 입체 이성질체 및 화합물 약 3% 이하의 다른 입체이성질체를 포함한다.
본 개시내용은 또한 본원에 개시된 임의의 화합물의 입체이성질체 순수 형태를 포함하는 약학적 조성물 및 입체이성질체 순수 형태의 용도를 포함한다. 또한, 본 개시내용은 본원에 개시된 임의의 화합물의 입체이성질체 혼합물을 포함하는 약학적 조성물 및 상기 약학적 조성물 또는 입체이성질체 혼합물의 용도를 포함한다. 이들 입체이성질체 또는 이의 혼합물은 당업계에 잘 알려진 방법 및 본원에 개시된 방법에 따라 합성될 수 있다. 입체이성질체의 혼합물은 키랄 컬럼 또는 키랄 용해제와 같은 표준 기술을 사용하여 용해될 수 있다. 예를 들어 Jacques 등의 문헌[Enantiomers, Racemates 및 Resolutions (Wiley-Interscience, New York, 1981)]; Wilen 등의 문헌[Tetrahedron 33:2725; Eliel, Stereochemistry of Carbon Compounds (McGraw-Hill, NY, 1962)]; 및 Wilen의 문헌[Tables of Resolving Agents 및 Optical Resolutions, page 268 (Eliel, Ed., Univ. of Notre Dame Press, Notre Dame, IN, 1972)] 참조.
호변이성질체
당업자에 의해 알려진 바와 같이, 본원에 개시된 소정의 화합물은 하나 이상의 호변이성질체 형태로 존재할 수 있다. 하나의 화학 구조가 하나의 호변이성질체 형태를 나타내는 데에만 사용될 수 있기 때문에, 편의상, 주어진 구조식의 화합물을 지칭하는 것은 상기 구조식의 다른 호변이성질체를 포함하는 것으로 이해될 것이다. 예를 들어, 다음은 식 I의 화합물의 호변이성질체를 예시한 것으로서, 식 중 고리 A는 고리 A가 융합되는 6원 고리 시스템과 함께 식 의 이환 고리 시스템을 형성하며, 식 중 R9는 H이다:
따라서, 본 개시내용의 범주는 본원에 개시된 화합물의 모든 호변이성질체 형태를 포함하는 것으로 이해되어야 한다.
동위원소 표지된 화합물
또한, 본 개시내용의 범주는 본원에 개시된 화합물의 모든 약학적으로 허용 가능한 동위원소 표지된 화합물, 예컨대 식 I의 화합물을 포함하며, 식 중 하나 이상의 원자는 동일한 원자 수를 갖되 원자 질량 또는 질량 수는 자연에서 일반적으로 발견되는 원자 질량 또는 질량 수와는 상이한 원자로 치환된다. 본원에 개시된 화합물에 포함시키기에 적합한 동위원소의 예는 2H 및 3H와 같은 수소 동위원소, 11C, 13C, 및 14C와 같은 탄소 동위원소, 36Cl과 같은 염소 동위원소, 18F와 같은 불소 동위원소, 123I 및 125I와 같은 요오드 동위원소, 13N 및 15N과 같은 질소 동위원소, 15O, 17O, 및 18O와 같은 산소 동위원소, 32P와 같은 인산 동위원소, 및 35S와 같은 황 동위원소를 포함한다. 식 I의 소정의 동위원소 표지된 화합물, 예를 들어 방사성 동위원소를 포함하는 화합물은 약물 및/또는 기질 조직 분포 연구에 유용하다. 방사성 동위원소 트리튬(3H) 및 탄소-14(14C)는, 이들이 쉽게 혼입될 수 있고 손쉬운 검출 수단이라는 점을 고려했을 때 이러한 목적에 특히 유용하다. 중수소(2H 또는 D)와 같은 동위원소로 치환하는 것은 보다 큰 대사 안정성, 예를 들어 생체내 반감기의 증가 또는 요구 투여량의 감소로 인한 특정 치료 이점을 제공할 수 있으며, 따라서 일부 상황에서 유리할 수 있다. 11C, 18F, 15O, 및 13N과 같은 양전자 방출 동위원소로 치환하는 것은, 예를 들어 표적 점유율을 검사하기 위한 양전자 방출 단층촬영(PET) 연구에 유용할 수 있다. 본원에 개시된 화합물의 동위원소-표지된 화합물은 일반적으로 당업자에게 공지된 통상의 기술에 의해 제조되거나, 이전에 사용된 비-표지된 시약 대신에 적절한 동위원소-표지된 시약을 사용하여 첨부된 일반 합성 반응식 및 예에 기술된 것과 유사한 방법에 의해 제조될 수 있다.
용매화물
전술한 바와 같이, 본원에 개시된 화합물 및 이의 입체이성질체, 호변이성질체, 및 동위원소 표지된 형태, 또는 전술한 것 중 어느 하나의 약학적으로 허용 가능한 염은 용매화된 형태 또는 용매화되지 않은 형태로 존재할 수 있다.
본원에서 사용되는 바와 같이, 용어 “용매화물”은 본원에 기술된 것과 같은 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한, 염 및 하나 이상의 약학적으로 허용 가능한 용매 분자의 화학량론적 또는 비-화학량론적 양을 포함하는 분자 복합체를 지칭한다. 용매가 물인 경우, 용매화물은 “수화물”로서 지칭된다.
따라서, 본 개시내용의 범주는 본원에 개시된 화합물 및 이의 입체이성질체, 호변이성질체, 및 동위원소 표지된 형태, 또는 전술한 것 중 어느 하나의 약학적으로 허용 가능한 염의 모든 용매를 포함하는 것으로 이해되어야 한다.
기타 정의
본 섹션에서는 본원에 개시된 화합물, 조성물, 및 용도의 범주를 설명하는 데 사용되는 추가 용어가 정의될 것이다.
본원에서 사용되는 바와 같이, 용어 “지방족” 또는 “지방족기”는 완전히 포화되거나 하나 이상의 불포화 단위를 함유하는 직쇄(즉, 비분지형) 또는 분지형, 치환 또는 비치환된 탄화수소 사슬, 또는 완전히 포화되거나 하나 이상의 불포화 단위를 함유하지만, 분자의 나머지 부분에 대한 단일 부착 지점을 갖는, 방향족이 아닌(본원에서 “카르보시클”, “시클로지방족” 또는 “시클로알킬”로도 지칭됨) 단환 탄화수소 또는 이환 탄화수소를 의미한다. 달리 명시되지 않는 한, 지방족기는 1 내지 6개의 지방족 탄소 원자를 함유한다. 일부 실시예에서, 지방족기는 1 내지 5개의 지방족 탄소 원자를 함유한다. 다른 실시예에서, 지방족기는 1 내지 4개의 지방족 탄소 원자를 함유한다. 또 다른 실시예에서, 지방족기는 1 내지 3개의 지방족 탄소 원자를 함유하고, 또 다른 실시예에서, 지방족기는 1 내지 2개의 지방족 탄소 원자를 함유한다. 일부 실시예에서, “시클로지방족”(또는 “카르보시클” 또는 “시클로알킬”)은 완전히 포화되거나 하나 이상의 불포화 단위를 함유하지만, 분자의 나머지 부분에 대한 단일 부착 지점을 갖는, 방향족이 아닌 단환 C3-C6 탄화수소를 지칭한다. 적절한 지방족 기는 선형 또는 분지형, 치환 또는 비치환 알킬, 알케닐, 알키닐기 및 이들의 혼성체, 예컨대 (시클로알킬)알킬, (시클로알케닐)알킬 또는 (시클로알킬)알케닐을 포함하지만, 이에 한정되지 않는다.
본원에서 사용되는 바와 같이, 용어 “이환 고리” 또는 “이환 고리 시스템”은 임의의 이환 고리 시스템, 즉 고리 시스템의 2개의 고리 사이에 공통인 하나 이상의 원자를 갖는, 탄소환 또는 헤테로환의, 포화되거나 하나 이상의 불포화 단위를 갖는 임의의 이환 고리 시스템을 지칭한다. 따라서, 상기 용어는 오르토-융합 또는 스피로환과 같은 임의의 허용 가능한 고리 융합을 포함한다. 본원에서 사용되는 바와 같이, 용어 “헤테로이환”은 하나 이상의 헤테로원자가 이환의 고리 중 하나 또는 둘 모두에 존재하는 것을 필요로 하는 “이환”의 서브세트이다. 이러한 헤테로원자는 고리 접합부에 존재할 수 있고 임의 치환될 수 있고, 질소(N-산화물 포함), 산소, 황(설폰 및 설폰산염과 같은 산화된 형태 포함), 인(포스포네이트 및 인산염과 같은 산화된 형태 포함), 붕소 등으로부터 선택될 수 있다. 일부 실시예에서, 이환형 기는 질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 7 내지 12개의 고리 구성원 및 0 내지 4개의 헤테로원자를 갖는다. 본원에서 사용되는 바와 같이, 용어 “가교 이환”은 임의의 이환 고리 시스템, 즉 적어도 하나의 가교를 갖는 탄소환 또는 헤테로환, 포화 또는 부분 불포화 고리 시스템을 지칭한다. IUPAC에 의해 정의된 바와 같이, “가교(bridge)”는 비분지형 원자 사슬 또는 원자 또는 2개의 다리목(bridgehead)을 연결하는 원자가 결합이며, 여기서 다리목은 3개 이상의 골격 원자(수소 제외)에 결합된 고리 시스템의 임의의 골격 원자이다. 일부 실시예에서, 가교 이환형 기는 질소, 산소 및 황으로부터 독립적으로 선택된 7 내지 12개의 고리 구성원 및 0 내지 4개의 헤테로원자를 갖는다. 이러한 가교된 이환형 기는 당업계에 잘 알려져 있고, 아래에 제시된 기를 포함하며, 여기서 각각의 기는 임의의 치환 가능한 탄소 또는 질소 원자에서 분자의 나머지 부분에 부착된다. 달리 명시되지 않는 한, 가교 이환형 기는 지방족기에 대해 제시된 바와 같은 하나 이상의 치환기로 임의 치환된다. 추가적으로 또는 대안적으로, 가교된 이환형 기의 임의의 치환 가능한 질소는 임의 치환된다. 예시적인 이환 고리는 다음을 포함한다:
예시적인 가교 이환은 다음을 포함한다:
용어 “저급 알킬”은 C1-4 직쇄 또는 분지형 알킬기를 지칭한다. 예시적인 저급 알킬기는 메틸, 에틸, 프로필, 이소프로필, 부틸, 이소부틸, 및 터트-부틸이다.
용어 “저급 할로알킬”은 하나 이상의 할로겐 원자로 치환된 C1-4 직쇄 또는 분지형 알킬기를 지칭한다.
용어 “헤테로원자”는 산소, 황, 질소, 인, 또는 실리콘(질소, 황, 인, 또는 실리콘의 임의의 산화된 형태; 임의의 염기성 질소의 사차화된 형태; 또는 헤테로환 고리 내의 산소, 황, 질소, 인, 또는 실리콘 원자를 포함함) 중 하나 이상을 의미한다.
본원에서 사용되는 용어 “불포화”는 모이어티가 하나 이상의 불포화 단위를 갖는 것을 의미한다.
본원에서 사용되는 바와 같이, 용어 “2가 C1-8 (또는C1-6) 포화 또는 불포화, 직쇄 또는 분지형, 탄화수소 사슬”은 본원에서 정의된 바와 같이 직쇄 또는 분지형인 2가 알킬렌, 알케닐렌, 및 알키닐렌 사슬을 지칭한다.
용어 “알킬렌”은 2가 알킬기를 지칭한다. “알킬렌 사슬”은 폴리메틸렌기, 즉 -(CH2)n-이고, 여기서 n은 양의 정수, 바람직하게는 1 내지 6, 1 내지 4, 1 내지 3, 1 내지 2, 또는 2 내지 3이다. 치환된 알킬렌 사슬은 하나 이상의 메틸렌 수소 원자가 치환기로 치환된 폴리메틸렌기이다. 적절한 치환기는 치환된 지방족기에 대해 후술하는 것들을 포함한다.
용어 “알케닐렌”은 2가 알케닐기를 지칭한다. 치환된 알케닐렌 사슬은 하나 이상의 수소 원자가 치환기로 치환되는 적어도 하나의 이중 결합을 함유하는 폴리메틸렌기이다. 적절한 치환기는 치환된 지방족기에 대해 후술하는 것들을 포함한다.
본원에서 사용되는 바와 같이, 용어 “헤테로환,” “헤테로시클릴,” “헤테로환 라디칼,” 및 “헤테로환 고리”는 상호교환적으로 사용되며, 포화되거나 부분적으로 불포화되고, 탄소 원자 외에, 전술한 바와 같이 1개 이상, 바람직하게는 1 내지 4개의 헤테로원자를 갖는 안정한 5- 내지 7-원 단환 또는 7 내지 10-원 이환 헤테로환 모이어티를 지칭한다. 헤테로환의 고리 원자와 관련하여 사용될 때, 용어 “질소”는 치환된 질소를 포함한다. 예로서, 포화 또는 부분 불포화 고리(산소, 황 및 질소로부터 선택된 0 내지 3개의 헤테로원자를 가짐.
헤테로환 고리는 안정한 구조를 초래하는 임의의 헤테로원자 또는 탄소 원자에서 제공된 화합물에 부착될 수 있고, 임의의 고리 원자는 임의 치환될 수 있다. 이러한 포화 또는 부분 불포화 헤테로환 라디칼의 예는, 제한 없이, 테트라히드로푸라닐, 테트라히드로티오페닐 피롤리디닐, 피페리디닐, 피롤리닐, 테트라히드로퀴놀리닐, 테트라히드로이소퀴놀리닐, 데카히드로퀴놀리닐, 옥사졸리디닐, 피페라지닐, 디옥사닐, 디옥솔라닐, 디아제피닐, 옥사제피닐, 티아제피닐, 모르폴리닐, 및 퀴누클리디닐을 포함한다. 용어 “헤테로환,” “헤테로시클릴,” “헤테로시클릴 고리,” “헤테로환형 기,” “헤테로환 모이어티,” 및 “헤테로환 라디칼”은 본원에서 상호교환적으로 사용되며, 헤테로시클릴 고리가 하나 이상의 아릴, 헤테로아릴, 또는 시클로지방족 고리, 예컨대 인돌리닐, 3H-인돌릴, 크로마닐, 페난트리디닐, 또는 테트라히드로퀴놀리닐에 융합되는 기를 또한 포함한다. 헤테로시클릴기는 단환 또는 이환, 가교 이환, 또는 스피로환일 수 있다. 헤테로환 고리는 하나 이상의 옥소(=O) 또는 티옥소(=S) 치환기를 포함할 수 있다. 용어 “헤테로시클릴알킬”은 헤테로시클릴로 치환된 알킬기를 지칭하며, 여기서 알킬 및 헤테로시클릴 부분은 독립적으로 임의 치환된다.
본원에서 사용되는 바와 같이, 용어 “부분적으로 불포화”는 적어도 하나의 이중 또는 삼중 결합을 포함하는 고리 모이어티를 지칭한다. 용어 “부분적으로 불포화”는 불포화의 다수의 부위를 갖는 고리를 포함하도록 의도되지만, 본원에서 정의된 바와 같이 아릴 또는 헤테로아릴 모이어티를 포함하도록 의도되지 않는다.
본원에서 사용되는 용어 “C1-3알킬”, “C1-5알킬”, 및 “C1-6알킬”은 각각 1 내지 3개, 1 내지 5개, 및 1 내지 6개의 탄소 원자를 함유하는 직쇄 또는 분지쇄 탄화수소를 지칭한다. C1-3알킬, C1-5알킬, 또는 C1-6알킬의 대표적인 예는 메틸, 에틸, n-프로필, 이소-프로필, n-부틸, 세크-부틸, 이소-부틸, 터트-부틸, 펜틸, 및 헥실을 포함하지만 이에 한정되지는 않는다.
본원에서 사용되는 용어 “C2-4알케닐”은 적어도 하나의 탄소-탄소 이중 결합을 갖는 2 내지 4개의 탄소 원자를 함유하는 포화 탄화수소를 지칭한다. 알케닐 기는 직선형 및 분지형 모이어티 둘 다를 포함한다. C2-4알케닐의 대표적인 예는 1-프로페닐, 2-프로페닐, 2-메틸-2-프로페닐, 및 부테닐을 포함하지만 이에 한정되지는 않는다.
본원에서 사용되는 용어 “C3-6시클로알킬”은 환형 프레임워크가 3 내지 6개의 탄소 원자를 갖는 포화 탄소환 분자를 지칭한다. C3-5시클로알킬의 대표적인 예는 시클로프로필, 시클로부틸, 시클로펜틸, 및 시클로헥실을 포함하지만 이에 한정되지는 않는다.
본원에서 사용된 용어 “디C1-3알킬아미노”는 -NR*R**을 지칭하며, 식 중 R* 및 R**은 본원에서 정의된 것과 같은 C1-3알킬을 독립적으로 나타낸다. 디C1-3알킬아미노의 대표적인 예는 -N(CH3)2, -N(CH2CH3)2, -N(CH3)(CH2CH3), -N(CH2CH2CH3)2, 및 -N(CH(CH3)2)2를 포함하지만 이에 한정되지는 않는다.
본원에서 사용되는 용어 “C1-3알콕시” 및 “C1-6알콕시”는 -OR#을 지칭하며, 식 중 R#은 본원에서 정의된 것과 같은 C1-3알킬기 및 C1-6알킬기를 각각 나타낸다. C1-3알콕시 또는 C1-6알콕시의 대표적인 예는 메톡시, 에톡시, 프로폭시, 이소-프로폭시, 및 부톡시를 포함하지만 이에 한정되지는 않는다.
본원에서 사용되는 용어 “할로겐”은 -F, -CI, -Br, 또는 -I를 지칭한다.
화학 기에 대한 또 다른 용어의 접두어로서 본원에서 사용되는 용어 “할로”는 하나 이상의 수소 원자가 본원에서 정의된 것과 같은 할로겐으로 치환되는 화학 기의 변형을 지칭한다. 할로겐은 각각의 경우 독립적으로 선택된다. 예를 들어, 용어 “C1-6할로알킬”은 하나 이상의 수소 원자가 할로겐으로 치환된, 본원에서 정의된 것과 같은 C1-6알킬을 지칭한다. C1-6할로알킬의 대표적인 예는 -CH2F, -CHF2, -CF3, -CHFCl, -CH2CF3, -CFHCF3, -CF2CF3, -CH(CF3)2, -CF(CHF2)2, 및 -CH(CH2F)(CF3)을 포함하지만 이에 한정되지는 않는다. 또한, 용어 “C1-6할로알콕시”는 하나 이상의 수소 원자가 할로겐으로 치환된, 본원에서 정의된 것과 같은 C1-6알콕시를 지칭한다. C1-6할로알콕시의 대표적인 예는 -OCH2F, -OCHF2, -OCF3, -OCHFCl, -OCH2CF3, -OCFHCF3, -OCF2CF3, -OCH(CF3)2, -OCF(CHF2)2, 및 -OCH(CH2F)(CF3)을 포함하지만 이에 한정되지는 않는다.
본원에서 사용되는 용어 “5원 헤테로아릴” 또는 “6원 헤테로아릴”은 N, S, 및 O로부터 선택된 하나의 고리 헤테로원자를 함유하고 임의로 하나 이상의 고리 탄소 원자(들) 대신에 1개 또는 2개의 고리 N 원자를 추가로 함유하는 2개 또는 3개의 이중 결합을 갖는 5원 또는 6원 탄소 고리를 지칭한다. 5원 헤테로아릴의 대표적인 예는 푸릴, 이미다졸릴, 피라졸릴, 이소옥사졸릴, 이소티아졸릴, 옥사디아졸릴, 및 옥사졸릴을 포함하지만 이에 한정되지는 않는다. 6원 헤테로아릴의 대표적인 예는 피리딜, 피리미딜, 피라질, 및 피리다질을 포함하지만 이에 한정되지는 않는다.
본원에서 사용되는 용어 “C3-6헤테로시클로알킬”은, 환형 프레임워크가 3 내지 6개의 탄소를 갖고, 하나의 탄소 원자가 N, O, 및 S로부터 선택된 헤테로원자로 치환되는 포화 탄소환 분자를 지칭한다. C3-6헤테로시클로알킬 기가 C6헤테로시클로알킬인 경우, 1개 또는 2개의 탄소 원자는 N, O, 및 S로부터 독립적으로 선택된 헤테로원자로 치환된다. C3-6헤테로시클로알킬의 대표적인 예는 아지리디닐, 아제티디닐, 옥세타닐, 피롤리디닐, 피페라지닐, 모르폴리닐, 및 티오모르폴리닐을 포함하지만 이에 한정되지는 않는다.
본원에서 사용되는 용어 “C5-8스피로알킬”은 2개의 고리가 단일 공통 탄소 원자를 통해 연결되는 이환 고리 시스템을 지칭한다. C5-8스피로알킬의 대표적인 예는 스피로[2.2]펜타닐, 스피로[3.2]헥사닐, 스피로[3.3]헵타닐, 스피로[3.4]옥타닐, 및 스피로[2.5]옥타닐을 포함하지만 이에 한정되지는 않는다.
본원에서 사용되는 용어 “C5-8트리시클로알킬”은 3개의 시클로알킬 고리 모두가 동일한 2개의 고리 원자를 공유하는 삼환 고리 시스템을 지칭한다. C5-8트리시클로알킬의 대표적인 예는 트리시클로[1.1.1.01,3]펜타닐, , 트리시클로[2.1.1.01,4]헥사닐, 트리시클로[3.1.1.01,5]헥사닐, 및 트리시클로[3.2.1.01,5]옥타닐을 포함하지만 이에 한정되지는 않는다.
단독으로 사용되거나 “아랄킬”, “아랄콕시”, 또는 “아릴옥시알킬”에서와 같이 더 큰 모이어티의 일부분으로서 사용될 때의 “아릴”이라는 용어는 총 4 내지 14개의 고리 구성원을 갖는 단환 또는 이환 고리 시스템으로서, 시스템 내 적어도 하나의 고리가 방향족이고, 시스템 내 각각의 고리는 3 내지 7개의 고리 구성원을 함유하는 단환 또는 이환 고리 시스템을 지칭한다. 용어 “아릴”은 용어 “아릴 고리”와 상호 교환적으로 사용될 수 있다. 본 개시내용의 소정의 실시예에서, “아릴”은 페닐, 바이페닐, 나프틸, 안트라실 등을 포함하고(이에 한정되지는 않음), 하나 이상의 치환기를 가질 수 있는 방향족 고리 시스템을 지칭한다. 또한, 본원에서 사용되는 바와 같이, 용어 “아릴”의 범주 내에 포함되는 것은 방향족 고리가 하나 이상의 비방향족 고리, 예컨대 인다닐, 프탈리미딜, 나프티미딜, 페난트리디닐, 또는 테트라히드로나프틸 등에 융합되는 기이다.
단독으로 사용되거나 “헤테로아랄킬” 또는 “헤테로아랄콕시”와 같은 더 큰 모이어티의 일부분으로서 사용될 때의 용어 “헤테로아릴” 및 “헤테로아르-”는 5 내지 10개의 고리 원자, 바람직하게는 5, 6, 또는 9개의 고리 원자를 갖고; 환형 배열로 공유된 6, 10, 또는 14개의 π 전자를 갖고; 탄소 원자에 추가하여 1 내지 5개의 헤테로원자를 갖는 기를 지칭한다. 용어 “헤테로아릴”의 맥락에서 “헤테로원자”는 질소, 산소, 또는 황을 특히 포함하지만 이에 한정되지는 않고, 질소 또는 황의 임의의 산화된 형태, 및 염기성 질소의 임의의 사차화된 형태를 포함한다. 헤테로아릴기는 티에닐, 푸라닐, 피롤릴, 이미다졸릴, 피라졸릴, 트리아졸릴, 테트라졸릴, 옥사졸릴, 이소옥사졸릴, 옥사디아졸릴, 티아졸릴, 이소티아졸릴, 티아디아졸릴, 피리딜, 피리다지닐, 피리미디닐, 피라지닐, 인돌리지닐, 퓨리디닐, 나프티리디닐, 및 프테리디닐을 포함하지만 이에 한정되지는 않는다. 본원에서 사용되는 바와 같이, 용어 “헤테로아릴” 및 “헤테로아르-”은 또한, 헤테로방향족 고리가 하나 이상의 아릴 고리, 지환족 고리, 또는 헤테로시클릴 고리에 융합되는 기를 포함하며, 여기서 라디칼 또는 부착점은 헤테로방향족 고리 상에 있다. 비제한적인 예는 인돌릴, 이소인돌릴, 벤조티에닐, 벤조푸라닐, 디벤조푸라닐, 인다졸릴, 벤즈이미다졸릴, 퀴놀릴, 이소퀴놀릴, 신놀리닐, 프탈라지닐, 퀴나졸리닐, 퀴녹살리닐, 4H-퀴놀리지닐, 카르바졸릴, 아크리디닐, 페나지닐, 페노티아지닐, 페녹사지닐, 테트라히드로퀴놀리닐, 테트라히드로이소퀴놀리닐, 및 피리도[2,3-b]-1,4-옥사진-3(4H)-온을 포함한다. 헤테로아릴기는 단환 또는 이환일 수 있다. 헤테로아릴 고리는 하나 이상의 옥소(=O) 또는 티옥소(=S) 치환기를 포함할 수 있다. 용어 “헤테로아릴”은 용어 “헤테로아릴 고리”, “헤테로아릴기”, 또는 “헤테로방향족”과 상호 교환적으로 사용될 수 있으며, 이들 용어 중 어느 하나는 임의 치환된 고리를 포함한다. 용어 “헤테로아랄킬”은 헤테로아릴로 치환된 알킬기를 지칭하며, 여기서 알킬 부분과 헤테로아릴 부분은 독립적으로 임의 치환된다.
본원에 기술된 바와 같이, 본 개시내용의 화합물은 “치환된” 모이어티를 함유할 수 있다. 일반적으로, 용어 “치환된”은 지정된 모이어티의 하나 이상의 수소가 적절한 치환기로 치환되는 것을 의미한다. 달리 표시되지 않는 한, “임의 치환된” 기는 기의 하나 이상의 치환 가능한 위치에서 적절한 치환기를 가질 수 있고, 임의의 주어진 구조에서 둘 이상의 위치가 명시된 군으로부터 선택된 하나 이상의 치환기로 치환되는 경우, 치환기는 모든 위치에서 동일하거나 상이할 수 있다. 본 개시내용에 의해 고려되는 치환기의 조합은 바람직하게는, 안정하거나 화학적으로 실행 가능한 화합물의 형성을 초래하는 것들이다. 본원에서 사용되는 바와 같이, 용어 “안정한”은, 소정의 실시예에서, 본원에 기술된 목적 중 하나 이상을 위한 화합물의 생산, 검출, 회수, 정제, 및 사용을 가능하게 하는 조건을 거쳤을 때 실질적으로 변경되지 않는 화합물을 지칭한다.
"임의 치환된" 기의 치환 가능한 탄소 원자 상의 적절한 1가 치환기는 독립적으로 할로겐; -(CH2)0-6R°; -(CH2)0-6OR°; -O(CH2)0-6Ro, -O-(CH2)0-6C(O)OR°; -(CH2)0-6CH(OR°)2; -(CH2)0-6SR°; -(CH2)0-6Ph(상기 Ph 는 R°로 치환될 수 있음); -(CH2)0-46O(CH2)0-1Ph(상기 Ph 는 R°로 치환될 수 있음); -CH=CHPh(상기 Ph 는 R°로 치환될 수 있음); -(CH2)0-6O(CH2)0-1-피리딜(상기 피리딜 은 R°로 치환될 수 있음); -NO2; -CN; -N3; -(CH2)0-6N(R°)2; -(CH2)0-6N(R°)C(O)R°; -N(R°)C(S)R°; -(CH2)0-6N(R°)C(O)NR°2; -N(R°)C(S)NR°2; -(CH2)0-6N(R°)C(O)OR°; -N(R°)N(R°)C(O)R°; -N(R°)N(R°)C(O)NR°2; -N(R°)N(R°)C(O)OR°; -(CH2)0-6C(O)R°; -C(S)R°; -(CH2)0-6C(O)OR°; -(CH2)0-6C(O)SR°; -(CH2)0-6C(O)OSiR°3; -(CH2)0-6OC(O)R°; -OC(O)(CH2)0-6SR°,-(CH2)0-6SC(O)R°; -(CH2)0-6C(O)NR°2; -C(S)NR°2; -C(S)SR°; -SC(S)SR°, -(CH2)0-6OC(O)NR°2; -C(O)N(OR°)R°; -C(O)C(O)R°; -C(O)CH2C(O)R°; -C(NOR°)R°; -(CH2)0-6SSR°; -(CH2)0-6S(O)2R°; -(CH2)0-6S(O)2OR°; -(CH2)0-6OS(O)2R°; -S(O)2NR°2; -(CH2)0-6S(O)R°; -N(R°)S(O)2NR°2; -N(R°)S(O)2R°; -N(OR°)R°; -C(NH)NR°2; -P(O)2R°; -P(O)R°2; -P(O)(OR°)2; -OP(O)(R°)OR°; -OP(O)R°2; -OP(O)(OR°)2; SiR°3; -(C1-4 직쇄 또는 분지형 알킬렌)O-N(R°)2; 또는 -(C1-4 직쇄 또는 분지형 알킬렌)C(O)O-N(R°)2이고, 여기서 각각의 R°은 아래 정의된 바와 같이 치환될 수 있고 독립적으로 수소, C1-6　지방족, -CH2Ph, -O(CH2)0-1Ph, -CH2-(5- 내지 6-원 헤테로아릴 고리), 또는 3원 내지 6원 포화, 부분 불포화, 또는 아릴 고리(질소, 산소, 및 황으로부터 독립적으로 선택된 0 내지 4개의 헤테로원자를 가짐)이거나, 상기 정의에도 불구하고, 2개의 독립적인 R°의 발생은 이들의 개재 원자와 함께 취해져 3- 내지 12-원 포화, 부분 불포화, 또는 아릴 단환 또는 이환 고리(질소, 산소, 및 황으로부터 독립적으로 선택된 0 내지 4개의 헤테로원자를 가짐)를 형성하며, 이는 아래와 같이 치환될 수 있다.
R° (또는 개재 원자와 함께 2개의 독립적인 R°을 취함으로써 형성된 고리) 상의 적절한 1가 치환기는, 독립적으로 할로겐, -(CH2)0-2R●, -(할로R●), -(CH2)0-2OH, -(CH2)0-2OR●, -(CH2)0-2CH(OR●)2; -O(할로R●), -CN, -N3, -(CH2)0-2C(O)R●, -(CH2)0-2C(O)OH, -(CH2)0-2C(O)OR●, -(CH2)0-2SR●, -(CH2)0-2SH, -(CH2)0-2NH2, -(CH2)0-2NHR●, -(CH2)0-2NR● 2, -NO2, -SiR● 3, -OSiR● 3, -C(O)SR● , -(C1-4 직쇄 또는 분지형 알킬렌)C(O)OR●, 또는 -SSR●이고 여기서 각각의 R●은 비치환되거나 앞에 “할로”가 있는 경우 하나 이상의 할로겐으로만 치환되고, C1-4 지방족, -CH2Ph, -O(CH2)0-1Ph, 또는 5-6원 포화, 부분 불포화, 또는 아릴 고리(질소, 산소, 및 황으로부터 독립적으로 선택된 0 내지 4개의 헤테로원자를 가짐)로부터 독립적으로 선택된다. R°의 포화 탄소 원자 상의 적절한 2가 치환기는 =O 및 =S를 포함한다.
“임의 치환된” 기의 포화 탄소 원자 상의 적절한 2가 치환기는 다음을 포함한다: =O, =S, =NNR* 2, =NNHC(O)R*, =NNHC(O)OR*, =NNHS(O)2R*, =NR*, =NOR*, -O(C(R* 2))2-3O-, 또는 -S(C(R* 2))2-3S-, 여기서 R*의 각각의 독립적인 발생은 수소, 아래 정의된 바와 같이 치환될 수 있는 C1-6 지방족, 및 비치환 5-6원 포화, 부분 불포화, 또는 아릴 고리(질소, 산소, 및 황으로부터 독립적으로 선택된 0 내지 4개의 헤테로원자를 가짐)로부터 선택된다. “임의 치환된” 기의 소성 치환 가능한 탄소에 결합된 적절한 2가 치환기는 다음을 포함한다: -O(CR* 2)2-3O-, 여기서 R*의 각각의 독립적인 발생은 수소, 아래에 정의된 바와 같이 치환될 수 있는 C1-6지방족, 및 비치환된 5-6원 포화, 부분 불포화, 또는 아릴 고리(질소, 산소, 및 황으로부터 독립적으로 선택된 0 내지 4개의 헤테로원자를 가짐)로부터 선택된다.
R*의 지방족 기 상의 적절한 치환기는 할로겐, -R●, -(할로R●), -OH, -OR●, -O(할로R●), -CN, -C(O)OH, -C(O)OR●, -NH2, -NHRl, -NR● 2, 또는 -NO2를 포함하며, 여기서 각각의 R●은 비치환되거나 앞에 “할로”가 있는 경우 하나 이상의 할로겐으로만 치환되고 독립적으로 C1-4 지방족, -CH2Ph, -O(CH2)0-1Ph, 또는 5-6원 포화, 부분 불포화, 또는 아릴 고리(질소, 산소, 및 황으로부터 독립적으로 선택된 0 내지 4개의 헤테로원자를 가짐)이다.
“임의 치환된” 기의 치환 가능한 질소 상의 적절한 치환기는 -R†, -NR† 2, -C(O)R†, -C(O)OR†, -C(O)C(O)R†, -C(O)CH2C(O)R†, -S(O)2R†, -S(O)2NR† 2, -C(S)NR† 2, -C(NH)NR† 2, 또는 -N(R†)S(O)2R†이며; 여기서 각각의 R†은 독립적으로 수소, 아래 정의된 바와 같이 치환될 수 있는 C1-6 지방족, 비치환 -OPh, 또는 비치환 5-6원 포화, 부분 불포화, 또는 아릴 고리(질소, 산소, 및 황으로부터 독립적으로 선택된 0 내지 4개의 헤테로원자를 가짐)이거나, 상기 정의에도 불구하고, R†의 2개의 독립적인 발생은 이들의 개재 원자와 함께 취해져 비치환 3 내지 12원 포화, 부분 불포화, 또는 아릴 단환 또는 이환 고리(질소, 산소, 및 황으로부터 독립적으로 선택된 0 내지 4개의 헤테로원자를 가짐)를 형성한다.
R†의 지방족기 상의 적절한 치환기는 독립적으로 할로겐, -R●, -(할로R●), -OH, -OR●, -O(할로R●), -CN, -C(O)OH, -C(O)OR●, -NH2, -NHRl, -NR● 2, 또는 -NO2이고, 각각의 R●은 비치환되거나 앞에 “할로”가 있는 경우 하나 이상의 할로겐으로만 치환되고 독립적으로 C1-4 지방족, -CH2Ph, -O(CH2)0-1Ph, 또는 5-6원 포화, 부분 불포화, 또는 아릴 고리(질소, 산소, 및 황으로부터 독립적으로 선택된 0 내지 4개의 헤테로원자를 가짐)이다.
본원에서 사용되는 용어 “약학적으로 허용 가능한”은 대상체, 특히 인간에서 사용되도록 일반적으로 인정되는 것을 지칭한다.
본원에서 사용되는 용어 “약학적으로 허용 가능한 염”은 약학적으로 허용 가능하고 부모 화합물의 바람직한 약리학적 활성을 갖는 화합물의 염을 지칭한다. 이러한 염은 다음을 포함한다: (1) 염산, 브롬화수소산, 황산, 질산, 인산 등과 같은 무기산으로 형성되거나; 아세트산, 프로피온산, 헥산산, 시클로펜탄프로피온산, 글리콜산, 피루브산, 락트산, 말론산, 숙신산, 말산, 말레산, 푸마르산, 타르타르산, 구연산, 벤조산, 3-(4-히드록시벤조일) 벤조산, 신남산, 만델산, 메탄설폰산 등과 같은 유기산으로 형성된 산 부가염; 또는 (2) 부모 화합물에 존재하는 산성 양성자가 알칼리 금속 이온, 알칼리 토 이온, 또는 알루미늄 이온과 같은 금속 이온으로 치환될 때; 또는 에탄올아민, 디에탄올아민, 트리에탄올아민, N-메틸글루카민, 디시클로헥실아민 등과 같은 유기 염기와 배위될 때 형성되는 염. 이러한 염의 추가 예는 Berge 등의 J. Pharm. Sci. 66(1):1-19 (1977)에서 확인할 수 있다. 또한 Stahl 등의 Pharmaceutical Salts: Properties, Selection, 및 Use, 2nd Revised Edition (2011)도 참조한다.
본원에서 사용되는 용어 “약학적으로 허용 가능한 부형제”는 약학적 조성물 또는 제형을 제조하기 위해 본원에 개시된 화합물 또는 염과 조합될 수 있는 광범위한 성분을 지칭한다. 통상적으로, 부형제는 희석제, 착색제, 비히클, 유착 방지제, 활택제, 붕해제, 향미제, 코팅제, 결합제, 감미제, 윤활제, 흡착제, 보존제 등을 포함하지만 이에 한정되지는 않는다.
본원에서 사용되는 용어 “대상체”는 영장류, 젖소, 양, 염소, 말, 개, 고양이, 토끼, 랫트, 및 마우스를 포함하지만 이에 한정되지 않는 인간 및 포유동물을 지칭한다. 일 실시예에서, 대상체는 인간이다.
본원에서 사용되는 바와 같이, 용어 “치료적 유효량”은 연구자, 수의사, 의사, 또는 다른 임상의가 추구하는 조직, 시스템, 또는 대상체의 생물학적 또는 의학적 반응을 유도할, 본원에 개시된 화합물의 양을 지칭한다.
일반 합성 절차
본원에 제공된 화합물은 본 섹션 및 다음 섹션에 기술된 절차에 따라 합성될 수 있다. 본원에 기술된 합성 방법은 단지 예시적인 것이며, 본원에 개시된 화합물은 당업자가 이해하는 바와 같이 대안적인 합성 전략을 사용하여 대안적인 경로에 의해 합성될 수도 있다. 본원에 제공된 일반적인 합성 절차 및 특정 실시예는 단지 예시적인 것이며, 어떤 방식으로도 본 개시내용의 범주를 제한하는 것으로 간주되어서는 안된다는 것을 이해해야 한다.
일반적으로, 식 I의 화합물은 다음 반응식에 따라 합성될 수 있다. 하기 반응식에 사용된 임의의 변수는 달리 명시되지 않는 한 식 I에 대해 정의된 것과 같은 변수이다. 모든 출발 물질은, 예를 들어 Merck Sigma-Aldrich Inc. 및 Enamine Ltd.로부터 상업적으로 이용할 수 있는 것이거나 당업계에 알려진 것이고, 일반적인 기술을 사용하는 알려진 절차를 사용해 합성할 수 있다. 출발 물질은 본원에 개시된 절차를 통해서 합성할 수도 있다. 본 섹션에서 논의된 반응식에 적합한 반응 조건, 예컨대 용매, 반응 온도, 및 시약은 본원에 제공된 예에서 확인할 수 있다. 이하에서 사용되는 바와 같이, Z는 이탈기이며, 할로겐(예를 들어 플루오르화물, 염화물, 브롬화물, 요오드화물), 설포네이트(예를 들어 메실레이트, 토실레이트, 벤젠설포네이트, 브로실레이트, 노실레이트, 트리플레이트), 디아조늄 등을 포함할 수 있지만 이에 한정되지는 않는다. 이하에서 사용되는 바와 같이, 소정의 실시예에서, Y는 유기금속 결합 시약 기이며, 보론산 및 에스테르, 유기주석, 및 유기아연 시약을 포함할 수 있지만 이에 한정되지는 않는다.
반응식 1
당업자가 이해할 수 있듯이, 상기 합성 반응식 및 대표적인 예들은 본 출원에서 기술되고 청구된 화합물이 합성될 수 있는 모든 수단의 포괄적인 목록을 포함하도록 의도되지는 않는다. 추가의 방법이 당업자에게 명백할 것이다. 또한, 전술한 다양한 합성 단계를 대안적인 순번 또는 순서로 수행하여 목적하는 화합물을 수득할 수 있다.
본원에 기술된 화합물에 대한 정제 방법은 당업계에 공지되어 있으며, 예를 들어 결정화, 크로마토그래피(예를 들어 액상 및 기상), 추출, 증류, 분쇄, 및 역상 HPLC를 포함한다.
본 개시내용은, 최종적으로 목적하는 화합물을 수득하기 전에, 기술된 합성 절차로부터 생산된 구조체를 포함하는 “중간체” 화합물을 추가로 포함하되, 단리되었는지 인시츄로 생성되었는지 단리되지 않았는지 여부와 무관하게 포함한다. 이들 중간체는 본 개시내용의 범주에 포함된다. 이러한 중간체 화합물의 예시적인 실시예는 아래의 예에 제시되어 있다.
예
본 섹션은 식 I의 화합물 및 이를 제조하는 방법의 구체적인 예를 제공한다.
약어 목록
일반 분석 및 정제 방법
본 섹션에서는 본원에 제공된 특정 화합물을 제조하는 데 사용되는 일반적인 분석 방법 및 정제 방법에 대한 설명이 제공된다.
크로마토그래피:
달리 명시되지 않는 한, 미정제 생성물 함유 잔기는, 플래쉬 실리카(SiO2)로 사전 충진된 Biotage 브랜드 실리카 겔 컬럼 또는 역상 플래쉬 실리카(C18)를 통해 미정제 물질 또는 농축물을 통과시키고, 표시된 것과 같은 용매 구배로 컬럼으로부터 생성물을 용리하여 정제하였다. 예를 들어, 실리카 겔(0-40% EtOAc/헥산)에 대한 설명은, 헥산 중 0% 내지 40% EtOAc의 용매 구배를 사용하여 실리카로 충진된 컬럼으로부터 용리함으로써 생성물을 수득하였다는 것을 의미한다.
분취 HPLC 방법:
이와 같이 표시된 경우, 본원에 기술된 화합물은 다음 두 가지 HPLC 컬럼 중 하나를 사용하는 Waters Fractionlynx 반-분취 HPLC-MS 시스템을 사용하여 역상 HPLC를 통해 정제한 것이다: (a) Phenominex Gemini 컬럼(5 마이크론, C18, 150x30 mm) 또는 (b) Waters X-select CSH 컬럼(5 마이크론, C18, 100x30 mm).
기기를 통과하는 일반적인 런은 다음을 포함하며, 조건은 최적의 분리를 달성하도록 가변될 수 있다: 10분에 걸쳐 물(0.1% 포름산 포함) 중 10%(v/v) 내지 100% MeCN(0.1% v/v 포름산 포함)의 선형 구배를 사용해 45 mL/분의 유속으로 용리함.
분석 HPLC 방법:
이와 같이 표시된 경우, 본원에 기술된 화합물을 DAD 검출기가 구비된 Aglilent 1100 시리즈 기기를 사용하여 분석하였다.
플래시 크로마토그래피 방법:
이와 같이 표시된 경우, 플래쉬 크로마토그래피는 Teledyne Isco 기기 상에서 사전 충진된 일회용 SiO2 고정상 컬럼을 사용하여 수행하되, 용리액 유속 범위는 15 내지 200 mL/분이었고, UV는 254 및 220 nm에서 검출하였다.
분취 키랄 초임계 유체 크로마토그래피(SFC) 방법:
이와 같이 표시된 경우, 본원에 기술된 화합물은 다음 두 가지 키랄 SFC 컬럼 중 하나를 사용하는 키랄 SFC를 통해 정제한 것이다: (a) Chiralpak IG 2x25 cm, 5 μm 또는 (b) Chiralpak AD-H 2x15 cm, 5 μm.
일부 CP 분석-SFC 실험을 다음 조건 하에 SFC 방법 Station(Thar, Waters) 상에서 수행하였다: 컬럼 온도: 40℃, 이동상: CO2/메탄올(0.2% 메탄올 암모니아) = 유속: 4.0 ml/분, 역압: 120 Bar, 검출 파장: 214 nm.
일부 CP 분석-SFC 실험을 다음 조건 하에 SFC-80(Thar, Waters) 상에서 수행하였다: 컬럼 온도: 35℃, 이동상(예시): CO2/메탄올(0.2% 메탄올 암모니아) = 유속: 80 g/분, 역압: 100 bar, 검출 파장: 214 nm.
분취 CP 방법: 산성 역상 MPLC: 기기 유형: Reveleris™ 분취 MPLC; 컬럼: Phenomenex LUNA C18(3) (150x25 mm, 10μ); 유속: 40 mL/분; 컬럼 온도: 실온; 용리액 A: 물 중 0.1% (v/v) 포름산, 용리액 B: 아세토니트릴 중 0.1% (v/v) 포름산; 표시된 구배 및 파장 사용.
양성자 NMR 스펙트럼:
달리 명시되지 않는 한, 모든 1H NMR 스펙트럼은 300, 400, 또는 500 Mhz에서 Bruker NMR 기기를 이용하거나 400 Mhz에서 Varian NMR 기기를 이용해 수집하였다. 이와 같이 특성화된 경우, 관찰된 모든 양성자는 기준으로서 내부 용매 피크를 사용하여 테트라메틸실란(TMS)으로부터 백만분율(ppm) 다운필드로서 보고된다. 모든 NMR은 약 25℃에서 수집하였다.
질량 분광 (MS)
달리 명시되지 않는 한, 출발 물질, 중간체, 및/또는 예시적인 화합물에 대한 모든 질량 스펙트럼 데이터는 [M+H]+ 분자 이온을 갖는 질량/전하(m/z)로서 보고된다. 보고된 분자 이온은 Waters Acquity UPLC/MS 시스템 또는 Gemini-NX UPLC/MS 시스템을 사용하여 전기분무 검출 방법(일반적으로 ESI MS로서 지칭됨)에 의해 수득하였다. 브롬 등과 같은 동위원소 원자를 갖는 화합물은 당업자가 이해하는 바와 같이, 검출된 동위원소 패턴에 따라 일반적으로 보고된다.
화합물 명칭
본원에 개시되고 기술된 화합물은 ChemDraw Professional 17.0의 IUPAC 명명 기능을 사용하여 명명하였다.
특정 예
본 섹션에는 본원에 제공된 화합물의 특정 예를 합성하는 절차가 제공된다. 모든 출발 물질은, 달리 표시되지 않는 한, Sigma-Aldrich Inc.로부터 상업적으로 이용할 수 있는 것이거나 당업계에 알려진 것이고, 일반적인 기술을 사용하는 알려진 절차를 사용해 합성할 수 있다.
예 A1: 중간체의 합성
방법 Int-1
중간체 1: 5,7-디클로로-2,3-디메틸피리도[3,4-b]피라진
500 mL 둥근 바닥 플라스크에 3,4-디아미노-2,6-디클로로피리딘(27 g, 152 mmol) 및 2,3-부탄디온(15.99 mL, 182 mmol)을 채웠다. EtOH(152 mL)를 플라스크에 첨가하고, 혼합물을 70℃로 가열하였다. 5시간 후, 혼합물을 프릿형 깔때기를 통해 여과하고 용리액을 감압 하에 약 75 mL로 농축시켰다. H2O(150 mL)를 용액에 첨가하고, 생성된 고형분을 여과하였다. 두 여액의 합쳐진 고형분을 H2O로 3회 세척하고, 공기 하에 방치하여 건조시켜 5,7-디클로로-2,3-디메틸피리도[3,4-b]피라진을 연갈색 고형분으로서 수득하였다(34.5 g, 152 mmol). LC/MS (ESI+) m/z = 228.0 [M+H]+ 1H NMR (500 MHz, 클로로포름-d) δ ppm 7.82 (s, 1H), 2.83 (s, 3H), 2.80 (s, 3H).
방법 Int-2
중간체 2: 6,8-디클로로-2,3-디메틸피리도[2,3-b]피라진
1 L 둥근 바닥 플라스크에서 4,6-디클로로피리딘-2,3-디아민(30 g, 169 mmol) 및 부탄-2,3-디온(16.12 mL, 185 mmol)을 합쳤다. EtOH(600 mL)를 첨가하고, 혼합물을 80℃로 5시간 동안 가열하였다. 냉각 후, 용매를 감압 하에 제거하였다. 생성된 고형분을 디에틸 에테르로 분쇄하고 여과하여 6,8-디클로로-2,3-디메틸피리도[2,3-b]피라진을 연갈색 고형분으로서 수득하였다(36.5 g, 160 mmol). LC/MS (ESI+) m/z = 228.0 [M+H]+ 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ ppm 8.21 (s, 1 H), 2.76 (s, 6 H)
방법 Int-3
중간체 3: 2,4-디클로로-6,7-디메틸프테리딘
100 mL의 둥근 바닥 플라스크에서 2,6-디클로로피리미딘-4,5-디아민(5 g, 27.9 mmol) 및 부탄-2,3-디온(2.91 mL, 33.5 mmol)을 EtOH(27.9 mL) 중에서 합치고, 혼합물을 30℃에서 18시간 동안 교반하였다. 냉각 후, 용매를 감압 하에 제거하였다. 생성된 고형분을 디에틸 에테르로 분쇄하고 여과하여 2,4-디클로로-6,7-디메틸프테리딘을 연갈색 고형분으로서 수득하였다(6.02 g, 26.3 mmol). LC/MS (ESI+) m/z = 229.0 [M+H]+ 1H NMR (500 MHz, 클로로포름-d) δ ppm 2.88 (s, 3 H), 2.87 (s, 3H).
표 1. 중간체 58은 방법 Int-8에 기술된 절차에 따라 다음과 같이 제조하였다:
방법 Int-4
중간체 4: 5,7-디클로로-2-메틸피리도[3,4-b]피라진
50 mL 둥근 바닥 플라스크에 EtOH(250 mL) 중 2,6-디클로로피리딘-3,4-디아민(25 g, 140 mmol) 및 2-옥소프로파날(30.4 g, 169 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 85℃에서 2시간 동안 가열하였다. 반응 플라스크를 실온으로 냉각시켰다. 혼합물을 H2O로 희석하고 생성된 고형분을 여과하고 H2O로 세척하였다. 고형분 물질을 DCM에 용해시키고, Na2SO4로 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 미정제 반응물을 수득하였다. 이 미정제 물질을 제2 배치의 2,6-디클로로피리딘-3,4-디아민과 합치고, 합친 미정제 물질을 실리카 겔의 플러그 상에 흡수시키고, 100% DCM의 구배로 용리하는, 실리카 겔 컬럼을 통해 크로마토그래피로 정제하여 회백색 고형분으로서 5,7-디클로로-2-메틸피리도[3,4-b]피라진(25.57 g, 119 mmol)과 두 이성질체의 혼합물 7.8 g을 수득하였다. 주요 이성질체: LC/MS (ESI+) m/z = 213.9 [M+H]+ 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ ppm 9.06 (s, 1 H), 8.11 (s, 1H), 2.79 (s, 3 H). 부 이성질체: LC/MS (ESI+) m/z = 214.0 [M+H]+ 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ ppm 9.16 (s, 1 H), 8.20 (s, 1H), 2.79 (s, 3 H).
방법 Int-5
중간체 5 및 6: 5,7-디클로로-2,3-디메틸-1,8-나프티리딘 및 2,4-디클로로-7-에틸-1,8-나프티리딘
스크류 캡이 부착된 바이알에 2-아미노-4,6-디클로로니코틴알데히드(0.5 g, 2.62 mmol) 및 메틸 에틸 케톤(2.62 mL)을 채웠다. 이 용액에 KOH(0.147 g, 2.62 mmol)를 첨가하였다. 반응물을 실온에서 밤새 교반하였다. H2O를 첨가하고, 1N 수성 HCl을 사용하여 수성 상을 7의 pH로 중화시켰다. 수성 상을 DCM으로 추출하였다. 유기상을 상 분리기를 사용하여 분리하고 감압 하에 농축시켰다. 미정제 물질을 실리카 겔 크로마토그래피(DCM 중 0-10% MeOH(1% NH3 포함))로 정제하여 5,7-디클로로-2,3-디메틸-1,8-나프티리딘(0.284 g, 1.25 mmol, 47.7%). (LC/MS (ESI+) m/z = 227.0 [M+H]+) 및 2,4-디클로로-7-에틸-1,8-나프티리딘(0.18 g, 0.79 mmol)(LC/MS (ESI+) m/z = 227.0 [M+H]+)을 수득하였다.
방법 Int-6
중간체 7: 5,7-디클로로-2-메틸-1,6-나프티리딘
50 mL 바이알에 아세톤(10 mL) 중 4-아미노-2,6-디클로로니코틴알데히드(1.91 g, 10 mmol, JW Pharmlab) 및 KOH(0.84 g, 15.0 mmol)를 첨가하였다. 반응물을 실온에서 30분 동안 교반한 후 침전물이 형성되었다. 반응 혼합물을 EtOAc로 희석하고, 건조시키고, 농축시켰다. 미정제 물질을 크로마토그래피(DCM 중 0-30% EtOAc)를 통해 정제하여 1.65 g(71%)의 5,7-디클로로-2-메틸-1,6-나프티리딘을 황백색 고형분으로서 수득하였다.
방법 Int-7
중간체 8: 2,4-디클로로-7-메틸-1,8-나프티리딘
50 mL 바이알에 2-아미노-4,6-디클로로니코틴알데히드(0.3507 g, 1.836 mmol) 및 아세톤(1.836 mL)을 첨가하였다. 이 용액에 KOH(0.155 g, 2.75 mmol)를 첨가하였다. 반응물을 실온에서 30분 동안 교반하였다. H2O를 첨가하고 수성상을 DCM으로 추출하였다. 유기상을 상 분리기를 사용해 분리하고 감압 하에 농축시켜 2,4-디클로로-7-메틸-1,8-나프티리딘을 수득하였다(0.317 g, 1.49 mmol). LC/MS (ESI+) m/z = 213.0 [M+H]+
방법 Int-8
중간체 9: 2,4-디클로로-7-메틸프테리딘
DCE(250 mL) 중 2,6-디클로로피리미딘-4,5-디아민(5.00 g, 27.9 mmol)의 현탁액에 황산칼슘(10.0 g, 73.5 mmol)을 첨가한 다음, 2-옥소프로파날을 적가하였다(물 중 40%, 5.0 ml, 32.1 mmol). 반응물을 25℃에서 밤새 교반한 다음, 셀라이트의 플러그를 통해 여과하고, 감압 하에 증발시켜 목적하는 물질을 연황색 고형분으로서 수득하였다(5.3g, 88%). MS (m/z+): 215.0 [M+1]+, 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d): 8.93 (1H, s), 2.91 (3H, s).
표 2. 중간체 10은 방법 Int-8에 기술된 절차에 따라 다음과 같이 제조하였다:
방법 Int-9
중간체 11: 4-((2R,4S)-4-브로모테트라히드로-2H-피란-2-일)-1-시클로프로필-1H-피라졸
단계 1: DMF(105 mL) 중 에틸 1H-피라졸-4-카르복실레이트(11.0 g, 78.5 mmol)의 용액에 탄산세슘(51.2 g, 157 mmol)을 첨가하고, 이어서 브롬화 벤질(9.3 mL, 78.4 mmol)을 첨가하였다. 반응물을 실온에서 3일 동안 교반하였다. 물을 첨가하고, 생성물을 EtOAc로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 H2O로 여러 번 세척한 다음, 염수로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 여과하고, 진공에서 농축시켜 에틸 1-벤질-1H-피라졸-4-카르복실레이트를 무색 시럽으로서 수득하였다(16.7 g, 75.3 mmol, 96% 수율). 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ ppm 7.94 (s, 1H), 7.85 (s, 1H), 7.43 - 7.30 (m, 3H), 7.26 - 7.22 (m, 2H), 5.30 (s, 2H), 4.27 (q, J = 7.1 Hz, 2H), 1.32 (t, J = 7.1 Hz, 3H). LC/MS (ESI+) m/z = 231.1 [M+H]+.
단계 2: 0℃의 THF(69 mL) 중 에틸 1-벤질-1H-피라졸-4-카르복실레이트(6.37 g, 27.7 mmol)의 용액에 리튬 알루미늄 수소화물(THF 중 2 M, 28 mL, 56.0 mmol)을 서서히 첨가하였다. 용액을 실온으로 가온시키고 1시간 동안 교반하였다. 반응물을 0℃로 냉각시키고, 물(2.2 mL)을 적가한 다음, 1M NaOH(6.0 mL) 및 물(2.2 mL)을 첨가하였다. 고형분을 셀라이트를 통해 여과하고, 필터 케이크를 EtOAc로 헹구었다. 여액을 진공에서 농축시켜 (1-벤질-1H-피라졸-4-일)메탄올을 무색 시럽으로서 수득하였다(4.43 g, 22.8 mmol, 85% 수율). 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ ppm 7.54 (s, 1H), 7.41 - 7.28 (m, 4H), 7.25 - 7.19 (m, 2H), 5.28 (s, 2H), 4.57 (s, 2H). LC/MS (ESI+) m/z = 189.1 [M+H]+.
단계 3: DCM(40 mL) 중 (1-벤질-1H-피라졸-4-일)메탄올(4.43 g, 22.8 mmol)의 용액에 활성화된 산화 망간(IV)(20.7 g, 235 mmol)을 여러 번 나누어 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 고형분을 셀라이트를 통해 여과하고 DCM으로 헹구었다. 여액을 진공에서 농축시키고, 미정제 물질을 헥산 중 0-40% EtOAc로 용리하는 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하여 1-벤질-1H-피라졸-4-카르브알데히드-1을 무색 시럽으로서 수득하였다(3.41 g, 18.3 mmol, 76% 수율). 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ ppm 9.84 (s, 1H), 8.00 (s, 1H), 7.87 (s, 1H), 7.44 - 7.32 (m, 3H), 7.31 - 7.21 (m, 2H), 5.34 (s, 2H). LC/MS (ESI+) m/z = 187.1 [M+H]+.
단계 4: 0℃의 DCM(41 mL) 중 1-벤질-1H-피라졸-4-카르브알데히드(3.05 g, 16.4 mmol) 및 3-부텐-1-올(1.5 mL, 17.0 mmol)의 용액에 브롬화수소산(아세트산 중 33%)(8.1 mL, 49.1 mmol)을 적가하였다. 용액을 밤새 실온으로 서서히 가온시켰다. 그런 다음, 용액을 0℃로 냉각시키고 포화 NaHCO3 용액으로 서서히 급냉시켰다. 생성물을 DCM으로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 염수로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 여과하고, 진공에서 농축시켰다. 미정제 물질을 헥산 중 0-35% EtOAc로 용리하는 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하여 1-벤질-4-(4-브로모테트라히드로-2H-피란-2-일)-1H-피라졸을 시스/트랜스 부분 입체이성질체의 1:1 혼합물로서 수득하였다(4.13 g, 12.9 mmol, 75% 수율). (1H NMR은 시스와 트랜스의 1:1 혼합물로서 보고됨) 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ ppm 7.50 (s, 2H), 7.39 - 7.27 (m, 8H), 7.24 - 7.19 (m, 4H), 5.26 (s, 4H), 4.90 (dd, J = 9.8, 3.1 Hz, 1H), 4.76 (t, J = 3.4 Hz, 1H), 4.33 (dd, J = 11.4, 2.0 Hz, 1H), 4.21 (tt, J = 11.8, 4.5 Hz, 1H), 4.13 - 4.01 (m, 2H), 3.92 (dd, J = 12.3, 4.7 Hz, 1H), 3.54 (td, J = 12.1, 2.3 Hz, 1H), 2.48 (dt, J = 14.0, 2.8 Hz, 1H), 2.25 - 2.18 (m, 2H), 2.18 - 2.12 (m, 3H), 2.11 - 2.03 (m, 1H), 1.99 - 1.87 (m, 1H). LC/MS (ESI+) m/z = 320.9 [M+H]+.
단계 5: 라세미 생성물을 ChiralART Cel-SB 컬럼을 이용한 키랄 SFC(구배: 수성 NH4OH 용액 중 5 내지 60% MeOH)로 정제하여 1-벤질-4-((2R,4S)-4-브로모테트라히드로-2H-피란-2-일)-1H-피라졸을 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ ppm 7.50 (s, 1H), 7.44 - 7.28 (m, 4H), 7.22 (d, J = 7.1 Hz, 2H), 5.26 (s, 2H), 4.33 (dd, J = 11.4, 2.2 Hz, 1H), 4.26 - 4.13 (m, 1H), 4.12 - 3.95 (m, 1H), 3.54 (tt, J = 12.1, 2.2 Hz, 1H), 2.48 (ddd, J = 13.1, 4.5, 2.2 Hz, 1H), 2.27 - 2.18 (m, 1H), 2.11 (qd, J = 11.9, 5.1 Hz, 2H). LC/MS (ESI+) m/z = 321.0 [M+H]+.
단계 6: EtOH(6.5 mL) 및 아세트산(2.2 mL) 중 1-벤질-4-((2R,4S)-4-브로모테트라히드로-2H-피란-2-일)-1H-피라졸(400 mg, 1.25 mmol)의 용액을 풍선 및 유출구를 통해 아르곤으로 10분 동안 퍼징하였다. 탄소 상의 수산화 팔라듐(70 mg, 0.25 mmol)을 신속하게 첨가하고, 용액을 풍선 및 유출구를 통해 아르곤으로 10분 동안 추가로 퍼징하였다. 아르곤 풍선을 수소 풍선으로 교체하고, 반응물을 실온에서 밤새 교반하였다. 촉매를 셀라이트를 이용한 여과로 제거하고, 에탄올로 여러 번 세척하였다. 여액을 진공에서 농축시켰다. 미정제 물질을 헥산 중 30-100% EtOAc로 용리하는 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하여 4-((2R,4S)-4-브로모테트라히드로-2H-피란-2-일)-1H-피라졸을 백색 고형분으로서 수득하였다(160 mg, 0.692 mmol, 56% 수율). 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 12.70 (s, 1H), 7.68 (s, 1H), 7.44 (s, 1H), 4.50 (td, J = 12.0, 5.9 Hz, 1H), 4.37 (dd, J = 11.1, 2.1 Hz, 1H), 3.91 (dd, J = 11.8, 4.8 Hz, 1H), 3.51 (td, J = 12.0, 2.1 Hz, 1H), 2.43 (dt, J = 13.0, 2.6 Hz, 1H), 2.26 - 2.12 (m, 1H), 2.07 - 1.87 (m, 2H). LC/MS (ESI+) m/z = 230.0 [M+H]+.
단계 7: 70℃의 디클로로에탄(4.3 mL) 중 4-((2R,4S)-4-브로모테트라히드로-2H-피란-2-일)-1H-피라졸(150 mg, 0.649 mmol) 및 시클로프로필보론산(112 mg, 1.30 mmol)의 용액에, 구리(II) 아세테이트(119 mg, 0.649 mmol) 및 2,2’-디피리딜(101 mg, 0.649 mmol)의 혼합물을 한 번에 첨가하였다. 혼합물을 산소 분위기 하에 70℃에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 포화 NaHCO3을 첨가하였다. 생성물을 DCM으로 추출하고, 합쳐진 유기층을 염수로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 여과하고, 진공에서 농축시켰다. 미정제 물질을 헥산 중 10-60% EtOAc로 용리하는 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하여 4-((2R,4S)-4-브로모테트라히드로-2H-피란-2-일)-1-시클로프로필-1H-피라졸을 황색 오일로서 수득하였다(160 mg, 0.561 mmol, 86% 수율). 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 7.73 (s, 1H), 7.36 (s, 1H), 4.49 (tt, J = 11.9, 4.4 Hz, 1H), 4.32 (dd, J = 11.2, 2.0 Hz, 1H), 3.90 (ddd, J = 11.8, 5.0, 1.8 Hz, 1H), 3.65 (tt, J = 7.4, 3.9 Hz, 1H), 3.49 (td, J = 12.0, 2.1 Hz, 1H), 2.41 (ddt, J = 12.6, 4.3, 2.1 Hz, 1H), 2.17 (ddd, J = 12.7, 4.5, 2.2 Hz, 1H), 2.05 - 1.86 (m, 2H), 1.05 - 0.95 (m, 2H), 0.95 - 0.87 (m, 2H). LC/MS (ESI+) m/z = 270.8 [M+H]+.
방법 Int-10a
중간체 12: 4-((2R,4S,6R)-4-브로모-6-메틸테트라히드로-2H-피란-2-일)-1-시클로프로필-1H-피라졸
아르곤 하에 교반 막대가 구비된 화염 건조된 40 mL 압력 바이알에 담긴 브롬화 철(iii)(3.20 g, 10.8 mmol)에 DCM(17 mL) 중 1-시클로프로필피라졸-4-카르브알데히드(1.23 g, 9.03 mmol) 및 (2R)-펜트-4-엔-2-올(778 mg, 9.03 mmol)의 용액을 0℃에서 N2 하에 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온으로 가온시키고 밤새 교반하였다. 물을 첨가하고(20 mL), 혼합물을 30분 동안 교반하였다. 생성물을 DCM으로 추출하고, 합쳐진 유기층을 염수로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 여과하고, 진공에서 농축시켰다. 미정제 물질을 헥산 중 0-30% EtOAc로 용리하는 실리카 겔 크로마토그래피로 정제한 다음, H2O 중 5-95% MeCN으로 용리하는 역상 크로마토그래피로 정제하여 4-[(2R,4S,6R)-4-브로모-6-메틸-테트라히드로피란-2-일]-1-시클로프로필-피라졸을 맑은 시럽으로서 수득하였다(612 mg, 2.10 mmol, 23% 수율). 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ ppm 7.66 - 7.34 (m, 2H), 4.36 (dd, J = 11.4, 2.0 Hz, 1H), 4.22 (tt, J = 12.1, 4.5 Hz, 1H), 3.60 (ddd, J = 11.0, 6.2, 1.9 Hz, 1H), 3.54 (tt, J = 7.3, 3.9 Hz, 1H), 2.45 (ddt, J = 13.0, 4.4, 2.0 Hz, 1H), 2.28 (ddt, J = 12.9, 4.1, 2.0 Hz, 1H), 2.06 (q, J = 12.0 Hz, 1H), 1.78 (td, J = 12.5, 11.0 Hz, 1H), 1.25 (d, J = 6.2 Hz, 3H), 1.13 - 1.05 (m, 2H), 1.04 - 0.94 (m, 2H). LC/MS (ESI+) m/z = 285.0 [M+H]+.
방법 Int-10b
중간체 52: 4-((2R,6R)-4-요오도-6-메틸테트라히드로-2H-피란-2-일)-1-시클로프로필-1H-피라졸
2-시클로프로필-4H-이미다졸-4-카르브알데히드(1.00 당량, 2000 mg, 14.7 mmol), (2R)-펜트-4-엔-2-올(1.19 당량, 1500 mg, 17.4 mmol) 및 요오드화 테트라부틸암모늄(1.20 당량, 6500 mg, 17.6 mmol)의 용액에 트리메틸실릴 트리플루오로메탄설포네이트(1.19 당량, 3.2 ml, 17.5 mmol)를 적가하였다. 혼합물을 25℃에서 16시간 동안 교반하였다. 혼합물을 감압 하에 농축시키고, 잔류물을 포화 Na2S2O3 용액으로 급냉시키고, EtOAc(30 mL * 3)로 추출하였다. 합쳐진 유기상을 물과 염수로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 농축시키고, 역상 크로마토그래피(물 중 45% MeCN, 0.1% 포름산)로 정제하여 1-시클로프로필-4-[(2R,6R)-4-요오도-6-메틸-테트라히드로피란-2-일]피라졸(1350 mg, 4.06 mmol, 27.67% 수율)을 황색 오일로서 수득하였다. LCMS: (M+H)+ = 333.0; 100% 순도(UV 254 nm); 유지 시간 = 1.88분.
표 3. 중간체 59는 방법 Int-10b에 기술된 절차에 따라 다음과 같이 제조하였다:
방법 Int-11
중간체 13: 4-((2R,4S)-4-브로모테트라히드로-2H-피란-2-일)-1-메틸-1H-피라졸
DMF(2.2 mL) 중 4-((2R,4S)-4-브로모테트라히드로-2H-피란-2-일)-1H-피라졸(25 mg, 0.108 mmol)의 용액에 탄산 세슘(88 mg, 0.270 mmol)을 첨가하고, 이어서 요오드화 메틸(0.0081 mL, 0.130 mmol)을 첨가하였다. 반응물을 실온에서 밤새 교반하였다. 물을 첨가하고, 생성물을 EtOAc로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 H2O로 여러 번 세척한 다음, 염수로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 여과하고, 진공에서 농축시켰다. 미정제 물질을 DCM 중 0-5% MeOH로 용리하는 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하여 4-((2R,4S)-4-브로모테트라히드로-2H-피란-2-일)-1-메틸-1H-피라졸을 무색 고형분으로서 수득하였다(18 mg, 0.0734 mmol, 68% 수율). 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ ppm 7.64 (s, 1H), 7.36 (s, 1H), 4.50 (tt, J = 12.0, 4.6 Hz, 1H), 4.33 (d, J = 11.3 Hz, 1H), 3.90 (dd, J = 11.8, 4.8 Hz, 1H), 3.78 (s, 3H), 3.50 (td, J = 11.8, 2.0 Hz, 1H), 2.41 (d, J = 12.5 Hz, 1H), 2.17 (dd, J = 9.9, 6.4 Hz, 1H), 2.04 - 1.85 (m, 2H). LC/MS (ESI+) m/z = 245.0 [M+H]+. 출발 물질 4-((2R,4S)-4-브로모테트라히드로-2H-피란-2-일)-1H-피라졸의 절대 구성을 X-선 결정학에 의해 설명하였다.
방법 Int-12
중간체 14: 2-(2-메틸피리딘-4-일)모르폴린
단계 1: 4-브로모-2-메틸피리딘(6.90 mL, 58.1 mmol), 1-에톡시비닐트리부틸틴(21.6 mL, 63.9 mmol, 1.1 당량), 및 톨루엔(100 mL)으로 충진된 250 mL 압력 용기를 실온에서 10분 동안 N2 가스로 퍼징하였다. 테트라키스(트리페닐포스핀)팔라듐(2.04 g, 2.91 mmol, 5 mol%)을 N2 분위기 하에 첨가하고, 반응 혼합물을 실온에서 5분 동안 N2 가스로 퍼징하였다. 반응 용기를 밀봉하고 110℃에서 16시간 동안 교반하였다. LCMS에 의해 반응이 완료된 것으로 판단될 때, 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, KF(3.72 g, 1.1 당량), Na2CO3(6.78 g, 1.1 당량), 및 실리카(30 g)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 10분 동안 교반하고, 셀라이트 패드를 통해 여과하였다. 셀라이트 베드를 헥산(50 mL)으로 세척하고, 합쳐진 여액을 감압 하에 농축시켰다. 미정제 잔류물을 헥산 중 0-5% EtOAc로 용리하는 실리카 겔을 사용하여 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 4-(1-에톡시비닐)-2-메틸피리딘을 무색 오일로서 수득하였다(7.46 g, 79%). 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δH 8.41 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 7.35 (s, 1 H), 8.41 (d, J = 4.7 Hz, 1 H), 5.01 (s, 1H), 4.46 (s, 1 H), 3.91 (q, J = 6.9 Hz, 2H), 2.47 (s, 3H), 1.35 (t, J = 6.9 Hz, 3H). ESI-MS (m/z+): 164.2 [M+H]+, LC-RT: 0.505분.
단계 2: 3M HCl(30.5 mL, 91.4 mmol, 2 당량) 중 5-(1-에톡시비닐)-2-메틸피리딘(7.46 g, 45.7 mmol)의 현탁액을 실온에서 30분 동안 교반하였다. LCMS에 의해 반응이 완료된 것으로 판단될 때, 반응 혼합물을 물(60 mL)로 희석하고, 5M NaOH로 pH 11로 염기화하고, EtOAc(3 x 60 mL)로 추출하였다. 유기층을 건조시키고(Na2SO4), 여과하고 감압 하에 농축시켜 1-(2-메틸피리딘-4-일)에탄-1-온을 무색 오일로서 수득하였다(5.35 g, 82%). 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δH 8.65 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 7.69 (s, 1H), 7.60 (d, J = 4.2 Hz, 1H), 2.49 (s, 3H), 2.57 (s, 3H). ESI-MS (m/z+): 136.10 [M+H]+, LC-RT: 0.202분.
단계 3: 100 mL 둥근 바닥 플라스크에 1-(2-메틸피리딘-4-일)에탄-1-온(5.00 g, 37.0 mmol) 및 HBr(AcOH 중 33%, 21 mL)을 채웠다. 얼음/수조를 사용하여 반응 혼합물을 0℃로 냉각시키고, HBr(AcOH 중 33%, 7 ml) 중 브롬(1.9 mL, 37.0 mmol, 1.0당량)의 용액을 적가하였다. 반응 혼합물을 40℃에서 1시간 동안 교반한 다음, 80℃에서 1시간 동안 추가로 교반하였다. LCMS에 의해 반응이 완료된 것으로 판단될 때, 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, Et2O(100 mL)에 붓고, 실온에서 30분 동안 교반하였다. 침전물을 여과하고, Et2O(50 mL)로 세척하고, 감압 하에 건조시켜 2-브로모-1-(2-메틸피리딘-4-일)에탄-1-온(HBr 염)을 황색 고형분으로서 수득하였다(10.7 g, 96%). ESI-MS (m/z+): 274.0 [M+H]+, LC-RT: 1.459분.
단계 4: 0℃의 THF(182 mL) 중 2-브로모-1-(2-메틸피리딘-4-일)에탄-1-온 아세테이트(10.7 g, 39.0 mmol)의 용액에 N-벤질에탄올아민(5.54 mL, 39.0 mmol, 1.0당량)에 이어서 DIPEA(13.6 mL, 78.1 mmol)를 서서히 첨가하였다. 반응물을 밤새 서서히 실온으로 가온시킨 후 침전물이 형성되었다. 용매를 진공에서 제거하였다. 그런 다음, 물을 반응 혼합물에 첨가하고, 수성 상을 EtOAc(3x100 mL)로 추출하였다. 합쳐진 유기상을 Na2SO4로 건조시키고, 여과하고, 진공에서 농축시켜 2-(벤질(2-히드록시에틸)아미노)-1-(2-메틸피리딘-4-일)에탄-1-온을 황색 고형분으로서 수득하였다(11.1 g, 100%). ESI-MS (m/z+): 285.10 [M+H]+, LC-RT: 0.642분.
단계 5: 500 mL 둥근 바닥 플라스크를 메탄올(390 mL) 중 2-(벤질(2-히드록시에틸)아미노)-1-(2-메틸피리딘-4-일)에탄-1-온(11.10 g, 39.0 mmol, 1 당량)으로 채우고 0℃로 냉각시켰다. 수소화붕소나트륨(2.95 g, 78.1 mmol, 2.0 당량)을 나누어 첨가한 다음, 반응물을 12시간에 걸쳐 점진적으로 실온으로 가온시켰다. LCMS에 의해 반응이 완료된 것으로 판단될 때, 용액을 0℃로 냉각시키고, 물(250 mL)을 첨가하였다. 생성물을 EtOAc(3x100 mL)로 추출하고, 합쳐진 유기층을 염수로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 여과하고, 진공에서 농축시켜 순수한 생성물 2-(벤질(2-히드록시에틸)아미노)-1-(2-메틸피리딘-4-일)에탄-1-올을 맑은 오일로서 수득하였다(8.45 g, 29.5 mmol, 75.6%). ESI-MS (m/z+): 287.20 [M+H]+, LC-RT: 0.215분.
단계 6: 질소 하에, 화염 건조된 50 mL 둥근 바닥 플라스크에 4-벤질-2-(2-메틸-4-피리딜)모르폴린(1.00 당량, 1.35 g, 5.03 mmol), Pd/C(0.252 당량, 135 mg, 1.27 mmol), 및 HCl(디옥산 중 4 M, 1.00 당량, 5.03 mmol)을 채웠다. 반응 바이알을 N2로 퍼징한 다음, 반응 혼합물을 H2로 2분 동안 버블링하였다. 용액으로부터 바늘을 제거하고, 반응물을 H2(풍선)의 양압 하에 실온에서 밤새 교반하였다. TLC 및 LCMS에 의해 완전한 전환이 관찰되었다. 반응 혼합물을 셀라이트 패드를 이용해 여과하고, 용매를 진공에서 제거하여 목적하는 2-(2-메틸-4-피리딜)모르폴린 히드로클로라이드를 수득하였다(1.01 g, 4.70 mmol, 93.51%). ESI-MS (m/z+): 179.1 [M+H]+, LC-RT: 0.240분. 1H NMR (DMSO-d6, 400 MHz): δH 8.53 (1H, d, J = 5.4 Hz), 7.45 (1H, s), 7.36 (1H, d, J = 5.3 Hz), 4.94 (1H, d, J = 11.0 Hz), 4.13 (1H, d, J = 12.7 Hz), 4.00 (1H, t, J = 12.3 Hz), 3.52 (1H, d, J = 12.7 Hz), 3.06 (1H, t, J = 12.4 Hz), 2.90 (1H, t, J = 11.9 Hz), 2.54 (3H, s).
방법 Int-13
중간체 15: 2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)모르폴린-4-윰 클로라이드
단계 1: DMF(150 mL) 중 피라졸(5.6 g, 81.9 mmol)의 용액에 탄산세슘(48.5 g, 149 mmol)을 첨가하고, 이어서 브롬화 벤질(9.2 mL, 74.5 mmol)을 첨가하였다. 반응물을 실온에서 3일 동안 교반하였다. 물을 첨가하고, 생성물을 EtOAc로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 H2O로 여러 번 세척한 다음 염수로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공에서 농축시켜 1-벤질-1H -피라졸(11.8 g, 74.6 mmol, 94% 수율)을 황색 액체로서 수득하고, 이를 추가 정제 없이 다음 단계에 넣었다. 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ ppm 7.56 (d, J = 1.9 Hz, 1H), 7.41 - 7.27 (m, 4H), 7.24 - 7.18 (m, 2H), 6.28 (t, J = 2.2 Hz, 1H), 5.33 (s, 2H). LC/MS (ESI+) m/z = 159.0 [M+H]+.
단계 2:무수 아세트산(11.0 mL, 116 mmol) 중 1-벤질-1H -피라졸(5.1 g, 32.3 mmol)의 용액에 황산(0.17 mL, 3.23 mmol)을 첨가하였다. 용액을 4시간 동안 환류시켰다. 반응물을 실온으로 냉각시키고, 물을 첨가하였다. 혼합물을 0℃로 냉각시키고 NaOH로 pH >10으로 염기화하였다. 생성물을 DCM으로 추출하고, 합쳐진 유기층을 염수로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 여과하고, 진공에서 농축시켰다. 미정제 물질을 헥산 중 10-40% EtOAc로 용리하는 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하여 1-(1-벤질-1H -피라졸-4-일)에탄-1-온-1(4.21 g, 21.0 mmol, 64% 수율)을 베이지색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ ppm 7.93 (s, 1H), 7.84 (s, 1H), 7.46 - 7.31 (m, 3H), 7.29 - 7.24 (m, 2H), 5.31 (s, 2H), 2.41 (s, 3H). LC/MS (ESI+) m/z = 201.1 [M+H]+.
단계 3: DCM(85 mL) 및 EtOH (21.2 mL) 중 1-(1-벤질-1H-피라졸-4-일)에탄-1-온(10.6 g, 52.9 mmol)의 용액에 피리디늄 트리브로마이드(18.8 g, 52.9 mmol)를 첨가하였다. 반응물을 실온에서 밤새 교반하였다. 반응물을 물(50 mL)로 희석하고, 나트륨 설파이트(1.7 g, 13.2 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 20분 동안 교반하였다. 층을 분리시키고, 수성층을 DCM으로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 염수로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 여과하고, 진공에서 농축시켰다. 합쳐진 미정제물을 헥산 중 0-30% EtOAc로 용리하는 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 1-(1-벤질-1H-피라졸-4-알)-2-브로모에탄-1-온(11.5 g, 41.2 mmol, 77% 수율)을 백색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ ppm 8.01 (s, 1H), 7.94 (s, 1H), 7.47 - 7.33 (m, 3H), 7.33 - 7.21 (m, 2H), 5.33 (s, 2H), 4.16 (d, J = 1.4 Hz, 2H). LC/MS (ESI+) m/z = 279.0 [M+H]+.
단계 4: 0℃의 THF(100 mL) 중 1-(1-벤질-1H-피라졸-4-일)-2-브로모에탄-1-온-1(6.0 g, 21.5 mmol)의 용액에 N-벤질에탄올아민(3.1 mL, 21.5 mmol) 및 N,N-디이소프로필에틸아민(7.5 mL, 43.0 mmol)을 서서히 첨가하였다. 반응물을 밤새 실온으로 서서히 가온시켰다. 용매를 진공에서 제거하였다. 그런 다음, 물을 반응 혼합물에 첨가하고, 생성물을 EtOAc로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 Na2SO4로 건조시키고, 여과하고, 진공에서 농축시켰다. 미정제 물질을 DCM 중 0-10% MeOH로 용리하는 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하여 2-(벤질(2-히드록시에틸)아미노)-1-(1-벤질-1H-피라졸-4-일)에탄-1-온(7.0 g, 20.1 mmol, 91% 수율)을 황색 반고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ ppm 8.57 (s, 1H), 7.96 (s, 1H), 7.20 - 7.31 (m, 10H), 5.36 (s, 2H), 4.44 (t, J = 5.2 Hz, 1H), 3.68 (d, J = 3.1 Hz, 2H), 3.43 - 3.53 (m, 4H), 2.60 (d, J = 6.2 Hz, 2H). LC/MS (ESI+) m/z = 349.9 [M+H]+.
단계 5: 메탄올(133 mL) 중 2-[벤질(2-히드록시에틸)아미노]-1-(1-벤질-1H-피라졸-4-일)에타논(6.7 g, 19.9 mmol)의 용액에 수소화붕소나트륨(1.5 g, 39.8 mmol)을 0℃에서 매우 서서히 첨가하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 30분 동안 교반한 다음, 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 용매를 진공에서 제거하고(약 90%), 혼합물을 0℃로 냉각시켰다. 물을 서서히 첨가하고, 생성물을 EtOAc로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 염수로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공에서 농축시켜 2-[벤질(2-히드록시에틸)아미노]-1-(1-벤질-1H -피라졸-4-일)에탄-1-올(6.6 g, 17.9 mmol, 90% 수율)을 황색 반고형분으로서 수득하고, 이를 정제 없이 다음 단계로 옮겼다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 7.62 (s, 1H), 7.45 - 7.12 (m, 10H), 5.25 (s, 2H), 4.81 (d, J = 3.8 Hz, 1H), 4.70 - 4.54 (m, 1H), 4.37 (t, J = 5.6 Hz, 1H), 3.82 - 3.60 (m, 2H), 3.42 (p, J = 5.8 Hz, 2H), 2.73 - 2.52 (m, 3H). LC/MS (ESI+) m/z = 352.2 [M+H]+.
단계 6: 6M 수성 HCl(46 mL, 277 mmol) 중 2-[벤질(2-히드록시에틸)아미노]-1-(1-벤질-1H-피라졸-4-일)에탄-1-올(6.4 g, 18.2 mmol)의 용액을 110℃에서 2시간 동안 환류하였다. 용액을 진공에서 농축시키고 고진공 하에 건조시켜 4-벤질-2-(1-벤질-1H -피라졸-2-윰-4-일)모르폴린-4-윰 디클로라이드(7.65 g, 18.8 mmol, 정량적 수율)을 베이지색 거품으로서 수득하고, 이를 정제 없이 다음 단계로 옮겼다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ ppm 12.17 (s, 1H), 7.87 (s, 1H), 7.71 - 7.64 (m, 2H), 7.60 (s, 1H), 7.48 (s, 1H), 7.46 - 7.40 (m, 3H), 7.37 - 7.24 (m, 3H), 7.24 - 7.15 (m, 2H), 5.29 (s, 2H), 5.00 (dd, J = 11.1, 2.3 Hz, 1H), 4.58 - 4.22 (m, 2H), 4.16 - 3.90 (m, 2H), 3.36 (d, J = 12.1 Hz, 1H), 3.27 - 2.98 (m, 3H). LC/MS (ESI+) m/z = 334.2 [M+H]+.
단계 7: 에탄올(12 mL) 및 물(12 mL) 중 4-벤질-2-(1-벤질-1H -피라졸-2-윰-4-일)모르폴린-4-윰 디클로라이드(2.00 g, 4.92 mmol)의 용액에 2M 수성 HCl(7.4 mL, 14.8 mmol)을 첨가하였다. 용액을 풍선 및 유출구를 통해 아르곤으로 5분 동안 퍼징하였다. 탄소 상의 수산화팔라듐(276 mg, 0.98 mmol)을 신속하게 첨가하고, 혼합물을 풍선을 통해 아르곤으로 퍼징하고 5분 동안 다시 유출하였다. 아르곤 풍선을 수소 풍선으로 교체하고, 반응물을 실온에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 셀라이트를 통해 여과하고, 에탄올 및 물로 여러 번 세척하였다. 여액을 진공에서 농축시켜 2-(1H -피라졸-4-일)모르폴린-4-윰 염산염(1.13 g, 4.91 mmol, 정량적 수율)을 백색 고형분으로서 수득하고, 이를 동결건조하고, 정제 없이 다음 단계로 옮겼다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ ppm 13.03 (s, 1H), 10.03 (s, 2H), 7.76 (s, 1H), 7.53 (s, 1H), 4.83 (d, J = 10.9 Hz, 1H), 3.95 (d, J = 7.8 Hz, 2H), 3.25 (d, J = 12.5 Hz, 1H), 3.11 (d, J = 12.7 Hz, 1H), 2.97 (q, J = 11.5, 10.7 Hz, 2H). LC/MS m/z = (ESI+) 154.1 [M+H]+.
단계 8: 물(100 mL) 및 1,4-디옥산(50 mL) 중 2-(1H-피라졸-4-일)모르폴린-4-윰 클로라이드(1.5 g, 7.91 mmol)의 용액에 탄산나트륨(2.5 g, 23.7 mmol)에 이어서 디-터트-부틸 디카르보네이트(2.1 g, 9.49 mmol)를 첨가하고, 반응물을 실온에서 3일 동안 교반하였다. 혼합물을 진공에서 농축시켜 건조시키고, 헥산 중 30 내지100% EtOAc로 용리하는 실리카 겔 크로마토그래피로 직접 정제하여 터트-부틸 2-(1H-피라졸-4-일)모르폴린-4-카르복실레이트(705 mg, 2.78 mmol, 35% 수율)를 백색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, Chloroform-d) δ ppm 10.52 - 10.15 (m, 1H), 7.60 (s, 2H), 4.60 - 4.21 (m, 1H), 4.10 - 3.99 (m, 1H), 3.98 - 3.75 (m, 2H), 3.65 (td, J = 11.4, 2.8 Hz, 1H), 3.02 (d, J = 35.1 Hz, 2H), 1.48 (s, 9H). LC/MS (ESI+) m/z = 254.2 [M+H]+.
단계 9: 디클로로에탄(28 mL) 중 터트-부틸 2-(1H-피라졸-4-일)모르폴린-4-카르복실레이트(1.07 g, 4.25 mmol)의 용액에 시클로프로필보론산(730 mg, 8.50 mmol) 및 탄산 나트륨(1.35 g, 12.8 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 70℃로 가열하였다. 구리(II) 아세테이트(781 mg, 4.25 mmol) 및 2,2'-디피리딜(664 mg, 4.25 mmol)의 고체 혼합물을 반응 혼합물에 한꺼번에 첨가하였다. 반응물을 산소 분위기 하에 70℃에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 실온으로 냉각시키고 진공에서 농축시켰다. 잔류물에 포화 NaHCO3을 첨가하고, 생성물을 EtOAc로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 염수로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 진공에서 농축시켰다. 미정제 물질을 헥산 중 0-60% EtOAc로 용리하는 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하여 터트-부틸 2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)모르폴린-4-카르복실레이트(0.97 g, 3.30 mmol, 78% 수율)를 황색 오일로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ ppm 7.45 (s, 2H), 4.41 (d, J = 10.2 Hz, 1H), 4.11 - 3.71 (m, 3H), 3.68 - 3.50 (m, 2H), 3.15 - 2.84 (m, 2H), 1.47 (s, 9H), 1.15 - 1.04 (m, 2H), 1.02 - 0.94 (m, 2H). LC/MS (ESI+) m/z = 294.1 [M+H]+. 단계 10: 0℃에서 1,4-디옥산(19 mL) 중 터트-부틸 2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)모르폴린-4-카르복실레이트(1.14 g, 3.88 mmol)의 용액에 HCl(1,4-디옥산 중 4 M)(8.0 mL, 77.6 mmol)을 적가하였다. 용액을 실온으로 가온시키고 2일 동안 교반하였다. 용액을 진공에서 농축 건조시켜 2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)모르폴린-4-윰 클로라이드(894 mg, 3.83 mmol, 99% 수율)을 베이지색 고형분으로서 수득하였고, 이를 정제 없이 다음 단계에서 사용하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 9.96 - 9.42 (m, 2H), 7.86 (s, 1H), 7.45 (s, 1H), 4.73 (dd, J = 11.4, 2.8 Hz, 1H), 3.98 (dd, J = 12.7, 3.8 Hz, 1H), 3.88 (dd, J = 13.8, 11.1 Hz, 1H), 3.74 - 3.59 (m, 1H), 3.32 (d, J = 12.4 Hz, 1H), 3.19 (d, J = 12.6 Hz, 1H), 3.10 - 2.92 (m, 2H), 1.04 - 0.96 (m, 2H), 0.97 - 0.89 (m, 2H). LC/MS (ESI+) m/z = 194.1 [M+H]+. 방법 Int-14
중간체 16: 2-(1-시클로프로필-1H-피라졸-4-일)-6-메틸모르폴린
단계 1: DMF(100 mL) 중 1-(1H-피라졸-4-일) 에탄-1-온(10 g, 0.1 mol) 및 Cs2CO3(48.3 g, 0.15 mol)의 교반 용액에 (브로모메틸)벤젠(20.3 g, 0.12mol)을 N2 하에 실온에서 적가하였다. 반응물을 80℃에서 1시간 동안 교반하였다. 혼합물을 물(500 mL)에 붓고 EA(100 mL x 3)로 추출하였다. 유기상을 염수(100 mL x 2)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고 여과하였다. 여액을 진공 하에 농축시키고, 잔류물을 실리카 겔(PE:EA = 5:1)을 이용해 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 1-(1-벤질-1H-피라졸-4-일)에탄-1-온을 연황색 고형분으로서 수득하였다(16.0 g). LCMS: (M+H)+ = 201.1; 순도 = 97.36% (UV 254nm).
단계 2: 1,4-디옥산(40 mL) 중 1-(1-벤질-1H-피라졸-4-일)에탄-1-온(3.9 g,19.47 mmol)의 용액에 CuBr2(7.23 g, 32.37 mmol)를 실온에서 첨가하였다. 첨가 후, 반응 혼합물을 85℃에서 7시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 물(160 mL)에 붓고 EA(80 mL x 3)로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 무수 Na2SO4로 건조시키고, 여과하고 농축시켰다. 미정제 생성물을 실리카 겔 컬럼(PE/EA, 1:10 내지 1:5)으로 정제하여 1-(1-벤질-1H-피라졸-4-일)-2-브로모에탄-1-온을 백색 고형분으로서 수득하였다(2.9 g, 10.39 mmol). LCMS: (M+H)+ = 280.
단계 3: 실온의 THF(20 mL) 중 화합물 1-(1-벤질-1H-피라졸-4-일)-2-브로모에탄-1-온(2.9 g, 10.39 mmol)의 용액에 1-(벤질아미노)프로판-2-올(1.89 g, 11.44 mmol)을 N2 하에 서서히 첨가하였다. 반응 혼합물을 35℃에서 3시간 동안 교반하여 황색 용액을 수득하였다. 물(20 mL)을 적가하여 반응을 급냉시켰다. 반응 혼합물을 EA(50 mL x 3)로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 무수 Na2SO4로 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 합쳐진 미정제 물질을 실리카 겔의 플러그 상에 흡수시키고, 실리카 겔 컬럼(PE/EA, 1:10 내지 1:2)을 통해 크로마토그래피로 정제하여 화합물 2-(벤질(2-히드록시프로필)아미노)-1-(1-벤질-1H-피라졸-4-일)에탄-1-온을 수득하였다(2.81 g, 7.73 mmol). LCMS: (M+H)+ = 364.
단계 4: 0℃의 메탄올(28 mL) 중 화합물 2-(벤질(2-히드록시프로필)아미노)-1-(1-벤질-1H-피라졸-4-일)에탄-1-온(2.8 g,7.70 mmol)의 용액에 테트라히드로붕산나트륨(0.58 g, 15.40 mmol)을 나누어 첨가하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 30분 동안 교반한 다음, 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 얼음처럼 차가운 물(20 mL)을 적가하여 반응을 급냉시켰다. 반응 혼합물을 EA(50 mL x 3)로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 무수 Na2SO4로 건조시키고, 여과하고 농축시켜 1-(벤질(2-(1-벤질-1H-피라졸-4-일)-2-히드록시에틸)아미노)프로판-2-올(2.8 g, 7.66 mmol)을 황색 액체 화합물로서 수득하고, 이를 추가 정제 없이 다음 단계에 직접 사용하였다. LCMS: (M+H)+ = 366.
단계 5: 실온의 1,4-디옥산(15 mL) 중 화합물 1-(벤질(2-(1-벤질-1H-피라졸-4-일)-2-히드록시에틸)아미노)프로판-2-올(2.8 g, 7.66 mmol)의 용액에 6M HCl(15 ml)을 서서히 첨가하였다. 반응 혼합물을 110℃에서 4시간 동안 교반하였다. 15% KOH를 적가하여 반응을 급냉시키고, pH를 8-9로 조정하였다. 반응 혼합물을 EA(100 mL x 3)로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 무수 Na2SO4로 건조시키고, 여과하고 농축시켜 4-벤질-2-(1-벤질-1H-피라졸-4-일)-6-메틸모르폴린(2.39 g, 6.88 mmol)을 황색 액체 화합물로서 수득하고, 이를 추가 정제 없이 다음 단계에 직접 사용하였다. LCMS: (M+H)+ = 348.
단계 6: 메탄올(12 mL) 및 2.4 mL HCl(6 M) 중 4-벤질-2-(1-벤질-1H-피라졸-4-일)-6-메틸모르폴린(2.39 g, 6.88 mmol)의 용액에 Pd(OH)2/C(0.48 g)를 첨가하고, 반응 혼합물을 30℃에서 16시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 여과하고, 여액을 진공 하에 농축시키고, Na2CO3 수용액으로 잔류물의 ph를 9-10으로 조정하였다. 수성상을 다음 단계에서 직접 사용하였다. LCMS: (M+H)+ =168.
단계 7:물/1,4-디옥산(10 mL/10 mL) 중 단계 6의 용액에 Na2CO3(0.88 g, 8.30 mml) 및 BoC2O(1.58 g, 7.24 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 물(20 mL)에 붓고 EA(50 mL x 3)로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 무수 Na2SO4로 건조시키고, 여과하고 농축시켜 미정제 터트-부틸 2-메틸-6-(1H-피라졸-4-일)모르폴린-4-카르복실레이트를 수득하였다. 미정제 생성물을 다음 단계에서 직접 사용하였다. LCMS: (M+H)+ = 268.
단계 8: DMF(35 mL) 중 터트-부틸 2-메틸-6-(1H-피라졸-4-일)모르폴린-4-카르복실레이트 (1.77 g, 6.62 mmol)의 용액에 시클로프로필보론산(1.71 g, 19.9mmol), Cu(OAc)2(1.32 g, 7.27 mmol), Na2CO3(1.40 g, 13.2 mmol), 2,2'-디피리딜(1.14 g, 7.30 mmol)을 실온에서 첨가하였다. 반응 혼합물을 80℃에서 10시간 동안 교반하였다. 혼합물을 물(100 mL)에 붓고 EA(60 mL x 3)로 추출하였다. 유기상을 염수(60 mL x 2)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고 여과하였다. 여액을 진공 하에 농축시키고, 미정제 생성물을 실리카 겔 컬럼(PE/EA, 1:10 내지 1:5)으로 정제하여 터트-부틸 2-(1-시클로프로필-1H-피라졸-4-일)-6-메틸모르폴린-4-카르복실레이트를 황색 액체로서 수득하였다(1.6 g, 5.20 mmol). LCMS: (M+H)+ = 308.
단계 9: 디클로로메탄(10 mL) 중 터트-부틸 2-(1-시클로프로필-1H-피라졸-4-일)-6-메틸모르폴린-4-카르복실레이트(1.6 g, 5.20 mmol)의 용액에 TFA(3 mL)를 첨가하고, 반응 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 여액을 진공 하에 농축시켜 2-(1-시클로프로필-1H-피라졸-4-일)-6-메틸모르폴린을 황색 액체로서 수득하였다(1.02 g, 4.93 mmol). LCMS: (M+H)+ = 208.
방법 Int-15
중간체 17: 7-클로로-2-메틸-5-(3-(트리플루오로메틸)바이시클로[1.1.1]펜탄-1-일)피리도[3,4-b]피라진
100 mL 둥근 바닥 플라스크에 THF(10 mL) 중 4-클로로-2-플루오로-1-요오도벤젠(1.0 g, 3.91 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 -40℃로 냉각시키고, 이소프로필마그네슘 클로라이드(2.144 mL, 10.73 mmol)를 -40℃에서 적가하고 30분 동안 교반하였다. 그런 다음, 반응 혼합물을 -78℃로 냉각시켰다. ZnCl2(2.05 mL, 3.9 mmol)(THF 중 2 M 용액)를 적가하고, 반응 혼합물을 실온까지 가온시킨 다음, 20 mL의 THF를 첨가하고 10분 동안 교반한 다음, 교반을 꺼 침전물이 침전되도록 하였다. 반응 혼합물을 다음 단계에 직접 사용하였다.
건조된 100 mL 둥근 바닥 플라스크에 비스(디-터트-부틸(4-디메틸아미노페닐)포스핀)-디클로로팔라듐(46.4mg, 0.065 mmol) 및 2,4-디클로로-6,7-디메틸프테리딘(0.3 g, 1.31 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 N2로 퍼징하고, THF(3 mL)에 용해시켰다. (4-클로로-2-플루오로페닐)요오드화 아연(II)(11.9 mL, 1.31 mmol, 상기 절차에 의해 제조됨)을 실온에서 혼합물에 조금씩 첨가하고 20분 동안 교반하였다. 반응물을 포화 NaHCO3 용액(20 mL)으로 급냉시켰다. 수성층을 에틸 아세테이트(2 x 30 mL)로 추출하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 헥산 중 0-50% 에틸 아세테이트(40% 에틸 아세테이트에서 용리된 생성물)가 포함된 자동화된 실리카 컬럼(100)을 사용하여 정제하여 2-클로로-4-(4-클로로-2-플루오로페닐)- 6,7-디메틸프테리딘(1.0 g, 3.12 mmol, 71 % 수율)을 자주색 고형분으로서 수득하였다. LCMS: (M+H)+ = 323.0; 순도 = 90.67% (214 nm).
표 4. 중간체 18 내지 28은 방법 Int-15에 기술된 절차에 따라 다음과 같이 제조하였다:
방법 Int-16
중간체 29: 2-클로로-4-(4-클로로-2,3-디플루오로-페닐)-6,7-디메틸-프테리딘
20 mL 마이크로웨이브 바이알에 2,4-디클로로-6,7-디메틸-프테리딘(500 mg, 2.18 mmol), (4-클로로-2,3-디플루오로-페닐)보론산(420 mg, 2.18 mmol), 탄산나트륨(694 mg, 6.55 mmol), 1,4-디옥산(10 mL), 및 물(3 mL)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 질소로 10분 동안 탈기시켰다. Pd(PPh3)4(126 mg, 0.109 mmol)를 첨가하고, 반응 혼합물을 40℃에서 3.5시간 동안 가열하였다. 혼합물을 실온으로 냉각시키고, DCM(50 mL) 및 물(10 mL)로 희석하였다. 수성층을 DCM(2 x 20 mL)으로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 염수(10 mL)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 진공에서 농축시켰다. 미정제 잔류물을 EtOAc 및 헥산(50-60%)을 사용하여 실리카 겔 크로마토그래피(40 g SilicaSep 컬럼)로 정제하여 2-클로로-4-(4-클로로-2,3-디플루오로-페닐)-6,7-디메틸-프테리딘을 갈색 고형분으로서 수득하였다(176 mg, 0.516 mmol, 24%). ESI-MS (m/z+): 342.0 [M+H]+, LC-RT: 3.579분. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 7.53 - 7.46 (m, 1H), 7.43 - 7.35 (m, 1H), 2.86 (s, 3H), 2.75 (s, 3H). 19F NMR (376 MHz, CDCl3) δ ppm -130.92 (s), -137.18 (s).
표 5. 중간체 30, 42 및 43은 표시된 출발 물질을 사용하여 방법 Int-16에 기술된 절차에 따라 제조하였다:
방법 Int-17
중간체 31: 2-클로로-6,7-디메틸-4-(6-(트리플루오로메틸)피리딘-3-일)프테리딘
20 mL 밀봉된 튜브에 2,4-디클로로-6,7-디메틸프테리딘(2당량, 1.2 g, 5.24 mmol) 및 2-트리플루오로메틸-피리딘-5-보론산(1당량, 500 mg, 2.62 mmol), 1,4-디옥산(24.0 mL), 및 물(4.0 mL)을 첨가하였다. 탄산칼륨(6당량, 2.18 g, 15.8 mmol)을 첨가하고, 반응 혼합물을 질소로 10분 동안 탈기시켰다. RuPhos Pd G3(0.1당량, 200 mg, 283 μmol)을 첨가하고, 반응 혼합물을 50℃에서 1시간 동안 가열하였다. 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 물(50.0 mL)로 희석하고, EtOAc(3 x 100 mL)로 추출하였다. 유기 추출물을 Na2SO4로 건조시키고, 여과하고, 진공에서 농축시켰다. 미정제 물질을 헥산 및 EtOAc(50-60%)를 사용하여 실리카 겔 크로마토그래피(120 g 카트리지)로 정제하여 2-클로로-6,7-디메틸-4-(6-(트리플루오로메틸)피리딘-3-일)프테리딘을 갈색 고형분으로서 수득하였다(867 mg, 65% 수율). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 9.88 (s, 1H), 8.94 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.91 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 2.89 (s, 3H), 2.83 (s, 3H). 19F NMR (376 MHz, 클로로포름-d) δ ppm -68.2 (s). m/z (ESI+): 340.0 [M+H]+.
방법 Int-18
중간체 32: 7-클로로-2,3-디메틸-5-(3-(트리플루오로메틸)바이시클로[1.1.1]펜탄-1-일)피리도[3,4-b]피라진
단계 1: THF(8 mL) 중 마그네슘(1.10당량, 204 mg, 8.4 mmol)이 충진된 화염 건조 플라스크에 1,2-디브로모에탄(5 mol%, 33 uL, 0.38 mmol)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 30분 동안 교반한 후, THF(8 mL) 중 1-요오도-3-(트리플루오로메틸)바이시클로[1.1.1]펜탄(1.00 당량, 2 g, 7.6 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 격렬하게 교반하면서 74℃에서 1시간 동안 가열하고 실온까지 냉각시켰다. 생성된 용액을 염화 아연 용액(THF 중 0.5 M, 1.10 당량, 16.8 mL, 8.4 mmol)에 적가하고, 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 유기아연 용액을 Knochel 절차를 사용하여 적정하여 상응하는 아연산염 시약의 0.12M 용액을 수득하였다(50% 수율).
단계 2: 화염 건조된 플라스크에 5,7-디클로로-2,3-디메틸-피리도[3,4-b]피라진(0.80 당량, 701 mg, 3.1 mmol), Pd(amphos)Cl2 (5 mol%, 136 mg, 0.19 mmol) 및 THF(7.7 mL)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 N2 하에 5분 동안 탈기하고, 3-(트리플루오로메틸)-1-바이시클로[1.1.1]펜타닐 염화 아연(1.00 당량, 31 mL, 3.84 mmol)의 용액을 적가하였다. 반응 혼합물을 45℃에서 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 용매를 진공에서 제거하였다. 잔류물을 DCM(80 mL)에 용해시키고 H2O(40 mL) 및 HCl(1 M, 15 mL)로 세척하였다. 수성상을 DCM(3 x 25 mL)으로 추출하고, 합쳐진 유기상을 염수로 세척하고, MgSO4 상에서 건조시키고, 휘발성 물질을 진공에서 제거하였다. 미정제 물질을 플래쉬 크로마토그래피(Isco RediSep® 컬럼 25 g, 100% DCM 내지 DCM 중 10% MeOH의 구배 사용)로 정제하여 표제 생성물 7-클로로-2,3-디메틸-5-[3-(트리플루오로메틸)-1-바이시클로[1.1.1]펜타닐]피리도[3,4-b]피라진(490 mg, 1.50 mmol, 39%)을 백색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 7.75 (s, 1H), 2.75 (s, 3H), 2.74 (s, 3H), 2.63 (s, 6H). 19F NMR (376 MHz,CDCl3) δ ppm -73.0 (s). m/z (ESI+): 328.1 [M+H]+.
표 6. 중간체 33 내지 36을, 1-요오드-3-(트리플루오로메틸)바이시클로[1.1.1]펜탄을 사용하고,표시된 출발 물질을 사용하여, 방법 Int-18에 기술된 절차에 따라 제조하였다:
방법 Int-19
중간체 37: 1-메틸-4-(4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)-5,6-디히드로-2H-피란-2-일)-1H-피라졸
단계 1: 20 mL 신틸레이션 바이알에 1-메틸-1H-피라졸-4-카르브알데히드(200 mg, 1.816 mmol)를 채우고, 이를 N2로 퍼징하였다. 그런 다음 (2-히드록시에틸)아세틸렌(191 mg, 206 μl, 2.72 mmol) 및 DCM(3.6 mL)을 첨가하였다. 바이알에 트리플루오로메탄 설폰산(327 mg, 194 μl, 2.180 mmol)을 0℃에서 서서히 첨가하였다. 5분 후, 반응물을 실온으로 가온시켰다. 5시간 후, 추가의 트리플루오로메탄 설폰산(327 mg, 194 μl, 2.180 mmol)을 첨가하였다. 추가로 18시간이 지난 후, 미정제 반응물을 포화 NaHCO3 용액으로 조심스럽게 급냉시키고 DCM으로 세척하였다. 합쳐진 유기층을 Na2SO4로 건조시키고, 여과하고, 농축시켰다. 생성된 미정제 물질을 실리카 겔의 플러그 상에 흡수시키고, 헵탄 중 0%-70% EtOAc로 용리하는, Redi-Sep 사전 충진식 실리카 겔 컬럼(40 g)을 통해 크로마토그래피로 정제하여 6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-3,6-디히드로-2H-피란-4-일 트리플루오로메탄설포네이트를 연황색 오일로서 수득하였다(227 mg, 0.727 mmol, 40% 수율). m/z (ESI, +ve ion): 313.0 [M+H]+. 1H NMR (500 MHz, 클로로포름-d) δ ppm 7.49 (s, 1 H), 7.37 (s, 1 H), 5.96 (dt, J=2.6, 1.4 Hz, 1 H), 5.34 (q, J=2.6 Hz, 1 H), 3.98 - 4.04 (m, 1 H), 3.92 (s, 3 H), 3.85 (ddd, J=11.5, 6.4, 5.2 Hz, 1 H), 2.45 - 2.60 (m, 2 H).
단계 2:20 mL 신틸레이션 바이알에 6-(1-메틸-1H-피라졸-4-일)-3,6-디히드로-2H-피란-4-일 트리플루오로메탄설포네이트(227 mg, 0.727 mmol), DCM과 [1,1’-비스(디페닐포스피노)페로센]-디클로로팔라듐(ii)의 복합체(59.4 mg, 0.073 mmol), 비스(피나콜라토)디보론(277 mg, 1.09 mmol), 및 칼륨 아세테이트(285 mg, 2.91 mg)을 충진하였다. 플라스크를 N2로 퍼징하고, 1,4-디옥산(2.9 mL)을 첨가하였다. 반응물을 90℃로 2시간 동안 가열하고, 반응물을 실온으로 냉각시켰다. 반응 혼합물을 EtOAc로 희석하고 실리카 겔의 플러그를 통해 여과하였다. 미정제 물질을 헵탄 중 0% 내지 100% EtOAc로 용리하는 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하여 1-메틸-4-(4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)-5,6-디히드로-2H-피란-2-일)-1H-피라졸을 적색 오일로서 수득하였다(87 mg, 0.30 mmol, 41% 수율). m/z (ESI, +ve ion): 291.2 [M+H]+. 1H NMR (500 MHz, 클로로포름-d) δ ppm 7.48 (s, 1 H), 7.36 (s, 1 H), 6.61 (q, J=1.9 Hz, 1 H), 5.20 (q, J=2.6 Hz, 1 H), 3.89 - 3.93 (m, 1 H), 3.89 (s, 3 H), 3.71 - 3.78 (m, 1 H), 2.28 - 2.39 (m, 1 H), 2.17 - 2.27 (m, 1 H), 1.30 (s, 12 H).
표 7. 중간체 38 내지 40, 44 내지 49, 51, 및 54 내지 56은 (2-히드록시에틸)아세틸렌 및 다음과 같이 언급된 출발 물질로부터 시작하여, 방법 Int-19에 기술된 절차에 따라 제조하였다:
방법 Int-20
중간체 41: 5,7-디클로로-2,3-디메틸피리도[3,4-b]피라진
단계 1:1,4-디옥산(50 mL) 및 물(5 mL) 중 6-브로모-5-메틸피리딘-3-아민(5 g, 26.9 mmol)의 용액에 2,4,6-트리메톡시-1,3,5,2,4,6-트리옥사트리보리난(5 g, 28.7 mmol) 및 탄산 칼륨(11.1 mg, 80.4 mmol)을 첨가하고, 반응 혼합물을 질소로 퍼징하였다. 그런 다음, [1,1'-비스(디페닐포스피노) 페로센]디클로로팔라듐(II)(2.2 g, 2.7 mmol)을 첨가하고, 반응 혼합물을 100℃에서 밤새 가열하였다. 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 물로 희석하고, DCM(200 mL * 3)으로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 무수 황산나트륨으로 건조시킨 다음, 감압 하에 농축시켜 미정제 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 실리카 겔 상에서 컬럼 크로마토그래피(PE/EtOAc = 1/1)로 정제하여 5,6-디메틸피리딘-3-아민(1.8 g, 28%)을 황색 고형분으로서 수득하였다. LCMS: [M+H]+ = 123.0; 유지 시간 = 1.18분.
단계 2:아세톤(20 mL) 중 5,6-디메틸피리딘-3-아민(0.95 g, 7.8 mmol)의 용액에 NBS(1.39 g, 7.8 mmol)를 -5℃ 에서 적가하고, 반응 혼합물을 실온에서 30분 동안 교반하였다. 완료 후, 반응 혼합물을 물(50 ml)로 급냉시켰다. 수성층을 DCM(100 mL * 3)으로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 무수 황산나트륨으로 건조시킨 다음, 감압 하에 농축시켜 미정제 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 실리카 겔 상에서 컬럼 크로마토그래피(PE/EtOAc = 10/1)로 정제하여 2-브로모-5,6-디메틸피리딘-3-아민(1 g, 63%)을 황색 고형분으로서 수득하였다. LCMS: [M + H]+ = 203.0; 유지 시간 = 1.43분.
단계 3:1,4-디옥산(20 mL) 중 2-브로모-5,6-디메틸피리딘-3-아민(1.5 g, 7.5 mmol)의 용액에 아연 시안화물(1.8 g, 15.4 mmol) 및 아연 분말(0.2 g, 3.1 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 질소로 퍼징하였다. 그런 다음, [1,1'-비스(디페닐포스피노)페로센]디클로로팔라듐(II)(0.6 g, 0.74 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 100℃에서 밤새 가열하였다. 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 물로 희석하고, EtOAc(100 mL * 3)로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 무수 황산나트륨으로 건조시킨 다음, 감압 하에 농축시켜 미정제 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 실리카 겔을 상에서 컬럼 크로마토그래피(PE/EtOAc= 1/1)로 정제하여 3-아미노-5,6-디메틸피콜리노니트릴(300 mg, 27%)을 황색 고형분으로서 수득하였다. LCMS: [M+H]+ = 148.0; 유지 시간 = 1.35분.
단계 4:메탄올/디클로로메탄(1/2, 6 mL) 중 3-아미노-5,6-디메틸 피콜리노니트릴(300 mg, 2 mmol)의 혼합물을 테트라부틸암모늄 브로마이드(217 mg, 0.67 mmol) 및 30% 과산화수소 수용액(2.1 mL)으로 처리하였다. 반응물을 0℃ 및 5 N NaOH 수용액(6.1 mL)을 첨가하였다. 첨가가 완료된 후, 반응 혼합물을 고형화시켰다. 추가의 메탄올/디클로로메탄(부피 기준 1:2, 6 mL)을 첨가하여 고형분을 용해시켰다. 반응물을 실온까지 가온시키고 밤새 교반하였다. 완료 후, 수성층을 에틸 아세테이트(50 mL * 3)로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 무수 황산나트륨으로 건조시킨 다음, 감압 하에 농축시켜 미정제 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 MeOH에서 마쇄하여 3-아미노-5,6-디메틸피콜린아미드(300 mg, 89%)를 황색 고형분으로서 수득하였다. LCMS: [M+H]+ = 166.0; 유지 시간 = 1.39분.
단계 5:염산(20%, 10 mL) 중 3-아미노-5,6-디메틸피콜린아미드(1.0당량, 500 mg, 2.99 mmol)의 용액에 디페닐 카보네이트(1.20당량, 778.2 mg, 3.64 mmol)를 첨가하였다. 생성된 용액을 가열하여 3시간 동안 환류시켰다. 반응 혼합물을 냉각시키고 여과하였다. 여액을 진공 하에 농축시켰다. 잔류물을 물(100 mL)로 희석하고, 수성 암모니아(25%)로 pH = 10으로 조정하였다. 여과에 의해 침전물을 수집한 다음, 물, 에탄올 및 에테르로 세척하고, 최종 건조시켜 미정제 생성물을 수득하였다. 미정제 고형분을 부피 기준 THF/MeOH/EA = 1/1/1로 마쇄하고, 여과하고 건조시켜 6,7-디메틸피리도[3,2-d]피리미딘-2,4(1H,3H)-디온(350 mg, 1.83 mmol, 61% 수율)을 수득하였다. LCMS: [M+H]+ = 192.1; 유지 시간: 1.25분.
단계 6:인 옥시클로라이드(20.0 당량, 11 mL, 115 mmol) 중 6,7-디메틸-1H-피리도[3,2-d]피리미딘-2,4-디온(1.00 당량, 1100 mg, 5.75 mmol)의 용액에 N,N-디이소프로필에틸아민(5.00 당량, 5.0 mL, 28.8 mmol)을 실온에서 적가하였다. 혼합물을 질소 하에 100℃에서 1시간 동안 교반하였다. 냉각 후, 반응 혼합물을 감압 하에 농축시켜 인 옥시클로라이드를 제거한 다음, 잔류물을 물(50 mL)로 처리하고 에틸 아세테이트(50 mL * 3)로 추출하였다. 유기층을 합치고, 염수(50 mL)로 세척하고, 무수 소듐 설페이트로 건조시키고, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 컬럼 크로마토그래피(석유 에테르 중 0-50% 에틸 아세테이트)로 정제하여 2,4-디클로로-6,7-디메틸-피리도[3,2-d]피리미딘(1.17 g, 4.76 mmol, 82.71 % 수율)을 백색 고형분으로서 수득하였다. LCMS: [M+H]+ = 228.1; 유지 시간: 1.99분.
방법 Int-21
중간체 50: 2-시클로프로필트리아졸-4-카르브알데히드
단계 1:1,4-디옥산(110 mL) 중의 메틸 2H-트리아졸-4-카르복실레이트(1.00 당량, 3000 mg, 23.6 mmol), 시클로프로필보론산(2.00 당량, 4055 mg, 47.2 mmol), Cu(OAc)2(1.00 당량, 4272 mg, 23.6 mmol), 및 DMAP(3.00 당량, 8639 mg, 70.8 mmol)의 혼합물을 90℃에서 16시간 동안 교반하였다. 반응물을 농축시키고, 컬럼 크로마토그래피로 정제하고, DCM으로 용리시켜 메틸 2-시클로프로필트리아졸-4-카르복실레이트(1380 mg, 8.26 mmol, 34.97% 수율)를 백색 고형분으로서 수득하였다. LCMS: Rt: 1.66분; [M+H]+ = 168.0; 214 nm에서 90.54% 순도.
단계 2:THF(28 mL) 중 메틸 2-시클로프로필트리아졸-4-카르복실레이트 (1.00 당량, 1.38 g, 8.26 mmol)의 용액에 LiAlH4(2.50 당량, 21 mL, 20.6 mmol)를 0℃에서 첨가하였다. 반응물을 N2 하에 0℃에서 1시간 동안 교반하였다. 반응물을 0℃에서 0.8 mL의 물을 적가한 다음, 0.8 mL의 수성 NaOH(10%), 및 2.4 mL의 물을 적가하여 급냉시켰다. 혼합물을 실온에서 10분 동안 교반하고 MgSO4를 첨가하였다. 추가로 10분 동안 교반한 후, 혼합물을 여과하고, 여액을 농축시켰다. 미정제 생성물을 PE 중 30% EtOAc로 용리하는 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 (2-시클로프로필트리아졸-4-일)메탄올(1050 mg, 7.55 mmol, 91.40% 수율)을 백색 고형분으로서 수득하였다. LCMS: Rt: 1.28분; [M+H]+ = 140.3.
단계 3: DCM(34 mL) 중 (2-시클로프로필트리아졸-4-일)메탄올(1.00 당량, 950 mg, 6.83 mmol)의 용액에 PCC(3.30 당량, 4844 mg, 22.5 mmol)를 첨가하고, 반응 혼합물을 25℃에서 3시간 동안 교반하였다. 혼합물을 여과하고, 여액을 농축시켰다. 미정제 생성물을 PE 중 20% EtOAc로 용리하는 플래쉬 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 2-시클로프로필트리아졸-4-카르브알데히드(518 mg, 3.78 mmol, 55.33% 수율)를 무색 오일로서 수득하였다. LC-MS: Rt: 1.58분; [M+H]+ = 285.3.
방법 Int-22
중간체 53: 1-벤질-3-시클로프로필-1H-피라졸-5-카르브알데히드
단계 1:에탄올(30 mL) 중 에틸 4-시클로프로필-2,4-디옥소-부타노에이트(1.00 당량, 5.00 g, 27.1 mmol)의 용액 및 수산화히드라지늄 용액(1.00 당량, 1359 mg, 27.1 mmol)을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 혼합물을 농축시켜 에틸 3-시클로프로필-1H-피라졸-5-카르복실레이트(4.50 g, 25.0 mmol, 91.99% 수율)를 백색 고형분으로서 수득하였다. LCMS: Rt: 1.67분; [M+H]+ = 180.9; 254 nm에서 85.37% 순도.
단계 2:아세토니트릴(100 mL) 중 에틸 3-시클로프로필-1H-피라졸-5-카르복실레이트(1.00 당량, 4.50 g, 25.0 mmol)의 용액에 탄산칼륨(3.00 당량, 10.35 g, 75.0 mmol) 및 브로모메틸벤젠(1.50 당량, 6.38 g, 37.5 mmol)을 첨가하였다. 반응물을 80℃에서 3시간 동안 교반하였다. 반응물을 여과하고, 여액을 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 석유 에테르 중 20% EtOAc로 용리하는 플래쉬 컬럼 크로마토그래피로 정제하였다. 목적하는 분획을 진공에서 농축 건조시켜 에틸 2-벤질-5-시클로프로필-피라졸-3-카르복실레이트(5.50 g, 20.3 mmol, 73.33 % 수율)를 무색 오일로서 수득하였다. LC-MS: Rt: 2.08분; [M+H]+ = 271.2.
단계 3:THF(50 mL) 중 에틸 2-벤질-5-시클로프로필-피라졸-3-카르복실레이트(1.00 당량, 5.50 g, 20.3 mmol)의 용액에 수소화리튬 알루미늄(2.50 당량, 51 mL, 50.9 mmol)을 질소 하에 0℃에서 적가하였다. 혼합물을 실온으로 서서히 가온시키고 1시간 동안 교반하였다. 반응을 NH4Cl(포화 수용액)을 첨가하여 급냉시켰다. 반응 혼합물을 EtOAc(400 mL)에 용해시키고, 유기물을 2 * 100 mL의 물로 세척한 다음, 100 mL의 포화 염수 용액으로 세척하였다. 그런 다음, 유기물을 분리하고 MgSO4로 건조시킨 다음, 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 그런 다음, 미정제 생성물을 석유 에테르 중 50% EtOAc로 용리하는 플래쉬 컬럼 크로마토그래피로 정제하였다. 목적하는 분획을 진공에서 농축 건조시켜 (2-벤질-5-시클로프로필-피라졸-3-일)메탄올(4.00 g, 17.5 mmol, 86.12 % 수율)을 무색 오일로서 수득하였다. LC-MS: Rt: 1.76분; [M+H]+ = 229.2.
단계 4:디클로로메탄(50 mL) 중 (2-벤질-5-시클로프로필-피라졸-3-일)메탄올(1.00 당량, 4.00 g, 17.5 mmol)의 용액에 이산화망간(10.0 당량, 15.23 g, 175 mmol)을 0℃에서 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 여과하고 농축시켜 건조시키고, 잔류물을 석유 에테르 중 20% EtOAc로 용리하는 플래쉬 컬럼 크로마토그래피로 정제하였다. 목적하는 분획을 진공에서 농축 건조시켜 2-벤질-5-시클로프로필-피라졸-3-카르브알데히드(3.80 g, 16.8 mmol, 95.85 % 수율)를 무색 오일로서 수득하였다. LC-MS: Rt: 2.04분, 2.12분; [M+H]+ = 227.2; 254 nm에서 97.58% 순도.
방법 Int-23
중간체 57: 2-벤질-5-시클로프로필-1,2,4-트리아졸-3-카르브알데히드
단계 1:에탄올(100 mL) 중 시클로프로판카르보하이드라지드(1.00 당량, 6.90 g, 68.9 mmol) 및 에틸 2-에톡시-2-이미노-아세테이트(1.00 당량, 10.00 g, 68.9 mmol)의 용액을 40℃에서 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 여과하여 에틸 2-[2-(시클로프로판카르보닐)히드라지노]-2-이미노-아세테이트(8.50 g, 42.7 mmol, 61.94% 수율)를 백색 고형분으로서 수득하였다. 에틸 2-[2-(시클로프로판카르보닐)히드라지노]-2-이미노-아세테이트(1.00 당량, 7.50 g, 37.6 mmol)를 아세트산(70 mL)에 첨가하고, 마이크로파에서 180℃에서 1시간 동안 교반하였다. 반응물을 농축 건조시키고, 잔류물을 EtOAc(200 mL)에 용해시키고, 유기물을 포화 NaHCO3 용액(100 mL * 3) 및 염수(100 mL)로 세척하였다. 그런 다음, 유기물을 분리하고 MgSO4로 건조시킨 후 잔류물로 농축시켰다. 그런 다음, 미정제 잔류물을 석유 에테르 중 50% EtOAc로 용리하는 플래쉬 컬럼 크로마토그래피로 정제하였다. 목적하는 분획을 진공에서 농축 건조시켜 에틸 3-시클로프로필-1H-1,2,4-트리아졸-5-카르복실레이트(4.50 g, 24.8 mmol, 65.97% 수율)를 황색 오일로서 수득하였다. LCMS: Rt: 1.41분; [M+H]+ = 182.2; 214 nm에서 74.72% 순도.
단계 2:아세토니트릴(100 mL) 중 에틸 3-시클로프로필-1H-1,2,4-트리아졸-5-카르복실레이트(1.00 당량, 4.50 g, 24.8 mmol)의 용액에 탄산칼륨(3.00 당량, 10.30 g, 74.5 mmol) 및 브로모메틸벤젠(1.50 당량, 6.37 g, 37.3 mmol)을 첨가하였다. 반응물을 80℃에서 3시간 동안 교반하였다. 반응물을 여과하고, 여액을 농축 건조시키고, 잔류물을 석유 에테르 중 20% EtOAc로 용리하는 플래쉬 컬럼 크로마토그래피로 정제하였다. 목적하는 분획을 진공에서 농축 건조시켜 에틸 2-벤질-5-시클로프로필-1,2,4-트리아졸-3-카르복실레이트(5.20 g, 19.2 mmol, 77.17% 수율)를 무색 오일로서 수득하였다. LC-MS: Rt: 2.03분; [M+H]+ = 272.3; 214 nm에서 92.05% 순도.
단계 3:에탄올(100 mL) 중 에틸 2-벤질-5-시클로프로필-1,2,4-트리아졸-3-카르복실레이트(1.00 당량, 5.20 g, 19.2 mmol)의 용액에 나트륨 시아노보로하이드라이드(2.50 당량, 3.01 g, 48.0 mmol)를 질소 하에 0℃에서 적가하였다. 반응물을 0℃에서 1시간 동안 교반하였다. 반응물을 농축 건조시키고, 잔류물을 EtOAc(500 mL)에 용해시키고, 유기물을 물(100 mL * 3) 및 염수(100 mL)로 세척하였다. 그런 다음, 유기물을 분리하고, 농축 건조 전에 MgSO4로 건조시켰다. 그런 다음, 미정제 물질을 메탄올 중 50% 디클로로메탄으로 용리하는 플래쉬 컬럼 크로마토그래피로 정제하였다. 목적하는 분획을 진공에서 농축 건조시켜 (2-벤질-5-시클로프로필-1,2,4-트리아졸-3-일)메탄올을 수득하였다(3.68 g, 16.1 mmol, 83.74% 수율). LC-MS: Rt: 1.60분, 1.64분; [M+H]+ = 230.3; 214 nm에서 89.22% 순도.
단계 4:DCM(200 mL) 중 (2-벤질-5-시클로프로필-1,2,4-트리아졸-3-일)메탄올(1.00당량, 3.10 g, 13.5 mmol)의 용액에 데스-마틴 페리오디난(2.00 당량, 11.47 g, 27.0 mmol)을 0℃에서 배치로 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 16시간 동안 교반하였다. 반응물을 여과하고 필터 케이크를 DCM(50 mL * 2)으로 세척하였다. 여액을 농축시켜 DCM을 제거하고, 포화 NaHCO3 용액(100 mL)으로 급냉시키고, EtOAc(100 mL * 3)로 추출하였다. 유기층을 합치고, 염수(100 mL)로 세척하고, 소듐 설페이트로 건조시키고, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 컬럼 크로마토그래피(석유 에테르 중 0-30% 에틸 아세테이트)로 정제하여 2-벤질-5-시클로프로필-1,2,4-트리아졸-3-카르브알데히드(2.70 g,11.9 mmol, 87.87% 수율)를 황색 오일로서 수득하였다. LC-MS: Rt = 1.82분; [M+H]+ = 228.1; 254 nm에서 100% 순도.
예 A2: 예시적인 화합물의 합성
방법 1
예 4: 6,7-디메틸-2-((2R,4S)-2-(2-메틸피리딘-4-일)테트라히드로-2H-피란-4-일)-4-(6-(트리플루오로메틸)피리딘-3-일)프테리딘
아르곤 하에 화염 건조된 마이크로웨이브 바이알을 2-클로로-6,7-디메틸-4-(6-(트리플루오로메틸)피리딘-3-일)피페리딘(105 mg, 308 μmol), CPhos(25.8 mg, 59.0 μmol), 및 THF(2.70 mL)로 채웠다. 반응 혼합물을 아르곤으로 5분 동안 탈기한 다음 ((2S,4S)-2-(2-메틸피리딘-4-일)테트라히드로-2H-피란-4-일)브롬화 아연(II)(1.54 mL, 384 μmol)을 적가하였다. 반응 바이알을 밀봉하고, 예열된 60℃의 오일조에 침지시켰다. 반응물을 60℃에서 밤새 교반하였다. LCMS에 의해 전환이 완료된 것으로 판단될 때, 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, EtOAc(5 mL)로 희석하고, 실리카 패드(1 cm)를 통과시켰다. 실리카를 EtOAc(10 mL)로 헹구고, 이어서 CH2Cl2 중 10% MeOH로 헹구었다. 휘발성 물질을 진공에서 제거하고, 미정제 물질을 플래쉬 크로마토그래피(Isco RediSep® 컬럼 24g; 용리 구배: CH2Cl2 중 50% 내지 100% EtOAc에 이어서, CH2Cl2 중 10% MeOH로 5 CV)로 정제하였다. 선택된 분획을 증발시켜 목적하는 6,7-디메틸-2-((2R,4S)-2-(2-메틸피리딘-4-일)테트라히드로-2H-피란-4-일)-4-(6-(트리플루오로메틸)피리딘-3-일)프테리딘을 수득하였다((57.2 mg, 39 %)). LCMS: m/z (ESI) [M+H]+ 481.20, tR = 1.302분. 1H NMR 주요 부분 입체이성질체. (DMSO- d6, 400 MHz): δH 1.77 (1H, q, J = 12.2 Hz), 2.06-1.93 (1H, m), 2.16 (1H, d, J = 13.1 Hz), 2.44 (3H, s), 2.73 (3H, s), 2.78 (3H, s), 3.59 (1H, t, J = 11.6 Hz), 3.80 (1H, t, J = 11.8 Hz), 4.25 (1H, dd, J = 11.3, 4.2 Hz), 4.62 (1H, d, J = 11.2 Hz), 7.19 (1H, d, J = 5.3 Hz), 7.27 (1H, s), 8.15 (1H, d, J = 8.3 Hz), 8.37 (1H, d, J = 5.3 Hz), 8.90 (1H, d, J = 8.2 Hz), 9.59 (1H, s).
방법 2
예 15: 4-(4-클로로-2-플루오로페닐)-2-((2S,4S)-2-(1-시클로프로필-1H-피라졸-4-일)테트라히드로-2H-피란-4-일)-6,7-디메틸프테리딘
단계 1: 1,2-디옥산(8 mL) 및 H2O (2 mL) 중 2-클로로-4-(4-클로로-2-플루오로페닐)-6,7-디메틸프테리딘(735 mg, 2.28 mmol, 1.0 당량)의 용액에 1-시클로프로필-4-(4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)-5,6-디히드로-2H-피란-2-일)-1H-피라졸(864 mg, 2.74 mmol, 1.2 당량) 및 칼륨 아세테이트(670 mg, 6.84 mmol, 3.0 당량)을 첨가하였다. 혼합물을 N2로 15분 동안 퍼징하였다. 그런 다음, PdCl2(dppf)-CH2Cl2 (93 mg, 0.114 mmol, 0.05 당량)를 첨가하였다. 반응물을 80℃에서 밤새 교반하였다. 반응물을 진공 하에 셀라이트 베드 상에서 여과하고, 디옥산으로 세척하고, 농축시켰다. 잔류물을 석유 에테르(PE, petroleum ether) 중 10-100% 에틸 아세테이트(EA, ethyl acetate)의 실리카 컬럼을 통해 정제하여 4-(4-클로로-2-플루오로페닐)-2-(6-(1-시클로프로필-1H-피라졸-4-일)-3,6-디히드로-2H-피란-4-일)-6,7-디메틸프테리딘(663 mg, 1.39 mmol)을 갈색 고형분으로서 수득하였다. LCMS: (M + H) + = 477.1. 순도 = 95.03% (214 nm).
단계 2:둥근 바닥 플라스크에 THF(6 mL) 중 4-(4-클로로-2-플루오로페닐)-2-(6-(1-시클로프로필-1H-피라졸-4-일)-3,6-디히드로-2H-피란-4-일)-6,7-디메틸프테리딘(663 mg, 1.39 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 질소로 5분 동안 탈기한 다음, [Rh(dppf)(COD)]BF4(202 mg, 0.28 mmol, 0.2 당량)를 첨가하고, 반응 혼합물을 수소 가스 분위기(풍선 압력) 하에 실온에서 2시간 동안 교반하였다. 용매를 감압 하에 증발시키고, 잔류물을 석유 에테르 중 5%-100% 에테르 아세테이트의 실리카 컬럼(100)에 의해 정제하여 4-(4-클로로-2-플루오로페닐)-2-(2-(1-시클로프로필-1H-피라졸-4-일)테트라히드로-2H-피란-4-일)-6,7-디메틸프테리딘(500 mg, 1.046 mmol)을 갈색 고형분으로서 수득하였다.
단계 3: 부분 입체이성질체(500 mg, 1.046 mmol)의 혼합물을 Daicel
AD 컬럼(20 x 250 mm, 10μm) 상에서 CO2/MeOH(0.2%메탄올 암모니아) = 65/35로 용리하는 키랄 SFC에 의해 분리하여 4-(4-클로로-2-플루오로페닐)-2-(2-(1-시클로프로필-1H-피라졸-4-일)테트라히드로-2H-피란-4-일)-6,7-디메틸프테리딘의 4개의 부분 입체이성질체를 수득하였다.
방법 3
예 36: 2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)-4-[5-(2,4-디플루오로페닐)-2-메틸-피리도[3,4-b]피라진-7-일]모르폴린
톨루엔(2.5 mL) 중 7-클로로-5-(2,4-디플루오로페닐)-2-메틸-피리도[3,4-b]피라진(90 mg, 0.309 mmol), 2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)모르폴린-4-윰 클로라이드(85 mg, 0.370 mmol), 및 터트-부톡시드 나트륨(26 mg, 0.269 mmol)의 혼합물에 XPhos Pd G4(19 mg, 0.022 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 100℃로 가열하고 밤새 교반하였다. 반응물을 실온으로 냉각시키고, 물을 첨가하였다. 고형분을 셀라이트를 이용해 여과하고 EtOAc로 헹구었다. 생성물을 EtOAc를 사용해 여액으로부터 추출하고, 합쳐진 유기층을 염수로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 여과하고, 진공에서 농축시켰다. 미정제 물질을 헥산 중 20-100% EtOAc로 용리하는 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하여 표제 화합물 2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)-4-[5-(2,4-디플루오로페닐)-2-메틸-피리도[3,4-b]피라진-7-일]모르폴린을 주황색 고형분으로서 수득하였다(65 mg, 0.138 mmol, 45% 수율). 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ ppm 8.51 (s, 1H), 7.85 (s, 1H), 7.66 (td, J = 8.4, 6.6 Hz, 1H), 7.48 (s, 1H), 7.36 (td, J = 9.8, 2.5 Hz, 1H), 7.23 (td, J = 8.6, 2.6 Hz, 1H), 7.18 (s, 1H), 4.56 (dd, J = 10.4, 2.7 Hz, 1H), 4.41 (d, J = 13.2 Hz, 1H), 4.29 - 4.19 (m, 1H), 4.09 - 3.86 (m, 1H), 3.89 - 3.52 (m, 2H), 3.21 - 2.84 (m, 2H), 2.64 (s, 3H), 1.11 - 0.98 (m, 2H), 0.98 - 0.89 (m, 2H). LC/MS (ESI+) m/z = 449.2 [M+H]+
방법 4
예 41: 4-(5-(2,4-디플루오로페닐)-2,3-디메틸-1,6-나프티리딘-7-일)-2-(2-메틸피리딘-4-일)모르폴린
단계 1: 50 mL 마이크로웨이브 바이알에 (2,4-디플루오로페닐)보론산(556 mg, 3.52 mmol), 5,7-디클로로-2,3-디메틸-1,6-나프티리딘(800 mg, 3.52 mmol), 탄산세슘(3.44 g, 10.6 mmol), 1,4-디옥산(16 mL), 및 물(4.8 mL)을 채웠다. 반응 혼합물을 질소로 10분 동안 탈기시켰다. Pd(dppf)Cl2·CH2Cl2(144 mg, 0.176 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 40℃에서 1시간 동안 가열하였다. 혼합물을 실온으로 냉각시키고, DCM(50 mL) 및 물(10 mL)로 희석하였다. 수성층을 DCM(2 x 25 mL)으로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 염수(10 mL)로 세척하고, 건조시키고(Na2SO4), 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 EtOAc 및 헥산(30-40%)을 사용하여 실리카 겔 크로마토그래피(80 g SilicaSep 카트리지)로 정제하여 7-클로로-5-(2,4-디플루오로페닐)-2,3-디메틸-1,6-나프티리딘을 고형분으로서 수득하였다(660 mg, 2.17 mmol, 62%). ESI-MS (m/z+): 305.1 [M+H]+, LC-RT: 2.09분. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 7.92 (s, 1H), 7.70 (d, J = 2.7 Hz, 1H), 7.62 - 7.53 (m, 1H), 7.13 - 7.05 (m, 1H), 7.04 - 6.95 (m, 1H), 2.73 (s, 3H), 2.43 (s, 3H). 19F NMR (376 MHz, CDCl3) δ ppm -107.43 (s), -109.37 (s).
단계 2: 7-클로로-5-(2,4-디플루오로페닐)-2,3-디메틸-1,6-나프티리딘(50 mg, 0.164 mmol), 2-(2-메틸-4-피리딜)모르폴린-4-윰 클로라이드(36 mg, 0.169 mmol), 터트-부톡시드 나트륨(63 mg, 0.658 mmol), 및 Pd(amphos)Cl2(12 mg, 0.0164 mmol)의 혼합물이 담긴 10 mL 마이크로파 바이알을 대상으로 3 사이클의 진공화/질소 충진을 수행하였다. 1,4-디옥산(2.5 mL)을 첨가하고, 혼합물을 80℃에서 5시간 동안 교반하였다. 혼합물을 실온으로 냉각시키고, EtOAc(50 mL) 및 물(20 mL)로 희석하였다. 층을 분리시키고, 수성층을 EtOAc(2 x 50 mL)로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 염수(10 mL)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 진공에서 농축시켰다. 잔류물을 MeOH 및 디클로로메탄(20-30%)을 사용하여 실리카 겔 크로마토그래피(SilicaSep® 24 g 카트리지)로 정제하여 오일을 수득하고, 이를 아세토니트릴 및 물(80-90%)을 사용하여 ACCQ 분취 HPLC(Gemini 150 x 30 mm C18 컬럼) 상에서 역상 크로마토그래피로 추가로 정제하여 4-[5-(2,4-디플루오로페닐)-2,3-디메틸-1,6-나프티리딘-7-일]-2-(2-메틸-4-피리딜)모르폴린(19 mg, 0.0410 mmol, 25%)을 황색 고형분으로서 수득하였다. ESI-MS (m/z+): 447.20 [M+H]+, LC-RT: 2.313분. 1H NMR (400 MHz, CD2Cl2) δ ppm 8.45 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 7.57 - 7.49 (m, 2H), 7.25 (s, 1H), 7.18 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 7.12 - 6.98 (m, 3H), 4.64 (dd, J = 10.4, 2.5 Hz, 1H), 4.46 (d, J = 12.4 Hz, 1H), 4.25 - 4.16 (m, 2H), 3.95 - 3.86 (m, 1H), 3.19 - 3.09 (m, 1H), 2.85 (dd, J = 12.7, 10.6 Hz, 1H), 2.62 (s, 3H), 2.54 (s, 3H), 2.32 (s, 3H). 19F NMR (376 MHz, CD2Cl2) δ ppm -109.71 (s), -110.69 (s).
방법 5
예 56 및 57: 2-(1-시클로프로필-1H-피라졸-4-일)-4-(5-(2,4-디플루오로페닐)-2-메틸피리도[3,4-b]피라진-7-일)-6-메틸모르폴린
무수 디옥산(15 mL) 중 7-클로로-5-(2,4-디플루오로페닐)-2-메틸피리도[3,4-b]피라진 (400 mg, 1.371 mmol, 1.0 당량), 2-(1-시클로프로필-1H-피라졸-4-일)-6-메틸모르폴린(528 mg, 1.645 mmol, 1.2 당량), 및 Cs2CO3(2.233 g, 6.855 mmol, 5.0 당량)의 현탁액에 Xantphos PdG3 (195 mg, 0.206 mmol, 0.15 당량)을 N2 하에 첨가하고, 반응 혼합물을 N2로 3회 퍼징하고 100℃에서 16시간 동안 교반하여 갈색 현탁액을 수득하였다. 반응 혼합물을 여과하고 DCM(50 mL x 3)으로 세척하고, 합쳐진 여액을 진공 하에 농축시켜 갈색 고형분을 수득하였다. 고형분을 DCM(5 mL)과 PE(50 mL)의 혼합물 용액으로 마쇄한 다음, PE(30 mL)로 세척하고, 합쳐진 액체를 진공 하에 농축시켜 미정제 생성물을 주황색 고형분으로서 수득하였다. 미정제 생성물을 컬럼(SiO2, PE: EA=15:1-1:1) 및 분취 HPLC로 정제하여 부분 입체이성질체 P1(2.6 mg) 및 P2(14.4 mg)를 황색 고형분으로서 수득하였다. 라세미체 생성물을 SFC(OD-H 4.6 x 100 cm, 5 μm 컬럼; 1% 메탄올 암모니아, F = 3.0 mL/분)로 정제하여 분리된 시스 및 트랜스 생성물을 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 8.48 (s, 1H), 7.66-7.60 (m, 2H), 7.52 (s, 1H), 7.50 (d, J = 3.1 Hz, 2H), 7.00 (s, 1H), 5.08 (s, 1H), 4.51-4.47 (m, 1H), 4.01-3.99 (m, 1H), 3.73 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 3.53 (d, J = 3.6 Hz, 2H), 3.25-3.17 (m, 2H), 2.87 (s, 3H), 1.28 (d, J = 6.3 Hz, 3H), 1.06 (d, J = 4.0 Hz, 1H), 0.98 (d, J = 5.3 Hz, 2H). LCMS: (M+H) + =463.
방법 6
예 69 및 70: 4-(4-(4-클로로-2-플루오로페닐)-7-메틸프테리딘-2-일)-2-(1-시클로프로필-1H-피라졸-4-일)-6-메틸모르폴린
DMSO(5 mL) 중 2-클로로-4-(4-클로로-2-플루오로페닐)-7-메틸프테리딘(400 mg, 1.29 mmol, 1.0 당량)의 용액에 2-(1-시클로프로필-1H-피라졸-4-일)-6-메틸모르폴린(348 mg, 1.68 mmol, 1.3 당량) 및 DIPEA(1.07mL, 6.45 mmol, 5.0 당량)를 첨가하였다. 혼합물을 100℃에서 2시간 동안 교반하였다. 2시간 후, LCMS는 출발 물질이 남아 있지 않음을 나타냈다. 반응 혼합물을 H2O(40 mL x 2 ) 및 EA(20 mL)로 추출하고, 유기층을 합치고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 증발 건조시켜 미정제 생성물을 수득하였다. 미정제 생성물을 분취 HPLC로 정제하여 트랜스 부분 입체이성질체(88 mg) 및 시스 부분 입체이성질체(170 mg)를 수득하였다. 시스 부분 입체이성질체 혼합물을 Daicel® OD 컬럼(20 x 250mm 10μm) 상에서 CO2/IPA(0.2% 메탄올 암모니아) = 65/35로 용리하는 키랄 SFC-150에 의해 분리하여 2개의 거울상 이성질체인 예 117 및 118을 수득하였다.
방법 7
예 84 및 85: 4-(4-클로로-3,5-디플루오로-페닐)-6,7-디메틸-2-[(2R,4S)-2-(2-메틸-4-피리딜)테트라히드로피란-4-일]프테리딘 및 4-(4-클로로-3,5-디플루오로-페닐)-6,7-디메틸-2-[(2R,4R)-2-(2-메틸-4-피리딜)테트라히드로피란-4-일]프테리딘
단계 1: 100 mL 둥근 바닥 플라스크에 2,4-디클로로-6,7-디메틸-프테리딘(3.00 g, 13.1 mmol) 및 THF(40 mL)를 채웠다. 용액을 -10℃로 냉각시키고, 물(5 mL) 중 NaSMe(1.01 g, 14.4 mmol)의 현탁액을 적가하였다. 반응 혼합물을 실온으로 가온시키고 17시간 동안 교반하였다. 혼합물을 DCM(50 mL) 및 물(10 mL)로 희석하였다. 수성층을 DCM(2 x 10 mL)으로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 Na2SO4로 건조시키고, 진공에서 농축시켰다. 미정제 잔류물을 EtOAc 및 헥산(50-60%)을 사용하여 실리카 겔 크로마토그래피(80 g SilicaSep 컬럼)로 정제하여 2-클로로-6,7-디메틸-4-메틸설파닐-프테리딘을 옅은 황색 고형분으로서 수득하였다(1.92 g, 7.98 mmol, 61%). ESI-MS (m/z+): 241.0 [M+H]+, LC-RT: 2.907분. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 2.79 (s, 3H), 2.76 (s, 3H), 2.70 (s, 3H).
단계 2: 50 mL 마이크로웨이브 바이알에 THF(12 mL) 중 2-클로로-6,7-디메틸-4-메틸설파닐-프테리딘(600 mg, 2.49 mmol), Pd2(dba)3(36 mg, 0.0626 mmol), 및 트리(2-푸릴)포스핀(30 mg, 0.129 mmol)의 용액을 채우고 3사이클의 진공화/질소 충진을 수행하였다. 그런 다음 브로모-[2-(2-메틸-4-피리딜)테트라하이드로피란-4-일]브롬화 아연 용액(THF 중 0.16 M, 23 ml, 3.74 mmol)을 25℃에서 적가하고, 혼합물을 44시간 동안 교반하였다. 혼합물을 DCM(100 mL) 및 포화 NaHCO3(20 mL)으로 희석하였다. 수성층을 DCM(2 x 50 mL)으로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 염수로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 진공에서 농축시켰다. 잔류물을 EtOAc 및 헥산(0-100%)에 이어서 MeOH 및 DCM(5-15%)을 사용하여 실리카 겔 크로마토그래피(SilicaSep 40 g 카트리지)로 정제하여 오일을 수득하고, 이를 아세토니트릴 및 0.1% 수성 포름산을 사용하여 역상 크로마토그래피(30 g C-18 카트리지)로 추가로 정제하여 6,7-디메틸-2-[2-(2-메틸-4-피리딜)테트라하이드로피란-4-일]-4-메틸설파닐-프테리딘을 고형분으로서 수득하였다(255 mg, 0.655 mmol, 26%). ESI-MS (m/z+): 382.10 [M+H]+, LC-RT: 2.136분. 1H NMR (400 MHz, CD2Cl2) δ ppm 8.41 (d, J = 4.9 Hz, 1H), 7.23 (s, 1H), 7.14 (d, J = 4.8 Hz, 1H), 4.56 - 4.49 (m, 1H), 4.37 - 4.28 (m, 1H), 3.85 - 3.77 (m, 1H), 3.48 - 3.38 (m, 1H), 2.74 (s, 3H), 2.72 (s, 3H), 2.66 (s, 3H), 2.52 (s, 3H), 2.43 - 2.36 (m, 1H), 2.17 - 2.09 (m, 2H), 1.95 - 1.84 (m, 1H).
단계 3: 화염 건조된 50 mL 마이크로웨이브 바이알에 6,7-디메틸-2-[2-(2-메틸-4-피리딜)테트라하이드로피란-4-일]-4-메틸설파닐-프테리딘(122 mg, 0.320 mmol), Pd(OAc)2(1.8 mg, 0.0080 mmol), SPhos(6.6 mg, 0.016 mmol), 및 THF(1 mL)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 N2 하에 5분 동안 탈기하고, 클로로-(4-클로로-2,3-디플루오로-페닐)염화 아연 용액(THF 중 0.089 M)(5.3 mL, 0.4797 mmol)을 25℃에서 30분에 걸쳐 적가하였다. 혼합물을 25℃에서 2시간 동안 교반하였다. 포화 NaHCO3(20 mL)을 첨가하여 반응을 급냉시키고, 반응 혼합물을 DCM(50 mL)으로 추출하였다. 수성층을 (2 x 50 mL)로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 Na2SO4로 건조시키고, 용매를 진공에서 제거하였다. 미정제 물질을 EtOAc 및 헥산(0-100%)에 이어서 MeOH 및 DCM(10-20%)을 사용하여 플래쉬 크로마토그래피(Isco RediSep® 컬럼 40g)로 정제하여 고형분을 수득하고(34 mg), 이를 MeOH 및 수성 중탄산 암모늄을 사용하여 분취 HPLC(Gemini® 5 μm NX-C18 110 Å, 100 x 30 mm)로 추가로 정제하여 하나의 피크로서 시스 이성질체 혼합물 4-(4-클로로-3,5-디플루오로-페닐)-6,7-디메틸-2-[rac-(2R,4S)-2-(2-메틸-4-피리딜) 테트라히드로피란-4-일]프테리딘(14 mg, 0.0277 mmol, 9%) 및 또 다른 피크로서 트랜스 이성질체 혼합물 4-(4-클로로-3,5-디플루오로-페닐)-6,7-디메틸-2-[rac-(2R,4R)-2-(2-메틸-4-리딜)테트라히드로피란-4-일]프테리딘(4.5 mg, 0.00907 mmol, 3%)을 수득하였다. 시스 이성질체: ESI-MS (m/z+): 482.2 [M+H]+, LC-RT: 1.598분. 1H NMR (400 MHz, CD2Cl2) δ ppm 8.41 (s, 2H), 8.39 (s, 1H), 7.23 (s, 1H), 7.14 (d, J = 4.0 Hz, 1H), 4.56 (dd, J = 11.3, 1.1 Hz, 1H), 4.39 - 4.32 (m, 1H), 3.90 - 3.79 (m, 1H), 3.64 - 3.51 (m, 1H), 2.81 (s, 3H), 2.79 (s, 3H), 2.52 (s, 3H), 2.48 - 2.40 (m, 1H), 2.24 - 2.13 (m, 2H), 2.01 - 1.88 (m, 1H). 19F NMR (376 MHz, CD2Cl2) δ ppm -113.77 (s), -113.80 (s). 트랜스 이성질체: ESI-MS (m/z+): 482.2 [M+H]+, LC-RT: 1.560분. 1H NMR (400 MHz, CD2Cl2) δppm 8.42 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 8.35 (d, J = 8.2 Hz, 2H), 7.23 (s, 1H), 7.14 (d, J = 4.9 Hz, 1H), 4.69 - 4.57 (m, 2H), 4.40 - 4.33 (m, 1H), 3.99 - 3.89 (m, 1H), 2.83 (s, 3H), 2.82 (s, 3H), 2.52 (s, 3H), 2.34 - 2.24 (m, 1H), 2.23 - 2.16 (m, 1H), 2.12 - 2.01 (m, 1H), 2.01 - 1.93 (m, 1H). 19F NMR (376 MHz, CD2Cl2) δ ppm -113.54 (s), -113.56 (s).
방법 8
예 87: 7-((2R,4S)-2-(1-시클로프로필-1H-피라졸-4-일)테트라히드로-2H-피란-4-일)-2,3-디메틸-5-(3-(트리플루오로메틸)바이시클로[1.1.1]펜탄-1-일)피리도[3,4-b]피라진
단계 1: 1,4-디옥산(10 mL) 중 7-클로로-2,3-디메틸-5-[3-(트리플루오로메틸)-1-바이시클로[1.1.1]펜타닐]피리도[3,4-b]피라진(490 mg, 1.50 mmol, 중간체 114) 및 1-시클로프로필-4-[(6R)-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)-3,6-디히드로-2H-피란-6-일]피라졸(520 mg, 1.64 mmol)의 용액에 탄산 세슘(1461 mg, 4.49 mmol), 물(1mL), 및 Pd(dppf)Cl2(109 mg, 0.150 mmol)를 첨가하였다. 그런 다음, 혼합물을 90℃에서 밤새 교반하였다. 완료 후, 혼합물을 실온으로 냉각시키고, EtOAc로 희석하였다. 그런 다음, 유기층을 물로 세척한 다음 염수로 세척하고, MgSO4로 건조시키고, 실리카의 플러그를 통해 여과하고, 진공에서 농축시켰다. 그런 다음, 잔류물을 DCM/EtOAc 구배(20%-100%)를 사용하여 플래쉬 크로마토그래피로 정제하여 목적하는 물질(560 mg, 75%)을 연황색 거품으로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d): δH 7.69 (1H, s), 7.53 (1H, s), 7.50 (1H, s), 7.18 (1H, s), 5.42 (1H, d, J = 2.9 Hz), 4.09-4.16 (1H, m), 3.93 (1H, m), 3.54-3.60 (1H, m), 2.74 (4H, s), 2.73 (3H, s), 2.67 (1H, m), 2.62 (6H, s), 1.10-1.13 (2H, m), 0.97-1.03 (2H, m).
단계 2: 에탄올(8 mL) 중 2,3-디메틸-7-[(6R)-6-(1-시클로프로필피라졸-4-일)-3,6-디히드로-2H-피란-4-일]-5-[3-(트리플루오로메틸)-1-바이시클로[1.1.1]펜타닐]피리도[3,4-b]피라진(1.00당량, 254 mg, 0.528 mmol)이 담긴 아르곤 분위기 하의 플라스크에 PtO2(0.710당량, 85 mg, 0.374 mmol)를 첨가하였다. 시스템을 수소로 퍼징하고 1 기압의 H2 하에 밤새 교반하였다. LCMS 및 1H NMR에 의해 반응이 완료된 것으로 판단될 때, 혼합물을 EtOAc로 희석하고 셀라이트를 통해 여과하고 증발시켰다. 미정제 물질을 추가 정제 없이 다음 단계에 사용하였다.
단계 3: DCE(5 mL) 중 2,3-디메틸-7-[(2R,4S)-2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)테트라히드로피란-4-일]-5-[3-(트리플루오로메틸)-1-바이시클로[1.1.1]펜타닐]-1,2,3,4-테트라하이드로피리도[3,4-b]피라진(1.00당량, 254 mg, 0.521 mmol)이 담긴 아르곤 분위기 하의 플라스크에 MnO2(20.1당량, 900 mg, 10.5 mmol)를 첨가하였다. 그런 다음, 반응물을 50℃에서 밤새 교반하였다. 완료 후, 혼합물을 실온으로 냉각시키고, EtOAc로 희석하고, 실리카의 플러그를 통해 여과하고, 용매를 진공에서 증발시켰다. 잔류물을 35%-100% DCM/EtOAc를 사용하여 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 목적하는 물질을 11:1 부분 입체이성질체 혼합물로서 수득하였다. Gemini® 5 um NX-C18 110 Å, 100 x 30 mm 컬럼 및 55%-75% 메탄올/물(10mm 암모늄 포르메이트) 구배를 사용하는 역상 크로마토그래피로 추가로 정제하여 목적하는 물질을 동결건조 후 백색 고형분으로서 수득하였다(113 mg, 45%). 1 H NMR (400 MHz, 클로로포름-d): δ ppm 7.54 (1H, s), 7.48 (2H, s), 4.55 (1H, d, J = 11.2 Hz), 4.25 (1H, d, J = 11.4 Hz), 3.84-3.78 (1H, m), 3.59-3.53 (1H, m), 3.22 (1H, m), 2.74 (3H, s), 2.73 (3H, s), 2.61 (6H, s), 2.30 (1H, d, J = 13.1 Hz), 2.02-1.95 (3H, m), 1.10 (2H, m), 1.04-0.97 (2H, m).
방법 9
예 89: 4-(4-클로로-2,3-디플루오로페닐)-7-메틸-2-(2-(2-메틸피리딘-4-일)테트라히드로-2H-피란-4-일)프테리딘
화염 건조된 50 mL 마이크로웨이브 바이알에, 2-클로로-4-(4-클로로-2,3-디플루오로-페닐)-7-메틸-프테리딘(100 mg, 0.306 mmol), 팔라듐 아세테이트(6.9 mg, 0.0306 mmol), C-Phos(0.200당량, 27 mg, 0.0611 mmol), 및 THF(3.5 mL)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 N2 하에 5분 동안 탈기하고, 브로모-[2-(2-메틸-4-피리딜)테트라하이드로피란-4-일]브롬화 아연 용액(THF 중 0.17 M)(1.8 mL, 0.3057 mmol)을 30분에 걸쳐 적가하였다. 혼합물을 22℃에서 2시간 동안 교반하였다. 포화 NaHCO3(20 mL)을 첨가하여 반응을 급냉시키고, 반응 혼합물을 DCM(50 mL)으로 추출하였다. 수성층을 DCM(2 x 50 mL)으로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 Na2SO4로 건조시키고, 용매를 진공에서 제거하였다. 미정제 물질을 EtOAc 및 헥산(0-100%)을 사용하고 이어서 MeOH 및 DCM(0-10%)을 사용하는 플래쉬 크로마토그래피(Isco RediSep® 컬럼 40g)로 정제하여 하여 고형분(100 mg)을 수득하고, 이를 MeOH 및 10mM 수성 포름산 암모늄을 사용하는 분취 HPLC(Gemini® 5 μm NX-C18 110 Å, 100 x 30 mm 컬럼)로 추가로 정제하여 시스 부분 입체이성질체의 혼합물로서 4-(4-클로로-2,3-디플루오로-페닐)-7-메틸-2-[rac-(2R,4S)-2-(2-메틸-4-피리딜)테트라히드로피란-4-일]프테리딘(32.3 mg, 22%) 및 트랜스 부분 입체이성질체의 혼합물로서 4-(4-클로로-2,3-디플루오로-페닐)-7-메틸-2-[rac-(2R,4R)-2-(2-메틸-4-피리딜)테트라히드로피란-4-일]프테리딘(2.8 mg, 2%)을 수득하였다. 시스 이성질체: ESI-MS (m/z+): 468.20 [M+H]+, LC-RT: 1.307분. 1H NMR (400 MHz, CD2Cl2) δ 8.81 (s, 1H), 8.41 (s, 1H), 7.50 - 7.45 (m, 1H), 7.43 - 7.37 (m, 1H), 7.23 (s, 1H), 7.13 (d, J = 4.6 Hz, 1H), 4.55 (d, J = 11.5 Hz, 1H), 4.34 (dd, J = 10.6, 3.8 Hz, 1H), 3.84 (td, J = 11.7, 3.2 Hz, 1H), 3.66 - 3.57 (m, 1H), 2.86 (s, 3H), 2.51 (s, 3H), 2.47 - 2.40 (m, 1H), 2.25 - 2.13 (m, 2H), 2.01 - 1.90 (m, 1H). 19F NMR (376 MHz, CD2Cl2) δ ppm -133.01 (s), -138.66 (s). 트랜스 이성질체: 1H NMR (400 MHz, CD2Cl2) δ ppm 8.85 (s, 1H), 8.42 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 7.56 - 7.51 (m, 1H), 7.46 - 7.38 (m, 1H), 7.21 (s, 1H), 7.12 (d, J = 4.7 Hz, 1H), 4.78 (dd, J = 9.6, 2.4 Hz, 1H), 4.04 - 3.97 (m, 1H), 3.90 (td, J = 11.3, 2.5 Hz, 1H), 3.76 - 3.71 (m, 1H), 2.89 (s, 3H), 2.52 (s, 3H), 2.52 (s, 2H), 2.30 - 2.24 (m, 1H), 2.22 - 2.16 (m, 1H).
방법 10
예 97: 8-(4-클로로-2-플루오로페닐)-6-(2-(1-시클로프로필-1H-피라졸-4-일)테트라히드로-2H-피란-4-일)-2,3-디메틸피리도[2,3-b]피라진
단계 1: 디옥산(20 mL) 및 H2O(4 mL) 중 6,8-디클로로-2,3-디메틸피리도[2,3-b]피라진(1 g, 4.4 mmol)의 용액에 1-시클로프로필-4-(4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)-5,6-디히드로-2H-피란-2-일)-1H-피라졸(1.4 g, 4.4 mmol) 및 K2CO3(1.8 g, 13 mmol)을 첨가하고, 반응 혼합물을 질소로 퍼징하였다. 그런 다음, Pd(dppf)Cl2
DCM(0.29 g, 0.36 mmol)을 첨가하고, 반응 혼합물을 80℃에서 5시간 동안 가열하였다. 그런 다음, 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고 LCMS에 의해 모니터링하였다. 완료 후, 수성층을 에틸 아세테이트(3 x 200 ml)로 추출하고, 합쳐진 유기층을 무수 황산나트륨으로 건조시키고 감압 하에 농축시켜 미정제 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 실리카 겔을 이용한 컬럼 크로마토그래피(PE:EA = 1:1)를 통해 정제하여 8-클로로-6-(6-(1-시클로프로필-1H-피라졸-4-일)-3,6-디히드로-2H-피란-4-일)-2,3-디메틸피리도[2,3-b]피라진을 자주색 고형분으로서 수득하였다(1.3 g, 76%). LCMS: (M+H)+ =382.0;
단계 2:250 mL 둥근 바닥 플라스크에 THF(40 mL) 중 4-클로로-2-플루오로-1-요오드벤젠(2.2 g, 8.6 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 -40℃로 냉각시키고, iPrMgCl(4.7 mL, 9.5 mmol)(THF 중 2 M 용액)을 적가하고, -40℃에서 30분 동안 교반한 다음, 반응 혼합물을 -78℃로 냉각시켰다. 그런 다음, ZnCl2(4.3 mL, 8.6 mmol)(THF 중 2 M 용액)를 적가하고, 반응 혼합물을 실온으로 가온시키고, 40 mL의 THF를 첨가하고 10분 동안 교반하여 (4-클로로-2-플루오로페닐)요오드화 아연(II)을 수득하고, 이를 다음 반응에서 직접 사용하였다.
N2로 퍼징하고 N2가 유지된 250-mL의 3구 둥근 바닥 플라스크에 THF(10 mL) 중 8-클로로-6-(6-(1-시클로프로필-1H-피라졸-4-일)-3,6-디히드로-2H-피란-4-일)-2,3-디메틸피리도[2,3-b]피라진(1.1 g, 2.9 mmol) 및 PdCl2(Atmphos)2(0.1 g, 0.14 mmol)를 넣었다. 반응 혼합물을 교반하고 (4-클로로-2-플루오로페닐)요오드화 아연(II)(2.2 g, 8.6 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 40분 동안 교반하고 LCMS에 의해 모니터링하였다. 완료 후, 반응 혼합물을 H2O(200 ml)로 급냉시켰다. 수성층을 EA(3 x 200 ml)로 추출하고, 합쳐진 유기층을 무수 황산나트륨으로 건조시킨 다음, 감압 하에 농축시켜 미정제 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 실리카 겔을 이용한 컬럼 크로마토그래피(PE:EA = 1:1)를 통해 정제하여 8-(4-클로로-2-플루오로페닐)-6-(6-(1-시클로프로필-1H-피라졸-4-일)-3,6-디히드로-2H-피란-4-일)-2,3-디메틸피리도[2,3-b]피라진을 백색 고형분으로서 수득하였다(900 mg, 64%). LCMS: (M + 1)+ = 476.0.
단계 3: THF(8 mL) 중 8-(4-클로로-2-플루오로페닐)-6-(6-(1-시클로프로필-1H-피라졸-4-일)-3,6-디히드로-2H-피란-4-일)-2,3-디메틸피리도[2,3-b]피라진(400 mg, 0.84 mmol)의 용액에 Rh(cod)dppf.BF4(122 mg, 0.17 mmol)를 첨가하고, 반응 혼합물을 실온에서 3시간 동안 수소로 퍼징하였다. 반응을 LCMS에 의해 모니터링하였다. 완료 후, 반응 혼합물을 감압 하에 증발시켜 미정제 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(PE:EA = 1:2)로 정제하여 8-(4-클로로-2-플루오로페닐)-6-(2-(1-시클로프로필-1H-피라졸-4-일)테트라하이드로-2H-피란-4-일)-2,3-디메틸피리도[2,3-b]피라진을 백색 고형분으로서 수득하였다(123 mg, 31%). LCMS: (M+H)+ = 478.0.
방법 11
예 210: 7-((2R,4S)-2-(1-시클로프로필-1H-피라졸-4-일)테트라히드로-2H-피란-4-일)-5-(2,4-디플루오로페닐)-2,3-디메틸피리도[3,4-b]피라진
단계 1: N2 하에서 디옥산(10 mL) 및 H2O (2 mL) 중의 7-클로로-5-(2,4-디플루오로페닐)-2,3-디메틸피리도[3,4-b]피라진(583 mg, 1.635 mmol, 1.0 당량), (R)-1-시클로프로필-4-(4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)-5,6-디히드로-2H-피란-2-일)-1H-피라졸(371 mg, 1.962 mmol, 1.2 당량) 및 K2CO3(678 mg, 4.905 mmol, 3.0 당량)의 혼합물에 Pd(dppf)Cl2
Figure pct00724
DCM(107 mg, 0.131 mmol, 0.08 당량)을 첨가하고 반응 혼합물을 N2로 3회 퍼징하고 80℃에서 5시간 동안 교반하여 갈색 현탁액을 수득하였다. 반응 혼합물을 규조토를 통해 여과하고, EtOAc(50 mL * 3)로 세척한 다음, EtOAc(150 mL * 3)로 추출하였다. 합쳐진 유기상을 염수(100 mL)로 세척하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고 진공에서 농축시켜 미정제 생성물을 수득하였다. 미정제 생성물을 컬럼 크로마토그래피(SiO2, PE/EA = 15:1-5:1)로 정제하여 목적하는 생성물 (R)-7-(6-(1-시클로프로필-1H-피라졸-4-일)-3,6-디히드로-2H-피란-4-일)-5-(2,4-디플루오로페닐)-2,3-디메틸피리도[3,4-b]피라진(513 mg, 68%)을 황색 고형분으로서 수득하였다. LCMS: (M+H) + = 460.1; 순도 = 99% (UV 254 nm); 유지 시간 =2.044분.
단계 2:에틸 아세테이트(4 mL) 중 5-(2,4-디플루오로페닐)-2,3-디메틸-7-[rac-(6R)-6-(1-시클로프로필피라졸-4-일)-3,6-디히드로-2H-피란-4-일]피리도[3,4-b]피라진(1.0 당량, 35 mg, 0.0762 mmol)의 용액에 탄소 상 팔라듐 10%(15 mg)를 첨가하였다. 반응물을 규조 패드를 통해 여과하였다. 여액을 감압 하에 농축시켰다. 미정제 생성물을 컬럼 크로마토그래피(DCM/MeOH 20:1 내지 10:1)로 정제한 다음, 분취-HPLC(A: 물(NH4HCO3), B: 아세토니트릴)로 추가로 정제하여 7-[(2R,4S)-2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)테트라히드로피란-4-일]-5-(2,4-디플루오로페닐)-2,3-디메틸-피리도[3,4-b]피라진(9.2 mg, 0.0199 mmol, 26.17%)을 백색 고형분으로서 수득하였다.
방법 12
예 227 및 228: 5-(4-클로로-2-플루오로-페닐)-7-[(2S,4R)-2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)테트라히드로피란-4-일]-2,3-디메틸-퀴녹살린 및 5-(4-클로로-2-플루오로-페닐)-7-[(2R,4S)-2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)테트라히드로피란-4-일]-2,3-디메틸-퀴녹살린.
단계 1: 아르곤 하에 1,4-디옥산(10 mL) 및 물(1 mL) 중 5-브로모-7-요오도-2,3-디메틸-퀴녹살린(1.00 당량, 460 mg, 1.27 mmol), 1-시클로프로필-4-[4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)-3,6-디히드로-2H-피란-6-일]피라졸(1.00 당량, 401 mg, 1.27 mmol), Pd(dppf)Cl2(0.1000 당량, 93 mg, 0.127 mmol) 및 탄산 나트륨(2.00 당량, 269 mg, 2.53 mmol)의 혼합물을 60℃에서 4시간 동안 교반하였다. 반응물을 여과하고 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 컬럼 크로마토그래피(PE 중 70% EtOAc)로 정제하여 5-브로모-7-[6-(1-시클로프로필피라졸-4-일)-3,6-디히드로-2H-피란-4-일]-2,3-디메틸-퀴녹살린(360 mg, 0.694 mmol, 54.77% 수율)을 갈색 고형분으로서 수득하였다. LCMS: Rt: 2.269분; [M+H]+ = 486.1.
단계 2:1,4-디옥산(8 mL)/물(1 mL)의 용액에 5-브로모-7-[(6R)-6-(1-시클로프로필피라졸-4-일)-3,6-디히드로-2H-피란-4-일]-2,3-디메틸-퀴녹살린(1.00 당량, 110 mg, 0.259 mmol), (4-클로로-2-플루오로-페닐)보론산(1.00 당량, 20 mg, 0.117 mmol) 및 KOAc(1.50 당량, 57 mg, 0.176 mmol)를 실온에서 첨가하였다. 그런 다음, Pd(dppf)Cl2(0.100 당량, 8.6 mg, 0.0118 mmol)를 N2 하에 용액에 첨가하고 100℃에서 16시간 동안 교반하였다. 혼합물을 물(30 mL)로 세척하고 에틸 아세테이트(30 mL * 3)로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 무수 황산나트륨으로 건조시킨 다음, 감압 하에 농축시켜 미정제 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 실리카 겔(PE/EtOAc = 1/1) 상에서 크로마토그래피를 통해 정제하여 5-(4-클로로-2-플루오로-페닐)-7-[(6R)-6-(1-시클로프로필피라졸-4-일)-3,6-디히드로-2H-피란-4-일]-2,3-디메틸-퀴녹살린(76 mg, 0.154 mmol, 67.20% 수율)을 수득하였다. LCMS: Rt: 2.215분; [M+H]+ = 476.7; 96.67% 254 nm에서 순도.
단계 3:PtO2 (1.00 당량, 36 mg, 0.160 mmol)를 H2 분위기 하 THF(5 mL) 중 5-(4-클로로-2-플루오로-페닐)-7-[6-(1-시클로프로필피라졸-4-일)-3,6-디히드로-2H-피란-4-일]-2,3-디메틸-퀴녹살린(1.00 당량, 76 mg, 0.160 mmol)의 용액에 첨가하였다. 혼합물을 25℃에서 2시간 동안 교반하였다. 혼합물을 여과하고 농축시켰다. DCM(5 mL) 및 MnO2(10.0당량, 139 mg, 1.60 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 25℃에서 16시간 동안 교반하였다. 혼합물을 물(30 mL)로 세척하고 에틸 아세테이트(30 mL * 3)로 추출하였다. 유기층을 무수 황산 나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 분취-HPLC로 정제하여 라세미 혼합물(50 mg, 100% 순도, 65.65% 수율)을 백색 고형분으로서 수득하였다. LC-MS: Rt: 2.164분; [M+H]+ = 477.0; 254 nm에서 100% 순도.
라세미 혼합물을 SFC로 분리하여 5-(4-클로로-2-플루오로-페닐)-7-[(2S,4R)-2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)테트라히드로피란-4-일]-2,3-디메틸-퀴녹살린(7.1 mg, 0.0149 mmol, 9.32% 수율) 및 5-(4-클로로-2-플루오로-페닐)-7-[(2R,4S)-2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)테트라히드로피란-4-일]-2,3-디메틸-퀴녹살린(7.1 mg, 0.0149 mmol, 9.32% 수율)을 백색 고형분으로서 수득하였다.
방법 13
예 157 및 158: 2-[(2R,4S,6R)-2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)-6-메틸-테트라히드로피란-4-일]-6,7-디메틸-4-(2,4,5-트리플루오로페닐)프테리딘 및 2-[(2R,4R,6R)-2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)-6-메틸-테트라히드로피란-4-일]-6,7-디메틸-4-(2,4,5-트리플루오로페닐)프테리딘
DMA(4 mL) 중 아연 분진(3.00당량, 392 mg, 6.00 mmol)의 혼합물에 아르곤 보호 하에 BrCH2CH2Br(1.00 당량, 0.10 mL, 2.00 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 10분 동안 교반하였다. TMSCl(1.00당량, 0.10 mL, 2.00 mmol)을 적가하고, 혼합물을 60℃에서 30분 동안 교반하였다. DMA(2 mL) 중 1-시클로프로필-4-[(2R,6R)-4-요오도-6-메틸-테트라히드로피란-2-일]피라졸(1.00 당량, 664 mg, 2.00 mmol)의 용액을 혼합물에 첨가하고, 혼합물을 60℃에서 1시간 동안 교반하였다. 아르곤 보호 하에 2-클로로-6,7-디메틸-4-(2,4,5-트리플루오로페닐)프테리딘(0.251 당량, 163 mg, 0.502 mmol) 및 PdCl2(Amphos)(0.0353 당량, 50 mg, 0.0706 mmol)의 혼합물에 1 mL의 현탁액을 첨가하였다. 혼합물을 60℃에서 16시간 동안 교반하였다. 혼합물을 물(30 mL)로 세척하고 에틸 아세테이트(30 mL * 3)로 추출하였다. 유기상을 농축시키고 실리카 겔(DCM / MeOH = 25/1) 상에서 크로마토그래피 분리하여 미정제(50 mg)를 적색 고형분으로서 수득하였다. 이를 분취-HPLC로 정제하여 혼합물을 수득하였다. 이성질체의 혼합물을 SFC에 의해 분리하여 2-[(2R,4R,6R)-2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)-6-메틸-테트라히드로피란-4-일]-6,7-디메틸-4-(2,4,5-트리플루오로페닐)프테리딘(3.6 mg, 0.00728 mmol, 1.80% 수율) 및 2-[(2R,4S,6R)-2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)-6-메틸-테트라히드로피란-4-일]-6,7-디메틸-4-(2,4,5-트리플루오로페닐)프테리딘(21 mg, 0.0421 mmol, 10.4% 수율)을 황색 오일로서 수득하였다.
방법 14
예 166: 2-(2-(3-시클로프로필-1H-피라졸-5-일)테트라히드로-2H-피란-4-일)-4-(2,4-디플루오로페닐)-6,7-디메틸프테리딘
단계 1: 질소 하에 1,4-디옥산(5 mL) 중 1-벤질-3-시클로프로필-5-[4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)-3,6-디히드로-2H-피란-6-일]피라졸(1.00 당량, 250 mg, 0.615 mmol)，2-클로로-4-(2,4-디플루오로페닐)-6,7-디메틸-프테리딘 (2.00 당량, 287 mg, 0.935 mmol) 및 탄산 칼륨(3.00 당량, 194 mg, 1.40 mmol)의 용액에 1,1'-비스(디페닐포스피노)페로센-팔라듐(II)디클로라이드 디클로로메탄 착물(0.100 당량, 38 mg, 0.0468 mmol)을 첨가하였다. 반응물을 100℃에서 밤새 교반하였다. 반응물을 농축시켜 건조시키고, 잔류물을 EtOAc(200 mL)에 용해시키고, 유기물을 2 * 50 mL의 물로 세척한 다음, 50 mL의 포화 염수 용액으로 세척하였다. 그런 다음, 유기물을 분리하고, 농축 건조 전에 MgSO4로 건조시켰다. 그런 다음, 미정제 잔류물을 석유 에테르 중 40% EtOAc로 용리하는 플래쉬 컬럼 크로마토그래피로 정제하였다. 목적하는 분획을 진공에서 농축 건조시켜 2-[6-(2-벤질-5-시클로프로필-피라졸-3-일)-3,6-디히드로-2H-피란-4-일]-4-(2,4-디플루오로페닐)-6,7-디메틸-프테리딘(100 mg, 0.182 mmol, 29.60% 수율)을 황색 고형분으로서 수득하였다. LC-MS: Rt: 2.30분; [M+H]+ = 551.3.
단계 2:메탄올(20 mL) 중 2-[6-(2-벤질-5-시클로프로필-피라졸-3-일)-3,6-디히드로-2H-피란-4-일]-4-(2,4-디플루오로페닐)-6,7-디메틸-프테리딘(1.00 당량, 90 mg, 0.163 mmol)의 용액에 Pt/C(1.00 당량, 200 mg, 0.163 mmol) 및 염산(20 mg)을 첨가하였다. 반응물을 80℃에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 여과하고 농축시켜 미정제 물질을 수득하였다. 미정제 물질을 디클로로메탄에 용해시킨 다음, NH3-MeOH(0.5 mL, 7N)를 첨가하였다. 혼합물을 농축시켜 미정제 물질을 수득하였다. 미정제 물질을 디클로로메탄(20 mL)에 용해시키고 이산화망간(10.0 당량, 142 mg, 1.63 mmol)을 첨가하였다. 반응물을 20℃에서 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 농축시키고 여과하여 미정제 생성물을 수득하였다. 미정제 생성물을 분취-HPLC로 정제하여 2-[2-(3-시클로프로필-1H-피라졸-5-일)테트라히드로피란-4-일]-4-(2,4-디플루오로페닐)-6,7-디메틸-프테리딘(1.6 mg, 0.00346 mmol, 2.12 % 수율)을 연황색 고형분으로서 수득하였다.
방법 15
예 168: 4-(2,4-디플루오로페닐)-6,7-디메틸-2-((2R,6R)-2-메틸-6-(1H-피라졸-4-일)테트라히드로-2H-피란-4-일)프테리딘
단계 1: 글로브 박스에서 DMA(4 mL) 중 아연 분진(6.13 당량, 392 mg, 6.00 mmol)의 혼합물에 BrCH2CH2Br(2.04 당량, 368 mg, 2.00 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 실온에서 10분 동안 교반하였다. TMSCl(2.04 당량, 217 mg, 2.00 mmol)을 적가하고, 혼합물을 60℃에서 30분 동안 교반하였다. DMA(2 mL) 중 1-벤질-4-[(2R,6R)-4-요오도-6-메틸-테트라히드로피란-2-일]피라졸(2.04 당량, 764 mg, 2.00 mmol)의 용액을 혼합물에 첨가하고, 혼합물을 60℃에서 1시간 동안 교반하였다. 아르곤 보호 하에 2-클로로-4-(2,4-디플루오로페닐)-6,7-디메틸-프테리딘(1.00 당량, 300 mg, 0.978 mmol) 및 PdCl2(Amphos)(0.0722 당량, 50 mg, 0.0706 mmol)의 혼합물에 1 mL의 현탁액을 첨가하였다. 혼합물을 60℃에서 16시간 동안 교반하였다. 혼합물을 EtOAc(30 mL * 2)로 추출하고 물(10 mL * 2)로 세척하였다. 유기층을 건조시키고 농축시켰다. 잔류물을 분취-TLC(UV254, 실리카, DCM/MeOH = 20/1)로 정제하여 2-((2R,6R)-2-(1-벤질-1H-피라졸-4-일)-6-메틸테트라히드로-2H-피란-4-일)-4-(2,4-디플루오로페닐)-6,7-디메틸프테리딘을 황색 고형분으로서 수득하였다(100 mg, 19% 수율). LC-MS: Rt: 2.003분; [M+H]+ = 527; 214 nm에서 96.90% 순도.
단계 2:메탄올(30 mL) 중 2-[(2R,6R)-2-(1-벤질피라졸-4-일)-6-메틸-테트라히드로피란-4-일]-4-(2,4-디플루오로페닐)-6,7-디메틸-프테리딘(1.00 당량, 80 mg, 0.152 mmol) 의 용액에 Pd/C(6.21 당량, 100 mg, 0.943 mmol) 및 HCl(3 방울)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 H2 하에 80℃에서 3시간 동안 교반하였다. 혼합물을 여과하고, 여액을 MeOH(2 mL, 7 N) 중 NH3에 붓고, 분취-TLC(실릴, UV 254, DCM/MeOH = 20/1)로 정제하여 과환원된 중간체를 황색 고형분으로서 수득하였다(50 mg, 89% 수율). 그런 다음, 미정제 중간체를 DCM(20 mL) 중에 용해시키고, MnO2(50.0 당량, 660 mg, 7.60 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 그런 다음, 혼합물을 여과하고, 여액을 농축시킨 다음, 분취-HPLC(NH4HCO3)로 정제하여 4-(2,4-디플루오로페닐)-6,7-디메틸-2-[2-(1H-피라졸-4-일)테트라히드로피란-4-일]프테리딘(7.1 mg,0.0163 mmol, 10.71% 수율)을 백색 고형분으로서 수득하였다.
방법 16
예 201: 5-[(2R,4S)-4-[4-(2,4-디플루오로페닐)-6,7-디메틸-프테리딘-2-일]테트라히드로피란-2-일]-1-메틸-피리딘-2-온
단계 1: MeCN(5 mL) 중 4-(2,4-디플루오로페닐)-2-[(2R,4S)-2-(6-메톡시-3-피리딜)테트라하이드로피란-4-일]-6,7-디메틸-프테리딘(1.00 당량, 50 mg, 0.108 mmol) 및 KOAc(2.00 당량, 21 mg, 0.216 mmol)의 용액을 N2 하에 둔 다음, MeI(1.00 당량, 15 mg, 0.108 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 80℃에서 3시간 동안 교반하였다. 혼합물을 분취-HPLC로 정제하여 5-[(2R,4S)-4-[4-(2,4-디플루오로페닐)-6,7-디메틸-프테리딘-2-일]테트라히드로피란-2-일]-1-메틸-피리딘-2-온(15 mg, 0.0324 mmol, 30.00 % 수율)을 녹색 고체로서 수득하였다.
방법 17
예 203: 3-((2R,4S)-4-(4-(2,4-디플루오로페닐)-6,7-디메틸프테리딘-2-일)테트라히드로-2H-피란-2-일)-1-메틸피리딘-2(1H)-온
단계 1: MeCN(5 mL) 중 4-(2,4-디플루오로페닐)-2-[(2R,4S)-2-(2-메톡시-3-피리딜)테트라히드로피란-4-일]-6,7-디메틸-프테리딘(1.00 당량, 45 mg, 0.0971 mmol)의 용액에 MeCN(2.5 mL) 중 TMSI(1.00 당량, 19 mg, 0.0971 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 N2 보호 하에 0℃에서 16시간 동안 교반하였다. 16시간 후, LC-MS는 DP/SM = 1/2를 나타냈다. 혼합물을 에틸 아세테이트(30 mL * 2)로 추출하고 물(30 mL * 2)로 세척하였다. 유기층을 농축시켜 미정제 3-[(2R,4S)-4-[4-(2,4-디플루오로페닐)-6,7-디메틸-프테리딘-2-일]테트라히드로피란-2-일]-1H-피리딘-2-온(50 mg, 0.0200 mmol, 20.62 % 수율)을 황색 고형분으로서 수득하였고, 이를 정제 없이 다음 단계에서 사용되었다. LC-MS: Rt: 1.39분, m/z: 450.1 [M+H]+. 254 nm에서 18% 순도.
단계 2: DMF(3 mL) 중 3-[(2R,4S)-4-[4-(2,4-디플루오로페닐)-6,7-디메틸-프테리딘-2-일]테트라히드로피란-2-일]-1H-피리딘-2-온(1.00 당량, 50 mg, 0.0200 mmol), K2CO3(5.00 당량, 14 mg, 0.100 mmol) 및 MeI(5.00 당량, 14 mg, 0.100 mmol)의 용액을 25℃에서 16시간 동안 교반하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트(30 mL * 2)로 추출하고, 물(30 mL * 2) 및 염수(50 mL)로 세척하였다. 유기층을 농축시키고 분취-HPLC로 정제하여 3-[(2R,4S)-4-[4-(2,4-디플루오로페닐)-6,7-디메틸-프테리딘-2-일]테트라히드로피란-2-일]-1-메틸-피리딘-2-온(5.0 mg, 0.0108 mmol, 53.87 % 수율)을 백색 고형분으로서 수득하였다.
표 B. 예시적인 화합물
아래 표 B에 개시된 화합물은 본 개시내용의 방법 또는 유사한 방법에 의해 제조하였다. 표 B의 화합물을 합성하는 데 필요한 적절한 시약, 출발 물질, 및 조건은 당업자에게 명백할 것이다. “(+/-)”로 지정된 화합물을 동일한 상대 입체화학을 공유하는 부분 입체이성질체(즉, 시스 또는 트랜스)의 혼합물로서 단리하였다. “(rac)”로 지정된 화합물을 도시된 화합물의 모든 가능한 입체이성질체의 혼합물로서 단리하였다. 어느 하나로 지정되지 않은 화합물은, 도시된 특정 입체이성질체가 단리된 생성물의 적어도 90%로 구성되도록, 도시된 특정 입체화학을 기준으로 단리하였다.
표 C. 표 B의 화합물에 대한 분석 데이터
예 A2-2: 예시적인 화합물의 합성
I-1076 및 I-1081의 합성
단계 1: DMSO(8 mL) 중 6,8-디클로로-2,3-디메틸-피리도[2,3-b]피라진(1.00 당량, 400 mg, 1.75 mmol), (2S,6R)-2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)-6-메틸-모르폴린(1.50 당량, 545 mg, 2.63 mmol) 및 DIEA(3.00 당량, 0.87 mL, 5.26 mmol)의 혼합물을 80℃에서 1시간 동안 교반하였다. LCMS는 출발 물질이 완전히 소모되었고 목적하는 질량이 검출되었음을 나타냈다(31%, 399.3 [M+H]+, ESI+ pos). 미정제 생성물을 역상 HPLC(0.1% FA 조건)로 정제하여 (2S,6R)-4-(8-클로로-2,3-디메틸-피리도[2,3-b]피라진-6-일)-2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)-6-메틸-모르폴린 3A(150 mg, 0.376 mmol, 21.44% 수율) 및 (2S,6R)-4-(6-클로로-2,3-디메틸-피리도[2,3-b]피라진-8-일)-2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)-6-메틸-모르폴린 3B(150 mg, 0.376 mmol, 21% 수율)의 혼합물을 황색 오일로서 수득하였다. LCMS (M+H)+ = 398.9; 순도 = 88% (220 nm). 유지 시간 = 0.873분
단계 2: 1,4-디옥산(1 mL) 및 물(0.10 mL) 중 (2S,6R)-4-(8-클로로-2,3-디메틸-피리도[2,3-b]피라진-6-일)-2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)-6-메틸-모르폴린(1.00 당량, 50 mg, 0.125 mmol) 및 (2S,6R)-4-(6-클로로-2,3-디메틸-피리도[2,3-b]피라진-8-일)-2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)-6-메틸-모르폴린(1.00 당량, 50 mg, 0.125 mmol)의 혼합물에 K2CO3(4.00 당량, 42 mg, 0.501 mmol) 및 (4-클로로-2-플루오로-페닐)보론산(6.00 당량, 131 mg, 0.752 mmol)을 첨가하였다. 그런 다음, [1,1'-비스(디페닐포스피노)페로센]디클로로팔라듐(II)(0.100 당량, 9.2 mg, 0.0125 mmol)을 N2 하에 첨가하였다. 혼합물을 80℃에서 2시간 동안 교반하였다. LCMS는 출발 물질이 완전히 소모되었고 목적하는 질량을 갖는 2개의 피크가 검출되었음을 나타냈다(20% 및 39%, 493.2 [M+H]+, ESI+ pos). 혼합물을 감압 하에 농축시켜 미정제 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 분취-HPLC(물-FA)-ACN, Phenomenex Luna C18 150 * 25 mm * 10 um)로 정제하고 동결 건조시켜 2개의 미정제 생성물을 수득하였다. 미정제 생성물 1을 분취-TLC(SiO2, 석유 에테르/에틸 아세테이트=0:1, Rf = 0.4)로 정제하고 동결 건조시켜 (2S,6R)-4-[8-(4-클로로-2-플루오로-페닐)-2,3-디메틸-피리도[2,3-b]피라진-6-일]-2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)-6-메틸-모르폴린(31 mg, 0.0627 mmol, 50% 수율)을 황색 고형분으로서 수득하였다. 미정제 생성물 2를 분취-TLC(SiO2, 석유 에테르/에틸 아세테이트=0:1, Rf = 0.4)로 정제하고 동결 건조시켜 (2S,6R)-4-[6-(4-클로로-2-플루오로-페닐)-2,3-디메틸-피리도[2,3-b]피라진-8-일]-2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)-6-메틸-모르폴린, I-1081(32 mg, 0.0645 mmol, 51% 수율)을 황색 고형분으로서 수득하였다. LCMS: (M+H)+ = 493.3; 순도 = 100% (220 nm). 유지 시간 = 0.946분. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 0.91 - 1.05 (m, 4 H) 1.23 (d, J=6.24 Hz, 3 H) 2.47 - 2.48 (m, 3 H) 2.59 (s, 3 H) 2.68 - 2.75 (m, 1 H) 2.98 (dd, J=12.78, 11.43 Hz, 1 H) 3.69 (tt, J=7.32, 3.74 Hz, 1 H) 3.73 - 3.81 (m, 1 H) 4.52 - 4.57 (m, 1 H) 4.57 - 4.66 (m, 2 H) 7.44 (dd, J=8.25, 1.90 Hz, 1 H) 7.48 (s, 1 H) 7.54 (s, 1 H) 7.55 - 7.61 (m, 2 H) 7.84 (s, 1 H). 피크 2, LCMS: (M+H)+ = 493.3; 순도 = 100% (220 nm). 유지 시간 = 0.853분. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 0.90 - 1.06 (m, 4 H) 1.16 - 1.25 (m, 3 H) 2.68 (d, J=3.42 Hz, 6 H) 2.77 - 2.90 (m, 1 H) 3.00 - 3.15 (m, 1 H) 3.69 (dt, J=7.27, 3.58 Hz, 1 H) 3.94 - 4.07 (m, 1 H) 4.42 (br d, J=12.10 Hz, 1 H) 4.58 (br d, J=12.59 Hz, 1 H) 4.79 (dd, J=10.64, 2.08 Hz, 1 H) 7.33 (s, 1 H) 7.43 - 7.51 (m, 2 H) 7.61 (dd, J=10.94, 1.90 Hz, 1 H) 7.82 (s, 1 H) 8.02 (t, J=8.56 Hz, 1 H).
I-1086의 합성
단계 1: 건조 DMF(5 mL) 중 3-메틸-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)이속사졸(3.00 당량, 152 mg, 0.72 mmol), (2S,6R)-2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)-4-(6,7-디메틸-4-메틸설파닐-프테리딘-2-일)-6-메틸-모르폴린(1.00 당량, 100 mg, 0.24 mmol), CuTC(2.20 당량, 102 mg, 0.53 mmol) 및 Pd(dppf)Cl2·CH2Cl2(0.30 당량, 53 mg, 0.07 mmol)을 함유하는 용액을 아르곤으로 3분 동안 플러싱하였다. 갈색 현탁액을 아르곤 하에서 8시간 동안 조사하였다(365 nm). LCMS는 출발 물질이 소모되었고 목적하는 생성물(55%, Rt: 0.933분; [M+H]+ = 220 nm에서 447.4)이 검출되었음을 나타냈다. 반응 혼합물을 물(20 mL)에 붓고 EtOAc (20 mL 3회)로 추출하였다. 합쳐진 유기상을 염수(20 mL)로 세척하고, Na2SO4로 건조시켜 미정제 생성물을 수득하였다. 생성물을 분취-HPLC(컬럼: Phenomenex Synergi Polar-RP 100 * 25 mm * 4 um; 조건: 물(TFA)-ACN)로 정제하고 동결 건조시켜 (2S,6R)-2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)-4-[6,7-디메틸-4-(3-메틸이속사졸-5-일)프테리딘-2-일]-6-메틸-모르폴린(69 mg, 0.15 mmol, 63% 수율)을 황색 고형분으로서 수득하였다. [M+H]+ = 447.4. 유지 시간 = 0.933분. LC-MS. Rt: 0.651분, m/z: 447.1 [M+H]+. 220nm에서 100% 순도. 1 H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 7.73 (s, 1H), 7.62 (s, 1H), 7.57 (s, 1H), 5.15 (br d, J = 13.1 Hz, 1H), 5.11 - 4.98 (m, 1H), 4.62 (dd, J = 2.6, 10.9 Hz, 1H), 3.90 - 3.77 (m, 1H), 3.61 (tt, J = 3.7, 7.3 Hz, 1H), 3.17 - 3.04 (m, 1H), 2.88 (br t, J = 12.1 Hz, 1H), 2.74 (s, 3H), 2.72 (s, 3H), 2.48 (s, 3H), 1.36 (br d, J = 6.0 Hz, 3H), 1.14 (br d, J = 2.8 Hz, 2H), 1.08 - 1.02 (m, 2H). 19F NMR (376 MHz, CDCl3) δ = -75.99 (s, 1F).
화합물 I-1096의 합성
단계 1: MeCN(30 mL) 중 2-클로로-1-(1-시클로프로필피라졸-4-일)에타논(1.00 당량, 700 mg, 3.79 mmol) 및 터트-부틸 N-[2-(벤질아미노)에틸]카르바메이트(2.00 당량, 1898 mg, 7.58 mmol)의 용액에 TEA(2.60 당량, 998 mg, 9.86 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 80℃에서 1시간 동안 교반하였다. LCMS는 출발 물질이 소모되었음을 나타냈다. 혼합물을 물에 부었다. 수성층을 EA(100 mL)로 3회 추출하였다. 합쳐진 유기층을 염수(100 * 5) mL로 세척하고, Na2SO4로 건조시켰다. 미정제 생성물을 TLC(PE : EtOAc=1:1) Rf=0.5로 정제하였다. 황색 오일로서 터트-부틸 N-[2-[벤질-[2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)-2-옥소-에틸] 아미노] 에틸] 카르바메이트(1000 mg, 2.26 mmol, 60% 수율)를 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 7.90 (s, 1H), 7.84 (s, 1H), 7.32 (s, 5H), 5.21 (br s, 1H), 3.76 (s, 2H), 3.64 (s, 2H), 3.62 - 3.57 (m, 1H), 3.24 (br d, J = 5.5 Hz, 2H), 2.76 (t, J = 5.9 Hz, 2H), 1.45 (s, 9H), 1.16 - 1.02 (m, 4H).
단계 2: 용액에 디옥산(1.00 당량, 2.0 mL, 0.753 mmol) 및 에틸 아세테이트(6 mL) 중 HCl 4M 중 터트-부틸 N-[2-[벤질-[2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)-2-옥소-에틸]아미노]에틸]카르바메이트(1.00 당량, 300 mg, 0.753 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 25℃에서 12시간 동안 교반하였다. LCMS는 출발 물질이 남아 있지 않음을 나타냈다. 황색 고형분을 침전시켰다. 혼합물에 PE(10 mL)로 첨가하고 25℃에서 0.5시간 동안 교반하였다. 혼합물을 여과하고, 필터 케이크를 PE로 세척하여 미정제 생성물. 4-벤질-6-(1-시클로프로필피라졸-4-일)-3, 5-디히드로-2H-피라진(200 mg, 0.713 mmol, 95% 수율)을 황색 고형분으로서 수득하였다. MS (ESI): m/z = 281.3 [M+H] +.
단계 3: THF(10 mL) 중 4-벤질-6-(1-시클로프로필피라졸-4-일)-3,5-디히드로-2H-피라진 (1.00 당량, 100 mg, 0.357 mmol)의 용액에 나트륨 시아노보로하이드라이드(2.00 당량, 45 mg, 0.713 mmol)를 25℃에서 첨가하고, 혼합물을 25℃에서 1시간 동안 교반하였다. LCMS는 일부 출발 물질이 남아 있음을 나타냈고, 나트륨 시아노보로하이드라이드(3.00 당량, 67 mg, 1.07 mmol)를 더 첨가하였다. 1시간 후, LCMS는 출발 물질이 남아 있음을 나타내었고, 출발 물질이 형성되었다. 12시간 후, LCMS는 반응이 완료되었음을 나타냈다. 미정제 생성물을 추가 정제 없이 다음 단계에서 직접 사용하였다. 1-벤질-3-(1-시클로프로필피라졸-4-일) 피페라진(100 mg, 0.269 mmol, 75% 수율)을 황색 고형분으로서 수득하였다. MS (ESI): m/z = 283.3 [M+H] +.ESI+.
단계 4: THF(10 mL) 중 1-벤질-3-(1-시클로프로필피라졸-4-일)피페라진(1.00 당량, 100 mg, 0.354 mmol)의 용액에 TEA(2.00 당량, 0.061 mL, 0.708 mmol) 및 Boc2O(1.50 당량, 116 mg, 0.531 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 25℃에서 3시간 동안 교반하였다. LCMS는 완료된 반응을 나타냈다. 혼합물을 물에 부었다. 수성층을 EA(50 mL)로 3회 추출하였다. 합쳐진 유기층을 염수(50 * 5) mL로 세척하고, Na2SO4로 건조시켰다. 미정제 생성물을 분취-TLC(PE:EtOAc=1:1)로 정제하여 목적하는 생성물 Rf=0.5를 수득하였다. 무색 오일로서 터트-부틸 4-벤질-2-(1-시클로프로필피라졸-4-일) 피페라진-1-카르복실레이트(70 mg, 0.165 mmol, 47% 수율)를 수득하였다, MS (ESI): m/z = 383.3 [M+H] +.
단계 5: MeCN(1 mL) 중 터트-부틸 4-벤질-2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)피페라진-1-카르복실레이트 (1.00 당량, 50 mg, 0.131 mmol)의 용액에 2,2,2-트리클로로에틸 카르보노클로리데이트(1.00 당량, 27 mg, 0.131 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 50℃에서 1시간 동안 교반하였다. LCMS는 반응이 완료되었음을 나타냈다. 잔류물을 분취 HPLC(컬럼: Phenomenex luna C18 150 * 25 mm * 10 um;이동상: [물(FA)-ACN];B%: 52% 내지 82%, 10분)로 정제하고 동결건조시켰다. O1-터트-부틸 O4-(2, 2, 2-트리클로로에틸) 2-(1-시클로프로필피라졸-4-일) 피페라진-1, 4-디카르복실레이트(35 mg, 0.0599 mmol, 45.79% 수율)를 무색 오일로서 수득하였다. LCMS. MS (ESI): m/z =467.0 [M+H] +
단계 6: 아세트산(2 mL) 중 O1-터트-부틸 O4-(2,2,2-트리클로로에틸) 2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)피페라진-1,4-디카르복실레이트(1.00 당량, 35 mg, 0.0748 mmol)의 용액에 아연 분말(2.04 당량, 10 mg, 0.153 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 N2 하에 20℃에서 2시간 동안 교반하였다. LCMS는 출발 물질이 남아 있음을 나타냈다. 반응물을 20℃에서 12시간 동안 교반하였다. LCMS는 출발 물질이 남아 있지 않음을 나타냈다. 아연 분말(2.04 당량, 10 mg, 0.153 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 20℃에서 2시간 동안 교반하였다. LCMS는 목적하는 생성물이 형성되었음을 나타냈다. 혼합물을 여과하고, 필터 케이크를 가스가 생성되지 않을 때까지 교반된 1 N HCl(50 ml)에 부었다. 여과 액체를 NH3 .H2O에 의해 PH를 7.0으로 조정하였다. 수성층을 DCM: MeOH =10: 1(30 mL)로 3회 추출하고, Na2SO4로 건조시켰다. 무색 오일로서 터트-부틸 2-(1-시클로프로필피라졸-4-일) 피페라진-1-카르복실레이트(20 mg, 0.0417 mmol, 55.77% 수율)를 수득하였다. MS (ESI): m/z =293.3 [M+H] +.
단계 7: DMSO(2 mL) 중 터트-부틸 2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)피페라진-1-카르복실레이트(1.00 당량, 20 mg, 0.0684 mmol) 및 2-클로로-4-(4-클로로-2-플루오로-페닐)-6,7-디메틸-프테리딘(0.500 당량, 11 mg, 0.0342 mmol)의 용액에 DIPEA(4.00 당량, 0.048 mL, 0.274 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 100℃에서 30분 동안 교반하였다. LCMS는 반응이 완료되었음을 나타냈다. 혼합물을 물에 붓고, 수성층을 EA(50 mL)로 3회 추출하였다. 합쳐진 유기층을 염수(50 x 5) mL로 세척하고 Na2SO4로 건조시켰다. 미정제 생성물을 추가 정제 없이 다음 단계에서 직접 사용하였다. 황색 고체로서 터트-부틸 4-[4-(4-클로로-2-플루오로-페닐)-6,7-디메틸-프테리딘-2-일]-2-(1-시클로프로필피라졸-4-일) 피페라진-1-카르복실레이트(20 mg, 0.0242 mmol, 35.34% 수율)를 수득하였다. MS (ESI): m/z = 579.4 [M+H]+.
단계 8: DCM(1 mL) 중 터트-부틸 4-[4-(4-클로로-2-플루오로-페닐)-6,7-디메틸-프테리딘-2-일]-2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)피페라진-1-카르복실레이트(1.00 당량, 20 mg, 0.0345 mmol)의 용액에 TFA(189 당량, 0.50 mL, 6.53 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 20℃에서 1시간 동안 교반하였다. LCMS는 반응이 완료되었음을 나타냈다. 혼합물 pH를 NH3 H2O에 의해 7로 조정하고 농축시켜 미정제 생성물을 수득하였다. 잔류물을 분취 HPLC(컬럼: Phenomenex Luna C18, 150 * 25 mm * 10 um; 이동상: [물 (FA)-ACN]; B%: 17%-47%, 10분)로 정제하고 동결건조시켰다.
4-(4-클로로-2-플루오로-페닐)-2-[3-(1-시클로프로필피라졸-4-일) 피페라진-1-일]-6, 7-디메틸-프테리딘(2.0 mg, 0.00384 mmol, 11.11% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. MS (ESI): m/z = 479.1 [M+H] +. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 7.65 (t, J = 7.8 Hz, 1H), 7.51 (d, J = 3.8 Hz, 2H), 7.29 (br d, J = 8.3 Hz, 2H), 5.02 - 5.01 (m, 1H), 5.12 - 4.99 (m, 1H), 4.95 (br d, J = 13.1 Hz, 1H), 3.97 - 3.84 (m, 1H), 3.57 (br s, 1H), 3.30 - 3.08 (m, 3H), 3.34 - 3.07 (m, 4H), 3.06 - 2.96 (m, 1H), 2.70 (s, 3H), 2.60 - 2.56 (m, 3H), 1.13 - 1.08 (m, 2H), 1.00 (br d, J = 6.6 Hz, 2H).
화합물 I-1099의 합성
25℃에서 DMSO(4 mL) 중 4-(4-클로로-2-플루오로-페닐)-2-[(2R, 4S)-2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)테트라히드로피란-4-일]-7-메틸-프테리딘 (1.00 당량, 250 mg, 0.538 mmol) 및 아연 디플루오로메탄설피네이트(4.00 당량, 632 mg, 2.15 mmol)의 용액에 격렬하게 교반하며 터트-부틸히드로퍼옥시드(6.00 당량, 415 mg, 3.23 mmol)를 첨가하고 N2로 30초 동안 버블링하였다. 반응 용액을 25℃에서 12시간 동안 교반하였다. LCMS는 반응물의 49%가 소모되었고 목적하는 질량의 30%가 검출되었음을 나타냈고, 반응 용액을 역 컬럼(FA)으로 정제하고 동결 건조시켜 미정제물을 수득한 다음, 이를 분취-HPLC(FA)로 정제하고 동결 건조시켜 4-(4-클로로-2-플루오로-페닐)-2-[(2R,4S)-2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)테트라히드로피란-4-일]-6-(디플루오로메틸)-7-메틸-프테리딘(19 mg, 0.0367 mmol, 6.82% 수율)을 황색 고형분으로서 수득하였다. LCMS (M+H) + = 514.9; 순도 = 98.4% (220 nm). 유지 시간 = 1.025분. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 7.78 - 7.69 (m, 1H), 7.52 (d, J = 1.2 Hz, 2H), 7.40 (dd, J = 1.7, 8.3 Hz, 1H), 7.36 - 7.30 (m, 1H), 6.94 - 6.60 (m, 1H), 4.67 - 4.53 (m, 1H), 4.35 - 4.25 (m, 1H), 3.92 - 3.79 (m, 1H), 3.69 - 3.49 (m, 2H), 3.08 (s, 3H), 2.56 - 2.41 (m, 1H), 2.31 - 2.13 (m, 3H), 1.15 - 1.08 (m, 2H), 1.04 - 0.97 (m, 2H).
화합물 I-1104의 합성
N2 분위기 하에 THF(1 mL) 및 TEA(2.00 당량, 0.063 mL, 0.451 mmol) 중 (2S,6R)-4-(8-클로로-2,3-디메틸피리도[2,3-b]피라진-6-일)-2-(1-시클로프로필-1H-피라졸-4-일)-6-메틸모르폴린 및 (2S,6R)-4-(6-클로로-2,3-디메틸피리도[2,3-b]피라진-8-일)-2-(1-시클로프로필-1H-피라졸-4-일)-6-메틸모르폴린(1.00 당량, 90 mg, 0.226 mmol), 에티닐시클로프로판(3.00 당량, 45 mg, 0.677 mmol) 및 잔트포스(0.1000 당량, 13 mg, 0.0226 mmol)의 용액에 Pd(OAc)2(0.0500 당량, 2.5 mg, 0.0113 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 70℃에서 16시간 동안 교반하였다. LCMS는 출발 물질이 완전히 소모되었고 목적하는 질량이 검출되었음을 나타냈다(14% 및 20%, 429.3 [M+H]+, ESI+ pos). 혼합물을 여과하고, 여과물을 감압 하에 농축시켜 미정제 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 분취-HPLC(물 (FA)-ACN, Phenomenex luna C18 150 * 25 mm * 10 um)로 정제하고 동결 건조시켜 (2S,6R)-4-[6-(2-시클로프로필에티닐)-2,3-디메틸-피리도[2,3-b]피라진-8-일]-2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)-6-메틸-모르폴린(13 mg, 0.0291 mmol, 12.90% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. 미정제 생성물을 분취-TLC(SiO2, 석유 에테르/에틸 아세테이트 = 0:1, rf = 0.3)로 정제하여 (2S,6R)-4-[8-(2-시클로프로필에티닐)-2,3-디메틸-피리도[2,3-b]피라진-6-일]-2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)-6-메틸-모르폴린(7.9 mg, 0.0181 mmol, 8.02% 수율)을 황색 고형분으로서 수득하였다. (M+H)+ = 429.2; 순도 = 98.2% (220 nm). 유지 시간 = 0.836분. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 0.80 - 0.86 (m, 2 H) 0.91 - 1.03 (m, 6 H) 1.19 (d, J=6.25 Hz, 3 H) 1.62 (tt, J=8.27, 4.99 Hz, 1 H) 2.63 (d, J=3.75 Hz, 6 H) 2.74 (dd, J=12.01, 10.76 Hz, 1 H) 2.95 - 3.05 (m, 1 H) 3.69 (tt, J=7.38, 3.69 Hz, 1 H) 3.90 - 4.00 (m, 1 H) 4.38 (br d, J=12.38 Hz, 1 H) 4.51 (br d, J=12.38 Hz, 1 H) 4.73 (dd, J=10.57, 2.31 Hz, 1 H) 6.99 (s, 1 H) 7.45 (s, 1 H) 7.82 (s, 1 H). LCMS: (M+H)+ = 429.2; 순도 = 98.2% (220 nm). 유지 시간 = 0.903분. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 0.80 - 0.88 (m, 2 H) 0.92 - 1.05 (m, 6 H) 1.21 (br d, J=6.11 Hz, 3 H) 1.62 - 1.75 (m, 1 H) 2.58 (d, J=2.81 Hz, 6 H) 2.64 - 2.70 (m, 1 H) 2.93 (br t, J=11.62 Hz, 1 H) 3.64 - 3.78 (m, 2 H) 4.45 - 4.62 (m, 3 H) 7.48 (s, 1 H) 7.52 (s, 1 H) 7.84 (s, 1 H).
I-1119의 합성
테플론-코팅된 자기 교반 막대가 구비된 유리 바이알에 (7-((2R,4S)-2-(1-시클로프로필-1H-피라졸-4-일)테트라히드로-2H-피란-4-일)-5-(2,4-디플루오로페닐)-2-메틸피리도[3,4-b]피라진-3-일)메틸 아세테이트(1.0 당량, 10 mg, 0.019 mmol), MeOH(0.25 mL) 및 THF(0.25 mL)를 채웠다. 바이알을 0℃의 얼음조에서 교반하면서 냉각시켰다. 탄산칼륨(1.0 당량, 2.7 mg, 0.019 mmol)을 첨가하고, 반응 혼합물을 0℃에서 90분 동안 교반하고 22℃에서 4일 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 5% 시트르산(수성)(25 μL)으로 급냉시키고, 감압 하에 증발 건조시켰다. 미정제 잔류 물질을 DCM 중 0% 내지 10% MeOH의 용리 구배를 사용하는 실리카 겔 플래쉬 크로마토그래피(사전 충진된 Teledyne RediSep® GOLD 컬럼, 12 g SiO2)로 정제하여 (7-((2R,4S)-2-(1-시클로프로필-1H-피라졸-4-일)테트라히드로-2H-피란-4-일)-5-(2,4-디플루오로페닐)-2-메틸피리도[3,4-b]피라진-3-일)메탄올 (4.3 mg, 0.009 mmol, 47 % 수율)을 황백색 고형분으로서 수득하였다. LC-MS(ESI+): Tr = 1.38분; [M+H]+ 478.2 (obs). 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz): δH 7.87 (1H, s), 7.68-7.73 (2H, m), 7.37-7.43 (2H, m), 7.26 (1H, dd, J = 9.8, 7.6 Hz), 5.37 (1H, t, J = 5.7 Hz), 4.71 (2H, d, J = 5.8 Hz), 4.49 (1H, d, J = 11.1 Hz), 4.09 (1H, d, J = 11.3 Hz), 3.70 (1H, t, J = 11.3 Hz), 3.63-3.67 (1H, m), 2.81 (3H, s), 2.22 (1H, d, J = 13.2 Hz), 1.85-1.94 (3H, m), 0.97-1.00 (2H, m), 0.89-0.95 (2H, m). 모든 온도는 섭씨(℃) 단위로 보고되고 보정되지 않는다. 시약 등급 화학 물질 및 무수 용매를 상업적 공급원으로부터 구매하였고, 달리 언급되지 않는 한, 추가 정제 없이 사용하였다. 플래쉬 크로마토그래피는 Teledyne Isco 기기 상에서 사전 충진된 일회용 SiO2 고정상 컬럼을 사용하여 수행하되, 용리액 유속 범위는 15 내지 200 mL/분이었고, UV 검출(254 및 220 nm)하였다. DAD 검출기(190 nm 내지 300 nm)가 구비된 Agilent 1100 시리즈 기기를 사용하여 분석용 HPLC 크로마토그램을 수행하였다. 질량 스펙트럼을 Waters Micromass ZQ 검출기로 130℃ 에서 기록하였다. 질량 분광계는 양의 이온 모드에서 작동되는 전기분무 이온 소스(ESI)가 구비되어 있었고, 0.3초의 스캔 시간으로 m/z 150 내지 800 사이에서 스캔하도록 설정하였다. 생성물 및 중간체를 Gemini-NX(5 M, 2.0 x 30 mm) 상에서 UPLC/MS에 의해 1.0 mL/분에서 5분에 걸쳐 H2O(0.1% HCOOH) 중 10% 내지 95%의 ACN의 낮은 pH 완충액 구배를 사용하여 3.5분 동안 분석하였다. 1H NMR 스펙트럼을 Varian NMR(AS 400)에 기록하였다. 화학적 이동은 테트라메틸실란 표준으로부터 백만분율로 보고된다.
화합물 I-1124의 합성
DMSO(2 mL) 중 2-클로로-4-[2-플루오로-4-(트리플루오로메틸)페닐]-6,7-디메틸-프테리딘 (1.00 당량, 80 mg, 0.224 mmol) 및 (2S,6R)-2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)-6-메틸-모르폴린(1.10 당량, 51 mg, 0.247 mmol)의 용액에 DIEA(5.00 당량, 0.54 mL, 3.26 mmol)를 첨가한 다음, 혼합물을 100℃에서 20분 동안 교반하였다. LCMS (5-95AB/1.5분): RT = 0.702분, 528.3 = [M+H]+, ESI+는 출발 물질이 완전히 소모되었고 목적하는 질량이 검출되었음을 나타냈다. 반응 혼합물을 물 10 mL로 희석하고, EA(10 mL * 2)로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 [Na2SO4]로 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 분취-HPLC(물 (FA)-ACN, Phenomenex luna C18 150 * 25 mm, 10 um)로 정제하여 (2S,6R)-2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)-4-[4-[2-플루오로-4-(트리플루오로메틸)페닐]-6,7-디메틸-프테리딘-2-일]-6-메틸-모르폴린(47 mg, 0.0889 mmol, 39.65 % 수율)을 황색 고형분으로서 수득하였다(단일 거울상이성질체), LCMS: (M+H)+ = 528.1; 순도 = 99.04% (220 nm); 유지 시간 = 1.063분. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 1.02 (br d, J=6.25 Hz, 2 H) 1.08 - 1.16 (m, 2 H) 1.33 (d, J=6.13 Hz, 3 H) 2.59 (s, 3 H) 2.73 (s, 3 H) 2.85 (dd, J=12.63, 11.51 Hz, 1 H) 3.04 - 3.14 (m, 1 H) 3.51 - 3.64 (m, 1 H) 3.77 - 3.89 (m, 1 H) 4.61 (br d, J=10.13 Hz, 1 H) 4.86 - 5.21 (m, 2 H) 7.48 - 7.63 (m, 4 H) 7.78 - 7.85 (m, 1 H).
화합물 I-1129의 합성
단계 1: 부탄-2,3-디온을 8 사이클 동안 D2O 및 D2SO4를 사용하여 중수소화하였다. 각 사이클에 대해, D2O 및 D2SO4의 양을 사이클에 사용된 부탄디온의 양에 따라 조정하였다. 제1 사이클 동안, D2O(8.61 당량, 100.00 g, 5000 mmol) 중 부탄-2,3-디온(1.00 당량, 50.00 g, 581 mmol)을 D2SO4(1.0 mL)에 첨가하고 혼합물을 95℃에서 12시간 동안 교반하였다. 부분적으로 중수소화된 부탄-2,3-디온을 98℃에서 대기압 하에 증류로 단리하였다. 이렇게 단리된 부분적으로 중소화된 부탄-2,3-디온을 다음 사이클에서 추가 정제 없이 사용하였다. 최종 사이클 후, 1,1,1,4,4,4-헥사듀테리오부탄-2,3-디온(12.50 g,136 mmol, 68.71% 수율)을 대기압 하에 98℃에서 증류에 의해 단리하였다. 이렇게 단리된 것을 추가 정제 없이 다음 반응에서 사용하였다. 1,1,1,4,4,4-헥사듀테리오부탄-2,3-디온에 대한 98.92 원자% D는 내부 표준으로서 MeOH를 사용함으로써 H NMR이었다.
단계 2:DCE(10 mL) 중 2,6-디클로로피리미딘-4,5-디아민(1.00 당량, 180 mg, 1.01 mmol)의 용액에 CaSO4(5.00 당량, 684 mg, 5.03 mmol) 및 1,1,1,4,4,4-헥사듀테리오부탄-2,3-디온(1.50 당량, 139 mg, 1.51 mmol)을 첨가한 다음, 혼합물을 85℃에서 16시간 동안 교반하였다. LCMS는 원료가 완전히 소모되었음을 나타냈고, 주요 피크는 MS를 나타냈다(233.7[M]+; ESI+, LC-RT : 0.748분). 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 아세토니트릴(50 mL)로 희석하고, 셀라이트를 통해 여과하였다. 필터 케이크를 아세토니트릴(20 mL x 2)로 세척하였다. 합쳐진 여액을 농축시키고 실리카 겔 컬럼(PE/EA = 3/1, Rf = 0.5)으로 정제하여 2,4-디클로로-6,7-비스(트리듀테리오메틸)프테리딘(190 mg, 0.808mmol, 80.37% 수율)을 연갈색 고형분으로서 수득하였다. 3목에 2,4-디플루오로-1-요오도-벤젠(1.00 당량, 500 mg, 2.08 mmol)을 넣고, 플래시를 밀봉하고 N2로 3회 퍼징하고, THF(10 mL)를 첨가하고, 용액을 교반하면서 -40℃로 냉각시키고, iPrMgCl
Figure pct00828
LiCl(THF 중 1.3 M)(1.10 당량, 1.8 mL, 2.29 mmol)을 -40℃에서 적가하고, 이 온도에서 30분 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 -60℃로 추가로 냉각시키고 ZnCl2(THF 중 0.5 M, 1.00 당량, 4.2 mL, 2.08 mmol)를 적가하고, 상기 반응 용액은 백색 플록으로 변환시키고, 반응 혼합물을 실온으로 서서히 가온시키고 1시간 동안 교반하였다. 상기 백색 플록이 무색 용액으로 변한 다음 다음 단계에서 사용하였다.
단계 3 N2 분위기 하 밀봉된 병에 THF(2 mL) 중 2,4-디클로로-6,7-비스(트리듀테리오메틸)프테리딘(1.00 당량, 40 mg, 0.170 mmol) 및 PdCl2(Amphos)(0.0500 당량, 6.0 mg, 0.00851 mmol)를 채우고, N2로 3회 퍼징한 다음, 0℃로 냉각시키고, 클로로-(2,4-디플루오로페닐)아연(1.20 당량, 44 mg, 0.204 mmol)을 0℃에서 적가하고, 25℃로 가온시키고, 25℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 용액을 황색에서 짙은 갈색으로 변화시켰다. LCMS는 원료가 소모되었음을 나타냈고, 주요 피크는 목적하는 MS(311.7 [M+H-1]+; ESI+)를 나타냈다. 반응물에 물(5 mL)을 첨가한 다음, EtOAc(5 mL * 2)로 추출하고, 유기물을 5 mL 포화 염수 용액으로 세척하였다. 그런 다음, 유기물을 분리하고, 농축 건조 전에 건조시켰다(Na2SO4). 그런 다음, 미정제물을 분취-TLC(PE/EA = 0/1, Rf = 0.7)로 정제하여 2-클로로-4-(2,4-디플루오로페닐)-6,7-비스(트리듀테리오메틸)프테리딘(25 mg, 0.0799 mmol, 46.99% 수율)을 백색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 7.84 - 7.76 (m, 1H), 7.14 - 7.08 (m, 1H), 7.01 (ddd, J = 2.4, 8.9, 9.8 Hz, 1H).
단계 4:(2S,6R)-2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)-4-[4-(2,4-디플루오로페닐)-6,7-비스(트리듀테리오메틸)프테리딘-2-일]-6-메틸-모르폴린. DMSO(1 mL) 중 2-클로로-4-(2,4-디플루오로페닐)-6,7-비스(트리듀테리오메틸)프테리딘(1.00 당량, 25 mg, 0.0799 mmol) 및 (2S,6R)-2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)-6-메틸-모르폴린(1.50 당량, 25 mg, 0.120 mmol)의 용액에 DIEA(4.00 당량, 41 mg, 0.320 mmol)를 첨가한 다음, 혼합물을 100℃에서 20분 동안 교반하였다. 반응물이 연황색에서 갈색으로 변하였다. LCMS는 원료가 소모되었음을 나타냈고, 주요 피크는 목적하는 MS-2(482.0 [M+H]+; ESI+, LC-RT: 1.014분)를 나타냈다. 반응 혼합물을 물(10 mL)에 붓고, EtOAc(5 mL * 2)로 추출하고, 유기물을 5 ml 포화 염수 용액으로 세척하였다. 그런 다음, 유기물을 분리하고, 농축 건조 전에 건조시켰다(Na2SO4). 그런 다음, 미정제물을 분취-TLC(PE/EA = 0/1, Rf = 0.5)로 정제하여 고형분을 수득한 다음 동결 건조시켜 (2S,6R)-2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)-4-[4-(2,4-디플루오로페닐)-6,7-비스(트리듀테리오메틸)프테리딘-2-일]-6-메틸-모르폴린(5.3 mg, 0.0108 mmol, 13.53% 수율)을 황색 고형분으로서 수득하였고, 이는 H NMR이었다. LCMS: (M+H) + = 481.9; 순도 = 98.67% (UV = 220 nm). 유지 시간 = 1.011분. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 5.15 - 4.93 (m, 2H), 4.64 - 4.58 (m, 1H), 3.89 - 3.80 (m, 1H), 3.63 - 3.54 (m, 1H), 3.13 - 3.04 (m, 1H), 2.89 - 2.81 (m, 1H), 2.73 - 2.68 (m, 2H), 2.61 - 2.56 (m, 1H), 1.35 - 1.32 (m, 3H), 1.15 - 1.10 (m, 2H), 1.05 - 0.99 (m, 2H).
화합물 I-1144의 합성
단계 1: 0℃에서 DCM(40 mL) 중 3-아미노프로판-1-올(1.00 당량, 2000 mg, 26.6 mmol) 및 NsCl(1.20 당량, 7081 mg, 32.0 mmol)의 용액에 TEA (3.00 당량, 6.9 mL, 79.9 mmol)를 첨가한 다음, 25℃에서 12시간 동안 교반하였다. LCMS는 출발 물질이 완전히 소모되었고 목적하는 MS가 없는 주요 피크가 소모되었음을 나타냈다(85%, Rt: 0.533분; [M+H]+ = 220 nm에서 344.2). 혼합물을 0℃에서 물(40 mL)로 희석하고 DCM(40 mL)으로 2회 추출하였다. 합쳐진 유기층을 Na2SO4로 건조시켰다. 용매를 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 미정제 생성물을 실리카 겔 상의 컬럼 크로마토그래피(SiO2, PE/EtOAc = 1/1 내지 0/1; PE/EtOAc = 1/1, 목적 생성물 Rf = 0.6)로 정제하여 N-(3-히드록시프로필)-4-니트로벤젠설폰아미드(6.20 g, 23.8 mmol, 89.46% 수율)를 백색 고형분으로서 수득하고, LCMS로 확인하였다: (M-H2O)+ = 242.7; 순도 = 91% (220 nm). 유지 시간 = 0.396분. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 8.38 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 8.07 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 5.40 (br t, J = 5.4 Hz, 1H), 3.89 - 3.65 (m, 2H), 3.21 (q, J = 6.0 Hz, 2H), 1.76 (td, J = 5.8, 11.6 Hz, 2H), 1.71 (br s, 1H).
단계 2: 아세톤(10 mL) 중 N-(3-히드록시프로필)-4-니트로벤젠설폰아미드(1.50 당량, 423 mg, 1.62 mmol) 및 2-클로로-1-(1-시클로프로필-1H-피라졸-4-일)에탄-1-온(1.00 당량, 200 mg, 1.08 mmol)의 용액에 K2CO3(3.00 당량, 449 mg, 3.25 mmol), 및 KI(1.00 당량, 180 mg, 1.08 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 25℃에서 2시간 동안 교반하였다. LCMS는 출발 물질이 소모되었고 목적하는 질량을 갖는 주요 피크가 있음을 나타냈다(35%, Rt: 0.832분; [M+H]+ = 220 nm에서 409.2). 혼합물을 1 N HCl(100 mL)에 부었다. 수성층을 EtOAc(100 mL)로 2회 추출하였다. 합쳐진 유기층을 Na2SO4로 건조시키고 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 미정제 생성물을 PE/EtOAc = 1/0 내지 0/1(PE/EtOAc = 1/1, 목적 생성물 Rf = 0.5)로 용리된 실리카 겔 상의 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 N-(2-(1-시클로프로필-1H-피라졸-4-일)-2-옥소에틸)-N-(3-히드록시프로필)-4-니트로벤젠설폰아미드(280 mg, 0.617 mmol, 56.95% 수율)를 황색 고형분으로서 수득하고, LCMS에 의해 확인하였다, (M+H)+ = 408.9; 순도 = 100% (220 nm). 유지 시간 = 0.614분. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 8.39 - 8.33 (m, 2H), 8.06 - 8.00 (m, 2H), 7.99 (s, 1H), 7.88 (s, 1H), 4.61 (s, 2H), 3.75 (t, J = 5.6 Hz, 2H), 3.69 - 3.62 (m, 1H), 3.47 (t, J = 6.5 Hz, 2H), 1.77 (quin, J = 6.1 Hz, 2H), 1.20 - 1.15 (m, 2H), 1.14 - 1.09 (m, 2H).
단계 3: DCM(26 mL) 중 N-(2-(1-시클로프로필-1H-피라졸-4-일)-2-옥소에틸)-N-(3-히드록시프로필)-4-니트로벤젠설폰아미드(1.00 당량, 260 mg, 0.637 mmol)의 용액에 TES(5.00 당량, 369 mg, 3.18 mmol)를 첨가하였다. 그런 다음, TMSOTf(5.00 당량, 0.58 mL, 3.18 mmol)를 N2 하에 0℃에서 첨가하였다. 혼합물을 25℃에서 12시간 동안 교반하였다. LCMS는 출발 물질이 완전히 소모되었고 목적하는 질량(70%, Rt: 0.590분; [M+H]+ = 220 nm에서 393.0)을 갖는 주요 피크를 나타냈다. 반응 혼합물을 포화 NaHCO3 용액(20 mL)에 붓고, 수성상을 DCM(20 mL × 3)으로 추출하였다. 합쳐진 유기상을 염수(20 mL)로 세척하고, 무수 Na2SO4로 건조시키고, 여과하고 농축시켜 진공에서 미정제 생성물을 수득하였다. 미정제 생성물을 용리된 실리카 겔 상의 컬럼 크로마토그래피(SiO2, PE/EtOAc = 1/0 to 0/1; PE/EtOAc = 1/1, 목적 생성물 Rf = 0.6)로 정제하여 2-(1-시클로프로필-1H-피라졸-4-일)-4-((4-니트로페닐)설포닐)-1,4-옥사제판(240 mg, 0.612 mmol, 96.07% 수율)을 황색 고형분으로서 수득하고, LCMS [M+H]+ = 393.1; 순도 = 99% (220 nm)로 확인하였다. 유지 시간 = 0.587분. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 8.40 - 8.35 (m, 2H), 8.02 - 7.96 (m, 2H), 7.43 (d, J = 7.8 Hz, 2H), 4.66 (dd, J = 2.7, 10.0 Hz, 1H), 4.20 - 4.11 (m, 1H), 4.01 - 3.94 (m, 1H), 3.90 - 3.80 (m, 2H), 3.56 (td, J = 3.5, 7.2 Hz, 1H), 3.12 (ddd, J = 5.9, 8.2, 13.8 Hz, 1H), 2.96 (dd, J = 10.0, 13.9 Hz, 1H), 2.17 - 2.06 (m, 2H), 1.13 - 1.07 (m, 2H), 1.05 - 0.99 (m, 2H).
단계 4: MeCN(5 mL) 중 2-(1-시클로프로필-1H-피라졸-4-일)-4-((4-니트로페닐)설포닐)-1,4-옥사제판(1.00 당량, 180 mg, 0.459 mmol), K2CO3(5.00 당량, 317 mg, 2.29 mmol)의 혼합물에 티오페놀(5.00 당량, 252 mg, 2.29 mmol)을 첨가한 다음, 혼합물을 25℃에서 12시간 동안 교반하였다. LCMS는 출발 물질이 완전히 소모되었고 목적하는 질량이 검출되었고(12%, Rt: 0.559분; [M+H]+ = 220 nm에서 208.1) 티오페놀의 66%가 검출되었음을 나타냈다. 반응 혼합물을 물(20 mL)을 첨가하여 급냉시킨 다음, EtOAc(15 mL)로 세척하였다. 수성상을 동결건조시키고 DCM/MeOH=10/1(15 mL) 중에서 마쇄하였다. 그런 다음, 혼합물을 여과하고, 여액을 진공 하에 농축시켜 2-(1-시클로프로필-1H-피라졸-4-일)-1,4-옥사제판(90 mg, 0.434 mmol, 94.67% 수율)을 황색 오일로서 수득하고, 이를 LCMS [M+H]+ = 208.1; 순도 = 64.6% (220 nm)로 확인하였다. 유지 시간 = 0.627분. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 7.41 (d, J = 5.0 Hz, 2H), 4.57 (dd, J = 3.1, 9.4 Hz, 1H), 4.03 (td, J = 5.5, 12.5 Hz, 1H), 3.83 (ddd, J = 4.9, 8.0, 12.6 Hz, 1H), 3.55 (tt, J = 3.8, 7.3 Hz, 1H), 3.28 (dd, J = 3.2, 13.8 Hz, 1H), 3.14 (td, J = 5.5, 13.5 Hz, 1H), 3.00 - 2.88 (m, 2H), 2.04 - 1.85 (m, 2H), 1.19 - 1.07 (m, 2H), 1.05 - 0.92 (m, 2H).
단계 5: DMSO(1 mL) 중 2-(1-시클로프로필-1H-피라졸-4-일)-1,4-옥사제판(1.00 당량, 14 mg, 0.0652 mmol) 및 DIEA(3.00 당량, 0.032 mL, 0.196 mmol)의 용액에 2-클로로-4-(2,4-디플루오로페닐)-6,7-디메틸프테리딘(1.00 당량, 20 mg, 0.0652 mmol)을 25℃에서 첨가하였다. 그런 다음, 반응 혼합물을 100℃에서 1시간 동안 교반하였다. LCMS는 목적하는 생성물의 94%를 나타냈다(94%, Rt: 0.946분; [M+H]+ = 220 nm에서 478.3). 반응물을 물(10 mL)로 희석한 다음, 에틸 아세테이트(15 mL × 3)로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 Na2SO4로 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 분취-TLC(SiO2, PE/EtOAc =1/1, Rf=0.4)로 정제하여 2-(1-시클로프로필-1H-피라졸-4-일)-4-(4-(2,4-디플루오로페닐)-6,7-디메틸프테리딘-2-일)-1,4-옥사제판(12 mg, 0.0258 mmol, 39.50% 수율)을 황색 고형분으로서 수득하였다, LCMS (5-95AB/1.5분). [M+H]+ = 478.3; 순도 = 100% (220 nm). 유지 시간 = 0.939분. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ ppm 0.90 - 0.97 (m, 2 H) 1.03 (br s, 2 H) 1.21 (br d, J=5.63 Hz, 3 H) 2.29 (s, 3 H) 2.57 (s, 3 H) 2.74 (dd, J=13.13, 10.76 Hz, 1 H) 3.03 (br t, J=11.88 Hz, 1 H) 3.65 - 3.80 (m, 2 H) 4.53 (br d, J=10.51 Hz, 1 H) 4.67 - 4.84 (m, 2 H) 7.27 - 7.37 (m, 1 H) 7.44 - 7.55 (m, 2 H) 7.58 (d, J=2.63 Hz, 1 H) 7.65 - 7.74 (m, 1 H) 7.84 (s, 1 H). 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6, 80 ℃) δ ppm 7.83 - 7.71 (m, 2H), 7.45 - 7.32 (m, 2H), 7.26 (dt, J = 2.5, 8.4 Hz, 1H), 4.82 - 4.65 (m, 2H), 4.51 (td, J = 5.5, 13.8 Hz, 1H), 4.02 (td, J = 4.8, 12.8 Hz, 1H), 3.73 - 3.57 (m, 3H), 3.53 (ddd, J = 3.8, 8.9, 12.8 Hz, 1H), 2.66 (s, 3H), 2.53 (s, 3H), 2.16 - 1.92 (m, 2H), 1.04 (br s, 2H), 1.00 - 0.92 (m, 2H). 19F NMR (376 MHz, DMSO-d 6) δ = -107.22 - -107.44 (m, 1F), -107.71 (br dd, J = 9.9, 24.0 Hz, 1F).
화합물 I-1147의 합성
단계 1: DCM(10 mL) 중 [(2R)-모르폴린-2-일]메탄올 히드로클로라이드(1.00 당량, 500 mg, 3.25 mmol)의 용액에 TsCl(1.20 당량, 745 mg, 3.91 mmol)을 0℃에서 적가하였다, 이어서 반응 혼합물을 25℃에서 2시간 동안 교반하였다. LCMS (5-95AB/1.5분): RT = 0.789분, 272.2 = [M+H]+, ESI+는 목적하는 생성물의 93.6%를 나타냈다. 반응물을 물(50 mL)로 희석한 다음, DCM(50 mL * 3)으로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 염수로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고 감압 하에 농축시켜 [(2R)-4-(p-톨일설포닐)모르폴린-2-일]메탄올(720 mg, 2.50 mmol, 76.88% 수율)을 무색 오일로서 수득하였다. LCMS: Rt: 0.468분; [M+H]+ = 272.0; 220 nm에서 94.3% 순도.
단계 2: DCM(60 mL) 중 [(2R)-4-(p-톨일설포닐)모르폴린-2-일]메탄올(1.00 당량, 4.00 g, 14.7 mmol)의 용액에 데스-마틴 페리오디난(1.20 당량, 7503 mg, 17.7 mmol)을 0℃에서 첨가하였다. 그런 다음, 반응 용액을 25℃로 가온시키고 16시간 동안 교반하였다. LCMS (5-95AB/1.5분): RT = 0.446분, 270.0 = [M+H]+, ESI+는 목적하는 생성물의 61%를 나타냈다. 반응 혼합물을 포화 티오황산나트륨 용액(80 mL)으로 급냉시키고, 중탄산나트륨 포화 용액으로 pH를 7-8로 조정하였다. 반응 혼합물을 에틸 아세테이트(80 mL * 3)로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 염수(80 mL)로 세척하고, 무수 황산 나트륨으로 건조시키고 진공에서 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 PE/EtOAc (2:1)(TLC, PE: EtOAc= 0:1, Rf = 0.55)로 용리하는 실리카 겔 상의 플래쉬 크로마토그래피로 정제하여 (2R)-4-(p-톨일설포닐)모르폴린-2-카르브알데히드(3.10 g, 11.5 mmol, 78.08% 수율)를 백색 결정으로서 수득하고, 이는 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 2.42 (s, 3 H) 3.18 - 3.31 (m, 1 H) 3.37 - 3.54 (m, 3 H) 3.66 (ddd, J=11.88, 9.07, 2.94 Hz, 1 H) 3.81 - 3.89 (m, 1 H) 4.22 (dd, J=8.57, 3.31 Hz, 1 H) 7.48 (br d, J=8.25 Hz, 2 H) 7.58 - 7.66 (m, 2 H) 9.52 (s, 1 H)였다.
단계 3: 메탄올(60 mL) 중 1-디아조-1-디메톡시포스포릴-프로판-2-온(1.30 당량, 2689 mg, 14.0 mmol)의 용액에 K2CO3(2.00 당량, 2976 mg, 21.5 mmol)을 첨가하였다. 그런 다음, 1-디아조-1-디메톡시포스포릴-프로판-2-온(1.30 당량, 2689 mg, 14.0 mmol)을 메탄올(60 mL)에 용해시키고, N2 분위기 하에 25℃에서 적가하였다. 반응 혼합물을 25℃에서 12시간 동안 교반하였다. LCMS (5-95AB/1.5분): RT = 0.568분, 266.0 = [M+H]+, ESI+는 목적하는 생성물의 83%를 나타냈다. 반응 혼합물을 셀라이트 패드를 통해 여과하였다. 필터 케이크를 MeOH(100 mL)로 세척하였다. 여액을 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 물(80 mL)로 희석한 다음, 에틸 아세테이트(100 mL * 3)로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 염수로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 PE/EtOAc (2:1)(TLC, PE: EtOAc = 0:1, Rf = 0.70)로 용리하는 실리카 겔 상의 플래쉬 크로마토그래피로 정제하여 (2S)-2-에티닐-4-(p-톨일설포닐)모르폴린(2.50 g, 8.38 mmol, 77.79% 수율)을 백색 고형분으로서 수득하였다. LCMS: Rt: 0.570분; [M+H]+ = 266.0; 220 nm에서 88.9% 순도.
단계 4: MeCN(20 mL) 중 시클로프로판아민(1.20 당량, 0.32 mL, 4.52 mmol)의 교반 용액에 디에틸아민(6.00 당량, 2.4 mL, 22.6 mmol) 및 2-아지도-1,3-디메틸-4,5-디히드로이미다졸-1-륨;헥사플루오로포스페이트(1.00 당량, 1075 mg, 3.77 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 N2 분위기 하 30℃에서 1시간 동안 교반하였다. 그런 다음, (2S)-2-에티닐-4-(p-톨일설포닐)모르폴린(1.00 당량, 1000 mg, 3.77 mmol), 구리(II) 설페이트 펜타히드레이트(0.200 당량, 188 mg, 0.754 mmol) 및 (+)-나트륨 L-아스코르베이트(0.500 당량, 373 mg, 1.88 mmol) 수용액을 첨가하였다. 반응 혼합물을 70℃에서 15시간 동안 교반하였다. LCMS (5-95AB/1.5분): RT = 0.851분, 349.1 = [M+H]+, ESI+는 목적하는 생성물의 93.3%를 나타냈다. 반응 혼합물을 필터를 통해 여과하였다. 필터 케이크를 MeCN(80 mL)으로 세척하였다. 여액을 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 물(80 mL)로 희석한 다음, 에틸 아세테이트(100 mL * 3)로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 염수로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 PE/EtOAc (1:1)(TLC, PE: EtOAc = 0:1, Rf = 0.35)로 용리하는 실리카 겔 상의 플래쉬 크로마토그래피로 정제하여 (2R)-2-(1-시클로프로필트리아졸-4-일)-4-(p-톨일설포닐)모르폴린(1.17 g, 3.36 mmol, 89.10% 수율)을 연황색 고형분으로서 수득하였고, 이는 LCMS (5-95AB/1.5분): RT = 0.858분, 349.1 = [M+H]+, ESI+는 목적하는 생성물의 99.1%를 나타냈다. LCMS: Rt: 0.858분; [M+H]+ = 349.1; 220 nm에서 99.1% 순도.
단계 5: 메탄올(50 mL) 중 (2R)-2-(1-시클로프로필트리아졸-4-일)-4-(p-톨일설포닐)모르폴린(1.00 당량, 500 mg, 1.44 mmol)의 혼합물에 Mg(12.0 당량, 413 mg, 17.2 mmol)(분말) 및 Mg(12.0 당량, 413 mg, 17.2 mmol)(칩)를 25℃에서 첨가하고, 반응 혼합물을 N2 분위기 하 80℃에서 12시간 동안 교반하였다. LCMS (5-95CD/1.5분): RT = 0.234분, 195.1 = [M+H]+, ESI+는 목적하는 생성물의 50.8%를 나타냈고, RT = 0.870분, 349.1 = [M+H]+, ESI+는 출발 물질의 47.7%를 나타냈다. 그런 다음, Mg(12.0 당량, 413 mg, 17.2 mmol)(분말) 및 Mg(12.0 당량, 413 mg, 17.2 mmol)(칩)를 첨가하고, 혼합물을 80℃에서 12시간 동안 교반하였다. LCMS (5-95CD/1.5분): RT = 0.292분, 195.1 = [M+H]+, ESI+는 목적하는 생성물의 74.3%를 나타냈고, RT = 0.885분, 349.1 = [M+H]+, ESI+는 출발 물질의 20.8%를 나타냈다. 반응 혼합물을 셀라이트 패드를 통해 여과하였다. 필터 케이크를 MeOH(100 mL)로 세척하였다. 여액을 감압 하에 농축시켜 미정제 생성물 (2R)-2-(1-시클로프로필트리아졸-4-일)모르폴린;4-메틸벤젠설폰산(770 mg, 1.03 mmol, 71.75% 수율)을 백색 고형분으로서 수득하였다. 미정제 생성물을 추가 정제 없이 다음 단계에서 사용하였다.
단계 6: DMSO(2 mL) 중 2-클로로-4-(2,4-디플루오로페닐)-6,7-디메틸-프테리딘(1.00 당량, 50 mg, 0.137 mmol) 및 DIEA(4.00 당량, 0.091 mL, 0.548 mmol)의 용액에 2-(1-시클로프로필트리아졸-4-일)모르폴린;4-메틸벤젠설폰산(1.20 당량, 60 mg, 0.164 mmol)을 25℃에서 첨가하였다. 그런 다음, 반응 혼합물을 100℃에서 20분 동안 교반하였다. LCMS (5-95AB/1.5분): RT = 0.933분, 465.2 = [M+H]+, ESI+는 목적하는 생성물의 48.8%를 나타냈다. 반응물을 물(10 mL)로 희석한 다음, 에틸 아세테이트(15 mL * 3)로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 Na2SO4로 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 분취-HPLC(컬럼, [Unisil 3-100 C18 Ultra 150 * 50 mm * 3 um]; 이동상: [ACN] 및 [H2O] (조건: [물(0.225% FA)-ACN], B%: 39%-69%; 검출기, UV 254 nm. RT: [7분])을로 정제하여 2-(1-시클로프로필트리아졸-4-일)-4-[4-(2,4-디플루오로페닐)-6,7-디메틸-프테리딘-2-일]모르폴린(32 mg, 0.0680 mmol, 49.68% 수율)을 연황색 고형분으로서 수득하였다. SFC(컬럼: Chiralpak IG-3 50×4.6mm I.D., 3 um 이동상: CO2의 경우 상 A, 및 MeOH + CAN의 경우 상 B(0.05% DEA); 구배 용리: 40% MeOH + CO2 중의 ACN (0.05% DEA) 유속: 3mL/분; 검출기: PDA; 컬럼 온도: 35 ℃; 배압: 100 Bar)는 2개의 피크를 나타냈고 비율은 25.9: 74.1이었다. 2.2 mg 생성물을 전달하고 29.4 mg을 가지고 있었다. I-1147, LCMS: Rt: 0.920분; [M+H]+ = 465.2; 220 nm에서 100% 순도. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 1.14 - 1.22 (m, 2 H) 1.23 - 1.28 (m, 2 H) 2.60 (s, 3 H) 2.72 (s, 3 H) 3.33 - 3.43 (m, 2 H) 3.78 (tt, J=7.37, 3.82 Hz, 1 H) 3.86 (td, J=11.58, 2.75 Hz, 1 H) 4.13 (dd, J=11.55, 1.90 Hz, 1 H) 4.82 (dd, J=10.45, 2.75 Hz, 1 H) 4.91 (br d, J=13.20 Hz, 1 H) 5.21 (br d, J=12.84 Hz, 1 H) 6.97 (td, J=9.48, 2.32 Hz, 1 H) 7.04 (td, J=8.25, 1.83 Hz, 1 H) 7.63 (s, 1 H) 7.67 - 7.77 (m, 1 H).
화합물 I-1155, I-1249 및 I-1244의 합성
단계 1: 메탄올(10 mL) 중 벤질 3-아세틸아제티딘-1-카르복실레이트 (1.00 당량, 1000 mg, 4.29 mmol), HBr (0.100 당량, 86 mg, 0.429 mmol)의 혼합물에 브롬(1.00 당량, 0.22 mL, 4.29 mmol)을 0℃에서 첨가한 다음, 혼합물을 35℃에서 12시간 동안 교반하였다. LCMS는 14%의 출발 물질이 남아 있고 33%의 목적하는 MS(311.7 [M+1]+, ESI pos)가 발견되었음을 나타냈다. NaHCO3으로 pH를 7로 조정하고, 혼합물을 에틸 아세테이트(50 mL x 3)로 추출하고 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 용액을 실리카 상의 컬럼(PE:EA=2:1)으로 정제하고 감압 하에 농축시켜 황색 오일을 수득하였다. 벤질 3-(2-브로모아세틸)아제티딘-1-카르복실레이트(327 mg, 1.05 mmol, 24.43% 수율)를 황색 오일로서 수득하고 다음 단계에 사용하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 7.40 - 7.30 (m, 5H), 5.11 (s, 2H), 4.19 (d, J= 7.5 Hz, 4H), 3.94 - 3.82 (m, 3H).
단계 2: 아세톤(8 mL) 중 벤질 3-(2-브로모아세틸)아제티딘-1-카르복실레이트(1.00 당량, 300 mg, 0.961 mmol), N-[(2R)-2-히드록시프로필]-4-니트로-벤젠설폰아미드(1.50 당량, 375 mg, 1.44 mmol), K2CO3(3.00 당량, 398 mg, 2.88 mmol) 및 KI(1.00 당량, 160 mg, 0.961 mmol)의 혼합물을 20℃에서 12시간 동안 교반하였다. LCMS는 출발 물질이 완전히 소모되었음을 나타냈고, 71%의 목적하는 MS(492.1.0 [M+1]+, ESI pos)가 발견되었다. 혼합물을 물(50 mL)에 붓고 에틸 아세테이트(3 * 50 mL)로 추출하고, 유기상을 Na2SO4로 건조시키고, 여과하고 진공에서 농축시켰다. 용액을 실리카 상의 컬럼(PE:EA=1:1)으로 정제하고 감압 하에 농축시켜 황색 오일을 수득하였다. 벤질 3-[2-[(4-니트로페닐)설포닐-[rac-(2R)-2-히드록시프로필]아미노]아세틸]아제티딘-1-카르복실레이트(270 mg,0.522 mmol, 54.30% 수율)를 황색 오일로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 8.41 (d, J= 8.8 Hz, 2H), 7.96 (d, J= 8.8 Hz, 2H), 7.44 - 7.27 (m, 5H), 5.09 (s, 2H), 4.21 - 4.15 (m, 1H), 4.06 - 3.92 (m, 4H), 3.71 (br d, J= 11.4 Hz, 1H), 3.57 (br d, J= 10.6 Hz, 1H), 3.45 (br s, 1H), 2.75 - 2.63 (m, 1H), 2.32 - 2.23 (m, 1H), 2.12 (br t, J= 11.2 Hz, 1H), 1.13 (d, J= 6.2 Hz, 3H).
단계 3: DCM(10 mL) 중 벤질 3-[2-[[(2R)-2-히드록시프로필]-(4-니트로페닐)설포닐-아미노]아세틸]아제티딘-1-카르복실레이트 (1.00 당량, 270 mg, 0.549 mmol)의 혼합물에 0℃에서 TES(5.00 당량, 630 mg, 2.75 mmol)를 첨가하고, TMSOTf(5.00 당량, 610 mg, 2.75 mmol)를 0℃에서 첨가한 다음, 혼합물을 0℃에서 2시간 동안 교반하였다. LCMS는 출발 물질이 완전히 소모되었음을 나타냈고, 88%의 목적하는 MS(476.0 [M+1]+, ESI pos)가 발견되었다. 합쳐진 혼합물을 포화 수성 NaHCO3(20 mL)에 붓고 에틸 아세테이트(3 * 20 mL)로 추출하고, 유기상을 Na2SO4로 건조시키고, 여과하고 진공 중에서 농축시켰다. 용액을 플래쉬 크로마토그래피(0.7 g SiO2 카트리지, PE:EA=1:1, 254 nm에서의 검출)로 정제하고 감압 하에 농축시켜 황색 오일을 수득하였다. 벤질 3-[(2S,6R)-6-메틸-4-(4-니트로페닐)설포닐-모르폴린-2-일]아제티딘-1-카르복실레이트(260 mg, 0.492 mmol, 89.58% 수율)를 황색 오일로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 8.46 - 8.38 (m, 2H), 7.97 - 7.90 (m, 2H), 7.40 - 7.29 (m, 5H), 5.09 (s, 2H), 4.08 - 4.02 (m, 1H), 4.02 - 3.96 (m, 1H), 3.91 (dd, J= 5.6, 8.7 Hz, 1H), 3.86 (dd, J= 5.7, 8.7 Hz, 1H), 3.78 - 3.70 (m, 2H), 3.65 (td, J= 1.9, 11.3 Hz, 1H), 3.58 (br d, J= 11.0 Hz, 1H), 2.60 - 2.49 (m, 1H), 2.05 - 1.91 (m, 2H), 1.16 (d, J= 6.3 Hz, 3H).
단계 4: MeCN(5 mL) 중 벤질 3-[(2S,6R)-6-메틸-4-(4-니트로페닐)설포닐-모르폴린-2-일]아제티딘-1-카르복실레이트(1.00 당량, 260 mg, 0.547 mmol) 및 K2CO3 (5.00 당량, 378 mg, 2.73 mmol)의 혼합물에 티오페놀(5.00 당량, 301 mg, 2.73 mmol)을 첨가한 다음, 혼합물을 15℃에서 12시간 동안 교반하였다. LCMS는 출발 물질이 완전히 소모되었음을 나타냈고, 50%의 목적하는 MS(290.9 [M+1]+, ESI pos)가 발견되었다. 혼합물을 포화 수성 NaHCO3(30 mL)으로 급냉시키고 EtOAc(3 * 50 mL)로 추출하고, 유기상을 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 합쳐진 수성상을 수성 NaCl(50 mL)에 붓고 밤새 방치하고 재활용 버킷에 부었다. 용액을 분취-HPLC(NH4HCO3, 컬럼 Waters Xbridge 150 * 25mm * 5um; 이동상: [물 (NH4HCO3)-ACN]; B%: 18%-48%, 10분)로 정제하고, 정제된 용액을 동결건조시켜 갈색 오일을 수득하였다. 벤질 3-[(2S,6R)-6-메틸모르폴린-2-일]아제티딘-1-카르복실레이트(74 mg, 0.255 mmol, 46.61% 수율)를 갈색 오일로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 7.40 - 7.27 (m, 5H), 5.10 (s, 2H), 4.10 - 3.96 (m, 3H), 3.81 (dd, J = 5.8, 8.4 Hz, 1H), 3.64 - 3.52 (m, 2H), 2.90 - 2.75 (m, 2H), 2.63 - 2.49 (m, 1H), 2.47 - 2.30 (m, 2H), 1.12 (d, J = 6.3 Hz, 3H).
단계 5: DMSO(1 mL) 중 벤질 3-[(2S,6R)-6-메틸모르폴린-2-일]아제티딘-1-카르복실레이트 (1.00 당량, 10 mg, 0.0344 mmol)의 혼합물에 2-클로로-4-(2,4-디플루오로페닐)-6,7-디메틸-프테리딘(1.00 당량, 11 mg, 0.0344 mmol) 및 DIPEA(3.00 당량, 0.018 mL, 0.103 mmol)를 첨가한 다음, 혼합물을 100℃에서 1시간 동안 교반하였다. LCMS는 출발 물질이 완전히 소모되었고 51%의 목적하는 MS(561.2 [M+1]+, ESI pos)가 발견되었음을 나타냈다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시켰다. 혼합물을 분취-HPLC(FA, 컬럼: Phenomenex luna C18 150 * 25mm * 10um; 이동상: [물 (FA)-ACN]; B%: 65%-85%, 10분)로 정제하고, 정제된 용액을 동결건조시켜 황색 고형분을 수득하였다. I-1155(3.4 mg, 0.00598 mmol, 17.36% 수율)를 황색 고형분으로서 수득하였다. LCMS Rt: 1.047분, m/z: 561.3 [M+H]+. 214 nm에서 97.441% 순도. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 7.76 - 7.66 (m, 1H), 7.43 - 7.27 (m, 5H), 7.09 - 7.01 (m, 1H), 6.98 (dt, J = 2.3, 9.4 Hz, 1H), 5.11 (s, 2H), 4.91 (br d, J = 7.0 Hz, 1H), 4.84 (br d, J = 12.9 Hz, 1H), 4.15 - 4.06 (m, 3H), 4.02 - 3.90 (m, 1H), 3.76 - 3.64 (m, 2H), 2.78 - 2.65 (m, 6H), 2.59 (s, 3H), 1.28 (d, J = 6.1 Hz, 3H). HPLC: Rt: 2.683분, 214 nm에서 99.297% 순도. 키랄 순도: Rt: 1.988분, 100.00%
단계 6: 에탄올(0.5000 mL) 및 물(0.5000 mL) 중 1-[3-[(2S,6R)-4-[4-(2,4-디플루오로페닐)-6,7-디메틸-프테리딘-2-일]-6-메틸-모르폴린-2-일]아제티딘-1-일]-2,2,2-트리플루오로-에타논(1.00 당량, 10 mg, 0.0191 mmol)의 혼합물에 K2CO3(3.00 당량, 7.9 mg, 0.0574 mmol)을 첨가한 다음, 혼합물을 40℃에서 1시간 동안 교반하여 황색 용액을 수득하였다. LCMS는 출발 물질이 완전히 소모되었고 59%의 목적하는 MS(427.1 [M+1]+, ESI pos)가 발견되었음을 나타냈다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시켰다. 용액을 분취-HPLC(컬럼: Shim-pack C18 150 * 25*10um; 이동상: [물 (FA)-ACN]; B%: 20%-50%, 10분)로 정제하고, 정제된 용액을 동결건조시켜 황색 고형분을 수득하였다. I-1249(3.1 mg,0.00594 mmol, 31.05% 수율)를 황색 고형분으로서 수득하였다(90% 순도, 불순물 및 ACN과 혼합됨). I-1249: LC-MS: Rt: 0.652분, m/z: 427.0 [M+H]+. 214 nm에서 96.118% 순도. 1H NMR (400 MHz, DMSO+D2O) δ = 8.62 (s, 1H), 7.76 - 7.67 (m, 1H), 7.06 (dt, J = 2.1, 8.2 Hz, 1H), 6.98 (dt, J = 2.3, 9.5 Hz, 1H), 5.02 - 4.72 (m, 2H), 4.21 - 3.93 (m, 4H), 3.84 - 3.66 (m, 2H), 3.13 - 2.95 (m, 2H), 2.74 (br d, J = 2.6 Hz, 1H), 2.72 (s, 3H), 2.60 (s, 3H), 1.35 - 1.27 (m, 3H). HPLC: Rt: 1.647분, 214 nm에서 89.991% 순도
단계 7: 무수 아세트산(348 당량, 1.0 mL, 10.6 mmol) 중 (2S,6R)-2-(아제티딘-3-일)-4-[4-(2,4-디플루오로페닐)-6,7-디메틸-프테리딘-2-일]-6-메틸-모르폴린(1.00 당량, 13 mg, 0.0305 mmol)의 혼합물에 80℃에서 0.5시간 동안 교반하여 적색 용액을 수득하였다. LCMS는 출발 물질이 완전히 소모되었음을 나타냈고, 56.6%의 목적하는 MS(469.1 [M+1]+, ESI pos)가 발견되었다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시켰다. 용액을 분취-HPLC(FA, 컬럼: Phenomenex luna C18 150 * 25mm * 10um; 이동상: [물 (FA)-ACN]; B%: 43%-73%, 2분)로 정제하고, 정제된 용액을 동결건조시켜 갈색 오일을 수득하였다. LCMS는 67.4%의 목적하는 MS(469.0 [M+1]+, ESI pos)가 발견되었음을 나타냈다. 용액을 분취-TLC(DCM:MeOH=30:1, Rf=0.3)로 재정제하고, 정제된 용액을 농축시켜 황색 오일을 수득하였다. 정제된 용액을 동결건조시켜 황색 고형분을 수득하였다. I-1244(2.7 mg,0.00526 mmol, 17.27% 수율)를 황색 고형분으로서 수득하였다(90% 순도, 불순물 및 ACN과 혼합됨). I-1244: LC-MS: Rt: 0.768분, m/z: 469.0 [M+H]+. 214 nm에서 95.999% 순도. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 7.75 - 7.66 (m, 1H), 7.08 - 7.02 (m, 1H), 6.97 (dt, J = 2.3, 9.5 Hz, 1H), 4.99 - 4.79 (m, 2H), 4.09 (br s, 4H), 3.76 - 3.64 (m, 2H), 2.78 - 2.65 (m, 5H), 2.59 (s, 3H), 1.87 (s, 3H), 1.28 (d, J = 6.3 Hz, 6H). HPLC: Rt: 2.136분, 214 nm에서 94.721% 순도.
화합물 I-1160의 합성
단계 1: THF(15 mL) 중 4-요오도-2-메톡시-피리딘(1.00 당량, 1000 mg, 4.25 mmol)의 용액에 -78℃에서 이소프로필마그네슘 클로라이드 리튬 클로라이드 착물(1.20 당량, 3.9 mL, 5.11 mmol)을 첨가하고 30분 동안 교반한 다음, 2-클로로-N-메톡시-N-메틸아세타미드(1.10 당량, 644 mg, 4.68 mmol)를 혼합물에 첨가하고 0℃에서 1시간 동안 교반하였다. LCMS는 원료가 완전히 소모되었고 목적하는 MS(185.7 [M+H]+; ESI+)를 갖는 주요 피크가 검출되었음을 나타냈다. 반응물을 NH4Cl(수성 20 mL)로 급냉시킨 다음, EtOAc(20 mL * 2)로 추출하고, 유기물을 10 mL 포화 염수 용액으로 세척하였다. 그런 다음, 유기물을 분리하고, 농축 건조 전에 건조시켰다(Na2SO4). 그런 다음, 미정제물을 실리카 겔 컬럼(PE/EA = 1/1, Rf = 0.6)으로 정제하여 2-클로로-1-(2-메톡시-3,4-디히드로피리딘-4-일)에타논(460 mg, 2.45 mmol, 57.62% 수율)을 연황색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 8.38 - 8.33 (m, 1H), 7.32 - 7.29 (m, 1H), 7.20 - 7.16 (m, 1H), 4.67 - 4.64 (m, 2H), 4.02 - 3.98 (m, 3H).
단계 2: 아세톤(20 mL) 중 N-[(2R)-2-히드록시프로필]-4-메틸-벤젠설폰아미드(1.50 당량, 4077 mg, 17.8 mmol) 및 2-클로로-1-(2-메톡시-4-피리딜)에타논(1.00 당량, 2200 mg, 11.9 mmol)의 용액에 K2CO3(3.00 당량, 4914 mg, 35.6 mmol) 및 KI(1.00 당량, 1968 mg, 11.9 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 25℃에서 2시간 동안 교반하였다. LCMS는 원료가 소모되었음을 나타냈고, 주요 피크는 목적하는 MS를 나타냈다(378.8[M+H]+,ESI+; LC-RT: 0.911분). 반응물을 물(30 mL)에 붓고, EtOAc(20 mL * 3)로 추출하고, 유기물을 20 mL 포화 염수 용액으로 세척하였다. 그런 다음, 유기물을 분리하고, 농축 건조 전에 건조시켰다(Na2SO4). 그런 다음, 미정제물을 실리카 겔 컬럼(PE/EA = 3/1, Rf = 0.5)으로 정제하여 N-[(2R)-2-히드록시프로필]-N-[2-(2-메톡시-4-피리딜)-2-옥소-에틸]-4-메틸-벤젠설폰아미드(1300 mg, 3.44 mmol, 28.98% 수율)를 연황색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 8.16 (d, J = 5.4 Hz, 1H), 7.63 - 7.57 (m, 2H), 7.35 - 7.31 (m, 2H), 7.08 - 7.04 (m, 1H), 6.95 - 6.91 (m, 1H), 4.42 - 4.34 (m, 1H), 4.01 - 3.96 (m, 2H), 3.95 - 3.92 (m, 3H), 3.76 - 3.65 (m, 3H), 2.45 - 2.43 (m, 3H), 1.25 - 1.22 (m, 3H).
단계 3:DCM(100 mL) 중 N-[(2R)-2-히드록시프로필]-N-[2-(2-메톡시-4-피리딜)-2-옥소-에틸]-4-메틸-벤젠설폰아미드(1.00 당량, 1400 mg, 3.70 mmol)의 용액에 트리에틸실란(5.00 당량, 2146 mg, 18.5 mmol) 및 트리메틸실릴 트리플루오로메탄설포네이트(5.00 당량, 3.3 mL, 18.5 mmol)를 0℃에서 첨가하고 혼합물을 25℃에서 12시간 동안 교반하였다. LCMS는 원료가 완전히 소모되었음을 나타냈고 주요 피크는 목적하는 MS(360.8 [M+H]+; ESI+, LC-RT = 0.940분)를 나타냈다. 반응물을 물(100 mL)로 세척한 다음, 농축 건조 전에 유기물을 분리하고 건조시키고(Na2SO4), (2R)-6-(2-메톡시-4-피리딜)-2-메틸-4-(p-톨일설포닐)-2,3-디히드로-1,4-옥사진(1250 mg, 3.47mmol, 93.75% 수율)을 연황색 오일로서 수득하였다.
단계 4: 메탄올(10 mL) 중 (2R)-6-(2-메톡시-4-피리딜)-2-메틸-4-(p-톨일설포닐)-2,3-디히드로-1,4-옥사진(1.00 당량, 300 mg, 0.832 mmol)의 용액에 Pd/C(3.40 당량, 300 mg, 2.83 mmol)를 N2 분위기 하에 첨가하였다. 혼합물을 H2로 3회 퍼징한 다음, 혼합물을 H2(15 psi) 하에 30℃에서 12시간 동안 교반하였다. LCMS는 원료가 완전히 소모되었음을 나타냈고, 주요 피크는 목적하는 MS를 나타냈다(362.8 [M+H]+; ESI+, LC-RT = 0.970분). 반응물을 여과하고, 여액을 진공에서 농축시켜 잔류물을 수득한 다음, 실리카 겔 컬럼(PE/EA = 1/3, Rf = 0.6)으로 정제하여 (2S,6R)-2-(2-메톡시-4-피리딜)-6-메틸-4-(p-톨일설포닐)모르폴린(200 mg, 0.552 mmol, 66.30% 수율)을 백색 고형분으로서 수득하였다.
단계 5: 메탄올(10 mL) 중 (2S,6R)-2-(2-메톡시-4-피리딜)-6-메틸-4-(p-톨일설포닐)모르폴린(1.00 당량, 150 mg, 0.414 mmol)의 용액에 Mg(분말, 10.6 당량, 105 mg, 4.38 mmol) 및 Mg(칩, 10.6 당량, 105 mg, 4.38 mmol)를 25℃에서 첨가한 다음, 혼합물을 N2 하에 80℃에서 12시간 동안 교반하였다. 백색 현탁액이 형성되었다. LCMS는 원료가 소모되었음을 나타냈고, 목적하는 MS를 갖는 주요 피크를 나타냈다(208.8 [M+H]+; ESI+, LC-RT: 0.251분). 반응물에 MeOH(20 mL)를 첨가하고 여과하고, 필터 케이크를 MeOH(20 mL * 2)로 세척하였다. 여액을 진공 하에 농축시켜 미정제 (2S,6R)-2-(2-메톡시-4-피리딜)-6-메틸-모르폴린(130 mg, 0.624mmol, 150.83% 수율)을 백색 고형분으로서 수득하였다.
단계 6: DMSO(3 mL) 중 (2S,6R)-2-(2-메톡시-4-피리딜)-6-메틸-모르폴린(1.00 당량, 100 mg, 0.480 mmol), 2-클로로-4-(2,4-디플루오로페닐)-6,7-디메틸-피리도[2,3-d]피리미딘(1.00 당량, 171 mg, 0.480 mmol)의 용액에 DIEA(4.00 당량, 248 mg, 1.92 mmol)를 첨가한 다음, 혼합물을 100℃에서 20분 동안 교반하였다. LCMS는 원료가 소모되었음을 나타냈고, 주요 피크는 목적하는 MS를 나타냈다(478.2 [M+H]+; ESI+, LC-RT: 0.888분). 반응 혼합물을 물(15 mL)에 붓고, EtOAc(10 mL * 2)로 추출하고, 유기물을 5 mL 포화 염수 용액으로 세척하였다. 그런 다음, 유기물을 분리하고, 농축 건조 전에 건조시켰다(Na2SO4). 그런 다음, 미정제 혼합물을 분취-HPLC(Phenomenex Luna C18 150 * 25 mm * 10 um, 물(FA)-ACN)로 정제하여 (2S,6R)-4-[4-(2,4-디플루오로페닐)-6,7-디메틸-피리도[2,3-d]피리미딘-2-일]-2-(2-메톡시-4-피리딜)-6-메틸-모르폴린(4.9 mg, 0.0101 mmol, 2.11% 수율)을 황색 고형분으로서 수득하였고, 이는 H NMR이었다. LCMS: (M+H)+ = 478.2; 순도 = 98.55% (UV = 220 nm). 유지 시간 = 0.910분. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 8.18 - 8.14 (m, 1H), 7.60 - 7.50 (m, 2H), 7.14 - 6.97 (m, 3H), 6.91 - 6.86 (m, 1H), 5.20 - 4.96 (m, 2H), 4.63 (s, 1H), 3.98 - 3.93 (m, 3H), 3.90 - 3.81 (m, 1H), 2.94 - 2.75 (m, 2H), 2.72 - 2.65 (m, 3H), 2.38 - 2.31 (m, 3H), 1.39 - 1.34 (m, 3H).
I-1170의 합성
N2 하에 화염 건조된 마이크로파 바이알에 PEPPSI™-SIPr(0.05 당량, 4.3 mg, 0.006 mmol), 클로로(인단-5-일)아연(4.00 당량, 3.9 mL, 0.50 mmol)을 채운 다음, 혼합물을 0℃로 냉각시켰다. MeCN(0.42 mL)에 이어서 2-[(2R,4S)-2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)테트라히드로피란-4-일]-6,7-디메틸-4-메틸설파닐-프테리딘(1.00 당량, 50 mg, 0.13 mmol)을 첨가하고, 생성된 혼합물을 실온에서 12시간 동안 교반하였다. 혼합물을 셀라이트 패드를 통해 여과하고, DCM(2 x 10 mL)으로 세척하고, 감압 하에 농축시켰다. 미정제 물질을 헥산 중 50% 내지 100% EtOAc의 구배를 사용한 10 g Biotage 컬럼 상의 정상 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제한 다음, DCM 중 0 내지 20% MeOH로 세척하였다. 목적하는 분획을 감압 하에 증발시켜 목적하는 유사체를 부분 입체이성질체의 혼합물로서 수득하였다. 목적하는 시스 부분 입체이성질체를 수성 10 mM 중탄산암모늄(pH = 10.0) 및 ACN(65-85%)을 사용하는 분취-HPLC 정제(Gemini® 5 um NX-C18 110 Å, 100 x 30 mm)에 의해 단리하였다. 4-인단-5-일-6,7-디메틸-2-[(2R,4S)-2-(1-시클로프로필피라졸-4-일) 테트라히드로피란-4-일]프테리딘(22 mg, 0.05 mmol, 37 % 수율). ESI-MS (m/z+): 467.3 [M+H]+ . 1H NMR (CHCl3-d, 400 MHz): δH 8.16-8.20 (2H, m), 7.49 (2H, s), 7.39 (1H, d, J = 7.8 Hz), 4.54 (1H, dd, J =11.4, 2.1 Hz), 4.25 (1H, d, J = 11.5 Hz), 3.77-3.84 (1H, m), 3.50-3.56 (1H, m), 3.01 (4H, dt, J = 11.6, 7.4 Hz),2.79 (6H, dd, J = 20.2, 0.0 Hz), 2.43 (1H, d, J = 13.4 Hz), 2.10-2.26 (5H, m), 1.05-1.09 (2H, m), 0.93-0.98 (2H, m).
I-1182의 합성
테플론-코팅된 자기 교반 막대가 구비된 화염 건조 유리 바이알에 Ar(g) 하에 4-(4-클로로-2-플루오로-페닐)-2-[(2R,4S)-2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)테트라히드로피란-4-일]-6,7-디메틸-프테리딘(방법 37을 통해 제조)(1.00 당량, 25 mg, 0.052 mmol) 및 Pd(amphos)Cl2(0.25 당량, 9.2 mg, 0.013 mmol)을 채웠다. 탈기하고, 무수 THF(1.0 mL)를 첨가하고, 바이알을 밀봉하고 Ar(g) 하에 퍼징하였다. THF 중 브로모(시클로부틸)아연(1.5 당량, 0.21 mL, 0.078 mmol)의 0.37 M 용액을 첨가하고, 반응 혼합물을 50℃에서 6시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, EtOAc로 희석하고, 포화 NH4Cl(수성)로 급냉시켰다. 층을 분리하고, 유기층을 포화 NH4Cl(수성) 및 염수로 세척하였다. 유기층을 수집하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 증발 건조시켰다. 미정제 잔류 물질을 DCM 중 0% 내지 10% MeOH의 용리 구배를 사용하여 플래쉬 크로마토그래피(Teledyne RediSep GOLD 컬럼, 12 g SiO2)로 정제하여 22 mg의 미정제 생성물을 수득하였다. 이를 pH 3.8(50-70%)의 포름산암모늄 수용액 중 MeCN의 용리 구배를 사용하는 분취 HPLC(Gemini® 5 um NX-C18 110 Å, 100 x 30 mm 컬럼)로 추가로 정제하여 4-(4-시클로부틸-2-플루오로-페닐)-2-[(2R,4S)-2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)테트라히드로피란-4-일]-6,7-디메틸-프테리딘(3.5 mg, 0.007 mmol, 13% 수율)을 연황색 고형분으로서 수득하였다. ESI-MS (m/z+): 499.3 [M+1]+, LC-RT: 1.80분. 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz): δH 7.73 (1H, s), 7.65 (1H, t, J = 7.6 Hz), 7.39 (1H, s), 7.28 (1H, s), 7.26 (1H, d, J = 2.9 Hz), 4.51 (1H, d, J = 11.2 Hz), 4.10 (1H, dd, J = 11.3, 4.3 Hz), 3.63-3.74 (4H, m), 3.41-3.50 (1H, m), 2.77 (3H, s), 2.65 (3H, s), 2.28-2.37 (2H, m), 2.14-2.24 (2H, m), 1.87-2.04 (6H, m), 0.98-1.00 (2H, m), 0.89-0.94 (2H, m).
I-1187의 합성(I-1192 및 I-1197에 대한 동일한 일반 방법)
테플론-코팅된 자기 교반 막대가 구비된 화염 건조 유리 바이알에 Ar(g) 하에 4-(4-클로로-2-플루오로-페닐)-2-[(2R,4S)-2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)테트라히드로피란-4-일]-6,7-디메틸-프테리딘(방법 37을 통해 제조)(1.00 당량, 50 mg, 0.10 mmol) 및 PEPPSI-SIPr(0.25 당량, 18 mg, 0.026 mmol)을 채웠다. 탈기하고, 무수 THF(1.5 mL)를 첨가하고, 바이알을 밀봉하고 Ar(g) 하에 퍼징하였다. 반응 혼합물을 교반하면서 40℃로 가열하고, 브로모(시클로프로필)아연 2(THF 중 0.39 M)(3.0 당량, 0.80 mL, 0.31 mmol)를 1시간에 걸쳐 적가하였다. 반응 혼합물을 40℃에서 추가 1시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, EtOAc로 희석하고, 포화 NH4Cl(수성)로 급냉시켰다. 층을 분리하고, 유기층을 포화 NH4Cl(수성) 및 염수로 세척하였다. 유기층을 수집하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 증발 건조시켰다. 미정제 잔류 물질을 DCM 중 0% 내지 10% MeOH의 용리 구배를 사용하여 실리카 겔 플래쉬 크로마토그래피(Teledyne RediSep≡ 컬럼, 12 g SiO2)로 정제하여 44 mg의 미정제 생성물을 수득하였다. 이를 pH 3.8(40-60%)의 포름산암모늄 수용액 중 MeCN의 용리 구배를 사용하는 분취 HPLC(Gemini® 5 um NX-C18 110 Å, 100 x 30 mm 컬럼)로 추가로 정제하여 2-((2R,4S)-2-(1-시클로프로필-1H-피라졸-4-일)테트라히드로-2H-피란-4-일)-4-(4-시클로프로필-2-플루오로페닐)-6,7-디메틸프테리딘(27 mg, 0.056 mmol, 53% 수율)을 황색 고형분으로서 수득하였다. ESI-MS (m/z+): 485.2 [M+1]+, LC-RT : 1.64분. 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz): δH 7.73 (1H, s), 7.59 (1H, t, J = 7.7 Hz), 7.38 (1H, s), 7.13 (1H, dd, J = 8.0, 1.6 Hz), 7.10 (1H, dd, J = 11.6, 1.6 Hz), 4.51 (1H, d, J = 11.2 Hz), 4.10 (1H, dd, J = 11.3, 4.1 Hz), 3.61-3.72 (2H, m), 3.42-3.48 (1H, m), 2.77 (3H, s), 2.65 (3H, s), 2.30 (1H, d, J = 13.4 Hz), 2.03-2.08 (2H, m), 1.87-1.99 (2H, m), 1.05-1.11 (2H, m), 0.96-1.01 (2H, m), 0.87-0.94 (2H, m), 0.81-0.84 (2H, m).
I-1202의 합성
단계 1: THF(100 mL) 중 4-요오도-1-메틸-피라졸 (1.00 당량, 5000 mg, 24.0 mmol)의 용액에 이소프로필마그네슘 클로라이드 리튬 클로라이드 착물（THF 중 1.3 M 용액）(1.20 당량, 22 mL, 28.8 mmol)을 -78℃에서 첨가하고, 혼합물을 -78℃에서 0.5시간 동안 교반하였다. 그런 다음, 2-클로로-N-메톡시-N-메틸아세타미드(3.00 당량, 9920 mg, 72.1 mmol)를 -78℃에서 첨가하고, 혼합물을 0℃에서 1시간 동안 교반하였다. LCMS는 출발 물질이 소모되었고, 목적하는 생성물(20%, Rt: 0.541분; [M+H]+ = 220 nm에서 159.1)이 형성되었음을 나타냈다. 반응 혼합물을 포화 NH4Cl(200 mL)로 급냉시키고, EtOAc(100 mL 3회)로 추출하였다. 합쳐진 유기상을 염수(50 mL)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 플래쉬 컬럼(PE 내지 EtOAc 조건, 70% 내지 100%)으로 정제하고 농축시켜 2-클로로-1-(1-메틸피라졸-4-일)에타논(1.50 g, 9.46 mmol, 39.35% 수율)을 1H NMR인 황백색 고형분으로서 수득하였다. [M+H]+ = 159.1. 유지 시간 = 0.541분. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 7.99 (s, 1H), 7.96 (s, 1H), 4.40 (s, 2H), 3.96 (s, 3H).
단계 2: 아세톤(10 mL) 중 2-클로로-1-(1-메틸피라졸-4-일)에타논(1.00 당량, 500 mg, 3.15 mmol), N-(2-히드록시에틸)-4-메틸-벤젠설폰아미드(2.00 당량, 1357 mg, 6.31 mmol), KI(1.00 당량, 523 mg, 3.15 mmol) 및 K2CO3(3.00 당량, 1307 mg, 9.46 mmol)의 혼합물을 25℃에서 1시간 동안 교반하였다. LCMS는 출발 물질이 소모되었고, 목적하는 생성물(39%, Rt: 0.489분; [M+H]+ = 220 nm에서 338.0)이 형성되었음을 나타냈다. 반응 혼합물을 물(50 mL)에 붓고 EtOAc(30 mL 3회)로 추출하였다. 합쳐진 유기상을 염수(30 mL)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 플래쉬 컬럼(PE 내지 EtOAc 조건, 30% 내지 100%)으로 정제하고 농축시켜 N-(2-히드록시에틸)-4-메틸-N-[2-(1-메틸피라졸-4-일)-2-옥소-에틸]벤젠설폰아미드(510 mg, 1.51 mmol, 47.95% 수율)를 황백색 고형분으로서 수득하였다. [M+H]+ = 338.0. 유지 시간 = 0.489분. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 8.01 (s, 1H), 7.95 (s, 1H), 7.75 (d, J = 8.1 Hz, 2H), 7.33 (d, J = 8.3 Hz, 2H), 4.49 (s, 2H), 3.97 (s, 3H), 3.64 (br s, 2H), 3.37 (t, J = 4.8 Hz, 2H), 2.44 (s, 3H).
단계 3: TFA(95.0 당량, 15 mL, 196 mmol) 중 N-(2-히드록시에틸)-4-메틸-N-[2-(1-메틸피라졸-4-일)-2-옥소-에틸]벤젠설폰아미드 (1.00 당량, 696 mg, 2.06 mmol)의 용액에 0℃에서 트리에틸실란(15.2 당량, 5.0 mL, 31.3 mmol)을 서서히 첨가한 다음 80℃에서 2시간 동안 교반하였다. LCMS는 출발 물질이 소모되었고, 목적하는 생성물(99%, Rt: 0.549분; [M+H]+ = 220 nm에서 322.1)이 형성되었음을 나타냈다. 반응 혼합물을 포화 NaHCO3(100 mL)(pH >8로 조정됨)로 급냉시키고, EtOAc(50 mL 3회)로 추출하였다. 합쳐진 유기상을 염수(50 mL)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 플래쉬 컬럼(PE 내지 EtOAc 조건, 60% 내지 80%)으로 정제하고 농축시켜 2-(1-메틸피라졸-4-일)-4-(p-톨일설포닐)모르폴린(634 mg, 1.97 mmol, 95.63% 수율)을 연황색 오일로서 수득하였다. 1H NMR: [M+H]+ = 322.1. 유지 시간 = 0.549분. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 7.64 (d, J = 8.3 Hz, 2H), 7.41 (s, 1H), 7.36 (s, 1H), 7.34 (s, 1H), 7.33 (s, 1H), 4.61 (dd, J = 2.7, 9.8 Hz, 1H), 4.01 - 3.94 (m, 1H), 3.87 (s, 3H), 3.79 (dt, J = 2.7, 11.3 Hz, 1H), 3.67 (td, J = 2.1, 11.5 Hz, 1H), 3.53 (dd, J = 1.9, 11.4 Hz, 1H), 2.54 (dt, J = 3.3, 11.2 Hz, 1H), 2.45 (s, 3H), 2.40 (dd, J = 9.9, 11.4 Hz, 1H).
단계 4: 메탄올(70 mL) 중 2-(1-메틸피라졸-4-일)-4-(p-톨일설포닐)모르폴린(1.00 당량, 700 mg, 2.18 mmol)의 혼합물에 Mg(12.0 당량, 627 mg, 26.1 mmol)(분말로서) 및 Mg 12.0 당량, 627 mg, 26.1 mmol)(칩으로서)를 25℃에서 첨가하고, 반응 혼합물을 N2 분위기 하에서 80℃에서 12시간 동안 교반하였다. LCMS는 출발 물질이 소모되었고, 목적하는 생성물(87%, Rt: 0.428분; [M+H]+ = 220 nm에서 168.1)이 형성되었음을 나타냈다. 반응 혼합물을 여과하고, 여과물을 감압 하에 농축시켜 4-메틸벤젠설폰산; 2-(1-메틸피라졸-4-일)모르폴린(640 mg,1.89 mmol, 86.57% 수율)을 황색 고형분으로서 수득하였다. [M+H]+ = 168.1. 유지 시간 = 0.428분. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 7.59 (s, 1H), 7.44 - 7.35 (m, 1H), 7.33 (s, 1H), 7.12 (br d, J = 3.1 Hz, 1H), 4.30 (dd, J = 2.4, 10.1 Hz, 1H), 3.78 (s, 3H), 3.75 (br d, J = 11.4 Hz, 1H), 3.57 - 3.48 (m, 1H), 3.17 (d, J = 5.3 Hz, 4H), 2.86 (td, J = 2.6, 12.3 Hz, 1H), 2.71 - 2.66 (m, 2H), 2.64 - 2.54 (m, 2H).
단계 5: 4-[4-(4-클로로-2-플루오로-페닐)-6,7-디메틸-프테리딘-2-일]-2-(1-메틸피라졸-4-일)모르폴린. DMSO(15 mL) 중 4-메틸벤젠설폰산;2-(1-메틸피라졸-4-일)모르폴린 (1.50 당량, 473 mg, 1.39 mmol) 및 2-클로로-4-(4-클로로-2-플루오로-페닐)-6,7-디메틸-프테리딘 (1.00 당량, 300 mg, 0.928 mmol)의 혼합물에 DIPEA(5.00 당량, 0.81 mL, 4.64 mmol)를 첨가한 다음, 100℃에서 0.5시간 동안 교반하였다. LCMS는 출발 물질이 소모되었고 목적하는 생성물(454.2, [M+H]+, ESI+)이 형성되었음을 나타냈다. LCMS는 출발 물질이 소모되었고 목적하는 생성물(39%, Rt: 0.859분; [M+H]+ = 220 nm에서 454.2)이 형성되었음을 나타냈다. 반응 혼합물을 물(30 mL) 및 EtOAc(30 mL)로 희석한 다음, 혼합물을 여과하고, 여액을 EtOAc(30 mL 5회)로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 염수(20 mL)로 세척하고, [건조 Na2SO4]로 건조시키고, 분취-HPLC(컬럼: Phenomenex luna C18 150 * 40mm * 15um; 조건: 물(FA)-ACN)로 정제하고 동결건조시켜 4-[4-(4-클로로-2-플루오로-페닐)-6,7-디메틸-프테리딘-2-일]-2-(1-메틸피라졸-4-일)모르폴린(130 mg, 0.284 mmol, 30.60% 수율)을 황색 고형분으로서 수득하였다. [M+H]+ = 454.2. 유지 시간 = 0.859분
단계 6: 4-[4-(4-클로로-2-플루오로-페닐)-6,7-디메틸-프테리딘-2-일]-2-(1-메틸피라졸-4-일)모르폴린 (1.00 당량, 130 mg, 0.28 mmol)를 SFC(컬럼: DAICEL CHIRALCEL OJ(250mm * 30mm, 10um); 조건: 0.1% NH3H2O MEOH)으로 분리하고, 동결건조시켜 (2S)-4-[4-(4-클로로-2-플루오로-페닐)-6,7-디메틸-프테리딘-2-일]-2-(1-메틸피라졸-4-일)모르폴린(16 mg, 0.0344 mmol, 12.00% 수율)(SFC 중의 피크 2)를 황색 고형분으로서 수득하고 (2R)-4-[4-(4-클로로-2-플루오로-페닐)-6,7-디메틸-프테리딘-2-일]-2-(1-메틸피라졸-4-일)모르폴린(14 mg, 0.0306 mmol, 10.69% 수율)(SFC 중의 피크 1)을 황색 고형분으로서 수득하였다. I-1202: Rt: 0.679분, m/z = 454.0 [M+H]+, 220 nm에서 100% 순도. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 7.58 (t, J = 7.8 Hz, 1H), 7.48 (s, 1H), 7.36 (s, 1H), 7.23 (dd, J = 1.9, 8.1 Hz, 1H), 7.17 (br d, J = 2.0 Hz, 1H), 5.04 - 4.86 (m, 1H), 4.76 (br d, J = 13.5 Hz, 1H), 4.53 (dd, J = 2.6, 10.1 Hz, 1H), 4.02 (br dd, J = 1.5, 11.5 Hz, 1H), 3.83 (s, 3H), 3.73 (dt, J = 2.8, 11.5 Hz, 1H), 3.34 - 3.25 (m, 1H), 3.21 (dd, J = 10.4, 13.4 Hz, 1H), 2.64 (s, 3H), 2.52 (s, 3H). 19F NMR (377 MHz, CDCl3) δ = -108.43 (s, 1F).
I-1210의 합성
단계 1: 1,4-디옥산(10 mL) 및 H2O(1 mL) 중 화합물 1(900 mg, 2.85 mmol, 1.00 당량) 및 INT-2(920 mg, 2.85 mmol, 1.0 당량)의 용액에 Pd(dppf)Cl2(104 mg, 0.14 mmol, 0.05 당량) 및 Na2CO3(603 mg, 5.69 mmol, 2 당량)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 N2 하에서 70℃에서 4시간 동안 교반하였다. LCMS: RT = 1.50분은 (R)-4-(4-클로로-2-플루오로페닐)-2-(6-(1-시클로프로필-1H-피라졸-4-일)-3,6-디히드로-2H-피란-4-일)-6,7-디메틸프테리딘이 소모되었음을 나타냈고, 목적하는 m/z를 갖는 하나의 주요 피크가 검출되었다. 혼합물을 여과하고 여액을 증발시켰다. 미정제 생성물을 플래쉬 크로마토그래피(석유 에테르:EtOAc = 1:1)로 정제하여 목적하는 생성물을 갈색 고형분으로서 수득하였다(900 mg, 66.2%).
단계 2: CH2Cl2 (10 mL) 및 i-PrOH (10 mL) 중 화합물 2(900 mg, 1.90 mmol, 1.0 당량)의 용액에 코발트 TPP(128 mg, 0.19 mmol. 0.1 당량) 및 Et3SiH(440 mg, 3.80 mmol, 2.0 당량)를 0℃에서 수득하였다. 그런 다음, 반응 혼합물을 O2 하에 0℃에서 1시간 동안 교반하였다. LC-MS: RT = 1.50분은 (2R)-4-(4-(4-클로로-2-플루오로페닐)-6,7-디메틸프테리딘-2-일)-2-(1-시클로프로필-1H-피라졸-4-일)테트라히드로-2H-피란-4-올이 소모되었음을 나타냈고, 목적하는 m/z를 갖는 하나의 주요 피크가 검출되었다. 용매를 증발시키고, 잔류물을 플래쉬 컬럼 크로마토그래피(DCM:MeOH = 95:5로 용리함)로 정제하여 (2R)-4-(4-(4-클로로-2-플루오로페닐)-6,7-디메틸프테리딘-2-일)-2-(1-시클로프로필-1H-피라졸-4-일)테트라히드로-2H-피란-4-올 을 갈색 고형분으로서 수득하였다(500 mg, 53%).
단계 3: CH2Cl2(10 mL) 중 (2R)-4-(4-(4-클로로-2-플루오로페닐)-6,7-디메틸프테리딘-2-일)-2-(1-시클로프로필-1H-피라졸-4-일)테트라히드로-2H-피란-4-올 (300 mg, 0.61 mmol, 1.0 당량)의 용액에 Me3OBF4(108 mg, 0.73 mmol. 1.2 당량) 및 1,8-비스(디메틸아미노)나프탈렌(257 mg, 1.20 mmol, 2.0 당량)을 0℃에서 첨가하였다. 이어서 반응 혼합물을 N2 하에서 0℃에서 1시간 동안 교반하였다. LC-MS는 4-(4-클로로-2-플루오로페닐)-2-((2R)-2-(1-시클로프로필-1H-피라졸-4-일)-4-메톡시테트라히드로-2H-피란-4-일)-6,7-디메틸프테리딘이 소모되었음을 나타냈고, 목적하는 m/z를 갖는 하나의 주요 피크가 검출되었다. 용매를 증발시키고, 잔류물을 분취-HPLC(ACN - H2O (0.1% TFA); 구배 : 5 - 95)로 정제하고 동결건조시켜 4-(4-클로로-2-플루오로페닐)-2-((2R)-2-(1-시클로프로필-1H-피라졸-4-일)-4-메톡시테트라히드로-2H-피란-4-일)-6,7-디메틸프테리딘을 백색 고형분으로서 수득하였다(31.1 mg, 10%). LCMS: (M+H)+ = 509.2. 유지 시간 = 1.018분. HPLC: 순도 = 95.664% (254 nm); 순도 = 98.768% (214 nm). 유지 시간 = 2.833분. 1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 8.60 (s, 1H), 8.59 (s, 1H), 7.80 (t, J = 8.0 Hz, 1H), 7.72-7.55 (m, 2H), 4.92-4.89 (m, 1H), 4.13 (s, 3H), 4.06 - 3.99 (m, 1H), 3.84-3.81 (m, 1H), 2.79 (s, 3H), 2.68 (s, 3H), 2.27-1.95 (m, 2H), 1.36 - 1.19 (m, 4H).
화합물 I-1216의 합성
단계 1: DCM(100 mL) 중 4-브로모-3-플루오로-벤즈알데히드(1.00 당량, 10.00 g, 49.3 mmol)의 용액에 BAST(1.11 당량, 10 mL, 54.8 mmol)를 0℃에서 첨가하고, 혼합물을 25℃에서 12시간 동안 교반하였다. TLC(PE, UV)는 출발 물질이 완전히 소모되었음을 나타내었고, 하나의 새로운 주요 스폿(Rf = 0.5)이 형성되었다. 반응 용액을 감압 하에 농축시켰다. 잔류물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(석유 에테르)로 정제하여 1-브로모-4-(디플루오로메틸)-2-플루오로-벤젠(7900 mg, 35.1 mmol, 71.28% 수율)을 무색 오일로서 수득하였다 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 6.44 - 6.75 (m, 1 H) 7.18 (d, J=7.88 Hz, 1 H) 7.24 - 7.31 (m, 1 H) 7.65 (t, J=7.50 Hz, 1 H)
단계 2: THF(5 mL) 중 1-브로모-4-(디플루오로메틸)-2-플루오로-벤젠 (1.00 당량, 500 mg, 2.22 mmol)의 용액에 iPrMgCl
Figure pct00839
LiCl (1.10 당량, 1.9 mL, 2.44 mmol)을 N2 하에 0℃에서 첨가하고, 혼합물을 20℃에서 1.5시간 동안 교반하였다. ZnCl2(1.20 당량, 3.8 mL, 2.67 mmol)를 N2 하에 -78℃에서 첨가하고, 혼합물을 20℃에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 다음 단계에 직접 사용하였다.
단계 3: N2 분위기 하에 밀봉된 병에 2,4-디클로로-6,7-디메틸-프테리딘(1.00 당량, 150 mg, 0.655 mmol) 및 PdCl2(Amphos)(0.0500 당량, 23 mg, 0.0327 mmol) 및 THF(2 mL)를 채우고, N2로 3회 퍼징한 다음, 0℃로 냉각시키고, 클로로-[4-(디플루오로메틸)-2-플루오로-페닐] 아연(2.00 당량, 6.5 mL, 1.31 mmol)을 0℃에서 반응 용액에 적가한 다음, 25℃로 가온하고 1시간 동안 교반하였다. 반응 용액을 황색에서 짙은 갈색으로 변화시켰다. LCMS (5-95AB/1.5분): RT = 0.890분, 399.2 = [M+H]+, ESI+는 출발 물질이 완전히 소모되었고 목적하는 생성물이 검출되었음을 나타냈다. 반응 용액을 포화 NH4Cl 용액(10 mL)으로 급냉시킨 다음, EtOAc(20 mL * 3)로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 감압 하에 증발시켜 잔류물을 수득한 다음, 잔류물을 플래쉬 컬럼(TLC, PE : EA = 3:1, Rf = 0.5)으로 정제하고, 진공에서 건조시켜 2-클로로-4-[4-(디플루오로메틸)-2-플루오로-페닐]-6,7-디메틸-프테리딘(220 mg, 0.650 mmol, 99.19% 수율)을 황색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 2.68 (s, 3 H) 2.81 (s, 3 H) 7.04 - 7.34 (m, 1 H) 7.64 - 7.71 (m, 2 H) 7.88 (t, J=7.40 Hz, 1 H).
단계 4: 1,4-디옥산(2 mL) 및 물(0.2000 mL) 중 2-클로로-4-[4-(디플루오로메틸)-2-플루오로-페닐]-6,7-디메틸-프테리딘(1.00 당량, 150 mg, 0.443 mmol), 1-시클로프로필-4-[(6R)-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)-3,6-디히드로-2H-피란-6-일]피라졸(1.10 당량, 154 mg, 0.487 mmol) 및 K2CO3(3.00 당량, 112 mg, 1.33 mmol)의 용액에 [1,1'-비스(디페닐포스피노)페로센]디클로로팔라듐(II)(0.0909 당량, 29 mg, 0.0403 mmol)을 20℃에서 첨가하였다. 혼합물을 100℃에서 2시간 동안 교반하였다. LCMS (5-95AB/1.5분): RT = 0.974분, 493.1 = [M+H]+, ESI+는 출발 물질이 완전히 소모되었고 목적하는 질량이 검출되었음을 나타냈다. 혼합물을 감압 하에 농축시켜 미정제 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 실리카 겔 상의 컬럼 크로마토그래피(PE : EA = 1/0 내지 0/1)를 통해 정제하여 2-[(6R)-6-(1-시클로프로필피라졸-4-일)-3,6-디히드로-2H-피란-4-일]-4-[4-(디플루오로메틸)-2-플루오로-페닐]-6,7-디메틸-프테리딘(240 mg, 0.467 mmol)을 백색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 0.96 - 1.03 (m, 2 H) 1.09 - 1.14 (m, 2 H) 2.73 (s, 3 H) 2.86 (s, 3 H) 2.92 - 3.04 (m, 2 H) 3.57 (dt, J=7.24, 3.53 Hz, 1 H) 3.95 (ddd, J=11.58, 6.82, 4.95 Hz, 1 H) 4.10 - 4.18 (m, 1 H) 5.46 (d, J=2.32 Hz, 1 H) 6.60 - 6.91 (m, 1 H) 7.42 (d, J=9.78 Hz, 1 H) 7.49 (s, 3 H) 7.67 (s, 1 H) 7.85 (t, J=7.34 Hz, 1 H).
단계 5: 에탄올(5 mL) 중 2-[(6R)-6-(1-시클로프로필피라졸-4-일)-3, 6-디히드로-2H-피란-4-일]-4-[4-(디플루오로메틸)-2-플루오로-페닐]-6,7-디메틸-프테리딘(1.00 당량, 240 mg, 0.487 mmol)의 용액에 PtO2(0.434 당량, 48 mg, 0.211 mmol)를 N2 하에 첨가하였다. 현탁액을 진공 하에 탈기하고 H2로 여러 번 퍼징하였다. 혼합물을 H2(15 psi) 하에 30℃에서 16시간 동안 교반하였다. LCMS (5-95AB/1.5분): RT = 0.474분, 499.3 = [M+H]+, ESI+는 출발 물질이 완전히 소모되었고 목적하는 질량을 갖는 하나의 주요 피크가 검출되었음을 나타냈다. 반응 혼합물을 여과하고 감압 하에 농축시켜 2-[(2R)-2-(1-시클로프로필피라졸-4-일) 테트라히드로피란-4-일]-4-[4-(디플루오로메틸)-2-플루오로-페닐]-6, 7-디메틸-5,6,7,8-테트라히드로프테리딘(230 mg, 0.461 mmol, 94.67% 수율)을 황색 오일로서 수득하였다. 미정제 생성물을 다음 단계에서 직접 사용하였다. [M+H]+ = 499.3; 순도 = 97.6% (220 nm). 유지 시간 = 0.474분.
단계 6: DCM(10 mL) 중 2-[(2R)-2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)테트라히드로피란-4-일]-4-[4-(디플루오로메틸)-2-플루오로-페닐]-6,7-디메틸-5,6,7,8-테트라히드로프테리딘(1.00 당량, 230 mg, 0.461 mmol)의 혼합물에 MnO2(20.0 당량, 802 mg, 9.23 mmol)를 첨가한 다음, 반응물을 30℃에서 16시간 동안 교반하였다. LCMS (5-95AB/1.5분): RT = 0.845분, 495.3 = [M+H]+, ESI+는 60%의 목적하는 화합물이 검출되었음을 나타냈다. 반응물을 30℃에서 추가 48시간 동안 교반하였다. LCMS (5-95AB/1.5분): RT = 0.954분, 495.1 = [M+H]+, ESI+는 90%의 목적하는 화합물이 검출되었음을 나타냈다. 반응 혼합물을 여과하고 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 분취-HPLC(Phenomenex Luna C18 150 * 25mm * 10um，물 (FA)-ACN)로 정제하여 2-[(2R)-2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)테트라히드로피란-4-일]-4-[4-(디플루오로메틸)-2-플루오로-페닐]-6,7-디메틸-프테리딘(140 mg, 0.283 mmol, 61.37% 수율)을 황색 고형분으로서 수득하였다, LCMS: [M+H]+ = 495.1; 순도 = 98.7% (220 nm). 유지 시간 = 0.955분.
단계 7: 2-[(2R,4S)-2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)테트라히드로피란-4-일]-4-[4-(디플루오로메틸)-2-플루오로-페닐]-6,7-디메틸-프테리딘 I-1216.2-[(2R)-2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)테트라히드로피란-4-일]-4-[4-(디플루오로메틸)-2-플루오로-페닐]-6,7-디메틸-프테리딘 (1.00 당량, 140 mg, 0.284 mmol)을 SFC로 정제하였다(DAICEL CHIRALPAK AD (컬럼: Chiralpak AD-3 50×4.6mm I.D., 3um 이동상: CO2의 경우 상 A, 및 IPA의 경우 상 B(0.05% DEA); 구배 용리: CO2 중의 40% IPA (0.05% DEA); 유속: 3mL/분; 검출기: PDA; 컬럼 온도: 35C ; 배압: 100 Bar). 2-[(2R,4S)-2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)테트라히드로피란-4-일]-4-[4-(디플루오로메틸)-2-플루오로-페닐]-6,7-디메틸-프테리딘(36 mg, 0.0702 mmol, 24.70% 수율)을 황색 고형분으로서 수득하였다. LCMS: (M+H)+ = 495.3; 순도 = 97.8% (220 nm). 유지 시간 = 0.848분. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 0.80 - 0.86 (m, 2 H) 0.91 - 1.03 (m, 6 H) 1.19 (d, J=6.25 Hz, 3 H) 1.62 (tt, J=8.27, 4.99 Hz, 1 H) 2.63 (d, J=3.75 Hz, 6 H) 2.74 (dd, J=12.01, 10.76 Hz, 1 H) 2.95 - 3.05 (m, 1 H) 3.69 (tt, J=7.38, 3.69 Hz, 1 H) 3.90 - 4.00 (m, 1 H) 4.38 (br d, J=12.38 Hz, 1 H) 4.51 (br d, J=12.38 Hz, 1 H) 4.73 (dd, J=10.57, 2.31 Hz, 1 H) 6.99 (s, 1 H) 7.45 (s, 1 H) 7.82 (s, 1 H).
I-1221의 합성
메탄올(2 mL) 중 4-(4-클로로-2-플루오로-페닐)-7-메틸-2-[rac-(2S,4R)-2- (1-시클로프로필피라졸-4-일)-테트라히드로피란-4-일]프테리딘(1.00 당량, 50 mg, 0.108 mmol)의 용액에 N2 중 CAN(1.50 당량, 88 mg, 0.161 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 60℃에서 4시간 동안 교반하였다. 혼합물을 농축시켜 미정제 생성물을 진공에서 수득하였다. 미정제 생성물을 분취-HPLC(FA, 컬럼: Phenomenex Luna C18 150 * 25mm * 10um;이동상: [물(FA)-ACN];B%: 54%-84%,10분)로 정제하였다. 정제된 용액을 동결건조시켰다. 4-(4-클로로-2-플루오로-페닐) -6-메톡시-7-메틸-2-[rac-(2S,4R)-2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)테트라히드로피란-4-일]프테리딘(2.1 mg,0.00400 mmol, 3.72% 수율)을 백색 고형분으로서 수득하였다. LC-MS: Rt: 0.994분; 495.1 = [M+H]+, ESI+; 220 nm에서 94.3% 순도. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 7.69 - 7.57 (m, 1H), 7.43 (s, 2H), 7.27 (dd, J = 1.8, 8.1 Hz, 1H), 7.21 (d, J = 1.9 Hz, 1H), 4.48 (dd, J = 2.0, 11.4 Hz, 1H), 4.26 - 4.14 (m, 1H), 3.99 - 3.88 (m, 3H), 3.78 - 3.64 (m, 1H), 3.54 - 3.39 (m, 2H), 2.69 (s, 3H), 2.44 - 2.29 (m, 1H), 2.17 - 2.05 (m, 3H), 1.09 - 0.98 (m, 2H), 0.94 - 0.85 (m, 2H).
화합물 I-1226의 합성
단계 1: 아세톤(40 mL) 중 N-[(2R)-2-히드록시프로필]-4-니트로-벤젠설폰아미드(1.00 당량, 0.95 g, 3.64 mmol) 및 K2CO3(1.50 당량, 0.75 g, 5.46 mmol)의 용액에 2-클로로-1-[1-(2-트리메틸실릴에톡시메틸)피라졸-4-일]에타논(1.00 당량, 1.00 g, 3.64 mmol)을 0℃에서 첨가하고, 혼합물을 25℃에서 12시간 동안 교반하였다. LCMS는 출발 물질이 완전히 소모되었고 목적하는 MS(57%, MS: 499.2 [M+H]+, ESI pos)를 갖는 주요 피크가 있음을 나타냈다. 반응 혼합물을 EtOAc(200 mL)와 물(200 mL) 사이에서 분리시켰다. 합쳐진 유기층을 염수(50 mL)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 분취-TLC(SiO2, DCM : MeOH = 20:1; Rf = 0.4)로 정제하여 N-[(2R)-2-히드록시프로필]-4-니트로-N-[2-옥소-2-[1-(2-트리메틸실릴에톡시메틸) 피라졸-4-일] 에틸] 벤젠설폰아미드 3(400 mg, 0.802 mmol, 22.05% 수율)을 백색 고형분으로서 수득하였다. LCMS (M+H)+ = 499.2; 순도 = 98% (220 nm). 유지 시간 = 0.943분. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ ppm -0.04 (s, 9 H) 0.82 - 0.87 (m, 3 H) 1.00 (d, J=6.25 Hz, 4 H) 3.08 (dd, J=14.32, 7.69 Hz, 2 H) 3.24 (d, J=3.88 Hz, 1 H) 3.51 - 3.60 (m, 3 H) 4.72 (d, J=4.75 Hz, 1 H) 4.80 (d, J=2.50 Hz, 2 H) 5.45 (s, 2 H) 8.05 (s, 1 H) 8.09 (d, J=8.76 Hz, 2 H) 8.38 (d, J=8.88 Hz, 2 H) 8.67 (s, 1 H).
단계 2: DCM(4 mL) 중 N-[(2R)-2-히드록시프로필]-4-니트로-N-[2-옥소-2-[1-(2-트리메틸실릴에톡시메틸)피라졸-4-일]에틸]벤젠설폰아미드 (1.00 당량, 390 mg, 0.782 mmol)의 용액에 TES(15.0 당량, 2690 mg, 11.7 mmol) 및 TMSOTf(5.00 당량, 0.71 mL, 3.91 mmol)를 0℃에서 첨가하고, 혼합물을 30℃에서 12시간 동안 교반하였다. LCMS는 출발 물질이 완전히 소모되었고 목적하는 MS(MS: 353.1 [M+H]+, ESI pos)를 갖는 주요 피크가 있음을 나타냈다. 반응 혼합물을 여과하고 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 분취-TLC(SiO2, DCM : MeOH = 20:1; Rf = 0.4)로 정제하여 (2R, 6S)-2-메틸-4-(4-니트로페닐) 설포닐-6-(1H-피라졸-4-일) 모르폴린 4(205 mg, 0.582 mmol, 74.38% 수율)를 백색 고형분으로서 수득하였다. LCMS (M+H)+ = 353.1; 순도 = 99% (220 nm). 유지 시간 = 0.810분. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.10 (d, J=6.13 Hz, 3 H) 2.06 (t, J=10.94 Hz, 1 H) 3.65 (br t, J=9.69 Hz, 2 H) 3.71 - 3.80 (m, 1 H) 4.03 (q, J=7.13 Hz, 1 H) 4.11 (q, J=7.13 Hz, 1 H) 4.61 (dd, J=10.44, 2.31 Hz, 1 H) 5.75 (s, 1 H) 7.49 - 7.66 (m, 1 H) 8.05 (d, J=8.76 Hz, 2 H) 8.44 (d, J=8.88 Hz, 2 H).
단계 3: DMF(3 mL) 중 브로모 (메톡시) 메탄(1.70 당량, 60 mg, 0.482 mmol) 및 K2CO3(2.00 당량, 78 mg, 0.568 mmol)의 용액에 (2R, 6S)-2-메틸-4-(4-니트로페닐) 설포닐-6-(1H-피라졸-4-일) 모르폴린(1.00 당량, 100 mg, 0.284 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 25℃에서 1시간 동안 교반하였다. LCMS는 출발 물질이 완전히 소모되었고 목적하는 생성물 질량(96%, MS: 397.1 [M+H]+, ESI pos)을 갖는 주요 피크가 있음을 나타냈다. 반응 혼합물을 EtOAc(40 mL)와 물(40 mL) 사이에서 분리시켰다. 분리된 유기층을 물로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 증발 건조시켰다. 반응 혼합물을 여과하고 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 분취-TLC(SiO2, DCM : MeOH = 20:1; Rf = 0.4)로 정제하여 (2S, 6R)-2-[1-(메톡시메틸)피라졸-4-일]-6-메틸-4-(4-니트로페닐) 설포닐-모르폴린 5(130 mg, 0.328 mmol, 115.55% 수율)를 백색 고형분으로서 수득하였다. H NMR에 일부 DMF가 나타나 있기 때문에 수율 >100%. LCMS (M+H)+ = 397.1; 순도 = 97% (220 nm). 유지 시간 = 0.841분. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 1.23 (d, J=6.25 Hz, 3 H) 2.13 (t, J=10.82 Hz, 1 H) 2.30 (t, J=11.01 Hz, 1 H) 3.33 (s, 3 H) 3.68 - 3.73 (m, 1 H) 3.81 (dd, J=11.44, 2.31 Hz, 1 H) 3.85 - 3.91 (m, 1 H) 4.70 (dd, J=10.44, 2.56 Hz, 1 H) 5.34 (s, 2 H) 7.52 (d, J=11.88 Hz, 2 H) 7.96 (d, J=8.88 Hz, 2 H) 8.42 (d, J=8.88 Hz, 2 H).
단계 4: MeCN(5 mL) 중 (2S, 6R)-2-[1-(메톡시메틸) 피라졸-4-일]-6-메틸-4-(4-니트로페닐) 설포닐-모르폴린 (1.00 당량, 100 mg, 0.252 mmol), K2CO3 (5.00 당량, 174 mg, 1.26 mmol)의 용액에 티오페놀(5.00 당량, 139 mg, 1.26 mmol)을 첨가한 다음, 혼합물을 25℃에서 12시간 동안 교반하였다. LCMS는 출발 물질이 소모되었음을 나타내었고 목적하는 생성물(212.1, [M+H]+, ESI+)이 형성되었다. 합쳐진 반응 혼합물을 물(20 mL)에 붓고, EtOAc(20 mL, 3회)로 추출하였다. LCMS는 수성상에서 목적하는 화합물 질량을 나타냈고, 이를 동결건조시켜 미정제 (2S, 6R)-2-[1-(메톡시메틸) 피라졸-4-일]-6-메틸-모르폴린 6 (36 mg, 0.170 mmol, 67.55% 수율)을 황색 거품으로서 수득하였다. LCMS: (M+H)+ = 212.2; 순도 = 83% (220 nm). 유지 시간 = 0.148분.
단계 5: DMSO(0.5000 mL) 중 (2S,6R)-2-[1-(메톡시메틸)피라졸-4-일]-6-메틸-모르폴린 (1.00 당량, 36 mg, 0.170 mmol) 및 2-클로로-4-(2,4-디플루오로페닐)-6,7-디메틸-피리도[2,3-d]피리미딘 (1.00 당량, 52 mg, 0.170 mmol)의 용액에 DIEA(4.00 당량, 88 mg, 0.682 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 100℃에서 0.5시간 동안 교반하였다. LCMS는 출발 물질이 완전히 소모되었고 목적하는 생성물 질량을 갖는 주요 피크가 있음을 나타냈다(Rt: 0.813분, m/z: 481.2 [M+H]+, 254 nm에서의 62% 순도). 반응물을 여과하고, 여액을 분취-HPLC(유속: 25 mL/분; 구배: 7분에 걸쳐 22-52% 물(0.1%FA)-ACN; 컬럼: Unisil 3-100 C18 Ultra 150 * 50mm * 3um)로 정제하고, 동결건조시켜 (2S,6R)-4-[4-(2,4-디플루오로페닐)-6,7-디메틸-피리도[2,3-d]피리미딘-2-일]-2-[1-(메톡시메틸)피라졸-4-일]-6-메틸-모르폴린(25 mg, 0.0524 mmol, 30.78% 수율) 을 황색 고형분으로서 수득하였다. LCMS (M+H)+ = 481.2; 순도 = 100% (220 nm). 유지 시간 = 0.812분. HPLC: 유지 시간: 1.751분, 220 nm에서 92% 순도. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.23 (br d, J=5.50 Hz, 3 H) 2.29 (s, 3 H) 2.57 (s, 3 H) 2.77 (dd, J=13.01, 10.63 Hz, 1 H) 3.04 (br t, J=11.88 Hz, 1 H) 3.23 (s, 3 H) 3.73 - 3.82 (m, 1 H) 4.60 (dd, J=10.63, 1.75 Hz, 1 H) 4.70 - 4.87 (m, 2 H) 5.36 (s, 2 H) 7.28 - 7.36 (m, 1 H) 7.46 - 7.54 (m, 1 H) 7.56 - 7.63 (m, 2 H) 7.66 - 7.76 (m, 1 H) 7.98 (s, 1 H).
화합물 I-1236의 합성
단계 1: DCM (10 mL) 중 [(4R)-2,2-디메틸-1,3-디옥솔란-4-일]메탄올(1.00 당량, 1.00 g, 7.57 mmol), DIPEA (3.00 당량, 4.0 mL, 22.7 mmol)의 혼합물에 메틸설포닐 메탄설포네이트(1.50 당량, 1.97 g, 11.3 mmol)를 0℃에서 첨가한 다음, 혼합물을 25℃에서 12시간 동안 교반하였다. 혼합물을 물(50 mL)에 붓고 DCM(3 * 50 mL)으로 추출하고, 유기상을 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 용액을 실리카 상의 컬럼(3 g SiO2 카트리지, PE:EA=1:1, 포스포몰리브드산에서의 검출)으로 정제하고 감압 하에 농축시켜 황색 오일을 수득하였다. [(4S)-2,2-디메틸-1,3-디옥솔란-4-일]메틸 메탄설포네이트(1150 mg, 5.20 mmol, 68.67% 수율)를 황색 오일로서 수득하고 다음 단계에 사용하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 4.44 - 4.34 (m, 1H), 4.23 (d, J = 5.3 Hz, 2H), 4.11 (dd, J = 6.5, 8.8 Hz, 1H), 3.84 (dd, J = 5.4, 8.7 Hz, 1H), 3.08 (s, 3H), 1.45 (s, 3H), 1.38 (s, 3H).
단계 2: MeCN(6.8 mL) 중 [(4S)-2,2-디메틸-1,3-디옥솔란-4-일]메틸 메탄설포네이트(1.00 당량, 500 mg, 2.38 mmol)의 황색 용액에 (2,4-디메톡시페닐)메탄아민(4.00 당량, 1591 mg, 9.51 mmol)을 첨가하여 짙은 황색 용액을 수득한 다음, 혼합물을 80℃에서 12시간 동안 교반하였다. LCMS는 출발 물질이 완전히 소모되었음을 나타냈고, 41%의 목적하는 MS(282.2 [M+1]+, ESI pos)가 발견되었다. 혼합물을 실온으로 냉각시켰다. 합쳐진 혼합물을 물(20 mL)에 붓고 에틸 아세테이트(3 * 50 mL)로 추출하고, 유기상을 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 용액을 실리카 상의 컬럼(2 g SiO2 카트리지, EA/MeOH=1.2%, 1% NH3.H2O, 254 nm에서 검출)으로 정제하고 감압 하에 농축시켜 갈색 오일을 수득하였다. 1-(2,4-디메톡시페닐)-N-[[(4R)-2,2-디메틸-1,3-디옥솔란-4-일]메틸]메탄아민(400 mg,1.39 mmol, 58.59% 수율)을 갈색 오일로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 7.13 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 6.49 - 6.40 (m, 2H), 4.31 - 4.20 (m, 1H), 4.04 (dd, J = 6.5, 7.9 Hz, 1H), 3.81 (d, J = 3.8 Hz, 6H), 3.76 (s, 2H), 3.71 - 3.63 (m, 1H), 2.77 - 2.64 (m, 2H), 1.40 (s, 3H), 1.35 (s, 3H).
단계 3: 1,4-디옥산(200mL) 중 4-요오도-1H-피라졸(1.00 당량, 10.00 g, 51.6 mmol)의 용액에 시클로프로필보론산(2.00 당량, 8.86 g, 103 mmol), Cu(OAc)2(1.00 당량, 9.36 g, 51.6 mmol), DMAP(4.00 당량, 25.16 g, 206 mmol) 및 피리딘(2.50 당량, 10 mL, 129 mmol)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 산소 분위기 하에 100℃에서 16시간 동안 교반하였다. 용액의 색상이 청색에서 흑색으로 변하였다. TLC(PE: EA=1:1)는 출발 물질이 완전히 소모되었고 2개의 새로운 스폿이 형성되었음을 나타냈다. LCMS는 출발 물질이 완전히 소모되었고 96%의 목적하는 생성물이 형성되었음을 나타냈다. 혼합물을 물(1000 mL)에 붓고 EA(1000 mL x 3)로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 염수(1000 mL x 1)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 농축하여 미정제물을 수득하였다. 미정제물을 (PE: EA=2: 1-1: 1)로 용리된 실리카 겔 상의 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 1-시클로프로필-4-요오도-피라졸(11.40 g, 48.7 mmol, 94.4% 수율)을 연황색 오일로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 7.52 (s, 1H), 7.49 (s, 1H), 3.62 (tt, J = 3.7, 7.3 Hz, 1H), 1.15 - 1.10 (m, 2H), 1.08 - 1.01 (m, 2H).
단계 4: THF(200 mL) 중 1-시클로프로필-4-요오도-피라졸(1.00 당량, 10.40 g, 44.4 mmol)의 용액에 N2 하에 -70℃에서 i-PrMgCl(1.50 당량, 33 mL, 66.7 mmol)을 적가한 다음, 반응 혼합물을 -70℃에서 30분 동안 교반한 다음, THF(20 mL) 중 2-클로로-N-메톡시-N-메틸아세타미드(1.20 당량, 7.34 g, 53.3 mmol)를 적가하고 0℃에서 1시간 동안 교반하였다. LCMS는 반응물이 소모되었고 목적하는 질량이 검출되었음을 나타냈고, 반응 용액을 포화 NH4Cl로 급냉시키고, H2O에 붓고, EtOAc로 추출하고, 감압 하에 증발시켜 잔류물을 수득한 다음, 이를 플래쉬 컬럼(PE: EA=0-60%)으로 정제하고, 감압 하에 증발시켜 2-클로로-1-(1-시클로프로필피라졸-4-일)에타논(8.10 g, 43.9 mmol, 98.73% 수율)을 무색 오일로서 수득하였다. 실온으로 냉각시킨 후, 생성물이 회백색 고형분으로 변하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 7.99 (s, 1H), 7.87 (s, 1H), 4.33 (s, 2H), 3.59 (tt, J = 3.8, 7.3 Hz, 1H), 1.13 - 1.07 (m, 2H), 1.07 - 1.00 (m, 2H).
단계 5: DMF(10 mL) 중 2-클로로-1-(1-시클로프로필피라졸-4-일)에타논 (1.00 당량, 170 mg, 0.921 mmol)의 자주색 혼합물에 1-(2,4-디메톡시페닐)-N-[[(4R)-2,2-디메틸-1,3-디옥솔란-4-일]메틸]메탄아민(1.50 당량, 389 mg, 1.38 mmol), K2CO3(2.00 당량, 255 mg, 1.84 mmol) 및 KI(1.50 당량, 229 mg, 1.38 mmol)를 첨가한 다음, 황색 혼합물을 15℃에서 12시간 동안 교반하였다. LCMS는 출발 물질이 완전히 소모되었음을 나타냈고, 60%의 목적하는 MS(430.3 [M+1]+, ESI pos)가 발견되었다. 혼합물을 물(60 mL)에 붓고 에틸 아세테이트(3 * 50 mL)로 추출하고, 유기상을 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 용액을 실리카 상의 컬럼(1 g SiO2 카트리지, EA, 254 nm에서 검출)으로 정제하고 감압 하에 농축시켜 황색 오일을 수득하였다. 1-(1-시클로프로필피라졸-4-일)-2-[(2,4-디메톡시페닐)메틸-[[(4R)-2,2-디메틸-1,3-디옥솔란-4-일]메틸]아미노] 에타논(320 mg, 0.633 mmol, 68.77% 수율)을 황색 오일로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 8.08 (s, 1H), 7.92 (s, 1H), 7.19 - 7.09 (m, 1H), 6.45 - 6.42 (m, 2H), 4.34 (quin, J = 6.2 Hz, 1H), 4.04 - 3.97 (m, 1H), 3.78 (d, J = 15.5 Hz, 8H), 3.63 - 3.52 (m, 4H), 2.79 - 2.63 (m, 2H), 1.35 (d, J = 4.3 Hz, 6H), 1.15 - 1.02 (m, 4H).
단계 6: DCE(1 mL) 중 1-(1-시클로프로필피라졸-4-일)-2-[(2,4-디메톡시페닐)메틸-[[(4R)-2,2-디메틸-1,3-디옥솔란-4-일]메틸]아미노]에타논(1.00 당량, 200 mg, 0.466 mmol)의 혼합물에 TFA(28.0 당량, 1.0 mL, 13.1 mmol)를 첨가한 다음, 황색 혼합물을 70℃에서 1시간 동안 교반하여 적색 용액을 수득하였다. LCMS는 출발 물질이 완전히 소모되었음을 나타냈고, 11%의 목적하는 MS(222.1[M+1]+, ESI pos) 및 13% 생성물(372.1[M+1]+, ESI pos)이 발견되었다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고 농축시켜 황색 오일을 수득하였다. (1R,5S)-5-(1-시클로프로필피라졸-4-일)-6,8-디옥사-3-아자바이시클로[3.2.1]옥탄(300 mg, 1.36 mmol, 291.18% 수율)을 황색 오일로서 수득하였다.
단계 7: DMSO(2 mL) 중 2-클로로-4-(2,4-디플루오로페닐)-6,7-디메틸-프테리딘 (1.00 당량, 40 mg, 0.130 mmol), (1R,5S)-5-(1-시클로프로필피라졸-4-일)-6,8-디옥사-3-아자바이시클로[3.2.1]옥탄 (5.00 당량, 144 mg, 0.652 mmol)의 황색 용액에 DIPEA(4.00 당량, 0.091 mL, 0.522 mmol)를 첨가한 다음, 혼합물을 100℃에서 1시간 동안 교반하여 갈색 용액을 수득하였다. LCMS는 출발 물질이 완전히 소모되었음을 나타냈고, 23.7%의 목적하는 MS(492.0 [M+1]+, ESI pos)가 발견되었다. 혼합물을 실온으로 냉각시켰다. 그런 다음, 혼합물을 물(20 mL)에 붓고 에틸 아세테이트(3 x 30 mL)로 추출하고, 합쳐진 유기층을 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고 진공에서 농축시켰다. 용액을 분취-TLC(EA, Rf=0.5)로 정제하고, 정제된 용액을 농축시켜 갈색 오일을 수득하였다. 그런 다음, 용액을 동결건조시켜 갈색 고형분을 수득하였다. SFC는 55%의 목적하는 MS(492.2 [M+1]+, ESI pos)(피크 2)가 발견되었고, 19% MS(532.1[M+18+Na]+, ESI pos, 가능한 고리-개방 BP)가 발견되었고, 25%의 목적하는 질량(492.1[M+1]+, ESI pos)(피크 1)이 발견되었다. 용액을 SFC(컬럼: DAICEL CHIRALPAK AD (250mm * 30mm, 10um); 이동상: 0.1% NH3.H2O ETOH; B%: 60%-60%, 9.8분)로 재정제하고, 정제된 용액을 농축시켜 황색 오일을 수득하였다. 그런 다음, 용액을 동결건조시켜 황색 고형분을 수득하였다. (1R,5S)-5-(1-시클로프로필피라졸-4-일)-3-[4-(2,4-디플루오로페닐)-6,7-디메틸-프테리딘-2-일]-6,8-디옥사-3-아자바이시클로[3.2.1]옥탄(3.7 mg,0.00719 mmol, 5.51% 수율)을 황색 고형분으로서 수득하였다. 생성물은 SFC 중 피크 2였다. 피크 1은 불순물과 혼합되었고 성공적으로 단리되지 않았다. DP에 대한 1H NMR (SFC 중 피크 2): LCMS. Rt: 0.899분; m/z: 492.1 [M+H]+. 214 nm에서 100% 순도. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 7.76 - 7.70 (m, 1H), 7.69 - 7.60 (m, 2H), 7.04 (br t, J = 7.8 Hz, 1H), 7.00 - 6.91 (m, 1H), 4.99 - 4.72 (m, 3H), 4.18 - 3.99 (m, 2H), 3.65 - 3.50 (m, 2H), 3.49 - 3.39 (m, 1H), 2.72 (s, 3H), 2.59 (s, 3H), 1.13 (br s, 2H), 1.02 (br d, J = 5.9 Hz, 2H). HPLC: Rt: 2.720분; 214 nm에서 94.564% 순도.
화합물 I-1241 및 I-1270의 합성
단계 1: 메탄올(100 mL) 중 4-벤질모르폴린-2-카르복실산(1.00 당량, 5.00 g, 22.6 mmol) 및 H2SO4(221 당량, 5.0 mL, 5000 mmol)의 용액을 70℃에서 1시간 동안 교반하였다. LCMS, 생성물: RT = 0.846분)은 출발 물질이 완전히 소모되었고, 100%의 목적하는 질량이 검출되었음을 나타냈다. 반응 혼합물을 포화 수성 NaHCO3(100 mL)에 서서히 붓고 0℃에서 10분 동안 교반한 다음, 혼합물을 EtOAc(100 mL * 3) 및 물(100 mL * 3)로 추출하였다. 유기층을 염수로 세척하고, Na2SO4로 건조시켰다. 용액을 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 미정제 생성물을 석유 에테르/에틸 아세테이트 = 100 /1 내지 0 /1, (DCM : MeOH = 10:1, 목적하는 생성물 Rf = 0.3 (I2))로 용리된 실리카 겔 상의 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 4-벤질모르폴린-2-카르복실레이트(4300 mg, 17.9 mmol, 79.25% 수율)를 무색 오일로서 수득하였다. (M+H)+ = 236.1; 순도 = 98% (220 nm). 유지 시간 = 0.846분. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 7.36 - 7.31 (m, 4H), 7.36 - 7.28 (m, 1H), 4.25 (dd, J = 2.9, 9.1 Hz, 1H), 4.02 (td, J = 3.2, 11.4 Hz, 1H), 3.78 - 3.75 (m, 3H), 3.75 - 3.68 (m, 1H), 3.58 - 3.45 (m, 2H), 3.03 - 2.94 (m, 1H), 2.73 - 2.57 (m, 1H), 2.40 - 2.22 (m, 2H).
단계 2: THF(40 mL) 중 메틸 4-벤질모르폴린-2-카르복실레이트(1.00 당량, 2.00 g, 8.50 mmol) 및 아세톤(2.20 당량, 1.4 mL, 18.7 mmol)의 용액에 N2로 30초 동안 버블링한 다음, NaH(2.20 당량, 748 mg, 18.7 mmol)를 서서히 첨가하고 60℃에서 1시간 동안 교반하였다. LCMS, rt = 0.614분)은 70% 순도의 목적하는 질량((M+H)+ = 262.1)이 검출되었음을 나타냈다. 잔류물을 에틸 아세테이트(50 * 3 mL)와 물(50 * 3 mL) 사이에서 분리시켰다. 분리된 유기층을 물로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 증발 건조시켰다. 미정제 생성물을 석유 에테르/에틸 아세테이트 = 100/1 내지 0 /1(석유 에테르/에틸 아세테이트 = 0/1, 목적하는 생성물 Rf = 0.4)로 용리된 실리카 겔 상의 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 1-(4-벤질모르폴린-2-일)부탄-1,3-디온(800 mg, 2.91 mmol, 34.21% 수율)을 황색 오일로서 수득하였다: (M+H)+ = 262.1; 순도 = 78% (220 nm). 유지 시간 =0.614분. 1H NMR (400 MHz,CDCl3) δ = 7.39 - 7.25 (m, 5H), 4.18 - 4.09 (m, 1H), 3.94 (br d, J = 11.2 Hz, 1H), 3.78 - 3.61 (m, 1H), 3.60 - 3.49 (m, 2H), 3.07 (br d, J = 11.0 Hz, 1H), 2.68 (br d, J = 11.1 Hz, 1H), 2.26 - 2.17 (m, 1H), 2.12 - 2.07 (m, 3H), 2.05 (s, 1H), 1.27 (t, J = 7.2 Hz, 1H).
단계 3: 에탄올(13 mL) 중 1-(4-벤질모르폴린-2-일) 부탄-1,3-디온(1.00 당량, 800 mg, 3.06 mmol)의 용액에 NH2OH·HCl(1.30 당량, 277 mg, 3.98 mmol)을 첨가하고, 85℃에서 2시간 동안 교반하였다. LCMS (5-95AB/1.5분): RT = 0.320분, 259.3 = [M+H] +, ESI+는 목적하는 질량의 97%를 나타냈다. 잔류물을 증발 건조시켜 추가 정제를 수행하였다. 잔류물을 플래쉬 실리카 겔 크로마토그래피 석유 에테르/에틸 아세테이트 = 100/1 내지 0/1(DCM:MeOH = 10:1, 목적하는 생성물 Rf = 0.3)로 정제하였다. 정제된 용액을 농축시켜 4-벤질-2-(3-메틸이속사졸-5-일) 모르폴린을 수득하고 4-벤질-2-(5-메틸이속사졸-3-일) 모르폴린(500 mg, 1.84 mmol, 60.06% 수율)을 백색 검으로서 수득하였다., LCMS (M+H) + = 259.1; 순도 = 95% (220 nm). 유지 시간 = 0.905분. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 7.63 - 7.42 (m, 5H), 6.43 - 6.23 (m, 1H), 5.20 - 4.88 (m, 1H), 4.53 - 4.29 (m, 1H), 2.71 - 2.63 (m, 2H), 2.42 - 2.39 (m, 2H), 2.34 - 2.31 (m, 2H), 2.25 - 2.20 (m, 2H), 1.99 (s, 1H), 1.94 - 1.89 (m, 1H), 1.26 - 1.22 (m, 1H).
단계 4: MeCN(2.5 mL) 및 물(0.5 mL) 중 4-벤질-2-(3-메틸이속사졸-5-일)모르폴린 (1.00 당량, 500 mg, 1.94 mmol)의 용액에 암모늄 세륨(IV) 니트레이트(2.00 당량, 2122 mg, 3.87 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 25℃에서 2시간 동안 교반하였다. LCMS (0-60AB/1.5분): RT = 0.115분, 169.2 = [M+H] +, ESI+는 목적하는 질량의 80%를 나타냈다. 잔류물을 증발 건조시켜 추가 정제를 수행하였다. 잔류물을 플래쉬 실리카 겔 크로마토그래피 석유 에테르/에틸 아세테이트 = 100/1 내지 0/1(DCM:MeOH = 10:1, 목적하는 생성물 Rf = 0.3)로 정제하였다. 정제된 용액을 농축시켜 2-(3-메틸이속사졸-5-일)모르폴린을 수득하고, 2-(5-메틸이속사졸-3-일)모르폴린(300 mg, 1.43 mmol, 73.72% 수율)을 백색 검으로서 수득하였다. (M+H) + = 169.2; 순도 = 80% (220 nm). 유지 시간 = 0.115분. 1H NMR (400 MHz,CDCl3) δ = 7.52 - 7.44 (m, 8H), 6.18 (s, 1H), 6.09 - 6.02 (m, 1H), 5.17 (dd, J = 1.7, 10.9 Hz, 1H), 5.09 (br d, J = 9.3 Hz, 1H), 4.40 - 4.10 (m, 8H), 3.85 - 3.49 (m, 4H), 3.16 - 2.92 (m, 3H), 2.43 (s, 2H), 2.34 - 2.27 (m, 4H), 1.32 - 1.24 (m, 3H).
단계 5: DMSO(3 mL) 중 2-(3-메틸이속사졸-5-일)모르폴린 (1.00 당량, 100 mg, 0.595 mmol) 및 2-클로로-4-(4-클로로-2-플루오로-페닐)-6,7-디메틸-프테리딘 (1.20 당량, 231 mg, 0.713 mmol)의 용액에 DIEA(5.00 당량, 0.50 mL, 2.97 mmol)를 첨가한 다음, 혼합물을 100℃에서 2시간 동안 교반하였다. LCMS (5-95AB/1.5분): RT = 0.975분, 455.2 = [M+H]+, ESI+는 목적하는 생성물의 94%를 나타냈다. 반응 혼합물을 H2O(50 mL)에 붓고 유기 용매(50 mL 2회)로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 염수(50 mL)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 진공에서 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 분취-HPLC(Unisil 3-100 C18 Ultra 150 * 50 mm * 3 um, 물(FA)-ACN)로 정제하고 동결건조시켜 4-[4-(4-클로로-2-플루오로-페닐)-6,7-디메틸-프테리딘-2-일]-2-(3-메틸이속사졸-5-일)모르폴린(6.1 mg, 0.0127 mmol, 2.14% 수율)을 황색 고형분으로서 수득하고, 4-[4-(4-클로로-2-플루오로-페닐)-6,7-디메틸-프테리딘-2-일]-2-(5-메틸이속사졸-3-일)모르폴린(50 mg, 0.104 mmol, 17.56% 수율)을 황색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 7.70 - 7.64 (m, 1H), 7.34 - 7.28 (m, 3H), 6.18 (s, 1H), 4.83 - 4.75 (m, 2H), 4.16 - 4.08 (m, 1H), 3.89 - 3.80 (m, 1H), 3.56 - 3.45 (m, 2H), 2.75 - 2.71 (m, 3H), 2.61 (s, 3H), 2.32 (s, 3H), 및 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 7.71 - 7.63 (m, 1H), 7.34 - 7.31 (m, 1H), 7.28 (d, J = 1.9 Hz, 1H), 6.18 (s, 1H), 6.11 (d, J = 0.6 Hz, 1H), 5.21 - 5.04 (m, 1H), 4.93 - 4.72 (m, 2H), 4.18 - 4.08 (m, 1H), 3.89 - 3.80 (m, 1H), 3.55 - 3.45 (m, 1H), 3.42 - 3.32 (m, 1H), 2.75 - 2.71 (m, 3H), 2.62 - 2.59 (m, 3H), 2.45 (s, 1H), 2.32 (s, 2H).
단계 6: 혼합물을 SFC(컬럼: Chiralpak IC-3 50×4.6mm I.D., 3um；이동상: CO2의 경우 상 A, 및 IPA+ACN(0.05%DEA)의 경우 상 B; 구배 용리: CO2 중의 40% IPA+ACN (0.05% DEA))로 분리하고, 동결건조시켜 4-[4-(4-클로로-2-플루오로-페닐)-6,7-디메틸-프테리딘-2-일]-2-(3-메틸이속사졸-5-일)모르폴린(17 mg, 0.0347 mmol, 157.70% 수율)을 황색 고형분으로서 수득하고 4-[4-(4-클로로-2-플루오로-페닐)-6,7-디메틸-프테리딘-2-일]-2-(5-메틸이속사졸-3-일)모르폴린(6.2 mg, 0.0129 mmol, 58.52% 수율)을 황색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 7.70 - 7.64 (m, 1H), 7.34 - 7.28 (m, 2H), 6.18 (s, 1H), 5.16 - 5.01 (m, 1H), 4.86 - 4.72 (m, 2H), 4.17 - 4.07 (m, 1H), 3.84 (dt, J = 2.8, 11.2 Hz, 1H), 3.58 - 3.40 (m, 2H), 2.74 (s, 3H), 2.61 (s, 3H), 2.32 (s, 3H), 1.49 - 1.46 (m, 1H). LCMS: RT =0.980분, 455.2 = [M+H]+ 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 7.63 (s, 1H), 7.31 (br dd, J = 2.0, 8.3 Hz, 2H), 6.11 (d, J = 0.7 Hz, 1H), 5.22 - 5.11 (m, 1H), 4.96 - 4.72 (m, 2H), 4.20 - 4.11 (m, 1H), 3.92 - 3.75 (m, 1H), 3.46 - 3.31 (m, 2H), 2.73 (s, 3H), 2.60 (s, 3H), 2.45 (d, J = 0.6 Hz, 3H). LCMS: RT = 0.991분, 455.2 = [M+H] +
화합물 I-1254의 합성
단계 1: N2 하에 THF(10 mL) 중 2,4-디클로로-6,7-디메틸-프테리딘(1.00 당량, 200 mg, 0.873 mmol) 및 PdCl2(amphos)(0.0500 당량, 31 mg, 0.0437 mmol)의 용액을 0℃로 냉각시킨 다음, 클로로-(2,4,6-트리플루오로페닐)아연(1.20 당량, 7.5 mL, 1.05 mmol)을 0℃에서 적가하였다. 혼합물을 25℃로 가온시키고 1시간 동안 교반하였다. 반응 용액이 분홍색에서 청색-흑색으로 변하였다. LCMS는 원료가 대부분 소모되었음을 나타냈고, 주요 피크는 목적하는 MS를 나타냈다(325.0[M+H] +; ESI+, LC-RT: 0.908분). 혼합물에 물(30 mL)을 첨가한 다음, EtOAc(20 mL * 2)로 추출하고, 유기물을 10 mL 포화 염수 용액으로 역세척하였다. 그런 다음, 유기물을 분리하고, 농축 건조 전에 건조시켰다(Na2SO4). 그런 다음, 미정제물을 실리카 겔 컬럼(PE/EA = 2/1,Rf = 0.5)으로 정제하여 2-클로로-6,7-디메틸-4-(2,4,6-트리플루오로페닐)프테리딘(350 mg, 0.830 mmol, 95.07% 수율)을 LCMS(77% 순도, 22% 디-네기시 BP와 혼합)인 청색-흑색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 6.90 - 6.83 (m, 2H), 2.88 - 2.85 (m, 3H), 2.75 - 2.72 (m, 3H). LCMS: (M+H) + = 302.0.
단계 2: 1,4-디옥산(7 mL) 및 물(0.7000 mL) 중 2-클로로-6,7-디메틸-4-(2,4,6-트리플루오로페닐)프테리딘(1.00 당량, 200 mg, 0.616 mmol) 및 1-시클로프로필-4-[rac-(6R)-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)-3,6-디히드로-2H-피란-6-일]피라졸(1.10 당량, 214 mg, 0.678 mmol) 및 Cs2CO3(1.00 당량, 200 mg, 0.616 mmol)의 용액에 Pd(dppf)Cl2·DCM(0.0500 당량, 25 mg, 0.0308 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 80 ℃에서 1.5시간 동안 교반하였다. LCMS는 목적하는 생성물이 형성되었음을 나타냈다. 혼합물을 농축시켜 미정제 생성물을 수득하였다. 잔류물을 분취 HPLC(컬럼: Phenomenex Luna C18 150 * 25mm * 10um; 이동상: [물 (FA)-ACN] B%: 46%-76%, 12분)로 정제하고 동결건조시켰다. 6,7-디메틸-2-[rac-(6R)-6-(1-시클로프로필피라졸-4-일)-3, 6-디히드로-2H-피란-4-일]-4-(2, 4, 6-트리플루오로페닐) 프테리딘(120 mg, 0.243 mmol, 39.49% 수율)을 회색 고형분으로서 수득하였다. LCMS, 479.2 [M+H]+, ESI+
단계 3: 에탄올(20 mL) 중 2-[(6R)-6-(1-시클로프로필피라졸-4-일)-3,6-디히드로-2H-피란-4-일]-6,7-디메틸-4-(2,4,6-트리플루오로페닐)프테리딘(1.00 당량, 110 mg, 0.230 mmol)의 용액에 PtO2(0.930 당량, 49 mg, 0.214 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 H2(15Psi) 하에 20℃에서 12시간 동안 교반하였다. LCMS는 출발 물질이 완전히 소모되었고 목적하는 생성물이 형성되었음을 나타냈다. 혼합물을 여과하고, 여과액을 농축시켜 미정제 생성물을 수득하였다. 미정제 생성물을 추가 정제 없이 다음 단계에서 직접적으로 사용하였다. LCMS: 485.1 [M+H]+, ESI+.
단계 4: DCE(5 mL) 중 2-[(2R)-2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)테트라히드로피란-4-일]-6,7-디메틸-4-(2,4,6-트리플루오로페닐)-5,6,7,8-테트라히드로프테리딘(1.00 당량, 120 mg, 0.248 mmol)의 용액에 MnO2(20.0 당량, 431 mg, 4.95 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 20℃에서 12시간 동안 교반하였다. 혼합물에 MnO2(20.0당량, 431 mg, 4.95 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 20℃에서 12시간 동안 교반하였다. LCMS는 반응이 완료되었음을 나타냈다. 혼합물을 여과하고, 여과액을 농축시켜 미정제 생성물을 수득하였다. 미정제 생성물을 분취 HPLC(컬럼: Phenomenex Luna C18 75 * 30mm * 3um; 이동상: [물 (FA)-ACN]; B%: 42%-72%, 7분)로 정제하고, 동결건조시켰다. 2-[(2R)-2-(1-시클로프로필피라졸-4-일) 테트라히드로피란-4-일]-6, 7-디메틸-4-(2, 4, 6-트리플루오로페닐)프테리딘(51 mg,0.101 mmol, 40.98% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. SFC는 2개의 피크를 나타냈다(비율은 94:6임). LCMS: 481.2 [M+H]+, ESI+, 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 7.49 (s, 2H), 6.85 (t, J = 8.3 Hz, 2H), 4.54 (dd, J = 1.6, 11.4 Hz, 1H), 4.30 - 4.20 (m, 1H), 3.87 - 3.73 (m, 1H), 3.54 (td, J = 3.5, 7.3 Hz, 2H), 2.84 (s, 3H), 2.73 - 2.69 (m, 3H), 2.43 (br d, J = 13.3 Hz, 1H), 2.27 - 2.13 (m, 3H), 1.15 - 1.03 (m, 2H), 1.01 - 0.89 (m, 2H).
I-1260의 합성
단계 1: 아세톤(15 mL) 중 N-[(2R)-2-히드록시프로필]-4-메틸-벤젠설폰아미드(1.00 당량, 1.00 g, 4.36 mmol)의 황색 용액에 2-클로로-1-(1-메틸이미다졸-4-일)에타논(1.50 당량, 1037 mg, 6.54 mmol), K2CO3(3.00 당량, 1808 mg, 13.1 mmol) 및 KI(1.00 당량, 724 mg, 4.36 mmol)를 첨가하여 황색 현탁액을 수득하고, 혼합물을 30℃에서 12시간 동안 교반하였다. 혼합물은 적색 현탁액이었다. 혼합물을 여과하고, 여액을 진공에서 농축시켰다. N-[(2R)-2-히드록시프로필]-4-메틸-N-[2-(1-메틸이미다졸-4-일)-2-옥소-에틸]벤젠설폰아미드(1.40 g, 3.70 mmol, 84.95% 수율)를 황색 오일로서 수득하였다, LC-MS: Rt: 0.703분; 334.0 = [M+H-18]+, ESI+; 94.6% 220 nm에서 순도.
단계 2: DCM(20 mL) 중 N-[(2R)-2-히드록시프로필]-4-메틸-N-[2-(1-메틸이미다졸-4-일)-2-옥소-에틸]벤젠설폰아미드(1.00 당량, 1.40 g, 3.98 mmol)의 황색 용액에 TES(10.0 당량, 13 mL, 39.8 mmol) 및 TMSOTf(10.0 당량, 7.2 mL, 39.8 mmol)를 0℃에서 첨가하여 황색 용액을 수득하고, 혼합물을 20℃에서 12시간 동안 교반하였다. 혼합물은 황색 용액이었다. 반응 혼합물을 NaHCO3 용액(50 mL)에 붓고, 수성상을 DCM(50 mL * 3)으로 추출하였다. 합쳐진 유기상을 염수(50 mL * 3)로 세척하고, 무수 Na2SO4로 건조시키고, 여과하고 농축시켜 진공 중에서 미정제 생성물을 수득하였다. 미정제 생성물을 PE 중 EA(0-100%)로 용리된 실리카 겔 상의 컬럼 크로마토그래피로 정제하였다. (2R,6R)-2-메틸-6-(1-메틸이미다졸-4-일)-4-(p-톨일설포닐)모르폴린(100 mg, 0.268 mmol, 6.74% 수율)을 무색 오일로서 수득하였다, LC-MS: Rt: 0.16분; 336.0 = [M+H]+, ESI+; 220 nm에서 100% 순도. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 7.65 (d, J = 8.3 Hz, 2H), 7.41 - 7.30 (m, 3H), 6.86 (d, J = 1.1 Hz, 1H), 4.65 (dd, J = 2.6, 10.6 Hz, 1H), 3.94 - 3.76 (m, 2H), 3.69 - 3.59 (m, 4H), 2.59 (t, J = 11.1 Hz, 1H), 2.44 (s, 3H), 2.18 - 2.08 (m, 1H), 1.20 (d, J = 6.3 Hz, 3H).
단계 3: 메탄올(2 mL) 중 (2R,6R)-2-메틸-6-(1-메틸이미다졸-4-일)-4-(p-톨일설포닐)모르폴린(1.00 당량, 90 mg, 0.268 mmol)의 황색 용액에 N2 중 Mg(칩)(10.0 당량, 64 mg, 2.68 mmol)을 첨가하여 황색 현탁액을 수득하였다. 혼합물을 80℃에서 12시간 동안 교반하였다. 혼합물은 백색 현탁액이었다. 혼합물을 여과하고, 여액을 진공에서 농축시켰다. (2R,6R)-2-메틸-6-(1-메틸이미다졸-4-일)모르폴린(60 mg, 0.265 mmol, 98.71% 수율)을 백색 검으로서 수득하였다, LC-MS: Rt: 0.262분; 182.1 = [M+H]+, ESI+.
단계 4: DMSO(2 mL) 중 (2R,6R)-2-메틸-6-(1-메틸이미다졸-4-일)모르폴린(1.00 당량, 48 mg, 0.265 mmol)의 백색 현탁액에 2-클로로-4-(2,4-디플루오로페닐)-6,7-디메틸-피리도[2,3-d]피리미딘(1.00 당량, 81 mg, 0.265 mmol) 및 DIPEA(4.00 당량, 0.18 mL, 1.06 mmol)를 첨가하여 백색 현탁액을 수득하고, 혼합물을 100℃에서 1시간 동안 교반하였다. 혼합물을 적색 용액이었다. LCMS는 22%의 출발 물질이 여전히 남아 있음을 나타냈고, 34%의 목적하는 질량이 검출되었다. 혼합물을 농축시켜 미정제 생성물을 진공에서 수득하였다. 미정제 생성물을 분취-HPLC(FA, 컬럼: Phenomenex Luna C18 150 * 25 mm * 10 um; 이동상: [물(FA)-ACN]; B%: 7%-37%, 10분)로 정제하고 동결건조시켰다. LCMS는 생성물이 불순함을 나타냈다. 미정제 생성물을 분취-HPLC(FA, 컬럼: Phenomenex Luna C18 150 * 25 mm * 10 um; 이동상: [물(FA)-ACN]; B%: 9%-39%, 10분)로 재정제하고 동결건조시켰다. (2R,6R)-4-[4-(2,4-디플루오로페닐)-6,7-디메틸-피리도[2,3-d]피리미딘-2-일]-2-메틸-6-(1-메틸이미다졸-4-일)모르폴린;포름산(18 mg,0.0302 mmol, 11.42% 수율)을 황색 고형분으로서 수득하였다, I-1260: LC-MS: Rt: 0.736분; 451.2 = [M+H]+, ESI+; 220 nm에서 85.8% 순도. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 7.83 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.68 - 7.55 (m, 2H), 7.17 - 6.97 (m, 3H), 5.31 - 5.19 (m, 1H), 5.13 - 4.96 (m, 1H), 4.80 - 4.66 (m, 1H), 3.87 (ddd, J = 2.5, 6.4, 10.3 Hz, 1H), 3.77 (s, 3H), 3.22 (t, J = 12.3 Hz, 1H), 2.87 (br dd, J = 11.1, 13.3 Hz, 1H), 2.71 (s, 3H), 2.36 (s, 3H), 1.34 (d, J = 6.2 Hz, 3H).
화합물 I-1265의 합성
단계 1: 1,4-디옥산(150 mL) 중 4-요오도-1H-피라졸(1.00 당량, 5.00 g, 25.8 mmol)의 용액에 시클로프로필보론산(2.00 당량, 4.43 g, 51.6 mmol), Cu(OAc)2(1.00 당량, 4.68 g, 25.8 mmol), DMAP(4.00 당량, 12.58 g, 103 mmol) 및 피리딘(2.50 당량, 5.2 mL, 64.4 mmol)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 산소 분위기(15 psi) 하에 100℃에서 16시간 동안 교반하였다. 용액의 색상이 청색에서 흑색으로 변하였다. LCMS. 유지 시간 = 0.847은 출발 물질이 완전히 소모되었고 94%의 목적하는 질량이 검출되었음을 나타냈다. 혼합물을 물(100 mL)에 붓고, EtOAc(200 mL * 3)로 추출하였다.합쳐진 유기층을 염수(100 mL)로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고 농축시켜 미정제물을 수득하였다. 미정제물을 석유 에테르/에틸 아세테이트 = 100/1 내지 1/1(석유 에테르/에틸 아세테이트 = 5/1, 목적하는 생성물 Rf = 0.3)로 용리된 실리카 겔 상의 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 1-시클로프로필-4-요오도-피라졸(4.50 g, 18.3 mmol, 70.86% 수율)을 연황색 오일로서 수득하였다. (M+H)+ = 236.1; 순도 = 64% (220 nm). 유지 시간 = 0.847분.1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 7.28 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 6.38 (d, J = 2.3 Hz, 1H), 3.63 - 3.53 (m, 1H), 1.15 - 1.10 (m, 2H), 1.05 - 0.99 (m, 2H).
단계 2: THF(60 mL) 중 1-시클로프로필-3-요오도-피라졸(1.00 당량, 1000 mg, 4.27 mmol)의 용액에 이소프로필마그네슘 클로라이드(1.20 당량, 3.9 mL, 5.13 mmol)을 -78℃에서 첨가하고 30분 동안 교반한 다음, 2-클로로-N-메톡시-N-메틸아세타미드(1.10 당량, 647 mg, 4.70 mmol)를 첨가하고 25℃에서 1시간 동안 교반하였다. LCMS (5-95AB/1.5분): RT = 0.663분, 185.3 = [M+H]+, ESI+는 목적하는 질량의 80%를 나타냈다. 반응 혼합물을 포화 수성 NH4Cl(100 mL)에 서서히 붓고 0℃에서 10분 동안 교반한 다음, 혼합물을 EtOAc(100 mL * 3)로 추출하였다. 유기층을 염수로 세척하고, Na2SO4로 건조시켰다. 용액을 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 석유 에테르/에틸 아세테이트 = 100/1 내지 1/1(석유 에테르 /에틸 아세테이트 = 5/1, 목적하는 생성물 Rf = 0.3)로 용리된 실리카 겔 상의 플래쉬 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하여 2-클로로-1-(1-시클로프로필피라졸-3-일) 에타논(1200 mg, 6.04 mmol, 40.42% 수율)을 무색 고형분으로서 수득하였다, LCMS: (M+H)+ = 185.2; 순도 = 96% (220 nm). 유지 시간 =0.668분.
단계 3: 아세톤(12 mL) 중 2-클로로-1-(1-시클로프로필피라졸-3-일)에타논(1.00 당량, 500 mg, 2.71 mmol) 및 4-메틸-N-[(2R)-2-히드록시프로필]벤젠설폰아미드(1.20 당량, 745 mg, 3.25 mmol)의 용액에 KI(1.00 당량, 450 mg, 2.71 mmol) 및 K2CO3(3.00 당량, 1123 mg, 8.12 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 25℃에서 2시간 동안 교반하였다. LCMS: RT = 0.895분)은 출발 물질이 완전히 소모되었고, 45%의 목적하는 질량이 검출되었음을 나타냈다. 반응 혼합물을 물(50 mL)에 붓고 EtOAc(50 * 3 mL)로 추출하였다. 유기층을 염수로 세척하고, Na2SO4로 건조시켰다. 용액을 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 미정제 생성물을 석유 에테르/에틸 아세테이트 = 100/1 내지 1/1, (석유 에테르/에틸 아세테이트 = 5/1, 목적하는 생성물 Rf = 0.4)로 용리된 실리카 겔 상의 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 N-[(2R)-2-히드록시N-[2-(1-시클로프로필피라졸-3-일)-2-옥소-에틸]-4-메틸-N-[rac-(2R)-2-히드록시프로필]벤젠설폰아미드(200 mg, 0.477 mmol, 17.61% 수율)를 무색 오일로서 수득하였다. (M+H)+ = 360.2; 순도 = 85% (220 nm). 유지 시간 = 0.865분.
단계 4: . DCM(2.5 mL) 중 N-[2-(1-시클로프로필피라졸-3-일)-2-옥소-에틸]-N-[(2R)-2-히드록시프로필]-4-메틸-벤젠설폰아미드(1.00 당량, 200 mg, 0.530 mmol), TES(10.0 당량, 1.7 mL, 5.30 mmol)의 용액에, 이어서 TMSOTf(8.00 당량, 0.77 mL, 4.24 mmol)를 혼합물에 0℃에서 첨가하였다. 혼합물을 30℃에서 12시간 동안 교반하였다. LCMS (5-95AB/1.5분): RT = 0.928분, 360.2 = [M+H]+, ESI+는 목적하는 생성물의 90%를 나타냈다. 반응 혼합물을 물(20 mL)에 붓고 EtOAc (20 * 3 mL)로 추출하였다. 분리된 유기층을 물로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 증발 건조시켰다. 미정제 생성물을 석유 에테르/에틸 아세테이트 = 100/1 내지 1 /1(석유 에테르/에틸 아세테이트 = 3/1, 목적하는 생성물 Rf = 0.4)로 용리된 실리카 겔 상의 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 (2R,6R)-2-(1-시클로프로필피라졸-3-일)-6-메틸-4-(p-톨일설포닐)모르폴린(200 mg, 0.470 mmol, 88.76% 수율)을 무색 오일로서 수득하였다. (M+H)+ = 360.0; 순도 = 90% (220 nm). 유지 시간 = 0.928분. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 7.67 (dd, J = 8.3, 11.6 Hz, 4H), 7.36 (dd, J = 2.3, 5.4 Hz, 3H), 7.33 - 7.29 (m, 3H), 6.74 (s, 1H), 6.28 - 6.25 (m, 1H), 6.17 - 6.13 (m, 1H), 4.77 - 4.68 (m, 1H), 3.90 - 3.76 (m, 3H), 3.67 - 3.49 (m, 5H), 2.98 - 2.91 (m, 1H), 2.53 - 2.39 (m, 8H), 2.19 - 2.10 (m, 1H), 1.31 - 1.16 (m, 10H), 1.15 - 1.05 (m, 5H), 1.05 - 0.87 (m, 1H).
단계 5: 메탄올(10 mL) 중 (2R)-6-(1-시클로프로필피라졸-3-일)-2-메틸-4-(p-톨일설포닐)-2,3-디히드로-1,4-옥사진(1.00 당량, 200 mg, 0.556 mmol)의 용액에 Pd/C(3.39 당량, 200 mg, 1.89 mmol)를 N2 분위기 하에 첨가하였다. 혼합물을 H2로 3회 퍼징한 다음, 혼합물을 H2(15 psi) 하에 30℃에서 12시간 동안 교반하였다. LCMS (5-95AB/1.5분): RT = 0.903분, 362.2 = [M+H]+, ESI+는 목적하는 생성물의 100%를 나타냈다. 반응 혼합물을 셀라이트를 통해 여과하고, 여과물을 감압 하에 증발시켜 미정제 생성물을 수득하였다. 미정제 생성물은 다음 단계에 직접 사용하였다. (M+H)+ = 362.2; 순도 = 100% (220 nm). 유지 시간 = 0.903분.
단계 6: 메탄올(20 mL) 중 (2R,6R)-2-(1-시클로프로필피라졸-3-일)-6-메틸-4-(p-톨일설포닐)모르폴린(1.00 당량, 200 mg, 0.553 mmol)의 용액에 Mg(분말)(9.79 당량, 130 mg, 5.42 mmol) 및 Mg(칩)(9.79 당량, 130 mg, 5.42 mmol)을 25℃에서 첨가한 다음, 혼합물을 N2 하에 80℃에서 12시간 동안 교반하였다. LCMS는 목적하는 생성물의 60%가 검출되었고 출발 물질의 30%가 남아 있음을 나타냈다. 반응 혼합물을 셀라이트를 통해 여과하고, 여과물을 감압 하에 증발시켜 미정제 생성물을 수득한 다음, 이를 메탄올(20 mL), Mg(분말)(10.0 당량, 133 mg, 5.53 mmol) 및 Mg(칩)(10.0 당량, 133 mg, 5.53 mmol)에 용해시키고, 용액에 첨가하고, N2로 3회 퍼징하고, N2 하에 80℃에서 12시간 동안 추가로 교반하였다. TLC는 반응물 1이 완전히 소모되었고 하나의 새로운 스폿이 형성되었음을 나타냈다. (PE/EtOAc = 3/1, 출발 물질 Rf = 0.3; 생성물 Rf = 0.5). 반응 혼합물을 셀라이트로 여과하고, 여과물을 감압 하에 증발시켜 미정제 생성물을 수득하였다. 미정제 생성물은 다음 단계에 직접 사용하였다. (M+H)+ = 362.2; 순도 = 33% (220 nm). 유지 시간 = 0.899분.
단계 7: (2R,6R)-2-(1-시클로프로필피라졸-3-일)-4-[4-(2,4-디플루오로페닐)-6,7-디메틸-프테리딘-2-일]-6-메틸-모르폴린. DMSO(0.5000 mL) 중 (2R,6R)-2-(1-시클로프로필피라졸-3-일)-6-메틸-모르폴린(1.00 당량, 210 mg, 1.01 mmol) 및 2-클로로-4-(2,4-디플루오로페닐)-6,7-디메틸-프테리딘(1.20 당량, 373 mg, 1.22 mmol)의 용액에 DIEA(5.00 당량, 23 mg, 0.178 mmol)를 첨가한 다음, 혼합물을 100℃에서 2시간 동안 교반하였다. LCMS (5-95AB/1.5분): RT = 0.980분, 478.3 = [M+H]+, ESI+는 목적하는 생성물의 70%를 나타냈다. 반응 혼합물을 H2O(50 mL)에 붓고 유기 용매(50 mL 2회)로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 염수(50 mL)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 진공에서 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 분취-HPLC(Unisil 3-100 C18 Ultra 150 * 50 mm * 3 um 물(FA)-ACN))로 정제하여 황색 고형분으로서 수득하였다. LCMS: RT = 0.982분, 478.2 = [M+H]+ 1H NMR: (400 MHz, CDCl3) δ = 7.71 (q, J = 7.2 Hz, 1H), 7.41 (d, J = 2.3 Hz, 1H), 7.08 - 6.92 (m, 2H), 6.30 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 5.21 - 4.92 (m, 2H), 4.72 (dd, J = 2.6, 11.1 Hz, 1H), 3.93 - 3.82 (m, 1H), 3.63 - 3.53 (m, 1H), 3.33 - 3.23 (m, 1H), 2.95 - 2.85 (m, 1H), 2.71 (s, 3H), 2.59 (s, 3H), 1.35 (d, J = 6.1 Hz, 3H), 1.14 - 1.08 (m, 2H), 1.05 - 0.99 (m, 2H).
화합물 I-1273의 합성
단계 1: MeCN(5 mL) 중 (2R,6S)-2-메틸-4-(p-톨일설포닐)-6-(1H-피라졸-4-일)모르폴린(1.00 당량, 130 mg, 0.404 mmol), KF (2.00 당량, 47 mg, 0.809 mmol) 및 1-[[브로모 (디플루오로) 메틸]-에톡시-포스포릴]옥시에탄(1.50 당량, 162 mg, 0.607 mmol)의 용액에 이어서, 혼합물을 40℃에서 12시간 동안 교반하였다. LCMS는 출발 물질이 완전히 소모되었고 질량(97%, MS: 372.1 [M+H]+, ESI pos)을 갖는 주요 피크가 있음을 나타냈다. 반응 혼합물을 EtOAc(40 mL)와 물(40 mL) 사이에서 분리하였다. 분리된 유기층을 물로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 증발 건조시켰다. 반응 혼합물을 여과하고 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 분취-TLC(SiO2, PE : EtOAc = 1:1; Rf = 0.4)로 정제하여 (2S,6R)-2-[1-(디플루오로메틸)피라졸-4-일]-6-메틸-4-(p-톨일설포닐) 모르폴린 2(150 mg, 0.404 mmol, 99.85% 수율)를 백색 고형분으로서 수득하였다. LCMS (M+H)+ = 372.1; 순도 = 98% (220 nm). 유지 시간 = 0.892분.1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.10 (d, J=6.24 Hz, 3 H) 2.41 (s, 3 H) 3.58 (br d, J=11.25 Hz, 1 H) 3.70 (br d, J=11.37 Hz, 1 H) 3.77 (ddd, J=10.15, 6.30, 2.38 Hz, 1 H) 4.30 - 4.35 (m, 2 H) 4.66 (dd, J=10.45, 2.38 Hz, 1 H) 7.46 (d, J=8.07 Hz, 2 H) 7.59 (s, 1 H) 7.66 (d, J=8.31 Hz, 2 H) 7.74 (s, 1 H) 7.78 (s, 1 H) 7.89 (s, 1 H) 8.22 (s, 1 H).
단계 2: 메탄올(10 mL) 중 (2S,6R)-2-[1-(디플루오로메틸)피라졸-4-일]-6-메틸-4-(p-톨일설포닐)모르폴린(1.00 당량, 150 mg, 0.404 mmol)의 용액에 Mg(분말)(10.0 당량, 97 mg, 4.04 mmol) 및 Mg(칩)(10.0 당량, 97 mg, 4.04 mmol)을 25℃에서 첨가한 다음, 혼합물을 N2 하에 80℃에서 12시간 동안 교반하였다. LCMS는 출발 물질이 완전히 소모되었음을 나타내었지만, 미량의 목적하는 화합물만이 검출되었다. (MS: 218.1 [M+H]+, ESI pos). 반응 혼합물을 셀라이트로 여과하여 미정제 생성물을 백색 고형분으로서 수득하였다. LCMS (M+H)+ = 218.1; 순도 = 2% (220 nm).
단계 3: DMSO(3 mL) 중 (2S,6R)-2-[1-(디플루오로메틸)피라졸-4-일]-6-메틸-모르폴린(1.00 당량, 200 mg, 0.921 mmol) 및 2-클로로-4-(2,4-디플루오로페닐)-6,7-디메틸-피리도[2,3-d]피리미딘(1.00 당량, 281 mg, 0.921 mmol)의 용액에 DIEA (4.00 당량, 476 mg, 3.68 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 100℃에서 0.5시간 동안 교반하였다. LCMS(생성물: RT = 0.826분; m/z: 487.2 [M+H]+. 220 nm에서 10% 순도)는 출발 물질이 완전히 소모되었고 MS가 검출되기를 원함을 나타냈다. 반응물을 여과하고, 여액을 분취-HPLC(유속: 25 mL/분; 구배: 7분에 걸쳐 27-57% 물(0.1% FA)-ACN; 컬럼: Unisil 3-100 C18 Ultra 150 * 50 mm * 3 um)로 정제하고, 동결건조시켜 (2S,6R)-2-[1-(디플루오로메틸)피라졸-4-일]-4-[4-(2,4-디플루오로페닐)-6,7-디메틸-피리도[2,3-d]피리미딘-2-일]-6-메틸-모르폴린; 포름산(8.5 mg, 0.0145 mmol, 1.58% 수율)을 황색 고형분으로서 수득하였다. LCMS (M+H)+ = 487.2; 순도 = 100% (220 nm). 유지 시간 = 0.826분. HPLC: 유지 시간: 1.848 분, 220 nm에서 90.857% 순도. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.24 (br s, 3 H) 2.30 (s, 3 H) 2.57 (s, 3 H) 2.72 - 2.84 (m, 1 H) 2.99 - 3.12 (m, 1 H) 3.73 - 3.84 (m, 1 H) 4.65 (br d, J=10.88 Hz, 1 H) 4.71 - 4.92 (m, 2 H) 7.28 - 7.37 (m, 1 H) 7.46 - 7.53 (m, 1 H) 7.54 - 7.63 (m, 2 H) 7.65 (br s, 1 H) 7.68 - 7.76 (m, 1 H) 7.79 (s, 1 H) 7.89 (br s, 1 H) 7.94 (s, 1 H).
I-1283의 합성
2-플루오로에타놀(160 당량, 2.0 mL, 34.3 mmol) 중 4-(4-클로로-2-플루오로-페닐)-2-[(2R,4S)-2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)테트라히드로피란-4-일]-7-메틸-프테리딘(1.00 당량, 100 mg, 0.215 mmol)의 황색 용액에 CAN(1.50 당량, 177 mg, 0.323 mmol)을 첨가하여 적색 용액을 수득하고, 혼합물을 20℃에서 2시간 동안 교반하였다. 혼합물은 황색 고형분이었다. LCMS는 31%의 출발 물질이 여전히 남아 있음을 나타냈고, 45%의 목적하는 질량이 검출되었다. 반응 혼합물을 Na2SO3 용액(20 mL) 및 EA(20 mL)에 붓고, 혼합물을 여과하고, 여액을 EA(20 mL * 3)로 추출하였다. 합쳐진 유기상을 염수(20 mL * 3)로 세척하고, 무수 Na2SO4로 건조시키고, 여과하고 농축시켜 진공 중에서 미정제 생성물을 수득하였다. 미정제 생성물을 분취-HPLC(FA, 컬럼: Phenomenex Luna C18 150 * 25 mm * 10 um; 이동상: [물 (FA)-ACN]; B%: 52%-82%, 10분)로 정제하고 동결건조시켰다. 4-(4-클로로-2-플루오로-페닐)-2-[(2R,4S)-2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)테트라히드로피란-4-일]-6-(2-플루오로에톡시)-7-메틸-프테리딘(7.7 mg, 0.0145 mmol, 6.75% 수율)을 황색 고형분으로서 수득하였다. I-1283: LC-MS: Rt: 0.906분; 527.2 = [M+H]+, ESI+; 220 nm에서 99.4% 순도. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 7.69 (t, J = 7.8 Hz, 1H), 7.50 (d, J = 1.5 Hz, 2H), 7.35 (dd, J = 1.9, 8.3 Hz, 1H), 7.29 (d, J = 1.9 Hz, 1H), 4.92 - 4.83 (m, 1H), 4.79 - 4.70 (m, 1H), 4.68 - 4.52 (m, 3H), 4.26 (d, J = 10.8 Hz, 1H), 3.88 - 3.70 (m, 1H), 3.62 - 3.46 (m, 2H), 2.81 (s, 3H), 2.42 (d, J = 13.3 Hz, 1H), 2.26 - 2.15 (m, 3H), 1.14 - 1.06 (m, 2H), 1.03 - 0.94 (m, 2H).
화합물 I-1288 및 I-1293의 합성
단계 1: DCE(100 mL) 중 헥산-2,3-디온(1.20 당량, 765 mg, 6.70 mmol)의 용액에 CaSO4(1.30 당량, 989 mg, 7.26 mmol)에 이어서 2,6-디클로로피리미딘-4,5-디아민(1.00 당량, 1000 mg, 5.59 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 80℃에서 16시간 동안 교반하였다. LCMS (5-95AB/1.5분): RT = 0.895분, 257.1 = [M+H]+, ESI+는 목적하는 생성물 MS를 나타냈다. 반응물을 EtOAc(200 mL)로 희석한 다음, 셀라이트 패드를 통해 여과하였다. 필터 케이크를 MeOH(100 mL) 및 EtOAc(150 mL) 및 DCM(150 mL)으로 세척하였다. 합쳐진 여액을 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 PE/EtOAc(9:1 내지 8:1 내지 1:1)로 용리하는 실리카 겔 상의 플래쉬 크로마토그래피로 정제하여 생성물을 황색 고형분으로서 수득하였고, LCMS (5-95AB/1.5분): RT = 0.853분, 257.1 = [M+H]+, ESI+는 100%의 미정제 생성물을 황색 오일로서 나타냈고, LCMS (5-95AB/1.5분): RT = 0.862분, 257.1 = [M+H]+, ESI+는 100%의 미정제 생성물 및 재활용 출발 물질(870 mg)을 황색 고형분으로서 나타냈다. 미정제 생성물을 분취-TLC(PE:EtOAc = 3:1, Rf = 0.55)로 추가로 정제하여 2,4-디클로로-6-메틸-7-프로필-프테리딘(170 mg, 0.661 mmol, 11.84% 수율)을 황색 고형분으로서 수득하였다. LCMS: Rt: 0.875분; [M+H]+ = 257.1; 220 nm에서 96.9% 순도. 미정제 생성물을 분취-TLC(PE:EtOAc = 3:1, Rf = 0.55)로 추가로 정제하여 2,4-디클로로-7-메틸-6-프로필-프테리딘(150 mg, 0.583 mmol, 10.44% 수율)을 황색 오일로서 수득하였다. LCMS: Rt: 0.889분; [M+H]+ = 257.1; 220 nm에서 99.2% 순도.
단계 2: 3목 병에 4-클로로-2-플루오로-1-요오도-벤젠(1.00 당량, 1000 mg, 3.90 mmol)을 장착하고, 병을 밀봉하고 N2로 3회 퍼징하고, THF(10 mL)를 첨가하고, 용액을 교반하면서 -40℃로 냉각시키고, iPrMgCl.LiCl(THF 중 1.3 M)(1.10 당량, 3.3 mL, 4.29 mmol)을 -40℃에서 적가하고, 혼합물을 이 온도에서 30분 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 -60℃로 추가로 냉각시키고, ZnCl2(THF 중 0.5 M)(1.00 당량, 7.8 mL, 3.90 mmol)를 적가하고, 반응 용액이 백색 플록으로 변하였고, 반응 혼합물을 실온으로 점진적으로 가온시키고 1시간 동안 교반하였다. 백색 플록이 무색 용액으로 변하였고, 클로로-(4-클로로-2-플루오로-페닐)아연(898 mg, 3.90 mmol, 99.96% 수율)을 THF 중 무색 용액으로서 수득하였다. 미정제 생성물을 정제 없이 다음 단계에서 사용하였다.
단계 3: N2 분위기 하에 밀봉된 병에 2,4-디클로로-6-메틸-7-프로필-프테리딘(1.00 당량, 170 mg, 0.661 mmol) 및 PdCl2(Amphos)(0.100 당량, 47 mg, 0.0661 mmol) 및 THF(6 mL)를 채우고, N2로 3회 퍼징한 다음, 0℃로 냉각시켰다. 클로로-(2,4-디플루오로페닐)아연(1.10 당량, 156 mg, 0.727 mmol)을 0℃에서 반응 용액에 적가한 다음, 혼합물을 25℃로 가온하고 12시간 동안 교반하였다. LCMS (5-95AB/1.5분): RT = 0.977분, 335.1 = [M+H]+, ESI+는 목적하는 생성물의 50.7%를 나타냈다. 반응 혼합물을 와 합쳐서 작동시켰다. 합쳐진 반응물을 물(50 mL)로 희석한 다음, 에틸 아세테이트(50 mL * 3)로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 염수로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 PE/EtOAc(5:1)(TLC, PE : EtOAc, Rf = 0.45)로 용리하는 실리카 겔 상의 플래쉬 크로마토그래피로 정제하여 2-클로로-4-(2,4-디플루오로페닐)-7-메틸-6-프로필-프테리딘(80 mg, 0.108 mmol, 16.27% 수율)을 황색 오일로서 수득하고, 2-클로로-4-(2,4-디플루오로페닐)-6-메틸-7-프로필-프테리딘(140 mg, 0.188 mmol, 28.46% 수율)을 황색 오일로서 수득하였다. 2개의 생성물을 합쳤다. LCMS: Rt: 0.960분; [M+H]+ = 335.1; 220 nm에서 45% 순도.
단계 4: DMSO(10 mL) 중 2-클로로-4-(2,4-디플루오로페닐)-6-메틸-7-프로필-프테리딘(1.00 당량, 80 mg, 0.108 mmol)，2-클로로-4-(2,4-디플루오로페닐)-7-메틸-6-프로필-프테리딘(1.75 당량, 140 mg, 0.188 mmol) 및 DIEA(4.00 당량, 56 mg, 0.430 mmol)의 용액에 (2S,6R)-2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)-6-메틸-모르폴린(1.20 당량, 67 mg, 0.129 mmol)을 25℃에서 첨가하였다. 그런 다음, 반응 혼합물을 100℃에서 30분 동안 교반하였다. LCMS (5-95AB/1.5분): RT = 1.083분, 506.3 = [M+H]+, ESI+는 목적하는 생성물의 57%를 나타냈다. 반응 혼합물을 와 합하여 추가 정제를 수행하였다. 합쳐진 반응 혼합물을 물(50 mL)로 희석한 다음, 에틸 아세테이트(50 mL * 3)로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 염수로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 분취-HPLC(컬럼, [Unisil 3-100 C18 Ultra 150 * 50mm * 3 um]; 이동상: [ACN] 및 [H2O] (조건: [물 (0.225%FA)-ACN], B%: 55%-85%; 검출기, UV 254 nm. RT: [7분])로 정제하여 2개의 생성물(40 mg)의 혼합물을 황색 고형분으로서 수득하였고, LCMS (5-95AB/1.5분): RT = 0.770분, 506.1 = [M+H]+, ESI+는 혼합물 생성물의 100%를 나타냈다. 생성물의 혼합물을 SFC(컬럼: DAICEL CHIRALPAK IC (250 mm * 30 mm, 10 um); 이동상: CO2의 경우 상 A, 및 MeOH + ACN (0.05% DEA)의 경우 상 B; 구배 용리: 40% MeOH + CO2 중 CAN(0.05% DEA) 유속: 3mL/분; 검출기: PDA 컬럼 온도: 35C; 배압: 100Bar)에 의해 분리하여 2개의 생성물을 수득하였다. (2S,6R)-2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)-4-[4-(2,4-디플루오로페닐)-6-메틸-7-프로필-프테리딘-2-일]-6-메틸-모르폴린(8.1 mg, 0.0155 mmol, 14.44% 수율)(SFC 중의 피크 1)을 황색 고체로서 수득하였다. (2S,6R)-2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)-4-[4-(2,4-디플루오로페닐)-7-메틸-6-프로필-프테리딘-2-일]-6-메틸-모르폴린(14 mg, 0.0275 mmol, 25.53% 수율)(SFC 중의 피크 2)을 황색 고체로서 수득하였다. I-1288, LCMS: Rt: 740분; [M+H]+ = 506.3; 220 nm에서 97.3% 순도 및 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 0.98 - 1.16 (m, 7 H) 1.33 (d, J=6.13 Hz, 3 H) 1.86 (dq, J=15.21, 7.44 Hz, 2 H) 2.62 (s, 3 H) 2.84 (br dd, J=12.94, 11.07 Hz, 1 H) 2.90 - 3.00 (m, 2 H) 3.08 (dd, J=13.13, 11.26 Hz, 1 H) 3.58 (tt, J=7.00, 3.63 Hz, 1 H) 3.77 - 3.89 (m, 1 H) 4.61 (br d, J=9.13 Hz, 1 H) 4.86 - 5.24 (m, 2 H) 6.92 - 7.09 (m, 2 H) 7.55 (br d, J=3.63 Hz, 2 H) 7.71 (q, J=7.75 Hz, 1 H); LCMS: Rt: 0.736분; [M+H]+ = 506.3; 220 nm에서 100% 순도 및 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 0.95 - 1.05 (m, 5 H) 1.08 - 1.15 (m, 2 H) 1.33 (d, J=6.25 Hz, 3 H) 1.76 (sxt, J=7.40 Hz, 2 H) 2.73 (s, 3 H) 2.80 - 2.88 (m, 3 H) 3.08 (dd, J=13.20, 11.07 Hz, 1 H) 3.58 (tt, J=7.25, 3.69 Hz, 1 H) 3.83 (ddd, J=10.22, 6.35, 2.44 Hz, 1 H) 4.60 (dd, J=10.76, 2.00 Hz, 1 H) 4.90 - 5.19 (m, 2 H) 6.93 - 7.00 (m, 1 H) 7.04 (br t, J=8.13 Hz, 1 H) 7.54 (d, J=3.75 Hz, 2 H) 7.72 (q, J=7.71 Hz, 1 H).
I-1298의 합성
단계 1: 1,4-디옥산(50 mL) 중 메틸 3-아미노-5,6-디클로로-피라진-2-카르복실레이트(4 g, 18.0 mmol, 1.0 당량) 및 테트라메틸스탄난 (8.05 g, 45.0 mmol, 2.5 당량)의 혼합물에 X-phos(3.43 g, 7.2 mmol, 0.4 당량) 및 Pd2(dba)3 (1.03 g, 1.8 mmol, 0.1 당량)을 첨가하였다. 혼합물을 탈기하고 N2 하에 교반한 다음, 110℃까지 가온하고 밤새 교반하였다. LCMS는 주요 피크가 목적하는 생성물이었고 출발 물질이 남아 있지 않음을 나타냈다. 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 물(50 mL)로 희석시키고, CH2Cl2(100 mL×3)로 추출하였다. 합쳐진 유기물을 NaHCO3(수성)(100 mL) 및 염수(100 mL)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 진공에서 농축시켜 미정제 생성물을 수득하였다. 미정제 생성물을 FCC(석유 에테르:EtOAc = 52:48)로 정제하여 목적하는 생성물(3 g, 87.3%)을 황색 고형분으로서 수득하였다. LCMS: M+H=182, Ref. 시간=0.85
단계 2: 밀봉된 튜브에서, 메틸 3-아미노-5,6-디메틸-피라진-2-카르복실레이트(300 mg, 1.66 mmol)를 MeOH(2 mL, 7 mol/L) 중 NH3의 용액에 첨가하였다. 혼합물을 80℃까지 가온시키고 밤새 교반하였다. 반응물을 농축시키고, 잔류물을 MTBE(50 mL)로 세척하였다. 고형분을 진공에서 건조시켜 목적하는 생성물을 수득하였다(295 mg, 96.5%). LCMS: M+H=167.2, Ref 시간=0.572분
단계 3: EtOH(3 mL) 중 6-옥소피페리딘-3-카르복실산(500 mg, 3.49 mmol, 1.0 당량)의 혼합물에 티오닐 클로라이드(5.24 mmol, 0.38 mL, 1.5 당량)를 적가하였다. 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 진공에서 농축시켜 미정제 생성물을 수득하였다. EtOAc(2 mL)로 세척한 후, 고형분을 수집하였다. 고형분을 진공에서 건조시켜 목적하는 생성물을 수득하였다(480 mg, 72.2%). LCMS: M+H=172.2, Ref. 시간=0.514. 1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 10.28(s, 1H), 4.13-4.07(m, 2H), 3.34-3.23(m, 2H), 2.83-2.77(m, 1H), 2.27-2.12(m, 2H), 2.02-1.95(m, 1H), 1.88-1.79(m, 1H),1.21-1.17(t, J=6.8Hz, J=14Hz, 3H)
단계 4: 1,4-디옥산(5 mL) 중 에틸 6-옥소피페리딘-3-카르복실레이트(300 mg, 1.75 mmol, 95% 순도, 1.0 당량), CuI(166.9 mg, 0.88 mmol, 0.53 당량) 및 Cs2CO3 (1.08 g, 3.33 mmol, 2.0 당량)의 혼합물에 4-브로모-1-시클로프로필-피라졸(426 mg, 2.28 mmol, 1.4 당량) 및 DMEDA(155 mg, 1.75 mmol, 1.05 당량)를 첨가하였다. 혼합물을 3회 탈기하고 N2 하에 교반하였다. 혼합물을 70℃까지 밤새 가온시켰다. 반응물을 물(100 mL)로 희석하고 EtOAc(100 mL×3)로 추출하였다. 유기물을 합치고, NaHCO3(수성)(100 mL)으로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 진공에서 농축시켜 미정제 생성물을 수득하였다. 미정제 생성물을 FCC(석유 에테르:EtOAc = 72:28)로 정제하여 목적하는 생성물(180 mg, 35.2%)을 황색 오일로서 수득하였다. M+H=278 Ref 시간 =0.98분. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.04(s, 1H), 7.51(s, 1H), 4.23-4.18(dd, J=6.8, J=14, 2H), 3.90-3.80(m, 2H), 3.60-3.55(m, 1H), 2.96-2.91(m, 1H), 2.67-2.51(m, 2H), 2.23-2.18(m, 1H), 2.11-2.03(m, 1H), 1.30-1.25(t, J=7.2, J=14, 3H), 1.14-1.10(m, 2H), 1.02-0.97 (m, 2H).
단계 5: THF(2 mL) 중 에틸 1-(1-시클로프로필피라졸-4-일)-6-옥소-피페리딘-3-카르복실레이트(180 mg, 0.65 mmol, 1.0 당량)의 용액에 2M LiOH(2 mL, 3.24 mmol, 5.0 당량)의 용액을 첨가하였다. 반응물을 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 반응물을 1M HCl로 pH = 4로 조정하고 동결건조시켰다. 잔류물을 CH2Cl2(100 mL×3)로 추출하였다. 유기물을 합치고 진공 중에서 농축시켜 미정제 생성물(280 mg, 86.5%)을 황색 오일로서 수득하였다. LCMS: M+H=250 Ref 시간 =0.552
단계 6: CH2Cl2(8 mL) 중 1-(1-시클로프로필피라졸-4-일)-6-옥소-피페리딘-3-카르복실산(500 mg, 2.0 mmol, 1.0 당량)의 혼합물에 3-아미노-5,6-디메틸-피라진-2-카르복사미드(366 mg, 2.2 mmol, 1.1 당량) 및 피리딘(793 mg, 10.03 mmol, 5.0 당량)을 첨가하였다. 혼합물을 교반하고 0℃로 냉각시킨 다음, DCM(8 mL) 중 POCl3(615 mg, 4.0 mmol, 2.0 당량)을 적가하였다. 완료 후, 혼합물을 25℃까지 가온시키고, 3시간 동안 교반하였다. 혼합물을 CH2Cl2(100 mL)로 급냉시키고 0.5M HCl(30 mL)로 세척하였다. 유기물을 NaHCO3(수성)(50 mL) 및 염수(50 mL)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 진공에서 농축시켜 미정제 생성물(780 mg, 39.1%)을 수득하였다. 미정제 생성물을 정제 없이 다음 단계를 거쳤다.
단계 7: MeCN(5 mL) 중 3-[[1-(1-시클로프로필피라졸-4-일)-6-옥소-피페리딘-3-카르보닐]아미노]-5,6-디메틸-피라진-2-카르복사미드(1 g, 2.52 mmol, 1.0 당량)의 혼합물에 물(15 mL) 중 KOH(181 mg, 7.54 mmol, 3.0 당량)의 용액을 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 혼합물을 1M HCl로 pH = 2로 조정하고 DCM(50 mL × 3)으로 추출하였다. 유기물을 NaHCO3(수성)(50 mL) 및 염수(50 mL)로 세척하였다. 합쳐진 유기물을 Na2SO4로 건조시키고 진공에서 농축시켰다. 미정제 생성물을 FCC(CH2Cl2: MeOH = 100-90%)로 정제하여 목적하는 생성물을 수득하였다(180 mg).
단계 8: DCM(10 mL) 중 화합물 12(100 mg, 0.26 mmol, 1.00 당량) 및 TsCl(65 mg, 0.34 mmol, 1.3 당량))의 용액에 Et3N (79 mg, 0.78 mmol, 3 당량)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 N2 하에 25℃에서 0.5시간 동안 교반하였다. LC-MS는 2-(1-(1-시클로프로필-1H-피라졸-4-일)-6-옥소피페리딘-3-일)-6,7-디메틸프테리딘-4-일 4-메틸벤젠설포네이트가 소모되었음을 나타냈고, 목적하는 m/z를 갖는 하나의 주요 피크가 검출되었다. 혼합물을 증발시켰다. 미정제물을 추가 정제 없이 다음 단계에서 적용하였다.
단계 9: 둥근 바닥 플라스크에 THF(12 mL) 중 4-클로로-2-플루오로-1-요오도벤젠(1.0 g, 3.1 mmol, 1.00 당량) 을 첨가하고 i-PrMgCl(2.00 M, 2.2 mL, 1.13 당량)을 -40℃에서 적가하였다. 혼합물을 동일한 온도에서 30분 동안 교반하였다. 그런 다음, 반응 혼합물을 -78℃로 냉각시키고, ZnCl2(2.00 M, 2 mL, 1.03 당량)를 적가하고, 반응 혼합물을 20℃로 1시간 동안 가온시키고, 백색 혼탁 액체를 형성하였다. 미정제 생성물을 다음 반응에 직접 사용하였다.
단계 10: THF(5 mL) 중 (80 mg, 0.15 mmol, 1 당량) 및 Pd(amphos)Cl2(6 mg, 0.008 mmol, 0.05 당량)에 THF(5 mL) 중 화합물 2(242 mg, 0.75 mmol, 5 당량)의 용액을 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 3시간 동안 교반하였다. LC-MS는 2-(1-(1-시클로프로필-1H-피라졸-4-일)-6-옥소피페리딘-3-일)-6,7-디메틸프테리딘-4-일 4-메틸벤젠설포네이트가 소모되었음을 나타냈고, 목적하는 m/z를 갖는 하나의 주요 피크가 검출되었다. 혼합물을 여과하고 증발시키고 분취-HPLC(ACN - H2O (0.1% FA); 구배 : 5 - 95)로 정제하고 동결건조시켜 5-(4-(4-클로로-2-플루오로페닐)-6,7-디메틸프테리딘-2-일)-1-(1-시클로프로필-1H-피라졸-4-일)피페리딘-2-온을 황색 고형분으로서 수득하였다(4.15 mg, 5.6%). LCMS: (M+H)+ = 592.3. 유지 시간 = 1.135분. HPLC: 순도 = 96.809% (254 nm); 순도 = 97.767% (214 nm). 유지 시간 = 3.269분. 1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 8.06 (s, 1H), 7.78 (t, J = 8.0 Hz, 1H), 7.70 (dd, J = 9.8, 2.0 Hz, 1H), 7.66 (s, 1H), 7.54 (dd, J = 8.4, 2.0 Hz, 1H), 4.14-4.06 (m, 2H), 3.83-3.79 (m, 1H), 3.72-3.68 (m, 1H), 2.79 (s, 3H), 2.67 (s, 3H), 2.62 (dd, J = 10.0, 6.8 Hz, 1H), 2.53 (d, J = 5.4 Hz, 1H), 2.39 - 2.28 (m, 2H), 1.03-0.92 (m, 4H).
화합물 I-1301 및 I-1328의 합성
단계 1: N2 분위기 하에 DCM (90 mL) 중 2-아미노피리딘(1.00 당량, 5.00 g, 53.1 mmol), 피리딘(2.10 당량, 9.0 mL, 112 mmol)의 무색 혼합물에. 반응 혼합물을 -78℃로 냉각시키고, DCM(10 mL) 중 무수 트리플릭스(2.10 당량, 31.48 g, 112 mmol)의 용액을 격렬하게 교반하면서 캐뉼라를 통해 적가하였다. 용액을 -78℃에서 2시간 동안 교반한 후, 냉각조를 제거하고 15℃에서 12시간 동안 계속 교반하여 황색 용액을 수득하였다. LCMS는 출발 물질이 완전히 소모되었음을 나타냈고, 46%의 목적하는 MS(358.7[M+1]+, ESI pos)가 발견되었다. 혼합물을 냉수(60 mL)에 붓고 DCM(3 x 60 mL)으로 추출하고, 합쳐진 유기층을 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고 진공에서 농축시켰다. 미정제 물질을 실리카 상의 컬럼(20g SiO2 카트리지, PE:EA=10%, 254 nm에서 검출)으로 정제하고 감압 하에 농축시켜 백색 고형분을 수득하였다. 1,1,1-트리플루오로-N-(2-피리딜)-N-(트리플루오로메틸설포닐)메탄설폰아미드(10.15 g, 26.9 mmol, 50.66% 수율)를 백색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 8.66 (dd, J= 1.4, 4.8 Hz, 1H), 7.96 (dt, J= 1.9, 7.8 Hz, 1H), 7.56 (ddd, J= 0.8, 4.8, 7.6 Hz, 1H), 7.48 (d, J= 7.9 Hz, 1H).
단계 2: DCM(80 mL) 중 1,4-디옥사스피로[4.5]데칸-8-카르브알데히드(1.00 당량, 4000 mg, 23.5 mmol)의 무색 혼합물에 BAST(1.10 당량, 5 mL, 25.9 mmol)를 0℃에서 첨가한 다음, 혼합물을 15℃에서 12시간 동안 교반하여 황색 혼합물을 수득하였다. 혼합물을 포화 수성 NaHCO3(50 mL)에 적가한 다음, 합쳐진 용액을 DCM(3 x 60 mL)으로 추출하고, 합쳐진 유기층을 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 진공에서 농축시켰다. 용액을 실리카 상의 컬럼(10 g SiO2 카트리지, PE/EA=10%, 포스포몰리브드산에서 검출)으로 정제하고 감압 하에 농축시켜 무색 오일을 수득하였다. 8-(디플루오로메틸)-1,4-디옥사스피로[4.5]데칸(3800 mg, 18.8 mmol, 79.92% 수율)을 무색 오일로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 5.80 - 5.39 (m, 1H), 4.02 - 3.89 (m, 4H), 1.90 - 1.70 (m, 5H), 1.62 - 1.42 (m, 4H).
단계 3: THF(5 mL) 중 8-(디플루오로메틸)-1,4-디옥사스피로[4.5]데칸 (1.00 당량, 3.80 g, 19.8 mmol)의 무색 혼합물에 1 M HCl (1.00 당량, 5.0 mL, 19.8 mmol)을 첨가한 다음, 혼합물을 40℃에서 24시간 동안 교반하였다. TLC(PE:EA=5:1, 포스포몰리브드산)는 출발 물질이 남아 있고(Rf=0.5) 새로운 스폿이 형성되었음을 나타냈다(Rf=0.4). 포화 수성 NaHCO3(15 mL)으로 pH를 7로 조정하고, 합쳐진 혼합물을 에틸 아세테이트(3 x 60 mL)로 추출하고, 유기상을 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 용액을 실리카 상의 컬럼(8 g SiO2 카트리지, PE/EA=6% - 10%, 포스포몰리브드산에서 검출)으로 정제하고 감압 하에 농축시켜 무색 오일을 수득하였다. 4-(디플루오로메틸)시클로헥산온(1.50 g, 9.62 mmol, 48.65% 수율)을 무색 오일로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 5.92 - 5.52 (m, 1H), 2.55 - 2.45 (m, 2H), 2.43 - 2.31 (m, 2H), 2.29 - 2.13 (m, 3H), 1.76 - 1.61 (m, 2H).
단계 4: THF(25 mL) 중 4-(디플루오로메틸)시클로헥산온(1.00 당량, 500 mg, 3.37 mmol)의 무색 혼합물에 LiHMDS(1.20 당량, 4.0 mL, 4.05 mmol)를 N2 분위기 하에 -78℃에서 첨가하였다. 그런 다음, 혼합물을 -78℃에서 1시간 동안 교반하고, 1,1,1-트리플루오로-N-(2-피리딜)-N-(트리플루오로메틸설포닐)메탄설폰아미드(1.20 당량, 1451 mg, 4.05 mmol)를 N2 분위기 하에 -78℃에서 0.5시간 동안 교반한 다음, 혼합물을 15℃에서 12시간 동안 교반하여 적색 용액을 수득하였다. TLC(PE:EA=5:1, 포스포몰리브드산)는 출발 물질(Rf=0.3)이 완전히 소모되었고 새로운 스폿(Rf=0.5)이 발견되었음을 보여주었다. 혼합물을 NH4Cl 수성(30 mL)에 붓고 에틸 아세테이트(3 x 50 mL)로 추출하고, 합쳐진 유기층을 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 진공에서 농축시켰다. 혼합물을 분취-TLC(PE:EA=5:1, Rf=0.5)로 정제하고, 정제된 용액을 농축시켜 무색 오일을 수득하였다. [4-(디플루오로메틸)시클로헥센-1-일] 트리플루오로메탄설포네이트(589 mg, 2.06 mmol, 61.04% 수율)를 무색 오일로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 5.85 (d, J= 4.3 Hz, 1H), 5.82 - 5.76 (m, 1H), 5.71 (d, J= 4.4 Hz, 1H), 5.57 (d, J= 4.3 Hz, 1H), 2.55 - 2.31 (m, 3H), 2.27 - 1.99 (m, 3H), 1.76 - 1.60 (m, 1H).
단계 5: 1,4-디옥산(5 mL) 중 [4-(디플루오로메틸)시클로헥센-1-일] 트리플루오로메탄설포네이트(1.00 당량, 250 mg, 0.892 mmol)의 무색 혼합물에 비스(피나콜라토)디보론(1.50 당량, 340 mg, 1.34 mmol), 칼륨 아세테이트(3.00 당량, 263 mg, 2.68 mmol), Pd(dppf)Cl2(0.100 당량, 65 mg, 0.0892 mmol)를 첨가한 다음, 갈색 혼합물을 N2 분위기 하에 90℃에서 12시간 동안 교반하여 흑색 용액을 수득하였다. TLC(PE:EA=8:1, 세륨 암모늄 몰리브데이트)는 출발 물질이 완전히 소모되었고 새로운 스폿이 발견되었음을 나타냈다(Rf=0.5). 반응 혼합물을 실온으로 냉각시켰다. 혼합물을 물(20 mL)에 붓고 에틸 아세테이트(3 x 30 mL)로 추출하고, 합쳐진 유기층을 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 진공에서 농축시켰다. 미정제 물질을 실리카 상의 컬럼(0.5 g SiO2 카트리지, PE:EA=1% -10%, 세륨 암모늄 몰리브데이트에서 검출)으로 정제하고 감압 하에 농축시켜 백색 고형분을 수득하였다. 2-[4-(디플루오로메틸)시클로헥센-1-일]-4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란(135 mg, 0.471 mmol, 52.76% 수율)을 백색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 6.55 (br d, J= 2.0 Hz, 1H), 5.77 (d, J= 4.3 Hz, 1H), 5.63 (d, J= 4.4 Hz, 1H), 5.49 (d, J= 4.5 Hz, 1H), 2.36 - 1.94 (m, 6H), 1.92 - 1.81 (m, 1H), 1.27 (s, 12H).
단계 6: 1,4-디옥산(5 mL) 및 물(1 mL) 중 2-[4-(디플루오로메틸)시클로헥센-1-일]-4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란(1.00 당량, 110 mg, 0.426 mmol)의 무색 혼합물에 2,4-디클로로-6,7-디메틸-피리도[2,3-d]피리미딘(1.00 당량, 97 mg, 0.426 mmol), 세슘 카보네이트(3.00 당량, 417 mg, 1.28 mmol), Pd(dppf)Cl2 DCM(0.0700 당량, 24 mg, 0.0298 mmol)을 첨가한 다음, 반응 혼합물을 질소로 3회 탈기하였다. 반응 혼합물을 N2 분위기 하에 40℃에서 0.5시간 동안 교반하여 적색 용액을 수득하였다. LCMS는 출발 물질이 완전히 소모되었고 43%의 목적하는 MS(323.9[M+1]+, ESI pos)가 발견되었음을 나타냈다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시켰다. 혼합물을 물(30 mL)에 붓고 에틸 아세테이트(3 x 30 mL)로 추출하고, 합쳐진 유기층을 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 진공에서 농축시켰다. 용액을 실리카 상의 컬럼(0.2 g SiO2 카트리지, PE:EA=42%, 254 nm에서의 검출)으로 정제하고 감압 하에 농축시켜 적색 오일을 수득하였다. 2-클로로-4-[4-(디플루오로메틸)시클로헥센-1-일]-6,7-디메틸-피리도[2,3-d]피리미딘(112 mg, 0.311 mmol, 73.05% 수율)을 적색 오일로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 8.12 (s, 1H), 6.21 (br s, 1H), 5.94 (d, J= 4.2 Hz, 1H), 5.80 (d, J= 4.2 Hz, 1H), 5.65 (d, J= 4.4 Hz, 1H), 2.87 - 2.79 (m, 1H), 2.78 (s, 3H), 2.73 - 2.61 (m, 1H), 2.60 - 2.53 (m, 1H), 2.51 (s, 3H), 2.43 - 2.21 (m, 2H), 2.20 - 2.09 (m, 1H), 1.79 - 1.68 (m, 1H).
단계 7: DMSO(2 mL) 중 2-클로로-4-[4-(디플루오로메틸)시클로헥센-1-일]-6,7-디메틸-피리도[2,3-d]피리미딘(1.00당량, 110 mg, 0.340 mmol)의 황색 혼합물에 (2S,6R)-2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)-6-메틸-모르폴린(1.50당량, 106 mg, 0.510 mmol) 및 DIPEA(3.00당량, 0.18 mL, 1.02 mmol)를 첨가한 다음, 혼합물을 100℃에서 1시간 동안 교반하여 황색 용액을 수득하였다. LCMS는 출발 물질이 남아 있고 69.8%의 목적하는 MS(495.2[M+1]+, ESI pos)가 발견되었음을 나타냈다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시켰다. 혼합물을 물(30 mL)에 붓고 에틸 아세테이트(3 x 30 mL)로 추출하고, 합쳐진 유기층을 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 진공에서 농축시켰다. 용액을 실리카 상의 컬럼(0.5 g SiO2 카트리지, PE:EA=1:1, 254 nm에서 검출)으로 정제하고 감압 하에 농축시켜 황색 고형분을 수득하였다. (2S,6R)-2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)-4-[4-[4-(디플루오로메틸)시클로헥센-1-일]-6,7-디메틸-피리도[2,3-d]피리미딘-2-일]-6-메틸-모르폴린(130 mg, 0.236 mmol, 69.4% 수율)을 황색 고형분으로서 수득하였다. LCMS는 89%의 목적하는 MS(495.3[M+1]+, ESI pos)가 발견되었음을 나타냈다. 용액을 분취-HPLC(NEU, 컬럼: Waters Xbridge 150 * 25mm * 5um; 이동상: 물 (NH4HCO3)-ACN; B%: 53%-83%, 8분)로 정제하고, 정제된 용액을 동결건조시켜 황색 고형분을 수득하였다. (2S,6R)-2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)-4-[4-[4-(디플루오로메틸)시클로헥센-1-일]-6,7-디메틸-피리도[2,3-d]피리미딘-2-일]-6-메틸-모르폴린;2,2,2-트리플루오로아세트산(2.8 mg, 0.00451 mmol, 8.92% 수율)을 황색 고형분으로서 수득하였다. LC-MS: Rt: 1.069분; m/z: 495.1 [M+H]+. 214 nm에서 100% 순도. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 7.99 (s, 1H), 7.55 (d, J= 2.5 Hz, 2H), 6.14 (br s, 1H), 5.92 (d, J= 3.8 Hz, 1H), 5.78 (d, J= 4.1 Hz, 1H), 5.64 (d, J= 4.3 Hz, 1H), 5.12 - 4.99 (m, 1H), 4.94 (br d, J= 12.9 Hz, 1H), 4.57 (dd, J= 2.4, 10.9 Hz, 1H), 3.85 - 3.73 (m, 1H), 3.58 (tt, J= 3.8, 7.3 Hz, 1H), 3.02 (dd, J= 11.1, 13.2 Hz, 1H), 2.83 - 2.69 (m, 5H), 2.61 - 2.45 (m, 2H), 2.39 (s, 3H), 2.35 - 2.19 (m, 2H), 2.12 (br d, J= 11.9 Hz, 1H), 1.75 - 1.63 (m, 1H), 1.32 (d, J= 6.1 Hz, 3H), 1.17 - 1.09 (m, 2H), 1.05 - 0.98 (m, 2H). HPLC: Rt: 2.735분; 214 nm에서 98.585% 순도.
단계 8: 에탄올(1 mL) 중 (2S,6R)-2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)-4-[4-[4-(디플루오로메틸)시클로헥센-1-일]-6,7-디메틸-피리도[2,3-d]피리미딘-2-일]-6-메틸-모르폴린(1.00 당량, 50 mg, 0.101 mmol)의 황색 혼합물에 10% Pd/C(1.00 당량, 5.0 mg, 0.101 mmol)를 첨가하였다. 그런 다음, 반응 혼합물을 H2로 3회 탈기하였다. 반응 혼합물을 H2 분위기 (15 psi) 하에 15℃에서 12시간 동안 교반하였다. LCMS는 출발 물질이 완전히 소모되었음을 나타냈고, 53.7%의 목적하는 MS(501.3 [M+1]+, ESI pos)가 발견되었다. 용액을 N2 분위기 하에 여과하고, 여액을 감압 하에 농축시켜 황색 오일을 수득하였다. 2-[(2S,6R)-2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)-6-메틸-모르폴린-4-일]-6-[4-(디플루오로메틸)시클로헥실]-5-에틸-N-이차-부틸-피리미딘-4-아민(50 mg, 0.0513 mmol, 50.73% 수율)을 황색 오일로서 수득하였다.
단계 9: MeCN(3 mL) 중 (2S,6R)-2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)-4-[4-[4-(디플루오로메틸)시클로헥실]-6,7-디메틸-5,6,7,8-테트라히드로피리도[2,3-d]피리미딘-2-일]-6-메틸-모르폴린(1.00 당량, 40 mg, 0.0799 mmol)의 무색 혼합물에 NBS(2.00 당량, 28 mg, 0.160 mmol), Na2CO3(3.00 당량, 25 mg, 0.240 mmol)을 첨가한 다음, 혼합물을 15℃에서 12시간 동안 교반하였다. LCMS는 출발 물질이 완전히 소모되었음을 나타냈고, 59%의 목적하는 MS(497.2[M+1]+, ESI pos)가 발견되었다. 혼합물을 Na2SO3(20 mL)에 붓고 에틸 아세테이트(3 x 30 mL)로 추출하고, 합쳐진 유기층을 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고, 진공에서 농축시켰다. 용액을 분취-TLC(EA)로 정제하고, 정제된 용액을 농축시켜 황색 고형분을 수득하였다. 용액을 동결건조시켜 황색 고형분을 수득하였다. (2S,6R)-2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)-4-[4-[4-(디플루오로메틸)시클로헥실]-6,7-디메틸-피리도[2,3-d]피리미딘-2-일]-6-메틸-모르폴린(8.1 mg, 0.0155 mmol, 19.40% 수율)을 황색 고형분으로서 수득하였다. LCMS: Rt: 0.843분; m/z: 497.4 [M+H]+. 214 nm에서 97.789% 순도. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 8.03 (br s, 1H), 7.59 - 7.50 (m, 2H), 6.21 - 5.31 (m, 1H), 5.22 - 4.82 (m, 2H), 4.56 (br d, J= 10.5 Hz, 1H), 3.83 - 3.74 (m, 1H), 3.64 - 3.23 (m, 2H), 3.10 - 3.01 (m, 1H), 2.88 - 2.80 (m, 3H), 2.46 - 2.37 (m, 3H), 2.10 - 1.92 (m, 5H), 1.91 - 1.70 (m, 3H), 1.52 - 1.42 (m, 1H), 1.33 (d, J= 6.2 Hz, 3H), 1.26 (br d, J= 4.5 Hz, 1H), 1.14 (br d, J= 1.1 Hz, 2H), 1.02 (br d, J= 6.8 Hz, 2H) HPLC: Rt: 2.761분; 214 nm에서 91.781% 순도.
화합물 I-1313의 합성
단계 1: THF(20 mL) 중 1-브로모-2-플루오로-4-(트리플루오로메톡시)벤젠(1.00 당량, 2000 mg, 7.72 mmol)의 용액에 iPrMgCl·LiCl(1.11 당량, 6.6 mL, 8.54 mmol)을 N2 하에 0℃에서 첨가하였다. 혼합물을 15℃에서 1.5시간 동안 교반하였다. ZnCl2(THF 중 0.5 M, 1.21 당량, 19 mL, 9.38 mmol)를 N2 하에 -78℃에서 첨가하고, 혼합물을 15℃에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 다음 단계에 직접 사용하였다.
단계 2: N2 분위기 하 밀봉된 병에 2,4-디클로로-6,7-디메틸-프테리딘(1.00 당량, 500 mg, 2.18 mmol) 및 Pd(Amphos)Cl2 (0.0500 당량, 77 mg, 0.109 mmol) 및 THF(20 mL)를 채우고, N2로 3회 퍼징한 다음, 0℃로 냉각시키고, 클로로-[2-플루오로-4-(트리플루오로메톡시)페닐]아연(1.50 당량, 19 mL, 3.27 mmol)을 0℃에서 반응 용액에 적가한 다음, 20℃로 가온시키고 0.5시간 동안 교반하였다. 반응 용액이 주황색에서 짙은 자주색으로 변하였다. LCMS는 출발 물질이 10% 남아 있고 목적하는 질량의 69%가 검출되었음을 보여주었다. (373.1, [M+H]+, ESI pos). 반응 용액을 합치고 포화 NH4Cl 용액(100 mL)으로 급냉시킨 다음, EtOAc(100 mL x 2)로 추출하고, 유기물을 감압 하에 증발시켜 잔류물을 수득한 다음, 이를 플래쉬 컬럼(PE:EA = 0 - 40%, PE/EtOAc = 3/1, Rf = 0.5)으로 정제하고, 진공에서 농축시켜 2-클로로-4-(2-플루오로-4-(트리플루오로메톡시)페닐)-6,7-디메틸프테리딘(770 mg, 2.07 mmol, 94.65% 수율)을 황색 고형분으로서 수득하였다. (M+H)+ = 373.0; 순도 = 85% (220 nm). 유지 시간 = 0.872분.1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 7.83 (t, J = 8.1 Hz, 1H), 7.24 (br d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.18 - 7.13 (m, 1H), 2.90 - 2.87 (m, 3H), 2.79 - 2.76 (m, 3H).
단계 3: 1,4-디옥산(40 mL) 및 물(4 mL) 중 1-시클로프로필-4-[(6R)-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)-3,6-디히드로-2H-피란-6-일]피라졸(1.10 당량, 653 mg, 2.07 mmol)，2-클로로-4-[2-플루오로-4-(트리플루오로메톡시)페닐]-6,7-디메틸-프테리딘(1.00 당량, 700 mg, 1.88 mmol) 및 K2CO3 (3.00 당량, 473 mg, 5.63 mmol)의 용액에 Pd(dppf)Cl2 (0.0909 당량, 125 mg, 0.171 mmol)을 20℃에서 첨가하였다. 혼합물을 100℃에서 3시간 동안 교반하였다. LCMS는 출발 물질이 완전히 소모되었고 목적하는 MS(72.3%, MS: 527.2 [M+H]+, ESI pos)를 갖는 주요 피크가 있음을 나타냈다. 반응 혼합물을 EtOAc(100 mL)와 물(100 mL) 사이에서 분리시켰다. 합쳐진 유기층을 Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 미정제 생성물을 실리카 겔 크로마토그래피(PE/EtOAc = 0-100%, PE/EtOAc = 1/1, 목적하는 생성물 Rf = 0.6) 상의 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 (R)-2-(6-(1-시클로프로필-1H-피라졸-4-일)-3,6-디히드로-2H-피란-4-일)-4-(2-플루오로-4-(트리플루오로메톡시)페닐)-6,7-디메틸프테리딘(760 mg, 1.44 mmol, 76.86% 수율)을 갈색 고형분으로서 수득하였다. (M+H)+ = 527.0; 순도 = 96% (220 nm). 유지 시간 = 0.875분.1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 7.83 (t, J = 8.1 Hz, 1H), 7.66 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.52 (d, J = 11.6 Hz, 2H), 7.26 - 7.11 (m, 2H), 5.46 (d, J = 2.6 Hz, 1H), 4.16 - 4.11 (m, 1H), 3.94 (ddd, J = 4.9, 7.0, 11.6 Hz, 1H), 3.56 (tt, J = 3.7, 7.3 Hz, 1H), 3.04 - 2.93 (m, 2H), 2.85 (s, 3H), 2.74 (s, 3H), 1.13 - 1.09 (m, 2H), 1.02 - 0.96 (m, 2H).
단계 4: 메탄올(5 mL) 중 2-[(6R)-6-(1-시클로프로필피라졸-4-일)-3,6-디히드로-2H-피란-4-일]-4-[2-플루오로-4-(트리플루오로메톡시)페닐]-6,7-디메틸-프테리딘(1.00 당량, 100 mg, 0.190 mmol)의 용액에 PtO2 (0.517 당량, 22 mg, 0.0982 mmol)를 N2 분위기 하에 첨가하였다. 혼합물을 H2(15 psi)로 3회 퍼징한 다음, 혼합물을 30℃에서 12시간 동안 교반하였다. LCMS (5-95AB/1.5분): RT = 0.837분, 533.2 = [M+H]+, ESI+는 목적하는 생성물의 98.8%를 나타냈다. 반응 혼합물을 여과하고 감압 하에 농축시켜 미정제 2-((2R)-2-(1-시클로프로필-1H-피라졸-4-일)테트라히드로-2H-피란-4-일)-4-(2-플루오로-4-(트리플루오로메톡시)페닐)-6,7-디메틸-5,6,7,8-테트라히드로프테리딘(101 mg, 0.190 mmol, 100.00% 수율)을 수득하였다. (M+H)+ = 533.2; 순도 = 98.8% (220 nm). 유지 시간 = 0. 837분.
단계 5: DCE(8 mL) 중 2-[(2R)-2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)테트라히드로피란-4-일]-4-[2-플루오로-4-(트리플루오로메톡시)페닐]-6,7-디메틸-5,6,7,8-테트라히드로프테리딘(1.00 당량, 100 mg, 0.188 mmol)의 용액에 MnO2(20.0 당량, 327 mg, 3.76 mmol)를 첨가한 다음, 혼합물을 30℃에서 12시간 동안 교반하였다. LCMS는 출발 물질이 여전히 남아 있고 목적하는 MS(9%, MS: 529.0 [M+H]+, ESI pos)를 갖는 피크를 나타냈다. 반응 혼합물을 여과하고 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였다. DCE(8 mL) 중 잔류물의 혼합물에 MnO2(20.0 당량, 327 mg, 3.76 mmol)를 첨가한 다음, 혼합물을 30℃에서 12시간 동안 교반하였다. LCMS는 일부 출발 물질이 남아 있고 목적하는 MS(21%, MS: 529.0 [M+H]+,ESI pos)를 갖는 피크를 나타냈다. 반응 혼합물을 여과하고 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였다. DCE(8 mL) 중 잔류물의 혼합물에 MnO2(20.0 당량, 327 mg, 3.76 mmol)를 첨가한 다음, 혼합물을 30℃에서 12시간 동안 교반하였다. LCMS는 출발 물질이 목적하는 MS(96%, MS: 529.1 [M+H]+, ESI pos)를 갖는 주요 피크와 함께 소모되었음을 나타냈다. 반응 혼합물을 여과하고, 여액을 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 분취-HPLC(Phenomenex C18 75 x 30mm x 3um;이동상: [물 (0.1% FA)-ACN]; B%: 42%-72%, 9분)로 정제하고 동결건조시켜 65.9 mg을 수득하였다. 2-((2R)-2-(1-시클로프로필-1H-피라졸-4-일)테트라히드로-2H-피란-4-일)-4-(2-플루오로-4-(트리플루오로메톡시)페닐)-6,7-디메틸프테리딘(5.9 mg, 0.0112 mmol, 5.94% 수율)을 전달하고, LCMS (M+H)+ = 529.1; 순도 = 100% (220 nm)로 확인하였다. 유지 시간 = 0.973분.1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 7.80 (t, J = 8.1 Hz, 1H), 7.51 (s, 2H), 7.24 (br d, J = 8.7 Hz, 1H), 7.16 (br d, J = 10.3 Hz, 1H), 4.56 (br d, J = 9.9 Hz, 1H), 4.32 - 4.23 (m, 1H), 3.87 - 3.77 (m, 1H), 3.61 - 3.50 (m, 2H), 2.86 (s, 3H), 2.75 (s, 3H), 2.45 (br d, J = 13.6 Hz, 1H), 2.27 - 2.15 (m, 3H), 1.16 - 1.05 (m, 2H), 1.03 - 0.96 (m, 2H).
단계 6: 2-[(2R)-2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)테트라히드로피란-4-일]-4-[2-플루오로-4-(트리플루오로메톡시)페닐]-6,7-디메틸-프테리딘(1.00 당량, 60 mg, 0.114 mmol)을 SFC[컬럼: Chiralcel OD-3 50×4.6 mm I.D., 3 um 이동상: CO2의 경우 상 A, 및 MeOH(0.05% DEA)의 경우 상 B; 구배 용리: CO2 중 MeOH (0.05% DEA) 5% 내지 40% 유속: 3 mL/분; 검출기: PDA 컬럼 온도: 35C ; 배압: 100Bar]로 정제하여 2-((2R,4S)-2-(1-시클로프로필-1H-피라졸-4-일)테트라히드로-2H-피란-4-일)-4-(2-플루오로-4-(트리플루오로메톡시)페닐)-6,7-디메틸프테리딘(28 mg, 0.0525 mmol, 46.20% 수율)을 회백색 고형분으로서 수득하고, LCMS (M+H)+ = 529.3; 순도 = 99% (220 nm)로 확인하였다. 유지 시간 = 0.979분. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 7.80 (t, J = 8.1 Hz, 1H), 7.52 (s, 2H), 7.24 (br d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.16 (br d, J = 9.9 Hz, 1H), 4.56 (dd, J = 1.8, 11.4 Hz, 1H), 4.27 (td, J = 3.1, 11.2 Hz, 1H), 3.86 - 3.78 (m, 1H), 3.60 - 3.51 (m, 2H), 2.86 (s, 3H), 2.75 (s, 3H), 2.45 (br d, J = 13.4 Hz, 1H), 2.24 - 2.17 (m, 3H), 1.13 - 1.08 (m, 2H), 1.03 - 0.98 (m, 2H).
화합물 I-1318의 합성
단계 1: MeCN(250 mL) 중 4-브로모-3-플루오로-페놀(1.00 당량, 5000 mg, 26.2 mmol)의 혼합물에 H2O(60 mL) 중 KOH(10.0 당량, 14688 mg, 262 mmol)를 첨가한 다음, 1-[[브로모(디플루오로)메틸]-에톡시-포스포릴]옥시에탄(4.00 당량, 27959 mg, 105 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 30℃에서 12시간 동안 교반하였다. LCMS는 출발 물질이 완전히 소모되었고 하나의 주요 피크가 검출되었음을 나타냈다(질량 신호 없음). 혼합물을 100 mL H2O로 희석하고, EA(100 mL * 3)로 추출하고, 합쳐진 유기층을 무수 Na2SO4로 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 실리카 컬럼 크로마토그래피(PE:EA = 1:0 내지 3:1, TLC (DP): PE:EA = 3:1, Rf = 0.5)로 정제하여 1-브로모-4-(디플루오로메톡시)-2-플루오로-벤젠(4200 mg, 17.4 mmol, 66.57% 수율)을 무색 오일로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 7.55 (dd, J = 7.8, 8.7 Hz, 1H), 6.97 (dd, J = 2.70, 9.0 Hz, 1H), 6.90 - 6.82 (m, 1H), 6.73 - 6.31 (m, 1H).
단계 2: THF(20 mL) 중 1-브로모-4-(디플루오로메톡시)-2-플루오로-벤젠(1.00 당량, 2000 mg, 8.30 mmol)의 용액에 iPrMgCl·LiCl(1.11 당량, 7.1 mL, 9.18 mmol)을 N2 하에 0℃에서 첨가하였다. 혼합물을 15℃에서 1.5시간 동안 교반하였다. N2 하에 -78℃에서 ZnCl2(THF 중 0.5 M, 1.21 당량, 20 mL, 10.1 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 15℃에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 다음 단계에 직접 사용하였다.
단계 3: N2 분위기 하 밀봉된 병에 2,4-디클로로-6,7-디메틸-프테리딘(1.00 당량, 500 mg, 2.18 mmol) 및 PdCl2(Amphos)(0.0500 당량, 77 mg, 0.109 mmol) 및 THF(5 mL)를 채우고, N2로 3회 퍼징한 다음, 0℃로 냉각시키고, 클로로-[4-(디플루오로메톡시)-2-플루오로-페닐]아연(1.30 당량, 16 mL, 2.84 mmol)을 0℃에서 반응 용액에 적가한 다음, 25℃로 가온시키고 1시간 동안 교반하였다. 반응 용액이 주황색에서 짙은 자주색으로 변하였고, LCMS는 목적하는 생성물의 75%가 검출되었음을 나타냈다(MS: 355.1 [M+H]+, ESI pos , RT = 0.911분). 반응 용액을 포화 NH4Cl 용액(100 mL)으로 급냉시키고, EtOAc(150 mL * 3)로 추출하고, 합쳐진 유기층을 무수 Na2SO4로 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 플래쉬 컬럼(PE:EA = 1:0 내지 1:1, TLC (DP): PE:EA = 1:1, Rf = 0.5)으로 정제하고 감압 하에 농축시켜 2-클로로-4-[4-(디플루오로메톡시)-2-플루오로-페닐]-6,7-디메틸-프테리딘(600 mg, 1.69 mmol, 77.50% 수율)을 황색 고형분으로서 수득하고, LCMS(355.1 [M+H]+, ESI pos, RT = 0.897분)로 확인하였다. LCMS: 355.1 [M+H]+, ESI pos , RT = 0.897분. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 7.81 (t, J = 8.10 Hz, 1H), 7.19 - 7.10 (m, 1H), 7.09 - 7.02 (m, 1H), 6.85 - 6.44 (m, 1H), 2.86 (s, 3H), 2.76 (s, 3H).
단계 4: 1,4-디옥산(30 mL) 및 물(3 mL) 중 1-시클로프로필-4-[(6R)-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)-3,6-디히드로-2H-피란-6-일]피라졸(1.15 당량, 595 mg, 1.88 mmol), 2-클로로-4-[4-(디플루오로메톡시)-2-플루오로-페닐]-6,7-디메틸-프테리딘(1.00 당량, 580 mg, 1.64 mmol) 및 K2CO3 (3.00 당량, 412 mg, 4.91 mmol)의 용액에 Pd(dppf)Cl2·DCM(0.120 당량, 144 mg, 0.196 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 N2 분위기 하 80℃에서 12시간 동안 교반하였다. LCMS는 출발 물질이 완전히 소모되었고 목적하는 생성물의 85%가 검출되었음을 나타냈다(509.2, [M+H]+, ESI+, RT = 0.955분). 반응 혼합물을 250 mL H2O에 붓고, EA(150 mL×3)로 추출하고, 합쳐진 유기층을 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 실리카 컬럼 크로마토그래피(PE:EA = 1:0 내지 0:1, TLC(DP): PE:EA = 1:1, Rf = 0.3)로 정제하여 4-[4-(디플루오로메톡시)-2-플루오로-페닐]-6,7-디메틸-2-[(6R)-6-(1-시클로프로필피라졸-4-일)-3,6-디히드로-2H-피란-4-일]프테리딘(600 mg, 1.18 mmol, 72.16% 수율)을 적색 고형분으로서 수득하였다, LCMS: (509.2, [M+H]+, ESI+, RT = 0.950분). LCMS: 509.2, [M+H]+, ESI+, RT = 0.950분. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 7.80 (t, J = 8.1 Hz, 1H), 7.66 (d, J = 2.3 Hz, 1H), 7.52 (d, J = 12.6 Hz, 2H), 7.12 (dd, J = 2.1, 8.5 Hz, 1H), 7.05 (dd, J = 2.2, 10.3 Hz, 1H), 6.83 - 6.44 (m, 1H), 5.46 (d, J = 2.6 Hz, 1H), 4.16 - 4.12 (m, 1H), 3.94 (ddd, J = 4.9, 6.9, 11.6 Hz, 1H), 3.57 (tt, J = 3.7, 7.3 Hz, 1H), 3.02 - 2.94 (m, 2H), 2.85 (s, 3H), 2.74 (s, 3H), 1.15 - 1.09 (m, 2H), 1.03 - 0.96 (m, 2H)).
단계 5: 에탄올(20 mL) 중 2-[(6R)-6-(1-시클로프로필피라졸-4-일)-3,6-디히드로-2H-피란-4-일]-4-[4-(디플루오로메톡시)-2-플루오로-페닐]-6,7-디메틸-프테리딘(1.00 당량, 500 mg, 0.983 mmol)의 용액에 PtO2(0.515 당량, 115 mg, 0.506 mmol)를 N2 분위기 하에 첨가하였다. 혼합물을 H2(15 psi)로 3회 퍼징한 다음, 혼합물을 H2(15 psi) 하에 30℃에서 12시간 동안 교반하였다. LCMS는 출발 물질이 완전히 소모되었고 하나의 주요 피크(목적하는 생성물)가 검출되었음을 나타냈다(515.2, [M+H]+, ESI+, RT = 0.950분). 혼합물을 여과하고, 필터 케이크를 EtOH(20 mL×3)로 세척하고, 합쳐진 유기층을 감압 하에 농축시켜 2-[(2R)-2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)테트라히드로피란-4-일]-4-[4-(디플루오로메톡시)-2-플루오로-페닐]-6,7-디메틸-5,6,7,8-테트라히드로프테리딘(500 mg, 0.972 mmol, 98.83% 수율)을 황색 고형분으로서 수득하고, 생성물을 다음 단계에 직접 사용하였다. LCMS: 515.2, [M+H]+, ESI+, RT = 0.950분.
단계 6: DCE(80 mL) 중 2-[(2R)-2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)테트라히드로피란-4-일]-4-[4-(디플루오로메톡시)-2-플루오로-페닐]-6,7-디메틸-5,6,7,8-테트라히드로프테리딘(1.00 당량, 500 mg, 0.972 mmol)의 용액에 MnO2(20.0 당량, 1690 mg, 19.4 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 30℃에서 12시간 동안 교반하였다. LCMS는 50%의 중간 생성물(513.2, [M+H]+, ESI+, RT = 0.805분) 및 37%의 목적하는 생성물(511.2, [M+H]+, ESI+, RT = 0.935분)이 검출되었음을 나타냈다. 혼합물을 여과한 다음, 유기층을 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 DCE(80 mL)에 재용해시키고, MnO2 (20.0 당량, 1690 mg, 19.4 mmol)를 첨가한 다음, 혼합물을 30℃에서 12시간 동안 교반하였다. LCMS는 22%의 중간 생성물(513.2, [M+H]+, ESI+, RT = 0.805분) 및 64%의 목적하는 생성물(511.2, [M+H]+, ESI+, RT = 0.935분)이 검출되었음을 나타냈다. 혼합물을 30℃에서 다른 12시간 동안 교반하였다. LCMS는 95%의 목적하는 생성물(511.2, [M+H]+, ESI+, RT=0.935분)이 검출되었음을 나타냈다. 혼합물을 여과하고 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 분취-HPLC(Phenomenex luna C18 150 * 40mm * 15um, 물(FA)-ACN)로 정제하고 동결건조시켜 2-[(2R,4S)-2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)테트라히드로피란-4-일]-4-[4-(디플루오로메톡시)-2-플루오로-페닐]-6,7-디메틸-프테리딘(290 mg, 0.568 mmol, 58.46% 수율)을 황색 고형분으로서 수득하였다, LCMS (511.2, [M+H]+, ESI+, RT=0.938분). SFC는 90.5% ee를 나타냈다. LCMS: 511.2, [M+H]+, ESI+, RT = 0.938분. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 7.78 (t, J = 8.1 Hz, 1H), 7.51 (s, 2H), 7.13 (dd, J = 2.0, 8.5 Hz, 1H), 7.06 (dd, J = 2.2, 10.3 Hz, 1H), 6.84 - 6.41 (m, 1H), 4.56 (dd, J = 1.9, 11.4 Hz, 1H), 4.27 (td, J = 3.1, 11.2 Hz, 1H), 3.88 - 3.77 (m, 1H), 3.61 - 3.49 (m, 2H), 2.89 - 2.82 (m, 3H), 2.74 (s, 3H), 2.45 (br d, J = 13.4 Hz, 1H), 2.28 - 2.22 (m, 1H), 2.21 - 2.13 (m, 2H), 1.15 - 0.91 (m, 4H).
단계 7: 생성물(80 mg)을 SFC(컬럼: Chiralpak AD-3 50×4.6mm I.D., 3um 이동상: CO2의 경우 상 A, 및 EtOH(0.05% DEA)의 경우 상 B; 구배 용리: CO2 중의 EtOH (0.05% DEA) 5% 내지 40% 유속: 3mL/분; 검출기: PDA 컬럼 온도: 35C; 배압: 100Bar ")로 정제하고 동결건조시켜 2-[(2R,4S)-2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)테트라히드로피란-4-일]-4-[4-(디플루오로메톡시)-2-플루오로-페닐]-6,7-디메틸-프테리딘(47 mg, 0.0910 mmol, 58.08% 수율)을 백색 고형분으로서 수득하였다, LCMS: (511.2, [M+H]+, ESI+, RT=0.936분). SFC는 100% ee를 나타냈다. LCMS: 511.2, [M+H]+, ESI+, RT = 0.936분. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 7.78 (t, J = 8.1 Hz, 1H), 7.51 (d, J = 1.4 Hz, 2H), 7.13 (dd, J = 1.9, 8.4 Hz, 1H), 7.08 - 7.03 (m, 1H), 6.85 - 6.42 (m, 1H), 4.56 (dd, J = 1.9, 11.4 Hz, 1H), 4.27 (td, J = 3.0, 11.1 Hz, 1H), 3.88 - 3.73 (m, 1H), 3.61 - 3.49 (m, 2H), 2.45 (br d, J = 13.3 Hz, 1H), 2.27 - 2.17 (m, 3H), 1.14 - 1.07 (m, 2H), 1.03 - 0.95 (m, 2H).
화합물 I-1323의 합성
단계 1: THF(200 mL) 중 2,4,6-트리클로로-5-니트로-피리미딘(1.00 당량, 13.00 g, 56.9 mmol)의 용액에 MeOH(1.70당량, 14 mL, 96.8 mmol) 중 NH3의 용액을 -65℃에서 적가하였다. 반응물을 -65℃에서 3시간 동안 교반하였다. LCMS (5-95AB/1.5분): RT = 0.510분, 209.0 = [M+H]+, ESI+는 목적하는 생성물의 74.3%를 나타냈다. 반응 혼합물을 빙초산으로 pH = 5 내지 6으로 조정하였다. 반응 혼합물을 감압 하에 농축시켜 미정제 생성물 2, 6-디클로로-5-니트로-피리미딘-4-아민(15.30 g, 54.2 mmol, 95.19% 수율)을 황색 고형분으로서 수득하였다. 미정제 생성물을 추가 정제 없이 다음 단계에서 사용하였다.
단계 2: 에탄올(150 mL) 및 물(30 mL) 중 2,6-디클로로-5-니트로-피리미딘-4-아민(1.00 당량, 15.30 g, 54.2 mmol)의 용액에 Fe(5.00 당량, 15128 mg, 271 mmol) 및 NH4Cl(6.00 당량, 17387 mg, 325 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 60℃에서 12시간 동안 교반하였다. TLC(PE: EtOAc = 0:1)는 출발 물질이 소모되었고 목적하는 생성물이 형성되었음을 나타냈다(Rf = 0.45). 반응물을 MeOH(500 mL)로 희석하고 30분 동안 교반하였다. 현탁액을 셀라이트 패드를 통해 여과하였다. 필터 케이크를 MeOH(200 mL)로 세척하였다. 여액을 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 물(100 mL)로 희석한 다음, 에틸 아세테이트(100 mL×3)로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 염수로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 PE/EtOAc(1:1 내지 1:3)(TLC, PE: EtOAc = 0:1, Rf = 0.45)로 용리하는 실리카 겔 상의 플래쉬 크로마토그래피로 정제하여 2,6-디클로로피리미딘-4,5-디아민(6.40 g, 33.1 mmol, 61.11% 수율)을 황색 고형분으로서 수득하였다. LCMS: Rt: 0.250분; [M+H]+ = 179.0; 220 nm에서 92.6% 순도.
단계 3: DCE(60 mL) 중 2-옥소프로판알(2.50 당량, 1006 mg, 14.0 mmol)의 용액에 CaSO4(3.00 당량, 2281 mg, 16.8 mmol)에 이어서 2,6-디클로로피리미딘-4,5-디아민(1.00 당량, 1000 mg, 5.59 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 25℃에서 48시간 동안 교반하였다. LCMS (5-60AB/1.5분): RT = 0.786분, 215.0 = [M+H]+, ESI+는 목적하는 생성물 MS의 97.4%를 나타냈다. 반응물을 EtOAc(100 mL)로 희석한 다음, 셀라이트 패드를 통해 여과하였다. 필터 케이크를 MeOH(100 mL) 및 EtOAc(100 mL) 및 DCM(100 mL)으로 세척하였다. 합쳐진 여액을 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 PE/EtOAc (3:1)(TLC, PE: EtOAc = 3:1, Rf = 0.40)로 용리하는 실리카 겔 상의 플래쉬 크로마토그래피로 정제하여 2,4-디클로로-7-메틸-프테리딘(1000 mg, 4.65 mmol, 83.24% 수율)을 황색 고형분으로서 수득하였다. LCMS: Rt: 0.802분; [M+H]+ = 215.0; 220 nm에서 99.1% 순도.
단계 4: 3목에 2,4-디플루오로-1-요오도-벤젠(1.00 당량, 6000 mg, 25.0 mmol)을 채우고, 플래쉬를 밀봉하고 N2로 3회 퍼징하고, THF(60 mL)를 첨가하고, 용액을 교반하면서 -40℃로 냉각시켰다. iPrMgCl.LiCl(THF 중 1.3 M)(1.10 당량, 21 mL, 27.5 mmol)을 -40℃에서 적가하고, 혼합물을 이 온도에서 30분 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 -60℃로 추가로 냉각시키고 ZnCl2(THF 중 0.5 M) (1.00 당량, 50 mL, 25.0 mmol)를 적가하고, 상기 반응 용액이 백색 플록으로 변하였고, 반응 혼합물을 실온으로 서서히 가온시키고 1시간 동안 교반하였다. 혼합물을 추가의 후처리 및 정제 없이 직접 사용하였다.
단계 5: N2 분위기 하 밀봉된 병에 2,4-디클로로-7-메틸-프테리딘(1.00 당량, 1000 mg, 4.65 mmol) 및 PdCl2(Amphos)(0.0600 당량, 198 mg, 0.279 mmol) 및 THF(10 mL)를 채우고, N2로 3회 퍼징한 다음, 0℃로 냉각시키고, 클로로-(2,4-디플루오로페닐)아연(1.10 당량, 19 mL, 5.12 mmol)을 0℃에서 반응 용액에 적가한 다음, 25℃로 가온시키고, 2시간 동안 교반하였다. LCMS (5-95AB/1.5분): RT = 0.846분, 293.0 = [M+H]+, ESI+는 목적하는 생성물의 61.8%를 나타냈다. 반응물을 물(50 mL)로 희석한 다음, 에틸 아세테이트(50 mL×3)로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 염수로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 PE/EtOAc (3:1)(TLC, PE: EtOAc = 3:1, Rf = 0.45)로 용리하는 실리카 겔 상의 플래쉬 크로마토그래피로 정제하여 2-클로로-4-(2,4-디플루오로페닐)-7-메틸-프테리딘(915 mg, 2.59 mmol, 55.80% 수율)을 갈색 고형분으로서 수득하였다. LCMS: Rt: 0.849분; [M+H]+ = 293.0; 220 nm에서 83.2% 순도.
단계 6: 1,4-디옥산(30 mL) 및 물(3 mL) 중 2-클로로-4-(2,4-디플루오로페닐)-7-메틸-프테리딘(1.00 당량, 860 mg, 2.35 mmol), Pd(dppf)Cl2·DCM (0.120 당량, 206 mg, 0.282 mmol) 및 K2CO3 (3.00 당량, 975 mg, 7.05 mmol)의 용액에 Pd(dppf)Cl2·DCM(0.120 당량, 206 mg, 0.282 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 N2 분위기 하에 80℃에서 5시간 동안 교반하였다. LCMS (5-95AB/1.5분): RT = 0.652분, 447.0 = [M+H]+, ESI+는 목적하는 생성물의 28.9%를 나타냈다. 반응 혼합물을 와 합하여 추가 정제를 수행하였다. 반응물을 물(100 mL)로 희석한 다음, 에틸 아세테이트(100 mL×3)로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 염수로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 PE/EtOAc (1:3) (TLC, PE: EtOAc = 0:1, Rf = 0.50)로 용리하는 실리카 겔 상의 플래쉬 크로마토그래피로 정제하여 4-(2,4-디플루오로페닐)-7-메틸-2-[rac-(6R)-6-(1-시클로프로필피라졸-4-일)-3,6-디히드로-2H-피란-4-일]프테리딘(500 mg, 0.999 mmol, 42.50% 수율)을 자주색 고형분으로서 수득하였다. LCMS: Rt: 0.648분; [M+H]+ = 447.0; 220 nm에서 89.2% 순도.
단계 7: 메탄올(20 mL) 중 2-[(6R)-6-(1-시클로프로필피라졸-4-일)-3,6-디히드로-2H-피란-4-일]-4-(2,4-디플루오로페닐)-7-메틸-프테리딘(1.00 당량, 500 mg, 1.12 mmol)의 용액에 PtO2(0.492 당량, 125 mg, 0.551 mmol)를 N2 분위기 하에 첨가하였다. 혼합물을 H2(15 psi)로 3회 퍼징한 다음, 혼합물을 H2(15 psi) 하에 30℃에서 48시간 동안 교반하였다. LCMS (5-95AB/1.5분): RT = 0.760분, 453.2 = [M+H]+, ESI+는 목적하는 생성물의 98%를 나타냈고 HPLC(10-80AB/1.5분): RT = 1.433분, 목적하는 생성물의 86.8%를 나타냈다. 반응 혼합물을 셀라이트 패드를 통해 여과하였다. 필터 케이크를 MeOH(100 mL) 및 EtOAc(100 mL)로 세척하였다. 여액을 감압 하에 농축시켜 미정제 생성물 미정제 생성물 2-[(2R)-2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)테트라히드로피란-4-일]-4-(2,4-디플루오로페닐)-7-메틸-5,6,7,8-테트라히드로프테리딘(520 mg, 0.997 mmol, 89.07% 수율)을 황색 검으로서 수득하였다. 미정제 생성물을 추가 정제 없이 다음 단계에서 사용하였다.
단계 8: DCE(50 mL) 중 2-[(2R)-2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)테트라히드로피란-4-일]-4-(2,4-디플루오로페닐)-7-메틸-5,6,7,8-테트라히드로프테리딘(1.00 당량, 400 mg, 0.767 mmol)의 용액에 MnO2 (25.0 당량, 1668 mg, 19.2 mmol)를 30℃에서 첨가하고 16시간 동안 교반하였다. LCMS (5-95AB/1.5분): RT = 0.890분, 449.2 = [M+H]+, ESI+는 목적하는 생성물의 12.8%를 나타냈고, RT = 0.766분, 453.2 = [M+H]+, ESI+는 출발 물질의 19.7%를 나타냈다. 반응 혼합물을 셀라이트 패드를 통해 여과하였다. 필터 케이크를 DCM(80 mL)으로 세척하였다. 여액을 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 DCE(40 mL)에 용해시키고 MnO2(25.0당량, 1668 mg, 19.2 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 30℃에서 16시간 동안 교반하였다. LCMS (5-95AB/1.5분): RT = 0.891분, 449.2 = [M+H]+, ESI+는 목적하는 생성물의 46.2%를 나타냈다. 반응 혼합물을 셀라이트 패드를 통해 여과하였다. 필터 케이크를 DCM(80 mL)으로 세척하였다. 여액을 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 [석유 에테르]/[에틸 아세테이트](1:2 내지 1:3)로 용리하는 실리카 겔 상의 플래쉬 크로마토그래피로 정제하여 2-[(2R)-2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)테트라히드로피란-4-일]-4-(2,4-디플루오로페닐)-7-메틸-프테리딘(155 mg, 0.290 mmol, 37.84% 수율)을 황색 고형분으로서 수득하였다. LCMS: Rt: 0.889분; [M+H]+ = 449.2; 220 nm에서 83.4% 순도. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 0.96 - 1.02 (m, 2 H) 1.08 - 1.12 (m, 2 H) 2.18 - 2.25 (m, 3 H) 2.46 (br d, J=13.51 Hz, 1 H) 2.91 (s, 3 H) 3.53 - 3.61 (m, 2 H) 3.78 - 3.87 (m, 1 H) 4.28 (dt, J=11.16, 3.17 Hz, 1 H) 4.52 - 4.62 (m, 1 H) 6.98 - 7.06 (m, 1 H) 7.11 (td, J=8.25, 1.88 Hz, 1 H) 7.51 (d, J=1.50 Hz, 2 H) 7.72 - 7.80 (m, 1 H) 8.75 - 8.92 (m, 1 H).
단계 9: 25℃에서 DMSO(3 mL) 중 2-[(2R)-2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)테트라히드로피란-4-일]-4-(2,4-디플루오로페닐)-7-메틸-프테리딘(1.00 당량, 100 mg, 0.223 mmol) 및 아연 디플루오로메탄설피네이트(4.00 당량, 262 mg, 0.892 mmol)의 용액에 터트-부틸히드로퍼옥시드(7.00 당량, 201 mg, 1.56 mmol)를 격렬하게 교반하며 첨가하고 N2로 30초 동안 버블링하였다. 반응 용액을 25℃에서 12시간 동안 교반하였다. LCMS (5-95AB/1.5분): RT = 0.685분, 499.0 = [M+H]+, ESI+는 목적하는 생성물의 42%를 나타냈다. 합쳐진 반응 용액을 역 컬럼([Phenomenex luna C18]; 이동상: [ACN] 및 [H2O] (조건: [물 (0.1%FA)-ACN], B%: 85%-90%; 검출기, UV 254 nm)으로 정제하고 동결건조시켜 미정제물(50 mg)을 수득하였고, 이는 LCMS (5-95AB/1.5분): RT = 0.683분, 449.1 = [M+H]+, ESI+는 미정제 생성물의 92.6%를 나타냈다. 미정제 생성물을 SFC(컬럼: OD 50×4.6mm I.D., 3um; 이동상: CO2의 경우 상 A,및 MeOH (0.05%DEA)의 경우 상 B; 구배 용리: CO2 중의 MeOH (0.05% DEA) 5% 내지 40%; 유속: 3 mL/분; 검출기: PDA; 컬럼 온도: 35C; 배압: 100 Bar)로 추가로 정제하였다. 2-[(2R,4S)-2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)테트라히드로피란-4-일]-6-(디플루오로메틸)-4-(2,4-디플루오로페닐)-7-메틸-프테리딘(9.5 mg, 0.0188 mmol, 8.43% 수율)을 황색 고형분으로서 수득하였다. LCMS: Rt: 0.654분; [M+H]+ = 449.2; 220 nm에서 99.0% 순도 및 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 0.95 - 1.03 (m, 2 H) 1.07 - 1.16 (m, 2 H) 2.16 - 2.28 (m, 3 H) 2.46 (br d, J=13.26 Hz, 1 H) 3.06 (s, 3 H) 3.52 - 3.65 (m, 2 H) 3.76 - 3.89 (m, 1 H) 4.28 (dt, J=11.26, 3.13 Hz, 1 H) 4.57 (dd, J=11.38, 1.88 Hz, 1 H) 6.58 - 6.91 (m, 1 H) 6.99 - 7.06 (m, 1 H) 7.12 (td, J=8.10, 2.06 Hz, 1 H) 7.51 (d, J=2.75 Hz, 2 H) 7.78 (td, J=8.16, 6.44 Hz, 1 H).
화합물 I-1333 및 I-1334의 합성
단계 1: DCM (30 mL) 중 (2,2-디메틸-1,3-디옥솔란-4-일)메탄아민(1.00 당량, 1000 mg, 7.62 mmol)의 용액에 TEA(3.00 당량, 3.2 mL, 22.9 mmol)를 첨가하였다. 그런 다음, TsCl(1.20 당량, 1738 mg, 9.15 mmol)을 0℃에서 혼합물에 첨가하였다. 반응물을 25℃에서 12시간 동안 교반하였다. LCMS는 원료가 완전히 소모되었음을 나타냈고, 주요 피크는 목적하는 MS(M+H)+ = 286.1; 순도 = 99.768%(220 nm)를 나타냈다. 유지 시간 = 0.816분. 반응물에 물(50 mL)을 첨가한 다음, 농축 건조 전에 유기물을 분리하고 건조시켜(Na2SO4) N-[(2,2-디메틸-1,3-디옥솔란-4-일)메틸]-4-메틸-벤젠설폰아미드(2.00 g, 7.01 mmol, 91.93% 수율)를 백색 고형분으로서 수득하였다. LCMS: (M+H)+ = 286.1; 순도 = 99.768% (220 nm). 유지 시간 = 0.816분. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 7.77 - 7.73 (m, 2H), 7.35 - 7.30 (m, 2H), 4.79 - 4.70 (m, 1H), 4.22 - 4.16 (m, 1H), 4.03 - 3.97 (m, 1H), 3.72 - 3.66 (m, 1H), 3.18 - 3.11 (m, 1H), 3.01 - 2.93 (m, 1H), 2.49 - 2.40 (m, 3H), 1.38 - 1.34 (m, 3H), 1.33 - 1.30 (m, 3H).
단계 2: HCl/MeOH (4 M, 22.8 당량, 38 mL, 152 mmol) 중 N-[(2,2-디메틸-1,3-디옥솔란-4-일)메틸]-4-메틸-벤젠설폰아미드(1.00 당량, 1900 mg, 6.66 mmol)의 용액에 25℃에서 1시간 동안 교반하였다. LCMS는 원료가 소모되었음을 나타냈고, 주요 피크는 목적하는 MS(M+H)+ = 246.1; 순도 = 96.23%(220 nm)를 나타냈다. 유지 시간 = 0.628분. 반응물을 진공에서 농축시켜 미정제 잔류물 N-(2,3-디히드록시프로필)-4-메틸-벤젠설폰아미드(1.60 g, 6.52 mmol, 97.96% 수율)를 적색 고형분으로서 수득하였다. MS (M+H)+ = 246.1; 순도 = 96.23% (220 nm). 유지 시간 = 0.628분.
단계 3: THF(25 mL) 중 N-(2,3-디히드록시프로필)-4-메틸-벤젠설폰아미드(1.00 당량, 1500 mg, 6.11 mmol)의 용액에 이미다졸(1.00 당량, 416 mg, 6.11 mmol)을 첨가한 다음, TBSCl(1.00 당량, 922 mg, 6.11 mmol)을 0℃에서 혼합물에 첨가하고, 혼합물을 25℃에서 5시간 동안 교반하였다. LCMS는 원료가 대부분 소모되었음을 나타냈고, 주요 피크는 목적하는 MS(M+H)+ = 360.1; 순도 = 65.12%(220 nm)를 나타냈다. 유지 시간 = 0.998분). 반응물을 합치고 물(50 mL)을 첨가한 다음, EtOAc(30 mL * 2)로 추출하고, 유기물을 10 mL 포화 염수 용액으로 세척하였다. 그런 다음, 유기물을 분리하고, 농축 건조 전에 건조시켰다(Na2SO4). 그런 다음, 미정제물을 실리카 겔 컬럼(PE/EA = 2/1, Rf = 0.4)으로 정제하여 N-[3-[터트-부틸(디메틸)실릴]옥시-2-히드록시-프로필]-4-메틸-벤젠설폰아미드(1500 mg, 4.17 mmol, 68.22% 수율)를 연황색 고형분으로서 수득하였다. MS (M+H)+ = 360.1; 순도 = 65.12% (220 nm). 유지 시간 = 0.998분. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 7.77 - 7.72 (m, 2H), 7.34 - 7.28 (m, 2H), 5.16 - 4.98 (m, 1H), 3.77 - 3.69 (m, 1H), 3.63 - 3.49 (m, 2H), 3.16 - 3.07 (m, 1H), 2.97 - 2.87 (m, 1H), 2.65 - 2.54 (m, 1H), 2.48 - 2.35 (m, 3H), 0.95 - 0.80 (m, 9H), 0.09 - 0.01 (m, 6H).
단계 4: 아세톤(30 mL) 중 N-[3-[터트-부틸(디메틸)실릴]옥시-2-히드록시-프로필]-4-메틸-벤젠설폰아미드(1.00 당량, 1000 mg, 2.78 mmol) 및 2-클로로-1-(1-시클로프로필피라졸-4-일)에타논(1.10 당량, 565 mg, 3.06 mmol)의 용액에 K2CO3(3.00 당량, 1153 mg, 8.34 mmol) 및 KI(1.00 당량, 462 mg, 2.78 mmol)를 첨가한 다음, 혼합물을 30℃에서 12시간 동안 교반하였다. LCMS는 원료가 소모되었음을 나타냈고, 주요 피크는 목적하는 MS를 나타냈다(M-18+H = 490.2; 순도 = 45.95%. 유지 시간 = 1.026분. 반응물에 물(50 mL)을 첨가한 다음, EtOAc(20 mL * 3)로 추출하고, 유기물을 10 mL 포화 염수 용액으로 세척하였다. 그런 다음, 유기물을 분리하고, 농축 건조 전에 건조시켰다(Na2SO4). 그런 다음, 미정제물을 실리카 겔 컬럼(PE/EA = 1/1, Rf = 0.5)으로 정제하여 N-[3-[터트-부틸(디메틸)실릴]옥시-2-히드록시-프로필]-N-[2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)-2-옥소-에틸]-4-메틸-벤젠설폰아미드(600 mg, 1.18 mmol, 42.49% 수율)를 연황색 고형분으로서 수득하였다 MS (M-18+H)+ = 490.2; 순도 = 45.95% (220 nm). 유지 시간 = 1.026분. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 8.07 - 8.03 (m, 1H), 7.93 - 7.89 (m, 1H), 7.76 - 7.72 (m, 2H), 7.35 - 7.29 (m, 2H), 4.62 - 4.54 (m, 2H), 3.83 - 3.73 (m, 2H), 3.65 (tt, J = 3.8, 7.4 Hz, 1H), 3.60 - 3.49 (m, 3H), 3.46 - 3.33 (m, 1H), 3.29 - 3.16 (m, 2H), 2.45 - 2.43 (m, 3H), 0.88 - 0.86 (m, 1H), 0.86 - 0.83 (m, 9H), 0.04 - 0.02 (m, 6H).
단계 5: DCM(20 mL) 중 N-[2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)-2-옥소-에틸]-N-[2-히드록시-3-[이소프로필(디메틸)실릴]옥시-프로필]-4-메틸-벤젠설폰아미드(1.00 당량, 780 mg, 1.58 mmol)의 용액에 트리에틸실란(5.00 당량, 916 mg, 7.90 mmol) 및 트리메틸실릴 트리플루오로메탄설포네이트(5.00 당량, 1.4 mL, 7.90 mmol)를 0℃에서 첨가한 다음, 30℃에서 16시간 동안 교반하였다. LCMS는 원료가 소모되었음을 나타냈고, 주요 피크는 목적하는 MS(M+H)+ = 376.1; 순도 = 90.11%(220 nm)를 나타냈다. 유지 시간 = 0.837분). 반응물에 물(20 mL)을 첨가한 다음, DCM(10 mL * 2)으로 추출하고, 유기물을 10 mL 포화 염수 용액으로 세척하였다. 그런 다음, 유기물을 분리하고, 농축 건조 전에 건조시켜(Na2SO4) 600 mg의 미정제 생성물을 수득하고, 정제 없이 다음 단계에 사용하였다. MS (M+H)+ = 376.1; 순도 = 90.11% (220 nm). 유지 시간 = 0.837분.
단계 6: 메탄올(10 mL) 중 [6-(1-시클로프로필피라졸-4-일)-4-(p-톨일설포닐)모르폴린-2-일]메탄올(1.00 당량, 200 mg, 0.530 mmol)의 용액에 Mg(분말)(15.7 당량, 200 mg, 8.33 mmol) 및 Mg(칩)(15.7 당량, 200 mg, 8.33 mmol)을 25℃에서 첨가한 다음, 혼합물을 80℃에서 16시간 동안 교반하였다. LCMS는 가장 많은 원료가 소모되었음을 나타냈고, 주요 피크는 목적하는 MS(M+H)+ = 224.1; 순도 = 92.29%(220 nm)를 나타냈다. 유지 시간 = 0.248분). MeOH(20 mL)를 첨가한 다음 여과하였다. 여액을 진공에서 농축시켜 미정제 [6-(1-시클로프로필피라졸-4-일)모르폴린-2-일]메탄올(200 mg, 0.896 mmol, 169.06% 수율)을 백색 고형분으로서 수득하였다. LCMS (M+H)+ = 224.1; 순도 = 92.29% (220 nm). 유지 시간 = 0.248분.
단계 7: DMSO(2 mL) 중 [6-(1-시클로프로필피라졸-4-일)모르폴린-2-일]메탄올(1.00당량, 200 mg, 0.896 mmol)의 용액에 2-클로로-4-(2,4-디플루오로페닐)-6,7-디메틸-프테리딘(1.20당량, 330 mg, 1.07 mmol) 및 DIEA(3.00당량, 347 mg, 2.69 mmol)를 첨가한 다음, 혼합물을 100℃에서 20분 동안 교반하였다. LCMS는 원료가 소모되었음을 나타냈고, 주요 피크는 목적하는 MS(M+H)+ = 494.2; 순도 = 60.85%(220 nm)를 나타냈다. 유지 시간 = 0.894분). 반응물에 물 20 mL를 첨가한 다음, EtOAc(5 mL * 3)로 추출하고, 유기물을 5 mL 포화 염수 용액으로 세척하였다. 그런 다음, 유기물을 분리하고, 농축 건조 전에 건조시켰다(Na2SO4). 그런 다음, 미정제물을 분취-HPLC(Phenomenex luna C18 150 * 25 mm * 10 um, 물(FA)-ACN))로 정제하고 동결건조시켜 [6-(1-시클로프로필피라졸-4-일)-4-[4-(2,4-디플루오로페닐)-6,7-디메틸-프테리딘-2-일]모르폴린-2-일]메탄올(80 mg, 0.162 mmol, 18.10% 수율)을 황색 고형분으로서 수득하였다. LCMS (M+H)+ = 494.2; 순도 = 60.85% (220 nm). 유지 시간 = 0.894분. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 7.77 - 7.67 (m, 1H), 7.59 - 7.52 (m, 2H), 7.09 - 6.94 (m, 2H), 5.22 - 5.06 (m, 1H), 5.04 - 4.93 (m, 1H), 4.72 - 4.61 (m, 1H), 3.90 - 3.82 (m, 2H), 3.79 - 3.71 (m, 1H), 3.63 - 3.56 (m, 1H), 3.16 - 3.00 (m, 2H), 2.74 - 2.70 (m, 3H), 2.62 - 2.58 (m, 3H), 1.29 - 1.25 (m, 1H), 1.17 - 1.11 (m, 2H), 1.07 - 1.00 (m, 2H).
단계 8: 라세미산 생성물을 SFC(REGIS(S,S)WHELK-O1(250 mm * 25 mm, 10 um), MeOH-ACN)로 정제하여 [(2S,6S)-6-(1-시클로프로필피라졸-4-일)-4-[4-(2,4-디플루오로페닐)-6,7-디메틸-프테리딘-2-일]모르폴린-2-일]메탄올(39 mg, 0.0747 mmol, 46.09% 수율)을 황색 고형분으로서 수득하고, [(2R,6R)-6-(1-시클로프로필피라졸-4-일)-4-[4-(2,4-디플루오로페닐)-6,7-디메틸-프테리딘-2-일]모르폴린-2-일]메탄올(40 mg, 0.0774 mmol, 47.76% 수율)을 황색 고형분으로서 수득하였다. LCMS (M+H)+ = 494.2; 순도 = 95.529% (220 nm). 유지 시간 = 0.881분. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 1.00 - 1.07 (m, 2 H) 1.11 - 1.17 (m, 2 H) 2.57 - 2.64 (m, 3 H) 2.73 (s, 3H) 3.01 - 3.16 (m, 2H) 3.56 - 3.63 (m, 1H) 3.71 - 3.78 (m, 1 H) 3.82 - 3.91 (m, 2 H) 4.63 - 4.70 (m, 1H) 4.94 - 5.04 (m, 1 H) 5.06 - 5.19 (m, 1 H) 6.94 - 7.09 (m, 2 H) 7.53 - 7.60 (m, 2 H) 7.68 - 7.76 (m, 1 H). LCMS (M+H)+ = 494.2; 순도 = 96.555% (220 nm). 유지 시간 = 0.876분. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 1.00 - 1.07 (m, 2 H) 1.11 - 1.17 (m, 2 H) 2.58 - 2.63 (m, 3 H) 2.70 - 2.75 (m, 3 H) 3.01 - 3.16 (m, 2 H) 3.55 - 3.64 (m, 1 H) 3.70 - 3.79 (m, 1 H) 3.81 - 3.91 (m, 2 H) 4.62 - 4.70 (m, 1 H) 4.93 - 5.04 (m, 1 H) 5.06 - 5.20 (m, 1 H) 6.94 - 7.09 (m, 2 H) 7.53 - 7.59 (m, 2 H) 7.67 - 7.76 (m, 1 H).
화합물 I-1338의 합성
MeCN(2 mL) 중 4-(4-클로로-2-플루오로-페닐)-7-메틸-2-[(2S,4R)-2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)테트라하이드로피란-4-일]프테리딘(1.00 당량, 100 mg, 0.215 mmol)의 황색 용액에 과산화요소 수소 부가물(2.00 당량, 40 mg, 0.430 mmol)을 0℃에서 첨가하여 황색 용액을 수득하였다. 그런 다음, 혼합물에 TFAA(1.90 당량, 0.058 mL, 0.409 mmol)를 0℃에서 첨가하여 황색 용액을 수득하였다. 적색 용액을 15℃에서 12시간 동안 교반하였다. LCMS는 출발 물질이 완전히 소모되었고 목적하는 질량이 검출되었음을 나타냈다. 반응 혼합물을 포화 수성 NaHCO3(20 mL)에 붓고 2시간 동안 교반하였다. 생성된 용액을 DCM(20 * 3 mL)으로 추출하고, 유기상을 건조시키고 진공 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 미정제 생성물을 분취-HPLC(FA, 컬럼: Phenomenex Luna C18 150 * 25 mm * 10 um; 이동상: [물 (FA)-ACN]; B%: 39% 내지 69%, 10분)로 정제하고 동결건조시켰다. 4-(4-클로로-2-플루오로-페닐)-2-[(2S,4R)-2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)테트라하이드로피란-4-일]-7-(2,2,2-트리플루오로에틸)프테리딘(14 mg, 0.0239 mmol, 11% 수율)을 황색 고형분으로서 수득하였다, LCMS [M+H]+ = 533.2; 순도 = 94% (220 nm). 유지 시간 = 0.908분. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 9.01 (s, 1H), 7.79 - 7.65 (m, 1H), 7.51 (d, J = 2.3 Hz, 2H), 7.43 - 7.28 (m, 2H), 4.58 (dd, J = 1.9, 11.4 Hz, 1H), 4.33 - 4.22 (m, 1H), 4.00 (q, J = 10.3 Hz, 2H), 3.88 - 3.76 (m, 1H), 3.67 - 3.47 (m, 2H), 2.46 (d, J = 13.2 Hz, 1H), 2.28 - 2.14 (m, 3H), 1.19 - 1.03 (m, 2H), 1.02 - 0.92 (m, 2H).
화합물 I-1343의 합성
단계 1: MeCN(0.5 mL) 중 (2R,6S)-2-메틸-4-(p-톨일설포닐)-6-(1H-피라졸-4-일)모르폴린(1.00 당량, 150 mg, 0.467 mmol) 및 Cs2CO3(3.00 당량, 455 mg, 1.40 mmol)의 용액을 브로모메틸시클로프로판(1.20 당량, 76 mg, 0.560 mmol)을 첨가하고 30℃에서 2시간 동안 교반하였다. LCMS (5-95AB/1.5분): RT = 0.918분, 376.3 = [M+H]+, ESI+는 목적하는 생성물의 91%를 나타냈다. 반응 혼합물을 셀라이트를 통해 여과하고, 여과물을 감압 하에 증발시켜 미정제 생성물을 수득하고, 미정제 생성물을 추가의 후처리 없이 다음 단계에 사용하였다. (M+H) + = 376.3; 순도 = 91% (220 nm). 유지 시간 = 0.918분.
단계 2: 메탄올(3 mL) 중 (6R)-2-[1-(시클로프로필메틸)피라졸-4-일]-6-메틸-4-(p-톨일설포닐)모르폴린(1.00 당량, 70 mg, 0.186 mmol)의 용액에 Mg(분말)(32.3 당량, 144 mg, 6.02 mmol) 및 Mg(칩)(32.3 당량, 144 mg, 6.02 mmol)을 25℃에서 첨가한 다음, 혼합물을 80℃에서 12시간 동안 교반하였다. LCMS (5-95AB/1.5분): RT = 0.689분, 222.1 = [M+H]+, ESI+는 목적하는 생성물의 88%를 나타냈다. 반응 혼합물을 셀라이트를 통해 여과하고, 여과물을 감압 하에 증발시켜 미정제 생성물을 수득하고, 이를 다음 단계에 대한 추가 작업 없이 수득하였다. (M+H) + = 222.1; 순도 = 88% (220 nm). 유지 시간 = 0.689분.
단계 3: DMSO(10 mL) 중 (2S,6R)-2-[1-(시클로프로필메틸)피라졸-4-일]-6-메틸-모르폴린(1.00 당량, 40 mg, 0.181 mmol) 및 2-클로로-4-(2,4-디플루오로페닐)-6,7-디메틸-프테리딘(1.50 당량, 83 mg, 0.271 mmol)의 용액에 DIEA(1.00 당량, 23 mg, 0.181 mmol)를 첨가한 다음, 혼합물을 100℃에서 20분 동안 교반하였다. LCMS (5-95AB/1.5분): RT=0.986분, 492.2 = [M+H]+, ESI+는 목적하는 생성물의 68%를 나타냈다. 반응 혼합물을 H2O (50 mL)에 붓고 EtOAc(50 mL 2회)로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 염수(50 mL)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 진공에서 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 분취-HPLC(Unisil 3-100 C18 Ultra 150 * 50 mm * 3 um, 물(FA)-ACN)로 정제하여 (2S,6R)-2-[1-(시클로프로필메틸)피라졸-4-일]-4-[4-(2,4-디플루오로페닐)-6,7-디메틸-프테리딘-2-일]-6-메틸-모르폴린 15 mg을 수득하였다(NMR에 나타낸 불순물과 혼합됨). 생성물을 SFC(컬럼: Chiralpak AD-3 50×4.6 mm I.D., 3um; 이동상: CO2의 경우 상 A, 및 MeOH (0.05%DEA)의 경우 상 B; 구배 용리: CO2 중 MeOH(0.05% DEA) 5% 내지 40%; 유속: 3 mL/분; 검출기: PDA; 컬럼 온도: 35C; 배압: 100 Bar")로 정제하고 동결건조시켜 (2S,6R)-2-[1-(시클로프로필메틸)피라졸-4-일]-4-[4-(2,4-디플루오로페닐)-6,7-디메틸-프테리딘-2-일]-6-메틸-모르폴린(2.4 mg, 0.00483 mmol, 2.67% 수율)을 백색 고형분으로서 수득하였다. (M+H) + = 492.2; 순도 = 68% (220 nm). 유지 시간 = 0.986분. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 7.76 - 7.69 (m, 1H), 7.64 - 7.55 (m, 2H), 7.09 - 6.94 (m, 2H), 5.19 - 4.92 (m, 2H), 4.69 - 4.60 (m, 1H), 3.98 (br d, J = 7.0 Hz, 2H), 3.89 - 3.81 (m, 1H), 3.12 (dd, J = 11.2, 13.1 Hz, 1H), 2.90 - 2.82 (m, 1H), 2.72 (s, 3H), 2.60 (s, 3H), 1.34 (d, J = 6.2 Hz, 3H), 1.31 - 1.26 (m, 1H), 0.70 - 0.65 (m, 2H), 0.40 (q, J = 5.0 Hz, 2H).
화합물 I-1348 및 I-1406의 합성.
단계 1: 1,4-디옥산(150 mL) 중 4-요오도-1H-피라졸(1.00 당량, 5.00 g, 25.8 mmol)의 용액에 시클로프로필보론산(2.00 당량, 4.43 g, 51.6 mmol), Cu(OAc)2 (1.00 당량, 5.15 g, 25.8 mmol), DMAP (4.00 당량, 12.58 g, 103 mmol) 및 피리딘(2.50 당량, 50 mL, 64.4 mmol)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 산소 분위기 하에 100℃에서 16시간 동안 교반하였다. 용액의 색상이 청색에서 흑색으로 변하였다. LCMS는 출발 물질이 완전히 소모되었음을 나타냈고, 97%의 목적하는 MS(235.0 [M+1]+, ESI pos)가 발견되었다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시켰다. 혼합물을 물(500 mL)에 붓고 에틸 아세테이트(3 x 500 mL)로 추출하고, 합쳐진 유기층을 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고 진공에서 농축시켰다. 용액을 실리카 상의 컬럼(20 g SiO2 카트리지, PE:EA = 2:1, 254 nm에서의 검출)으로 정제하고 감압 하에 농축시켜 1-시클로프로필-4-요오드-피라졸(5.60 g, 22.7 mmol, 88.18% 수율)을 황색 오일로서 수득하였다. [M+H]+ = 235.0; 순도 = 97% (220 nm). 유지 시간 = 0.763분. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 7.50 (s, 1H), 7.47 (s, 1H), 3.60 (tt, J= 3.7, 7.3 Hz, 1H), 1.14 - 1.08 (m, 2H), 1.06 - 0.99 (m, 2H)
단계 2: DMF(30 mL) 중 (2R)-4-터트-부톡시카르보닐모르폴린-2-카르복실산(1.00 당량, 4.50 g, 19.5 mmol)의 무색 혼합물에 DIEA(3.00 당량, 7.54 g, 58.4 mmol), HATU(1.20 당량, 8.88 g, 23.4 mmol)를 첨가한 다음, 혼합물을 15℃에서 10분 동안 교반하여 황색 용액을 수득한 다음, N,O-디메틸히드록실아민 히드로클로라이드(1.10 당량, 2.09 g, 21.4 mmol)를 첨가한 다음, 혼합물을 15℃에서 12시간 동안 교반하여 황색 용액을 수득하였다. LCMS는 출발 물질이 완전히 소모되었음을 나타냈고, 91%의 목적하는 MS(219.2 [M-C4H8+H]+, ESI pos)가 발견되었다. TLC(EA)는 출발 물질이 완전히 소모되었고 새로운 스폿이 관찰되었음을 나타냈다. 혼합물을 물(150 mL)에 붓고 에틸 아세테이트(3 x 150 mL)로 추출하고, 합쳐진 유기층을 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고 진공에서 농축시켰다. 용액을 실리카 상의 컬럼(10 g SiO2 카트리지, PE:EA=1:1, 포스포몰리브드산에서 검출)으로 정제하고 감압 하에 농축시켜 터트-부틸 (2R)-2-[메톡시(메틸)카르바모일]모르폴린-4-카르복실레이트(2.10 g, 7.66 mmol, 39.34% 수율)를 무색 오일로서 수득하였다. [M-C4H8+H]+ = 219.2; 순도 = 91% (220 nm). 유지 시간 = 0.770분. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 4.35 (br d, J= 4.3 Hz, 1H), 4.10 - 3.97 (m, 2H), 3.94 - 3.82 (m, 1H), 3.76 (s, 3H), 3.64 - 3.55 (m, 1H), 3.22 (s, 3H), 3.06 (br d, J= 8.2 Hz, 2H), 1.48 (s, 9H).
단계 3: THF(10 mL) 중 1-시클로프로필-4-요오도-피라졸(1.00 당량, 800 mg, 3.42 mmol)의 무색 혼합물에 iPrMgCl·LiCl(1.20 당량, 3.2 mL, 4.10 mmol)을 20℃에서 첨가하였다. 혼합물을 20℃에서 1시간 동안 교반하였다. TLC는 1-시클로프로필-4-요오드-피라졸(EA : PE = 1:5, Rf = 0.3)이 소모되었음을 나타냈고 새로운 스폿(EA : PE = 1:5, Rf = 0.03)이 검출되었다. THF(4 mL) 중 터트-부틸 (2R)-2-[메톡시(메틸)카르바모일]모르폴린-4-카르복실레이트(1.40 당량, 1313 mg, 4.79 mmol)의 용액에 준비된 그리냐드 시약을 5℃에서 첨가한 다음, 혼합물을 N2 분위기 하 20℃에서 2시간 동안 교반하였다. LC-MS는 그리냐드 시약의 일부가 남아 있지만 목적하는 생성물(MS = 266 [M-56+H]+, ESI, POS)이 검출되었음을 보여주었다. 혼합물을 20℃에서 추가 10시간 동안 교반하였다. LC-MS는 그리냐드 시약이 소모되었음을 나타냈고, 목적하는 MS(MS = 266.0 [M-56+H]+, ESI, POS)가 검출되었다. 반응 혼합물을 포화 NH4Cl 용액(50 mL)으로 급냉시키고 EtOAc(50 mL x 3)로 추출하였다. 유기상을 염수(50 mL)로 세척하였다. 농축 후, 잔류물을 분취-TLC(EA:PE = 1:1, Rf = 0.3)로 정제하였다. 터트-부틸 (2R)-2-(1-시클로프로필피라졸-4-카르보닐)모르폴린-4-카르복실레이트(820 mg, 2.16 mmol, 63.08% 수율)를 수득하였다. [M-56+H]+ = 266.0; 순도 = 84.5% (220 nm). 유지 시간 = 0.849분.
단계 4: TFA (83.9 당량, 2.0 mL, 26.1 mmol) 중 터트-부틸 (2R)-2-(1-시클로프로필피라졸-4-카르보닐)모르폴린-4-카르복실레이트(1.00 당량, 100 mg, 0.311 mmol)의 무색 혼합물에 이어서, 혼합물을 30℃에서 2시간 동안 교반하였다. LCMS는 출발 물질이 완전히 소모되었음을 나타냈고, 54%의 목적하는 MS(222.1 [M+H]+, ESI pos)가 발견되었다. 포화 수성 NaHCO3(5 mL)로 pH를 7로 조정하고, 혼합물을 DCM(20 mL x 3)으로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고 진공에서 농축시켰다. (1-시클로프로필피라졸-4-일)-[(2R)-모르폴린-2-일]메탄온(80 mg, 0.210 mmol, 67.39% 수율)을 무색 오일로서 수득하였다. [M+H]+ = 222.1; 순도 = 54% (220 nm).
단계 5: DMSO(5 mL) 중 (1-시클로프로필피라졸-4-일)-[(2R)-모르폴린-2-일]메탄온(1.00당량, 40 mg, 0.154 mmol)의 황색 혼합물에 2-클로로-4-(2,4-디플루오로페닐)-6,7-디메틸-프테리딘(1.00당량, 55 mg, 0.154 mmol), DIPEA(3.00당량, 0.080 mL, 0.461 mmol)를 첨가한 다음, 혼합물을 100℃에서 1시간 동안 교반하여 갈색 용액을 수득하였다. LCMS는 출발 물질이 완전히 소모되었고 73%의 목적하는 MS(492.1 [M+H]+, ESI pos)가 발견되었음을 나타냈다. 합쳐진 혼합물을 실온으로 냉각시켰다. 혼합물을 분취-HPLC(컬럼: Waters Xbridge 150 * 25 mm * 5 um; 이동상: 물 (NH4HCO3)-ACN; B%: 45%-75%, 8분)로 정제하고, 정제된 용액을 동결건조시켜 (1-시클로프로필피라졸-4-일)-[4-[4-(2,4-디플루오로페닐)-6,7-디메틸-프테리딘-2-일]모르폴린-2-일]메에타논(2.5 mg, 0.00505 mmol, 3% 수율)을 황색 고형분으로서 수득하였다. LCMS Rt: 0.947분; m/z: 492.1 [M+H]+, 220 nm에서 100% 순도. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 8.20 (s, 1H), 8.08 (s, 1H), 7.74 (dt, J = 6.6, 8.1 Hz, 1H), 7.10 - 6.93 (m, 2H), 5.16 (br d, J = 13.5 Hz, 1H), 4.87 (br d, J = 13.5 Hz, 1H), 4.48 (br d, J = 7.9 Hz, 1H), 4.25 - 4.15 (m, 1H), 3.83 (dt, J = 2.7, 11.4 Hz, 1H), 3.65 (tt, J = 3.7, 7.3 Hz, 1H), 3.47 - 3.32 (m, 2H), 2.73 (s, 3H), 2.61 (s, 3H), 1.23 - 1.15 (m, 2H), 1.13 - 1.06 (m, 2H).
단계 6: 메탄올(1 mL) 중 (1-시클로프로필피라졸-4-일)-[(2R)-4-[4-(2,4-디플루오로페닐)-6,7-디메틸-프테리딘-2-일]모르폴린-2-일]메타논(1.00 당량, 20 mg, 0.0407 mmol)의 황색 혼합물에 NaBH4(5.00 당량, 7.7 mg, 0.203 mmol)를 N2 분위기 하에 0℃에서 첨가한 다음, 혼합물을 N2 분위기 하에 0℃에서 2시간 동안 교반하였다. LCMS는 출발 물질이 완전히 소모되었음을 나타냈고, 93%의 목적하는 MS(498.0 [M+H]+, ESI pos)가 발견되었다. 혼합물을 NH4Cl 수성(5 mL)에 붓고 에틸 아세테이트(20 mL x 3)로 추출하고, 합쳐진 유기층을 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고 진공에서 농축시켰다. (1-시클로프로필피라졸-4-일)-[(2R)-4-[4-(2,4-디플루오로페닐)-6,7-디메틸-5,6,7,8-테트라하이드로프테리딘-2-일]모르폴린-2-일]메탄올(20 mg, 0.0374 mmol, 91.87% 수율)을 황색 고체로서 수득하였다. [M +H]+ = 498.0; 순도 = 93% (220 nm). 유지 시간 = 0.591분.
단계 7: MeCN(0.5000 mL) 중 (1-시클로프로필피라졸-4-일)-[4-[4-(2,4-디플루오로페닐)-6,7-디메틸-5,6,7,8-테트라히드로프테리딘-2-일]모르폴린-2-일]메탄올(1.00 당량, 20 mg, 0.0402 mmol)의 황색 혼합물에 NBS(2.00 당량, 14 mg, 0.0804 mmol) 및 Na2CO3(3.00 당량, 13 mg, 0.121 mmol)을 첨가한 다음, 혼합물을 15℃에서 12시간 동안 교반하여 황색 용액을 수득하였다. LCMS는 출발 물질이 완전히 소모되었음을 나타냈고, 49%의 목적하는 MS(494.3 [M+H]+, ESI pos)가 발견되었다. 혼합물을 Na2SO3(10 mL)에 붓고 에틸 아세테이트(20 mL x 3)로 추출하고, 합쳐진 유기층을 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고 진공에서 농축시켰다. 용액을 분취-HPLC(컬럼: Waters Xbridge 150 * 25 mm * 5 um; 이동상: 물 (NH4HCO3)-ACN; B%: 38%-68%, 8분)로 정제하고, 정제된 용액을 동결건조시켜 (1-시클로프로필피라졸-4-일)-[4-[4-(2,4-디플루오로페닐)-6,7-디메틸-프테리딘-2-일]모르폴린-2-일]메탄올(2.2 mg, 0.00448 mmol, 11.14% 수율)을 황색 고형분으로서 수득하였다(라세미): LC-MS Rt: 0.864분; m/z: [M+H]+ =494.2, 220 nm에서 100% 순도. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 7.74 - 7.63 (m, 1H), 7.52 (s, 2H), 7.04 (dt, J = 2.4, 8.3 Hz, 1H), 7.00 - 6.91 (m, 1H), 4.89 - 4.81 (m, 2H), 4.80 - 4.62 (m, 1H), 4.20 - 4.06 (m, 1H), 3.86 - 3.65 (m, 2H), 3.58 (tt, J = 3.7, 7.2 Hz, 1H), 3.35 - 3.18 (m, 1H), 3.16 - 2.98 (m, 1H), 2.71 (s, 3H), 2.59 (s, 3H), 1.11 (br d, J = 2.8 Hz, 2H), 1.05 - 0.94 (m, 2H).
화합물 I-1351의 합성
단계 1: MeCN(0.5 mL) 중 (2R,6S)-2-메틸-4-(p-톨일설포닐)-6-(1H-피라졸-4-일)모르폴린(1.00 당량, 100 mg, 0.311 mmol) 및 Cs2CO3 (3.00 당량, 303 mg, 0.933 mmol)의 용액에 3-(브로모메틸)옥세탄(1.20 당량, 56 mg, 0.373 mmol)을 30℃서 12시간 동안 교반하였다. LCMS (5-95AB/1.5분): RT = 0.858분, 392.1 = [M+H]+, ESI+는 목적하는 생성물의 71%를 나타냈다. 반응 혼합물을 여과하고, 여액을 분취-HPLC(Unisil 3-100 C18 Ultra 150 * 50 mm * 3 um, 물(FA)-ACN)로 정제하여 (2R,6S)-2-메틸-4-(p-톨일설포닐)-6-(1H-피라졸-4-일)모르폴린(1.00 당량, 100 mg, 0.311 mmol)을 백색 고형분으로서 수득하였고, LCMS(M+H) + = 376.3; 순도 = 93%(220 nm)였다. 유지 시간 = 0.854분.
단계 2: 메탄올(7 mL) 중 (2R,6S)-2-메틸-6-[1-(옥세탄-3-일메틸)피라졸-4-일]-4-(p-톨일설포닐)모르폴린(1.00 당량, 100 mg, 0.255 mmol)의 용액에 Mg(칩)(16.3 당량, 100 mg, 4.17 mmol) 및 Mg(분말)(16.3 당량, 100 mg, 4.17 mmol)을 25℃에서 첨가한 다음, 혼합물을 80℃에서 12시간 동안 교반하였다. LCMS는 64%의 목적하는 생성물(MS(238.8[M+H] +, ESI +, LC-RT: 0.287분)이 검출되었고 34%의 출발 물질이 남아 있음을 나타냈다. 반응 혼합물을 셀라이트를 통해 여과하고, 여과물을 감압 하에 증발시켜 미정제 생성물을 수득한 다음, 이를 메탄올(7 mL), Mg(칩)(16.3 당량, 100 mg, 4.17 mmol) 및 Mg(분말)(16.3 당량, 100 mg, 4.17 mmol)에 용해시키고, N2로 3회 퍼징하고, 80℃에서 12시간 동안 추가로 교반하였다. LCMS는 78%의 목적하는 생성물(MS(238.2 [M+H] +, ESI+, LC-RT: 0.274분)이 검출되었음을 나타냈다. 반응 혼합물을 셀라이트를 통해 여과하고, 여과물을 감압 하에 증발시켜 미정제 생성물을 수득하고, 이를 다음 단계에 대한 추가 작업 없이 수득하였다. (M+H) + = 238.8; 순도 = 78%(220 nm). 유지 시간 = 0.283분.
단계 3: DMSO(2.5 mL) 중 (2R,6S)-2-메틸-6-[1-(옥세탄-3-일메틸)피라졸-4-일]모르폴린(1.00 당량, 60 mg, 0.253 mmol)의 용액에 2-클로로-4-(2,4-디플루오로페닐)-6,7-디메틸-프테리딘(1.50 당량, 116 mg, 0.379 mmol) 및 DIEA(5.00 당량, 163 mg, 1.26 mmol)를 첨가한 다음, 혼합물을 100℃에서 20분 동안 교반하였다. LCMS (5-95AB/1.5분): RT = 0.926분, 508.3 = [M+H]+, ESI+는 목적하는 생성물의 54%를 나타냈다. 반응 혼합물을 H2O(50 mL)에 붓고 EtOAc(50 mL)로 2회 추출하였다. 합쳐진 유기층을 염수(50 mL)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 진공에서 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 분취-HPLC(컬럼: REGIS(S,S)WHELK-O1 (250 mm * 25 mm, 10 um), 조건: ACN/IPA (0.1% NH3H2O), 구배 시간(분): 3.7)로 정제하였다. 정제된 용액을 동결건조시켜 생성물 35 mg을 황색 고형분으로서 수득하였다(NMR에 나타낸 불순물과 혼합됨). 그런 다음, 잔류물을 분취-TLC(PE:EtOAc = 0:1, Rf = 0.65, UV)로 다시 정제하여 생성물을 황색 고형분 27 mg(NMR에 도시된 불순물과 혼합됨)으로서 수득하였다. 그런 다음, 잔류물을 SFC(컬럼: Kromasil (S,S)Whelk-O1 50×4.6 mm I.D., 3.5 um, 이동상: CO2의 경우 상 A, 및 상 B: IPA+CAN (0.05% DEA), CO2 중의 40%B;유속: 3 mL/분; 검출기: PDA; 컬럼 온도: 35C; 배압: 100 Bar ")로 분리하고 동결건조시켜 (2R,6S)-4-[4-(2,4-디플루오로페닐)-6,7-디메틸-프테리딘-2-일]-2-메틸-6-[1-(옥세탄-3-일메틸)피라졸-4-일]모르폴린(15 mg, 0.0261 mmol, 10.34% 수율)을 황색 고형분으로서 수득하였다. (M+H) + =508.3; 순도 = 54% (220 nm). 유지 시간 = 0.926분. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 7.72 (br d, J = 6.6 Hz, 1H), 7.58 (s, 1H), 7.53 (s, 1H), 7.54 - 7.52 (m, 1H), 7.46 (s, 1H), 7.07 - 6.96 (m, 2H), 5.17 - 4.94 (m, 2H), 4.88 - 4.81 (m, 2H), 4.68 - 4.58 (m, 1H), 4.56 - 4.48 (m, 2H), 4.45 - 4.38 (m, 2H), 3.90 - 3.79 (m, 1H), 3.58 - 3.48 (m, 1H), 3.14 - 3.02 (m, 1H), 2.90 - 2.82 (m, 1H), 2.72 (s, 3H), 2.60 (s, 3H), 1.33 (d, J = 6.2 Hz, 3H).
화합물 I-1356의 합성
단계 1: DMF(1.5 mL) 중 (2R,6S)-2-메틸-4-(p-톨일설포닐)-6-(1H-피라졸-4-일)모르폴린(1.00 당량, 100 mg, 0.311 mmol)의 용액에 K2CO3(2.00 당량, 86 mg, 0.622 mmol) 및 트리듀테리오(요오드)메탄(1.20 당량, 54 mg, 0.373 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 30℃에서 12시간 동안 교반하였다. LCMS는 목적하는 생성물이 검출된 하나의 주요 피크를 나타냈다(82.5%, Rt: 0.863분; [M+H]+ = 220 nm에서 339.1). 혼합물을 5 mL H2O로 희석하고, EA(10 mL * 3)로 추출하고, 합쳐진 유기층을 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고 감압 하에 농축시켜 (2R,6S)-2-메틸-4-(p-톨일설포닐)-6-[1-(트리듀테리오메틸)피라졸-4-일]모르폴린(90 mg, 0.266 mmol, 85.47% 수율)을 황색 고형분으로서 수득하고, 혼합물을 다음 단계에 직접 사용하였다. [M+H]+ = 339.1; 순도 = 82.5% (220 nm). 유지 시간 = 0.863분.
단계 2: 메탄올(16 mL) 중 (2R,6S)-2-메틸-4-(p-톨일설포닐)-6-[1-(트리듀테리오메틸)피라졸-4-일]모르폴린(1.00 당량, 80 mg, 0.236 mmol)의 용액에 Mg(분말)(15.9 당량, 90 mg, 3.75 mmol) 및 Mg(칩)(15.9 당량, 90 mg, 3.75 mmol)을 25℃에서 첨가한 다음, 혼합물을 80℃에서 16시간 동안 교반하였다. LCMS는 출발 물질의 60%가 남아 있고 하나의 새로운 피크가 검출되었음을 나타냈다(목적하는 생성물 질량 신호 없음). Mg(칩)(15.9당량, 90 mg, 3.75 mmol)를 반응 혼합물에 첨가한 다음, 혼합물을 80℃에서 12시간 동안 추가로 교반하였다. LCMS는 출발 물질이 완전히 소모되었고 하나의 새로운 주요 피크가 검출되었음을 나타냈다(목적하는 생성물 질량 신호 없음). 혼합물을 여과하고 MeOH(20 mL * 3)로 세척하고, 합쳐진 유기층을 감압 하에 농축시켜 미정제 (2R,6S)-2-메틸-6-[1-(트리듀테리오메틸)피라졸-4-일]모르폴린(88 mg, 0.478 mmol, 202.05% 수율)을 백색 고형분으로서 수득하고, 잔류물을 다음 단계에 직접 사용하였다. HPLC 순도 = 84.8% (220 nm). 유지 시간 = 0.222분.
단계 3: DMSO(2.5 mL) 중 2-클로로-4-(2,4-디플루오로페닐)-6,7-디메틸-프테리딘(1.00 당량, 85 mg, 0.277 mmol)의 용액에 (2R,6S)-2-메틸-6-[1-(트리듀테리오메틸)피라졸-4-일]모르폴린(1.50 당량, 77 mg, 0.416 mmol) 및 DIPEA(4.00 당량, 0.19 mL, 1.11 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 100℃에서 20분 동안 교반하였다. LCMS는 출발 물질이 완전히 소모되었고 목적하는 생성물이 검출되었음을 나타냈다(32%, Rt: 0.932분; [M+H]+ = 220 nm에서 455.2). 합쳐진 혼합물을 20 mL H2O로 희석하고, EA(30 mL * 3)로 추출하고, 합쳐진 유기층을 무수 Na2SO4로 건조시키고, 여과하고 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 컬럼 실리카 크로마토그래피(PE/EtOAc = 0-60%, PE/EtOAc = 1/1, 목적하는 생성물 Rf = 0.5)로 정제하여 미정제 생성물을 수득하였다. 미정제 생성물을 분취-HPLC(Phenomenex Synergi C18 150 * 25 mm * 10 um, 물(FA)-ACN)로 다시 정제하고 동결건조시켜 (2R,6S)-4-[4-(2,4-디플루오로페닐)-6,7-디메틸-프테리딘-2-일]-2-메틸-6-[1-(트리듀테리오메틸)피라졸-4-일]모르폴린(6.6 mg, 0.0143 mmol, 5.17% 수율)을 황색 고형분으로서 수득하였다, LCMS [M+H]+ = 455.2, 순도 = 98.71% (220 nm). 유지 시간 = 0.929분. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 7.76 - 7.68 (m, 1H), 7.56 (s, 1H), 7.46 (s, 1H), 7.08 - 7.02 (m, 1H), 7.01 - 6.94 (m, 1H), 5.19 - 4.91 (m, 2H), 4.63 (dd, J = 2.3, 10.8 Hz, 1H), 3.84 (ddd, J = 2.5, 6.3, 10.3 Hz, 1H), 3.09 (dd, J = 11.0, 13.3 Hz, 1H), 2.85 (dd, J = 10.8, 13.3 Hz, 1H), 2.72 (s, 3H), 2.60 (s, 3H), 1.33 (d, J = 6.3 Hz, 3H). SFC는 100% ee를 나타냈다.
화합물 I-1361의 합성
단계 1: DCM(10 mL) 중 메틸 (2R)-모르폴린-2-카르복실레이트; 히드로클로라이드(1.00 당량, 950 mg, 5.23 mmol) 및 TEA(3.00 당량, 2.2 mL, 15.7 mmol)의 용액에 TsCl(1.20 당량, 1391 mg, 6.28 mmol)을 0℃에서 첨가하였다. 혼합물을 25℃에서 12시간 동안 교반하였다. LCMS는 출발 물질이 완전히 소모되었고 목적하는 질량(98%, MS: 300.1 [M+H]+, ESI pos)을 갖는 주요 피크가 있음을 나타냈다. 반응 혼합물을 DCM(200 mL)과 물(200 mL) 사이에서 분리시켰다. 합쳐진 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켜 미정제 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 실리카 겔 상의 컬럼 크로마토그래피(석유 에테르/에틸 아세테이트 = 100 : 1 내지 1 : 1, Rf =0.6으로 용리됨)로 정제하여 메틸 (2R)-4-(p-톨일설포닐) 모르폴린-2-카르복실레이트(1.40 g, 4.68 mmol, 89.41% 수율)를 백색 고형분으로서 수득하였다. (M+H)+ = 300.1; 순도 = 99% (220 nm). 유지 시간 = 0.806분. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 2.44 (s, 3 H) 2.52 - 2.64 (m, 2 H) 3.43 (br dd, J=11.76, 1.50 Hz, 1 H) 3.68 - 3.76 (m, 2 H) 3.78 (s, 3 H) 4.05 (dt, J=11.63, 3.00 Hz, 1 H) 4.24 (dd, J=9.57, 3.06 Hz, 1 H) 7.35 (d, J=8.13 Hz, 2 H) 7.64 (d, J=8.25 Hz, 2 H).
단계 2: 메탄올(6 mL) 중 메틸 (2R)-4-(p-톨일설포닐) 모르폴린-2-카르복실레이트(1.00 당량, 700 mg, 2.34 mmol)의 용액에 히드라진 일수화물(1.60 당량, 0.12 mL, 3.74 mmol)을 25℃에서 첨가하였다. 반응 혼합물을 50℃에서 5시간 동안 가열하였다. LCMS는 출발 물질이 완전히 소모되었고 목적하는 질량(97%, MS: 300.1 [M+H]+, ESI pos)을 갖는 주요 피크가 있음을 나타냈다. 생성된 혼합물을 실온으로 냉각시키고 물(50 mL)에 붓고, EtOAc(3 * 25 mL)로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켜 미정제 (2R)-4-(p-톨일설포닐)모르폴린-2-카르보하이드라지드(750 mg, 2.51 mmol, 107.14% 수율)를 무색 고형분으로서 수득하였다. (M+H)+ = 300.1; 순도 = 97% (220 nm). 유지 시간 = 0.650분. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 2.17 (t, J=10.88 Hz, 1 H) 2.29 (td, J=11.38, 3.13 Hz, 1 H) 2.42 (s, 3 H) 3.17 (s, 1 H) 3.41 (br s, 1 H) 3.51 - 3.64 (m, 3 H) 3.90 (br d, J=11.13 Hz, 1 H) 4.02 (dd, J=10.13, 2.63 Hz, 1 H) 4.15 - 4.47 (m, 1 H) 7.48 (br d, J=8.00 Hz, 2 H) 7.63 (d, J=8.13 Hz, 2 H) 8.57 - 9.51 (m, 1 H).
단계 3: MeCN(20 mL) 중 (2R)-4-(p-톨일설포닐) 모르폴린-2-카르보히드라지드(1.00 당량, 750 mg, 2.51 mmol) 및 P2O5(6.00 당량, 2134 mg, 15.0 mmol)의 용액에 시클로프로판카르보닐 클로라이드(1.20 당량, 314 mg, 3.01 mmol)를 실온에서 첨가하였다. 반응 혼합물을 50℃에서 1시간 동안 교반하였다. LCMS는 출발 물질이 완전히 소모되었고 목적하는 질량(91%, MS: 350.1 [M+H]+, ESI pos)을 갖는 주요 피크가 있음을 나타냈다. 혼합물을 셀라이트 패드를 통해 여과하고, 여액을 농축시켜 미정제 생성물을 수득하고, 미정제 생성물을 다음 단계에 직접 사용하였다. (M+H)+ = 350.1; 순도 = 87% (220 nm). 유지 시간 = 0.839분.
단계 4: 메탄올(25 mL) 중 (2R)-2-(5-시클로프로필-1,3,4-옥사디아조l-2-일)-4-(p-톨일설포닐)모르폴린(1.00 당량, 200 mg, 0.572 mmol)의 용액에 Mg(분말)(10.0 당량, 137 mg, 5.72 mmol) 및 Mg(칩)(10.0 당량, 137 mg, 5.72 mmol)을 25℃에서 첨가한 다음, 혼합물을 N2 하에 80℃에서 12시간 동안 교반하였다. LCMS는 출발 물질이 완전히 소모되었음을 나타내었지만, 16%의 목적하는 화합물만이 검출되었다(16%, MS: 196.1 [M+H]+, ESI pos). 반응 혼합물을 셀라이트로 여과하여 미정제 생성물을 백색 고형분으로서 수득하였다. (M+H)+ = 196.1; 순도 = 16% (220 nm). 유지 시간 = 0.123분.
단계 5: DMSO(2 mL) 중 2-클로로-4-(2,4-디플루오로페닐)-6,7-디메틸-피리도[2,3-d]피리미딘(5.00 당량, 250 mg, 0.818 mmol) 및 (2R)-2-(5-시클로프로필-1,3,4-옥사디아졸-2-일)모르폴린(1.00 당량, 32 mg, 0.164 mmol)의 용액에 DIEA(1.33 당량, 28 mg, 0.218 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 100℃에서 1시간 동안 교반하였다. LCMS는 출발 물질이 완전히 소모되었고 목적하는 생성물 질량을 갖는 주요 피크가 있음을 나타냈다(Rt: 0.795분, m/z: 465.2 [M+H]+, 220 nm에서의 43% 순도). 반응물을 여과하고, 여액을 분취-HPLC(유속: 25 mL/분; 구배: 7분에 걸쳐 29-59% 물(0.1% FA)-ACN; 컬럼: Unisil 3-100 C18 Ultra 150 * 25 mm * 5 um)로 정제하고, 동결건조시켜 (2R)-2-(5-시클로프로필-1,3,4-옥사디아조l-2-일)-4-[4-(2,4-디플루오로페닐)-6,7-디메틸-피리도[2,3-d]피리미딘-2-일]모르폴린(4.1 mg, 0.00853 mmol, 5.22% 수율)을 황색 고형분으로서 수득하였다, LCMS (M+H)+ = 465.2; 순도 = 100% (220 nm)였다. 유지 시간 = 0.830분. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 1.12 - 1.19 (m, 4 H) 2.12 - 2.21 (m, 1 H) 2.35 (s, 3 H) 2.70 (s, 3 H) 3.40 - 3.51 (m, 1 H) 3.63 (dd, J=13.38, 10.13 Hz, 1 H) 3.80 - 3.89 (m, 1 H) 4.12 - 4.18 (m, 1 H) 4.79 - 4.91 (m, 2 H) 5.13 - 5.21 (m, 1 H) 6.97 - 7.14 (m, 2 H) 7.52 - 7.61 (m, 2 H).
화합물 I-1364 및 I-1365의 합성
단계 1: THF(0.1 mL, 과건조) 중 요오드(0.0500 당량, 6.3 mg, 0.0246 mmol)를 N2 분위기 하에 건조 THF(1.5 mL) 중 Mg(1.27 당량, 15 mg, 0.626 mmol)의 현탁액에 첨가하고, 1-브로모-3-(트리플루오로메틸)시클로부탄(1.00 당량, 100 mg, 0.493 mmol)을 25℃에서 첨가하고, 황색 용액이 무색으로 변할 때까지 가열한 다음, 25℃에서 1시간 동안 교반하고, 유백색 현탁액을 형성하였다. ZnCl2(0.900 당량, 0.89 mL, 0.443 mmol)를 적가하고, 혼합물을 30분 동안 교반하였다. 백색 침전물이 형성되었다. 반응물을 직접 사용하였다.
단계 2: N2 분위기 하 밀봉된 병에 2,4-디클로로-6,7-디메틸-프테리딘(1.00 당량, 25 mg, 0.109 mmol) 및 PdCl2(Amphos)(0.0500 당량, 3.9 mg, 0.00546 mmol) 및 THF(1.5 mL)를 채우고, N2로 3회 퍼징하고, 클로로-[3-(트리플루오로메틸)시클로부틸]아연(4.50 당량, 110 mg, 0.491 mmol)을 25℃에서 반응 용액에 적가한 다음, 40℃로 가온하고 1시간 동안 교반하였다. 반응 용액이 황색에서 짙은 갈색으로 변하였고, 반응이 종료되었고, LCMS는 반응물이 소모되었고 목적하는 질량의 71%가 검출되었음을 나타내었고, 반응 용액을 H2O(5 mL)에 붓고, EtOAc(5 mL)로 추출하고, Na2SO4 상에서 건조시키고 감압 하에 증발시켜 잔류물을 수득하고, 그런 다음, 플래쉬 컬럼(PE:EA = 3:1, Rf = 0.3) 진공에서 건조시켜 2-클로로-6,7-디메틸-4-[3-(트리플루오로메틸)시클로부틸]프테리딘(18 mg, 0.0568 mmol, 52.08% 수율)을 황색 오일로서 수득하였다. [M+ H]+= 317.0; 유지 시간 = 0.930분.
단계 3: DMSO(0.5 mL) 중 2-클로로-6,7-디메틸-4-[3-(트리플루오로메틸)시클로부틸]프테리딘(1.00 당량, 16 mg, 0.0505 mmol), (2S,6R)-2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)-6-메틸-모르폴린(1.00 당량, 10 mg, 0.0505 mmol) 및 DIEA(3.00 당량, 20 mg, 0.152 mmol)의 용액을 100℃에서 1시간 동안 교반하였다. LCMS는 반응물이 소모되었고 목적하는 질량의 50%가 검출되었음을 나타내었고, 반응 용액을 H2O(5 mL)에 붓고, EtOAc(5 mL * 3)로 추출하고 감압 하에 증발시켜 잔류물을 수득하고, 그런 다음, 이를 분취-HPLC(FA)로 정제하고 동결건조시켜 (2S,6R )-2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)-4-[6,7-디메틸-4-[3-(트리플루오로메틸)시클로부틸]프테리딘-2-일]-6-메틸-모르폴린(1.4 mg, 0.00288 mmol, 5.70% 수율)을 황색 고형분으로서 수득하고 (2S,6R)-2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)-4-[6,7-디메틸-4-[3-(트리플루오로메틸)시클로부틸]프테리딘-2-일]-6-메틸-모르폴린(2.7 mg, 0.00556 mmol, 11.00% 수율)을 황색 고형분으로서 수득하였다. [M+ H]+ = 488.2; 순도 = 98.1% (220 nm). 유지 시간 = 0.980분. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 7.60 - 7.51 (m, 2H), 7.31 - 7.30 (m, 1H), 7.25 - 7.25 (m, 1H), 5.17 - 5.11 (m, 1H), 5.05 - 4.97 (m, 1H), 4.65 - 4.49 (m, 2H), 3.89 - 3.77 (m, 1H), 3.63 - 3.55 (m, 1H), 3.17 - 2.99 (m, 2H), 2.88 - 2.79 (m, 1H), 2.75 - 2.54 (m, 10H), 1.39 - 1.31 (m, 3H), 1.17 - 1.07 (m, 2H), 1.05 - 0.98 (m, 2H). [M+H]+ = 488.2; 순도 = 100% (220 nm). 유지 시간 = 1.003분. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 7.58 - 7.54 (m, 2H), 5.15 - 5.07 (m, 1H), 5.00 (br d, J = 13.1 Hz, 1H), 4.73 (br t, J = 8.3 Hz, 1H), 4.61 (dd, J = 2.6, 10.9 Hz, 1H), 3.84 (ddd, J = 2.6, 6.4, 10.2 Hz, 1H), 3.60 (td, J = 3.5, 7.2 Hz, 1H), 3.08 (br t, J = 11.7 Hz, 2H), 2.84 (br dd, J = 11.1, 12.7 Hz, 1H), 2.75 - 2.64 (m, 7H), 2.63 (s, 3H), 1.35 (br d, J = 6.0 Hz, 3H), 1.14 (br d, J = 2.6 Hz, 2H), 1.03 (br d, J = 5.3 Hz, 2H).
화합물 I-1381 및 I-1409의 합성
단계 1: 혼합물에 시클로프로판카르브알데히드(1.00 당량, 5.4 mL, 71.3 mmol) 및 MeNO2(1.50 당량, 5.8 mL, 107 mmol)를 첨가하였다. 5분 동안 교반한 후, t-BuOK(0.200 당량, 14 mL, 14.3 mmol)을 서서히 첨가하였다. 첨가 동안, 백색 고형분이 형성되었다. 혼합물을 20℃로 가온시키고 16시간 동안 교반하였다. LCMS는 출발 물질이 완전히 소모되었고 하나의 주요 피크가 검출되었음을 나타냈다(220 nm에서 98%, Rt: 0.307분; 목적하는 질량 신호 없음). 혼합물을 포화 수성 NH4Cl(150 mL)로 희석하고 DCM(50 mL × 3)으로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 Na2SO4로 건조시키고, 여과하였다. 여액을 진공 하에 50℃에서 농축시켜 미정제 1-시클로프로필-2-니트로-에탄올(9.50 g, 72.4 mmol, 101.56% 수율)을 황색 오일로서 수득하고, H NMR을 다음 단계에 직접 사용하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 4.60 - 4.49 (m, 2H), 3.68 (tt, J = 4.1, 8.0 Hz, 1H), 2.45 (d, J = 4.1 Hz, 1H), 0.96 (tq, J = 4.8, 8.2 Hz, 1H), 0.71 - 0.57 (m, 2H), 0.54 - 0.43 (m, 1H), 0.40 - 0.30 (m, 1H).
단계 2: MeOH(100 mL) 중 1-시클로프로필-2-니트로-에탄올(1.00 당량, 9.50 g, 72.4 mmol)의 혼합물에 Pd/C(0.0124 당량, 0.95 g, 0.896 mmol)를 N2 하에 25℃에서 첨가하였다. 그런 다음, 반응 혼합물을 H2 (30 psi) 하에 25℃에서 12시간 동안 교반하였다. TLC(DCM/MeOH = 10/1, 목적하는 생성물 Rf = 0.4)는 출발 물질이 완전히 소모되었고 하나의 새로운 스폿이 형성되었음을 나타냈다. LCMS는 반응을 모니터링하였다(목적하는 질량 신호 없음). 반응 혼합물을 여과하고, 여액을 농축시켜 2-아미노-1-시클로프로필-에탄올(7.80 g, 77.1 mmol, 106.44% 수율)(미정제)을 황색 오일로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 3.27 - 3.14 (m, 1H), 2.97 - 2.92 (m, 1H), 2.91 - 2.69 (m, 1H), 0.93 - 0.79 (m, 1H), 0.60 - 0.44 (m, 2H), 0.43 - 0.17 (m, 2H). MeOH(70 mL) 중 1-시클로프로필-2-니트로-에탄올(1.00 당량, 7.00 g, 53.4 mmol)의 상기 혼합물에 Pd/C(0.0124 당량, 0.70 g, 0.660 mmol)를 N2 하에 25℃에서 첨가한 다음, 반응 혼합물을 H2 (30 Psi) 하에 60℃에서 12시간 동안 교반하였다. TLC(DCM/MeOH = 10/1, 목적하는 생성물 Rf = 0.4)는 출발 물질이 완전히 소모되었고 하나의 새로운 스폿이 형성되었음을 나타냈다. LCMS로 반응을 모니터링하였다. 반응 혼합물을 여과하고, 여액을 농축시켜 미정제 2-아미노-1-시클로프로필-에탄올(6.00 g, 59.3 mmol, 111.12% 수율)을 황색 오일로서 수득하고, 이를 다음 단계에 직접 사용하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 2.95 (dd, J = 3.3, 12.4 Hz, 1H), 2.84 (dt, J = 3.4, 8.0 Hz, 1H), 2.77 - 2.67 (m, 1H), 0.89 - 0.79 (m, 1H), 0.58 - 0.45 (m, 2H), 0.39 - 0.30 (m, 1H), 0.26 - 0.17 (m, 1H).
단계 3: DCM(5 mL) 중 2-아미노-1-시클로프로필-에탄올(1.00 당량, 0.50 g, 4.94 mmol)의 혼합물에 TEA(1.50 당량, 749 mg, 7.41 mmol), TsCl(1.10 당량, 1033 mg, 5.44 mmol)을 0℃에서 첨가한 다음, 반응 혼합물을 20℃에서 12시간 동안 교반하였다. LCMS는 출발 물질이 완전히 소모되었고 목적하는 질량을 갖는 하나의 주요 피크가 검출되었음을 나타냈다(74%, Rt: 0.934분; [M+H]+ = 220 nm에서 238.1). 반응 혼합물을 20℃에서 물(10 mL)을 첨가하여 급냉시킨 다음, EtOAc(20 mL)로 희석하고 EtOAc(20 mL × 3)로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 포화 NaCl(수성, 10 mL)로 세척하고, Na2SO4를 건조시켜 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 플래쉬 실리카 겔 크로마토그래피(ISCO®; 40 g SepaFlash® Silica Flash Column, 0 - 50% EtOAc /PE의 용리; 구배 @ 40 mL/분, PE/EtOAc = 3/1, 목적하는 생성물 Rf = 0.6)로 정제하여 N-(2-시클로프로필-2-히드록시-에틸)-4-메틸-벤젠설폰아미드(1.15 g, 4.50 mmol, 91.12% 수율)를 무색 오일로서 수득하였다. LCMS: [M+H]+= 238.1; 순도 = 74.152% (220 nm). 유지 시간 = 0.934분. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 7.76 (d, J = 8.3 Hz, 2H), 7.32 (d, J = 8.2 Hz, 2H), 4.97 (br s, 1H), 3.26 - 3.14 (m, 1H), 3.03 - 2.89 (m, 2H), 2.44 (s, 3H), 2.04 - 1.83 (m, 1H), 0.92 - 0.79 (m, 1H), 0.58 - 0.46 (m, 2H), 0.35 - 0.15 (m, 2H).
단계 4: 아세톤(30 mL) 중 N-(2-시클로프로필-2-히드록시-에틸)-4-메틸-벤젠설폰아미드(1.00 당량, 950 mg, 3.72 mmol) 및 K2CO3(1.50 당량, 771 mg, 5.58 mmol), KI(1.00 당량, 618 mg, 3.72 mmol)의 용액에 2-클로로-1-(1-시클로프로필-1H-피라졸-4-일)에탄-1-온(1.30 당량, 893 mg, 4.84 mmol)을 0℃에서 첨가한 다음, 30℃에서 12시간 동안 교반하였다. LCMS는 대부분의 출발 물질이 소모되었고, 목적하는 질량을 갖는 주요 피크가 있음을 나타냈다(58.6%, Rt: 0.873분; [M+Na]+ = 220 nm에서 426.1). 반응 혼합물을 에틸 아세테이트(50 × 2 mL)과 물(100 mL) 사이에서 분리시켰다. 합쳐진 유기층을 무수 Na2SO4로 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 미정제 생성물을 1 /0 내지 0/1(TLC:PE/EtOAc = 1/1, 목적하는 생성물 Rf = 0.2)로 용리된 실리카 겔 상의 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 N-(2-시클로프로필-2-히드록시-에틸)-N-[2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)-2-옥소-에틸]-4-메틸-벤젠설폰아미드(1100 mg, 2.73 mmol, 73.27% 수율)를 연황색 오일로서 수득하고, LCMS로 확인하였다. [M+H]+ = 403.1; 순도 = 93% (220 nm). 유지 시간 = 0.558분. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 8.05 (s, 1H), 7.91 (s, 1H), 7.74 (d, J = 8.1 Hz, 2H), 7.32 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 4.67 - 4.57 (m, 1H), 4.48 - 4.37 (m, 1H), 3.65 (tt, J = 3.7, 7.2 Hz, 1H), 3.42 - 3.36 (m, 1H), 3.33 - 3.26 (m, 1H), 3.09 - 2.97 (m, 1H), 2.44 (s, 3H), 1.17 (br d, J = 4.4 Hz, 2H), 1.11 (br s, 2H), 1.08 - 0.97 (m, 1H), 0.81 - 0.72 (m, 1H), 0.53 - 0.41 (m, 2H), 0.33 (td, J = 4.7, 9.0 Hz, 1H), 0.17 (qd, J = 4.6, 9.2 Hz, 1H).
단계 5: DCM(20 mL) 중 N-(2-시클로프로필-2-히드록시-에틸)-N-[2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)-2-옥소-에틸]-4-메틸-벤젠설폰아미드(1.00 당량, 1000 mg, 2.48 mmol) 및 TES(10.0 당량, 7.8 mL, 24.8 mmol)의 용액에 TMSOTf(10.0 당량, 4.5 mL, 24.8 mmol)를 0℃에서 혼합물에 첨가하였다. 혼합물을 30℃에서 12시간 동안 교반하였다. LCMS는 출발 물질이 완전히 소모되었고 목적하는 질량을 갖는 주요 피크가 있음을 나타냈다(97%, Rt: 0.659분; MS: 220 nm에서 388.1 [M+H]+). 반응 혼합물을 EtOAc(50 × 2 mL)와 물(100 mL) 사이에서 분리시켰다. 합쳐진 유기층을 Na2SO4로 건조시키고, 여과하고 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 미정제 생성물을 실리카 겔을 이용한 컬럼 크로마토그래피(PE/EtOAc = 1/0 내지 0/1, TLC: PE/EtOAc = 1/1, Rf = 0.6으로 용리됨)로 정제하여 2-시클로프로필-6-(1-시클로프로필피라졸-4-일)-4-(p-톨일설포닐)모르폴린(530 mg, 1.37 mmol, 55.19% 수율)을 오일로서 수득하고, LCMS [M+H]+ = 388.3; 순도 = 98.7%(220 nm)로 확인하였다. 유지 시간 = 0.867분. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6 ) δ = 7.75 (s, 1H), 7.66 (d, J = 8.2 Hz, 2H), 7.47 (d, J = 7.9 Hz, 2H), 7.36 (s, 1H), 4.47 (dd, J = 2.3, 10.5 Hz, 1H), 3.70 - 3.50 (m, 3H), 3.07 - 2.95 (m, 1H), 2.42 (s, 3H), 2.10 (td, J = 11.0, 16.6 Hz, 2H), 1.00 - 0.96 (m, 2H), 0.94 - 0.89 (m, 2H), 0.83 - 0.73 (m, 1H), 0.47 - 0.39 (m, 2H), 0.29 (br d, J = 4.8 Hz, 2H).
단계 6: MeOH(5 mL) 중 2-시클로프로필-6-(1-시클로프로필피라졸-4-일)-4-(p-톨일설포닐)모르폴린(1.00 당량, 100 mg, 0.258 mmol)의 혼합물에 Mg 칩(10.0 당량, 62 mg, 2.58 mmol) 및 Mg 분말(10.0 당량, 62 mg, 2.58 mmol)을 25℃에서 첨가하고, 반응 혼합물을 80℃에서 12시간 동안 교반하였다. LCMS는 일부 출발 물질이 남아 있음을 나타냈다. Mg 칩(10.0 당량, 62 mg, 2.58 mmol)을 혼합물에 첨가하고, 반응 혼합물을 80℃에서 12시간 동안 교반하였다. LCMS는 출발 물질이 완전히 소모되었고 목적하는 MS(92%, Rt: 0.248분; MS: 220 nm에서 234.2 [M+H]+)를 갖는 주요 피크가 있음을 나타냈다. 반응 혼합물을 감압 하에 농축시켜 2-시클로프로필-6-(1-시클로프로필피라졸-4-일)모르폴린(45 mg, 0.193 mmol, 74.74% 수율)을 백색 고형분으로서 수득하고, 이를 다음 단계에 직접 사용하였다. [M+H]+ = 234.2 ; 순도 = 92.637% (220 nm). 유지 시간 = 0.248분.
단계 7: DMSO(2 mL) 중 2-클로로-4-(2,4-디플루오로페닐)-6,7-디메틸-프테리딘(1.00 당량, 60 mg, 0.196 mmol) 및 DIEA(3.00 당량, 0.097 mL, 0.587 mmol)의 용액에 (2R,6S)-2-시클로프로필-6-(1-시클로프로필피라졸-4-일)모르폴린(1.00 당량, 46 mg, 0.196 mmol)(시스)을 25℃에서 첨가하였다. 그런 다음, 반응 혼합물을 100℃에서 1시간 동안 교반하였다. LCMS는 출발 물질이 완전히 소모되었고 목적하는 질량이 검출되었음을 나타냈다(60%, Rt: 0.845분; [M+H]+ = 220 nm에서 504.4). 반응 혼합물을 0℃에서 NH4Cl(20 mL)을 첨가하여 급냉시킨 다음, EtOAc(15 mL × 3)로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 염수(10 mL)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 분취-HPLC(컬럼: Phenomenex luna C18 150 × 25 mm × 10 um; 이동상: [물 (FA)-ACN]; B%: 56% - 86%, 12분)로 정제하고 동결건조시켜 (2R,6S)-2-시클로프로필-6-(1-시클로프로필피라졸-4-일)-4-[4-(2,4-디플루오로페닐)-6,7-디메틸-프테리딘-2-일]모르폴린(25 mg, 0.0487 mmol, 24.87% 수율) (시스)을 황색 고형분으로서 수득하였다. LCMS, HPLC 및 SFC (컬럼: Chiralpak IC-3 50 × 4.6 mm I.D., 3 um; 이동상: CO2의 경우 상 A, 및 IPA+ACN (0.05%DEA)의 경우 상 B; 구배 용리: CO2 중의 40% IPA+ACN (0.05% DEA); 유속: 3 mL/분; 검출기: PDA; 컬럼 온도: 35C; 배압: 100 Bar). (시스) [M+H]+ = 504.4; 순도 = 98% (220 nm). 유지 시간 = 0.841분. SFC 피크 1 유지 시간 = 1.306분, 피크 2 유지 시간 = 1.939분; 피크 1/피크 2 = 1:1. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 7.64 (q, J = 7.8 Hz, 1H), 7.47 (s, 2H), 7.04 - 6.84 (m, 2H), 4.98 (br d, J = 9.0 Hz, 2H), 4.45 (dd, J = 2.0, 10.8 Hz, 1H), 3.50 (tt, J = 3.6, 7.3 Hz, 1H), 3.08 - 2.88 (m, 3H), 2.64 (s, 3H), 2.52 (s, 3H), 1.11 - 1.00 (m, 2H), 0.98 - 0.85 (m, 3H), 0.60 - 0.47 (m, 2H), 0.45 - 0.27 (m, 2H).
단계 8: 2R,6S)-2-시클로프로필-6-(1-시클로프로필피라졸-4-일)-4-[4-(2,4-디플루오로페닐)-6,7-디메틸-프테리딘-2-일]모르폴린 및 (2S,6R)-2-시클로프로필-6-(1-시클로프로필피라졸-4-일)-4-[4-(2,4-디플루오로페닐)-6,7-디메틸-프테리딘-2-일]모르폴린의 혼합물. (2R,6S)-2-시클로프로필-6-(1-시클로프로필피라졸-4-일)-4-[4-(2,4-디플루오로페닐)-6,7-디메틸-프테리딘-2-일]모르폴린(1.00 당량, 20 mg, 0.0397 mmol) (시스)를 SFC(컬럼: DAICEL CHIRALPAK IC (250 mm × 30 mm, 10 um); 이동상: CO2의 경우 상 A, 및 IPA+CAN (0.1% NH3H2O IPA)의 경우 상 B; 구배 용리: 50% IPA+ CO2 중 ACN (0.1% NH3H2O IPA);유속: 70 mL/분; 검출기: PDA; 컬럼 온도: 35C; 구배 시간: 4.2분)로 정제하여 (2R,6S)-2-시클로프로필-6-(1-시클로프로필피라졸-4-일)-4-[4-(2,4-디플루오로페닐)-6,7-디메틸-프테리딘-2-일]모르폴린(7.5 mg, 0.0149 mmol, 37.50% 수율)을 황색 고형분으로서 수득하고 (2S,6R)-2-시클로프로필-6-(1-시클로프로필피라졸-4-일)-4-[4-(2,4-디플루오로페닐)-6,7-디메틸-프테리딘-2-일]모르폴린(8.8 mg, 0.0175 mmol, 44.00% 수율)을 황색 고형분으로서 수득하였다. LCMS, [M+H]+ = 504.3; 순도 = 100% (220 nm). 유지 시간 = 0.993분, ee= 99.97%. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 7.77 - 7.67 (m, 1H), 7.55 (s, 2H), 7.09 - 6.93 (m, 2H), 5.06 (br d, J = 10.1 Hz, 2H), 4.53 (dd, J = 2.1, 10.8 Hz, 1H), 3.68 - 3.52 (m, 1H), 3.14 - 2.96 (m, 3H), 2.72 (s, 3H), 2.60 (s, 3H), 1.15 - 1.08 (m, 2H), 1.06 - 0.96 (m, 3H), 0.67 - 0.55 (m, 2H), 0.52 - 0.36 (m, 2H). SFC 중의 피크 2: [M+H]+ = 504.3; 순도 = 100% (220 nm). 유지 시간 = 0.990분, ee= 99.24%. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 7.76 - 7.66 (m, 1H), 7.55 (s, 2H), 7.09 - 6.93 (m, 2H), 5.06 (br d, J = 10.6 Hz, 2H), 4.53 (br d, J = 9.4 Hz, 1H), 3.58 (td, J = 3.4, 6.8 Hz, 1H), 3.15 - 2.96 (m, 3H), 2.72 (s, 3H), 2.60 (s, 3H), 1.17 - 1.08 (m, 2H), 1.06 - 0.96 (m, 3H), 0.68 - 0.55 (m, 2H), 0.52 - 0.36 (m, 2H).
I-1391의 합성(I-1588 및 I-1396과 동일한 일반 방법)
N2 하에 화염 건조된 10 ml 마이크로파 바이알에 PEPPSI™-SIPr(0.05 당량, 4.3 mg, 0.006 mmol) 및 클로로-[2,6-디플루오로-4-(트리플루오로메틸)페닐]아연(4.00 당량, 3.9 mL, 0.5 mmol)을 채웠다. 그런 다음, 혼합물을 0℃로 냉각시켰다. MeCN(0.42 mL)에 이어서 2-[(2R,4S)-2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)테트라하이드로피란-4-일]-6,7-디메틸-4-메틸설파닐-프테리딘(1.00 당량, 50 mg, 0.13 mmol)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 N2로 퍼징하고, 반응 온도를 100℃로 조절하면서 일정한 마이크로파 하에 2시간 동안 조사하였다. 반응 혼합물을 물(20 mL) 및 EtOAc(20 mL)로 희석하였다. 수성층을 수집하고, 유기층을 물(2 x 30 mL)로 세척하였다. 유기상을 수집하고, Na2SO4로 건조시키고, 셀라이트 패드를 통해 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 생성된 물질을 헥산 중 40-100% EtOAc의 구배를 사용하는 10 g Biotage 컬럼을 이용한 플래쉬 크로마토그래피에 의해 정제한 다음, DCM 중 0-20% MeOH를 사용하여 세척하였다. 목적하는 분획을 증발시켜 목적하는 유사체를 부분 입체이성질체의 혼합물로서 수득하였다. 목적하는 시스 부분 입체이성질체를 수성 10 mM 포름산암모늄(PH= 3.8) 및 ACN(45-65%)을 사용하여 분취-HPLC 정제(Gemini® 5 um NX-C18 110 Å, 100 x 30 mm)에 의해 단리하였다. 황색 고형분으로서 4-[2,6-디플루오로-4-(트리플루오로메틸)페닐]-6,7-디메틸-2-[(2R,4S)-2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)테트라히드로피란-4-일]프테리딘(25 mg,0.0471 mmol, 37% 수율). ESI-MS (m/z+): 531.1 [M+H]+. 1H NMR (CHCl3-d, 400 MHz): δH 7.48 (2H, d, J = 2.0 Hz), 7.35 (2H, d, J = 7.5 Hz), 4.53 (1H, dd, J = 11.4, 2.1 Hz), 4.24 (1H, d, J = 11.5 Hz), 3.78 (1H, s), 3.53 (2H, td, J = 7.3, 3.7 Hz), 2.84 (3H, s), 2.69 (3H, s), 2.40 (1H, s), 2.13-2.22 (3H, m), 1.05-1.08 (2H, m), 0.95-0.99 (2H, m).
화합물 I-1401의 합성
단계 1: MeCN(10 mL) 중 5-플루오로-1H-피라졸(1.00 당량, 900 mg, 10.5 mmol)의 혼합물에 25℃에서 NIS(1.00당량, 2353 mg, 10.5 mmol)를 첨가하였다. 그런 다음, 혼합물을 60℃에서 16시간 동안 교반하였다. TLC(PE:EA = 3:1, 새로운 스폿 Rf = 0.5)는 재료가 완전히 소모되었고 하나의 새로운 주요 스폿이 형성되었음을 나타냈다. 반응 혼합물을 물 20 mL로 희석하고 EA(50 mL * 2)로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 수성 Na2SO3(100 mL * 2)으로 세척하고, [Na2SO4] 상에서 건조시키고, 여과하고 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 플래쉬 실리카 겔 크로마토그래피(0-15% 에틸 아세테이트/석유 에테르의 용리액)로 정제하여 5-플루오로-4-요오도-1H-피라졸(1300 mg, 6.13 mmol, 58.65% 수율)을 황색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 7.48 (d, J=1.38 Hz, 1 H) 10.05 - 10.58 (m, 1 H) 10.06 - 10.06 (m, 1 H).
단계 2: THF(20 mL) 중 5-플루오로-4-요오도-1H-피라졸(1.00 당량, 1300 mg, 6.13 mmol)의 용액을 N2로 0℃에서 3회 퍼징하고, NaH(1.20 당량, 294 mg, 7.36 mmol)를 0℃로 유지된 온도로 서서히 첨가하고 0.5시간 동안 교반한 다음, SEMCl(1.50 당량, 1.6 mL, 9.20 mmol)을 첨가하고 25℃로 가온시키고 12시간 동안 교반하였다. TLC(PE/EA = 5/1, 새로운 스폿 Rf = 0.7)는 출발 물질이 완전히 소모되었고 하나의 새로운 스폿이 형성되었음을 나타냈다. 반응 혼합물을 포화 수성 NH4Cl(50 mL)에 서서히 부은 다음, 혼합물을 EA(80 mL * 3)로 추출하였다. 유기층을 염수로 세척하고, Na2SO4로 건조시켰다. 용액을 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 미정제 생성물을 플래쉬 실리카 겔 크로마토그래피(0-15% 에틸 아세테이트/석유 에테르의 용리액)로 정제하여 2-[(5-플루오로-4-요오도-피라졸-1-일)메톡시]에틸-트리메틸-실란(2100 mg, 5.83 mmol, 95.05% 수율)을 무색 오일로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 0.00 (d, J=0.88 Hz, 9 H) 0.88 - 0.94 (m, 2 H) 3.55 - 3.61 (m, 2 H) 5.26 (s, 2 H) 7.45 (d, J=2.00 Hz, 1 H).
단계 3: THF(30 mL) 중 2-[(5-플루오로-4-요오도-피라졸-1-일)메톡시]에틸-트리메틸-실란 (1.00 당량, 1900 mg, 4.44 mmol)의 용액에 iPrMgC·LiCl(1.00 당량, 3.4 mL, 4.44 mmol)을 -78℃에서 첨가하고 30분 동안 교반한 다음, 2-클로로-N-메톡시-N-메틸아세타미드(1.10 당량, 672 mg, 4.89 mmol)를 0℃에서 첨가하고 25℃에서 1시간 동안 교반하였다. TLC(PE/EA = 5/1, 출발 물질 Rf = 0.7, 새로운 스폿 Rf = 0.3)는 출발 물질이 완전히 소모되었고 하나의 새로운 스폿이 형성되었음을 나타냈다. 반응 혼합물을 포화 수성 NH4Cl(100 mL)에 서서히 붓고 0℃에서 10분 동안 교반한 다음, 혼합물을 EtOAc(100 mL * 3)로 추출하였다. 유기층을 염수로 세척하고, Na2SO4로 건조시켰다. 용액을 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 플래쉬 실리카 겔 크로마토그래피(0-13% 에틸 아세테이트/석유 에테르의 용리액)로 정제하여 2-클로로-1-[5-플루오로-1-(2-트리메틸실릴에톡시메틸)피라졸-4-일]에타논(950 mg, 3.08 mmol, 69.39% 수율)을 황색 오일로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm -0.01 - 0.02 (m, 9 H) 0.92 - 0.97 (m, 2 H) 3.61 - 3.66 (m, 2 H) 4.48 (s, 2 H) 5.31 (s, 2 H) 8.04 (d, J=1.50 Hz, 1 H).
단계 4: 아세톤(20 mL) 중 2-클로로-1-[5-플루오로-1-(2-트리메틸실릴에톡시메틸)피라졸-4-일]에타논(1.00당량, 900 mg, 3.07 mmol)의 용액에 N-[(2R)-2-히드록시프로필]-4-메틸-벤젠설폰아미드(1.20 당량, 846 mg, 3.69 mmol), K2CO3(3.00 당량, 1274 mg, 9.22 mmol) 및 KI(1.00 당량, 510 mg, 3.07 mmol)를 첨가하고, 용액을 30℃에서 16시간 동안 교반하였다. LCMS (5-95AB/1.5분): RT = 0.834분, 486.2 = [M+H]+, ESI+는 목적하는 질량이 검출되었음을 나타냈다. 잔류물을 플래쉬 실리카 겔 크로마토그래피(0 - 17% 에틸 아세테이트/석유 에테르의 용리액)로 정제하여 N-[2-[5-플루오로-1-(2-트리메틸실릴에톡시메틸)피라졸-4-일]-2-옥소-에틸]-N-[(2R)-2-히드록시프로필]-4-메틸-벤젠설폰아미드(800 mg, 1.65 mmol, 53.59% 수율)(미정제)를 황색 오일로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 0.02 (s, 9 H) 0.93 - 0.98 (m, 2 H) 1.13 (br d, J=6.13 Hz, 3 H) 2.45 (s, 3 H) 3.55 - 3.66 (m, 3 H) 3.77 - 3.95 (m, 2 H) 4.34 - 4.40 (m, 1 H) 4.58 - 4.64 (m, 1 H) 5.21 (s, 1 H) 5.30 (s, 2 H) 7.34 (br d, J=7.63 Hz, 2 H) 7.64 (br d, J=7.88 Hz, 1 H) 7.75 (br d, J=8.00 Hz, 2 H).
단계 5: DCM(16 mL) 중 N-[2-[5-플루오로-1-(2-트리메틸실릴에톡시메틸)피라졸-4-일]-2-옥소-에틸]-N-[(2R)-2-히드록시프로필]-4-메틸-벤젠설폰아미드(1.00 당량, 800 mg, 1.65 mmol)의 용액에 트리에틸실란(5.00 당량, 955 mg, 8.24 mmol) 및 트리메틸실릴 트리플루오로메탄설포네이트(5.00 당량, 1.5 mL, 8.24 mmol)를 0℃에서 첨가한 다음, 25℃에서 16시간 동안 교반하였다. LCMS (5-95AB/1.5분): RT = 0.853분, 340.1 = [M+H]+, ESI+는 출발 물질이 완전히 소모되었고 목적하는 질량을 갖는 하나의 주요 피크가 검출되었음을 나타냈다. TLC(EA, 새로운 스폿 Rf = 0.4)는 반응물이 완전히 소모되었고 하나의 새로운 스폿이 형성되었음을 나타냈다. 반응 혼합물을 물 5 mL을 첨가하여 급냉시키고, EA(10 mL * 2)로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 [Na2SO4]로 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 플래쉬 실리카 겔 크로마토그래피(0 - 60% 에틸 아세테이트/석유 에테르의 용리액)로 정제하여 (2S,6R)-2-(5-플루오로-1H-피라졸-4-일)-6-메틸-4-(p-톨일설포닐)모르폴린(350 mg, 1.03 mmol, 62.60% 수율)을 황색 오일로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 1.15 - 1.21 (m, 3 H) 2.06 - 2.12 (m, 1 H) 2.32 (t, J=11.00 Hz, 1 H) 2.46 (s, 3 H) 3.64 (dt, J=11.34, 2.03 Hz, 1 H) 3.78 (dt, J=11.49, 1.96 Hz, 1 H) 3.85 (ddd, J=10.21, 6.30, 2.45 Hz, 1 H) 4.65 (dd, J=10.64, 2.57 Hz, 1 H) 7.33 - 7.40 (m, 3 H) 7.65 (d, J=8.19 Hz, 2 H).
단계 6: 1,4-디옥산(10 mL) 중 (2S,6R)-2-(5-플루오로-1H-피라졸-4-일)-6-메틸-4-(p-톨일설포닐)모르폴린(1.00 당량, 100 mg, 0.295 mmol), 시클로프로필보론산(2.00 당량, 51 mg, 0.589 mmol), DMAP (4.00 당량, 144 mg, 1.18 mmol), 피리딘(2.50 당량, 0.060 mL, 0.737 mmol) 및 Cu(OAc)2 (1.00 당량, 54 mg, 0.295 mmol)의 혼합물을 100℃에서 O2 (15 psi) 하에 12시간 동안 교반하였다. LCMS (5-95AB/1.5분): RT = 0.777분, 380.3 = [M+H]+, ESI+는 출발 물질이 완전히 소모되었고 목적하는 질량이 검출되었음을 나타냈다. 반응 혼합물을 여과하고 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 플래쉬 실리카 겔 크로마토그래피(0-50% 에틸 아세테이트/석유 에테르의 용리액)(TLC:EA, UV, Rf = 0.7)로 정제하여 (2S,6R)-2-(1-시클로프로필-5-플루오로-피라졸-4-일)-6-메틸-4-(p-톨일설포닐)모르폴린(110 mg, 0.290 mmol, 98.39% 수율)을 황색 오일로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 0.92 - 1.07 (m, 4 H) 1.18 (d, J=6.25 Hz, 3 H) 2.03 - 2.09 (m, 2 H) 2.31 (t, J=11.07 Hz, 1 H) 2.46 (s, 3 H) 3.38 - 3.45 (m, 1 H) 3.63 (dt, J=11.41, 2.05 Hz, 1 H) 3.75 (dt, J=11.44, 2.10 Hz, 1 H) 3.79 - 3.87 (m, 1 H) 4.58 (dd, J=10.63, 2.63 Hz, 1 H) 7.23 - 7.27 (m, 1 H) 7.36 (d, J=8.00 Hz, 2 H) 7.65 (d, J=8.25 Hz, 2 H).
단계 7: 메탄올(10 mL) 중 (2S,6R)-2-(1-시클로프로필-5-플루오로-피라졸-4-일)-6-메틸-4-(p-톨일설포닐)모르폴린(1.00 당량, 110 mg, 0.290 mmol)의 용액에 Mg(분말)(15.0 당량, 104 mg, 4.35 mmol) 및 Mg(칩)(15.0 당량, 104 mg, 4.35 mmol)을 25℃에서 첨가한 다음, 혼합물을 80℃에서 16시간 동안 교반하였다. LCMS (5-95AB/1.5분): RT = 0.336분, 226.3 = [M+H]+, ESI+는 출발 물질이 완전히 소모되었고 목적하는 질량을 갖는 하나의 주요 피크가 검출되었음을 나타냈다. 반응 혼합물을 여과하고 감압 하에 농축시켜 (2S,6R)-2-(1-시클로프로필-5-플루오로-피라졸-4-일)-6-메틸-모르폴린(60 mg, 0.266 mmol, 91.88% 수율)을 백색 고형분으로서 수득하고, 이를 다음 단계에서 직접 사용하였다.
단계 8: DMSO(0.5 mL) 중 2-클로로-4-(2,4-디플루오로페닐)-6,7-디메틸-프테리딘(1.00 당량, 30 mg, 0.0978 mmol) 및 (2S,6R)-2-(1-시클로프로필-5-플루오로-피라졸-4-일)-6-메틸-모르폴린(1.50 당량, 33 mg, 0.147 mmol)의 용액에 DIEA(5.00 당량, 0.08 mL, 0.489 mmol)를 첨가한 다음, 혼합물을 100℃에서 20분 동안 교반하였다. LCMS (5-95AB/1.5분): RT = 1.019분, 496.2 = [M+H]+, ESI+는 반응물이 완전히 소모되었고 목적하는 질량이 검출되었음을 나타냈다. 반응 혼합물을 물 10 mL로 희석시키고, EA(10 mL * 3)으로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 [Na2SO4]로 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 분취-HPLC(물(0.225%FA)-ACN, Phenomenex luna C18 150 * 25 mm * 10 um)로 정제하여 (2S,6R)-2-(1-시클로프로필-5-플루오로-피라졸-4-일)-4-[4-(2,4-디플루오로페닐)-6,7-디메틸-프테리딘-2-일]-6-메틸-모르폴린(11 mg, 0.0210 mmol, 21.51% 수율)을 황색 고형분으로서 수득하였다. LCMS: (M+H)+ = 496.2; 순도 = 94.5% (220 nm). 유지 시간 = 0.702분. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 0.94 - 1.02 (m, 2 H) 1.03 - 1.11 (m, 2 H) 1.32 (d, J=6.25 Hz, 3 H) 2.60 (s, 3 H) 2.72 (s, 3 H) 2.83 - 2.89 (m, 1 H) 3.06 - 3.22 (m, 1 H) 3.46 (tt, J=7.13, 3.75 Hz, 1 H) 3.79 - 3.88 (m, 1 H) 4.57 (dd, J=11.01, 2.50 Hz, 1 H) 4.90 - 5.15 (m, 2 H) 6.94 - 7.08 (m, 2 H) 7.40 (d, J=2.25 Hz, 1 H) 7.67 - 7.77 (m, 1 H).
화합물 I-1414 및 I-1432의 합성
단계 1: THF(0.5 mL) 중 요오드(0.050 당량, 25 mg, 0.099 mmol)를 N2 분위기 하에 건조 THF(4 mL) 중 Mg(1.27 당량, 60 mg, 2.50 mmol)의 현탁액에 첨가하고, 1-브로모-3-(트리플루오로메틸)시클로부탄(1.00당량, 400 mg, 1.97 mmol)을 25℃에서 첨가하고, 황색 용액이 무색 용액으로 변할 때까지 가열한 다음, 25℃에서 1시간 동안 교반하고, 유백색 현탁액을 형성하였다. ZnCl2(0.900 당량, 3.5 mL, 1.77 mmol)를 적가하고, 혼합물을 30분 동안 교반하였다. 백색 침전물이 형성되었다. 반응 용액을 주사기로 직접 사용하였다.
단계 2: N2 분위기 하 밀봉된 병에 2,4-디클로로-6,7-디메틸-프테리딘(1.00 당량, 100 mg, 0.437 mmol) 및 PdCl2(Amphos) (0.050 당량, 15 mg, 0.0218 mmol) 및 THF(3 mL)를 채우고, N2로 3회 퍼징하고, 클로로-[3-(트리플루오로메틸)시클로부틸]아연(4.51 당량, 441 mg, 1.97 mmol)을 25℃에서 반응 용액에 적가한 다음, 45℃로 가열하고 1시간 동안 교반하였다. 반응 용액이 황색에서 짙은 갈색으로 변하였고, 반응을 완료하고, 반응 용액을 H2O(10 mL)에 붓고, EtOAc(10 mL * 2)로 추출하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 감압 하에 증발시켜 2-클로로-6,7-디메틸-4-[3-(트리플루오로메틸)시클로부틸]프테리딘(60 mg, 0.189 mmol, 43.40% 수율)을 황색 고형분으로서 수득하였다. [M+H]+ = 317.0; 순도 = 92.4% (220 nm). 유지 시간 = 0.922분. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 5.00 - 4.83 (m, 1H), 3.28 - 3.11 (m, 1H), 2.85 - 2.74 (m, 10H).
단계 3: 1,4-디옥산(2 mL) 및 물(0.4 mL) 중의 2-클로로-6,7-디메틸-4-[3-(트리플루오로메틸)시클로부틸]프테리딘(1.00 당량, 60 mg, 0.189 mmol),1-시클로프로필-4-[(6R)-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)-3,6-디히드로-2H-피란-6-일]피라졸(1.10 당량, 66 mg, 0.208 mmol) 및 K2CO3 (2.00 당량, 32 mg, 0.379 mmol)의 용액에 [1,1'-비스(디페닐포스피노)페로센]디클로로팔라듐(II) (0.0800 당량, 11 mg, 0.0152 mmol)을 첨가하고 N2로 3회 첨가하고, 반응 용액을 100℃에서 2시간 동안 교반하였고, LCMS는 반응물이 소모되었고 61%의 목적하는 질량이 검출되었다. 반응 용액을 H2O (5 mL)에 붓고, EtOAc (5 mL * 2)로 추출하고, Na2SO4로 건조시키고, 감압 하에 증발시켜 잔류물을 수득한 다음, 이를 분취-Prep-TLC(순수 EA, Rf = 0.4)로 정제하여 2-[(6R)-6-(1-시클로프로필피라졸-4-일)-3,6-디히드로-2H-피란-4-일]-6,7-디메틸-4-[3-(트리플루오로메틸)시클로부틸]프테리딘(56 mg, 0.119 mmol, 62.83% 수율)을 황색 고형분으로서 수득하였다. [M+H]+ = 471.2; 순도 = 94.5% (220 nm). 유지 시간 = 0.953분.
단계 4: 에탄올(5 mL) 중 2-[(6R)-6-(1-시클로프로필피라졸-4-일)-3,6-디히드로-2H-피란-4-일]-6,7-디메틸-4-[3-(트리플루오로메틸)시클로부틸]프테리딘(1.00 당량, 56 mg, 0.119 mmol)의 용액에 PtO2(1.00 당량, 27 mg, 0.119 mmol)를 N2 분위기 하에 첨가하였다. 혼합물을 H2로 3회 퍼징한 다음, 혼합물을 H2 분위기(15 psi) 하에 25℃에서 12시간 동안 교반하였다. LCMS는 반응물이 소모되었음을 나타냈고 목적하는 질량의 95%가 검출되었고, 반응 혼합물을 셀라이트를 통해 여과하고 감압 하에 증발시켜 2-[(2R)-2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)테트라하이드로피란-4-일]-6,7-디메틸-4-[3-(트리플루오로메틸)시클로부틸]-5,6,7,8-테트라하이드로프테리딘(55 mg, 0.115 mmol, 96.97% 수율)을 황색 오일로서 수득하였다. [M+H]+ = 477.1; 순도 = 95% (220 nm). 유지 시간 = 0.725분.
단계 5: DCM(4 mL) 중 2-[(2R)-2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)테트라하이드로피란-4-일]-6,7-디메틸-4-[3-(트리플루오로메틸)시클로부틸]-5,6,7,8-테트라하이드로프테리딘(1.00 당량, 55 mg, 0.115 mmol)의 용액에 MnO2(15.0 당량, 151 mg, 1.73 mmol)를 첨가하고 25℃에서 12시간 동안 교반하였다. LCMS는 반응물이 소모되었고 목적하는 질량의 90%가 검출되었음을 나타내었고, 반응 혼합물을 셀라이트를 통해 여과하고, 감압 하에 증발시켜 잔류물을 수득하고, 그런 다음, 이를 분취-HPLC(FA)로 정제하고 동결건조시켜 2-[(2R)-2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)테트라히드로피란-4-일]-6,7-디메틸-4-[3-(트리플루오로메틸)시클로부틸]프테리딘(5.7 mg, 0.0121 mmol, 10.45% 수율)을 회백색 고형분으로 수득하고 2-[(2R)-2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)테트라히드로피란-4-일]-6,7-디메틸-4-[3-(트리플루오로메틸)시클로부틸]프테리딘(22 mg, 0.0463 mmol, 40.09% 수율)을 회백색 고형분으로서 수득하였다. [M+H]+ = 473.2; 순도 = 99.6% (220 nm). 유지 시간 = 2.387분. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 7.52 (s, 2H), 4.68 (t, J = 9.0 Hz, 1H), 4.61 - 4.52 (m, 1H), 4.31 - 4.24 (m, 1H), 3.89 - 3.76 (m, 1H), 3.62 - 3.52 (m, 1H), 3.52 - 3.43 (m, 1H), 3.23 - 3.06 (m, 1H), 2.84 - 2.74 (m, 8H), 2.70 - 2.60 (m, 2H), 2.48 - 2.41 (m, 1H), 2.26 - 2.10 (m, 3H), 1.15 - 1.08 (m, 2H), 1.04 - 0.96 (m, 2H). [M+H]+ = 473.2; 순도 = 97.9% (220 nm). 유지 시간 = 2.443분. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 7.52 (d, J = 1.3 Hz, 2H), 4.90 (quin, J = 8.1 Hz, 1H), 4.58 (dd, J = 1.9, 11.4 Hz, 1H), 4.32 - 4.24 (m, 1H), 3.87 - 3.77 (m, 1H), 3.58 - 3.42 (m, 2H), 3.26 - 3.08 (m, 1H), 2.86 - 2.74 (m, 9H), 2.44 (br d, J = 13.3 Hz, 1H), 2.21 - 2.11 (m, 3H), 1.12 - 1.07 (m, 2H), 1.02 - 0.95 (m, 2H).
화합물 I-1433의 합성
DMSO (1 mL) 중 (2R)-2-(5-시클로프로필-1, 3, 4-옥사디아조l-2-일) 모르폴린(1.00 당량, 100 mg, 0.512 mmol) 및 2-클로로-4-(2, 4-디플루오로페닐)-6, 7-디메틸-프테리딘(0.500 당량, 79 mg, 0.256 mmol) 의 용액에 DIEA(4.00 당량, 0.34 mL, 2.05 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 100℃에서 1시간 동안 교반하였다. LCMS는 출발 물질이 완전히 소모되었고 목적하는 질량(12%, MS: 466.1 [M+H]+, ESI pos)을 갖는 새로운 피크가 있음을 나타냈다. 반응물을 여과하고, 여액을 분취-HPLC(유속: 25 mL/분; 구배: 7분에 걸쳐 38-68% 물(0.1% FA)-ACN; 컬럼: Unisil 3-100 C18 Ultra 150 * 25 mm * 10 um)로 정제하고, 동결 건조시켜 (2R)-2-(5-시클로프로필-1,3,4-옥사디아졸-2-일)-4-[4-(2,4-디플루오로페닐)-6,7-디메틸-프테리딘-2-일]모르폴린(2.3 mg, 0.00434 mmol, 0.8500% 수율)을 갈색 고형분으로서 수득하였다. Rt: 0.926분, m/z: 466.1 [M+H]+. 220 nm에서 96.54% 순도. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 1.11 - 1.21 (m, 4 H) 2.13 - 2.21 (m, 1 H) 2.61 (s, 3 H) 2.73 (s, 3 H) 3.50 (ddd, J=13.76, 10.88, 3.38 Hz, 1 H) 3.64 - 3.75 (m, 1 H) 3.85 (td, J=11.07, 2.38 Hz, 1 H) 4.17 (dt, J=11.44, 2.78 Hz, 1 H) 4.85 (dd, J=10.13, 2.88 Hz, 2 H) 5.17 (br d, J=12.51 Hz, 1 H) 6.94 - 7.08 (m, 2 H) 7.72 (td, J=8.13, 6.75 Hz, 1 H).
화합물 I-1436의 합성
단계 1: DCM(150 mL) 중 2, 6-디클로로피리딘-4-아민(1.00 당량, 5000 mg, 30.7 mmol)의 용액에 (Boc)2O(1.00 당량, 7.1 mL, 30.7 mmol) 및 DMAP(0.170 당량, 636 mg, 5.21 mmol)를 0℃에서 첨가한 다음, 30℃에서 16시간 동안 교반하였다. TLC(PE/EA = 3/1, 출발 물질 Rf = 0.1; PE/EA = 3/1, 새로운 스폿 Rf = 0.5)는 새로운 스폿이 검출되었음을 나타냈다. 반응 혼합물을 포화 NH4Cl 수용액(100 mL)에 붓고, 에틸 아세테이트(100 mL * 3)로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 Na2SO4로 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 PE/EtOAc(100/1 내지 3/1)(TLC, PE: EtOAc = 5:1, Rf = 0.60)로 용리하는 실리카 겔 상의 플래쉬 크로마토그래피로 정제하여 생성물 터트-부틸 N-(2,6-디클로로-4-피리딜) 카르바메이트(7000 mg, 21.3 mmol, 69.38% 수율)를 수득하였고, LCMS(M-56+H)+ = 207.1; 순도 = 80%(254 nm)였다. 유지 시간 = 0.930분.
단계 2: THF(8 mL) 중 터트-부틸 N-(2,6-디클로로-4-피리딜)카르바메이트(1.00 당량, 500 mg, 1.90 mmol)의 용액을 N2로 -78℃에서 3회 퍼징하고, t-부틸 리튬/펜탄(3.10 당량, 4.5 mL, 5.89 mmol)을 0℃로 유지된 온도로 서서히 첨가하고 0.5시간 동안 교반한 다음, DMF(1.50당량, 208 mg, 2.85 mmol)를 첨가하고 25℃로 가온시키고 2시간 동안 교반하였다. TLC(PE/EA = 5/1, 출발 물질 Rf = 0.1; 새로운 스폿 Rf = 0.5, UV)는 새로운 스폿이 검출되었음을 나타냈다. 반응 혼합물을 포화 NH4Cl 수용액(100 mL)에 붓고, 에틸 아세테이트(10 mL * 3)로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 Na2SO4로 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 PE/EtOAc(100/1 내지 3/1)(TLC, PE:EtOAc = 5:1, Rf = 0.50)로 용리하는 실리카 겔 상의 플래쉬 크로마토그래피로 정제하여 생성물 터트-부틸 N-(2,6-디클로로-4-피리딜)카르바메이트(7000 mg, 21.3 mmol, 69.38% 수율)를 수득하였고, 이는 H NMR이었다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 11.11 - 10.98 (m, 1H), 10.47 - 10.45 (m, 1H), 8.48 (s, 1H), 1.55 (s, 9H).
단계 3: HCl/디옥산(4 M, 11.6 당량, 2.5 mL, 10.0 mmol) 중 삼차-부틸 N-(2,6-디클로로-3-포르밀-4-피리딜)카르바메이트(1.00당량, 250 mg, 0.859 mmol)의 용액을 30℃에서 1시간 동안 교반하였다. LCMS (5-95AB/1.5분): RT = 0.564분, 191.0 = [M+H]+, ESI+는 목적하는 생성물의 91%를 나타냈다. 반응 혼합물을 포화 NaHCO3 수용액(20 mL)에 붓고, 에틸 아세테이트(20 mL * 3)로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 Na2SO4로 건조시키고, 여과하고 감압 하에 농축시켜 미정제 4-아미노-2,6-디클로로-피리딘-3-카르브알데히드(200 mg, 0.984 mmol, 114.62% 수율)를 수득하였고, 이는 LCMS: (M+H)+ = 191.0; 순도 = 94% (220 nm)였다. 유지 시간 = 0.564분.
단계 4: THF(5 mL) 중 4-아미노-2,6-디클로로-피리딘-3-카르브알데히드(1.00 당량, 200 mg, 1.05 mmol)의 용액에 1-히드록시프로판-2-온(1.50 당량, 116 mg, 1.57 mmol) 및 KOH(5.00 당량, 293 mg, 5.24 mmol)를 첨가한 다음, 혼합물을 25℃에서 12시간 동안 교반하였다. LCMS (5-95AB/1.5분): RT = 0.812분, 229.0 = [M]+, ESI+는 목적하는 생성물의 90%를 나타냈다. 반응 혼합물을 포화 NH4Cl 수용액(20 mL)에 붓고, 에틸 아세테이트(20 mL * 3)로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 Na2SO4로 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였다. (M+H)+ = 229.0; 순도 = 90% (220 nm). 유지 시간 = 0.812분.
단계 5: MeCN(3 mL) 중 5,7-디클로로-2-메틸-1,6-나프티리딘-3-올(1.00 당량, 150 mg, 0.655 mmol) 및 K2CO3(3.00 당량, 272 mg, 1.96 mmol)의 용액 현탁액에 MeI(0.900 당량, 0.037 mL, 0.589 mmol)를 첨가하고, 30℃에서 1시간 동안 교반하였다. LCMS (5-95AB/1.5분): RT = 0.899분, 243.0 = [M]+, ESI+는 목적하는 생성물의 28%를 나타냈고, RT = 0.816분, 229.0 = [M]+, ESI+는 출발 물질의 70%를 나타냈다. 12시간 후, LCMS (5-95AB/1.5분): RT = 0.896분, 243.0 = [M]+, ESI+는 목적하는 생성물의 90%를 나타냈다. 반응 혼합물을 포화 NH4Cl 수용액(5 mL)에 붓고, 에틸 아세테이트(20 mL * 3)로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고 감압 하에 농축시켜 미정제 5,7-디클로로-3-메톡시-2-메틸-1,6-나프티리딘(180 mg, 0.740 mmol, 113.07% 수율)을 수득하였고, 이는 LCMS였다: (M+H) + = 243.0; 순도 = 97% (220 nm). 유지 시간 = 0.889분.
단계 6: 1,4-디옥산(5 mL) 및 물(1 mL) 중 5,7-디클로로-3-메톡시-2-메틸-1,6-나프티리딘(1.00 당량, 180 mg, 0.740 mmol) 및 2-(2,4-디플루오로페닐)-4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란(0.900 당량, 160 mg, 0.666 mmol) 및 Cs2CO3(3.00 당량, 722 mg, 2.22 mmol) 및 Pd(dppf)Cl2·CH2Cl2(0.0500 당량, 30 mg, 0.0370 mmol)의 용액을 N2로 3회 퍼징하고 40℃에서 2시간 동안 교반하였다. LCMS (5-95AB/1.5분): RT = 0.951분, 321.2 = [M+H]+, ESI+는 목적하는 생성물의 40%를 나타냈다. 반응 혼합물을 에틸 아세테이트(20 mL * 3)로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 Na2SO4로 건조시키고, 여과하고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 분취-TLC(PE:EtOAc = 1:1, Rf = 0.55)로 정제하여 7-클로로-5-(2,4-디플루오로페닐)-3-메톡시-2-메틸-1,6-나프티리딘(120 mg, 0.299 mmol, 40.42% 수율)을 황색 고형분으로서 수득하였다. (M+H)+ = 321.2; 순도 = 40% (220 nm). 유지 시간 = 0.951분. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 7.91 (s, 1H), 7.67 - 7.59 (m, 2H), 7.53 - 7.37 (m, 3H), 7.13 - 7.01 (m, 3H), 3.87 - 3.84 (m, 3H), 2.70 (s, 3H).
단계 7: 1,4-디옥산(0.5 mL) 및 물(0.1 mL) 중의 7-클로로-5-(2,4-디플루오로페닐)-3-메톡시-2-메틸-1,6-나프티리딘(1.00 당량, 100 mg, 0.312 mmol) 및 1-시클로프로필-4-[(6R)-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)-3,6-디히드로-2H-피란-6-일]피라졸(1.10 당량, 108 mg, 0.343 mmol) 및 K2CO3 (3.00 당량, 129 mg, 0.935 mmol) 및 Pd(dppf)Cl2CH2Cl2 (0.0900 당량, 23 mg, 0.0281 mmol) 용액을 N2로 3회 퍼징하고 100℃에서 2시간 동안 교반하였다. LCMS (5-95AB/1.5분): RT = 0.939분, 475.2 = [M+H]+, ESI+는 목적하는 생성물의 59%를 나타냈다. 반응 혼합물을 포화 NH4Cl 수용액(20 mL)에 붓고, 에틸 아세테이트(20 mL * 3)로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 Na2SO4로 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 분취-TLC(PE:EtOAc = 0:1, Rf = 0.55)로 정제하여 7-[(6R)-6-(1-시클로프로필피라졸-4-일)-3,6-디히드로-2H-피란-4-일]-5-(2,4-디플루오로페닐)-3-메톡시-2-메틸-1,6-나프티리딘(40 mg, 0.0531 mmol, 17.03% 수율)을 황색 오일로서 수득하였다, LCMS (5-95AB/1.5분): RT = 0.960분, 475.2 = [M+H]+, ESI+는 목적하는 질량의 63%를 나타냈다. (M+H) + = 475.2; 순도 = 63% (220 nm). 유지 시간 = 0.960분.
단계 8: 에탄올(2 mL) 중 7-[(6R)-6-(1-시클로프로필피라졸-4-일)-3,6-디히드로-2H-피란-4-일]-5-(2,4-디플루오로페닐)-3-메톡시-2-메틸-1,6-나프티리딘(1.00 당량, 40 mg, 0.0843 mmol) 및 PtO2(0.500 당량, 9.6 mg, 0.0421 mmol)의 용액을 H2로 3회 퍼징하고 30℃에서 2시간 동안 교반하였다. LCMS (5-95AB/1.5분): RT = 0.892분, 477.2 = [M+H]+, ESI+는 목적하는 생성물의 38%를 나타냈다. 반응 혼합물을 셀라이트로 여과하고 EtOAc(50 mL)로 2회 추출하였다. 합쳐진 유기층을 염수(50 mL)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 진공에서 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 분취-HPLC(컬럼: Unisil 3-100 C18 Ultra 150 * 50 mm * 3 um), 조건: 물(FA)-ACN, 구배 시간(분): 7)로 정제하였다. 정제된 용액을 동결건조시켜 생성물 7-[(2R,4S)-2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)테트라히드로피란-4-일]-5-(2,4-디플루오로페닐)-3-메톡시-2-메틸-1,6-나프티리딘(2.4 mg, 0.00488 mmol, 5.79% 수율)을 백색 고형분으로서 수득하였다 (M+H) + = 477.2; 순도 = 100%(220 nm). 유지 시간 = 0.923분. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 7.73 (s, 1H), 7.60 (dt, J = 6.5, 8.3 Hz, 1H), 7.48 (d, J = 3.7 Hz, 2H), 7.13 - 7.07 (m, 2H), 7.01 (dt, J = 2.4, 9.4 Hz, 1H), 4.56 (dd, J = 1.7, 11.2 Hz, 1H), 4.29 - 4.23 (m, 1H), 3.85 (s, 3H), 3.81 - 3.77 (m, 1H), 3.56 (td, J = 3.6, 7.3 Hz, 1H), 3.31 (tt, J = 3.6, 11.9 Hz, 1H), 2.69 (s, 3H), 2.42 - 2.35 (m, 1H), 2.10 - 1.94 (m, 3H), 1.13 - 1.07 (m, 2H), 1.01 - 0.96 (m, 2H).
화합물 I-1441의 합성
단계 1: DMF(2 mL) 중 (2R,6S)-2-메틸-4-(p-톨일설포닐)-6-(1H-피라졸-4-일)모르폴린(1.00 당량, 200 mg, 0.622 mmol), 브로모(메톡시)메탄 (1.70 당량, 132 mg, 1.06 mmol) 및 K2CO3 (2.00 당량, 172 mg, 1.24 mmol)의 용액을 25℃에서 1시간 동안 교반하였다. LCMS는 반응물이 소모되었고 목적하는 질량이 검출되었음을 나타냈고, 반응 용액을 H2O(10 mL)에 붓고, EtOAc(10 mL * 2)로 추출하여 유기층을 수득한 다음, 이를 포화 NaCl 용액으로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고 증발시켜 (2R,6S)-2-[1-(메톡시메틸)피라졸-4-일]-6-메틸-4-(p-톨일설포닐)모르폴린(150 mg, 0.410 mmol, 65.96% 수율)을 황색 오일로서 수득하였다. [M+H]+ = 366.1; 순도 = 97.4% (220 nm). 유지 시간 = 0.851분.
단계 2: 메탄올(25 mL) 중 (2R,6S)-2-[1-(메톡시메틸)피라졸-4-일]-6-메틸-4-(p-톨일설포닐)모르폴린(1.00 당량, 150 mg, 0.410 mmol)의 용액에 Mg(분말)(12.5 당량, 124 mg, 5.15 mmol) 및 Mg(칩)(12.5 당량, 124 mg, 5.15 mmol)을 25℃에서 첨가한 다음, N2로 3회 퍼징하고 80℃에서 12시간 동안 교반하였다. LCMS는 72%의 목적하는 질량이 검출되었고 16%의 SM이 남아 있음을 나타낸 다음, 또 다른 Mg(칩)(12.5 당량, 124 mg, 5.15 mmol) 및 Mg(분말)(12.5 당량, 124 mg, 5.15 mmol)을 첨가하고 80℃에서 또 다른 12시간 동안 교반하였다. LCMS는 78%의 목적하는 질량이 검출되었음을 나타냈다. 반응 혼합물을 MeOH 및 EtOAc가 포함된 셀라이트를 통해 여과한 다음, 진공에서 건조시켜 (2S,6R)-2-[1-(메톡시메틸)피라졸-4-일]-6-메틸-모르폴린;4-메틸벤젠설폰산(162 mg, 0.422 mmol, 102.93% 수율)을 황색 고형분으로서 수득하였다. [M+H]+ = 212.2; 순도 = 78% (220 nm). 유지 시간 = 0.248분.
단계 3: DMSO(2 mL) 중 (2S,6R)-2-[1-(메톡시메틸)피라졸-4-일]-6-메틸-모르폴린;4-메틸벤젠설폰산(1.00 당량, 80 mg, 0.209 mmol) 및 2-클로로-4-(2,4-디플루오로페닐)-6,7-디메틸-프테리딘(1.00 당량, 64 mg, 0.209 mmol)의 용액에 DIEA(5.00 당량, 135 mg, 1.04 mmol)를 첨가한 다음, 혼합물을 100℃에서 1시간 동안 교반하였다. LCMS는 반응물이 소모되었음을 나타냈고 목적하는 질량의 41%가 검출되었다. 반응 용액을 H2O(10 mL)에 붓고, EtOAc(10 mL * 2)로 추출하고, Na2SO4 상에서 건조시키고 감압 하에 증발시켜 잔류물을 수득한 다음, 이를 분취-HPLC(FA)로 정제하고 동결건조시켜 (2S,6R)-4-[4-(2,4-디플루오로페닐)-6,7-디메틸-프테리딘-2-일]-2-[1-(메톡시메틸)피라졸-4-일]-6-메틸-모르폴린(7.2 mg, 0.0148 mmol, 7.10% 수율)을 황색 고형분으로서 수득하였다. [M+H]+ = 482.1; 순도 = 98.7% (220 nm). 유지 시간 = 0.956분. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 7.66 (d, J = 3.1 Hz, 3H), 7.07 - 6.94 (m, 2H), 5.38 (s, 2H), 5.21 - 4.92 (m, 2H), 4.66 (dd, J = 2.8, 11.0 Hz, 1H), 3.85 (ddd, J = 2.5, 6.3, 10.4 Hz, 1H), 3.35 (s, 3H), 3.09 (dd, J = 10.9, 13.3 Hz, 1H), 2.90 - 2.83 (m, 1H), 2.72 (s, 3H), 2.60 (s, 3H), 1.34 (d, J = 6.1 Hz, 3H).
화합물 I-1446의 합성
DMSO(2 mL) 중 (2S,6R)-2-[1-(메톡시메틸)피라졸-4-일]-6-메틸-모르폴린;4-메틸벤젠설폰산(1.00 당량, 80 mg, 0.209 mmol) 및 2-클로로-4-(4-클로로-2-플루오로-페닐)-6,7-디메틸-프테리딘(1.00 당량, 67 mg, 0.209 mmol)의 용액에 DIEA(5.00 당량, 135 mg, 1.04 mmol)를 첨가한 다음, 혼합물을 100℃에서 1시간 동안 교반하였다. LCMS는 반응물이 소모되었음을 나타냈고 목적하는 질량의 45%가 검출되었다. 반응 용액을 H2O(10 mL)에 붓고, EtOAc(10 * 2 mL)로 추출하고, Na2SO4 상에서 건조시키고 감압 하에 증발시켜 잔류물을 수득한 다음, 이를 분취-HPLC(FA)로 정제하고 동결건조시켜 (2S,6R)-4-[4-(4-클로로-2-플루오로-페닐)-6,7-디메틸-프테리딘-2-일]-2-[1-(메톡시메틸)피라졸-4-일]-6-메틸-모르폴린(8.6 mg, 0.0173 mmol, 8.30% 수율)을 황색 고형분으로서 수득하였다. [M+H]+ = 498.2; 순도 = 100% (220 nm). 유지 시간 = 0.978분. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 7.69 - 7.62 (m, 3H), 7.32 (br d, J = 8.1 Hz, 2H), 5.38 (s, 2H), 5.20 - 4.89 (m, 2H), 4.66 (dd, J = 1.9, 10.6 Hz, 1H), 3.85 (ddd, J = 2.5, 6.4, 10.6 Hz, 1H), 3.35 (s, 3H), 3.09 (dd, J = 10.9, 13.3 Hz, 1H), 2.86 (dd, J = 10.7, 13.3 Hz, 1H), 2.72 (s, 3H), 2.60 (s, 3H), 1.34 (d, J = 6.3 Hz, 3H).
I-1451의 합성(I-1495 및 I-1500에 대한 동일한 일반 방법)
테플론-코팅된 자기 교반 막대가 구비된 화염 건조 둥근 바닥 플라스크에 (7-((2R,4S)-2-(1-시클로프로필-1H-피라졸-4-일)테트라히드로-2H-피란-4-일)-5-(2,4-디플루오로페닐)-2-메틸피리도[3,4-b]피라진-3-일)메탄올(1.0 당량, 48 mg, 0.10 mmol)을 채웠다. 플라스크를 밀봉하고 Ar(g) 하에 퍼징하였다. 무수 톨루엔(3.0 mL)을 첨가하고, 생성된 용액을 22℃에서 교반하였다. 아세톤 시아노히드린 2(2.00 당량, 0.018 mL, 0.201 mmol), (3E)-3-(디메틸카르바모일이미노)-1,1-디메틸-우레아(1.50 당량, 26 mg, 0.151 mmol) 및 트리-n-부틸포스핀(1.50 당량, 0.037 mL, 0.151 mmol)을 순차적으로 첨가하였다. 주황색 침전물의 형성이 관찰되었다. 반응 혼합물을 22℃에서 24시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 EtOAc로 희석하고, 포화 NH4Cl (수성), 포화 NaHCO3 (수성) 및 염수로 순차적으로 세척하였다. 유기층을 Na2SO4로 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 증발 건조시켰다. 미정제 잔류 혼합물을 DCM 중 0% 내지 10% MeOH의 용리 구배를 사용하는 실리카 겔 플래쉬 컬럼 크로마토그래피(Teledyne RediSep® Solid 컬럼, 24 g SiO2)로 정제하여 54 mg의 미정제 생성물을 황색-주황색 시럽으로서 수득하였다. 생성물을 pH 3.8(50-70%)의 10mM 포름산암모늄 수용액 중 MeOH의 용리 구배를 사용하는 분취 HPLC(Gemini® 5 um NX-C18 110 Å, 100 x 30 mm 컬럼)로 추가로 정제하여 2-(7-((2R,4S)-2-(1-시클로프로필-1H-피라졸-4-일)테트라히드로-2H-피란-4-일)-5-(2,4-디플루오로페닐)-2-메틸피리도[3,4-b]피라진-3-일)아세토니트릴(12 mg, 0.025 mmol, 25 % 수율)을 백색 고형분으로서 수득하였다. LC-MS(ESI+): Tr = 1.44분; [M+H]+ 487.3(obs). 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz): δH 7.89 (1H, s), 7.71-7.77 (2H, m), 7.36-7.40 (2H, m), 7.26 (1H, td, J = 8.4, 2.6 Hz), 4.56 (2H, s), 4.49 (1H, d, J = 11.1 Hz), 4.09 (1H, dd, J = 11.2, 4.0 Hz), 3.60-3.71 (2H, m), 2.71 (3H, s), 2.22 (1H, d, J = 13.0 Hz), 1.86-1.95 (4H, m), 1.23 (1H, s), 0.95-1.00 (2H, m), 0.88-0.93 (2H, m).
I-1456의 합성
테플론-코팅된 자기 교반 막대가 구비된 화염 건조 둥근 바닥 플라스크에 (7-((2R,4S)-2-(1-시클로프로필-1H-피라졸-4-일)테트라히드로-2H-피란-4-일)-5-(2,4-디플루오로페닐)-2-메틸피리도[3,4-b]피라진-3-일)메탄올(1.0 당량, 51 mg, 0.10 mmol) 및 무수 THF(1.5 mL)를 채웠다. 플라스크를 밀봉하고, Ar(g) 하에 퍼징하고, 교반하면서 0℃의 얼음조에서 냉각시켰다. 퍼플루오로부탄설포닐 플루오라이드(1.20 당량, 0.022 mL, 0.121 mmol)에 이어서 2-터트-부틸-1,1,3,3-테트라메틸구아니딘(1.10 당량, 0.023 mL, 0.111 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 22℃에서 22시간 동안 교반한 다음, 추가의 퍼플루오로부탄설포닐 플루오라이드(1.20 당량, 0.022 mL, 0.121 mmol) 및 2-터트-부틸-1,1,3,3-테트라메틸구아니딘(1.10 당량, 0.023 mL, 0.111 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 22℃에서 24시간 동안 추가로 교반한 다음, 추가의 퍼플루오로부탄설포닐 플루오라이드(1.20 당량, 0.022 mL, 0.121 mmol) 및 2-터트-부틸-1,1,3,3-테트라메틸구아니딘(1.10 당량, 0.023 mL, 0.111 mmol)을 첨가하였다. 72시간의 반응 시간 후, 플라스크를 얼음조에서 0℃로 냉각시키고, 반응 혼합물을 포화 NaHCO3 (수성)으로 급냉시켰다. 반응 혼합물을 22℃로 가온시키고, EtOAc로 희석하고, 포화 NH4Cl (수성), 포화 NaHCO3 (수성) 및 염수로 순차적으로 세척하였다. 유기층을 Na2SO4로 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 증발 건조시켰다. 미정제 잔류 혼합물을 DCM 중 0% 내지 10% MeOH의 용리 구배를 사용하는 실리카 겔 플래쉬 컬럼 크로마토그래피(Teledyne RediSep® GOLD 컬럼, 24 g SiO2)로 정제하여 40 mg의 미정제 생성물을 백색 거품으로서 수득하였다. 생성물을 pH 3.8(55-75%)의 10mM 포름산암모늄 수용액 중 MeOH의 용리 구배를 사용하는 분취 HPLC(Gemini® 5 um NX-C18 110 Å, 100 x 30 mm 컬럼)로 추가로 정제하여 7-((2R,4S)-2-(1-시클로프로필-1H-피라졸-4-일)테트라히드로-2H-피란-4-일)-5-(2,4-디플루오로페닐)-3-(플루오로메틸)-2-메틸피리도[3,4-b]피라진 (20 mg, 0.04 mmol, 42 % 수율)을 백색 고형분으로서 수득하였다. LC-MS(ESI+): Tr = 1.60분; [M+H]+ 480.3 (obs). 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz): δH 7.91 (1H, s), 7.69-7.74 (2H, m), 7.39-7.44 (2H, m), 7.27 (1H, t, J = 8.6 Hz), 5.70 (2H, d, J = 46.5 Hz), 4.49 (1H, d, J = 11.1 Hz), 4.09 (1H, d, J = 11.2 Hz), 3.62-3.72 (2H, m), 3.33-3.35 (2H, m), 2.79 (3H, s), 2.23 (1H, d, J = 13.1 Hz), 1.86-1.98 (3H, m), 0.98-0.99 (2H, m), 0.90-0.92 (2H, m).
I-1461의 합성
단계 1: 1,4-디옥산(60 mL) 중 5-브로모-3-요오도-1-메틸-피리딘-2-온 (1.0 당량, 3.00 g, 9.6 mmol) 및 1-시클로프로필-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)피라졸(1.1 당량, 2.46 g, 10.5 mmol)의 용액에 물(15 ml), K2CO3(3.00당량, 3.96 g, 28.7 mmol) 및 Pd(dppf)2Cl2(0.05 당량, 390 mg, 0.5 mmol)를 첨가하였다. TLC로 완료가 표시될 때까지 혼합물을 80℃에서 교반하였다. 반응 혼합물을 냉각시킨 다음, 물과 EtOAc를 첨가하고, 혼합물을 EtOAc로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 염수로 세척하고, MgSO4로 건조시키고, 여과하고, 진공에서 농축시켰다. 미정제 물질을 헥산 중 60 내지 90% EtOAc로 용리하는 120 g의 사전 충진된 컬럼을 사용하는 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하여 5-브로모-3-(1-시클로프로필-1H -피라졸-4-일)-1-메틸피리딘-2(1H)-온(2.36 g, 8.0 mmol, 84% 수율)을 연황색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δH 8.36 (1H, s), 7.78 (1H, d, J = 0.7 Hz), 7.57 (1H, d, J = 2.6 Hz), 3.59-3.54 (1H, m), 3.53 (3H, s), 1.11-1.07 (2H, m), 0.99- 0.94 (2H, m).
단계 2: DMF(20 mL) 중 5-브로모-3-(1-시클로프로필피라졸-4-일)-1-메틸-피리딘-2-온(1.0 당량, 1.50 g, 5.1 mmol)의 용액에 비스(피나콜라토)디보론(1.1 당량, 1.42 g, 5.6 mmol), K2CO3(3.0 당량, 1.50 g, 15.3 mmol) 및 Pd(dppf)Cl2(0.05 당량, 208 mg, 0.26 mmol)를 첨가하였다. TLC로 완료가 표시될 때까지 혼합물을 80℃에서 교반하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 물과 EtOAc를 첨가하였다. 유기상을 수집하고, 수성층을 EtOAc로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 물, 염수로 세척하고, MgSO4로 건조시키고, 여과하고, 진공에서 농축시켰다. 미정제 물질을 헥산 중 60 내지 90% EtOAc로 용리하는 120 g의 사전 충진된 컬럼을 사용하는 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하여 3-(1-시클로프로필-1H-피라졸-4-일)-1-메틸-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)피리딘-2(1H)-온(1.5g, 4.37 mmol, 86% 수율)을 연황색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δH 8.20 (1H, s), 7.75 (1H, d, J = 0.7 Hz), 7.70 (1H, d, J = 1.9 Hz), 7.54 (1H, d, J = 1.9 Hz), 3.44-3.42 (4H, m), 1.14 (12H, s), 0.99-0.91 (2H, m), 0.86-0.79 (2H, m). LC/MS (ESI+) m/z = 342.1 [M+1]+.
단계 3: 1,4-디옥산(15 mL) 중 2-클로로-4-(2,4-디플루오로페닐)-6,7-디메틸-프테리딘(1.0 당량, 0.70 g, 2.05 mmol) 및 3-(1-시클로프로필피라졸-4-일)-1-메틸-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)피리딘-2-온(1.0 당량, 0.70 g, 2.05 mmol)의 용액에 Cs2CO3 (3.0 당량, 2.0 g, 6.15 mmol), water (3 mL) 및 Pd(dppf)Cl2 (0.05 당량, 208 mg, 0.26 mmol)를 첨가하였다. TLC로 완료가 표시될 때까지 혼합물을 80℃에서 교반하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시킨 다음, 물과 EtOAc를 첨가하였다. 유기상을 수집하고, 수성층을 EtOAc로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 물, 염수로 세척하고, MgSO4로 건조시키고, 여과하고, 진공에서 농축시켰다. 미정제 물질을 DCM 중 EtOAc(30 내지 100%)로 용리시킨 다음 DCM 중 MeOH(5 내지 20%)로 용리시킨 80 g의 사전 충진된 컬럼을 사용하는 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하여 3-(1-시클로프로필-1H-피라졸-4-일)-5-(4-(2,4-디플루오로페닐)-6,7-디메틸프테리딘-2-일)-1-메틸피리딘-2(1H)-온(0.87 g, 1.8 mmol, 87% 수율)을 황색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δH 8.87 (1H, d, J = 2.4 Hz), 8.78 (1H, d, J = 2.4 Hz), 8.43 (1H, s), 8.08 (1H, s), 7.84-7.78 (1H, m), 7.24 (1H, s), 7.13-6.99 (2H, m), 3.74 (3H, s), 3.63 (1H, tt, J = 7.3, 3.8 Hz), 2.84 (3H, s), 2.71 (3H, s), 1.19-1.11 (2H, m), 1.06-0.99 (2H, m). LC/MS (ESI+) m/z = 486.3 [M+1]+.
화합물 I-1462의 합성
단계 1: 1,4-디옥산(100 mL) 중 에틸 4-요오도-1H-피라졸-5-카르복실레이트(1.00 당량, 4.00 g, 15.0 mmol), 시클로프로필보론산(2.00 당량, 2583 mg, 30.1 mmol), Cs2CO3 (2.50 당량, 12216 mg, 37.6 mmol), Cu(OAc)2 (0.840 당량, 2522 mg, 12.6 mmol) 및 DMAP (4.00 당량, 7337 mg, 60.1 mmol)의 혼합물을 N2 분위기 하에 50℃에서 12시간 동안 교반하였다. TLC(EA/PE = 1/10, 목적하는 생성물 Rf = 0.5)는 에틸 4-요오도-1H-피라졸-5-카르복실레이트가 소모되었음을 나타냈고 새로운 스폿이 검출되었다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시켰다. 그런 다음, EtOAc(200 mL)를 첨가하고, 생성된 혼합물을 1시간 동안 교반하였다. 여과 후, 여액을 농축 건조시켜 미정제 생성물을 수득하였다. 미정제물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피(EA/PE = 0/1 내지 1/10, 목적하는 생성물 Rf = 0.5)로 정제하여 에틸 2-시클로프로필-4-요오도-피라졸-3-카르복실레이트(1900 mg, 6.11 mmol, 40.62% 수율)를 무색 오일로서 수득하고, LCMS [M+H]+ = 282.2; 순도 = 97.5%(220 nm)로 확인하였다. 유지 시간 = 0.914분. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.02 (s, 1H), 7.71 - 7.63 (m, 1H), 7.11 - 7.03 (m, 1H), 6.99-6.94 (m, 1H), 5.26 (s, 2H), 5.19 (s, 2H).
단계 2: THF(100 mL) 중 에틸 2-시클로프로필-4-요오도-피라졸-3-카르복실레이트(1.00 당량, 1900 mg, 6.21 mmol)의 혼합물에 LiBH4(3.00 당량, 406 mg, 18.6 mmol)를 0℃에서 첨가하였다. 혼합물을 40℃에서 3시간 동안 교반하였다. LC-MS는 출발 물질이 완전히 소모되었고 목적하는 질량이 검출되었음을 나타냈다(86%, Rt: 0.443분; [M+H]+ = 220 nm에서 265.0). 혼합물을 포화 수성 NH4Cl(200 mL)에 첨가하였다. 혼합물을 EtOAc(200 mL * 2)로 추출하고, 유기상을 농축 건조시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 정제 없이 다음 단계에 직접 사용하였다. (2-시클로프로필-4-요오드-피라졸-3-일)메탄올(1600 mg, 5.39 mmol, 86.88% 수율)을 황색 오일로서 수득하고, LCMS [M+H]+ = 265.0; 순도 = 86.88%(220 nm)로 확인하였다. 유지 시간 = 0.443분.
단계 3: DMF(50 mL) 중 (2-시클로프로필-4-요오드-피라졸-3-일)메탄올(1.00당량, 1000 mg, 3.79 mmol)의 용액에 NaH(1.50 당량, 341 mg, 5.68 mmol)를 0℃에서 첨가하고 0.5시간 동안 교반한 다음, BnBr(1.50당량, 0.68 mL, 5.68 mmol)을 반응 혼합물에 첨가하고 25℃에서 12시간 동안 교반하였다. LC-MS는 출발 물질이 완전히 소모되었고 목적하는 질량이 검출되었음을 나타냈다(88%, Rt: 0.919분; [M+H]+ = 220 nm에서 355.1). 반응 혼합물을 100 mL의 물에 조심스럽게 붓고, EA(100 mL×3)로 추출하고, 합쳐진 유기상을 Na2SO4 상에서 건조시키고 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 컬럼 크로마토그래피(SiO2, PE:EA = 10/1, 목적하는 생성물 Rf = 0.7)로 정제하고 농축시켜 5-(벤질옥시메틸)-1-시클로프로필-4-요오드-피라졸(750 mg, 2.09 mmol, 55.13% 수율)을 백색 고형분으로서 수득하고, LCMS [M+H]+ = 355.1; 순도 = 98.6%(220 nm)로 확인하였다. 유지 시간 = 0.919분.
단계 4: THF(20 mL) 중 5-(벤질옥시메틸)-1-시클로프로필-4-요오드-피라졸(1.00당량, 380 mg, 1.07 mmol)의 용액에 i-PrMgCl·LiCl(1.10당량, 0.91 mL, 1.18 mmol)을 N2 분위기 하에 20℃에서 0.5시간 동안 첨가한 다음, 2-클로로-N-메톡시-N-메틸아세타미드(3.00당량, 443 mg, 3.22 mmol)를 반응 혼합물에 20℃에서 첨가하고 20℃에서 1시간 동안 교반하였다. LCMS는 출발 물질이 완전히 소모되었고 목적하는 질량이 검출되었음을 나타냈다(67%, Rt: 0.89분; [M+H]+ = 254 nm에서 305.3). 반응 용액을 포화 NH4Cl로 급냉시키고, H2O에 붓고, EtOAc로 추출하고, 감압 하에 증발시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 컬럼 크로마토그래피(SiO2, PE:EA = 5/1, 목적하는 생성물 Rf = 0.5)로 정제하고 농축시켜 1-[5-(벤질옥시메틸)-1-시클로프로필-피라졸-4-일]-2-클로로-에타논(420 mg, 1.10 mmol, 102.76% 수율)을 무색 오일로서 수득하였다. [M+H]+: (M+H) + = 305.3; 순도 = 67.8% (254 nm). 유지 시간 = 0.89분.
단계 5: 아세톤(20 mL) 중 1-[5-(벤질옥시메틸)-1-시클로프로필-피라졸-4-일]-2-클로로-에타논(1.10당량, 414 mg, 1.34 mmol)의 용액에 N-[(2R)-2-히드록시프로필]-4-메틸-벤젠설폰아미드(1.00 당량, 280 mg, 1.22 mmol), K2CO3(3.00 당량, 506 mg, 3.66 mmol) 및 KI(1.00 당량, 203 mg, 1.22 mmol)를 첨가하고, 반응 혼합물을 25℃에서 12시간 동안 교반하였다. LCMS는 출발 물질이 완전히 소모되었고 목적하는 질량이 검출되었음을 나타냈다(15%, Rt: 0.796분; [M+Na]+ = 254 nm에서 520.1). 반응물을 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 컬럼 크로마토그래피(SiO2, PE:EA = 1/1, 목적하는 생성물 Rf = 0.2)로 정제하고 농축시켜 N-[2-[5-(벤질옥시메틸)-1-시클로프로필-피라졸-4-일]-2-옥소-에틸]-4-메틸-N-[(2S)-2-히드록시프로필]벤젠설폰아미드(435 mg, 0.542 mmol, 44.39% 수율)를 백색 고형분으로서 수득하고, LCMS [M+Na]+ = 520.1; 순도 = 90.4%(UV 254 nm)로 확인하였다. 유지 시간 = 0.901분.
단계 6: DCM(20 mL) 중 N-[2-[5-(벤질옥시메틸)-1-시클로프로필-피라졸-4-일]-2-옥소-에틸]-N-[(2R)-2-히드록시프로필]-4-메틸-벤젠설폰아미드(1.00당량, 435 mg, 0.874 mmol), TES(10.0당량, 2.7 mL, 8.74 mmol)의 용액에 TMSOTf(8.00당량, 1.3 mL, 6.99 mmol)를 0℃에서 첨가하고, 반응 혼합물을 30℃에서 12시간 동안 교반하였다. LCMS는 출발 물질이 완전히 소모되었고 목적하는 질량이 검출되었음을 나타냈다(36%, Rt: 0.951분; [M+H]+ = 220 nm에서 482.3). 반응물을 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 분취-HPLC(컬럼: Waters Xbridge 150 * 25 mm * 5 um; 이동상: [물 (NH4HCO3)-ACN]; B%: 50%-80%, 8분)로 동결건조시켜 [2-시클로프로필-4-[(2S, 6R)-6-메틸-4-(p-톨일설포닐) 모르폴린-2-일] 피라졸-3-일] 메탄올(90 mg, 0.207 mmol, 23.67% 수율)을 백색 고형분으로서 수득하였다. [M+H]+ = 482.2;순도 = 25.4% (UV 254 nm). 유지 시간 = 0.933분.
단계 7: 메탄올(16 mL) 중 (2S,6R)-2-[5-(벤질옥시메틸)-1-시클로프로필-피라졸-4-일]-6-메틸-4-(p-톨일설포닐)모르폴린(1.00 당량, 80 mg, 0.166 mmol)의 용액에 Mg(칩)(20.0 당량, 80 mg, 3.32 mmol) 및 Mg(분말)(20.0 당량, 80 mg, 3.32 mmol)을 첨가하고, 반응물을 Ar 분위기 하에 80℃에서 12시간 동안 교반하였다. LCMS는 50% 출발 물질이 남아 있고 40%의 목적하는 질량이 검출되었음을 나타냈다. 그런 다음, Mg(칩)(20.0 당량, 80 mg, 3.32 mmol) 및 Mg(분말)(20.0 당량, 80 mg, 3.32 mmol)를 반응물에 첨가하고, Ar 분위기 하에 80℃에서 12시간 동안 교반하였다. LCMS는 25% 출발 물질이 남아 있고 목적하는 질량이 검출되었음을 나타냈다(4%, Rt: 0.458분; [M+H]+ = 220 nm에서 238.1). 혼합물을 여과하고, 여액을 진공에서 농축시켰다. 잔류물을 분취-HPLC(컬럼: Shim-pack C18 150 * 25*10 um; 이동상: [물 (FA)-ACN]; B%: 2%-32%, 10분)로 정제하고 농축시켜 [2-시클로프로필-4-[(2S,6R)-6-메틸모르폴린-2-일]피라졸-3-일]메탄올(3.0 mg, 0.0126 mmol, 7.61% 수율)을 백색 고형분으로서 수득하였다. [M+H]+ = 238.1; 순도 = 3.6% (UV 220 nm). 유지 시간 = 0.455분.
단계 8: DMSO(1 mL) 중 [2-시클로프로필-4-[(2S,6R)-6-메틸모르폴린-2-일]피라졸-3-일]메탄올(1.00 당량, 3.0 mg, 0.0126 mmol)의 용액에 2-클로로-4-(2,4-디플루오로페닐)-6,7-디메틸-프테리딘(1.50 당량, 5.8 mg, 0.0190 mmol) 및 DIEA(3.00 당량, 4.9 mg, 0.0379 mmol)를 첨가하고, 반응물을 100℃에서 1시간 동안 교반하였다. LCMS는 출발 물질이 완전히 소모되었고 목적하는 질량이 검출되었음을 나타냈다(41%, Rt: 0.872분; [M+H]+ = 220 nm에서 508.1). 반응물을 분취-HPLC(컬럼: Unisil 3-100 C18 Ultra 150 * 50 mm * 3 um; 이동상: [물 (FA)-ACN]; B%: 6%-36%, 7분)로 정제하고, 용액을 동결건조시켜 [2-시클로프로필-4-[(2S,6R)-4-[4-(2,4-디플루오로페닐)-6,7-디메틸-프테리딘-2-일]-6-메틸-모르폴린-2-일]피라졸-3-일]메탄올(1.6 mg, 0.00315 mmol, 24.94% 수율)을 백색 고형분으로서 수득하였다. LCMS: (M+H) + = 508.1; 순도 = 96.8% (UV 220 nm). 유지 시간 = 0.943분. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.76 - 7.65 (m, 1H), 7.42 (s, 1H), 7.07 - 6.93 (m, 2H), 5.26 - 5.09 (m, 1H), 5.04-5.01 (m, 1H), 4.90 - 4.77 (m, 2H), 4.74-4.70 (m, 1H), 3.94-3.88 (m, 1H), 3.51 - 3.42 (m, 1H), 3.25-3.17 (m, 1H), 2.91 - 2.83 (m, 1H), 2.71 (s, 3H), 2.59 (s, 3H), 1.35 (d, J = 6.1 Hz, 3H), 1.23 - 1.20 (m, 2H), 1.09-1.06 (m, 2H).
화합물 I-1467 및 I-1524의 합성.
단계 1: THF(160 mL) 중 1-에톡시-2,2-디플루오로-에탄올(1.00 당량, 4.00 g, 31.7 mmol)의 무색 혼합물에 K2CO3(0.1000 당량, 438 mg, 3.17 mmol)을 첨가한 다음, 니트로메탄(1.50 당량, 2904 mg, 47.6 mmol)을 0℃에서 첨가한 다음, 혼합물을 15℃에서 12시간 동안 교반하여 황색 용액을 수득하였다. TLC(PE: EA = 2:1, 포스포몰리브드산, Rf = 0.5)는 출발 물질이 완전히 소모되었고 새로운 스폿이 발견되었음을 나타냈다. 혼합물을 1N HCl(160 mL)에 붓고 MTBE(500 mL x 3)로 추출하고, 합쳐진 유기층을 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고 진공에서 농축시켰다. 1,1-디플루오로-3-니트로-프로판-2-올(4.50 g, 25.5 mmol, 80.45% 수율)을 황색 오일로서 수득하고, 다음 단계에 사용하였다.
단계 2: 메탄올(20 mL) 중 1,1-디플루오로-3-니트로-프로판-2-올(1.00 당량, 1.00 g, 7.09 mmol)의 혼합물에 10% Pd/C(1.00 당량, 100 mg, 7.09 mmol)를 첨가하였다. 그런 다음, 반응 혼합물을 H2로 3회 탈기하였다. 반응 혼합물을 H2 분위기 (50 psi) 하에 50℃에서 12시간 동안 교반하였다. TLC (PE : EA = 2:1, I2, Rf = 0.01)는 출발 물질이 완전히 소모되었고 새로운 스폿이 발견되었음을 보여주었다. 용액을 N2 분위기 하에 여과하고, 여액을 감압 하에 농축시켜 황색 고형분을 수득하고, 3-아미노-1,1-디플루오로-프로판-2-올(400 mg, 2.16 mmol, 30.4% 수율)을 황색 고형분으로서 수득하였다.
단계 3: DCM(10 mL) 중 3-아미노-1,1-디플루오로-프로판-2-올(1.00 당량, 350 mg, 3.15 mmol)의 혼합물에 TEA(3.00 당량, 0.82 mL, 9.45 mmol)를 첨가한 다음, TsCl(1.00 당량, 601 mg, 3.15 mmol)을 0℃에서 첨가한 다음, 혼합물을 15℃에서 12시간 동안 교반하였다. LCMS는 출발 물질이 완전히 소모되었음을 나타냈고, 68%의 목적하는 MS(Rt: 0.587분; [M+H]+ = 220 nm에서 265.8)가 발견되었다. TLC(PE: EA = 1:1, Rf = 0.5)는 출발 물질이 완전히 소모되었고 새로운 스폿이 발견되었음을 나타냈다. 후처리 및 정제를 와 합하였다. 합쳐진 혼합물을 물(30 mL)에 붓고 에틸 아세테이트(40 mL x 3)로 추출하고, 합쳐진 유기층을 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고 진공에서 농축시켰다. 용액을 실리카 상의 컬럼(5 g SiO2 카트리지, PE:EA = 32%, 254 nm에서의 검출, Rf = 0.5)으로 정제하고 감압 하에 농축시켜 미정제 N-(3,3-디플루오로-2-히드록시-프로필)-4-메틸-벤젠설폰아미드(1.40 g, 5.01 mmol, 159.13% 수율)를 백색 고형분으로서 수득하였다. [M+H]+ = 265.8; 순도 = 68% (220 nm). 유지 시간 = 0.587분. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 7.77 (d, J = 8.3 Hz, 2H), 7.35 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 5.87 (d, J = 4.4 Hz, 1H), 5.73 (d, J = 4.3 Hz, 1H), 5.59 (d, J = 4.3 Hz, 1H), 4.88 (br d, J = 5.5 Hz, 1H), 3.98 - 3.85 (m, 1H), 3.27 (ddd, J = 3.6, 7.3, 13.8 Hz, 1H), 3.15 - 3.07 (m, 1H), 2.70 (br d, J = 4.9 Hz, 1H), 2.45 (s, 3H).
단계 4: 아세톤(20 mL) 중 N-(3,3-디플루오로-2-히드록시-프로필)-4-메틸-벤젠설폰아미드(1.00 당량, 700 mg, 2.64 mmol)의 혼합물에 2-클로로-1-(1-시클로프로필피라졸-4-일)에타논(1.00 당량, 487 mg, 2.64 mmol), KI(1.00 당량, 438 mg, 2.64 mmol), K2CO3(3.00 당량, 1094 mg, 7.92 mmol)을 첨가한 다음, 혼합물을 15℃에서 12시간 동안 교반하였다. LCMS는 출발 물질이 완전히 소모되었음을 나타냈고, 71%의 목적하는 MS(Rt: 0.829분; [M+H]+ = 220 nm에서 414.1)가 발견되었다. 후처리 및 정제를 와 합하였다. 합쳐진 혼합물을 물(50 mL)에 붓고 에틸 아세테이트(50 mL x 3)로 추출하고, 합쳐진 유기층을 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고 진공에서 농축시켰다. 용액을 실리카 상의 컬럼(2 g SiO2 카트리지, PE : EA = 45%, 254 nm에서 검출, Rf = 0.3)으로 정제하고 감압 하에 농축시켜 N-[2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)-2-옥소-에틸]-N-(3,3-디플루오로-2-하이드록시-프로필)-4-메틸-벤젠설폰아미드(650 mg, 1.49 mmol, 56.60% 수율)를 무색 오일로서 수득하였다. [M+H]+ = 414.1; 순도 = 71% (220 nm). 유지 시간 = 0.829분. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 8.05 (s, 1H), 7.91 (s, 1H), 7.73 (d, J = 8.3 Hz, 2H), 7.35 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 5.92 (d, J = 3.4 Hz, 1H), 5.78 (d, J = 3.3 Hz, 1H), 5.64 (d, J = 3.4 Hz, 1H), 4.52 (s, 2H), 4.35 - 4.22 (m, 1H), 4.08 - 3.95 (m, 1H), 3.67 (tt, J = 3.8, 7.3 Hz, 1H), 3.52 - 3.44 (m, 1H), 3.38 - 3.30 (m, 1H), 2.46 (s, 3H), 1.21 - 1.15 (m, 2H), 1.15 - 1.09 (m, 2H).
단계 5: DCM(5 mL) 중 N-[2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)-2-옥소-에틸]-N-(3,3-디플루오로-2-히드록시-프로필)-4-메틸-벤젠설폰아미드(1.00 당량, 300 mg, 0.726 mmol)의 무색 혼합물에 TES(5.00 당량, 832 mg, 3.63 mmol) 및 TMSOTf(5.00 당량, 0.66 mL, 3.63 mmol)를 0℃에서 첨가한 다음, 혼합물을 30℃에서 12시간 동안 교반하여 무색 혼합물을 수득하였다. LCMS는 출발 물질이 완전히 소모되었음을 나타냈고, 70.9%의 목적하는 MS(Rt: 0.786분; [M+H]+ = 220 nm에서 395.9)가 발견되었다. 혼합물을 포화 수성 NaHCO3(20 mL)으로 세척하고, EtOAc(30 mL×3)로 추출하고, 합쳐진 유기층을 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 여과하고 진공에서 농축시켰다. 6-(1-시클로프로필피라졸-4-일)-2-(디플루오로메틸)-4-(p-톨일설포닐)-2,3-디히드로-1,4-옥사진(280 mg, 0.496 mmol, 68.31% 수율)을 백색 고형분으로서 수득하였다. [M+H]+ = 395.9; 순도 = 70.9% (220 nm). 유지 시간 = 0.786분.
단계 6: 메탄올(5 mL) 중 6-(1-시클로프로필피라졸-4-일)-2-(디플루오로메틸)-4-(p-톨일설포닐)-2,3-디히드로-1,4-옥사진(1.00 당량, 230 mg, 0.582 mmol)의 무색 혼합물에 10% Pd/C(1.00 당량, 25 mg, 0.582 mmol)를 첨가하였다. 그런 다음, 반응 혼합물을 H2로 3회 탈기하였다. 반응 혼합물을 H2 분위기 (15 psi) 하에 30℃에서 2시간 동안 교반하였다. LCMS는 57% 출발 물질이 여전히 38%의 목적하는 질량(397.9 [M+H]+, ESI pos)으로 남아 있음을 나타냈다. 10% Pd/C(1.00 당량, 50 mg, 0.582 mmol)를 첨가한 다음, 혼합물을 H2 분위기(15 psi) 하에 30℃에서 6시간 동안 교반하였다. LCMS는 출발 물질이 완전히 소모되었음을 나타냈고, 95.3%의 목적하는 MS(Rt: 0.952분; [M+H]+ = 220 nm에서 398.1)가 발견되었다. 용액을 N2 분위기 하에 여과하고, 여액을 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)-6-(디플루오로메틸)-4-(p-톨일설포닐)모르폴린(230 mg, 0.550 mmol, 94.52% 수율)을 무색 오일로서 수득하였다. [M+H]+ = 398.1; 순도 = 95.3% (220 nm). 유지 시간 = 0.952분.
단계 7: 메탄올(5 mL) 중 2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)-6-(디플루오로메틸)-4-(p-톨일설포닐)모르폴린(1.00 당량, 230 mg, 0.579 mmol)의 무색 혼합물에 Mg(칩)(10.0 당량, 139 mg, 5.79 mmol) 및 Mg(분말)(10.0 당량, 139 mg, 5.79 mmol)을 첨가한 다음, 혼합물을 N2 분위기 하에 80℃에서 12시간 동안 교반하여 백색 현탁액을 수득하였다. LCMS는 출발 물질이 완전히 소모되었음을 나타냈고, 목적하는 MS(Rt: 0.332분; [M+H]+ = 220 nm에서 244.5)가 발견되었다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시켰다. 반응 혼합물을 여과하고, 여과물을 감압 하에 농축시켜 백색 고형분을 수득하였다. 2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)-6-(디플루오로메틸)모르폴린(200 mg, 0.493 mmol, 85.25% 수율)을 백색 고형분으로서 수득하였다. [M+H]+ = 244.5; 순도 = 90% (220 nm). 유지 시간 = 0.332분.
단계 8: DMSO(5 mL) 중 2-클로로-4-(2,4-디플루오로페닐)-6,7-디메틸-프테리딘(1.00 당량, 177 mg, 0.576 mmol)의 갈색 혼합물에 2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)-6-(디플루오로메틸)모르폴린(1.00 당량, 140 mg, 0.576 mmol) 및 DIEA(3.00 당량, 223 mg, 1.73 mmol)를 첨가한 다음, 혼합물을 100℃에서 1시간 동안 교반하여 갈색 용액을 수득하였다. LCMS는 출발 물질이 완전히 소모되었음을 나타냈고, 74%의 목적하는 MS(Rt: 1.049분; [M+H]+ = 220 nm에서 514.0)가 발견되었다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시켰다. 혼합물을 물(30 mL)에 붓고 에틸 아세테이트(50 mL x 3)로 추출하고, 합쳐진 유기층을 염수로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키고, 여과하고 진공에서 농축시켰다. 용액을 분취-HPLC(컬럼: Waters Xbridge 150 * 25 mm * 5 um; 이동상: 물 (NH4HCO3)-ACN; B%: 53% 내지 83%, 8분)로 정제하고, 정제된 용액을 동결건조시켜 황색 고형분을 수득하였다. 용액을 SFC(컬럼: DAICEL CHIRALPAK IC (250 mm * 30 mm, 10 um); 이동상: ACN/MeOH (0.1% NH3H2O); B%: 30%-30%, 3.6분)로 정제하고, 정제된 용액을 동결건조시켜 (2S,6S)-2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)-6-(디플루오로메틸)-4-[4-(2,4-디플루오로페닐)-6,7-디메틸-프테리딘-2-일]모르폴린(22 mg, 0.0423 mmol, 7.35% 수율)을 황색 고형분으로서 수득하였다. (2R,6R)-2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)-6-(디플루오로메틸)-4-[4-(2,4-디플루오로페닐)-6,7-디메틸-프테리딘-2-일]모르폴린(22 mg, 0.0420 mmol, 7.31% 수율)을 황색 고형분으로서 수득하였다. LCMS (SFC 중 피크 1) [M+H]+ = 514.1; 순도 = 100% (220 nm). 유지 시간 = 1.047분. ee. = 99.58%. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 7.77 - 7.68 (m, 1H), 7.56 (s, 2H), 7.10 - 7.03 (m, 1H), 6.99 (dt, J = 2.3, 9.5 Hz, 1H), 6.03 - 5.99 (m, 1H), 5.87 (d, J = 3.7 Hz, 1H), 5.73 (d, J = 3.7 Hz, 1H), 5.16 (br d, J = 12.5 Hz, 2H), 4.67 (dd, J = 2.4, 10.9 Hz, 1H), 4.05 - 3.93 (m, 1H), 3.59 (tt, J = 3.7, 7.3 Hz, 1H), 3.14 (ddd, J = 7.6, 11.1, 13.4 Hz, 2H), 2.74 (s, 3H), 2.62 (s, 3H), 1.17 - 1.10 (m, 2H), 1.08 - 0.98 (m, 2H). SFC 중의 피크 2) [M+H]+ = 514.0; 순도 = 100% (220 nm). 유지 시간 = 1.046분. ee. = 96.226%. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 7.78 - 7.68 (m, 1H), 7.56 (s, 2H), 7.06 (dt, J = 1.9, 8.2 Hz, 1H), 6.98 (dt, J = 2.3, 9.5 Hz, 1H), 6.01 (d, J = 3.7 Hz, 1H), 5.87 (d, J = 3.7 Hz, 1H), 5.73 (d, J = 3.7 Hz, 1H), 5.16 (br d, J = 13.4 Hz, 2H), 4.67 (dd, J = 2.4, 10.9 Hz, 1H), 4.05 - 3.93 (m, 1H), 3.59 (tt, J = 3.7, 7.3 Hz, 1H), 3.14 (ddd, J = 7.6, 11.1, 13.4 Hz, 2H), 2.74 (s, 3H), 2.62 (s, 3H), 1.16 - 1.08 (m, 2H), 1.07 - 0.99 (m, 2H).
화합물 I-1472의 합성
단계 1: MeCN(15 mL) 중 (2R,6S)-2-메틸-4-(p-톨일설포닐)-6-(1H-피라졸-4-일)모르폴린(1.00 당량, 500 mg, 1.56 mmol), KF (2.00 당량, 181 mg, 3.11 mmol) 및 1-[[브로모(디플루오로)메틸]-에톡시-포스포릴]옥시에탄(1.50 당량, 623 mg, 2.33 mmol)의 용액에 이어서 혼합물을 40℃에서 12시간 동안 교반하였다. LCMS (5-95AB/1.5분): RT = 0.630분, 372.0 = [M+H]+, ESI+는 목적하는 생성물의 45.3%를 나타냈고, RT = 0.543분, 322.0 = [M+H]+, ESI+는 출발 물질의 54%를 나타냈다. 이어서 반응 혼합물을 50℃에서 5시간 동안 교반하였다. LCMS (5-95AB/1.5 분): RT = 0.629분, 372.1 = [M+H]+, ESI+는 목적하는 생성물의 90.0%를 나타냈다. 반응물을 물(50 mL)로 희석한 다음, 에틸 아세테이트(50 mL * 3)로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 염수로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 PE/EtOAc(4:1)(TLC, PE: EtOAc = 1:1, Rf = 0.60)로 용리하는 실리카 겔 상의 플래쉬 크로마토그래피로 정제하여 (2S,6R)-2-[1-(디플루오로메틸)피라졸-4-일]-6-메틸-4-(p-톨일설포닐)모르폴린(284 mg, 0.765 mmol, 49.15% 수율)을 무색 검으로서 수득하였다. [M+H]+ = 372.1; 순도 = 100% (220 nm). 유지 시간 = 0.725분. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 1.20 - 1.25 (m, 3 H) 2.04 - 2.08 (m, 1 H) 2.17 - 2.27 (m, 1 H) 2.43 - 2.50 (m, 3 H) 3.67 (br dd, J=11.32, 1.94 Hz, 1 H) 3.75 - 3.83 (m, 1 H) 3.84 - 3.94 (m, 1 H) 4.72 (dd, J=10.44, 2.44 Hz, 1 H) 6.98 - 7.20 (m, 1 H) 7.37 (br d, J=8.00 Hz, 2 H) 7.60 - 7.70 (m, 3 H) 7.76 - 7.81 (m, 1 H).
단계 2: 메탄올(10 mL) 중 (2S,6R)-2-[1-(디플루오로메틸)피라졸-4-일]-6-메틸-4-(p-톨일설포닐)모르폴린(1.00 당량, 50 mg, 0.135 mmol) 및 Et3SiH(46.5 당량, 1.0 mL, 6.26 mmol)의 혼합물에 Mg 분말(30.0 당량, 97 mg, 4.04 mmol) 및 Mg 칩(30.0 당량, 97 mg, 4.04 mmol)을 25℃에서 첨가하고, 반응 혼합물을 N2 분위기 하에 80℃에서 12시간 동안 교반하였다. LCMS (0-60AB/1.5분): RT = 0.353분, 218.1 = [M+H]+, ESI+는 목적하는 생성물의 16.7%를 나타냈고, RT = 0.935분, 372.1 = [M+H]+, ESI+는 출발 물질의 45%를 나타냈다. 그런 다음, Mg 분말(20.0당량, 65 mg, 2.69 mmol) 및 Mg 칩(20.0당량, 65 mg, 2.69 mmol)을 첨가하고, 반응 혼합물을 N2 분위기 하에 80℃에서 12시간 동안 교반하였다. LCMS (0-60AB/1.5분): RT = 0.381분, 218.1 = [M+H]+, ESI+는 목적하는 생성물의 30.4%를 나타냈다. 반응 혼합물을 셀라이트 패드를 통해 여과하였다. 필터 케이크를 MeOH(50 mL)로 세척하였다. 여액을 감압 하에 농축시켜 미정제 생성물 (2S,6R)-2-[1-(디플루오로메틸)피라졸-4-일]-6-메틸-모르폴린(50 mg, 0.113 mmol, 83.78% 수율)을 백색 고형분으로서 수득하였다. 이를 추가 정제 없이 다음 단계에 사용하였다.
단계 3: DMSO(2 mL) 중 (2S,6R)-2-[1-(디플루오로메틸)피라졸-4-일]-6-메틸-모르폴린(1.00 당량, 50 mg, 0.113 mmol) 및 2-클로로-4-(2,4-디플루오로페닐)-6,7-디메틸-프테리딘(1.00 당량, 47 mg, 0.113 mmol)의 용액에 DIEA(4.00 당량, 58 mg, 0.451 mmol)를 25℃에서 첨가하였다. 그런 다음, 반응 혼합물을 100℃에서 30분 동안 교반하였다. LCMS (5-95AB/1.5분): RT = 0.793분, 488.1 = [M+H]+, ESI+는 목적하는 생성물의 39.2%를 나타냈다. 반응물을 물(20 mL)로 희석한 다음, 에틸 아세테이트(20 mL * 3)로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 염수로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 분취-HPLC(컬럼, [Unisil 3-100 C18 Ultra 150 * 50mm * 3 um]; 이동상: [ACN] 및 [H2O] (조건: [물 (0.225%FA)-ACN], B%: 41%-71%; 검출기, UV 254 nm. RT: [7분]])로 정제하여 (2S,6R)-2-[1-(디플루오로메틸)피라졸-4-일]-4-[4-(2,4-디플루오로페닐)-6,7-디메틸-프테리딘-2-일]-6-메틸-모르폴린(20 mg, 0.0415 mmol, 36.77% 수율)을 황색 고형분으로서 수득하였다. [M+H]+ = 488.1; 순도 = 98.9% (220 nm). 유지 시간 = 0.789분; 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 1.35 (d, J=6.25 Hz, 3 H) 2.61 (s, 3 H) 2.73 (s, 3 H) 2.82 - 2.91 (m, 1 H) 3.06 (dd, J=13.32, 10.94 Hz, 1 H) 3.80 - 3.92 (m, 1 H) 4.68 (dd, J=10.88, 2.38 Hz, 1 H) 4.95 - 5.06 (m, 1 H) 5.08 - 5.23 (m, 1 H) 6.98 (td, J=9.54, 2.31 Hz, 1 H) 7.04 (s, 1 H) 7.04 - 7.09 (m, 1 H) 7.19 (s, 1 H) 7.34 (s, 1 H) 7.68 - 7.78 (m, 2 H) 7.91 (s, 1 H).
화합물 I-1477의 합성
20℃에서 DCE(2 mL) 및 물(0.8 mL) 중 4-(4-클로로-2-플루오로-페닐)-2-[(2R,4S)-2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)테트라히드로피란-4-일]-6,7-디메틸-프테리딘(1.00 당량, 150 mg, 0.313 mmol) 및 아연 디플루오로메탄설피네이트(4.00 당량, 368 mg, 1.25 mmol)의 용액에 터트-부틸히드로퍼옥시드(7.00 당량, 197 mg, 2.19 mmol)를 격렬하게 교반하며 첨가하고, N2로 30초 동안 버블링하였다. 반응 용액을 20℃에서 1시간 동안 교반하였다. LCMS는 대부분의 출발 물질이 여전히 남아 있음을 나타냈다. 그런 다음, 반응 용액을 20℃에서 12시간 동안 교반하였다. LCMS는 대부분의 출발 물질이 여전히 남아 있음을 나타냈고, 목적하는 MS(529.2 [M+H]+, RT = 1.008분)가 검출되었다. 그런 다음, 반응 용액을 30℃에서 12시간 동안 추가로 교반하였다. LCMS는 67%의 출발 물질이 여전히 남아 있음을 나타냈고, 19%의 목적하는 MS(529.2 [M+H]+, RT = 1.018분)가 검출되었다. 혼합물을 30 mL 얼음 포화 Na2SO3 용액에 붓고, EA(15 mL * 3)로 추출하고, 합쳐진 유기층을 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 분취-TLC(DCM:MeOH = 20:1, Rf = 0.4)로 정제하여 잔류물을 수득하였다(40 mg, LCMS 중 39% 순도). 잔류물을 분취-HPLC(유속: 25 mL/분; 구배: 10분에 걸쳐 40-70% 물(0.1% FA)-ACN; 컬럼: Shim-pack C18 150 * 25*10 um)로 정제하고 동결건조시켜 4-(4-클로로-2-플루오로-페닐)-2-[(2R,4S)-2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)테트라히드로피란-4-일]-7-(2,2-디플루오로에틸)-6-메틸-프테리딘(4.9 mg, 0.00741 mmol, 2.37% 수율)을 황색 고형분으로서 수득하였다. [M+H]+ = 529.3; 순도 = 98.819% (220 nm). 유지 시간 = 0.987분. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 7.70 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 7.49 (s, 2H), 7.38 - 7.28 (m, 2H), 6.75 - 6.42 (m, 1H), 4.56 (dd, J = 1.6, 11.2 Hz, 1H), 4.30 - 4.23 (m, 1H), 3.81 (dt, J = 2.8, 11.6 Hz, 1H), 3.65 (dt, J = 4.8, 15.2 Hz, 2H), 3.56 (td, J = 3.6, 10.8 Hz, 2H), 2.79 (s, 3H), 2.47 - 2.37 (m, 1H), 2.25 - 2.14 (m, 3H), 1.12 - 1.07 (m, 2H), 1.01 - 0.95 (m, 2H).
화합물 I-1485의 합성
단계 1: 톨루엔(10 mL) 중 5-브로모-4-플루오로-인단-1-온(1.00 당량, 1000 mg, 4.37 mmol) 및 TsOH(0.200 당량, 150 mg, 0.873 mmol)의 용액에 에탄-1,2-디티올(1.02 당량, 419 mg, 4.45 mmol)을 첨가한 다음, 혼합물을 100℃에서 16시간 동안 교반하였다. LCMS는 형성되었지만 목적하는 MS가 없는 주요 피크를 나타냈다. 반응 용액에 NaOH(수성 1 M)(20 mL)로 급냉시킨 다음, 에틸 아세테이트(10 mL * 3)로 추출하고, 유기물을 10 mL 포화 염수 용액으로 세척하였다. 그런 다음, 유기물을 분리하고, 농축 건조 전에 건조시켰다(Na2SO4). 그런 다음, 미정제물을 실리카 겔 컬럼(PE/EA = 5/1)으로 정제하여 5'-브로모-4'-플루오로-스피로[1,3-디티오란-2,1'-인단](1250 mg, 4.10 mmol, 93.80% 수율)을 백색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 2.73 (t, J=6.69 Hz, 2 H) 3.02 (t, J=6.69 Hz, 2 H) 3.40 - 3.59 (m, 4 H) 7.22 (d, J=8.13 Hz, 1 H) 7.42 (dd, J=8.00, 6.38 Hz, 1 H).
단계 2: 1,4-디옥산(20 mL) 중 5'-브로모-4'-플루오로-스피로[1,3-디티오란-2,1'-인단](1.00 당량, 1250 mg, 4.10 mmol)의 용액에 KOAc(2.50 당량, 1005 mg, 10.2 mmol) 및 4,4,5,5-테트라메틸-2-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)-1,3,2-디옥사보롤란(1.50 당량, 1560 mg, 6.14 mmol)을 첨가한 다음, Pd(dppf)Cl2·CH2Cl2 (0.100 당량, 332 mg, 0.410 mmol)을 N2하에 혼합물에 첨가하였다. 그런 다음, 혼합물을 100℃에서 16시간 동안 교반하였다. LCMS는 출발 물질이 소모되었음을 나타냈고, 주요 피크는 목적하는 MS (M+H)+ = 353.1, 순도 = 23.96%, uv = 220 nm를 나타냈다. 유지 시간 = 0.752분. 반응 용액을 물(50 mL)에 붓고, 에틸 아세테이트(20 mL * 2)로 추출하고, 유기물을 10 mL 포화 염수 용액으로 세척하였다. 그런 다음, 유기물을 분리하고, 농축 건조 전에 건조시켰다(Na2SO4). 그런 다음, 미정제물을 실리카 겔 컬럼(PE/EA = 5/1, Rf = 0.5)으로 정제하여 2-(4'-플루오로스피로[1,3-디티올란-2,1'-인단]-5'-일)-4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란(1300 mg, 3.69 mmol, 90.11% 수율)을 백색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 1.27 (s, 11 H) 2.67 - 2.73 (m, 2 H) 2.98 (t, J=6.75 Hz, 2 H) 3.42 - 3.49 (m, 2 H) 3.50 - 3.57 (m, 2 H) 7.32 (d, J=7.50 Hz, 1 H) 7.60 - 7.68 (m, 1 H). MS (M+H)+ = 353.1, 순도 = 23.9%, uv = 220 nm. 유지 시간 = 0.752분.
단계 3: 물(2 mL) 및 톨루엔(20 mL) 중 2-(4'-플루오로스피로[1,3-디티오란-2,1'-인단]-5'-일)-4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란(1.00 당량, 1400 mg, 3.97 mmol)의 용액에 K3PO4 (3.00 당량, 2527 mg, 11.9 mmol) 및 PdCl2(amphos) (0.0500 당량, 141 mg, 0.199 mmol)를 N2 하에 첨가한 다음, 혼합물을 55℃에서 16시간 동안 교반하였다. LCMS는 원료가 소모되었음을 나타냈고, 주요 피크는 목적하는 MS(M+H)+ = 419.0, 순도 = 23.3%, uv = 220 nm를 나타냈다. 유지 시간 = 0.985분. 반응 용액을 물(50 mL)에 붓고, 에틸 아세테이트(20 mL * 2)로 추출하고, 유기물을 10 mL 포화 염수 용액으로 세척하였다. 그런 다음, 유기물을 분리하고, 농축 건조 전에 건조시켰다(Na2SO4). 그런 다음, 미정제물을 실리카 겔 컬럼(PE/EA = 1/1, Rf = 0.5)으로 정제하여 2-클로로-4-(4'-플루오로스피로[1,3-디티오란-2,1'-인단]-5'-일)-6,7-디메틸-프테리딘(950 mg, 2.27 mmol, 57.06% 수율)을 적색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 2.76 (s, 3 H) 2.81 (t, J=6.69 Hz, 2 H) 2.84 - 2.87 (m, 3 H) 3.09 (t, J=6.69 Hz, 2 H) 3.47 - 3.54 (m, 2 H) 3.55 - 3.62 (m, 2 H) 7.52 (d, J=7.88 Hz, 1 H) 7.61 - 7.70 (m, 1 H). LCMS (M+H)+ = 419.0, 순도 = 23.3%, uv= 220 nm. 유지 시간 = 0.985분.
단계 4: DMSO(10 mL) 중 2-클로로-4-(4'-플루오로스피로[1,3-디티오란-2,1'-인단]-5'-일)-6,7-디메틸-프테리딘(1.00당량, 950 mg, 2.27 mmol) 및 (6R)-2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)-6-메틸-모르폴린(1.50당량, 705 mg, 3.40 mmol)의 용액에 DIEA(3.00당량, 879 mg, 6.80 mmol)를 첨가한 다음 100℃에서 20분 동안 교반하였다. LCMS는 원료가 완전히 소모되었음을 나타냈고, 주요 피크는 목적하는 MS(M+H)+ = 590.2, 순도 = 88.17%, UV = 220 nm를 나타냈다. 유지 시간 = 1.052분. 반응 혼합물을 물(50 mL)에 붓고, 에틸 아세테이트(30 mL * 2)로 추출하고, 유기물을 포화 염수 용액(10 mL)으로 세척하였다. 그런 다음, 유기물을 분리하고, 농축 건조 전에 건조시켰다(Na2SO4). 그런 다음, 미정제물을 실리카 겔 컬럼(PE/EA = 1/1, Rf = 0.5)으로 정제하여 (2S,6R)-2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)-4-[4-(4'-플루오로스피로[1,3-디티오란-2,1'-인단]-5'-일)-6,7-디메틸-프테리딘-2-일]-6-메틸-모르폴린(900 mg, 1.53 mmol, 67.30% 수율)을 적색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 1.01 (q, J=6.32 Hz, 2 H) 1.07 - 1.16 (m, 2 H) 1.33 (d, J=6.11 Hz, 3 H) 2.61 (s, 3 H) 2.72 (s, 3 H) 3.04 - 3.11 (m, 3 H) 3.47 - 3.52 (m, 2 H) 3.55 - 3.61 (m, 3 H) 3.75 - 3.88 (m, 1 H) 4.60 (br d, J=10.76 Hz, 1 H) 4.90 - 5.03 (m, 1 H) 7.48 (d, J=7.58 Hz, 1 H) 7.52 - 7.61 (m, 3 H). LCMS (M+H)+ = 590.2, 순도 = 88.17%, UV = 220 nm. 유지 시간 = 1.052분.
단계 5: DCM(1 mL) 중 NIS(4.00당량, 76 mg, 0.339 mmol)의 용액을 2개의 플라스틱 둥근 바닥 플라스크에서 -78℃로 냉각시켰다. HF-Py(70%, 0.10 mL, 0.0848 mmol)를 혼합물에 각각 첨가하고 30분 동안 교반한 다음, DCM(0.50 mL) 중 (2S,6R)-2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)-4-[4-(4'-플루오로스피로[1,3-디티오란-2,1'-인단]-5'-일)-6,7-디메틸-프테리딘-2-일]-6-메틸-모르폴린(1.00당량, 50 mg, 0.0848 mmol)의 용액을 적가하였다. 첨가가 완료된 후, 반응 혼합물을 -50℃로 가온시키고 3시간 동안 교반하였다. LCMS는 원료가 소모되었음을 나타냈고, 주요 피크는 목적하는 MS (M+H)+ = 563.2, 및 MS (M+H)+ = 662.1을 나타냈다. 반응물을 얼음물(5 mL)과 NaHCO3(수성 10 mL)의 혼합물에 붓고, 에틸 아세테이트(5 mL * 3)로 추출하고, 유기물을 5 mL 포화 염수 용액으로 세척하였다. 그런 다음, 유기물을 분리하고, 농축 건조 전에 건조시켰다(Na2SO4). 그런 다음, 미정제물을 분취-TLC(PE/EA = 1/2, Rf = 0.4)로 정제하여 (2S,6R)-2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)-4-[6,7-디메틸-4-(1,1,4-트리플루오로인단-5-일)프테리딘-2-일]-6-메틸-모르폴린(20 mg, 0.0373 mmol, 22.02% 수율) 및 (2S,6R)-2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)-4-[6,7-디메틸-4-(1,1,4-트리플루오로-2-요오도-인단-5-일)프테리딘-2-일]-6-메틸-모르폴린(35 mg, 0.0529 mmol, 31.21% 수율)을 적색 고형분으로서 수득하였다. MS (M+H)+ = 536.2 및 662.1, 순도 = 27.67% 및 71.84%.
단계 6: DCM(1 mL) 중 (2S,6R)-2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)-4-[6,7-디메틸-4-(1,1,4-트리플루오로-2-요오도-인단-5-일)프테리딘-2-일]-6-메틸-모르폴린(1.00 당량, 55 mg, 0.0529 mmol)의 용액에 DBU(1.50 당량, 12 mg, 0.0793 mmol)를 첨가한 다음, 혼합물을 20℃에서 2시간 동안 교반하였다. LCMS는 원료가 완전히 소모되었음을 나타냈고, 주요 피크는 목적하는 MS(M+H)+ = 534.1, 순도 = 87.56%, UV = 220 nm를 나타냈다. 유지 시간 = 1.010분. 반응물에 HCl(1 M, 1 mL)을 첨가한 다음, 5 mL의 물을 첨가한 다음, 에틸 아세테이트(2 mL * 2)로 추출하고, 유기물을 3 mL의 포화 염수 용액으로 세척하였다. 그런 다음, 유기물을 분리하고 농축 건조시키기 전에 건조시키고(Na2SO4), 미정제 (2S,6R)-2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)-4-[6,7-디메틸-4-(1,1,4-트리플루오로인덴-5-일)프테리딘-2-일]-6-메틸-모르폴린(60 mg, 0.112 mmol, 212.65% 수율)을 황색 고형분으로서 수득하고, 추가 정제 없이 다음 단계에 사용하였다. MS (M+H)+ = 534.1, 순도 = 87.56%, UV = 220 nm. 유지 시간 = 1.01분.
단계 7: MeCN(1 mL) 중 (2S,6R)-2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)-4-[6,7-디메틸-4-(1,1,4-트리플루오로인덴-5-일)프테리딘-2-일]-6-메틸-모르폴린(1.00 당량, 45 mg, 0.0843 mmol)의 용액에 K3PO4(0.200 당량, 3.6 mg, 0.0169 mmol) 및 2-니트로벤젠설포노하이드라지드(2.00 당량, 37 mg, 0.169 mmol)를 혼합물에 첨가한 다음, 혼합물을 20℃에서 16시간 동안 교반하였다. LCMS는 원료가 소모되었음을 나타냈고, 주요 피크는 목적하는 MS(M+H)+ = 536.2, 순도 = 86.22%, UV = 220 nm를 나타냈다. 유지 시간 = 1.003분. 반응물에 HCl(수성 1 M)(1 mL)로 급냉시킨 다음, 물(5 mL)에 붓고, 에틸 아세테이트(3 mL * 2)로 추출하고, 유기물을 3 mL 포화 염수 용액으로 세척하였다. 그런 다음, 유기물을 분리하고, 농축 건조 전에 건조시켰다(Na2SO4). 그런 다음, 미정제물을 분취-TLC(PE/EA = 1/3, Rf = 0.3)로 2회 정제하여 (2S,6R)-2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)-4-[6,7-디메틸-4-(1,1,4-트리플루오로인단-5-일)프테리딘-2-일]-6-메틸-모르폴린(15 mg, 0.0280 mmol, 33.25% 수율)을 연황색 고형분으로서 수득하였다. MS (M+H)+ = 536.2, 순도 = 100%, uv = 220 nm. 유지 시간 = 1.008분. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 0.98 - 1.05 (m, 2 H) 1.09 - 1.15 (m, 2 H) 1.33 (d, J=6.11 Hz, 3 H) 2.60 (s, 3 H) 2.66 - 2.79 (m, 5 H) 2.85 (dd, J=13.20, 10.76 Hz, 1 H) 3.03 - 3.12 (m, 1 H) 3.13 - 3.20 (m, 2 H) 3.58 (tt, J=7.23, 3.65 Hz, 1 H) 3.77 - 3.89 (m, 1 H) 4.61 (br d, J=8.93 Hz, 1 H) 4.85 - 5.23 (m, 2 H) 7.49 (br d, J=7.82 Hz, 1 H) 7.52 - 7.58 (m, 2 H) 7.62 - 7.70 (m, 1 H).
I-1490의 합성
테플론-코팅된 자기 교반 막대가 구비된 유리 바이알에 (7-((2R,4S)-2-(1-시클로프로필-1H-피라졸-4-일)테트라히드로-2H-피란-4-일)-5-(2,4-디플루오로페닐)-2-메틸피리도[3,4-b]피라진-3-일)메탄올(1.0 당량, 119 mg, 0.25 mmol), 칼륨 아세테이트(4.0 당량, 98 mg, 1.0 mmol), DCM(0.15 mL) 및 물(0.15 mL)을 채웠다. 생성된 용액을 얼음조에서 0℃에서 교반하면서 냉각시켰다. [브로모(디플루오로)메틸]-트리메틸-실란(2.0 당량, 0.079 mL, 0.50 mmol)을 첨가하고, 반응 혼합물을 22℃에서 17시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 DCM 및 물로 희석하였다. 층을 분리시키고, 수성층을 DCM(3x)으로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 무수 Na2SO4로 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 증발 건조시켰다. 미정제 잔류 혼합물을 DCM 중 1% 내지 10% MeOH의 용리 구배를 사용하는 실리카 겔 플래쉬 컬럼 크로마토그래피(Teledyne RediSep® GOLD 컬럼, 24 g SiO2)로 정제하여 31 mg의 미정제 생성물을 수득하였다. 생성물을 pH 3.8(30-50%)의 10mM 포름산암모늄 수용액 중 MeOH의 용리 구배를 사용하는 분취 HPLC(Gemini® 5 um NX-C18 110 Å, 100 x 30 mm 컬럼)로 추가로 정제하여 7-((2R,4S)-2-(1-시클로프로필-1H-피라졸-4-일)테트라히드로-2H-피란-4-일)-3-((디플루오로메톡시)메틸)-5-(2,4-디플루오로페닐)-2-메틸피리도[3,4-b]피라진 (11 mg, 0.02 mmol, 8 % 수율)을 회백색 고형분으로서 수득하였다. 생성물은 시스:트랜스 부분 입체이성질체의 3:1 혼합물이었다. LC-MS(ESI+): Tr = 0.94분; [M+H]+ 528.3 (obs). 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz): δH 9.14-9.16 (4H, m), 9.05 (4H, s), 8.43 (9H, s), 7.97 (1H, s), 7.87 (3H, s), 7.63-7.70 (4H, m), 7.38 (4H, t, J = 9.8 Hz), 7.24 (4H, t, J = 8.5 Hz), 5.02 (1H, t, J = 4.8 Hz), 4.65-4.69 (10H, m), 4.15 (3H, d, J = 11.2 Hz), 4.01 (5H, s), 3.78 (5H, d, J = 13.4 Hz), 2.77-2.78 (10H, m), 2.35 (4H, d, J = 13.7 Hz), 1.85-1.98 (9H, m), 1.41-1.44 (9H, m), 1.19-1.24 (10H, m).
1505의 합성(I-1278에 대한 동일한 일반 방법).
테플론-코팅된 자기 교반 막대가 구비된 화염 건조 둥근 바닥 플라스크에 (7-((2R,4S)-2-(1-시클로프로필-1H-피라졸-4-일)테트라히드로-2H-피란-4-일)-5-(2,4-디플루오로페닐)-2-메틸피리도[3,4-b]피라진-3-일)메탄올(1.0 당량, 60 mg, 0.126 mmol)을 채웠다. 플라스크를 밀봉하고 Ar(g) 하에 퍼징하였다. 무수 톨루엔(1.5 mL)에 이어서 옥세탄-3-일메탄올(10.0 당량, 0.10 mL, 1.26 mmol) 및 2-(트리부틸-λ5-포스파닐리덴)아세토니트릴(3.00 당량, 0.099 mL, 0.377 mmol)을 첨가하였다. 생성된 용액을 40℃에서 20시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 22℃로 냉각시키고, EtOAc로 희석하고, 포화 NH4Cl (수성), 포화 NaHCO3 (수성) 및 염수로 순차적으로 세척하였다. 유기층을 Na2SO4로 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 증발 건조시켰다. 미정제 잔류 혼합물을 DCM 중 0% 내지 10% MeOH의 용리 구배를 사용하는 실리카 겔 플래쉬 컬럼 크로마토그래피(Teledyne RediSep® GOLD 컬럼, 24 g SiO2)로 정제하여 296 mg의 미정제 생성물을 짙은 갈색 시럽으로서 수득하였다. 생성물을 pH 3.8(48-68%)의 10mM 포름산암모늄 수용액 중 MeOH의 용리 구배를 사용하는 분취 HPLC(Gemini® 5 um NX-C18 110 Å, 100 x 30 mm 컬럼)로 추가로 정제하여 7-((2R,4S)-2-(1-시클로프로필-1H-피라졸-4-일)테트라히드로-2H-피란-4-일)-5-(2,4-디플루오로페닐)-2-메틸-3-((옥세탄-3-일메톡시)메틸)피리도[3,4-b]피라진 (12 mg, 0.021 mmol, 17 % 수율)을 백색 고형분으로서 수득하였다. LC-MS(ESI+): Tr = 1.47분; [M+H]+ 548.3(obs). 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz): δH 7.88 (1H, s), 7.70-7.74 (2H, m), 7.39-7.43 (2H, m), 7.27 (1H, td, J = 8.5, 2.6 Hz), 4.79 (2H, s), 4.55 (2H, dd, J = 7.9, 5.9 Hz), 4.49 (1H, dd, J = 10.8, 1.9 Hz), 4.23 (2H, t, J = 6.0 Hz), 4.09 (1H, dd, J = 11.2, 3.9 Hz), 3.63-3.72 (4H, m), 3.09-3.16 (1H, m), 2.76 (2H, s), 2.22 (1H, d, J = 13.0 Hz), 1.87-1.96 (3H, m), 0.97-0.99 (2H, m), 0.88-0.93 (3H, m).
화합물 I-1510 및 I-1511의 합성
단계 1: DCM(20 mL) 중 [(2R)-4-(p-톨일설포닐)모르폴린-2-일]메탄올(1.00 당량, 1000 mg, 3.69 mmol)의 용액에 데스-마틴 페리오디난(1.10 당량, 1720 mg, 4.05 mmol)을 0℃에서 첨가하였다. 그런 다음, 반응 용액을 25℃로 가온시키고 16시간 동안 교반하였다. LCMS (5-95AB/1.5분): RT = 0.427분, 270.0 = [M+H]+, ESI+는 목적하는 생성물의 55%를 나타냈고, RT = 0.630분, 272.1 = [M+H]+, ESI+는 출발 물질의 10%를 나타냈고, 밤 후, LCMS는 출발 물질이 완전히 소모되었음을 나타냈다. 반응 혼합물을 포화 NH4Cl 수용액(20 mL)에 붓고, 에틸 아세테이트(20 mL * 3)로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 Na2SO4로 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 [석유 에테르]/[에틸 아세테이트] = (100/1 - 3/1)（PE/EA=5:1，Rf= 0.5）로 용리하는 실리카 겔 상의 플래쉬 크로마토그래피로 정제하여 (2R)-4-(p-톨일설포닐)모르폴린-2-카르브알데히드(520 mg,1.54 mmol, 41.91% 수율)를 백색 고형분으로서 수득하였고, LCMS [M+H] + = 270.0; 순도 = 84%(220 nm)였다. 유지 시간 = 0.751분.
단계 2: 에탄올(4 mL) 및 물(0.1000 mL) 중 NH2OH
Figure pct00882
HCl(1.50 당량, 194 mg, 2.78 mmol) 및 (2R)-4-(p-톨일설포닐) 모르폴린-2-카르브알데히드(1.00 당량, 500 mg, 1.86 mmol)의 용액에 TEA(3.00당량, 0.77 mL, 5.57 mmol)를 첨가하고 25℃에서 2시간 동안 교반하였다. LCMS (5-95AB/1.5분): RT = 0.786분, 285.1 = [M+H]+, ESI+는 목적하는 생성물의 71.5%를 나타냈다. 반응 혼합물을 여과하였다. 필터 케이크를 물(2 mL * 3)로 세척하였다. 여액을 감압 하에 농축시켜 (2E,2R)-4-(p-톨일설포닐)모르폴린-2-카르브알데히드 옥심(285 mg,0.952 mmol, 51.29% 수율)을 백색 고형분으로서 수득하였고, LCMS [M+H] + = 285.1; 순도 = 95%(220 nm)였다. 유지 시간 = 0.494분.
단계 3: DMF(5 mL) 중 (2E,2R)-4-(p-톨일설포닐)모르폴린-2-카르브알데히드 옥심(1.00당량, 285 mg, 1.00 mmol) 및 NCS(1.00당량, 178 mg, 1.00 mmol)의 용액을 N2로 3회 퍼징하고 30℃에서 1시간 동안 교반하였다. 이는 추가 후처리 다음 단계에 사용되었다. [M+H] + =319.0; 순도 = 90% (220 nm). 유지 시간 = 0.840분.
단계 4: 터트-부탄올(2 mL) 및 물(2 mL) 둘 다를 반응 밀봉 튜브에 첨가하고, 아스코르베이트(0.500 당량, 20 mg, 0.290 mmol), NaHCO3(4.30 당량, 210 mg, 2.50 mmol) 및 CuSO4
Figure pct00883
H2O(0.0500 당량, 7.2 mg, 0.0290 mmol)를 첨가하고, 혼합물이 이 때 갈색으로 변하였고, 이어서 프로프-1-이엔(1.00당량, 0.58 mL, 0.580 mmol)을 N2 분위기에서 서서히 첨가하고, 마지막으로 (2Z,2R)-N-히드록시-4-(p-톨일설포닐)모르폴린-2-카르복시미도일 클로라이드(1.00 당량, 185 mg, 0.580 mmol)를 0℃에서 서서히 첨가하고, 그 시간 동안 색상이 갈색에서 황색, 연황색, 무색 및 연청색으로 변하였고, 궁극적으로 30℃에서 2시간 동안 교반하였다. LCMS (5-95AB/1.5분): RT = 0.873분, 323.1= [M+H]+, ESI+는 22.5%의 목적하는 생성물을 나타냈고 출발 물질은 없었다. 반응 혼합물을 에틸 아세테이트(20 mL * 3)로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 Na2SO4로 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 분취-HPLC(컬럼, [Phenomenex luna C18 250 * 50mm * 10 um]; 이동상: [ACN] 및 [H2O] (조건: [물 (0.225%FA)-ACN], B%: 65%-90%; 검출기, UV 254 nm. RT: [22분])로 정제하고 동결 건조시켜 2-(5-메틸이속사졸-3-일)-4-(p-톨일설포닐) 모르폴린(20 mg, 0.0620 mmol, 10.69% 수율)을 백색 고형분으로서 수득하고, LCMS. [M+H] + = 323.1; 순도 = 100% (220 nm)였다. 유지 시간 = 0.876분.
단계 5: 메탄올(2 mL) 중 (2R)-2-(5-메틸이속사졸-3-일)-4-(p-톨일설포닐)모르폴린(1.00당량, 20 mg, 0.0620 mmol)의 용액에 Mg(분말)(15.0당량, 22 mg, 0.931 mmol) 및 Mg(칩)(15.0당량, 22 mg, 0.931 mmol)을 25℃에서 첨가한 다음, N2로 3회 퍼징하고 80℃에서 12시간 동안 교반하였다. LCMS (5-95AB/1.5분)는 출발 물질의 28%를 나타냈다. 그런 다음, 메탄올(6 mL) 중의 혼합물을 25℃에서 Mg(분말)(20.0 당량, 30 mg, 1.24 mmol) 및 Mg(칩)(20.0 당량, 30 mg, 1.24 mmol)을 첨가한 다음, N2로 3회 퍼징하고 80℃에서 12시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 셀라톰을 통해 여과하고, 여과물을 감압 하에 증발시켜 4-메틸벤젠설폰산; (2R)-2-(5-메틸이속사졸-3-일)모르폴린(30 mg, 142.06% 수율)을 미정제 생성물로서 수득하였다. [M+H] + =323.1; 순도 = 28% (220 nm). 유지 시간 = 0.883분.
단계 6: DMSO(0.5000 mL) 중 4-메틸벤젠설폰산;(2R)-2-(5-메틸이속사졸-3-일)모르폴린(1.20 당량, 29 mg, 0.0856 mmol) 및 2-클로로-4-(4-클로로-2-플루오로-페닐)-6,7-디메틸-프테리딘(1.00 당량, 23 mg, 0.0713 mmol)의 용액에 DIEA(4.17당량, 38 mg, 0.297 mmol)를 100℃에서 2시간 동안 교반하였다. LCMS (5-95AB/1.5분): RT = 0.991분, 455.1 = [M+H]+, ESI+는 목적하는 생성물의 33.5%를 나타냈다. 반응 혼합물을 H2O (20 mL)에 붓고 에틸 아세테이트(20 mL * 3)로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 Na2SO4로 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 분취-HPLC(Phenomenex Synergi C18 150 * 25mm * 10um), 조건: 물(FA)-ACN, 구배 시간(분)： 10)로 정제하고 동결건조시켜 (2R)-4-[4-(4-클로로-2-플루오로-페닐)-6,7-디메틸-프테리딘-2-일]-2-(5-메틸이속사졸-3-일)모르폴린(2.4 mg,0.00512 mmol, 7.18% 수율)을 황색 고형분으로서 수득하였다. [M+H] + =455.1; 순도 = 33.5% (220 nm). 유지 시간 = 0.991분. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 7.66 (t, J = 7.8 Hz, 1H), 7.31 (br d, J = 8.2 Hz, 1H), 7.25 (s, 1H), 6.11 (s, 1H), 5.16 (br d, J = 12.7 Hz, 1H), 4.90 (br d, J = 13.8 Hz, 1H), 4.78 - 4.71 (m, 1H), 4.15 (br d, J = 9.7 Hz, 1H), 3.89 - 3.80 (m, 1H), 3.44 - 3.30 (m, 2H), 2.72 (s, 3H), 2.60 (s, 3H), 2.45 (s, 3H).
단계 7: 터트-부탄올(2.5mL) 및 물(2.5mL) 둘 모두를 밀봉된 튜브에 첨가하고, Na 아스코르베이트(0.500 당량, 21 mg, 0.308 mmol), NaHCO3(4.30 당량, 223 mg, 2.65 mmol) 및 CuSO4
Figure pct00884
H2O(0.0500 당량, 7.7 mg, 0.0308 mmol)를 첨가하고, 반응 혼합물이 갈색으로 변하였고, 이어서 에티닐시클로프로판(1.00당량, 41 mg, 0.617 mmol)을 N2 분위기에서 서서히 첨가하고, 마지막으로 (2Z,2R)-N-히드록시-4-(p-톨일설포닐)모르폴린-2-카르복시미도일 클로라이드(1.00 당량, 197 mg, 0.617 mmol)를 0℃에서 첨가하고, 그 시간 동안 반응 색상은 갈색에서 황색, 연황색, 무색 및 연황색으로 변하였고, 궁극적으로 30℃에서 2시간 동안 교반하였다. LCMS (5-95AB/1.5분): RT = 0.912분, 349.1 = [M+H]+, ESI+는 목적하는 생성물의 60%를 나타냈다. 반응 혼합물을 에틸 아세테이트(20 mL * 3)로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 Na2SO4로 건조시키고, 여과하고 감압 하에 농축시켜 (2R)-2-(5-시클로프로필이속사졸-3-일)-4-(p-톨일설포닐)모르폴린(25 mg,0.0718 mmol, 11.63% 수율)을 백색 고형분으로서 수득하였다. [M+H] + =349.1; 순도 = 60% (220 nm). 유지 시간 = 0.912분.
단계 8: 메탄올(6 mL) 중 (2R)-2-(5-시클로프로필이속사졸-3-일)-4-(p-톨일설포닐)모르폴린(1.00당량, 25 mg, 0.0718 mmol)의 용액을 25℃에서 Mg(분말)(15.0당량, 26 mg, 1.08 mmol) 및 Mg(칩)(15.0당량, 26 mg, 1.08 mmol)을 첨가한 다음, N2로 3회 퍼징하고 80℃에서 12시간 동안 교반하였다. LCMS (5-95AB/1.5분): RT = 0.206분, 195.3 = [M+H]+, ESI+는 목적하는 생성물의 43%를 나타냈고, RT = 0.932분, 349.2 = [M+H]+, ESI+는 출발 물질의 48.6%를 나타냈다. 그런 다음, Mg(분말)(15.0당량, 26 mg, 1.08 mmol) 및 Mg(파일)(15.0당량, 26 mg, 1.08 mmol)를 25℃에서 첨가한 다음, N2로 3회 퍼징하고 80℃에서 12시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 셀라톰을 통해 여과하고, 여과물을 감압 하에 증발시켜 4-메틸벤젠설폰산; (2R)-2-(5-시클로프로필이속사졸-3-일) 모르폴린(50 mg, 0.136 mmol, 190.17% 수율)을 백색 고형분으로서 수득하였다. [M+H] + =195.3; 순도 = 43% (220 nm). 유지 시간 = 0.206분.
단계 9: DMSO(1 mL) 중 4-메틸벤젠설폰산; (2R)-2-(5-시클로프로필이속사졸-3-일)모르폴린(2.21 당량, 50 mg, 0.136 mmol) 및 2-클로로-4-(4-클로로-2-플루오로-페닐)-6,7-디메틸-프테리딘(1.00 당량, 20 mg, 0.0618 mmol)의 용액을 DIEA(4.17 당량, 33 mg, 0.257 mmol)를 첨가하고 100℃에서 2시간 동안 교반하였다. LCMS (5-95AB/1.5분): RT = 1.030분, 481.1 = [M+H]+, ESI+는 목적하는 생성물의 44%를 나타냈다. 반응 혼합물을 H2O (20 mL)에 붓고 에틸 아세테이트(20 mL * 3)로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 Na2SO4로 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 분취-HPLC(Phenomenex Synergi C18 150 * 25mm * 10um), 조건: 물(FA)-ACN, 구배 시간(분)： 10)로 정제하고 동결건조시켜 (2R)-4-[4-(4-클로로-2-플루오로-페닐)-6,7-디메틸-프테리딘-2-일]-2-(5-시클로프로필이속사졸-3-일)모르폴린(2.3 mg,0.00462 mmol, 7.48% 수율)을 황색 고형분으로서 수득하였다. LCMS (M+H) + =481.1; 순도 = 44% (220 nm). 유지 시간 = 1.030분. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 7.66 (t, J = 7.8 Hz, 1H), 7.31 (br d, J = 8.6 Hz, 1H), 7.25 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 6.01 (s, 1H), 5.21 - 5.10 (m, 1H), 4.89 (br d, J = 13.6 Hz, 1H), 4.73 (dd, J = 2.6, 10.3 Hz, 1H), 4.15 (br dd, J = 1.5, 11.4 Hz, 1H), 3.89 - 3.78 (m, 1H), 3.42 - 3.30 (m, 2H), 2.72 (s, 3H), 2.60 (s, 3H), 2.10 - 2.00 (m, 1H), 1.12 - 1.04 (m, 2H), 1.00 - 0.94 (m, 2H).
I-1513의 합성
단계 1: 1,4-디옥산(50 mL) 중 메틸 3-아미노-5,6-디클로로-피라진-2-카르복실레이트(4 g, 18.0 mmol, 1.0 당량) 및 테트라메틸스탄난 (8.05 g, 45.0 mmol, 2.5 당량)의 혼합물에 X-phos(3.43 g, 7.2 mmol, 0.4 당량) 및 Pd2(dba)3(1.03 g, 1.8 mmol, 0.1 당량)을 첨가하였다. 혼합물을 탈기하고 N2 하에 교반한 다음, 110℃까지 가온하고 밤새 교반하였다. LCMS는 주요 피크가 목적하는 생성물이었고 출발 물질이 남아 있지 않음을 나타냈다. 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 물(50 mL)로 희석시키고, CH2Cl2(100 mL×3)로 추출하였다. 합쳐진 유기물을 NaHCO3 (수성)(100 mL) 및 염수(100 mL)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 진공에서 농축시켜 미정제 생성물을 수득하였다. 미정제 생성물을 FCC (석유 에테르:에틸 아세테이트 = 52:48)로 정제하여 목적하는 생성물(3 g, 87.3%)을 황색 고형분으로서 수득하였다. LCMS: M+H=182, Ref. 시간=0.85.
단계 2: 밀봉된 튜브에서, 메틸 3-아미노-5,6-디메틸-피라진-2-카르복실레이트(300 mg, 1.66 mmol)를 MeOH(2 mL, 7 mol/L) 중 NH3의 용액에 첨가하였다. 혼합물을 80℃로 가온하고 밤새 교반하였다. 반응물을 농축시키고, 잔류물을 MTBE(50 mL)로 세척하였다. 고형분을 진공에서 건조시켜 목적하는 생성물을 수득하였다(295 mg, 96.5%). LCMS: M+H=167.2, Ref 시간=0.572분
단계 3: EtOH(50 mL) 중 6-옥소피페리딘-3-카르복시산(5 g, 34.9 mmol, 1.0당량)의 혼합물에 티오닐 클로라이드(52.4 mmol, 3.8 mL, 1.5 당량)를 적가하였다. 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 혼합물을 진공에서 농축시켜 미정제 생성물을 수득하였다. MTBE(100 mL)로 세척한 후, 고형분을 수집하였다. 고형분을 진공에서 건조시켜 목적하는 생성물을 수득하였다(7 g, 100%). LCMS: M+H=172.2, Ref. 시간=0.514. 1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 10.28(s, 1H), 4.13-4.07(m, 2H), 3.34-3.23(m, 2H), 2.83-2.77(m, 1H), 2.27-2.12(m, 2H), 2.02-1.95(m, 1H), 1.88-1.79(m, 1H),1.21-1.17(t, J=6.8Hz, 3H).
단계 4: 1,4-디옥산(30 mL) 중 에틸 6-옥소피페리딘-3-카르복실레이트(1.4 g, 8.18 mmol, 95% 순도, 1.0 당량), 4-브로모-2-메틸피리딘(1.40 g, 8.18 mmol, 1.0 당량) 및 DMEDA(793 mg, 9 mmol, 1.1 당량) CuI (779 mg, 4.09 mmol, 0.5 당량)의 혼합물에 Cs2CO3 (5.32 g, 16.36 mmol, 2.0 당량)을 첨가하였다. 혼합물을 3회 탈기하고 N2 하에 교반하였다. 혼합물을 110℃까지 밤새 가온시켰다. 혼합물을 여과하고, 유기물을 수집하고, Na2SO4로 건조시키고, 진공에서 농축시켜 미정제 생성물을 수득하였다. 미정제 생성물을 FCC(DCM:MeOH=10:1)로 정제하여 목적하는 생성물(1.4 g, 65.3%)을 황색 오일로서 수득하였다. M+H=263.1 Ref 시간 =0.546분.
단계 5: MeOH(40 mL) 중 에틸 1-(2-메틸-4-피리딜)-6-옥소-피페리딘-3-카르복실레이트(2.5 g, 9.53 mmol, 1.0당량)의 용액에 H2O(40 mL) 중 LiOH(229 mg, 9.53 mmol, 1.0당량)의 용액을 첨가하였다. 30분 동안 교반한 후, LCMS는 출발 물질이 소모되었음을 나타냈다. 반응물을 1 M HCl로 pH = 4로 조정하고 동결건조시켜 생성물을 수득하였다(1.5 g, 67.2%). LCMS: M+H=235.1 Ref 시간 =0.246.
단계 6: DCM(15 mL) 중 1-(2-메틸-4-피리딜)-6-옥소-피페리딘-3-카르복실산(800 mg, 3.42 mmol, 1.0 당량)의 혼합물에 3-아미노-5,6-디메틸-피라진-2-카르복사미드(567 mg, 3.45 mmol, 1.0 당량) 및 피리딘(1.62 g, 20.5 mmol, 6.0 당량)을 첨가하고, 혼합물을 교반하고 0℃까지 냉각시킨 다음, DCM(5 mL) 중 POCl3 (944 mg, 6.83 mmol, 2.0 당량)을 적가하였다. 완료 후, 혼합물을 25℃까지 가온시키고, 3시간 동안 교반하였다. 혼합물을 진공에서 농축시키고 다음 단계에 사용하였다. LCMS: M+H=383.4 Ref 시간 =1.057.
단계 7: MeCN(20 mL) 중 5,6-디메틸-3-[[1-(2-메틸-4-피리딜)-6-옥소-피페리딘-3-카르보닐]아미노]피라진-2-카르복사미드(1.5 g, 3.9 mmol, 1.0 당량)의 혼합물에 물(20 mL) 중 KOH(2.2 g, 39 mmol, 10 당량)의 용액을 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 혼합물을 동결건조시키고 FCC(CH2Cl2: MeOH = 100-90%)로 정제하여 목적하는 생성물을 수득하였다(300 mg).
단계 8: DCM 및 MeCN(15+15 mL) 중의 5-(4-히드록시-6,7-디메틸-프테리딘-2-일)-1-(2-메틸-4-피리딜)피페리딘-2-온(260 mg, 0.71 mmol, 1.00 당량) 및 TsCl 204 mg, 1.07 mmol, 1.5 당량)의 용액에 Et3N(216 mg, 2.14 mmol, 3 당량)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 N2 하에 25℃에서 5시간 동안 교반하였다. LC-MS는 출발 물질이 소모되었음을 나타내었고, 목적하는 m/z를 갖는 하나의 주 피크가 검출되었다. 혼합물을 증발시키고 FCC(CH2Cl2:MeOH = 100-95%)로 정제하여 목적하는 생성물을 수득하였다. LCMS: M+H=519.5 Ref 시간 =1.49.
단계 9: THF(5 mL) 중 2,4-디플루오로-1-요오도-벤젠(300 mg, 1.25 mmol, 1.00 당량)의 용액에 i-PrMgCl (0.65 mL, 2.00 M, 1.1 당량)을 -40℃에서 적가하였다. 혼합물을 동일한 온도에서 30분 동안 교반하였다. 그런 다음, 반응 혼합물을 -78℃로 냉각시키고, ZnCl2(2 mL THF 중 180 mg, 2.00 M, 1.05 당량)를 적가하고, 반응 혼합물을 20℃로 1시간 동안 가온시키고, 백색 혼탁 액체를 형성하였다. 미정제 생성물은 다음 반응에 직접 사용하였다.
단계 10: THF(5 mL) 중 [6,7-디메틸-2-[1-(2-메틸-4-피리딜)-6-옥소-3-피페리딜]프테리딘-4-일] 4-메틸벤젠설포네이트(300 mg, 0.58 mmol, 1 당량) 및 Pd(amphos)Cl2 (24 mg, 0.03 mmol, 0.05 당량)의 혼합물에 THF(5 mL) 중 (2,4-디플루오로페닐)-요오도-아연의 용액을 첨가하였다. 혼합물을 N2 하에 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 혼합물을 여과하고 증발시키고 분취- HPLC(ACN - H2O (0.1% NH3); 구배: 5 - 95)로 정제하고 동결건조시켜 목적하는 생성물을 황색 고형분으로서 수득하였다(48.14 mg, 20% 수율). LCMS: (M+H)+ = 461.5. 유지 시간 = 1.492분. HPLC: 순도 = 98.3% (254 nm); 순도 = 98.9% (214 nm). 유지 시간 = 2.370분. 1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 8.39 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 7.82 - 7.73 (m, 1H), 7.53 - 7.45 (m, 1H), 7.36 - 7.29 (m, 2H), 7.27 - 7.22 (m, 1H), 4.33 - 4.28 (m, 1H), 4.15 - 4.11 (m, 1H), 3.89 - 3.80 (m, 1H), 2.79 (s, 3H), 2.7 - 2.70 (m, 1H), 2.67 (s, 3H), 2.60 - 2.55 (m, 1H), 2.44 (s, 3H), 2.41 - 2.38 (m, 2H).
화합물 I-1529 및 I-1532의 합성
단계 1: DMF(10 mL) 중 5,6-디히드로-4H-피롤로[1,2-b]피라졸(1.00 당량, 500 mg, 4.62 mmol)의 용액에 NBS(1.00 당량, 823 mg, 4.62 mmol)를 첨가한 다음, 20℃에서 16시간 동안 교반하였다. LCMS는 원료가 소모되었음을 나타냈고, 주요 피크는 목적하는 MS를 나타냈다(187.0 [M+H]+, LC-RT = 0.698분). TLC(PE/EA = 1/1)는 원료가 소모되었고 새로운 스폿이 형성되었음을 나타냈다. 반응물에 물(30 mL)을 첨가한 다음, 에틸 아세테이트(10 mL * 3)로 추출하고, 유기물을 10 mL 포화 염수 용액으로 세척하였다. 그런 다음, 유기물을 분리하고, 농축 건조 전에 건조시켰다(Na2SO4). 그런 다음, 미정제물을 실리카 겔 컬럼(PE/EA = 1/1)으로 정제하여 3-브로모-5,6-디히드로-4H-피롤로[1,2-b]피라졸(500 mg, 2.67 mmol, 57.82% 수율)을 백색 고형분으로서 수득하였다. MS (M+H)+ = 187.0; 순도 = 100% (220 nm). 유지 시간 = 0.698분. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 2.58 - 2.68 (m, 2 H) 2.82 - 2.93 (m, 2 H) 4.14 - 4.24 (m, 2 H) 7.42 - 7.46 (m, 1 H).
단계 2. THF(10 mL) 중 3-브로모-5,6-디히드로-4H-피롤로[1,2-b]피라졸(1.00 당량, 350 mg, 1.87 mmol)의 용액에 i-PrMgCl·LiCl(1.50 당량, 2.2 mL, 2.81 mmol)를 0℃에서 첨가하고, 15℃에서 5시간 동안 교반하고, 2-클로로-N-메톡시-N-메틸아세타미드(1.10 당량, 283 mg, 2.06 mmol)를 0℃에서 혼합물에 첨가한 다음, 15℃에서 10분 동안 교반하였다. LCMS는 원료가 대부분 소모되었음을 나타냈고, 74.6%의 주요 피크는 목적하는 MS(185.1 [M+H]+)를 나타냈다. 유지 시간 = 0.278분). 반응물에 NH4Cl(수성 10 mL) 및 물(20 mL)을 첨가한 다음, 용액을 에틸 아세테이트(5 mL * 3)로 추출하고, 유기물을 10 mL 포화 염수 용액으로 세척하였다. 그런 다음, 유기물을 분리하고, 농축 건조 전에 건조시켰다(Na2SO4). 그런 다음, 미정제물을 실리카 겔 컬럼(PE/EA = 0/1, Rf = 0.3)으로 정제하여 2-클로로-1-(5,6-디히드로-4H-피롤로[1,2-b]피라졸-3-일)에타논(160 mg, 0.867 mmol, 46.31% 수율)을 백색 고형분으로서 수득하였다. MS (M+H)+ = 185.1; 순도 = 74.6% (220 nm). 유지 시간 = 0.278분. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 2.66 - 2.76 (m, 2 H) 3.11 - 3.20 (m, 2 H) 4.17 - 4.25 (m, 2 H) 4.37 - 4.41 (m, 2 H) 7.93 - 8.00 (m, 1 H).
단계 3: 아세톤(5 mL) 중 2-클로로-1-(5,6-디히드로-4H-피롤로[1,2-b]피라졸-3-일)에타논(1.00 당량, 160 mg, 0.867 mmol)의 용액에 N-(2-히드록시에틸)-4-메틸-벤젠설폰아미드(1.20 당량, 224 mg, 1.04 mmol), K2CO3 (3.00 당량, 359 mg, 2.60 mmol) 및 KI(1.00 당량, 144 mg, 0.867 mmol)를 첨가하고 15℃에서 16시간 동안 교반하였다. LCMS는 원료가 완전히 소모되었음을 나타냈고 주요 피크는 목적하는 MS (M+H)+ = 364.1. 유지 시간 = 0.795분. 반응물을 물(20 mL)에 붓고, 에틸 아세테이트(10 mL * 2)로 추출하고, 유기물을 10 mL 포화 염수 용액으로 세척하였다. 그런 다음, 유기물을 분리하고, 농축 건조 전에 건조시켰다(Na2SO4). 그런 다음, 미정제물을 실리카 겔 컬럼(PE/EA = 1/0 내지 1/1)으로 정제하여 N-[2-(5,6-디히드로-4H-피롤로[1,2-b]피라졸-3-일)-2-옥소-에틸]-N-(2-히드록시에틸)-4-메틸-벤젠설폰아미드(150 mg, 0.413 mmol, 47.62% 수율)를 백색 고형분으로서 수득하였다. MS (M+H)+ = 364.1; 순도 = 99.759% (220 nm). 유지 시간 = 0.795분.1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 2.44 (s, 2 H) 2.41 - 2.41 (m, 1 H) 2.64 - 2.77 (m, 2 H) 3.16 (br t, J=7.38 Hz, 2 H) 3.37 (br d, J=3.25 Hz, 2 H) 3.58 - 3.69 (m, 3 H) 4.13 - 4.26 (m, 2 H) 4.41 - 4.50 (m, 2 H) 7.30 - 7.35 (m, 2 H) 7.73 - 7.79 (m, 2 H) 7.93 - 7.97 (m, 1 H).
단계 4: DCM(5 mL) 중 N-[2-(5,6-디히드로-4H-피롤로[1,2-b]피라졸-3-일)-2-옥소-에틸]-N-(2-히드록시에틸)-4-메틸-벤젠설폰아미드(1.00 당량, 150 mg, 0.413 mmol)의 용액에 TES (5.00 당량, 473 mg, 2.06 mmol) 및 TMSOTf (5.00 당량, 0.37 mL, 2.06 mmol)를 0℃에서 첨가한 다음 15℃에서 16시간 동안 교반하였다. LCMS는 원료가 소모되었음을 나타냈고, 주요 피크는 목적하는 MS(M+H)+ = 348.1을 나타냈다. 유지 시간 = 0.866분. 반응물을 물(20 mL)에 붓고, DCM(10 mL * 2)으로 추출한 다음, 유기물을 10 mL 포화 염수 용액으로 세척하였다. 그런 다음, 유기물을 분리하고, 농축 건조 전에 건조시켰다(Na2SO4). 그런 다음, 미정제물을 실리카 겔 컬럼(PE/EA = 1/1, Rf = 0.5)으로 정제하여 2-(5,6-디히드로-4H-피롤로[1,2-b]피라졸-3-일)-4-(p-톨일설포닐)모르폴린(95 mg, 0.273 mmol, 66.25% 수율)을 백색 고형분으로서 수득하였다. MS (M+H)+ = 348.1; 순도 = 100% (220 nm). 유지 시간 = 0.866분. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 2.03 - 2.08 (m, 1 H) 2.37 - 2.43 (m, 1 H) 2.45 - 2.47 (m, 3 H) 2.48 - 2.55 (m, 1 H) 2.55 - 2.63 (m, 2 H) 2.77 - 2.93 (m, 2 H) 3.50 - 3.59 (m, 1 H) 3.62 - 3.71 (m, 1 H) 3.73 - 3.85 (m, 1 H) 3.93 - 4.02 (m, 1 H) 4.06 - 4.17 (m, 3 H) 4.51 - 4.59 (m, 1 H) 7.33 - 7.39 (m, 2 H) 7.40 - 7.44 (m, 1 H) 7.62 - 7.68 (m, 2 H).
단계 5: 메탄올(5 mL) 중 2-(5,6-디히드로-4H-피롤로[1,2-b]피라졸-3-일)-4-(p-톨일설포닐)모르폴린(1.00 당량, 95 mg, 0.273 mmol)의 용액에 Mg 분말(12.2 당량, 80 mg, 3.33 mmol) 및 Mg 칩(12.2 당량, 80 mg, 3.33 mmol)을 25℃에서 첨가한 다음, 80℃에서 16시간 동안 교반하였다. LCMS는 17%의 원료가 남아 있음을 나타냈고, 주요 피크는 목적하는 MS (M+H)+ = 194.1을 나타냈다. 반응물을 20℃로 냉각시키고, Mg 칩(12.2당량, 80 mg, 3.33 mmol)을 용액에 첨가하고, 80℃에서 16시간 동안 교반하였다. LCMS는 주요 피크가 91.8%의 목적하는 MS(M+H)+ = 194.1을 나타냈다. 반응 용액을 여과하고, 여액을 진공에서 농축시켜 2-(5,6-디히드로-4H-피롤로[1,2-b]피라졸-3-일)모르폴린(100 mg, 0.259 mmol, 94.62% 수율)을 백색 고형분으로서 수득하였다. MS (M+H)+ = 194.1; 순도 = 91.8% (220 nm). 유지 시간 = 0.275분.
단계 6: 건조 DMSO(1 mL) 및 DIEA(3.00당량, 126 mg, 0.978 mmol) 중 2-클로로-4-(2,4-디플루오로페닐)-6,7-디메틸-프테리딘(1.00 당량, 100 mg, 0.326 mmol) 및 2-(5,6-디히드로-4H-피롤로[1,2-b]피라졸-3-일)모르폴린(1.50 당량, 95 mg, 0.489 mmol) 의 용액에 첨가한 다음, 100℃에서 20분 동안 교반하였다. LCMS는 원료가 완전히 소모되었음을 나타냈고, 주요 피크는 목적하는 MS(M+H)+ = 464.2, 순도 = 54.7%(220 nm)를 나타냈다. 유지 시간 = 0.915분. 혼합물을 물(10 mL)에 붓고, 에틸 아세테이트(5 mL * 2)로 추출하고, 유기물을 5 mL 포화 염수 용액으로 세척하였다. 그런 다음, 유기물을 분리하고, 농축 건조 전에 건조시켰다(Na2SO4). 그런 다음, 미정제물을 분취-HPLC(Unisil 3-100 C18 Ultra 150 * 50 mm * 3 um , 물( FA)-ACN)로 정제하고 동결건조시켜 4-[4-(2,4-디플루오로페닐)-6,7-디메틸-프테리딘-2-일]-2-(5,6-디히드로-4H-피롤로[1,2-b]피라졸-3-일)모르폴린(25 mg, 0.0547 mmol, 16.79% 수율)을 황색 고형분으로서 수득하였다(라세메이트): MS (M+H)+ = 464.1; 순도 = 100% (220 nm). 유지 시간 = 0.922분. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 2.59 - 2.68 (m, 5 H) 2.73 (s, 3 H) 2.92 - 3.06 (m, 2 H) 3.27 - 3.43 (m, 2 H) 3.82 (td, J=11.54, 2.69 Hz, 1 H) 4.03 - 4.22 (m, 3 H) 4.56 (dd, J=10.44, 2.69 Hz, 1 H) 4.88 (br d, J=13.51 Hz, 1 H) 5.03 (br d, J=11.13 Hz, 1 H) 6.93 - 7.11 (m, 2 H) 7.58 (s, 1 H) 7.67 - 7.80 (m, 1 H).
단계 7: 단계 6의 생성물 혼합물을 SFC(DAICEL CHIRALCEL OJ (250 mm * 30 mm, 10 um) MeOH) 중 0.1% NH3H2O)로 정제하여 (2R)-4-[4-(2,4-디플루오로페닐)-6,7-디메틸-프테리딘-2-일]-2-(5,6-디히드로-4H-피롤로[1,2-b]피라졸-3-일)모르폴린(11.21 mg, 0.0233 mmol, 46% 수율)을 황색 고형분으로서 수득하고, (2S)-4-[4-(2,4-디플루오로페닐)-6,7-디메틸-프테리딘-2-일]-2-(5,6-디히드로-4H-피롤로[1,2-b]피라졸-3-일)모르폴린(10.52 mg, 0.0221 mmol, 43.90% 수율)을 황색 고형분으로서 수득하였다. MS (M+H)+ = 464.1; 순도 = 97.197% (220 nm). 유지 시간 = 0.914분. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 2.57 - 2.66 (m, 5 H) 2.70 - 2.74 (m, 3 H) 2.92 - 3.02 (m, 2 H) 3.24 - 3.39 (m, 2 H) 3.80 (td, J=11.55, 2.69 Hz, 1 H) 4.04 - 4.17 (m, 3 H) 4.54 (dd, J=10.39, 2.69 Hz, 1 H) 4.86 (br d, J=13.33 Hz, 1 H) 5.01 (br d, J=12.84 Hz, 1 H) 6.92 - 7.09 (m, 2 H) 7.53 - 7.58 (m, 1 H) 7.66 - 7.77 (m, 1 H). MS (M+H)+ = 464.2; 순도 = 96.447% (220 nm). 유지 시간 = 0.919분. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 2.57 - 2.66 (m, 5 H) 2.69 (br s, 3 H) 2.91 - 3.01 (m, 2 H) 3.23 - 3.41 (m, 2 H) 3.80 (td, J=11.43, 2.08 Hz, 1 H) 4.03 - 4.19 (m, 3 H) 4.54 (dd, J=10.21, 2.26 Hz, 1 H) 4.74 - 4.90 (m, 1 H) 4.92 - 5.09 (m, 1 H) 6.91 - 7.11 (m, 2 H) 7.45 - 7.60 (m, 1 H) 7.65 - 7.79 (m, 1 H).
화합물 I-1538의 합성
단계 1: THF(3 mL) 중 1-브로모-2,5-디플루오로-4-(트리플루오로메틸)벤젠(1.00 당량, 108 mg, 0.414 mmol)의 용액에 N2로 3회 퍼징하고, iPrMgCl
Figure pct00888
LiCl(THF 중의 1.3 M)(1.10 당량, 0.35 mL, 0.455 mmol)을 25℃에서 서서히 첨가하고 1시간 동안 교반한 다음, 반응 혼합물을 -78℃로 냉각시키고 염화 아연(THF 중 0.5M) (1.21 당량, 1.0 mL, 0.501 mmol)을 적가하였다. 반응 혼합물이 25℃가 되도록 하고 2시간 동안 교반하였다. 반응 용액을 다음 단계에 직접 사용하였다.
단계 2: N2 분위기 하 밀봉된 병에 클로로-[2,5-디플루오로-4-(트리플루오로메틸)페닐]아연(1.60 당량, 197 mg, 0.698 mmol) 및 PdCl2(Amphos)(0.0500 당량, 15 mg, 0.0218 mmol) 및 THF(2mL)를 채우고, N2로 3회 퍼징한 다음, 0℃로 냉각시키고, 2,4-디클로로-6,7-디메틸-프테리딘(1.00 당량, 100 mg, 0.437 mmol)을 반응 용액에 0℃에서 적가한 다음, 25℃로 가온하고 1시간 동안 교반하였다. LCMS는 반응물이 소모되었고 목적하는 질량의 25%가 검출되었음을 나타냈고, 반응 용액을 H2O에 붓고, EtOAc로 추출하고, 진공에서 건조시켜 잔류물을 수득한 다음, 이를 분취-HPLC(FA)로 정제하고, 동결건조시켜 2-클로로-4-[2,5-디플루오로-4-(트리플루오로메틸)페닐]-6,7-디메틸-프테리딘(10 mg,0.0267 mmol, 6.11% 수율)을 황색 고형분으로서 수득하였다. [M+H]+ = 375.1. 유지 시간 = 0.902분.
단계 3: DMSO(1 mL) 중 2-클로로-4-[2,5-디플루오로-4-(트리플루오로메틸)페닐]-6,7-디메틸-프테리딘(1.00 당량, 10 mg, 0.0267 mmol) 및 (2S,6R)-2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)-6-메틸-모르폴린(1.00 당량, 5.5 mg, 0.0267 mmol)의 용액에 DIEA(5.00 당량, 17 mg, 0.133 mmol)를 첨가한 다음, 혼합물을 100℃에서 1시간 동안 교반하였다. LCMS는 반응물이 소모되었음을 나타냈고 목적하는 질량의 86%가 검출되었다. 반응 용액을 분취-HPLC(FA)로 정제하고 동결건조시켜 (2S,6R)-2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)-4-[4-[2,5-디플루오로-4-(트리플루오로메틸)페닐]-6,7-디메틸-프테리딘-2-일]-6-메틸-모르폴린(7.4 mg,0.0135 mmol, 50.62% 수율)을 황색 고형분으로서 수득하였다. [M+H]+ = 546.2. 유지 시간 = 1.037분. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 7.58 - 7.52 (m, 3H), 7.48 (dd, J = 5.5, 8.6 Hz, 1H), 5.16 - 4.79 (m, 2H), 4.61 (br d, J = 10.8 Hz, 1H), 3.90 - 3.76 (m, 1H), 3.58 (td, J = 3.6, 7.2 Hz, 1H), 3.09 (dd, J = 11.1, 13.4 Hz, 1H), 2.86 (dd, J = 10.8, 13.1 Hz, 1H), 2.73 (s, 3H), 2.60 (s, 3H), 1.34 (d, J = 6.2 Hz, 3H), 1.15 - 1.08 (m, 2H), 1.01 (s, 2H).
I-1552의 합성(I-1562에 대한 동일한 일반 방법)
테플론-코팅된 자기 교반 막대가 구비된 유리 바이알에 7-((2R)-2-(1-시클로프로필-1H-피라졸-4-일)테트라히드로-2H-피란-4-일)-5-(2,4-디플루오로페닐)-2-메틸피리도[3,4-b]피라진(방법 37을 통해 제조)(1.0 당량, 90 mg, 0.20 mmol), 비스(디플루오로메틸설피닐옥시)아연(3.0 당량, 178 mg, 0.60 mmol), DCM(1.0 mL) 및 물(0.2 mL)을 채웠다. 바이알을 0℃의 얼음조에서 교반하면서 냉각시켰다. 트리플루오로아세트산(1.0 당량, 15.5 μL, 0.20 mmol)에 이어서 터트-부틸 히드로퍼옥시드(H2O 중 70% 용액)(5.0 당량, 0.14 mL, 0.50 mmol)를 적가하였다. 5분 후, 얼음조를 제거하고, 반응 혼합물을 22℃에서 36시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 DCM으로 희석하고 포화 NaHCO3 (수성)으로 세척하였다. 유기층을 Na2SO4로 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 증발 건조시켰다. 미정제 잔류 물질을 DCM 중 0% 내지 10% MeOH의 용리 구배를 사용하여 실리카 겔 플래쉬 크로마토그래피(Teledyne RediSep® GOLD 컬럼, 24 g SiO2)로 정제하여 44 mg의 미정제 생성물을 수득하였다. 생성물을 pH 3.8(40-60%)의 10mM 포름산암모늄 수용액 중 MeCN의 용리 구배를 사용하는 분취 HPLC(Gemini® 5 um NX-C18 110 Å, 100 x 30 mm 컬럼)로 추가로 정제하여 7-((2R,4S)-2-(1-시클로프로필-1H-피라졸-4-일)테트라히드로-2H-피란-4-일)-3-(디플루오로메틸)-5-(2,4-디플루오로페닐)-2-메틸피리도[3,4-b]피라진(14 mg, 0.028 mmol, 14 % 수율)을 황백색 고형분으로서 수득하였다. LC-MS(ESI+): Tr = 1.72분; [M+H]+ 498.1 (obs). 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz): δH 7.96 (1H, s), 7.73-7.78 (2H, m), 7.40-7.46 (2H, m), 7.11-7.38 (2H, m), 4.50 (1H, d, J = 11.1 Hz), 4.10 (1H, d, J = 11.3 Hz), 3.61-3.72 (2H, m), 3.37-3.40 (1H, m), 2.86 (3H, s), 2.23 (1H, d, J = 13.0 Hz), 1.88-1.99 (3H, m), 0.90-0.99 (4H, m).
I-1557의 합성
테플론-코팅된 자기 교반 막대가 구비된 화염 건조 유리 바이알에 7-((2R)-2-(1-시클로프로필-1H-피라졸-4-일)테트라히드로-2H-피란-4-일)-5-(2,4-디플루오로페닐)-2-메틸피리도[3,4-b]피라진(방법 37을 통해 제조)(1.0 당량, 118 mg, 0.26 mmol), 프로피온산 2 (10 당량, 0.20 mL, 2.64 mmol), 암모늄 퍼설페이트(2.0 당량, 120 mg, 0.53 mmol), Ir[dF(CF3)ppy]2(dtbbpy)PF6 (0.02 당량, 5.9 mg, 0.005 mmol) 및 무수 DMSO(1.5 mL)를 채웠다. 바이알을 밀봉하고 Ar로 5분 동안 탈기하였다. 반응 혼합물을 Penn PhD 광반응기(25% 램프 강도)에서 청색 LED(450 nm)로 22℃에서 16시간 동안 교반하면서 조사하였다. 미정제 반응 혼합물을 0.1% 포름산이 포함된 물 중 10% 내지 100% MeCN의 용리 구배를 사용하여 역상 플래쉬 크로마토그래피(Biotage® C18 듀오 컬럼, 30g)로 직접 정제하여 66 mg의 미정제 생성물을 갈색 고형분으로서 수득하였다. 생성물을 pH 3.8(45-65%)의 10mM 포름산암모늄 수용액 중 MeCN의 용리 구배를 사용하는 분취 HPLC(Gemini® 5 um NX-C18 110 Å, 100 x 30 mm 컬럼)로 추가로 정제하여 7-((2R,4S)-2-(1-시클로프로필-1H-피라졸-4-일)테트라히드로-2H-피란-4-일)-5-(2,4-디플루오로페닐)-3-에틸-2-메틸피리도[3,4-b]피라진 (5.7 mg, 0.012 mmol, 4.5 % 수율)을 회백색 고형분으로서 수득하였다. LC-MS(ESI+): Tr = 1.74분; [M+H]+ 476.2 (obs). 1H NMR (DMSO-d6, 400 MHz): δH 7.83 (1H, s), 7.70-7.76 (2H, m), 7.36-7.42 (2H, m), 7.24-7.28 (1H, m), 4.49 (1H, dd, J = 11.2, 2.0 Hz), 4.09 (1H, dd, J = 11.2, 3.9 Hz), 3.62-3.72 (2H, m), 3.32 (2H, dd, J = 11.2, 11.2 Hz), 2.98 (2H, q, J = 7.3 Hz), 2.74 (3H, s), 2.22 (1H, d, J = 13.0 Hz), 1.86-1.98 (3H, m), 1.19 (3H, t, J = 7.3 Hz), 0.90-1.02 (4H, m).
I-1567의 합성
단계 1: THF(30 mL) 중 CuBr2 (2.95 g, 13.25 mmol, 1.5 당량)의 용액에 질소 하에 실온에서 t-BuONO(1.37 g, 13.25 mmol, 1.5 당량)를 첨가하였다. 70℃에서 10분 동안 교반한 후, 용액을 실온으로 냉각시키고, THF(10 mL) 중 메틸 3-아미노-5,6-디메틸피라진-2-카르복실레이트(1.60 g, 8.83 mmol, 1.0 당량)의 용액을 적가하였다. 그런 다음, 혼합물을 70℃에서 2시간 동안 교반하였다. LCMS는 출발 물질이 완전히 소모되었고 60%의 목적하는 화합물이 검출되었음을 나타냈다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시키고, 물로 급냉시키고, 에틸 아세테이트(30 mL × 3)로 추출하였다. 유기상을 Na2SO4로 건조시키고, 감압 하에 농축시켰다. 미정제 생성물을 컬럼 크로마토그래피(SiO2, 석유 에테르: 에틸 아세테이트 = 0% 내지 20%)로 정제하여 생성물 메틸 3-브로모-5,6-디메틸피라진-2-카르복실레이트(879 mg, 3.59 mmol, 40% 수율)를 황색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 3.91 (s, 3H), 2.54 (s, 3H), 2.49 (s, 3H).
단계 2: Pd2(dba)3 (176 mg, 0.3 mmol, 0.1 당량), PCy3 (172 mg, 0.62 mmol, 0.2 당량), Cs2CO3 (3.98 g, 12.2 mmol, 3.0 당량) 및 메틸 3-브로모-5,6-디메틸-피라진-2-카르복실레이트(750 mg, 3.06 mmol, 1.0 당량)의 혼합물을 질소 하에 플라스크에서 제조하였다. 이어서, 1,4-디옥산(20 mL) 및 2-[(E)-2 에톡시비닐]-4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란(909 mg, 4.59 mmol, 1.5 당량)을 첨가하고 혼합물을 100℃에서 5시간 동안 교반하였다. LCMS는 출발 물질이 완전히 소모되었고 80% 목적하는 화합물이 검출되었음을 나타냈다. 그런 다음, 현탁액을 실온으로 냉각시키고, 셀라이트 플러그를 통해 여과하고, 물로 세척하고, EtOAc로 추출하였다. 유기상을 Na2SO4로 건조시키고, 감압 하에 농축시켰다. 미정제 생성물을 컬럼 크로마토그래피(실리카 겔, EtOAc/PE = 1:1)로 정제하여 생성물 메틸 (E)-3-(2-에톡시비닐)-5,6-디메틸피라진-2-카르복실레이트(520 mg, 2.20 mmol, 72% 수율)를 황색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 7.74 (d, J = 6.4 Hz, 1H), 6.52 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 4.00 (q, J = 8.13 Hz, 2H), 3.85 (s, 3H), 2.49 (s, 3H), 2.44 (s, 3H), 1.28 (t, J = 7 Hz, 3H).
단계 3: THF(15 mL) 및 물(5 mL) 중 메틸 (E)-3-(2-에톡시비닐)-5,6-디메틸피라진-2-카르복실레이트(520 mg, 2.20 mmol, 1.0 당량)의 용액에 LiOH(102 mg, 4.40 mmol, 2.0 당량)를 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 3시간 동안 교반하였다. LCMS는 출발 물질이 완전히 소모되었고, 80%의 목적하는 화합물이 검출되었음을 나타냈다. 생성된 용액을 HCl로 pH 5로 처리하고 동결건조기로 건조시켜 생성물 (E)-3-(2-에톡시비닐)-5,6-디메틸피라진-2-카르복시산을 수득하였다. 미정제 생성물을 추가 정제 없이 다음 단계에서 사용하였다. LCMS: Rt: 1.335분, m/z: [M+H]+ = 223.1. 254 nm에서 80% 순도.
단계 4: DMF(20 mL) 중 3-[(E)-2-에톡시비닐]-5,6-디메틸-피라진-2-카르복실산(333 mg, 1.5 mmol, 1.0 당량), 2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)테트라하이드로피란-4-아민(310 mg, 1.5 mmol, 1.0 당량) 및 HATU(856 mg, 2.25 mmol, 1.5 당량)의 용액을 질소 하에 플라스크에서 제조하였다. 그런 다음, DIEA(582 mg, 4.5 mmol, 3.0당량)를 첨가하고, 용액을 0℃에서 1시간 동안 교반하였다. LCMS는 출발 물질이 소모되었고 목적하는 화합물이 검출되었음을 나타냈다. 반응물을 물로 급냉시키고 EtOAc로 추출하였다. 유기상을 염수로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 감압 하에 농축시켰다. 미정제 생성물을 컬럼 크로마토그래피(실리카, 석유 에테르/에틸 아세테이트 = 1:2)로 정제하여 목적하는 생성물 N-[(2R,4S)-2-(1-시클로프로필-1H-피라졸-4-일)테트라히드로-2H-피란-4-일]-3-[(E)-2-에톡시비닐]-5,6-디메틸피라진-2-카르복사미드(480 mg, 1.17 mmol, 78% 수율)를 황색 오일로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 8.50 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.72-7.66 (m, 2H), 7.34 (s, 1H), 6.88 (d, J = 12.4 Hz, 1H), 4.38 (d, J = 10.4 Hz, 1H), 4.15-4.04 (m, 1H), 3.99-3.93 (m, 2H), 3.68-3.61 (m, 1H), 3.56 (t, J = 11.4 Hz, 1H), 2.56 (d, J = 12.4 Hz, 1H), 2.47 (s, 3H), 2.47 (s, 3H), 2.05 (d, J = 15.2 Hz, 1H), 1.78 (d, J = 11.6 Hz, 1H), 1.67-1.58 (m, 2H), 1.29-1.24 (m, 3H), 0.99-0.88 (m, 4H).
단계 5: TFA(2.0 mL) 중 N -[(2R,4S)-2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)테트라하이드로피란-4-일]-3-[(E)-2-에톡시비닐]-5,6-디메틸-피라진-2-카르복사미드(480 mg, 1.17 mmol, 1.0당량)의 용액을 질소 하에 제조하였다. 그런 다음 반응물을 실온에서 3시간 동안 교반하였다. LCMS는 출발 물질이 완전히 소모되었고 목적하는 화합물이 검출되었음을 나타냈다. 반응물을 물로 급냉시키고 EtOAc로 추출하였다. 유기상을 Na2SO4로 건조시키고, 감압 하에 농축시켰다. 미정제 생성물을 컬럼 크로마토그래피(실리카 겔, DCM/MeOH = 10:1)로 정제하여 6-[(2R,4S)-2-(1-시클로프로필-1H-피라졸-4-일)테트라히드로-2H-피란-4-일]-2,3-디메틸피리도[3,4-b]피라진-5(6H)-온을 갈색 고형분으로서 수득하였다(262 mg, 0.72 mmol, 61% 수율). 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.86 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 7.74 (s, 1H), 7.40 (s, 1H), 6.66 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 5.22-5.12 (m, 1H), 4.54-4.51 (m, 1H), 4.09-4.06 (m, 1H), 3.74-3.65 (m, 2H), 2.63 (s, 6H), 2.06-2.01 (m, 3H), 1.77 (d, J = 9.6 Hz, 1H), 0.98-0.90 (m, 4H).
단계 6: MeCN(10 mL) 중 6-[(2R,4S)-2-(1-시클로프로필-1H-피라졸-4-일)테트라히드로-2H-피란-4-일]-2,3-디메틸피리도[3,4-b]피라진-5(6H)-온(240 mg, 0.66 mmol, 1.0 당량)의 용액에 NBS(129 mg, 0.72 mmol, 1.1당량)를 질소 하에 첨가하였다. 용액을 0℃에서 1시간 동안 교반하였다. LCMS는 출발 물질이 소모되었고 목적하는 생성물의 50%가 검출되었음을 나타냈다. 반응물을 물로 급냉시키고 EtOAc로 추출하였다. 유기상을 Na2SO4로 건조시키고, 감압 하에 농축시켰다. 미정제 생성물을 컬럼 크로마토그래피(실리카 겔, EtOAc/Et3N = 20:1)로 정제하여 8-브로모-6-[(2R,4S)-2-(1-시클로프로필-1H-피라졸-4-일)테트라히드로-2H-피란-4-일]-2,3-디메틸피리도[3,4-b]피라진-5(6H)-온(57 mg, 0.13 mmol, 20% 수율)을 백색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 8.22 (s, 1H), 7.75 (s, 1H), 7.41 (s, 1H), 5.20-5.12 (m, 1H), 4.52 (dd, J = 1.6, 10.8 Hz, 1H), 4.08-4.05 (m, 1H), 3.71-3.63 (m, 2H), 2.69 (s, 3H), 2.67 (s, 3H), 2.17 (q, J = 11.9 Hz, 1H), 2.03-2.01 (m, 1H), 1.78 (d, J = 12.4 Hz, 1H), 1.18 (t, J = 7.0 Hz, 1H), 1.01-0.91 (m, 4H).
단계 7: 8-브로모-6-[(2R,4S)-2-(1-시클로프로필-1H-피라졸-4-일)테트라히드로-2H-피란-4-일]-2,3-디메틸피리도[3,4-b]피라진-5(6H)-온 (50 mg, 0.11 mmol, 1.0 당량), [2-플루오로-4-(트리플루오로메틸)페닐]보론산(47 mg, 0.23 mmol, 2.0 당량), Pd(dppf)Cl2 (8 mg, 0.01 mmol, 0.1 당량) 및 Cs2CO3 (110 mg, 0.34 mmol, 3.0 당량)의 혼합물을 질소 하에 플라스크에서 제조한 다음, 1,4-디옥산을 첨가하였다. 용액을 90℃에서 3시간 동안 교반하였다. LCMS는 출발 물질이 소모되었고 목적하는 생성물이 검출되었음을 나타냈다. 현탁액을 실리카 겔의 플러그를 통해 여과하고 감압 하에 농축시켰다. 미정제 생성물을 컬럼 크로마토그래피(실리카 겔, EtOAc/Et3N = 20:1)로 정제하여 생성물 6-[(2R,4S)-2-(1-시클로프로필-1H-피라졸-4-일)테트라히드로-2H-피란-4-일]-8-[2-플루오로-4-(트리플루오로메틸)페닐]-2,3-디메틸피리도[3,4-b]피라진-5(6H)-온(22 mg, 0.04 mmol, 37% 수율)을 갈색 고형분으로서 수득하였다. LC-MS：Rt: 1.37분, m/z: 528.2 [M+H]+. 254nm에서 99% 순도. 1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 8.03 (s, 1H), 7.79-7.75 (m, 2H), 7.73 (s, 1H), 7.69 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.40 (s, 1H), 5.29-5.22 (m, 1H), 4.55 (dd, J = 1.2, 10.8 Hz, 1H), 3.08 (dd, J = 3.2, 11.2 Hz, 1H), 3.72 (t, J = 11.0 Hz, 1H), 3.67-3.61 (m, 1H), 2.65 (s, 3H), 2.55 (s, 3H), 2.18 (q, 11.7 Hz, 1H), 2.07-2.01 (m, 2H), 1.83 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 0.98-0.86 (m, 4H). HPLC: Rt: 3.85분, 214 nm에서 98% 순도.
화합물 I-1572의 합성
단계 1: 1,4-디옥산(5 mL) 중 1-브로모-2,5-디플루오로-4-메틸-벤젠(1.00 당량, 160 mg, 0.773 mmol)의 용액에 4,4,5,5-테트라메틸-2-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)-1,3,2-디옥사보롤란(1.50 당량, 0.29 g, 1.16 mmol) 및 KOAc (2.50 당량, 190 mg, 1.93 mmol)를 첨가한 다음, Pd(dppf)Cl2·CH2Cl2(0.100 당량, 63 mg, 0.0773 mmol)를 N2 하에서 혼합물에 첨가하였다. 반응물을 100℃에서 10시간 동안 교반하였다. TLC(PE/EA=10/1, 출발 물질 Rf = 0.4, 새로운 스폿 Rf = 0.6)는 반응물이 완전히 소모되었고 하나의 새로운 스폿이 형성되었음을 나타냈다. 반응 혼합물을 여과하고, 필터 케이크를 DCM(5 mL)으로 세척하고, 용매를 합치고 증발시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 컬럼 크로마토그래피(PE/에틸 아세테이트 = 0 내지 10%, PE/EtOAc = 10/1, 목적하는 생성물 Rf = 0.6)로 정제하여 2-(2,5-디플루오로-4-메틸-페닐)-4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란(50 mg, 0.197 mmol, 25.46% 수율)을 백색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3, 298 K) 이동 (ppm) = 7.32 (dd, J = 4.7, 9.3 Hz, 1H), 6.86 (dd, J = 5.8, 8.9 Hz, 1H), 2.33 - 2.24 (m, 3H), 1.36 (s, 12H).
단계 2: N2 분위기 하에 밀봉된 병에 2,4-디클로로-6,7-디메틸-프테리딘(1.00 당량, 325 mg, 1.42 mmol), 2-(2,5-디플루오로-4-메틸-페닐)-4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란(1.00 당량, 360 mg, 1.42 mmol), Pd(dppf)Cl2(0.1000 당량, 104 mg, 0.142 mmol) 및 K3PO4(3.00 당량, 902 mg, 4.25 mmol)를 채우고 N2로 3회 퍼징한 다음, THF(10 mL) 및 H2O(5.00 당량, 128 mg, 7.08 mmol)를 한꺼번에 15℃에서 첨가한 다음, 혼합물을 15℃에서 1시간 및 30℃에서 10시간 동안 교반하였다. 반응 용액이 주황색에서 짙은 자주색으로 변하였고, LCMS는 원료가 완전히 소모되었음을 나타냈고, 주요 피크는 MS를 나타냈다(32%, Rt: 0.918분; [M+H]+ = 220 nm에서 321.0). 반응 혼합물을 증발시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 컬럼 크로마토그래피(PE/에틸 아세테이트 = 0 내지 20%, PE/EtOAc = 10/1, 목적하는 생성물 Rf = 0.3)로 정제하여 2-클로로-4-(2,5-디플루오로-4-메틸-페닐)-6,7-디메틸-프테리딘(120 mg, 0.374 mmol, 26.41% 수율)을 백색 고형분으로서 수득하고, 150 mg 미정제 생성물(40% 순도)을 백색 고형분으로서 수득하였다. [M+H]+=321.0; 순도 = 75% (220 nm). 유지 시간 = 0.941분.
단계 3: 1,4-디옥산(10 mL) 및 물(1 mL) 중 2-클로로-4-(2,4-디플루오로-5-메틸-페닐)-6,7-디메틸-프테리딘(1.00 당량, 120 mg, 0.374 mmol), 1-시클로프로필-4-[(6R)-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)-3,6-디히드로-2H-피란-6-일]피라졸(1.00 당량, 118 mg, 0.374 mmol) 및 K2CO3 (3.00 당량, 94 mg, 1.12 mmol)의 용액에 Pd(dppf)Cl2·DCM(0.120 당량, 33 mg, 0.0449 mmol)을 한꺼번에 첨가하였다. 그런 다음, 반응 혼합물을 N2 분위기 하 80℃에서 12시간 동안 교반하였다. LCMS는 출발 물질이 완전히 소모되었고 목적하는 생성물이 검출되었음을나타냈다(70%, Rt: 0.987분; [M+H]+ = 220 nm에서 475.1). 혼합물을 30 mL H2O에 붓고, EA(50 mL * 2)로 추출하고, 합쳐진 유기층을 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 분취-TLC (PE:EA = 1:2, Rf = 0.6)로 정제하여 2-[(6R)-6-(1-시클로프로필피라졸-4-일)-3,6-디히드로-2H-피란-4-일]-4-(2,4-디플루오로-5-메틸-페닐)-6,7-디메틸-프테리딘(100 mg,0.211 mmol, 56%수율)을 황색 고형분으로서 수득하였다. [M+H]+ = 475.2; 순도 = 95% (220 nm). 유지 시간 = 0.893분. 1H NMR (400 MHz, CDCl3, 298 K) Shift (ppm) = 7.67 (d, J = 1.7 Hz, 1H), 7.54 (s, 1H), 7.51 (s, 1H), 7.44 (dd, J = 5.6, 9.2 Hz, 1H), 7.08 (dd, J = 6.1, 9.7 Hz, 1H), 5.47 (br d, J = 2.6 Hz, 1H), 4.18 - 4.09 (m, 1H), 3.99 - 3.90 (m, 1H), 3.57 (tt, J = 3.6, 7.3 Hz, 1H), 3.05 - 2.91 (m, 2H), 2.85 (s, 3H), 2.74 (s, 3H), 2.39 (d, J = 1.1 Hz, 3H), 1.15 - 1.09 (m, 2H), 1.04 - 0.96 (m, 2H).
단계 4: 에탄올(1 mL) 중 2-[(6R)-6-(1-시클로프로필피라졸-4-일)-3, 6-디히드로-2H-피란-4-일]-4-(2,5-디플루오로-4-메틸-페닐)-6,7-디메틸-프테리딘(1.00 당량, 120 mg, 0.253 mmol)의 용액에 PtO2(1.00 당량, 57 mg, 0.253 mmol)를 N2 분위기 하에 첨가하였다. 혼합물을 H2(15 psi)로 3회 퍼징한 다음, 혼합물을 H2(15 psi) 분위기 하에 30℃에서 16시간 동안 교반하였다. LCMS는 출발 물질이 완전히 소모되었고 목적하는 생성물이 검출되었음을 나타냈다(97%, Rt: 0.798분; [M+H]+ = 220 nm에서 481.3). 현탁액을 셀라이트 또는 실리카 겔 패드를 통해 여과하고, 필터 케이크를 EtOH(5 mL×3)로 세척하였다. 합쳐진 여액을 농축 건조시켜 2-[(2R)-2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)테트라히드로피란-4-일]-4-(2,5-디플루오로-4-메틸-페닐)-6,7-디메틸-5,6,7,8-테트라히드로프테리딘(120 mg, 0.230 mmol, 90.84% 수율)을 황색 검(120 mg)으로서 수득하고, LCMS [M+H]+ = 481.3; 순도 = 92%(220 nm)로 확인하였다. 유지 시간 = 0.713분. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 7.49 - 7.43 (m, 2H), 7.21 (dd, J = 5.9, 9.4 Hz, 1H), 6.99 (dd, J = 6.0, 9.8 Hz, 1H), 4.44 (dd, J = 1.8, 11.3 Hz, 1H), 3.54 (tt, J = 3.8, 7.3 Hz, 2H), 2.97 (tt, J = 3.7, 11.9 Hz, 1H), 2.32 (d, J = 1.6 Hz, 3H), 2.28 - 2.19 (m, 1H), 2.20 - 2.08 (m, 2H), 2.03 - 1.84 (m, 4H), 1.21 (d, J = 6.5 Hz, 3H), 1.13 (d, J = 6.4 Hz, 3H), 1.10 - 1.07 (m, 2H), 0.99 - 0.95 (m, 2H).
단계 5: DCE(1 mL) 중 2-[(2R)-2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)테트라히드로피란-4-일]-4-(2,5-디플루오로-4-메틸-페닐)-6,7-디메틸-프테리딘(1.00 당량, 99 mg, 0.208 mmol)의 용액에 MnO2(20.0 당량, 362 mg, 4.16 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 30℃에서 48시간 동안 교반하였다. LCMS는 출발 물질이 완전히 소모되었고 목적하는 생성물이 검출되었음을 나타냈다(96%, Rt: 0.936분; [M+H]+ = 220 nm에서 477.2). 반응물을 여과하고, 여액을 진공에서 농축시켰다. 미정제 생성물을 SFC(0.1% NH3H2O IPA B: 40%-40%; 검출기, UV 254 nm. RT: 5.4 분))로 정제하였다. SFC 분리 후, 용리액을 농축시켜 유기 용매를 제거하였다. 잔류 수용액을 동결건조시켜 2-[(2R,4S)-2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)테트라히드로피란-4-일]-4-(2,5-디플루오로-4-메틸-페닐)-6,7-디메틸-프테리딘(42 mg, 0.0608 mmol, 29.23% 수율)을 백색 고형분으로서 수득하였다. 순도는 HPLC에서 254 nm 하에 81%, 215 nm 하에 69%였다. 생성물을 분취-TLC(PE/EA = 2/1, rf = 0.5)로 정제하여 2-[(2R,4S)-2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)테트라히드로피란-4-일]-4-(2,5-디플루오로-4-메틸-페닐)-6,7-디메틸-프테리딘(29 mg, 0.0609 mmol, 29.25% 수율)을 백색 고형분으로서 수득하였다. 100%, Rt: 0.956분; [M+H]+ = 220 nm에서 477.2) 순도, HPLC에서 215 nm 하에서 90% 및 254 nm 하에서 94%; 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 7.51 (s, 2H), 7.42 (dd, J = 5.6, 9.1 Hz, 1H), 7.08 (dd, J = 6.1, 9.4 Hz, 1H), 4.56 (dd, J = 1.9, 11.4 Hz, 1H), 4.27 (td, J = 3.1, 11.1 Hz, 1H), 3.89 - 3.77 (m, 1H), 3.62 - 3.48 (m, 2H), 2.85 (s, 3H), 2.74 (s, 3H), 2.45 (br d, J = 13.4 Hz, 1H), 2.40 (d, J = 1.6 Hz, 3H), 2.24 - 2.16 (m, 3H), 1.15 - 1.07 (m, 2H), 1.03 - 0.94 (m, 2H).
화합물 I-1577 및 I-1578의 합성
단계 1: THF(30 mL) 중 1-브로모-2-플루오로-4-(트리플루오로메틸)벤젠(1.00 당량, 3000 mg, 12.3 mmol)의 용액에 iPrMgCl·LiCl(1.11 당량, 11 mL, 13.7 mmol)을 N2 하에 0℃에서 첨가하였다. 혼합물을 15℃에서 1.5시간 동안 교반하였다. ZnCl2 (1.21 당량, 30 mL, 15.0 mmol)를 N2 하에 -78℃에서 첨가하고, 혼합물을 15℃에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 다음 단계에 직접 사용하였다.
단계 2: N2 분위기 하에 밀봉된 병에 2,4-디클로로-6,7-디메틸-프테리딘(1.00 당량, 300 mg, 1.31 mmol) 및 PdCl2(Amphos) (0.0500 당량, 46 mg, 0.0655 mmol) 및 THF(3 mL)를 채우고, N2로 3회 퍼징한 다음, 0℃로 냉각시키고, 클로로-[2-플루오로-4-(트리플루오로메틸)페닐]아연(1.20 당량, 415 mg, 1.57 mmol)을 0℃에서 반응 용액에 적가한 다음, 25℃로 가온하고 1시간 동안 교반하였다. 반응 용액이 주황색에서 짙은 자주색으로 변하였고, LCMS는 목적하는 생성물의 60%가 검출되었음을 나타냈다(MS: 357.1 [M+H]+, ESI pos , RT=0.948분). 반응 용액을 포화 NH4Cl 용액(100 mL)으로 급냉시킨 다음, EtOAc(500 mL)로 추출하고 감압 하에 증발시켜 잔류물을 수득한 다음, 이를 플래쉬 컬럼(PE:EA = 0 내지 40%, PE:EA = 3:1, Rf = 0.5)으로 정제하고 진공에서 건조시켜 2-클로로-4-[2-플루오로-4-(트리플루오로메틸)페닐]-6,7-디메틸-프테리딘(330 mg,0.712 mmol, 54.39% 수율)을 적색 고형분으로서 수득하였다. (M+H)+ = 357.2; 순도 = 77% (220 nm). 유지 시간 = 0.958분. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 7.89 (t, J = 7.3 Hz, 1H), 7.64 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.53 (d, J = 9.8 Hz, 1H), 2.87 (s, 4H), 2.75 (s, 3H).
단계 3: 1,4-디옥산(5 mL) 및 물(0.5000 mL) 중 2-클로로-4-[2-플루오로-4-(트리플루오로메틸)페닐]-6,7-디메틸-프테리딘(1.00 당량, 280 mg, 0.785 mmol) K2CO3 (3.00 당량, 325 mg, 2.35 mmol) 및 Pd(dppf)CL2·CH2Cl2 (0.1000 당량, 64 mg, 0.0785 mmol)의 용액에 1-(시클로프로필메틸)-4-[4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)-3,6-디히드로-2H-피란-6-일]피라졸(1.50 당량, 389 mg, 1.18 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 80℃에서 2시간 동안 교반하였다. LCMS는 출발 물질이 완전히 소모되었고 목적하는 생성물 질량(37%, MS: 525.0 [M+H]+, ESI pos)을 갖는 주요 피크가 있음을 나타냈다. 혼합물을 EA(100 mL)로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 감압 하에 농축시켜 미정제 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 여과하고, 여액을 분취-HPLC(유속: 25 mL/분; 구배: 7분에 걸쳐 38-68% 물(0.1%FA)-ACN; 컬럼: Unisil 3-100 C18 Ultra 150 * 25mm * 10um)로 정제하고, 동결건조시켜 4-[2-플루오로-4-(트리플루오로메틸)페닐]-6,7-디메틸-2-[rac-(6R)-6-[1-(시클로프로필메틸)피라졸-4-일]-3,6-디히드로-2H-피란-4-일]프테리딘(120 mg,0.229 mmol, 29.15% 수율)을 회색 고형분으로서 수득하였다. (M+H)+ = 525.0; 순도 = 94% (220 nm). 유지 시간 = 1.009분.1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 0.37 (q, J=5.09 Hz, 2 H) 0.60 - 0.69 (m, 2 H) 1.22 - 1.36 (m, 1 H) 2.74 (s, 3 H) 2.86 (s, 3 H) 3.97 (d, J=7.00 Hz, 2 H) 4.13 - 4.21 (m, 1 H) 5.51 (br d, J=2.50 Hz, 1 H) 7.50 - 7.59 (m, 3 H) 7.70 (d, J=1.88 Hz, 1 H) 7.89 (t, J=7.25 Hz, 1 H).
단계 4: 에탄올(4 mL) 중 2-[(6R)-6-[1-(시클로프로필메틸)피라졸-4-일]-3,6-디히드로-2H-피란-4-일]-4-[2-플루오로-4-(트리플루오로메틸)페닐]-6,7-디메틸-프테리딘(1.00 당량, 110 mg, 0.210 mmol)의 용액에 PtO2(0.434 당량, 21 mg, 0.0910 mmol)를 N2 하에 첨가하였다. 현탁액을 진공 하에 탈기하고 H2로 5회 퍼징하였다. 혼합물을 H2(15 psi) 하에 30℃에서 16시간 동안 교반하였다. LCMS는 출발 물질이 완전히 소모되었고 목적하는 생성물 질량(96%, MS: 531.2 [M+H]+, ESI pos)을 갖는 새로운 피크가 있음을 나타냈다. 혼합물을 셀라이트 패드를 통해 여과하고, 여액을 농축시켜 2-[(2R)-2-[1-(시클로프로필메틸) 피라졸-4-일] 테트라히드로피란-4-일]-4-[2-플루오로-4-(트리플루오로메틸) 페닐]-6, 7-디메틸-5, 6, 7, 8-테트라히드로프테리딘(120 mg, 0.208 mmol, 99.22% 수율)을 갈색 고형분으로서 수득하였다. [M+2+H]+, 531.2 ; 순도 = 92% (220 nm). 유지 시간 = 0.505분.1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 0.36 (q, J=5.09 Hz, 2 H) 0.60 - 0.66 (m, 2 H) 0.82 - 0.93 (m, 1 H) 1.14 (d, J=6.38 Hz, 3 H) 1.22 (d, J=6.75 Hz, 3 H) 1.86 - 2.04 (m, 4 H) 2.10 (s, 1 H) 2.15 - 2.23 (m, 1 H) 2.99 (tt, J=11.93, 3.71 Hz, 1 H) 3.47 (br s, 1 H) 3.73 (br d, J=7.00 Hz, 2 H) 3.94 (d, J=7.00 Hz, 2 H) 4.19 (br dd, J=11.26, 3.63 Hz, 1 H) 4.48 (dd, J=11.38, 1.75 Hz, 1 H) 5.37 (br s, 1 H) 7.42 - 7.58 (m, 4 H) 7.73 (t, J=7.38 Hz, 1 H).
단계 5: DCE(5 mL) 중 2-[(2R)-2-[1-(시클로프로필메틸) 피라졸-4-일] 테트라히드로피란-4-일]-4-[2-플루오로-4-(트리플루오로메틸) 페닐]-6, 7-디메틸-5, 6, 7, 8-테트라히드로프테리딘(1.00 당량, 120 mg, 0.226 mmol)의 용액에 MnO2(20.0 당량, 393 mg, 4.52 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 30℃에서 12시간 동안 교반하였다. LCMS는 목적하는 질량을 갖는 새로운 피크를 나타냈지만, 대부분의 출발 물질은 여전히 변하지 않았다(38%, MS: 527.2 [M+H]+, ESI pos). 반응물을 여과하고, MnO2(20.0 당량, 393 mg, 4.52 mmol)를 여액에 첨가하였다. 혼합물을 30℃에서 24시간 동안 교반하였다. LCMS는 출발 물질이 남아 있지 않고 목적하는 생성물 질량을 갖는 주요 피크가 존재함을 보여주었다(84%, MS: 527.2 [M+H]+, ESI pos). 반응물을 여과하고, 여액을 분취-HPLC(유속: 25 mL/분; 구배: 10분에 걸쳐 60-90% 물(0.1%FA)-ACN; 컬럼: YMC Triart C18 150 * 25mm * 5um)로 정제하고, 동결건조시켜 2-[(2R)-2-[1-(시클로프로필메틸)피라졸-4-일]테트라히드로피란-4-일]-4-[2-플루오로-4-(트리플루오로메틸)페닐]-6,7-디메틸-프테리딘(30 mg,0.0570 mmol, 25.20% 수율)을 백색 고형분으로서 수득하였다. [M+H]+ , 527.4 ; 순도 = 99.66% (220 nm). 유지 시간 = 0.984분. HPLC: 유지 시간 =2.464분, 220 nm에서 99.02% 순도. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 0.38 (q, J=4.96 Hz, 2 H) 0.61 - 0.69 (m, 2 H) 1.22 - 1.34 (m, 1 H) 2.17 - 2.33 (m, 3 H) 2.48 (br d, J=13.38 Hz, 1 H) 2.74 (s, 3 H) 2.87 (s, 3 H) 3.51 - 3.64 (m, 1 H) 3.80 - 3.88 (m, 1 H) 3.96 (d, J=7.00 Hz, 2 H) 4.26 - 4.33 (m, 1 H) 4.61 (dd, J=11.32, 1.81 Hz, 1 H) 7.53 (t, J=4.19 Hz, 2 H) 7.58 (s, 1 H) 7.64 (d, J=7.88 Hz, 1 H) 7.87 (t, J=7.19 Hz, 1 H).
단계 6: 단계 4의 생성물 혼합물을 SFC(DAICEL CHIRALPAK AD(250mm * 30mm,10um), 이동상: CO2의 경우 상 A, 및 MeOH(0.05%DEA)의 경우 상 B; 구배 용리: CO2 중 40% MeOH (0.05% DEA), 유속: 3mL/분; 검출기, PDA, 컬럼 온도: 35℃;배압: 100Bar)로 정제하여 2-[(2R,4S)-2-[1-(시클로프로필메틸)피라졸-4-일]테트라히드로피란-4-일]-4-[2-플루오로-4-(트리플루오로메틸)페닐]-6,7-디메틸-프테리딘(18 mg, 0.0328 mmol, 14.50% 수율)을 백색 고형분으로서 수득하고 2-[(2S,4R)-2-[1-(시클로프로필메틸)피라졸-4-일]테트라히드로피란-4-일]-4-[2-플루오로-4-(트리플루오로메틸)페닐]-6,7-디메틸-프테리딘(12 mg, 0.022 mmol, 9.71% 수율)을 백색 고형분으로서 수득하였다. LC-MS: Rt: 0.984분, m/z: 527.4 [M+H]+. 220 nm에서 99.85% 순도. HPLC: 유지 시간 =2.461분, 220 nm에서 96.13% 순도. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 0.33 - 0.42 (m, 2 H) 0.61 - 0.70 (m, 2 H) 1.25 - 1.30 (m, 1 H) 2.19 - 2.32 (m, 3 H) 2.43 - 2.53 (m, 1 H) 2.74 (s, 3 H) 2.87 (s, 3 H) 3.57 (ddd, J=15.79, 11.91, 3.81 Hz, 1 H) 3.78 - 3.88 (m, 1 H) 3.96 (d, J=7.13 Hz, 2 H) 4.24 - 4.33 (m, 1 H) 4.57 - 4.64 (m, 1 H) 7.53 (t, J=4.13 Hz, 2 H) 7.58 (s, 1 H) 7.63 (d, J=8.13 Hz, 1 H) 7.87 (t, J=7.19 Hz, 1 H). LC-MS: Rt: 0.984분, m/z: 527.4 [M+H]+. 220 nm에서 99.35% 순도. HPLC: 유지 시간 =2.467분, 220 nm에서 98.84% 순도. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 0.37 (q, J=4.92 Hz, 2 H) 0.61 - 0.69 (m, 2 H) 1.24 - 1.30 (m, 1 H) 2.16 - 2.33 (m, 3 H) 2.44 - 2.52 (m, 1 H) 2.74 (s, 3 H) 2.87 (s, 3 H) 3.51 - 3.63 (m, 1 H) 3.79 - 3.88 (m, 1 H) 3.96 (d, J=7.00 Hz, 2 H) 4.25 - 4.33 (m, 1 H) 4.60 (dd, J=11.38, 1.88 Hz, 1 H) 7.53 (t, J=4.13 Hz, 2 H) 7.58 (s, 1 H) 7.63 (d, J=8.00 Hz, 1 H) 7.87 (t, J=7.25 Hz, 1 H).
화합물 I-1582의 합성
단계 1: THF(0.5 mL) 중 요오드(0.050당량, 12 mg, 0.0474 mmol)를 N2 분위기 하에 건조 THF(4 mL) 중 Mg(1.27 당량, 29 mg, 1.20 mmol)의 현탁액에 첨가하고, 6-브로모-2,2-디플루오로-스피로[3.3]헵탄(1.00 당량, 200 mg, 0.948 mmol)을 25℃에서 첨가하고, 황색 용액이 무색 용액으로 변할 때까지 가열한 다음, 25℃에서 1시간 동안 교반하고, 유백색 현탁액을 형성하였다. ZnCl2(1.00 당량, 1.9 mL, 0.948 mmol)를 적가하고, 혼합물을 30분 동안 교반하였다. 백색 침전물이 형성되었다. 반응 혼합물을 주사기로 직접 사용하였다.
단계 2: N2 하에 밀봉된 병에 2,4-디클로로-6,7-디메틸-프테리딘(1.00 당량, 50 mg, 0.218 mmol) 및 PdCl2(Amphos) (0.0500 당량, 7.7 mg, 0.0109 mmol) 및 THF (3 mL) 분위기를 채우고, N2로 3회 퍼징하고, 클로로-(2,2-디플루오로스피로[3.3]헵탄-6-일)아연(4.51 당량, 228 mg, 0.985 mmol)을 25℃에서 반응 용액에 적가한 다음, 45℃로 가온하고 1시간 동안 교반하였다. 반응 용액이 황색에서 짙은 갈색으로 변하였고, LCMS는 47%의 SM이 남아 있고 42%의 목적하는 질량이 검출되었음을 나타냈고, 반응 용액을 H2O에 붓고, EtOAc로 추출하고, Na2SO4로 건조시키고 감압 하에 증발시켜 잔류물을 수득한 다음, 이를 플래쉬 컬럼(PE:EA=3:1, Rf=0.4)으로 정제하고 증발시켜 2-클로로-4-(2,2-디플루오로스피로[3.3]헵탄-6-일)-6,7-디메틸-프테리딘(55 mg,0.169 mmol, 77.59% 수율)을 황색 고형분으로서 수득하였다. LCMS (M+H)+ = 325.1; 유지 시간 = 0.871분. [M+ H]+= 325.1; 유지 시간 = 0.871분.
단계 3: 1,4-디옥산(2 mL) 및 물(0.4000 mL) 중 2-클로로-4-(2,2-디플루오로스피로[3.3]헵탄-6-일)-6,7-디메틸-프테리딘(1.00 당량, 55 mg, 0.169 mmol), 1-시클로프로필-4-[(6R)-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)-3,6-디히드로-2H-피란-6-일]피라졸(1.10 당량, 59 mg, 0.186 mmol) 및 K2CO3 (2.00 당량, 28 mg, 0.339 mmol)의 용액에, [1,1'-비스(디페닐포스피노)페로센]디클로로팔라듐(II)(0.0800 당량, 9.9 mg, 0.0135 mmol)을 첨가하고 N2로 3회 퍼징하고, 반응 용액을 100℃에서 2시간 동안 교반하였고, LCMS는 반응물이 소모되었음을 나타냈고 36%의 목적하는 질량이 검출되었다. 반응 용액을 H2O에 붓고, EtOAc로 추출하고, Na2SO4 로 건조시키고 감압 하에 증발시켜 잔류물을 수득한 다음, 이를 분취-TLC(순수 EA, Rf=0.4)로 정제하여 2-[(6R)-6-(1-시클로프로필피라졸-4-일)-3,6-디히드로-2H-피란-4-일]-4-(2,2-디플루오로스피로[3.3]헵탄-6-일)-6,7-디메틸-프테리딘(32 mg, 0.0669 mmol, 39.48% 수율)을 황색 고형분으로서 수득하였다. [M+ H]+= 479.2; 유지 시간 = 0.967분.
단계 4: 에탄올(3 mL) 중 2-[(6R)-6-(1-시클로프로필피라졸-4-일)-3,6-디히드로-2H-피란-4-일]-4-(2,2-디플루오로스피로[3.3]헵탄-6-일)-6,7-디메틸-프테리딘(1.00 당량, 32 mg, 0.0669 mmol)의 용액에 PtO2(1.00 당량, 15 mg, 0.0669 mmol)를 N2 분위기 하에 첨가하였다. 혼합물을 H2로 3회 퍼징한 다음, 혼합물을 H2 분위기(15 psi) 하에 25℃에서 2시간 동안 교반하였다. LCMS는 반응물이 소모되었음을 나타냈고 목적하는 질량의 100%가 검출되었고, 반응 용액을 셀룰로오스를 통해 여과하고 감압 하에 증발시켜 2-[(2R)-2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)테트라하이드로피란-4-일]-4-(2,2-디플루오로스피로[3.3]헵탄-6-일)-6,7-디메틸-5,6,7,8-테트라하이드로프테리딘(32 mg, 0.0660 mmol, 98.75% 수율)을 황색 검으로서 수득하였다. [M+ H]+ = 485.4; 유지 시간 = 0.723분.
단계 5: DCM(4 mL) 중 2-[(2R)-2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)테트라히드로피란-4-일]-4-(2,2-디플루오로스피로[3.3]헵탄-6-일)-6,7-디메틸-5,6,7,8-테트라히드로프테리딘(1.00 당량, 32 mg, 0.0660 mmol) 용액에 MnO2(15.0 당량, 86 mg, 0.991 mmol) 를 첨가하고 25℃에서 12시간 동안 교반하였다. LCMS는 반응물이 소모되었고 목적하는 질량의 100%가 검출되었음을 나타냈고, 반응 용액을 셀룰로오스를 통해 여과하고 감압 하에 증발시켜 잔류물을 수득한 다음, 이를 분취-HPLC(FA)로 정제하고 동결건조시켜 2-[(2R)-2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)테트라히드로피란-4-일]-4-(2,2-디플루오로스피로[3.3]헵탄-6-일)-6,7-디메틸-프테리딘(6.1 mg, 0.0127 mmol, 19.19% 수율)을 회백색 고형분으로서 수득하였다. [M+ H]+ = 481.2; 순도 = 100% (220 nm). 유지 시간 = 0.957분. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 7.51 (s, 2H), 4.75 (t, J = 8.4 Hz, 1H), 4.57 (dd, J = 1.8, 11.4 Hz, 1H), 4.31 - 4.23 (m, 1H), 3.87 - 3.76 (m, 1H), 3.61 - 3.54 (m, 1H), 3.50 - 3.41 (m, 1H), 2.79 (d, J = 18.1 Hz, 7H), 2.74 - 2.56 (m, 7H), 2.41 (br d, J = 13.3 Hz, 1H), 2.22 - 2.12 (m, 3H), 1.10 (br d, J = 2.7 Hz, 2H), 1.00 (dd, J = 2.1, 7.3 Hz, 2H), ee. 89%.
화합물 I-1585의 합성
단계 1: THF(4 mL) 중 1-브로모-2,4-디플루오로-5-(트리플루오로메틸)벤젠(1.00 당량, 400 mg, 1.53 mmol)의 용액에 iPrMgCl.LiCl(1.14 당량, 1.3 mL, 1.74 mmol)을 N2 하에 0℃에서 첨가하였다. 혼합물을 15℃에서 1.5시간 동안 교반하였다. LCMS는 출발 물질이 완전히 소모되었음을 보여주었다. ZnCl2(1.22 당량, 3.8 mL, 1.88 mmol)를 N2 하에 -78℃에서 첨가하고, 혼합물을 15℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 다음 단계(THF(9.1 mL) 중 (2,4-디플루오로-5-(트리플루오로메틸)페닐)아연(II) 염화물, 0.17 M)에 직접 사용하였다.
단계 2: N2 분위기 하 밀봉된 병에 2,4-디클로로-6,7-디메틸프테리딘(1.00 당량, 100 mg, 0.437 mmol) 및 PdCl2(Amphos)(0.0500 당량, 15 mg, 0.0218 mmol) 및 THF(2 mL)를 채우고 N2로 3회 퍼징하였다. 그런 다음, 0℃로 냉각시키고, (2,4-디플루오로-5-(트리플루오로메틸)페닐)아연(II) 클로라이드(1.50 당량, 3.9 mL, 0.655 mmol)을 0℃에서 반응 용액에 적가한 다음, 20℃로 가온하고 1시간 동안 교반하였다. 반응 용액이 주황색에서 짙은 자주색으로 변하였다. LCMS는 출발 물질이 남아 있음을 나타냈고 목적하는 생성물이 검출되었다(23%, Rt: 0.809분; [M+H]+ = 220 nm에서 375.2). 그런 다음, 클로로-[2,4-디플루오로-5-(트리플루오로메틸)페닐]아연(1.50 당량, 3.9 mL, 0.655 mmol)을 0℃에서 첨가하고, 혼합물을 20℃에서 12시간 동안 교반하였다. LCMS는 출발 물질이 남아 있음을 나타냈고 목적하는 생성물이 검출되었다(33%, Rt: 0.913분; [M+H]+ = 220 nm에서 375.0). 반응 용액을 포화 NH4Cl 용액(20 mL)으로 급냉시킨 다음, EtOAc(30 mL × 3)로 추출하고 감압 하에 증발시켜 잔류물을 수득한 다음, 역상 크로마토그래피(0.1% FA)로 정제하고 동결건조시켜 2-클로로-4-(2,4-디플루오로-5-(트리플루오로메틸)페닐)-6,7-디메틸프테리딘(110 mg, 0.261 mmol, 59.85% 수율)을 황색 고형분으로서 수득하고, LCMS [M+H]+ = 375.3; 순도 = 89%(220 nm)로 확인하였다. 유지 시간 = 0.811분. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ = 8.22 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 7.95 (t, J = 10.5 Hz, 1H), 2.81 (s, 3H), 2.70 - 2.66 (m, 3H).
단계 3: 1,4-디옥산(5 mL) 및 물(0.5 mL) 중 (R)-1-시클로프로필-4-(4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)-5,6-디히드로-2H-피란-2-일)-1H-피라졸(1.10 당량, 102 mg, 0.323 mmol), 2-클로로-4-(2,4-디플루오로-5-(트리플루오로메틸)페닐)-6,7-디메틸프테리딘(1.00 당량, 110 mg, 0.294 mmol) 및 K2CO3 (3.00 당량, 74 mg, 0.881 mmol)의 용액에 Pd(dppf)Cl2 (0.0909 당량, 20 mg, 0.0267 mmol)를 20℃에서 첨가하였다 혼합물을 100℃에서 12시간 동안 교반하였다. LCMS는 출발 물질이 완전히 소모되었고 목적하는 질량이 주요한 것으로 나타났다(39%, Rt: 0.801분; [M+H]+ = 220 nm에서 529.1). 혼합물을 감압 하에 농축시켜 미정제 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 실리카 겔을 상의 컬럼 크로마토그래피(PE/EtOAc = 1/0 내지 0/1; PE/EtOAc = 0/1, 목적하는 생성물 Rf = 254 nm에서 0.4)를 통해 정제하여 (R)-2-(6-(1-시클로프로필-1H-피라졸-4-일)-3,6-디히드로-2H-피란-4-일)-4-(2,4-디플루오로-5-(트리플루오로메틸)페닐)-6,7-디메틸프테리딘(90 mg,0.170 mmol, 58.01% 수율)을 주황색 고형분으로서 수득하고, LCMS [M+H]+ = 529.3; 순도 = 90%(220 nm)로 확인하였다. 유지 시간 = 0.989분. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 7.70 - 7.64 (m, 1H), 7.53 (d, J = 12.0 Hz, 2H), 7.15 (t, J = 9.6 Hz, 1H), 5.52 - 5.44 (m, 1H), 4.19 - 4.05 (m, 2H), 3.95 (ddd, J = 5.1, 6.8, 11.7 Hz, 1H), 3.63 - 3.51 (m, 1H), 3.06 - 2.94 (m, 2H), 2.87 (s, 3H), 2.76 - 2.70 (m, 3H), 1.14 - 1.08 (m, 2H), 1.05 - 0.94 (m, 2H).
단계 4: EtOH(4 mL) 중 (R)-2-(6-(1-시클로프로필-1H-피라졸-4-일)-3,6-디히드로-2H-피란-4-일)-4-(2,4-디플루오로-5-(트리플루오로메틸)페닐)-6,7-디메틸프테리딘(1.00 당량, 90 mg, 0.170 mmol)의 용액에 PtO2 (0.507 당량, 20 mg, 0.0864 mmol)를 N2 분위기 하에 첨가하였다. 혼합물을 H2로 3회 퍼징한 다음, 혼합물을 H2(15 psi) 하에 30℃에서 12시간 동안 교반하였다. LCMS는 출발 물질이 완전히 소모되었고 목적하는 질량이 검출되었음을 보여주었다(87%, Rt: 0.626분; [M+H]+ = 220 nm에서 535.5). 반응 혼합물을 여과하고, 여과물을 감압 하에 농축시켜 미정제 생성물 2-((2R)-2-(1-시클로프로필-1H-피라졸-4-일)테트라히드로-2H-피란-4-일)-4-(2,4-디플루오로-5-(트리플루오로메틸)페닐)-6,7-디메틸-5,6,7,8-테트라히드로프테리딘(90 mg, 0.168 mmol, 98.87% 수율)을 황색 오일로서 수득하고, 이를 LCMS로 확인하고 이를 다음 단계에 직접 사용하였다. LCMS: [M+H]+ = 535.2; 순도 = 60% (220 nm). 유지 시간 = 0.732분.
단계 5: DCE(4 mL) 중 2-((2R)-2-(1-시클로프로필-1H-피라졸-4-일)테트라히드로-2H-피란-4-일)-4-(2,4-디플루오로-5-(트리플루오로메틸)페닐)-6,7-디메틸-5,6,7,8-테트라히드로프테리딘(1.00 당량, 90 mg, 0.168 mmol)의 용액에 MnO2 (20.0 당량, 293 mg, 3.37 mmol)를 20℃에서 첨가하고 30℃에서 12시간 동안 교반하였다. LCMS는 출발 물질이 남아 있고 목적하는 질량이 검출되었음을 나타냈다(20%, Rt: 0.810분; [M+H]+ = 220 nm에서 531.5). 반응 혼합물을 여과하고, 여액을 MnO2(20.0 당량, 293 mg, 3.37 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 30℃에서 12시간 동안 교반하였다. LCMS는 목적하는 질량이 주요한 것임을 나타냈다(87%, Rt: 0.980분; [M+H]+ = 220 nm에서 531.2). 반응 혼합물을 여과하고, 여액을 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 분취-HPLC(컬럼: Phenomenex luna C18 150 × 25 mm × 10 um ; 이동상: [물 (FA)-ACN]; B%: 46%-76%, 12분)로 정제하고 동결건조시켜 2-((2R)-2-(1-시클로프로필-1H-피라졸-4-일)테트라히드로-2H-피란-4-일)-4-(2,4-디플루오로-5-(트리플루오로메틸)페닐)-6,7-디메틸프테리딘(15 mg, 0.0285 mmol, 16.91% 수율)을 황색 고형분으로서 수득하였다(라세메이트): LCMS: [M+H]+ = 531.2; 순도 = 98.7% (220 nm). 유지 시간 = 0.998분. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 8.06 (t, J = 7.4 Hz, 1H), 7.51 (d, J = 1.1 Hz, 2H), 7.16 (t, J = 9.6 Hz, 1H), 4.57 (dd, J = 1.6, 11.4 Hz, 1H), 4.33 - 4.22 (m, 1H), 3.89 - 3.74 (m, 1H), 3.63 - 3.49 (m, 2H), 2.87 (s, 3H), 2.74 (s, 3H), 2.44 (br d, J = 13.4 Hz, 1H), 2.28 - 2.16 (m, 3H), 1.13 - 1.05 (m, 2H), 1.04 - 0.95 (m, 2H). EE, 86%.
I-1588의 합성
화염 건조된 10 mL 마이크로파 바이알에 N2 하에 6,7-디메틸-4-메틸설파닐-2-[(2R,4S)-2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)테트라히드로피란-4-일]프테리딘(1.00 당량, 100 mg, 0.25 mmol), [2,3-디플루오로-4-(트리플루오로메틸)페닐]보론산(1.50 당량, 85 mg, 0.38 mmol) 및 THF(5 mL)를 채웠다. 반응 혼합물을 아르곤 하에 5분 동안 탈기한 다음, Pd(PPh3)4(0.30 당량, 87 mg, 0.08 mmol) 및 구리(I) 티오펜-2-카르복실레이트(CuTC)(2.00 당량, 96 mg, 0.51 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 N2로 퍼징하고, 반응 바이알을 격막이 있는 알루미늄 캡으로 밀봉하고, 반응 혼합물을 100℃에서 조절된 반응 온도로 일정한 마이크로파 하에 2시간 동안 조사하였다. 혼합물을 셀라이트 패드를 통해 여과하고, DCM(2 x 10 mL)으로 세척하고, 농축시키고, 물 중 10% 내지 60% ACN의 구배를 사용하여 C18 플래쉬 크로마토그래피(30 g Biotage C18 컬럼)로 정제하였다. 목적하는 분획을 감압 하에 증발시켜 목적하는 유사체를 부분 입체이성질체의 혼합물로서 수득하였다. 목적하는 시스 부분 입체이성질체를 수성 10 mM 포름산암모늄 및 ACN(60-80%)을 사용하는 분취-HPLC 정제(Gemini® 5 um NX-C18 110 Å, 100 x 30 mm)에 의해 단리하여 4-[2,3-디플루오로-4-(트리플루오로메틸)페닐]-6,7-디메틸-2-[(2R,4S)-2-(1-시클로프로필 피라졸-4-일)테트라히드로피란-4-일]프테리딘(70 mg,0.132 mmol, 52 % 수율)을 회백색 고형분으로서 수득하였다. ESI-MS (m/z+): 531.3 [M+H]. 1H NMR (CHCl3-d, 400 MHz): δH 7.53-7.58 (2H, m), 7.47 (2H, t, J = 2.2 Hz), 4.54 (1H, dd, J = 11.4, 2.1 Hz), 4.23-4.27 (1H, m), 3.75-3.82 (1H, m), 3.50-3.56(2H, m), 2.85 (3H, s), 2.73 (3H, s), 2.39-2.44 (1H, m), 2.13-2.22 (3H, m), 1.05-1.09 (2H, m), 0.94-0.99 (2H, m).
화합물 I-1593의 합성
단계 1: THF(30 mL) 중 1-브로모-2-플루오로-4-(트리플루오로메틸)벤젠(1.00 당량, 3000 mg, 12.3 mmol)의 용액에 iPrMgCl·LiCl(1.11 당량, 11 mL, 13.7 mmol)을 0℃에서 N2 분위기 하에 첨가하였다. 혼합물을 15℃에서 1.5시간 동안 교반하였다. ZnCl2(1.21 당량, 30 mL, 15.0 mmol)를 N2분위기 하에 -78℃에서 첨가하고, 혼합물을 15℃에서 1시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 다음 단계에 직접 사용하였다.
단계 2: N2 분위기 하에 밀봉된 병에 2,4-디클로로-7-메틸-프테리딘(1.00 당량, 900 mg, 4.19 mmol) 및 PdCl2(Amphos)(0.0500 당량, 148 mg, 0.209 mmol) 및 THF(9mL)를 채우고, N2로 3회 퍼징한 다음, 0℃로 냉각시키고, 클로로-[2-플루오로-4-(트리플루오로메틸)페닐]아연(1.00 당량, 25 mL, 4.19 mmol)을 0℃에서 반응 용액에 적가한 다음, 25℃로 가온시키고 1시간 동안 교반하였다. 반응 용액이 주황색에서 짙은 자주색으로 변하였고, LCMS는 목적하는 생성물의 57%가 검출되었음을 나타냈다(57%, Rt=0.937분; [M+H]+ = 220 nm에서 343.1) .반응 용액을 포화 NH4Cl 용액(100 mL)으로 급냉시키고, EtOAc(150 mL * 3)로 추출하고 감압 하에 증발시켜 잔류물을 수득하고, 그런 다음, 플래쉬 컬럼(PE:EA= 0 내지 40%, PE: EA=3: 1, Rf=0.5)으로 정제하고, 진공에서 건조시켜 2-클로로-4-[2-플루오로-4-(트리플루오로메틸)페닐]-7-메틸-프테리딘(900 mg, 2.44 mmol, 58.36% 수율)을 적색 고형분으로서 수득하고, LCMS [M+H]+=343.1; 순도 = 93% (220 nm)에 의해 확인하였다. 유지 시간 = 0.920분. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 8.88 (s, 1H), 7.90 (t, J = 7.3 Hz, 1H), 7.66 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.55 (d, J = 9.4 Hz, 1H), 2.94 (s, 3H).
단계 3: 2-[(6R)-6-(1-시클로프로필피라졸-4-일)-3,6-디히드로-2H-피란-4-일]-4-[2-플루오로-4-(트리플루오로메틸)페닐]-7-메틸-프테리딘. 1,4-디옥산(40 mL) 및 물(4 mL) 중 2-클로로-4-[2-플루오로-4-(트리플루오로메틸)페닐]-7-메틸-프테리딘(1.00 당량, 900 mg, 2.63 mmol), 1-시클로프로필-4-[(6R)-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)-3,6-디히드로-2H-피란-6-일]피라졸(1.15 당량, 955 mg, 3.02 mmol) 및 K2CO3(3.00 당량, 662 mg, 7.88 mmol)의 용액에 Pd(dppf)Cl2·DCM(0.120 당량, 231 mg, 0.315 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 N2 분위기 하에 80℃에서 12시간 동안 교반하였다. LCMS는 출발 물질이 완전히 소모되었고 목적하는 생성물을 갖는 하나의 주요 피크가 검출되었음을 나타냈다(67%, Rt=0.971분; [M+H]+ = 220 nm에서 497.3). 혼합물을 50 mL H2O에 붓고, EA(100 mL * 3)로 추출하고, 합쳐진 유기층을 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 실리카 컬럼 크로마토그래피(PE:EA=1:0 내지 1:1, PE:EA=1:1, 목적하는 생성물 Rf=0.5)로 정제하여 2-[(6R)-6-(1-시클로프로필피라졸-4-일)-3,6-디히드로-2H-피란-4-일]-4-[2-플루오로-4-(트리플루오로메틸)페닐]-7-메틸-프테리딘(950 mg,1.91 mmol, 72.86% 수율)을 적색 고형분으로서 수득하였다. [M+H]+=497.3; 순도 = 87% (220 nm). 유지 시간 = 0.962분. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 8.79 (s, 1H), 7.88 (t, J = 7.3 Hz, 1H), 7.74 - 7.71 (m, 1H), 7.64 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.57 - 7.49 (m, 3H), 5.47 (q, J = 2.5 Hz, 1H), 4.16 - 4.12 (m, 1H), 3.95 (ddd, J = 5.0, 6.9, 11.6 Hz, 1H), 3.57 (tt, J = 3.8, 7.3 Hz, 1H), 3.03 - 2.95 (m, 2H), 2.91 (s, 3H), 1.15 - 1.08 (m, 2H), 1.03 - 0.97 (m, 2H).
단계 4: 에탄올(20 mL) 중 2-[(6R)-6-(1-시클로프로필피라졸-4-일)-3,6-디히드로-2H-피란-4-일]-4-[2-플루오로-4-(트리플루오로메틸)페닐]-7-메틸-프테리딘(1.00 당량, 800 mg, 1.61 mmol)의 용액에 Pd/C(0.937 당량, 160 mg, 1.51 mmol)를 N2 분위기 하에 첨가하였다. 혼합물을 H2(15 psi)로 3회 퍼징한 다음, 혼합물을 H2 (15 psi) 분위기 하에 30℃에서 12시간 동안 교반하였다. LCMS는 출발 물질이 완전히 소모되었고 목적하는 생성물을 갖는 하나의 주요 피크가 검출되었음을 나타냈다(82%, Rt=0.808분; [M+H]+ = 220 nm에서 503.2, 중간체 생성물 함유). 혼합물을 30℃에서 12시간 동안 추가로 교반하였다. LCMS는 출발 물질이 완전히 소모되었고 목적하는 생성물을 갖는 하나의 주요 피크가 검출되었음을 나타냈다(92%, Rt=0.808분; [M+H]+ = 220 nm에서 503.2). 반응 혼합물을 여과하고 감압 하에 농축시켜 미정제 2-[(2R)-2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)테트라히드로피란-4-일]-4-[2-플루오로-4-(트리플루오로메틸)페닐]-7-메틸-5,6,7,8-테트라히드로프테리딘(850 mg, 1.69 mmol, 104.97% 수율)을 짙은 황색 고형분으로서 수득하고, 잔류물을 다음 단계에 직접 사용하였다.
단계 5: 건조 DCE(50 mL) 중 2-[(2R)-2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)테트라히드로피란-4-일]-4-[2-플루오로-4-(트리플루오로메틸)페닐]-7-메틸-5,6,7,8-테트라히드로프테리딘(1.00 당량, 850 mg, 1.69 mmol)의 용액에 MnO2(20.0 당량, 2941 mg, 33.8 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 30℃에서 12시간 동안 교반하였다. LCMS는 출발 물질의 27%가 남아 있고, 목적하는 생성물의 29%가 검출되었고(29%, Rt=0.968분, [M+H]+ = 499.3, ESI+), MS=SM+16인 새로운 피크가 검출되었음을 나타냈다. 혼합물을 여과하고, 여과된 케이크를 EA(20 mL * 3)로 세척하고, 합쳐진 유기층을 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 건조 DCM(50 mL)에 재용해시키고, MnO2(20.0 당량, 2941 mg, 33.8 mmol)를 혼합물에 첨가한 다음, 혼합물을 30℃에서 12시간 동안 추가로 교반하였다. LCMS는 출발 물질이 완전히 소모되었고 목적하는 생성물의 59%가 검출되었음을 나타냈다(59%, Rt=0.968분, [M+H]+=499.3). 혼합물을 여과하고, 필터 케이크를 EA(50 mL * 3)로 세척하고, 합쳐진 유기층을 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 컬럼 실리카 크로마토그래피(PE:EA=1:0 내지 1:2, PE:EA=0:1, 목적하는 생성물 Rf=0.5)로 정제하여 2-[(2R)-2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)테트라히드로피란-4-일]-4-[2-플루오로-4-(트리플루오로메틸)페닐]-7-메틸-프테리딘(320 mg,0.642 mmol, 37.95% 수율)을 적색 오일로서 수득하였다, LCMS [M+H]+=499.3; 순도 = 78% (220 nm). 유지 시간=0.934분. 단계 6: 25℃에서, DMSO(10 mL) 중 -[(2R,4S)-2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)테트라히드로피란-4-일]-4-[2-플루오로-4-(트리플루오로메틸)페닐]-7-메틸-프테리딘(1.00 당량, 100 mg, 0.201 mmol) 및 아연 디플루오로메탄설피네이트(4.00 당량, 236 mg, 0.802 mmol)의 용액에 DMSO(2 mL) 중 터트-부틸히드로퍼옥시드(7.00 당량, 181 mg, 1.40 mmol)를 격렬하게 교반하며 첨가하고, N2로 30초 동안 버블링하였다. 반응 용액을 30℃에서 4시간 동안 교반하였다. LCMS는 75%의 출발 물질이 남아 있고 15%의 목적하는 생성물이 검출되었음을 나타냈다(15%, Rt=0.981분, [M+H]+=220 nm에서 549.3). 반응 용액을 30℃에서 12시간 동안 추가로 교반하였다. LCMS는 출발 물질이 완전히 소모되었고 목적하는 생성물의 40%가 검출되었음을 나타냈다(40%, Rt=1.003분, [M+H]+= 220nm에서 549.3). 합쳐진 혼합물을 10 mL Na2S2O3으로 급냉시킨 다음, EA(20 mL * 3)로 추출하고, 합쳐진 유기층을 무수 Na2SO4로 건조시키고, 여과하고 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 분취-TLC(PE:EA=0:1, 목적하는 생성물 Rf = 0.3)로 정제하여 미정제 생성물을 수득하였다. 미정제 생성물을 분취-HPLC(Phenomenex luna C18 150 * 25mm * 10um, 물(FA)-ACN)로 다시 정제하고 동결건조시켜 2-[(2R,4S)-2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)테트라히드로피란-4-일]-6-(디플루오로메틸)-4-[2-플루오로-4-(트리플루오로메틸)페닐]-7-메틸-프테리딘(3.4 mg,0.00555 mmol, 2.76% 수율)을 고형분으로서 수득하였다, LCMS [M+H]+=549.3; 순도 = 98.4% (220 nm). 유지 시간 = 1.016분. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 7.88 (t, J = 7.3 Hz, 1H), 7.66 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.59 - 7.45 (m, 3H), 6.91 - 6.58 (m, 1H), 4.58 (dd, J = 1.9, 11.4 Hz, 1H), 4.29 (td, J = 3.1, 11.2 Hz, 1H), 3.90 - 3.78 (m, 1H), 3.67 - 3.51 (m, 2H), 3.08 (s, 3H), 2.47 (br d, J = 13.1 Hz, 1H), 2.21 (s, 3H), 1.18 - 1.06 (m, 2H), 1.03 - 0.94 (m, 2H). SFC는 100% ee를 나타냈고, 순도는 1H NMR 및 LCMS의 결과에 기초하여 90%였다.
화합물 I-1598 및 I-1638의 합성
단계 1: DCM(5 mL) 중 N-[2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)-2-옥소-에틸]-N-(3,3-디플루오로-2-히드록시-프로필)-4-메틸-벤젠설폰아미드(1.00 당량, 300 mg, 0.726 mmol) 및 트리에틸실란(19.0 당량, 2.2 mL, 13.8 mmol)의 용액에 TMSOTf(8.38 당량, 1.1 mL, 6.08 mmol)를 0℃에서 첨가하였다. 혼합물을 0℃에서 0.5시간 동안 교반하였다. LCMS는 목적하는 생성물의 37%가 검출되었음을 나타냈다(37%, Rt = 0.965분; [M+H]+ = 220 nm에서 396.0). 혼합물을 포화 수성 NaHCO3(50 mL)으로 급냉시키고, EtOAc(30 mL * 3)로 추출하고, 합쳐진 유기층을 염수로 세척하고, 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고 농축시켜 6-(1-시클로프로필피라졸-4-일)-2-(디플루오로메틸)-4-(p-톨일설포닐)-2,3-디히드로-1,4-옥사진(250 mg, 0.499 mmol, 68.83% 수율)을 백색 고형분으로서 수득하고, LCMS 및 H NMR에 의해 확인하였다. [M+H]+=396.0; 순도 = 79% (220 nm). 유지 시간 =0.958분. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 7.67 (d, J = 8.3 Hz, 2H), 7.49 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 7.42 - 7.36 (m, 1H), 7.33 (d, J = 8.2 Hz, 2H), 5.92 - 5.56 (m, 1H), 3.94 (br d, J = 13.3 Hz, 1H), 3.59 - 3.51 (m, 1H), 3.50 - 3.42 (m, 1H), 3.24 (dd, J = 8.6, 13.5 Hz, 1H), 2.47 - 2.42 (m, 3H), 2.04 (s, 2H), 1.12 - 1.06 (m, 2H), 1.01 (br dd, J = 1.1, 6.2 Hz, 2H), 0.92 (s, 1H).
단계 2: 메탄올(5 mL) 중 6-(1-시클로프로필피라졸-4-일)-2-(디플루오로메틸)-4-(p-톨일설포닐)-2,3-디히드로-1,4-옥사진(1.00 당량, 250 mg, 0.632 mmol)의 용액에 Pd/C(1.00 당량, 67 mg, 0.632 mmol)를 15℃에서 첨가하였다. 그런 다음, 반응 혼합물을 H2로 3회 탈기하였다. 반응 혼합물을 H2 분위기(15 psi) 하에 15℃에서 2시간 동안 교반하였다. LCMS는 목적하는 생성물의 32%가 검출되었음을 나타냈다(32%, Rt = 0.923분; [M+H]+ = 220 nm에서 398.2). 반응 혼합물을 H2 분위기(15 psi) 하에 30℃에서 6시간 동안 추가로 교반하였다. LCMS는 목적하는 생성물의 95%가 검출되었음을 나타냈다(95%, Rt = 0.939분; [M+H]+ = 220 nm에서 398.2). 용액을 여과하고, 필터 케이크를 MeOH(30 mL * 3)로 세척하고, 합쳐진 유기층을 감압 하에 농축시켜 2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)-6-(디플루오로메틸)-4-(p-톨일설포닐)모르폴린(200 mg, 0.503 mmol, 79.59% 수율)을 무색 오일로서 수득하였다.
단계 3: 메탄올(2 mL) 중 2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)-6-(디플루오로메틸)-4-(p-톨일설포닐)모르폴린(1.00 당량, 190 mg, 0.478 mmol)의 무색 혼합물에 Mg(칩)(10.0 당량, 115 mg, 4.78 mmol) 및 Mg(분말)(10.0 당량, 115 mg, 4.78 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 N2 분위기 하에 80℃에서 12시간 동안 교반하였다. LCMS는 목적하는 생성물의 93%가 검출되었음을 나타냈다(93%, Rt = 0.334분; [M+H]+ = 220 nm에서 244.3). 반응 혼합물을 실온으로 냉각시켰다. 반응 혼합물을 여과하고, 여액을 감압 하에 농축시켜 2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)-6-(디플루오로메틸)모르폴린(90 mg, 0.370 mmol, 77.39% 수율)을 백색 고형분으로서 수득하였다.
단계 4: DMSO(1.5 mL) 중 2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)-6-(디플루오로메틸)모르폴린(1.00 당량, 70 mg, 0.288 mmol)의 용액에 2-클로로-4-[2-플루오로-4-(트리플루오로메틸)페닐]-6,7-디메틸-프테리딘(1.00당량, 103 mg, 0.288 mmol) 및 DIEA(3.00 당량, 0.15 mL, 0.863 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 100℃에서 1시간 동안 교반하였다. LCMS는 목적하는 생성물의 47%가 검출되었음을 나타냈다(47%, Rt = 1.012분; [M+H]+ = 220 nm에서 564.3). 혼합물을 60 mL H2O로 급냉시키고, EA(30 mL * 3)로 추출하고, 합쳐진 유기층을 무수 Na2SO4로 건조시키고, 여과하고 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 분취- HPLC(유속: 25 mL/분; 구배: 10분에 걸쳐 60-80% 물(0.1% FA)-ACN; 컬럼: Phenomenex luna C18 150 * 25mm * 5um)로 정제하고 동결건조시켜 (2S,6S)-2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)-6-(디플루오로메틸)-4-[4-[2-플루오로-4-(트리플루오로메틸)페닐]-6,7-디메틸-프테리딘-2-일]모르폴린(42 mg, 0.0743 mmol, 25.80% 수율)을 갈색 고형분으로서 수득하였다.
단계 5: 생성물을 SFC(컬럼: (S,S)Whelk-O1 100×4.6mm I.D., 3.5um 이동상: CO2의 경우 상 A 및 MeOH+ACN (0.05% DEA)의 경우 상 B; 구배 용리: CO2 중의 40% MeOH+ACN (0.05% DEA); 유속: 3 mL/분; 검출기: PDA , 컬럼 온도: 35C; 배압: 100Bar)로 정제하고 동결건조시켜 (2S,6S)-2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)-6-(디플루오로메틸)-4-[4-[2-플루오로-4-(트리플루오로메틸)페닐]-6,7-디메틸-프테리딘-2-일]모르폴린(12 mg,0.0217 mmol, 30.77% 수율)을 황색 고형분으로서 수득하고, (2R,6R)-2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)-6-(디플루오로메틸)-4-[4-[2-플루오로-4-(트리플루오로메틸)페닐]-6,7-디메틸-프테리딘-2-일]모르폴린(14 mg, 0.0250 mmol, 35.42% 수율)을 황색 고형분으로서 수득하였다, 564.3 [M+H]+; 순도 = 100.0% (220 nm). 유지 시간 =1.048분. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 7.82 (t, J = 7.1 Hz, 1H), 7.60 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.55 (s, 2H), 7.51 (br d, J = 9.4 Hz, 1H), 6.03 - 5.70 (m, 1H), 5.15 (br dd, J = 2.0, 10.7 Hz, 2H), 4.67 (dd, J = 2.1, 10.9 Hz, 1H), 4.09 - 3.91 (m, 1H), 3.59 (tt, J = 3.6, 7.3 Hz, 1H), 3.15 (ddd, J = 8.3, 11.0, 13.4 Hz, 2H), 2.75 (s, 3H), 2.61 (s, 3H), 1.16 - 1.10 (m, 2H), 1.08 - 1.01 (m, 2H). SFC는 ee, 100%를 나타냈다. [M+H]+ 564.3 순도 = 100% (220 nm). 유지 시간 =1.042분. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 7.82 (t, J = 7.4 Hz, 1H), 7.60 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 7.55 (s, 2H), 7.51 (d, J = 9.4 Hz, 1H), 6.04 - 5.69 (m, 1H), 5.23 - 5.06 (m, 2H), 4.71 - 4.61 (m, 1H), 4.07 - 3.91 (m, 1H), 3.60 (qd, J = 3.6, 7.1 Hz, 1H), 3.22 - 3.09 (m, 2H), 2.75 (s, 3H), 2.61 (s, 3H), 1.26 (s, 1H), 1.18 - 1.10 (m, 2H), 1.07 - 0.99 (m, 2H). SFC는 ee > 99%를 나타냈다.
화합물 I-1603의 합성
단계 1: MeCN(120 mL) 중 에틸 3-시클로프로필-3-옥소-프로파노에이트(1.60 당량, 3360 mg, 21.5 mmol)의 용액에 Cu(NO3)2·3H2O(0.356 당량, 1152 mg, 4.77 mmol)를 한꺼번에 첨가한 다음, 혼합물을 공기 하에 50℃에서 6시간 동안 교반한 다음, 혼합물을 20℃로 냉각시킨 다음, 2,6-디클로로피리미딘-4,5-디아민(1.00 당량, 2400 mg, 13.4 mmol)을 반응 혼합물에 나누어 첨가하고, 혼합물을 20℃에서 4시간 동안 교반하였다. LCMS는 원료가 완전히 소모되었음을 나타냈고, 주요 피크는 MS를 나타냈다(71%, Rt: 0.923분; [M+H]+ = 220 nm에서 313.0). 혼합물을 여과한 다음, 여액을 증발시켜 잔류물을 수득하고, 잔류물을 컬럼 크로마토그래피(헥산/에틸 아세테이트 = 0 내지 50%, PE/EtOAc = 2/1, 목적하는 생성물 Rf = 0.3)로 정제하여 미정제 에틸 2,4-디클로로-7-시클로프로필-프테리딘-6-카르복실레이트(600 mg, 1.92 mmol, 14.29% 수율) 및 에틸 2,4-디클로로-6-시클로프로필-프테리딘-7-카르복실레이트레이트(600 mg, 1.92 mmol, 14.29% 수율)를 연황색 고형분으로서 수득하고, LCMS [M+H]+=312.9; 순도 = 91%(220 nm)로 확인하였다. 유지 시간 = 0.934 및 0.954분.
단계 2: N2 분위기 하에 밀봉된 병에 에틸 2,4-디클로로-7-시클로프로필-프테리딘-6-카르복실레이트(1.00 당량, 500 mg, 1.60 mmol), 에틸 2,4-디클로로-6-시클로프로필-프테리딘-7-카르복실레이트(1.00 당량, 500 mg, 1.60 mmol), (2,5-디플루오로페닐)보론산(0.800 당량, 202 mg, 1.28 mmol), K3PO4(3.00 당량, 1017 mg, 4.79 mmol) 및 PdCl2(Amphos)(0.0500 당량, 57 mg, 0.0798 mmol)를 채우고, N2로 3회 퍼징하고, 이어서 톨루엔(12 mL) 및 물(1.2 mL)를 15℃에서 한꺼번에 첨가하고, 그런 다음, 혼합물을 15℃에서 2시간 동안 교반하고 30℃에서 10시간 동안 교반하였다. LCMS는 원료가 완전히 소모되었음을 나타냈고, 주요 피크는 MS를 나타냈다(60%, Rt: 0.998분; [M+H]+ = 220 nm에서 391.0). 반응 혼합물을 여과하고, 필터 케이크를 EtOAc(30 mL)로 세척하고, 용매를 합치고, 물(50 mL)을 첨가한 다음, 유기상을 Na2SO4로 건조시키고, 여과하고 감압 하에 농축시켜 증발시켜 잔류물을 수득하고, 잔류물을 컬럼 크로마토그래피(헥산/에틸 아세테이트 = 0 내지 30%, PE/EtOAc = 2/1, 목적하는 생성물 Rf = 0.5)로 정제하여 에틸 2-클로로-7-시클로프로필-4-(2,5-디플루오로페닐)프테리딘-6-카르복실레이트(380 mg, 0.654 mmol, 40.95% 수율) 및 에틸 2-클로로-6-시클로프로필-4-(2,5-디플루오로페닐)프테리딘-7-카르복실레이트(380 mg, 0.654 mmol, 40.95% 수율)를 무색 오일로서 수득하였다. [M+H]+ = 391.0. 유지 시간 = 0.998분.
단계 3: 1,4-디옥산(8 mL) 및 물(0.8 mL) 중 1-시클로프로필-4-[(6R)-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)-3,6-디히드로-2H-피란-6-일]피라졸(2.00 당량, 210 mg, 0.665 mmol), Pd(dppf)Cl2·DCM (0.200 당량, 49 mg, 0.0665 mmol) 및 에틸 2-클로로-7-시클로프로필-4-(2,4-디플루오로페닐)프테리딘-6-카르복실레이트(1.00 당량, 130 mg, 0.333 mmol), 에틸 2-클로로-6-시클로프로필-4-(2,4-디플루오로페닐)프테리딘-7-카르복실레이트(1.00 당량, 130 mg, 0.333 mmol)의 용액에 K2CO3(6.00 당량, 168 mg, 2.00 mmol)을 한꺼번에 첨가하였다. 그런 다음, 반응 혼합물을 N2 분위기 하 80℃에서 3시간 동안 교반하였다. LCMS는 출발 물질이 완전히 소모되었고 목적하는 생성물을 갖는 하나의 주요 피크가 검출되었음을 나타냈다(63.5%, Rt: 1.008분; [M+H]+ = 220 nm에서 545.2). 혼합물을 H2O(80 mL)에 붓고, EtOAc(100 mL * 2)로 추출하고, 합쳐진 유기층을 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 분취-TLC(PE/EtOAc = 1/2, 목적하는 생성물 Rf = 0.6)로 정제하여 에틸 7-시클로프로필-2-[(6R)-6-(1-시클로프로필피라졸-4-일)-3,6-디히드로-2H-피란-4-일]-4-(2,4-디플루오로페닐)프테리딘-6-카르복실레이트(120 mg, 0.220 mmol, 66.24% 수율)을 황색 고형분으로서 수득하고 에틸 6-시클로프로필-2-[(6R)-6-(1-시클로프로필피라졸-4-일)-3,6-디히드로-2H-피란-4-일]-4-(2,4-디플루오로페닐)프테리딘-7-카르복실레이트(120 mg, 0.220 mmol, 66.24% 수율)를 황색 고형분으로서 수득하고 LCMS [M+H]+ = 545.2; 순도 = 91.9% (220 nm)로 확인하였다. 유지 시간 = 0.869분.
단계 4: 에탄올(15 mL) 중 에틸 7-시클로프로필-2-[(6R)-6-(1-시클로프로필피라졸-4-일)-3,6-디히드로-2H-피란-4-일]-4-(2,4-디플루오로페닐)프테리딘-6-카르복실레이트(1.00 당량, 170 mg, 0.312 mmol) 및 에틸 6-시클로프로필-2-[(6R)-6-(1-시클로프로필피라졸-4-일)-3,6-디히드로-2H-피란-4-일]-4-(2,4-디플루오로페닐)프테리딘-7-카르복실레이트(1.00 당량, 170 mg, 0.312 mmol)의 용액에 PtO2(2.00 당량, 142 mg, 0.624 mmol)를 N2 분위기 하에 첨가하였다. 혼합물을 H2(15 psi)로 3회 퍼징한 다음, 혼합물을 H2(15 psi) 분위기 하에 15℃에서 12시간 동안 교반하였다. LCMS는 출발 물질이 완전히 소모되었고 목적하는 생성물이 검출되었음을 나타냈다(61.6%, Rt: 0.814 및 0.831분; [M+H]+ = 220 nm에서 551.1). 현탁액을 셀라이트 패드를 통해 여과하고, 필터 케이크를 MeOH(5 mL×3)로 세척하였다. 합쳐진 여액을 농축 건조시켜 에틸 7-시클로프로필-2-[(2R)-2 -(1-시클로프로필피라졸-4-일)테트라히드로피란-4-일]-4-(2,4-디플루오로페닐)프테리딘-6-카르복실레이트(160 mg,0.293 mmol, 93.77% 수율) 및 에틸 6-시클로프로필-2-[(2R)-2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)테트라히드로피란-4-일]-4-(2,4-디플루오로페닐)프테리딘-7-카르복실레이트(160 mg,0.293 mmol, 93.77% 수율)를 황색 검으로서 수득하였다. [M+H]+ = 551.1, 순도 = 61.6% (220 nm). 유지 시간 = 0.814 및 0.831분.
단계 5: DCE(10 mL) 중 에틸 7-시클로프로필-2-[(6R)-6-(1-시클로프로필피라졸-4-일)-3,6-디히드로-2H-피란-4-일]-4-(2,4-디플루오로페닐)프테리딘-6-카르복실레이트(1.00 당량, 170 mg, 0.312 mmol) 및 에틸 6-시클로프로필-2-[(6R)-6-(1-시클로프로필피라졸-4-일)-3,6-디히드로-2H-피란-4-일]-4-(2,4-디플루오로페닐)프테리딘-7-카르복실레이트(1.00 당량, 170 mg, 0.312 mmol)의 용액에 MnO2(15.0 당량, 284 mg, 3.27 mmol)를 한꺼번에 첨가하였다. 혼합물을 30℃에서 4시간 동안 교반하였다. LCMS는 목적하는 MS가 주요한 것으로 밝혀졌고, 출발 물질이 완전히 소모되었고 목적하는 생성물이 검출되었음을 나타냈다(90.7%, Rt: 0.997분; [M+H]+ = 220 nm에서 547.1). 현탁액을 셀라이트 패드를 통해 여과하고, 패드를 MeOH(5 mL×3)로 세척하였다. 합쳐진 여액을 농축 건조시켜 에틸 7-시클로프로필-2-[(2R)-2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)테트라히드로피란-4-일]-4-(2,4-디플루오로페닐)프테리딘-6-카르복실레이트(110 mg, 0.201 mmol, 92.34% 수율) 및 에틸 6-시클로프로필-2-[(2R)-2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)테트라히드로피란-4-일]-4-(2,4-디플루오로페닐)프테리딘-7-카르복실레이트(110 mg, 0.201 mmol, 92.34% 수율)를 황색 고형분으로서 수득하고, LCMS [M+H]+ = 545.2; 순도 = 91.7% (220 nm)로 확인하였다. 유지 시간 = 0.914분.
단계 6: THF(3 mL) 및 물(2 mL) 중 에틸 7-시클로프로필-2-[(2R)-2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)테트라히드로피란-4-일]-4-(2,4-디플루오로페닐)프테리딘-6-카르복실레이트(1.00 당량, 75 mg, 0.137 mmol) 및 에틸 6-시클로프로필-2-[(2R)-2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)테트라히드로피란-4-일]-4-(2,4-디플루오로페닐)프테리딘-7-카르복실레이트(1.00 당량, 75 mg, 0.137 mmol)의 용액에 NaOH(31.2 당량, 373 mg, 4.29 mmol)를 한꺼번에 첨가하였다. 이어서 혼합물을 15℃에서 12시간 동안 교반하였다. LCMS는 출발 물질이 완전히 소모되었고 목적하는 생성물이 검출되었음을 나타냈다(89.9%, Rt: 0.887분; [M+H]+ = 220 nm에서 519.2). 혼합물을 역상 컬럼(C18 150 * 40 mm * 15 um, 0.1% FA)으로 정제하고, 용매를 동결건조시켜 7-시클로프로필-2-[(2R)-2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)테트라히드로피란-4-일]-4-(2,4-디플루오로페닐)프테리딘-6-카르복실산(50 mg, 0.0964 mmol, 70.27% 수율) 및 6-시클로프로필-2-[(2R)-2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)테트라히드로피란-4-일]-4-(2,4-디플루오로페닐)프테리딘-7-카르복실레이트(50 mg, 0.0964 mmol, 70.27% 수율)를 황색 고형분으로서 수득하고, LCMS [M+H]+=519.2; 순도 = 88.7% (220 nm)로 확인하였다. 유지 시간 = 0.808분.
단계 7: DMF(1 mL) 중 7-시클로프로필-2-[(2R)-2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)테트라히드로피란-4-일]-4-(2,4-디플루오로페닐)프테리딘-6-카르복실산(1.00 당량, 35 mg, 0.0675 mmol) 및 6-시클로프로필-2-[(2R)-2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)테트라히드로피란-4-일]-4-(2,4-디플루오로페닐)프테리딘-7-카르복실산(0.100 당량, 3.5 mg, 0.00675 mmol)의 용액에 HATU(1.50 당량, 38 mg, 0.101 mmol) 및 DIEA(3.00 당량, 0.035 mL, 0.203 mmol)를 한꺼번에 첨가하였다. 그런 다음, 혼합물을 10℃에서 10분 동안 교반하였다. 그런 다음, 디메틸아민 히드로클로라이드(4.00 당량, 22 mg, 0.270 mmol)를 한꺼번에 첨가한 다음, 혼합물을 10℃에서 2시간 동안 교반하였다. LCMS는 출발 물질이 완전히 소모되었고 목적하는 생성물이 검출되었음을 나타냈다(61.7%, Rt: 0.921분; [M+H]+ = 220 nm에서 546.1). 반응 혼합물을 분취-HPLC(C18 150 * 40 mm * 15 um, 0.1% FA)로 정제하고, 용매를 동결건조시켜 7-시클로프로필-2-[(2R)-2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)테트라히드로피란-4-일]-4-(2,4-디플루오로페닐)-N,N-디메틸-프테리딘-6-카르복사미드(31 mg, 0.0562 mmol, 83.26% 수율)를 황색 고형분으로서 수득하였다. 98.9% 순도, Rt: 0.909분; [M+H]+ = 220 nm에서 546.2. 1H NMR (400 MHz, CDCl3, 297 K) 이동 (ppm) = 7.79 - 7.70 (m, 1H), 7.49 (s, 2H), 7.09 (dt, J = 2.4, 8.2 Hz, 1H), 7.02 - 6.94 (m, 1H), 4.55 (dd, J = 2.0, 11.2 Hz, 1H), 4.27 (br dd, J = 3.0, 11.6 Hz, 1H), 3.80 (dt, J = 1.8, 11.8 Hz, 1H), 3.62 - 3.51 (m, 2H), 3.22 (s, 3H), 3.00 (s, 3H), 2.35 (dt, J = 4.2, 8.2 Hz, 2H), 2.27 - 2.16 (m, 2H), 2.10 (br dd, J = 1.9, 13.3 Hz, 1H), 1.61 (br dd, J = 3.2, 4.2 Hz, 2H), 1.33 (br dd, J = 3.4, 7.8 Hz, 2H), 1.09 (br d, J = 2.8 Hz, 2H), 1.03 - 0.95 (m, 2H). 19F NMR (376.5 MHz, CDCl3, 297 K) 이동 (ppm) -105.72, -106.58. 키랄 SFC, ee. 95%.
화합물 I-1609의 합성
단계 1: 3목 병에 2,4-디플루오로-1-요오드-벤젠(1.00 당량, 1200 mg, 5.00 mmol)을 채우고, 플래쉬를 밀봉하고 N2로 3회 퍼징하고, THF(25 mL)를 첨가하고, 용액을 교반하면서 -40℃로 냉각시키고, i-PrMgCl·LiCl(THF 중 1.3 M)(1.10 당량, 4.2 mL, 5.50 mmol)을 -40℃에서 적가하고, 이 온도에서 30분 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 -60℃로 추가로 냉각시키고, 아연(II) 클로라이드(THF 중 0.5 M)(1.00 당량, 10 mL, 5.00 mmol)을 적가하고, 반응 용액이 백색 플록으로 변하였다. 반응 혼합물을 15℃로 가온시키고 1시간 동안 교반하였다. 백색 플록이 무색 용액으로 변한 다음 다음 단계에 사용하였다.
단계 2: DCE(240 mL) 중 2,6-디클로로피리미딘-4,5-디아민 (1.00 당량, 4000 mg, 22.3 mmol)의 용액에 CaSO4(3.00 당량, 9126 mg, 67.0 mmol)에 이어서 2-옥소프로판알(2.50 당량, 4025 mg, 55.9 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 15℃에서 12시간 동안 교반하였다. LCMS는 목적하는 MS(M+H)+ = 215.0, 순도 = 99%, UV = 220 nm를 나타내는 주요 피크를 나타냈다. 유지 시간 = 0.382분. TLC(PE/EA= 1/1)는 원료가 완전히 소모되었고(Rf = 0.3) 새로운 스폿(Rf = 0.5)이 형성되었음을 나타냈다. 용액을 여과한 다음, 여과를 진공에서 농축시켜 2,4-디클로로-7-메틸-프테리딘(3400 mg, 15.8 mmol, 70.76% 수율)을 백색 고형분으로서 수득하였다. MS (M+H)+ = 215.0, 순도 = 99%, uv = 220 nm. 유지 시간 = 0.382분.
단계 3: N2 분위기 하 밀봉된 병에 2,4-디클로로-7-메틸-프테리딘(1.00 당량, 800 mg, 3.72 mmol) 및 PdCl2(Amphos)(0.0500 당량, 132 mg, 0.186 mmol) 및 THF(10 mL)를 채우고, N2로 3회 퍼징한 다음, 0℃로 냉각시키고, 클로로-(2,4-디플루오로페닐)아연(1.00 당량, 796 mg, 3.72 mmol)을 0℃에서 반응 용액에 적가한 다음, 15℃로 가온시키고, 16시간 동안 교반하였다. LCMS는 39%의 원료가 남아 있음을 나타냈고, 목적하는 MS (M+H)+ = 293.0, 순도 = 35.4%, uv = 220 nm였다. 유지 시간 = 0.846분. 반응물을 물(100 mL)에 서서히 붓고, 에틸 아세테이트(20 mL * 3)로 추출하고, 유기물을 20 mL 포화 염수 용액으로 세척하였다. 그런 다음, 유기물을 분리하고, 농축 건조 전에 건조시켰다(Na2SO4). 그런 다음, 미정제물을 실리카 겔 컬럼(PE/EA = 2/1)으로 정제하여 미정제 생성물 700 mg(44% 순도)을 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 2.89 - 2.93 (m, 3 H) 7.02 (ddd, J=9.88, 8.88, 2.38 Hz, 1 H) 7.08 - 7.16 (m, 1 H) 7.80 (td, J=8.19, 6.38 Hz, 1 H) 8.87 (s, 1 H). 그런 다음, 미정제 생성물을 분취-HPLC(120g Flash Column, Welch Ultimate XB_C18 20-40 μm; 120 A, 30% 15분)로 정제하여 2-클로로-4-(2,4-디플루오로페닐)-7-메틸-프테리딘(170 mg, 0.581 mmol, 15.61% 수율)을 연적색 고형분으로서 수득하였다, MS (M+H)+ = 293.0, 순도 = 91.088%, uv = 220 nm. 유지 시간 = 0.854분.
단계 4: DMSO(2 mL) 중 2-클로로-4-(2,4-디플루오로페닐)-7-메틸-프테리딘(1.00 당량, 150 mg, 0.513 mmol)의 용액에 (2S,6R)-2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)-6-메틸-모르폴린(1.50 당량, 159 mg, 0.769 mmol) 및 DIEA(5.00 당량, 331 mg, 2.56 mmol)를 첨가한 다음, 100℃에서 20분 동안 교반하였다. LCMS는 원료가 소모되었음을 나타냈고, 주요 피크는 목적하는 MS(M+H)+ = 464.2, 순도 = 81.74%, uv = 220 nm를 나타냈다. 유지 시간 = 0.936분. 반응물을 물(20 mL)에 붓고, 에틸 아세테이트(10 mL * 2)로 추출하고, 유기물을 5 mL 포화 염수 용액으로 세척하였다. 그런 다음, 유기물을 분리하고, 농축 건조 전에 건조시켰다(Na2SO4). 그런 다음, 미정제물을 실리카 겔 컬럼(PE/EA = 1/1, Rf = 0.5)으로 정제하여 (2S,6R)-2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)-4-[4-(2,4-디플루오로페닐)-7-메틸-프테리딘-2-일]-6-메틸-모르폴린(190 mg, 0.410 mmol, 79.99% 수율)을 적색 고형분으로서 수득하였다. MS (M+H)+ = 464.2, 순도 = 81.74%, uv = 220 nm. 유지 시간 = 0.936분. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 0.98 - 1.04 (m, 2 H) 1.10 - 1.14 (m, 2 H) 1.33 (d, J=6.13 Hz, 3 H) 2.70 - 2.77 (m, 3 H) 2.87 (dd, J=13.32, 10.69 Hz, 1 H) 3.10 (dd, J=13.32, 10.94 Hz, 1 H) 3.58 (tt, J=7.16, 3.60 Hz, 1 H) 3.76 - 3.91 (m, 1 H) 4.61 (br d, J=10.26 Hz, 1 H) 4.99 - 5.09 (m, 1 H) 6.93 - 7.10 (m, 2 H) 7.54 (s, 2 H) 7.69 (q, J=7.59 Hz, 1 H) 8.41 (s, 1 H).
단계 5: 20℃에서 DMSO(2.5 mL) 중 (2S,6R)-2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)-4-[4-(2,4-디플루오로페닐)-7-메틸-프테리딘-2-일]-6-메틸-모르폴린(1.00 당량, 140 mg, 0.302 mmol) 및 아연 디플루오로메탄설피네이트(4.00 당량, 355 mg, 1.21 mmol)의 용액에 DMSO(0.5 mL) 중 터트-부틸히드로퍼옥시드(7.00 당량, 190 mg, 2.11 mmol)의 용액을 격렬하게 교반하고 30초 동안 N2로 버블링하였다. 반응 용액을 30℃에서 4시간 동안 교반하였다. LCMS는 원료가 소모되었음을 나타냈고, 주요 피크는 목적하는 MS(M+H)+ = 514.1, 순도 = 53.34%, uv = 220 nm를 나타냈다. 유지 시간 = 1.005분. 반응물을 Na2SO3(수성 5 mL) 및 물(10 mL)에 붓고, 에틸 아세테이트(5 mL * 2)로 추출하고, 유기물을 5 mL 포화 염수 용액으로 세척하였다. 그런 다음, 유기물을 분리하고, 농축 건조 전에 건조시켰다(Na2SO4). 그런 다음, 미정제물을 실리카 겔 컬럼(PE/EA = 1/2)으로 정제하여 80 mg의 미정제 생성물(93.918% 순도)을 수득한 다음, 분취-TLC(PE/EA = 1/2, Rf = 0.5)로 정제하고 동결건조시켜 (2S,6R)-2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)-4-[6-(디플루오로메틸)-4-(2,4-디플루오로페닐)-7-메틸-프테리딘-2-일]-6-메틸-모르폴린(35 mg, 0.0668 mmol, 22.12% 수율)을 황색 고형분으로서 수득하였다. MS (M+H)+ = 514.2, 순도 = 98.733%, uv = 220 nm. 유지 시간 = 0.997분. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 1.02 (br d, J=6.60 Hz, 2 H) 1.09 - 1.15 (m, 2 H) 1.35 (br d, J=5.87 Hz, 3 H) 2.86 - 2.93 (m, 4 H) 3.13 (br t, J=12.04 Hz, 1 H) 3.50 - 3.64 (m, 1 H) 3.76 - 3.90 (m, 1 H) 4.53 - 4.70 (m, 1 H) 4.90 - 5.27 (m, 2 H) 6.45 - 6.79 (m, 1 H) 6.92 (s, 2 H) 7.49 - 7.59 (m, 2 H) 7.63 - 7.77 (m, 1 H).
화합물 I-1624의 합성
단계 1: THF(30 mL) 중 에티닐트리메틸실란(2.50 당량, 11 mL, 76.1 mmol)의 무색 용액에 n-BuLi(헥산 중 2.5M)(2.50 당량, 30 mL, 76.1 mmol)를 N2 중 -78℃에서 첨가하여 무색 용액을 수득하고, 혼합물을 0℃에서 0.5시간 동안 교반하고, 혼합물을 무색 용액이었다. 혼합물을 -78℃로 냉각시켰다. 혼합물에 THF(20 mL) 및 BF3·Et2O(2.00 당량, 7.7 mL, 60.9 mmol) 중 (2S)-2-(벤질옥시메틸)옥시란(1.00 당량, 5.00 g, 30.5 mmol)을 N2 중 -78℃에서 첨가하여 흑색 용액을 수득하고, 혼합물을 N2 중 -78℃에서 3시간 동안 교반하였다. 혼합물은 무색 용액이었다. LCMS는 출발 물질이 완전히 소모되었고 목적하는 질량이 검출되었음을 나타냈다(263.3 = [M+H]+, ESI+). 미정제 반응 혼합물을 0℃에서 포화 염화암모늄(200 mL)으로 급냉시켰다. 수성상을 에틸 아세테이트(200 mL * 3)로 추출하였다.합쳐진 유기상을 염수(200 mL * 3)로 세척하고, 무수 Na2SO4로 건조시키고, 여과하고 농축시켜 진공에서 미정제 생성물을 수득하였다. 미정제 생성물을 PE 중 EtOAc(0 내지 20%)로 용리된 실리카 겔을 이용한 컬럼 크로마토그래피로 정제하였다. (2S)-1-벤질옥시-5-트리메틸실릴-펜트-4-인-2-올(7.80 g, 27.9 mmol, 91.66% 수율)을 황색 오일로서 수득하였다, [M+H]+= 263.1; 순도 = 93.9%(220 nm). 유지 시간 = 0.953분.
단계 2: 메탄올(20 mL) 중 (2S)-1-벤질옥시-5-트리메틸실릴-펜트-4-인-2-올(1.00 당량, 2.00 g, 7.62 mmol)의 황색 용액에 K2CO3 (3.00 당량, 3160 mg, 22.9 mmol)을 첨가하여 황색 현탁액을 수득하고, 혼합물을 15℃에서 2시간 동안 교반하였다. 혼합물이 황색 현탁액으로 변하였다. LCMS는 출발 물질이 완전히 소모되었고 목적하는 약한 질량이 검출되었음을 나타냈다(191.1 = [M+H]+, ESI+). 혼합물을 농축시켜 미정제 생성물을 수득하였다. 미정제 생성물을 물(50 mL)에 붓고, 수성상을 EA(50 mL * 3)로 추출하였다. 합쳐진 유기상을 염수(20 mL * 3)로 세척하고, 무수 Na2SO4로 건조시키고, 여과하고 농축시켜 진공 중에서 미정제 생성물을 수득하였다. (2S)-1-벤질옥시펜트-4-인-2-올(1270 mg, 6.58 mmol, 86.28% 수율)을 무색 오일로서 수득하였다. [M+H]+ = 191.3; 순도 = 98.5% (220 nm). 유지 시간 = 0.765분. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 7.33 - 7.18 (m, 5H), 4.49 (s, 2H), 3.94 - 3.85 (m, 1H), 3.57 - 3.49 (m, 1H), 3.46 - 3.36 (m, 1H), 2.47 - 2.34 (m, 3H), 2.01 - 1.85 (m, 1H).
단계 3: 교반 혼합물 (2S)-1-벤질옥시펜트-4-인-2-올(1.00 당량, 1000 mg, 5.26 mmol) 및 1-시클로프로필피라졸-4-카르브알데히드(1.00 당량, 716 mg, 5.26 mmol)에 DCM(25 mL)을 첨가하고, 질소 분위기 하 -15℃에서 30분 동안 교반한 후 첨가하였다. 혼합물에 TfOH(3.00 당량, 1.4 mL, 15.8 mmol)를 질소 분위기 하에 -15 내지 -5℃에서 적가하고, 혼합물을 -10 내지 0℃에서 1시간 동안 교반하였다. 그런 다음, 혼합물을 10 내지 25℃에서 16시간 동안 교반하였다. LCMS (5-95AB/1.5분): RT = 1.025분, 459.3 = [M+H]+, ESI+는 목적하는 생성물(Bn 보호기를 포함함)의 29.3%를 나타냈고, RT = 0.856분, 369.2 = [M+H]+, ESI+는 목적하는 생성물의 7%를 나타냈다. 혼합물에 1 mol HCl을 0℃에서 조심스럽게 희석한 다음, 포화 NaHCO3 수용액으로 pH 7로 조정하였다. 혼합물을 에틸 아세테이트(100 mL * 3)로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 Na2SO4로 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 분취-HPLC(컬럼, [Phenomenex luna C18 250 * 50 mm * 10 um]; 이동상: [ACN] 및 [H2O] (조건: [물 (0.225% FA)-ACN], B%: 65%-90%; 검출기, UV 254 nm. RT: [22분])을 통해 [(2S,6R)-6-(1-시클로프로필피라졸-4-일)-2-(히드록시메틸)-3,6-디히드로-2H-피란-4-일] 트리플루오로메탄설포네이트(270 mg, 0.711 mmol, 13.53% 수율)를 녹색 고체로서 수득하였다. [M+H]+= 369.0; 순도 = 97% (220 nm). 유지 시간 = 0.848분.
단계 4: 1,4-디옥산(5 mL) 중 [(2S,6R)-6-(1-시클로프로필피라졸-4-일)-2-(히드록시메틸)-3,6-디히드로-2H-피란-4-일] 트리플루오로메탄설포네이트(1.00 당량, 260 mg, 0.706 mmol), B2pin2 (1.50 당량, 269 mg, 1.06 mmol) 및 칼륨 아세테이트(4.00 당량, 277 mg, 2.82 mmol)의 용액에 Pd(dppf)Cl2·CH2Cl2(0.0300 당량, 17 mg, 0.0212 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 N2로 3회 퍼징하고, N2 분위기 하에 80℃에서 4시간 동안 가열하였다. LCMS (5-95AB/1.5분): RT = 0.835분, 347.1 = [M+H]+, ESI+는 목적하는 생성물의 73.8%를 나타냈다. 반응 혼합물을 에틸 아세테이트(50 mL * 3)로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 Na2SO4로 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 분취-TLC(PE: EtOAc=0:1, Rf=0.35)로 정제하여 [(2S,6R)-6-(1-시클로프로필피라졸-4-일)-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)-3,6-디히드로-2H-피란-2-일]메탄올 (150 mg,0.433 mmol, 61.37% 수율)을 적갈색 고형분으로서 수득하였다. [M+H]+= 347.2; 순도 = 100% (220 nm). 유지 시간 = 0.831분.
단계 5: 1,4-디옥산(2.5mL) 및 물(0.5000mL) 중 [(2S,6R)-6-(1-시클로프로필피라졸-4-일)-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)-3,6-디히드로-2H-피란-2-일]메탄올 (1.00 당량, 140 mg, 0.404 mmol) 및 2-클로로-4-(2,4-디플루오로페닐)-6,7-디메틸-프테리딘(1.20 당량, 149 mg, 0.485 mmol)의 용액에 K2CO3(2.50 당량, 140 mg, 1.01 mmol) 및 Pd(dppf)Cl2·CH2Cl2(0.1000 당량, 5.2 mg, 0.0404 mmol)를 N2 분위기에서 첨가한 다음, 혼합물을 80℃에서 20분 동안 교반하였다. LCMS (5-95AB/1.5분): RT = 0.894분, 491.2 = [M+H]+, ESI+는 목적하는 생성물의 64.7%를 나타냈다. 반응 혼합물을 에틸 아세테이트(100 mL * 3)로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 Na2SO4로 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 미정제 생성물을 100% 에틸 아세테이트를 사용하는 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하여 [(2S,6R)-6-(1-시클로프로필피라졸-4-일)-4-[4-(2,4-디플루오로페닐)-6,7-디메틸-프테리딘-2-일]-3,6-디히드로-2H-피란-2-일]메탄올 (100 mg, 0.165 mmol, 40.84% 수율)을 적갈색 고형분으로서 수득하였다. [M+H]+= 491.2; 순도 = 81% (220 nm). 유지 시간 = 0.897분.
단계 6: 에탄올(10 mL) 중 [(2S,6R)-6-(1-시클로프로필피라졸-4-일)-4-[4-(2,4-디플루오로페닐)-6,7-디메틸-프테리딘-2-일]-3,6-디히드로-2H-피란-2-일]메탄올(1.00 당량, 90 mg, 0.183 mmol)의 용액에 H2(15 psi) 분위기에서 PtO2 (1.00 당량, 42 mg, 0.183 mmol)를 첨가하고, H2 (15 psi) 하에 25℃에서 16시간 동안 교반하였다. LCMS (5-95AB/1.5분): RT = 0.775분, 497.2 = [M+H]+, ESI+는 목적하는 생성물의 98%를 나타냈다. 반응 혼합물을 셀라이트 패드를 통해 여과하였다. 필터 케이크를 DCM(20 mL)으로 세척하였다. 유기상을 감압 하에 농축시켜 [(2S,4R,6R)-6-(1-시클로프로필피라졸-4-일)-4-[4-(2,4-디플루오로페닐)-6,7-디메틸-5,6,7,8-테트라히드로프테리딘-2-일]테트라히드로피란-2-일]메탄올(100 mg, 0.197 mmol, 107.56% 수율)을 적갈색 고형분으로서 수득하였다. [M+H]+= 497.2; 순도 = 98% (220 nm). 유지 시간 = 0.775분.
단계 7: DCM(10 mL) 중 [(2S,4R,6R)-6-(1-시클로프로필피라졸-4-일)-4-[4-(2,4-디플루오로페닐)-6,7-디메틸-5,6,7,8-테트라히드로프테리딘-2-일]테트라히드로피란-2-일]메탄올 (1.00 당량, 90 mg, 0.181 mmol)의 용액에 MnO2(10.0 당량, 158 mg, 1.81 mmol)를 첨가하고, 혼합물을 30℃에서 16시간 동안 교반하였다. LCMS (5-95AB/1.5분): RT = 0.872분, 493.2 = [M+H]+, ESI+는 목적하는 생성물의 92%를 나타냈다. 반응 혼합물을 셀라이트 패드를 통해 여과하였다. 필터 케이크를 DCM(10 mL)으로 세척하였다. 유기상을 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 분취-HPLC(컬럼, 물 Xbridge 150 * 25mm * 5um; 이동상: [ACN] 및 [H2O] (조건: 물 ( NH4HCO3)-ACN , B%: 32%-62%; 검출기, UV 254 nm. RT: [8분])로 정제하였다. 정제된 용액을 동결건조시켜 생성물 [(2S,4R,6R)-6-(1-시클로프로필피라졸-4-일)-4-[4-(2,4-디플루오로페닐)-6,7-디메틸-프테리딘-2-일]테트라히드로피란-2-일]메탄올 (3.9 mg, 0.00780 mmol, 4.30% 수율)을 백색 고형분으로서 수득하였다. (5-95AB/1.5분): RT = 0.874분, 493.2 = [M+H]+, HPLC RT = 0.874분, 493.2 = [M+H]+, 순도 = 99.2% (220 nm). 유지 시간 = 0.874분. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 7.80 - 7.70 (m, 1H), 7.51 (s, 2H), 7.14 - 6.97 (m, 2H), 4.66 (dd, J = 1.7, 11.4 Hz, 1H), 3.97 - 3.84 (m, 1H), 3.80 - 3.48 (m, 4H), 2.85 (s, 3H), 2.73 (s, 3H), 2.46 (br d, J = 13.3 Hz, 1H), 2.24 - 2.12 (m, 3H), 2.01 - 1.89 (m, 1H), 1.15 - 1.06 (m, 2H), 1.05 - 0.97 (m, 2H). SFC는 단 하나의 피크를 나타냈따. 생성물을 키랄 에폭시드로부터 제조하였으므로, 이는 (2S,4R,6R) 생성물이어야 한다.
화합물 I-1633의 합성
단계 1: MeCN(8 mL) 중 (2R,6S)-2-메틸-4-(p-톨일설포닐)-6-(1H-피라졸-4-일)모르폴린(1.00 당량, 400 mg, 1.24 mmol)의 용액에 K2CO3(2.00 당량, 344 mg, 2.49 mmol) 및 MeI(1.70 당량, 0.13 mL, 2.12 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 60℃에서 12시간 동안 교반하였다. LCMS는 출발 물질이 거의 완전히 소모되었고 목적하는 생성물 질량을 갖는 새로운 피크가 있음을 나타냈다(71.6%, Rt: 0.562분; [M+H]+ = 220 nm에서 336.1). 혼합물을 EtOAc (300 mL)로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켜 미정제 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 실리카 겔을 이용한 컬럼 크로마토그래피(석유 에테르/에틸 아세테이트 = 0:1 내지 3:1, Rf = 0.5로 용리됨)로 정제하여 (2R, 6S)-2-메틸-6-(1-메틸피라졸-4-일)-4-(p-톨일설포닐) 모르폴린(250 mg, 0.745 mmol, 59.89% 수율)을 백색 고형분으로서 수득하였다. (M+H)+ = 336.1; 순도 = 71% (220 nm). 유지 시간 = 0.562분. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 1.15 (d, J=6.13 Hz, 3 H) 2.00 (t, J=10.82 Hz, 1 H) 2.18 (t, J=11.01 Hz, 1 H) 2.41 (s, 3 H) 3.59 (br d, J=11.26 Hz, 1 H) 3.68 (br d, J=11.38 Hz, 1 H) 3.81 (s, 3 H) 4.60 (dd, J=10.51, 2.38 Hz, 1 H) 7.22 (s, 1 H) 7.31 (d, J=8.00 Hz, 2 H) 7.36 (s, 1 H) 7.59 (d, J=8.00 Hz, 2 H).
단계 2: 메탄올(5 mL) 중 (2R, 6S)-2-메틸-6-(1-메틸피라졸-4-일)-4-(p-톨일설포닐) 모르폴린(1.00 당량, 250 mg, 0.745 mmol)의 용액에 Mg(칩)(10.0 당량, 179 mg, 7.45 mmol) 및 Mg(분말)(10.0 당량, 179 mg, 7.45 mmol)을 첨가한 다음, 혼합물을 N2 분위기 하에 80℃에서 12시간 동안 교반하여 백색 용액을 수득하였다. LCMS는 출발 물질이 여전히 남아 있음을 나타냈다. 그런 다음, 반응 혼합물에 Mg(칩)(10.0당량, 179 mg, 7.45 mmol)을 첨가하고, N2 분위기 하에 80℃에서 12시간 동안 교반하였다. LCMS는 출발 물질이 완전히 소모되었고 목적하는 MS를 갖는 새로운 피크가 있음을 나타냈다(80%, Rt: 0.14분, [M+H]+ = 220 nm에서 182.1). 반응 혼합물을 셀라이트로 여과하여 미정제 생성물을 수득하고, 미정제 생성물을 다음 단계에 직접 사용하였다. (M+H)+ = 182.1; 순도 = 85% (220 nm). 유지 시간 = 0.147분.
단계 3: DMSO(4 mL) 중 2-클로로-4-(2, 4-디플루오로페닐)-6, 7-디메틸-프테리딘(1.00 당량, 100 mg, 0.326 mmol) 및 (2R, 6S )-2-메틸-6-(1-메틸피라졸-4-일) 모르폴린(2.00 당량, 118 mg, 0.652 mmol)의 용액에 DIEA(5.00 당량, 0.27 mL, 1.63 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 100℃에서 2시간 동안 교반하였다. LCMS는 출발 물질이 완전히 소모되었고 목적하는 생성물 질량(53%, MS: 452.2 [M+H]+, ESI pos)을 갖는 주요 피크가 있음을 나타냈다. 반응물을 여과하고, 여액을 분취-HPLC(유속: 25 mL/분; 구배: 7분에 걸쳐 44-74% 물(0.1% FA)-ACN; 컬럼: Phenomenex Luna C18 150 * 25 mm * 10 um)로 정제하고, 동결건조시켜 (2R,6S)-4-[4-(2,4-디플루오로페닐)-6,7-디메틸-프테리딘-2-일]-2-메틸-6-(1-메틸피라졸-4-일)모르폴린(29 mg, 0.0632 mmol, 19.38% 수율)을 황색 고형분으로서 수득하였다. (M+H)+ = 452.2; 순도 = 100% (220 nm). 유지 시간 = 0.919분. HPLC: 유지 시간 = 2.255분, 220 nm에서 98.61% 순도. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 1.33 (br d, J=5.75 Hz, 3 H) 2.60 (s, 3 H) 2.72 (s, 3 H) 2.81 - 2.91 (m, 1 H) 3.09 (br t, J=11.82 Hz, 1 H) 3.85 (br s, 1 H) 3.91 (s, 3 H) 4.57 - 4.71 (m, 1 H) 4.91 - 5.19 (m, 2 H) 6.92 - 7.12 (m, 2 H) 7.46 (s, 1 H) 7.56 (s, 1 H) 7.72 (q, J=7.30 Hz, 1 H).
I-1653의 합성
실온에서 무수 메탄올(5 mL) 중 2-[2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)테트라하이드로피란-4-일]-4-(2,4-디플루오로페닐)-7-메틸-프테리딘-(1.00 당량, 100 mg, 0.22 mmol)의 용액에 CAN(1.50 당량, 183 mg, 0.33 mmol)을 나누어 첨가하고, 반응 혼합물을 1시간 동안 교반하였다. 이 시점에서, CAN(0.5당량, 63 mg)을 첨가하고, 생성된 용액을 1시간 동안 교반하였다. LCMS에 의해 반응이 완료된 것으로 판단될 때, 반응 혼합물을 물로 세척하고, 수성층을 EtOAc(3 x 10 mL)로 추출하였다. 합쳐진 유기상을 염수로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 미정제 잔류물을 물 중 35% 내지 80% ACN의 구배를 사용하는 역상 크로마토그래피로 정제한 후, 분취 HPLC(조건: 물 중 65% 내지 0% 10mM 중탄산암모늄 pH = 10.0)로 정제하여 4-(2,4-디플루오로페닐)-6-메톡시-7-메틸-2-[rac-(2R,4S)-2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)테트라히드로피란-4-일]프테리딘을 황색 고형분으로서 수득하였다(26.6 mg, 0.054 mmol, 24% 수율). ESI-MS (m/z+): 479.3 [M+1]+, LC-RT: 1.60분. 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz): δH 7.83 (1H, td, J = 8.4, 6.6 Hz), 7.69 (1H, s), 7.47-7.41 (1H, m), 7.35 (1H, d, J = 0.8 Hz), 7.27 (1H, td, J = 8.5, 2.6 Hz), 4.47 (1H, d, J = 11.1 Hz), 4.06 (1H, dd, J = 11.3, 4.2 Hz), 3.90 (2H, s), 3.69-3.58 (2H, m), 3.40 (1H, t, J = 11.8 Hz), 2.62 (2H, s), 2.26 (1H, d, J = 13.4 Hz), 1.99 (1H, s), 1.92-1.83 (2H, m), 0.90-0.84 (2H, m), 0.98-0.93 (2H, m). 19F NMR (DMSO-d6, 376 MHz): δF -107.2, -107.0.
I-1658의 합성
N2 (g) 하에 화염 건조된 마이크로파 바이알에 2-(2-(1H-피라졸-4-일)테트라히드로-2H-피란-4-일)-4-(2,4-디플루오로페닐)-6,7-디메틸프테리딘(1.0 당량, 60 mg, 0.14 mmol), 2-(트리부틸-λ5-포스파닐리덴)아세토니트릴(CPMB, 2.0 당량, 0.075 mL, 0.284 mmol) 및 2-메톡시에탄올(1.5 당량, 0.017 mL, 0.21 mmol)을 채우고, 1,4-디옥산(1.4 mL)을 격막이 있는 알루미늄 캡으로 바이알을 밀봉하였다. 반응 혼합물을 일정한 마이크로파 하에 30분 동안 조사하고, 반응 온도를 100℃로 제어하였다. 미정제 반응물을 감압 하에 증발 건조시키고, 잔류 물질을 실리카 겔 플래쉬 크로마토그래피(Sfar Biotage® 컬럼 24g, DCM 중 40% EtOAc 내지 100% EtOAc의 구배를 사용함) 및 역상 크로마토그래피(Biotage® C18 듀오 컬럼 12g, 물 중 35% CH3CN 내지 물 중 80% CH3CN의 구배를 사용함)로 정제하여 고형분을 수득하고, 이를 MeOH 및 10mM 포름산암모늄 수용액(50-100%)을 사용하여 분취 HPLC(Gemini® 5 um NX-C18 110 Å, 100 x 30 mm 컬럼)로 추가로 정제하여 4-(2,4-디플루오로페닐)-2-(2-(1-(2-메톡시에틸)-1H-피라졸-4-일)테트라히드로-2H-피란-4-일)-6,7-디메틸프테리딘(29 mg, 0.06 mmol, 42 % 수율)을 단일 부분 입체이성질체(시스)로서 수득하였다. ESI-MS (m/z+): 481.4 [M+1]+, LC-RT: 1.45분. 1H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz): δH 7.77-7.83 (1H, m), 7.67 (1H, s), 7.47 (1H, td, J = 9.9, 2.5 Hz), 7.40 (1H, s), 7.31 (1H, td, J = 8.5, 2.5 Hz), 4.53 (1H, dd, J = 11.3, 2.0 Hz), 4.19 (2H, t, J = 5.4 Hz), 4.10 (1H, dd, J = 11.3, 4.2 Hz), 3.71 (1H, t, J = 11.6 Hz), 3.64 (2H, t, J = 5.4 Hz), 3.43-3.51 (1H, m), 3.20 (3H, s), 2.77 (3H, s), 2.65 (3H, s), 2.31 (1H, d, J = 13.0 Hz), 2.06 (1H, d, J = 13.1 Hz), 1.88-1.97 (2H, m). 19F NMR (DMSO-d 6, 376 MHz): δF -107.1, -107.7.
화합물 I-1668의 합성
단계 1: 펜탄(200 mL) 중 1,1-디브로모-2,2-비스(클로로메틸)시클로프로판(1.00 당량, 100.00 g, 337 mmol)의 혼합물을 N2로 3회 탈기하고 -50℃로 냉각시켰다. 혼합물에 MeLi(2.37 당량, 500 mL, 800 mmol)를 -50℃ 미만에서 서서히 첨가하였다. 그런 다음, 혼합물을 0℃로 가온시키고 3시간 동안 교반하였다. 혼합물을 얼음물에 첨가하고 DCM(150 mL * 3)으로 추출하였다. 유기상을 진공 하에 20℃에서 증류시켜 DCM/펜탄/디에틸 에테르(1100 mL) 중 용액 트리시클로[1.1.1.01,3]펜탄(11.00 g,166 mmol, 49.40% 수율)을 수득하였다. 용액을 추가 정제 없이 다음 단계에 직접 사용하였다.
단계 2: 1-프로판올(500 mL) 중 트리스(2,2,6,6-테트라메틸-3,5-헵탄디오나토)망간(III)(0.0500 당량, 2287 mg, 3.78 mmol)의 혼합물을 0℃로 냉각시켰다. 그런 다음, DCM(500 mL) 중 PHSiH3(1.00 당량, 8186 mg, 75.6 mmol) 및 트리시클로[1.1.1.01,3]펜탄(1.00 당량, 5000 mg, 75.6 mmol)의 용액을 0℃에서 첨가하였다. 다음으로, Et2O/펜탄/DCM (100 mL) 중 터트-부틸-N-터트-부톡시카르보닐이미노카르바메이트(1.50 당량, 26126 mg, 113 mmol)를 0℃에서 첨가하였다. 혼합물을 0℃에서 3시간 동안 교반하였다. 혼합물을 30 mL의 물을 첨가하고 진공 하에 농축시켜 미정제물을 수득하였다. 미정제물을 플래쉬 컬럼(PE 내지 PE 중 5% EtOAc; 세륨 (IV)-포스포몰리브드산 염색, PE:EtOAc=5:1, 목적하는 생성물 Rf=0.4)으로 정제하여 터트-부틸 N-(1-바이시클로[1.1.1]펜타닐)-N-(터트-부톡시카르보닐아미노)카르바메이트(7.90 g, 26.5 mmol, 35.00% 수율)를 회백색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 2.11 - 1.93 (m, 6H), 1.56 - 1.39 (m, 20H).
단계 3: HCl/EtOAc(11.9당량, 40 mL, 160 mmol) 중 터트-부틸 N-(1-바이시클로[1.1.1]펜타닐)-N-(터트-부톡시카르보닐아미노)카르바메이트(1.00당량, 4000 mg, 13.4 mmol)의 혼합물을 20℃에서 12시간 동안 교반하였다. 혼합물을 여과하고, 필터 케이크를 진공 하에 농축시켜 1-바이시클로[1.1.1]펜타닐하이드라진;디히드로클로라이드(2000 mg, 11.7 mmol, 87.21% 수율)를 백색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ = 2.45 (s, 1H), 1.82 (s, 6H).
단계 4: 에탄올(5 mL) 중 1-바이시클로[1.1.1]펜타닐히드라진;디히드로클로라이드(1.00 당량, 500 mg, 2.92 mmol)의 용액을 0℃로 냉각시키고, 에탄올(5 mL) 중 에틸 2-포르밀-3-옥소-프로파노에이트(1.00 당량, 421 mg, 2.92 mmol)를 반응 혼합물에 첨가하였다. 이어서 혼합물을 25℃에서 2시간 동안 교반하였다. LCMS는 반응을 모니터링하였고, 출발 물질을 완전히 소모하였고, 목적하는 생성물의 75%가 검출되었다(75% 순도, Rt=0.822분, [M+H]+= 220 nm에서 207.2). 혼합물을 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 분취-HPLC(0.5% FA 조건)로 정제하고, EA(100 mL * 3)로 추출하고, 합쳐진 유기층을 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고 감압 하에 농축시켜 에틸 1-(1-바이시클로[1.1.1]펜타닐)피라졸-4-카르복실레이트(350 mg, 1.70 mmol, 58.06% 수율)를 황색 오일로서 수득하였다. LCMS [M+H]+=207.2, 순도 = 100% (220 nm). 유지 시간 = 0.822분. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 7.92 (d, J = 10.3 Hz, 2H), 4.30 (q, J = 7.1 Hz, 2H), 2.66 (s, 1H), 2.33 (s, 6H), 1.35 (t, J = 7.1 Hz, 3H).
단계 5: 혼합물을 15℃에서 4시간 동안 교반하였다. LCMS는 출발 물질이 완전히 소모되었고 목적하는 생성물의 98%가 검출되었음을 나타냈다(98%, RT=0.431분, [M+H]+= 220 nm에서 165.3). 혼합물을 0.2 mL H2O로 급냉시킨 다음, 10 g의 Na2SO4 및 5 mL의 EA를 반응에 첨가하고, 혼합물을 15℃에서 30분 동안 교반하였다. 이후, 혼합물을 여과하고 필터 케이크를 EA(5 mL * 3)로 세척하고, 합쳐진 유기층을 감압 하에 농축시켜 미정제 [1-(1-바이시클로[1.1.1]펜타닐)피라졸-4-일]메탄올(300 mg, 1.83 mmol, 107.66% 수율)을 무색 오일로서 수득하고, 잔류물을 직접 사용하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 7.54 (s, 1H), 7.45 (s, 1H), 4.60 (s, 2H), 2.62 (s, 1H), 2.30 (s, 7H).
단계 6: 건조 DCE(25 mL) 중 [1-(1-바이시클로[1.1.1]펜타닐)피라졸-4-일]메탄올(1.00 당량, 280 mg, 1.71 mmol)의 용액에 MnO2(20.0 당량, 2965 mg, 34.1 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 55℃에서 12시간 동안 교반하였다. LCMS는 출발 물질이 완전히 소모되었음을 나타냈고, 목적하는 생성물을 갖는 하나의 주요 피크가 검출되었다(75%, Rt=0.583분, [M+H]+= 220 nm에서 163.1). 혼합물을 여과하고, 필터 케이크를 EA(20 mL * 3)로 세척하고, 합쳐진 유기층을 감압 하에 농축시켜 1-(1-바이시클로[1.1.1]펜타닐)피라졸-4-카르브알데히드(195 mg, 1.20 mmol, 70.51% 수율)를 황색 오일로서 수득하고, 잔류물을 다음 단계에 직접 사용하였다.
단계 7: 교반 혼합물 혼합물 1-(1-바이시클로[1.1.1]펜타닐)피라졸-4-카르브알데히드(1.00 당량, 170 mg, 1.05 mmol) 및 3-부틴-1-올(1.00 당량, 0.080 mL, 1.05 mmol)에 DCE(5 mL)를 첨가하고, 질소 분위기 하 -10℃에서 30분 동안 교반하였다. 혼합물에 TfOH(3.00 당량, 0.28 mL, 3.14 mmol)를 질소 분위기 하에 -10℃에서 적가하고, 혼합물을 -10℃에서 1시간 동안 교반하였다. 그런 다음, 혼합물을 15℃에서 16시간 동안 교반하였다. LCMS는 출발 물질이 완전히 소모되었음을 나타냈고, 목적하는 생성물을 갖는 하나의 주요 피크가 검출되었다(86%, RT=0.941분, [M+H]+= 220 nm에서 365.2). 혼합물을 50 mL H2O로 급냉시키고, EA(100 mL * 3)로 추출하고, 합쳐진 유기층을 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고 감압 하에 농축시켜 [6-[1-(1-바이시클로[1.1.1]펜타닐)피라졸-4-일]-3,6-디히드로-2H-피란-4-일] 트리플루오로메탄설포네이트(320 mg, 0.878 mmol, 83.80% 수율)를 적색 오일로서 수득하고, 잔류물을 다음 단계에 직접 사용하였다.
단계 8: 1,4-디옥산(3 mL) 중 [6-[1-(1-바이시클로[1.1.1]펜타닐)피라졸-4-일]-3,6-디히드로-2H-피란-4-일] 트리플루오로메탄설포네이트(1.00 당량, 270 mg, 0.741 mmol), B2pin2(1.50 당량, 282 mg, 1.11 mmol) 및 AcOK(4.00 당량, 290 mg, 2.96 mmol)의 용액에 N2 분위기 하에 Pd(dppf)Cl2(0.100 당량, 61 mg, 0.0741 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 N2 하에 90℃에서 4시간 동안 가열하였다. LCMS는 출발 물질이 완전히 소모되었고 22% 목적하는 생성물이 검출되었음을 나타냈다(22%, Rt=0.917분, [M+H]+= 220 nm에서 343.2). 반응 혼합물을 50 mL H2O로 급냉시키고, EA(50 mL * 3)로 추출하고, 합쳐진 유기층을 무수 Na2SO4로 건조시키고, 여과하고 감압 하에 농축시켜 수득하였다. 잔류물을 분취-HPLC(Phenomenex luna C18 150 * 25mm * 10um, 물(FA)-ACN)로 정제한 다음, EA(20 mL * 3)로 추출하고, 합쳐진 유기층을 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고 감압 하에 농축시켜 1-(1-바이시클로[1.1.1]펜타닐)-4-[4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)-3,6-디히드로-2H-피란-6-일]피라졸(60 mg, 0.175 mmol, 23.66% 수율)을 연황색 오일로서 수득하였다. [M+H]+=343.1; 순도 = 84% (220 nm). 유지 시간 = 0.915분. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 7.51 (s, 1H), 7.39 (s, 1H), 6.57 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 5.18 (br d, J = 2.2 Hz, 1H), 3.95 - 3.86 (m, 1H), 3.72 (ddd, J = 4.4, 7.4, 11.5 Hz, 1H), 2.59 (s, 1H), 2.27 (s, 8H), 1.28 (s, 13H).
단계 9: 1,4-디옥산(2 mL) 및 물(0.2 mL) 중 2-클로로-4-(2,4-디플루오로페닐)-6,7-디메틸-프테리딘(1.00 당량, 42 mg, 0.137 mmol), 1-(1-바이시클로[1.1.1]펜타닐)-4-[4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)-3,6-디히드로-2H-피란-6-일]피라졸(1.15 당량, 54 mg, 0.157 mmol) 및 K2CO3 (3.00 당량, 35 mg, 0.411 mmol)의 용액에 Pd(dppf)Cl2·DCM(0.120 당량, 12 mg, 0.0164 mmol)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 N2 분위기 하에 80℃에서 12시간 동안 교반하였다. LCMS는 출발 물질이 완전히 소모되었고 목적하는 생성물의 60%가 검출되었음을 나타냈다(60%, Rt=0.998분, [M+H]+= 220 nm에서 487.3). 반응물을 5 mL H2O로 급냉시키고, EA(20 mL * 3)로 추출하고, 합쳐진 유기층을 무수 Na2SO4로 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(PE:EA=1:0 내지 1:1, PE:EA=1:1, 목적하는 생성물 Rf=0.3)로 정제하여 2-[6-[1-(1-바이시클로[1.1.1]펜타닐)피라졸-4-일]-3,6-디히드로-2H-피란-4-일]-4-(2,4-디플루오로페닐)-6,7-디메틸-프테리딘(40 mg, 0.0822 mmol, 60.04% 수율)을 무색 오일로서 수득하였다, [M+H]+=487.3; 순도 =93% (220 nm). 유지 시간 = 0.998분.
단계 10: 에탄올(2 mL) 중 2-[(6R)-6-[1-(1-바이시클로[1.1.1]펜타닐)피라졸-4-일]-3,6-디히드로-2H-피란-4-일]-4-(2,4-디플루오로페닐)-6,7-디메틸-프테리딘(1.00 당량, 40 mg, 0.0822 mmol)의 용액에 PtO2(1.15 당량, 10 mg, 0.0943 mmol)를 N2 분위기 하에 첨가하였다. 혼합물을 H2(15 psi)로 3회 퍼징한 다음, 혼합물을 H2 (15 psi) 분위기 하에 30℃에서 12시간 동안 교반하였다. LCMS는 출발 물질이 완전히 소모되었고 목적하는 생성물을 갖는 하나의 주요 피크가 검출되었음을 나타냈다(91%, Rt=0.893분 [M+H]+= 220 nm에서 493.4). 반응 혼합물을 여과하고 감압 하에 농축시켜 2-[(2R)-2-[1-(1-바이시클로[1.1.1]펜타닐)피라졸-4-일]테트라히드로피란-4-일]-4-(2,4-디플루오로페닐)-6,7-디메틸-5,6,7,8-테트라히드로프테리딘(30 mg, 0.0609 mmol, 74.08% 수율)을 황색 고형분으로서 수득하고, 잔류물을 다음 단계에 직접 사용하였다.
단계 11: 건조 DCE(2 mL) 중 2-[(2R)-2-[1-(1-바이시클로[1.1.1]펜타닐)피라졸-4-일]테트라히드로피란-4-일]-4-(2,4-디플루오로페닐)-6,7-디메틸-5,6,7,8-테트라히드로프테리딘(1.00 당량, 30 mg, 0.0609 mmol)의 용액에 MnO2(20.0 당량, 106 mg, 1.22 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 30℃에서 12시간 동안 교반하였다. LCMS는 출발 물질이 완전히 소모되었고 목적하는 생성물을 갖는 하나의 주요 피크가 검출되었음을 나타냈다(83%, Rt=0.969분, [M+H]+= 220 nm에서 489.4). 혼합물을 여과하고, 필터 케이크를 MeOH(10 mL * 3)로 세척하고, 합쳐진 유기층을 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 분취-HPLC(Phenomenex C18 75 * 30mm * 3um, 물(FA)-ACN)로 정제하고 동결건조시켜 2-[(2R,4S)-2-[1-(1-바이시클로[1.1.1]펜타닐)피라졸-4-일]테트라하이드로피란-4-일]-4-(2,4-디플루오로페닐)-6,7-디메틸-프테리딘(5.3 mg, 0.0107 mmol, 17.50% 수율)을 백색 고형분으로서 수득하였다 [M+H]+= 489.3; 순도 = 98.4%(220 nm). 유지 시간 = 0.983분. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 7.81 - 7.72 (m, 1H), 7.56 (s, 1H), 7.51 (s, 1H), 7.10 (qd, J = 2.9, 8.8 Hz, 1H), 7.01 (dt, J = 2.3, 9.4 Hz, 1H), 4.58 (dd, J = 1.7, 11.4 Hz, 1H), 4.28 (td, J = 3.0, 11.2 Hz, 1H), 3.91 - 3.77 (m, 1H), 3.63 - 3.44 (m, 1H), 2.85 (s, 3H), 2.74 (s, 3H), 2.60 (s, 1H), 2.46 (br d, J = 13.0 Hz, 1H), 2.28 (s, 6H), 2.26 - 2.15 (m, 3H). SFC는 2개의 피크(비율은 1:1임) 시스-혼합을 나타냈다.
화합물 I-1673 및 I-1674의 합성
단계 1: THF(50 mL) 및 t-BuOH(50 mL)의 혼합물을 0℃로 냉각시키고, 시클로프로판-카르브알데히드(1.00당량, 5.4 mL, 71.3 mmol) 및 니트로메탄(1.50당량, 5.8 mL, 107 mmol)을 반응 혼합물에 첨가하였다. 5분 동안 교반한 후, t-BuOK(0.200 당량, 14 mL, 14.3 mmol)(THF 중)을 서서히 첨가하였다. 첨가 동안, 백색 고형분이 형성되었다. 혼합물을 20℃로 가온시킨 다음, 20℃에서 12시간 동안 교반하였다. TLC(PE: EA=10:1/V: V, 2, 4-디니트로벤젠, 출발 물질 Rf=0.5)는 반응을 모니터링하였고, 출발 물질을 완전히 소모하였고, 하나의 새로운 피크(PE:EA=10:1 / V : V, 목적하는 생성물 Rf=0.7)가 검출되었다. 혼합물을 150 mL H2O로 급냉시키고, EA(150 mL * 3)로 추출하고, 합쳐진 유기층을 무수 Na2SO4로 건조시키고, 여과하고 감압 하에 농축시켜 1-시클로프로필-2-니트로-에탄올(7.20 g, 54.9 mmol, 76.97% 수율)을 무색 오일로서 수득하였다, 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 4.57 - 4.52 (m, 2H), 3.68 (dt, J = 4.3, 7.9 Hz, 1H), 2.40 (br s, 1H), 0.96 (tq, J = 4.9, 8.2 Hz, 1H), 0.73 - 0.57 (m, 2H), 0.52 - 0.43 (m, 1H), 0.41 - 0.30 (m, 1H).
단계 2: 메탄올(72 mL) 중 1-시클로프로필-2-니트로-에탄올(1.00 당량, 7.20 g, 54.9 mmol)의 혼합물에 Pd/C(0.0124 당량, 0.72 g, 0.679 mmol)를 25℃에서 첨가하였다. 혼합물을 H2로 여러 번 퍼징한 다음, 반응 혼합물을 H2 (40 Psi) 분위기 하에 60℃에서 12시간 동안 교반하였다. 혼합물을 여과하고, 필터 케이크를 MeOH(50 mL * 3)로 세척하고, 합쳐진 유기층을 감압 하에 농축시켜 2-아미노-1-시클로프로필-에탄올(4.40 g, 43.5 mmol, 79.22% 수율)을 무색 오일로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 2.94 (br dd, J = 3.2, 12.3 Hz, 1H), 2.89 - 2.81 (m, 1H), 2.72 (br dd, J = 7.9, 12.3 Hz, 1H), 0.84 (br dd, J = 4.2, 7.7 Hz, 1H), 0.61 - 0.45 (m, 2H), 0.35 (br d, J = 8.6 Hz, 1H), 0.27 - 0.16 (m, 1H).
단계 3: DCM(10 mL) 중 2-아미노-1-시클로프로필-에탄올(1.00 당량, 1.00 g, 9.89 mmol)의 혼합물에 TEA(1.50 당량, 1498 mg, 14.8 mmol), TsCl(1.10 당량, 2066 mg, 10.9 mmol)을 0℃에서 첨가한 다음, 반응 혼합물을 20℃에서 12시간 동안 교반하였다. LCMS는 출발 물질이 완전히 소모되었고 하나의 주 피크(69%, Rt=0.798분; [M+H]+ = 220 nm에서 238.1)가 검출되었음을 나타냈다. 반응 혼합물을 20℃에서 물 10 mL를 첨가하여 급냉시킨 다음, EtOAc 20 mL로 희석하고, EtOAc 60 mL(20 mL * 3)로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 수성 포화 NaCl 10 mL(10 mL)로 세척하고, [무수 Na2SO4]로 건조시키고, 여과하고 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 플래쉬 실리카 겔 크로마토그래피(ISCO; 40 g SepaFlash Silica Flash Column, 0-50% 에틸 아세테이트/석유 에테르 구배 @ 40 mL/분으로 용리, PE:EtOAc=3:1, 목적하는 생성물 Rf=0.6)로 정제하여 N-(2-시클로프로필-2-히드록시-에틸)-4-메틸-벤젠설폰아미드(1.40 g, 5.48 mmol, 55.46% 수율)를 무색 오일로서 수득하였다, [M+H]+=238.1; 순도 = 98% (220 nm). 유지 시간 = 0.810분. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 7.76 (d, J = 8.3 Hz, 2H), 7.33 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 4.99 - 4.84 (m, 1H), 3.28 - 3.15 (m, 1H), 3.00 - 2.89 (m, 2H), 2.44 (s, 3H), 0.85 (dq, J = 4.3, 8.1 Hz, 1H), 0.56 - 0.48 (m, 2H), 0.35 - 0.11 (m, 2H).
단계 4: 아세톤(60 mL) 중 2-클로로-1-[1-(2-트리메틸실릴에톡시메틸)피라졸-4-일]에타논(1.00 당량, 1507 mg, 5.48 mmol) 및 N-(2-시클로프로필-2-히드록시-에틸)-4-메틸-벤젠설폰아미드(1.00 당량, 1400 mg, 5.48 mmol)의 용액에 K2CO3(3.00 당량, 2273 mg, 16.4 mmol) 및 KI(1.00 당량, 910 mg, 5.48 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 25℃에서 2시간 동안 교반하였다. LCMS는 출발 물질이 남아 있음을 나타냈다. 혼합물을 30℃에서 다른 12시간 동안 교반하였다. LCMS는 목적하는 생성물의 39%가 검출되었음을 나타냈다(39%, Rt= 1.018분, [M+H-H2O]+ = 220nm에서 476.3). 반응 혼합물을 EtOAc(50 * 3 mL)와 물(50 * 3 mL) 사이에서 분리시켰다. 유기층을 염수로 세척하고, Na2SO4로 건조시켰다. 용액을 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 미정제 생성물을 실리카 겔을 이용한 컬럼 크로마토그래피(석유 에테르/에틸 아세테이트 = 100:1 내지 1:1, PE:EA = 1:1, 목적하는 생성물 Rf=0.3으로 용리됨)로 정제하여 미정제 생성물을 수득하였다. 미정제 생성물을 분취-HPLC(0.5% FA 조건)로 다시 정제한 다음, EA(150 mL * 3)로 추출하고, 합쳐진 유기층을 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고 감압 하에 농축시켜 N-(2-시클로프로필-2-히드록시-에틸)-4-메틸-N-[2-옥소-2-[1-(2-트리메틸실릴에톡시메틸)피라졸-4-일]에틸]벤젠설폰아미드(880 mg, 1.07 mmol, 19.51% 수율)를 무색 오일로서 수득하고, LCMS로 확인하였다: [M+H]+=476.3 ; 순도 = 59% (220 nm). 유지 시간 = 0.810분. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 8.16 (s, 1H), 7.98 (s, 1H), 7.76 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.69 - 7.55 (m, 2H), 7.37 - 7.30 (m, 2H), 5.46 (s, 1H), 5.40 - 5.36 (m, 1H), 4.71 - 4.45 (m, 1H), 3.83 - 3.71 (m, 1H), 3.67 - 3.52 (m, 3H), 3.48 - 3.24 (m, 2H), 3.13 - 2.99 (m, 1H), 2.47 - 2.42 (m, 3H), 1.00 - 0.87 (m, 2H), 0.82 - 0.71 (m, 1H), 0.65 - 0.40 (m, 3H), 0.39 - 0.30 (m, 1H), 0.22 - 0.13 (m, 1H), 0.03 - -0.04 (m, 10H).
단계 5: DCM(20 mL) 중 N-(2-시클로프로필-2-히드록시-에틸)-4-메틸-N-[2-옥소-2-[1-(2-트리메틸실릴에톡시메틸)피라졸-4-일]에틸]벤젠설폰아미드(1.00 당량, 800 mg, 1.62 mmol) 및 TES (10.0 당량, 5.1 mL, 16.2 mmol)의 용액에 TMSOTf(10.0당량, 2.9 mL, 16.2 mmol)를 0℃에서 첨가하고, 혼합물을 30℃에서 12시간 동안 교반하였다. LCMS는 출발 물질이 완전히 소모되었고 목적하는 생성물의 98%가 검출되었음을 나타냈다(98%, Rt =0.898분, [M+H]+ = 220 nm에서 348.2). 잔류물을 DCM(100 * 2 mL)과 물(30 mL) 사이에서 분리시켰다. 분리된 유기층을 Na2SO4 상에서 건조시키고 증발 건조시켰다. 미정제 생성물을 석유 에테르/에틸 아세테이트 = 1 : 0 내지 0 : 1(석유 에테르/에틸 아세테이트=1:1, 목적하는 생성물 Rf=0.2)로 용리된 실리카 겔 상의 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 2-시클로프로필-4-(p-톨일설포닐)-6-(1H-피라졸-4-일)모르폴린(660 mg, 1.90 mmol, 117.23% 수율)을 백색 고형분으로서 수득하고, 1H NMR로 확인하였다: (400 MHz, CDCl3) δ = 8.22 - 7.71 (m, 2H), 7.65 (br d, J = 7.6 Hz, 2H), 7.37 (br d, J = 7.4 Hz, 2H), 4.78 - 4.56 (m, 1H), 3.84 - 3.65 (m, 2H), 3.04 (br d, J = 7.5 Hz, 1H), 2.46 (s, 3H), 2.31 - 2.15 (m, 2H), 0.81 (br d, J = 3.0 Hz, 1H), 0.57 (br d, J = 6.1 Hz, 2H), 0.47 - 0.26 (m, 2H)).단계 6: THF(8 mL) 중 (2R,6S)-2-시클로프로필-4-(p-톨일설포닐)-6-(1H-피라졸-4-일)모르폴린(1.00 당량, 400 mg, 1.15 mmol)의 용액에 NaH(1.10 당량, 0.00051 mL, 1.27 mmol)를 0℃에서 첨가한 다음, 혼합물을 25℃에서 0.5시간 동안 교반하였다. THF(1 mL) 중 MeI(1.10 당량, 180 mg, 1.27 mmol)를 반응 혼합물에 첨가한 다음, 혼합물을 25℃에서 12시간 동안 교반하였다. LCMS는 출발 물질이 완전히 소모되었고 목적하는 생성물을 갖는 하나의 주요 피크가 검출되었음을 나타냈다(33%, Rt=1.006분, [M+H]+= 220 nm에서 362.3). 혼합물을 20 mL 포화 NH4Cl로 급냉시키고, EA(100 mL * 3)로 추출하고, 합쳐진 유기층을 무수 Na2SO4로 건조시키고, 여과하고 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피(PE:EA=1:0 내지 0:1, PE:EA=0:1, 목적하는 생성물 Rf=0.3)로 정제하여 (2R,6S)-2-시클로프로필-6-(1-메틸피라졸-4-일)-4-(p-톨일설포닐)모르폴린(290 mg, 0.802 mmol, 69.69% 수율)을 무색 오일로서 수득하였다. LCMS: [M+H]+=476.3 ; 순도 = 98% (220 nm). 유지 시간 = 0.903분. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 7.65 (d, J = 8.3 Hz, 2H), 7.42 - 7.31 (m, 4H), 4.57 (dd, J = 2.5, 10.5 Hz, 1H), 3.86 (s, 3H), 3.78 - 3.63 (m, 2H), 3.00 (ddd, J = 2.5, 8.2, 10.4 Hz, 1H), 2.46 (s, 3H), 2.28 - 2.18 (m, 2H), 0.86 - 0.73 (m, 1H), 0.63 - 0.49 (m, 2H), 0.46 - 0.27 (m, 2H).
단계 7: 메탄올(16 mL) 중 (2R,6S)-2-시클로프로필-6-(1-메틸피라졸-4-일)-4-(p-톨일설포닐)모르폴린(1.00 당량, 290 mg, 0.802 mmol)의 용액에 Mg(분말)(15.6 당량, 300 mg, 12.5 mmol) 및 Mg(칩)(15.6 당량, 300 mg, 12.5 mmol)을 25℃에서 첨가한 다음, 혼합물을 80℃에서 16시간 동안 교반하였다. LCMS는 14%의 출발 물질이 남아 있고 80%의 목적하는 생성물이 검출되었음을 나타냈다(14%, Rt=0.244분, [M+H]+ = 220 nm에서 208.3). Mg(칩)(7.79 당량, 150 mg, 6.25 mmol)를 반응에 첨가한 다음, 혼합물을 80℃에서 12시간 동안 추가로 교반하였다. LCMS는 목적하는 생성물의 97%가 검출되었음을 나타냈다(97%, Rt=0.244분, [M+H]+= 220 nm에서 208.3). 혼합물을 여과하고, 필터 케이크를 MeOH(30 mL * 3)로 세척하고, 합쳐진 유기층을 감압 하에 농축시켜 (2R,6S)-2-시클로프로필-6-(1-메틸피라졸-4-일)모르폴린(560 mg, 2.70 mmol, 336.75% 수율)을 백색 고형분으로서 수득하고, 생성물을 다음 단계에 직접 사용하였다.
단계 8: DMSO(6 mL) 중 (2R,6S)-2-시클로프로필-6-(1-메틸피라졸-4-일)모르폴린(2.37 당량, 480 mg, 2.32 mmol)의 용액에 2-클로로-4-(2,4-디플루오로페닐)-6,7-디메틸-프테리딘(1.00 당량, 300 mg, 0.978 mmol) 및 DIEA(3.00 당량, 0.51 mL, 2.93 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 100℃에서 1시간 동안 교반하였다. LCMS는 출발 물질이 완전히 소모되었고 목적하는 생성물의 70%가 검출되었음을 나타냈다(70%, Rt=0.985분, [M+H]+ = 220 nm에서 478.3). 혼합물을 100 mL H2O로 급냉시키고, EA(150 mL * 3)로 추출하고, 합쳐진 유기층을 무수 Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고 감압 하에 농축시켜 (2R,6S)-2-시클로프로필-4-[4-(2,4-디플루오로페닐)-6,7-디메틸-프테리딘-2-일]-6-(1-메틸피라졸-4-일)모르폴린(250 mg,0.524 mmol, 53.52% 수율)을 적색 고형분으로서 수득하였다, LCMS, [M+H]+=478.3 ; 순도 = 96% (220 nm). 유지 시간 = 0.998분. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 7.72 (q, J = 7.8 Hz, 1H), 7.55 (s, 1H), 7.46 (s, 1H), 7.05 (br t, J = 7.9 Hz, 1H), 6.98 (br t, J = 9.4 Hz, 1H), 5.06 (br d, J = 9.8 Hz, 2H), 4.55 (dd, J = 2.1, 10.8 Hz, 1H), 3.90 (s, 3H), 3.13 - 2.96 (m, 3H), 2.72 (s, 3H), 2.60 (s, 3H), 1.06 - 0.93 (m, 1H), 0.67 - 0.54 (m, 2H), 0.52 - 0.34 (m, 2H). SFC는 시스-혼합물로서 2개의 피크(비율은 1:1임)를 나타냈다.
단계 9: 생성물을 SFC("컬럼: Chiralpak IC-3 50×4.6mm I.D., 3um, 이동상: CO2의 경우 상 A , 및 EtOH(0.05%DEA)의 경우 상 B; 구배 용리: CO2 중의 40% EtOH (0.05% DEA), 유속: 3mL/분; 검출기: PDA, 컬럼 온도: 35oC; 배압: 100 Bar ")로 정제하고 동결건조시켜 (2R,6S)-2-시클로프로필-4-[4-(2,4-디플루오로페닐)-6,7-디메틸-프테리딘-2-일]-6-(1-메틸피라졸-4-일)모르폴린(93 mg, 0.192 mmol, 37.16% 수율)을 황색 고형분으로서 수득하였다. 갈색 고형분으로서 (2S,6R)-2-시클로프로필-4-[4-(2,4-디플루오로페닐)-6,7-디메틸-프테리딘-2-일]-6-(1-메틸피라졸-4-일)모르폴린(103 mg, 0.206 mmol, 39.87% 수율), LCMS: [M+H]+=478.3; 순도 = 96% (220 nm). 유지 시간 = 0.956분. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 7.72 (q, J = 7.6 Hz, 1H), 7.56 (s, 1H), 7.46 (s, 1H), 7.05 (br t, J = 8.3 Hz, 1H), 7.01 - 6.92 (m, 1H), 5.19 - 4.97 (m, 2H), 4.55 (dd, J = 2.5, 10.7 Hz, 1H), 3.90 (s, 3H), 3.14 - 2.96 (m, 3H), 2.72 (s, 3H), 2.60 (s, 3H), 1.08 - 0.95 (m, 1H), 0.67 - 0.54 (m, 2H), 0.53 - 0.33 (m, 2H). SFC는 ee 99%를 나타냈다. LCMS: [M+H]+=478.3 ; 순도 = 96% (220 nm). 유지 시간 = 0.964분. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 7.76 - 7.68 (m, 1H), 7.56 (s, 1H), 7.46 (s, 1H), 7.09 - 7.02 (m, 1H), 6.98 (br t, J = 9.5 Hz, 1H), 5.17 - 4.97 (m, 2H), 4.55 (dd, J = 2.5, 10.7 Hz, 1H), 3.90 (s, 3H), 3.17 - 2.96 (m, 3H), 2.72 (s, 3H), 2.60 (s, 3H), 1.09 - 0.95 (m, 1H), 0.66 - 0.54 (m, 2H), 0.51 - 0.31 (m, 2H) SFC는 ee 99.3%를 나타냈다.
화합물 I-1686의 합성
단계 1: DMF(15 mL) 중 (2R,6S)-2-메틸-4-(p-톨일설포닐)-6-(1H-피라졸-4-일)모르폴린(1.00 당량, 450 mg, 1.40 mmol), 2-브로모에탄올(1.70 당량, 0.17 mL, 2.38 mmol) 및 K2CO3(2.00 당량, 387 mg, 2.80 mmol)의 용액을 120℃에서 4시간 동안 교반하였다. LCMS (5-95AB/1.5분): RT = 0.835분, 366.1 = [M+H]+, ESI+는 목적하는 생성물의 85%를 나타냈다. 반응 혼합물을 에틸 아세테이트(50 mL * 2)과 물(80 mL) 사이에서 분리시켰다. 합쳐진 유기층을 Na2SO4로 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 미정제 생성물을 실리카 겔 크로마토그래피(에틸 아세테이트, 목적하는 생성물 Rf = 0.2, 포스포몰리브드산에 의해 제시됨)를 이용한 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 2-(4-((2S,6R)-6-메틸-4-토실모르폴린-2-일)-1H-피라졸-1-일)에탄-1-올(430 mg, 1.18 mmol, 84.04 % 수율)을 연백색 고형분으로서 수득하였다. LCMS: (M+H) + = 366.1; 순도 = 78% (220 nm); 유지 시간 = 0.524분. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 7.64 (d, J = 8.3 Hz, 2H), 7.49 - 7.38 (m, 2H), 7.35 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 4.66 (dd, J = 2.5, 10.5 Hz, 1H), 4.28 - 4.17 (m, 2H), 4.06 - 3.90 (m, 2H), 3.90 - 3.80 (m, 1H), 3.74 (br d, J = 11.4 Hz, 1H), 3.63 (br d, J = 11.4 Hz, 1H), 2.45 (s, 3H), 2.23 (t, J = 11.0 Hz, 1H), 2.08 (s, 1H), 1.21 - 1.15 (m, 3H)
단계 2: 메탄올(8 mL) 중 2-[4-[(2S,6R)-6-메틸-4-(p-톨일설포닐)모르폴린-2-일]피라졸-1-일]에탄올(1.00 당량, 430 mg, 1.18 mmol)의 혼합물에 Mg(10.0 당량, 282 mg, 11.8 mmol)(칩) 및 Mg(10.0 당량, 282 mg, 11.8 mmol)(분말)을 25℃에서 첨가하고, 반응 혼합물을 80℃에서 12시간 동안 교반하였다. LCMS (5-95AB/1.5분): RT = 0.221분, 212.1 = [M+H]+, ESI+는 목적하는 생성물의 42.7%를 나타냈다. 반응 혼합물을 셀라이트를 통해 여과하고, 여과물을 감압 하에 증발시켜 미정제 생성물 2-(4-((2S,6R)-6-메틸모르폴린-2-일)-1H-피라졸-1-일)에탄-1-올(450 mg, 1.17 mmol, 99.74% 수율)을 연황색 고형분으로서 수득하였다. LCMS: (M+H) + = 212.2; 순도 = 80%(220 nm); 유지 시간 = 0.221분. 1H NMR (400 MHz, DMSO) δ = 7.34 (d, J = 7.9 Hz, 1H), 7.11 (d, J = 7.7 Hz, 1H), 4.12 - 3.96 (m, 2H), 3.74 - 3.62 (m, 2H), 3.42 - 3.31 (m, 2H), 3.22 - 3.14 (m, 2H), 2.89 (s, 1H), 2.73 (s, 1H), 2.34 - 2.17 (m, 2H), 1.26 - 0.97 (m, 3H)
단계 3: THF(20 mL) 중 4-메틸벤젠설폰산;2-[4-[(2S,6R)-6-메틸모르폴린-2-일]피라졸-1-일]에탄올(1.20당량, 142 mg, 0.371 mmol) 및 2-클로로-4-(4-클로로-2-플루오로-페닐)-6,7-디메틸-프테리딘(1.00당량, 100 mg, 0.309 mmol)의 용액에 DIEA(5.00당량, 0.26 mL, 1.55 mmol)를 첨가한 다음, 혼합물을 80℃에서 8시간 동안 교반하였다. LCMS는 출발 물질이 여전히 남아 있음을 나타냈다. 반응 혼합물에 4-메틸벤젠설폰산;2-[4-[(2S,6R)-6-메틸모르폴린-2-일]피라졸-1-일]에탄올(0.843 당량, 100 mg, 0.261 mmol)을 첨가한 다음, 혼합물을 80℃에서 12시간 동안 교반하였다. LCMS (5-95AB/1.5분): RT = 0.940분, 498.2 = [M+H]+, ESI+는 목적하는 생성물의 72%를 나타냈다. 반응 혼합물을 에틸 아세테이트(50 mL * 2)과 물(80 mL) 사이에서 분리시켰다. 합쳐진 유기층을 Na2SO4로 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 미정제 생성물을 분취-TLC(DCM/MeOH=10:1, 목적하는 생성물 Rf = 0.2, 254 nm로 나타냄)로 2회 정제하여 2-(4-((2S,6R)-4-(4-(4-클로로-2-플루오로페닐)-6,7-디메틸프테리딘-2-일)-6-메틸모르폴린-2-일)-1H-피라졸-1-일)에탄-1-올(12 mg,0.0240 mmol, 7.76 % 수율)을 황색 고형분으로서 수득하고, LCMS로 확인하였다: (M+H) + = 498.2; 순도 = 97% (220 nm); 유지 시간 = 0.900분 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 7.68 - 7.60 (m, 2H), 7.54 (br s, 1H), 7.31 (br d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.25 (br s, 1H), 5.13 - 4.95 (m, 2H), 4.63 (br d, J = 10.1 Hz, 1H), 4.24 (br s, 2H), 4.00 (br s, 2H), 3.84 (br s, 1H), 3.09 (br s, 1H), 2.87 (br d, J = 11.5 Hz, 1H), 2.71 (s, 3H), 2.59 (s, 3H), 1.33 (br d, J = 6.0 Hz, 4H).
화합물 I-1691의 합성
메탄올(4 mL) 중 2-[(2R,4S)-2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)테트라하이드로피란-4-일]-4-[2-플루오로-4-(트리플루오로메틸)페닐]-7-메틸-프테리딘(1.00 당량, 90 mg, 0.181 mmol)의 용액에 CAN(1.50 당량, 160 mg, 0.292 mmol)을 나누어 첨가한 다음, 20℃에서 3시간 동안 교반하였다. LCMS (5-95AB/1.5분): RT = 1.007분, 529.0 = [M+H]+, ESI+는 목적하는 생성물의 42.7%를 나타냈다. 혼합물을 20℃에서 2시간 동안 교반하였다. LCMS (5-95AB/1.5분): RT = 0.707분, 529.2 = [M+H]+, ESI+는 목적하는 생성물의 25%를 나타냈다. 반응 혼합물을 DCM(50 mL * 2)과 Na2SO3(수성, 50 mL) 사이에서 분리시켰다. 합쳐진 유기층을 Na2SO4로 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 농축시켰다. 미정제 생성물을 분취-HPLC(Phenomenex luna C18 150 * 25 mm * 10 um; 이동상: [물 (0.1% FA)-ACN]; B%: 60%-90%, 12분)로 정제하고 동결건조시켜 2-((2R,4S)-2-(1-시클로프로필-1H-피라졸-4-일)테트라하이드로-2H-피란-4-일)-4-(2-플루오로-4-(트리플루오로메틸)페닐)-6-메톡시-7-메틸프테리딘(15 mg, 0.0272 mmol, 25.3% 수율)을 백색 고형분으로서 수득하고, LCMS로 확인하였다: (M+H) + = 529.2; 순도 = 99% (220 nm); 유지 시간 =1.002분. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ = 7.87 (t, J = 7.3 Hz, 1H), 7.62 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.54 - 7.48 (m, 3H), 4.56 (dd, J = 1.9, 11.4 Hz, 1H), 4.30 - 4.24 (m, 1H), 4.01 (s, 3H), 3.85 - 3.77 (m, 1H), 3.59 - 3.49 (m, 2H), 2.77 (s, 3H), 2.43 (br d, J = 13.4 Hz, 1H), 2.26 - 2.21 (m, 1H), 2.20 - 2.16 (m, 2H), 1.12 - 1.07 (m, 2H), 1.02 - 0.96 (m, 2H).
화합물 I-1696, I-1698, I-1699 및 I-1700의 합성
단계 1: THF(75 mL) 중 에틸 옥사졸-5-카르복실레이트(1.00 당량, 10.00 g, 70.9 mmol)의 용액에 LiHMDS(1.10 당량, 78 mL, 77.9 mmol)를 N2 분위기 하 -78℃에서 적가하고 20분 동안 교반하였다. 그런 다음, THF(15 mL) 중 CBr4(1.40 당량, 3.29 g, 99.2 mmol)의 용액을 -78℃에서 서서히 첨가하였다. 그런 다음, 반응 혼합물을 N2 분위기 하에 -78℃에서 2시간 동안 교반하고, 20℃로 12시간 동안 가온시켰다. TLC(PE: EtOAc=2:1; UV)는 여러 스폿이 형성되었고 목적하는 스폿이 발견되었음을 나타냈다(Rf=0.4). 혼합물에 물(100 mL)을 첨가하고 EtOAc (150 mL x 3)로 추출하였다. 유기상을 진공 하에 농축시켜 미정제물을 수득하였다. 미정제물을 플래쉬 컬럼(PE: EtOAc=2:1, Rf=0.4)으로 정제하였다. 에틸 2-브로모옥사졸-5-카르복실레이트(3200 mg, 14.5 mmol, 20% 수율)를 연황색 오일로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ = 7.60 - 7.47 (m, 1H), 4.30 - 4.19 (m, 2H), 1.27 - 1.20 (m, 3H)
단계 2: 톨루엔(32.5 mL) 및 물(3.9 mL) 중 에틸 2-브로모옥사졸-5-카르복실레이트(1.00당량, 3200 mg, 14.5 mmol), 시클로프로필보론산(1.60당량, 1999 mg, 23.3 mmol), K3PO4(3.00당량, 9250 mg, 43.6 mmol)의 혼합물에 Pd(dppf)Cl2·DCM (0.0500 당량, 532 mg, 0.727 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 N2로 3회 탈기하고 120℃에서 16시간 동안 교반하였다. LCMS는 목적하는 MS(44%, MS: 182 [M+H]+, RT = 0.584분)가 검출된 피크를 나타냈다. 혼합물을 진공 하에 농축시켜 미정제물을 수득하였다. 미정제물을 플래쉬 크로마토그래피(PE: EtOAc=2:1; UV, Rf=0.4)로 정제하여 에틸 2-시클로프로필옥사졸-5-카르복실레이트(1300 mg, 7.01 mmol, 48.20% 수율)를 황색 오일로서 수득하였다. LCMS: (M+H) + =182.1; 순도 = 97.7% (UV 220 nm); 유지 시간 = 0.587분. 11H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ = 7.47 (s, 1H), 4.23 (q, J = 7.2 Hz, 2H), 2.07 - 1.97 (m, 1H), 1.24 (t, J = 7.2 Hz, 3H), 1.09 - 1.03 (m, 2H), 1.03 - 0.97 (m, 2H).
단계 3: THF(60 mL) 중 에틸 2-시클로프로필옥사졸-5-카르복실레이트(1.00 당량, 1300 mg, 7.17 mmol)의 혼합물을 0℃로 냉각시키고 LiAlH4(2.00 당량, 545 mg, 14.3 mmol)를 서서히 첨가하였다. 혼합물을 20℃에서 3시간 동안 교반하였다. LCMS는 출발 물질이 완전히 소모되었고 목적하는 MS(98.7%, MS: 140 [M+H]+, RT = 0.322분)를 갖는 주요 피크가 검출되었음을 나타냈다. 0℃에서 혼합물에 545 mg의 물을 서서히 첨가하였다. 혼합물을 여과하고, 여액을 진공 하에 농축시켜 (2-시클로프로필옥사졸-5-일)메탄올(760 mg, 5.46 mmol, 76.12% 수율)을 연황색 오일로서 수득하였다. LCMS: (M+H) + = 140.1; 순도 = 97.2% (UV 220 nm); 유지 시간 = 0.270분. 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ = 6.82 (s, 1H), 4.60 (br s, 2H), 2.14 - 1.98 (m, 1H), 1.13 - 0.96 (m, 4H).
단계 4: DCE(8 mL) 중 (2-시클로프로필옥사졸-5-일)메탄올(1.00 당량, 360 mg, 2.59 mmol)의 혼합물에 MnO2(10.0 당량, 2249 mg, 25.9 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 60℃에서 2시간 동안 교반하였다. LCMS는 목적하는 MS(57%, MS: 138 [M+H]+, RT = 0.462분)를 갖는 주요 피크를 나타냈다. 혼합물을 여과하고, 여액을 진공 하에 농축시켜 2-시클로프로필옥사졸-5-카르브알데히드(320 mg, 2.33 mmol, 90.19% 수율)를 연황색 오일로서 수득하였다. LCMS: (M+H) + = 138.1; 순도 = 83.9% (UV 220 nm); 유지 시간 =0.645분. 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ = 9.68 - 9.61 (m, 1H), 7.79 - 7.63 (m, 1H), 2.24 - 2.12 (m, 1H), 1.30 - 1.14 (m, 5H).
단계 5: DCM(8 mL) 중 2-시클로프로필옥사졸-5-카르브알데히드(1.00당량, 410 mg, 2.99 mmol) 및 3-부틴-1-올(1.50당량, 0.34 mL, 4.48 mmol)의 혼합물을 20℃로 냉각시켰다. 혼합물에 트리플루오로메탄설폰산(2.40당량, 0.64 mL, 7.18 mmol)을 서서히 첨가하고 20℃에서 3시간 동안 교반하였다. 그런 다음, 트리플루오로메탄설폰산(2.40당량, 0.64 mL, 7.18 mmol)을 첨가하고, 혼합물을 20℃에서 3시간 동안 교반하였다. LCMS는 목적하는 MS(81%, MS: 340 [M+H]+, RT = 0.737분)를 갖는 주요 피크를 나타냈다. 혼합물을 진공 하에 농축시키고 역상-HPLC(물 중 FA, FA: ACN=100% 내지 0%, 220 및 254 nm)로 정제하고 동결건조시켜 [6-(2-시클로프로필옥사졸-5-일)-3,6-디히드로-2H-피란-4-일] 트리플루오로메탄설포네이트(330 mg, 0.973 mmol, 32.53% 수율)를 황색 오일로서 수득하였다. LCMS: (M+H) + =340; 순도 = 77.3% (UV 220 nm); 유지 시간 = 0.739분. 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ = 6.86 (s, 1H), 5.94 - 5.90 (m, 1H), 5.40 - 5.35 (m, 1H), 3.93 - 3.87 (m, 2H), 2.67 - 2.54 (m, 3H), 2.49 - 2.39 (m, 2H), 2.12 - 2.03 (m, 2H), 1.13 - 1.03 (m, 5H).
단계 6: 1,4-디옥산(7 mL) 중 B2핀2(1.30 당량, 404 mg, 1.59 mmol)의 무색 혼합물에 [6-(2-시클로프로필옥사졸-5-일)-3,6-디히드로-2H-피란-4-일] 트리플루오로메탄설포네이트(1.00 당량, 415 mg, 1.22 mmol), 칼륨 아세테이트(3.00 당량, 360 mg, 3.67 mmol), Pd(dppf)Cl2·DCM(0.1000 당량, 89 mg, 0.122 mmol)을 첨가한 다음, 갈색 혼합물을 N2 분위기 하에 90℃에서 12시간 동안 교반하여 흑색 용액을 수득하였다. LCMS는 44%의 목적하는 MS가 발견되었음을 나타냈다(44%, MS: 318 [M+H]+, RT = 0.742분). 혼합물을 진공 하에 농축시켜 미정제물을 수득하였다. 미정제물을 플래쉬 컬럼(PE:EtOAc = 10:1 내지 1:1; 사분해산암모늄, Rf = 0.3)으로 정제하고 진공 하에 농축시켜 2-시클로프로필-5-[4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)-3,6-디히드로-2H-피란-6-일]옥사졸(330 mg, 0.739 mmol, 60.39% 수율)을 황색 오일로서 수득하였다. LCMS: (M+H) + = 318; 순도 = 71.6% (UV 220 nm); 유지 시간 = 0.736분.
단계 7: 1,4-디옥산(7 mL) 및 물(1.4 mL) 중의 2-시클로프로필-5-[4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)-3,6-디히드로-2H-피란-6-일]옥사졸(1.00 당량, 290 mg, 0.914 mmol), 2-클로로-4-(2,4-디플루오로페닐)-6,7-디메틸-프테리딘(1.00 당량, 280 mg, 0.913 mmol) 및 K2CO3(2.00 당량, 153 mg, 1.83 mmol)의 용액에, [1,1'-비스(디페닐포스피노)페로센]디클로로팔라듐(II)(0.1 당량, 67 mg, 0.0913 mmol)을 첨가하고 N2로 3회 퍼징하고, 반응 용액을 80℃에서 2시간 동안 교반하고 반응물이 모두 소모되었고 약 83%의 목적하는 질량이 검출되었음을 나타냈다(LCMS (M+H) + = 462.2; 유지 시간 = 0.789분). 혼합물을 진공 하에 농축시키고, 플래쉬 컬럼(PE:EtOAc = 1:1, UV, Rf = 0.2)으로 정제하여 2-시클로프로필-5-[4-[4-(2,4-디플루오로페닐)-6,7-디메틸-프테리딘-2-일]-3,6-디히드로-2H-피란-6-일]옥사졸(190 mg, 0.395 mmol, 43% 수율)을 황색 고형분으로서 수득하였다. LCMS: (M+H) + = 462; 순도 = 96.9% (UV 220 nm); 유지 시간 = 0.977분. 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ = 7.84 - 7.75 (m, 1H), 7.65 - 7.59 (m, 1H), 7.13 - 7.05 (m, 1H), 7.04 - 6.96 (m, 1H), 6.90 - 6.85 (m, 1H), 5.51 (br d, J = 2.6 Hz, 1H), 4.06 - 3.95 (m, 2H), 3.09 - 2.91 (m, 2H), 2.85 (s, 3H), 2.73 (s, 3H), 2.05 (br s, 1H), 1.13 - 1.06 (m, 2H), 1.06 - 0.99 (m, 2H).
단계 8: THF(10 mL) 중 2-시클로프로필-5-[4-[4-(2,4-디플루오로페닐)-6,7-디메틸-프테리딘-2-일]-3,6-디히드로-2H-피란-6-일]옥사졸(1.00 당량, 50 mg, 0.108 mmol)의 용액에 1,1'-비스(디-i-프로필포스피노) 페로센 (1,5-시클로옥타디엔)로듐 (i) 테트라-플루오로보레이트(0.203 당량, 5.0 mg, 0.0220 mmol)를 N2 분위기 하에 첨가하고, 혼합물을 H2에 의해 3회 퍼징한 다음, H2 분위기(풍선, 15 psi) 하에 50℃에서 12시간 동안 교반하였다. LCMS는 출발 물질이 완전히 소모되었고 목적하는 MS(74%, MS: 464 [M+H]+, RT = 0.763분)를 갖는 주요 피크가 있음을 나타냈다. 혼합물을 진공 하에 농축시켜 미정제물을 수득하였다. 미정제물을 역상-HPLC(FA, 물 중 FA: ACN = 100% 내지 0%, UV 220 및 254 nm)로 정제하고 동결건조시켜 20 mg의 생성물 2-시클로프로필-5-[4-[4-(2,4-디플루오로페닐)-6,7-디메틸-프테리딘-2-일]테트라하이드로피란-2-일]옥사졸(20 mg, 0.0411 mmol, 37.95% 수율)을 황색 고형분으로서 수득하였다. 105 mg의 생성물은 4개의 피크를 나타냈다. 조건: 0.1% NH3H2O EtOH; 컬럼: DAICEL CHIRALCEL OJ-H (250 mm * 30 mm, 5 um); 유속 (mL/분): 50, 컬럼: Chiralcel OJ-3 50 × 4.6 mm I.D., 3 um; 이동상: CO2의 경우 상 A, 및 MeOH(0.05% DEA)의 경우 상 B; 구배 용리: A 중 B 5% 내지 40%; 유속: 3 mL/분; 검출기: DAD; 컬럼 온도: 35℃; 배압: 100 Bar).
단계 9: 105 mg 생성물을 SFC 분리를 위해 흘렸고(조건: 0.1% NH3H2O EtOH; 컬럼: DAICEL CHIRALCEL OJ-H (250 mm * 30 mm, 5 um); 유속(mL/분): 50) 4개의 피크를 수득하였다. SFC 중 피크 1-회백색 고형분으로서 2-시클로프로필-5-[(2R,4R)-4-[4-(2,4-디플루오로페닐)-6,7-디메틸-프테리딘-2-일]테트라히드로피란-2-일]옥사졸(17 mg,0.0344 mmol, 31.78% 수율). LCMS (M+H) + = 464.3; 순도 = 95% (220 nm); 유지 시간 = 0.753분. 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ = 7.81 - 7.72 (m, 1H), 7.09 (dt, J = 2.2, 8.3 Hz, 1H), 7.00 (dt, J = 2.4, 9.5 Hz, 1H), 5.07 - 4.96 (m, 1H), 4.00 - 3.83 (m, 2H), 3.81 - 3.70 (m, 1H), 2.87 - 2.82 (m, 3H), 2.76 - 2.73 (m, 3H), 2.69 (br s, 1H), 2.53 - 2.35 (m, 2H), 2.30 - 2.17 (m, 1H), 2.12 - 2.00 (m, 1H), 1.11 - 0.97 (m, 4H). SFC 중 피크 2 - 연황색 고형분으로서 2-시클로프로필-5-[(2S,4S)-4-[4-(2,4-디플루오로페닐)-6,7-디메틸-프테리딘-2-일]테트라히드로피란-2-일]옥사졸(15 mg, 0.0316 mmol, 29.18% 수율). LCMS (M+H) + = 464.3; 순도 = 96.4% (220 nm); 유지 시간 = 0.751분. 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ = 7.84 - 7.72 (m, 1H), 7.13 - 7.05 (m, 1H), 7.04 - 6.96 (m, 1H), 6.96 - 6.89 (m, 1H), 5.09 - 4.94 (m, 1H), 3.99 - 3.84 (m, 2H), 3.82 - 3.70 (m, 1H), 2.85 (s, 3H), 2.79 - 2.70 (m, 4H), 2.52 - 2.36 (m, 2H), 2.30 - 2.18 (m, 1H), 2.14 - 2.03 (m, 1H), 1.13 - 1.07 (m, 2H), 1.06 - 0.99 (m, 2H). SFC 중 피크 3- 연황색 고형분으로서 2-시클로프로필-5-[(2R,4S)-4-[4-(2,4-디플루오로페닐)-6,7-디메틸-프테리딘-2-일]테트라히드로피란-2-일]옥사졸(11 mg, 0.0230 mmol, 21.25 % 수율). LCMS (M+H) + = 464.2; 순도 = 97.9% (220 nm); 유지 시간 = 0.743분. 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ = 7.82 - 7.70 (m, 1H), 7.14 - 7.05 (m, 1H), 7.05 - 6.96 (m, 1H), 6.92 - 6.86 (m, 1H), 4.66 - 4.56 (m, 1H), 4.35 - 4.24 (m, 1H), 3.91 - 3.76 (m, 1H), 3.60 - 3.46 (m, 1H), 2.85 (s, 3H), 2.73 (s, 3H), 2.51 - 2.33 (m, 2H), 2.26 - 2.16 (m, 2H), 2.10 - 1.98 (m, 1H), 1.10 - 1.04 (m, 2H), 1.03 - 0.96 (m, 2H). SFC 중 피크 4 - 회백색 고형분으로서 2-시클로프로필-5-[(2S,4R)-4-[4-(2,4-디플루오로페닐)-6,7-디메틸-프테리딘-2-일]테트라히드로피란-2-일]옥사졸(16 mg,0.0325 mmol, 30.01 %% 수율). LCMS (M+H) + = 464.2; 순도 = 96.4% (220 nm); 유지 시간 = 0.746분. 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ = 7.80 - 7.72 (m, 1H), 7.13 - 7.05 (m, 1H), 7.04 - 6.96 (m, 1H), 6.91 - 6.86 (m, 1H), 4.68 - 4.52 (m, 1H), 4.34 - 4.23 (m, 1H), 3.88 - 3.76 (m, 1H), 3.60 - 3.43 (m, 1H), 2.85 (s, 3H), 2.75 - 2.69 (m, 3H), 2.49 - 2.31 (m, 2H), 2.25 - 2.15 (m, 2H), 2.09 - 1.99 (m, 1H), 1.09 - 1.04 (m, 2H), 1.03 - 0.97 (m, 2H). (시스- 거울상 이성질체 쌍은 NMR에 의해 거울상 이성질체 쌍과 구별되었다).
I. 화합물 I-1701 및 I-1702의 합성
단계 1: MeCN(14 mL) 중 2-시클로프로필-4-(p-톨일설포닐)-6-(1H-피라졸-4-일)모르폴린(1.00 당량, 600 mg, 1.73 mmol) 및 1-[[브로모(디플루오로)메틸]-에톡시-포스포릴]옥시에탄(1.50 당량, 692 mg, 2.59 mmol)의 용액에 KF (2.00 당량, 201 mg, 3.45 mmol)를 20℃에서 첨가하였다. 혼합물을 40℃에서 3시간 동안 교반하였다. LCMS는 목적하는 생성물의 약 53%가 검출되었음을 나타냈다(53%, Rt = 0.971분; [M+H]+ = 220 nm에서 398.2). 혼합물을 80 mL의 얼음물로 급냉시키고, EA(30 mL*3)로 추출하고, 합쳐진 유기층을 무수 Na2SO4로 건조시키고, 여과하고 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 플래시 컬럼(PE:EA = 0 ~ 20%, PE:EA = 3:1, 목적하는 생성물 Rf = 0.7)으로 정제하여 2-시클로프로필-6-[1-(디플루오로메틸)피라졸-4-일]-4-(p-톨일설포닐)모르폴린(630 mg, 1.59 mmol, 91.79% 수율)을 무색 오일로서 수득하고, LCMS로 확인하였다: [M+H]+ =398.2, 순도 = 99.5% (220 nm);유지 시간 = 0.964분. 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ = 7.76 (s, 1H), 7.65 (d, J = 8.1 Hz, 2H), 7.59 (s, 1H), 7.37 (s, 2H), 7.18 - 6.96 (m, 1H), 4.61 (dd, J = 1.9, 10.4 Hz, 1H), 4.37 (dt, J = 5.1, 7.4 Hz, 2H), 3.81 - 3.69 (m, 2H), 3.07 - 2.98 (m, 1H), 2.45 (s, 3H), 0.86 - 0.74 (m, 1H), 0.56 (br dd, J = 3.4, 7.3 Hz, 2H), 0.46 - 0.28 (m, 2H).
단계 2: 메탄올(30 mL) 중 (2R,6S)-2-시클로프로필-6-[1-(디플루오로메틸)피라졸-4-일]-4-(p-톨일설포닐)모르폴린(1.00 당량, 630 mg, 1.59 mmol) 및 Et3SiH(46.5 당량, 12 mL, 73.7 mmol)의 용액에 Mg(30.0 당량, 1141 mg, 47.6 mmol)(분말) 및 Mg(30.0 당량, 1141 mg, 47.6 mmol)(칩)을 25℃에서 첨가하고, 반응 혼합물을 N2 분위기 하에 80℃에서 12시간 동안 교반하였다. LCMS는 목적하는 생성물의 47%가 검출되었음을 나타냈다(47%, Rt = 0.381분; [M+H]+ = 244.2, UV 220 nm). 반응 혼합물을 실온으로 냉각시켰다. 혼합물을 여과하고, 필터 케이크를 MeOH(30 mL * 3)로 세척하고, 합쳐진 유기층을 감압 하에 농축시켜 미정제 (2R,6S)-2-시클로프로필-6-[1-(디플루오로메틸)피라졸-4-일]모르폴린(730 mg, 3.00 mmol, 189.32% 수율)을 백색 고형분으로서 수득하였다.
단계 3: DMSO(6 mL) 중 2-클로로-4-(2,4-디플루오로페닐)-6,7-디메틸-프테리딘(1.00 당량, 159 mg, 0.520 mmol)의 용액에 DIEA(3.00 당량, 0.27 mL, 1.56 mmol) 및 2-시클로프로필-6-[1-(디플루오로메틸)피라졸-4-일]모르폴린(1.00 당량, 240 mg, 0.520 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 100℃에서 1시간 동안 교반하였다. LCMS는 목적하는 생성물의 42%가 검출되었음을 나타냈다(42%, Rt = 1.046분; [M+H]+ = 220 nm에서 514.3). 반응물을 60 mL H2O로 급냉시키고, EA(30 mL * 3)로 추출하고, 합쳐진 유기층을 무수 Na2SO4로 건조시키고, 여과하고 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 분취-TLC(PE:EA = 2:1, 목적하는 생성물 Rf = 0.6)로 정제하여 미정제 생성물(140 mg, LCMS 중 83% 순도)을 수득하였다. 미정제 생성물을 분취-TLC(PE:EA = 2:1, 목적하는 생성물 Rf = 0.6)로 다시 정제하여 2-시클로프로필-6-[1-(디플루오로메틸)피라졸-4-일]-4-[4-(2,4-디플루오로페닐)-6,7-디메틸-프테리딘-2-일]모르폴린(110 mg, 0.214 mmol, 41% 수율)을 갈색 고형분으로서 수득하였다. 생성물을 SFC(DAICEL CHIRALPAK IC (250 mm*30 mm, 10 um), 이동상: CO2의 경우 상 A, 및 EtOH (0.05% DEA)의 경우 상 B; 구배 용리: CO2 중의 EtOH (0.05% DEA) 5% 내지 40%, 유속: 3 mL/분; 검출기: PDA, 컬럼 온도: 35C; 배압: 100 Bar)로 정제하여 (2S,6R)-2-시클로프로필-6-[1-(디플루오로메틸)피라졸-4-일]-4-[4-(2,4-디플루오로페닐)-6,7-디메틸-프테리딘-2-일]모르폴린(34 mg, 0.0646 mmol, 12.42 % 수율)을 황색 고형분으로서 수득하였다. (2R,6S)-2-시클로프로필-6-[1-(디플루오로메틸)피라졸-4-일]-4-[4-(2,4-디플루오로페닐)-6,7-디메틸-프테리딘-2-일]모르폴린(30 mg, 0.0572 mmol, 11.01 % 수율)을 황색 고형분으로서 수득하였다. LCMS: [M+H]+ = 514.4; 순도 = 96.49% (220 nm); 유지 시간 = 0.937분. HPLC: 유지 시간 = 2.555분, 220 nm에서 97.26% 순도. SFC는 ee 약 100%를 나타냈다. 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ = 7.90 (s, 1H), 7.74 (s, 1H), 7.73 - 7.67 (m, 1H), 7.33 (s, 1H), 7.18 (s, 1H), 7.08 - 7.02 (m, 1H), 6.98 (dt, J = 2.3, 9.4 Hz, 1H), 5.08 (br s, 2H), 4.60 (dd, J = 2.3, 10.8 Hz, 1H), 3.10 - 3.02 (m, 3H), 2.72 (s, 3H), 2.59 (s, 3H), 1.01 (br d, J = 6.5 Hz, 1H), 0.67 - 0.56 (m, 2H), 0.54 - 0.45 (m, 1H), 0.44 - 0.34 (m, 1H). LCMS: [M+H]+ = 514.3; 순도 = 98.60% (220 nm); 유지 시간 = 0.954분. HPLC: 유지 시간 = 2.534분, 220 nm에서 99.23% 순도. SFC는 ee. 97%를 나타냈다. 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ = 7.90 (s, 1H), 7.74 (s, 1H), 7.73 - 7.67 (m, 1H), 7.33 (s, 1H), 7.18 (s, 1H), 7.08 - 7.02 (m, 1H), 6.98 (dt, J = 2.4, 9.4 Hz, 1H), 5.18 - 5.00 (m, 2H), 4.60 (dd, J = 2.4, 10.9 Hz, 1H), 3.04 (br d, J = 9.2 Hz, 3H), 2.72 (s, 3H), 2.60 (s, 3H), 1.01 (br d, J = 6.2 Hz, 1H), 0.67 - 0.56 (m, 2H), 0.53 - 0.45 (m, 1H), 0.41 (br d, J = 3.1 Hz, 1H).
화합물 I-1706의 합성
단계 1: 1,4-디옥산(15 mL) 중 5-브로모-2,4-디플루오로-벤즈알데히드(1.00 당량, 2000 mg, 9.05 mmol)의 용액에 KOAc(2.50 당량, 2220 mg, 22.6 mmol) 및 4,4,5,5-테트라메틸-2-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)-1,3,2-디옥사보롤란(1.50 당량, 3447 mg, 13.6 mmol)을 첨가한 다음, Pd(dppf)Cl2·CH2Cl2(0.0500 당량, 367 mg, 0.452 mmol)를 N2 하에 혼합물에 첨가한 다음 혼합물을 100℃에서 16시간 동안 교반하였다. LCMS는 원료가 소모되었고 주요 피크가 형성되었지만 목적하는 MS가 없음을 나타냈다. TLC(PE/EA = 10/1)는 원료(Rf = 0.6)이 대부분 소모되었고 새로운 스폿(Rf = 0.4)이 형성되었음을 나타냈다. 반응 용액을 물(80 mL)에 부은 다음 에틸 아세테이트(20 mL * 3)로 추출하고 유기물을 20 mL 포화 염수 용액으로 세척하였다. 그런 다음, 유기물을 분리하고, 농축 건조 전에 건조시켰다(Na2SO4). 그런 다음, 미정제물을 실리카 겔 컬럼(PE/EA = 40/1)으로 정제하여 2,4-디플루오로-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)벤즈알데히드(1350 mg, 5.04 mmol, 55.65% 수율)를 연황색 반고체로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ ppm 1.37 (s, 13 H) 6.88 (dd, J=10.58, 8.86 Hz, 1 H) 8.35 (dd, J=8.56, 6.85 Hz, 1 H) 10.27 (s, 1 H).
단계 2: 톨루엔(20 mL) 및 물(2 mL) 중 2,4-디클로로-6,7-디메틸-프테리딘(1.00 당량, 1068 mg, 4.66 mmol) 및 2,4-디플루오로-5-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)벤즈알데히드(1.00 당량, 1250 mg, 4.66 mmol)의 용액에 K3PO4(3.00 당량, 2966 mg, 14.0 mmol) 및 PdCl2(amphos)(0.0500 당량, 165 mg, 0.233 mmol)를 N2 하에 첨가한 다음, 55℃에서 16시간 동안 교반하였다. LCMS는 원료가 소모되었음을 나타냈고, 주요 피크는 목적하는 MS(M+H)+ = 335.0, 순도 = 35.65%, uv = 254 nm, 유지 시간 = 0.849분을 나타냈다. 합쳐진 반응 용액을 물(50 mL)에 붓고, 에틸 아세테이트(20 mL * 3)로 추출하고, 유기물을 10 mL 포화 염수 용액으로 세척하였다. 그런 다음, 유기물을 분리하고, 농축 건조 전에 건조시켰다(Na2SO4). 그런 다음, 미정제 생성물 혼합물을 실리카 겔 컬럼(PE/EA = 1/1)으로 정제하여 5-(2-클로로-6,7-디메틸-프테리딘-4-일)-2,4-디플루오로-벤즈알데히드(680 mg, 2.03 mmol, 43.57% 수율)를 갈색 고형분으로서 수득하였다. LCMS: (M+H)+ = 335.0, 순도 = 81.04%, uv = 220 nm, 유지 시간 = 0.855분.
단계 3: DCM(10 mL) 중 5-(2-클로로-6,7-디메틸-프테리딘-4-일)-2,4-디플루오로-벤즈알데히드(1.00 당량, 580 mg, 1.73 mmol)의 용액에 BAST(5.00 당량, 1.6 mL, 8.66 mmol)를 0℃에서 첨가한 다음, 20℃에서 16시간 동안 교반하였다. LCMS는 원료가 소모되었음을 나타냈고, 주요 피크는 목적하는 MS(M+H)+ = 357.0, 순도 = 50.8%, uv = 220 nm, 유지 시간 = 0.909분을 나타냈다. 반응 용액을 얼음-NaHCO3(수성 20 mL)에 서서히 붓고, 에틸 아세테이트(5 mL*2)로 추출하고, 유기물을 5 mL 포화 염수 용액으로 세척하였다. 그런 다음, 유기물을 분리하고, 농축 건조 전에 건조시켰다(Na2SO4). 그런 다음, 미정제물을 실리카 겔 컬럼(PE/EA = 1/1)으로 정제하여 2-클로로-4-[5-(디플루오로메틸)-2,4-디플루오로-페닐]-6,7-디메틸-프테리딘(280 mg, 0.785 mmol, 45.30% 수율)을 갈색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ ppm 2.75 (s, 3 H) 2.85 - 2.90 (m, 3 H) 6.79 - 7.14 (m, 1 H) 6.79 - 6.82 (m, 1 H) 6.94 (s, 1 H) 8.07 (t, J=7.50 Hz, 1 H).
단계 4: DMSO(2 mL) 중 2-클로로-4-[5-(디플루오로메틸)-2,4-디플루오로-페닐]-6,7-디메틸-프테리딘(1.00 당량, 100 mg, 0.280 mmol)의 용액에 (2S,6R)-2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)-6-메틸-모르폴린(1.50 당량, 87 mg, 0.421 mmol) 및 DIEA(5.00 당량, 181 mg, 1.40 mmol)를 첨가한 다음, 혼합물을 100℃에서 20분 동안 교반하였다. LCMS는 원료가 완전히 소모되었음을 나타냈고, 주요 피크는 목적하는 MS(M+H)+ = 528.2, 순도 = 83.33%, uv = 220 nm, 유지 시간 = 0.982분을 나타냈다. 미정제 반응 혼합물 용액을 물(20 mL)에 붓고, 에틸 아세테이트(10 mL*2)로 추출하고, 유기상을 포화 염수 용액(10 mL)으로 세척하였다. 합쳐진 유기상을 분리하고, 여과 및 농축 건조 전에 건조시켰다(Na2SO4). 그런 다음, 미정제 생성물 혼합물을 분취-HPLC(Phenomenex C18 75 * 30 mm * 3 um, 물(FA)-ACN)로 정제하고 동결건조시켜 (2S,6R)-2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)-4-[4-[5-(디플루오로메틸)-2,4-디플루오로-페닐]-6,7-디메틸-프테리딘-2-일]-6-메틸-모르폴린(49 mg, 0.0916 mmol, 32.67% 수율)을 황색 고형분으로서 수득하였다. LCMS: (M+H)+ = 528.2, 순도 = 99.24%, uv = 220 nm, 유지 시간 = 0.980분. 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ ppm 0.98 - 1.09 (m, 2 H) 1.10 - 1.16 (m, 2 H) 1.34 (d, J=6.25 Hz, 3 H) 2.59 (s, 3 H) 2.73 (s, 3 H) 2.81 - 2.92 (m, 1 H) 3.04 - 3.17 (m, 1 H) 3.54 - 3.65 (m, 1 H) 3.77 - 3.91 (m, 1 H) 4.55 - 4.72 (m, 1 H) 4.86 - 5.21 (m, 2 H) 6.78 - 7.11 (m, 2 H) 7.27 (s, 1 H) 7.55 (d, J=3.75 Hz, 2 H) 7.94 - 8.03 (m, 1 H).
I-1744의 합성
테플론-코팅된 자기 교반 막대가 구비된 유리 바이알에 2-((2R)-2-(1-시클로프로필-1H -피라졸-4-일)테트라하이드로-2H -피란-4-일)-4-(2,4-디플루오로페닐)-7-메틸프테리딘(방법 37을 통해 제조됨)(1.0 당량, 90 mg, 0.20 mmol), 시클로헥산카르복실산 2(3.0 당량, 76 mg, 0.60 mmol), 암모늄 퍼설페이트(2.0 당량, 92 mg, 0.40 mmol) 및 질산은(0.1 당량, 2 mg, 0.02 mmol)을 채웠다. DCE(1.0 mL) 및 물(1.0 mL)을 첨가하고, 반응 혼합물을 22℃에서 차광하여 6시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 DCM으로 희석하고 포화 NaHCO3 (수성)으로 급냉시켰다. 층을 분리시키고, 수성층을 DCM(x3)으로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 무수 Na2SO4로 건조시키고, 여과하고, 감압 하에 증발 건조시켰다. 잔류 미정제 물질을 DCM 중 0% 내지 10% MeOH의 용리 구배를 사용하는 실리카 겔 플래쉬 컬럼 크로마토그래피(TeleDyne RediSep Gold 컬럼 24 g SiO2)로 정제하여 미정제 생성물을 황색 거품(66 mg)으로서 수득하였다. 생성물을 pH 3.8(65-85%)의 포름산암모늄 수용액 중 용리 구배 MeOH를 사용하는 분취 HPLC(Gemini® 5 um NX-C18 110 Å, 100 x 30 mm 컬럼)로 추가로 정제하여 6-시클로헥실-2-((2R,4S)-2-(1-시클로프로필-1H -피라졸-4-일)테트라하이드로-2H -피란-4-일)-4-(2,4-디플루오로페닐)-7-메틸프테리딘(29 mg, 0.05 mmol, 27% 수율)을 연황색 고형분으로서 수득하였다. LC-MS(ESI+): Tr = 1.95분; [M+H]+ 531.4 (obs). 1H NMR (CHCl3-d, 400 MHz): δH 7.76-7.82 (1H, m), 7.49 (2H, s), 7.09 (1H, t, J = 7.9 Hz), 7.00 (1H, t, J = 9.6 Hz), 4.55 (1H, d, J = 11.4 Hz), 4.25 (1H, d, J = 11.6 Hz), 3.77-3.82 (1H, m), 3.49-3.58 (2H, m), 3.05-3.05 (1H, m), 2.88 (3H, d, J = 2.5 Hz), 2.42 (1H, d, J = 13.4 Hz), 2.17-2.26 (3H, m), 1.84-1.87 (4H, m), 1.77 (1H, d, J = 13.0 Hz), 1.49-1.58 (3H, m), 1.37-1.47 (2H, m), 1.25-1.31 (1H, m), 1.07-1.08 (2H, m), 0.96-0.98 (2H, m). 19F NMR (CHCl3-d, 376 MHz): δF -105.6 (1F, m), -106.5 (1F, m).
화합물 I-1711 및 I-1712의 합성
DMSO(6 mL) 중 (2R,6S)-2-시클로프로필-6-[1-(디플루오로메틸)피라졸-4-일]모르폴린(1.49당량, 183 mg, 0.751 mmol)의 용액에 DIEA(3.00당량, 0.26 mL, 1.51 mmol) 및 2-클로로-4-[2-플루오로-4-(트리플루오로메틸)페닐]-6,7-디메틸-프테리딘(1.00당량, 180 mg, 0.505 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 100℃에서 1시간 동안 교반하였다. LCMS는 목적하는 생성물의 51%가 검출되었음을 나타냈다(51%, Rt = 0.983분; [M+H]+ = 220 nm에서 564.3). 반응 혼합물을 60 mL H2O로 급냉시키고, EA(30 mL * 3)로 추출하고, 합쳐진 유기층을 무수 Na2SO4로 건조시키고, 여과하고 감압 하에 농축시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 분취-TLC(PE:EA = 2:1, 목적하는 생성물 Rf = 0.6)로 정제하여 미정제 생성물 150 mg(LCMS 중 68% 순도)을 수득하였다. 미정제 생성물을 분취-HPLC(유속: 25 mL/분; 구배: 10분에 걸쳐 70 - 90% 물(0.1% FA)-ACN; 컬럼: Phenomenex luna C18 150 * 25 mm * 5 um)로 다시 정제하고, 동결건조시켜 2-시클로프로필-6-[1-(디플루오로메틸)피라졸-4-일]-4-[4-[2-플루오로-4-(트리플루오로메틸)페닐]-6,7-디메틸-프테리딘-2-일]모르폴린(88 mg, 0.156 mmol, 30.95% 수율)을 갈색 고형분으로서 수득하였다. 생성물을 SFC(컬럼: 키랄팩 IC-3 50×4.6 mm I.D., 3 um 이동상: CO2의 경우 상 A, 및 EtOH(0.05% DEA)의 경우 상 B; 구배 용리: CO2 중 40% EtOH (0.05% DEA), 유속: 3 mL/분; 검출기: PDA , 컬럼 온도: 35C; 배압: 100 Bar)로 정제하여 (2R,6S)-2-시클로프로필-6-[1-(디플루오로메틸)피라졸-4-일]-4-[4-[2-플루오로-4-(트리플루오로메틸)페닐]-6,7-디메틸-프테리딘-2-일]모르폴린(17.16 mg, 0.0305 mmol, 6.03 % 수율)을 황색 고형분으로서 수득하고, (2S,6R)-2-시클로프로필-6-[1-(디플루오로메틸)피라졸-4-일]-4-[4-[2-플루오로-4-(트리플루오로메틸)페닐]-6,7-디메틸-프테리딘-2-일]모르폴린(28 mg, 0.0486 mmol, 9.63 % 수율)을 갈색 고형분으로서 수득하였다, LCMS [M+H]+ = 564.2; 순도 = 100.0% (220 nm); 유지 시간 = 0.979분. HPLC: 유지 시간 = 2.717분, 220 nm에서 98.76% 순도. SFC는 ee = 100%를 나타냈다. 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ = 7.90 (s, 1H), 7.85 - 7.77 (m, 1H), 7.74 (s, 1H), 7.59 (br d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.50 (br d, J = 9.3 Hz, 1H), 7.33 (s, 1H), 7.18 (s, 1H), 7.03 (s, 1H), 5.08 (br dd, J = 3.4, 7.9 Hz, 2H), 4.60 (dd, J = 2.3, 10.8 Hz, 1H), 3.14 - 3.00 (m, 3H), 2.73 (s, 3H), 2.59 (s, 3H), 1.01 (br d, J = 6.3 Hz, 1H), 0.62 (td, J = 3.1, 7.9 Hz, 2H), 0.53 - 0.45 (m, 1H), 0.40 (br s, 1H) 및 제2 피크, LCMS 564.2 [M+H]+; 순도 = 97.1% (220 nm); 유지 시간 = 0.988분. HPLC: 유지 시간 = 2.728분, 220 nm에서 98.74% 순도. SFC는 ee = 98%을 나타냈다. 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ = 7.90 (s, 1H), 7.81 (br t, J = 7.1 Hz, 1H), 7.74 (s, 1H), 7.59 (br d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.50 (br d, J = 9.3 Hz, 1H), 7.33 (s, 1H), 7.18 (s, 1H), 7.03 (s, 1H), 5.21 - 4.95 (m, 2H), 4.60 (dd, J = 2.0, 10.8 Hz, 1H), 3.06 (br s, 2H), 3.04 (s, 1H), 2.73 (s, 3H), 2.59 (s, 3H), 1.01 (br d, J = 6.5 Hz, 1H), 0.66 - 0.56 (m, 2H), 0.48 (br dd, J = 3.0, 4.3 Hz, 1H), 0.44 - 0.36 (m, 1H).
화합물 I-1716 및 I-1729의 합성
단계 1: 메탄올(10 mL) 중 벤질 3-옥소시클로부탄카르복실레이트(1.00당량, 1.00 g, 4.90 mmol)의 용액에 NaBH4(1.00당량, 185 mg, 4.90 mmol)를 -40℃에서 첨가한 다음, 반응 혼합물을 1시간 동안 교반하였다. TLC(PE: EtOAc = 3:1, Rf = 0.1)는 출발 물질이 소모되었음을 나타냈고 목적하는 생성물 플롯이 나타났다. 반응 혼합물을 수성 NH4Cl (20 mL)로 0℃ 하에서 서서히 급냉시켰다. 그런 다음, 혼합물을 물(10 mL)로 희석하고, EtOAc(20 mL 3회)로 추출하였다. 합쳐진 유기상을 염수(20 mL)로 세척하고, Na2SO4로 건조시키고, 역플래쉬(0.1% v/v FA 조건, 30% 내지 60%)로 정제하고, 동결건조시켜 벤질 3-히드록시시클로부탄카르복실레이트(1.00 g, 4.85 mmol, 99% 수율)를 연황색 오일로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ = 7.42 - 7.30 (m, 5H), 5.13 (s, 2H), 4.25 - 4.17 (m, 1H), 2.72 - 2.65 (m, 1H), 2.65 - 2.56 (m, 2H), 2.23 - 2.15 (m, 2H).
단계 2: 은 트리플루오로메탄설포네이트(4.00 당량, 3987 mg, 15.5 mmol), 1- 클로로메틸-4-플루오로-1,4-디아조니아바이시클로[2.2.2]옥탄 비스(테트라플루오로보레이트)(1.50 당량, 2061 mg, 5.82 mmol) 및 KF(4.00 당량, 898 mg, 15.5 mmol)를 에틸 아세테이트(10 mL) 중 벤질 3-히드록시시클로부탄카르복실레이트(1.00 당량, 800 mg, 3.88 mmol)의 용액에 이어서 2-플루오로피리딘(4.00 당량, 1.3 mL, 15.5 mmol)에 첨가한 다음 (트리플루오로메틸)트리메틸실란(2.50 당량, 1.5 mL, 9.70 mmol)을 혼합물에 적가한 다음 혼합물을 25℃에서 36시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 여과하고 케이크를 EtOAc(50 mL)로 세척하였다. 합쳐진 여액을 역상 컬럼(0.1% v/v FA 조건, 30% 내지 60%)으로 정제하고 동결건조시켜 벤질 3-(트리플루오로메톡시)시클로부탄카르복실레이트(790 mg,2.88 mmol, 74% 수율)를 황색 오일로서 수득하였다, HPLC 순도 = 56 % (220 nm); 유지 시간 = 0.680분. 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ = 7.42 - 7.32 (m, 5H), 5.15 (s, 2H), 4.58 (quin, J = 7.5 Hz, 1H), 2.83 - 2.72 (m, 1H), 2.65 (dtd, J = 2.6, 7.2, 9.7 Hz, 2H), 2.60 - 2.48 (m, 2H). 19F NMR (377 MHz, 클로로포름-d) δ = -59.56 (s, 1F).
단계 3: THF(10 mL) 중 벤질 3-(트리플루오로메톡시)시클로부탄카르복실레이트(1.00 당량, 864 mg, 3.15 mmol)의 용액에 습식 Pd(OH)2(0.119 당량, 263 mg, 0.375 mmol)를 N2 분위기 하에 첨가하고, 혼합물을 H2에 의해 3회 퍼징한 다음, 혼합물을 H2 분위기(풍선, 15psi) 하에 25℃에서 12시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 직접 여과하고, 케이크를 EtOAc(20 mL)로 세척하였다. 합쳐진 여액을 농축시켜 미정제 3-(트리플루오로메톡시)시클로부탄카르복시산(525 mg, 2.85 mmol, 90% 수율)을 짙은 녹색 오일로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ = 4.69 - 4.50 (m, 1H), 2.84 - 2.73 (m, 1H), 2.73 - 2.64 (m, 2H), 2.62 - 2.50 (m, 2H). 19F NMR (376 MHz, 클로로포름-d) δ = -59.61 (s, 1F).
단계 4: 아르곤 하의 반응 바이알에 Ir[dF(CF3)ppy)]2(dtbbpy)PF6(0.00500 당량, 4.3 mg, 0.00385 mmol), 암모늄 퍼설페이트(4.00 당량, 704 mg, 3.08 mmol), 3-(트리플루오로메톡시)시클로부탄카르복실산(3.00 당량, 426 mg, 2.31 mmol) 및 2-클로로-6,7-디메틸-프테리딘(1.00 당량, 150 mg, 0.771 mmol)을 채웠다. 무수 DMSO(5 mL)를 첨가하고, 바이알을 밀봉하고 질소 하에 두었다. 반응물을 교반하고, 냉각 팬이 구비된 34 W 청색 LED 램프(7 cm 거리)로 조사하여 반응 온도를 25℃에서 14시간 동안 유지시켰다. LCMS는 출발 물질이 소모되었음을 나타냈고 목적하는 생성물(38%, Rt: 0.958분; [M+H]+ = 220 nm에서 333.0)이 형성되었음을 나타냈다. 반응 혼합물을 물(20 mL)에 붓고 EtOAc(20 mL 3회)로 추출하였다. 합쳐진 유기상을 염수(20 mL)로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 플래쉬 컬럼(PE 내지 EtOAc 조건, PE: EtOAc= 1:3 하에 40% 내지 70%, Rf = 0.5)으로 정제하고 농축시켜 2-클로로-6,7-디메틸-4-[3-(트리플루오로메톡시)시클로부틸]프테리딘(103 mg, 0.310 mmol, 40.17 % 수율)을 갈색 고형분으로서 수득하였다. LCMS: [M+H]+ = 475.1; 유지 시간 = 0.644분. 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ = 4.84 (quin, J = 7.6 Hz, 1H), 4.43 - 4.31 (m, 1H), 2.95 - 2.84 (m, 4H), 2.83 (s, 3H), 2.78 (s, 3H). 19F NMR (376 MHz, 클로로포름-d) δ = -59.42 (s, 1F).
단계 5: THF(1 mL) 중 (2S,6R)-2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)-6-메틸-모르폴린(2.00 당량, 72 mg, 0.349 mmol), 2-클로로-6,7-디메틸-4-[3-(트리플루오로메톡시)시클로부틸]프테리딘(1.00 당량, 58 mg, 0.174 mmol)의 용액에 DIEA(4.00당량, 0.12 mL, 0.697 mmol)를 첨가한 다음, 혼합물을 80℃에서 20분 동안 교반하였다. LCMS는 출발 물질이 소모되었고, 목적하는 생성물(68%, Rt: 0.671분; [M+H]+ = 220 nm에서 504.4)이 형성되었음을 나타냈다. 반응 혼합물을 물(10 mL) 및 EtOAc(10 mL)로 희석한 다음, 혼합물을 여과하고 케이크를 EtOAc(10 mL 5회)로 세척하였다. 여액을 EtOAc(10 mL 3회)로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 염수(10 mL)로 세척하고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 플래쉬 컬럼(컬럼: Phenomenex Synergi C18 150 * 25 mm, 10 um; 조건: 물(FA)-ACN)으로 정제하여 (2S,6R)-2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)-4-[6,7-디메틸-4-[3-(트리플루오로메톡시)시클로부틸]프테리딘-2-일]-6-메틸-모르폴린(20 mg, 0.0393 mmol, 22.56 % 수율)을 황색 고형분으로서 수득하고 (2S,6R)-2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)-4-[6,7-디메틸-4-[3-(트리플루오로메톡시)시클로부틸]프테리딘-2-일]-6-메틸-모르폴린(13 mg, 0.0260 mmol, 14.92 % 수율)을 황색 고형분으로서 수득하였다. LCMS: [M+H]+ = 504.2, 순도 = 100 % (220 nm); 유지 시간 = 1.007분. 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ = 7.60 - 7.54 (m, 2H), 5.16 - 5.08 (m, 1H), 5.06 - 4.96 (m, 1H), 4.82 (quin, J = 7.6 Hz, 1H), 4.61 (dd, J = 2.5, 10.9 Hz, 1H), 4.29 - 4.16 (m, 1H), 3.90 - 3.77 (m, 1H), 3.60 (tt, J = 3.7, 7.2 Hz, 1H), 3.16 - 3.02 (m, 1H), 2.91 - 2.80 (m, 3H), 2.76 - 2.67 (m, 5H), 2.63 (s, 3H), 1.35 (br d, J = 5.8 Hz, 3H), 1.14 (br s, 2H), 1.08 - 0.99 (m, 2H). 19F NMR (376 MHz, 클로로포름-d) δ = -59.21 (s, 1F). 제2 피크 [M+H]+ = 504.2, 순도 = 98 % (220 nm); 유지 시간 = 1.017분. 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ = 7.55 (br d, J = 6.5 Hz, 2H), 5.18 - 4.91 (m, 3H), 4.80 - 4.68 (m, 1H), 4.67 - 4.58 (m, 1H), 3.91 - 3.78 (m, 1H), 3.65 - 3.54 (m, 1H), 3.16 - 3.02 (m, 1H), 2.91 - 2.67 (m, 8H), 2.66 - 2.57 (m, 3H), 1.35 (br d, J = 6.1 Hz, 3H), 1.18 - 1.10 (m, 2H), 1.07 - 0.97 (m, 2H). 19F NMR (376 MHz, 클로로포름-d) δ = -59.17 (s, 1F).
화합물 I-1733의 합성
단계 1: MeCN(16 mL) 중 부트-3-엔-1-설포닐클로라이드(1.00당량, 4300 mg, 27.8 mmol)의 용액에 MeCN(8 mL) 중 NH3.H2O(43.1당량, 40 mL, 1200 mmol)를 0℃에서 적가한 다음, 혼합물을 0℃에서 2시간 동안 교반하였다. 혼합물에 물(80 mL)을 첨가한 다음, 반응 혼합물을 DCM(150 mL * 3)으로 추출한 다음, 수상을 EtOAc(150 mL * 3)로 추출하고, 유기상을 합치고, Na2SO4 상에서 건조시키고, 여과하고 감압 하에 농축시켜 부트-3-엔-1-설폰아미드(3200 mg, 23.7 mmol, 85.12% 수율)를 백색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3, 298 K) 이동 (ppm) = 5.86 (tdd, J = 6.6, 10.3, 17.0 Hz, 1H), 5.26 - 5.10 (m, 2H), 4.58 (br s, 2H), 3.30 - 3.18 (m, 2H), 2.71 - 2.58 (m, 2H).
단계 2: DCM(100 mL) 중 부트-3-엔-1-설폰아미드(1.00 당량, 3200 mg, 23.7 mmol)의 용액에 PhI(OAc)2(1.50 당량, 11437 mg, 35.5 mmol), Rh2(OAc)4(0.0500 당량, 528 mg, 1.18 mmol) 및 Al2O3(2.50 당량, 6034 mg, 59.2 mmol)을 한꺼번에 첨가한 다음, 혼합물을 N2 하에 30℃에서 12시간 동안 교반하였다. TLC는 출발 물질이 소모되었음을 나타내었고, 목적하는 피크가 형성되었다. (PE/EtOAc = 1/2, 목적하는 생성물 Rf=0.3, 출발 물질 Rf=0.6, 발색제로서 포스포몰리브드산). 혼합물을 증발시켜 잔류물을 수득하고, 잔류물을 컬럼 크로마토그래피(헥산/에틸 아세테이트=0~70%, PE/EtOAc = 1/2, 목적하는 생성물 Rf=0.3)로 정제하여 2λ6-티아-1-아자바이시클로[3.1.0]헥산 2,2-디옥사이드(2800 mg, 21.0 mmol, 88.82% 수율)를 백색 고형분으로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3, 298 K) 이동 (ppm) = 3.23 - 3.16 (m, 1H), 3.15 - 3.06 (m, 1H), 2.87 - 2.74 (m, 1H), 2.70 - 2.62 (m, 2H), 2.47 (dd, J = 2.7, 5.1 Hz, 1H), 2.30 (dd, J = 2.8, 4.3 Hz, 1H).
단계 3: DCM(40 mL) 중 BnOH(3.00당량, 5.6 mL, 54.1 mmol) 및 2λ6-티아-1-아자바이시클로[3.1.0]헥산 2,2-디옥사이드(1.00당량, 2400 mg, 18.0 mmol)의 용액에 BF3.Et2O(0.1000당량, 256 mg, 1.80 mmol)를 15℃에서 나누어 첨가한 다음, 혼합물을 N2 하에 15℃에서 3시간 동안 교반하였다. LCMS는 원료가 완전히 소모되었음을 나타냈고, 주요 피크는 MS를 나타냈다(88%, Rt: 0.734분; [M+H]+ = 220 nm에서 242.1). TLC는 목적하는 생성물을 발견하였다(헥산/에틸 아세테이트=1:1, Rf=0.6). 혼합물을 증발시켜 잔류물을 수득하고, 잔류물을 컬럼 크로마토그래피(헥산/에틸 아세테이트=0~60%, PE/EtOAc = 1/1, 목적하는 생성물 Rf=0.6)로 정제하여 4-벤질옥시티아지난 1,1-디옥사이드(3200 mg, 12.6 mmol, 70% 수율)를 무색 오일로서 수득하였다. LCMS: 97.5 % 순도, Rt: 0.658분; [M+H]+ = 220 nm에서 242.1); 1H NMR (400 MHz, CDCl3, 298 K) 이동 (ppm) = 7.44 - 7.30 (m, 5H), 4.65 - 4.52 (m, 2H), 4.47 (br d, J = 8.0 Hz, 1H), 3.63 - 3.45 (m, 3H), 3.44 - 3.31 (m, 1H), 3.10 (td, J = 3.9, 13.5 Hz, 1H), 2.46 - 2.38 (m, 1H), 2.36 - 2.27 (m, 1H).
단계 4: 1,4-디옥산(40 mL) 중 4-벤질옥시티아지난 1,1-디옥사이드(1.00 당량, 2900 mg, 12.0 mmol) 및 1-시클로프로필-4-요오드-피라졸(2.00 당량, 5625 mg, 24.0 mmol)의 용액에 CuI(3.00 당량, 6866 mg, 36.1 mmol), K2CO3(3.00 당량, 4983 mg, 36.1 mmol) 및 DMEDA(4.00 당량, 4237 mg, 48.1 mmol)를 한꺼번에 15℃에서 첨가한 다음, 혼합물을 105℃에서 12시간 동안 교반하였다. LCMS는 원료가 완전히 소모되었음을 나타냈고, 주요 피크는 MS를 나타냈다(40.7%, Rt: 0.766분; [M+H]+ = 220 nm에서 348.2). 반응 혼합물을 여과하고, 필터 케이크를 DCM(100 mL)으로 세척하고, 용매를 합치고, 증발시켜 잔류물을 수득하고, 잔류물을 컬럼 크로마토그래피(헥산/에틸 아세테이트=0~60%, PE/EtOAc = 1/1, 목적하는 생성물 Rf=0.4)로 정제하여 4-벤질옥시-2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)티아지난 1을 수득하고, 4-벤질옥시-2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)티아지난 1,1-디옥시드(4000 mg, 10.9 mmol, 91.01 % 수율)를 무색 오일로서 수득하였다, 41% 순도, Rt: 0.766분; [M+H]+ = 220 nm에서 348.2); 1H NMR (400 MHz, CDCl3, 298 K) 이동 (ppm) = 7.50 (s, 1H), 7.46 (s, 1H), 7.41 - 7.31 (m, 5H), 4.58 (s, 2H), 3.94 - 3.87 (m, 1H), 3.74 - 3.66 (m, 2H), 3.51 (tt, J = 3.8, 7.3 Hz, 1H), 3.42 (td, J = 7.5, 13.4 Hz, 1H), 3.08 (td, J = 4.9, 13.3 Hz, 1H), 2.48 (td, J = 4.1, 7.7 Hz, 2H), 1.08 - 1.02 (m, 2H), 1.00 - 0.93 (m, 2H).
단계 5: DCM(30 mL) 중 4-벤질옥시-2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)티아지난 1,1-디옥사이드(1.00 당량, 1200 mg, 3.45 mmol)의 용액에 DCM(3 mL) 중 BBr3(3.00 당량, 3.3 mL, 10.4 mmol)을 0℃에서 적가한 다음, 혼합물을 N2 하에 0℃에서 4시간 동안 교반하였다. TLC는 출발 물질이 소모되었고, 새로운 피크가 형성되었음을 나타냈다. (DCM/MeOH = 15/1, 목적하는 생성물 Rf = 0.3, 발색제로서의 포스포몰리브드산). 반응 혼합물을 NaHCO3 용액(10 mL)으로 급냉시킨 다음, 혼합물을 증발시켜 잔류물을 수득하고, 잔류물을 컬럼 크로마토그래피(헥산/에틸 아세테이트 = 10:1~0:1, 이어서 에틸 아세테이트:MeOH = 3:1, 목적하는 생성물 Rf = 0.3, DCM/MeOH = 15/1)로 정제하여 2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)-1,1-디옥소-티아지난-4-올(500 mg, 1.94 mmol, 56.26% 수율)을 황색 오일로서 수득하였다. 1H NMR (400 MHz, CDCl3, 296 K) 이동 (ppm) = 7.51 (br s, 1H), 7.43 (br s, 1H), 3.91 (br s, 1H), 3.72 (br d, J = 13.6 Hz, 1H), 3.54 - 3.41 (m, 2H), 3.30 (br dd, J = 3.9, 13.2 Hz, 2H), 3.00 - 2.91 (m, 1H), 2.38 - 2.27 (m, 1H), 2.26 - 2.16 (m, 1H), 1.00 (br s, 2H), 0.90 (br d, J = 5.0 Hz, 2H).
단계 6: MeCN(25 mL) 중 2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)-1,1-디옥소-티아지난-4-올(1.00 당량, 1100 mg, 4.27 mmol)의 용액에 IBX(3.00 당량, 3386 mg, 12.8 mmol)를 한꺼번에 첨가한 다음, 혼합물을 90℃에서 3시간 동안 교반하였다. 혼합물을 여과한 다음, 용매를 증발시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 역상 컬럼(C18 150*40 mm*15 um, 0.1% FA)으로 정제하고, 용매를 동결건조시켜 2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)-1을 수득하고,1-디옥소-티아지난-4-온(800 mg, 3.13 mmol, 73.30% 수율)을 황색 오일로서 수득하였다, 83% 순도, Rt: 0.209분; [M+H]+ = 256.0 및 [M+H+18]+ = 220 nm에서 274.2; 1H NMR (400 MHz, CDCl3, 298 K) 이동 (ppm) = 7.50 (s, 1H), 7.39 (s, 1H), 4.30 (s, 2H), 3.57 (td, J = 3.6, 7.3 Hz, 1H), 3.51 (t, J = 6.8 Hz, 2H), 3.10 (t, J = 6.8 Hz, 2H), 1.16 - 1.10 (m, 2H), 1.07 - 1.01 (m, 2H).
단계 7: THF (30 mL) 중 2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)-1,1-디옥소-티아지난-4-온(1.00 당량, 400 mg, 1.57 mmol)의 무색 혼합물에 LiHMDS(1.50 당량, 2.4 mL, 2.35 mmol)를 -78℃에서 N2 분위기 하에 1시간 동안 적가하고, THF(6 mL) 중 N-(4-클로로-2-피리딜)-1,1,1-트리플루오로-N-(트리플루오로메틸설포닐)메탄설폰아미드(1.00 당량, 615 mg, 1.57 mmol)를 N2 분위기 하에 -78℃에서 적가한 다음, 혼합물을 -78℃에서 0.5시간 동안 교반하고 15℃에서 12시간 동안 교반하여 적색 용액을 수득하였다. LCMS는 원료가 완전히 소모되었음을 나타냈고 목적하는 MS를 나타냈다(26%, Rt: 0.860분; [M+H]+ = 220 nm에서 387.9, ESI+). NH4Cl(2 mL)을 혼합물에 첨가한 다음, NaHCO3 용액(3 mL)을 첨가하고, 혼합물을 역상 컬럼(C18 150 * 40 mm * 15 um, 0.1% FA)으로 정제하고, 용매를 동결건조시켜 [2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)-1,1-디옥소-5,6-디히드로티아진-4-일]트리플루오로메탄설포네이트(220 mg, 0.568 mmol, 36.25% 수율)를 황색 오일로서 수득하였다, 85% 순도, Rt: 0.787분; [M+H]+ = 388.1, 220 nm).
단계 8: 1,4-디옥산(12 mL) 중 [2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)-1,1-디옥소-5,6-디히드로티아진-4-일] 트리플루오로메탄설포네이트(1.00 당량, 420 mg, 1.08 mmol)의 무색 혼합물에 B2pin2(1.50 당량, 413 mg, 1.63 mmol), KOAc(3.00 당량, 319 mg, 3.25 mmol), Pd(dppf)Cl2·DCM(0.100 당량, 88 mg, 0.108 mmol)을 한꺼번에 첨가한 다음, 혼합물을 N2 분위기 하에 90℃에서 12시간 동안 교반하여 흑색 용액을 수득하였다. LCMS는 원료가 완전히 소모되었음을 나타냈고 목적하는 MS를 나타냈다(44%, Rt: 0.895분; [M+H]+ = 220 nm에서 366.0, ESI+). 반응 혼합물을 증발시켜 잔류물을 수득하고, 잔류물을 역상 컬럼(C18 150*40 mm*15 um, 0.1% FA)으로 정제하고, 용매를 동결건조시켜 2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)-5,6-디히드로티아진 1,1-디옥사이드(270 mg, 0.665 mmol, 61.36% 수율)를 황색 고형분으로서 수득하였다, 74% 순도, Rt: 0.89분; [M+H]+ = 220 nm에서 366.0).
단계 9: 1,4-디옥산(12 mL) 중 2-클로로-4-(4-클로로-2-플루오로-페닐)-6,7-디메틸-프테리딘(1.20 당량, 127 mg, 0.394 mmol)의 혼합물에 2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)-4-(4,4,5,5-테트라메틸-1,3,2-디옥사보롤란-2-일)-5,6-디히드로티아진 1,1-디옥시드(1.00 당량, 120 mg, 0.329 mmol), K2CO3(3.00 당량, 136 mg, 0.986 mmol), Pd(dppf)Cl2·DCM(0.100 당량, 27 mg, 0.0329 mmol)을 첨가한 다음, 갈색 혼합물을 N2 분위기 하에서 80℃에서 12시간 동안 교반하여 흑색 용액을 수득하였다. LCMS: 원료가 완전히 소모되었음을 나타냈고 목적하는 MS를 나타냈다(60%, Rt: 0.979분; [M+H]+ = 220 nm에서 526.0, ESI+). 반응 혼합물을 여과하고, 필터 케이크를 DCM(30 mL)으로 세척하고, 용매를 합치고, 증발시켜 잔류물을 수득하고, 잔류물을 역상 컬럼(C18 150*40 mm*15 um, 0.1% FA)으로 정제하고, 용매를 동결건조시켜 4-[4-(4-클로로-2-플루오로-페닐)-6,7-디메틸-프테리딘-2-일]-2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)-5,6-디히드로티아진 1,1-디옥시드(80 mg, 0.137 mmol, 41.67 % 수율)를 황색 고형분으로서 수득하였다, 94% 순도, Rt: 0.96분; [M+H]+ = 220 nm에서 366.0).
단계 10: THF(25 mL) 중 4-[4-(4-클로로-2-플루오로-페닐)-6,7-디메틸-프테리딘-2-일]-2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)-5,6-디히드로티아진 1,1-디옥사이드(1.00 당량, 120 mg, 0.228 mmol)의 용액에 1,1'-비스(디-i-프로필포스피노)페로센(1,5-시클로옥타디엔)로듐(I) 테트라플루오로보레이트(0.400 당량, 65 mg, 0.0913 mmol)를 N2 분위기 하에 첨가하고, 혼합물을 H2에 의해 3회 퍼징한 다음, H2 분위기(balloon, 15 psi) 하에 50℃에서 1.5시간 동안 교반하였다. LCMS는 목적하는 MS(528.2, [M+H]+, ESI+)를 발견하였다. 반응 혼합물을 여과한 다음, 여액을 증발시켜 잔류물을 수득하였다. 잔류물을 분취-TLC(DCM/MeOH = 20/1, 목적하는 생성물 Rf = 0.4)로 정제하여 약 20 mg의 미정제 생성물(약 90% 순도) 및 4-[4-(4-클로로-2-플루오로-페닐)-6,7-디메틸-프테리딘-2-일]-2-(1-시클로프로필피라졸-4-일)티아지난 1,1-디옥사이드(52 mg, 0.0962 mmol, 42.18% 수율)를 황색 고형분으로서 수득하였다. 순수 화합물을 동결건조시켜 황색 고형분, 라세미체를 수득하였다, 97.7% 순도, Rt: 0.925분; [M+H]+ = 528.1, 220 nm; HPLC: Rt: 2.16분, 215 nm에서 97.2% 순도. 1H NMR (400 MHz, CDCl3, 298 K) 이동 (ppm) = 7.67 (t, J = 7.8 Hz, 1H), 7.56 (s, 1H), 7.47 (s, 1H), 7.36 (dd, J = 1.7, 8.3 Hz, 1H), 7.30 (dd, J = 1.8, 9.5 Hz, 1H), 4.49 (dd, J = 9.5, 13.4 Hz, 1H), 4.18 - 4.10 (m, 1H), 3.82 - 3.74 (m, 1H), 3.59 - 3.45 (m, 2H), 3.37 - 3.28 (m, 1H), 3.04 (dtd, J = 3.7, 10.6, 14.2 Hz, 1H), 2.89 - 2.83 (m, 4H), 2.76 (s, 3H), 1.15 - 1.08 (m, 2H), 1.03 - 0.96 (m, 2H). 19F NMR (376.5 MHz, CDCl3, 298 K), 이동 (ppm) = -108.40. 키랄 SFC는 반응 생성물이 2개의 입체이성질체의 1:1 비율을 갖는 라세미 혼합물임을 나타냈다.
화합물 I-1736 및 I-1738의 합성
단계 1: DMF(7 mL) 중 (2R,6S)-2-시클로프로필-4-(p-톨일설포닐)-6-(1H-피라졸-4-일)모르폴린(1.00 당량, 600 mg, 1.73 mmol) 및 K2CO3(2.00 당량, 477 mg, 3.45 mmol)의 용액에 브로모(메톡시) 메탄(1.70 당량, 0.24 mL, 2.94 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 25℃에서 2시간 동안 교반하였다. LCMS는 출발 물질이 거의 완전히 소모되었고 목적하는 생성물 질량(69%, MS: 392.2 [M+H]+, ESI pos)을 갖는 주요 피크가 있음을 나타냈다. 혼합물을 EtOAc(500 mL)로 추출하였다. 합쳐진 유기층을 무수 황산나트륨 상에서 건조시키고, 감압 하에 농축시켜 미정제 생성물을 수득하였다. 미정제 생성물을 석유 에테르/에틸 아세테이트 = 100:1 내지 1로 용리된 실리카 겔을 이용한 컬럼 크로마토그래피로 정제하였다: 1, Rf = 0.4로 정제하여 (2R, 6S)-2-시클로프로필-6-[1-(메톡시메틸)피라졸-4-일]-4-(p-톨일설포닐)모르폴린(600 mg, 1.53 mmol, 88.75% 수율)을 황색 오일로서 수득하였다. LCMS: (M+H)+ = 392.2; 순도 = 97% (220 nm); 유지 시간 = 0.733분. 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ ppm 0.26 - 0.36 (m, 1 H) 0.38 - 0.46 (m, 1 H) 0.49 - 0.62 (m, 1 H) 0.74 - 0.86 (m, 1 H) 2.16 - 2.29 (m, 1 H) 2.46 (s, 2 H) 2.89 (s, 3 H) 2.96 (s, 3 H) 3.02 (ddd, J=10.38, 8.19, 2.44 Hz, 1 H) 3.33 (s, 2 H) 3.68 - 3.79 (m, 1 H) 4.56 - 4.66 (m, 1 H) 5.33 (s, 1 H) 7.36 (d, J=8.00 Hz, 1 H) 7.50 (d, J=11.38 Hz, 1 H) 7.65 (d, J=8.25 Hz, 1 H) 8.02 (s, 1 H).
단계 2: 메탄올(15 mL) 중 (2R, 6S)-2-시클로프로필-6-[1-(메톡시메틸)피라졸-4-일]-4-(p-톨일설포닐) 모르폴린(1.00 당량, 600 mg, 1.53 mmol)의 용액에 Mg(칩)(10.0 당량, 368 mg, 15.3 mmol) 및 Mg(분말)(10.0 당량, 368 mg, 15.3 mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 N2 분위기 하에 80℃에서 12시간 동안 교반하였다. LCMS는 출발 물질이 여전히 남아 있음을 나타냈다. 그런 다음, 반응 혼합물에 Mg(칩)(10.0 당량, 368 mg, 15.3 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 N2 분위기 하에 80℃에서 12시간 동안 추가로 교반하였다. LCMS는 출발 물질이 완전히 소모되었음을 나타냈다. 반응 혼합물을 셀라이트로 여과하여 미정제 생성물을 수득하고, 미정제 생성물을 다음 단계에 직접 사용하였다. LCMS: (M+H)+ = 238.1; 순도 = 57% (220 nm); 유지 시간 = 0.552분.
단계 3: DMSO(4 mL) 중 2-클로로-4-(2, 4-디플루오로페닐)-6, 7-디메틸-프테리딘(1.00 당량, 200 mg, 0.652 mmol) 및 (2R, 6S )-2-시클로프로필-6-[1-(메톡시메틸) 피라졸-4-일]모르폴린(2.00 당량, 309 mg, 1.30 mmol)의 용액에 DIEA(5.00 당량, 0.54 mL, 3.26 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 100℃℃℃℃동안 교반하였다. LCMS는 출발 물질이 목적하는 생성물 질량(51%, MS: 508.3 [M+H]+, ESI pos)을 갖는 주요 피크의 외관과 함께 완전히 소모되었음을 나타냈다. 혼합물을 감압 하에 농축시키고, 역상 크로마토그래피(0.5% FA)로 정제하여 200 mg의 황색 고형분을 수득하고, LCMS, (M+H)+ = 508.3; 순도 = 100% (220 nm); 유지 시간 = 0.909분으로 확인하였다.
단계 4: 단계 3의 혼합물을 SFC(DAICEL CHIRALPAK AD (250 mm*30 mm, 10 um), 이동상: CO2의 경우 상 A, 및 MeOH (0.05% DEA)의 경우 상 B; 구배 용리: CO2 중 40% MeOH (0.05% DEA) 유속: 3 mL/분; 검출기: PDA, 컬럼 온도: 35C; 배압: 100 Bar)로 정제하여 (2R, 6S)-2-시클로프로필-4-[4-(2, 4-디플루오로페닐)-6,7-디메틸-프테리딘-2-일]-6-[1-(메톡시메틸) 피라졸-4-일]모르폴린(79 mg, 0.155 mmol, 23.84% 수율)을 황색 고형분으로서 수득하고 (2S,6R)-2-시클로프로필-4-[4-(2,4-디플루오로페닐)-6,7-디메틸-프테리딘-2-일]-6-[1-(메톡시메틸)피라졸-4-일] 모르폴린(74 mg, 0.145 mmol, 22.18% 수율)을 황색 고형분으로서 수득하였다. LCMS: (M+H)+ = 508.2; 순도 = 100% (220 nm); 유지 시간 = 0.970분.1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ ppm 0.35 - 0.53 (m, 2 H) 0.55 - 0.67 (m, 2 H) 0.96 - 1.08 (m, 1 H) 2.60 (s, 3 H) 2.72 (s, 3 H) 3.01 - 3.15 (m, 3 H) 3.36 (s, 3 H) 4.58 (dd, J=10.88, 2.45 Hz, 1 H) 4.98 - 5.16 (m, 2 H) 5.38 (s, 2 H) 6.94 - 7.02 (m, 1 H) 7.02 - 7.10 (m, 1 H) 7.66 (d, J=5.50 Hz, 2 H) 7.69 - 7.77 (m, 1 H), 및 LCMS: (M+H)+ = 508.2; 순도 = 100% (220 nm); 유지 시간 = 0.969분. HPLC: 유지 시간 =2.397 min, 220 nm에서 99% 순도. 1H NMR (400 MHz, 클로로포름-d) δ ppm 0.33 (s, 2 H) 0.55 - 0.71 (m, 2 H) 0.95 - 1.09 (m, 1 H) 2.60 (s, 3 H) 2.72 (s, 3 H) 2.99 - 3.14 (m, 3 H) 3.36 (s, 3 H) 4.59 (dd, J=10.76, 2.45 Hz, 1 H) 5.13 (br s, 2 H) 5.38 (s, 2 H) 6.95 - 7.02 (m, 1 H) 7.02 - 7.10 (m, 1 H) 7.66 (d, J=5.50 Hz, 2 H) 7.69 - 7.77 (m, 1 H).
예 A3: 시험관 내 검정 데이터
비장 티로신 키나아제(“Syk”, Spleen Tyrosine Kinase) 검정의 세포 인산화를 사용하여, 발현된 유발 수용체가 골수 세포 2 활성에 미치는 영향을 시험관 내에서 측정하기
TREM2 작용제 효능의 측정은 인간 TREM2 및 DAP12를 발현하는 HEK 세포주(HEK293T-hTREM2 세포)를 사용하여 수행하였다. TREM2에 대한 소분자의 결합 및 활성화는 Syk의 인산화를 증가시킨다. 생성된 Syk 인산화 수준은 상업적 AlphaLisa 시약 키트를 사용하여 측정하였다. 검정을 수행하기 위해, HEK-hTREM2 세포를 25 μL의 완전 성장 배지 중의 384 웰 플레이트에 웰 당 14,000개의 세포로 도말하고, 37℃, 5% CO2 하에 20-24시간 동안 인큐베이션하였다.
검정에 앞서, 시험 화합물을 검정 완충액 중 384 웰 플레이트에서 희석하고 30분 동안 평형화시켰다. 블롯팅지를 반전시켜 세포 플레이트로부터 성장 배지를 제거하고, 검정 완충액 중 25 μL의 시험 화 물질을 세포에 첨가하였다. 세포를 실온에서 45분 동안 인큐베이션하였다. 45분 후, 검정 완충액을 제거하고 10 μL의 용해 완충액을 첨가하였다. 플레이트를 실온에서 350 RPM으로 20분 동안 진탕시켰다. 완전히 용해된 후, AlphaLisa 시약을 용해물에 첨가하고, Perkin Elmer Envision 플레이트 판독기를 사용하여 형광 강도를 측정하였다. 강도를 사용해 표준 곡선을 생성하고, 활성화 백분율(%)을 계산하였다. Prism v9 소프트웨어를 사용해 곡선 피팅을 수행하고, 곡선 피팅으로부터 log(작용제) 대 반응 - 가변 기울기(4 파라미터) 및 EC50을 계산하였다.
표 D에 제시된 결과는 전술한 시험관 내 검정으로 생성하였다. 이 검정은 본원에 기술된 화합물 중 어느 하나를 시험하여 화합물이 TREM2의 작용제로서 작용하는 능력을 평가하고 특성화하는 데 사용될 수 있다.
“A”로서 지정된 화합물은 ≤ 0.05 μM의 EC50을 나타냈다. “B”로서 지정된 화합물은 EC50 > 0.05 μM 및 ≤ 0.5 μM을 나타냈다. “C”로서 지정된 화합물은 EC50 > 0.5 μM 및 ≤ 3.0 μM을 나타냈다. “D”로서 지정된 화합물은 EC50 > 3.0 μM 및 ≤ 100 μM을 나타냈다. “-”로서 지정된 화합물은 본 출원의 출원일 현재 시험한 적이 없었지만, 본원에 기술된 방법을 사용하여 시험할 수 있다.
표 D. hTREM2 EC50 데이터(HEK293 세포)
표 D-2. hTREM2 EC50 데이터(HEK293 세포):
본원에 인용된 모든 참조 문헌, 예를 들어 과학 간행물 또는 특허 출원 공개는 마치 각각의 참조 문헌이 모든 목적을 위해 그 전체가 참조로서 통합되도록 구체적으로 및 개별적으로 표시된 것과 같은 정도로 모든 목적을 위해 그 전체가 참조로서 본원에 통합된다.

Claims (26)

  1. 식 IIIa의 화합물
    IIIa, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염으로서;
    여기서
    R2는 H 또는 메틸이고;
    R4는 , , 또는 이고;
    R5는 C3-6시클로알킬, C5-8스피로알킬, C5-8트리시클로알킬, 시클로펜트-1-엔-1-일, 시클로헥스-1-엔-1-일, 페닐, 6원 헤테로아릴, 아지리딘-1-일, 피롤리딘-1-일, 3-아자바이시클로[3.1.0]헥산-3-일, 피페리딘-1-일, 또는 -OCH2-(C3-6시클로알킬)이고,
    여기서 C3-6시클로알킬, C5-8스피로알킬, C5-8트리시클로알킬, 시클로펜트-1-엔-1-일, 시클로헥스-1-엔-1-일, 페닐, 및 6원 헤테로아릴은 할로겐, C1-3알킬, 및 C1-3할로알킬로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 치환기로 추가로 임의 치환되고,
    여기서 아지리딘-1-일, 피롤리딘-1-일, 3-아자바이시클로[3.1.0]헥산-3-일, 피페리딘-1-일, 및 -OCH2-(C3-6시클로알킬)은 할로겐, C1-3알킬, C1-3할로알킬, 및 C1-3알콕시로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 치환기로 추가로 치환되고;
    R6은 H 또는 메틸이고;
    R7은 메틸이고;
    단,
    R4가 이고 R2가 H인 경우, R5는 , , , , , , , , 또는 이 아니며;
    R4가 이고 R2가 H인 경우, R5는 , , , , , , , 또는 이 아닌, 화합물.
  2. 식 IIIa의 화합물
    IIIa, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염으로서;
    여기서
    R2는 H 또는 메틸이고;
    R4는 이고;
    R5는 C3-6시클로알킬, C5-8스피로알킬, C5-8트리시클로알킬, 시클로펜트-1-엔-1-일, 시클로헥스-1-엔-1-일, 페닐, 6원 헤테로아릴, 아지리딘-1-일, 피롤리딘-1-일, 3-아자바이시클로[3.1.0]헥산-3-일, 피페리딘-1-일, 또는 -OCH2-(C3-6시클로알킬)이고,
    여기서 C3-6시클로알킬, C5-8스피로알킬, C5-8트리시클로알킬, 시클로펜트-1-엔-1-일, 시클로헥스-1-엔-1-일, 페닐, 및 6원 헤테로아릴은 할로겐, C1-3알킬, 및 C1-3할로알킬로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 치환기로 추가로 임의 치환되고,
    여기서 아지리딘-1-일, 피롤리딘-1-일, 3-아자바이시클로[3.1.0]헥산-3-일, 피페리딘-1-일, 및 -OCH2-(C3-6시클로알킬)은 할로겐, C1-3알킬, C1-3할로알킬, 및 C1-3알콕시로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 치환기로 추가로 치환되고;
    R6은 H 또는 메틸이고;
    R7은 메틸인, 화합물.
  3. 식 IIIa의 화합물
    IIIa, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염으로서;
    여기서
    R2는 메틸이고;
    R4는 , , 또는 이고;
    R5는 C3-6시클로알킬, C5-8스피로알킬, C5-8트리시클로알킬, 시클로펜트-1-엔-1-일, 시클로헥스-1-엔-1-일, 페닐, 6원 헤테로아릴, 아지리딘-1-일, 피롤리딘-1-일, 3-아자바이시클로[3.1.0]헥산-3-일, 피페리딘-1-일, 또는 -OCH2-(C3-6시클로알킬)이고,
    여기서 C3-6시클로알킬, C5-8스피로알킬, C5-8트리시클로알킬, 시클로펜트-1-엔-1-일, 시클로헥스-1-엔-1-일, 페닐, 및 6원 헤테로아릴은 할로겐, C1-3알킬, 및 C1-3할로알킬로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 치환기로 추가로 임의 치환되고,
    여기서 아지리딘-1-일, 피롤리딘-1-일, 3-아자바이시클로[3.1.0]헥산-3-일, 피페리딘-1-일, 및 -OCH2-(C3-6시클로알킬)은 할로겐, C1-3알킬, C1-3할로알킬, 및 C1-3알콕시로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 치환기로 추가로 치환되고;
    R6은 H 또는 메틸이고;
    R7은 Me인, 화합물.
  4. 식 IIIa의 화합물
    IIIa, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염으로서;
    여기서
    R2는 H 또는 메틸이고;
    R4는 5원 헤테로아릴 또는 6원 헤테로아릴이고; 여기서 5원 헤테로아릴 또는 6원 헤테로아릴기는 C1-6알킬, C1-6알콕시, 및 C3-6시클로알킬로부터 독립적으로 선택된 1 내지 3개의 치환기로 임의 치환되고;
    R5는 또는 이고;
    R6은 H 또는 메틸이고;
    R7은 Me인, 화합물.
  5. 식 IIIb의 화합물
    IIIb, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염으로서;
    여기서
    R2는 H 또는 메틸이고;
    R4는 또는 이고;
    R5는 C3-6시클로알킬, C5-8스피로알킬, C5-8트리시클로알킬, 시클로펜트-1-엔-1-일, 시클로헥스-1-엔-1-일, 페닐, 6원 헤테로아릴, 아지리딘-1-일, 피롤리딘-1-일, 3-아자바이시클로[3.1.0]헥산-3-일, 피페리딘-1-일, 또는 -OCH2-(C3-6시클로알킬)이고,
    여기서 C3-6시클로알킬, C5-8스피로알킬, C5-8트리시클로알킬, 시클로펜트-1-엔-1-일, 시클로헥스-1-엔-1-일, 페닐, 및 6원 헤테로아릴은 할로겐, C1-3알킬, 및 C1-3할로알킬로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 치환기로 추가로 임의 치환되고,
    여기서 아지리딘-1-일, 피롤리딘-1-일, 3-아자바이시클로[3.1.0]헥산-3-일, 피페리딘-1-일, 및 -OCH2-(C3-6시클로알킬)은 할로겐, C1-3알킬, C1-3할로알킬, 및 C1-3알콕시로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 치환기로 추가로 치환되고;
    R6은 H 또는 메틸이고;
    R7은 메틸이고;
    단,
    R4가 인 경우, R5는 , , 또는 이 아니고;
    R4가 인 경우, R5는 , , , 또는 이 아닌, 화합물.
  6. 식 IIIb의 화합물
    IIIb, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염으로서;
    여기서
    R2는 H 또는 메틸이고;
    R4는 5원 헤테로아릴 또는 6원 헤테로아릴이고; 여기서 5원 헤테로아릴 또는 6원 헤테로아릴기는 C1-6알킬, C1-6알콕시, 및 C3-6시클로알킬로부터 독립적으로 선택된 1 내지 3개의 치환기로 임의 치환되고;
    R5는 , , 또는 이고;
    R6은 H 또는 메틸이고;
    R7은 메틸이고;
    단, R4가 인 경우, R5는 이 아닌, 화합물.
  7. 식 IIIb의 화합물
    IIIb, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염으로서;
    여기서
    R2는 H 또는 메틸이고;
    R4는 이고;
    R5는 , 또는 이고;
    R6은 H 또는 메틸이고;
    R7은 메틸인, 화합물.
  8. 식 IIIb의 화합물
    IIIb, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염으로서;
    여기서
    R4는 이고;
    R5는 또는 이고;
    R6은 H 또는 메틸이고;
    R7은 Me인, 화합물.
  9. 식 Va의 화합물
    Va, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염으로서;
    여기서
    R2는 H 또는 메틸이고;
    R4는 또는 이고;
    R5는 C1-6할로알킬, C3-6시클로알킬, C5-8스피로알킬, C5-8트리시클로알킬, 시클로펜트-1-엔-1-일, 시클로헥스-1-엔-1-일, 페닐, 6원 헤테로아릴, 아지리딘-1-일, 피롤리딘-1-일, 3-아자바이시클로[3.1.0]헥산-3-일, 피페리딘-1-일, 또는 -OCH2-(C3-6시클로알킬)이고,
    여기서 C3-6시클로알킬, C5-8스피로알킬, C5-8트리시클로알킬, 시클로펜트-1-엔-1-일, 시클로헥스-1-엔-1-일, 페닐, 및 6원 헤테로아릴은 할로겐, C1-3알킬, 및 C1-3할로알킬로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 치환기로 추가로 임의 치환되고,
    여기서 아지리딘-1-일, 피롤리딘-1-일, 3-아자바이시클로[3.1.0]헥산-3-일, 피페리딘-1-일, 및 -OCH2-(C3-6시클로알킬)은 할로겐, C1-3알킬, C1-3할로알킬, 및 C1-3알콕시로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 치환기로 추가로 치환되고;
    R6은 H 또는 메틸이고;
    R7은 메틸이고;
    단,
    R6이 Me이고 R2가 H인 경우, R5는 이 아니며;
    R2 및 R6 모두가 H인 경우, R5는 이 아닌, 화합물.
  10. 식 Vb의 화합물
    Vb, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염으로서;
    여기서
    R2는 H 또는 메틸이고;
    R4는 또는 이고;
    R5는 C1-6할로알킬, C3-6시클로알킬, C5-8스피로알킬, C5-8트리시클로알킬, 시클로펜트-1-엔-1-일, 시클로헥스-1-엔-1-일, 페닐, 6원 헤테로아릴, 아지리딘-1-일, 피롤리딘-1-일, 3-아자바이시클로[3.1.0]헥산-3-일, 피페리딘-1-일, 또는 -OCH2-(C3-6시클로알킬)이고,
    여기서 C3-6시클로알킬, C5-8스피로알킬, C5-8트리시클로알킬, 시클로펜트-1-엔-1-일, 시클로헥스-1-엔-1-일, 페닐, 및 6원 헤테로아릴은 할로겐, C1-3알킬, 및 C1-3할로알킬로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 치환기로 추가로 임의 치환되고,
    여기서 아지리딘-1-일, 피롤리딘-1-일, 3-아자바이시클로[3.1.0]헥산-3-일, 피페리딘-1-일, 및 -OCH2-(C3-6시클로알킬)은 할로겐, C1-3알킬, C1-3할로알킬, 및 C1-3알콕시로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 치환기로 추가로 치환되고;
    R6은 H 또는 메틸이고;
    R7은 메틸이고;
    단, R2가 H인 경우, R5는 이 아닌, 화합물.
  11. 식 Va 또는 Vb의 화합물
    Vb, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염으로서;
    여기서
    R2는 H 또는 메틸이고;
    R4는 5원 헤테로아릴 또는 6원 헤테로아릴이고; 여기서 5원 헤테로아릴 또는 6원 헤테로아릴기는 C1-6알킬, C1-6알콕시, 및 C3-6시클로알킬로부터 독립적으로 선택된 1 내지 3개의 치환기로 임의 치환되고;
    R5는 , , 또는 이고;
    R6은 H 또는 메틸이고;
    R7은 메틸인, 화합물.
  12. 식 Va 또는 Vb의 화합물
    Vb, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염으로서;
    여기서
    R2는 H 또는 메틸이고;
    R4는 , 또는 이고;
    R5는 , , 또는 이고;
    R6은 H 또는 메틸이고;
    R7은 메틸인, 화합물.
  13. 식 Va 또는 Vb의 화합물
    Vb, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염으로서;
    여기서
    R2는 메틸이고;
    R4는 또는 이고;
    R5는 C1-6할로알킬, C3-6시클로알킬, C5-8스피로알킬, C5-8트리시클로알킬, 시클로펜트-1-엔-1-일, 시클로헥스-1-엔-1-일, 페닐, 6원 헤테로아릴, 아지리딘-1-일, 피롤리딘-1-일, 3-아자바이시클로[3.1.0]헥산-3-일, 피페리딘-1-일, 또는 -OCH2-(C3-6시클로알킬)이고,
    여기서 C3-6시클로알킬, C5-8스피로알킬, C5-8트리시클로알킬, 시클로펜트-1-엔-1-일, 시클로헥스-1-엔-1-일, 페닐, 및 6원 헤테로아릴은 할로겐, C1-3알킬, 및 C1-3할로알킬로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 치환기로 추가로 임의 치환되고,
    여기서 아지리딘-1-일, 피롤리딘-1-일, 3-아자바이시클로[3.1.0]헥산-3-일, 피페리딘-1-일, 및 -OCH2-(C3-6시클로알킬)은 할로겐, C1-3알킬, C1-3할로알킬, 및 C1-3알콕시로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 치환기로 추가로 치환되고;
    R6은 H 또는 메틸이고;
    R7은 메틸인, 화합물.
  14. 식 Vb의 화합물
    Vb, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염으로서;
    여기서
    R2는 H 또는 메틸이고;
    R4는 이고;
    R5는 , , , 또는 이고;
    R6은 H 또는 메틸이고;
    R7은 메틸이고;
    단, R2가 H인 경우, R5는 이 아닌, 화합물.
  15. 식 VIIIa의 화합물
    VIIIa, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염으로서;
    여기서
    R2는 H 또는 메틸이고;
    R4는 이고;
    R5는 C1-6할로알킬, C3-6시클로알킬, C5-8스피로알킬, C5-8트리시클로알킬, 시클로펜트-1-엔-1-일, 시클로헥스-1-엔-1-일, 페닐, 6원 헤테로아릴, 아지리딘-1-일, 피롤리딘-1-일, 3-아자바이시클로[3.1.0]헥산-3-일, 피페리딘-1-일, 또는 -OCH2-(C3-6시클로알킬)이고,
    여기서 C3-6시클로알킬, C5-8스피로알킬, C5-8트리시클로알킬, 시클로펜트-1-엔-1-일, 시클로헥스-1-엔-1-일, 페닐, 및 6원 헤테로아릴은 할로겐, C1-3알킬, 및 C1-3할로알킬로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 치환기로 추가로 임의 치환되고,
    여기서 아지리딘-1-일, 피롤리딘-1-일, 3-아자바이시클로[3.1.0]헥산-3-일, 피페리딘-1-일, 및 -OCH2-(C3-6시클로알킬)은 할로겐, C1-3알킬, C1-3할로알킬, 및 C1-3알콕시로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 치환기로 추가로 치환되고;
    R6은 H 또는 메틸이고;
    R7은 Me이고
    단, R5는 이 아닌, 화합물.
  16. 식 VIIIa의 화합물
    VIIIa, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염으로서;
    여기서
    R2는 H 또는 메틸이고;
    R4는 이고;
    R5는 또는 이고;
    R6은 H 또는 메틸이고;
    R7은 메틸인, 화합물.
  17. 식 VIIIb의 화합물
    VIIIb, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염으로서;
    여기서
    R2는 H 또는 메틸이고;
    R4는 5원 헤테로아릴 또는 6원 헤테로아릴이고; 여기서 5원 헤테로아릴 또는 6원 헤테로아릴기는 C1-6알킬, C1-6알콕시, 및 C3-6시클로알킬로부터 독립적으로 선택된 1 내지 3개의 치환기로 임의 치환되고;
    R5는 C1-6할로알킬, C3-6시클로알킬, C5-8스피로알킬, C5-8트리시클로알킬, 시클로펜트-1-엔-1-일, 시클로헥스-1-엔-1-일, 페닐, 6원 헤테로아릴, 아지리딘-1-일, 피롤리딘-1-일, 3-아자바이시클로[3.1.0]헥산-3-일, 피페리딘-1-일, 또는 -OCH2-(C3-6시클로알킬)이고,
    여기서 C3-6시클로알킬, C5-8스피로알킬, C5-8트리시클로알킬, 시클로펜트-1-엔-1-일, 시클로헥스-1-엔-1-일, 페닐, 및 6원 헤테로아릴은 할로겐, C1-3알킬, 및 C1-3할로알킬로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 치환기로 추가로 임의 치환되고,
    여기서 아지리딘-1-일, 피롤리딘-1-일, 3-아자바이시클로[3.1.0]헥산-3-일, 피페리딘-1-일, 및 -OCH2-(C3-6시클로알킬)은 할로겐, C1-3알킬, C1-3할로알킬, 및 C1-3알콕시로부터 독립적으로 선택된 1 내지 4개의 치환기로 추가로 치환되고;
    R6은 H 또는 메틸이고;
    R7은 메틸인, 화합물.
  18. 표 A 또는 A-2의 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염.
  19. 약학적 조성물로서, 제1항 내지 제18항 중 어느 한 항의 화합물, 또는 이의 호변이성질체, 또는 상기 화합물 또는 상기 호변이성질체의 약학적으로 허용 가능한 염, 및 약학적으로 허용 가능한 부형제를 포함하는 약학적 조성물.
  20. 의약으로서 사용하기 위한, 제1항 내지 제18항 중 어느 한 항의 화합물, 또는 이의 호변이성질체, 또는 상기 화합물 또는 상기 호변이성질체의 약학적으로 허용 가능한 염, 또는 제19항의 약학적 조성물.
  21. 인간 TREM2의 기능 상실과 연관된 병태를 치료하거나 예방하는 데 사용하기 위한, 제1항 내지 제18항 중 어느 한 항의 화합물, 또는 이의 호변이성질체, 또는 상기 화합물 또는 상기 호변이성질체의 약학적으로 허용 가능한 염, 또는 제19항의 약학적 조성물.
  22. 파킨슨병, 류마티스 관절염, 알츠하이머병, 나수-하콜라병, 전두측두엽 치매, 다발성 경화증, 프리온 질환, 또는 뇌졸중을 치료하거나 예방하는 데 사용하기 위한, 제1항 내지 제18항 중 어느 한 항의 화합물, 또는 이의 호변이성질체, 또는 상기 화합물 또는 상기 호변이성질체의 약학적으로 허용 가능한 염, 또는 제19항의 약학적 조성물.
  23. 인간 TREM2의 기능 상실과 연관된 병태를 치료하거나 예방하기 위한 의약을 제조하는 데 있어서, 제1항 내지 제18항 중 어느 한 항의 화합물, 또는 이의 호변이성질체, 또는 상기 화합물 또는 상기 호변이성질체의 약학적으로 허용 가능한 염, 또는 제19항의 약학적 조성물의 용도.
  24. 파킨슨병, 류마티스 관절염, 알츠하이머병, 나수-하콜라병, 전두측두엽 치매, 다발성 경화증, 프리온 질환, 또는 뇌졸중을 치료하거나 예방하기 위한 의약을 제조하는 데 있어서, 제1항 내지 제18항 중 어느 한 항의 화합물, 또는 이의 호변이성질체, 또는 상기 화합물 또는 상기 호변이성질체의 약학적으로 허용 가능한 염, 또는 제19항의 약학적 조성물의 용도.
  25. 인간 TREM2의 기능 상실과 연관된 병태의 치료 또는 예방을 필요로 하는 대상체에서 이를 치료하거나 예방하는 방법으로서, 상기 방법은 제1항 내지 제18항 중 어느 한 항의 화합물, 또는 이의 호변이성질체, 또는 상기 화합물 또는 상기 호변이성질체의 약학적으로 허용 가능한 염의 치료적 유효량을 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는, 방법.
  26. 파킨슨병, 류마티스 관절염, 알츠하이머병, 나수-하콜라병, 전두측두엽 치매, 다발성 경화증, 프리온 질환, 또는 뇌졸중의 치료 또는 예방을 필요로 하는 대상체에서 이를 치료하거나 예방하는 방법으로서, 상기 방법은 제1항 내지 제18항 중 어느 한 항의 화합물, 또는 이의 호변이성질체, 또는 상기 화합물 또는 상기 호변이성질체의 약학적으로 허용 가능한 염의 치료적 유효량을 대상체에게 투여하는 단계를 포함하는, 방법.
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