CN110408663B - 一种高产胞外多糖的乳酸菌及制备方法和应用 - Google Patents

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Abstract

本发明提供一种高产胞外多糖的乳酸菌，名称为inm25‑ST，菌株的分类名称：嗜热链球菌(Streptococcus thermophilus inm25‑ST)，保藏编号为CGMCC NO.15446，保藏日期为：2018年03月12日，保藏单位为：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址为：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，具有高产胞外多糖性能。

Description

一种高产胞外多糖的乳酸菌及制备方法和应用
技术领域
本发明涉及一种高产胞外多糖的乳酸菌及制备方法和应用。
背景技术
嗜热链球菌(Streptococcus thermophilus)是乳酸菌的链球菌属中唯一可应用在发酵食品上的菌株，通常与保加利亚乳杆菌配伍做酸乳的基础发酵剂。性能优良的嗜热链球菌在发酵过程中会产生胞外多糖。胞外多糖 (Exopolysaccharides，EPS)是指乳酸菌在生长、代谢过程中分泌到细胞外的黏液多糖或荚膜多糖的总称。胞外多糖是一种活性高分子化合物，经研究，乳酸菌胞外多糖不仅具有改善酸乳流变特性，增加酸乳粘度，提高酸乳稳定性的优良特性，对人体还具有免疫调节、抗肿瘤和降低胆固醇等生理作用，而且基本无细胞毒性，使其成为食品科学、天然药物等领域的研究热点之一。
近些年发酵乳产品普遍存在的问题是，工业化生产的酸乳产品质地稀薄，粘度低，保水能力差，在运输和储存过程中极易产生乳清大量析出的现象，严重影响产品品质，因此市面大部分乳制品采用添加琼脂、果胶或羟丙基二淀粉磷酸酯等增稠剂成分来提高酸乳品质。然而增稠剂的使用不仅会影响酸乳的风味也有悖于消费者对安全、无添加产品的追求。对生产者和消费者而言，迫切希望能使用性能优良的发酵剂菌株生产安全绿色的纯天然酸乳。目前我国乳制品行业的发酵剂以进口为主，因此筛选发酵性能优良的乳酸菌并开发自主知识产权的发酵剂对我国乳制品工业的发展有重要作用。
其次，由于胞外多糖的产量低，受多种合成因素的影响，提取过程又很复杂，很难进行工业化生产。目前有关胞外多糖的研究报道多集中在真菌多糖，乳酸菌胞外多糖的研究相对较少，对嗜热链球菌胞外多糖的研究就更少，且胞外多糖的产量偏低。因此筛选高产胞外多糖的嗜热链球菌，对于改善酸乳品质，开发功能性发酵制品，提高胞外多糖的工业化生产，扩展胞外多糖在食品和制药方面的利用具有重要意义。
发明内容
本发明针对以上问题，提供一种高产胞外多糖的乳酸菌及制备方法和应用。
发明目的通过以下方案实现：一种高产胞外多糖的乳酸菌，名称为 inm25-ST，菌株的分类名称：嗜热链球菌(Streptococcus thermophilus)，保藏编号为CGMCC NO.15446，保藏日期为：2018年03月12日，保藏单位为：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址为：北京市朝阳区北辰西路1号院3号。
进一步的，所述乳酸菌高产胞外多糖，其胞外多糖产量为：476.3-644.0 mg/L。
一种胞外多糖，将inm25-ST发酵的脱脂酸乳通过等电点法除酪蛋白，酶解后，用三氯乙酸沉淀离心，取上清液用乙醇沉淀，将所述沉淀溶解于超纯水后再用超纯水透析，即得。
一种高产胞外多糖的乳酸菌的筛选方法，从M17培养基中挑取具有拉丝倾向的乳酸菌菌落，纯化培养，然后接种于灭菌脱脂牛奶进行发酵，选取发酵乳质地粘稠，拉丝明显的乳酸菌。
一种高产胞外多糖的乳酸菌的应用，其特征在于：在发酵食品中的应用。
一种发酵剂，发酵剂的活性成分包含嗜热链球菌(Streptococcusthermophilus)。
一种发酵剂的应用，在发酵食品中的应用。
一种功能性脱脂发酵乳，将嗜热链球菌inm25-ST或嗜热链球菌 inm25-ST发酵剂，按2-5％(v/v)比例接种到11-13％(w/v)的灭菌脱脂乳中发酵4.5-5.5h，发酵温度为37-43℃，得到具有高含胞外多糖，质地粘稠，低脂，风味丰富的发酵乳。
本发明所提供的嗜热链球菌inm25-ST(Streptococcus thermophilus) 筛选自中国四川阿坝藏族自治州地区的传统牦牛奶发酵酸乳，通过细菌形态学、生理学和培养特征，结合API50CH鉴定试剂条(法国梅里埃)和16S rDNA测序等对该菌进行了鉴定。
本发明所提供的嗜热链球菌inm25-ST(Streptococcus thermophilus) 的菌落形态学特征为：在M17琼脂培养基上形成明显的菌落，直径在0.1-0.2mm之间，圆形，边缘整齐，乳白色，表面湿润光滑。其菌体形态特征为：革兰氏染色呈阳性，球形，不生芽孢，成对或成链状。
本发明所提供的嗜热链球菌inm25-ST(Streptococcus thermophilus) 的16SrDNA全序列为SEQ ID No.1所示。
本发明所提供的嗜热链球菌inm25-ST(Streptococcus thermophilus) 高产胞外多糖，其胞外多糖产量为：476.3-644.0mg/L。
本发明所提供的嗜热链球菌inm25-ST(Streptococcus thermophilus) 具有良好的发酵性能，发酵时间短，发酵乳质地粘稠，酸乳风味明显，且冷藏期内后酸化程度弱。
本发明提供嗜热链球菌inm25-ST(Streptococcus thermophilus)的发酵乳的制备方法。
本发明提供嗜热链球菌inm25-ST(Streptococcus thermophilus)的胞外多糖的制备方法。
本发明提供嗜热链球菌inm25-ST(Streptococcus thermophilus)可以用于制备发酵性能优良的发酵剂。
本发明筛选出的高产胞外多糖乳酸菌inm25-ST能够高产胞外多糖，其含量范围达476.3-644.0mg/L，显著高于其他乳酸菌。实验测得本菌株 inm25-ST发酵所得的酸乳酸度为72-78°T，酸乳黏度为7500-8500mPa﹒ s，凝乳时间为4.5-5.5h，酸乳持水力为50-65％，冷藏期7天后酸度增加了3.5-5°T。
生物材料保藏
本发明所提供的嗜热链球菌(Streptococcus thermophilus)，于2018 年03月12日，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址为：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏编号为CGMCC NO.15446。
附图说明
图1为嗜热链球菌inm25-ST的菌落形态图。
图2为嗜热链球菌inm25-ST革兰氏染色的菌体形态图。
图3为嗜热链球菌inm25-ST的16S rDNA的电泳鉴定图。
具体实施方式
以下结合具体实施例对本发明作进一步说明：
下述实施实例中所使用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法；所使用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。
M17固体培养基：大豆胨5.0g/L，蛋白胨2.5g/L，酪蛋白胨2.5g/L，酵母浸粉2.5g/L，牛肉浸粉5.0g/L，乳糖5.0g/L，抗坏血酸钠0.5g/L，β-甘油磷酸钠19.0g/L，硫酸镁0.25g/L，琼脂12.75g/L，调节pH至7.2 ±0.2.
灭菌脱脂牛乳；脱脂乳粉以12％(w/v)比例溶于蒸馏水中，55℃加热平衡，115℃保持10min灭菌。
样品1为嗜热链球菌AB0603。
样品3为嗜热链球菌AB2302。
实施例1，本发明的一种高产胞外多糖的乳酸菌，名称为inm25-ST，菌株的分类名称：嗜热链球菌(Streptococcus thermophilus)，保藏编号为CGMCC NO.15446，保藏日期为：2018年03月12日，保藏单位为：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址为：北京市朝阳区北辰西路1号院3号。
一种高产胞外多糖的乳酸菌，乳酸菌高产胞外多糖，其胞外多糖产量为：476.3-644.0mg/L。
一种高产胞外多糖的乳酸菌，胞外多糖从所述嗜热链球菌 (Streptococcusthermophilus inm25-ST)发酵的高含胞外多糖的脱脂酸乳中提取得到。
一种高产胞外多糖的乳酸菌，脱脂酸乳按照如下步骤的方法制备得到：将嗜热链球菌(Streptococcus thermophilus)按2-5％(v/v)比例接种到11-13％(w/v)的灭菌脱脂乳中发酵4.5-5.5h，培养温度为37-43℃。
一种高产胞外多糖的乳酸菌，乳酸菌筛选自四川阿坝藏族自治州地区的传统牦牛发酵乳。
一种胞外多糖，将inm25-ST发酵的脱脂酸乳通过等电点法除酪蛋白，酶解后，用三氯乙酸沉淀离心，取上清液用乙醇沉淀，将所述沉淀溶解于超纯水后再用超纯水透析，即得。
一种高产胞外多糖的乳酸菌，实验测得本菌株inm25-ST发酵所得的酸乳酸度为72-78°T，酸乳黏度为7500-8500mPa﹒s，凝乳时间为 4.5-5.5h，酸乳持水力为50-65％，冷藏期7天后酸度增加了3.5-5°T。
一种高产胞外多糖的乳酸菌的制备方法，将权利要求1所述嗜热链球菌(Streptococcus thermophilus)在M17液体培养基中提前活化培养。
一种高产胞外多糖的乳酸菌的筛选方法，从M17培养基中挑取具有拉丝倾向的乳酸菌菌落，纯化培养，然后接种于灭菌脱脂牛奶进行发酵，选取发酵乳质地粘稠，拉丝明显的乳酸菌。
一种发酵剂，发酵剂的活性成分包含嗜热链球菌(Streptococcusthermophilus)。
一种发酵剂的应用，在发酵食品中的应用。
一种高产胞外多糖的乳酸菌的应用，在发酵食品中的应用。
一种功能性脱脂发酵乳，嗜热链球菌inm25-ST或嗜热链球菌 inm25-ST发酵剂，按2-5％(v/v)比例接种到11-13％(w/v)的灭菌脱脂乳中发酵4.5-5.5h，发酵温度为37-43℃，所述发酵乳具有高含胞外多糖，质地粘稠，低脂，风味丰富的特点，适用于糖尿病患者、肥胖患者。
一种食品源胞外多糖的应用，胞外多糖应用于食品添加剂，不限于增稠剂、稳定剂。
一种食品源胞外多糖的应用，胞外多糖应用于可食性食用膜。
实施例2嗜热链球菌inm25-ST的筛选及鉴定：
1.嗜热链球菌inm25-ST的筛选
1.1样品来源
样品采自于四川阿坝藏族自治区红原县、诺尔盖县等地藏族牧民的传统牦牛奶发酵酸乳，共采集26份样品，采样点远离公路和城镇，取样点距离在10公里以上，样品未添加商业发酵剂，牧民沿袭传统发酵方式转接牦牛奶发酵而成。
1.2菌株的分离纯化
以无菌操作称取25g样品，放入装有225ml无菌生理盐水的锥形瓶中 (瓶内预置适当数量的无菌玻璃珠)，充分震荡摇匀，用无菌生理盐水进行十倍梯度稀释，选取适宜稀释度的样品稀释液，涂布于M17固体培养基上，置于43℃培养48h。培养结束后，从琼脂培养基中选择生长有50-150 个单菌落的平板，挑取具有粘性的菌落，在M17琼脂平板上多次划线纯化，直至整个平板上的菌落形态一致，挑取单菌落到M17液体培养基增菌培养。得到的菌株均在含40％甘油的M17液体培养基中于-80℃冷冻保存。
2.嗜热链球菌inm25-ST的鉴定
2.1菌落特征
嗜热链球菌inm25-ST在M17琼脂培养基培养48h后，呈现圆形，直径在0.1-0.2mm之间，白色，边缘整齐的湿润菌落，见图1。
2.2显微镜下形态
嗜热链球菌inm25-ST菌落涂片：革兰氏染色呈阳性，不生芽，球形，成对或成链状，见图2。
2.3 16S rDNA鉴定
用Ezup柱式细菌基因组DNA抽提试剂盒提取目标菌株基因组DNA，将提取的乳酸菌基因组DNA作为PCR扩增的模板，采用细菌通用引物27F和 1492R进行16S rDNA的PCR实验，PCR反应扩增结束后，取PCR产物进行琼脂糖凝胶检测拍照，扩增片段长度为1.5kb左右，见图3。将PCR产物送至生工生物工程(上海)有限公司进行测序，结果如SEQ ID NO.1所示，在NCBI网站上进行BLAST序列比对，结果显示该序列与嗜热链球菌的16S rDNA序列同源性超过99％。
将菌株inm25-ST的序列比对结果和生理生化结果相结合，确定筛选的乳酸菌inm25-ST为嗜热链球菌(Streptococcus thermophilus)。
实施例3嗜热链球菌inm25-ST制备脱脂酸乳
1.脱脂酸乳的制备
将保藏于-80℃的40％(v/v)冷冻甘油管中的乳酸菌，按2％(v/v) 比例接种到M17液体培养基中，37℃条件下培养18h进行活化，制备种子液。将活化后的种子液继续按2％(v/v)比例接种于12％(w/v)的灭菌脱脂乳中，43℃静置培养，以滴定酸度>70°T为发酵终点，置于4℃冷藏 24h，得到不需要添加增稠剂的酸乳。
2.酸乳理化指标测定
2.1酸乳发酵时间的测定
将活化后的菌株种子液按2％(v/v)比例接种于12％(w/v)的灭菌脱脂乳中，43℃静置培养，以滴定酸度>70°T为发酵终点，记录发酵时间，三次平行实验，取平均值。
实验测得嗜热链球菌inm25-ST凝乳时间为280-320min。
2.2酸乳滴定酸度的测定
根据GB 5009.239-2016，称取10g(精确到0.001g)已混匀的试样，置于150ml锥形瓶中，加20ml新煮沸冷却至室温的水，混匀，加入2.0ml 酚酞试剂指示液，混匀后用氢氧化钠标准溶液滴定，边滴边转动烧瓶，直到颜色与参比溶液颜色相似，且5s内不消退，整个滴定过程应在45s内完成，滴定过程中，向锥形瓶中吹氮气，防止溶液吸收空气中的二氧化碳，记录消耗的氢氧化钠标准溶液毫升数(V1)，代入下式(1)进行计算。
Figure RE-GDA0002192661480000071
式中：
X1——样品的酸度，单位为度(°T)[以100g样品所消耗的0.1mol/L 氢氧化钠的毫升数计，单位为毫升每100克(ml/100g)]；
c1——氢氧化钠标准溶液的摩尔浓度，单位为摩尔每升(mol/L)；
V1——滴定时所消耗氢氧化钠标准溶液的体积，单位为毫升(ml)；
V0——空白实验所消耗氢氧化钠标准溶液的体积，单位为毫升(ml)；
100——100g样品；
m1——样品的质量，单位克(g)；
0.1——酸度理论定义氢氧化钠的摩尔浓度，单位为摩尔每升 (mol/L)。
以重复性条件下获得的两次独立测定结果的算数平均值表示，结果保留三位有效数字。
实验测得嗜热链球菌inm25-ST发酵酸乳的终点酸度为75～80°T。
2.3酸乳粘度的测定
采用流变仪(博勒飞公司DV2T型)，在4℃下测试粘度，转子型号为 64，分别在50r/min的速度下测定三次，选取第20s的数据为测量值，每个样品做三个平行试样，结果取算数平均值。
实验测得嗜热链球菌inm25-ST发酵酸乳的粘度为7754mPa﹒s。
2.4酸乳脱水收缩敏感性的测定
取20g样品置于一个装有定量滤纸的漏斗中，室温条件下静置过滤 2h，收集滤液，并按式(3)计算持水率。
Figure RE-GDA0002192661480000081
式中
W1——收集的滤液的质量，单位克(g)；
W2——样品的质量，单位克(g)。
以重复性条件下获得的两次独立测定结果的算数平均值表示，结果保留三位有效数字。
实验测得嗜热链球菌inm25-ST发酵酸乳的持水力为55-60％。
2.5感官评定
由8位食品专业师生进行感官评价：(1)色泽评定：将适量酸乳放入烧杯中，在日光灯下观察其色泽。(2)滋味和气味评定：打开封盖后马上闻气味，然后用温水漱口，再品尝滋味。(3)组织状态评定：将酸乳倾斜倒在光滑的黑瓷板上，略微倾斜转动，仔细观察组织状态。感官评价总分100分，其中色泽10分，滋味和气味40分，组织状态50分。评分标准见表1。
表1感官评价评分标准
Figure RE-GDA0002192661480000082
Figure RE-GDA0002192661480000091
实验测得嗜热链球菌inm25-ST发酵酸乳的理化指标测定结果见表2。
表2菌株发酵理化指标测定结果
Figure RE-GDA0002192661480000092
2.6酸乳后酸化的测定
将活化后的菌株按2％(v/v)比例接种于12％(w/v)的灭菌脱脂乳中， 43℃静置培养，发酵完成后放入4℃冷藏，测定冷藏1d、3d、5d、7d时的滴定酸度。实验测得嗜热链球菌inm25-ST发酵酸乳的后酸化结果见表3。
表3保质期内酸度测定结果
Figure RE-GDA0002192661480000093
实施例4嗜热链球菌inm25-ST的胞外多糖的制备
脱脂酸乳的制备
见实施例3“1.脱脂酸乳的制备”部分的记载。
胞外多糖的提取
等电点法除酪蛋白：取发酵乳样品50g,用饱和氢氧化钠调样液pH至 8.0,4000g/min，离心20min，上清液用HCl溶液调pH至4.6,4000g/min，离心20min，取上清液；
酶解：调节pH至7.5，加入1/10体积的胰酶液(浓度为3g/L，现配现用)，40℃水浴，酶解2.5h后，4000g/min，离心30min，取上清液；
三氯乙酸法除蛋白：加入80％(w/v)的三氯乙酸溶液至终浓度为10％，使蛋白质变性，4℃沉淀1h后，12000g/min，离心40min，收集上清液；
乙醇沉淀：加入4倍体积预冷的无水乙醇，4℃沉淀过夜，12000g/min，离心40min，收集沉淀，重溶于超纯水中；
透析：装入透析袋(截留分子量14000Da)，4℃超纯水透析48h，每 8h换水；
冷冻干燥48h。
3.粗多糖纯度鉴定
采用紫外-可见光谱法分析粗多糖纯度。
称取提取出的粗多糖0.5mg，溶于5ml超纯水中，制成0.1mg/mL的多糖溶液，用紫外可见光谱仪于190-350nm波段进行紫外扫描。如果在 260nm、280nm处有紫外特征吸收峰，则表明样品纯度不高；反之，则可以认为样品基本不含核酸和蛋白质，保证了一定的纯度。
实验测得嗜热链球菌inm25-ST在260nm、280nm波长处没有紫外特征吸收峰。
4.多糖含量测定
采用苯酚-浓硫酸法测定胞外多糖含量，用葡萄糖做标准曲线。取适量分析纯葡萄糖置于鼓风干燥箱中80℃干燥2h，冷却后精确称取4mg葡萄糖于100mL容量瓶中，加蒸馏水至刻度，配制成葡萄糖标准溶液 (40ug/ml)。准确吸取葡萄糖标准溶液0.00、0.20、0.40、0.60、0.80、 1.00、1.20、1.40、1.60、1.80ml，及样品备用液0.2ml，置于具塞刻度试管中，再加入6％(v/v)苯酚溶液1ml,混匀后静置2min，迅速加入5mL 浓硫酸，混匀静置10min后30℃水浴加热15min，取出，置于冷水中冷却，以空白溶液为对照，测定490nm波长处的吸光度，每组做3个平行。以葡萄糖含量(mg/L)为横坐标，吸光度值(A490)为纵坐标绘制标准曲线。
将发酵乳样品中提取的多糖溶解于5ml水中，按上述方法测得胞外多糖含量测定结果见下表4，实验测得嗜热链球菌inm25-ST胞外多糖产量为 476.3-644.0mg/L。
表4苯酚-硫酸法测定胞外多糖含量结果
样品编号 胞外多糖mg/L
1 68.8-101.8
inm25-ST 476.3-644.0
3 12-36.3
表5为现有专利中嗜热链球菌产胞外多糖的含量，相比可知，本专利嗜热链球菌inm25-ST是产胞外多糖的优势菌株。
表5现有专利嗜热链球菌产胞外多糖的比较
Figure RE-GDA0002192661480000111
实施例5利用嗜热链球菌inm25-ST制备直投式菌粉发酵剂
1.嗜热链球菌inm25-ST菌泥的制备
挑取嗜热链球菌inm25-ST单菌落接种于50mL M17液体培养基中，放置37℃培养箱中培养18h。再次按5％的接种量于250mL M17液体培养基中活化，放置37℃培养箱中培养24h。最后将活化好的嗜热链球菌inm25-ST以5％接种量于10L发酵罐中进行高密度厌氧培养，于37℃、 pH 6.8的条件下培养18h。之后在8000r/min、4℃条件下离心15min，弃去上清液，收集菌体沉淀，用无菌磷酸盐缓冲液(pH 7.0)漂洗菌体2次。即可得到嗜热链球菌inm25-ST菌泥。
2.保护剂的制备
冻干保护剂含有15％的脱脂乳粉，5％的海藻糖，3％的谷氨酸钠，1％的甘油，0.5％的半胱氨酸盐酸盐。水作为溶剂。于110℃灭菌备用。
3.嗜热链球菌inm25-ST菌粉的制备
将上述制备的嗜热链球菌inm25-ST菌体沉淀按1:5的比例与保护剂溶液充分混匀。于-40℃条件下预冻5h，使其均匀冻结在容器内壁上，然后进行真空冷冻干燥，干燥18～20h后，即可得到嗜热链球菌inm25-ST菌粉。用生理盐水复水后，洗涤两次，测得嗜热链球菌inm25-ST中活菌数为2.0×1010～6.0×1010CFU/g。
实施例6利用嗜热链球菌inm25-ST制备发酵果蔬汁
一般生产工艺：将原料清洗干净后切块，采用闪蒸(0.5～1min，121℃) 的方法灭酶处理后，将原料打浆成流体，加蔗糖等调味剂再进行均质 (15-25MPa，10～15min)，灭菌(90-100℃，10-20min)，冷却至40℃左右，接入活化好的嗜热链球菌inm25-ST(107CFU/mL)，在37-43℃条件下恒温发酵16-24h，使其pH值为4.2-4.5，冷却灌装，4-10℃保藏。
实施例7利用嗜热链球菌inm25-ST制备奶酪
以马苏里拉奶酪为例，一般生产工艺：选择新鲜无抗原料乳，均质，72-80℃加热灭菌，保持10-15s，按2-5％(v/v)比例，接入活化好的嗜热链球菌inm25-ST菌液(107CFU/mL)，发酵凝块30-60min，达到一定酸度后，添加凝乳酶，搅拌均匀后静置35-50min，待凝乳达到一定硬度后，用干酪刀切割成1cm的小方块，静置5-10min，加热使温度在15min内上升至42℃，pH达6.1时，开始排出乳清。将干酪堆叠在干酪槽两侧， 10-20min后形成大块状，将凝块切块，每隔10min翻转一次，直到pH达到5.25。将凝块切成小条，加入1.5-2％的食盐，充分混匀。将凝块加热，挤揉拉伸，使中心温度达66℃左右，凝块形成拉丝状的特殊结构。装入模具，4-10℃冷却，脱模。真空包装，在4℃条件下成熟2-4周，即可完成。
虽然本发明已通过参考优选的实施例进行了描述，但是，本领域普通技术人员应当了解，可以不限于上述实施例的描述，在权利要求书的范围内，可作出形式和细节上的各种变化。
Figure RE-GDA0002192661480000141
Figure RE-GDA0002192661480000151
序列表
<110> 浙江一鸣食品股份有限公司 浙江大学
<120> 一种高产胞外多糖的乳酸菌及制备方法和应用
<160> 1
<170> SIPOSequenceListing 1.0
<210> 1
<211> 1502
<212> DNA
<213> 嗜热链球菌(Streptococcus thermophilus)
<400> 1
cctggctcag gacgaacgct ggcggcgtgc ctaatacatg caagtagaac gctgaagaga 60
ggagcttgct cttcttggat gagttgcgaa cgggtgagta acgcgtaggt aacctgcctt 120
gtagcggggg ataactattg gaaacgatag ctaataccgc ataacaatgg atgacacatg 180
tcatttattt gaaaggggca attgttccac tacaagatgg acctgcgttg tattagctag 240
taggtgaggt aatggctcac ctaggcgacg atacatagcc gacctgagag ggtgatcggc 300
cacactggga ctgagacacg gcccagactc ctacgggagg cagcagtagg gaatcttcgg 360
caatgggggc aaccctgacc gagcaacgcc gcgtgagtga agaaggtttt cggatcgtaa 420
agctctgttg taagtcaaga acgggtgtga gagtggaaag ttcacactgt gacggtagct 480
taccagaaag ggacggctaa ctacgtgcca gcagccgcgg taatacgtag gtcccgagcg 540
ttgtccggat ttattgggcg taaagcgagc gcaggcggtt tgataagtct gaagttaaag 600
gctgtggctc aaccatagtt cgctttggaa actgtcaaac ttgagtgcag aaggggagag 660
tggaattcca tgtgtagcgg tgaaatgcgt agatatatgg aggaacaccg gtggcgaaag 720
cggctctctg gtctgtaact gacgctgagg ctcgaaagcg tggggagcga acaggattag 780
ataccctggt agtccacgcc gtaaacgatg agtgctaggt gttggatcct ttccgggatt 840
cagtgccgca gctaacgcat taagcactcc gcctggggag tacgaccgca aggttgaaac 900
tcaaaggaat tgacgggggc ccgcacaagc ggtggagcat gtggtttaat tcgaagcaac 960
gcgaagaacc ttaccaggtc ttgacatccc gatgctattt ctagagatag aaagttactt 1020
cggtacatcg gtgacaggtg gtgcatggtt gtcgtcagct cgtgtcgtga gatgttgggt 1080
taagtcccgc aacgagcgca acccctattg ttagttgcca tcattcagtt gggcactcta 1140
gcgagactgc cggtaataaa ccggaggaag gtggggatga cgtcaaatca tcatgcccct 1200
tatgacctgg gctacacacg tgctacaatg gttggtacaa cgagttgcga gtcggtgacg 1260
gcgagctaat ctcttaaagc caatctcagt tcggattgta ggctgcaact cgcctacatg 1320
aagtcggaat cgctagtaat cgcggatcag cacgccgcgg tgaatacgtt cccgggcctt 1380
gtacacaccg cccgtcacac cacgagagtt tgtaacaccc gaagtcggtg aggtaacctt 1440
ttggagccag ccgcctaagg tgggacagat gattggggtg aagtcgtaac aaggtaagcc 1500
gt 1502

Claims (5)

1.一种高产胞外多糖的乳酸菌，其特征在于：菌株的名称为：嗜热链球菌(Streptococcus thermophilus) inm25-ST，保藏编号为CGMCC NO.15446，保藏日期为：2018年03月12日，保藏单位为：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址为：北京市朝阳区北辰西路1号院3号。
2.一种如权利要求1所述高产胞外多糖的乳酸菌的应用，其特征在于：在发酵食品中的应用。
3.一种发酵剂，其特征在于：所述发酵剂的活性成分包含权利要求1所述嗜热链球菌inm25-ST。
4.一种如权利要求3所述发酵剂的应用，其特征在于：在发酵食品中的应用。
5.一种功能性脱脂发酵乳，其特征在于：由权利要求1所述嗜热链球菌inm25-ST或由权利要求3所述嗜热链球菌inm25-ST发酵剂，按2-5%（v/v）比例接种到11-13%（w/v）的灭菌脱脂乳中发酵4.5-5.5h，发酵温度为37-43℃，得到具有高含胞外多糖，质地粘稠，低脂，风味丰富的发酵乳。
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