CN110618185A - 一种赭曲霉毒素a的比率电化学检测方法 - Google Patents

一种赭曲霉毒素a的比率电化学检测方法 Download PDF

Info

Publication number
CN110618185A
CN110618185A CN201910802150.7A CN201910802150A CN110618185A CN 110618185 A CN110618185 A CN 110618185A CN 201910802150 A CN201910802150 A CN 201910802150A CN 110618185 A CN110618185 A CN 110618185A
Authority
CN
China
Prior art keywords
electrode
ochratoxin
concentration
ota
cdna
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN201910802150.7A
Other languages
English (en)
Other versions
CN110618185B (zh
Inventor
由天艳
朱成喜
刘�东
李玉叶
申秀丽
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Jiangsu University
Original Assignee
Jiangsu University
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Jiangsu University filed Critical Jiangsu University
Priority to CN201910802150.7A priority Critical patent/CN110618185B/zh
Publication of CN110618185A publication Critical patent/CN110618185A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN110618185B publication Critical patent/CN110618185B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N27/00—Investigating or analysing materials by the use of electric, electrochemical, or magnetic means
    • G01N27/26—Investigating or analysing materials by the use of electric, electrochemical, or magnetic means by investigating electrochemical variables; by using electrolysis or electrophoresis
    • G01N27/28—Electrolytic cell components
    • G01N27/30—Electrodes, e.g. test electrodes; Half-cells
    • G01N27/327—Biochemical electrodes, e.g. electrical or mechanical details for in vitro measurements
    • G01N27/3275—Sensing specific biomolecules, e.g. nucleic acid strands, based on an electrode surface reaction
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N27/00—Investigating or analysing materials by the use of electric, electrochemical, or magnetic means
    • G01N27/26—Investigating or analysing materials by the use of electric, electrochemical, or magnetic means by investigating electrochemical variables; by using electrolysis or electrophoresis
    • G01N27/416—Systems
    • G01N27/48—Systems using polarography, i.e. measuring changes in current under a slowly-varying voltage

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Electrochemistry (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Spectroscopy & Molecular Physics (AREA)
  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)

Abstract

本发明属于生物传感技术领域，涉及一种检测赭曲霉毒素A的比率电化学适配体传感器的制备方法，并将其用于检测赭曲霉毒素A(OTA)。该比率传感策略通过在金电极上顺序修饰二茂铁标记的互补DNA(Fc‑cDNA)，赭曲霉毒素A适配体(Aptamer)以及一个辅助互补DNA(hDNA)而构建，利用目标诱导的构象变化输出双电流信号IFc和IMB(分别为Fc和MB的氧化电流)，并使用两者的比率信号(IFc/IMB)量化和检测OTA。获得的比率电化学适配体传感器可实现对OTA的高灵敏、高可靠性检测，检测线性范围为10pg/mL‑10ng/mL，检出限为3.3pg/mL。本发明旨在发展一种灵敏度高、选择性好、可靠性高的比率电化学适配体传感器，为测定实际样品中的OTA提供可靠的传感平台。

Description

一种赭曲霉毒素A的比率电化学检测方法
技术领域
本发明属于生物传感技术领域，涉及一种检测赭曲霉毒素A的比率电化学检测方法。
背景技术
赭曲霉毒素A(OTA)是由曲霉和青霉在适宜温湿度条件下产生的一种常见真菌毒素，其广泛存在于小麦、玉米和大豆等各种谷物中。OTA会通过抑制动物体蛋白质和相关酶的合成，破坏细胞结构，损害动物体肝脏、肾脏、神经、造血等组织器官，具有致癌、致畸、致突变等危害，对人和动物的健康造成了严重威胁。因此，发展简便快捷、灵敏可靠的检测方法，实现对谷物中OTA的高精准分析检测具有重要意义。目前，OTA的常用检测技术主要包括酶联免疫吸附法、薄层色谱法、高效液相色谱串联质谱法和高效液相色谱串联荧光检测法等。虽然这些方法具有较高的灵敏度和可靠性，但也存在操作复杂、成本高、检测过程耗时等缺点。
电化学方法由于其具有灵敏度高、操作简单、成本低、检测时间短等特点，在真菌毒素检测领域引起了越来越多的关注。但传统的电化学传感方法均是通过单一电信号(电流、电位、电阻等)的变化实现对目标物的检测。这类电化学传感器易受外界因素干扰，导致可靠性差、准确度不够。近年来，具有双响应信号的比率电化学传感被认为可以有效克服环境和人为因素造成的可靠性差、准确度低等问题。比率电化学传感器可通过测量不同氧化还原电位下电流信号的比值来量化目标物。理论上，该策略可以建立一种内部校准以克服外部因素的干扰，从而提高电化学传感器的可靠性和准确性等。因此，开发一种比率电化学适配体传感器实现对OTA的可靠、灵敏、高选择性检测成为一项重要课题。
发明内容
针对现有技术存在的问题，本发明利用Fc标记的互补DNA以及DNA与MB的无标记结合，通过加入OTA的适配体，形成一种具有双响应电流信号的新型比率电化学策略，并利用此策略构建比率电化学适配体传感器，实现对OTA的高灵敏、高可靠性检测。
一种检测赭曲霉毒素A的比率电化学适配体传感器的制备方法，包括以下步骤：
(1)将金电极(AuE)依次用不同粒径的三氧化二铝粉末打磨，并依次在乙醇和水中超声以清除表面残留，然后在硫酸溶液中使用循环伏安对电极进行电化学清洗；
(2)将二茂铁标记的互补DNA(Fc-cDNA)修饰到经步骤(1)处理的电极上，利用Au-S键将Fc-cDNA固定在金电极表面；
(3)将巯基己醇MCH修饰在步骤(2)处理过的电极上，以封闭金的非特异性结合位点；
(4)将赭曲霉毒素A的适配体(Aptamer)修饰在步骤(3)处理过的电极上，利用其与cDNA的杂交反应形成双链DNA；
(5)将辅助互补DNA(hDNA)修饰在步骤(4)处理过的电极上，利用杂交反应进一步形成更长的双链DNA；
(6)将步骤(5)得到的电极浸泡在不同浓度的赭曲霉毒素A的标准溶液中，超纯水冲洗后在室温下自然晾干；
(7)将步骤(6)得到的电极浸泡在亚甲蓝(MB)溶液中，超纯水冲洗后在室温下自然晾干，记为MB/OTA/hDNA/Apt/MCH/Fc-cDNA/AuE-1；在三电极体系中，将得到的电极MB/OTA/hDNA/Apt/MCH/Fc-cDNA/AuE-1作为工作电极，Ag/AgCl(饱和KCl)电极为参比电极，铂丝为对电极，以磷酸盐缓冲溶液为电解液，进行电化学交流伏安曲线(ACV)测量，检测比率信号IFc/IMB，建立赭曲霉毒素A溶液浓度与比率信号IFc/IMB的对应关系的标准线性曲线；
(8)待测样品中赭曲霉毒素A浓度的检测：
将步骤(5)得到的电极浸泡在赭曲霉毒素A的待测溶液中，超纯水冲洗后在室温下自然晾干；然后再浸泡在亚甲蓝MB溶液中，超纯水冲洗后在室温下自然晾干，记为MB/OTA/hDNA/Apt/MCH/Fc-cDNA/AuE-2；在三电极体系中，将得到的电极MB/OTA/hDNA/Apt/MCH/Fc-cDNA/AuE-2作为工作电极，Ag/AgCl(饱和KCl)电极为参比电极，铂丝为对电极，以磷酸盐缓冲溶液为电解液，进行电化学交流伏安曲线(ACV)测量，检测比率信号IFc/IMB，代入步骤(7)建立标准线性曲线中，得到待测溶液中赭曲霉毒素A的浓度，实现对赭曲霉毒素A的高灵敏、高可靠性检测。
步骤(1)中，金电极的直径d＝3mm；所用的三氧化二铝粉末的粒径依次为0.3μm和0.05μm；所述循环伏安的扫描速率为100mV/s，扫描电位范围为-0.2-1.6V，硫酸的浓度为0.1M。
步骤(2)中，Fc-cDNA的用量为6μL，浓度为1μM，修饰时间为室温下8小时。
步骤(3)中，MCH的用量为6μL，浓度为1mM，孵育时间为室温下1小时。
步骤(4)中，Aptamer的用量为6μL，浓度为2μM，反应时间为1小时，温度37℃。
步骤(5)中，hDNA的用量为6μL，浓度为2μM，反应时间为1小时，温度37℃。
步骤(6)中，电极浸泡的时间为40分钟，赭曲霉毒素A的标准溶液的浓度为1×10-11～1×10-8g/mL。
步骤(7)中，MB的浓度为2μM，浸泡时间为10分钟；磷酸盐缓冲溶液的浓度为0.01M，pH为7.4；ACV测量的电位范围为-0.5-0.7V，频率为25Hz。
步骤(8)中，电极浸泡在赭曲霉毒素A的待测溶液中浸泡的时间为40分钟；MB的浓度为2μM，浸泡在MB中的时间为10分钟；磷酸盐缓冲溶液的浓度为0.01M，pH为7.4；ACV测量的电位范围为-0.5-0.7V，频率为25Hz。
该比率电化学适配体传感器的工作原理：
首先，顺序修饰的Fc-cDNA、Aptamer和hDNA在金电极表面形成双链DNA，此时Fc远离电极，且双链DNA可以吸附较多的MB，即形成较小的Fc氧化电流(IFc)和较大的MB氧化电流(IMB)。当有OTA存在时，由于其与适配体的特异性结合，双链DNA被打开，Aptamer和hDNA被冲离电极，于是cDNA在电极表面形成发夹结构，此时Fc接近电极表面且吸附MB的能力变弱，导致IFc增大而IMB降低。因此，可通过测量双信号的比值(IFc/IMB)实现对目标物OTA的准确检测。
本发明的有益效果为：
(1)本发明利用Fc标记的互补DNA以及DNA与MB的无标记结合，形成具有双响应电流信号的比率策略，提高了电化学检测的可靠性和准确度。
(2)本发明使用MB作为DNA的无标记结合探针，放大了MB的电流信号，提高了检测OTA的灵敏度。
(3)本发明构建的用于检测OTA的比率电化学适配体传感器，具有灵敏度高、选择性好、可靠性高等特点，在生物传感、食品安全等领域有较大的应用前景。
附图说明
图1A为该比率适配体传感器的构建过程示意图；B为传感器的检测示意图。
图2A为不同浓度OTA所对应的ACV响应，其中OTA的浓度a-h依次为1×10-11，2×10-11，5×10-11，1×10-10，5×10-10，1×10-9，5×10-9和1×10-8g/mL；B为比值IFc/IMB与OTA浓度对数之间的标准线性曲线。
图3A为该传感器的选择性(图中干扰物分别为黄曲霉毒素B1，玉米赤霉烯酮，N-乙酰-L-苯丙氨酸，华法林，赭曲霉毒素B)；B为传感器的7天稳定性。
具体实施方式
下面结合说明书附图和实施例对本发明做进一步说明。
实施例1
一种赭曲霉毒素A的比率电化学检测方法，包括以下步骤：
(1)将直径3mm的金电极(AuE)依次用0.3μm和0.05μm的三氧化二铝粉末打磨，并依次在乙醇和水中超声以清除表面残留，然后在0.1M硫酸溶液中以100mV/s的扫速、-0.2-1.6V的电位使用循环伏安对电极进行电化学清洗；
(2)将6μL浓度为1μM的二茂铁标记的互补DNA(Fc-cDNA)修饰到经步骤(1)处理的电极上，在室温下放置8小时，利用Au-S键将Fc-cDNA固定在金电极表面；
(3)将6μL浓度为1mM的巯基己醇(MCH)修饰在步骤(2)处理过的电极上，在室温下孵育1小时，以封闭金的非特异性结合位点；
(4)将6μL浓度为2μM的赭曲霉毒素A适配体(Aptamer)修饰在步骤(3)处理过的电极上，在37℃下反应1小时，利用其与cDNA的杂交反应形成双链DNA；
(5)将6μL浓度为2μM的辅助互补DNA(hDNA)修饰在步骤(4)处理过的电极上，在37℃下反应1小时，利用杂交反应进一步形成更长的双链DNA；
(6)将步骤(5)得到的电极浸泡在赭曲霉毒素A的标准溶液中40分钟，超纯水冲洗后在室温下自然晾干；
(7)将步骤(6)得到的电极浸泡在2μM的亚甲蓝(MB)溶液中10分钟，超纯水冲洗后在室温下自然晾干，记为MB/OTA/hDNA/Apt/MCH/Fc-cDNA/AuE-1；在三电极体系中，将得到的电极MB/OTA/hDNA/Apt/MCH/Fc-cDNA/AuE-1作为工作电极，Ag/AgCl(饱和KCl)电极为参比电极，铂丝为对电极，以pH为7.4、浓度为0.01M的磷酸盐缓冲溶液为电解液，进行电化学交流伏安曲线(ACV)测量，检测比率信号IFc/IMB，其中ACV测量的电位范围为-0.5-0.7V，频率为25Hz；建立赭曲霉毒素A溶液浓度与比率信号IFc/IMB的对应关系的标准线性曲线，如图2B；
(8)待测样品中赭曲霉毒素A浓度的检测：
将步骤(5)得到的电极浸泡在赭曲霉毒素A的待测溶液中，超纯水冲洗后在室温下自然晾干；然后再浸泡在亚甲蓝MB溶液中，超纯水冲洗后在室温下自然晾干，记为MB/OTA/hDNA/Apt/MCH/Fc-cDNA/AuE-2；在三电极体系中，将得到的电极MB/OTA/hDNA/Apt/MCH/Fc-cDNA/AuE-2作为工作电极，Ag/AgCl(饱和KCl)电极为参比电极，铂丝为对电极，以pH为7.4、浓度为0.01M的磷酸盐缓冲溶液为电解液，进行电化学交流伏安曲线(ACV)测量，其中ACV测量的电位范围为-0.5-0.7V，频率为25Hz；检测比率信号IFc/IMB，代入步骤(7)建立的标准线性曲线中，得到待测溶液中赭曲霉毒素A的浓度。
所述比率电化学适配体传感器的构建如附图1A。
所述比率电化学适配体传感器对赭曲霉毒素A的检测过程如附图1B。
从图2A中，可以看出，随着OTA浓度的增加(a-h的浓度依次为1×10-11，2×10-11，5×10-11，1×10-10，5×10-10，1×10-9，5×10-9和1×10-8g/mL)，IFc的值逐渐增大而IMB逐渐降低。
从图2B中，可以看出，比值IFc/IMB与OTA浓度对数之间的标准线性曲线为IFc/IMB＝3.457+0.262Log COTA[g/mL](R2＝0.995)，线性范围为10pg/mL-10ng/mL，检出限为3.3pg/mL。
从图3A中，可以看出，与OTA具有类似毒性和类似结构的干扰物质(黄曲霉毒素B1，玉米赤霉烯酮，N-乙酰-L-苯丙氨酸，华法林，赭曲霉毒素B)引起的IFc/IMB值的变化可以忽略不计，证明该传感器具有优异的选择性能。
从图3B中，可以看出，该适配体传感器对OTA进行连续7天的检测，相对标准偏差(RSD)为3.9％，证明该传感器具有良好的稳定性能。

Claims (9)

1.一种赭曲霉毒素A的比率电化学检测方法，其特征在于，包括如下步骤：
(1)将金电极AuE依次用不同粒径的三氧化二铝粉末打磨，并依次在乙醇和水中超声以清除表面残留，然后在硫酸溶液中使用循环伏安对电极进行电化学清洗；
(2)将二茂铁标记的互补DNA即Fc-cDNA修饰到经步骤(1)处理的电极上，利用Au-S键将Fc-cDNA固定在金电极表面；
(3)将巯基己醇MCH修饰在步骤(2)处理过的电极上，以封闭金的非特异性结合位点；
(4)将赭曲霉毒素A的适配体Aptamer修饰在步骤(3)处理过的电极上，利用其与cDNA的杂交反应形成双链DNA；
(5)将辅助互补DNA即hDNA修饰在步骤(4)处理过的电极上，利用杂交反应进一步形成更长的双链DNA；
(6)将步骤(5)得到的电极浸泡在不同浓度的赭曲霉毒素A的标准溶液中，超纯水冲洗后在室温下自然晾干；
(7)将步骤(6)得到的电极浸泡在亚甲蓝MB溶液中，超纯水冲洗后在室温下自然晾干，记为MB/OTA/hDNA/Apt/MCH/Fc-cDNA/AuE-1；在三电极体系中，将得到的电极MB/OTA/hDNA/Apt/MCH/Fc-cDNA/AuE-1作为工作电极，Ag/AgCl(饱和KCl)电极为参比电极，铂丝为对电极，以磷酸盐缓冲溶液为电解液，进行电化学交流伏安曲线测量，检测比率信号IFc/IMB，建立赭曲霉毒素A溶液浓度与比率信号IFc/IMB的对应关系的标准线性曲线；
(8)待测样品中赭曲霉毒素A浓度的检测：
将步骤(5)得到的电极浸泡在赭曲霉毒素A的待测溶液中，超纯水冲洗后在室温下自然晾干；然后再浸泡在亚甲蓝MB溶液中，超纯水冲洗后在室温下自然晾干，记为MB/OTA/hDNA/Apt/MCH/Fc-cDNA/AuE-2；在三电极体系中，将得到的电极MB/OTA/hDNA/Apt/MCH/Fc-cDNA/AuE-2作为工作电极，Ag/AgCl(饱和KCl)电极为参比电极，铂丝为对电极，以磷酸盐缓冲溶液为电解液，进行电化学交流伏安曲线测量，检测比率信号IFc/IMB，代入步骤(7)建立的标准线性曲线中，得到待测溶液中赭曲霉毒素A的浓度。
2.根据权利要求1所述的赭曲霉毒素A的比率电化学检测方法，其特征在于，步骤(1)中，金电极的直径d＝3mm；所用的三氧化二铝粉末的粒径依次为0.3μm和0.05μm；所述循环伏安的扫描速率为100mV/s，扫描电位范围为-0.2-1.6V，硫酸的浓度为0.1M。
3.根据权利要求1所述的赭曲霉毒素A的比率电化学检测方法，其特征在于，步骤(2)中，Fc-cDNA的用量为6μL，浓度为1μM，修饰时间为室温下8小时。
4.根据权利要求1所述的赭曲霉毒素A的比率电化学检测方法，其特征在于，步骤(3)中，MCH的用量为6μL，浓度为1mM，孵育时间为室温下1小时。
5.根据权利要求1所述的赭曲霉毒素A的比率电化学检测方法，其特征在于，步骤(4)中，Aptamer的用量为6μL，浓度为2μM，反应时间为1小时，温度37℃。
6.根据权利要求1所述的赭曲霉毒素A的比率电化学检测方法，其特征在于，步骤(5)中，hDNA的用量为6μL，浓度为2μM，反应时间为1小时，温度37℃。
7.根据权利要求1所述的赭曲霉毒素A的比率电化学检测方法，其特征在于，步骤(6)中，电极浸泡的时间为40分钟，赭曲霉毒素A的标准溶液的浓度为1×10-11～1×10-8g/mL。
8.根据权利要求1所述的赭曲霉毒素A的比率电化学检测方法，其特征在于，步骤(7)中，MB的浓度为2μM，浸泡时间为10分钟；磷酸盐缓冲溶液的浓度为0.01M，pH为7.4；ACV测量的电位范围为-0.5-0.7V，频率为25Hz。
9.根据权利要求1所述的赭曲霉毒素A的比率电化学检测方法，其特征在于，步骤(8)中，电极浸泡在赭曲霉毒素A的待测溶液中浸泡的时间为40分钟；MB的浓度为2μM，浸泡在MB中的时间为10分钟；磷酸盐缓冲溶液的浓度为0.01M，pH为7.4；ACV测量的电位范围为-0.5-0.7V，频率为25Hz。
CN201910802150.7A 2019-08-28 2019-08-28 一种赭曲霉毒素a的比率电化学检测方法 Active CN110618185B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201910802150.7A CN110618185B (zh) 2019-08-28 2019-08-28 一种赭曲霉毒素a的比率电化学检测方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201910802150.7A CN110618185B (zh) 2019-08-28 2019-08-28 一种赭曲霉毒素a的比率电化学检测方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN110618185A true CN110618185A (zh) 2019-12-27
CN110618185B CN110618185B (zh) 2021-11-23

Family

ID=68922127

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201910802150.7A Active CN110618185B (zh) 2019-08-28 2019-08-28 一种赭曲霉毒素a的比率电化学检测方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN110618185B (zh)

Cited By (13)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN111398391A (zh) * 2020-05-18 2020-07-10 河南工业大学 一种用于t-2毒素残留检测的电化学传感器制备方法
CN111443118A (zh) * 2020-01-02 2020-07-24 青岛科技大学 一种用于弧菌检测的比率型电化学传感平台及其制备方法和应用
CN111537583A (zh) * 2020-04-28 2020-08-14 江苏大学 基于时间调控灵敏度的检测黄曲霉毒素b1的无标记比率电化学传感器的制备方法
CN112285172A (zh) * 2020-09-07 2021-01-29 江苏大学 一种基于不同结构适配体放大线性范围双比率生物传感器的制备方法及其应用
CN112858444A (zh) * 2021-01-25 2021-05-28 中国地质大学（武汉） 通过单个氧化还原分子的双峰信号实现e-ab传感器免校准的检测方法
CN113295756A (zh) * 2021-05-31 2021-08-24 江苏大学 一种检测黄曲霉毒素b1的无标记比率均相电化学传感方法
CN113484391A (zh) * 2021-07-20 2021-10-08 江苏大学 一种自参比比率电化学生物传感器的构建方法及其黄曲霉毒素b1检测应用
CN113552195A (zh) * 2021-07-29 2021-10-26 太原师范学院 一种电化学比率法检测玉米赤霉烯酮的检测方法
CN115032252A (zh) * 2022-04-28 2022-09-09 江南大学 一种检测赭曲霉毒素a的电化学传感分析方法
CN115165995A (zh) * 2022-06-09 2022-10-11 西北大学 赭曲霉素a的检测方法和电化学ota适体传感器的制备方法
CN115219579A (zh) * 2022-07-29 2022-10-21 江苏大学 一种基于交替光激发调控亚甲基蓝电子传递的电化学传感器的构建方法及其应用
CN116381018A (zh) * 2023-04-06 2023-07-04 华北理工大学 一种修饰丝网印刷电极、赭曲霉毒素适配体竞争型生物传感器和检测方法
CN115219579B (zh) * 2022-07-29 2024-06-07 江苏大学 一种基于交替光激发调控亚甲基蓝电子传递的电化学传感器的构建方法及其应用

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20130071947A1 (en) * 2011-09-20 2013-03-21 Libing Wang Chirality sensor and method for detection of aflatoxin by using the sensor
CN103424448A (zh) * 2013-07-26 2013-12-04 江苏大学 一种电化学适配体传感器检测痕量赭曲霉毒素a的方法
CN103792372A (zh) * 2014-02-20 2014-05-14 南京大学 双核酸标记的比率电化学免疫传感器
CN108490053A (zh) * 2018-03-08 2018-09-04 清华大学 一种三维石墨烯基比例型信号放大适体传感器及其制备方法与应用

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20130071947A1 (en) * 2011-09-20 2013-03-21 Libing Wang Chirality sensor and method for detection of aflatoxin by using the sensor
CN103424448A (zh) * 2013-07-26 2013-12-04 江苏大学 一种电化学适配体传感器检测痕量赭曲霉毒素a的方法
CN103792372A (zh) * 2014-02-20 2014-05-14 南京大学 双核酸标记的比率电化学免疫传感器
CN108490053A (zh) * 2018-03-08 2018-09-04 清华大学 一种三维石墨烯基比例型信号放大适体传感器及其制备方法与应用

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
CUI LIN等: "A reusable ratiometric electrochemical biosensor on the basis of the binding of methylene blue to DNA with alternating AT base sequence for sensitive detection of adenosine", 《BIOSENSORS & BIOELECTRONICS》 *
REN KEWEI等: "Ratiometric electrochemical proximity assay for sensitive one-step protein detection", 《SCIENTIFIC REPORTS》 *

Cited By (18)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN111443118B (zh) * 2020-01-02 2022-11-22 青岛科技大学 一种用于弧菌检测的比率型电化学传感平台及其制备方法和应用
CN111443118A (zh) * 2020-01-02 2020-07-24 青岛科技大学 一种用于弧菌检测的比率型电化学传感平台及其制备方法和应用
CN111537583A (zh) * 2020-04-28 2020-08-14 江苏大学 基于时间调控灵敏度的检测黄曲霉毒素b1的无标记比率电化学传感器的制备方法
CN111398391A (zh) * 2020-05-18 2020-07-10 河南工业大学 一种用于t-2毒素残留检测的电化学传感器制备方法
CN112285172A (zh) * 2020-09-07 2021-01-29 江苏大学 一种基于不同结构适配体放大线性范围双比率生物传感器的制备方法及其应用
CN112285172B (zh) * 2020-09-07 2022-12-16 江苏大学 基于不同结构适配体双比率生物传感器的制备方法及应用
CN112858444A (zh) * 2021-01-25 2021-05-28 中国地质大学（武汉） 通过单个氧化还原分子的双峰信号实现e-ab传感器免校准的检测方法
CN113295756A (zh) * 2021-05-31 2021-08-24 江苏大学 一种检测黄曲霉毒素b1的无标记比率均相电化学传感方法
CN113295756B (zh) * 2021-05-31 2023-05-05 江苏大学 一种检测黄曲霉毒素b1的无标记比率均相电化学传感方法
CN113484391A (zh) * 2021-07-20 2021-10-08 江苏大学 一种自参比比率电化学生物传感器的构建方法及其黄曲霉毒素b1检测应用
CN113552195A (zh) * 2021-07-29 2021-10-26 太原师范学院 一种电化学比率法检测玉米赤霉烯酮的检测方法
CN113552195B (zh) * 2021-07-29 2023-08-01 太原师范学院 一种电化学比率法检测玉米赤霉烯酮的检测方法
CN115032252A (zh) * 2022-04-28 2022-09-09 江南大学 一种检测赭曲霉毒素a的电化学传感分析方法
CN115165995A (zh) * 2022-06-09 2022-10-11 西北大学 赭曲霉素a的检测方法和电化学ota适体传感器的制备方法
CN115165995B (zh) * 2022-06-09 2024-05-28 西北大学 赭曲霉素a的检测方法和电化学ota适体传感器的制备方法
CN115219579A (zh) * 2022-07-29 2022-10-21 江苏大学 一种基于交替光激发调控亚甲基蓝电子传递的电化学传感器的构建方法及其应用
CN115219579B (zh) * 2022-07-29 2024-06-07 江苏大学 一种基于交替光激发调控亚甲基蓝电子传递的电化学传感器的构建方法及其应用
CN116381018A (zh) * 2023-04-06 2023-07-04 华北理工大学 一种修饰丝网印刷电极、赭曲霉毒素适配体竞争型生物传感器和检测方法

Also Published As

Publication number Publication date
CN110618185B (zh) 2021-11-23

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN110618185B (zh) 一种赭曲霉毒素a的比率电化学检测方法
CN111175364B (zh) 一种同时检测黄曲霉毒素b1和赭曲霉毒素a的比率电化学适配体传感器的制备方法
CN107525834B (zh) 一种Cu-MOF标记的DNA适配体传感器用于检测啶虫脒的方法
CN102735740B (zh) 利用电化学核酸适配体传感器一步快速检测赭曲霉毒素ａ的方法
CN110208343A (zh) 一种检测黄曲霉毒素b1的比率电化学生物传感器的制备方法
CN103424448A (zh) 一种电化学适配体传感器检测痕量赭曲霉毒素a的方法
CN102375021B (zh) 一种采用dna为探针的电化学检测环境污染物方法
CN112280831A (zh) 一种基于DNA walker的电化学生物传感器的制备方法及其应用
CN101793862B (zh) 一种l-半胱氨酸/壳聚糖修饰的电化学传感器及其应用
CN113484391B (zh) 一种自参比比率电化学生物传感器的构建方法及其黄曲霉毒素b1检测应用
Ferancová et al. Association interaction and voltammetric determination of 1-aminopyrene and 1-hydroxypyrene at cyclodextrin and DNA based electrochemical sensors
CN110044987A (zh) 二茂铁基共价有机框架修饰电极的制备方法及其电化学检测肌钙蛋白的方法
CN111024791B (zh) 检测赭曲霉毒素a的电化学传感器和方法
CN111307907B (zh) 检测黄曲霉毒素的可再生电化学传感器和方法
CN104677962A (zh) 一种过氧化聚多巴胺修饰电极以及基于该电极的氯霉素电化学检测方法
CN104109676B (zh) 杂色曲菌素适配体以及相关的电化学生物传感器
CN116297779A (zh) 一种检测孔雀石绿的核酸适配体电化学传感器及其制备方法与应用
CN113295756B (zh) 一种检测黄曲霉毒素b1的无标记比率均相电化学传感方法
CN110031526A (zh) 一种基于K2Fe4O7电极的多巴胺无酶传感器、制备方法及其应用
CN113552195B (zh) 一种电化学比率法检测玉米赤霉烯酮的检测方法
CN103969319A (zh) 一种水生生物金属硫蛋白的检测方法
CN115078495A (zh) 一种结合夹心式生物传感器的便携式幽门螺杆菌检测仪
CN114441614A (zh) 一种电化学微生物快速检测仪及生物探针的修饰方法
Uemura et al. Development of Small-sized Lysine Enzyme Sensor for Clinical Use.
CN109470761B (zh) 一种用于玉米赤霉烯酮zen检测的电化学dna适体传感器及检测zen的方法

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant