CN110632208A - 一种用于清肺化痰、止咳平喘的中药组合物的主要成分的检测方法 - Google Patents

一种用于清肺化痰、止咳平喘的中药组合物的主要成分的检测方法 Download PDF

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Abstract

本发明提供一种用于清肺化痰、止咳平喘的中药组合物的主要成分的检测方法，所述中药组合物的主要成分包括桑皮苷A、栀子苷、苦杏仁苷、表小檗碱、小檗碱、迷迭香酸、黄芩苷和汉黄芩苷。本发明采用双波长超高效液相检测方法，按照下述高效液相色谱条件进行检测：色谱柱：Waters ACQUITYUPLC CSH Phenyl‑Hexyl；DAD检测器，检测波长210‑212nm，328‑332nm；流动相A：10‑15mM磷酸二氢钾水溶液，流动相B为乙腈，梯度洗脱。本发明提供的检测方法，能够实现上述8种组分的有效分离，且本发明提供的方法经专属性、灵敏度等方法学研究及验证，发现本发明的方法灵敏、准确、重现性较好。

Description

一种用于清肺化痰、止咳平喘的中药组合物的主要成分的检 测方法
技术领域
本发明涉及药物分析技术领域，尤其涉及一种用于清肺化痰、止咳平喘的中药组合物的主要成分的检测方法。
背景技术
咳嗽是呼吸系统疾病最常见的症状之一，它是一种保护性神经反射，通过咳嗽产生呼气性冲击动作，能将呼吸道内的异物或分泌排出体外。中医认为，咳嗽是因邪客肺系，肺失宣肃，肺气不清所致。根据中医理论，针对咳嗽的发病机理，主要以清热解毒、润肺化痰、止咳平喘为治疗原则，进行辩证配伍组方，以达到标本兼治的目的。
桑白皮汤出自明代张介宾所著医书《景岳全书》，由桑白皮、半夏、紫苏子、川贝母、苦杏仁、栀子、黄芩、黄连和生姜9味药材组成，用于治疗“治肺气有余，火炎痰盛作喘”。桑白皮汤作为中医药传承与发展过程中保留下来的中药方剂杰出代表之一，在现代临床上有着广泛的应用，尤其在治疗老年慢性支气管炎，肺气肿等疾病方面疗效显著。但是，目前桑白皮汤的质量控制较为简单，主要采用薄层色谱法对其化合物进行鉴别，或者采用高效液相色谱法对桑白皮汤主要成分中的单个化合物进行含量检测，不能全面反映桑白皮汤的质量。因此，开发一种可以同时检测桑白皮汤中多种指标成分的含量测定方法，实现对桑白皮汤中多个指标成分的控制，对今后桑白皮汤的开发和质量控制具有十分重要的意义。
发明内容
针对现有检测方法无法实现桑白皮汤中多个指标成分的同时检测的问题，本发明提供一种用于清肺化痰、止咳平喘的中药组合物的检测方法。
为解决上述技术问题，本发明提供的技术方案是：
一种用于清肺化痰、止咳平喘的中药组合物的主要成分的检测方法，所述中药组合物的主要成分包括桑皮苷A、栀子苷、苦杏仁苷、表小檗碱、小檗碱、迷迭香酸、黄芩苷和汉黄芩苷，所述检测方法包括以下步骤：
(1)供试品溶液和对照品溶液的配制：
将中药组合物的原料经提取后制得供试品溶液；
取桑皮苷A、栀子苷、苦杏仁苷、表小檗碱、小檗碱、迷迭香酸、黄芩苷和汉黄芩苷对照品混合，用溶剂配制成对照品溶液；
(2)采用双波长检测方法，按照下述超高效液相色谱条件对所述供试品品溶液和对照品溶液进行检测，色谱条件为：
色谱柱：Waters ACQUITY UPLC CSH Phenyl-Hexyl；
DAD检测器，检测波长210-212nm，328-332nm；
流动相A：10-15mM磷酸二氢钾水溶液，流动相B为乙腈；
洗脱方式为梯度洗脱。
桑皮苷A、栀子苷、苦杏仁苷、表小檗碱、小檗碱、迷迭香酸、黄芩苷和汉黄芩苷8种组分的极性不同，对pH的敏感性不同，最大吸收波长也不相同，本发明提供的用于清肺化痰、止咳平喘的中药组合物的主要成分的检测方法，综合考量了上述多种因素，创造性的选择双波长检测方法，以Waters ACQUITY UPLC CSH Phenyl-Hexyl作为检测色谱柱，以磷酸二氢钾水溶液-乙腈作为流动相，梯度洗脱，使得上述8种组分能够完全分离，同时获得较好的峰形和灵敏度，创造性地实现了上述8种组分的同时定量检测，且本发明提供的方法经专属性、灵敏度等方法学研究及验证，发现本发明的方法灵敏、准确、重现性较好。与现有技术相比，使原本需要多次定量测定完成的测定指标，能够一次定量测定完成，极大地提高了检测效率；且本发明提供的检测方法抗干扰能力强，无需对中药组合物进行特殊的前处理，即可实现对成分复杂的中药提取物中多达8种组分的同时检测，具有十分广阔的应用前景。
可选的，对照品溶液配制中所述溶剂可为甲醇或乙醇，优选为甲醇。
优选的，所述梯度洗脱的洗脱程序如下：
0-3min，94％流动相A，6％流动相B；
3-7min，94％→92％流动相A，6％→8％流动相B；
7-12min，92％流动相A，8％流动相B；
12-14min，92％→90％流动相A，8％→10％流动相B；
14-15min，90％→87％流动相A，10％→13％流动相B；
15-17min，87％→86％流动相A，13％→14％流动相B；
17-30min，86％流动相A，14％流动相B；
30-31min，86％→83％流动相A，14％→17％流动相B；
31-33min，83％→80％流动相A，17％→20％流动相B；
33-37min，80％流动相A，20％流动相B；
37-39min，80％→78％流动相A，20％→22％流动相B；
39-45min，78％流动相A，22％流动相B；
45-50min，78→77％流动相A，22％→23％流动相B；
50-55min，77％→65％流动相A，23％→35％流动相B；
55-57min，65％→60％流动相A，35％→40％流动相B；
57-60min，60％→55％流动相A，40％→45％流动相B；
60-64min，55％→50％流动相A，45％→50％流动相B；
64-65min，50％→40％流动相A，50％→60％流动相B；
65-75min，40％流动相A，60％流动相B。
优选的梯度洗脱顺序，可以提高各组分峰之间的分离度和检测的灵敏度，使检测结果定量准确，且精密度高。
优选的，所述磷酸二氢钾水溶液的pH为3.2，流速为0.28-0.32mL/min，柱温为23-27℃，进样体积为1μL。
更优选的，检测波长为210nm和330nm，流速为0.3mL/min，柱温为25℃。
优选的流动相A的pH值，可以减少谱带拖尾，改善峰形，从而有利于提高各组分之间的分离度；优选的检测波长，可尽量避免中药提取物中大量杂质对检测的干扰，提高检测的灵敏度和检测结果的准确性。优选的流速和柱温，有利于进一步提高各组分之间的分离度，使检测结果的准确度及精密度更高。
优选的，所述色谱柱的规格为150*2.1mm，填料直径为1.7μm。
优选的色谱柱规格可以使各组分峰形、分离度及检测的灵敏度俱佳，且基线干扰较小。
优选的，所述用于清肺化痰、止咳平喘的中药组合物的原料为桑白皮、半夏、紫苏子、川贝母、苦杏仁、栀子、黄芩、黄连和生姜。
优选的，所述供试品溶液的配制包括如下步骤：
步骤a，将除苦杏仁之外的其他原料加水浸泡25-35min，武火煮沸，文火煎煮20-25min，加入苦杏仁，继续煎煮5-10min，过滤，得一煎液和滤渣；
步骤b，向所述滤渣中加水，武火煮沸，文火煎煮15-25min，过滤，得二煎液，合并所述一煎液和二煎液，减压浓缩，得中药组合物煎液(桑白皮汤)；
步骤c，精密量取所述中药组合物煎液加入量瓶中，加入无水乙醇稀释，超声，定容，离心，取上清液，过滤，得供试品溶液。
优选的供试品溶液的制备方法，可将中药组合物中待检测的组分充分提取出来。
优选的，步骤a中，所述水的加入量为所述中药组合物的原料总重量的8-10倍。
优选的，所述水的加入量为所述中药组合物的原料总重量的6-8倍。
优选的，将所述中药组合物煎液加入量瓶中用无水乙醇稀释3.8-4.2倍，超声时间为18-22min。
桑白皮汤的原料含有9味药材，水提液中含有大量糖类及蛋白质等成分，通过加入无水乙醇对样品中的干扰成分进行前处理，使其得以精制。将得到的桑白皮汤用无水乙醇稀释3.8-4.2倍，可使各检测成分的色谱峰的峰形、色谱峰的响应值及分离度良好。
优选的，所述对照品溶液中桑皮苷A、苦杏仁苷、栀子苷、表小檗碱、小檗碱、迷迭香酸、黄芩苷和汉黄芩苷的浓度分别为100.0μg·mL-1、500.5μg·mL-1、1097.0μg·mL-1、372.5μg·mL-1、1004.5μg·mL-1、49.0μg·mL-1、625.5μg·mL-1和247.5μg·mL-1。
优选的，所述供试品溶液的浓度为79.41g·L-1。
优选的对照品溶液和供试品溶液的浓度，有利于使待测组分的峰形更好，柱效高，积分更准确，从而有利于对供试品中待测组分的含量进行更准确的计算。
采用现代化方法对中成药进行开发与研究具有重要意义，为中成药的质量提供一个客观、整体的评价依据。本发明采用UHPLC-DAD法对桑白皮汤中的8种成分进行含量测定，建立了标准、可靠的定量方法，为今后对桑白皮汤的开发和质量控制提供了参考。
附图说明
图1为实施例2中系统适用性项下对照品溶液在210nm条件下的色谱图；
图2为实施例2中系统适用性项下对照品溶液在330nm条件下的色谱图；
图3为实施例2中系统适用性项下供试品溶液在210nm条件下的色谱图；
图4为实施例2中系统适用性项下供试品溶液在330nm条件下的色谱图；
图5为实施例2中专属性项下供试品溶液与分别不含栀子、苦杏仁、桑白皮的阴性对照溶液在210nm条件下的色谱图，其中，(E)供试品溶液，(F)不含栀子的阴性对照溶液，(G)不含苦杏仁的阴性对照溶液，(H)不含桑白皮的阴性对照溶液；
图6为实施例2中专属性项下供试品溶液与与分别不含不含紫苏子、黄岑、黄连的阴性对照溶液在330nm条件下的色谱图，其中，(I)供试品溶液，(J)不含紫苏子的阴性对照溶液，(K)不含黄岑的阴性对照溶液，(L)不含黄连的阴性对照溶液；
图7为实施例4中供试品溶液在210nm条件下的色谱图；
图8为实施例4中供试品溶液在330nm条件下的色谱图；
图9为实施例5中供试品溶液在210nm条件下的色谱图；
图10为实施例5中供试品溶液在330nm条件下的色谱图；
图11为对比例1中供试品溶液在210nm条件下的色谱图；
图12为对比例1中供试品溶液在330nm条件下的色谱图；
图13为对比例2中供试品溶液在210nm条件下的色谱图；
图14为对比例2中供试品溶液在330nm条件下的色谱图；
图15为对比例3中供试品溶液在210nm条件下的色谱图；
图16为对比例3中供试品溶液在330nm条件下的色谱图。
图17为对比例4中供试品溶液在210nm条件下的色谱图；
图18为对比例4中供试品溶液在330nm条件下的色谱图；
图19为对比例5中供试品溶液在210nm条件下的色谱图；
图20为对比例5中供试品溶液在330nm条件下的色谱图；
图21为对比例6中供试品溶液在210nm条件下的色谱图；
图22为对比例6中供试品溶液在330nm条件下的色谱图。
具体实施方式
为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合实施例，对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。
实施例1
材料与方法
仪器：Agilent 1290 Infinity II超高效液相色谱仪(美国安捷伦科技有限公司)；AB135-S分析天平(瑞士METTLER TOLEDO仪器有限公司)；KH200B型超声波清洗器(昆山禾创超声仪器有限公司)；SHZ循环水式真空泵(巩义市予华仪器有限责任公司)。
试剂与样品：桑白皮、清半夏、紫苏子、川贝母、苦杏仁、栀子、黄芩和黄连饮片均购自同仁堂药店，生姜购自超市。
苦杏仁苷(CHB171011、纯度>98％)、桑皮苷A(CHB170405、纯度>98％)、栀子苷(CHB171010、纯度>98％)、表小檗碱(CHB170317、纯度>98％)、小檗碱(CHB170220、纯度>98％)、迷迭香酸(CHB171103、纯度>98％)、黄芩苷(CHB160712、纯度>98％)和汉黄芩苷(CHB170228、纯度>98％)，均购自成都克洛玛生物科技有限公司。
1.溶液的配制
1.1供试品溶液的配制
步骤a，称取桑白皮、清半夏、紫苏子、川贝母、苦杏仁、栀子、黄芩、黄连和生姜各3g(桑白皮汤配方)，将除苦杏仁之外的其他原料加水250mL，浸泡30min，武火煮沸，文火煎煮23min，加入苦杏仁，继续煎煮7min，过滤，得一煎液和滤渣；
步骤b，向所述滤渣中加水200mL，武火煮沸，文火煎煮20min，过滤，得二煎液，合并所述一煎液和二煎液，减压浓缩至85mL，得中药组合物煎液；
步骤c，精密量取所述中药组合物煎液5mL加入20mL量瓶中，加入10mL无水乙醇，摇匀，超声(40KHz)20min，冷却，用无水乙醇定容至20mL，离心，取上清液，过0.22μm微孔有机滤膜，弃去出滤液，取续滤液，得供试品溶液。
九味药各3g共27g除以浓缩后体积得桑白皮汤物质基准煎液，浓度为317.65g.L-1，稀释4倍后，供试品溶液的浓度为79.41g·L-1。
1.2对照品溶液的配制
分别称取桑皮苷A、苦杏仁苷、栀子苷、表小檗碱、小檗碱、迷迭香酸、黄芩苷和汉黄芩苷对照品适量，精密称定，加入甲醇溶解，制成质量浓度分别为100.0μg·mL-1、500.5μg·mL-1、1097.0μg·mL-1、372.5μg·mL-1、1004.5μg·mL-1、49.0μg·mL-1、625.5μg·mL-1和247.5μg·mL-1的对照品溶液。
1.3阴性对照溶液的配制
按照桑白皮汤配方分别制备不含桑白皮、紫苏子、苦杏仁、栀子、黄连或黄芩药材饮片的阴性样品，再按上述供试品溶液的制备方法制备相对应的阴性样品溶液。
超高效液相色谱(UHPLC))条件：
色谱柱：Waters ACQUITY UPLC CSH Phenyl-Hexyl(150mm×2.1mm,1.7μm)；
流动相：磷酸二氢钾水溶液(pH 3.2；0.01M)(A)-乙腈(B)；
流速：0.3mL·min-1；
柱温：25℃；
进样量：1μL；
检测波长：210nm和330nm，梯度洗脱条件见表1。
表1梯度洗脱条件
Figure BDA0002228303570000091
实施例2
方法学验证：
2.1系统适用性
取1.2项下配制的对照品溶液，按照上述超高效液相色谱条件进样分析，记录色谱图，如图1所示，结果证明：苦杏仁苷、桑皮苷A、栀子苷、表小檗碱、小檗碱、迷迭香酸、黄芩苷和汉黄芩苷色谱峰与其相邻色谱峰之间的分离度均大于1.5，各色谱峰的理论塔板数不低于29000。
取1.2项下配制的各对照品溶液，按照上述超高效液相色谱条件连续进样6次，各成分峰面积的RSD％在0.11％－1.2％之间。
精密量取1.2项下配制的各对照品溶液0.25、1.0、2.0、3.0和4.0mL，分别置5mL量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，配制成系列标准溶液，测定各待测物的信噪比(S/N)均大于10，结果表明色谱系统的检测能力良好。
其中，图1为对照品溶液在210nm条件下的色谱图，图2为对照品溶液在330nm条件下的色谱图，其中，峰1为苦杏仁苷(保留时间为11.82min)，峰2为桑皮苷A(保留时间为12.55min)，峰3为栀子苷(保留时间为14.14min)，峰4为表小檗碱(保留时间为30.22min)，峰5为小檗碱(保留时间为37.02min)，峰6为迷迭香酸(保留时间为37.86min)，峰7为黄芩苷(保留时间为42.58min)，峰8为汉黄芩苷(保留时间为52.95min)。
2.2专属性
按照上述超高效液相色谱条件进样分析1.1配制的供试品溶液、1.2配制的对照品溶液、及1.3项下配制的阴性对照溶液。
其中，图3为供试品溶液的在210nm条件下的色谱图，图4为供试品溶液的在330nm条件下的色谱图。图5为210nm检测条件下，供试品溶液色谱图与分别不含栀子、苦杏仁、桑白皮的阴性对照溶液的色谱图，图6为330nm检测条件下，供试品溶液色谱图与分别不含紫苏子、黄岑、黄连的阴性对照溶液的色谱图。对比图谱可知，供试品溶液中苦杏仁苷来自苦杏仁，桑皮苷A来自桑白皮，栀子苷来自栀子，表小檗碱和小檗碱来自黄连，迷迭香酸来自紫苏子，黄芩苷和汉黄芩苷来自黄芩，阴性对照溶液在测定成分出峰时间处均无干扰，分析方法专属性良好。
2.3线性与范围
精密量取1.2配制的对照品溶液0.25、1.0、2.0、3.0和4.0mL，分别置5mL量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，配制成系列标准溶液。按照超高效液相色谱条件进样测定，记录色谱峰的峰面积，以各对照品浓度x(μg.mL-1)为横坐标，峰面积y为纵坐标，绘制标准曲线，进行回归计算，得到得回归方程。以对照品溶液逐级稀释法进样检测，以信噪比(S/N)10:1为基准分别测得各化合物的定量限，结果见表2。
表2
Figure BDA0002228303570000111
结果表明，苦杏仁苷、桑皮苷A、栀子苷、表小檗碱、小檗碱、迷迭香酸、黄芩苷和汉黄芩苷在考察范围内线性关系良好，相关系数均大于0.999。
2.4精密度
重复性：取1.1项下，步骤b中制备得到的中药组合物煎液2.5mL，5mL和7.5mL，按1.1供试品溶液的制备项下步骤c操作，制备低、中、高3个浓度的供试品溶液，每一种浓度平行操作3份，按超高效液相色谱条件进样测定，并计算RSD，结果见表3，结果表明，RSD均小于2.5％，表明方法重复性良好。
中间精密度：连续三天取1.1项下，步骤b中制备得到的中药组合物煎液5mL，按1.1供试品溶液的制备项下步骤c操作，制备相同浓度的供试品溶液3份，按超高效液相色谱条件进样测定，并计算RSD，具体结果如表3所示，结果表明，RSD均小于3.8％，表明方法的精密度良好。
表3
Figure BDA0002228303570000121
2.5准确度
精密量取1.1项下，步骤b中制备得到的中药组合物煎液(317.65g·L-1)9份，每份2.5mL置于20mL量瓶中，分别加入按相当于中药组合物煎液中指标性成分含量的50％、100％和150％质量浓度的1.2项下制备的对照品溶液，制备低、中、高供试品溶液，每一种浓度平行制备3份，按超高效液相色谱条件进行测定，计算各成分的平均回收率及RSD，测定结果见表4。
表4
Figure BDA0002228303570000131
Figure BDA0002228303570000141
以上结果表明，各成分在各浓度下的回收率均在91～106％范围内，且RSD均小于5.0％，说明本法准确度较好。
2.6稳定性
取1.1项下配制的供试品溶液，室温放置，分别于0、2、4、8、12和24h，按超高效液相色谱条件进样测定，记录峰面积，计算RSD值，结果表明，各成分在24h内稳定(RSD<3.0％)，表明供试品在室温放置24h内稳定。
2.7检测限与定量限
指标成分 检测限(μg/mL) 定量限(μg/mL)
苦杏仁苷 0.2431 0.867
桑皮苷A 0.3232 1.082
栀子苷 0.3892 1.564
表小檗碱 0.1655 0.5162
小檗碱 0.0931 0.3643
迷迭香酸 0.2173 0.7265
黄芩苷 0.1302 0.4078
汉黄芩苷 0.1893 0.6542
各成分的检测限浓度在0.093-0.389μg/ml之间，定量限浓度在0.364-1.564μg/ml之间。
实施例3
取十批桑白皮汤样品，按实施例2，1.1项下供试品溶液的制备操作制备供试品溶液，按超高效液相色谱条件进样测定，记录各成分峰面积，采用外标法根据各成分峰面积，计算各批次样品中有效成分的含量。含量测定结果见表5。
表5
Figure BDA0002228303570000151
由上表可以看出，不同批次的原料成分提取得到的苦杏仁苷、桑皮苷A、栀子苷、表小檗碱、小檗碱、迷迭香酸、黄芩苷和汉黄芩苷含量差距较大，因此，很有必要对桑白皮汤中的这8组分进行定量检测，这对桑白皮汤的质量控制具有十分重要的意义。
实施例4
超高效液相色谱(UHPLC)条件：色谱柱：Waters ACQUITY UPLC CSH Phenyl-Hexyl(150mm×2.1mm,1.7μm)；流动相：磷酸二氢钾水溶液(pH 3.2；0.01M)(A)-乙腈(B)；流速：0.28mL·min-1；梯度洗脱条件见表1；柱温：25℃；进样量：1μL；检测波长：210nm和330nm。
对照品储备液的制备：分别称取桑皮苷A、苦杏仁苷、栀子苷、表小檗碱、小檗碱、迷迭香酸、黄芩苷和汉黄芩苷对照品适量，精密称定，加入甲醇溶解制成质量浓度分别为100.0μg.mL-1、500.5μg.mL-1、1097.0μg.mL-1、372.5μg.mL-1、1004.5μg.mL-1、49.0μg.mL-1、625.5μg.mL-1和247.5μg.mL-1的混合对照品储备液。
供试品溶液的制备：精密移取1.1项下，步骤b中制备得到的桑白皮汤组合物煎液(浓度为317.65g.L-1)5mL，置20mL的量瓶中，加入10mL乙醇，摇匀，超声(40kHz)20min，冷却，用乙醇定容至20mL，摇匀，离心，取上清液，过0.22μm微孔有机滤膜，弃去初滤液，得供试品溶液。将上述对照品储备液和供试品溶液分别注入UHPLC进行测定，结果如图7-8所示。
实施例5
超高效液相色谱(UHPLC)条件：色谱柱：Waters ACQUITY UPLC CSH Phenyl-Hexyl(150mm×2.1mm,1.7μm)；流动相：磷酸二氢钾水溶液(pH 3.2；0.015M)(A)-乙腈(B)；流速：0.32mL·min-1；梯度洗脱条件见表1；柱温：25℃；进样量：1μL；检测波长：211nm和328nm。
对照品储备液的制备：分别称取桑皮苷A、苦杏仁苷、栀子苷、表小檗碱、小檗碱、迷迭香酸、黄芩苷和汉黄芩苷对照品适量，精密称定，加入甲醇溶解制成质量浓度分别为100.0μg.mL-1、500.5μg.mL-1、1097.0μg.mL-1、372.5μg.mL-1、1004.5μg.mL-1、49.0μg.mL-1、625.5μg.mL-1和247.5μg.mL-1的混合对照品储备液。
供试品溶液的制备：精密移取1.1项下，步骤b中制备得到的桑白皮汤组合物煎液(浓度为317.65g.L-1)5mL，置20mL的量瓶中，加入10mL乙醇，摇匀，超声(40kHz)20min，冷却，用乙醇定容至20mL，摇匀，离心，取上清液，过0.22μm微孔有机滤膜，弃去初滤液，得供试品溶液。将上述对照品储备液和供试品溶液分别注入UHPLC进行测定，结果如图9-10所示。
实施例6
超高效液相色谱(UHPLC)条件：色谱柱：Waters ACQUITY UPLC CSH Phenyl-Hexyl(150mm×2.1mm,1.7μm)；流动相：磷酸二氢钾水溶液(pH 3.2；0.012M)(A)-乙腈(B)；流速：0.3mL·min-1；梯度洗脱条件见表1；柱温：23℃；进样量：1μL；检测波长：212nm和332nm。
对照品储备液的制备：分别称取桑皮苷A、苦杏仁苷、栀子苷、表小檗碱、小檗碱、迷迭香酸、黄芩苷和汉黄芩苷对照品适量，精密称定，加入甲醇溶解制成质量浓度分别为100.0μg.mL-1、500.5μg.mL-1、1097.0μg.mL-1、372.5μg.mL-1、1004.5μg.mL-1、49.0μg.mL-1、625.5μg.mL-1和247.5μg.mL-1的混合对照品储备液。
供试品溶液的制备：精密移取1.1项下，步骤b中制备得到的桑白皮汤组合物煎液(浓度为317.65g.L-1)5mL，置20mL的量瓶中，加入10mL乙醇，摇匀，超声(40kHz)20min，冷却，用乙醇定容至20mL，摇匀，离心，取上清液，过0.22μm微孔有机滤膜，弃去初滤液，得供试品溶液。将上述对照品储备液和供试品溶液分别注入UHPLC进行测定。
实施例7
超高效液相色谱(UHPLC)条件：色谱柱：Waters ACQUITY UPLC CSH Phenyl-Hexyl(150mm×2.1mm,1.7μm)；流动相：磷酸二氢钾水溶液(pH 3.2；0.01M)(A)-乙腈(B)；流速：0.3mL·min-1；梯度洗脱条件见表1；柱温：27℃；进样量：1μL；检测波长：210nm和328nm。
对照品储备液的制备：分别称取桑皮苷A、苦杏仁苷、栀子苷、表小檗碱、小檗碱、迷迭香酸、黄芩苷和汉黄芩苷对照品适量，精密称定，加入甲醇溶解制成质量浓度分别为100.0μg.mL-1、500.5μg.mL-1、1097.0μg.mL-1、372.5μg.mL-1、1004.5μg.mL-1、49.0μg.mL-1、625.5μg.mL-1和247.5μg.mL-1的混合对照品储备液。
供试品溶液的制备：精密移取1.1项下，步骤b中制备得到的桑白皮汤组合物煎液(浓度为317.65g.L-1)5mL，置20mL的量瓶中，加入10mL乙醇，摇匀，超声(40kHz)20min，冷却，用乙醇定容至20mL，摇匀，离心，取上清液，过0.22μm微孔有机滤膜，弃去初滤液，得供试品溶液。将上述对照品储备液和供试品溶液分别注入UHPLC进行测定。
实施例8
超高效液相色谱(UHPLC)条件：色谱柱：Waters ACQUITY UPLC CSH Phenyl-Hexyl(150mm×2.1mm,1.7μm)；流动相：磷酸二氢钾水溶液(pH 3.2；0.011M)(A)-乙腈(B)；流速：0.3mL·min-1；梯度洗脱条件见表1；柱温：26℃；进样量：1μL；检测波长：210nm和332nm。
对照品储备液的制备：分别称取桑皮苷A、苦杏仁苷、栀子苷、表小檗碱、小檗碱、迷迭香酸、黄芩苷和汉黄芩苷对照品适量，精密称定，加入甲醇溶解制成质量浓度分别为100.0μg.mL-1、500.5μg.mL-1、1097.0μg.mL-1、372.5μg.mL-1、1004.5μg.mL-1、49.0μg.mL-1、625.5μg.mL-1和247.5μg.mL-1的混合对照品储备液。
供试品溶液的制备：精密移取1.1项下，步骤b中制备得到的桑白皮汤组合物煎液(浓度为317.65g.L-1)5mL，置20mL的量瓶中，加入10mL乙醇，摇匀，超声(40kHz)20min，冷却，用乙醇定容至20mL，摇匀，离心，取上清液，过0.22μm微孔有机滤膜，弃去初滤液，得供试品溶液。将上述对照品储备液和供试品溶液分别注入UHPLC进行测定。
实施例9
超高效液相色谱(UHPLC)条件：色谱柱：Waters ACQUITY UPLC CSH Phenyl-Hexyl(150mm×2.1mm,1.7μm)；流动相：磷酸二氢钾水溶液(pH3.2；0.01M)(A)-乙腈(B)；流速：0.32mL·min-1；梯度洗脱条件见表1；柱温：25℃；进样量：1μL；检测波长：210nm和330nm。
对照品储备液的制备：分别称取桑皮苷A、苦杏仁苷、栀子苷、表小檗碱、小檗碱、迷迭香酸、黄芩苷和汉黄芩苷对照品适量，精密称定，加入甲醇溶解制成质量浓度分别为100.0μg.mL-1、500.5μg.mL-1、1097.0μg.mL-1、372.5μg.mL-1、1004.5μg.mL-1、49.0μg.mL-1、625.5μg.mL-1和247.5μg.mL-1的混合对照品储备液。
供试品溶液的制备：精密移取1.1项下，步骤b中制备得到的桑白皮汤组合物煎液(浓度为317.65g.L-1)5mL，置20mL的量瓶中，加入10mL乙醇，摇匀，超声(40kHz)20min，冷却，用乙醇定容至20mL，摇匀，离心，取上清液，过0.22μm微孔有机滤膜，弃去初滤液，得供试品溶液。将上述对照品储备液和供试品溶液分别注入UHPLC进行测定。
试验结果证明，实施例4-9中苦杏仁苷、桑皮苷A、栀子苷、表小檗碱、小檗碱、迷迭香酸、黄芩苷和汉黄芩苷色谱峰与其相邻色谱峰之间的分离度均大于1.5，各色谱峰的理论塔板数不低于29000。
对比例1
超高效液相色谱(UHPLC)条件：色谱柱：Waters CORTECS UPLC C18(150mm×2.1mm,1.6μm)；流动相：磷酸二氢钾水溶液(pH 3.2；0.01M)(A)-乙腈(B)；流速：0.3mL·min-1；梯度洗脱条件见表1；柱温：25℃；进样量：1μL；检测波长：210nm和330nm。
取与实施例9中相同的供试品溶液和对照品溶液分别注入UHPLC进行测定，色谱图如图11、图12所示。
可以证明，将本发明提供的检测方法中的色谱柱更换为其他色谱柱，无法实现桑白皮汤中8种组分的有效分离。
对比例2
超高效液相色谱(UHPLC)条件：色谱柱：Waters ACQUITY UPLC CSH Phenyl-Hexyl(150mm×2.1mm,1.7μm)；流动相：水(A)-甲醇(B)；流速：0.3mL·min-1；梯度洗脱条件见表1；柱温：25℃；进样量：1μL；检测波长：210nm和330nm。
取与实施例9中相同的供试品溶液和对照品溶液分别注入UHPLC进行测定，色谱图如图13、图14所示。
可以证明，将本发明提供的检测方法中的流动相替换为水-甲醇按照相同的梯度进行洗脱，无法实现桑白皮汤中8种组分的分离。
对比例3
超高效液相色谱(UHPLC)条件：色谱柱：Waters ACQUITY UPLC CSH Phenyl-Hexyl(150mm×2.1mm,1.7μm)；流动相：水(A)-乙腈(B)；流速：0.3mL·min-1；梯度洗脱条件见表1；柱温：25℃；进样量：1μL；检测波长：210nm和330nm。
取与实施例9中相同的供试品溶液和对照品溶液分别注入UHPLC进行测定，色谱图如图15、图16所示。
可以证明，将本发明提供的检测方法中的流动相替换为水-乙腈按照相同的梯度进行洗脱，无法实现桑白皮汤中8种组分的分离。
对比例4
超高效液相色谱(UHPLC)条件：色谱柱：Waters ACQUITY UPLC CSH Phenyl-Hexyl(150mm×2.1mm,1.7μm)；流动相：磷酸二氢钾水溶液(pH 3.2；0.005M)(A)-乙腈(B)；流速：0.3mL·min-1；梯度洗脱条件见表1；柱温：25℃；进样量：1μL；检测波长：210nm和330nm。
取与实施例9中相同的供试品溶液和对照品溶液分别注入UHPLC进行测定，色谱图如图17、图18所示。
由图中可以看出，将磷酸二氢钾水溶液的浓度调为0.005M时不能有效分离小檗碱和迷迭香酸，两者之间的分离度小于1.2。
对比例5
超高效液相色谱(UHPLC)条件：色谱柱：Waters ACQUITY UPLC CSH Phenyl-Hexyl(150mm×2.1mm,1.7μm)；流动相：磷酸二氢钾水溶液(pH 3.2；0.01M)(A)-乙腈(B)；流速：0.3mL·min-1；梯度洗脱条件见表1；柱温：35℃；进样量：1μL；检测波长：210nm和330nm。
取与实施例9中相同的供试品溶液和对照品溶液分别注入UHPLC进行测定，色谱图如图19、图20所示。
由图中可以看出，将柱温调节为35℃时不能有效分离苦杏仁苷和桑皮苷，两者之间的分离度小于1.2。
对比例6
超高效液相色谱(UHPLC)条件：色谱柱：Waters ACQUITY UPLC CSH Phenyl-Hexyl(150mm×2.1mm,1.7μm)；流动相：磷酸二氢钾-磷酸氢二钾水溶液(pH 3.2；0.01M)(A)-乙腈(B)；流速：0.3mL·min-1；梯度洗脱条件见表1；柱温：25℃；进样量：1μL；检测波长：210nm和330nm。
取与实施例9中相同的供试品溶液和对照品溶液分别注入UHPLC进行测定，色谱图如图21、图22所示。
将本发明提供的检测方法中的流动相替换为磷酸二氢钾-磷酸氢二钾水溶液按照相同的梯度进行洗脱，无法实现桑白皮汤中表小檗碱组分与其他杂质的有效分离，表小檗碱与其他杂质之间的分离度小于1.2。
对比例7
超高效液相色谱(UHPLC)条件：色谱柱：Waters ACQUITY UPLC CSH Phenyl-Hexyl(150mm×2.1mm,1.7μm)；流动相：磷酸二氢钾水溶液(pH 3.2；0.01M)(A)-乙腈(B)；流速：0.35mL·min-1；梯度洗脱条件见表1；柱温：25℃；进样量：1μL；检测波长：210nm和330nm。
取与实施例9中相同的供试品溶液和对照品溶液分别注入UHPLC进行测定。
对比例8
超高效液相色谱(UHPLC)条件：色谱柱：Waters ACQUITY UPLC CSH Phenyl-Hexyl(150mm×2.1mm,1.7μm)；流动相：磷酸二氢钾水溶液(pH 3.2；0.01M)(A)-乙腈(B)；流速：0.4mL·min-1；梯度洗脱条件见表1；柱温：25℃；进样量：1μL；检测波长：210nm和330nm。
取与实施例9中相同的供试品溶液和对照品溶液分别注入UHPLC进行测定。
实施例7-8中将流速调节为0.35-0.4mL/min，无法实现桑白皮汤中苦杏仁苷组分与其他杂质的有效分离，苦杏仁苷与其他杂质之间的分离度小于1.2。
以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换或改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (10)

1.一种用于清肺化痰、止咳平喘的中药组合物的主要成分的检测方法，所述中药组合物的主要成分包括桑皮苷A、栀子苷、苦杏仁苷、表小檗碱、小檗碱、迷迭香酸、黄芩苷和汉黄芩苷，其特征在于，所述检测方法包括以下步骤：
(1)供试品溶液和对照品溶液的配制：
将中药组合物的原料经提取后制得供试品溶液；
取桑皮苷A、栀子苷、苦杏仁苷、表小檗碱、小檗碱、迷迭香酸、黄芩苷和汉黄芩苷对照品混合，用溶剂配制成对照品溶液；
(2)采用双波长检测方法，按照下述超高效液相色谱条件对所述供试品溶液和对照品溶液进行检测，色谱条件为：
色谱柱：Waters ACQUITY UPLC CSH Phenyl-Hexyl；
DAD检测器，检测波长210-212nm，328-332nm；
流动相A：10-15mM磷酸二氢钾水溶液，流动相B为乙腈；
洗脱方式为梯度洗脱。
2.如权利要求1所述的用于清肺化痰、止咳平喘的中药组合物的主要成分的检测方法，其特征在于，所述梯度洗脱的洗脱程序如下：
0-3min，94％流动相A，6％流动相B；
3-7min，94％→92％流动相A，6％→8％流动相B；
7-12min，92％流动相A，8％流动相B；
12-14min，92％→90％流动相A，8％→10％流动相B；
14-15min，90％→87％流动相A，10％→13％流动相B；
15-17min，87％→86％流动相A，13％→14％流动相B；
17-30min，86％流动相A，14％流动相B；
30-31min，86％→83％流动相A，14％→17％流动相B；
31-33min，83％→80％流动相A，17％→20％流动相B；
33-37min，80％流动相A，20％流动相B；
37-39min，80％→78％流动相A，20％→22％流动相B；
39-45min，78％流动相A，22％流动相B；
45-50min，78→77％流动相A，22％→23％流动相B；
50-55min，77％→65％流动相A，23％→35％流动相B；
55-57min，65％→60％流动相A，35％→40％流动相B；
57-60min，60％→55％流动相A，40％→45％流动相B；
60-64min，55％→50％流动相A，45％→50％流动相B；
64-65min，50％→40％流动相A，50％→60％流动相B；
65-75min，40％流动相A，60％流动相B。
3.如权利要求1或2所述的用于清肺化痰、止咳平喘的中药组合物的主要成分的检测方法，其特征在于，所述磷酸二氢钾水溶液的pH为3.2，流速为0.28-0.32mL/min，柱温为23-27℃，进样体积为1μL。
4.如权利要求3所述的用于清肺化痰、止咳平喘的中药组合物的主要成分的检测方法，其特征在于，检测波长为210nm和330nm，流速为0.3mL/min，柱温为25℃。
5.如权利要求1或2所述的用于清肺化痰、止咳平喘的中药组合物的主要成分的检测方法，其特征在于，所述色谱柱的规格为150*2.1mm，填料直径为1.7μm。
6.如权利要求1或2所述的用于清肺化痰、止咳平喘的中药组合物的主要成分的检测方法，其特征在于，所述用于清肺化痰、止咳平喘的中药组合物的原料为桑白皮、半夏、紫苏子、川贝母、苦杏仁、栀子、黄芩、黄连和生姜。
7.如权利要求6所述的用于清肺化痰、止咳平喘的中药组合物的主要成分的检测方法，其特征在于，所述供试品溶液的配制包括如下步骤：
步骤a，将除苦杏仁之外的其他原料加水浸泡25-35min，武火煮沸，文火煎煮20-25min，加入苦杏仁，继续煎煮5-10min，过滤，得一煎液和滤渣；
步骤b，向所述滤渣中加水，武火煮沸，文火煎煮15-25min，过滤，得二煎液，合并所述一煎液和二煎液，减压浓缩，得中药组合物煎液；
步骤c，精密量取所述中药组合物煎液加入量瓶中，加入无水乙醇稀释，超声，定容，离心，取上清液，过滤，得供试品溶液。
8.如权利要求7所述的用于清肺化痰、止咳平喘的中药组合物的主要成分的检测方法，其特征在于，步骤a中，所述水的加入量为所述中药组合物的原料总重量的8-10倍；和/或
步骤b中，所述水的加入量为所述中药组合物的原料总重量的6-8倍；和/或
步骤c中，将所述中药组合物煎液加入量瓶中用无水乙醇稀释3.8-4.2倍，超声时间为18-22min。
9.如权利要求1所述的用于清肺化痰、止咳平喘的中药组合物的主要成分的检测方法，其特征在于，所述对照品溶液中桑皮苷A、苦杏仁苷、栀子苷、表小檗碱、小檗碱、迷迭香酸、黄芩苷和汉黄芩苷的浓度分别为100.0μg·mL-1、500.5μg·mL-1、1097.0μg·mL-1、372.5μg·mL-1、1004.5μg·mL-1、49.0μg·mL-1、625.5μg·mL-1和247.5μg·mL-1。
10.如权利要求1或9所述的用于清肺化痰、止咳平喘的中药组合物的主要成分的检测方法，其特征在于，所述供试品溶液的浓度为79.41g·L-1。
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Cited By (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN111624294A (zh) * 2020-07-08 2020-09-04 湖北美思创药业有限公司 一种泻白散颗粒中地骨皮乙素和桑皮苷a的uplc含量检测方法
CN112649525A (zh) * 2020-12-01 2021-04-13 陕西摩美得气血和制药有限公司 小儿清热宣肺贴膏中栀子苷和苦杏仁苷的同时测定方法
CN114252518A (zh) * 2021-02-04 2022-03-29 山东祥隆医药研究院有限公司 一种经典名方桑白皮汤物质基准指纹图谱的建立方法及其指纹图谱
CN114487154A (zh) * 2021-12-20 2022-05-13 河北省药品医疗器械检验研究院(河北省化妆品检验研究中心) 一种四季三黄片溶出度的检测方法

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102854258A (zh) * 2011-06-29 2013-01-02 高雄医学大学 用于检测醌类、二苯乙烯类、黄酮类及生物碱类组合物的化学特征分析
CN105467059A (zh) * 2015-12-30 2016-04-06 云南理想药业有限公司 一种治疗血尿的中药组合物的质量检测方法
CN110187041A (zh) * 2019-07-11 2019-08-30 上海凯宝药业股份有限公司 一种痰热清注射液指纹图谱的建立方法及其指纹图谱

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102854258A (zh) * 2011-06-29 2013-01-02 高雄医学大学 用于检测醌类、二苯乙烯类、黄酮类及生物碱类组合物的化学特征分析
CN105467059A (zh) * 2015-12-30 2016-04-06 云南理想药业有限公司 一种治疗血尿的中药组合物的质量检测方法
CN110187041A (zh) * 2019-07-11 2019-08-30 上海凯宝药业股份有限公司 一种痰热清注射液指纹图谱的建立方法及其指纹图谱

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
丁长玲等: "RP-HPLC法同时测定抗感染药物复方三黄酊中5种成分的含量", 《药学研究》 *
王丹等: "中药黄芩HPLC指纹图谱的化学轮廓及其影响因素的研究", 《中国医药导报》 *

Cited By (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN111624294A (zh) * 2020-07-08 2020-09-04 湖北美思创药业有限公司 一种泻白散颗粒中地骨皮乙素和桑皮苷a的uplc含量检测方法
CN112649525A (zh) * 2020-12-01 2021-04-13 陕西摩美得气血和制药有限公司 小儿清热宣肺贴膏中栀子苷和苦杏仁苷的同时测定方法
CN114252518A (zh) * 2021-02-04 2022-03-29 山东祥隆医药研究院有限公司 一种经典名方桑白皮汤物质基准指纹图谱的建立方法及其指纹图谱
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CN114487154A (zh) * 2021-12-20 2022-05-13 河北省药品医疗器械检验研究院(河北省化妆品检验研究中心) 一种四季三黄片溶出度的检测方法
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