CN110430900A

CN110430900A - 包含赛乐西帕的药物组合物

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Publication number: CN110430900A
Application number: CN201880016540.5A
Authority: CN
Inventors: 克劳斯·海勒布兰德; 亚历山德拉·施利克尔-斯佩因
Original assignee: Ecot Rhine Pharmaceutical Co Ltd
Current assignee: Ecot Rhine Pharmaceutical Co Ltd
Priority date: 2017-03-08
Filing date: 2018-03-07
Publication date: 2019-11-08
Anticipated expiration: 2038-03-07
Also published as: BR112019018420A2; ES2880009T3; AR111570A1; JOP20190204A1; EP3592391B1; IL269061A; SG11201907804QA; MX2019010598A; EA201992074A1; PE20191492A1; AU2018229750A1; JP2020509070A; KR102593075B1; KR20190122803A; WO2018162527A1; CN110430900B; PH12019502033A1; ECSP19072294A; NI201900090A; CL2019002511A1

Abstract

本发明涉及含水药物组合物，其包含化合物2‑{4‑[N‑(5,6‑二苯基吡嗪‑2‑基)‑N‑异丙基氨基]丁氧基}‑N‑(甲磺酰基)乙酰胺、甘氨酸、聚山梨酸酯20和含水磷酸盐缓冲剂，其中相对量如说明书中所述，其中所述药物组合物的pH在约7和8之间；涉及由所述含水组合物制备的冻干药物组合物；以及涉及适用于i.v.施用的其重构含水组合物。本发明还涉及用于制备所述组合物的方法；以及它们用于治疗与IP受体有关的疾病或病症的用途。

Description

包含赛乐西帕的药物组合物

本发明涉及包含2-{4-[N-(5,6-二苯基吡嗪-2-基)-N-异丙基氨基]丁氧基}-N-(甲磺酰基)乙酰胺(赛乐西帕(selexipag)、NS-304、ACT-293987；下文中称为化合物)的药物组合物，这些药物组合物适用于静脉内(i.v.)施用。

赛乐西帕及其活性代谢物2-(4-((5,6-二苯基吡嗪-2-基)(异丙基)氨基)丁氧基)乙酸(MRE-269、ACT-333679)的制备和医学用途描述于WO2002/088084；WO2009/157396；WO2009/107736；WO2009/154246；WO2009/157397；WO2009/157398；WO2010/150865；WO2011/024874；Nakamura等，Bioorg Med Chem(2007),15,7720-7725；Kuwano等人，J PharmacolExp Ther(2007),322(3),1181-1188；Kuwano等人，J Pharmacol Exp Ther(2008),326(3),691-699；O.Sitbon等人，N Engl J Med(2015),373,2522-33；Asaki等人，Bioorg Med Chem(2007),15,6692-6704；Asaki等人，J.Med.Chem.(2015),58,7128-7137中。某些制剂公开于WO2013/024051和WO2014/069401中。

具体地，赛乐西帕或其活性代谢物可用作以下的预防剂或治疗剂：溃疡、指溃疡、糖尿病性坏疽、糖尿病足溃疡、压力性溃疡(褥疮)、高血压、肺高血压、肺动脉高血压、方坦病和与方坦病相关联的肺高血压、结节病和与结节病相关联的肺高血压、末梢循环障碍(例如，慢性动脉闭塞、间歇性跛行、外周栓塞、震动综合征、雷诺氏病)、结缔组织病(例如，系统性红斑狼疮、硬皮病、混合性结缔组织病、血管炎综合征)、经皮冠状动脉成形术(PTCA)后再闭塞/再狭窄、动脉硬化、血栓形成(例如，急性期脑血栓形成、肺栓塞)、短暂性脑缺血发作(TIA)、糖尿病性神经病变、缺血性病症(例如，脑梗死、心肌梗死)、心绞痛(例如，稳定型心绞痛、不稳定型心绞痛)、包括肾小球肾炎和处于任何阶段的糖尿病性肾病的慢性肾脏疾病、变态反应、支气管哮喘、冠状动脉介入诸如斑块切除术和支架植入术后再狭窄、因透析所致的血小板减少症、涉及器官或组织纤维化的疾病(例如，肾病诸如肾小管间质性肾炎)、呼吸系统疾病(例如，(普通性)间质性肺炎/(特发性)肺纤维化、慢性阻塞性肺病)、消化系统疾病(例如，肝硬化、病毒性肝炎、慢性胰腺炎和硬性胃癌)、心血管疾病(例如，心肌纤维化)、骨和关节疾病(例如，骨髓纤维化和类风湿性关节炎)、皮肤疾病(例如，手术后瘢痕、烫伤瘢痕、瘢痕疙瘩和肥厚性瘢痕)、产科疾病(例如，子宫肌瘤)、泌尿系统疾病(例如，前列腺增生)、其它疾病(例如，阿尔茨海默病、硬化性腹膜炎、I型糖尿病和手术后器官粘连)、勃起功能障碍(例如，糖尿病性勃起功能障碍、心因性勃起功能障碍、精神病性勃起功能障碍、与慢性肾衰竭有关的勃起功能障碍、用于除去前列腺的骨盆内手术后勃起功能障碍以及与衰老和动脉硬化有关的血管性勃起功能障碍)、炎性肠病(例如，溃疡性结肠炎、克罗恩氏病、肠结核、缺血性结肠炎和与白塞病有关的肠溃疡)、胃炎、胃溃疡、缺血性眼病(例如，视网膜动脉阻塞、视网膜静脉阻塞、缺血性视神经病变)、突发性耳聋、无血管性骨坏死、因使用非甾体消炎剂所致的肠损伤和与腰椎管狭窄症有关的症状。

赛乐西帕显示有益于治疗肺动脉高血压。在III期临床试验中，在肺动脉高血压患者中，接受赛乐西帕的患者的与肺动脉高血压有关的死亡或并发症的主要复合终点的风险显著低于接受安慰剂的患者。赛乐西帕例如在美国获得了市场批准，并且被指示用于治疗肺动脉高血压(PAH，WHO I组)以延迟疾病进展并降低因PAH住院的风险。

迄今为止，已经使用了旨在用于每天口服两次的赛乐西帕的标准膜包衣的片剂制剂，其中赋形剂包括D-甘露糖醇、玉米淀粉、低取代羟丙基纤维素、羟丙基纤维素和硬脂酸镁；并且片剂被膜包衣有包衣材料，该包衣材料包括羟丙甲纤维素、丙二醇、二氧化钛、巴西棕榈蜡以及氧化铁混合物。

赛乐西帕被认为起前药的作用(同时保留自身对IP受体的某些激动活性)，该前药可在哺乳动物尤其是人体内发挥活性代谢物2-(4-((5,6-二苯基吡嗪-2-基)(异丙基)氨基)丁氧基)乙酸的长效选择性IP受体激动剂活性。赛乐西帕的体内代谢可以有效地充当一类“缓释机制”，这类机制有可能延长活性并且减少与高浓度PGI2激动剂相关联的典型副作用(Kuwano等，J Pharmacol Exp Ther(2007),322(3),1181-1188)。

与PGI2激动剂相关联的副作用还通过特定的增加剂量安排来解决。口服赛乐西帕的推荐起始剂量为给予200微克每天两次。然后，剂量以200微克每天两次的增量，通常以一周为间隔，增加至高达1600微克每天两次的最高耐受剂量。如果患者不能达到耐受剂量，那么应将剂量降低至先前的耐受剂量。

在某些情况下，赛乐西帕的口服制剂的使用可能是不适当的或不可能的(例如，在紧急护理中，或在患者出于一些原因不能吞咽片剂的情况下)。此外，某些疾病的治疗可能仅需要短期治疗，或者包括交替的治疗期/非治疗期的治疗，在这种情况下，上文提及的增加剂量安排可能是不适当的。此类疾病可包括例如溃疡、指溃疡、糖尿病性坏疽、糖尿病足溃疡、压力性溃疡(褥疮)、末梢循环障碍等。因此，需要开发针对赛乐西帕的稳定并且可再现的i.v.制剂。在1期研究“健康受试者体内新型口服前列环素IP受体激动剂赛乐西帕的绝对口服生物利用率”中，当口服或通过i.v.输注来施用时，赛乐西帕通常耐受良好(N.Hurst,P.Kaufmann,M.Richard,B.Astruc,J.Dingemanse,Poster presented at theAmerican College of Clinical Pharmacology annual meeting,2016年9月25-27日，Bethesda,USA)。此外，在2017年6月15日发表了“Safety Study of the Switch from OralSelexipag to Intravenous Selexipag in Subjects With Stable Pulmonary ArterialHypertension”(https://clinicaltrials.gov/ct2/show/NCT03187678)。

开发此类包含赛乐西帕的i.v.制剂的特殊困难来自于这样一个事实，即赛乐西帕的需要剂量有可能在每天微克至个位数毫克范围内，需要对注射剂量进行严格的定量控制。例如，活性成分在注射器或管材上的吸附可能对赛乐西帕i.v.制剂的适用性产生影响。此外，由于赛乐西帕为可水解前药的实质，应防止在此类i.v.制剂中过早水解成活性代谢物。因此，稳定性，包括化学稳定性，可为选择适用于i.v.施用的药物组合物的另一重要标准。

现已发现，只有某些包含赛乐西帕、增量剂、洗涤剂和缓冲剂的组合物才得到可再现地冻干成稳定饼并且重构成适用于i.v.施用的受控组合物的化学和物理稳定的含水制剂。可避免活性成分向管材和注射器的吸附。

1)第一实施方案涉及一种含水药物组合物，该含水药物组合物包含：

·约0.1g/kg至1g/kg、尤其约0.5g/kg(相对于所述含水药物组合物的总重量)的化合物：2-{4-[N-(5,6-二苯基吡嗪-2-基)-N-异丙基氨基]丁氧基}-N-(甲磺酰基)乙酰胺：；

·约2.5重量％至10重量％的增量剂，该增量剂为甘氨酸(特别地约3重量％至6重量％的甘氨酸；尤其约5重量％的甘氨酸)(即，约25g/kg至100g/kg、特别地约30g/kg至60g/kg、尤其约50g/kg的甘氨酸)；

·约0.05重量％至0.4重量％的洗涤剂，该洗涤剂为聚山梨酸酯20(特别地在约0.1重量％和0.3重量％之间的聚山梨酸酯20；尤其约0.1重量％、0.2重量％或0.3重量％的聚山梨酸酯20)(其中优选地使用约5g/kg至40g/kg；特别地在约10g/kg和30g/kg之间；尤其约10g/kg、20g/kg或30g/kg的约10重量％的聚山梨酸酯20的水溶液)；以及

·含水磷酸盐缓冲剂(尤其含水磷酸钠缓冲剂(即，由H₃PO₄和NaOH构成的含水缓冲剂))，其中所述磷酸盐缓冲剂的总量为约5mmol/kg至20mmol/kg(相对于所述含水药物组合物的总重量)，特别是约10mmol/kg；

其中所述含水药物组合物的pH在约7和8之间(特别地pH为7.5±0.3；尤其7.5±0.2)。

根据实施方案1)所述的本发明组合物为液体各向同性混合物，它含有游离碱形式的化合物。化合物可用于制备以无定形形式、或者以一种或多种结晶形式、或者以无定形形式和结晶形式的混合形式的本发明的组合物。结晶形式可以是无水形式或者溶剂化物或水合物形式。此类形态学形式涵盖在化合物的范围内。优选地，化合物以结晶形式使用。本发明的组合物涵盖以基本上纯的形式的化合物。考虑到化合物的实际化学纯度或者溶剂化物或水合物的存在，可以调节化合物的量。

术语“增量剂”是指与活性药物成分并且与组合物的其它赋形剂化学相容并且增加冻干组合物的质量的物质或组分。适用于根据本发明的实施方案1)的药物组合物的增量剂为甘氨酸。药物组合物中通常使用的增量剂为例如甘露糖醇、海藻糖、L-脯氨酸和聚乙烯吡咯烷酮。

如在本发明的范围内使用的赋形剂聚山梨酸酯20或聚氧乙烯(20)脱水山梨糖醇单月桂酸酯是指可商购获得的聚山梨酸酯20(CAS编号9005-64-5，E 432)，优选的是，CrodaAmericas/Merck Chemicals的20/20聚山梨酸酯20的另选的商品形式为例如PML 20；POE-L；Crillet^TM1；SML20；L-20；L-20；Montanox^TM20；LT-221；Ritabate 20；Sorbax PML-20；T-20；Protasorb^TML-20；SML 20；TW 20；TF-20。

聚山梨酸酯20可定义为(非离子)洗涤剂/乳化剂/表面活性剂。洗涤剂，尤其可商购获得的洗涤剂产品，通常不是纯的化合物，而可能是含有一种一级主洗涤剂组分的相当复杂的化合物的混合物。例如，聚山梨酸酯20为通过将脱水山梨糖醇乙氧基化，之后添加月桂酸所形成的聚山梨酸酯型非离子洗涤剂。乙氧基化过程得到具有20个聚乙二醇重复单元的分子；在实施过程中，这些重复单元被分布在4条不同的链中，得到包含一系列化学物质的商用产品。聚山梨酸酯20可包含可变量的所述一级主洗涤剂成分和残余量的其它组分，诸如例如残余的聚乙二醇(它可能来自于化学生产过程)。上文提及的化学物质的变化和可能包含在商业产品中的残余的其它组分涵盖在如本文所用的术语“聚山梨酸酯20”的范围内。

如以下实施方案1)和实施方案2)至6)中所定义的药物组合物的总重量％为100。

为避免任何疑问，很好理解，如下文实施方案1)和2)至6)中所定义的药物组合物可以另外包含其它常规的成分和/或添加剂，这些成分和/或添加剂可以单独使用或组合使用(足量，即，其中可能需要减少所述其它常规的成分和/或添加剂的最大量以构成100的总重量％)。应当理解，如下文实施方案1)和2)至6)中所定义的药物组合物将不包含其它增量剂或其它洗涤剂。

针对本文提及的这些和其它药学上可接受的赋形剂和程序，参考了大量关于这个主题的文献，参见例如R.C.Rowe,P.J.Seskey,S.C.Owen,Handbook of PharmaceuticalExcipients，第5版，Pharmaceutical Press2006；Remington,The Science and Practiceof Pharmacy，第21版(2005)，第5部分，“Pharmaceutical Manufacturing”[LippincottWilliams&Wilkins出版]。

此类常规成分或添加剂的示例为张力调节剂，诸如盐(例如NaCl、KCl、MgCl₂、CaCl₂)。其它常规成分或添加剂为例如抗微生物防腐剂，诸如在例如注射用抑菌水中使用的抗微生物防腐剂。示例为苄醇。

每种药学上可接受的赋形剂的绝对量和相对于其它药学上可接受的赋形剂的量取决于所需的药物组合物的性质，并且可以通过常规实验来选择。

药物组合物的总重量百分比为100。

术语“药物组合物”可与术语“制剂”或“组合物”互换。

除非是关于温度而使用，否则放置于数值“X”之前的术语“约”在本申请中是指从X减去X的10％延伸至X加上X的10％的区间，并且优选的是，从X减去X的5％延伸至X加上X的5％的区间(其中很好理解，低于0％，相应地高于100％的百分比值不适用)。在术语约放置于范围之前的情况下，相应的区间将应用于这个范围的两个值。在术语约放置于特定值的列表之前的情况下，相应的区间将应用于这个列表的所有值。例如，约10g/kg、20g/kg或30g/kg的约10重量％的聚山梨酸酯20的水溶液是指10±1g/kg、20±2g/kg或30±3g/kg的10±1重量％的聚山梨酸酯20的水溶液；优选的是，10±0.5g/kg、20±1g/kg或30±1.5g/kg的10±0.5重量％的聚山梨酸酯20的水溶液。在温度的特定情况下，放置于温度“Y”之前的术语“约”在本申请中是指从温度Y减去10℃延伸至Y加上10℃的区间；并且优选地，在温度为至少30℃的情况下，是指从Y减去5℃延伸至Y加上5℃的区间；或者，在温度低于30℃的情况下，是指从Y减去2℃延伸至Y加上2℃的区间。

无论何时使用词语“在……之间”或“至”来描述数值范围时，应当理解，所指出的范围的端点被明确地公开并且包括在这个范围内。例如：如果将温度范围被描述成在40℃和80℃之间(或40℃至80℃)，那么这意指端点40℃和80℃包括在这个范围内；或者如果将变量定义为在1和4之间(或1至4)的整数，那么这意指变量为整数1、2、3或4。

表达“重量％”(或％(w/w))是指与所考虑的组合物的总重量相比较的重量百分比。如果没有另外明确地说明，那么所考虑的总重量为药物组合物的总重量。在将某一值给定为值％，而没有进一步说明的情况下，此一值是指重量％。与比率相关的表达(wt/wt)是指相应组分的重量比。

在本发明的上下文中，术语“基本上由……组成”应理解为尤其意指，相应组合物由如相应实施方案中明确说明的量的相应组合物的至少90重量百分比、特别地至少95重量百分比、尤其至少99重量百分比的量并且优选地100重量百分比的量组成(即，在“由……组成”的含义内)。术语“包含”应优选地理解为在术语“基本上由……组成”的含义内。

术语“基本上”，例如当在诸如“基本上纯的”的术语中使用时，在本发明的上下文中，应理解为尤其意指，相应组合物/化合物等的存在量为至少90重量百分比、尤其至少95重量百分比并且特别地至少99重量百分比的相应纯的组合物/化合物等。

本发明的其它实施方案呈现在下文中：

2)在另一个实施方案中，本发明涉及根据实施方案1)所述的药物组合物，该药物组合物包含：

·约0.1g/kg至1g/kg、尤其约0.5g/kg的化合物：2-{4-[N-(5,6-二苯基吡嗪-2-基)-N-异丙基氨基]丁氧基}-N-(甲磺酰基)乙酰胺；

·约3重量％至6重量％的甘氨酸；尤其5±0.5重量％的甘氨酸(即，50±5g/kg的甘氨酸)；

·约0.1重量％至0.3重量％(尤其约0.1重量％、0.2重量％或0.3重量％)的聚山梨酸酯20(其中优选地使用约10g/kg、20g/kg或30g/kg的约10重量％的聚山梨酸酯20的水溶液)；以及

·含水磷酸钠缓冲剂(由H₃PO₄和NaOH构成)，其中所述磷酸钠缓冲剂的浓度为约5mmol/kg至20mmol/kg、特别是约10mmol/kg；

其中所述药物组合物的pH为7.5±0.2。

3)在另一个实施方案中，本发明涉及根据实施方案1)所述的药物组合物，该药物组合物包含：

·5±0.5重量％的甘氨酸(即，50±5g/kg的甘氨酸)；

·约0.3重量％的聚山梨酸酯20(其中优选地使用约30g/kg的约10重量％的聚山梨酸酯20的水溶液)；以及

·含水磷酸钠缓冲剂(即，由H₃PO₄和NaOH构成的含水缓冲剂)，其中所述磷酸钠缓冲剂的浓度为约5mmol/kg至20mmol/kg、特别是约10mmol/kg；

其中所述药物组合物的pH为7.5±0.2。

4)在另一个实施方案中，本发明涉及根据实施方案1)所述的药物组合物，该药物组合物包含：

·5±0.5重量％的甘氨酸(即，50±5g/kg的甘氨酸)；

·约0.2重量％的聚山梨酸酯20(其中优选地使用约20g/kg的约10重量％的聚山梨酸酯20的水溶液)；以及

其中所述药物组合物的pH为7.5±0.2。

5)在另一个实施方案中，本发明涉及根据实施方案1)所述的药物组合物，该药物组合物包含：

·5±0.5重量％的甘氨酸(即，50±5g/kg的甘氨酸)；

·约0.1重量％的聚山梨酸酯20(其中优选地使用约10g/kg的约10重量％的聚山梨酸酯20的水溶液)；以及

其中所述药物组合物的pH为7.5±0.2。

6)在另一个实施方案中，本发明涉及根据实施方案1)至5)中任一项所述的药物组合物，其中将结晶形式、尤其基本上纯的结晶形式(优选地如WO2010/150865中所公开的基本上纯的结晶形式I或基本上纯的结晶形式II)的化合物2-{4-[N-(5,6-二苯基吡嗪-2-基)-N-异丙基氨基]丁氧基}-N-(甲磺酰基)乙酰胺用于制备所述组合物。

在冷冻干燥之前，应优选地将根据本发明的药物组合物填充至容器(单位剂量或多剂量容器，诸如小瓶)中，这些容器适用于储存冻干饼并且适用于药物组合物的稍后重构。此类容器可以在惰性气体气氛(诸如特别地氮气气氛)下填充。此类惰性气体气氛可减少活性成分的氧化降解。因此，另一个实施方案涉及一种容器，诸如例如小瓶、安瓿、注射器、联接的室装置、笔装置或自动注射装置，尤其小瓶，这种容器填充有根据实施方案1)至6)中任一项所述的药物组合物。

7)另一个实施方案涉及一种用于制备冻干药物组合物(即，冻干饼)的方法；所述方法包药物括以下步骤：

a)制备根据实施方案1)至6)中任一项所述的含水药物组合物；以及

b)使用包括以下步骤的方法冷冻干燥所述含水药物组合物以形成饼：

(i)在第一温度下冷冻含水药物组合物持续足以将液体制剂转化成固态的时间(尤其至少约1小时的时间)，其中所述第一温度在约-55℃至-25℃的范围内(尤其约-

45℃)；

(ii)在第二温度下将冷冻组合物退火(特别地持续至少约1小时、尤其至少约2小时的时间)；其中所述第二温度在约-20℃至-1℃的范围内(特别地约-10℃至-2℃；尤其约-3℃)；

(iii)在第三温度下使冷冻组合物经历真空(特别地约0.1mbar至1.5mbar、尤其约0.2mbar至1.2mbar、特别是0.5±0.1mbar的真空)，其中所述第三温度在约-55℃至-25℃的范围内(尤其约-45℃)；以及

(iv)在第四温度下于所述真空中干燥组合物(特别地持续至少约2小时、尤其至少约5小时、特别是在约5小时至15小时、约5小时至19小时之间、优选地在约5小时至22小时之间或在5小时至15小时之间的时间)，其中所述第四温度在约20℃至40℃的范围内、特别地在约25℃至35℃的范围内、尤其约35℃。

(v)任选地，组合物可以保持在约20℃至35℃、优选地20℃的结束温度。

术语“饼”是指当液体制剂被冻干或冷冻干燥时得到的干燥固体材料。

8)另一个实施方案涉及一种冻干药物组合物，所述冻干药物组合物通过冻干根据实施方案1)至6)中任一项所述的含水药物组合物；尤其通过使用根据实施方案7)所述的方法来制备。

9)在另一个实施方案中，本发明涉及根据实施方案8)所述的冻干药物组合物；其中所述冻干药物组合物处于在容器中；特别地处于小瓶或注射器中；尤其处于小瓶中。

10)在另一个实施方案中，本发明涉及根据实施方案8)或9)所述的冻干药物组合物；其中所述冻干药物组合物具有小于约2重量％(例如，如使用卡尔费休(Karl Fischer)分析所确定)、特别地小于约1.5重量％的残余水含量。

11)在另一个实施方案中，本发明涉及根据实施方案7)至10)中任一项所述的冻干药物组合物；其中所述冻干药物组合物在室温和约75％或低于75％的相对湿度下(尤其在约25℃和约60％rH下)化学稳定至少6个月。

12)在另一个实施方案中，本发明涉及根据实施方案7)至10)中任一项所述的冻干药物组合物；其中所述冻干药物组合物在约2℃至8℃和约75％或低于75％的相对湿度(尤其约60％rH)下化学稳定至少12个月。

13)在另一个实施方案中，本发明涉及根据实施方案7)至10)中任一项所述的冻干药物组合物；其中所述冻干药物组合物的饼在室温和约75％或低于75％的相对湿度下(尤其在约25℃和约60％rH下)物理稳定至少6个月。

14)另一个实施方案涉及一种用于制备重构药物组合物的方法；所述方法包括通过将至少一种稀释剂添加至根据实施方案8)至13)中任一项所述的冻干药物组合物中来重构所述冻干组合物的步骤。

重构所述药物组合物的合适稀释剂包括作为安全、稳定并且药学上可接受的载体的任何稀释剂。优选的是注射用水(WFI)，诸如尤其无菌注射用水(SWFI)或抑菌性注射用水(BWFI)，任选地含有张力调节剂或若干张力调节剂的混合物。优选的稀释剂为WFI，并且尤其含水(优选地，生理)盐水。

15)在另一个实施方案中，本发明涉及根据实施方案20)所述的方法；其中所述稀释剂为注射用水或盐水(特别地盐水、尤其具有约0.9重量％的浓度的生理盐水/含水盐水)。

16)在另一个实施方案中，本发明涉及根据实施方案14)或15)所述的方法；其中所述重构药物组合物用第二稀释剂进一步稀释(尤其稀释至约50mL的总体积)(其中应当理解，所述第二稀释剂可与第一稀释剂相同或不同)。

17)在另一个实施方案中，本发明涉及根据实施方案16)所述的方法；其中所述第二稀释剂为盐水、尤其具有约0.9重量％的浓度的生理盐水/含水盐水。

18)另一个实施方案涉及一种重构药物组合物，这种重构药物组合物由根据实施方案8)至13)中任一项所述的冻干药物组合物制备；尤其根据实施方案14)或15)所述的方法制备；其中尤其所述重构药物组合物使用注射用水(尤其无菌注射用水)或盐水(尤其具有约0.9重量％的浓度的生理盐水/含水盐水)作为稀释剂进行重构。

19)在另一个实施方案中，本发明涉及根据实施方案18)所述的重构药物组合物；其中所述重构药物组合物处于容器中；特别地小瓶、安瓿或注射器；尤其处于小瓶中。

20)在另一个实施方案中，本发明涉及根据实施方案18)或19)所述的重构药物组合物；其中所述重构药物组合物在小于约2分钟、特别地约1分钟或更少、尤其约30秒或更少的重构时间内重构。

21)在另一个实施方案中，本发明涉及根据实施方案18)至20)中任一项所述的重构药物组合物；其中所述重构药物组合物使用注射用水(尤其无菌注射用水)或盐水(尤其具有约0.9重量％的浓度的生理盐水/含水盐水)作为稀释剂进行重构；其中所述重构药物组合物的总体积特别地在约2mL和10mL之间、尤其在约3mL和4.5mL之间或优选地在约8mL和8.5mL之间。

22)在另一个实施方案中，本发明涉及根据实施方案18)至21)中任一项所述的重构药物组合物；其中所述重构药物组合物具有低于约1500mOsmol/kg、尤其低于约1000mOsmol/kg的渗透度、特别是低于约950mOsmol/kg的渗透度；其中总体积尤其在约8mL和8.5mL之间。

23)在另一个实施方案中，本发明涉及根据实施方案18)至22)中任一项所述的重构药物组合物；其中所述重构药物组合物包含约0.1mg/mL至0.5mg/mL、尤其约0.225mg/mL的化合物：2-{4-[N-(5,6-二苯基吡嗪-2-基)-N-异丙基氨基]丁氧基}-N-(甲磺酰基)乙酰胺。

24)另一个实施方案涉及根据实施方案18)至23)中任一项所述的用于i.v.施用的重构药物组合物；其中所述重构药物组合物或所述重构药物组合物的一部分被进一步稀释(尤其进一步稀释至约50mL的总体积)；尤其根据实施方案16)或17)所述的方法进行稀释；其中所述重构并且进一步稀释的药物组合物包含量为约4.5μg/mL、9μg/mL、13.5μg/mL、18μg/mL、22.5μg/mL、27μg/mL、31.5μg/mL或36μg/mL的化合物2-{4-[N-(5,6-二苯基吡嗪-2-基)-N-异丙基氨基]丁氧基}-N-(甲磺酰基)乙酰胺；其中所述量的容差特别地为10％、尤其5％。

25)在另一个实施方案中，本发明涉及根据实施方案24)所述的重构并且进一步稀释的药物组合物；其中所述重构并且进一步稀释的药物组合物使用盐水(尤其，低渗或生理盐水；特别是，具有约0.9重量％的浓度的生理盐水/含水盐水)进一步稀释；其中尤其，所述重构并且进一步稀释的药物组合物的总体积为50mL。

26)在另一个实施方案中，本发明涉及根据实施方案24)或25)所述的重构并且进一步稀释的药物组合物；其中所述重构并且进一步稀释的药物组合物具有低于约1000mOsmol/kg(尤其低于约500mOsmol/kg)的渗透度(特别地，它大约为等渗的)。

渗透度为流体浓度的测量结果，由每kg流体的溶质数目表示。人体内细胞外流体的正常渗透度为约275mOsmol/kg至295mOsmol/kg。高渗溶液具有高于细胞外流体的渗透度(高于约350mOsmol/kg)；生理(或等渗)溶液具有类似于身体渗透度的渗透度(约275mOsmol/kg至295mOsmol/kg)，低渗溶液具有低于身体渗透度的渗透度(低于约250mOsmol/kg)，这积极地促进流体吸收。

根据本发明的药物组合物可用作药剂。

根据本发明的药物组合物适用于i.v.施用；并且可以适用于另选的肠胃外施用途径，诸如皮下或肌肉内施用；或者当转化成气溶胶时，用于吸入施用。

根据本发明的药物组合物可尤其用于制备药剂，并且/或者尤其适用于治疗溃疡、指溃疡、糖尿病性坏疽、糖尿病足溃疡、压力性溃疡(褥疮)、高血压、肺高血压、肺动脉高血压、方坦病和与方坦病相关联的肺高血压、结节病和与结节病相关联的肺高血压、末梢循环障碍(例如，慢性动脉闭塞、间歇性跛行、外周栓塞、震动综合征、雷诺氏病)、结缔组织病(例如，系统性红斑狼疮、硬皮病、混合性结缔组织病、血管炎综合征)、经皮冠状动脉成形术(PTCA)后再闭塞/再狭窄、动脉硬化、血栓形成(例如，急性期脑血栓形成、肺栓塞)、短暂性脑缺血发作(TIA)、糖尿病性神经病变、缺血性病症(例如，脑梗死、心肌梗死)、心绞痛(例如，稳定型心绞痛、不稳定型心绞痛)、包括肾小球肾炎和处于任何阶段的糖尿病性肾病的慢性肾脏疾病、变态反应、支气管哮喘、冠状动脉介入诸如斑块切除术和支架植入术后再狭窄、因透析所致的血小板减少症、涉及器官或组织纤维化的疾病(例如，肾病诸如肾小管间质性肾炎)、呼吸系统疾病(例如，间质性肺炎、(特发性)肺纤维化、慢性阻塞性肺病)、消化系统疾病(例如，肝硬化、病毒性肝炎、慢性胰腺炎和硬性胃癌)、心血管疾病(例如，心肌纤维化)、骨和关节疾病(例如，骨髓纤维化和类风湿性关节炎)、皮肤疾病(例如，手术后瘢痕、烫伤瘢痕、瘢痕疙瘩和肥厚性瘢痕)、产科疾病(例如，子宫肌瘤)、泌尿系统疾病(例如，前列腺增生)、其它疾病(例如，阿尔茨海默病、硬化性腹膜炎、I型糖尿病和手术后器官粘连)、勃起功能障碍(例如，糖尿病性勃起功能障碍、心因性勃起功能障碍、精神病性勃起功能障碍、与慢性肾衰竭相关联的勃起功能障碍、用于除去前列腺的骨盆内手术后勃起功能障碍以及与衰老和动脉硬化相关联的血管性勃起功能障碍)、炎性肠病(例如，溃疡性结肠炎、克罗恩氏病、肠结核、缺血性结肠炎和与白塞病相关联的肠溃疡)、胃炎、胃溃疡、缺血性眼病(例如，视网膜动脉阻塞、视网膜静脉阻塞、缺血性视神经病变)、突发性耳聋、无血管性骨坏死、因使用非甾体消炎剂所致的肠损伤和与腰椎管狭窄症相关联的症状。

根据本发明的药物组合物可以特别用于制备药剂，并且/或者尤其适用于治疗溃疡、指溃疡、糖尿病性坏疽、糖尿病足溃疡、肺高血压、肺动脉高血压、方坦病和与方坦病相关联的肺高血压、结节病和与结节病相关联的肺高血压、末梢循环障碍(例如，间歇性跛行、雷诺氏病)、结缔组织病(例如，系统性红斑狼疮、硬皮病)、包括肾小球肾炎和任何阶段的糖尿病性肾病的慢性肾脏疾病、涉及器官或组织纤维化的疾病(例如，肾病，诸如肾小管间质性肾炎)或呼吸系统疾病(例如，(普通性)间质性肺炎/(特发性)肺纤维化)。

如果在一定时间段期间，化合物的初始含量的至少80％、优选地至少90％并且最优选地至少95％在所述时间段内维持溶解状态，那么含水(例如，重构或者重构并且进一步稀释的)药物组合物被认为是物理“稳定的”。

如果在一定时间段期间，观察到相对于重构时间和/或残余水分的变化小于30％、优选地小于20％并且最优选地小于10％，那么冻干组合物(即，冻干饼)被认为是物理“稳定的”。另外，饼外观可以被认为是确定冻干组合物的物理稳定性的标准。

如果在某些条件下并且在一定时间段期间，化合物的初始含量的至少80％、特别地至少95％、尤其至少98％并且优选地至少99％在所述条件下并且在所述时间段内维持不降解，那么药物组合物被认为是化学“稳定的”。尤其，降解可被定义为在具体条件下并且在指定时间段期间产生小于1％、优选地小于0.5％的2-(4-((5,6-二苯基吡嗪-2-基)(异丙基)氨基)丁氧基)乙酸(即，由化合物的水解得到的产物)的降解。

此外，特别是对于任何含水药物组合物，另外可以考虑在光暴露下的化学稳定性(例如通过在65cm的距离下使用OSRAM L58W/840灯所测量)。定义化学稳定性的以上值是在不存在额外光暴露的情况下。

优选地，当在5℃至50℃的温度和约75％或更低的rH下存放时，本发明的冻干药物组合物应化学和物理“稳定”至少6个月、优选地至少12个月。更优选地，当在15℃至45℃的温度和约75％或更低的rH下存放时，它们应稳定至少6个月或优选地12个月。最优选地，当在25℃至40℃的温度和约75％或更低的rH下、尤其在40℃和75％rH下或特别地在25℃和60％rH下存放时，它们应稳定至少6个月或优选地12个月。

优选地，当在5℃至50℃的温度下存放时，本发明的含水药物组合物(例如，冻干之前的含水组合物、重构制剂或重构并且进一步稀释的制剂)应化学和物理“稳定”至少6小时、优选地至少12小时。更优选地，当在15℃至45℃的温度下存放时，它们应稳定至少6小时或优选地12小时。最优选地，当在25℃至40℃的温度下、尤其在室温下存放时，它们应稳定至少6小时或优选地12小时。

药物组合物的化学稳定性可以常规方式，例如通过测量化合物及其降解产物(诸如，尤其2-(4-((5,6-二苯基吡嗪-2-基)(异丙基)氨基)丁氧基)乙酸)进行测试。化合物及其降解产物的含量可以通过常规HPLC进行评估。

药物组合物的物理稳定性可以常规方式，例如通过例如在某一温度和相对湿度下储存限定时间段之后测量冻干组合物(即，冻干饼)的重构时间、水含量、外观和/或显微镜图像；以及通过在某一温度下储存限定时间段之后测量含水制剂(例如，冻干之前的含水组合物、重构制剂后重构并且进一步稀释的试剂)维持药物增溶并且防止沉淀的能力来进行测试。

根据实施方案1)至6)中任一项所述的含税药物组合物可以配制在容器中。例如从对应于500mg的化合物的批次大小(1kg药物组合物的批次大小)，可以得到250个小瓶，每个小瓶约3.8g药物组合物，并且可以如下构成：

可以调节相应成分的纯度的量，从而可以产生增加量的化合物。

用于制备根据本发明的如前所述并且填充在容器中的冻干药物组合物的方法可包括以下步骤：

·将一定量的化合物：目标值：0.500g(例如，在1500mL玻璃烧杯中)；与相应量的WFI：目标值：800g；甘氨酸：目标值：50.00g；10％(w/w)聚山梨酸酯20：目标值：30.00g；15％(w/w)NaOH：目标值：3.16g；和磷酸，85％(w/w)：目标值：1.153g混合；

·搅拌至均匀。

·使用1.0％(w/w)NaOH将pH调节至pH 7.5。

·添加WFI至目标重量：1000g。

·过滤(例如，在层流条件下通过0.22μm PVDF膜过滤器)。

·填充小瓶(例如，在层流条件下)：目标填充重量：3.80g±3％。

用于冻干上文药物组合物的方法可例如包括以下步骤：

用于冻干上文药物组合物的另选方法可例如包括以下步骤：

上文方法中的退火步骤(步骤4至6)为任选的。包括退火步骤的方法可以防止饼底部区域中的收缩以及饼的盖子形成。

用于冻干上文药物组合物另一个另选方法可例如包括以下步骤：

换句话说，相对于实施方案7)，结束温度可为第五温度，即约20℃。同样，以上方法中的退火步骤(步骤4至6)为任选的。包括退火步骤的方法可以防止饼底部区域中的收缩以及饼的盖子形成。

根据用于冻干上文药物组合物的方法，可例如通过使用以下方法的压接来密封小瓶：

·将帽放置于每个小瓶上并且例如用半自动或全自动压接机或等效物进行压接。

可以通过使用以下方法重构冻干药物组合物：

添加盐水或WFI(例如，目标值8.1mL)并且轻轻地摇动直到饼完全溶解。

实施例

缩写(如本文和上文描述中所使用)：

aq. 含水

atm 大气压力

DSC 差示扫描量热法

HPLC 高效液相色谱法

min 分钟

泊洛沙姆188 聚氧丙烯-聚氧乙烯共聚物，例如P188

PS20 聚山梨酸酯20，例如20

PS80 聚山梨酸酯80，例如80

rH 相对湿度

RP 反相

RT 室温

WFI 注射用水

原材料购自商业供应商：

使用以下设备：

HPLC装备

制造商： Agilent Technologies(Santa Clara，CA，USA)

类型： 1100系列

脱气装置： G1322A

BinPump： G1312A

ALS： G1329A

ALSTherm： G1330A

ColCom： G1316A

VWD： G1314A

色谱法管理软件： Dionex，Chromeleon 6.80

Agilent，Chemstation B.04.03SP1

Wyatt，Astra 6.1

UV分光光度计：Agilent Technologies Cary 50；纯化水供应：Siemens UltraClean UV UF TM；pH计：Mettler Toledo SevenMulti；电极：InLab Micro；天平：Kern EW6200-2NM

化合物的制备：

赛乐西帕(化合物：2-{4-[N-(5,6-二苯基吡嗪-2-基)-N-异丙基氨基]丁氧基}-N-(甲磺酰基)乙酰胺)的制备描述于WO2002/088084中。游离碱的多晶型形式即结晶形式I、II和III的制备公开于WO2010/150865；药学上可接受的盐的多晶型形式公开于WO2011/024874。化合物以游离碱尤其多晶型形式I的结晶的形式用于以下实施例和测定中。

分析方法

差示扫描量热分析(DSC)

通过差示扫描量热法来评估冷冻的原料药产品溶液的热性质。通过DSC，可以通过与空参考盘相比测量样品在冷却/加热时的行为来识别出相变温度(即，结晶点和熔点)。当发生吸热反应如熔融时，系统必须向样本中投入比向参考中更多的能量，以使两者保持在相同的温度水平。测量这种需要的功率并且将它用于计算相变温度和焓。

通过差示扫描量热测定使用DSC-8000(Perkin Elmer，Waltham，MA，USA)确定冻干之前的组合物的相变温度。向50μL铝样本盘中称重约20mg的对应溶液。用闭合的铝DSC盖密封盘。将空的铝样本盘用作参考。执行以下循环：

步骤	开始温度	结束温度	扫描速率	持续时间
					平衡	25℃	25℃	-	1min
第1冷却步骤	25℃	-65℃	10℃/min	9min
					平衡	-65℃	-65℃	-	1min
第1加热步骤	-65℃	25℃	10℃/min	9min
					平衡	25℃	25℃	-	1min
第2冷却步骤	25℃	-65℃	10℃/min	9min
					平衡	-65℃	-65℃	-	1min
第2加热步骤	-65℃	25℃	10℃/min	9min

在第二加热步骤中执行熔点评估。

用于含量和纯度分析的反相HPLC

使用RP-HPLC来定量冻干组合物中的化合物并且将化合物与潜在的杂质分离以评价产物纯度。通过计算将RP-HPLC测量结果转变成相应样本中的化合物浓度。

色谱参数

移动相：将3.24g辛烷-1-磺酸钠盐溶解于1500mL纯化水中。

添加1.5mL的正磷酸85％。添加3500mL甲醇。

流动速率： 1.0mL/min等度

温度： 40℃

VWD： 302nm

进样体积： 10μL

样本温度： 10℃

运行时间： 40min

参考溶液和校准曲线

稀释剂： 70％甲醇、30％纯化水(v/v)

标准储备溶液(100μg/mL化合物)：

将200mL容量棕色玻璃容器填充有180mL稀释剂。随后添加20mg化合物参考材料。将混合物在20℃下于超声浴中处理10min。在化合物完全溶解之后，将体积填充至200mL。

标准溶液(5μg/mL)：使用稀释剂1:20(v/v)稀释标准储备溶液(100μg/mL)。

校准曲线：

在每个分析序列开始和结束时，在等距步骤(即，5μL、10μL、15μL、20μL和25μL)中将五种不同进样体积的参考溶液(5μg/mL)施加于柱。将检测到的峰面积与相应的施加质量对准，并且通过平均值的线性回归生成将UV测量的响应转变成化合物质量的公式。

样品制备

稀释剂： 70％甲醇、30％纯化水(v/v)。

在分析之前，使用稀释剂将样本稀释至10μg/mL的浓度，或者如果浓度低于10μg/mL，那么不稀释样本。

用于残余水分分析的卡尔-费休滴定法

向用压接帽密封的玻璃小瓶中称重每个冻干循环的50mg至100mg的三个随机小瓶。将样本转移至加热至100℃的卡尔费休电量计(756/774；Metrohm)的烘箱中。通过进样针刺透帽的隔膜，并且通过干燥的氮气流，将生成的水蒸汽直接转移至卡尔费休电量计的滴定室中。将空的玻璃小瓶用于空白校正。

视觉外观

在每个冻干循环之后，取得示例性小瓶的照片。

通过小心地打破玻璃小瓶来从小瓶中去除冻干物，并且竖直切割冻干的饼以针对塌陷区对它的内层进行筛选。

扫描电镜(SEM)

通过SEM分析冻干物以评估它们的微结构。小心地切割相应的冻干物，并且通过SEM分析竖直横截面以及顶部/底部表面。

实施例1：

如下构成并且制备对应于500mg的化合物的批次大小(1kg药物组合物的批次大小)，得到250个小瓶，每个小瓶约3.8g药物组合物：

·在1500mL玻璃烧杯中填充一定量的WFI：目标值：800g。

·添加一定量的15％(w/w)NaOH：目标值：3.16g。

·搅拌至均匀。

·添加一定量的化合物：目标值：0.500g。

·搅拌至均匀。

·添加一定量的甘氨酸：目标值：50.00g。

·搅拌至均匀。

·添加一定量的10％(w/w)聚山梨酸酯20：目标值：30.00g。

·搅拌至均匀。

·添加一定量的膦酸85％(w/w)：目标值：1.153g。

·搅拌至均匀。

·使用1.0％(w/w)NaOH将pH调节至pH 7.5。

·添加WFI至目标重量：1000g。

·在层流条件下通过0.22μm PVDF膜过滤器进行过滤。

·在层流条件下填充小瓶：目标填充重量：3.80g±3％。

使用以下程序将小瓶冻干：

根据用于冻干上文药物组合物的方法，使用以下方法通过压接来密封小瓶：

·将帽放置于每个小瓶上并且例如用半自动或全自动压接机进行压接。

实施例2：

制备60瓶以下组合物的批次大小(对应于在10mmol/kg磷酸钠缓冲剂pH 7.5中的0.50mg/g化合物、5重量％甘氨酸、0.3重量％聚山梨酸酯20)：

1.将a)填充于配混容器中

2.在搅拌下添加b)

3.在不存在光时在搅拌下添加c)以获得澄清溶液

4.在搅拌下添加d)以获得澄清溶液

5.在搅拌下添加e)

6.在搅拌下添加f)

7.用g)调节pH(目标：pH 7.5)

8.用h)填充至最终重量3.800mg

9.复查目标pH

使用以上程序处理60个小瓶。

使用以下程序将小瓶冻干：

A：使用0.85mbar真空的冻干运行的过程参数。

目视检查揭示冻干饼在底部区域和顶部表面(也称为盖子)有轻微收缩，显示较致密的结构可能由于饼阻力而导致在底部区域收缩/密度增加。

冻干饼的分析：

残余水含量(卡尔-费休)为0.41％。

针对冻干药物产品中的化合物含量和纯度，用3.6mL盐水重构两个随机小瓶。将重构溶液使用稀释剂进行1:50稀释，随后通过RP-HPLC进行分析：

化合物含量(目标值＝0.50mg/mL)：0.54mg/mL；化合物纯度：100％

B：使用0.5mbar真空的冻干运行的过程参数。

目视检查揭示冻干蛋糕形成了致密的盖子以及在底部区域中形成了收缩。

冻干饼的分析：

残余水含量(卡尔-费休)为0.50％。

化合物含量(目标值＝0.50mg/mL)：0.52mg/mL；化合物纯度：100％

C：包括退火步骤的冻干运行的过程参数。

目视检查揭示饼在底部区域中没有收缩并且没有形成盖子。

冻干饼的分析：

残余水(卡尔-费休)：0.20％

化合物含量(目标值＝0.50mg/mL)：0.51mg/mL

化合物纯度：100％

残余水含量通过退火步骤大幅度地减少至0.20％。

实施例3：

类似于实施例2，制备60瓶以下组合物的批次大小(对应于在10mmol/kg磷酸钠缓冲剂pH 7.5中的0.50mg/g化合物、5重量％甘氨酸、0.1重量％聚山梨酸酯20)：

使实施例3的组合物经受如实施例2A)至C)中所述的冻干条件。

目视检查揭示在相同条件下与针对实施例2的组合物获得的相应饼没有差别的冻干饼。

实施例4：使用中稳定性测试

为了评估化合物对输液器的潜在吸附，应用以下程序：

通过在注射器中直接混合来制备化合物含量分别为4.5μg/mL和36μg/mL的在0.9％NaCl中的模拟输注溶液：

在3.6mL盐水中重构相应的冻干物(得到具有0.5mg/mL的化合物浓度的约3.8mL总体积)，通过RP-HPLC来评估化合物浓度(采样点1)。去除50mL PP琥珀色注射器的柱塞，并且通过鲁尔锁双头螺旋帽闭合注射器。对于4.5μg/mL化合物：将49.55g的0.9％NaCl(在25℃下的密度＝1.003g/mL)填充于50mL注射器中。对于36μg/mL化合物：将46.40g的0.9％NaCl(在25℃下的密度＝1.003g/mL)填充于50mL注射器中。

对于4.5μg/mL化合物：从10R玻璃小瓶中取出0.450mL重构制剂变型(0.5mg/mL化合物)并转移至填充有盐水的50mL PP注射器中以获得用于输注的4.5μg/mL的化合物浓度。对于36μg/mL化合物：从10R玻璃小瓶中取出3.6mL重构制剂变型(0.5mg/mL化合物)并转移至填充有盐水的50mL PP注射器中以获得用于输注的36μg/mL的化合物浓度。通过插入柱塞来闭合注射器。通过轻轻地摇动来均匀地混合溶液。通过在右上位置小心地打开闭合帽来释放注射器中的过压。将注射器在室温下和不存在光时储存4小时(作为最坏的情况)。将输注管与注射器联接并且用输注溶液冲洗。收集第一mL(采样点2)并且通过RP-HPLC进行分析。评估化合物浓度和杂质概况。在室温下并且在不存在光时的总提取时间(测试0.625mL/min的输注流量)之后，释放并且收集剩余的输注溶液，将最后1mL直接采样至琥珀色玻璃HPLC小瓶中以用于分析(采样点3)。评估化合物浓度和杂质概况。收集先前步骤中的总释放输注体积并且进行匀化。记录总体积，并且使用RP-HPLC确定化合物的浓度和杂质概况(采样点4)。使用标准曲线通过RP-HPLC一式两份地确定溶液中化合物的所有纯度和含量。

为了判断递送给患者的化合物的总剂量，在总质量平衡中将在不同采样点测量的化合物含量相加(采样点4)。重构小瓶中关于所测量的化合物浓度(100％)的相对总剂量如下所示：

在较高的稀释输注溶液(4.5μg/mL)中化合物含量的相对减少高于较低的稀释液(36μg/mL)。在4.5μg/g化合物的情况下，可在变型5号中观察到最高减少，在变型1a号中观察到最低减少。在具有36μg/g化合物的变型中，在所有测试变型中对输液器的吸附是相当的，其中化合物含量损失3％至4％。

在具有4.5μg/g化合物的变型1b号中以3倍聚山梨酸酯20浓度的使用中稳定性测试得到进一步改进，高于在具有0.1％聚山梨酸酯20的变型1a号中观察到的化合物回收率90％3-4个百分点。

实施例5：物理和化学稳定性测试

缓冲剂和样本制备

化合物储备溶液(在通过预溶解于NaOH中的10mmol/kg Na-PO4 pH 7.5中的1mg/g化合物)：

将1680mg的4M NaOH添加于500g纯化水中，之后添加600mg化合物。在室温下将混合物在不锈钢烧杯中搅拌60min直到获得澄清溶液。添加691.2mg的正磷酸(85％)，并且使用1M NaOH将pH调节至7.5。最后，用纯化水填充溶液至最终质量为600g。

增量剂储备溶液(在10mmol/kg Na-PO4 pH 7.5中的10重量％增量剂)：

将287.5mg正磷酸(85％)添加于75.0g纯化水中。添加10.00g相应的增量剂，并且搅拌混合物直到获得澄清溶液。随后使用1M NaOH将pH调节至7.5，并且将溶液填充至最终质量为100g。

洗涤剂储备溶液(在10mmol/kg Na-PO4 pH 7.5中的10重量％洗涤剂)：

将1.00g相应的洗涤剂用10mmol/kg Na-PO4 pH 7.5填充至10.0g并且搅拌直到获得澄清溶液。

用于冻干的制剂变型的配混和等分：

将900mg相应的洗涤剂储备溶液、45g相应的增量剂储备溶液和45g化合物储备溶液在不锈钢烧杯中混合，得到相应制剂变型，此类制剂变型在pH 7.5的10mmol/kg磷酸钠缓冲剂中含有0.5mg/g化合物、5％(w/w)增量剂和0.1％(w/w)洗涤剂。随后，将所得溶液通过0.22μm PVDF过滤器过滤，并且通过3.8mL的等分试样填充到10R小瓶中。用冻干胶塞和适当的压接帽密封小瓶。

制备以下样本：

选择保守的冻干循环，此类冻干循环被认为适用于所有制剂变型。根据文献执行退火步骤(Xiaolin Tang和Michael J.Pikal,Pharmaceutical Research，第21卷，第2期，2004年2月)。

物理稳定性：

含有甘氨酸(6号、11号和16号)和甘露糖醇(7号和12号)的变型几乎不显示可见的饼变形。含有海藻糖的变型(8号和13号)显示轻微的收缩，由此观察不到断裂。含有17PF的变型(9号、14号和19号)显示强收缩以及断裂的饼。在这些特定组合物中L-脯氨酸(10号、15号和20号)是不合适的。尽管温度水平相对较低，但是含有L-脯氨酸的冻干物在冻干过程中熔融，产生将饼向上推的升华压力。

化学稳定性：

在不同的制备步骤之后，通过RP-HPLC获得每种制剂变型的六种不同样本的含量和纯度分析。

通过计算在302nm处的相对峰面积来确定不同采样时间的化合物的纯度。

在配混期间，过滤和冻干化合物在所有制剂基质中都足够稳定：未观察到含量和纯度的显著降低。冻干过程对含量和纯度没有可检测的影响。在40℃下储存的样本显示很少至无降低的含量和纯度。在60℃下的强制降解研究期间将冻干物暴露于升高的温度显示，含有甘露糖醇的冻干物(7号、12号)稳定性低，并且含有甘氨酸(6号、11号、16号)和海藻糖(8号、13号)的变型的化学稳定性最好。

实施例6：吸附研究

参照实施例6a：

使用目标pH 7.5的以下组合物制备含有0.1mg/g化合物的冻干物：

参照实施例6b：

使用目标pH 7.5的以下组合物制备在20mL琥珀色小瓶中含有0.5mg化合物的冻干物：

将组合物在小瓶中用20mL媒介物重构，并且任选地通过在注射器中用另外的媒介物直接稀释来进一步稀释至化合物的1/2浓度。

通过在输液器中应用0.3mL/min的流动速率来测试吸附。在T₀(第一滴流出输液器)时以及在流动穿过输液器的5min(T₅)和10min(T₁₀)之后测量冻干小瓶(参考值)[任选地：在稀释步骤之后的注射器中(T_s)]的化合物浓度。

a)0.9％盐水作为媒介物的重构组合物(未进一步稀释)显示如下的输液器的吸附：

时间

回收率

时间

回收率

时间

回收率

时间

回收率

Ts

未测量

T0

59％

T5

100％

T10

100％

向媒介物中添加2重量％PEG 400、10重量％乙醇或6％丙二醇分别得到70％、76％、67％的在T₀时的回收率。

b)使用i)0.9％盐水+40重量％羟丙基-β-环糊精、ii)0.9％盐水+3重量％或iii)0.9％盐水+2重量％80作为媒介物的重构组合物(未进一步稀释)显示如下的对输液器的吸附：

#

时间

回收率

时间

回收率

时间

回收率

时间

回收率

i)

Ts

未测量

T0

97％

T5

102％

T10

100％

ii)

Ts

未测量

T0

100％

T5

105％

T10

107％

iii)

Ts

未测量

T0

101％

T5

106％

T10

104％

c)测试使用i)0.9％盐水+0.1重量％或ii)0.9％盐水+0.1重量％80作为媒介物且进一步稀释至化合物的1/2浓度的重构组合物证实，在T₀时的吸附可以被阻止：

在绝对生物利用率研究中，使用用盐水重构的参照实施例6a的组合物；并且通过使用高于8μg/mL的浓度，用参照实施例6a的重构组合物冲洗整个输液器，并且使用低输注速率诸如0.1mL/min至0.3mL/min来克服吸附。

Claims

1.一种含水药物组合物，包含：

·约0.1g/kg至1g/kg的化合物2-{4-[N-(5,6-二苯基吡嗪-2-基)-N-异丙基氨基]丁氧基}-N-(甲磺酰基)乙酰胺：

·约2.5重量％至10重量％的增量剂，所述增量剂为甘氨酸；

·约0.05重量％至0.4重量％的洗涤剂，所述洗涤剂为聚山梨酸酯20；以及

·含水磷酸盐缓冲剂，其中所述磷酸盐缓冲剂的总量为约5mmol/kg至20mmol/kg；

其中所述含水药物组合物的pH在约7和8之间。

2.根据权利要求1所述的含水药物组合物；包含：

·约0.5g/kg的化合物：2-{4-[N-(5,6-二苯基吡嗪-2-基)-N-异丙基氨基]丁氧基}-N-(甲磺酰基)乙酰胺；

·约3重量％至6重量％的甘氨酸；

·约0.1重量％至0.3重量％的聚山梨酸酯20；以及

·含水磷酸钠缓冲剂，其中所述磷酸钠缓冲剂的浓度为约5mmol/kg至20mmol/kg；

其中所述含水药物组合物的pH为7.5±0.2。

3.根据权利要求1所述的含水药物组合物；包含

·5±0.5重量％的甘氨酸；

·约0.3重量％的聚山梨酸酯20；以及

其中所述含水药物组合物的pH为7.5±0.2。

4.根据权利要求1至3中任一项所述的含水药物组合物，其中将结晶形式的所述化合物2-{4-[N-(5,6-二苯基吡嗪-2-基)-N-异丙基氨基]丁氧基}-N-(甲磺酰基)乙酰胺用于制备所述组合物。

5.一种用于制备冻干药物组合物的方法；所述方法药物包括以下步骤：

a)制备根据权利要求1至4中任一项所述的含水药物组合物；以及

(i)在第一温度下冷冻所述含水药物组合物持续足以将液体制剂转化成固态的时间，其中所述第一温度在约-55℃至-25℃的范围内；

(ii)在第二温度下将所述冷冻组合物退火；其中所述第二温度在约-20℃至-1℃的范围内；

(iii)在第三温度下使所述冷冻组合物经历真空，其中所述第三温度在约-55℃至-25℃的范围内；以及

(iv)在第四温度下于所述真空中干燥所述组合物，其中所述第四温度在约20℃至40℃的范围内。

6.一种冻干药物组合物，所述冻干药物组合物是通过冻干根据权利要求1至4中任一项所述的含水药物组合物来制备的。

7.根据权利要求6所述的冻干药物组合物；其中所述冻干药物组合物处于容器中。

8.根据权利要求6或7所述的冻干药物组合物；其中所述冻干药物组合物具有小于约2重量％的残余水含量。

9.根据权利要求6至8中任一项所述的冻干药物组合物；其中所述冻干药物组合物在室温和约75％或低于75％的相对湿度下化学稳定并且物理稳定至少6个月。

10.根据权利要求1至4或6至9中任一项所述的药物组合物，所述药物组合物用作药剂。

11.根据权利要求1至4或6至9中任一项所述的药物组合物，所述药物组合物用于预防或治疗溃疡、指溃疡、糖尿病性坏疽、糖尿病足溃疡、肺高血压、肺动脉高血压、方坦病和与方坦病相关联的肺高血压、结节病和与结节病相关联的肺高血压、末梢循环障碍、结缔组织病、包括肾小球肾炎和处于任何阶段的糖尿病性肾病的慢性肾脏疾病、涉及器官或组织纤维化的疾病、或呼吸系统疾病。

12.一种用于制备重构药物组合物的方法；所述方法包括通过将至少一种稀释剂添加至根据权利要求6至9中任一项所述的冻干药物组合物中来重构所述冻干组合物的步骤。

13.一种重构药物组合物，所述重构药物组合物是由根据权利要求6至8中任一项所述的冻干药物组合物制备的。

14.根据权利要求13所述的重构药物组合物；其中所述重构药物组合物处于容器中。

15.根据权利要求13或14所述的重构药物组合物；其中所述重构药物组合物在小于约2分钟的重构时间内重构。

16.根据权利要求13或14所述的重构药物组合物；其中所述重构药物组合物使用注射用水或盐水作为稀释剂来重构；其中所述重构药物组合物的总体积在约2mL和10mL之间。

17.根据权利要求13至16中任一项所述的重构药物组合物；其中所述重构药物组合物或所述重构药物组合物的一部分被进一步稀释；其中所述重构并且进一步稀释的药物组合物包含量为约4.5μg/mL、9μg/mL、13.5μg/mL、18μg/mL、22.5μg/mL、27μg/mL、31.5μg/mL或36μg/mL的化合物2-{4-[N-(5,6-二苯基吡嗪-2-基)-N-异丙基氨基]丁氧基}-N-(甲磺酰基)乙酰胺。

18.根据权利要求17所述的重构并且进一步稀释的药物组合物；其中所述重构并且进一步稀释的药物组合物具有低于约1000mOsmol/kg的渗透度。